CN111850061B - 一种井冈羟胺a酯化物的制备方法 - Google Patents
一种井冈羟胺a酯化物的制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种式(I)所示的井冈羟胺A酯化物的制备方法，式(I)中，R为C1‑C21的饱和脂烃基、C1‑C21的不饱和脂烃基或C1‑C21的卤代饱和脂烃基，所述方法为：井冈羟胺A和脂肪酸RCOOH在叔丁醇中在生物催化剂的作用下反应制得式(I)所示的井冈羟胺A的酯化物；所述生物催化剂为Lipozyme RMIM、Lipase CALB、猪胰脂肪酶、假丝酵母脂肪酶、皱褶假丝酵母脂肪酶中的一种。本发明方法可准确控制反应位点，得到高纯度的井冈羟胺A酯化物。
Description
技术领域
本发明涉及一种酶催化制备井冈羟胺A酯化物的方法。
背景技术
井冈霉素(Validamycin)是一种假三糖类化合物，于1970年在吸水链霉菌柠檬变种(Streptomyce hygroscopicus var.lemonesus)的次生代谢产物中分离得到，被命名为有效霉素。1973年上海市农药研究所在江西井冈山以及浙江杭州的土壤中发现并筛选出能够抑制水稻纹枯病(Rhizoctonia solani)的吸水链霉菌井冈变种(S.hygroscopicusvar.jinggangensis)菌株，经研究，从中提取的活性化合物化学结构与有效霉素是一致的，其有效成分被命名为井冈霉素(jinggangmycin)。井冈霉素能高效地抑制水稻纹枯病，对蔬菜幼苗枯萎病也具有一定的杀菌效果，另外具有长久药效，低毒性，低残留，高安全，环境污染小的优势使其成为我国推广使用面积最大、亩用成本最低的无公害生物源农药。
井冈霉素A是井冈霉素类化合物中最重要也是最主要的组分，其分子结构包含井冈羟胺A和一个D型吡喃葡萄糖基，是一类假三糖类化合物。
井冈羟胺A化学结构同海藻糖类似(如下所示)，被认为是一类具有高活性的天然海藻糖酶竞争性抑制剂，其结构新颖，离体杀菌效果好，选择性强，对海藻糖酶的抑制效果能达到10-8-10-9mol/L，另外其对哺乳动物以及高等植物的安全性高，具有很好的应用前景。
井冈羟胺A具有较强的离体海藻糖酶抑制活性，但很难进入生物体内，因此，有必要通过修饰井冈羟胺A的结构，增加其进入生物体内的能力，以此解决靠“注射”才能发挥其杀虫、杀菌活性的问题，而酯合成则成为了一个首选的方案。但是，井冈羟胺A上羟基数量较多，常规的化学合成法很难精准控制酯化位点，而本发明采用的脂肪酶催化合成法，可准确控制反应位点，并最终得到高纯度的衍生物。进一步对其生物活性进行研究，研究表明，其具有很好的生物活性。
发明内容
本发明的目的是提供一种酶催化制备井冈羟胺A酯化物的方法，该方法可准确控制反应位点，得到高纯度的井冈羟胺A酯化物。
为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：
一种式(I)所示的井冈羟胺A酯化物的制备方法，所述方法为：井冈羟胺A和脂肪酸RCOOH在叔丁醇中在生物催化剂的作用下反应制得式(I)所示的井冈羟胺A的酯化物；所述生物催化剂为Lipozyme RMIM、Lipase CALB、猪胰脂肪酶、假丝酵母脂肪酶、皱褶假丝酵母脂肪酶中的一种；
R为C1-C21的饱和脂烃基、C1-C21的不饱和脂烃基或C1-C21的卤代饱和脂烃基。
作为优选，R＝CnH2n+1，其中n＝1-21。进一步优选n＝8-18，更进一步优选n＝10-18，再更进一步优选10-17。
作为优选，R＝CnH2n-1，其中n＝1-21。进一步优选n＝3-18，更进一步优选n＝5-18，特别优选n＝7-18，如R＝CH2＝CHCH2CH2CH2CH2CH2。
作为优选，R＝CnH2n+1-mXm，其中n＝1-21，m≤2n+1，X＝F、Cl、Br或I。进一步优选n＝3-18，更进一步优选n＝5-18，特别优选n＝7-18。进一步优选X＝Cl。特别优选R＝CCl3CH2CH2CH2CH2CH2CH2。
作为优选，反应体系中还加入经过活化的分子筛，所述分子筛的用量以井冈羟胺A的摩尔数计为0.4-2g/mmoL，更优选为1.2-2.0g/mmoL，最优选为1.2g/mmoL。作为进一步的优选，所述的分子筛为4A°分子筛。作为进一步的优选，所述的分子筛在使用前先进行活化。活化方法推荐为：400℃活化2h。
作为优选，所述的生物催化剂是Lipozyme RMIM，此时井冈羟胺A转化率最高。
作为优选，所述的投料方式为：使井冈羟胺A在叔丁醇中于90-110℃回流搅拌4-6h制得井冈羟胺A饱和溶液，然后将井冈羟胺A饱和溶液和脂肪酸RCOOH在反应容器中混合。这种投料方式可以显著提高井冈羟胺A在叔丁醇中的溶解度，从而有效提高反应效率。
作为进一步的优选，所述制备方法具体按照如下实施：将井冈羟胺A-叔丁醇饱和溶液和脂肪酸RCOOH在反应容器中于25-50℃充分混合，然后加入生物催化剂在25-50℃振荡反应，充分反应后，反应液经分离纯化得到井冈羟胺A的酯化物；所述井冈羟胺A与脂肪酸RCOOH的投料摩尔比为4:1-1:4，所述生物催化剂的用量以井冈羟胺A的摩尔数计为40-240g/moL。
作为更进一步的优选，反应体系中还加入分子筛，所述分子筛的用量以井冈羟胺A的摩尔数计为0.4-2g/mmoL，更优选为1.2-2.0g/mmoL，最优选为1.2g/mmoL。
作为更进一步的优选，所述的生物催化剂是Lipozyme RMIM，此时井冈羟胺A转化率最高。
作为更进一步的优选，所述的生物催化剂是Lipozyme RMIM，所述生物催化剂的用量以井冈羟胺A的摩尔数计为160-240g/moL，最优选为160g/moL。
作为更进一步的优选，所述的生物催化剂是Lipozyme RMIM，反应时间为48h时达到平衡。
作为更进一步的优选，所述的生物催化剂是Lipozyme RMIM，反应温度为45-50℃，最适温度为45℃。
作为更进一步的优选，所述的生物催化剂是Lipozyme RMIM，所述井冈羟胺A与脂肪酸RCOOH的投料摩尔比为1:2-4，最优选为1:3。
本发明最优选生物催化剂是Lipozyme RMIM时的反应条件为：井冈羟胺A与脂肪酸RCOOH的摩尔比为1:3，酶加量为160g/moL井冈羟胺A，分子筛的用量为1.2g/mmoL井冈羟胺A，反应温度为45℃，反应时间为48h。
作为更进一步的优选，所述的分离纯化的具体步骤为：离心除去生物催化剂(及分子筛)，蒸除溶剂，然后加水并用氢氧化钠调节pH值至中性，通过大孔吸附树脂柱分离，以体积浓度为0％-55％的乙醇水溶液为洗脱试剂进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥。
本发明所述的式(I)所示的井冈羟胺A酯化物对水稻纹枯病具有良好的抑制作用。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
(1)本发明提供了一种提高井冈羟胺A溶解性的方法，可提高井冈羟胺A在叔丁醇中的溶解度。
(2)本发明提供了一种酶催化制备井冈羟胺A酯化物的方法，该方法可准确控制反应位点，得到高纯度的井冈羟胺A酯化物。
(3)本发明通过加入分子筛可明显提高井冈羟胺A和脂肪酸的反应效率。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此。
实施例1：产脂肪酶菌株的发酵
本发明将琼氏不动杆菌zjutfet-1(保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2015年9月6日，保藏编号CCTCC NO.M2015511，保藏地址为中国武汉武汉大学，邮编430072)，应用于所述化合物的合成。该菌的培养方法如下文所述：
将琼氏不动杆菌zjutfet-1接种至斜面培养基，在35℃培养20h，获得斜面菌落；所述斜面培养基终浓度组成为：LB培养基+2％琼脂粉。
将斜面菌落接种于种子培养基，在30℃培养6h，获得种子液，所述种子培养基终浓度组成为蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，NaCl 10g/L，溶剂为蒸馏水，pH值为7.0；
将种子液以体积浓度0.2％接种量接种于发酵培养基，在30℃、180rpm的条件下培养48h，将发酵液离心，弃上清液，获得湿菌体，随后进行冷冻干燥获得下文所述的菌体冻干粉。所述发酵培养基组成蛋白胨10g/L、蔗糖5g/L、磷酸氢二钾10g/L、硫酸镁0.5g/L，橄榄油50g/L，溶剂为蒸馏水，pH值为7.0。
实施例2：乙酸井冈羟胺A酯(化合物1)的制备(R1＝CH3CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和乙酸(0.120g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，然后通过大孔吸附树脂柱(上海华震科技有限公司，HZ-801)分离，洗脱液为0％-55％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到0.38g乙酸井冈羟胺A酯，纯度98.8％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1(体积比)，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ5.58(dd,J＝6.2,0.6Hz,1H),4.74(d,J＝0.9Hz,2H),4.06(s,1H),3.72(dd,J＝2.5,1.5Hz,1H),3.57–3.54(m,1H),3.52(dd,J＝12.2,8.0Hz,1H),3.35(t,J＝8.3Hz,1H),3.27(dd,J＝12.4,8.2Hz,1H),3.17(dd,J＝7.9,1.8Hz,1H),3.13–3.11(m,1H),3.09(dd,J＝9.2,6.3Hz,1H),2.08(d,J＝1.0Hz,1H),2.07(dd,J＝6.5,4.1Hz,1H),2.01(s,3H),1.76(s,1H),1.33–1.31(m,1H),1.07–1.05(m,1H).ESI-MS:[M+H]:378.1719.
实施例3：丙酸井冈羟胺A酯(化合物2)的制备(R1＝CH3CH2CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和丙酸(0.148g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到丙酸井冈羟胺A酯0.42g，纯度98.5％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ5.58(dd,J＝6.2,0.6Hz,1H),4.72(d,J＝0.6Hz,2H),4.06(dd,J＝4.2,0.7Hz,1H),3.85(dt,J＝5.5,3.7Hz,1H),3.70(dd,J＝9.4,4.3Hz,1H),3.60(dd,J＝9.3,4.2Hz,1H),3.52(dd,J＝12.4,7.6Hz,1H),3.27(dd,J＝12.4,7.6Hz,1H),3.19–3.14(m,2H),3.09(dd,J＝6.2,4.4Hz,1H),2.88–2.81(m,1H),2.48(dd,J＝7.5,2.9Hz,1H),2.46–2.42(m,2H),1.68(s,1H),1.37–1.26(m,1H),1.20(t,J＝6.8Hz,3H),1.09(dd,J＝8.2,3.6Hz,1H).
ESI-MS:[M+H]+:392.1867.
实施例4：丁酸井冈羟胺A酯(化合物3)的制备(R1＝CH3CH2CH2CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和丁酸(0.176g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到丁酸井冈羟胺A酯0.45g，纯度98.2％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ4.73(d,J＝13.9Hz,2H),4.56(s,1H),4.41(dd,J＝9.5,5.8Hz,1H),4.31(s,1H),3.77(t,J＝8.4Hz,1H),3.53(dd,J＝10.4,3.8Hz,1H),3.49–3.41(m,1H),3.41–3.23(m,6H),3.09(t,J＝8.7Hz,1H),2.13(dt,J＝11.2,6.9Hz,1H),1.89(s,5H),1.87–1.80(m,1H),1.53(ddd,J＝14.9,11.7,5.8Hz,1H).
ESI-MS[M+H]+406.2067,[M+Na]+428.1890
实施例5：戊酸井冈羟胺A酯(化合物4)的制备(R1＝CH3CH2CH2CH2CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和戊酸(0.204g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到戊酸井冈羟胺A酯0.46g，纯度99.1％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ5.76(s,1H),5.44(s,1H),4.65(s,5H),4.17(dd,J＝10.6,2.8Hz,1H),4.09–3.86(m,3H),3.70(d,J＝4.7Hz,1H),2.28(t,J＝7.3Hz,2H),2.03–1.93(m,1H),1.77(d,J＝14.1Hz,1H),1.51(dt,J＝15.0,7.4Hz,2H),1.38–1.03(m,4H),0.86(t,J＝7.3Hz,3H).
ESI-MS[M+H]+420.2227,[M+Na]+442.2040
实施例6：己酸井冈羟胺A酯(化合物5)的制备
(R1＝CH3CH2CH2CH2CH2CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和己酸(0.232g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到己酸井冈羟胺A酯0.45g，纯度98.4％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ5.81(dd,J＝37.3,3.0Hz,1H),4.68(d,J＝13.1Hz,2H),4.35(d,J＝13.2Hz,1H),3.96(d,J＝17.8Hz,1H),3.69(dd,J＝11.3,5.7Hz,1H),3.49(d,J＝3.8Hz,31H),3.46–3.17(m,6H),3.11–3.02(m,1H),2.31(dt,J＝22.2,7.3Hz,1H),2.15(t,J＝7.4Hz,1H),1.74(dd,J＝14.1,3.2Hz,1H),1.56–1.36(m,2H),1.36–1.03(m,6H),,0.89(t,J＝6.9Hz,3H).
ESI-MS[M+H]+434.2381,[M+Na]+456.2189
实施例7：庚酸井冈羟胺A酯(化合物6)的制备
(R1＝CH3CH2CH2CH2CH2CH2CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和庚酸(0.260g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到庚酸井冈羟胺A酯0.48g，纯度98.5％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ5.79(dd,J＝37.3,3.0Hz,1H),4.62(d,J＝13.1Hz,2H),4.33(d,J＝13.2Hz,1H),3.94(d,J＝17.8Hz,1H),3.71(dd,J＝11.3,5.7Hz,1H),3.45(d,J＝3.8Hz,31H),3.43–3.17(m,6H),3.11–3.01(m,1H),2.31(dt,J＝22.2,7.3Hz,1H),2.18(t,J＝7.4Hz,1H),1.71(dd,J＝14.1,3.2Hz,1H),1.56–1.38(m,2H),1.36–1.03(m,8H),0.91(t,J＝6.9Hz,3H).
ESI-MS[M+H]+448.2532,[M+Na]+470.2341
实施例8：辛酸井冈羟胺A酯(化合物7)的制备
(R1＝CH3CH2CH2CH2CH2CH2CH2CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和辛酸(0.288g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到辛酸井冈羟胺A酯0.51g，纯度98.3％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ5.81(dd,J＝37.3,3.0Hz,1H),4.65(d,J＝13.1Hz,2H),4.31(d,J＝13.2Hz,1H),3.94(d,J＝17.8Hz,1H),3.71(dd,J＝11.3,5.7Hz,1H),3.45(d,J＝3.8Hz,31H),3.40–3.17(m,6H),3.11–3.01(m,1H),2.30(dt,J＝22.2,7.3Hz,1H),2.18(t,J＝7.4Hz,1H),1.74(dd,J＝14.1,3.2Hz,1H),1.56–1.40(m,2H),1.36–1.01(m,10H),0.91(t,J＝6.9Hz,3H).
ESI-MS[M+H]+462.2686,[M+Na]+484.2492
实施例9：壬酸井冈羟胺A酯(化合物8)的制备
(R1＝CH3CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和壬酸(0.316g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到壬酸井冈羟胺A酯0.49g，纯度98.9％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ5.79(dd,J＝37.3,3.0Hz,1H),4.66(d,J＝13.1Hz,2H),4.45(d,J＝13.2Hz,1H),3.97(d,J＝17.8Hz,1H),3.71(dd,J＝11.3,5.7Hz,1H),3.48(d,J＝3.8Hz,31H),3.45–3.18(m,6H),3.13–3.04(m,1H),2.29(dt,J＝22.2,7.3Hz,1H),2.17(t,J＝7.4Hz,1H),1.76(dd,J＝14.1,3.2Hz,1H),1.58–1.40(m,2H),1.24(s,10H),1.16–1.00(m,2H),0.86(t,J＝6.9Hz,3H).
ESI-MS[M+H]+476.2856,[M+Na]+498.2616
实施例10：癸酸井冈羟胺A酯(化合物9)的制备
(R1＝CH3CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和癸酸(0.344g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到癸酸井冈羟胺A酯0.55g，纯度98.4％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ5.86(dd,J＝37.6,3.5Hz,1H),4.62(d,J＝13.0Hz,1H),4.48(d,J＝13.2Hz,1H),3.92(d,J＝18.1Hz,1H),3.65(dd,J＝11.0,5.7Hz,1H),3.43(d,J＝3.6Hz,1H),3.40–3.13(m,6H),3.11–3.04(m,1H),2.29(dt,J＝22.2,7.1Hz,1H),2.17(t,J＝7.7Hz,1H),1.81(dd,J＝14.5,3.6Hz,1H),1.58–1.42(m,2H),1.24(s,12H),1.16–0.98(m,2H),0.86(t,J＝6.5Hz,3H).
m/z(ESI-MS):[M+H]+490.3008,[M+Na]+512.2746.
实施例11：正十一烷酸井冈羟胺A酯(化合物10)的制备
(R1＝CH3CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和正十一烷酸(0.372g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到正十一烷酸井冈羟胺A酯0.52g，纯度98.1％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ5.92(dd,J＝37.8,3.7Hz,1H),4.71(d,J＝13.5Hz,1H),4.48(d,J＝13.7Hz,1H),3.98(d,J＝17.2Hz,1H),3.71(dd,J＝11.8,5.4Hz,1H),3.46(d,J＝3.4Hz,1H),3.42–3.18(m,6H),3.13–3.06(m,1H),2.30(dt,J＝22.2,7.2Hz,1H),2.21(t,J＝7.4Hz,1H),1.85(dd,J＝14.0,3.2Hz,1H),1.56–1.42(m,2H),1.20(s,14H),1.16–0.98(m,2H),0.86(t,J＝6.3Hz,3H).
m/z(ESI-MS):[M+H]+504.3161,[M+Na]+527.1816.
实施例12：正十二烷酸井冈羟胺A酯(化合物11)的制备：
(R1＝CH3CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CO-，R2-R8＝H)
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和正十二烷酸(0.400g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到正十二烷酸井冈羟胺A酯0.54g，纯度98.2％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ5.95(dd,J＝36.5,4.1Hz,1H),4.77(d,J＝12.8Hz,1H),4.50(d,J＝12.8Hz,1H),3.41(d,J＝17.8Hz,1H),3.768(dd,J＝11.3,5.7Hz,1H),3.43(d,J＝3.8Hz,1H),3.40–3.18(m,6H),3.13–3.06(m,1H),2.32(dt,J＝22.2,7.3Hz,1H),2.25(t,J＝7.4Hz,1H),1.86(dd,J＝14.1,3.2Hz,1H),1.56–1.42(m,2H),1.23(s,12H),1.16–0.92(m,4H),0.81(t,J＝6.8Hz,3H).
m/z(ESI-MS):[M+H]+518.3310,[M+Na]+540.2876.
实施例13：正十四烷酸井冈羟胺A酯(化合物12)的制备：
(R1＝CH3CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CO-，R2-R8＝H)
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和正十三烷酸(0.428g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到正十四烷酸井冈羟胺A酯0.49g，纯度98.6％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ5.93(dd,J＝37.3,3.0Hz,1H),4.70(d,J＝13.1Hz,1H),4.50(d,J＝13.2Hz,1H),3.94(d,J＝17.4Hz,1H),3.72(dd,J＝11.3,5.7Hz,1H),3.48(d,J＝4.2Hz,1H),3.44–3.17(m,6H),3.13–3.02(m,1H),2.31(dt,J＝22.2,7.3Hz,1H),2.24(t,J＝7.4Hz,1H),1.87(dd,J＝14.1,3.2Hz,1H),1.65–1.40(m,2H),1.18(s,12H),1.15–0.81(m,6H),0.74(t,J＝6.4Hz,3H).
m/z(ESI-MS):[M+H]+546.3624,[M+Na]+568.3201
实施例14：正十五烷酸井冈羟胺A酯(化合物13)的制备
(R1＝CH3CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和正十五烷酸(0.484g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，过滤除去析出的脂肪酸钠，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到正十五烷酸井冈羟胺A酯0.58g，纯度98.4％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ5.58(dd,J＝6.2,0.6Hz,1H),4.76(d,J＝0.9Hz,2H),4.06(dd,J＝7.3,0.6Hz,1H),3.75(dd,J＝9.2,7.4Hz,1H),3.70(t,J＝8.8Hz,1H),3.52(dd,J＝12.4,7.1Hz,1H),3.27(dd,J＝12.4,7.1Hz,1H),3.19(t,J＝8.9Hz,1H),3.13–3.06(m,2H),2.83(dd,J＝10.5,8.7Hz,1H),2.61(dd,J＝16.9,7.8Hz,1H),2.36(t,J＝8.0Hz,2H),2.02(t,J＝7.9Hz,1H),1.97(s,1H),1.69(p,J＝7.8Hz,2H),1.40–1.29(m,23H),1.21–1.16(m,1H),0.99(t,J＝6.4Hz,3H).
m/z(ESI-MS):[M+H]+560.3833,[M+Na]+582.3432
实施例15：正十六烷酸井冈羟胺A酯(化合物14)的制备
(R1＝CH3CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和正十六烷酸(0.512g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，过滤除去析出的脂肪酸钠，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到正十六烷酸井冈羟胺A酯0.56g，纯度98.4％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ5.58(dd,J＝6.2,0.6Hz,1H),4.74(d,J＝0.6Hz,2H),4.06(dd,J＝4.4,0.9Hz,1H),3.75(dd,J＝9.2,4.4Hz,1H),3.55–3.49(m,2H),3.27(dd,J＝12.4,7.0Hz,1H),3.22–3.17(m,1H),3.14–3.07(m,2H),2.83(dd,J＝10.3,8.1Hz,1H),2.49(dt,J＝9.3,7.6Hz,1H),2.32(t,J＝8.2Hz,2H),2.19(t,J＝8.0Hz,1H),1.71(p,J＝8.0Hz,2H),1.51(s,1H),1.41–1.26(m,25H),1.18(t,J＝7.9Hz,1H),0.99(t,J＝6.4Hz,3H).
m/z(ESI-MS):[M+H]+574.4101,[M+Na]+596.3614
实施例16：正十八烷酸井冈羟胺A酯(化合物15)的制备
(R1＝CH3CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和正十八烷酸(0.568g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡48h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，过滤除去析出的脂肪酸钠，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到正十八烷酸井冈羟胺A酯0.54g，纯度98.6％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(500MHz,Chloroform)δ5.58(dd,J＝6.2,0.6Hz,1H),4.74(d,J＝0.9Hz,2H),4.06(dd,J＝4.2,0.6Hz,1H),3.75(dd,J＝8.9,4.3Hz,1H),3.52(dd,J＝12.4,7.6Hz,1H),3.50–3.46(m,1H),3.27(dd,J＝12.4,7.6Hz,1H),3.18–3.13(m,1H),3.12–3.07(m,2H),2.83(dd,J＝10.4,8.1Hz,1H),2.59(dt,J＝9.2,7.7Hz,1H),2.26(dt,J＝11.2,8.1Hz,3H),1.70(p,J＝8.0Hz,2H),1.43–1.30(m,29H),1.17(s,1H),1.11(t,J＝8.0Hz,1H),0.99(t,J＝6.5Hz,3H).
m/z(ESI-MS):[M+H]+602.4508,[M+Na]+624.5136
实施例17：7,8-辛烯酸井冈羟胺A酯(化合物16)的制备(R1＝CH2＝CHCH2CH2CH2CH2CH2CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和7,8-辛烯酸(0.28g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡72h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到7,8-辛烯酸井冈羟胺A酯0.62g，纯度97.9％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(600MHz,DMSO)δ5.65(ddt,J＝16.3,10.0,6.1Hz,1H),5.58(dd,J＝6.2,0.6Hz,1H),5.02–4.97(m,1H),4.97–4.93(m,1H),4.77(d,J＝0.9Hz,2H),4.06(d,J＝1.3Hz,1H),3.77–3.72(m,2H),3.52(dd,J＝12.5,7.5Hz,1H),3.35(s,1H),3.27(dd,J＝12.5,7.5Hz,1H),3.22–3.17(m,1H),3.14–3.11(m,1H),3.09(t,J＝4.3Hz,1H),2.36(dt,J＝9.8,7.9Hz,3H),2.08(t,J＝8.0Hz,1H),2.02(dd,J＝14.2,7.8Hz,2H),1.74–1.66(m,3H),1.38–1.34(m,4H),1.34–1.30(m,1H),1.15(t,J＝7.9Hz,1H).
m/z(ESI-MS):[M+H]+:460.2506
实施例18：三氯辛酸井冈羟胺A酯(化合物17)的制备(R1＝CCl3CH2CH2CH2CH2CH2CH2CO-，R2-R8＝H)：
井冈羟胺A(1.34g，4.0mmol)和三氯辛酸(0.50g，2.0mmol)依次加入到50mL的锥形烧瓶中，加入环己烷与叔丁醇各10mL。45℃下，摇床振荡30min，反应体系充分平衡后加入菌体冻干粉(1g)，45℃下，摇床振荡72h。反应结束后，加入20mL三氯甲烷停止反应，反应液过滤，旋蒸，加入20mL去离子水，然后加入1M氢氧化钠溶液至pH＝7，然后通过大孔吸附树脂柱分离，洗脱液为0％-55％浓度梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥，得到三氯辛酸井冈羟胺A酯0.49g，纯度98.1％。TLC检测浓缩液，展开剂为正丙醇：水：乙酸＝4:1:1，显色剂为碘蒸气与茚三酮溶液。
1H NMR(500MHz,Chloroform)δ5.58(dd,J＝6.2,0.6Hz,1H),4.74(d,J＝0.6Hz,2H),4.06(dd,J＝2.6,0.6Hz,1H),4.00(dd,J＝7.0,3.3Hz,1H),3.74(t,J＝3.1Hz,1H),3.52(dd,J＝12.4,7.1Hz,1H),3.35(t,J＝8.3Hz,1H),3.27(dd,J＝12.4,7.1Hz,1H),3.21–3.15(m,1H),3.11–3.06(m,1H),2.82(dd,J＝10.3,8.3Hz,1H),2.43(dt,J＝9.2,7.7Hz,1H),2.37–2.28(m,4H),1.90(t,J＝7.9Hz,1H),1.73(p,J＝8.0Hz,2H),1.51(s,1H),1.42–1.32(m,6H),1.31(d,J＝4.1Hz,1H),1.24(t,J＝7.9Hz,1H).
m/z(ESI-MS):[M+H]+:565.1462
实施例19：抗菌活性的测定
采用的测定方法是菌丝生长速率法。具体操作：用直径为6.0mm的打孔器在土豆培养基的边缘取活化好的R.solani菌碟，将菌碟菌丝面朝下，分别接种至含药琼脂培养基平板和对照组培养基平板的正中央，于25℃的恒温培养箱中培养，待对照菌落直径在50mm和80mm之间时(R.solani一般需要36h)利用游标卡尺测量，由数据的平均值计算菌落直径，最终算得抑制率。菌丝生长抑制率计算公式4-1(长度单位：mm)如下：
实验过程中，先以多个待测试剂稀释到1000μg/mL的浓度得到的抑制率做参照，若抑制率为0则舍弃，相反，若抑制率大于0，则以500μg/mL、250μg/mL、125μg/mL、62.5μg/mL、31.25μg/mL等浓度梯度做抑菌活性测定。
药物毒力回归方程和有效中浓度EC50与EC5的计算：以菌丝生长抑制率表示药物对R.solani的毒力。对菌丝生长的抑制率换算成抑制几率值(y)，药剂浓度换算成浓度对数(x)，按最小二乘法求出药物对R.solani抑制几率值的回归方程决定系数R，根据毒力回归方程分别计算药物对菌丝生长的抑制中浓度EC5和EC50值。
表1不同药物对R.solani的毒力方程
从上表可见，该类化合物具有很好的生物活性，其中，部分化合物对水稻纹枯病的抑制作用超过了井冈霉素A，甚至最低作用效果相较于井冈霉素A或井冈羟胺A，低2-3个数量级。因此，该类化合物具有巨大的应用前景和商业价值，有望开发成为替代井冈霉素的新型高效、绿色杀菌剂。
实施例20：井冈羟胺A-叔丁醇饱和溶液的制备
90℃油浴锅中，井冈羟胺A(5g)在叔丁醇(300mL)中回流搅拌5h制得井冈羟胺A-叔丁醇饱和溶液。
90℃油浴锅中，井冈羟胺A(5g)在叔丁醇(300mL)中不回流条件下搅拌30h制得井冈羟胺A-叔丁醇饱和溶液。
两种溶液的溶解度如表2所示：
表2
实施例21：
90℃油浴锅中，井冈羟胺A(5g)在叔丁醇(300mL)中回流搅拌5h制得井冈羟胺A-叔丁醇饱和溶液。将井冈羟胺A-叔丁醇饱和溶液(21mL，0.5mmoL)和十一酸(1.0mmoL,186.33mg)于反应容器中于40℃充分混合，然后加入脂肪酶Lipozyme RMIM(100mg)和已于400℃活化2h的4A°分子筛(1g)在40℃振荡反应，反应30h后取样，加水稀释，过膜，高效液相色谱仪分析；其中，流动相为pH＝7.0PBS溶液和甲醇的混合液(其中甲醇的体积分数为3％)。高效液相色谱仪分析结果：井冈羟胺A转化率分别为26.87％。
反应液经离心除去分子筛及催化剂，蒸除溶剂，然后加水并用氢氧化钠调节pH值至中性，通过大孔吸附树脂柱(上海华震科技有限公司，HZ-801)分离，以体积浓度为0％-55％的乙醇水溶液为洗脱试剂进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥得到产物，产物的1HNMR(600MHz,DMSO)和m/z(ESI-MS)表征表明其与上述化合物10为同一物质，即为十一酸井冈羟胺A酯，产物纯度为98％。
实施例22：筛选最适脂肪酶催化十一酸井冈羟胺A的合成
改变脂肪酶，其他反应步骤同实施例21，所得产物均为十一酸井冈羟胺A酯，其中高效液相色谱仪分析结果如下表所示：
表3：不同脂肪酶a催化下的井冈羟胺A转化率
a表中所列的脂肪酶均购买于厦门慧嘉生物科技有限公司。
结果显示，Lipozyme RMIM的催化效率最高，井冈羟胺A转化率达26.87％。
实施例23：Lipozyme RMIM催化合成十一酸井冈羟胺A的条件优化—反应时间
将井冈羟胺A-叔丁醇饱和溶液(21mL，0.5mmoL)和十一酸(1.0mmoL,186.33mg)于反应容器中于40℃充分混合，然后加入Lipozyme RMIM(100mg)和已于400℃活化2h的4A°分子筛(1g)在40℃振荡反应，反应过程取样，加水稀释，过膜，高效液相色谱仪分析；其中，流动相为pH＝7.0PBS溶液和3％甲醇的混合液。高效液相色谱仪分析结果如表4所示：
表4不同反应时间下的井冈羟胺A转化率
结果显示，Lipozyme RMIM的最佳催化时间为48小时，井冈羟胺A转化率达26.54％。
实施例24：Lipozyme RMIM催化合成十一酸井冈羟胺A的条件优化—温度
将井冈羟胺A-叔丁醇饱和溶液(21mL，,0.5mmoL)和十一酸(1.0mmoL，186.33mg)于反应容器中(于25℃，30℃,35℃，40℃，45℃,50℃)充分混合，然后加入脂肪酶(100mg)和已于400℃活化2h的4A°分子筛(1g)(在25℃，30℃,35℃，40℃，45℃,50℃)振荡反应，反应48h后取样，加水稀释，过膜，高效液相色谱仪分析；其中，流动相为pH＝7.0PBS溶液和3％甲醇的混合液。高效液相色谱仪分析结果如表5所示：
表5：不同温度下的井冈羟胺A转化率
结果显示，Lipozyme RMIM的最适催化温度为45℃。
实施例25：Lipozyme RMIM催化合成十一酸井冈羟胺A的条件优化—分子筛加量
将井冈羟胺A-叔丁醇饱和溶液(21mL，,0.5mmoL)和十一酸(1.0mmoL，186.33mg)于反应容器中于45℃充分混合，然后加入脂肪酶(100mg)和已经400℃活化2小时的4A°分子筛(0g、0.2g、0.4g、0.6g、0.8g、1.0g)在45℃振荡反应，反应48h后取样，加水稀释，过膜，高效液相色谱仪分析；其中，流动相为pH＝7.0PBS溶液和3％甲醇的混合液。高效液相色谱仪分析结果如表6所示：
表6不同分子筛加量下的井冈羟胺A转化率
结果显示，最适分子筛量为1.2g/mmoL。
实施例26：Lipozyme RMIM催化合成十一酸井冈羟胺A的条件优化—底物摩尔比
将井冈羟胺A-叔丁醇饱和溶液(21mL，,0.5mmoL)和十一酸(0.125mmoL,0.167mmoL，0.25mmoL,0.5mmoL,1.0mmoL，1.5mmoL，2.0mmoL)于反应容器中于45℃充分混合，然后加入脂肪酶(100mg)和已于400℃活化2h的4A°分子筛(0.6g)在45℃振荡反应，反应48h后取样，加水稀释，过膜，高效液相色谱仪分析；其中，流动相为pH＝7.0PBS溶液和3％甲醇的混合液。高效液相色谱仪分析结果如表7所示：
表7不同底物摩尔比下的井冈羟胺A转化率
结果显示，综合考虑反应的物料及转化率，Lipozyme RMIM催化反应的最适摩尔比为1:3。
不同底物摩尔比下得到的反应液的后处理方法同实施例21，所得产物均为十一酸井冈羟胺A酯。
实施例27：Lipozyme RMIM催化合成十一酸井冈羟胺A的条件优化—酶加量
将井冈羟胺A-叔丁醇饱和溶液(21mL，,0.5mmoL)和十一酸(1.5mmoL，279.495mg)于反应容器中于45℃充分混合，然后加入脂肪酶(20mg,40mg,60mg,80mg，100mg，120mg)和已于400℃活化2h的4A°分子筛(0.6g)在45℃振荡反应，反应48h后取样，加水稀释，过膜，高效液相色谱仪分析；其中，流动相为pH＝7.0PBS溶液和3％甲醇的混合液。高效液相色谱仪分析结果如表8所示：
表8不同酶加量下的井冈羟胺A转化率
结果显示，在反应体系为21mL时，酶的最适加量为80mg,即160g/moL。
综上所述，在井冈羟胺A-叔丁醇饱和溶液中，当使用Lipozyme RMIM作为催化剂，井冈羟胺A与十一酸的摩尔比为1:3，反应温度为45℃，分子筛量为1.2g/mmoL，酶加量为200g/moL时，反应48h井冈羟胺A转化率高达43％。
Claims (13)
1.一种式（I）所示的井冈羟胺A酯化物的制备方法，所述方法为：井冈羟胺A和十一酸在叔丁醇中在生物催化剂的作用下反应制得式（I）所示的井冈羟胺A的酯化物；所述生物催化剂为Lipozyme RMIM；
R=CnH2n+1，其中n=10。
2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：原料的投料方式为：使井冈羟胺A在叔丁醇中于90-110℃回流搅拌4-6 h制得井冈羟胺A饱和溶液，然后将井冈羟胺A饱和溶液和十一酸在反应容器中混合。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述制备方法具体按照如下实施：将井冈羟胺A-叔丁醇饱和溶液和十一酸在反应容器中于25-50 ℃充分混合，然后加入生物催化剂在25-50 ℃振荡反应，充分反应后，反应液经分离纯化得到井冈羟胺A的酯化物；所述井冈羟胺A与十一酸的投料摩尔比为4:1-1:4，所述生物催化剂的用量以井冈羟胺A的摩尔数计为40-240 g/moL。
4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于：反应体系中还加入经过活化的分子筛，所述分子筛的用量以井冈羟胺A的摩尔数计为0.4-2 g/mmoL。
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述分子筛的用量以井冈羟胺A的摩尔数计为1.2-2.0g/mmoL。
6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述分子筛的用量以井冈羟胺A的摩尔数计为1.2g/mmoL。
7.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述井冈羟胺A与十一酸的投料摩尔比为1:2-4；所述生物催化剂的用量以井冈羟胺A的摩尔数计为160-240 g/moL。
8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述井冈羟胺A与十一酸的投料摩尔比为1:3。
9.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述生物催化剂的用量以井冈羟胺A的摩尔数计为160 g/moL。
10.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于：反应温度为45-50℃；反应时间为48 h。
11.如权利要求10所述的制备方法，其特征在于：反应温度为45℃。
12.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于反应条件为：井冈羟胺A与十一酸的摩尔比为1:3，酶加量为160 g/moL井冈羟胺A，分子筛的用量为1.2g/mmoL井冈羟胺A，反应温度为45℃，反应时间为48 h。
13.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述的分离纯化步骤具体为：离心除去生物催化剂及分子筛，蒸除溶剂，然后加水并用氢氧化钠调节pH值至中性，通过大孔吸附树脂柱分离，以体积浓度为0%-55%的乙醇水溶液为洗脱试剂进行梯度洗脱，收集目标液，浓缩干燥。
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