CN111700178A - 一种罗非鱼油或其分提物的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种罗非鱼油或其分提物的应用，属于食品技术领域。所述应用包括猪饲料、人乳替代脂或乳制品中的应用。本发明发现罗非鱼油中棕榈酸，油酸和亚油酸，且棕榈酸超过65％分布在sn‑2位上，含量最高的甘油三酯OPL，可作为猪饲料中脂肪添加物或配方奶粉用油。因此，在猪饲料或配方奶粉加入罗非鱼油，有利于对脂肪酸和钙的吸收，能够提高能量的吸收与利用。

Description

一种罗非鱼油或其分提物的应用

技术领域

本发明涉及一种罗非鱼油或其分提物的应用，属于食品技术领域。

背景技术

在饲粮中添加脂肪在于为机体提供生长发育所需的能量。仔猪能很好的吸收利用母乳脂肪，其生长发育所需的能量70％来自乳脂，但对于饲料脂肪，仔猪却难以消化利用，导致仔猪断奶后出现脂肪性腹泻，生长缓慢、死亡率高。现有的猪饲料多以一些含油的饼粕或植物油等作为脂肪来源。脂肪的营养价值不仅与其脂肪酸碳链的长度、双键数目有关，还决定于脂肪酸的组成及脂肪酸的分布位置。研究表明饱和脂肪酸在sn-2位置上比在sn-1和sn-3更易被吸收。猪乳脂及猪体脂的甘油三酯有着独特的结构，饱和脂肪酸优先酯化在sn-2位，不饱和脂肪酸主要分布在sn-1，3位，而饲料中脂肪的脂肪酸组成单一，脂肪酸组成与比例严重不均衡；且饱和脂肪酸优先酯化在sn-1，3位，吸收利用率低，引起能量和钙的丢失(陈进超.妊娠后期和哺乳期饲粮添加不同链长肪酸对母猪繁殖性能和哺乳仔猪生长性能的影响，西南大学硕士学位论文，2019)。早期断乳的仔猪，抵抗力差，消化能力弱，现存的饲料并不完全符合仔猪的消化吸收的生理特点，因此我们需要为其提供易于消化和营养全价的饲粮。

母乳被普遍认为是婴儿最好的食物，其营养丰富均衡，易吸收利用，有利于婴儿的生长发育。母乳中含有3％～5％的脂肪(绝大多数为水)，称为人乳脂，主要由甘油三酯(TAG，约98％)组成，不仅为婴儿提供约50％的所需能量，还可为婴儿提供生长发育必需的脂肪酸、对婴幼儿的健康成长具有重要作用。人乳脂中脂肪酸在TAG分子上的分布并不是随机的，而是具有独特的分布特点，约70％的棕榈酸分布在TAG的sn-2位，而不饱和脂肪酸(UFA)主要分布在sn-1,3位，因此，人乳脂的TAG以1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯(OPO)和1-油酸-2-棕榈酸-3-亚油酸(OPL)为主，这种特殊的TAG结构有利于婴幼儿对脂肪和钙的吸收，防止能量和钙的缺失(Donald M S.The effects of glyceride structure onabsorption and metabolism,Annual Review of Nutrition,1991,11,413-434)。婴儿期是人一生中生长发育最快的时期，刚出身的婴儿，一年后的身高增加25cm，脑重增加2倍多，大脑是人乳代谢最为旺盛的组织，这一阶段婴儿的代谢显著高于成人，需要更多的能量(王兴国，人乳脂及人乳替代脂[M],科学出版社)，因此，FAO和WHO推荐：对婴儿来说，脂肪提供的能量应该占其膳食总能量的40％～60％(成人的推荐值仅为20％～30％)。因此，对婴幼儿来说，不仅膳食中要有足够多的脂肪量，而且这种脂肪结构还要有利于吸收，母乳中富含的OPO和OPL甘三酯有利于婴幼儿的吸收，为最佳的甘三酯结构形式。然而，我们对现有的市售婴幼儿奶粉脂肪酸、sn-2位脂肪酸及甘油三酯组成调查发现，其人乳替代脂在sn-2位脂肪酸及甘油三酯组成上与母乳脂具有较大差别，市售人乳替代脂中甘三酯中饱和脂肪酸在sn-1,3位，而不饱和脂肪酸在sn-2位(孙聪，人乳替代脂的组成、相似性评价及制备研究，江南大学博士学位论文，2018)。现有的市售婴幼儿配方奶粉多为植物油基，植物油的组成和分布不利于婴幼儿的消化与吸收。在甘油三酯组成上，只有少数人乳替代脂添加了OPO结构脂，很少有关注到OPL结构脂的添加，而OPL是我国母乳脂中含量最高的甘油三酯，因此，人乳替代脂中添加OPL甘油三酯是婴幼儿配方奶粉质量提升的关键。

发明内容

为了解决上述问题，本发明发现罗非鱼油中具有高含量棕榈酸，油酸和亚油酸，且棕榈酸超过65％分布在sn-2位上，含量最高的甘油三酯为OPL(31.94％)，这种组成与分布有利于婴幼儿或仔猪对脂肪酸和钙的吸收，能够提高能量的吸收与利用，改善粪便的硬度，减少婴幼儿便秘和肠道疾病的发生，可作为猪饲料中脂肪添加物或配方奶粉用油。

本发明的第一个目的是提供一种罗非鱼油或其分提物在猪饲料中的应用。

在本发明一种实施方式中，罗非鱼油分提物是采用干法分提或溶剂法分提对罗非油进行分提得到。

在本发明一种实施方式中，所述罗非鱼油或其分提物作为猪饲料中的脂肪来源。

本发明的第二个目的是提供一种猪饲料，所述猪饲料包含罗非鱼油或其分提物、蛋白质、碳水化合物、矿物质和维生素。

在本发明一种实施方式中，所述饲料中蛋白质包含豆粕、血粉、鱼粉、乳清蛋白粉中的一种或多种。

在本发明一种实施方式中，所述饲料中碳水化合物包含乳糖、乳清粉、寡聚糖中的一种或多种。

在本发明一种实施方式中，所述饲料包含，以质量百分数计，5％-10％份罗非鱼油或其分提物、20％-30％鱼粉、20％-30％豆粕、10％-20％乳清粉、15％-25％血粉、0-1％维生素和0-1％矿物质。

本发明的第三个目的是提供一种罗非鱼油或其分提物在人乳替代脂或乳制品中的应用。

在本发明一种实施方式中，罗非鱼油分提物是采用干法分提或溶剂法分提对罗非鱼油进行分提得到。

在本发明一种实施方式中，所述罗非鱼油分提物的制备方法中提取溶剂为丙酮或正己烷；罗非鱼油和溶剂的质量体积比(w/v，g/mL)为1：(2-10)；提取温度为-15～5℃；时间为10-20h。

在本发明一种实施方式中，所述罗非鱼油或其分提物在制备人乳替代脂中作为OPO和OPL补充成分。

本发明的第四个目的是提供一种人乳替代脂组合物，所述组合物是以罗非鱼油或其分提物为基料油，再添加其他天然油脂和/或改性油脂复配而成。

在本发明一种实施方式中，所述天然油脂包括大豆油、花生油、棕榈油和椰子油中的一种或多种。

在本发明一种实施方式中，所述改性油脂包括OPO结构脂和/或OPL结构脂。

在本发明一种实施方式中，所述人乳替代脂组合物包括，以质量百分数计，0-10％大豆油，0-10％花生油，0-10％棕榈油，10％-20％椰子油、0-30％巴沙鱼油、0％-20％OPO结构脂、0-5％OPL结构脂、40-70％罗非鱼油或其分提物。

在本发明一种实施方式中，优选地，大豆油：花生油：棕榈油：椰子油：巴沙鱼油：罗非鱼油的质量份数比为(1-2)：(1-5)：(0.01-1)：(10-20)：(20-30)：(40-55)。

在本发明一种实施方式中，优选地，大豆油：花生油：棕榈油：椰子油：OPO结构脂：罗非鱼油分提物的质量份数比为(0.01-1)：(0.01-1)：(0.01-1)：(10-20)：(10-20)：(60-70)。

本发明的第五个目的是提供一种包含上述人乳替代脂组合物的食品。

本发明的有益效果：

(1)本发明选用的罗非鱼油中主要脂肪酸为棕榈酸、油酸和亚油酸，含量分别为24.27％、33.90％和21.48％。罗非鱼油中棕榈酸超过65％分布在sn-2位上，这种高sn-2棕榈酸和高OPL含量在其他天然来源的油脂中未发现，OPL是中国母乳脂中含量最高的甘油三酯。罗非鱼油的这种组成和结构有利于脂质的消化和吸收，可以很好的应用于猪饲料和配方奶粉。

(2)本发明提供了一种猪饲料，所述饲料包含脂肪、蛋白质、碳水化合物、维生素、矿物质等营养素，易于消化，营养全价。

(3)本发明提供一种配方奶粉用油，所述配方奶粉用油在总脂肪酸，sn-2位脂肪酸及甘油三酯组成与中国母乳脂相似度较高，解决了配方奶粉脂肪酸和钙低吸收率的问题，提高能量的吸收与利用，改善了粪便的硬度，减少婴幼儿便秘和肠道疾病的发生，更符合中国婴幼儿的需求。

(4)本发明提供了一种包含上述配方奶粉用油的婴幼儿配方奶粉。

具体实施方式

以下对本发明的优选实施例进行说明，应当理解实施例是为了更好地解释本发明，不用于限制本发明。

1、棕榈酸含量的测定方法

取50mg鱼油于10mL刻度管，加入2mL 0.5mol/L的氢氧化钾-甲醇溶液，65℃皂化30min，冷却后加入2mL25％体积分数的三氟化硼-甲醇溶液，70℃水浴5min；加入2mL正己烷振荡3-4min提取脂肪酸甲酯，加入4mL饱和NaCl溶液，取上层溶液加入无水硫酸钠振荡(10000rpm离心5min)，注射器吸取过膜，气相色谱检测，计算棕榈酸含量。

2、sn-2位棕榈酸含量的测定方法

取50mg样品溶于1.0mL色谱级正己烷中，加入7mL Tris-HCl缓冲液(pH＝7.6)、1.75mL胆酸盐溶液(0.05％)、0.7mL的氯化钙溶液(2.2％)，旋涡振荡2min，加入50mg的猪胰脂酶，并在37℃下反应9min，每3min取出旋涡振荡2min。反应结束后，向冷却后的样品中加入2mL无水乙醚，以4000r/min的转速离心后吸取有机上层，氮气浓缩至200μL的样品在薄层色谱上点样，展开剂为正己烷：无水乙醚：冰醋酸(50:50:1，v/v/v)，采用2,7-二氯荧光素显色，并在紫外灯下识别，刮下2-MAG，用无水乙醚萃取两次，氮气吹干无水乙醚后，对样品进行脂肪酸甲酯化，经气相色谱仪进行检测分析，计算sn-2位棕榈酸含量。

3、甘油三酯含量的测定方法

采用配有蒸发光检测器的反相高效液相色谱仪(RP-HPLC)检测分析产物中甘油三酯的组成。取20mg样品溶于1.0mL色谱级正己烷中，膜过滤后，经高效液相色谱仪进行检测分析。采用峰面积归一化的方法完成定量，并使用标品进行标定将面积百分比转换为质量百分比，计算甘油三酯的含量。

4、人乳替代脂的相似性评价

本发明所涉及的人乳替代脂同中国母乳脂在脂肪酸、sn-2位脂肪酸及甘油三酯组成方面的相似性，根据邹孝强等(邹孝强.人乳脂替代品的评价模型建立及其酶法制备[D]:[博士学位论文].无锡:江南大学，2013.)建立的人乳脂相似性评价模型，采用“扣分”原则评价人乳替代脂与人乳脂的相似度。人乳脂相似性评价模型如下：

其中，G表示相似性评价总得分，满分为100分；G_{FA/sn-2FA/TAG}表示脂肪酸、sn-2位脂肪酸或甘油三酯的相似性评价得分；n为总脂肪酸或sn-2位脂肪酸或甘油三酯中指标的数量；b_i表示人乳替代脂的总脂肪酸或sn-2位脂肪酸或甘油三酯的实际值；a_i表示人乳脂的总脂肪酸或sn-2位脂肪酸或甘油三酯的端值，取决于b_i的大小。

实施例1：罗非鱼油

采用氯仿甲醇法提取罗非鱼油，取新鲜罗非鱼肝脏冷冻干燥并粉碎。取粉碎后的粉末10g，加入100mL甲醇，震荡，再加入200mL氯仿，超声20min，抽滤后取澄清液体，加入100mL质量分数为0.88％的氯化钠溶液，将混合后的溶液在4500rpm下离心10min，吸取下层，置于圆底烧瓶中，旋蒸除去溶剂得到罗非鱼油。测得罗非鱼油中棕榈酸、油酸，亚油酸含量为24.27％、33.90％和21.48％。sn-2位棕榈酸含量为48.01％，经计算有65.94％的棕榈酸分布在sn-2位。其中OPL、OPO的含量分别为31.94％，14.71％，这种高OPL含量在其他天然来源的油脂中未发现。

实施例2：一种罗非鱼油的分提产物的制备方法

将实施例1得到的罗非油经溶剂法分提，所用溶剂为丙酮，罗非鱼油与溶剂比(w/v)为1:6，分提温度为-10℃，分提时间12h，得到罗非鱼油分提物。测得罗非鱼油分提物中棕榈酸、油酸，亚油酸含量为26.43％、29.07％和19.32％。sn-2位棕榈酸含量为52.47％，经计算有66.17％的棕榈酸分布在sn-2位。其中OPL，OPO的含量分别为36.25％，19.03％。

实施例3：一种猪饲料

一种猪饲料，所述饲料包括，以质量百分数计，9％罗非鱼油、25％鱼粉、25％粉碎豆粕、20％乳清粉、20％喷雾血粉、0.5％维生素和0.5％矿物质。

实施例4：一种人乳替代脂组合物

选取大豆油、花生油、棕榈油、椰子油、巴沙鱼油和实施例1制备得到的罗非鱼油为基料油，配比为大豆油：花生油：棕榈油：椰子油：巴沙鱼油：罗非鱼油＝1.02％：2.87％：0.46％：18.15％：27.79％：49.72％，其总脂肪酸，sn-2位脂肪酸及甘油三酯三部分与中国母乳脂的相似得分分别为：96.78、79.52和83.05总平均得分为86.45。目前中国市场上配方奶粉中人乳替代脂的总相似性得分均在60分以下(孙聪.人乳替代脂的组成、相似性评价及制备研究，江南大学博士学位论文，2018)，因此本发明显著提高了人乳替代脂与中国人母乳脂的相似性。

实施例5：一种人乳替代脂组合物

选取大豆油、花生油、棕榈油、椰子油、OPO结构脂和实施例2制备得到的罗非鱼油分提物为基料油，各原料的总脂肪酸、sn-2位脂肪酸和甘油三酯的组成见表1-3，配比为大豆油：花生油：棕榈油：椰子油：OPO结构脂：罗非鱼油分提物＝0.10％：0.25％：0.40％：14.57％：16.73％：67.96％，其总脂肪酸，sn-2位脂肪酸及甘油三酯三部分与中国母乳脂的相似得分分别为：95.31、82.28和82.45。总平均得分为86.68。目前中国市场上配方奶粉中人乳替代脂的总相似性得分均在60分以下(孙聪.人乳替代脂的组成、相似性评价及制备研究，江南大学博士学位论文，2018)，因此本发明显著提高了人乳替代脂与中国人母乳脂的相似性。

表1天然油脂、改性油脂和罗非鱼油总脂肪酸组成(％)

注：ND表示未测出。

表2天然油脂、改性油脂和罗非鱼油sn-2位脂肪酸组成(％)

表3天然油脂、改性油脂和罗非鱼油甘油三酯组成(％)

注：ND表示未测出。

实施例6：一种婴幼儿配方奶粉

一种含有实施例3中的人乳替代脂组合物的婴幼儿配方奶粉。其组成包括(按重量份计)：脱脂牛/羊乳300份、乳清粉200份、乳清蛋白粉15份，婴幼儿配方奶粉用油80份、磷脂5份、DHA粉1份、花生四烯酸粉1份、白砂糖40份，乳糖40份，葡萄糖20份、唾液酸0.5份、核苷酸0.5份、胆碱3份、叶黄素0.1、复合维生素1份和复合矿物质1份。

对比例1：其他鱼油

参照实施例1的氯仿甲醇法提取鲢鱼油、草鱼油、鲤鱼油和鳊鱼油，测得这四种鱼油棕榈酸，油酸，亚油酸，sn-2位棕榈酸含量如下表所示。由表1可以看出，其他四种鱼油同母乳脂相比，脂肪酸组成是上差异不大，但在位置分布上差异较大，尤其是OPO和OPL含量，这与中国人的母乳脂组成差距较大，不适合作为基料油调配人乳替代脂。

表4脂质组成对比

采用小鼠为模型，研究鱼油对其脂质代谢的影响，具体如下：

实验动物清洁级Wistar大鼠(1周龄，雄性)，饲养于清洁级实验动物中心，温度(23+2℃)，湿度60％，自由饮水和采食。实验动物的护理和预处理都依照《实验动物管理条例》相关规定进行。准备21只雄性Wistar大鼠用基础饲料喂养一周后，随机分为3组，分别为实验组(添加罗非鱼油)、对照组(添加鲢鱼油)和基础对照组(添加棕榈油)。适应一周后开始按饲料配方喂养。各组饲料配方参照美国营养学会推荐的实验动物饲料配方配制而成，各组饲料出脂肪来源不同，能量及各种主要营养素、矿物质和各种微量元素保持一致。每日更换垫料和饮用水，将幼鼠放在代谢笼中单独喂养，喂养实验进行2周，记录平均摄食量和增重。

表5幼鼠基本膳食配方

喂养实验进行两周，及时分别收集最后3天的粪便。每天结束后将收集的粪样称重，冻存于-20℃。实验期结束后，分别将各笼的全部粪样拌和混匀，取一部分进行冷冻干燥，粉碎过40目筛，于-20℃条件下冷冻保存。对小鼠粪便脂质和矿物质组成进行测定，结果见表6和7。

表6小鼠膳食摄入和生长状况

在两周的喂养实验期间，包含罗非鱼油的实验室小鼠体重较另外两组有一定的增加趋势。且对照组和基础对照组小鼠粪便颜色较深，含水量较低。

表7小鼠脂肪和矿物质表观吸收率

注：表观吸收率＝(摄入-粪便中的含量)/摄入×100％

小鼠脂肪和矿物质表观吸收率如表7。实验组与对照组和基础对照组相比，脂肪表观吸收率更好，可以看出罗非鱼油更有利于脂肪的吸收。三组中镁的表观吸收率没有显著差异。而实验组的表观吸收率高于另外两组，这可能由于棕榈酸位于sn-1，3位易与钙结合形成钙皂，而钙皂在胆汁中溶解度低，皂中的脂肪和钙都很难被吸收。由此可以得出，罗非鱼油减少了粪便中钙的排泄，改善了钙的吸收。

对比例2：一种市售婴幼儿配方奶粉中脂质评价

称取1克市售植物油基婴幼儿配方奶粉，加入10mL 65℃的热水，充分混合后冷却。加入2.0mL氨水，充分混合后放入约65℃的水浴锅中，加热15～20min,不时取出振荡。取出后冷却至室温，加入10mL乙醇，缓和但彻底地进行混合。分别加入25mL的乙醚和石油醚进行萃取，分层后取上层有机相，重复2-3次。合并所有的有机相，40℃下旋转蒸发除去有机溶剂，所得的脂肪放置在-20℃冰箱中备用。测得该市售婴幼儿配方奶粉的总脂肪酸中棕榈酸、油酸，亚油酸含量为15.78％、39.72％和18.70％，sn-2位棕榈酸含量为11.48％。其中OPO，OPL的含量分别为12.21％，5.98％。对总脂肪酸，sn-2位脂肪酸和甘油三酯分别评价，得分为85.35，23.62和33.68，平均得分为47.55，与实施例3中的婴幼儿配方奶粉相比，在sn-2位脂肪酸和甘油三酯方面失分较多。

虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims (10)

1.罗非鱼油或其分提物在猪饲料中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，罗非鱼油分提物是采用干法分提或溶剂法分提对罗非鱼油进行分提得到。

3.一种猪饲料，其特征在于，所述猪饲料含有罗非鱼油或其分提物、蛋白质、碳水化合物、矿物质和维生素。

4.根据权利要求3所述的猪饲料，其特征在于，所述饲料中蛋白质包括豆粕、血粉、鱼粉、乳清蛋白粉中的一种或多种；所述饲料中碳水化合物包括乳糖、乳清粉、寡聚糖中的一种或多种。

5.根据权利要求3或4所述的猪饲料，其特征在于，所述饲料含有，以质量百分数计，5％-10％罗非鱼油或其分提物、20％-30％鱼粉、20％-30％豆粕、10％-20％乳清粉、15％-25％血粉、0-1％维生素和0-1％矿物质。

6.罗非鱼油或其分提物在制备人乳替代脂或乳制品中的应用。

7.一种人乳替代脂组合物，其特征在于，所述组合物是以罗非鱼油或其分提物为基料油，再添加其他天然油脂和/或改性油脂复配而成。

8.根据权利要求7所述的人乳替代脂组合物，其特征在于，所述天然油脂包括大豆油、花生油、棕榈油、椰子油、巴沙鱼油中的一种或多种；所述改性油脂包括OPO结构脂和/或OPL结构脂。

9.根据权利要求7或8所述的人乳替代脂组合物，其特征在于，所述人乳替代脂组合物包括，以质量百分数计，0-10％大豆油，0-10％花生油，0-10％棕榈油，10％-20％椰子油、0-30％巴沙鱼油、0-20％OPO结构脂、0-5％OPL结构脂、40％-70％罗非鱼油或其分提物。

10.一种包含权利要求7-9任一所述的人乳替代脂组合物的食品。