CN111556755A - 用于治疗偏头痛的人乳寡糖 - Google Patents

Abstract

本发明涉及人乳寡糖(HMO)，包含HMO的合成组合物在预防或治疗人偏头痛中的用途以及预防或治疗人偏头痛的方法。

Description

用于治疗偏头痛的人乳寡糖

技术领域

本发明涉及用于预防和治疗人复发性偏头痛的方法、化合物和组合物。

背景技术

偏头痛是常见神经系统疾病，其特征是与恶心、呕吐以及对视觉、听觉和嗅觉刺激过敏相关的难受头痛。偏头痛发作可导致数小时至数天的剧烈疼痛，并且严重到疼痛致残。被称为先兆的症状可在头痛之前或伴随头痛出现。这些可包括闪光、盲点或面部一侧或手臂或腿部有刺痛感。

全世界偏头痛的患病率约为10％，然而，在美国则略高一些(约12％)。全球疾病负担研究将偏头痛列为289种疾病中排名第七的最常见的致残病理。与男性相比，女性偏头痛的发生率更高(1-17％)。偏头痛患者通常会经历工作效率和机能大大降低。这导致患者的生活质量下降，并给个人和雇主带来沉重的经济负担。保守估计美国每年与偏头痛相关的费用为780亿美元(Thompson等人，《临床药学和治疗学杂志(J.Clin.Pharm.Ther.)》，42，394(2017))。

偏头痛是神经血管病症，涉及皮质扩散抑制、神经源性炎症和颅脑血管收缩功能障碍。某些诱因可引发偏头痛发作。这些包括荷尔蒙变化、情绪诱因、身体原因(如剧烈的体力消耗)、饮食因素(例如酒精、咖啡因、亚硝酸盐)、药物和环境诱因，例如强光、强烈气味或响亮声音。

尽管深入研究，偏头痛的确切发病机理仍未完全了解，并且仍没有完整的预防和攻击疗法。据信偏头痛发作的基本机制涉及三叉神经血管系统的激活。通过触发机制，发生硬脑膜和软膜血管的血管舒张，这可刺激血管周围的三叉神经原神经末梢。激活的伤害感受器在周围释放神经肽，包括降钙素生成的肽、P物质和神经激肽A。这些物质会引起三叉神经的炎症。当炎症和血管相互作用时，血管扩张，导致疼痛。大脑本身不包含对疼痛敏感的神经元。当压力激活在覆盖大脑的组织中或在面部、颈部和头皮周围的肌肉和血管中的对疼痛敏感的神经时，就会产生疼痛。

谷氨酸是中枢神经系统中主要的兴奋性神经递质，并且在初级传入神经传递和伤害感受中起重要作用。大量的人和动物研究表明，偏头痛中的谷氨酸和谷氨酸能系统过度活跃。谷氨酸盐是非必需氨基酸谷氨酸的离子形式，并且它几乎激发每个神经元，从而促进初级神经传递和疼痛感。作为神经递质，谷氨酸通过线粒体酶谷氨酰胺酶由谷氨酰胺合成，并储存在突触小泡中。在神经传递期间，它从储存库中释放到突触间隙并由突触前谷氨酸转运体和位于相邻神经胶质细胞上的转运体清除。

谷氨酸受体也存在于三叉神经系统中。主要的谷氨酸离子受体中的一种是N-甲基D-天冬氨酸盐(NMDA)。谷氨酸激活NMDA引起细胞结构和DNA损伤，从而引起神经元细胞死亡，并且谷氨酸兴奋性毒性与NMDA受体的超兴奋性相关，该超兴奋性在偏头痛的病理生理中起关键作用。NMDA受犬尿氨酸途径的代谢物激活或抑制。

色氨酸沿犬尿氨酸和5-羟色胺途径代谢，从而导致犬尿氨酸代谢产物和神经活性5-羟色胺以及褪黑素形成。两条途径的色氨酸降解能力不相等，其中犬尿氨酸途径分解代谢的色氨酸占95％，而5-羟色胺途径分解代谢的色氨酸占5％。在犬尿氨酸途径中，色氨酸通过色氨酸2,3-加双氧酶和吲哚胺2,3-加双氧酶(IDO)(它们是犬尿氨酸途径的限速酶并通过细胞因子TNF-α和IFN-γ调节)转化为N-甲酰基-L-犬尿氨酸。N-甲酰基-L-犬尿氨酸可以进一步代谢为L-犬尿氨酸(L-KYN)，其是犬尿酸(KYNA)的前体。L-KYN也可以降解为邻氨基苯甲酸或3-羟基-L-犬尿氨酸。然后邻氨基苯甲酸和3-羟基-L-犬尿氨酸进一步转化为3-羟基邻氨基苯甲酸，其将代谢为喹啉酸。在犬尿氨酸途径代谢物中，许多化合物具有生物活性。3-羟基-L-犬尿氨酸和3-羟基邻氨基苯甲酸能够增加自由基的形成，从而产生氧化应激。相比之下，KYNA具有神经保护功能，因为它可以作为NMDA的拮抗剂。

在5-羟色胺途径中，色氨酸通过色氨酸羟化酶转化为5-羟基色氨酸。然后5-羟色氨酸可被代谢成5-羟色胺，其再通过5-羟色胺N-乙酰基转移酶代谢成褪黑素。褪黑素在色氨酸代谢中起着非常重要的作用，因为它影响着这两个途径的两个关键酶；IDO和5-羟色胺N-乙酰基转移酶。褪黑素已显示出诱导IDO的表达，而降低5-羟色胺N-乙酰基转移酶的表达。

已报道偏头痛患者体内有犬尿氨酸和5-羟色胺途径的异常。与对照组相比，偏头痛患者体内测量的5-羟色胺和褪黑素水平较低，并且研究示出慢性偏头痛患者的邻氨基苯甲酸升高惊人，所有其他犬尿氨酸均下降，特别是KYNA。KYNA水平的降低可导致NMDA的过度活化，并且5-羟色胺水平过低会导致褪黑素水平降低，这又会导致犬尿氨酸代谢产物失衡。这些事件导致偏头痛。此外，色氨酸的消耗已显示出增加偏头痛患者的恶心、头痛和畏光感(Drummond Cephalalgia26,1225(2006)；Curto等人，J.Headache Pain 17:47(2016))。这表明偏头痛患者的色氨酸水平和分解代谢异常。

因为色氨酸是必需氨基酸，估计饮食需要量为每天5mg/kg，并且它是几乎所有蛋白质来源中的限制性氨基酸，因此色氨酸的饮食来源可能不足以获得调节的犬尿氨酸和5-羟色胺途径。因此，需要安全、有效的干预措施以获得足够色氨酸来调节这两个途径。

必需维生素如核黄素、叶酸和吡哆醛磷酸盐的水平对于预防神经毒性也很重要。这三种B-维生素可以通过缓解氧化应激、线粒体功能障碍、神经源性炎症和谷氨酸兴奋性毒性发挥作用，且它们在色氨酸-犬尿氨酸途径中起关键作用。因此，维生素B缺乏会导致严重神经系统后果。考虑到全球人口中10-15％的维生素吸收和利用受到限制，长期维生素不足会导致多种神经系统病症如偏头痛的发展。尽管B-维生素作为补充剂且存在于多种食物中，但仍然存在不足，主要是由于生物利用度低，以及由于食物摄入不足和饮食不均衡造成的营养不良。维生素B补充剂已用于偏头痛的治疗，然而，由于维生素的持续生物利用度，通过肠道细菌进行原位强化似乎是更好选择。

越来越多的证据表明，肠道微生物群在神经炎性病症的产生中起关键作用。肠道微生物群由庞大细菌群落组成，主要位于结肠且与宿主共生。人胃肠道微生物群包括至少1000种不同种的细菌，它们共同构成10¹⁴个细菌细胞，是人细胞的十倍，并且它们编码比人基因组多100倍的独特基因(Qin等人，《自然(Nature)》464，59(2010))。肠道细菌可以通过迷走感觉神经与中枢神经系统直接通讯。迷走感觉神经是通过大脑和胃肠(GI)道之间的双向通讯进行的神经免疫和脑肠中枢的关键组成部分。

已经报道在偏头痛与一系列炎症性病症如哮喘、肥胖、代谢综合征、过敏和胃肠道病症如肠易激综合征和乳糜泻疾病之间的重要关联。已经从两个方向发现这些关联：与健康对照组相比，偏头痛患者更常患有胃肠道病症；且与对照组相比，具有胃肠道病症的患者更常患有偏头痛。这表明肠道和偏头痛之间的显著关联。这种关联可以通过肠道微生物群改变、炎性免疫反应和肠道通透性增加(所有这些都已在胃肠道病症中被观察到)来解释。在偏头痛患者和胃肠道病症人群中观察到肠道微生物群改变。这可导致肠道通透性增加。通透性受损会导致难消化的食物颗粒和细菌成分如脂糖(LPS)渗入血流。血流中LPS和有害代谢产物的存在会影响血脑屏障。血脑屏障的破坏可导致神经炎症并引发引起偏头痛的反应(Lankarani等人，Middle East J.Dig.Dis.9，139(2017))。此外，γ-氨基丁酸(GABA)是可以由肠道细菌产生和破坏的有效抑制性神经递质。因此，GABA代谢的失衡可与偏头痛发作的发生和频率相关。

目前，尚无偏头痛的治愈方法。通常，使用缓解疼痛的药物如阿司匹林、布洛芬和曲普坦类来治疗疼痛。通常，这些药物要么仅用于轻度偏头痛，要么具有明显的副作用如恶心、头晕、嗜睡、肌肉无力、中风和心脏病发作。预防性药物是可用的，但是目前可用的预防性手段药物均不完全消除头痛，并且具有严重副作用。通常，这些药物已被开发用于其他目的，如抗抑郁剂、抗癫痫药等。

WO 2017/198276描述使用人乳寡糖预防或治疗人的5-羟色胺和/或色氨酸失调，特别是用于改善肠运动性的合成组合物和方法。提到的疾病有抑郁、焦虑、愤怒、对疼痛异常敏感、碳水化合物渴望和暴食、便秘、消化系统病症、因缺乏阳光而感到昏昏欲睡、过度依赖他人、感到不堪重负、过度警惕、失眠、无趣、自卑、偏头痛、认知功能差和耳鸣。

目前尚无有效且副作用少的针对复发性偏头痛的预防性减少发作或发作严重程度的干预措施。因此，迫切需要有效、安全且耐受良好的预防或治疗人的复发性偏头痛的方法和化合物。

发明内容

本发明的第一方面涉及人乳寡糖(HMO)在预防性减少

——人的复发性偏头痛的症状严重程度和/或

——偏头痛的复发，特别是偏头痛的复发频率中的用途。

本发明的第二方面涉及合成组合物在预防性减少

——人的复发性偏头痛的症状严重程度和/或

——偏头痛的复发，特别是偏头痛的复发频率中的用途；该组合物包含至少一种人乳寡糖(HMO)。

优选地，合成组合物含有的HMO的量为1g至15g；更优选，2g至10g。例如，合成组合物可以含有3g至7g的HMO。

合成组合物可含有双歧杆菌，例如长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)和/或两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)。合成组合物还可包含镁源、维生素B源、褪黑素、辅酶Q10和/或ω-3长链脂肪酸。

本发明的第三方面涉及用于预防性减少人的复发性偏头痛的症状严重程度的方法，该方法包括向人施用有效量的至少一种人乳寡糖(HMO)。

本发明的第四方面涉及用于预防性减少人的偏头痛的复发，特别是偏头痛的复发频率的方法，该方法包括向人施用有效量的至少一种人乳寡糖(HMO)。

人可患有慢性偏头痛和/或可患有另一种病症，例如炎性病症(如哮喘)、肥胖症、代谢综合征、过敏和胃肠道病症(如肠易激综合症和乳糜泻疾病)。另一种病症不是5-羟色胺或色氨酸代谢异常。

优选地，向人施用HMO至少1-2周，更优选至少3至4周，例如2-4个月，5-12个月或更长时间。在一个实施方式中，治疗可以暂时停止，如果患者在停止HMO摄入后经历偏头痛的发生，则可以再次恢复治疗。在其他实施方式中，如果患者在停药后长时间不发生偏头痛，例如3-6个月，则可以永久停止治疗。

本发明的第五方面涉及用于预防性减少以下项的方法：

——慢性偏头痛患者的平均头痛天数，或

——慢性偏头痛患者的偏头痛症状的严重程度，

该方法包括向患者施用有效量的至少一种人乳寡糖持续至少14天。

优选地，每天向人施用1g至15g的HMO，更优选地，每天2g至10g。例如，可以每天向人施用3g至7g。可以在初始阶段期间向人施用较高剂量，而在第二(维持)阶段向人施用较低剂量。

本发明的第六方面是封装物在预防性减少以下项中的用途：

——人的复发性偏头痛的症状严重程度和/或

——偏头痛的复发，特别是偏头痛的复发频率，该封装物包含至少14个单独日剂量的有效量的至少一种人乳寡糖(HMO)。

优选地，封装物中的每个剂量含有约1g至15g的人乳寡糖，优选2g至10g，更优选3g至7g。此外，封装物优选地包含至少约21个日剂量，例如约28个日剂量。

除上述HMO的量外，每日剂量还可包含镁源、维生素B源、褪黑素、辅酶Q10、ω-3长链脂肪酸和/或胆碱。另选地，封装物可另外包含至少14日剂量的镁源、维生素B源、褪黑素、辅酶Q10、ω-3长链脂肪酸和/或胆碱。

HMO可以是中性HMO或酸性HMO。中性HMO可以是一种或更多种岩藻糖基化HMO或一种或更多种非岩藻糖基化HMO。优选地，HMO选自2’-FL、3-FL、DFL、LNT、LNnT、3’-SL、6’-SL、LNFP-I或其混合物。优选地，HMO包括、由或基本上由2’-FL以及LNnT和LNT中的至少一个组成；2’-FL和DFL中的至少一个以及LNnT和LNT中的至少一个(例如2’-FL、DFL以及LNnT和LNT中的至少一个)；2’-FL和6’-SL；DFL和6’-SL；2’-FL、DFL和6’-SL；2’-FL、6’-SL以及LNnT和LNT中的至少一个；2’-FL、DFL、6’-SL以及LNnT和LNT中的至少一个。

人可患有涉及胃肠道症状的疾病或病症。例如，疾病或病症可以是自身免疫疾病如乳糜泻疾病，肠易激综合症，过敏和/或食物不耐受，如非乳糜泻/小麦不耐受。

优选地，人不是婴儿人。

可以进一步向人施用镁源、维生素B源、褪黑素、辅酶Q10、ω-3长链脂肪酸、胆碱和/或益生菌，例如一种或更多种双歧杆菌物种。优选地，进一步向人施用维生素B源、ω-3长链脂肪酸和/或胆碱。

本发明的第六方面涉及慢性偏头痛患者的饮食管理的方法，该方法包括向患者施用有效量的至少一种人乳寡糖持续至少14天时间。

具体实施方式

人乳寡糖(HMO)是人乳中发现的可溶性聚糖的异质混合物。它们是人乳中仅次于乳糖和脂质的第三种最丰富的固体成分，并且以5-25g/l的浓度存在(Bode：《人乳寡糖及其有益作用(Human milk oligosaccharides and their beneficial effects)》，见：《人乳的饮食和营养方面手册(Handbook of dietary and nutritional aspects of humanbreast milk)》(Zibadi等人编辑)，pp.515-31，瓦赫宁根学术出版社(WageningenAcademic Publishers)(2013))。HMO对小肠中的酶水解具有抵抗力，且因此在很大程度上未被消化和吸收，并完好无损地到达结肠。到达结肠的大多数HMO作为底物，通过选择性刺激特定细菌的生长来塑造肠道生态系统。据信，HMO实质上可调节婴儿肠道微生物群，并在配方奶喂养和母乳喂养的婴儿的菌群差异中起决定性作用。

HMO可优先增加胃肠道中双歧杆菌的丰度，特别是青春双歧杆菌系统发育组的双歧杆菌，例如，长双歧杆菌和/或两歧双歧杆菌。双歧杆菌能够从头合成B-维生素如核黄素和叶酸，从而确保其恒定的生物利用度，并且可以分泌神经调节剂如GABA。另外，双歧杆菌物种能够合成色氨酸，并且可以影响免疫调节和不同免疫标记物如IFN-γ和TNF-α的表达。犬尿氨酸途径受IFN-γ和TNF-a调节，因此选择性刺激双歧杆菌可影响色氨酸代谢并帮助调节5-羟色胺和犬尿氨酸途径。此外，岩藻糖基化HMO可以通过传入迷走神经刺激中枢神经系统(Vazquez等人，《公共科学图书馆·综合(PLoS ONE)》11：e0166070(2016))。

现已令人惊讶地发现，向患有复发性偏头痛的人经口或肠施用一种或更多种HMO可减少或防止人的偏头痛的发生和/或复发。此外，当这些症状再次发生时，偏头痛症状的严重程度和/或频率会降低。减少发生在不患有胃肠道病症的人和患有胃肠道症状的人中。因此，本发明提供人乳寡糖和包含其的合成组合物，可用作人的复发性偏头痛的饮食性初级和/或次级预防。

另外，向人(优选非婴儿儿童和成人)施用人乳寡糖优先产生有益的肠道微生物群。结果，胃肠道的通透性和炎症减弱。

在本说明书中，除非另有说明，否则以下术语具有适用于本文所述所有实施方式的以下含义：

“非婴儿人”或“非婴儿”意指3岁及年龄更大的人。非婴儿人可以是儿童、青少年、成人或老人。

“人乳寡糖”或“HMO”意指在人母乳中发现的复杂碳水化合物(Urashima等人：《乳寡糖(Milk Oligosaccharides)》，Nova科学出版社(Nova Science Publisher(2011))；Chen Adv.Carbohydr.Chem.Biochem.72，113(2015))。HMO具有在还原端包含乳糖单元的核心结构，该还原端可以被一个或更多个β-N-乙酰基-乳糖胺基和/或一个或更多个β-乳-N-生物基单元延长，并且该核心结构可以被αL-呋喃核糖基和/或α-N-乙酰基神经氨酰(唾液酰基)部分取代。就这一点而言，非酸性(或中性)HMO没有唾液酸残基，并且酸性HMO在其结构中具有至少一个唾液酸残基。非酸性(或中性)HMO可以是岩藻糖基化的或非岩藻糖基化的。这类中性非岩藻糖基化HMO的实例包括乳-N-四糖(LNT)、乳-N-新四糖(LNnT)、乳-N-新己糖(LNnH)、对乳-N-新己糖(pLNnH)、对-乳-N-己糖(pLNH)和乳-N-己糖(LNH)。中性岩藻糖基化HMO的实例包括2’-岩藻糖基乳糖(2’-FL)、乳-N-岩藻五糖I(LNFP-I)、乳-N-二岩藻己糖I(LNDFH-1)、3-岩藻糖基乳糖(3-FL)、二岩藻糖基乳糖(DFL)、乳-N-岩藻五糖II(LNFP-II)、乳-N-岩藻五糖III(LNFP-III)、乳-N-二岩藻己糖III(LNDFH-III)、岩藻糖基-乳-N-己糖II(FLNH-II)、乳-N-岩藻五糖V(LNFP-V)、乳-N-岩藻五糖VI(LNFP-VI)、乳-N-二岩藻己糖II(LNDFH-II)、岩藻糖基-乳-N-己糖I(FLNH-1)、岩藻糖基-对-乳-N-己糖I(FpLNH-1)、岩藻糖基-对-乳-N-新己糖II(F-pLNnH II)和岩藻糖基-乳-N-新己糖(FLNnH)。酸性HMO的实例包括3’-唾液乳糖(3’-SL)、6’-唾液乳糖(6’-SL)、3-岩藻糖基-3’-唾液乳糖(FSL)、LST a、岩藻糖基-LST a(FLST a)、LST b、岩藻糖基-LST b(FLST b)、LST c、岩藻糖基-LST c(FLSTc)、唾液酸基-LNH(SLNH)、唾液酸基-乳-N-己糖(SLNH)、唾液酸基-乳-N-新己糖I(SLNH-1)、唾液酸基-乳-N-新己糖II(SLNH-II)和二唾液酸基-乳-N-四糖(DSLNT)。

“合成组合物”意指人工制备的组合物，并且优选地意指含有至少一种以化学和/或生物学方式(例如通过化学反应、酶促反应或重组)离体产生的化合物的组合物。在一些实施方式中，合成组合物可以但不优选与天然存在的组合物相同。合成组合物通常包含一种或更多种能够预防或治疗人的偏头痛的化合物，包括一种或更多种HMO。同样，在一些实施方式中，合成组合物可以包含一种或更多种营养或药学活性组分，其不会不利地影响上述化合物的功效。下面还描述本发明的合成组合物的一些非限制性实施方式。

“偏头痛”意指以反复发作的中度至重度头痛伴抽搐性疼痛为标志的病状，其通常持续两小时至三天。它可能有早期症状(综合症)，其表明疾病或病情(例如便秘、情绪变化、食物渴望等)的发作。偏头痛发作通常始于头部的一侧，但可蔓延到两侧，并常伴有恶心、呕吐和对光或声音的敏感性，并且有时具有先发先兆。随之是发作(后驱症状)后发生且持续数小时到约2-3天的一个或更多症状，例如疲劳、精神错乱、皮肤和头皮敏感、情绪变化等。本上下文中的“偏头痛患者”意指患有复发的偏头痛发作的个人，无论是否伴有前驱症状和/或后驱症状。“减少偏头痛的严重程度”意指减少以下症状中的一种或更多种：头部一侧或两侧感觉到的中度至重度搏动性头痛，恶心，意识模糊，视力模糊，情绪变化，疲劳以及对伴随头痛的光、声音或气味的敏感性增加。

“复发性偏头痛”意指个人定期经历偏头痛的症状，如每周一次，两周一次，每月一次或更多次，偏头痛病状持续约2小时至约72小时。“复发频率”意指在一段时间内，例如1个月、3个月等，人的复发性偏头痛发生的次数。根据本发明，本文公开的组合物和治疗方法减少慢性偏头痛患者的偏头痛的复发频率至少25％，如30-50％。

“慢性偏头痛”意指偏头痛病状，其中患者每月至少有10天头痛，连续至少3个月。慢性偏头痛是复发性偏头痛的更极端形式。

“患者”一般是患有疾病或病理状况的个人，目前或过去已经由合格的医疗专业人员对其进行观察或控制。

“疗法”意指为减少或消除疾病或病理状况的症状而给予的治疗或采取的措施。

“治疗”意指解决医学病状或疾病，目的是改善或稳定被治疗的人的预后或解决潜在的营养需求。因此，治疗包括通过解决被治疗者的营养需求而进行的医疗状况或疾病的饮食或营养管理。“治疗(treating)”和“治疗(treatment)”具有语法上对应的含义。

“预防性治疗”或“预防”意指为减少疾病的开始或复发的风险而给予的治疗或采取的措施。术语“预防性治疗”在本文中与术语“预防治疗”可互换使用。

“初级预防”意指在未知患有病状的个体中预防病状的开始。

“次级预防”意指预防高危个人的病状的开始，或预防已经患有病状的患者的症状的复发。在本上下文中，“高危个人”意指这样的个人，其不知道患有疾病例如偏头痛，但具有遗传倾向或具有可引起病状开始(例如偏头痛发作)的另一种生理病状例如疾病或代谢性病症如炎性病症，例如哮喘、肥胖、代谢综合征；过敏；胃肠道病症如肠易激综合症或腹腔疾病。

“减少偏头痛”意指消除或减轻个人的偏头痛相关的至少一种症状，优选个人的偏头痛的两种或更多种症状，优选所有偏头痛的症状。“预防偏头痛”意指减少个人的与偏头痛相关的一种或更多种症状(优选两种或更多种症状，更优选所有偏头痛症状)的发生或复发的风险。“偏头痛的症状”优选意指特征在于以下中至少一种的头痛：

——头部的一侧或两侧的疼痛；

——感觉悸动或搏动的疼痛；

——对光线、声音以及有时对气味和触感敏感；

——恶心和呕吐；

——视力模糊；

——头晕，有时之后会晕厥。

“严重偏头痛”意指至少伴有以下症状之一的偏头痛：恶心、神志不清、视力模糊、头晕和有时随之是晕厥、情绪变化、疲劳、对光、声音或气味的敏感性增加，其中的任何项可伴随有可在头部的一侧或两侧感觉到且无预警情况下发生的中度至重度的悸动或搏动头痛。

在当前内容中，术语减少和预防偏头痛还涉及前驱和后驱偏头痛症状。还考虑其他描述的偏头痛症状(例如参见https://migraine.com/migraine-symptoms/)。

“微生物群”、“微生物丛”和“微生物组”意指通常生活在人体器官或部分，特别是人胃肠器官中的活微生物群落。胃肠道微生物群中最主要的成员包括：以下门的微生物：厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门、变形菌门、协同菌门、疣微菌门、梭杆菌门和广古菌门；在属水平上的拟杆菌属、粪杆菌属、双歧杆菌属、罗氏菌属、另枝菌属、柯林斯氏菌属、布劳特氏菌属(Blautia)、粪球菌属、瘤胃球菌属、优杆菌属和Dorea；在种水平：单形拟杆菌、Alistipesputredinis、粪副拟杆菌、布氏瘤胃球菌、Dorea longicatena、粪拟杆菌、多形拟杆菌、霍氏真杆菌、扭链瘤胃球菌、柔嫩梭菌群、酸奶胃球菌、产气柯林斯菌、Dorea formicigenerans、普通拟杆菌和肠道罗斯拜瑞氏菌。胃肠道微生物群包括位于覆盖胃肠道上皮的粘液层中或附着于其上的粘膜相关微生物群和在胃肠道的内腔中发现的与腔相关的微生物群。

“肠内施用”意指用于将组合物递送至人的任何常规形式，其引起组合物在胃肠道(包括胃)中的沉积。肠内施用的方法包括通过鼻胃管或空肠管、经口、舌下和直肠进食。

“经口施用”意指用于通过口将组合物递送至人的任何常规形式。因此，经口施用是肠内施用的一种形式。

“有效量”意指足以在人身上产生所需结果的HMO的量，特别是有效减少慢性偏头痛患者的偏头痛症状的严重程度或偏头痛的复发的发生率的HMO的量。可以一剂或多剂施用有效量以达到所需结果。根据本发明，本文提及的关于物质量或治疗天数的所有和每个值可偏离+/-10％，而对治疗没有影响。这由术语“约”指示。

“青春双歧杆菌系统发生群的双歧杆菌”意指选自以下组成的组的细菌：青春双歧杆菌、角双歧杆菌、链双歧杆菌、假小链双歧杆菌、Bifidobacterium kashiwanohense、齿双歧杆菌和甾体双歧杆菌((Duranti等人，Appl.Environ.Microbiol.79,336(2013),Bottacini等人，Microbial Cell Fact.13:S4(2014)))。优选地，青春双歧杆菌系统发生群的双歧杆菌是青春双歧杆菌和/或假小链双歧杆菌。

“微生物群的调节”意指对微生物群施加修饰或控制的影响，例如导致双歧杆菌、巴氏杆菌和/或粪杆菌属和/或其他产生丁酸盐的细菌的固有肠道丰度增加的影响。在另一个实例中，影响可引起活泼瘤胃球菌和/或变形菌门的肠内丰度的减少。“变形菌门”是革兰氏阴性菌的门，且包括多种致病菌，如埃希氏菌属、沙门氏菌属、弧菌属、幽门螺杆菌属、耶尔森氏菌属和许多其他著名的属。

“饮食管理”意指由于疾病、病症或医疗状况而患有以下项的患者的全部或部分进餐：

——摄取、消化、吸收、代谢或排泄普通食物或其中所含的某些营养素或代谢物的能力受限、受损或受干扰，或者

——具有其他医学确定的营养素要求

(参阅：欧盟委员会的关于特殊医疗用途食品分类的委员会公告，欧盟官方公报C401,25.11.2017，第10-11页)。

根据本发明，可以通过向人施用一种或更多种HMO来减少或预防人的复发性偏头痛的发生率和强度。HMO可以作为独立的化合物或以合成组合物的形式施用。

因此，本发明的一个方面涉及人乳寡糖(HMO)在预防性减少人的以下项中的用途：

——复发性偏头痛的症状严重程度和/或

——偏头痛的复发，特别是偏头痛的复发频率。

本发明的另一方面是包含HMO的合成组合物在预防性减少以下项中的用途

——复发性偏头痛的症状严重程度和/或

——偏头痛的复发，特别是偏头痛的复发频率。

本发明的另一方面是预防性减少人的复发性偏头痛的症状严重程度的方法，该方法包括向人施用有效量的至少一种人乳寡糖。

本发明的又一方面是用于预防性地减少人的偏头痛的复发，特别是偏头痛的复发频率的方法，该方法包括向人施用有效量的至少一种人乳寡糖。

本发明的又一方面是用于预防性减少以下项的方法

——慢性偏头痛患者头痛天数的平均数，或

——慢性偏头痛患者的偏头痛症状的严重程度，

该方法包括向患者施用有效量的至少一种人乳寡糖持续至少14天的时间。

本发明的又一方面是用于慢性偏头痛患者或患有复发性偏头痛的患者的饮食管理的方法，该方法包括向该患者施用有效量的至少一种人乳寡糖持续至少14天的时间。

本发明的又一方面涉及包含至少14个单独日剂量的有效量的至少一种人乳寡糖(HMO)的封装物在预防性减少人的以下项中的用途

——复发性偏头痛的症状严重程度和/或

——偏头痛的复发，特别是偏头痛的复发频率。

本发明的另一方面是

——一种或更多种人乳寡糖(HMO)，

——包含一种或更多种人乳寡糖(HMO)的合成组合物，或

——包含至少14个单独日剂量的有效量的一种或更多种人乳寡糖的封装物，在患有复发性或慢性偏头痛的患者的饮食管理中的用途。

关于每个方面，可以通过熟知的方法从哺乳动物(包括但不限于人、牛、羊、猪或山羊物种)分泌的一种或多种乳中分离或富集HMO。还可以通过使用微生物发酵、酶促方法、化学合成或这些技术的组合的熟知方法来生产HMO。作为实例，可以如WO 2011/100980和WO2013/044928中所述那样制备使用化学物质LNnT，可以如WO 2012/155916和WO 2013/044928中所述那样合成LNT，可以如WO 2013/091660所述那样制备LNT和LNnT的混合物，可以如WO 2010/115934和WO 2010/115935中所述那样制备2’-FL，可以如WO 2013/139344中所述那样制备3-FL，可以如WO 2010/100979中所述那样制备6’-SL及其盐，可以如WO 2012/113404中所述那样制备唾液酸化寡糖，并且可以如WO 2012/113405中所述那样制备人乳寡糖的混合物。作为酶促生产的实例，可以如WO 2012/007588中所述那样制备唾液酸化寡糖，如WO 2012/127410中所述那样制备岩藻糖基化寡糖，并且可以如WO 2012/156897和WO2012/156898中所述那样有利地制备人乳寡糖的多种混合物。可以在WO 01/04341和WO2007/101862中找到使用基因修饰的大肠杆菌制备核心人乳寡糖(可选地由岩藻糖或唾液酸取代)的生物技术方法的描述。

在上述方面中的任一项中，HMO可以是单个HMO或适合于本发明目的的任何HMO的混合物。HMO可以是中性HMO或酸性HMO。在一个实施方式中，中性HMO是一种或更多种岩藻糖基化HMO；在另一个实施方式中，中性HMO是一种或更多种非岩藻糖基化HMO。特别地，岩藻糖基化中性HMO选自以下组成的列表：2’-FL、3-FL、DFL、LNFP-I、LNFP-II、LNFP-III、LNFP-V、LNFP-VI、LNDFH-I、LNDFH-II、LNDFH-III、FLNH-I、FLNH-II、FLNnH、FpLNH-I和F-pLNnH II，优选2’-FL，且非岩藻糖基化中性HMO选自LNT、LNnT、LNH、LNnH、pLNH和pLNnH例如LNnT组成的列表。一种或更多种岩藻糖基化HMO可以是例如包含、由或基本由2’-FL和DFL组成的混合物。

在一个实施方式中，混合物包含、由或基本上由中性HMO组成，优选至少第一中性HMO和至少第二中性HMO，其中第一中性HMO是岩藻糖基化中性HMO，且第二中性HMO是非岩藻糖基化中性HMO。岩藻糖基化中性HMO和非岩藻糖基化HMO可以以约4:1至1:1的质量比存在。特别地，HMO的混合物包含、由或基本上由岩藻糖基化HMO以及非岩藻糖基化中性HMO组成，该岩藻糖基化HMO选自2’-FL、3-FL、DFL、LNFP-I、LNFP-II、LNFP-III、LNFP-V、LNDFH-I、LNDFH-II、LNDFH-III、FLNH-I、FLNH-II、FLNnH、FpLNH-I和F-pLNnH II组成的列表，该非岩藻糖基化中性HMO选自LNT、LNnT、LNH、LNnH、pLNH和pLNnH组成的列表。更优选地，中性HMO的混合物包含、由或基本上由以下组成：选自2’-FL、3-FL和DFL组成的列表的岩藻糖基化HMO，和选自LNT和LNnT组成的列表的非岩藻糖基化中性HMO；有利地，混合物包含、由或基本上由以下组成：2’-FL以及LNnT和LNT中的至少一个；或2’-FL和DFL中的至少一个，以及LNnT和LNT中的至少一个；或2’-FL、DFL以及LNnT和LNT中的至少一个。

在其他实施方式中，混合物包含、由或基本上由至少第一(酸性)HMO和至少第二(中性)HMO组成，其中第一(酸性)HMO选自3’-SL、6’-SL和FSL并且第二(中性)HMO是选自2’-FL、3-FL、DFL、LNT和LNnT组成的列表；有利地，混合物包含、由或基本上由以下组成：2’-FL和6’-SL；或6’-SL以及2’-FL和DFL中的至少一个；或2’-FL、6’-SL以及LNnT和LNT中的至少一个；或2’-FL、DFL、6’-SL以及LNnT和/或LNT中的至少一个。

在一个实施方式中，合成组合物可以呈营养组合物的形式。例如，营养组合物可以是食物组合物、补液、医疗食品或用于特殊医疗目的的食品、营养补品等。营养组合物可以含有蛋白质、脂质和/或可消化的碳水化合物的来源，并且可以呈粉末或液体形式。可以将组合物设计为唯一营养来源或作为营养补充剂。

合适蛋白质来源包括乳蛋白、大豆蛋白、大米蛋白、豌豆蛋白和燕麦蛋白、或其混合物。乳蛋白可以成乳蛋白浓缩物、乳蛋白分离物、乳清蛋白或酪蛋白或两者的混合物的形式。蛋白质可以是完整蛋白质或水解蛋白质、部分水解或广泛水解。水解蛋白提供易于消化的优势，这对患有炎症或受损胃肠道的人至关重要。蛋白质也可以游离氨基酸的形式提供。蛋白质可占营养组合物能量的约5％至约30％，通常约10％至20％。

蛋白质来源可以是以下的来源：谷氨酰胺、苏氨酸、半胱氨酸、丝氨酸、脯氨酸或这些氨基酸的组合。谷氨酰胺来源可以是谷氨酰胺二肽和/或富含谷氨酰胺的蛋白质。由于肠细胞将谷氨酰胺用作能量源，因此可以包含谷氨酰胺。苏氨酸、丝氨酸和脯氨酸是生产粘蛋白的重要氨基酸。粘蛋白覆盖胃肠道且可以改善肠屏障功能和粘膜愈合。半胱氨酸是谷胱甘肽的主要前体，它是机体抗氧化防御的关键。

合适的可消化碳水化合物包括麦芽糖糊精、水解或改性的淀粉或玉米淀粉、葡萄糖聚合物、玉米糖浆、玉米糖浆固体、高果糖玉米糖浆、大米衍生的碳水化合物、豌豆衍生的碳水化合物、马铃薯衍生的碳水化合物、木薯淀粉、蔗糖、葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖、蜂蜜、糖醇(例如麦芽糖醇、赤藓糖醇、山梨糖醇)或其混合物。优选地，组合物不添加乳糖。通常，可消化的碳水化合物提供营养组合物能量的约35％至约55％。特别合适的可消化碳水化合物是低葡萄糖当量(DE)麦芽糖糊精。

合适的脂质包括中链甘油三酸酯(MCT)和长链甘油三酸酯(LCT)。优选地，脂质是MCT和LCT的混合物。例如，MCT可以占脂质重量的约30％至约70％，更具体地占重量的约50％至约60％。MCT具有易于消化的优势，这对胃肠道发炎或受损的人至关重要。通常，脂质提供营养组合物能量的约35％至约50％。脂质可以含有必需脂肪酸(ω-3和ω-6脂肪酸)。优选地，这些多不饱和脂肪酸提供的脂质源的总能量少于约30％。

长链甘油三酸酯的合适来源是菜籽油、葵花籽油、棕榈油、大豆油、乳脂、玉米油、高油性油和大豆卵磷脂。分馏椰子油是中链甘油三酸酯的合适来源。营养组合物的脂质分布优选设计为多不饱和脂肪酸ω-3(n-3)与ω-3(n-6)之比为约4:1至约10:1。例如，n-3与n-6的脂肪酸比例可以为约6:1至约9:1。多不饱和脂肪酸可以由ω-3脂肪酸组成。

营养组合物还可包含维生素和矿物质。如果营养组合物旨在作为唯一的营养来源，则其优选包含完整的维生素和矿物质。维生素的实例包括维生素A、B-复合物(如B1、B2、B6和B12)、C、D、E和K、烟酸和酸性维生素，如泛酸、叶酸和生物素。矿物质的实例包括钙、铁、锌、镁、碘、铜、磷、锰、钾、铬、钼、硒、镍、锡、硅、钒和硼。镁的来源，例如二柠檬酸镁(600mg)，可以减少偏头痛的发生和强度。营养组合物还可包含辅酶Q10。营养组合物还可包含类胡萝卜素，如叶黄素、番茄红素、玉米黄质和β-胡萝卜素。所包含的类胡萝卜素的总量可在约0.001μg/ml至约10μg/ml范围内变化。叶黄素可以以约0.001μg/ml至约10μg/ml，优选地约0.044μg/ml至约5μg/ml的叶黄素量被包含在内。番茄红素可以以约0.001μg/ml至约10μg/ml，优选约0.0185μg/ml至约5μg/ml的番茄红素量被包含在内。β-胡萝卜素可包含约0.001μg/ml至约10mg/ml，例如约0.034μg/ml至约5μg/ml的β-胡萝卜素。

营养组合物优选还含有低浓度的钠；例如，约300mg/l至约400mg/l。剩余电解质的浓度可以在不给肾脏功能带来不必要肾溶质负担情况下满足需要。例如，钾优选以约1180至约1300mg/l的范围存在；并且氯化物优选以约680至约800mg/l的范围存在。

营养组合物还可含有各种其他常规成分，如防腐剂、乳化剂、增稠剂、缓冲剂、纤维和益生元(例如低聚果糖、低聚半乳糖)、益生菌(例如动物双歧杆菌乳亚种BB-12、动物双歧杆菌乳亚种HN019、动物双歧杆菌乳亚种Bi07、动物双歧杆菌乳亚种W52、婴儿双歧杆菌ATCC15697、两歧双歧杆菌、鼠李糖乳杆菌GG、鼠李糖乳杆菌HNOOI、嗜酸乳杆菌LA-5、嗜酸乳杆菌NCFM、短乳杆菌W63、干酪乳杆菌W56、唾液乳杆菌W24、发酵乳杆菌CECT5716、长双歧杆菌BB536、长双歧杆菌AH 1205、长双歧杆菌AH 1206、短双歧杆菌M-16V、罗伊氏乳杆菌ATCC55730，罗伊氏乳杆菌ATCC PTA-6485、罗伊氏乳杆菌DSM 17938)、抗氧化剂/抗炎化合物(包括生育酚、类胡萝卜素、抗坏血酸/维生素C、抗坏血酸棕榈酸酯、多酚、谷胱甘肽和超氧化物歧化酶(瓜))、其他生物活性因子(例如，生长激素、细胞因子、TFG-β)、着色剂、调味剂和稳定剂、润滑剂等。

营养组合物可以配制成可溶粉末、液体浓缩物或即用型制剂。组合物可以通过鼻胃管或经口喂给有需要的人。也可以存在各种调味剂、纤维和其他添加剂。

营养组合物可以通过用于制备固体或液体形式的营养组合物的任何常用制造技术来制备。例如，可以通过合并各种进料溶液来制备组合物。可以通过加热和混合脂质源，然后在加热和搅拌时添加乳化剂(例如卵磷脂)、脂溶性维生素和至少一部分蛋白质源来制备脂肪蛋白进料溶液。然后通过在加热和搅拌时向水中添加矿物质、痕量和超痕量矿物质、增稠剂或悬浮剂来制备碳水化合物进料溶液。在添加碳水化合物(例如，HMO和可消化的碳水化合物源)之前，将所得溶液在持续加热和搅拌下保持10分钟。然后将所得进料溶液在加热和搅拌时共混在一起，并将pH调节至6.6-7.0，然后将组合物经受高温短时处理，在此期间将组合物进行热处理、乳化和均质化，然后使其冷却。如果需要，添加水溶性维生素和抗坏血酸，将pH调节至所需范围，添加调味剂，并添加水以达到所需的总固体含量。

对于液体产品，然后可以将所得溶液无菌包装以形成无菌包装的营养组合物。以这种形式，营养组合物可以是即食或浓缩液体形式。另选地，可将组合物喷雾干燥并加工并包装为可重构粉末。

当营养产品是即食营养液体时，以液体的重量计，液体中HMO的总浓度优选为约0.1％至约1.5％，包括约0.21％至约1.0％，例如约0.3％至约0.7％。当营养产品是浓缩营养液时，以液体的重量计，液体中HMO的总浓度优选为约0.2％至约3.0％，包括约0.4％至约2.0％，例如约0.6％至约1.5％。

在另一个实施方式中，营养组合物为单位剂型。单位剂型可含有可接受的食品级载体，例如磷酸盐缓冲盐溶液，乙醇在水中的混合物，水和乳化液如油/水或水/油乳化液，以及各种润湿剂或赋形剂。单位剂型也可以含有对人施用时不会产生不良、过敏或其他不良反应的其他物质。载体和其他物质可包括溶剂、分散剂、包衣剂、吸收促进剂、控释剂和一种或更多种惰性赋形剂，如淀粉、多元醇、制粒剂、微晶纤维素、稀释剂、润滑剂、粘合剂和崩解剂。

单位剂型可以经口施用，例如作为含有预定量混合物的片剂、胶囊或丸剂，或作为含有预定浓度混合物的粉剂或颗粒剂，或含有预定浓度的在水性或非水性溶液中的混合物的凝胶剂、糊剂、溶液剂、悬浮剂、乳液剂、糖浆、大丸剂、药糖剂或浆剂。经口施用组合物可以包含一种或更多种粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、调味剂和湿润剂。经口施用组合物如片剂可以任选地被包衣并且可以被配制以提供HMO的持续、延迟或受控释放。

单位剂型也可以通过鼻胃管施用或直接输注到胃肠道或胃中。

单位剂型还可包括治疗剂，如抗生素、益生菌、镁源、褪黑素、辅酶Q10、ω-3多不饱和脂肪酸、止痛药和抗炎剂。这种人用组合物的合适剂量可以基于因素如人的病况、免疫状况、体重和年龄以常规方式确定。在某些情况下，剂量的浓度应与在人母乳中组合物的HMO所发现的浓度相似。所需量通常为每天约1g至约15g，在某些实施方式中为每天约2g至约10g，例如每天约3g至约7g。适当的剂量方案可以通过本领域技术人员已知的方法来确定。

在进一步的实施方式中，HMO可以包含在药物组合物中。药物组合物可以含有药学上可接受的载体，例如，磷酸盐缓冲盐溶液，乙醇在水中的混合物，水和乳化液(如油/水或水/油乳化液)，以及各种润湿剂或赋形剂。药物组合物还可以含有其他物质，当向非婴儿施用时，该物质不会产生不利、过敏或其他不需要的反应。载体和其他物质可包括溶剂、分散剂、包衣剂、吸收促进剂、控释剂和一种或更多种惰性赋形剂，如淀粉、多元醇、制粒剂、微晶纤维素、稀释剂、润滑剂、粘合剂和崩解剂。

药物组合物可以经口施用，例如作为含有预定量的片剂、胶囊剂或丸剂，或作为含有预定浓度的粉剂或颗粒剂，或含有预定浓度的在水性或非水性溶液中的凝胶剂、糊剂、溶液剂、悬浮剂、乳液剂、糖浆、大丸剂、药糖剂或浆剂。经口施用组合物可以包含粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、调味剂和湿润剂。经口施用组合物如片剂可以任选地被包衣并且可以被配制为提供其中混合物的持续、延迟或受控释放。

药物组合物也可以通过直肠栓剂、气雾剂管、鼻胃管或直接输注到胃肠道或胃中来施用。

药物组合物还可包含治疗剂，如抗生素、益生菌、止痛药和抗炎剂。这些人用组合物的合适剂量可以基于因素如病况、免疫状态、体重和年龄以常规方式确定。在某些情况下，剂量的浓度应与人母乳中发现的HMO的浓度相似。所需量通常范围为每天约1g至约15g，在某些实施方式中为每天约2g至约10g，例如每天约3g至约7g，或约4g到约8g。适当的剂量方案可以通过常规方法确定。

为了预防或治疗人的复发性偏头痛，需要施用的一种或多种HMO的量将根据因素而变化，如复发性偏头痛的风险和严重程度，任何潜在的医学状况或疾病，年龄，组合物的形式以及被施用的其他药物。然而，所需量可以由医师容易地设定，并且通常在每天约1g至约15g的范围内，在某些实施方式中，每天约2g至约10g，例如约3g到每天约7g，或约4g到约8g。可以基于几个因素来确定合适的剂量，该因素包括例如体重和/或病况，正在治疗或预防的复发性偏头痛的严重程度，其他病情和/或疾病，副作用的发生率和/或严重程度以及施用方式。适当的剂量范围可以通过本领域技术人员已知的方法来确定。在一个实施方式中，方法包括第一和第二治疗阶段。在第一(初始)阶段，剂量可以较高(例如每天约3g至约15g，优选每天约3g至约10g)。在第二(维持)阶段，可以减少剂量(例如每天约1g至约10g，优选每天约2g至约7.5g)。

实施例

实施例1

招募年龄在18-70岁之间的患者，其具有至少12个月的复发性偏头痛病史(根据《国际头痛病症分类法》第3版[试行版]的标准)。患者在28天的筛查期间符合慢性偏头痛的标准(头痛持续时间或严重程度超过15天，并且达到偏头痛的ICHD-3试行标准的头痛超过8天)。关键的排除标准是在筛查之前的四个月内使用预防性药物；在筛查之前的两个月中使用预防性手段，例如经颅磁刺激；和在筛选期间使用阿片类药物或巴比妥类药物超过4天。如果是孕妇或哺乳期妇女，则患者也被排除在外。

在初次就诊(筛查)时，会向每位患者提供关于研究的书面和口头信息，并要求患者签署知情同意书。通过全面回顾包括头痛/偏头痛病史的临床病史对每位患者进行评估，并对其进行身体检查和12导联心电图。收集血液和尿液样本。将粪便采样装置分发给每个患者。指示患者将其样品保存在冰箱中，直到下一次就诊为止。为患者提供电子日记以记录头痛/偏头痛的发生和强度。疼痛强度采用李克特4点量表，其中得分“0”表示“无疼痛”，而得分“3”表示“严重疼痛”。患者还会记录相关的偏头痛症状(例如恶心、畏光和恐声)，使用的任何药物。

在第一次就诊的28天内进行第二次就诊(开始干预)时，将检查合格标准，并将合格受试者随机分为两组。总共包括40名患者。每组有20名患者，其中一组消耗治疗产品，而一组则使用安慰剂产品。治疗产品含有5克2’-FL和LNnT的组合，而安慰剂产品包含5克葡萄糖。两种产品均以粉末形式存在于单位剂量容器中。审查日记，并评估身体和精神健康的症状，胃肠道症状，生活质量和粪便稠度(通过SF36、GSRS、BSFS和QoL问卷进行测量)。试验补充品与使用急救药物的说明一起分发。收集粪便样本，并分发用于收集新样本的装置。指导患者保持当前饮食。

收集血液样本和尿液以进行生物标记和生物样本库。将血液样本中的血清转移至冷冻管中，并保存在-80℃下。测量以下生物标记物IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-6、IL-12、IL-10、MIP-1β、hs-CRP、脂多糖结合蛋白、脂肪酸结合蛋白2、类胰蛋白酶、抗鞭毛蛋白、连蛋白、组胺、前列腺素2和皮质醇。为了分析犬尿氨酸和5-羟色胺途径的代谢物水平，在血清中测量了以下化合物；色氨酸、L-犬尿氨酸、犬尿氨酸和5-羟色胺。对血液进行流式细胞术以确定免疫细胞的水平。

尿液样品储存在-80℃。使用NMR分析尿液样本中的细菌代谢产物(如SCFA)。

粪便样品在-80℃下保存直至分析。使用16S rRNA基因序列对粪便样品进行微生物分析。

在4周后的第3次就诊时，收集粪便样本，收集血液和尿液样本，并评估头痛/偏头痛的发生和强度，和身体和精神健康的症状，胃肠道症状，生活质量，和粪便稠度(通过SF36、GSRS、BSFS和QoL问卷进行测量)。分发用于补充新样本的试验补充品和装置。

在干预结束时(第8周)，每位患者访问医疗队。进行体格检查并重新评估症状(通过日志、GSRS、IBS-SSS、BSFS和QoL量表等进行测量)。收集试验补充产品以检查合规性。如前所述收集粪便样本和血液样本并进行分析。

初级终点是与基线的28天筛查期相比之下的每月平均头痛天数的平均变化(其中头痛持续≥4小时且头痛的严重程度至少为中等水平的天数或其中使用急性偏头痛特异性药物[曲普坦或麦角碱]治疗任何严重程度或持续时间的头痛的天数)。与安慰剂组相比，接受治疗产品的患者平均头痛天数减少。此外，在发生头痛/偏头痛的情况下，治疗组的强度较小。与安慰剂组相比，治疗组还显示出由GSRS评分确定的胃肠道症状改善和粪便稠度改善。血液分析表明，治疗患者的炎症标志物水平降低，肠通透性降低，表明粘膜屏障改善，调节性免疫细胞增加以及来自犬尿氨酸和5-羟色胺途径的代谢物分布更加平衡。粪便分析表明，接受治疗的患者细菌过度生长/营养不良的水平降低和更高的双歧杆菌水平；特别是青春双歧杆菌系统发育组成员，长双歧杆菌和双歧双歧杆菌。短链脂肪酸的浓度增加，且有害的代谢物减少。

实施例2

从普通人群中招募总计272名患有复发性偏头痛的男性和女性参与者参加研究。参与者完成基线筛查调查，他们在其中指出任何医疗状况(包括偏头痛)以及各种胃肠道和生活质量症状。对于症状，使用李克特5点量表，其中得分1表示“无症状”，而得分5表示“严重症状”。在272名参与者中，还指出以下附加条件：

病状	参与者数量
		肠易激综合症	86
腹泻	141
		便秘	143
过敏	137
		食物不耐受	149
抑郁	182

为每个参与者提供足够3周的HMO量，每天约4g HMO的剂量。将HMO提供为仅2’-FL或2’-FL和LNnT(按重量计)的4:1混合物。

摄入3周后，每个参与者都要完成第二次调查，其中他们会指出胃肠道和生活质量症状。相同的李克特5点量表用于评估症状。

在6周、9周和12周后重复此过程。

在整个12周的过程中，头痛/偏头痛参与者表示头痛/偏头痛的发生率和强度降低。此外，它们还表示胃肠道和生活质量症状的改善。

实施例3

将HMO 2’-FL和LNnT以4:1的质量比引入旋转混合器。将0.25质量％的硬脂酸镁引入到混合器中，并且将混合物混合10分钟。然后将混合物在流化床中附聚，并装入5至15克棒状封装物，并将封装物密封。

Claims (30)

1.人乳寡糖(HMO)在预防性减少人的以下项中的用途：

——复发性偏头痛的症状严重程度，

——偏头痛的复发，和/或

——偏头痛的复发频率。

2.合成组合物在预防性减少人的以下项中的用途：

——复发性偏头痛的症状严重程度，

——偏头痛的复发，和/或

——偏头痛的复发频率，

所述组合物包含至少一种人乳寡糖(HMO)。

3.根据权利要求2所述的合成组合物的用途，所述合成组合物包含1g至15g，优选2g至10g，更优选3g至7g的HMO。

4.一种包含至少14个单独日剂量的有效量的至少一种人乳寡糖(HMO)的封装物在预防性减少人的以下项中的用途：

——复发性偏头痛的症状严重程度，

——偏头痛的复发，和/或

——偏头痛的复发频率。

5.根据权利要求4所述的封装物的用途，其中每个日剂量含有约1g至约15g，优选约2g至约10g的至少一种HMO。

6.——一种或多种人乳寡糖(HMO)，

——包含一种或多种人乳寡糖(HMO)的合成组合物，或

——包含至少14个单独日剂量的有效量的至少一种或多种人乳寡糖(HMO)的封装物，

在患有复发性或慢性偏头痛的患者的饮食管理中的用途。

7.根据前述权利要求中任一项所述的HMO的用途，合成组合物的用途，封装物的用途或用途，其中所述人患有具有胃肠道症状的疾病或病症。

8.根据权利要求7所述的HMO的用途，合成组合物的用途，封装物的用途或用途，其中所述疾病或病症是自身免疫性疾病、肠易激综合症、过敏和/或食物不耐受。

9.根据前述权利要求中任一项所述的HMO的用途，合成组合物的用途，封装物的用途或用途，其中所述复发性偏头痛是慢性偏头痛。

10.根据前述权利要求中任一项所述的HMO的用途，合成组合物的用途，封装物的用途或用途，其中所述HMO：

-是2’-FL、3-FL、DFL、LNT、LNnT、3’-SL、6’-SL、LNFP-I或其混合物，或

-包含，由或基本上由至少一种中性HMO组成。

11.根据权利要求10所述的HMO的用途，合成组合物的用途，封装物的用途或用途，其中所述中性HMO是岩藻糖基化HMO和非岩藻糖基化HMO的混合物。

12.根据权利要求11所述的HMO的用途，合成组合物的用途，封装物的用途或用途，其中所述混合物包含，由或基本上由2’-FL和DFL中的至少一种，以及LNnT和LNT中的至少一种组成。

13.根据权利要求12所述的HMO的用途，合成组合物的用途，封装物的用途或用途，其中所述混合物包含，由或基本上由2’-FL和LNnT组成，优选地，2’-FL和LNnT的质量比为约4:1至1:1。

14.一种用于预防性减少人的复发性偏头痛的症状严重程度的方法，所述方法包括向所述人施用有效量的至少一种人乳寡糖。

15.一种用于预防性地减少人的偏头痛复发的方法，所述方法包括向所述人施用有效量的至少一种人乳寡糖。

16.根据权利要求14或15所述的方法，其中所述偏头痛是慢性偏头痛。

17.根据权利要求14至16中任一项所述的方法，其中每天向所述人施用1g至15g人乳寡糖，优选每天2g至10g，更优选每天3g至7g。

18.根据权利要求14至17中任一项所述的方法，其中，向所述人施用所述人乳寡糖至少1周，优选至少2周。

19.根据权利要求14至18中任一项所述的方法，其中所述人患有具有胃肠道症状的疾病或病症。

20.根据权利要求19的方法，其中所述疾病或病症是自身免疫疾病、肠易激综合症、过敏和/或食物不耐受。

21.根据权利要求14至20中任一项所述的方法，其中所述人乳寡糖是2’-FL、3-FL、DFL、LNT、LNnT、3’-SL、6’-SL、LNFP-I或其混合物。

22.根据权利要求14至20中任一项所述的方法，其中所述人乳寡糖包含，由或基本上由至少一种中性HMO组成。

23.根据权利要求22所述的方法，其中所述中性HMO是岩藻糖基化HMO和非岩藻糖基化HMO的混合物。

24.根据权利要求23所述的方法，其中，所述混合物包含，由或基本上由2’-FL和DFL中的至少一种，以及LNnT和LNT中的至少一种组成。

25.根据权利要求24所述的方法，其中，所述混合物包含，由或基本上由2’-FL和LNnT组成，优选地，2’-FL和LNnT的质量比为约4:1至1:1。

26.根据权利要求14至25中任一项所述的方法，所述方法包括第一阶段和第二阶段，在所述第一阶段中，向所述人施用较高剂量的人乳寡糖；在所述第二阶段中，向所述人施用较低剂量的人乳寡糖。

27.根据权利要求26的方法，其中所述较高剂量为每天3g至15g，优选为每天3g至10g，所述较低剂量为每天1g至10g，优选为每天2g至7.5g。

28.一种用于预防性减少以下项的方法

——慢性偏头痛患者的平均头痛天数，或

——慢性偏头痛患者的偏头痛症状的严重程度，

所述方法包括向所述患者施用有效量的至少一种人乳寡糖持续至少14天。

29.一种用于慢性偏头痛患者或患有慢性偏头痛的患者的饮食管理方法，所述方法包括向所述患者施用有效量的至少一种人乳寡糖持续至少14天。

30.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述人不是婴儿。