CN111405903A

CN111405903A - 多发性骨髓瘤的新疗法

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Publication number: CN111405903A
Application number: CN201880072543.0A
Authority: CN
Inventors: 圣地亚哥·埃斯特班·马丁; 劳拉·内沃拉; 安立奎·玛利亚·奥乔·圣·米格尔; 帕特里克·库兹明斯基; 梅赛德斯·加拉约亚
Original assignee: Idp Discovery Pharma SL
Current assignee: Idp Discovery Pharma SL
Priority date: 2017-09-08
Filing date: 2018-09-10
Publication date: 2020-07-10
Also published as: EP3678679A1; KR20200052350A; US20200261534A1; CA3091948A1; AU2018328057A1; WO2019048679A1

Abstract

本发明涉及肿瘤学领域。更具体地，其涉及将模拟肽化合物用于治疗多发性骨髓瘤，尤其是顽固性，难治性或复发性多发性骨髓瘤和/或与其他抗肿瘤剂组合。

Description

多发性骨髓瘤的新疗法

发明领域

本发明涉及肿瘤学领域。更具体地，其涉及将模拟肽(peptidomimetic)化合物用于治疗多发性骨髓瘤，尤其是顽固性，难治性或复发性多发性骨髓瘤和/或与其他抗肿瘤剂组合。

发明背景

多发性骨髓瘤是骨髓中累积的浆细胞的恶性肿瘤，其导致骨破坏和骨髓衰竭。像浆细胞一样，骨髓瘤细胞也产生抗体，但其都是一种特定类型的抗体的拷贝。因为这些产生自单个克隆，因此其被称为单克隆蛋白质或M-蛋白质。

骨髓瘤细胞倾向于收集在骨髓中以及在骨的硬的外部。一部分骨髓瘤细胞被称为浆细胞瘤。当仅存在一部分骨髓瘤细胞时，其通常被称为孤立性浆细胞瘤。然而，在大部分情况中，骨髓瘤细胞生长并且遍布骨髓，侵入骨组织，并且散布全身。当这发生时，该疾病被称为多发性骨髓瘤。术语多发性骨髓瘤和骨髓瘤在本文中可互换地使用。

多发性骨髓瘤可以导致多种器官功能紊乱和症状，包括骨痛或骨折，肾衰竭，易于感染，贫血，血钙过多，以及偶然的凝血异常，神经学症状，以及血管高粘证候。多发性骨髓瘤是西方世界中第二常见的被诊断的血液恶性肿瘤，根据国立癌症研究所仅在2016年在美国就有30,000新病例发生(https://seer.cancer.gov/statfacts/html/mulmy.html)。不幸的是，尽管过去30年间付出了大量努力以提高基于细胞毒性化学疗法的治疗对该疾病的活性，但是多发性骨髓瘤目前被认为是不可治愈的疾病并且患者总存活率基本保持不变，中值为3-4年。

近来，随着引入萨力多胺及其免疫调节衍生物如来那度胺(Dimopoulos M等.N.Engl.J.Med.2007,357,2123-2132；Weber DM等.N.Engl.J.Med.2007,357,2133-2142)和蛋白酶体抑制剂如硼替佐米(Richardson PG等.N.Engl.J.Med.2005,352,2487-2498)作为治疗选项，在多发性骨髓瘤的治疗管理方面已有一系列重要进展。虽然这些类型的试剂已被证明在复发的或常规或高剂量基于细胞毒性化学疗法的治疗方案难治的多发性骨髓瘤患者的背景中是有活性的，显著比例的多发性骨髓瘤患者对这些试剂自始具有抗性，而开始的响应者(即使是实现持久的完全缓解的那些)最终可能会复发。因此，急迫地需要开发针对多发性骨髓瘤的新类型的试剂，以进一步改善多发性骨髓瘤患者的结果，并且有希望对这种目前不可治愈的瘤实现高治愈率。

关于多发性骨髓瘤的更多信息可见于医学文献如Devita,Hellman,和Rosenberg的癌症：肿瘤学原则和实践(cancer:principles&practice of oncology),第10版,2014年12月,Wolters Kluwer；关于多发性骨髓瘤的NCCN指南(NCCN guidelines insightsmultiple myeloma),版本3.2016(J Natl Compr Canc Netw 2016；14(4):389–400),以及多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma),版本3.2017(J Natl Compr Canc Netw 2017；15:230-269)。

理想的抗肿瘤药将选择性地杀死癌细胞，相对于其对非癌细胞的毒性具有宽的指标，并且将同样保持其对癌细胞的效力，甚至在延长对所述药物的暴露后也是如此。不幸的是，目前利用已知试剂的治疗都不具有理想的特性。大多数化疗剂具有非常窄的治疗指标，并且此外，轻微地暴露于亚致死浓度的癌细胞可能发展出对此种试剂的耐受性，并且经常发展出对若干其他抗肿瘤剂的交叉耐受性。

抗癌肽和模拟肽(或肽类分子)已经成为作为新的抗癌剂的有希望的分子。模拟肽是含有非肽结构元件(例如，非天然氨基酸)的化合物，被设计成模拟或拮抗天然肽的生物学活性。可以对母肽进行结构修饰以改变其性质，从而获得模拟肽。作为这些修饰的结果，模拟肽不再具有典型的肽特征如酶不稳定的肽键，并且因此原因，模拟肽设计的主要应用之一是增加母肽的稳定性。

c-Myc是在细胞生长和分化中起重要作用的核蛋白质，并且其异常的过表达与致癌作用相关(Meichle A.,Biochim.Biophys Acta,1114:129-146,1992)。更具体地，c-Myc已被描述为与Max异二聚化从而反式激活下游靶效应物的转录因子(Blackwood EM等,CurrOpin Genet Dev.1992,2(2):227-35；Cole MD和Mc Mahon SB,Oncogene.1999 May 13；18(19):2916-24)。

Huang等(Exp Hematol 2006,34(11):1480-9)报道了作为c-Myc/Max二聚化抑制剂的小分子化合物10058-F4，其在体外在急性髓性白血病细胞中显示抗增殖性质。之前，WO2010/034031已对模拟肽化合物进行了描述，公开了被设计成用于与Max结合的Myc模拟肽大环及其在增殖性疾病的治疗中的潜在用途。然而该文献没有显示这些肽实际上抑制c-Myc/Max反式激活活性，更不用说这些模拟肽试剂具有肿瘤抑制性质。

近年来，尽管有可用的新治疗选项，但仍需要寻找在新诊断的多发性骨髓瘤的治疗中并且特别是用于治疗难治性和复发性多发性骨髓瘤的具有减小的副作用和提高的效力的新药物和药物组合。

发明概述

本发明提供用于治疗多发性骨髓瘤的模拟肽化合物。

实施例1显示式I的化合物(例如S09和S014)在包括多发性骨髓瘤细胞系MM.S1在内的多种癌细胞系中的体外抗肿瘤活性。此外，在实施例2中显示式(I)的肽在位置X1和X3与配体的交联对于观察到的细胞毒活性是必要的，当所述配体被连接至肽序列的其他位置时观察到效力损失。

此外，实施例3中显示式I的化合物在数种多发性骨髓瘤细胞系中在uM范围具有细胞毒性作用，该多发性骨髓瘤细胞系包括烷基化剂，皮质类固醇和蒽环霉素耐受性细胞系。大多数患有多发性骨髓瘤的患者经历复发或是难以治疗的。式I的化合物在对多发性骨髓瘤的治疗方案中常用的药物耐受的细胞系中抑制肿瘤生长的能力表明其可用于治疗此类患者，例如作为第二，第三线或进一步的治疗，作为单一试剂或与其他药物组合。

此外，在实施例4中，在体外S09与治疗标准抗骨髓瘤试剂显示非常好的协同作用。特别地，利用S09、地塞米松和选自硼替佐米或环磷酰胺的药物的三元组合治疗呈现如由计算组合指数(CI)所指示的协同作用，所述计算组合指数在测试的各S09浓度下基本上低于1。

此外，在实施例5中，显示在体内在双重和三元组合中S09增强硼替佐米，地塞米松和环磷酰胺的抗增殖作用。

因此，本发明的第一方面涉及式(I)的化合物：

其中X₂是非极性氨基酸，优选地选自由以下各项组成的组：Leu和Phe；并且

其中X₄是氨基酸，优选为Leu；

其中X₅是氨基酸，优选为Ser；

其中X₁和X₃是独立选择的并且具有式(II)：

其中R₁是H或选自由以下各项组成的组的单价基团：(C₁-C₁₀)烷基，(C₂-C₁₀)烯基，(C₂-C₁₀)炔基，(C₁-C₁₀)烷基-O-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-C(＝O)-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-O-C(O)-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-C(O)-NR₂-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-S-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-SR₃-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-S(＝O)₂-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-S(＝O)-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-O-S(＝O)₂-O-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-NR₄-(C₁-C₁₀)烷基；以及

(优选地已知的)包含3至14个碳原子的环系，所述环系包含1至3个环，其中：

每一个所述环是饱和的，部分不饱和的，或芳香性的；

所述环是分开的，部分或完全稠合的，

形成所述(优选地已知的)环系的每一个成员选自由以下各项组成的组：-CH-，-CH₂-，-NH-，-N-，-SH-，-S-，和-O-；并且

所述环系任选地被独立地选自由以下各项组成的组的一个或多个基团取代：卤素，-OH，-NO₂，(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)卤代烷基，和(C₁-C₁₀)烷基-O-；并且

R₂，R₃和R₄是独立地选自由以下各项组成的组的单价基团：氢，(C₁-C₁₀)烷基，(C₂-C₁₀)烯基，和(C₂-C₁₀)炔基；并且

其中L是经由α碳与X₁和X₃结合的二价基团，并且选自由以下各项组成的组：-O-，O-(C₁-C₁₀)烷基-O-，O-(C₁-C₁₀)烯基-O-，C(＝O)，C(＝O)NR₅，C(＝O)O，NR₆，S-S-，S-(C₁-C₁₀)烷基-S，S-(C₁-C₁₀)烯基-S-和(优选地已知的)由3至6个成员的一个环组成的环系，所述环：

是饱和的，部分不饱和的，或芳香性的；

R₅和R₆是独立地选自由以下各项组成的组的基团：-H和(C₁-C₁₀)烷基(C₁-C₁₀)烷基，(C₂-C₁₀)烯基，和(C₂-C₁₀)炔基；

所述化合物用于治疗患有多发性骨髓瘤的对象的方法中。

其还涉及式(I)的化合物在制备用于治疗多发性骨髓瘤的药物中的用途。

此外，本发明提供治疗多发性骨髓瘤的方法，所述方法包括向需要此种治疗的对象施用治疗有效量的式(I)的化合物。

本发明还提供药物组合物，所述药物组合物包含式(I)的化合物和药学上可接受的载体或赋形剂，所述药物组合物用于治疗患有多发性骨髓瘤的对象的方法中。

在任何以上的特别的实施方案中，所述多发性骨髓瘤是顽固性，难治性或复发性多发性骨髓瘤，优选地其中所述多发性骨髓瘤对于在先的治疗(例如化疗，靶向疗法或皮质类固醇)是顽固性，难治性或复发性的。

在另一个特别的实施方案中，任选地与以上或以下提及的实施方案或特征中的一个或多个组合，所述式(I)的化合物与另一种药物组合施用。

本发明还涉及式(I)的化合物用于制备药物的用途，所述药物通过采用式(I)的化合物与另一种药物的组合疗法用于癌症的有效治疗。

其还涉及治疗癌症的方法，所述方法包括向需要此种治疗的患者施用治疗有效量的式(I)的化合物与治疗有效量的另一种药物的组合。

本发明还提供药物组合物，所述药物组合物包含组合用于如本文中所述的治疗多发性骨髓瘤的方法中的式(I)的化合物、另一种药物以及药学上可接受的载体或赋形剂。

本发明还提供用于如本文中所述的治疗多发性骨髓瘤的方法的试剂盒，所述试剂盒包含：包含式(I)的化合物的药物组合物，和包含另一种药物的药物组合物；以及任选地，将两种药物组合用于治疗多发性骨髓瘤的方法的使用说明。

在任何以上的特别的实施方案中，所述另一种药物是抗癌药，优选地选自由以下各项组成的组：烷基化剂、皮质类固醇和蛋白酶体抑制剂，及其组合。

优选地，本发明涉及如本文中所述的化合物、药物组合物或试剂盒的协同组合。

附图简述

图1：S09、地塞米松(DEXA)5nM和硼替佐米(BORT)1nM的二元和三元组合。

该图显示MM1S细胞系用作为单一试剂的、分别与DEXA 5nM和BORT 1nM二元组合的、以及三元组合的S09(以0uM，0.3uM，0.6uM，1.25uM和2.5uM)孵育24h后获得的细胞存活百分比。

图2：S09，地塞米松(DEXA)5nM和硼替佐米(BORT)2nM的二元和三元组合。

该图显示MM1S细胞系用作为单一试剂的、分别与DEXA 5nM和BORT 2nM二元组合的、以及三元组合的S09(以0uM，0.3uM，0.6uM，1.25uM和2.5uM)孵育24h后获得的细胞存活百分比。

图3：S09、地塞米松(DEXA)5nM和环磷酰胺(CYCLO)2.5uM的二元和三元组合。

该图显示MM1S细胞系用作为单一试剂的、分别与DEXA 5nM和CYCLO 2.5uM二元组合的、以及三元组合的S09(以0uM，0.3uM，0.6uM，1.25uM和2.5uM)孵育24h后获得的细胞存活百分比。

图4：S09、地塞米松(DEXA)5nM和环磷酰胺(CYCLO)5uM的二元和三元组合。

该图显示MM1S细胞系用作为单一试剂的、分别与DEXA 5nM和CYCLO 5uM二元组合的、以及三元组合的S09(以0uM，0.3uM，0.6uM，1.25uM和2.5uM)孵育24h后获得的细胞存活百分比。

发明详述

定义

术语“氨基酸”是指含有氨基和羧基两者的分子。除非另外明确说明，氨基酸可以具有L或D构型。可以根据侧链基团来将氨基酸分类。由不同侧链确定基本上有四种不同类型的氨基酸：(1)非极性，(2)极性和中性(无电荷极性)，(3)酸性和极性(下文中也被称为“酸”或“酸性”氨基酸)，(4)碱性和极性(下文中也被称为“碱性”氨基酸)。

非极性氨基酸具有的侧链是烃烷基(烷支链)或芳香性的(苯环)或杂芳香性的(例如吲哚环)。常见的非极性氨基酸的说明性非限制性实例有Ala，Val，Leu，Ile，Pro，Trp，Gly，Phe和Met。

极性中性氨基酸在侧链中具有极性的但在中性pH中不带电荷的基因(如羟基，酰胺或硫醇基团)。极性中性氨基酸的说明性非限制性实例有Ser，Thr，Cys，Tyr，Asn和Gln。

在某些实施方案中，氨基酸是α氨基酸。合适的氨基酸包括但不限于中性α-氨基酸如20种常见的天然存在的α-氨基酸的L-异构体：丙氨酸，精氨酸，天冬酰胺，天冬氨酸，半胱氨酸，谷氨酰胺，谷氨酸，甘氨酸，组氨酸，异亮氨酸，亮氨酸，赖氨酸，甲硫氨酸，苯丙氨酸，脯氨酸，丝氨酸，苏氨酸，色氨酸，酪氨酸和缬氨酸；天然β-氨基酸(例如，β-丙氨酸)；以及非天然氨基酸。

表1

表1(续)

Table 2：非天然氨基酸

用于构建本发明的肽的氨基酸可以通过有机合成来制备，或通过其他路径诸如例如天然来源的分解或分离而获得。

存在许多已知的非天然氨基酸，其中任意可包含在本发明的肽中(其中一些列在以上表2中)。非天然氨基酸的一些实例有4-羟基脯氨酸，锁链素，γ-氨基丁酸，β-氰基丙氨酸，正缬氨酸，4-(E)-丁烯基-4(R)-甲基-N-甲基-L-苏氨酸，N-甲基-L-亮氨酸，1-氨基-环丙烷甲酸，1-氨基-2-苯基-环丙烷甲酸，1-氨基-环丁烷甲酸，4-氨基-环戊烯甲酸，3-氨基-环己烷甲酸，4-哌啶基乙酸，4-氨基-1-甲基吡咯-2-甲酸，2,4-二氨基丁酸，2,3-二氨基丙酸，2,4-二氨基丁酸，2-氨基己二酸，4-(氨基甲基)苯甲酸，4-氨基苯甲酸，正-，间-和对-取代的苯丙氨酸(例如，被—C(═O)C₆H₅；—CF₃；—CN；-卤素；—NO₂；—CH₃取代)，二取代的苯丙氨酸，取代的酪氨酸(例如，进一步被—C(═O)C₆H₅；—CF₃；—CN；-卤素；—NO₂；—CH₃取代)以及抑胃酶氨酸。此外，适合用于本发明的氨基酸可以衍生化以包含经化学修饰的氨基酸残基，如羟基化的，磷酸化的，磺化的，酰化的，脂化的和糖基化的氨基酸残基。

术语"治疗"，如本文中使用的，除非另外指示，包括疾病或病症的改善、治愈、和/或保持治愈(即，预防或延迟复发)。病症开始后的治疗目标在于减少、减轻、改善或完全地消除病症，和/或其相关症状，以防止其恶化，减缓进展速率，或防止病症在其最初被消除后再次发生(即，预防复发)。术语"治疗(treatment)"，如本文中使用的，除非另外指示，是指“治疗(treating)”的动作。

如本文中使用的术语“治疗有效量”是指在如本文中限定的疾病、病症或病理学状态的预防性或治疗性治疗中在向对象(如人类患者)施用单剂量或多剂量后有效的量。例如，所述预防性或治疗性效果与硼替佐米、卡非佐米、来那度胺、萨力多胺、环磷酰胺或常用于治疗多发性骨髓瘤的任何药物的预防性或治疗性效果是相当的。

如本说明书中通篇使用的术语“组合”或“组合疗法”意在包括在相同的或单独的药物制剂中并且在相同的时间或在不同的时间将述及的治疗剂施用于患有癌症的对象。如果在不同的时间施用治疗剂，其施用在时间上应当足够靠近以使组合的效果(例如增效或协同响应)发生。组合方案中采用的特别的治疗的组合将考虑所需的治疗剂和/或程序的相容性和/或要实现的所需的治疗效果。将被理解的是，采用的治疗可以实现针对相同病症的所需的效果(例如，抗癌效果)，和/或其可以实现不同效果(例如，控制任何不良效果)。

如本文中使用的术语“耐受”是指对癌症治疗缺少响应。当由于肿瘤在治疗前具有的特性(即，癌细胞具有的一些固有特征阻止治疗的有效性)而发生耐受时，耐受可以是“原发性的(自始的)”，或者是由于肿瘤细胞响应于治疗而获得的特性而在治疗期间使肿瘤变得耐受时发生的“继发性的(获得性的)”。

如本文中使用的术语“对象”是指哺乳动物对象。优选地，其选自人，伴侣动物，非家养牲畜或动物园动物。例如，对象可以选自人，狗，猫，牛，猪，绵羊，马，熊等。在优选的实施方案中，所述哺乳动物对象是人对象。

如本文中使用的术语“药学上可接受的盐”是指在良好医学判断的范围内适合用于与人及低等动物的组织接触而不具有过度的毒性、刺激、变态反应等并且与合理的效益/风险比相称的那些盐。药学上可接受的盐是本领域中熟知的。药学上可接受的无毒性的酸加成盐的实例有利用无机酸如盐酸，氢溴酸，磷酸，硫酸和高氯酸或利用有机酸如乙酸，三氟乙酸，草酸，马来酸，酒石酸，柠檬酸，琥珀酸或丙二酸或通过使用本领域中使用的其他方法如离子交换形成的氨基基团的盐。其他药学上可接受的盐包括己二酸盐，藻酸盐，抗坏血酸盐，天冬氨酸盐，苯磺酸盐，苯甲酸盐，硫酸氢盐，硼酸盐，丁酸盐，樟脑酸盐，樟脑磺酸盐，柠檬酸盐，环戊烷丙酸盐，二葡糖酸盐，十二烷基硫酸盐，乙磺酸盐，甲酸盐，富马酸盐，葡庚糖酸盐，甘油磷酸盐，葡糖酸盐，半硫酸盐，庚酸盐，己酸盐，氢碘化物，2-羟基-乙磺酸盐，乳糖醛酸盐，乳酸盐，月桂酸盐，月桂基硫酸盐，苹果酸盐，马来酸盐，丙二酸盐，甲磺酸盐，2-萘磺酸盐，烟酸盐，硝酸盐，油酸盐，草酸盐，棕榈酸盐，双羟萘酸盐，果胶酯酸盐(pectinate)，过硫酸盐，3-苯丙酸盐，磷酸盐，苦味酸盐，三甲基乙酸盐，丙酸盐，硬脂酸盐，琥珀酸盐，硫酸盐，酒石酸盐，硫氰酸盐，对甲苯磺酸盐，十一酸盐，戊酸盐等。来源于合适的碱的盐包括碱金属，碱土金属和铵。代表性碱或碱土金属盐包括钠，锂，钾，钙，镁等。在适当的时候，另外的药学上可接受的盐包括使用抗衡离子如卤化物，氢氧化物，羧酸盐，硫酸盐，磷酸盐，硝酸盐，低级烷基磺酸盐和芳基磺酸盐形成的无毒性铵，季铵和胺阳离子。

如本文中使用的术语“前药”涵盖在体内转化为式(I)的化合物的那些衍生物。前药可以在生物学条件下水解，氧化或以其他方式反应从而提供式(I)的化合物。前药的实例包括但不限于包括可生物水解部分如可生物水解的酰胺，可生物水解的酯，可生物水解的氨基甲酸酯，可生物水解的碳酸酯，可生物水解的酰脲和可生物水解的磷酸酯类似物的衍生物。前药通常可以使用已知的方法如Burger"Medicinal Chemistry and DrugDiscovery(药物化学和药物发现)第6版(Donald J.Abraham编辑,2001,Wiley)和"Designand Applications of Prodrugs(前药的设计和应用)"(H.Bundgaard编辑,1985,HarwoodAcademic Publishers)描述的那些方法来制备。

发明详述

本发明的第一方面涉及式(I)的化合物：

其中X₄是氨基酸，优选为Leu；

其中X₅是氨基酸，优选为Ser；

其中X₁和X₃是独立选择的并且具有式(II):

其中R₁是H或选自由以下各项组成的组的单价基团：(C₁-C₁₀)烷基，(C₂-C₁₀)烯基，(C₂-C₁₀)炔基，(C₁-C₁₀)烷基-O-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-C(＝O)-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-O-C(O)-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-C(O)-NR₂-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-S-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-SR₃-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-S(＝O)₂-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-S(＝O)-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-O-S(＝O)₂-O-(C₁-C₁₀)烷基，(C₁-C₁₀)烷基-NR₄-(C₁-C₁₀)烷基；和

每一个所述环是饱和的，部分不饱和的，或芳香性的；

所述环是分开的，部分或完全稠合的，

形成(优选地已知的)环系的每一个成员选自由以下各项组成的组：-CH-，-CH₂-，-NH-，-N-，-SH-，-S-，和-O-；并且

其中L是经由α碳与X₁和X₃相连的二价基团，并且选自由以下各项组成的组：-O-，O-(C₁-C₁₀)烷基-O-，O-(C₁-C₁₀)烯基-O-，C(＝O)，C(＝O)NR₅，C(＝O)O，NR₆，S-S-，S-(C₁-C₁₀)烷基-S，S-(C₁-C₁₀)烯基-S-和(优选地已知的)由3至6个成员的一个环组成的环系，所述环：

是饱和的，部分不饱和的，或芳香性的；

所述式(I)的化合物用于治疗患有多发性骨髓瘤的对象的方法中。

术语“式(I)的化合物”在此处意在涵盖其任何药学上可接受的盐或溶剂化物(例如水合物)。其还可以涵盖能够直接地或间接地提供式(I)的化合物的任何前药或任何其他化合物，以及式(I)的化合物的活性代谢物。优选地，其涉及式(I)的化合物或其任何药学上可接受的盐或溶剂化物(例如水合物)。

c-Myc蛋白质是在细胞生长和分化的调节中起重要作用的转录因子，其异常的过表达与致癌作用相关(Cole MD.Ann.Rev.Gen 1986,20,361-385；Henriksson M和LuscherB.Adv.Cancer Res.1996,68,109-182；Marcu KB,Bossone SA和PatelAJ.Ann.Rev.Biochem.1992,61,809-860)。c-Myc在通过螺旋-环-螺旋拉链结构域相互作用而与其配偶体Max二聚化时显示序列特异性DNA结合(Blackwood.E.M.和Eisenman.R.N.,Science 1991,251,1211-1217；Blackwood,E.M.,Lilscher.B.和Eisenman.R.N.,GenesDev.1992,6；71-80；Blackwell.T.K.等,Science 1990,250,1149-1151；Blackwell.T.K.等,Mol.Cell.Biol.1993,13:5216-5224)。无意受限于理论，据信式(I)的化合物通过阻止在c-Myc和Max之间形成复合物而发挥其抗增殖效果。

优选地，式(II)的R₁选自由以下各项组成的组的单价基团：H，(C₁-C₁₀)烷基，(C₂-C₁₀)烯基，和(C₂-C₁₀)炔基，更优选地R₁是H或C1-C10烷基，更优选地R₁是H或C1-C4烷基，并且甚至更优选地R₁是H或–CH3。

在优选的实施方案中，X₁和X₃是Ala或Gly，X₂选自Leu和Phe，X₄是Leu和X₅是Ser。因此，在此种优选的实施方案中，式(I)的化合物中的肽序列选自由以下各项组成的组：

SEQ ID NO:1(Ala-Pro-Lys-Ala-Val-Ile-Leu-Lys-Lys-Ala-Ala-Ala-Tyr-Ile-Leu-Ser)

SEQ ID NO:2(Ala-Pro-Lys-Ala-Val-Ile-Phe-Lys-Lys-Ala-Ala-Ala-Tyr-Ile-Leu-Ser)

SEQ ID NO:12(Ala-Pro-Lys-Gly-Val-Ile-Leu-Lys-Lys-Ala-Gly-Ala-Tyr-Ile-Leu-Ser)

优选地，所述肽序列是SEQ ID NO:1。

多种配体(L)可以用于式(I)的化合物以用于位置X₁和X₃之间的肽交联。交联系统(也被称为“订书机”)是本领域中已知的并且通常被用于保持肽在溶液中的α-螺旋结构和/或增加其在体内的稳定性。此种配体已被描述于例如Schafmeister C E等,Journal ofthe American Chemical Society 2000,122(24),5891-5892；Walensky等,Journal ofMedicinal Chemistry 2014,57(15),6275-6288；Cromm等,ACS Chemical Biology 2015,10(6),1362-1375；和De Araujo等,Angew Chem Int Ed Engl.2014,53(27),6965-9。

在优选的实施方案中，L是具有直链或支链C3-C30烃的二价基团，其可以被独立地选自以下的一个或多个基团一次或多次中断：-O-，-S-，-SO-，NH-，-CO-，-NMe-，-NHCO-，-CONH-，亚芳基，杂亚芳基，直链或支链C1-C6-亚烷基和环亚烷基和具有多达4个选自由N、O和S组成的组的杂原子的5-10元杂环基；任选地被一个或多个选自由以下各项组成的组的取代基取代：卤素，-OH，-COOH，-NH₂，-NO₂，C1-C6烷基和C1-C6烯基。

在特别的实施方案中，L具有式(IIIa)：

-(CH₂)_y-P-(CH₂)_a-(Q)_b-(CH₂)_c-(V)_d-(CH₂)_z-

(IIIa)

其中

P，Q和V各自独立地选自包含以下各项的组：O，S，NH，CONH，C(O)O，C1-C6亚烷基，亚芳基如亚苯基和杂亚芳基如亚三唑，其任选地被卤素取代；

y和z是各自独立地选自1至10的整数值；

a和c是各自独立地选自0至10的整数值；并且

b和d是各自独立地选自0至3的整数值.

在优选的实施方案中，该配体选自由以下各项组成的组：

-(CH₂)_y-CH＝CH-(CH₂)_z-(IIIb)，优选地其中y和z是相同的或不同的并且是选自1至10的整数值，包括1，2，3，4，5，6，7，8，9和10。优选地y和z是独立地选自3至6的整数值，更优选是独立地选自3和6的整数值；

优选地其中P和V各自独立地选自由以下各项组成的组：O和S；同样优选地，y和z是1；优选地a选自1或6至10；优选地b是0或1；并且优选地c是0或1；

式(IIIc)的一些特别的实施方案有：

-(CH₂)_y-P-(CH₂)_a-V-(CH₂)_z-(IIId1)，优选地其中P和V各自独立地选自由以下各项组成的组：O和S；同样优选地，y和z是1，并且a选自6至10，优选为8。在一些优选的实施方案中，式(IIId1)的配体选自(IIId1.1)和(IIId1.2)：

-(CH₂)_n-O-(CH₂)_n-O-(CH₂)_n- (IIId1.1)；

-(CH₂)_n-S-(CH₂)_n-S-(CH₂)_n- (IIId1.2)；

优选地其中P和V各自独立地选自由以下各项组成的组：O和S；同样优选地，y，a，c和z是1。在一些优选的实施方案中，式(IIId2)的配体选自(IIId2.1)和(IIId2.2):

其中在式(IIId1.1)，(IIId1.2)，(IIId2.1)，(IIId2.2)，(IIIe)和(IIIf)中，每个n是独立地选自1至10的整数值，包括1，2，3，4，5，6，7，8，9和10。在一些优选的实施方案中，每个n是独立地选自3至6的整数值。优选地，对于式(IIIe)或(IIIf)的配体，每个n是独立地选自3至6的整数值。在其他优选的实施方案中，每个n独立地选自1或2。优选地，对于式(IIId)的配体，每个n是1。

在特别的实施方案中，任选地与以上或以下提及的一个或多个实施方案或特征组合，用于根据本发明的用途的式(I)的化合物，是这样的一个，其中X₂选自由以下各项组成的组：Leu和Phe；并且其中L具有式(IIIb)：

-(CH₂)_y-CH＝CH-(CH₂)_z-

(IIIb)

其中y和z是相同的或不同的并且是选自1至10的整数值，包括1，2，3，4，5，6，7，8，9和10。优选地y和z是独立地选自3至6的整数值，更优选是独立地选自3和6的整数值；同样优选地X₁和X₃具有式(II)并且R₁选自–CH₃或H。

在另一个特别的实施方案中，任选地与以上或以下提及的一个或多个实施方案或特征组合，用于根据本发明的用途的式(I)的化合物，是这样的一个，其中X₂选自由以下各项组成的组：Leu和Phe；并且其中L具有式(IIIc):

优选地其中P和V各自独立地选自由以下各项组成的组：O和S；同样优选地，y和z是1；优选地a选自1或6至10；优选地b是0或1；优选地c是0或1；同样优选地X₁和X₃具有式(II)并且R₁选自–CH₃或H。

在更特别的实施方案中，任选地与以上或以下提及的一个或多个实施方案或特征组合，用于根据本发明的用途的式(I)的化合物，是这样的一个，其中X₂选自由以下各项组成的组：Leu和Phe；并且其中L具有式(IIId1)：

-(CH₂)_y-P-(CH₂)_a-V-(CH₂)_z-

(IIId1)

优选地其中P和V各自独立地选自由以下各项组成的组：O和S；同样优选地，y和z是1并且a选自6至10，优选为8；同样优选地X₁和X₃具有式(II)并且R₁选自–CH₃或H。

在仍更特别的实施方案中，任选地与以上或以下提及的一个或多个实施方案或特征组合，用于根据本发明的用途的式(I)的化合物，是这样的一个，其中X₂选自由以下各项组成的组：Leu和Phe；并且其中L具有式(IIId2)：

优选地其中P和V各自独立地选自由以下各项组成的组：O和S；同样优选地，y，a，c和z是1；同样优选地X₁和X₃具有式(II)并且R₁选自–CH₃或H。

在优选的实施方案中，用于根据本发明的用途的式(I)的化合物自由以下各项组成的组：具有以下显示的各式的S09、S14、IDP-P1708160和IDP-P1708161，及其组合：

S09(SEQ ID NO:3)：

S14(SEQ ID NO:4)：

IDP-P1708160(SEQ ID NO:13)：

和IDP-P1708161(SEQ ID NO:14):

在特别的实施方案中，式(I)的化合物是S09。

用于根据本发明的用途的式(I)的化合物可以使用Fmoc固相肽化学法来制备。该方法包括通过缩合将一个氨基酸的羧基或C-端与另一个的氨基或N-端偶联，该偶联反应重复需要的次数直至获得所需的肽。

所述肽的制备方法可以根据L桥的性质而有不同，一些说明性的非限制性实例如下：

(1.a)利用式(IV)的化合物和式(V)的化合物(其对应于被称为X1和X3的氨基酸)通过缩合将所述肽的相应的氨基酸偶联。化合物(IV)和(V)将是进行随后的环化步骤以产生“L”桥的那些：

其中R₁是如以上限定的，Z₁和Z₂是相同的或不同的并且表示(C₂-C₁₀)烯基；和

(1.b)在溶液中利用Grubbs(I或II代)催化剂进行的包括闭环的环化步骤(参见Kim Young-Woo等,“Synthesis of all-hydrocarbon stapled a-helical peptides byring-closing olefin metathesis”,Nature Protocols,2011,6(6),761-771页；ScottJ.M.等,“Application of Ring-Closing Metathesis to the Synthesis of RigidifiedAmino Acids and Peptides”,J.Am.Chem.Soc.,1996,v.118(40),9606–9614页)；或者，备选地，

(2a)通过缩合将需要的氨基酸偶联，包括式(VI)的化合物和式(VII)的化合物，其对应于被称为X1和X3的氨基酸。化合物(VI)和(VII)将是进行随后的环化步骤以产生“L”二价基团”的那些：

其中R₁是如以上限定的，Z₃和Z₄是相同的或不同的，选自由以下各项组成的组：卤素–SH，-NHR₇，-OH，(C₂-C₁₀)烷基-SH，(C₁-C₁₀)烷基-OH，(C₁-C₁₀)烷基-NHR₈，C(＝O)OH，(C₁-C₁₀)C(＝O)OH，OR₉，C(＝O)-卤素，C(＝O)-OR₁₀，优选地Z₃是(C₁-C₁₀)C(＝O)OH并且Z₄是(C₁-C₁₀)烷基-NHR₈或Z₃是(C₁-C₁₀)烷基-NHR₈并且Z₄是(C₁-C₁₀)C(＝O)OH；

其中R₇ R₈ R₉和R₁₀独立地选自由以下各项组成的组的单价基团：氢，(C₁-C₁₀)烷基，(C₂-C₁₀)烯基，和(C₂-C₁₀)炔基；(优选地已知的)包含3至14个碳原子的环系，所述环系包含1至3个环，其中：

每一个所述环是饱和的，部分不饱和的，或芳香性的；

所述环是分开的，部分或完全稠合的，

所述环系任选地被独立地选自由以下各项组成的组的一个或多个基团取代：卤素，-OH，-NH₂，-SH，C(＝O)-卤素(C₁-C₁₀)卤代烷基，和(C₁-C₁₀)烷基-O-；和

(2b)包括将Z₃和Z₄基团偶联的环化步骤；或者，备选地，

(3a)利用式(VIII)的化合物和式(IX)的化合物(其对应于被称为X1和X3的氨基酸)通过缩合将所述肽的相应的氨基酸偶联。化合物(VIII)和(IX)将是进行随后的环化步骤以产生“L”二价基团”的那些：

其中R₁是如以上限定的，Z₅和Z₆中的一个是(C₂-C₁₀)炔基并且另一个是(C₂-C₁₀)烷基-N₃；和

(3.b)包括通过已知方法如Cu(I)介导的Huisgen 1,3-二极环加成反应(也被称为“链接(click)”反应)将Z₅和Z₆基团缩合的环化步骤以产生1,4-取代的1,2,3-三唑桥(参见Kolb H.C.等,“The growing impact of click chemistry on drug discovery”,2003,Drug Discov Today,8(24):1128–1137)；或者，备选地，

(4a)通过缩合将需要的氨基酸偶联，包括式(X)的化合物和式(XI)的化合物，其对应于被称为X1和X3的氨基酸。化合物(X)和(XI)将是进行随后的环化步骤以产生“L”二价基团”的那些：

其中R₁是如上所述的(优选为H)，并且Z₇是–(CH₂)_y-P并且Z₈是–(CH₂)_z-V，如以上针对式(IIIc)所述的(优选地Z₇和Z₈是-CH₂-S)；和

(4b)环化步骤，所述环化步骤包括通过如Doron C.Greenbaum等“Development ofalpha-Helical Calpain Probes by Mimicking a Natural Protein-ProteinInteraction”,JACS 2012)中所述的已知方法利用Br-(CH₂)_a–(联苯)_b-(CH₂)_c(其中a，b和c是如以上针对式(IIIc)所述的)如Br-(C₂-C₁₀)-Br或Br-CH₂-联苯-CH₂-Br将Z₇和Z₈基团偶联。

在优选的实施方案中，用于根据本发明的用途的式(I)的化合物使用Fmoc固相肽化学法遵从实施例中描述的合成方法来制备。

本发明还涉及式(I)的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗多发性骨髓瘤。

典型地，治疗性治疗被施用于已被诊断患有活跃多发性骨髓瘤的那些患者。数十年来，活跃多发性骨髓瘤的诊断需要终末器官损伤的出现，其被称为CRAB标准，包括增加的钙水平，肾功能紊乱，贫血和破坏性骨损伤。国际骨髓瘤工作组(International MyelomaWorking Group，IMWG)最近综述了用于诊断多发性骨髓瘤的标准(http://imwg.myeloma.org/international-myeloma-working-group-imwg-criteria-for-the-diagnosis-of-multiple-myeloma；NCCN Guidelines Insights,Multiple Myeloma_,version 3.2016,J Natl Compr Canc Netw 2016；14(4):389–400)。更新的标准允许治疗这样的患者，所述患者处于进展为有症状的疾病的高风险中以致显然其将受益于治疗并且如果在严重器官损伤发生前对其治疗也可能活更久。

在修订的IMWG中，这些标志物中至少一种的出现被认为足以诊断活跃多发性骨髓瘤，而不管是否存在症状或CRAB特征。在两个以上的独立研究中已经证明这些标志物中的每一种与约80％或更高的在两年内发展出骨髓瘤相关的器官损伤的风险相关。因此，在优选的实施方案中，所述对象已被诊断患有活跃多发性骨髓瘤。优选地，当符合以下标准时，患者被诊断为患有活跃多发性骨髓瘤：

克隆的骨髓浆细胞≥10％或活检证明的骨或髓外浆细胞瘤；和

以下骨髓瘤定义事件中的任意一个或多个：

·高钙血症：血清钙>0.25mmol/L(>1mg/dL)高于正常的上限或>2.75mmol/L(>11mg/dL)

·肾机能不全：肌酐清除率<40mL/分钟或血清肌酐>177μmol/L(>2mg/dL)

·贫血：血红蛋白>20g/L，低于正常的下限，或血红蛋白值<100g/L

·骨损伤：在骨放射线照相，CT或PET/CT上的一处或多处溶骨损伤。如果骨髓具有<10％克隆的浆细胞，需要超过一处骨损伤以区别于具有最小髓牵连的独立性浆细胞瘤

·在骨髓检查中60％以上的克隆浆细胞

·100以上的血清涉及/非涉及的游离轻链比，前提是涉及的轻链的绝对值至少为100mg/L(患者的涉及的游离轻链，κ或λ，是高于正常参考范围的；非涉及的游离轻链典型地是在正常范围内或低于正常范围的)

·在MRI上的超过一个局部损伤，其尺寸至少为5mm以上。

取决于疾病的发展阶段，本发明的治疗方法的抗癌作用包括但不限于肿瘤生长抑制，肿瘤生长延迟，肿瘤退化，肿瘤缩小，肿瘤尺寸和/或肿瘤标志物减少，停止治疗后肿瘤重新生长所需时间增加，以及疾病进展减慢。在特别的实施方案中，本发明的治疗方法适用于人患者，尤其是对之前的治疗(例如化疗，靶向疗法或皮质类固醇)耐受，复发或难治的那些。一线治疗也是被预期的。

在特别的实施方案中，任选地与以上或以下描述的一个或多个实施方案或特征组合，所述多发性骨髓瘤是难治性或复发性多发性骨髓瘤，换言之，骨髓瘤细胞被发现对治疗耐受或变得耐受。对治疗缺少响应可以在临床上被确定为进行性疾病或临床复发。

通常，当以下一项或多项发生时，发现多发性骨髓瘤中的进行性疾病：血液或尿液中的M-蛋白质的量增加至少25％，骨髓中浆细胞的数量增加25％，骨损伤的尺寸或数量增加，或者无法由其他病症解释的钙水平的增加。通常，当以下一项或多项发生时，发现临床复发：癌症生长的直接迹象，器官损伤的迹象，浆细胞瘤或骨损伤的数量或尺寸的增加(大至少50％)，提高的钙水平，以及血液中肌酐水平的提高，或者红细胞数目的减少(针对

Multiple Myeloma的NCCN指南,版本1.2016)。

在优选的实施方案中，所述多发性骨髓瘤耐受选自由以下各项组成的组的药物：烷基化剂(优选地，氮芥)，皮质类固醇和蒽环霉素。

烷基化剂是与生物分子中的富电子原子反应从而形成共价键的化合物。传统上，这些试剂被分成两类：与生物分子直接反应的那些以及形成反应性中间体的那些，所述反应性中间体之后与生物分子反应。此化疗剂组包括但不限于氮芥(例如，环磷酰胺，盐酸氮芥，尿嘧啶氮芥，美法仑，苯丁酸氮芥，异环磷酰胺和苯达莫司汀)，亚硝基脲(例如，armustine，罗氮芥和链脲菌素)和烷基磺酸盐(例如，白消安)。

皮质类固醇在多发性骨髓瘤的治疗中起重要作用并且具有抗炎和抗骨髓瘤效果两者。此治疗剂组的非限制性实例是地塞米松，泼尼松龙和甲基泼尼松龙。

蒽环霉素，也被称为蒽环霉素抗生素，包括道诺霉素，多柔比星及其类似物，如表柔比星，伊达比星，米托蒽醌，匹克生琼和戊柔比星。

在优选的实施方案中，所述多发性骨髓瘤耐受选自由以下各项组成的组的药物：美法仑，地塞米松和多柔比星。这可能例如在所述药物中的一种在在先的治疗中已被单独地或与其他药物组合地用于所述对象时发生。

药物组合物

本发明还提供包含式(I)的化合物和药学上可接受的载体或赋形剂的药物组合物，其用于治疗患有多发性骨髓瘤的对象的方法。

表述“药学上可接受的赋形剂或载体”是指药学上可接受的材料，组合物或载体。从与药物组合物的其他成分相容的意义上说，各组分必须是药学上可接受的。其还必须适用于与人和动物的组织或器官接触而没有过度的毒性，刺激，变态反应，免疫原性或其他问题或并发症且与合理的效益/风险比相称。类似地，术语“兽医学可接受的”表示适合用于与非人动物接触。合适的药学上可接受的赋形剂的实例有溶剂，分散介质，稀释剂，或其他液体载体，分散或悬浮助剂，表面活性剂，等渗剂，增稠或乳化剂，防腐剂，固体粘合剂，乳化剂等。除非在任何常规赋形剂介质与一种物质或其衍生物不相容(如通过产生任何不良的生物学作用或另外地以有害的方式与药物组合物的任何其他组分相互作用)的情况下，否则预期其用途在本发明的范围内。

本文中所述的药物组合物的制剂可以通过任何已知的或之后在药理学领域开发出的方法来制备。通常，此种制备方法包括以下步骤：将活性成分与赋形剂和/或一种或多种其他辅助成分相结合，然后，如果需要和/或可取，将产物成型和/或包装为所需的单剂量或多剂量单元。

用于本发明的治疗方法的药物组合物可以批量地，作为一个单个单位剂量，和/或作为多个单个单位剂量制备，包装，和/或售卖。如本文中使用的，“单位剂量”是包含预定量的活性成分的不连续量的药物组合物。活性成分的量通常等于将被施用于对象的活性成分的剂量和/或此种剂量的方便的分数，如，例如，此种剂量的二分之一或三分之一。

取决于治疗的对象的身份，身材和/或状态并且还取决于组合物的施用途径，本发明的药物组合物中活性成分，药学上可接受的赋形剂，和/或任何额外成分的相对量将有所不同。

药物组合物的制备中使用的药学上或兽医学可接受的赋形剂包括但不限于惰性稀释剂，分散和/或制粒剂，表面活性剂和/或乳化剂，崩解剂，粘合剂，防腐剂，缓冲剂，润滑剂，和/或油剂。此种赋形剂可以任选地包含在本发明的制剂中。根据制剂者的判断，赋形剂如可可油和栓剂蜡，着色剂，涂覆剂，增甜剂，调味剂和增香剂可以存在于所述组合物中。

示例的稀释剂包括但不限于碳酸钙，碳酸钠，磷酸钙，磷酸二钙，硫酸钙，磷酸氢钙，磷酸钠，乳糖，蔗糖，纤维素，微晶纤维素，高岭土，甘露醇，山梨醇，肌醇，氯化钠，干淀粉，玉米淀粉，糖粉，及其组合。

示例的制粒和/或分散剂包括但不限于马铃薯淀粉，玉米淀粉，木薯淀粉，羟基乙酸淀粉钠，黏土，藻酸，瓜尔豆胶，柑橘渣，琼脂，膨润土，纤维素和木制品，天然海绵，阳离子交换树脂，碳酸钙，硅酸盐，碳酸钠，交联聚乙烯吡咯烷酮)(交聚维酮)，羧甲基淀粉钠(羟基乙酸淀粉钠)，羧甲基纤维素，交联羧甲基纤维素钠(交联羧甲纤维素)，甲基纤维素，预胶凝淀粉(淀粉1500)，微晶淀粉，水不溶性淀粉，羧甲基纤维素钙，硅酸铝镁(Veegum)，十二烷基硫酸钠，季铵化合物，及其组合。

示例的表面活性剂和/或乳化剂包括但不限于天然乳化剂(例如阿拉伯树胶，琼脂，藻酸，藻酸钠，黄芪胶，chondrux，胆固醇，黄原胶，果胶，明胶，蛋黄，酪蛋白，羊毛脂，胆固醇，蜡和卵磷脂)，胶体粘土(例如膨润土[硅酸铝]和Veegum[硅酸铝镁])，长链氨基酸衍生物，高分子量醇(例如硬脂醇，鲸蜡醇，油醇，三乙酸甘油酯单硬脂酸酯，乙二醇二硬脂酸酯，单硬脂酸甘油酯，以及丙二醇单硬脂酸酯，聚乙烯醇)，卡波姆(carbomer)(例如羧基聚甲烯，聚丙烯酸，丙烯酸聚合物和羧基乙烯基聚合物)，角叉菜胶，纤维素衍生物(例如羧甲基纤维素钠，粉状纤维素，羟甲基纤维素，羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，甲基纤维素)，脱水山梨醇脂肪酸酯{例如聚氧乙烯脱水山梨醇单月桂酸酯[Tween 20]，聚氧乙烯脱水山梨醇[Tween 60]，聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯[Tween 80]，脱水山梨醇单棕榈酸酯[Span40]，脱水山梨醇单硬脂酸酯[Span 60]，脱水山梨醇三硬脂酸酯[Span 65]，单油酸甘油酯，脱水山梨醇单油酸酯[Span 80])，聚氧乙烯酯(例如聚氧乙烯单硬脂酸酯[Myrj 45]，聚氧乙烯氢化蓖麻油，聚乙氧基化蓖麻油，聚氧基亚甲基硬脂酸酯和Solutol)，蔗糖脂肪酸酯，聚乙二醇脂肪酸酯(例如Cremophor)，聚氧乙烯醚(例如聚氧乙烯月桂基醚[Brij 30])，聚(乙烯基-吡咯烷酮)，二乙二醇单月桂酸酯，油酸三乙醇胺，油酸钠，油酸钾，油酸乙酯，油酸，月桂酸乙酯，十二烷基硫酸钠，Pluronic F 68，泊洛沙姆(Poloxamer)188，溴化十六烷基三甲铵，氯化十六烷基吡啶，苯扎氯铵，多库酯钠等和/或其组合。

示例性粘合剂包括但不限于淀粉(例如玉米淀粉和淀粉糊)；明胶；糖(例如蔗糖，葡萄糖，右旋糖，糊精，糖蜜，乳糖，乳糖醇，甘露醇)；天然和合成胶(例如阿拉伯胶，藻酸钠，爱尔兰藓的提取物，潘瓦尔胶(panwar gum)，茄替胶(ghatti gum)，伊莎珀尔果壳(isapolhusk)的粘液，羧甲基纤维素，甲基纤维素，乙基纤维素，羟乙基纤维素，羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，微晶纤维素，乙酸纤维素，聚乙烯吡咯烷酮)，硅酸铝镁(Veegum)，和落叶松阿拉伯半乳聚糖)；藻酸盐；聚环氧乙烷；聚乙二醇；无机钙盐；硅酸；聚甲基丙烯酸酯；蜡；水；醇；及其组合。

示例性防腐剂可以包括抗氧化剂，螯合剂，抗微生物防腐剂，抗真菌防腐剂，醇防腐剂，酸性防腐剂和其他防腐剂。示例性抗氧化剂包括但不限于α生育酚，抗坏血酸，抗坏血酸棕榈酸酯，丁基化羟基苯甲醚，丁基化羟基甲苯，单硫代甘油，焦亚硫酸钾，丙酸，没食子酸丙酯，抗坏血酸钠，亚硫酸氢钠，焦亚硫酸钠和亚硫酸钠。示例性螯合剂包括乙二胺四乙酸(EDTA)，柠檬酸单水合物，依地酸二钠，依地酸二钾，依地酸，富马酸，苹果酸，磷酸，依地酸钠，酒石酸和依地酸三钠。示例性抗微生物防腐剂包括但不限于苯扎氯铵，苄索氯铵，苯甲醇，溴硝丙二醇，溴化十六烷基三甲铵，氯化十六烷基吡啶，氯己定，氯丁醇，氯甲酚，氯二甲苯酚，甲苯酚，乙醇，甘油，海克替啶(hexetidine)，咪脲，苯酚，苯氧乙醇，苯基乙醇，硝酸苯汞，丙二醇和硫柳汞。示例性抗真菌防腐剂包括但不限于对羟基苯甲酸丁酯，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸乙酯，对羟基苯甲酸丙酯，苯甲酸，羟基苯甲酸，苯甲酸钾，山梨酸钾，苯甲酸钠，丙酸钠和/或山梨酸。示例性醇防腐剂包括但不限于乙醇，聚乙二醇，苯酚，酚类化合物，双酚，氯丁醇，羟基苯甲酸酯和苯基乙醇。示例性酸性防腐剂包括但不限于维生素A，维生素C，维生素E，β-胡萝卜素，柠檬酸，乙酸，脱氢乙酸，抗坏血酸，山梨酸和植酸。其他防腐剂包括但不限于生育酚，乙酸生育酚，甲磺酸得立肟(deteroxime mesylate)，溴化十六烷基三甲铵，丁基化羟基苯甲醚(BHA)，丁基化羟基甲苯(BHT)，乙二胺，月桂基硫酸钠(SLS)，月桂基醚硫酸钠(SLES)，亚硫酸氢钠，焦亚硫酸钠，亚硫酸钾，焦亚硫酸钾，GlydantPlus，Phenonip，对羟基苯甲酸甲酯，Germall 115，Germaben II，Neolone，Kathon和Euxyl。在某些实施方案中，防腐剂是抗氧化剂。在其他实施方案中，防腐剂是螯合剂。

示例性缓冲剂包括但不限于柠檬酸盐缓冲溶液，乙酸盐缓冲溶液，磷酸盐缓冲溶液，氯化铵，碳酸钙，氯化钙，柠檬酸钙，葡乳醛酸钙，葡庚糖酸钙，葡萄糖酸钙，D-葡萄糖酸，甘油磷酸钙，乳酸钙，丙酸，乙酰丙酸钙，戊酸，磷酸氢钙，磷酸，磷酸钙，氢氧化磷酸钙，乙酸钾，氯化钾，葡萄糖酸钾，钾混合物，磷酸氢二钾，磷酸二氢钾，磷酸钾混合物，乙酸钠，碳酸氢钠，氯化钠，柠檬酸钠，乳酸钠，磷酸氢二钠，磷酸二氢钠，磷酸钠混合物，缓血酸胺，氢氧化镁，氢氧化铝，藻酸，无热原水，等渗盐水，林格氏溶液(Ringer's solution)，乙醇，及其组合。

示例性润滑剂包括但不限于硬脂酸镁，硬脂酸钙，硬脂酸，二氧化硅，滑石，麦芽，山嵛酸甘油酯，氢化植物油，聚乙二醇，苯甲酸钠，乙酸钠，氯化钠，亮氨酸，十二烷基硫酸镁，十二烷基硫酸钠，及其组合。

示例性油剂包括但不限于扁桃仁油，杏核油，鳄梨油，巴巴苏油，香柠檬油，黑加仑籽油，玻璃苣油，杜松油，春黄菊油，加拿大油菜油，香菜油，巴西棕榈油，蓖麻油，肉桂油，可可脂，椰子油，鳕鱼肝油，咖啡油，玉米油，棉籽油，鸸鹋油，桉树油，夜来香油，鱼油，亚麻籽油，香叶醇，葫芦油，葡萄籽油，榛子坚果油，牛膝草(hyssop)油，肉豆蔻酸异丙酯，荷荷巴(jojoba)油，夏威夷坚果油，杂薰衣草油，薰衣草油，柠檬油，山苍子(litsea cubeba)油，澳洲坚果(macademia nut)油，锦葵油，芒果籽油，白芒花籽油，貂油，肉豆蔻油，橄榄油，橙油，橙色连鳍鲑油，棕榈油，棕榈仁油，桃仁油，花生油，罂粟籽油，南瓜籽油，油菜籽油，米糠油，迷迭香油，红花油，檀香木油，山茶花油，香薄荷油，沙棘油，芝麻油，牛油树脂，硅酮油，大豆油，向日葵油，茶树油，蓟油，椿木(tsubaki)油，香根草油，胡桃油和小麦胚芽油。示例性油剂包括但不限于硬脂酸丁酯，辛酸甘油三酯，癸酸甘油三酯，环甲硅油，癸二酸二乙酯，二甲基硅油360，肉豆蔻酸异丙酯，矿物油，辛基十二烷醇，油醇，硅酮油，及其组合。

用于口服和肠胃外施用的液体剂型包括但不限于药学上或兽医学可接受的脂质体乳液，微乳液，溶液，混悬液，糖浆和酏剂。除活性成分之外，液体剂型还可包含本领域中常用的惰性稀释剂，如例如水或其他溶剂，增溶剂和乳化剂如乙醇，异丙醇，碳酸乙酯，乙酸乙酯，苯甲醇，苯甲酸苄酯，丙二醇，1,3-丁二醇，二甲基甲酰胺，油(特别是棉籽油，花生油，玉米油，胚芽油，橄榄油，蓖麻油和芝麻油)，甘油，四氢呋喃甲醇，聚乙二醇以及脱水山梨醇的脂肪酸酯及其混合物。除了惰性稀释剂，口服组合物还可以包含佐剂如湿润剂，乳化剂和悬浮剂，增甜剂，调味剂，和增香剂。在肠胃外施用的某些实施方案中，本发明的缀合物与增溶剂如聚乙氧基蓖麻油(例如CREMOPHOR^TM)，醇，油，改性油，二醇，聚山梨醇酯，环糊精，聚合物及其组合混合。

可注射制剂，例如无菌可注射水性或油性混悬液，可根据已知技术使用合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂来配制。无菌可注射制剂可为在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液，混悬液或乳液，例如在1,3-丁二醇中的溶液。在可采用的可接受的载体和溶剂之中有水、U.S.P.林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。此外，无菌不挥发性油常规用作溶剂或悬浮介质。出于该目的，可采用任何温和的不挥发性油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，诸如油酸的脂肪酸可用于制备可注射剂。备选地，所述制剂可以是脂质体的形式。

可注射制剂可例如通过经细菌截留性过滤器过滤，或通过以可在使用前溶解或分散于无菌水或其他无菌可注射介质中的无菌固体组合物形式并入灭菌剂来灭菌。

为延长药物的作用，通常期望的是减缓来自皮下或肌肉内注射的药物的吸收。这可通过使用水溶性不良的结晶或非晶物质的液体混悬液来实现。药物的吸收速率则取决于它的溶出速率，所述溶出速率又可取决于晶体大小和结晶形式。备选地，可通过将药物溶解或悬浮于油载体中来实现肠胃外施用的药物的延迟吸收。

用于口服施用的固体剂型包括胶囊，片剂，丸剂，粉剂和粒剂。在此种固体剂型中，活性成分与至少一种惰性的药学上可接受的赋形剂如柠檬酸钠或磷酸氢钙和/或a)填充剂或增量剂(filler或extender)如淀粉，乳糖，蔗糖，葡萄糖，甘露醇和硅酸，b)粘合剂如，例如，羧甲基纤维素，藻酸盐，明胶，聚乙烯吡咯烷酮，蔗糖和阿拉伯树胶，c)保湿剂如甘油，d)崩解剂如琼脂，碳酸钙，马铃薯或木薯淀粉，藻酸，某些硅酸盐和碳酸钠，e)溶液阻滞剂如石蜡，f)吸收加速剂如季铵化合物，g)湿润剂如，例如，十六烷醇和甘油单硬脂酸酯，h)吸附剂如高岭土和膨润土，以及i)润滑剂如滑石，硬脂酸钙，硬脂酸镁，固体聚乙二醇，十二烷基硫酸钠及其混合物混合。在胶囊，片剂和丸剂的情况中，所述剂型可以包含缓冲剂。

相似类型的固体组合物可以被用作使用赋形剂如乳糖以及高分子量聚乙二醇等的软和硬填充的明胶胶囊中的填充剂。片剂，糖衣丸，胶囊，丸剂和粒剂的固体剂型可以用包衣和壳如肠溶衣和制药领域中熟知的其他包衣来制备。其可以任选地包含遮光剂并且可以具有这样的组成以致其仅仅或优先在肠道的特定部分释放活性成分，任选地，以延迟的方式。可用的包埋(embedding)组合物的实例包括聚合物质和蜡。相似类型的固体组合物可以被用作使用赋形剂如乳糖以及高分子量聚乙二醇等的软和硬填充的明胶胶囊中的填充剂。

用于本发明的治疗方法的式(I)的化合物可以是利用如上所述的一种或多种赋形剂的微胶囊的形式，例如被制备成脂质体。片剂，糖衣丸，胶囊，丸剂和粒剂的固体剂型可以用包衣和壳如肠溶衣，释放控制包衣和制药领域中熟知的其他包衣来制备。在此种固体剂型中，活性成分可与至少一种惰性稀释剂如蔗糖，乳糖或淀粉混合。此种剂型可以常规地包含除惰性稀释剂外的物质，例如，制片润滑剂和其他制片助剂如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊，片剂和丸剂的情况中，所述剂型可以包含缓冲剂。其可以任选地包含遮光剂并且可以具有这样的组成以致其仅仅或优先在肠道的特定部分释放活性成分，任选地，以延迟的方式。可用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。

用于本发明的治疗方法的式(I)的化合物典型地被配制为与其目的施用途径相容的药物组合物。完成施用的方法是本领域技术人员已知的。这包括，例如，注射或输注，通过肠胃外途径如静脉内，血管内，动脉内，皮下，肌肉内，腹膜内，心室内，上皮内，或其他以及口服，舌下，鼻，眼睛，直肠，经皮或局部。持续释放施用也是具体地被预期的，例如，作为积存注射或易蚀植入物。局部递送是被特别预期的，例如，作为经由至一条或多条动脉(如肾动脉)的导管的递送或定位于目的位点的血管供应。

在特别的实施方案中，式(I)的化合物通过口服，舌下，经皮或肠胃外途径施用/被配制成用于口服，舌下，经皮或肠胃外途径施用。优选地，式(I)的化合物通过肠胃外途径施用/被配制成用于肠胃外途径施用，所述肠胃外途径包括静脉内，肌肉内，腹膜内，胸膜内或静脉内施用，优选静脉内施用。通过血管内途径的施用使用本领域中熟知的设备进行，所述设备用于通过插入静脉中的针或导管将液体从容器施用至患者的血管系统。所述设备可以包括针或导管，管子，流量调节器，滴注器，输注管路过滤器，静脉注射设置开关，送液管，组件间的连接器，用作注射位点的带盖的侧管，以及用于穿透并将管子连接至静脉注射袋或其他输注液体容器的中空针(spike)。

优选地，所述组合物的形式适合用于血管内施用。在优选的实施方案中，所述组合物是水性组合物，更优选为稳定的水性组合物。如本文中使用的，“稳定组合物”可指这样的制剂，在所述制剂中其中的活性成分在存储后基本上保持其物理稳定性和/或化学稳定性和/或生物学活性。

此种组合物的一些实施方案可以由冻干制剂提供。所述冻干制剂可以被复原并稀释以提供可用于血管内注射的溶液形式的本发明的组合物。优选地，所述冻干制剂在单剂量容器中提供。

如果需要，本发明的复原的实施方案可以被进一步稀释。此进一步稀释优选地利用如本文中所述的水性稀释剂进行。将根据复原溶液中的浓度和稀释溶液中所需的浓度来稀释复原的溶液。

式(I)的化合物可以被单次施用。其也可以在治疗方法的过程中规律施用，例如，一天一次，两次，三次，四次或更多次，每隔一天，每周，两周一次，每三周一次或每月。

在特别的实施方案中，任选地与以上或以下描述的任何特征或实施方案组合，式(I)的化合物被每天施用，优选为每天一次或两次。

在另一个特别的实施方案中，任选地与以上或以下描述的任何特征或实施方案组合，式(I)的化合物每周施用两次或三次。例如，其可以在治疗周期的每周的第1至7天施用；在第1，3和5天施用；或在第1天和第4天施用。

周期的持续时间和次数不受特别限制。周期可以重复例如直至实现最大响应，疾病进展或不可接受的毒性。并且，周期可以每3或4周一次地重复达3-4个周期。

式(I)的化合物也可以被连续地施用至对象(例如，静脉内施用或通过自植入物，泵，持续释放制剂等释放)。

要施用的剂量可取决于多种因素，包括疾病的类型和严重性和/或对象的特征，如总体健康，年龄，性别，体重和对药物的耐受性，并且在需要时应当根据个体需要和专业判断来调整。所述剂量也可以取决于因素如施用途径，治疗方案，目标位点或施用的其他疗法而变化。技术人员将能够根据这些及其他因素来确定适当的剂量。预防或治疗有效量可以包括但不限于约0.001mg/kg至约100mg/kg体重，优选地约0.01mg/kg至约10mg/kg，更优选地约0.1mg/kg至约1mg/kg的剂量。

在特别的实施方案中，任选地与以上或以下描述的任何特征或实施方案组合，式(I)的化合物通过肠胃外施用途径(优选地静脉内施用)以约0.1至约1mg/kg体重，优选地约0.25至约0.5mg/kg体重，更优选地约0.30至约0.35mg/kg体重的剂量(对于成人)和约0.45至约0.5mg/kg体重的剂量(对于儿童)施用。

式(I)的化合物可以单独施用(作为单一试剂)或与另一种药物组合施用。

组合疗法

本发明还涉及式(I)的化合物或包含式(I)的化合物的药物组合物，其用于本发明的治疗方法，其中所述治疗包括将式(I)的化合物与另一种药物组合施用。各试剂可以以所述试剂作为单一试剂或在组合疗法中通常使用的剂量和/或时间安排施用。式(I)的化合物的剂量和施用方案已描述于本文中。

该另一种药物可以是常用于多发性骨髓瘤的治疗性治疗的另一种抗癌药，如化疗剂，靶向疗法或皮质类固醇。

该另一种药物也可以是辅助性治疗。这可以包括用于处理骨髓瘤的症状和骨髓瘤治疗的副作用的支持性护理。这包括例如用于骨损伤(例如二膦酸盐)，肾损伤(血浆除去法，施用血管内流体)，贫血(例如红细胞生成素)，感染(例如免疫球蛋白)，血栓形成(例如肝素)等的治疗。

关于现有的用于多发性骨髓瘤的主要和辅助治疗方案的额外细节可见于例如Devita,Hellman和Rosenberg的cancer:principles&practice of oncology(肿瘤学原理和实践),第10版,2014年12月,Wolters Kluwer；以及NCCN guidelines insightsmultiple myeloma(关于多发性骨髓瘤的NCCN指南),版本3.2016(J Natl Compr CancNetw 2016；14(4):389–400),Multiple Myeloma(多发性骨髓瘤),版本3.2017(J NatlCompr Canc Netw 2017；15:230-269)。

在一个实施方案中，任选地与以上或以下描述的任何实施方案或特征结合，本发明的肽与一种或多种抗癌剂组合施用。所述药物可以以二元组合，三元组合，四元组合或包含更多数目试剂的组合施用。抗癌剂可以是，例如，甲氨蝶呤，长春新碱，阿霉素，顺铂，不含糖的氯乙基亚硝基脲，5-氟尿嘧啶，丝裂霉素C，博来霉素，多柔比星，达卡巴嗪，紫杉酚，fragyline，三聚氰胺GLA，戊柔比星，卡莫司汀和聚苯丙生，MMI270，BAY 12-9566，RAS法呢基转移酶抑制剂，法呢基转移酶抑制剂，MMP，MTA/LY231514，LY264618/洛美曲索，Glamolec，CI-994，TNP-470，Hycamtin/托泊替康(Topotecan)，PKC412，Valspodar/PSC833，Novantrone/米托蒽醌，Metaret/苏拉明，巴马司他(Batimastat)，E7070，BCH-4556，CS-682，9-AC，AG3340，AG3433，Incel/VX-710，VX-853，ZD0101，ISI641，ODN 698，TA 2516/Marmistat，BB2516/Marmistat，CDP 845，D2163，PD183805，DX895 if，Lemonal DP 2202，FK317，毕西巴尼(Picibanil)/OK-432，AD 32/戊柔比星，Metastron/锶衍生物，Temodal/替莫唑胺，Evacet/脂质体多柔比星，Yewtaxan/紫杉醇，紫杉酚/紫杉醇，Xeload/卡培他滨，Furtulon/去氧氟尿苷，Cyclopax/口服紫杉醇，口服紫杉烷(Taxoid)，SPU-077/顺铂，HMR1275/Flavopiridol，CP-358(774)/EGFR，CP-609(754)/RAS癌基因抑制剂，BMS-182751/口服铂，UFT(替加氟/尿嘧啶)，Ergamisol/左旋咪唑，恩尿嘧啶/776C85/5FU增强剂，Campto/左旋咪唑，Camptosar/伊立替康，Tumodex/雷替曲塞，Leustatin/克拉屈滨，Paxex/紫杉醇，Doxil/脂质体多柔比星，Caelyx/脂质体多柔比星，Fludara/氟达拉滨，Pharmarubicin/表柔比星，DepoCyt，ZD1839，LU79553/Bis-Naphtalimide，LU 103793/尾海兔素，Caetyx/脂质体多柔比星，Gemzar/吉西他滨，ZD 0473/Anormed，YM 116，碘种(iodine seed)，CDK4和CDK2抑制剂，PARP抑制剂，D4809/Dexifosamide，Ifes/Mesnex/异环磷酰胺，Vumon/替尼泊苷，Paraplatin/卡铂，Plantinol/顺铂，Vepeside/依托泊苷，ZD 9331，Taxotere/多西他赛，鸟嘌呤阿拉伯糖苷的前药，紫杉烷类似物，亚硝基脲，烷基化剂如美法仑和环磷酰胺，氨基多睡丹(Aminoglutethimide)，天冬酰胺酶，白消安，卡铂，苯丁酸氮芥，阿糖孢苷HCl，更生霉素，道诺霉素HCl，雌氮芥磷酸钠(Estramustine phosphate sodium)，依托泊苷(VP16-213)，氟尿苷，氟尿嘧啶(5-FU)，氟他米特，羟基脲(羟基尿素)，异环磷酰胺，干扰素α-2a，α-2b，亮丙瑞林乙酸盐(LHRH释放因子类似物)，罗氮芥(CCNU)，二氯甲基二乙胺HCl(氮芥)，巯嘌呤，美司钠，米托坦(o.p-DDD)，米托蒽醌HCl，奥曲肽，普卡霉素，甲基苄肼HCl，链脲菌素，它莫西芬柠檬酸盐，硫鸟嘌呤，噻替派，长春花碱硫酸盐，安吖啶(m-AMSA)，阿扎胞苷，红细胞生成素，六甲基三聚氰胺(HMM)，白介素2，米托胍腙(Mitoguazone)(甲基-GAG；甲基乙二醛二脒基肼；MGBG)，喷司他丁(2′-脱氧助间型霉素)，司莫司汀(甲基-CCNU)，替尼泊苷(VM-26)或长春地辛硫酸盐，信号转导抑制剂(如MEK，BRAF，AKT，her2，mTOR和PI3K抑制剂)，但其不限于此。

在特别的实施方案中，任选地与以上或以下描述的一个或多个实施方案或特征组合，所述另一种药物选自由以下各项组成的组：烷基化剂，皮质类固醇蛋白酶体抑制剂，及其组合。

式(I)的化合物可以与烷基化剂组合。烷基化剂的实例已提供在上文中。优选地，所述烷基化剂选自由以下各项组成的组：氮芥，亚硝基脲和烷基磺酸盐。更优选地所述烷基化剂是氮芥，甚至更优选为环磷酰胺。

环磷酰胺已经以高剂量(600mg/m2)IV(60分钟，达4天)作为单一试剂被使用。周期可以重复，每4周一次，达2个周期，然后每3个月一次直至最大响应，疾病进展或不可接受的毒性。

组合的环磷酰胺治疗的一个实例是与硼替佐米和地塞米松的组合，其中环磷酰胺在第1，8，15和22天以300mg/m²/天的剂量口服施用并且周期每4周重复一次达3–4个周期。

环磷酰胺可以以600mg/m²或更低的剂量如500mg/m²，400mg/m²，300mg/m²，200mg/m²或100mg/m²(肠胃外或口服)，优选地以约300mg/m²/天的剂量与式(I)的肽组合使用。可以例如根据以上治疗方案使用任何这些剂量。

其还可以与皮质类固醇组合。优选地，所述皮质类固醇选自由以下各项组成的组：地塞米松，泼尼松龙和甲基泼尼松龙，更优选为地塞米松。

以下提供地塞米松组合临床使用的一些实例：

(i)与硼替佐米组合：第1–4天(所有周期)和第9–12天(周期1和2)，每天口服40mg；或第1–2，4–5，8–9及11–12天，每天口服20mg，重复周期，每3周一次，达3–4个周期。

(ii)与硼替佐米和环磷酰胺组合：第1-4，9-12和17-20天，每天口服40mg，重复周期，每4周一次，达3–4个周期；

(ii i)与多柔比星和硼替佐米组合：在周期1的第1–4，9–12和17–20，每天口服40mg，并且在周期2-4的第1–4天，重复周期，每3周一次，达3–4个周期。

因此，例如，地塞米松可以在第1–4，9–12和17–20天期间以每天口服20mg至40mg的剂量与式(I)的化合物组合使用，并且周期可以重复，每3或4周一次，达3–4个周期。其也可以以上面指定的剂量和方案使用。

抑制蛋白酶体功能已作为抗癌疗法的有效策略出现(Crawford等,J Cell CommunSignal.2011,5(2):101–110)。式(I)的化合物也可以与蛋白酶体抑制剂组合。所述蛋白酶体抑制剂是优选地选自由以下各项组成的组：硼替佐米，卡非佐米和伊沙佐米，优选为硼替佐米。此外，所述蛋白酶体抑制剂(例如硼替佐米)可以另外地例如与通常已被成功组合而没有增加的毒性的多柔比星，萨力多胺，美法仑，地塞米松和来那度胺组合。

硼替佐米可以在第1，4，8和11天以1.3mg/m2(3–5秒的静脉推注(IV push)或皮下(SC))与式(I)的化合物组合使用。周期可以重复，每3或4周一次，达3–4个周期。

在另一个特别的实施方案中，任选地与以上或以下描述的一个或多个实施方案或特征组合，所述治疗方法包括施用式(I)的化合物，皮质类固醇和选自由以下各项组成的组的药物：烷基化剂，蛋白酶体抑制剂，及其组合。

优选地，所述皮质类固醇是地塞米松。在优选的实施方案中，所述组合疗法包含式(I)的化合物和地塞米松，优选地其包含式(I)的化合物，地塞米松和选自硼替佐米或环磷酰胺的化合物。

在另一个特别的实施方案中，任选地与以上或以下描述的一个或多个实施方案或特征组合，所述组合治疗选自由以下组成或包含以下的组：

-式(I)的化合物+硼替佐米；

-式(I)的化合物+环磷酰胺；

-式(I)的化合物+地塞米松；

-式(I)的化合物+硼替佐米+地塞米松；和

-式(I)的化合物+环磷酰胺+地塞米松。

优选的剂量和施用方案如上所述。

在特别的实施方案中，任选地与以上或以下描述的一个或多个实施方案或特征组合，式(I)的化合物在治疗周期的每周的第1至7天施用，优选地每天一次，并且另一种抗癌药在治疗周期的每周的第1天和第4天施用，优选地每天一次。所述治疗可以持续3-4周并且周期优选地每3-4周重复一次。

在另一个特别的实施方案中，任选地与以上或以下描述的一个或多个实施方案或特征组合，式(I)的化合物在治疗周期的每周的第1天，第3天和第5天施用，优选地每天一次，并且另一种抗癌药在治疗周期的每周的第1天和第4天施用，优选地每天一次。所述治疗可以持续3-4周并且周期优选地每3-4周重复一次。

在另一个特别的实施方案中，任选地与以上或以下描述的一个或多个实施方案或特征组合，式(I)的化合物在治疗周期的每周的第1天和第4天施用，优选地每天一次，并且另一种抗癌药在治疗周期的每周的第1天和第4天施用，优选地每天一次。所述治疗可以持续3-4周并且周期优选地每3-4周重复一次。

式(I)的化合物的特别的和优选的实施方案已在上文中被描述。优选地，式(I)的化合物选自由以下各项组成的组：S09，S14及其组合，更优选地式(I)的化合物是S09。

式(I)的化合物和所述另一种药物(优选地另一个抗癌药)可在相同的或分开的药物组合物中被施用，并且可以在相同的时间(同时)或在不同的时间施用(在所述另一种药物之前或之后施用式(I)的化合物)。关于组合疗法的施用方案的进一步细节提供在上文中。

在特别的实施方案中，式(I)的化合物的施用与所述另一种药物的施用是同时的，作为同一组合物的部分或作为分开的组合物。在另一个特别的实施方案中，式(I)的化合物的施用与所述另一种药物的施用是相继的(之前或之后)。

本发明还涉及式(I)的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于通过如本文所述的采用式(I)的化合物以及另一种药物的组合疗法的癌症的有效治疗。

其还涉及治疗癌症的方法，所述方法包括向需要此种治疗的患者组合施用治疗有效量的式(I)的化合物及治疗有效量的如本文中所述的另一种药物。

本发明还提供包含组合地用于如本文中所述的治疗多发性骨髓瘤的方法的式(I)的化合物，另一种药物和药学上可接受的载体或赋形剂的药物组合物。

本发明还提供用于如本文中所述的治疗多发性骨髓瘤的方法的试剂盒，其包括：包含式(I)的化合物的药物组合物，和包含另一种药物的药物组合物；以及任选地，用于在如本文中所述的治疗多发性骨髓瘤的方法中组合使用两种药物的使用说明。

本发明的项目

1.式(I)的化合物：

其中X₄是氨基酸，优选为Leu；

其中X₅是氨基酸，优选为Ser；

其中X₁和X₃是独立选择的并且具有式(II):

每一个所述环是饱和的，部分不饱和的，或芳香性的；

所述环是分开的，部分或完全稠合的，

是饱和的，部分不饱和的，或芳香性的；

2.根据第1项的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中X2选自由以下各项组成的组：Leu和Phe；并且其中L具有式(IIIb)：

-(CH₂)_y-CH＝CH-(CH₂)_z-

(IIIb)

其中y和z是相同的或不同的并且是选自1至10的整数值，优选独立地选自3至6，更优选独立地选自3和6。

3.根据第1或2项中任一的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述化合物选自由以下各项组成的组：S09(SEQ ID NO:3)，S14(SEQ ID NO:4)，及其组合。

4.根据第1至3项中任一的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述多发性骨髓瘤是顽固性，难治性或复发性多发性骨髓瘤，优选地其中所述多发性骨髓瘤对于在先的治疗是顽固性，难治性或复发性的。

5.根据第4项的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述多发性骨髓瘤耐受选自由以下各项组成的组的药物：烷基化剂，皮质类固醇和蒽环霉素。

6.根据第4或5项中任一的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述多发性骨髓瘤耐受选自由以下各项组成的组的药物：美法仑，地塞米松和多柔比星。

7.根据第1至6项中任一的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述治疗包括将式(I)的化合物与另一种药物组合施用。

8.根据第7项的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述另一种药物选自由以下各项组成的组：烷基化剂，皮质类固醇，蛋白酶体抑制剂，及其组合。

9.根据第8项的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述治疗包括施用式(I)的化合物，皮质类固醇和选自由以下各项组成的组的药物：烷基化剂，蛋白酶体抑制剂，及其组合。

10.根据第8或9项中任一的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述烷基化剂选自由以下各项组成的组：氮芥，亚硝基脲和烷基磺酸盐，优选为氮芥，更优选为环磷酰胺。

11.根据第8至10项中任一的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述皮质类固醇选自由以下各项组成的组：地塞米松，泼尼松龙和甲基泼尼松龙，优选为地塞米松。

12.根据第8至11项中任一的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述蛋白酶体抑制剂选自由以下各项组成的组：硼替佐米，卡非佐米和伊沙佐米，优选为硼替佐米。

13.根据第7项的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中式(I)的化合物被用于选自由以下各项组成的组的组合治疗：

-式(I)的化合物+硼替佐米；

-式(I)的化合物+环磷酰胺；

-式(I)的化合物+地塞米松；

-式(I)的化合物+硼替佐米+地塞米松；以及

-式(I)的化合物+环磷酰胺+地塞米松。

14.根据第7至13项中任一的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中式(I)的化合物在治疗周期的每周的第1至7天施用，优选地每天一次或两次，并且另一种抗癌药在治疗周期的每周的第1天和第4天施用，优选地每天一次。

15.根据第7至13项中任一的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中式(I)的化合物在治疗周期的每周的第1天，第3天和第5天施用，优选地每天一次，并且另一种抗癌药在治疗周期的每周的第1天和第4天施用，优选地每天一次。

16.根据第7至13项中任一的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中式(I)的化合物在治疗周期的每周的第1天和第4天施用，优选地每天一次，并且另一种抗癌药在治疗周期的每周的第1天和第4天施用，优选地每天一次。

17.根据第1至16项中任一的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述治疗周期持续3-4周并且周期每3-4周重复一次。

18.根据第1至17项中任一的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中式(I)的化合物被配制成以0.1mg/kg至1mg/kg的剂量，优选地以0.25mg/kg至0.5mg/kg的剂量施用。

19.根据第1至18项中任一的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中式(I)的化合物被配制成用于肠胃外施用，优选地用于静脉内，肌肉内，腹膜内，胸膜内或静脉内施用，更优选地用于静脉内施用。

20.根据第1至19项中任一的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述对象是人。

21.药物组合物，其包含如第1至3项中任一所限定的式(I)的化合物和药学上可接受的载体或赋形剂，所述药物组合物用于根据第1至20项中任一的治疗方法。

22.药物组合物，其包含如第1至3项中任一所限定的式(I)的化合物、另一种药物以及药学上可接受的载体或赋形剂，所述药物组合物用于根据第7至20项中任一的治疗方法。

23.用于根据第7至20项中任一的治疗方法的试剂盒，所述试剂盒包括：包含如第1至3项中任一所限定的式(I)的化合物的药物组合物，和包含另一种药物的药物组合物；以及任选地，用于将两种药物组合用于根据第7至20项中任一的治疗方法的使用说明。

预期本文中所述的任何特征可以任选地与本发明的任何医药用途，药物组合物，试剂盒，治疗方法，制药方法和组合疗法的任何实施方案组合；并且本说明书中讨论的任何实施方案可以关于这些中的任何一个实施。将理解的是，本文中描述的特别的实施方案被当作说明来显示并且不是作为本发明的限制。

所有出版物和专利申请以与各个出版物或专利申请被特别地和单独地指示为通过引用结合相同的程度通过引用结合于此。

词语“一个(a)”或“一种(an)”的使用可以表示“一个(one)”，但其也符合“一个或多个”，“至少一个”和“一个或多于一个”的含义。术语“另一个”的使用也可以是指一个或多个。权利要求中术语“或”的使用用于表示“和/或”，除非明确指示仅指替代品或替代品是是互相排斥的。

如本说明书和权利要求书中使用的，词语“包含(comprising)”(及任何形式的包含，如“包含(comprise)”和“包含(comprises)”)，“具有(having)”(及任何形式的具有，如“具有(have)”和“具有(has)”)，“包括(including)”(及任何形式的包括，如“包括(includes)”和“包括(include)”)或“含有(containing)”(及任何形式的含有，如“含有(contains)”和“含有(contain))是包容性的或开放性的并且不排除额外的，未列举的要素或方法步骤。术语“包括(comprises)”也涵盖和明确公开了术语“由……组成(consistsof)”和“基本上由……组成(consists essentially of)”。如本文中使用的，短语“基本上由……组成”将权利要求的范围限制至指定的物质或步骤以及不实质影响所要求保护的发明的基本的和新的特征的那些。如本文中使用的，短语“由……组成”排除了未在权利要求中指定的任何要素，步骤或成分，除了例如与所述要素或限制通常相关联的杂质。

本文所用的术语“或其组合”指在该术语前所列项目的所有排列和组合。例如，“A、B、C或其组合”意在包括下列中的至少一种：A、B、C、AB、AC、BC或ABC，并且若在特定情况下次序是重要的，则还包括BA、CA、CB、CBA、BCA、ACB、BAC或CAB。进一步地，该例中明确地包括含一或多个项目或术语重复出现的组合，如BB、AAA、MB、BBC、AAABCCCC、CBBAAA、CABABB等等。本领域技术人员会理解，典型情况下，对于任何组合中项目或术语的数目没有限制，除非从上下文中明显看出并非如此。

如本文中使用的，词语近似(approximation)，诸如，但不限于，“约(about)”，“约(around)”，“大约(approximately)”是指这样的情况，当如此修饰时被理解为不一定是绝对的或完美的而是被认为足够接近本领域技术人员保证标明所呈现的情况的那些。描述可以变化的程度将取决于可以建立多大的改变而仍然使本领域技术人员认为修饰的特征仍然具有所需的未修饰特征的特性和能力。通常(但是遵循之前的讨论)，用词语近似如“约”修饰的本文中的数值可以自指定的值改变±1％，2％，3％，4％，5％，6％，7％，8％，9％，10％，11％，12％，13％，14％或15％。因此，术语“约”可以表示指定的值±其值的5％，优选地指定的值±其值的2％，最优选地术语“约”准确地表示指定的值(±0％)。

以下实施例用于说明本发明并且不应当被视为限制其范围。

实施例

实施例1.-模拟肽化合物的化学合成和纯化

化学合成

材料：Fmoc-保护的α-氨基酸(包括烯族氨基酸：Fmoc-[(S)-2-(4戊烯基)丙氨酸]OH，Fmoc-[(R)-2-(4戊烯基)丙氨酸]OH，Fmoc-[(S)-2-(7辛烯基)丙氨酸]OH，Fmoc-[(R)-2-(7辛烯基)丙氨酸]OH)，2-(6-氯-1-H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸铵(TBTU)，树脂，二甲基甲酰胺(DMF)，N,N-二异丙基乙胺(DIEA)，三氟乙酸(TFA)，1,2-二氯乙烷(DCE)，Grubbs Ru(IV)催化剂和哌啶购买自不同的供应商。

简言之，利用自动化合成仪使用Fmoc固相肽化学法来合成线性多肽。仅在从反应容器中去除树脂后手动进行与烯族氨基酸的偶联。

如由Scott J.M.及同事(Scott J.M.等,“Application of Ring-ClosingMetathesis to the Synthesis of Rigidified Amino Acids and Peptides”,1996,J.Am.Chem.Soc.,1996,118(40),pp 9606-9614)公开的，在将线性肽从树脂上切离后利用第一代Grubbs催化剂在溶液中进行闭环置换反应。在4℃利用甲基叔丁基醚将去保护的肽沉淀并冻干。

纯化

冻干的肽通过反相HPLC使用C18柱来纯化。通过LC-MS-ESI鉴别所述肽。下面显示了所有化合物的所有质谱数据。

HPLC条件：

S09.所述化合物通过HPLC-RP(SepaxGPC-18柱；泵A：H₂O与0.1％TFA；泵B乙腈与0.1％TFA)，使用12分钟内5％-60％的B的线性梯度(R.T.＝6.55)纯化。纯度级别95.05％(HPLC)；

S14.所述化合物通过HPLC-RP(SepaxGPC-18柱；泵A：H₂O与0.1％TFA；泵B乙腈与0.1％TFA)，使用12分钟内5％-60％的B的线性梯度(R.T.＝7.63)纯化。纯度级别96.67％(HPLC)。

化合物质量特性：

实施例2.-S09和S14在若干癌症细胞系中的抗增殖作用

1.材料和方法

模拟肽化合物的制备

将冻干的模拟肽溶解在生理血清中。

细胞系

A549，上皮(肺癌)，ATCC：CCL-185

HL-60，早幼粒细胞(急性髓细胞白血病，AML)，ECACC：98070106

MCF-7，上皮(乳腺癌)，ECACC：86012803

MM.1S，B成淋巴细胞(多发性骨髓瘤)，ATCC：CRL-2974

RAMOS，B淋巴细胞(伯基特淋巴瘤(Burkitt’s Lymphoma))，ATCC：CRL-1596

BJ，成纤维细胞(正常皮肤)，

CRL-2522^TM

细胞培养

在培养箱中在CO₂(6％)下在37℃在具有10％失活的胎牛血清(FBS)(Gibco-BRL10106-169)的DMEM高葡萄糖(Dulbecco’s Modified Eagle Solution，Gibco-BRL 31966-21)培养基中培养细胞系A549，MCF-7和RAMOS。在培养箱中在37℃在具有10％失活的胎牛血清(FBS)和2mM谷氨酰胺(Sigma G7513)的RPMI-1640(Sigma R8758)培养基中培养细胞系HL-60和MM.1S。在培养箱中在CO₂(6％)下在37℃在具有10％失活的胎牛血清(FBS)(Gibco-BRL 10106-169)的Eagle's最小必要培养基(Eagle's Minimum Essential Medium)(Sigma，M-2279)中培养细胞系BJ。

在扩增步骤和测定期间，将粘附的细胞用DPBS(Dulbecco’s Phosphate BufferedSaline，Sigma D1283)冲洗三次并且之后用胰蛋白酶([0.5g/ml]/EDTA[0.2g/ml])(Gibco-BRL，15400054)在DPBS溶液中在37℃处理5分钟，并且在脱离后，转移到培养基中。将没有粘附的细胞离心并且转移到培养基中。在用台盼蓝进行标记后，在Neubauer室中对细胞进行计数。仅在生存力高于90％时进行各测定。

生存力测定

将细胞以10000个细胞/孔的密度接种在96孔板中的100μl培养基中。24h后，以100μM的初始浓度以及连续稀释(1:1)加入待测化合物以计算剂量/响应曲线。对照是未处理的细胞。各实验一式三份地进行。

在24-72h期间在培养箱中在CO₂气氛下在37℃将细胞与指示浓度的化合物孵育。然后，通过MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-yl)-2,5-二苯基四氮唑溴盐)测定来测量细胞生存力。MTT的储液(475989Calbiochem)为5mg/ml(在PBS中)。加入1x.10μl/孔的MTT溶液并将平板孵育3-4小时。弃去培养基并向各孔加入100μl的提取缓冲液(PBS 1x，15％SDS，50％NaN,N-二甲基甲酰胺，pH 4.7)。将平板在室温在回转振荡下孵育16h。最后测量570nm的吸光度。作为阴性对照(实验噪音)，用20μl/孔的在H₂O中的10％SDS溶液处理3个孔。

统计学

进行数据分析，计算相对阴性对照的值(其被认为等于100％)归一化的细胞生存力百分比。通过S形方程剂量响应(变化斜率)拟合剂量/响应曲线并且计算IC₅₀值如下：

Y＝底部+(顶部-底部)/(1+10^{[(LogIC50-X)*HillSlope]},

其中：X是化合物浓度(对数标尺)并且Y是响应

使用GraphPad Prism(用于Windows的Prism 6)进行计算和作图。

2.结果

实验结果概述在下表3中：

表3.-IC50值(μM)：

参比化合物：Int-HI-S6A-F8抑制剂，作为阳性对照(化合物购买自EnzoTechnology)；10058-F4作为活性参比化合物(购买自Sigma)。

如由这些数据可推导出的，式(I)的肽与参比化合物相比显示更好的特异性和灵敏性。

实施例3.-比较测试显示配体的特定位置在式(I)的肽的活性中是关键的

为了证明式(I)的肽中的配体(L)的特定位置对于活性是关键的，发明人将肽S09的活性与其具有不同配体位置的版本进行了比较。

表4列出了合成的用于比较目的的肽：

名称	序列
		SEQ ID NO:5(IDP-S19)	AXKVVILKXATAYILS
SEQ ID NO:6(IDP-S21)	APKVXILKKATXYILS
		SEQ ID NO:7(IDP-S22)	APKVVXLKKATAXILS
SEQ ID NO:8(IDP-S23)	APKVVILKXATAYILXV
		SEQ ID NO:9(IDP-S17)	APKVVIXKKATAYXLS
SEQ ID NO:10(IDP-S18)	APKVVILXKATAYIXS

在所有情况中，X代表下式的氨基酸：

并且对应于-(CH₂)₆-CH＝CH-(CH₂)₃-的L二价基团通过与分别的α碳连接而与两个X连接。

遵循的用于肽合成的规程与以上已经公开的基本相同。

HPLC条件：

IDP-S19：所述化合物通过HPLC-RP(C-18柱；泵A：H₂O与0.1％TFA；泵B乙腈与0.1％TFA)，使用20分钟内47％-57％的B的线性梯度(R.T.＝8.59)纯化。纯度级别95.11％(HPLC)；

IDP-S20：所述化合物通过HPLC-RP(C-18柱；泵A：H₂O与0.1％TFA；泵B乙腈与0.1％TFA)，使用20分钟内53％-63％的B的线性梯度(R.T.＝11.75)纯化。纯度级别97.56％(HPLC)；

IDP-S21：所述化合物通过HPLC-RP(C-18柱；泵A：H₂O与0.1％TFA；泵B乙腈与0.1％TFA)，使用20分钟内35％-45％的B的线性梯度(R.T.＝12.04)纯化。纯度级别95.12％(HPLC)；

IDP-S22：所述化合物通过HPLC-RP(C-18柱；泵A：H₂O与0.1％TFA；泵B乙腈与0.1％TFA)，使用20分钟内40％-50％的B的线性梯度(R.T.＝14.11)纯化。纯度级别95.09％(HPLC)；

IDP-S23：所述化合物通过HPLC-RP(C-18柱；泵A：H₂O与0.1％TFA；泵B乙腈与0.1％TFA)，使用20分钟内50％-60％的B的线性梯度(R.T.＝8.80)纯化。纯度级别98.60％(HPLC)；

IDP-S17：所述化合物通过HPLC-RP(C-18柱；泵A：H₂O与0.1％TFA；泵B乙腈与0.1％TFA)，使用12分钟内5％-60％的B的线性梯度(R.T.＝7.01)纯化。纯度级别99.11％(HPLC)；并且

IDP-S18：所述化合物通过HPLC-RP(C-18柱；泵A：H₂O与0.1％TFA；泵B乙腈与0.1％TFA)，使用12分钟内5％-60％的B的线性梯度(R.T.＝8.2)纯化。纯度级别97.8％(HPLC)。

表5：质量特性

名称	序列	MW(理论)	MW(实际，1H)
				IDP-S19	AXKVVILKXATAYILS	1781.01	1782.05
IDP-S21	APKVXILKKATXYILS	1836.09	1837.1
				IDP-S22	APKVVXLKKATAXILS	1729.97	1730.97
IDP-S23	APKVVILKXATAYILXV	1890.18	1891.3
				IDP-S17	APKVVIXKKATAYXLS	1780.2	1781.2
IDP-S18	APKVVILXKATAYIXS	1765.2	1766.6

遵循与之前的部分中公开的相同的规程，获得以下活性数据：

表6

野生型序列SEQ ID NO:11(Pro-Lys-Val-Val-Ile-Leu-Lys-Lys-Ala-Thr-Ala-Tyr-Ile)未显示生长抑制活性。令人惊奇地，当如本文中所述的配体连接野生型序列的第3位和第10位[对应于式(I)的化合物的位置X1和X3]时，观察到uM级的抗增殖性质。相反，其他版本(其中在肽序列中的其他位置之间建立桥)没有给化合物提供显著活性。这是惊人的，因为目前已经公开的是交联(订书(stapled))肽相当于原来的肽序列提供提高的稳定性。然而，在现有技术中没有关于订书肽(stapler)在原本无活性的野生型肽序列的激活中的可能作用的启示。

实施例4.-S09在耐药性多发性骨髓瘤细胞系中的效力

1.材料和方法

模拟肽化合物的制备

将冻干的模拟肽溶解在生理血清中。

细胞系:

NCI-H929，成淋巴细胞(骨髓瘤)，

CRL-9068^TM

OPM-2，成淋巴细胞(骨髓瘤)，DSMZ No。ACC50

MM144，成淋巴细胞(骨髓瘤)，萨拉曼卡大学(University of Salamanca)

MM1R，成淋巴细胞(骨髓瘤)，

CRL-2975^TM，耐受地塞米松

RPMI-8266，成淋巴细胞(骨髓瘤)，

CCL 155^TM

RPMI-8266-LR5，成淋巴细胞(骨髓瘤)，经选择而耐受美法仑(Bellamy WT等,Cancer Res.1991Feb 1；51(3):995-1002)。

U266，成淋巴细胞(骨髓瘤)，

TIB196^TM

U266DOX4，成淋巴细胞(骨髓瘤)，经选择而耐受多柔比星(

等,ClinCancer Res.2013五月15；19(10):2677-87)。

U266-LR7，成淋巴细胞(骨髓瘤)，经选择而耐受美法仑(

等,ClinCancer Res.2013五月15；19(10):2677-87)。

细胞培养

在培养箱中在37℃在具有10％失活的胎牛血清(FBS)和2mM谷氨酰胺(SigmaG7513)的RPMI-1640(Sigma R8758)培养基中培养所有细胞系。

在扩增步骤期间将细胞离心并转移到培养基中。在用台盼蓝进行标记后在Neubauer室中对细胞进行计数。仅在生存力高于90％时进行各测定。

生存力测定

在24-72h期间在培养箱中在CO₂气氛下在37℃将细胞与指示浓度的模拟肽化合物(S09)孵育。然后，通过MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-yl)-2,5-二苯基四氮唑溴盐)测定来测量细胞生存力。MTT的储液(475989Calbiochem)为5mg/ml(在PBS中)。加入1x.10μl/孔的MTT溶液并将平板孵育3-4小时。弃去培养基并向各孔加入100μl的提取缓冲液(PBS 1x，15％SDS，50％Na N,N-二甲基甲酰胺，pH 4.7)。将平板在室温在回转振荡下孵育16h。最后测量570nm的吸光度。作为阴性对照(实验噪音)，用20μl/孔的在H₂O中的10％SDS溶液处理3个孔。

统计学

Y＝底部+(顶部-底部)/(1+10^{[(LogIC50-X)*HillSlope]},

其中：X是化合物浓度(对数标尺)并且Y是响应

使用GraphPad Prism(用于Windows的Prism 6)进行计算和作图。

2.结果

本研究的目的是确定S09在多种多发性骨髓瘤(MM)细胞系中的体外抗增殖性质，这些细胞系中的一些被描述为耐受MM的主要治疗中通常使用的药物。获得的对应于导致50％生长抑制的试剂浓度的IC50(μM)值概述在下表7中：

表7：S09的IC50值(μM)

细胞系	S09
		H929	3.6μM
OPM2	4.8μM
		MM144	6.8μM
MM1R	8.3μM
		MM1S	7.5μM
RPMI	7.4μM
		RPMI-LR5	11.4μM
U266	7.5μM
		U266DOX4	5μM
U266LR7	9.7μM

S09在数种MM细胞系中显示高的抗癌活性。特别地，其在耐受经批准的MM治疗如美法仑(RPMI-LR5和U266-LR7)，多柔比星(U266Dox4)和地塞米松(MM1R)的不同骨髓瘤细胞中显示几乎相同的效力。

实施例5.-确定S09药物组合的体外协同作用.

1.材料和方法

细胞系

MM1S，成淋巴细胞(骨髓瘤)，

CRL-2974^TM

细胞培养

在培养箱中在37℃在具有10％失活的胎牛血清(FBS)和2mM谷氨酰胺(SigmaG7513)的RPMI-1640(Sigma R8758)培养基中培养MM1S细胞。

体外协同作用

在单一疗法中以及在二元和三元组合中利用不同剂量的S09，地塞米松，硼替佐米和环磷酰胺处理MM1S细胞达24h。对于每种三元组合，在保持其间比率恒定的情况下，探测不同的剂量组合。在三元组合中使用以下浓度(在测试的单一疗法和双元组合中使用相应的浓度)：

-地塞米松:硼替佐米(5nM:1nM和5nM:2nM)，S09的连续浓度为0.3uM；0.6uM；1.25uM和2.5uM；和

-地塞米松:环磷酰胺(5nM:2.5uM和5nM:5uM)，S09的连续浓度为0.3uM；0.6uM；1.25uM和2.5uM。

通过MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-yl)-2,5-二苯基四氮唑溴盐)测定来测量生存力(如之前限定)。

利用Calcusyn软件(Biosoft，Ferguson，MO，USA)量化组合的效力，所述软件是基于Chou Talalay方法(Chou TC,Talalay P.Adv Enzyme Regul.1984；22:27-55)，所述方法计算合用指数(CI)，说明如下：CI>1：拮抗作用，CI＝1：加成作用，CI<1协同作用。

2.结果

本研究的目的是确定S09增强其他抗骨髓瘤剂的体外抗肿瘤活性的能力。实验结果显示在图1，2，3和4中。

对于测试的各S09浓度(即，0.3uM，0.6uM，1.2uM和2.5uM)，计算的关于单一疗法和双元疗法获得的双元和三元组合的协同指数(CI)分别提供在下面的表中。

表8.-S09，硼替佐米和地塞米松

Conc S09(uM)	DC Bort 1nM	DC Bort 2nM	DC Dexa 5nM	TC Bort 1nM&Dexa5nM	TC Bort 2nM&Dexa5nM
						0.3	0.422	0.68	0.699	0.274	0.476
0.6	0.414	0.612	1.13	0.403	0.503
						1.25	0.312	0.668	1.36	0.375	0.389
2.5	0.526	0.821	0.379	0.309	0.001

表9.-S09，环磷酰胺和地塞米松

S09与多发性骨髓瘤治疗中使用的标准护理药物(即，硼替佐米，环磷酰胺和地塞米松)显示良好的协同作用，如可以通过利用双元和三元组合中的药物治疗24小时孵育后MM1S细胞存活结果观察到的(如由低于1的CI所示)，特别是在硼替佐米和环磷酰胺2.5uM的情况下。

此外，显示利用S09的三元组合治疗，即：

i.S09，地塞米松和硼替佐米；以及

ii.S09，地塞米松和环磷酰胺；

提供非常好的协同作用。

最具有协同作用的组合被证明是：

-S09 2.5uM，硼替佐米2nM和地塞米松5nM；以及

-S09 2.5uM，环磷酰胺2.5uM和地塞米松5nM。

实施例6.-确定S09药物组合的体内协同作用.

1.材料和方法

动物

在无热原区域圈养和操作6-7周龄的CB17-SCID免疫抑制小鼠(雌性)。其购买自Janvier Labs(法国)。所有实验都在萨拉曼卡大学(西班牙)的设施内进行。

研究组

对照：培养基(PBS)，腹膜内(i.p.)，第1至5天各12小时。

治疗组：

-单一疗法：

·硼替佐米0.5mg/kg i.p.在第1天和第4天

·环磷酰胺50mg/kg i.p.在第1天和第4天

·地塞米松0.5mg/kg i.p.在第1天和第4天

·S09 4mg/kg i.p.在第1至7天各12小时

-双元组合：

·硼替佐米0.5mg/kg i.p.在第1天和第4天+S09 4mg/kg i.p.在第1至7天各12小时

·环磷酰胺50mg/kg i.p.在第1天和第4天+S09 4mg/kg i.p.在第1至7天各12小时

·地塞米松0.5mg/kg i.p.在第1天和第4天+S09 4mg/kg i.p.在第1至7天各12小时

·硼替佐米0.5mg/kg i.p.在第1天和第4天+环磷酰胺50mg/kg i.p.在第1天和第4天

·环磷酰胺50mg/kg i.p.在第1天和第4天+地塞米松0.5mg/kg i.p.在第1天和第4天

·地塞米松0.5mg/kg i.p.在第1天和第4天+硼替佐米0.5mg/kg i.p.在第1天和第4天

-三元组合：

·硼替佐米0.5mg/kg i.p.在第1天和第4天+地塞米松0.5mg/kg i.p.在第1天和第4天+S09 4mg/kg i.p.在第1至7天各12小时

·环磷酰胺50mg/kg i.p.在第1天和第4天+地塞米松0.5mg/kg i.p.在第1天和第4天+S09 4mg/kg i.p.在第1至7天各12小时

皮下异种移植物模型

将小鼠右侧的毛剃去并且通过吸入麻醉以减少其移动，皮下接种在50μl的RPMI-1640培养基和50μl的

Basement Membrane Matrix中的3x 106个MM1S细胞。当肿瘤变得可感知时(在30天)，根据肿瘤体积(mm³)将小鼠随机分到不同的组中(5只小鼠在对照组中，4只在其余的组中)。这通过用卡尺测量两个肿瘤直径并且使用以下球状体公式来评估：

V＝(a·b^2·π)/6

其中a和b分别对应于最长和最短直径。肿瘤体积每周监测三次。

治疗终点通过小鼠中肿瘤体积的值来确定(2000mm³-2200mm³的范围)。

2.结果

本研究的目的是确定S09增强用于多发性骨髓瘤治疗的其他试剂的体内抗肿瘤活性的能力。在二元组合和三元组合中评估与S09组合的以下试剂：硼替佐米(B)，环磷酰胺(C)和地塞米松(D)。

实验数据概述在下表10中，其中记录未处理小鼠组(对照)，用一种药物处理的组(单一疗法)，用2种药物的混合物处理的组(二元组合)以及用三种药物的混合物处理的组(三元组合)的治疗第1天，第5天，第10天，第15天和第24天的肿瘤体积和归一化的肿瘤体积％。

表10：所有组在不同治疗天数测量的肿瘤体积和归一化肿瘤体积百分比(％)

S09显示与通常出现在多发性骨髓瘤治疗方案中的药物的非常好的体内协同作用，如可以由小鼠异种移植物模型中肿瘤生长下降观察到的。在第24天，当未处理小鼠(对照)的肿瘤体积达到最大值(1978,66mm³)时，报道的单一疗法中硼替佐米，环磷酰胺和地塞米松的效力在与S09组合(即二元组合)时得到提高，显示相当于未处理的对照肿瘤生长分别下降76％，72％和58％。

相对于未处理的对照，环磷酰胺，地塞米松和S09的三元组合显示71％的肿瘤生长下降并且地塞米松，硼替佐米和S09的三元组合达到几乎90％(86％)的肿瘤体积减小。

实施例7.-IDP-P1708160和IDP-P1708161模拟肽化合物的化学合成和纯化

化学合成

材料：Fmoc-保护的α-氨基酸，2-(6-氯-1-H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸铵(TBTU)，树脂，二甲基甲酰胺(DMF)，N,N-二异丙基乙胺(DIEA)，三氟乙酸(TFA)，1,2-二氯乙烷(DCE)，三(2-羧乙基)膦(TCEP)，1-8-二-溴-辛烷，1,2-二(2-溴-乙氧基)乙烷，4((4-溴甲基)苯基)苄基溴和哌啶购买自不同的供应商。

简言之，利用自动化合成仪使用Fmoc固相肽化学法来合成线性多肽。在半胱氨酸侧链的选择性去保护后，在DMF中在TCEP存在下在室温进行与1-8-二-溴-辛烷，4((4-溴甲基)苯基)苄基溴的偶联反应达2小时以分别获得IDP-P1708160和IDP-P1708161(DoronC.Greenbaum等,“Development of alpha-Helical Calpain Probes by Mimicking aNatural Protein-Protein Interaction”,JACS 2012)。切割所述肽并且利用在DCM中的TFA除去侧链保护基。利用甲基叔丁基醚在4℃将去保护的肽沉淀并冻干。

纯化

HPLC条件：

IDP-P1708160。所述化合物通过HPLC-RP(SepaxGPC-18柱；泵A：H₂O与0.1％TFA；泵B乙腈80％与0.1％TFA)使用20分钟内41％-61％的B的线性梯度(R.T.＝9.95)纯化。纯度级别97.71％(HPLC)；

IDP-P1708161。所述化合物通过HPLC-RP(SepaxGPC-18柱；泵A：H₂O与0.1％TFA；泵B乙腈80％与0.1％TFA)使用20分钟40％-60％的B的线性梯度(R.T.＝10.26)纯化。纯度级别95.13％(HPLC)。

表11.-化合物质量特性：

实施例8.-IDP-P1708160和IDP-P1708161在若干癌细胞系中的抗增殖作用

1.材料和方法

模拟肽化合物的制备

将冻干的模拟肽溶解在生理血清中。

细胞系

A549，上皮(乳腺癌)，ATCC：CCL-185

MBA-MD231，上皮(乳腺癌)，ECACC：86012803

MM.1S，B成淋巴细胞(多发性骨髓瘤)，ATCC：CRL-2974

NCI-H128，上皮(小细胞肺癌)，ATCC：HTB-120^TM

细胞培养

在培养箱中在CO₂(6％)下在37℃在具有10％失活的胎牛血清(FBS)(Gibco-BRL10106-169)的DMEM高葡萄糖(Dulbecco’s Modified Eagle Solution，Gibco-BRL 31966-21)培养基中培养细胞系A549和MBA-MD231。在培养箱中在37℃在具有10％失活的胎牛血清(FBS)和2mM谷氨酰胺(Sigma G7513)的RPMI-1640(Sigma R8758)培养基中培养细胞系NCI-H128和MM.1S。

生存力测定

将细胞以10,000个细胞/孔的密度接种在96孔板中的100μl培养基中。24h后，以100μM的初始浓度以及连续稀释(1:1)加入待测化合物以计算剂量/响应曲线。对照是未处理的细胞。各实验一式三份地进行。

在24-72h期间在培养箱中在CO₂气氛下在37℃将细胞与指示浓度的化合物孵育。然后，通过MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-yl)-2,5-二苯基四氮唑溴盐)测定来测量细胞生存力。MTT的储液(475989 Calbiochem)为5mg/ml(在PBS中)。加入1x.10μl/孔的MTT溶液并将平板孵育3-4小时。弃去培养基并向各孔加入100μl的提取缓冲液(PBS 1x，15％SDS，50％NaN,N-二甲基甲酰胺，pH 4.7)。将平板在室温在回转振荡下孵育16h。最后测量570nm的吸光度。作为阴性对照(实验噪音)，用20μl/孔的在H₂O中的10％SDS溶液处理3个孔。

统计学

Y＝底部+(顶部-底部)/(1+10^{[(LogIC50-X)*HillSlope]},

其中：X是化合物浓度(对数标尺)并且Y是响应

使用GraphPad Prism(用于Windows的Prism 6)进行计算和作图。

2.结果

实验结果概述在下表中：

表12.-IC50值(μM)：

细胞系
					IDP-P1708160	IDP-P1708161	S09
MM.1S	48	33±15	6.7±1
				A549	65±17	42±6	6.3±0.5
MBA-MD231	42±2	29±2	4.9±0.3
				NCI-H128	16±1	14±1	3±1

如由这些数据可推导出的，在各种癌细胞系中，具有式(IIIa)的配体(L)(而不是S09和S14化合物中使用的)的式(I)的肽被证明提供与S09相当的良好的细胞毒性活性。

实施例9.-IDP-P1708160，IDP-P1708161和S14在耐药性多发性骨髓瘤细胞系中的效力

1.材料和方法

模拟肽化合物的制备

将冻干的模拟肽溶解在生理血清中。

细胞系:

MM1R，成淋巴细胞(骨髓瘤)，

CRL-2975^TM，耐受地塞米松

RPMI-8266，成淋巴细胞(骨髓瘤)，

CCL 155^TM

RPMI-8266-LR5，成淋巴细胞(骨髓瘤)，经选择而耐受美法仑(Bellamy WT等,Cancer Res.1991 Feb 1；51(3):995-1002).

U266DOX4，成淋巴细胞(骨髓瘤)，经选择而耐受多柔比星(

等,ClinCancer Res.2013年5月15；19(10):2677-87).

U266-LR7，成淋巴细胞(骨髓瘤)，经选择而耐受美法仑(

等,ClinCancer Res.2013年5月15；19(10):2677-87).

细胞培养

生存力测定

将细胞以10,000个细胞/孔的密度接种在96孔板中的100μl培养基中。24h后，以40μM的初始浓度以及连续稀释(1:1)加入待测化合物以计算剂量/响应曲线。对照是未处理的细胞。各实验一式三份地进行。

在24-72h期间在培养箱中在CO₂气氛下在37℃将细胞与指示浓度的模拟肽化合物孵育。然后，通过MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-yl)-2,5-二苯基四氮唑溴盐)测定来测量细胞生存力。MTT的储液(475989Calbiochem)为5mg/ml(在PBS中)。加入1x.10μl/孔的MTT溶液并将平板孵育3-4小时。弃去培养基并向各孔加入100μl的提取缓冲液(PBS 1x，15％SDS，50％Na N,N-二甲基甲酰胺，pH 4.7)。将平板在室温在回转振荡下孵育16h。最后测量570nm的吸光度。作为阴性对照(实验噪音)，用20μl/孔的在H₂O中的10％SDS溶液处理3个孔。

统计学

Y＝底部+(顶部-底部)/(1+10^{[(LogIC50-X)*HillSlope]},

其中：X是化合物浓度(对数标尺)并且Y是响应

使用GraphPad Prism(用于Windows的Prism 6)进行计算和作图。

2.结果

本研究的目的是确定IDP-P1708160，IDP-P1708161在各种多发性骨髓瘤(MM)细胞系中的体外抗增殖性质，这些细胞系中的一些已被描述为耐受MM的主要治疗中通常使用的药物。获得的对应于引起50％生长抑制的试剂浓度的IC50(μM)值概述在下表中：

表13：24小时后的IC50(以μM计的值)

细胞系	P1708160	P1708161	S14
				MM1R	15μM	12.5μM	15μM
MM1S	35μM	10μM	7μM
				RPMI	15μM	5μM	10μM
RPMI-LR5	35μM	35μM	10μM
				U266DOX4	10μM	10μM	15μM
U266LR7	2.5μM	5μM	10μM

表14：72小时后的IC50(以μM计的值)

细胞系	P1708160	P1708161	S14
				MM1R	10μM	15μM	15μM
MM1S	5μM	15μM	7μM
				RPMI	15μM	7.5μM	10μM
RPMI-LR5	7.5μM	35μM	10μM
				U266DOX4	7.5μM	5μM	15μM
U266LR7	2.5μM	5μM	10μM

因此，在耐受标准治疗的数种MM细胞系中(即，对耐受美法仑(RPMI-LR5和U266-LR7)，多柔比星(U266Dox4)和地塞米松(MM1R)的细胞系)，IDP-P1708160，IDP-P1708161和S14也显示良好的抗癌活性。

序列表

<110> IDP研发制药有限公司

萨拉曼卡大学癌症研究基金会

<120> 多发性骨髓瘤的新疗法

<130> 903 501

<150> EP 17 382 601.7

<151> 2017-09-08

<160> 14

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 肽

<220>

<221> MISC_FEATURE

<223> 其对应于化合物S09的肽序列(不带有二价基团配体)

<400> 1

Ala Pro Lys Ala Val Ile Leu Lys Lys Ala Ala Ala Tyr Ile Leu Ser

1 5 10 15

<210> 2

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 肽

<220>

<221> MISC_FEATURE

<223> 其对应于化合物S14的肽序列(不带有二价基团配体)

<400> 2

Ala Pro Lys Ala Val Ile Phe Lys Lys Ala Ala Ala Tyr Ile Leu Ser

1 5 10 15

<210> 3

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 化合物S09

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 第4位的X残基具有式(II)，其中R1是-CH3并且

其经由L二价基团-(CH2)6-CH=CH-(CH2)3-与第11位的X残基相连

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> 第11位的X残基具有(II)，其中R1是-CH3

<400> 3

Ala Pro Lys Xaa Val Ile Leu Lys Lys Ala Xaa Ala Tyr Ile Leu Ser

1 5 10 15

<210> 4

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 化合物S14

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 第4位的X残基具有式(II)，其中R1是-CH3并且

其经由L二价基团-(CH2)6-CH=CH-(CH2)3-与第11位的X残基相连

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> 第11位的X残基具有(II)，其中R1是-CH3

<400> 4

Ala Pro Lys Xaa Val Ile Phe Lys Lys Ala Xaa Ala Tyr Ile Leu Ser

1 5 10 15

<210> 5

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 化合物S19

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> 第2位的X残基具有式(II)，其中R1是-CH3并且

其经由L二价基团-(CH2)6-CH=CH-(CH2)3-与第9位的X残基相连

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> 第9位的X残基具有(II)，其中R1是-CH3

<400> 5

Ala Xaa Lys Val Val Ile Leu Lys Xaa Ala Thr Ala Tyr Ile Leu Ser

1 5 10 15

<210> 6

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 化合物S21

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> 第5位的X残基具有式(II)，其中R1是-CH3并且

其经由L二价基团-(CH2)6-CH=CH-(CH2)3-与第12位的X残基相连

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 第12位的X残基具有(II)，其中R1是-CH3

<400> 6

Ala Pro Lys Val Xaa Ile Leu Lys Lys Ala Thr Xaa Tyr Ile Leu Ser

1 5 10 15

<210> 7

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 化合物S22

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> 第6位的X残基具有式(II)，其中R1是-CH3并且

其经由L二价基团-(CH2)6-CH=CH-(CH2)3-与第13位的X残基相连

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 第13位的X残基具有(II)，其中R1是-CH3

<400> 7

Ala Pro Lys Val Val Xaa Leu Lys Lys Ala Thr Ala Xaa Ile Leu Ser

1 5 10 15

<210> 8

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 化合物S23

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> 第9位的X残基具有式(II)，其中R1是-CH3并且

其经由L二价基团-(CH2)6-CH=CH-(CH2)3-与第16位的X残基相连

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (16)..(16)

<223> 第16位的X残基具有(II)，其中R1是-CH3

<400> 8

Ala Pro Lys Val Val Ile Leu Lys Xaa Ala Thr Ala Tyr Ile Leu Xaa

1 5 10 15

Val

<210> 9

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 化合物S17

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> 第7位的X残基具有式(II)，其中R1是-CH3并且

其经由L二价基团-(CH2)6-CH=CH-(CH2)3-与第14位的X残基相连

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 第14位的X残基具有(II)，其中R1是-CH3

<400> 9

Ala Pro Lys Val Val Ile Xaa Lys Lys Ala Thr Ala Tyr Xaa Leu Ser

1 5 10 15

<210> 10

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 化合物S18

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> 第8位的X残基具有式(II)，其中R1是-CH3并且

其经由L二价基团-(CH2)6-CH=CH-(CH2)3-与第15位的X残基相连

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (15)..(15)

<223> 第15位的X残基具有(II)，其中R1是-CH3

<400> 10

Ala Pro Lys Val Val Ile Leu Xaa Lys Ala Thr Ala Tyr Ile Xaa Ser

1 5 10 15

<210> 11

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 肽

<220>

<221> MISC_FEATURE

<223> 野生型序列

<400> 11

Pro Lys Val Val Ile Leu Lys Lys Ala Thr Ala Tyr Ile

1 5 10

<210> 12

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 肽

<220>

<221> MISC_FEATURE

<223> 其对应于化合物IDP-P1708160和IDP-P1708161的肽序列(不带有二价基团

配体)

<400> 12

Ala Pro Lys Gly Val Ile Leu Lys Lys Ala Gly Ala Tyr Ile Leu Ser

1 5 10 15

<210> 13

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 化合物IDP-P1708160

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 第4位的X残基具有式(II)，其中R1是-H并且

其经由L二价基团-(CH2)-S-(CH2)8-S-(CH2)-与第11位的X残基相连

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> 第11位的X残基具有(II)，其中R1是-H

<400> 13

Ala Pro Lys Xaa Val Ile Leu Lys Lys Ala Xaa Ala Tyr Ile Leu Ser

1 5 10 15

<210> 14

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 化合物IDP-P1708161

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 第4位的X残基具有式(II)，其中R1是-H并且

其经由L二价基团-(CH2)-S-(CH2)-联苯-(CH2)-S-(CH2)-与第11位的X残基相连

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> 第11位的X残基具有(II)，其中R1是-H

<400> 14

Ala Pro Lys Xaa Val Ile Leu Lys Lys Ala Xaa Ala Tyr Ile Leu Ser

1 5 10 15

Claims

1.式(I)的化合物：

其中X₄是氨基酸，优选为Leu；

其中X₅是氨基酸，优选为Ser；

其中X₁和X₃是独立选择的并且具有式(II)：

包含3至14个碳原子的环系，所述环系包含1至3个环，其中：

每一个所述环是饱和的，部分不饱和的，或芳香性的；

所述环是分开的，部分或完全稠合的，

形成所述环系的每一个成员选自由以下各项组成的组：-CH-，-CH₂-，-NH-，-N-，-SH-，-S-，和-O-；并且

其中L是经由α碳与X₁和X₃相连的二价基团，并且选自由以下各项组成的组：-O-，O-(C₁-C₁₀)烷基-O-，O-(C₁-C₁₀)烯基-O-，C(＝O)，C(＝O)NR₅，C(＝O)O，NR₆，S-S-，S-(C₁-C₁₀)烷基-S，S-(C₁-C₁₀)烯基-S-和由3至6个成员的一个环组成的环系，所述环：

是饱和的，部分不饱和的，或芳香性的；

所述式(I)的化合物用于治疗患有多发性骨髓瘤的对象的方法中，所述对象优选为人。

2.根据权利要求1所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中X₂选自由以下各项组成的组：Leu和Phe；优选地X₁和X₃选自Ala和Gly，并且其中L具有式(IIIa)：

-(CH₂)_y-P-(CH₂)_a-(Q)_b-(CH₂)_c-(V)_d-(CH₂)_z-

(IIIa)

其中

y和z是各自独立地选自1至10的整数值；

a和c是各自独立地选自0至10的整数值；并且

b和d是各自独立地选自0至3的整数值。

3.根据权利要求1或2中任一项所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中X₂选自由以下各项组成的组：Leu和Phe；并且其中L具有式(IIIb)：

-(CH₂)_y-CH＝CH-(CH₂)_z-

(IIIb)

4.根据权利要求1至3中任一项所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述化合物选自由以下各项组成的组：S09(SEQ ID NO:3)，S14(SEQ ID NO:4)，及其组合。

5.根据权利要求1或2中任一项所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中X₂选自由以下各项组成的组：Leu和Phe；并且其中L具有式(IIIc)：

优选地，其中，P和V各自独立地选自由以下各项组成的组：O和S；y和z是1；a选自1或6至10；b是0或1；并且c是0或1。

6.根据权利要求1-2或5中任一项所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述化合物选自由以下各项组成的组：IDP-P1708160(SEQ ID NO:13)，IDP-P1708161(SEQ ID NO:14)，及其组合。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述多发性骨髓瘤是顽固性，难治性或复发性多发性骨髓瘤，优选地其中所述多发性骨髓瘤对于在先的治疗是顽固性，难治性或复发性的。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述治疗包括将式(I)的化合物与另一种药物组合施用。

9.根据权利要求8所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述另一种药物选自由以下各项组成的组：烷基化剂，皮质类固醇，蛋白酶体抑制剂，及其组合。

10.根据权利要求9所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中所述治疗包括施用式(I)的化合物，皮质类固醇和选自由以下各项组成的组的药物：烷基化剂，蛋白酶体抑制剂，及其组合。

11.根据权利要求9或10中任一项所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，

其中所述烷基化剂选自由以下各项组成的组：氮芥，亚硝基脲和烷基磺酸盐，优选为氮芥，更优选为环磷酰胺；

其中所述皮质类固醇选自由以下各项组成的组：地塞米松，泼尼松龙和甲基泼尼松龙，优选为地塞米松；并且

其中所述蛋白酶体抑制剂选自由以下各项组成的组：硼替佐米，卡非佐米和伊沙佐米，优选为硼替佐米。

12.根据权利要求11所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中式(I)的化合物被用于选自由以下各项组成的组的组合治疗：

-式(I)的化合物+硼替佐米；

-式(I)的化合物+环磷酰胺；

-式(I)的化合物+地塞米松；

-式(I)的化合物+硼替佐米+地塞米松；以及

-式(I)的化合物+环磷酰胺+地塞米松。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中式(I)的化合物在治疗周期的每周的第1至7天施用，优选地每天一次或两次，并且另一种抗癌药在治疗周期的每周的第1天和第4天施用，优选地每天一次。

14.根据权利要求1至12中任一项所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中式(I)的化合物在治疗周期的每周的第1天，第3天和第5天施用，优选地每天一次，并且另一种抗癌药在治疗周期的每周的第1天和第4天施用，优选地每天一次。

15.根据权利要求1至12中任一项所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中式(I)的化合物在治疗周期的每周的第1天和第4天施用，优选地每天一次，并且另一种抗癌药在治疗周期的每周的第1天和第4天施用，优选地每天一次。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的用于治疗方法的式(I)的化合物，其中式(I)的化合物被配制成以0.1mg/kg至1mg/kg的剂量，优选地以0.25mg/kg至0.5mg/kg的剂量施用；并且

其中，优选地，式(I)的化合物被配制成用于肠胃外施用，优选地用于静脉内，肌肉内，腹膜内，胸膜内或静脉内施用，更优选地用于静脉内施用。

17.药物组合物，其包含如权利要求1至6中任一项所限定的式(I)的化合物，以及药学上可接受的载体或赋形剂，所述药物组合物用于根据权利要求1至16中任一项所述的治疗方法中。

18.药物组合物，其包含如权利要求1至6中任一项所限定的式(I)的化合物、另一种药物、以及药学上可接受的载体或赋形剂，所述药物组合物用于根据权利要求8至16中任一项所述的治疗方法。