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CN111333626B - 苯基吡咯烷类化合物及其用途 - Google Patents

苯基吡咯烷类化合物及其用途 Download PDF

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CN111333626B CN201911303362.7A CN201911303362A CN111333626B CN 111333626 B CN111333626 B CN 111333626B CN 201911303362 A CN201911303362 A CN 201911303362A CN 111333626 B CN111333626 B CN 111333626B
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Abstract

本发明提供了一种化合物，其为式(A)所示化合物或式(A)所示化合物的互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、盐或前药R为
Figure DDA0002322426350000011
R1和R2分别独立选自H、C1‑C10烷基、C3‑C10环烷基、C1‑C10烷氧基、卤素和‑CN；和R3、R4和R5分别独立选自C1‑C10烷基、C3‑C10环烷基、C1‑C10烷氧基、卤素和‑CN，前提是，当R1为‑CH3、Cl或‑CN时，R2不为H，当R1为H时，R2不为H、‑CN或‑CH3。

Description

苯基吡咯烷类化合物及其用途
相关申请的交叉引用
本申请基于下列申请提出，并要求这些中国专利申请的优先权，这些中国专利申请的全部内容在此引入本申请作为参考：
申请号为：201910806179.2，申请日为2019年8月28日的中国专利申请；和
申请号为：201811553504.0，申请日为2018年12月18日的中国专利申请。
技术领域
本发明涉及化学及医药领域，具体的，本发明涉及新型的苯基吡咯烷类化合物及其用途。
背景技术
磷酸二酯酶(缩写为PDE)，也被称为3',5'-环核苷酸磷酸二酯酶，能够催化cAMP(环腺苷酸)发生水解反应以生成5'-AMP(5'-腺苷一磷酸)，或者催化cGMP(环鸟苷酸)发生水解反应以生成5'-GMP(5'-鸟苷一磷酸)。目前已经鉴别了11种磷酸二酯酶，其中，PDE4、PDE7和PDE8对于cAMP具有特异性。对于在免疫和炎性细胞如嗜中性粒细胞、巨噬细胞和T-淋巴细胞中所表达的cAMP，PDE4是最重要的调节剂。cAMP是调节炎性反应的关键第二信使，据报道PDE4也能够通过调节促炎细胞因子例如TNFα、IL-2、IFN-γ、GM-CSF和LTB4来调节炎性细胞的炎性反应。通过抑制PDE4，能够有效治疗哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、类风湿性关节炎、特应性皮炎、炎性肠病如克罗恩氏病(Crohn’s disease)、特应性皮炎(AD)等炎性疾病。
已知，PDE4分为PDE4A、PDE4B、PDE4C、PDE4D四个亚型，其中，抑制PDE4D会导致诸如呕吐等副反应，而选择性地抑制PDE4B能改善呕吐等副作用的发生。
另外，环核苷酸(cAMP和cGMP)也是调节平滑肌的收缩性的重要第二信使。PDE能够水解环核苷酸，并且在调节细胞内环核苷酸的水平和作用持续时间中发挥重要作用。抑制PDE的化合物可以提升环核苷酸的细胞水平并松弛多种类型的平滑肌。研究表明PDE4是cAMP特异性的，并且在膀胱中大量表达。WO2016040083A1公开了氮杂环丁烷基氧基苯基吡咯烷类化合物，据称这些化合物作为PDE4抑制剂，并可用于治疗膀胱过度活动症(OAB)，包括相关症状例如尿频和尿急和其他病症的缓解。
目前炎性疾病、变应性疾病、自身免疫性疾病等领域的治疗取得了一定的进展，但仍有待进一步开发新型的药物，以作为目前药物的改进或者替换。
发明内容
本发明旨在提出一种能够有效抑制PDE4的化合物，其能过作为目前药物或者PDE4抑制的改进或者替换。
为此，在本发明的第一方面，本发明提出了一种化合物，其为式(A)所示化合物或式(A)所示化合物的互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、盐或前药：
Figure BDA0002322426330000021
其中，
R为
Figure BDA0002322426330000022
R1和R2分别独立选自H、C1-C10烷基、C3-C10环烷基、C1-C10烷氧基、卤素和-CN；和
R3、R4和R5分别独立选自C1-C10烷基、C3-C10环烷基、C1-C10烷氧基、卤素和-CN，
前提是，
当R1为-CH3、Cl或-CN时，R2不为H，
当R1为H时，R2不为H、-CN或-CH3。
根据本发明的实施例，上述化合物还可以具有下列附加技术的至少之一：
根据本发明的实施例，R1、R3、R4和R5分别独立地选自卤素、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基、卤素和-CN。
根据本发明的实施例，R1、R3、R4和R5分别独立地选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、卤素和-CN。
根据本发明的实施例，R2选自卤素、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基、卤素和-CN。
根据本发明的实施例，R2选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、卤素和-CN。
根据本发明的实施例，所述卤素为F、Cl、Br或I。
根据本发明的实施例，R1选自-CH3、-CF3、-CH2CH3、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、环丙基、F、Cl、Br或-CN；R2选自H、-CH3、-CH2CH3、F、Cl、-CN；或者R3、R4和R5各自独立选自-CH3、-CF3、-CH2CH3、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、环丙基、F、Cl、Br或-CN。
根据本发明的实施例，R1和R2各自独立选自H、C1-C6烷基、C1-C6环烷基、C1-C6烷氧基、F、Cl、Br、I、-CN，R3、R4和R5各自独立选自C1-C6烷基、C1-C6环烷基、C1-C6烷氧基、F、Cl、Br、I、-CN，条件是当R1为-CH3、Cl、-CN时，R2不为H，且当R1为H时，R2不为H、-CN、-CH3。
根据本发明的实施例，R1选自-CH3、-OCH3、-OCH2CH3、F、Cl、-CN，R2选自H、-CH3、F、Cl、-CN，条件是当R1为-CH3、Cl、-CN时，R2不为H原子；
R3选自C1-C6的烷基、C1-C6的环烷基、F、Cl、Br、I，优选甲基、乙基、氯原子；
R4选自-CH3、-OCH3、F、Cl、-CN，优选Cl、-CN；
R5选自C1-C6烷氧基，优选甲氧基。
R1和R2各自独立选自H、C1-C10烷基、C3-C10环烷基、C1-C10烷氧基、F、Cl、Br、I、-CN，R3、R4和R5各自独立选自C1-C10烷基、C3-C10环烷基、C1-C10烷氧基、F、Cl、Br、I、-CN，条件是当R1为-CH3、Cl、-CN时，R2不为H，且当R1为H时，R2不为H、-CN、-CH3。
根据本发明的实施例，R1选自-CH3、-CH2CH3、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、F、Cl、-CN；所述R2选自H、-CH3、-CH2CH3、F、Cl、-CN；条件是当R1为-CH3、Cl、-CN时，R2不为H原子。
根据本发明的实施例，R3选自C1-C10的烷基、C3-C10的环烷基、F、Cl、Br、I，优选甲基、乙基、氯原子。
根据本发明的实施例，R4选自-CH3、-OCH3、F、Cl、-CN，优选Cl、-CN。
根据本发明的实施例，R5选自C1-C10烷氧基，优选甲氧基。
根据本发明的实施例，所述化合物为下列所示化合物或下列所示化合物的互变异构体、立体异构体、水合物、溶剂化物、药学可接受的盐或前药：
Figure BDA0002322426330000031
Figure BDA0002322426330000041
Figure BDA0002322426330000051
Figure BDA0002322426330000061
根据本发明的实施例，所述盐包括药学上可以接受的盐，选自下列的至少之一：硫酸、磷酸、硝酸、氢溴酸、盐酸、甲酸、乙酸、丙酸、苯磺酸、苯甲酸、苯乙酸、水杨酸、褐藻酸、氨茴酸、樟脑酸、柠檬酸、乙烯磺酸、蚁酸、富马酸、糠酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、乙醇酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、粘液酸、双羟萘酸、泛酸、硬脂酸、琥珀酸、磺胺酸、酒石酸、对甲苯磺酸、丙二酸、2-羟基丙酸、草酸、羟乙酸、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、枸橼酸、赖氨酸、精氨酸、门冬氨酸、肉桂酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸或三氟甲磺酸。本领域技术人员能够理解的是，除了药学可接受的盐外，本发明还可以采用其他的盐类型，可以用于在化合物纯化中或在制备其它药学上可以接受的盐中充当中间体或可用于本发明化合物的鉴别、表征或纯化。
在本发明的第二方面，本发明提出了一种药物组合物，其包括：前面所述的化合物作为活性成分；以及可选的其他药物，所述其他药物用于治疗或者预防选自下列的至少之一：PDE4相关疾病、炎性疾病、变应性疾病、自身免疫性疾病、移植排斥反应、关节炎性疾病、皮肤炎性疾病、炎症性肠病以及与平滑肌收缩性相关疾病、哮喘、慢性支气管炎、慢性阻塞性肺炎、变应性鼻炎、呼吸窘迫综合征、成人呼吸窘迫综合征、特发性皮炎、银屑病、荨麻疹、类风湿性关节炎、骨关节炎、痛风性关节炎或脊椎炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病和膀胱过度活动症、尿频和尿急。根据本发明的实施例，该药物组合物还包括药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
在本发明的第三方面，本发明提出了前面所述的化合物或者药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或者预防PDE4相关疾病。
在本发明的第四方面，本发明提出了前面所述的化合物或者药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或者预防选自下列的至少之一：炎性疾病、变应性疾病、自身免疫性疾病、移植排斥反应、关节炎性疾病、皮肤炎性疾病、炎症性肠病以及与平滑肌收缩性相关疾病、哮喘、慢性支气管炎、慢性阻塞性肺炎、变应性鼻炎、呼吸窘迫综合征、成人呼吸窘迫综合征、特发性皮炎、银屑病、荨麻疹、类风湿性关节炎、骨关节炎、痛风性关节炎或脊椎炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病和膀胱过度活动症、尿频和尿急。
在本发明的第五方面，本发明提出了一种药物联合，包括：权利要求1～9任一项所述的化合物作为活性成分；以及其他药物，所述其他药物用于治疗或者预防选自下列的至少之一：PDE4相关疾病、炎性疾病、变应性疾病、自身免疫性疾病、移植排斥反应、关节炎性疾病、皮肤炎性疾病、炎症性肠病以及与平滑肌收缩性相关疾病、哮喘、慢性支气管炎、慢性阻塞性肺炎、变应性鼻炎、呼吸窘迫综合征、成人呼吸窘迫综合征、特发性皮炎、银屑病、荨麻疹、类风湿性关节炎、骨关节炎、痛风性关节炎或脊椎炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病和膀胱过度活动症、尿频和尿急。
根据本发明的实施例，利用本发明的化合物、药物组合物或者药物联合，可以为有需要的患者提供更优、更有效的临床治疗药物或方案。根据本发明的实施例，本发明提出了一系列结构新颖、特异性强、药效优良、生物利用度高或成药性好的PDE4抑制剂，能够有效地治疗PDE4相关的疾病或病症，包括但不限于炎性疾病、变应性疾病、自身免疫性疾病、移植排斥反应、关节炎性疾病、皮肤炎性疾病、炎症性肠病以及与平滑肌收缩性相关的疾病等。
进一步，本发明涉及通式(A)所示的化合物、其立体异构体、水合物、溶剂化物、药学可接受的盐、前药，在制备治疗与磷酸二酯酶-4(PDE4)有关疾病的药物中的用途。
本发明的优选方案，其中与磷酸二酯酶-4(PDE4)有关的疾病选自炎性疾病、变应性疾病、自身免疫性疾病、移植排斥反应、关节炎性疾病、皮肤炎性疾病、炎症性肠病以及与平滑肌收缩性相关的疾病。
本发明的优选方案，其中变应性疾病选自哮喘、慢性支气管炎、慢性阻塞性肺炎、变应性鼻炎、成人呼吸窘迫综合征。
本发明的优选方案，其中皮肤炎性疾病选自特发性皮炎、银屑病、或荨麻疹。
本发明的优选方案，其中关节炎性疾病选自类风湿性关节炎、骨关节炎、痛风性关节炎或脊椎炎。
本发明的优选方案，其中炎症性肠病选自溃疡性结肠炎和克罗恩病。
本发明的优选方案，其中与平滑肌收缩性相关的疾病选自膀胱过度活动症及其相关症状例如尿频和尿急。
本发明还涉及治疗与磷酸二酯酶-4(PDE4)有关的疾病方法，该方法包括给以患者治疗上有效剂量的包含本发明所述化合物或其药学上可接受的盐的药物制剂。
术语定义和说明
除非另有说明，本申请说明书和权利要求书中记载的基团和术语定义，包括其作为实例的定义、示例性的定义、优选的定义、表格中记载的定义、实施例中具体化合物的定义等，可以彼此之间任意组合和结合。这样的组合和结合后的基团定义及化合物结构，应当属于本申请说明书记载的范围内。
术语“药学上可接受的盐”是指药学上可接受的无毒酸或碱的盐，包括无机酸和碱、有机酸和碱的盐。衍生自无机碱的盐包括但不限于Al、Ca、Li、Mg、K、Na和Zn形成的金属盐；衍生自有机碱的盐包括但不限于伯胺、仲胺或叔胺的盐，包括天然存在的取代或未取代的胺、环胺和碱性离子交换树脂，例如铵、异丙基胺、三甲基胺、二乙胺、三乙胺、三丙基胺、二乙醇胺、乙醇胺、二甲基乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二环己基胺、咖啡碱、普鲁卡因、胆碱、甜菜碱、苯明青霉素、乙二胺、葡萄糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、三乙醇胺、氨丁三醇、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶或聚胺树脂形成的有机盐；衍生自无机酸和有机酸的盐包括但不限于硫酸、磷酸、硝酸、氢溴酸、盐酸、甲酸、乙酸、丙酸、苯磺酸、苯甲酸、苯乙酸、水杨酸、褐藻酸、氨茴酸、樟脑酸、柠檬酸、乙烯磺酸、蚁酸、富马酸、糠酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、乙醇酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、粘液酸、双羟萘酸、泛酸、硬脂酸、琥珀酸、磺胺酸、酒石酸、对甲苯磺酸、丙二酸、2-羟基丙酸、草酸、羟乙酸、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、枸橼酸、赖氨酸、精氨酸、门冬氨酸、肉桂酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸或三氟甲磺酸等形成的有机盐。
术语“立体异构体”是指由分子中原子在空间上排列方式不同所产生的异构体，包括顺反异构体、对映异构体、非对应异构体和构象异构体。
术语“互变异构体”是指因分子中某一原子在两个位置迅速移动而产生的官能团异构体。本发明化合物可表现出互变异构现象。互变异构的化合物可以存在两种或多种可相互转化的种类。质子移变互变异构体来自两个原子之间共价键合的氢原子的迁移。互变异构体一般以平衡形式存在，尝试分离单一互变异构体时通常产生一种混合物，其理化性质与化合物的混合物是一致的。平衡的位置取决于分子内的化学特性。例如，在很多脂族醛和酮如乙醛中，酮型占优势；而在酚中，烯醇型占优势。本发明包含化合物的所有互变异构形式。
术语“药物组合物”表示一种或多种文本所述化合物或其生理学/药学上可接受的盐或前体药物与其它化学组分的混合物，其它组分例如生理学/药学上可接受的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进化合物对生物体的给药。
术语“溶剂化物”指本发明化合物或其盐包括以分子间非共价力结合的化学计量或非化学计量的溶剂，当溶剂为水时，则为水合物。
术语“前药”是指可以在生理条件下或者通过溶剂解转化为具有生物活性的本发明化合物。本发明的前药通过修饰在该化合物中的功能基团来制备，该修饰可以按常规的操作或者在体内被除去，而得到母体化合物。前药包括本发明化合物中的一个羟基或者氨基连接到任何基团上所形成的化合物，当本发明化合物的前药被施予哺乳动物个体时，前药被割裂而分别形成游离的羟基、游离的氨基。
在本文中，如无特别说明，“烷基”是指直链或支链饱和一价烃基，其中，烃基的一个或者多个氢原子可以被卤素例如F、Br或者Cl取代，具体的示例是一个碳原子或者多个碳原子上的氢可以被卤素例如F、Br或者Cl取代，这些被取代的烃基仍可以被理解为属于“烷基”的范畴。例如，术语“C1-C10烷基”可以理解为表示具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子的直链或支链饱和一价烃基。所述烷基是例如甲基、三氟甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、1，2-二甲基丙基、新戊基、1，1-二甲基丙基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、2-乙基丁基、1-乙基丁基、3，3-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，1-二甲基丁基、2，3-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基或1，2-二甲基丁基等或它们的异构体。特别地，所述基团具有1、2、3、4、5、6个碳原子(“C1-6烷基”或“C1-C6烷基”)，例如甲基、三氟甲基、乙基、丙基、丁基、异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基，更特别地，所述基团具有1、2或3个碳原子(“C1-3烷基”或“C1-C3烷基”)，例如甲基、三氟甲基、乙基、正丙基或异丙基。
在本文中，如无特别说明，“环烷基”应理解为表示饱和的一价单环或双环烃环，其中，烃环的一个或者多个氢原子可以被卤素例如F、Br或者Cl取代，具体的示例是一个碳原子或者多个碳原子上的氢可以被卤素例如F、Br或者Cl取代，这些被取代的烃环仍可以被理解为属于“环烷基”的范畴。例如，术语“C3-C10环烷基”可以理解为表示饱和的一价单环或双环烃环，其具有3～10个碳原子。如环庚基、环辛基、环壬基或环癸基，或者是双环烃基如十氢化萘环。特别地，环烷基可以具有3、4、5、6个碳原子(“C3-6环烷基”或“C3-C6环烷基”)，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基。
在本文中，如无特别说明，术语“烷氧基”应理解为表示饱和的直链或支链烷，经氧原子键连接到其他基团上，其中，一个或者多个氢原子可以被卤素例如F、Br或者Cl取代，具体的示例是一个碳原子或者多个碳原子上的氢可以被卤素例如F、Br或者Cl取代，这些被取代的基团仍可以被理解为属于“环烷基”的范畴。具体的，术语“C1-C10烷氧基”可以理解为表示饱和的具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个碳原子的直链或支链烷基，经氧原子键连接到结构上，例如甲氧基(-OCH3)、(-OCF3)-O-(CH2)9-CH3。特别地，所述基团具有1、2、3、4、5、6个碳原子(“C1-6烷氧基”或“C1-C6烷氧基”)，例如-O-(CH2)5-CH3。
术语“辅料”是指可药用惰性成分。术语“赋形剂”的种类实例非限制性地包括粘合剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、稳定剂、填充剂和稀释剂等。赋形剂能增强药物制剂的操作特性，即通过增加流动性和/或粘着性使制剂更适于直接压缩。适用于上述制剂的典型的“药学上可接受的载体”的实例为：糖类，例如乳糖、蔗糖、甘露醇和山梨醇；淀粉类，例如玉米淀粉、木薯淀粉和土豆淀粉；纤维素及其衍生物，例如羧甲基纤维素钠，乙基纤维素和甲基纤维素；磷酸钙类，例如磷酸二钙和磷酸三钙；硫酸钠；硫酸钙；聚乙烯吡咯烷酮；聚乙烯醇；硬脂酸；硬脂酸碱土金属盐，例如硬脂酸镁和硬脂酸钙；硬脂酸；植物油类，例如花生油、棉籽油、芝麻油、橄榄油和玉米油；非离子、阳离子和负离子表面活性剂；乙二醇聚合物；脂肪醇类；和谷物水解固形物以及其它无毒的可相容的填充剂、粘合剂、崩解剂、缓冲剂、防腐剂、抗氧剂、润滑剂、着色剂等在药物制剂中常用到的辅料。
本发明还涉及一种制备本发明通式(A)化合物的方法，该方法包括：
Figure BDA0002322426330000101
其中R选自
Figure BDA0002322426330000102
R1、R2、R3、R4和R5的定义如上文所述；X为卤素，如-Cl、-Br、-I等；式(IV)的结构为
Figure BDA0002322426330000111
其中，式(I)化合物在催化剂条件下与氮杂环丁基-3-醇或其盐发生偶联反应得到式(II)化合物；式(II)化合物与甲基磺酰氯反应得到式(III)化合物，式(III)化合物进一步与式(IV)化合物发生亲核取代反应得到式(V)化合物，式(V)化合物在酸性条件下脱去保护剂得到目标化合物(A)。
式(IV)的合成路线和制备方法参考专利申请WO2001047905A1、CN106795137A以及期刊文献Nichols,P.J.；DeMattei,J.A.Org.Lett.2006,8,1495-1498所公开的合成方法。
根据本发明的实施例，本发明：
1)提供了结构新颖、药代动力学性质优良、药效或成药性好的PDE4抑制剂，可以用于有效治疗PDE4相关的疾病、病症；
2)本发明的实施例，相对于PDE4D型，本发明的化合物对PDE4B型的选择性抑制活性更为显著，与阳性对照组化合物相比，本发明化合物具有更好的PDE4B选择性，能显著改善因PDE4D型抑制导致的胃肠道副作用如呕吐等。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
附图说明
本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
图1显示了测试例5中所得到的的临床评分和临床评分AUC抑制率示意图。
具体实施方式
下面通过实施例详细说明发明的技术方案，但本发明的保护范围包括但不限于此。
如无特别说明，本发明的化合物均是通过核磁共振(NMR)和/或质谱(MS)来确定其结构的。NMR位移的单位为10-6(ppm)。NMR测定的溶剂为氘代二甲基亚砜、氘代氯仿、氘代甲醇等，内标为四甲基硅烷(TMS)。
本发明的缩写定义如下：
Ms：甲磺酰基；LPS：内毒素；PBMC：外周血单核细胞；TNFα：肿瘤坏死因子α；PBS：磷酸盐缓冲液；FBS：胎牛血清；“IC50”指半数抑制浓度，指达到最大抑制效果一半时的浓度。
实施例1：目标化合物001的制备
2-(3-(5-((3S,4S)-1-((S)-2,3-二羟基丙酰基)-4-((R)-1-羟乙基)-4-甲基吡咯烷-3-基)-2-甲氧基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基)-5-甲基异烟腈(目标化合物001)
2-(3-(5-((3S,4S)-1-((S)-2,3-dihydroxypropanoyl)-4-((R)-1-hydroxyethyl)-4-methylpyrrolidi n-3-yl)-2-methoxyphenoxy)azetidin-1-yl)-5-methylisonicotinonitrile
Figure BDA0002322426330000121
目标化合物001的合成路线如下所示：
Figure BDA0002322426330000122
第一步：1-(4-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-醇(001B)的合成
1-(4-chloro-5-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-ol
Figure BDA0002322426330000131
室温下，将2-溴-4-氯-5-甲基吡啶(001A)(5g，25mmol)加至150mL的DMSO中，依次加入氮杂环丁烷-3-醇盐酸盐(4.1g，37.5mmol)、碘化亚铜(1g，5.1mmol)、L-脯氨酸(1.15g，10mmol)和碳酸钾(10.4g，75mmol)，将反应液加热至90℃并在氮气保护下搅拌过夜。将反应液冷却至室温，加入蒸馏水(600mL)稀释，用乙酸乙酯(200mL×3)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水洗涤(200mL×2)，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得固体状化合物1-(4-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-醇(001B)(4.2g，产率84％)。
LC-MS,M/Z(ESI):200(M+1)
第二步：2-(3-羟基氮杂环丁基-1-基)-5-甲基异烟碱腈(001C)的合成
2-(3-hydroxyazetidin-1-yl)-5-methylisonicotinonitrile
Figure BDA0002322426330000132
将1-(4-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-醇(001B)(30mg，0.15mmol)溶于DMA(4mL)中，加入氰化锌(53mg，0.45mmol)，四三苯基膦钯(35mg，0.03mmol)，氮气保护下微波加热至120℃继续反应2h。冷却至室温，减压浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得标题化合物2-(3-羟基氮杂环丁基-1-基)-5-甲基异烟碱腈(001C)(10mg，产率34.7％)。
LC-MS,M/Z(ESI):190(M+1)
第三步：1-(4-氰基-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-甲基磺酸酯(001D)的合成
1-(4-cyano-5-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl methanesulfonate
Figure BDA0002322426330000133
将2-(3-羟基氮杂环丁基-1-基)-5-甲基异烟碱腈(001C)(110mg，0.58mmol)加入到二氯甲烷(5mL)中，加入三乙胺(176mg，1.7mmol)并冷却至0℃，加入甲基磺酰氯(100mg，0.87mmol)后室温搅拌2h。加入二氯甲烷(20mL)稀释，有机相用去离子水(20mL×3)洗涤，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得白色固体化合物1-(4-氰基-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-甲基磺酸酯(001D)，(130mg，产率84％)。
第四步：2-(3-(5-((3S，4S)-1-((S)-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-羰基)-4-((R)-1-羟乙基)-4-甲基吡咯-3-基)-2-甲氧基苯氧基)氮杂环丁基-1-基)-5-甲基异烟腈(001E)的合成
2-(3-(5-((3S,4S)-1-((S)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolane-4-carbonyl)-4-((R)-1-hydroxyethyl)-4-methylpyrrolidin-3-yl)-2-methoxyphenoxy)azetidin-1-yl)-5-methylisonicotinonitrile
Figure BDA0002322426330000141
将化合物((S)-2,2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)((3S,4S)-4-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-(3-(R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(化合物IV)(150mg，0.39mmol)加入至DMF(2mL)中，加入磷酸钾(339mg，1.6mmol)后，加热至90℃并搅拌0.5h，冷却至40℃，加入1-(4-氰基-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-甲基磺酸酯(001D)(130mg，0.48mmol)，加热至90℃，搅拌过夜。冷却至室温，加入蒸馏水(10mL)稀释，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(10mL×2)洗，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得固体化合物2-(3-(5-((3S,4S)-1-((S)-2，2-二甲基-1,3-二氧杂环戊烷-4-羰基)-4-((R)-1-羟乙基)-4-甲基吡咯-3-基)-2-甲氧基苯氧基)氮杂环丁基-1-基)-5-甲基异烟腈(001E)(93mg，产率34％)。
LC-MS,M/Z(ESI):551(M+1)。
第五步：2-(3-(5-((3S,4S)-1-((S)-2,3-二羟基丙酰基)-4-((R)-1-羟乙基)-4-甲基吡咯烷-3-基)-2-甲氧基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基)-5-甲基异烟腈(目标化合物001)的合成
2-(3-(5-((3S,4S)-1-((S)-2,3-dihydroxypropanoyl)-4-((R)-1-hydroxyethyl)-4-methylpyrrolidin-3-yl)-2-methoxyphenoxy)azetidin-1-yl)-5-methylisonicotinonitrile
Figure BDA0002322426330000142
将2-(3-(5-((3S，4S)-1-((S)-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-羰基)-4-((R)-1-羟乙基)-4-甲基吡咯烷3-基)-2-甲氧基苯氧基)氮杂环丁基-1-基)-5-甲基异烟腈(001E)(82mg，0.15mmol)溶于四氢呋喃(4mL)，加入1N盐酸(2mL)，室温搅拌过夜。用饱和碳酸氢钠水溶液调节pH＝8-9，用乙酸乙酯(15mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(纯乙酸乙酯)得到固体状的目标化合物2-(3-(5-((3S，4S)-1-((S)-2，3-二羟基丙酰基)-4-((R)-1-羟乙基)-4-甲基吡咯烷-3-基)-2-甲氧基苯氧基)氮杂环丁烷-1-基)-5-甲基异烟腈(目标化合物001)(20mg，收率26％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.19(s,1H),6.96-6.86(m,3H),6.68(s,1H),5.13(q,1H),4.90(m,2H),4.76(m,1H),4.39(s,2H),4.24(m,1H),3.91(m,3H),3.75(s,3H),3.65-3.34(m,6H),2.29(s,3H),1.02(d,3H),0.64(s,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):511(M+1)。
实施例2：目标化合物002的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(4-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮(目标化合物002)
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(4-chloro-5-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
以4-氯-2-溴-5-甲基吡啶(002A)为起始原料，参照化合物001的制备方法中的第一步、第三步～第五步所述的方法制备得到目标化合物002。具体的制备路线及方法如下所示：
Figure BDA0002322426330000151
第一步：(1-4-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(002B)的合成
1-(4-c hloro-5-met hylpyridin-2-yl)azetidin-3-ol
将4-氯-2-溴-5-甲基吡啶(002A)(5.0g，25mmol)加入至DMSO(150mL)中，依次加入氮杂环丁基-3-醇盐酸盐(4.1g，37.5mmol)、碘化亚铜(975mg，5mmol)、L-脯氨酸(1.15g，10mmol)和碳酸钾(10.4g，75mmol)，将反应液加热至90℃并在氮气保护下搅拌过夜。反应液冷却至室温，加入去离子水(650mL)稀释，用乙酸乙酯(150mL×3)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(200mL×2)洗涤后分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得到固体化合物1-(4-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(002B)(4g，产率83％)。
LC-MS,M/Z(ESI):199[M+1]。
第二步：1-(4–氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-甲基磺酸酯(002C)的合成1-(4-chloro-5-met hylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl met hanesulfonate
将1-(4-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(002B)(4g，20mmol)溶入到二氯甲烷(50mL)中，加入三乙胺(8.4mL，60mmol)后将反应液冷却至0℃，滴加甲基磺酰氯(2.3mL，30mmol)后升至室温搅拌2h。加入二氯甲烷(100mL)稀释，用去离子水(60mL×3)洗涤，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得淡黄色液体化合物1-(4–氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-甲基磺酸酯(002C)(3.5g，产率63％)。
第三步：((3S，4S)-4-(3-((1-(4-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)((S)-2，2-二甲基-1，3-二氧环戊-4-基)甲酮(002D)的合成
((3S,4S)-4-(3-((1-(4-chloro-5-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)((S)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)met hanone
将化合物((S)-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)((3S，4S)4–(3-羟基-4-甲氧基苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(3.5g，9.3mmol)溶入DMF(70mL)，加入磷酸钾(7.9g，37.2mmol)并将反应液加热至90℃反应0.5h。反应液冷却至40℃，加入1-(4–氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-甲基磺酸酯(002C)(3.07g，1.1mmol)，加热至90℃搅拌过夜。冷却至室温，加入去离子水(400mL)稀释，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(100mL×2)洗涤，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得固体化合物((3S，4S)-4-(3-((1-(4-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)((S)-2，2-二甲基-1，3-二氧环戊-4-基)甲酮(002D)(2.1g，产率41％)。
LC-MS，M/Z(ESI):560[M+1]。
第四步：(S)-1-((3S，4S)-4-(3-((1-((3-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-2-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2，3-二羟基丙烷-1-酮(目标化合物002)的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(3-chloro-5-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
将((3S，4S)-4-(3-((1-(4-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)((S)-2，2-二甲基-1，3-二氧环戊-4-基)甲酮(002D)(2.1g，3.75mmol)溶于四氢呋喃(20mL)，加入1N盐酸(10mL)并室温搅拌过夜。加入饱和碳酸氢钠水溶液调节p H＝8-9，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(纯乙酸乙酯)，得到固体状目标化合物(S)-1-((3S，4S)-4-(3-((1-((3-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-2-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2，3-二羟基丙烷-1-酮(002)(1.6g，82％)。
1H NMR(400M Hz,DMSO-d6)δ7.99(s,1H),6.95(q,2H),6.68(s,1H),6.59(s,1H),5.11(q,1H),4.91(q,2H),4.76(q,1H),4.36(q,2H),4.25(q,1H),3.91(m,2H),3.75(s,3H),3.73-3.34(m,6H),2.16(s,3H),1.00(d,3H),0.64(s,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):520(M+1)。
实施例3：目标化合物003的制备
6-(3-(5-((3S，4S)-1-((S)-2，3-二羟丙酰基)-4-((R)-1-羟乙基)-4-甲基吡咯烷-3-基)-2-甲氧基苯氧基)氮杂环丁-1-基)-3-甲基烟碱腈
6-(3-(5-((3S,4S)-1-((S)-2,3-dihydroxypropanoyl)-4-((R)-1-hydroxyethyl)-4-methylpyrrolidi n-3-yl)-2-methoxyphenoxy)azetidin-1-yl)-3-methylpicolinonitrile
Figure BDA0002322426330000171
以6-溴-3-甲基-2-氰基吡啶(003A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物003。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.64(q,1H),6.96-6.87(m,2H),6.75(d,1H),6.69(s,1H),5.12(q,1H),4.41(s,2H),4.25(m,1H),3.95(m,3H),3.76(s,3H),3.66-3.48(m,7H),2.33(s,3H),1.02(d,3H),0.65(s,3H).
LC-MS,M/Z(ESI):511(M+1)。
实施例4：目标化合物004的制备
(S)-1-((3S，4S)-4-(3-((1-(3-氟-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2，3-二羟基丙基-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(3-fluoro-5-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000181
以3-氟-2-溴-5-甲基吡啶(004A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物004。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.78(s,1H),7.34(d,1H),6.94(d,1H),6.88(d,1H),6.69(d,1H),5.32(t,1H),5.11(m,1H),4.86(m,2H),4.73(m,1H),4.43(d,2H),4.24(d,2H),3.95(m,2H),3.75(s,1H),3.64-3.46(m,6H),2.18(s,3H),1.01(d,3H),0.63(s,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):504[M+1]。
实施例5：目标化合物005的制备
(S)-1-((3S，4S)-4-(3-((1-(3-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2，3-二羟基丙基-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(3-chloro-5-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000182
以3-氯-2-溴-5-甲基吡啶(005A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物005。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.94(s,1H),7.56(d,1H),6.93(q,1H),6.88(d,1H),6.69(d,1H),5.07(q,1H),4.52(q,4H),4.22(d,2H),4.03(m,2H),3.92(s,1H),3.65(s,3H),3.57-3.47(m,6H),2.17(s,3H),1.01(d,3H),0.63(s,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):520[M+1]。
实施例6：目标化合物006的制备
2-(3-(5-((3S，4S)-1-((S)-2，3-二羟丙酰基)-4-((R)-1-羟乙基)-4-甲基吡咯烷-3-基)-2-甲氧基苯氧基)氮杂环丁-1-基)-5-甲基烟碱腈
2-(3-(5-((3S,4S)-1-((S)-2,3-dihydroxypropanoyl)-4-((R)-1-hydroxyethyl)-4-methylpyrrolidin-3-yl)-2-methoxyphenoxy)azetidin-1-yl)-5-methylnicotinonitrile
Figure BDA0002322426330000191
以2-溴-5-甲基-3-氰基吡啶(006A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物006。
1H NMR(400M Hz,DMSO-d6)δ8.21(q,1H),7.84(s,1H),6.97-6.87(m,2H),6.70(s,1H),5.12(q,1H),4.84(q,2H),4.26(m,1H),4.13(m,2H),3.94(m,1H),3.74(s,3H),3.67-3.47(m,7H),2.19(s,3H),1.01(d,3H),0.64(s,3H).
LC-MS,M/Z(ESI):511[M+1]。
实施例7：目标化合物007的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5,6-二甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5,6-dimethylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000192
以2-溴-5,6-二甲基吡啶(007A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物007。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.29(s,1H),6.94(m,2H),6.68(s,1H),6.23(m,1H),5.08(m,1H),4.91(m,2H),4.76(m,1H),4.36(d,2H),4.25(d,1H),3.91(m,1H),3.70-3.50(m,6H),3.70(s,3H),2.27(s,3H),2.10(s,3H),1.01(d,3H),0.63(s,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):500[M+1]。
实施例8：目标化合物008的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(4,5-二甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(4,5-dimethylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000201
以2-溴-4,5-二甲基吡啶(008A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物008。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.81(s,1H),6.92(m,2H),6.68(s,1H),6.30(m,1H),5.06(m,1H),4.88(m,2H),4.74(m,1H),4.38(d,2H),4.24(d,1H),4.10(m,1H),3.74(s,3H),3.74-3.49(m,6H),2.32(s,3H),2.15(s,3H),1.02(d,3H),0.64(s,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):500[M+1]。
实施例9：目标化合物009的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-chloro-3-fluoropyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyet hyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000202
以3-氟-2-溴-5-氯吡啶(009A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物009。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00(s,1H),7.82(d,1H),6.95(m,2H),6.87(s,1H),5.14-4.79(m,4H),4.52(d,2H),4.26(d,1H),4.06(d,2H),3.95-3.60(m,6H),3.76(s,3H),1.00(d,3H),0.64(s,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):524[M+1]
实施例10：目标化合物010的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-氯-4-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-chloro-4-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000211
以5-氯-2-溴-4-甲基吡啶(010A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物010。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.02(d,1H),6.96(m,1H),6.93(m,1H),6.69(s,1H),6.48(s,1H),5.06(q,1H),4.88(m,2H),4.76(m,1H),4.36(q,2H),4.24(m,1H),3.91(m,2H),3.76(s,3H),3.66-3.48(m,6H),2.25(s,3H),1.02(d,3H),0.64(s,3H)
LC-MS,M/Z(ESI):520[M+1]。
实施例11：目标化合物011的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-氯-6-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-chloro-6-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000212
以5-氯-2-溴-6-甲基吡啶(011A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物011。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.54(dd,1H),6.94(dd,1H),6.87(d,1H),6.68(s,1H),6.33(d,1H),5.10(m,1H),4.88(m,2H),4.74(dt,1H),4.37(q,2H),4.24(q,1H),3.90(m,3H),3.75(s,3H),3.73-3.37(m,5H),2.35(s,3H),1.01(d,3H),0.64(s,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):520[M+1]。
实施例12：目标化合物012的制备
6-(3-(5-((3S,4S)-1-((S)-2,3-二羟丙酰基)-4-((R)-1-羟乙基)-4-甲基吡咯烷-3-基)-2-甲氧基苯氧基)氮杂环丁-1-基)-4-甲基烟碱腈
6-(3-(5-((3S,4S)-1-((S)-2,3-dihydroxypropanoyl)-4-((R)-1-hydroxyethyl)-4-methylpyrrolidin-3-yl)-2-met hoxyp henoxy)azetidin-1-yl)-4-met hylnicotinonitrile
Figure BDA0002322426330000221
以2-溴-4-甲基-5-氰基吡啶(012A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物012。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.39(d,1H),6.96(dd,1H),6.89(d,1H),6.69(s,1H),6.45(s,1H),5.15(q,1H),4.88(q,2H),4.74(m,1H),4.48(t,1H),4.24(m,2H),4.13(m,2H),3.93(m,1H),3.75(s,3H),3.75-3.55(m,6H),2.33(s,3H),1.01(d,3H),0.64(s,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):511[M+1]。
实施例13：目标化合物013的制备
6-(3-(5-((3S,4S)-1-((S)-2,3-二羟丙酰基)-4-((R)-1-羟乙基)-4-甲基吡咯烷-3-基)-2-甲氧基苯氧基)氮杂环丁-1-基)-2-甲基烟碱腈
6-(3-(5-((3S,4S)-1-((S)-2,3-dihydroxypropanoyl)-4-((R)-1-hydroxyethyl)-4-methylpyrrolidin-3-yl)-2-methoxyphenoxy)azetidin-1-yl)-2-methylnicotinonitrile
Figure BDA0002322426330000222
以2-溴-6-甲基-5-氰基吡啶(7A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物013。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.79(dd,1H),6.94(m,1H),6.90(m,1H),6.69(s,1H),6.35(d,1H),5.16(q,1H),4.90(q,2H),4.76(m,1H),4.48(t,1H),4.26(m,1H),4.08(m,2H),4.02(m,1H),3.76(s,3H),3.71-3.43(m,6H),2.46(s,3H),1.02(d,3H),0.64(s,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):511[M+1]。
实施例14：目标化合物014的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(3-氯-5-氟吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(3-chloro-5-fluoropyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000231
以3-氯-2-溴-5-氟吡啶(014A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物014。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.17(s,1H),7.88(d,1H),6.94(m,2H),6.68(m,1H),5.08(m,1H),4.88(m,2H),4.74(m,1H),4.55(d,2H),4.23(d,1H),4.05(m,2H),3.90-3.67(m,6H),3.75(s,3H),1.01(d,3H),0.62(s,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):524[M+1]。
实施例15：目标化合物015的制备
(S)-2,3-二羟基-1-((3S,4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(4-甲氧基-3-((1-(5-甲氧基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)丙烷-1-酮
(S)-2,3-dihydroxy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-4-(4-methoxy-3-((1-(5-methoxypyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)phenyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)propan-1-one
Figure BDA0002322426330000232
以2-溴-5-甲氧基吡啶(015A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物015。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.85(s,1H),7.29(d,1H),6.93(m,2H),6.69(s,1H),6.45(d,1H),5.09(m,1H),4.88(m,2H),4.72(m,1H),4.31(m,3H),4.25(d,1H),3.92(d,1H),3.83(m,2H),3.75(s,3H),3.72-3.45(m,6H),1.02(d,3H),0.64(s,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):502[M+1]。
实施例16：目标化合物016的制备
(S)-2,3-二羟基-1-((3S,4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(4-甲氧基-3-((1-(5-甲基嘧啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)丙烷-1-酮
(S)-2,3-dihydroxy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-4-(4-methoxy-3-((1-(5-methylpyrimidin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)phenyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)propan-1-one
Figure BDA0002322426330000241
以2-溴-5-甲基嘧啶(016A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物016。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.32(d,2H),6.97(t,2H),6.74(m,1H),5.10(s,1H),4.59(d,2H),4.24(d,2H),4.21(t,2H),3.84(q,1H),3.74-3.30(m,6H),3.74(s,3H),2.20(s,3H),1.14(d,3H),0.76(t,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):487[M+1]。
实施例17：目标化合物017的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-乙基嘧啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙烷-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-ethylpyrimidin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000242
以2-氯-5-乙基嘧啶(017A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物017。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(d,2H),6.97(t,2H),6.74(m,1H),5.16(s,1H),4.61(d,2H),4.27(d,2H),4.22(t,2H),3.87(q,1H),3.74-3.30(m,6H),3.52(s,3H),2.57(q,2H),1.23(t,3H),1.13(d,3H),0.76(t,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):501[M+1]。
实施例18：目标化合物018的制备
S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-氯嘧啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙烷-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-chloropyrimidin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000251
以2-溴-5-氯嘧啶(018A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物018。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.44(d,2H),6.96(m,2H),6.87(d,1H),5.12(s,1H),4.91(m,2H),4.76(m,1H),4.49(m,2H),4.23(d,1H),4.02(m,2H),3.75(s,3H),3.65-3.35(m,6H),1.01(d,3H),0.64(d,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):507[M+1]。
实施例19：目标化合物019的制备
5-(3-(5-((3S,4S)-1-((S)-2,3-二羟丙酰基)-4-((R)-1-羟乙基)-4-甲基吡咯烷-3-基)-2-甲氧基苯氧基)氮杂环丁基-1-基)吡嗪-2-甲腈
5-(3-(5-((3S,4S)-1-((S)-2,3-dihydroxypropanoyl)-4-((R)-1-hydroxyethyl)-4-methylpyrrolidin-3-yl)-2-methoxyphenoxy)azetidin-1-yl)pyrazine-2-carbonitrile
Figure BDA0002322426330000252
以2-氰基-5-氯哌嗪(019A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物019。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.55(t,1H),8.02(d,1H),6.98(m,2H),6.69(d,1H),5.18(m,1H),4.89(m,2H),4.73(m,1H),4.64(m,2H),4.24(m,2H),3.91(m,1H),3.76(s,3H),3.71-3.36(m,6H),1.02(d,3H),0.65(d 3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):498[M+1]。
实施例20：目标化合物020的制备
(S)-2,3-二羟基-1-((3S,4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(4-甲氧基-3-((1-(6-甲氧基吡啶-3-基)氮杂环丁烷-3-基)氧)苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)丙烷-1-酮
(S)-2,3-dihydroxy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-4-(4-methoxy-3-((1-(6-methoxypyridin-3-yl)azetidin-3-yl)oxy)phenyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)propan-1-one
Figure BDA0002322426330000261
以3-溴-6-甲氧基吡啶(020A)起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物020。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.45(d,1H),7.04(d,3H),6.49(d,1H),6.73(d,1H),5.11(m,1H),4.26(m,2H),3.84(m,1H),3.75-3.35(m,16H),1.03(d,3H),0.64(d,3H).
LC-MS,M/Z(ESI):502(M+1)。
实施例21：目标化合物021的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(3,5-二甲基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙烷-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(3,5-dimethylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000262
以2-溴-3,5-二甲基吡啶(021A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物021。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.80(s,1H),7.19(s,1H),6.93(dd,1H),6.86(d,1H),6.69(d,1H),5.05(m,1H),4.88(m,2H),4.74(m,1H),4.40(t,2H),4.24(m,1H),3.96(m,3H),3.75(s,3H),3.64-3.46(m,6H),2.13(s,3H),2.11(s,3H),1.01(d,3H),0.64(s,3H).
LC-MS,M/Z(ESI):500(M+1).
实施例22：目标化合物022的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-乙氧基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙烷-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-ethoxypyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000271
以2-溴-5-乙氧基吡啶(022A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物022。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.83(d,1H),7.27(m,1H),6.93(d,1H),6.86(d,1H),6.69(d,1H),6.45(d,1H),5.09(dd,1H),4.87(m,2H),4.74(m,1H),4.26(m,3H),3.96(m,2H),3.81(m,2H),3.75(s,3H),3.65-3.51(m,6H),3.17(m,1H),1.29(t,3H),1.03(d,3H),0.64(d,3H).
LC-MS,M/Z(ESI):516(M+1)。
实施例23：目标化合物023的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-氯-3-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙烷-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-chloro-3-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000272
以2-溴-5-氯-3-甲基吡啶(023A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物023。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.99(m,1H),7.48(m,1H),6.93(m,2H),6.68(d,1H),5.06(m,1H),4.88(m,2H),4.71(m,1H),4.47(t,2H),4.25(m,1H),4.02(m,2H),3.93(m,1H),3.75(s,3H),3.57-3.48(m,7H),2.16(s,3H),1.02(d,3H),0.64(s,3H).
LC-MS,M/Z(ESI):521(M+1).
实施例24：目标化合物024的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-chloro-3-fluoropyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000281
以5-氯-2-溴-3-氟吡啶(024A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物024。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00(s,1H),7.78(dt,1H),6.96-6.87(m,2H),6.69(s,1H),5.13-5.12(m,1H),4.52-4.48(m,2H),4.25-4.21(m,1H),4.05-4.00(m,2H),3.93-3.91(m,1H),3.75(s,3H),3.75-3.44(m,10H),1.01(d,3H),0.63(d,3H).
LC-MS,M/Z(ESI):524.2(M+1).
实施例25：目标化合物025的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-氟-4-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-fluoro-4-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000282
以5-氟-2-溴-4-甲基吡啶(025A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物025。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.02(s,1H),6.96-6.87(m,2H),6.68(s,1H),6.53-6.50(m,1H),5.13-5.09(m,1H),4.41-4.37(m,4H),4.25-4.22(m,1H),3.94-3.90(m,4H),3.75(s,3H),3.75-3.47(m,6H),3.35-3.34(m,1H),2.23(s,3H),1.02(d,3H),0.64(d,3H).
LC-MS,M/Z(ESI):504.2(M+1).
实施例26：目标化合物026的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-氟-6-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-fluoro-6-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000291
以5-氟-2-溴-6-甲基吡啶(026A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物026。
1H NMR(400M Hz,DMSO-d6)δ7.45(t,1H),6.95-6.88(m,2H),6.68(s,1H),6.34(d,1H),5.11-5.08(m,1H),4.37-4.33(m,2H),4.27-4.20(m,1H),3.94-3.91(m,5H),3.88(s,3H),3.75-3.40(m,6H),3.36(dd,1H),3.19-3.16(m,1H),2.29(d,3H),1.02(d,3H),0.64(d,3H).
LC-MS,M/Z(ESI):504.2(M+1).
实施例27：目标化合物027的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(6-乙基-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(6-ethyl-5-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000292
以1-(6-乙基-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(027D)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物027。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.56(d,1H),6.87-6.84(m,2H),6.71-6.70(m,1H),6.33(s,1H),5.36-5.34(m,1H),5.08-5.03(m,1H),4.63-4.53(m,2H),4.43-4.38(m,2H),4.23-4.11(m,2H),3.89-3.76(m,9H),3.54-3.50(m,1H),3.43-3.30(m,1H),2.24(d,3H),2.10-2.01(m,3H),1.25-1.14(m,6H),0.76(d,3H).
LC-MS,M/Z(ESI):514.3(M+1).
其中，1-(6-乙基-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(027D)的制备方法如下：
Figure BDA0002322426330000301
第一步：1-(6-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(027B)的合成
1-(6-chloro-5-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-ol
Figure BDA0002322426330000302
将2，6-二氯-5-甲基吡啶(027A)(2.0g，12.3mol)溶入到DMSO(20mL)中，加入氮杂环丁基-3-醇盐酸盐(1.34g，12.3mmol)，碘化亚铜(934mg，4.92mmol)，L-脯氨酸(282mg，2.46mmol)，碳酸钾(5.09g，36.9mmol)，加热至90℃，在氮气保护下搅拌过夜。冷却至室温，加入水(100mL)稀释，用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(40mL×2)洗，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得1-(6-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(27B)，白色固体(0.4g，产率13.8％)。
第二步：1-(5-甲基-6-乙烯基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(027C)的合成
(5-methyl-6-vinylpyridin-2-yl)azetidin-3-ol
Figure BDA0002322426330000303
将1-(6-氯-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(027B)(310mg，1.32mol)溶于1,4-二氧六环(10mL)中，加入水(1.0ml)，加入1,1'-双(二苯膦基)二茂铁二氯化钯(II)二氯 甲烷复合物(54mg,0.066mmol)，加入乙烯基三氟硼酸钾(530mg，3.96mmol)，加入碳酸钾(546mg，3.96mmol)，氮气保护下微波加热至120℃搅拌反应2小时。将反应液冷却至室温，加入水(50ml)，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)，得到化合物1-(5-甲基-6-乙烯基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(027C)，白色固体(280mg，产率100％)。
第三步：1-(6-乙基-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(027D)的合成
1-(6-ethyl-5-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-ol
Figure BDA0002322426330000311
将原料1-(5-甲基-6-乙烯基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(027C)(0.5g，2.63mmol)加入到乙酸乙酯(100ml)中，加入10％钯碳(0.1g)，通入氢气，室温下搅拌1小时。过滤，滤液浓缩得化合物1-(6-乙基-5-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(027D)，白色固体(0.4g，产率79.1％)。
LC-MS,M/Z(ESI):193.1(M+1)。
实施例28：目标化合物028的制备
(S)-2,3-二羟基-1-((3S,4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(3-((1-(5-异丙氧基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)丙烷-1-酮
(S)-2,3-dihydroxy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-4-(3-((1-(5-isopropoxypyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)propan-1-one
Figure BDA0002322426330000312
以2-溴-5-异丙氧基吡啶(028A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物028。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.86-7.85(m,1H),7.80-7.77(m,1H),7.70-6.97(dd,1H),6.93-6.88(m,2H),6.72-6.71(m,1H),6.47(s,3H),5.19-5.16(m,1H),4.62-4.59(m,2H),4.30-4.24(m,1H),4.21-4.14(m,2H),3.97-3.94(m,2H),3.77(s,3H),3.74-3.45(m,6H),3.39-3.34(m,1H),1.04(d,3H),0.82-0.78(m,2H),0.71-0.68(m,2H),0.66(d,3H).
LC-MS,M/Z(ESI):530.2(M+1)。
实施例29：目标化合物029的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-乙基-6-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-ethyl-6-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000321
化合物029具体合成路线和方法如下：
Figure BDA0002322426330000322
第一步～第三步：
((3S,4S)-4-(3-((1-(5-氯-6-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧环戊-4-基)甲酮(029D)的合成
((3S,4S)-4-(3-((1-(5-chloro-6-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)((S)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)methanone
以5-氯-2-溴-6-甲基吡啶(029A)为起始原料，第一步至第三步的合成方法参照前文化合物002的制备实施例，得到中间体029D。
第四步：((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧环戊-4-基)((3S,4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(4-甲氧基3-((1-(6-甲基-5-乙烯基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮的合成
((S)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)((3S,4S)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-4-(4-methoxy-3-((1-(6-methyl-5-vinylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)phenyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)methanone
Figure BDA0002322426330000331
将((3S,4S)-4-(3-((1-(5-氯-6-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧环戊-4-基)甲酮(029D)(70mg，0.13mmol)溶于1,4-二氧六环(3mL)中，加入水(0.3ml)，加入氯(2-二环己基膦基-2',6'-二-异丙氧基-1,1'-联苯基)(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(5.2mg，0.0067mmol)，1,1'-双(二苯膦基)二茂铁二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(5.5mg,0.0067mmol),加入乙烯基三氟硼酸钾(54mg，0.403mmol)，加热至140℃搅拌过夜。加入水(10ml)，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)，得化合物((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧环戊-4-基)((3S,4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(4-甲氧基3-((1-(6-甲基-5-乙烯基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(029E)，白色固体(6.2mg，产率9.0％)。
第五步：((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧环戊-4-基)((3S,4S)-4-(3-((1-(5-乙基-6-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(029F)的合成((S)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)((3S,4S)-4-(3-((1-(5-ethyl-6-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)methanone
Figure BDA0002322426330000332
将((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧环戊-4-基)((3S,4S)-4-(3-((1-(6-甲基-5-乙烯基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(029E)(150mg，0.27mmol)溶入到10ml甲醇中，加入10％钯碳(15mg)，室温下通入氢气，搅拌过夜。过滤反应液，浓缩，得化合物((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧环戊-4-基)((3S,4S)-4-(3-((1-(5-乙基-6-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(029F)，白色固体(100mg，产率66.6％)。
第六步：(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-乙基-6-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮(化合物029)的合成
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-ethyl-6-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
将((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧环戊-4-基)((3S,4S)-4-(3-((1-(5-乙基-6-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(029F)(100mg，0.18mmol)溶于10ml甲醇中，加入1N盐酸(2mL)，室温搅拌过夜。加入饱和碳酸氢钠水溶液，调节pH至8～9，用乙酸乙酯(25mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(纯乙酸乙酯)，得目标化合物(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-乙基-6-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮(029)，(45mg，产率48.5％)。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.29(t,1H)，6.85-6.79(m,2H),6.65(s,1H),6.20(d,1H)，5.08-5.05(m,1H),4.56-4.54(m,1H)，4.43-4.39(m，2H)，4.10-4.09(m,2H),3.89-3.76(m，8H)，3.56-3.55(m，1H)，3.42-3.32(m,1H),2.60-2.48(m，2H),2.40(s,3H),1.26(t，3H),1.17(d,3H),0.76(d，3H).
LC-MS,M/Z(ESI):514.2(M+1).
实施例30：目标化合物030的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-乙基-4-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-ethyl-4-methylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000341
以5-氯-2-溴-4-甲基吡啶(030A)为起始原料，参照化合物029的制备方法制备得到目标化合物030。
1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.28(m,1H),6.85-6.79(m,2H),6.65(s,1H),6.20(d,1H),5.08-5.05(m,1H),4.58-4.53(m,1H),4.43-4.39(m,2H),4.16-4.08(m,2H),3.89-3.76(m,9H),3.58-3.53(m,1H),3.43-3.32(m,1H),2.60-2.48(m,5H),2.40(d,3H),1.26-1.13(m,6H),0.76(d,3H).
LC-MS,M/Z(ESI):514.3(M+1).
实施例31：目标化合物031的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-乙基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙烷-1-酮
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-ethylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one
Figure BDA0002322426330000351
以2-溴-5-乙基吡啶(031A)为起始原料，参照化合物002的制备方法制备得到目标化合物031。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.94(s,1H),7.42(dt,1H),6.94(dd,1H),6.87(d,1H),6.69(d,1H),6.42(d,1H),5.12-5.09(m,1H),4.92-4.87(m,2H),4.74(m,1H),4.33(m,3H),4.24(m,1H),3.27-3.90(m,1H),3.86-3.83(m,2H),3.75(s,3H),3.70-3.45(m,6H),3.37-3.32(m,1H),2.50-2.44(m,1H),1.12(t,3H),1.01(d,3H),0.64(d,3H).
LC-MS,M/Z(ESI):500.3(M+1)。
实施例32：阳性对照组化合物及其制备
Figure BDA0002322426330000352
参考专利WO2014159012A1制备方法制备得到阳性对照组化合物。
LC-MS,M/Z(ESI):486[M+1]。
下文测试例的阳性对照组化合物均指实施例32所述化合物。
实施例33：目标化合物032的制备
(S)-2,3-二羟基-1-((3S，4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(3-((1-(5-异丙基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)氧基)-4-甲氧基苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)丙-1-酮(化合物032)
(S)-2,3-dihydroxy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-4-(3-((1-(5-isopropylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)propan-1-one(化合物032)
Figure BDA0002322426330000361
化合物032具体合成路线和方法如下：
Figure BDA0002322426330000362
第一步：(S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-羧酸钾(032B)的合成
potassium(S)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolane-4-carboxylate(032B)
Figure BDA0002322426330000363
室温下，将(S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-羧酸甲酯(032A)(10g，62.4mmol)加至200mL甲醇中，将反应液加热至50℃搅拌反应2h，用TLC(PE:EA＝10:1)高锰酸钾显色监测反应完全，反应液浓缩干得浅黄色固体化合物032B粗品(11.6g，产率101％)，可直接投入下一步反应。
第二步：((3S,4S)-4-(3-(苄氧基)-4-甲氧基苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)((S-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲酮(032C)的合成
((3S,4S)-4-(3-(benzyloxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)((S)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)methanone
Figure BDA0002322426330000371
室温下，将(S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-羧酸钾(032B)(11.5g，62.4mmol)加至150mL的DMF溶液中，再加入(R)-1-((3S，4S)-4-(3-(苄氧基)-4-甲氧基苯基)-3-甲基吡咯烷-3-基)乙烷-1-醇(7.1g，20.8mmol)，将反应液冷却至0℃，滴加50％1-丙基磷酸酐DMF溶液(19.8g，31.2mmol)，滴加完后缓慢升至室温，并在氮气保护下搅拌过夜，加入饱和氯化钠溶液(100mL)稀释，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水洗涤(100mL×2)，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得无色油状化合物((3S,4S)-4-(3-(苄氧基)-4-甲氧基苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)((S-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲酮(032C)(6.1g，产率62.5％)。
LC-MS,M/Z(ESI):470.58(M+1)
第三步：((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)((3S,4S)-4-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(032D)的合成
(S)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)((3S,4S)-4-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)methanone
Figure BDA0002322426330000372
室温下，将((3S,4S)-4-(3-(苄氧基)-4-甲氧基苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)((S-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲酮(032C)(6.1g，8.12mmol)加至100mL的甲醇溶液中，在氢气氛围中室温搅拌过夜，硅藻土过滤，滤饼用甲醇(50mL×3)洗涤，滤液浓缩干得无色油状化合物((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)((3S,4S)-4-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(032D)(3.8g，产率77％)。
LC-MS,M/Z(ESI):380.45(M+1)
第四步：1-(5-异丙基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-醇(032F)的合成
1-(5-isopropylpyridin-2-yl)azetidin-3-ol
Figure BDA0002322426330000381
室温下，将2-溴-5-异丙基吡啶(032E)(2g，10mmol)加至10mL的DMSO中，依次加入氮杂环丁烷-3-醇盐酸盐(1.5g，14.99mmol)、碘化亚铜(1.9g，10.0mmol)、L-脯氨酸(0.23g，2.0mmol)和碳酸铯(6.51g，20mmol)，将反应液加热至95℃并在氮气保护下搅拌过夜。将反应液冷却至室温，加水(20mL)稀释，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(100mL×2)洗涤，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得白色固体状化合物1-(5-异丙基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-醇(032F)(1.0g，产率52％)。
LC-MS,M/Z(ESI):193.26(M+1)
第五步：1-(5-异丙基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基4-甲基苯磺酸酯(032G)的合成
1-(5-isopropylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl 4-methylbenzenesulfonate(032G)
Figure BDA0002322426330000382
将1-(5-异丙基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-醇(032F)(1.0g，5.2mmol)加入到二氯甲烷(5mL)中，加入三乙胺(1.05g，10.4mmol)、4-N,N-二甲氨基吡啶(0.13g，1.04mmol)并冷却至0℃，加入对甲基苯磺酰氯(1.09g，5.7mmol)后室温搅拌反应过夜。加入二氯甲烷(20mL)稀释，硅胶(20mL)，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得白色固体化合物1-(5-异丙基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基4-甲基苯磺酸酯(032G)(1.6g，产率89％)。
LC-MS,M/Z(ESI):347.44(M+1)
第六步：((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)((3S,4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(3-((1-(5-异丙基吡啶-2-基)氮杂环丁-3-基氧基)-4-甲氧基苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(032H)的合成
((S)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)((3S,4S)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-4-(3-((1-(5-isopropylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)methanone(032H)
Figure BDA0002322426330000383
将化合物((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)((3S,4S)-4-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(032D)(0.4g，1.05mmol)加入至DMF(4mL)中，加入碳酸铯(0.52g，1.58mmol)后，加热至50℃并搅拌0.5h，再加入1-(5-异丙基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基4-甲基苯磺酸酯(032G)(0.37g，1.05mmol)，加热至90℃，搅拌反应4h。冷却至室温，加入蒸馏水(10mL)稀释，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(10mL×2)洗，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得油状化合物((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)((3S,4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(3-((1-(5-异丙基吡啶-2-基)氮杂环丁-3-基氧基)-4-甲氧基苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(032H)(0.3g，产率51.4％)。
LC-MS,M/Z(ESI):554.70(M+1)。
第七步：(S)-2,3-二羟基-1-((3S，4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(3-((1-(5-异丙基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)氧基)-4-甲氧基苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)丙-1-酮(目标化合物032)的合成
(S)-2,3-dihydroxy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-4-(3-((1-(5-isopropylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)propan-1-one(目标化合物032)
Figure BDA0002322426330000391
将((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)((3S,4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(3-((1-(5-异丙基吡啶-2-基)氮杂环丁-3-基氧基)-4-甲氧基苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(032H)(0.3g，0.54mmol)溶于二氯甲烷(3mL)，加入4N氯化氢/1,4-二氧六环溶液(1mL)，室温搅拌3h，反应完后，用饱和碳酸氢钠水溶液调节pH＝8-9，用二氯甲烷(15mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(纯乙酸乙酯)得到固体状的目标化合物(S)-2,3-二羟基-1-((3S，4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(3-((1-(5-异丙基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)氧基)-4-甲氧基苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)丙-1-酮(目标化合物032)(0.2g，收率71.9％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.94(s,1H),7.47-7.44(dd,1H),6.93-6.86(m,2H),6.67(q,1H),6.42(d,1H),5.11-5.07(m,1H),4.91-4.70(m,3H),4.34-4.31(m,3H),3.83-3.73(m,3H),3.64-3.46(m,9H),3.16(d,1H),2.79-2.76(m,1H),1.14(d,6H),0.99(d,3H),0.62(s,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):514.63(M+1)。
实施例34：目标化合物033的制备
(S)-2,3-二羟基-1-((3S,4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(4-甲氧基-3-((1-(5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)丙-1-酮(目标化合物033)
(S)-2,3-dihydroxy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-4-(4-methoxy-3-((1-(5-(2,2,2-trifluoroethyl)pyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)phenyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)propan-1-one(目标化合物033)
Figure BDA0002322426330000401
化合物033具体合成路线和方法如下：
Figure BDA0002322426330000402
第一步：1-(5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-醇(033B)的合成
1-(5-(2,2,2-trifluoroethyl)pyridin-2-yl)azetidin-3-ol(033B)
Figure BDA0002322426330000403
室温下，将2-溴-5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶(033A)(1g，4.17mmol)加至10mL的DMSO中，依次加入氮杂环丁烷-3-醇盐酸盐(0.91g，8.33mmol)、碘化亚铜(0.79g，4.17mmol)、L-脯氨酸(0.1g，0.83mmol)和碳酸铯(3.39g，10.42mmol)，将反应液加热至95℃并在氮气保护下搅拌过夜。将反应液冷却至室温，加水(20mL)稀释，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(50mL×2)洗涤，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得白色固体状化合物1-(5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-醇(033B)(0.52g，产率53.8％)。
LC-MS,M/Z(ESI):232.21(M+1)
第二步：1-(5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基4-甲基苯磺酸酯(033C)的合成
1-(5-(2,2,2-trifluoroethyl)pyridin-2-yl)azetidin-3-yl 4-methylbenzenesulfonate(033C)
Figure BDA0002322426330000411
将1-(5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-醇(033B)(0.26g，1.12mmol)加入到二氯甲烷(5mL)中，加入三乙胺(0.23g，2.24mmol)、4-N,N-二甲氨基吡啶(27mg，0.22mmol)并冷却至0℃，加入对甲基苯磺酰氯(0.24g，1.23mmol)后室温搅拌反应过夜。加入二氯甲烷(10mL)稀释，硅胶(5mL)，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得白色固体化合物1-(5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基4-甲基苯磺酸酯(033C)(0.35g，产率81％)。
LC-MS,M/Z(ESI):387.39(M+1)
第三步：((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)((3S，4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(4-甲氧基-3-((1-(5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)氧基)苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(033D)的合成
((S)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)((3S,4S)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-4-(4-methoxy-3-((1-(5-(2,2,2-trifluoroethyl)pyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)phenyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)methanone(033D)
Figure BDA0002322426330000412
将化合物((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)((3S,4S)-4-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(032D，参考本发明实施例33第三步合成)(0.35g，0.92mmol)加入至DMF(4mL)中，加入碳酸铯(0.45g，1.38mmol)后，加热至50℃并搅拌0.5h，再加入1-(5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基4-甲基苯磺酸酯(033C)(0.35g，0.92mmol)，加热至90℃，搅拌反应4h。冷却至室温，加入蒸馏水(10mL)稀释，用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相，有机相用饱和食盐水(10mL×2)洗，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得油状化合物((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)((3S，4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(4-甲氧基-3-((1-(5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)氧基)苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(033D)(0.25g，产率45.7％)。
LC-MS,M/Z(ESI):594.64(M+1)。
第四步：(S)-2,3-二羟基-1-((3S，4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(4-甲氧基-3-((1-(5-(2，2，2-三氟乙基)吡啶-2-基氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)丙-1-酮(目标化合物033)的合成
(S)-2,3-dihydroxy-1-((3S,4S)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-4-(4-methoxy-3-((1-(5-(2,2,2-trifluoroethyl)pyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)phenyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)propan-1-one(目标化合物033)
Figure BDA0002322426330000421
将((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)((3S，4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(4-甲氧基-3-((1-(5-(2,2,2-三氟乙基)吡啶-2-基)氮杂环丁烷-3-基)氧基)苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(033D)(0.25g，0.42mmol)溶于二氯甲烷(3mL)，加入4N氯化氢/1,4-二氧六环溶液(1mL)，室温搅拌3h，反应完后，用饱和碳酸氢钠水溶液调节pH＝8-9，用二氯甲烷(15mL×3)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(纯乙酸乙酯)得到固体状的目标化合物(S)-2,3-二羟基-1-((3S，4S)-3-((R)-1-羟乙基)-4-(4-甲氧基-3-((1-(5-(2，2，2-三氟乙基)吡啶-2-基氮杂环丁-3-基)氧基)苯基)-3-甲基吡咯烷-1-基)丙-1-酮(目标化合物033)(0.18g，收率77.2％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.03(s,1H),7.50-7.49(m,1H),6.91-6.85(m,2H),6.68(S,1H),6.46(d,1H),5.10-4.70(m,5H),4.36-4.22(m,4H),3.90-3.44(m,15H),3.16(d,1H),2.34-2.30(m,1H),0.99(d,3H),0.62(s,3H)。
LC-MS,M/Z(ESI):554.58(M+1)。
实施例35：目标化合物034的制备
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-环丙基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮(目标化合物034)
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-cyclopropylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one(目标化合物034)
Figure BDA0002322426330000431
化合物034具体合成路线和方法如下：
Figure BDA0002322426330000432
第一步：1-(5-氯吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(034B)的合成
1-(5-chloropyridin-2-yl)azetidin-3-ol(034B)
Figure BDA0002322426330000433
室温下将5-氯-2-溴吡啶(034A)(25.0g,130.2mmol)加入到DMSO(300mL)中，加入氮杂环丁基-3-醇盐酸盐(17.0g,156.3mmol)，碘化亚铜(2.5g,13.0mmol)，L-脯氨酸(16.5g,143.2mmol)，磷酸钾(55.2g,260.4mmol)，氮气保护下加热至115℃，搅拌16h。冷却至室温，加入水(1500mL)稀释，用乙酸乙酯(500mL×3)萃取，分液，合并有机相，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得淡黄色液体1-(5-氯吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(034B)(17.0g,产率70.9％)。
LC-MS,M/Z(ESI):184.8(M+1)。
第二步：1-(5-氯吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-甲基磺酸酯(034C)的合成
1-(5-chloropyridin-2-yl)azetidin-3-yl methanesulfonate(034C)
Figure BDA0002322426330000441
室温下将1-(5-氯吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-醇(034B)(17.0g，92.4mmol)，加入到二氯甲烷(200mL)中，加入三乙胺(18.7g，184.8mmol)，冷却至0℃，加入甲基磺酰氯(12.6g，110.9mmol)，室温搅拌3h。加入二氯甲烷(200mL)稀释，用水(60mL×3)洗，分液，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱分离纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得淡黄色固体1-(5-氯吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-甲基磺酸酯(034C)(22g，产率90.8％)。
LC-MS,M/Z(ESI):263.7(M+1)。
第三步：((3S,4S)-4-(3-((1-(5-氯吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧环戊烷-4-基)甲酮(034D)的合成
((3S,4S)-4-(3-((1-(5-chloropyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)((S)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)methanone(034D)
Figure BDA0002322426330000442
室温下将化合物物((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)((3S,4S)-4-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)甲酮(032D)(6.0g,15.8mmol)加入到DMF(50mL)中，加入磷酸钾(10.1g，47.4mmol)，加热至90℃，搅拌0.5h，冷却至40℃，加入1-(5-氯吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-甲基磺酸酯(034C)(5.0g,18.9mmol)，加热至90℃，搅拌16h。冷却至室温，加入水(200mL)稀释，用乙酸乙酯(200mL×3)萃取，分液，合并有机相，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得白色固体((3S,4S)-4-(3-((1-(5-氯吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧环戊烷-4-基)甲酮(034D)(4.3g,产率49.7％)。
LC-MS,M/Z(ESI):546.3(M+1)。
第四步：((3S,4S)-4-(3-((1-(5-环丙基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧环戊烷-4-基)甲酮(034E)的合成
((3S,4S)-4-(3-((1-(5-cyclopropylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)((S)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)methanone(034E)
Figure BDA0002322426330000451
室温下将原料((3S,4S)-4-(3-((1-(5-氯吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧环戊烷-4-基)甲酮(034D)(546mg，1.0mmol)加入到甲苯(20mL)中，加入水(1mL)，氮气保护下加入二三叔丁基膦钯(51mg，0.1mmol)，磷酸钾(424mg，2.0mmol)，加热至110℃，搅拌16h。冷却至室温，加入水(20mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，分液，合并有机相，有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，残留物用硅胶柱纯化(石油醚:乙酸乙酯(V/V)＝2:1)得白色固体粗品((3S,4S)-4-(3-((1-(5-环丙基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧环戊烷-4-基)甲酮(034E)(220mg，产率39.8％)。
LC-MS,M/Z(ESI):552.4(M+1)
第五步：(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-环丁基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙基-1-酮(034)的合成
(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-(5-cyclopropylpyridin-2-yl)azetidin-3-yl)oxy)-4-methoxyphenyl)-3-((R)-1-hydroxyethyl)-3-methylpyrrolidin-1-yl)-2,3-dihydroxypropan-1-one(034)
Figure BDA0002322426330000452
室温下将((3S,4S)-4-(3-((1-(5-环丙基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)((S)-2,2-二甲基-1,3-二氧环戊烷-4-基)甲酮(034E)(150mg,0.27mmol)溶于四氢呋喃(4mL)，加入1N盐酸(2mL)，室温搅拌16h。将反应液浓缩，制备得白色固体(S)-1-((3S,4S)-4-(3-((1-((5-氯-6-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁基-3-基)氧)-4-甲氧苯基)-3-((R)-1-羟乙基)-3-甲基吡咯烷-1-基)-2,3-二羟基丙烷-1-酮(034)(17mg，产率12.2％)。
1H NMR(400m Hz,DMSO-d6)δ7.94(d,1H),7.24(d,1H),6.92-6.97(m,2H),6.68(d,1H),6.39(d,1H),5.11-5.09(m,1H),4.33-4.31(m,2H),4.27-4.21(m,1H),3.95-3.91(m,1H),3.84-3.81(m,2H),3.74(s,3H),3.65-3.42(m,8H),3.36-3.34(m,2H),1.83-1.77(m,1H),1.01(d,3H),0.86-0.84(m,2H),0.64(s,3H),0.57-0.55(m,2H).
LC-MS,M/Z(ESI):512.7(M+1)
生物学活性及相关性质测试例
测试例1：PDE4B和PDE4D酶活试验
针对前面所合成的化合物，采用PDE-Glo Phosphodiesterase Assay Kit(promega，V1361)分别测试化合物针对PDE4B和PDE4D的抑制活性。按照试剂盒所提供的说明书，简言之，首先将待检测化合物在DMSO溶剂中配制成10mM的浓储液，随后以试剂盒提供的Reaction buffer稀释成10x工作液。以Reaction buffer在冰上操作将PDE4B酶(EnzoLife Sciences，BML-SE522-0020)稀释至浓度为1ng/微升，以得到PDE4B酶工作液，PDE4D酶(Enzo Life Sciences，BML-SE523-0020)稀释至浓度为4ng/微升，以得到PDE4D酶工作液。在384孔板(Corning，CLS3707)的孔中加入1.5微升PDE4B工作液(或者PDE4D工作液)和1微升化合物工作液，室温震荡孵育5分钟，随后加入2.5微升/孔cAMP(在Reaction buffer中，浓度为2μM)，继续室温震荡孵育20分钟，加入2.5μl/孔1×Termination Buffer，随后加入2.5μl/孔1×Detection Buffer，继续室温震荡20分钟。最后加入10μl/孔1×Kinase-Glo，室温震荡孵育10分钟，以PheraStar仪器检测生物发光。实验结果输入GraphPad Prism软件，经拟合计算得到各化合物的IC50。
实验结果表明，与阳性对照组化合物相比，本发明的化合物，例如化合物001～031对PDE4均具有更好或相当的抑制活性；另外，在抑制PDE4B/PDE4D的活性对比试验中发现，与最接近的现有技术相比(阳性对照组化合物)，本发明化合物，例如化合物001～004、006～012、014～015、025、027、028、031～034表现出更好的选择性PDE4B抑制作用，能有效改善呕吐等副作用的发生。另外，根据本发明的实施例，申请人对化合物005、化合物013、化合物016、化合物017、化合物018、化合物024、化合物029和化合物030进行了测试，结果表明这些化合物均能够有效地抑制PDE4B，并且相对于PDE4D而言，对于PDE4B的选择性抑制活性，要明显优于对照组化合物。
为方便理解，部分结果的数据总结在下表中：
表1：测试化合物对PDE4B和PDE4D的抑制活性结果
Figure BDA0002322426330000461
Figure BDA0002322426330000471
测试例2：LPS诱导人PBMC分泌TNFα模型试验
PBMC提取过程：吸取1单位人外周浓缩血(浓缩自200cc外周血)，加入0.9％生理盐水至总体积为120ml，混匀。取50ml离心管，加入15ml LymphoprepTM，之后小心而缓慢地加入30ml稀释后的浓缩血，使稀释血液重叠于分层液上，避免将稀释血液混入分离液或冲破分离液液面，其中，LymphoprepTM与稀释血液的比例为1:2。将离心管配平放置入水平离心机(eppendorf，5810R)，20℃，800g离心20min。小心取出离心管。直接将巴氏吸管深入白膜层，吸取PBMC。采用3倍体积0.9％生理盐水或PBS(不含钙或镁离子)，将所得到的PBMC轻轻吹打混匀。混匀后，在20℃下250g离心10min，去上清液去除细胞悬液中留存的血小板，将所得到的细胞沉淀以20ml PBS悬浮，并采用台盼蓝染色进行计数。
采用PBMC进行化合物筛选：将前面所得到的PBMC悬浮液进行离心，以去除PBS，然后用完全培养基(RPMI1640+10％FBS+1％P/S)重悬并计数。按照5×104/孔，100微升/孔接入细胞。将待筛选的化合物配制成终浓度的4×，按照50微升/孔加入到细胞中，在加入细胞之前，将化合物提前预孵育30min。同时设定对照孔，不加化合物。LPS的刺激终浓度为10ng/ml，配制成4×，按照50微升/孔加入到细胞中。同时设定对照孔，不加LPS孔。细胞继续孵育，在24h收集上清10％进行检测。Invitrogen公司的Human TNF-α试剂盒(REF：88-7346-88)对所得到的上清进行检测。
实验结果表明，与阳性对照组相比，本发明化合物取得了更好或者相当的人PBMC分泌TNFα抑制活性，特别是化合物001～003、006～008、010～012、028、031～034显著优于阳性对照组，能更好地抑制人PBMC中炎症因子TNFα的分泌，具有更为突出的抗炎效果。
为方便理解，部分结果的数据总结在下表中：
表2：测试化合物对LPS诱导人PBMC分泌TNFα的抑制活性结果
测试化合物 IC<sub>50</sub>(nM)
阳性对照组 3.32
001 0.36
002 0.56
003 1.48
004 5.13
005 6.18
006 2.52
007 2.24
008 1.81
009 7.57
010 1.05
011 1.55
012 2.52
014 15.1
015 3.34
020 9.38
021 14.1
022 1.01
023 5.4
024 6.56
025 3.26
026 14.9
028 2.94
031 0.70
032 0.26
033 0.53
034 0.32
测试例3：LPS刺激的小鼠体内释放TNF-α的测定
取18只Balb/c小鼠，周龄：6-8周，随机分配为空白组、模型组和给药组，每组6只小鼠，口服灌胃给予溶媒(空白组、模型组)或50mg/kg的化合物(给药组，其中阳性对照组给药剂量为100mg/kg)。灌胃给药30分钟后，腹腔注射PBS(空白组)或1mg/kg的LPS(模型组和给药组)。腹腔注射后90分钟或120分钟后，取小鼠心脏采血，2-8℃静置4h后5000rpm离心10分钟收集血清，血清-80℃保存待测。
用小鼠TNF-α检测试剂盒(Mouse TNFa ELISA试剂盒：Biolegend，Cat：430904)检测血清中TNF-α水平。根据血清TNF-α水平计算化合物对TNF-α的释放抑制活性。
化合物抑制活性％＝{1-(给药组TNFα浓度-空白组TNFα浓度)/(模型组TNFα浓度-空白组TNFα浓度)}×100％。
实验结果表明，与阳性对照组相比，本发明化合物能够更好的抑制小鼠体内LPS刺激的TNF-α的释放，抑制活性显著优于阳性对照组，具有更为突出的抗炎效果。
为方便理解，部分结果的数据总结在下表中：
表3：LPS刺激的小鼠体内释放TNF-α的测定
Figure BDA0002322426330000491
测试例4：药代动力学试验
大鼠药代动力学试验，采用雄性SD大鼠3只，180-240g，禁食过夜，口服灌胃给药10mg/kg。在给药前和在给药后15、30分钟以及1、2、4、8、24小时采血。血液样品8000转/分钟4℃离心6分钟，收集血浆，于-20℃保存。取各时间点血浆，加入3-5倍量含内标的乙腈溶液混合，涡旋混合1分钟，13000转/分钟4℃离心10分钟，取上清液加入3倍量水混合，取适量混合液进行LC-MS/MS分析。主要药代动力学参数用WinNonlin 7.0软件非房室模型分析。
小鼠药代动力学试验，使用雄性CD-1小鼠9只，20-25g，禁食过夜，口服灌胃给药10mg/kg，每个采血时间点3只小鼠，共9只小鼠交替采血。犬药代动力学试验，使用雄性比格犬3只，8-10kg，禁食过夜，口服灌胃给药5mg/kg。食蟹猴药代动力学试验，使用雄性食蟹猴3只，4-6.5kg，禁食过夜，口服灌胃给药20mg/kg。其余操作同大鼠药代动力学试验。
表4:小鼠、大鼠、犬的药代动力学试验结果
Figure BDA0002322426330000501
表5:食蟹猴的药代动力学试验结果
Figure BDA0002322426330000502
表4和表5的实验结果表明，与阳性对照组相比，本发明化合物的暴露量更优，表现出更为优良的药代动力学性质。同时，申请人也对生物利用度进行了考察，明显优于对照组化合物。
测试例5：小鼠CIA关节炎模型试验
1.实验方法
(1)Ⅱ型胶原/完全弗氏佐剂的配制
乙酸的配制：稀释2N的乙酸至100mM，用0.22微米滤膜过滤后，4℃保存。
牛Ⅱ型胶原溶液配制：将牛Ⅱ型胶原(CII)溶解于100mM的乙酸溶液中，并置于4℃过夜保存。胶原蛋白的终浓度为8mg/mL。
乳剂的制备：将过夜保存的CII溶液与等体积的完全弗氏佐剂混合，使用高速匀浆机，在冰上以30,000转每分钟匀浆大约60分钟，直至溶液形成稳定的乳剂。
(2)关节炎的诱导：
DBA/1小鼠经异氟烷麻醉后，在尾部皮下(距尾根部2-3厘米)注射50微升的制备好的胶原乳剂(包含200微克CII)进行免疫。第一次免疫当天记为第0天，随后的天数依序标注。第21天，尾部同法注射相同体积胶原乳剂。正常组的小鼠无需免疫。
(3)给药和剂量设计
第21天，将关节炎诱导的小鼠按照体重进行随机分组，使各组间平均体重一致，随机分为6个治疗组进行给药，每组10只小鼠。
G1为正常小鼠，不做任何处理；G2组给予空白溶媒；G3-G7给予化合物，剂量为30mg/kg，每天给药2次，共持续21天。灌胃给药体积为10mL/kg。
(4)关节炎发病指标测定
增强免疫后，每天观察小鼠发病情况。当小鼠开始发病之后(出现关节炎的临床症状)，根据病变的不同程度(红肿，关节变形)按照0-4分的标准进行临床评分，每个肢体的最高评分为4分，每只动物最高评分为16分。至少每周评分三次。
计算各组别21天到42天的临床评分曲线下面积(AUC)，并计算给药组的临床评分AUC抑制率百分比：
抑制率％＝1-(给药组AUC/空白溶媒组AUC)*100％
(5)统计学处理
实验数据应用平均数±标准误表示(Mean±SEM)，临床评分用单因素方差分析(One-way ANOVA)，p<0.05认为有显著性差异。
2.实验结果
参考图1，各组别试验终点临床评分和临床评分AUC抑制率结果见下表6。
表6：
Figure BDA0002322426330000511
Figure BDA0002322426330000521
在实验终点(第42天)时，各给药组临床评分显著低于空白溶媒组。第21天到42天的临床评分AUC抑制率结果显示，与阳性对照组相比，本发明化合物表现出更为优良的抑制关节炎的药效。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (21)

1.一种化合物，其为式(A)所示化合物或式(A)所示化合物的互变异构体、立体异构体或盐：
Figure FDA0003762943560000011
其中，
R为
Figure FDA0003762943560000012
R1和R2分别独立选自H、C1-C10烷基、C3-C10环烷基、C1-C10烷氧基、卤素和-CN；和
R3、R4和R5分别独立选自C1-C10烷基、C3-C10环烷基、C1-C10烷氧基、卤素和-CN，
前提是，
当R1为-CH3、Cl或-CN时，R2不为H，
当R1为H时，R2不为H、-CN或-CH3。
2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1、R3、R4和R5分别独立地选自卤素、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基和-CN。
3.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1、R3、R4和R5分别独立地选自卤素、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基和-CN。
4.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，R2选自H、C1-C5烷基、C1-C5烷氧基、卤素和-CN。
5.根据权利要求4所述的化合物，其特征在于，R2选自H、C1-C3烷基、C1-C3烷氧基、卤素和-CN。
6.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述卤素为F、Cl、Br或I。
7.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，
R1选自-CH3、-CF3、-CH2CH3、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、环丙基、F、Cl、Br或-CN；
R2选自H、-CH3、-CH2CH3、F、Cl、-CN；或者
R3、R4和R5各自独立选自-CH3、-CF3、-CH2CH3、-CH2CF3、-OCH3、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、环丙基、F、Cl、Br或-CN。
8.根据权利要求1所述的化合物，其为下列所示化合物或下列所示化合物的互变异构体、立体异构体或药学可接受的盐：
Figure FDA0003762943560000021
Figure FDA0003762943560000031
Figure FDA0003762943560000041
9.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，所述盐为药学上可接受的盐，选自下列的至少之一：硫酸、磷酸、硝酸、氢溴酸、盐酸、甲酸、乙酸、丙酸、苯磺酸、苯甲酸、苯乙酸、水杨酸、褐藻酸、氨茴酸、樟脑酸、柠檬酸、乙烯磺酸、蚁酸、富马酸、糠酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、乙醇酸、羟乙磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、粘液酸、双羟萘酸、泛酸、硬脂酸、琥珀酸、磺胺酸、酒石酸、对甲苯磺酸、丙二酸、2-羟基丙酸、草酸、羟乙酸、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、枸橼酸、赖氨酸、精氨酸、门冬氨酸、肉桂酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸或三氟甲磺酸。
10.一种药物组合物，其特征在于，包括：
权利要求1～9任一项所述的化合物作为活性成分；以及
可选的其他药物，所述其他药物用于治疗或者预防
PDE4相关疾病。
11.根据权利要求10所述的药物组合物，其特征在于，所述PDE4相关疾病选自下列疾病的至少之一：
炎性疾病、变应性疾病、自身免疫性疾病、移植排斥反应、与平滑肌收缩性相关疾病、哮喘、慢性支气管炎、慢性阻塞性肺炎、呼吸窘迫综合征、成人呼吸窘迫综合征、特发性皮炎、银屑病、荨麻疹、类风湿性关节炎、骨关节炎、痛风性关节炎或脊椎炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病和膀胱过度活动症、尿频和尿急。
12.根据权利要求11所述的药物组合物，其特征在于，所述变应性疾病为变应性鼻炎。
13.根据权利要求11所述的药物组合物，其特征在于，所述炎性疾病选自关节炎性疾病、皮肤炎性疾病和炎症性肠病的至少之一。
14.权利要求1～9任一项所述的化合物或者权利要求10～13任一项所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或者预防PDE4相关疾病。
15.权利要求1～9任一项所述的化合物或者权利要求10～13任一项所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗或者预防选自下列的至少之一：炎性疾病、变应性疾病、自身免疫性疾病、移植排斥反应以及与平滑肌收缩性相关疾病、哮喘、慢性支气管炎、慢性阻塞性肺炎、呼吸窘迫综合征、成人呼吸窘迫综合征、特发性皮炎、银屑病、荨麻疹、类风湿性关节炎、骨关节炎、痛风性关节炎或脊椎炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病和膀胱过度活动症、尿频和尿急。
16.根据权利要求15所述的用途，其特征在于，所述变应性疾病为变应性鼻炎。
17.根据权利要求15所述的用途，其特征在于，所述炎性疾病选自关节炎性疾病、皮肤炎性疾病和炎症性肠病的至少之一。
18.一种药物联合，包括：
权利要求1～9任一项所述的化合物作为活性成分；以及
其他药物，所述其他药物用于治疗或者预防
PDE4相关疾病。
19.根据权利要求16所述的药物联合，其特征在于，所述PDE4相关疾病选自下列疾病的至少之一：
炎性疾病、变应性疾病、自身免疫性疾病、移植排斥反应以及与平滑肌收缩性相关疾病、哮喘、慢性支气管炎、慢性阻塞性肺炎、呼吸窘迫综合征、成人呼吸窘迫综合征、特发性皮炎、银屑病、荨麻疹、类风湿性关节炎、骨关节炎、痛风性关节炎或脊椎炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病和膀胱过度活动症、尿频和尿急。
20.根据权利要求19所述的药物联合，其特征在于，所述变应性疾病为变应性鼻炎。
21.根据权利要求19所述的药物联合，其特征在于，所述炎性疾病选自关节炎性疾病、皮肤炎性疾病和炎症性肠病的至少之一。
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