CN111032018A

CN111032018A - 药物组合物

Info

Publication number: CN111032018A
Application number: CN201880052445.0A
Authority: CN
Inventors: 加里·库克; 萨利·路易斯·马什; 斯蒂芬·约翰·佩森; 迈克尔·布莱恩·罗伊; 克里斯多夫·马丁·叶
Original assignee: Kalvista Pharmaceuticals Ltd
Current assignee: Kalvista Pharmaceuticals Ltd
Priority date: 2017-08-11
Filing date: 2018-08-13
Publication date: 2020-04-17
Also published as: EP3664780A1; CA3071772A1; US20200261383A1; WO2019030540A1; MA49837A; TW201919600A; BR112020002325A2; JP2020530475A; KR20200038987A; SG11202001179YA; GB201713660D0; AU2018315034A1

Abstract

本发明涉及包含至少一种非离子张度剂、至少一种缓冲剂和活性成分的药物组合物水溶液，其中所述活性成分是式I的化合物，其中R¹‑R⁹是本文中所定义的；用于制备这些组合物的方法，以及其在医学中的用途、尤其是其在治疗眼病中的用途。

Description

药物组合物

技术领域

本发明涉及小分子血浆激肽释放酶抑制剂的药物组合物水溶液、用于制备这些组合物的方法及其在医学中的用途、尤其是其在治疗眼病中的用途。

背景技术

血浆激肽释放酶-激肽系统是血液蛋白质系统，其在炎症、血压控制、凝血和疼痛中起作用。血浆激肽释放酶-激肽系统在患有晚期糖尿病性黄斑水肿的患者中异常地丰富。最近已公开，血浆激肽释放酶有助于糖尿病大鼠中的视网膜血管功能障碍(A.Clermont等人，“Plasma kallikrein mediates retinal vascular dysfunction and inducesretinal thickening in diabetic rats(血浆激肽释放酶介导视网膜血管功能障碍并且诱导糖尿病大鼠中的视网膜增厚)”Diabetes,2011,60,p1590-98)。此外，施用血浆激肽释放酶抑制剂ASP-440改善了糖尿病大鼠中的视网膜血管通透性和视网膜血流异常二者。因此，血浆激肽释放酶抑制剂应当具有作为减轻与糖尿病性视网膜病相关的视网膜血管通透性和糖尿病性黄斑水肿的治疗的效用。糖尿病的其他并发症(诸如脑出血、肾病、心肌病和神经病，其全部都与血浆激肽释放酶相关)也可以被认为是血浆激肽释放酶抑制剂的靶标。

先前已描述合成和小分子血浆激肽释放酶抑制剂，例如Garrett等人(“Peptidealdehyde....”J.Peptide Res.52,p62-71(1998))，T.Griesbacher等人(“Involvement oftissue kallikrein but not plasma kallikrein in the development of symptomsmediated by endogenous kinins in acute pancreatitis in rats(在由大鼠急性胰腺炎中的内源性激肽介导的症状的发展中涉及组织激肽释放酶而不是血浆激肽释放酶)”British Journal of Pharmacology 137,p692-700(2002))，Evans(“Selectivedipeptide inhibitors of kallikrein(激肽释放酶的选择性二肽抑制剂)”WO03/076458)，Szelke等人(“Kininogenase inhibitors(激肽原酶抑制剂)”WO92/04371),D.M.Evans等人(Immunolpharmacology,32,p115-116(1996))，Szelke等人(“Kininogeninhibitors(激肽原抑制剂)”WO95/07921)，Antonsson等人(“New peptides derivatives(新型肽衍生物)”WO94/29335)，J.Corte等人(“Six membered heterocycles useful asserine protease inhibitors(可用作丝氨酸蛋白酶抑制剂的六元杂环)”WO2005/123680)，J.Stürzbecher等人(Brazilian J.Med.Biol.Res 27,p1929-34(1994))，Kettner等人(US 5,187,157)，N.Teno等人(Chem.Pharm.Bull.41,p1079-1090(1993))，W.B.Young等人(“Small molecule inhibitors of plasma kallikrein(血浆激肽释放酶的小分子抑制剂)”Bioorg.Med.Chem.Letts.16,p2034-2036(2006))，Okada等人(“Development ofpotent and selective plasmin and plasma kallikrein inhibitors and studies onthe structure-activity relationship(有效且选择性的纤溶酶和血浆激肽释放酶抑制剂的开发以及构效关系的研究)”Chem.Pharm.Bull.48,p1964-72(2000))，Steinmetzer等人(“Trypsin-like serine protease inhibitors and their preparation and use(胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶抑制剂及其制备和用途)”WO08/049595)，Zhang等人(“Discoveryof highly potent small molecule kallikrein inhibitors(高度有效的小分子激肽释放酶抑制剂的发现)”Medicinal Chemistry 2,p545-553(2006))，Sinha等人(“Inhibitorsof plasma kallikrein(血浆激肽释放酶抑制剂)”WO08/016883)，Shigenaga等人(“PlasmaKallikrein Inhibitors(血浆激肽释放酶抑制剂)”WO2011/118672)，以及Kolte等人(“Biochemical characterization of a novel high-affinity and specifickallikrein inhibitor(新型高亲和性和特异性激肽释放酶抑制剂的生化表征)”,BritishJournal of Pharmacology(2011),162(7),1639-1649)。此外，Steinmetzer等人(“Serineprotease inhibitors(丝氨酸蛋白酶抑制剂)”WO2012/004678)描述了环化肽类似物，其是人类纤溶酶和血浆激肽释放酶的抑制剂。

迄今为止，唯一的经批准用于医疗用途的选择性血浆激肽释放酶抑制剂是艾卡拉肽(Ecallantide)。艾卡拉肽被配制为注射用溶液。其是存在过敏性反应风险的大蛋白血浆激肽释放酶抑制剂。本领域已知的其他血浆激肽释放酶抑制剂通常是小分子，其中一些包括高度极性和可离子化的官能团，诸如胍或脒。最近，已经报导了不以胍或脒官能团为特征的血浆激肽释放酶抑制剂。例如，Brandl等人(“N-((6-amino-pyridin-3-yl)methyl)-heteroaryl-carboxamides as inhibitors of plasma kallikrein(作为血浆激肽释放酶抑制剂的N-((6-氨基-吡啶-3-基)甲基)-杂芳基-甲酰胺)”WO2012/017020)，Evans等人(“Benzylamine derivatives as inhibitors of plasma kallikrein(作为血浆激肽释放酶抑制剂的苄胺衍生物)”WO2013/005045)，Allan等人(“Benzylamine derivatives(苄胺衍生物)”WO2014/108679)，和Davie等人(“Heterocyclic derivates(杂环衍生物)”WO2014/188211)。

血浆激肽释放酶抑制剂的玻璃体内注射是已知的(例如，参见Evans等人，WO2013/005045)并且允许血浆激肽释放酶抑制剂直接递送至眼组织。然而，作为溶液给药并且通过玻璃体内注射施用的小分子通常在数小时内从玻璃体中清除(例如，参见David Maurice，“Review:Practical Issues in Intravitreal Drug Delivery(综述：玻璃体内药物递送中的实际问题)”,Journal of Ocular Pharmacology and Therapeutics，第17卷，第4期,2001，p393-401，和Chandrasekar Durairaj等人，“Prediction of Vitreal Half-LifeBased on Drug Physiochemical Properties:Quantitative Structure-Pharmacokinetic Relationships(QSPKR)(基于药物生化性质的玻璃体半衰期预测：定量结构-药代动力学关系(QSPKR))”，Pharmaceutical Research，第26卷，第5期，2009，p1236-1260)。

血浆激肽释放酶抑制剂的先前报导并未提供通过玻璃体内注射施用的水溶液制剂的延长的作用持续时间(例如大于7天)的证据。例如，Evans给出了在对兔进行玻璃体内注射后一种化合物的药代动力学数据。然而，所公开的数据仅限于给药后7天；并未描述该时间点后的数据。

玻璃体内注射是侵入性程序，并且因此期望降低的清除率和延长的作用持续时间以减少注射之间所需的时间段。Cook等人(“Pharmaceutical compositions(药物组合物)”WO2014/108685)公开了含有具有相对长的溶解时间的悬浮血浆激肽释放酶抑制剂的组合物，由此提供相对长的作用时间段。然而，含有悬浮活性物的药物组合物的问题在于需要另外的制造步骤，诸如降低活性成分的粒度和控制活性成分的粒度分布。还存在制剂中的悬浮液的不均匀性风险。

因此，需要包含血浆激肽释放酶抑制剂的药物组合物，其具有较长作用持续时间并且不具有与活性成分的悬浮液相关的缺点。此外，需要适于注射至眼中并且在眼组织(特别是视网膜)中具有较长作用持续时间的药物组合物。

发明内容

本发明的目的是提供血浆激肽释放酶抑制剂的药物组合物，其可以肠胃外施用，并且特别是通过玻璃体内注射施用。本发明的另一个目的是提供血浆激肽释放酶抑制剂的药物组合物，其具有相对长的作用时间段，特别是在眼组织中，从而使得在维持足够的体内血浆激肽释放酶抑制剂水平以提供预期临床效果的同时以比其他方式所需频率更低的频率施用组合物。

令人惊讶的是，已发现，本发明的包含血浆激肽释放酶抑制剂并且呈水溶液形式的药物组合物在通过玻璃体内注射施用时能够提供相对长的作用时间段。在施用药物组合物后，发现视网膜中的活性成分的水平特别高。

本发明的药物组合物水溶液相比于Cook等人的药物组合物水性悬浮液是有利地，因为水溶液在维持血浆激肽释放酶抑制剂的较长作用时间段的同时避免了需要与悬浮活性物相关的额外制造步骤(诸如降低活性成分的粒度和控制活性成分的粒度分布)。相比于Cook等人的药物组合物水性悬浮液，本发明的药物组合物水溶液的另一个优点在于与悬浮液相比，溶液不均匀性的风险极大降低。

在本申请中，前述血浆激肽释放酶抑制剂在下文中是指如下文所定义并且如Evans等人(“Benzylamine derivatives as inhibitors of plasma kallikrein(作为血浆激肽释放酶抑制剂的苄胺衍生物)”WO2013/005045)中所公开的式I的化合物。

玻璃体内注射本发明的组合物使得活性成分从玻璃体液中缓慢消除。此外，在视网膜中和在脉络膜中观察到特别高浓度的活性成分，这证实了活性成分到达后部眼组织。

因此，本发明的另一个目的是提供通过降低组合物需要施用至受试者的频率而具有改善的患者依从性的组合物。

本发明涉及用于肠胃外施用的水溶液形式的药物组合物，其包含至少一种非离子张度剂、至少一种缓冲剂和活性成分，其中所述活性成分是式I的化合物

其中：

R¹选自H、烷基、-CO烷基、-CO芳基、-CO杂芳基、-CO₂烷基、-(CH₂)_aOH、-(CH₂)_bCOOR¹⁰、-(CH₂)_cCONH₂、-SO₂烷基和-SO₂芳基；

R²选自H和烷基；

R³选自H、烷基、-(CH₂)_d芳基、-(CH₂)_e杂芳基、-(CH₂)_f环烷基、-(CH₂)_g杂环烷基、-CH(环烷基)₂和-CH(杂环烷基)₂；

R⁴和R⁶独立地选自H和烷基；

R⁵选自H、烷基、烷氧基和OH；

或R⁴和R⁵与其所连接的原子一起可以结合以形成5-或6-元氮杂环烷基结构；

R⁷和R⁸独立地选自H、烷基、烷氧基、CN和卤素；

R⁹是芳基或杂芳基；

R¹⁰是H或烷基；

a、b、c、d、e、f和g独立地是1、2或3；

*1和*2表示手性中心；

烷基是具有多达10个碳原子(C₁-C₁₀)的直链饱和烃或3至10个碳原子(C₃-C₁₀)的支链饱和烃；烷基可以任选地被独立地选自以下的1或2个取代基取代：(C₃-C₁₀)环烷基、(C₁-C₆)烷氧基、OH、CN、CF₃、COOR¹¹、氟和NR¹¹R¹²；

环烷基是3至10个碳原子的单环或双环饱和烃；环烷基可以任选地与芳基稠合；

杂环烷基是C-连接或N-连接的3至10元饱和单环或双环，其中所述杂环烷基环在可能的情况下含有独立地选自N、NR¹¹和O的1、2或3个杂原子；

烷氧基是1至6个碳原子(C₁-C₆)的直链的O-连接的烃或3至6个碳原子(C₃-C₆)的支链的O-连接的烃；烷氧基可以任选地被独立地选自以下的1或2个取代基取代：(C₃-C₁₀)环烷基、OH、CN、CF₃、COOR¹¹、氟和NR¹¹R¹²；

芳基是苯基、联苯基或萘基；芳基可以任选地被独立地选自以下的多达5个取代基取代：烷基、烷氧基、OH、卤素、CN、COOR¹¹、CF₃和NR¹¹R¹²；

杂芳基是5、6、9或10元单环或双环芳族环，其在可能的情况下含有独立地选自N、NR¹¹、S和O的1、2或3个环成员；杂芳基可以任选地被独立地选自以下的1、2或3个取代基取代：烷基、烷氧基、OH、卤素、CN、COOR¹¹、CF₃和NR¹¹R¹²；

R¹¹和R¹²独立地选自H和烷基；

及其互变异构体、异构体、立体异构体(包括其对映异构体、非对映异构体以及外消旋和非外消旋(scalemic)混合物)和药用盐。

本发明还涉及用于治疗由血浆激肽释放酶介导的疾病或病况的方法，所述方法包括向哺乳动物肠胃外施用本发明的药物组合物。

由血浆激肽释放酶介导的疾病或病况可以选自受损的视敏度、糖尿病性视网膜病、与糖尿病性视网膜病相关的视网膜血管通透性、糖尿病性黄斑水肿、视网膜血管阻塞、遗传性血管性水肿、糖尿病、胰腺炎、脑出血、高血糖患者中的脑出血、肾病、心肌病、神经病、炎性肠病、关节炎、炎症、败血性休克、低血压、癌症、成人呼吸窘迫综合征、弥漫性血管内凝血、心肺转流手术期间的血液凝固和外科手术后出血。

优选地，由血浆激肽释放酶介导的疾病或病况选自受损的视敏度、糖尿病性视网膜病、与糖尿病性视网膜病相关的视网膜血管通透性、糖尿病性黄斑水肿和视网膜血管阻塞。更优选地，由血浆激肽释放酶介导的疾病或病况是与糖尿病性视网膜病相关的视网膜血管通透性或糖尿病性黄斑水肿。

附图简述

图1在第1天单次双侧玻璃体内注射化合物1之后的复合眼组织浓度-时间曲线。数据表示为每一样品时间点的来自一只动物的个别眼数据。

图2在第1天、第29天和第57天向兔双侧玻璃体内注射化合物1之后的平均眼组织浓度-时间曲线。数据表示为每一样品时间点的来自一只动物的平均数据。

图3在第1天、第29天和第57天向猴单次双侧玻璃体内注射化合物1之后的平均眼组织浓度-时间曲线(第58天至第99天)。数据表示为每一样品时间点的来自一只动物的平均数据。

具体实施方式

活性成分

本发明的药物组合物是水溶液。优选地，当使用微观粒子计数测试测量时，本发明的药物组合物满足USP＜788＞(Particulate matter in injections(注射中的颗粒物质))对于容器体积为2mL的小体积注射的要求。使用微观粒子计数测试，USP＜788＞中对于小体积注射所提供的接受限值为所测试的每一个离散单元中或所测试的每一个合并样品中存在的粒子数(实际或计算)不超过3000个/容器(等于或大于10μm)，并且不超过300个/容器(等于或大于25μm)。

更优选地，当使用微观粒子计数测试测量时，本发明的药物组合物满足USP＜788＞(注射中的颗粒物质)对于大体积注射的要求。使用微观粒子计数测试，USP＜788＞中对于大体积注射所提供的接受限值为所测试的每一个离散单元中或所测试的每一个合并样品中存在的粒子数(实际或计算)不超过12个/mL(等于或大于10μm)，并且不超过2个/mL(等于或大于25μm)。

更优选地，当使用微观粒子计数测试测量时，本发明的药物组合物满足USP＜789＞(Particulate matter in ophthalmic solutions(眼用溶液中的颗粒物质))的要求。使用微观粒子计数测试，USP＜789＞中提供的接受限值为所测试的单元中存在的粒子平均数不超过50个/mL(等于或大于10μm)，并且不超过5个/mL(等于或大于25μm)，并且不超过2个/mL(等于或大于50μm)。

本文中对USP＜788＞和USP＜789＞的提及是指美国药典(United StatesPharmacopeia，USP)37,NF 32中的USP＜788＞和USP＜789＞。

本发明的组合物是水性的，但是可以预配制为无菌非水溶液或呈干燥形式，其可以随后用合适的水性载体(例如无菌无热原水)重构。在一些实施方案中，组合物可以提供为本体溶液，其在使用之前进一步用例如无菌无热原水稀释。

本发明的组合物可以是低渗、等渗或高渗的。本发明的组合物的重量渗透摩尔浓度通常为约250至约350mOsmol/kg。例如，组合物的重量渗透摩尔浓度可以为250、260、270、280、290、300、310、320、330、340或350mOsmol/kg。

组合物的pH将通常为约2至约10，例如pH 2、3、4、5、6、7、8、9或10。优选地，组合物的pH将为约4至约8，例如pH为约5至约7.5。更优选地，组合物的pH将为约5至约6。

本发明的组合物包括式I的血浆激肽释放酶抑制剂作为活性成分。通常，活性成分以以下浓度存在于组合物中：约5μg/mL至约500μg/mL、或约5μg/mL至约300μg/mL、或约30μg/mL至约300μg/mL、或约5μg/mL至约200μg/mL、或约10μg/mL至约200μg/mL。在优选的实施方案中，活性成分以约10μg/mL至约200μg/mL的浓度存在于组合物中。通常，活性成分以以下浓度存在于组合物中：约5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、30μg/mL、40μg/mL、50μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL、150μg/mL或200ug/mL。所指定的浓度是指组合物中式I的血浆激肽释放酶抑制剂的游离碱的浓度。式I的血浆激肽释放酶抑制剂的游离碱具有式I所描绘的结构。

活性成分是式I的血浆激肽释放酶抑制剂

其中：

R²选自H和烷基；

R⁴和R⁶独立地选自H和烷基；

R⁵选自H、烷基、烷氧基和OH；

R⁷和R⁸独立地选自H、烷基、烷氧基、CN和卤素；

R⁹是芳基或杂芳基；

R¹⁰是H或烷基；

a、b、c、d、e、f和g独立地是1、2或3；

*1和*2表示手性中心；

R¹¹和R¹²独立地选自H和烷基；

及其互变异构体、异构体、立体异构体(包括其对映异构体、非对映异构体以及外消旋和非外消旋混合物)和药用盐。

在一些实施方案中，血浆激肽释放酶抑制剂是式I的化合物，其中：

R¹选自H、烷基、-CO烷基、-CO芳基、-CO₂烷基、-CH₂CH₂OH、-CH₂COOR¹⁰、-CH₂CONH₂、-SO₂烷基和-SO₂芳基；

R²选自H和烷基；

R³选自烷基、-CH₂芳基、-CH₂环烷基和-CH(环烷基)₂；

R⁴和R⁶独立地选自H和烷基；

R⁵选自H、烷基和OH；

R⁷和R⁸独立地选自H、F和Cl；

R⁹是芳基；

R¹⁰是H或烷基；

*1和*2表示手性中心；

烷基是具有多达6个碳原子(C₁-C₆)的直链饱和烃或3至6个碳原子(C₃-C₆)的支链饱和烃；烷基可以任选地被独立地选自以下的1或2个取代基取代：(C₃-C₁₀)环烷基、(C₁-C₆)烷氧基、OH、CN、CF₃、COOR¹¹、氟和NR¹¹R¹²；

环烷基是3至10个碳原子的单环或双环饱和烃；

R¹¹和R¹²独立地选自H和烷基；

在本发明的实施方案中，R¹选自H、烷基、-CO烷基、-CO芳基、-(CH₂)_aOH、-(CH₂)_bCOOR¹⁰、-(CH₂)_cCONH₂、-SO₂烷基和-SO₂芳基。

在本发明的实施方案中，R¹选自H、烷基、-CO烷基、-CO芳基、-(CH₂)_aOH、-CH₂COOR¹⁰、-CH₂CONH₂、-SO₂烷基和-SO₂芳基；其中a是1或2。

在本发明的实施方案中，R¹选自H、-CO芳基、-CO烷基、-CH₂COOH、-SO₂Ph和-SO₂CH₃。

在本发明的实施方案中，R¹选自H、-CO乙基、甲基、甲基磺酰基、-CO苯基、苯基砜、-CH₂COOH、-CO-ⁱ丙基、丙基、-CH₂COOCH₃、-CH₂CONH₂、-CH₂CH₂OH和-CO萘基。

在本发明的实施方案中，R¹选自-CO烷基和-CO苯基。

在本发明的实施方案中，R¹选自H、-CO芳基、CO杂芳基、-CO烷基、-CH₂COOH、-SO₂Ph和-SO₂CH₃。

在本发明的实施方案中，R¹选自-CO烷基、CO杂芳基和-CO芳基。

在本发明的实施方案中，R²选自H和甲基。

在本发明的实施方案中，R²是H。

在本发明的实施方案中，R³选自烷基、-(CH₂)_d芳基、-(CH₂)_f环烷基和-CH(环烷基)₂；其中d和f独立地是1或2。

在本发明的实施方案中，R³选自烷基、-CH₂芳基、-CH₂环烷基和-CH(环烷基)₂。

在本发明的实施方案中，R³选自-CH₂芳基、-CH₂环烷基和-CH(环烷基)₂。

在本发明的实施方案中，R³选自：

在本发明的实施方案中，R⁴选自H和甲基。

在本发明的实施方案中，R⁴是H。

在本发明的实施方案中，R⁵选自H、烷基和OH。

在本发明的实施方案中，R⁵选自H和OH。

在本发明的实施方案中，R⁵是H。

在本发明的实施方案中，R⁴和R⁵与其所连接的原子一起结合以形成吡咯烷部分。

在本发明的实施方案中，R⁴和R⁵与其所连接的原子一起结合以形成哌啶部分。

在本发明的实施方案中，R⁶选自H和甲基。

在本发明的实施方案中，R⁶是H。

在本发明的实施方案中，R⁷选自H、甲基和卤素。

在本发明的实施方案中，R⁷选自H、F和Cl。

在本发明的实施方案中，R⁷是H。

在本发明的实施方案中，R⁸选自H、甲基和卤素。

在本发明的实施方案中，R⁸选自H、F和Cl。

在本发明的实施方案中，R⁸选自H和F。

在本发明的实施方案中，R⁸是H。

在本发明的实施方案中，R⁹是芳基。

在本发明的实施方案中，R⁹选自苯基和萘基，其中苯基可以任选地被独立地选自以下的多达3个取代基取代：烷基、烷氧基、OH、卤素、CN、COOR¹¹、CF₃和NR¹¹R¹²。

在本发明的实施方案中，R⁹是苯基，其中苯基可以任选地被独立地选自以下的多达2个取代基取代：烷基、卤素和CF₃。

在本发明的实施方案中，R⁹选自苯基、1-萘、2,4-二氯苯基、3,4-二氯苯基、3,4-二氟苯基、4-氯苯基、4-三氟甲基苯基和4-乙氧基苯基。

在本发明的实施方案中，R⁹选自苯基、杂芳基和萘基，其中苯基可以任选地被独立地选自以下的多达3个取代基取代：烷基、烷氧基、OH、卤素、CN、COOR¹¹、CF₃和NR¹¹R¹²。

在本发明的实施方案中，R⁹选自苯基、1-萘、3,4-二氯苯基、3,4-二氟苯基、4-氯苯基、4-氟苯基、3-氟苯基、4-三氟甲基苯基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、吡啶-4-基、苯并噻吩-3-基、噻吩-2-基、噻吩-3-基、吲哚-3-基和噻唑-4基。

在本发明的实施方案中，R¹⁰是H或甲基。

在本发明的实施方案中，关于手性中心*1的立体化学构型是R。

在本发明的实施方案中，关于手性中心*2的立体化学构型是S。

在本发明的实施方案中，a是2并且b、c、d、e、f和g是1。

在本发明的实施方案中，a是2并且b、c、d、e、f、g、h、j、l和m是1。

在本发明的实施方案中，k是0或1。

在优选的实施方案中，活性成分是选自以下的化合物：

(S)-N-(4-氨基甲基-苄基)-2-[(R)-3-(4-乙氧基-苯基)-2-丙酰基氨基-丙酰基氨基]-3-苯基-丙酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

{(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-环己基-乙基氨基}-乙酸；

(S)-N-(4-氨基甲基-3-氟-苄基)-2-[(R)-3-(4-乙氧基-苯基)-2-丙酰基氨基-丙酰基氨基]-3-苯基-丙酰胺；

(S)-N-(4-氨基甲基-2-氯-苄基)-2-[(R)-3-(4-乙氧基-苯基)-2-丙酰基氨基-丙酰基氨基]-3-苯基-丙酰胺；

(S)-N-(4-氨基甲基-苄基)-3-(3,4-二氯-苯基)-2-[(R)-3-(4-乙氧基-苯基)-2-丙酰基氨基-丙酰基氨基]-丙酰胺；

(S)-N-(4-氨基甲基-3-氯-苄基)-2-[(R)-3-(4-乙氧基-苯基)-2-丙酰基氨基-丙酰基氨基]-3-苯基-丙酰胺；

(S)-N-(4-氨基甲基-苄基)-2-{[(R)-3-(4-乙氧基-苯基)-2-丙酰基氨基-丙酰基]-甲基-氨基}-3-苯基-丙酰胺；

({(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-环己基-乙基}-甲基-氨基)-乙酸；

(S)-N-(4-氨基甲基-3-氟-苄基)-2-{[(R)-3-(4-乙氧基-苯基)-2-丙酰基氨基-丙酰基]-甲基-氨基}-3-苯基-丙酰胺；

N-[(R)-1-{[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基]-甲基-氨甲酰基}-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-{[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基]-甲基-氨甲酰基}-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-异丁酰胺；

萘-1-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-4-氯-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-2,4-二氯-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-3,4-二氟-苯甲酰胺；

(R)-2-氨基-N-[(1S,2S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-羟基-2-苯基-乙基]-3-(4-乙氧基-苯基)-丙酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-烟酰胺；

(2S,3S)-N-(4-氨基甲基-苄基)-2-[(R)-3-(4-乙氧基-苯基)-2-丙酰基氨基-丙酰基氨基]-3-羟基-3-苯基-丙酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-异烟酰胺；

噻吩-3-甲酸-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

环己烷甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

异噁唑-5-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

吡啶-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

苯并[b]噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

(R)-N-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基]-2-(4-氯-苯磺酰基氨基)-3-(4-乙氧基-苯基)-丙酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-3-氯-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-2-氯-苯甲酰胺

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-3-三氟甲基-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-4-甲基-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-3,4-二氯-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-4-甲氧基-苯甲酰胺；

(S)-N-(4-氨基甲基-苄基)-2-[(R)-3-(4-乙氧基-苯基)-2-(2-苯基乙酰基氨基-乙酰基氨基)-丙酰基氨基]-3-苯基-丙酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-4-氟-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-6-甲基-烟酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-2-甲基-烟酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-2,6-二氯-烟酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-5,6-二氯-烟酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-2,3,6-三氟-异烟酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-3,3,3-三氟-丙酰胺；

2,4-二甲基-噻唑-5-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

2-甲基-噻唑-5-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

3-氯-噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

4-甲基-噻唑-5-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

呋喃-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

3-甲基-噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-2-甲氧基-异烟酰胺；

3-甲基-1H-吡咯-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

3-氨基-噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-丙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-2-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-(3,4-二氯-苯基)-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-(4-氯-苯基)-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-(4-氟-苯基)-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-(4-甲氧基-苯基)-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-4-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-(3-氟-苯基)-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-噻吩-2-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-噻吩-3-基-乙基氨甲酰基-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-噻唑-4-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯并[b]噻吩-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-3-氟-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-3-氯-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

吡啶-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-噻吩-2-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-2-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-4-甲氧基-苯甲酰胺；

吡啶-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-3-氯-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-4-甲氧基-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-(3,4-二氟-苯基)-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-异烟酰胺；

噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-2-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-4-氯-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-2-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-4-甲基-苯甲酰胺；

吡啶-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-(3,4-二氯-苯基)-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

(R)-N-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-2-基-乙基]-3-(4-乙氧基-苯基)-2-丙酰基氨基-丙酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-3-氟-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-异烟酰胺；

吡啶-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-3-氟-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-(3,4-二氯-苯基)-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

(R)-N-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-3-基-乙基]-3-(4-乙氧基-苯基)-2-丙酰基氨基-丙酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-(3,4-二氯-苯基)-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-异烟酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-(3,4-二氯-苯基)-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-3,3,3-三氟-丙酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-4-氯-苯甲酰胺；

异噁唑-5-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-4-甲基-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-(3,4-二氟-苯基)-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

3-氯-噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯并[b]噻吩-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-异烟酰胺；

3-乙酰基氨基-噻吩-2-甲酸-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-(2-氟-苯基)-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

3-甲基-噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-3-甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

3-氨基-噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-噻唑-4-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

3-氯-噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-噻唑-4-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-噻唑-4-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-4-甲基-苯甲酰胺；

3-甲基-1H-吡咯-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯并[b]噻吩-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

3-乙酰基氨基-噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯并[b]噻吩-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-3-甲基-苯甲酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-2-甲基-苯甲酰胺；

3,5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-3-甲基-苄基氨甲酰基)-2-吡啶-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

3-乙酰基氨基-噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-噻吩-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

3-氨基-噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯并[b]噻吩-3-基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

3-氯-噻吩-2-甲酸[(R)-1-{[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基]-甲基-氨甲酰基}-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；

N-[(R)-1-[(1S,2R)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-羟基-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺；

3-氯-噻吩-2-甲酸[(R)-1-[(1S,2R)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-羟基-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-酰胺；和

N-{(R,S)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-[4-(2,2,2-三氟-乙氧基)-苯基]-乙基}-苯甲酰胺；

及其药用盐。

在特别优选的实施方案中，活性成分是N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺或其药用盐。N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺是血浆激肽释放酶抑制剂。在更优选的实施方案中，活性成分是N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺盐酸盐。

本发明中所使用的化合物可以使用适当的材料根据已知程序、尤其是Evans等人(“Benzylamine derivatives as inhibitors of plasma kallikrein(作为血浆激肽释放酶抑制剂的苄胺衍生物)”WO2013/005045)所描述的那些程序来制备。此外，通过利用这些程序，本领域普通技术人员可以容易地制备可以用于本发明的组合物中的另外的化合物。

本发明中所使用的化合物可以以其药用盐形式(诸如本文所描述的那些)分离。药用盐通常是盐酸盐。

赋形剂

本发明的组合物适用于肠胃外施用。特别地，本发明的组合物可以适用于注射至眼中。更特别地，本发明的组合物可以适用于玻璃体内注射。

本发明的组合物包括一种或多种药用赋形剂。术语“赋形剂”在本文中用于描述除活性成分以外的任何成分，其可以赋予制剂功能特性(例如注射能力、稳定性增强、药物释放速率控制)和/或非功能特性(例如处理助剂或稀释剂)。赋形剂的选择在很大程度上将取决于诸如以下因素：具体施用模式、赋形剂对溶解性和稳定性的效应以及剂型的性质。

本发明的组合物包括至少一种缓冲剂。使用缓冲剂可以使pH的波动最小化，这可以改善稳定性和/或改善施用后组合物在受试者中的耐受性。可以用于本发明的组合物中的合适的缓冲剂包括组氨酸、乙酸盐、柠檬酸盐、二甲胂酸盐、bis-tris、马来酸盐、哌嗪、MES(2-(N-吗啉基)乙磺酸)、酒石酸盐、乳酸盐；琥珀酸盐；硫酸盐；磷酸盐；丙氨酸；咪唑；精氨酸和天冬酰胺。通常，缓冲剂选自组氨酸、马来酸盐和柠檬酸盐。优选地，缓冲剂是组氨酸。缓冲剂的pH通常将为约2至约10，例如约pH 2、3、4、5、6、7、8、9或10。通常，缓冲剂的pH将为约4至约8。优选地，缓冲剂的pH将为约5至约7.5。更优选地，缓冲剂的pH将为约5至约6的pH。在实施方案中，缓冲剂不是PBS(磷酸盐缓冲盐水)。

缓冲剂的pH可以通过添加酸或碱来调整。例如，缓冲剂的pH可以用盐酸来调整。本发明中所提及的缓冲剂还旨在包括缓冲剂的盐。例如，组氨酸缓冲剂包括组氨酸盐酸盐缓冲剂。

本发明的组合物包含以下量的缓冲剂：约0.0001％至约1％，或约0.001％至约0.32％，任选地约0.01％至约0.16％。优选地，本发明的组合物包含按组合物的重量计约0.01％至约0.08％的量的缓冲剂。通常，本发明的组合物包含按组合物的重量计约0.01％、0.02％、0.03％或0.04％的量的缓冲剂。

本发明的组合物包括至少一种非离子张度剂。使用非离子张度剂允许控制组合物的重量渗透摩尔浓度。非离子张度剂通常是碳水化合物并且优选是糖。非离子张度剂可以选自包含以下的组：甘油；糖，例如葡萄糖、甘露醇、山梨糖醇、海藻糖、右旋糖、乳糖、麦芽糖、果糖、蔗糖和肌醇；羟基乙基淀粉，例如羟乙基淀粉(hetastarch)和五聚淀粉(pentastarch)。非离子张度剂通常是右旋糖或海藻糖。优选地，非离子张度剂是海藻糖。

本发明的组合物可以不含或基本上不含盐水。本发明的组合物优选不含磷酸盐缓冲盐水。

本发明的组合物可以含有组氨酸作为缓冲剂以及右旋糖或海藻糖作为非离子张度剂，并且可以任选地不含或基本上不含磷酸盐缓冲盐水。

本发明的组合物可以为低渗、等渗或高渗的。可以期望用于玻璃体内注射的组合物与玻璃体等渗，即具有与玻璃体相同的有效重量渗透摩尔浓度，以便不破坏玻璃体和周围组织的体液平衡。

本发明的组合物包含按组合物的重量计约0.1％至约30％(例如按组合物的重量计约0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、2.5％、5％、10％、15％、20％、25％或30％)的量的非离子张度剂。通常，本发明的组合物包含按组合物的重量计约1％至约20％、或约5％至约15％、或约7％至约12％、或按组合物的重量计约8％至约10％的量的非离子张度剂。通常，本发明的组合物包含按组合物的重量计约8％、9％或10％的量的非离子张度剂。

本发明的组合物的重量渗透摩尔浓度通常为约250至约350mOsmol/kg。例如，组合物的重量渗透摩尔浓度可以为250、260、270、280、290、300、310、320、330、340或350mOsmol/kg。技术人员应理解，所使用的非离子张度剂的量可以根据试剂的具体选择和组合物中的其他组分而变化。

组合物可以包括非离子表面活性剂，诸如羧酸酯、聚乙二醇酯、脂肪酸的二醇酯、乙氧基化脂族醇、聚氧乙烯表面活性剂、山梨糖醇酯、山梨糖醇酯的乙氧基化衍生物、脂肪酸的二醇酯和泊洛沙姆(poloxamer)。聚氧乙烯表面活性剂包括聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯，其也称为聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯80(聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯，

80)、聚山梨醇酯40(聚氧乙烯脱水山梨糖醇单棕榈酸酯，

40)和聚山梨醇酯20(聚氧乙烯脱水山梨糖醇单月桂酸酯，

20)。优选地，非离子表面活性剂是聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯。更优选地，非离子表面活性剂是聚山梨醇酯20。

备选地，本发明的组合物可以不含或基本上不含非离子表面活性剂，诸如羧酸酯、聚乙二醇酯、脂肪酸的二醇酯、乙氧基化脂族醇、聚氧乙烯表面活性剂、山梨糖醇酯、山梨糖醇酯的乙氧基化衍生物、脂肪酸的二醇酯和泊洛沙姆。聚氧乙烯表面活性剂包括聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯，其也称为聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯80(聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯，

80)、聚山梨醇酯40(聚氧乙烯脱水山梨糖醇单棕榈酸酯，

40)和聚山梨醇酯20(聚氧乙烯脱水山梨糖醇单月桂酸酯，

20)。本发明的组合物优选不含聚山梨醇酯(例如聚山梨醇酯20)。

本发明的组合物可以含有组氨酸作为缓冲剂以及右旋糖或海藻糖作为非离子张度剂，并且可以任选地不含或基本上不含聚山梨醇酯(例如聚山梨醇酯20)。

组合物可以包括抗氧化剂，诸如丙酮、亚硫酸氢钠、丁基化羟基茴香醚、丁基化羟基甲苯、半胱氨酸、半胱氨酸盐HCl、连二亚硫酸钠、龙胆酸、龙胆酸乙醇胺、谷氨酸单钠、甲醛次硫酸钠、偏亚硫酸氢钾、偏亚硫酸氢钠、一硫代甘油、没食子酸丙酯、亚硫酸钠、巯基乙酸钠或抗坏血酸。备选地，特别是对于组合物的眼内使用，包装可以以控制组合物的氧化电位的方式来配置，包括例如在制造期间用惰性气体吹扫。

在本发明的组合物中，活性成分在玻璃体液中的半衰期t_1/2可以为至少约1天，例如至少约3天、至少约5天或约7天以上。在本发明的组合物中，活性成分在玻璃体液中的t_1/2可以小于约40天，例如小于约30天、小于约20天。在本发明的组合物中，活性成分在玻璃体液中的t_1/2可以为约1天至约40天，例如约3天至约30天或约5天与约20天。

在本发明的组合物中，活性成分在视网膜中的半衰期t_1/2可以为至少约1天，例如至少约3天、至少约5天或约7天以上。在本发明的组合物中，活性成分在视网膜中的t_1/2可以小于约40天，例如小于约30天、小于约20天。在本发明的组合物中，活性成分在视网膜中的t_1/2可以为约1天至约40天，例如约3天至约30天或约5天至约20天。

在本发明的组合物中，活性成分在视网膜-脉络膜复合体中的半衰期t_1/2可以为至少约1天，例如至少约3天、至少约5天或约7天以上。在本发明的组合物中，活性成分在视网膜-脉络膜复合体中的t_1/2可以小于约40天，例如小于约30天、小于约20天。在本发明的组合物中，活性成分在视网膜-脉络膜复合体中的t_1/2可以为约1天至约40天，例如约3天至约30天或约5天至约20天。

另外的治疗剂

本发明的组合物可以包括一种或多种其他治疗剂。例如，组合物可以包括以下中的一种或多种：抑制血小板源生长因子(PDGF)的药剂、抑制内皮生长因子(VEGF)的药剂和抑制整联蛋白(例如整联蛋白α5β1)的药剂。组合物也可以包括一种或多种类固醇。组合物也可以包括其他抑制血浆激肽释放酶的药剂和/或其他炎症抑制剂。组合物也可以包括缓激肽的拮抗剂，例如缓激肽B2受体的拮抗剂，诸如药物艾替班特(icatibant)。

可以包括在本发明的组合物中的治疗剂的具体实例包括EP2281885A和S.Patel，Retina，2009年6月；29(6Suppl):S45-8中公开的那些。

在一些实施方案中，式I的血浆激肽释放酶抑制剂和一种或多种其他治疗剂可以存在于相同的药物组合物水溶液中。在其他实施方案中，式I的血浆激肽释放酶抑制剂和一种或多种其他治疗剂可以存在于不同的药物组合物中(其中一者是药物组合物水溶液)。组合物可以分开、顺序或同时施用。

施用、医学治疗和用途

本发明也提供了用于治疗由血浆激肽释放酶介导的疾病或病况的方法，所述方法包括向哺乳动物肠胃外施用本发明的药物组合物。

本发明也提供了本发明的药物组合物，其用于治疗由血浆激肽释放酶介导的疾病或病况。

本发明也提供了本发明的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗由血浆激肽释放酶介导的疾病或病况，其中所述治疗包括施用本发明的药物组合物。

所述用途和方法可用于治疗由血浆激肽释放酶介导的疾病或病况。例如，所述用途和方法可用于治疗受损的视敏度、糖尿病性视网膜病、与糖尿病性视网膜病相关的视网膜血管通透性、糖尿病性黄斑水肿、视网膜血管阻塞、遗传性血管性水肿、糖尿病、胰腺炎、脑出血、高血糖患者中的脑出血、肾病、心肌病、神经病、炎性肠病、关节炎、炎症、败血性休克、低血压、癌症、成人呼吸窘迫综合征、弥漫性血管内凝血、心肺转流手术期间的血液凝固和外科手术后出血。优选地，所述用途和方法可用于治疗受损的视敏度、糖尿病性视网膜病、与糖尿病性视网膜病相关的视网膜血管通透性、糖尿病性黄斑水肿和视网膜血管阻塞。更优选地，所述用途和方法可用于治疗与糖尿病性视网膜病相关的视网膜血管通透性或糖尿病性黄斑水肿。在一些实施方案中，所述用途和方法可用于治疗疾病状态的微血管并发症。

本发明的组合物适于肠胃外施用。因此，可以将本发明的化合物直接施用至例如血流、皮下组织、肌肉、眼睛或内部器官中。

用于肠胃外施用的合适的方式包括动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内、滑膜内、皮下、静脉内、玻璃体内、玻璃体内注射或玻璃体腔内。在一些实施方案中，组合物可以经由手术切口施用至皮下组织、肌肉组织中或直接施用至特定器官中。

在一个优选的实施方案中，通过玻璃体内注射施用组合物。为了改善患者依从性，在通过玻璃体内注射施用组合物时，优选的是相对不频繁地施用组合物。例如，可以约每两周一次至约每6个月一次地施用组合物，例如约每个月一次至约每6个月一次、或约一个月一次、或约每两个月一次、每三个月一次、每四个月一次或每五个月一次地施用组合物。优选地，将每一个月一次或每两个月一次或每三个月一次地施用组合物。任选地，将每一个月一次地施用组合物。

用于肠胃外施用的合适的装置包括针式(包括微型针)注射器、无针式注射器和输注技术。

在一些实施方案中，所述用途和方法涉及组合疗法。例如，所述用途和方法还可以包括视网膜的激光治疗。已知用于治疗糖尿病性黄斑水肿的激光疗法与玻璃体内注射VEGF抑制剂的组合(Elman M、Aiello L、Beck R等人“Randomized trial evaluatingranibizumab plus prompt or deferred laser or triamcinolone plus prompt laserfor diabetic macular edema”.Ophthalmology.2010年4月27日)。

设想本发明的组合物将采取无菌水溶液的形式。肠胃外制剂在无菌条件下的制备(例如通过冻干和重构)可以容易地使用本领域技术人员所熟知的标准医药技术来完成。例如，用于对本发明的组合物进行灭菌的合适的方法可以是终末灭菌，或无菌过滤之后进行无菌灌封。终末灭菌方法、无菌过滤和无菌处理描述于美国药典USP＜1211＞药典法规的灭菌和无菌保证(Sterilization and Sterility Assurance of Compendial Articles)中，并且终末灭菌进一步描述于美国药典USP＜1222＞终末灭菌的药物产品-参量释放(Terminally Sterilized Pharmaceutical Products-Parametric Release)中。(参见美国药典(USP)37,NF 32)。

可以在主治医师的监督下将组合物施用至患者。

方法

本发明还涉及用于制备本发明的药物组合物的方法。

在一个实施方案中，提供了用于制备本发明的药物组合物的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)制备至少一种非离子张度剂和至少一种缓冲剂在水中的溶液；

(b)将式I的化合物或其药用盐溶解于步骤(a)中制备的溶液中；

其中至少一种非离子张度剂、至少一种缓冲剂和式I的化合物是如本文所定义的。

优选地，步骤(a)中使用的水是无菌注射用水。

所述方法还可以包括以下步骤：

(c)将至少一种非离子张度剂和至少一种缓冲剂的水溶液添加至步骤(b)中制备的溶液；和/或

(d)对溶液进行灭菌。

优选地，步骤(d)中的灭菌通过无菌过滤进行。

本发明也提供了用于制备本发明的药物组合物的方法，所述方法包括将水添加至包含至少一种非离子张度剂、至少一种缓冲剂和活性成分的非水性制剂，其中所述活性成分是式I的化合物或其药用盐，并且其中至少一种非离子张度剂、至少一种缓冲剂和式I的化合物是如本文所定义的。

定义

术语“水性”意指组合物包括水作为溶剂。通常，组合物中的水含量按组合物的重量计大于或等于约35重量％、优选大于约50％，例如按组合物的重量计大于约60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％。

术语“包含”涵盖“包括”以及“由……组成”，例如，“包含”X的组合物可以排他性地由X组成或可以包括其他事物，例如X+Y。

词语“基本上”不排除“完全”，例如“基本上不含”Y的组合物可以完全不含Y。如果需要，词语“基本上”可以从本发明的定义中省略。

关于数值x的术语“约”是任选的并且意指例如x±10％。

术语“烷基”包括饱和烃残基，包括：

-多达10个碳原子(C₁-C₁₀)、或多达6个碳原子(C₁-C₆)、或多达4个碳原子(C₁-C₄)的直链基团。这样的烷基的实例包括但不限于C₁-甲基、C₂-乙基、C₃-丙基和C₄-正丁基；

-3至10个碳原子(C₃-C₁₀)、或多达7个碳原子(C₃-C₇)、或多达4个碳原子(C₃-C₄)的支链基团。这样的烷基的实例包括但不限于C₃-异丙基、C₄-仲丁基、C₄-异丁基、C₄-叔丁基和C₅-新戊基；

每个任选地如上文所述的被取代。

术语“烷氧基”包括O-连接的烃残基，包括：

-1至6个碳原子(C₁-C₆)或1至4个碳原子(C₁-C₄)的直链基团。这样的烷氧基的实例包括但不限于C₁-甲氧基、C₂-乙氧基、C₃-正丙氧基和C₄-正丁氧基；

-3至6个碳原子(C₃-C₆)或3至4个碳原子(C₃-C₄)的支链基团。这样的烷氧基的实例包括但不限于C₃-异丙氧基和C₄-仲丁氧基和叔丁氧基；

每个任选地如上文所述的被取代。

除非另外陈述，否则卤素选自Cl、F、Br和I。

环烷基是如上文所定义的。环烷基可以含有3至10个碳原子、或4至10个碳原子、或5至10个碳原子、或4至6个碳原子。合适的单环环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。合适的二环环烷基的实例包括十氢萘和八氢-1H-茚。当与芳基稠合时，合适的环烷基的实例包括二氢茚基和1,2,3,4-四氢萘基。

杂环烷基是如上文所定义的。合适的杂环烷基的实例包括氧杂环丙基、氮杂环丙基、氮杂环丁基、四氢呋喃基、吡咯烷基、四氢吡喃基、哌啶基、N-甲基哌啶基、吗啉基、N-甲基吗啉基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基、氮杂环庚基、氧氮杂环庚基和二氮杂环庚基。

芳基是如上文所定义的。通常，芳基将任选地被1、2或3个取代基取代。任选的取代基选自上文所述的那些。合适的芳基的实例包括苯基和萘基(每个任选地如上文所述的被取代)。

杂芳基是如上文所定义的。合适的杂芳基的实例包括噻吩基、呋喃基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、异噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并三唑基、喹啉基和异喹啉基(任选地如上文所述的被取代)。

术语“C-连接”，诸如在“C-连接的杂环烷基”中，意指杂环烷基经由环碳原子结合至分子的其余部分。

术语“N-连接”，诸如在“N-连接的杂环烷基”中，意指杂环烷基经由环氮原子结合至分子的其余部分。

术语“O-连接”，诸如在“O-连接的烃残基”中，意指烃残基经由氧原子结合至分子的其余部分。

在诸如-CO烷基和-(CH₂)_bCOOR¹⁰的基团中，“-”表示取代基与分子的其余部分的连接点。

“药用盐”意指生理学上或毒物学上可耐受的盐，并且在适当时包括药用碱加成盐和药用酸加成盐。例如，(i)在化合物含有一个或多个酸性基团(例如羧基)的情况下，可以形成的药用碱加成盐包括钠盐、钾盐、钙盐、镁盐和铵盐，或与有机胺诸如二乙胺、N-甲基-葡萄糖胺、二乙醇胺或氨基酸(例如赖氨酸)等的盐；(ii)在化合物含有碱性基团(诸如氨基)的情况下，可以形成的药用酸加成盐包括盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、磷酸盐、乙磺酸盐(esylate)、甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、萘二磺酸盐、马来酸盐、己二酸盐、富马酸盐、马尿酸盐、樟脑酸盐、昔萘酸盐(xinafoate)、对乙酰氨基苯甲酸盐、二羟基苯甲酸盐、羟基萘甲酸盐、琥珀酸盐、抗坏血酸盐、油酸盐、硫酸氢盐等。

也可以形成酸和碱的半盐，例如，半硫酸盐和半钙盐。

关于合适的盐的综述，参见“Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection and Use(药用盐手册：性质、选择和用途)”，Stahl和Wermuth(Wiley-VCH,Weinheim，德国，2002)。

“前药”是指可在体内通过代谢方式(例如通过水解、还原或氧化)转化成本发明化合物的化合物。用于形成前药的合适的基团描述于“The Practice of MedicinalChemistry(医学化学实践)”，第2版，pp561-585(2003)和F.J.Leinweber,DrugMetab.Res.,1987,18,379中。

在用于本发明的组合物中的化合物以一种或多种几何、光学、对映异构、非对映异构和互变异构形式存在的情况下，包括但不限于顺式-和反式-形式、E-和Z-形式、R-、S-和内消旋-形式、酮-和烯醇-形式，则除非另外陈述，否则对具体化合物的提及包括所有这些异构形式，包括外消旋及其其他混合物。在适当时，可以通过应用或调整已知方法(例如层析技术和重结晶技术)将这样的异构体从其混合物中分离。在适当时，可以通过应用或调整已知方法(例如不对称合成)来制备这样的异构体。

对具体化合物的提及也包括所有同位素变体。

在本发明的上下文中，本文中对“治疗”的提及包括对治愈性、姑息性和预防性治疗的提及。

实施本发明的模式

通过以下实施例进一步说明本发明。应理解，实施例仅出于说明性目的并且不旨在如上文所描述限制本发明。在不背离本发明的范围的情形下可以对细节作出修改。在以下实施例中，使用以下缩写和定义：

aq	水溶液
		hrs	小时
IPA	异丙醇
		Me	甲基
MeCN	乙腈
		MeOH	甲醇
Min	分钟
		QS	适量(足量)
Ph	苯基
		RRT	相对保留时间
SWFI	无菌注射用水
		rt	室温

重量渗透摩尔浓度

使用符合USP＜785＞(freezing point depression(冰点降低))的校准渗透压计测定重量渗透摩尔浓度。(参见美国药典(USP)37,NF 32)。

颗粒物质

使用USP＜789＞(Particulate matter in ophthalmic solutions(眼用溶液中的颗粒物质))中描述的微观粒子计数测试来测量药物组合物中的颗粒物质(参见美国药典(USP)37,NF 32)。

合成实施例

式I的化合物可以根据Evans等人(“Benzylamine derivatives as inhibitorsof plasma kallikrein(作为血浆激肽释放酶抑制剂的苄胺衍生物)”WO2013/005045)中所描述的方法来制备。N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺盐酸盐(“化合物1”)可以使用WO2014/006414中公开的方法来制备。化合物1的结构如下所示：

浓度

以下实施例中限定的浓度和剂量水平基于化合物1的游离碱的量。

实施例1：

制备化合物1在0.01％聚山梨醇酯20、8.7％海藻糖、0.155％组氨酸(10mM)、QSSWFI中的10、30、100μg/mL溶液的制剂，并且以0.5、1.5、5μg/眼给药。下文提供了进一步的细节。

载体制备

利用70％IPA对通风橱和实验室器具进行消毒。利用无菌注射用水(SWFI)将盐酸(5.00mL)补足至体积(50.0mL)。利用SWFI将聚山梨醇酯20(5.00g)补足至体积(50.0mL)。

将海藻糖(43.53g)、组氨酸(0.78g)、先前制备的稀盐酸(2.06mL)和先前制备的聚山梨醇酯20溶液(0.50mL)溶解于SWFI中并且补足至体积(500.0mL)。经由无菌设备真空过滤溶液。

剂量制备

将化合物1和载体从冰箱中取出并且使其达到室温。

作为剂量制剂制备中的第一步，将150mL载体无菌过滤。

称重出三个单独的5mg化合物1样品并且置于三个单独的无菌容器中。将一定体积(大约20mL)的载体添加至每个无菌容器中，其中体积(以mL计)相当于每个无菌容器的游离碱化合物1的大约4×质量(以mg计)，以在每个无菌容器中产生饱和溶液。向每个饱和溶液中添加磁力搅拌棒并且在室温下将容器置于磁力搅拌器上大约72小时。将每个饱和溶液离心，并且经由0.22μm PVDF过滤器过滤上清液。弃掉前1mL滤液。

三份单独的所得过滤溶液相当于大约100μg/mL。保留所得过滤溶液中的一者以用作100μg/mL剂量制剂。

将来自三份100μg/mL所得过滤溶液中的第二份的6mL用14mL过滤载体稀释以产生30μg/mL过滤溶液。

将来自三份100μg/mL所得过滤溶液中的第三份的2mL用18mL过滤载体稀释以产生10μg/mL过滤溶液。

配制的测试样品取样和分析

在剂量施用当天(第1天)，从每个化合物1制剂浓度的顶部层、中间层和底部层获得一式两份的1mL样品。在分析之前将所有剂量制剂样品冷藏(2至8℃)。分析每个化合物1制剂浓度的一组样品的载体中测试样品的浓度和均匀性。将一式两份的样品中的另一组冷藏储存(2至8℃)直至获得结果并且结果看起来可接受为止。

浓度结果为标示量的90.4％至105％。

药代动力学研究

在研究开始时，将15只大约7月龄且重1.7至2.3公斤的实验未处理

的雄性荷兰黑带兔(Dutch-belted rabbit)分配至如下表1中所示的治疗组。

表1：组鉴别

*浓度和剂量水平根据测试样品的游离碱形式表示。

在第1天向动物施用一次化合物1药物制剂水溶液的单次双侧玻璃体内注射。在第2天、第5天、第8天、第15天和第29天排定的终末处死时，使第1至3组中的一只动物/组在尸体剖检时收获双眼并解剖以分离以下用于分析化合物1浓度：房水、玻璃体液和脉络膜/视网膜(或视网膜-脉络膜组织复合体)。视网膜和脉络膜组织浓度示于图1中。AUC、Cmax和t_1/2数据分别总结于表5、6和7中。

实施例2

制备化合物1在于SWFI中的9.8％海藻糖、0.03％组氨酸(2mM)中的100μg/mL溶液制剂并且以5μg/眼以每月间隔给药。在向荷兰黑带兔的双眼或向食蟹猴的单眼多次双侧玻璃体内注射后，表征化合物1的眼组织和体液浓度。下文提供了进一步的细节。

化合物1的10、30、100和300μg/mL溶液制剂的制备

通过将L-组氨酸(1.09g)和海藻糖二水合物(356.7g)在搅动下溶解于SWFI(3270g)中来制备9.8％w/w海藻糖和2mM组氨酸缓冲溶液。根据需要使用1.0N HCl溶液调整缓冲剂pH并且用SWFI稀释至3640g以产生缓冲溶液。将化合物1(0.340g)溶解于海藻糖-组氨酸缓冲剂(2800g)溶液中，在40℃下利用高能转子定子混合足够时间以提供可见澄清的无色溶液，大约15-30min。根据需要用1.0N HCl溶液调整溶液的pH。使用HPLC来测定溶液中化合物1的浓度，并且根据需要将溶液用海藻糖-组氨酸缓冲溶液稀释。经由两个串联的PVDF无菌过滤模块将所得的100μg/mL化合物1溶液制剂无菌过滤至无菌、去热原的派热克斯(pyrex)玻璃容器中。

利用常见缓冲剂并且在化合物1的量有所变化的情况下类似地制备化合物1的10、30和300μg/mL溶液制剂。例如，使用0.104g化合物1来制备30μg/mL溶液并且使用0.0363g化合物1来制备10μg/mL溶液制剂。

下表2提供了化合物1的10、30、100和300μg/mL溶液制剂的分析和表征数据。

表2：化合物1的10、30、100和300μg/mL溶液制剂的分析和表征数据

*C,C,L,FVP＝澄清、无色、液体、不含可见粒子

**LC％＝标示量％

***ND＝未检测

当填充至用氯丁基橡胶塞密封的2mL透明1型玻璃小瓶中时，化合物1的10、30、100和300μg/mL溶液制剂是稳定的，如表3中的数据所示。

表3：化合物1的10、30、100和300μg/mL溶液制剂的稳定性数据

*C,C,L,FVP＝澄清、无色、液体、不含可见粒子

**LC％＝标示量％

+RH＝相对湿度

兔中的眼药代动力学研究

在研究开始时，将19只大约7月龄且重1.7至2.3公斤的实验未处理

的雄性荷兰黑带兔分配至如下表4中所示的治疗组。

表4：组鉴别

*浓度和剂量水平根据测试样品的游离碱形式表示

在第1天、第29天和第57天向动物施用一次化合物1药物制剂水溶液的单次双侧玻璃体内注射。在第1天、第2天、第8天、第29天、第30天、第36天、第57天、第58天、第60天、第62天、第64天、第71天、第78天、第85天、第99天、第113天和第127天排定的终末处死时，使一只动物/组在尸体剖检时收获双眼并解剖以分离以下用于分析化合物1浓度：房水、玻璃体液、脉络膜和视网膜。玻璃体、视网膜和脉络膜组织浓度示于图2中。所得AUC和Cmax数据分别总结于表5和表6中。

出于比较目的，还提供了WO2013/005045的图2中所示的配制于磷酸盐缓冲盐水中的化合物1(4.2μg/mL化合物1)的数据。

眼组织(玻璃体、视网膜和脉络膜)浓度表明活性成分在作为药物组合物水溶液递送时具有出乎意料地长的半衰期，并且视网膜(和脉络膜)水平证实活性成分能够到达后部眼组织。

表5：在单次或多次双侧IVT给药化合物1后兔中化合物1眼组织和体液暴露(AUC)的总结

NC＝未计算；浓度低于分析定量限或数据不充分

*第三次给药后28天的AUC；取样区间第57天至第85天

**仅视网膜值

表6：在单次或多次双侧IVT给药化合物1后兔中化合物1眼组织和体液暴露(C_max)的总结

NC＝未计算；浓度低于分析定量限或数据不充分

*给药区间第1天至第29天的Cmax，**给药区间第29天至第57天的Cmax，***给药区间第57天至第127天的Cmax

⁺仅视网膜值

表7：在单次或多次双侧IVT给药化合物1后兔中化合物1眼组织和体液暴露(终末半衰期，t_1/2)的总结

NC＝未计算；浓度低于分析定量限或数据不充分

猴中的眼药代动力学研究

将6只实验未处理

的雄性食蟹猴分配至如下表8中所示的治疗组。

表8：组鉴别

*浓度和剂量水平根据测试样品的游离碱形式表示

在第1天、第29天和第57天向动物施用一次化合物1药物制剂水溶液的单次双侧玻璃体内注射。在第58天、第71天、第85天和第99天排定的终末处死时，使一只动物/组在尸体剖检时收获双眼并解剖以分离以下用于分析化合物1浓度：房水、玻璃体液、脉络膜和视网膜。所得AUC和Cmax数据总结于表9中。玻璃体、视网膜和脉络膜组织浓度示于图3中。眼组织(玻璃体、视网膜和脉络膜)浓度表明活性成分在作为药物组合物水溶液递送时具有出乎意料地长的半衰期，并且视网膜(和脉络膜)水平证实活性成分能够到达后部眼组织。

表9：在多次玻璃体内注射化合物1后99天取样时期内着色(Pigmented)猴的眼药代动力学

第三次给药后计算的AUC 0-最后；取样区间第57天至第99天

应理解，本发明仅通过实施例的方式来描述并且在仍属本发明的范围和精神时对本发明作出修改。

Claims

1.一种用于肠胃外施用的水溶液形式的药物组合物，所述药物组合物包含至少一种非离子张度剂、至少一种缓冲剂和活性成分，其中所述活性成分是式I的化合物

其中：

R²选自H和烷基；

R⁴和R⁶独立地选自H和烷基；

R⁵选自H、烷基、烷氧基和OH；

R⁷和R⁸独立地选自H、烷基、烷氧基、CN和卤素；

R⁹是芳基或杂芳基；

R¹⁰是H或烷基；

a、b、c、d、e、f和g独立地是1、2或3；

*1和*2表示手性中心；

R¹¹和R¹²独立地选自H和烷基；

2.根据权利要求1所述的组合物，其中R⁹选自苯基和萘基，其中苯基可以任选地被独立地选自以下的多达3个取代基取代：烷基、烷氧基、OH、卤素、CN、COOR¹¹、CF₃和NR¹¹R¹²。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的组合物，其中R⁹选自苯基、1-萘、2,4-二氯苯基、3,4-二氯苯基、3,4-二氟苯基、4-氯苯基、4-三氟甲基苯基和4-乙氧基苯基。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中R¹选自H、-CO芳基、-CO烷基、-CH₂COOH、-SO₂Ph和-SO₂CH₃。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中R¹选自-CO烷基和-CO芳基。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的组合物，其中R³选自：

7.根据权利要求1至6中任一项所述的组合物，其中R⁴和R⁶选自H和CH₃。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的组合物，其中关于手性中心*1的立体化学构型是R。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的组合物，其中关于手性中心*2的立体化学构型是S。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的组合物，其中a是2并且b、c、d、e、f、g、h、j、l和m是1。

11.根据权利要求1所述的组合物，其中所述式I的化合物选自：

及其药用盐。

12.根据权利要求1所述的组合物，其中所述式I的化合物是N-[(R)-1-[(S)-1-(4-氨基甲基-苄基氨甲酰基)-2-苯基-乙基氨甲酰基]-2-(4-乙氧基-苯基)-乙基]-苯甲酰胺或其药用盐。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的组合物，其中基于所述组合物中所述式I的化合物的游离碱的浓度，所述式I的化合物以约5μg/mL至约300μg/mL的量存在。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的组合物，其中所述至少一种非离子张度剂选自包含以下的组：甘油；糖，例如葡萄糖、甘露醇、山梨糖醇、海藻糖、右旋糖、乳糖、麦芽糖、果糖、蔗糖和肌醇；羟基乙基淀粉，例如羟乙基淀粉和五聚淀粉。

15.根据权利要求1至13中任一项所述的组合物，其中所述至少一种非离子张度剂是右旋糖或海藻糖，优选海藻糖。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的组合物，其中所述至少一种非离子张度剂以按所述组合物的重量计约0.1％至约30％的量存在。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的组合物，其中所述组合物的pH为约2至约10，优选约5至约7.5。

18.根据权利要求1至17中任一项所述的组合物，其中所述组合物具有约250至约350mOsmol/kg的重量渗透摩尔浓度。

19.根据权利要求1至18中任一项所述的组合物，其中所述至少一种缓冲剂选自包含以下的组：组氨酸、乙酸盐、柠檬酸盐、二甲胂酸盐、bis-tris、马来酸盐、哌嗪、MES(2-(N-吗啉基)乙磺酸)、酒石酸盐、乳酸盐；琥珀酸盐；硫酸盐；磷酸盐；丙氨酸；咪唑；精氨酸和天冬酰胺。

20.根据权利要求1至19中任一项所述的组合物，其中所述至少一种缓冲剂是组氨酸。

21.根据权利要求1至20中任一项所述的组合物，其中所述组合物基本上不含盐水。

22.根据权利要求1至21中任一项所述的组合物，其中所述组合物含有组氨酸作为缓冲剂，以及右旋糖或海藻糖作为非离子张度剂。

23.根据权利要求1至22中任一项所述的组合物，其中所述组合物基本上不含磷酸盐缓冲盐水。

24.根据权利要求1至23中任一项所述的组合物，所述组合物还包含非离子表面活性剂，其中所述非离子表面活性剂是聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯，优选地其中所述非离子表面活性剂是聚山梨醇酯20。

25.根据权利要求1至23中任一项所述的组合物，其中所述组合物基本上不含非离子表面活性剂，诸如羧酸酯、聚乙二醇酯、脂肪酸的二醇酯、乙氧基化脂族醇、聚氧乙烯表面活性剂、山梨糖醇酯、山梨糖醇酯的乙氧基化衍生物、脂肪酸的二醇酯和泊洛沙姆。聚氧乙烯表面活性剂包括聚氧乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯，其也被称为聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯80(聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯，

80)、聚山梨醇酯40(聚氧乙烯脱水山梨糖醇单棕榈酸酯，

40)和聚山梨醇酯20(聚氧乙烯脱水山梨糖醇单月桂酸酯，

20)。

26.根据权利要求1至25中任一项所述的组合物，其用于注射至眼中，优选玻璃体内注射。

27.根据权利要求1至26中任一项所述的组合物，其中所述活性成分是HCl盐。

28.根据权利要求1至27中任一项所述的组合物，其中在玻璃体内注射后，所述活性成分在玻璃体液中的半衰期t_1/2为至少约1天，例如至少约3天或至少约5天，或优选约7天以上。

29.根据权利要求1至28中任一项所述的组合物，其中在玻璃体内注射后，所述活性成分在玻璃体液中的t_1/2小于约40天，例如小于约30天、小于约20天。

30.根据权利要求1至27中任一项所述的组合物，其中在玻璃体内注射后，所述活性成分在玻璃体液中的t_1/2为约1天至约40天，例如约3天至约30天，或约5天至约20天。

31.根据权利要求1至30中任一项所述的组合物，其中在玻璃体内注射后，所述活性成分在视网膜中的半衰期t_1/2为至少约1天，例如至少约3天或至少约5天，或优选约7天以上。

32.根据权利要求1至31中任一项所述的组合物，其中在玻璃体内注射后，所述活性成分在视网膜中的t_1/2小于约40天，例如小于约30天、小于约20天。

33.根据权利要求1至30中任一项所述的组合物，其中在玻璃体内注射后，所述活性成分在视网膜中的t_1/2为约1天至约40天，例如约3天至约30天，或约5天至约20天。

34.根据权利要求1至30中任一项所述的组合物，其中在玻璃体内注射后，所述活性成分在视网膜-脉络膜复合体中的半衰期t_1/2为至少约1天，例如至少约3天或至少约5天，或优选约7天以上。

35.根据权利要求1至30或34中任一项所述的组合物，其中在玻璃体内注射后，所述活性成分在视网膜-脉络膜复合体中的t_1/2小于约40天，例如小于约30天、小于约20天。

36.根据权利要求1至30中任一项所述的组合物，其中在玻璃体内注射后，所述活性成分在视网膜-脉络膜复合体中的t_1/2为约1天至约40天，例如约3天至约30天，或约5天至约20天。

37.一种用于治疗由血浆激肽释放酶介导的疾病或病况的方法，所述方法包括向哺乳动物肠胃外施用根据权利要求1至36中任一项所述的药物组合物。

38.根据权利要求37所述的方法，其中所述由血浆激肽释放酶介导的疾病或病况选自受损的视敏度、糖尿病性视网膜病、与糖尿病性视网膜病相关的视网膜血管通透性、糖尿病性黄斑水肿、视网膜血管阻塞、遗传性血管性水肿、糖尿病、胰腺炎、脑出血、高血糖患者中的脑出血、肾病、心肌病、神经病、炎性肠病、关节炎、炎症、败血性休克、低血压、癌症、成人呼吸窘迫综合征、弥漫性血管内凝血、心肺转流手术期间的血液凝固和外科手术后出血。

39.根据权利要求37所述的方法，其中所述由血浆激肽释放酶介导的疾病或病况选自受损的视敏度、糖尿病性视网膜病、与糖尿病性视网膜病相关的视网膜血管通透性、糖尿病性黄斑水肿和视网膜血管阻塞。

40.根据权利要求37所述的方法，其中所述由血浆激肽释放酶介导的疾病或病况是与糖尿病性视网膜病相关的视网膜血管通透性或糖尿病性黄斑水肿。

41.根据权利要求37至40中任一项所述的方法，其用于治疗疾病状态的微血管并发症。

42.根据权利要求37至41中任一项所述的方法，其中所述肠胃外施用是动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌内、滑膜内、皮下、静脉内、注射至眼中、玻璃体内、玻璃体内注射或玻璃体腔内。

43.根据权利要求42所述的方法，其中所述肠胃外施用是玻璃体内注射。

44.根据权利要求37至43中任一项所述的方法，其中约每两周一次至约每6个月一次、例如约一个月一次、或约每两个月一次、每三个月一次、每四个月一次或每五个月一次地施用所述组合物。

45.根据权利要求37至44中任一项所述的方法，其中所述方法包括组合疗法。

46.根据权利要求45所述的方法，其中所述方法包括视网膜的激光治疗。

47.一种用于制备根据权利要求1至36中任一项所述的组合物的方法，所述方法包括以下步骤：

(b)将式I的化合物或其药用盐溶解在步骤(a)中制备的溶液中；

其中所述至少一种非离子张度剂、所述至少一种缓冲剂和所述式I的化合物如权利要求1中所定义。

48.根据权利要求47所述的方法，其中步骤(a)中使用的水是无菌注射用水。

49.根据权利要求47或权利要求48所述的方法，所述方法还包括以下步骤：

(c)将至少一种非离子张度剂和至少一种缓冲剂的水溶液添加至步骤(b)中制备的所述溶液中。

50.根据权利要求47至49中任一项所述的方法，所述方法还包括以下步骤：

(d)对所述溶液进行灭菌。

51.根据权利要求50所述的方法，其中步骤(d)中的灭菌通过无菌过滤进行。

52.一种用于制备根据权利要求1至36中任一项所述的组合物的方法，所述方法包括将水添加至包含至少一种非离子张度剂、至少一种缓冲剂和活性成分的非水性制剂中，其中所述活性成分是式I的化合物或其药用盐；并且