CN119818386A - 一种生物肽抑菌漱口水及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种生物肽抑菌漱口水及其制备方法与应用。该漱口水包含特定比例的SEQ NO.1、SEQ NO.2和SEQ NO.3小分子肽，以及甘油、透明质酸钠、椰油酰胺丙基甜菜碱等助剂。这些小分子肽分别针对口腔细菌细胞壁合成、细胞膜转运和细胞膜能量代谢相关蛋白发挥作用，组合后产生协同增效的抑菌效果。经抑菌圈试验和最低抑菌浓度测定，本发明漱口水对变形链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的抑菌效果显著优于传统漱口水和单一生物肽漱口水，且具有良好的生物相容性、低毒性，能有效清洁口腔、预防口腔疾病，适用于日常口腔护理。

Description

一种生物肽抑菌漱口水及其制备方法与应用

技术领域

本发明属于生物医药和化学技术领域，具体涉及一种生物肽抑菌漱口水及其制备方法与应用。

背景技术

口腔是一个复杂的微生态系统，众多微生物在此栖息。正常情况下，口腔微生物与人体处于平衡状态，但当平衡被打破时，就会引发各类口腔疾病。龋齿、牙龈炎、牙周炎和口臭等问题困扰着许多人，严重影响生活质量。

传统漱口水多以化学杀菌剂如氯己定作为主要抑菌成分。氯己定虽能抑制口腔微生物生长，但其长期使用存在诸多弊端。它容易导致口腔黏膜刺激，引起使用者不适，甚至可能造成口腔黏膜损伤。而且，氯己定还会使牙齿染色，影响牙齿美观，这对于注重形象的使用者来说是难以接受的。此外，随着人们健康意识的提高，对天然、安全的口腔护理产品的需求日益迫切。

生物肽因其良好的生物相容性、低毒性以及独特的生物活性，逐渐成为口腔护理领域的研究热点。然而，现有的生物肽漱口水仍存在一些不足。部分生物肽漱口水的抑菌效果不够理想，难以有效应对多种口腔致病菌。一些生物肽漱口水的稳定性较差，在储存和使用过程中有效成分容易失活或降解，从而影响产品的抑菌性能和保质期。而且，单一生物肽往往只能针对细菌的某一特定靶点或生理过程发挥作用，抑菌谱相对较窄，难以实现全面高效的抑菌效果。

基于以上背景，开发一种具有高效抑菌性能、良好稳定性且安全无刺激的生物肽抑菌漱口水具有重要的现实意义。本发明旨在通过设计新型小分子肽序列，并优化漱口水配方，克服现有技术的缺陷，为口腔护理市场提供一种更优质的产品。

发明内容

本发明提供了一种生物肽抑菌漱口水，包含以下小分子肽SEQ NO.1：Leu-His-Pro-Gly-Tyr-Lys-Glu。

进一步，还包含以下小分子肽SEQ NO.2：Arg-Trp-Ser-Ile-Asp-Met-Cys。

进一步，还包含以下小分子肽SEQNO6：Phe-Ala-Val-Gln-Thr-Asn-Leu。另一方面，一种生物肽抑菌漱口水，包含以下重量百分比的成分：SEQ NO.1(Leu-His-Pro-Gly-Tyr-Lys-Glu)小分子肽：0.15份-0.35份；

SEQ NO.2(Arg-Trp-Ser-Ile-Asp-Met-Cys)小分子肽：0.1份-0.2份；

SEQ NO.3(Phe-Ala-Val-Gln-Thr-Asn-Leu)小分子肽：0.1份-0.2份；

保湿剂：甘油5份-10份和透明质酸钠0.1份-0.3份；

表面活性剂：椰油酰胺丙基甜菜碱1份-3份；

调味剂：薄荷脑0.1份-0.3份和木糖醇2份-5份；

防腐剂：山梨酸钾0.05份-0.15份；

缓冲剂：磷酸氢二钠0.2份-0.5份和柠檬酸0.1份-0.3份；

缓释有机化合物:2-(2-羟基苯氧基)乙酸乙酯,1份-3份。

其余为去离子水。

进一步，所述SEQ NO.1小分子肽通过与口腔细菌细胞壁合成过程中的转糖基酶的活性位点特异性结合，阻碍肽聚糖合成过程中糖链的延伸，从而抑制细菌生长。

进一步，所述SEQ NO.2小分子肽通过与口腔细菌细胞膜上的ATP结合盒式转运蛋白的底物结合位点相互作用，阻止其对营养物质的摄取以及有害物质的排出，进而抑制细菌增殖。

进一步，其中所述SEQ NO.3小分子肽通过与口腔细菌细胞膜上的质子动力势相关蛋白结合，干扰其正常的构象和功能，破坏细菌细胞膜的能量转换和物质运输平衡，从而抑制细菌生长。

进一步，SEQ NO.1、SEQ NO.2和SEQ NO.3.小分子肽按照3:2:2的比例组合时，对变形链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的混合菌群具有协同抑菌作用，在总肽浓度为0.3mg/mL的情况下，对上述混合菌群抑制率达到85份以上。进一步，缓释有机化合物:2-(2-羟基苯氧基)乙酸乙酯,1份-3份。2-(2-羟基苯氧基)乙酸乙酯该化合物具有酯基和羟基苯氧基结构。酯基在口腔环境中可缓慢水解，释放出具有抑菌活性的羟基苯氧基乙酸。羟基苯氧基乙酸能够与多种口腔细菌的蛋白质和酶分子中的氨基、巯基等基团发生反应，改变其结构和功能，从而增强漱口水的抑菌效果。

另一方面，本发明还提供了一种制备所述生物肽抑菌漱口水的方法，包括以下步骤：

S1分别采用化学合成法制备SEQ NO.1、SEQ NO.2和SEQ NO.3小分子肽，在合成过程中，选择合适的固相合成树脂，用保护基团对相应氨基酸修饰后，依序将氨基酸偶联到树脂上，控制反应温度在20-30℃，pH值在6-8，每个氨基酸偶联时间为1-2小时，肽链合成完成后去除保护基团并切割，再经高效液相色谱纯化鉴定，使肽的纯度达95份以上；

S2将纯化后的SEQ NO.1、SEQ NO.2和SEQ NO.3小分子肽按照权利要求1所述比例与保湿剂、表面活性剂、调味剂、防腐剂以及缓冲剂等成分在适量去离子水中混合，先分别溶解小分子肽于少量去离子水，再依次加入其他成分，在搅拌器中以200-400转/分钟的速度缓慢搅拌30-60分钟直至均匀；

S3最后用0.22μm微孔滤膜过滤混合溶液以去除杂质，得到生物肽抑菌漱口水成品，并进行无菌包装。

所述生物肽抑菌漱口水在口腔护理中的应用，用于预防和改善由变形链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌引起的口腔疾病，包括龋齿、牙龈炎、口臭。发明的有益效果：

本发明的生物肽抑菌漱口水通过包含SEQ NO.1、SEQ NO.2和SEQ NO.3三种新型小分子肽，针对口腔细菌的多个关键靶点发挥作用。三种小分子肽的组合产生了协同增效作用，并非简单的叠加。SEQ NO.1破坏细菌细胞壁结构，为SEQNO.2和SEQ NO.3与细胞膜靶点结合创造条件；SEQ NO.2干扰细胞膜转运蛋白功能，削弱细菌代谢与修复能力，与SEQ NO.3共同作用于细胞膜体系；SEQ NO.3破坏细菌细胞膜的能量和物质运输平衡，反过来影响细菌对细胞壁损伤的应对和转运蛋白功能的维持。这种协同作用从多方面攻击细菌，极大地增强了抑菌效果。生物肽由天然氨基酸组成，具有良好的生物相容性，对口腔黏膜和牙齿的刺激性极小。与传统含化学杀菌剂的漱口水不同，本发明漱口水降低了因成分刺激导致口腔黏膜损伤、牙齿染色等潜在危害风险，适合长期使用。尤其对于儿童、孕妇和口腔敏感人群，提供了一种安全可靠的口腔护理选择，能在有效预防和治疗口腔疾病的同时，保障使用者的健康。除了生物肽成分，漱口水还包含多种精心挑选的助剂。保湿剂甘油和透明质酸钠能保持口腔湿润，防止干燥不适，同时有助于维持产品稳定性；表面活性剂椰油酰胺丙基甜菜碱可降低表面张力，使漱口水更好地渗透和清洁口腔各个部位，提高抑菌效果；调味剂薄荷脑和木糖醇赋予清新口气和良好口感，且木糖醇具有防龋作用；防腐剂山梨酸钾确保产品质量和安全，防止微生物污染；缓冲剂磷酸氢二钠和柠檬酸维持适宜的pH值，保障生物肽活性和口腔健康。漱口水配方中的2-(2-羟基苯氧基)乙酸乙酯(HPAE)作为缓释有机化合物，能够有效延长漱口水的抑菌时间。HPAE的酯基在口腔环境中缓慢水解，持续释放出具有抑菌活性的羟基苯氧基乙酸，与生物肽协同作用，持续抑制口腔细菌的生长繁殖。与许多现有漱口水相比，本发明漱口水的抑菌效果可持续更长时间，能够更可靠地保护口腔健康，减少了因抑菌作用短暂而导致口腔细菌再次滋生的风险。各成分相互协同，使漱口水不仅在抑菌方面表现出色，还能全面提升使用者的口腔健康和舒适度，在口腔护理产品市场中具有较强的竞争力，为口腔护理提供了一种综合性能优良的解决方案。

具体实施方式

实施例1

本试验旨在比较本发明的生物肽抑菌漱口水(包含新型小分子肽组合)与现有传统漱口水及单一生物肽漱口水在抑菌效果方面的差异，以突出本发明的增效优势。

本发明漱口水：按照上述发明内容中所述制备方法制备的生物肽抑菌漱口水，其中SEQ NO.1(Leu-His-Pro-Gly-Tyr-Lys-Glu)、SEQ NO.2(Arg-Trp-Ser-Ile-Asp-Met-Cys)和SEQ NO.3(Phe-Ala-Val-Gln-Thr-Asn-Leu)小分子肽按照3:2:2的比例组合，且各成分含量在规定范围内，总肽浓度为0.3mg/mL。

传统漱口水：选取市场上具有代表性的含有氯己定的传统漱口水，氯己定浓度为0.12份(w/v)，该浓度为常见的有效抑菌浓度范围。

单一生物肽漱口水1：仅含有SEQ NO.1小分子肽的漱口水，肽浓度为0.2mg/mL，其他成分与本发明漱口水类似，但不含SEQ NO.2和SEQ NO.3肽及相应调整成分比例。

单一生物肽漱口水2：仅含有SEQ NO.2小分子肽的漱口水，肽浓度为0.15mg/mL，成分调整同理。

单一生物肽漱口水3：仅含有SEQ NO.3小分子肽的漱口水，肽浓度为0.18mg/mL，成分调整同理。

试验菌株：变形链球菌(Streptococcusmutans)、牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis)和具核梭杆菌(Fusobacteriumnucleatum)，均购自专业微生物菌种保藏机构，在试验前经复苏、培养并调整至对数生长期备用。

试验方法：制备Müller-Hinton琼脂培养基平板，将平板均匀划分为若干区域。取10μL不同漱口水样品分别滴加在相应区域的培养基表面，放置牛津杯(直径8mm)，使样品均匀扩散。用无菌棉签蘸取适量试验菌株菌悬液(浓度为1×10⁷CFU/mL)，在平板表面均匀涂布，37℃培养24小时。测量抑菌圈直径，每个样品重复3次，取平均值。

采用液体稀释法，在96孔微量培养板中，将不同漱口水用无菌培养基进行倍比稀释，每孔终体积为200μL。向每孔加入20μL试验菌株菌悬液(浓度为1×10⁶CFU/mL)，37℃培养48小时。观察孔内液体浑浊度，以无浑浊生长的最低漱口水浓度为该样品对相应菌株的MIC，每个样品重复3次。

试验结果

(一)抑菌圈试验结果

1.对变形链球菌的抑菌效果

1.本发明漱口水的抑菌圈直径平均为22.5mm。

2.传统漱口水的抑菌圈直径平均为18.2mm。

3.单一生物肽漱口水1的抑菌圈直径平均为13.5mm。

4.单一生物肽漱口水2的抑菌圈直径平均为11.8mm。

5.单一生物肽漱口水3的抑菌圈直径平均为12.6mm。2.对牙龈卟啉单胞菌的抑菌效果

1.本发明漱口水的抑菌圈直径平均为20.8mm。

2.传统漱口水的抑菌圈直径平均为16.5mm。

3.单一生物肽漱口水1的抑菌圈直径平均为10.2mm。

4.单一生物肽漱口水2的抑菌圈直径平均为14.3mm。

5.单一生物肽漱口水3的抑菌圈直径平均为11.5mm。

3.对具核梭杆菌的抑菌效果

1.本发明漱口水的抑菌圈直径平均为21.6mm。

2.传统漱口水的抑菌圈直径平均为17.3mm。

3.单一生物肽漱口水1的抑菌圈直径平均为11.9mm。

4.单一生物肽漱口水2的抑菌圈直径平均为10.8mm。

5.单一生物肽漱口水3的抑菌圈直径平均为13.2mm。(二)最低抑菌浓度(MIC)测定结果

1.对变形链球菌的MIC

1.本发明漱口水的MIC为0.03mg/mL。

2.传统漱口水的MIC为0.06份(w/v)，换算后约为0.6mg/mL。

3.单一生物肽漱口水1的MIC为0.2mg/mL。

4.单一生物肽漱口水2的MIC为0.3mg/mL。

5.单一生物肽漱口水3的MIC为0.25mg/mL。

2.对牙龈卟啉单胞菌的MIC

1.本发明漱口水的MIC为0.04mg/mL。

2.传统漱口水的MIC为0.08份(w/v)，约为0.8mg/mL。

3.单一生物肽漱口水1的MIC为0.4mg/mL。

4.单一生物肽漱口水2的MIC为0.2mg/mL。

5.单一生物肽漱口水3的MIC为0.3mg/mL。

3.对具核梭杆菌的MIC

1.本发明漱口水的MIC为0.035mg/mL。

2.传统漱口水的MIC为0.07份(w/v)，约为0.7mg/mL。

3.单一生物肽漱口水1的MIC为0.3mg/mL。

4.单一生物肽漱口水2的MIC为0.4mg/mL。

5.单一生物肽漱口水3的MIC为0.2mg/mL。

从抑菌圈试验结果来看，本发明漱口水对三种试验菌株的抑菌圈直径均明显大于传统漱口水。这表明本发明漱口水在抑制细菌生长的扩散方面具有更优异的性能，能够在更大的区域内阻止细菌的生长繁殖。在MIC测定结果中，本发明漱口水对变形链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的MIC值均远低于传统漱口水。这意味着本发明漱口水在较低的浓度下就能有效地抑制这些细菌的生长，说明其抑菌活性更强，且由于使用较低浓度有效成分，可减少因高浓度化学杀菌剂带来的潜在副作用风险，如口腔黏膜刺激、牙齿染色等问题。

抑菌圈试验中，本发明漱口水对各菌株的抑菌圈直径均大于单一生物肽漱口水。这显示出三种新型小分子肽的组合产生了协同增效作用，其抑菌效果不是单一肽的简单叠加，而是通过多靶点作用机制相互配合，扩大了抑菌范围和强度。在MIC测定方面，本发明漱口水的MIC值显著低于单一生物肽漱口水。例如，对变形链球菌，单一生物肽漱口水1的MIC为0.2mg/mL，而本发明漱口水仅需0.03mg/mL，这充分证明了三种肽组合后在抑制细菌生长所需的最低有效浓度上大幅降低，体现了强大的增效作用，进一步说明本发明漱口水通过合理的肽组合设计，优化了抑菌性能，在口腔护理产品领域具有明显的优势和创新性。

实施例2

本试验旨在研究2-(2-羟基苯氧基)乙酸乙酯(HPAE)在生物肽抑菌漱口水中的增效作用，与不含HPAE的漱口水对比，评估其对抑菌效果和持久度的影响。试验漱口水1：按照上述发明内容中所述制备方法制备的生物肽抑菌漱口水，包含SEQ NO.1、SEQ NO.2和SEQNO.3小分子肽、甘油、山梨醇、月桂醇聚醚硫酸酯钠、天然薄荷脑、甜橙香精、苯甲酸钠、HPAE以及去离子水，各成分含量在规定范围内。

试验漱口水2：与试验漱口水1类似，但不含HPAE，其他成分含量相应调整。试验菌株：变形链球菌(Streptococcusmutans)、牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis)和具核梭杆菌(Fusobacteriumnucleatum)，均购自专业微生物菌种保藏机构，在试验前经复苏、培养并调整至对数生长期备用。

制备Müller-Hinton琼脂培养基平板，将平板均匀划分为若干区域。取10μL不同漱口水样品分别滴加在相应区域的培养基表面，放置牛津杯(直径8mm)，使样品均匀扩散。用无菌棉签蘸取适量试验菌株菌悬液(浓度为1×10⁷CFU/mL)，在平板表面均匀涂布，37℃培养24小时。测量抑菌圈直径，每个样品重复3次，取平均值。

采用液体稀释法，在96孔微量培养板中，将不同漱口水用无菌培养基进行倍比稀释，每孔终体积为200μL。向每孔加入20μL试验菌株菌悬液(浓度为1×10⁶CFU/mL)，37℃培养48小时。观察孔内液体浑浊度，以无浑浊生长的最低漱口水浓度为该样品对相应菌株的MIC，每个样品重复3次。

将试验漱口水1和试验漱口水2分别与变形链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的菌悬液(浓度为1×10⁶CFU/mL)混合，在37℃下孵育。每隔2小时取少量混合液，接种于相应的培养基平板上，培养24小时后观察菌落生长情况，确定漱口水抑菌效果的持续时间。

试验结果：对变形链球菌的抑菌效果，试验漱口水1(含HPAE)的抑菌圈直径平均为23.8mm。

试验漱口水2(不含HPAE)的抑菌圈直径平均为22.5mm。对牙龈卟啉单胞菌的抑菌效果

试验漱口水1(含HPAE)的抑菌圈直径平均为21.6mm。试验漱口水2(不含HPAE)的抑菌圈直径平均为20.8mm。对具核梭杆菌的抑菌效果，试验漱口水1(含HPAE)的抑菌圈直径平均为22.9mm。试验漱口水2(不含HPAE)的抑菌圈直径平均为21.6mm。

MIC测定结果，对变形链球菌的MIC，试验漱口水1(含HPAE)的MIC为0.025mg/mL。试验漱口水2(不含HPAE)的MIC为0.03mg/mL。对牙龈卟啉单胞菌的MIC，试验漱口水1(含HPAE)的MIC为0.035mg/mL。试验漱口水2(不含HPAE)的MIC为0.04mg/mL。对具核梭杆菌的MIC，试验漱口水1(含HPAE)的MIC为0.03mg/mL。试验漱口水2(不含HPAE)的MIC为0.035mg/mL。持久度测试结果，试验漱口水1(含HPAE)对变形链球菌的抑菌效果可持续8小时以上；对牙龈卟啉单胞菌可持续7小时以上；对具核梭杆菌可持续7.5小时以上。试验漱口水2(不含HPAE)对变形链球菌的抑菌效果可持续6小时左右；对牙龈卟啉单胞菌可持续5.5小时左右；对具核梭杆菌可持续6小时左右。

缓释有机化合物：2-(2-羟基苯氧基)乙酸乙酯(以下简称HPAE)，其结构式为。该化合物具有酯基和羟基苯氧基结构。酯基在口腔环境中可缓慢水解，释放出具有抑菌活性的羟基苯氧基乙酸。羟基苯氧基乙酸能够与多种口腔细菌的蛋白质和酶分子中的氨基、巯基等基团发生反应，改变其结构和功能，从而增强漱口水的抑菌效果。

从试验结果可以看出，2-(2-羟基苯氧基)乙酸乙酯(HPAE)在生物肽抑菌漱口水中具有明显的增效作用。在抑菌圈试验中，含有HPAE的漱口水对三种试验菌株的抑菌圈直径均比不含HPAE的漱口水有所增大，表明HPAE能够增强漱口水的抑菌能力。在MIC测定结果中，含有HPAE的漱口水对各菌株的MIC值均低于不含HPAE的漱口水，说明HPAE可降低漱口水抑制细菌生长所需的最低有效浓度。在持久度测试方面，含有HPAE的漱口水抑菌效果持续时间明显长于不含HPAE的漱口水。这是因为HPAE的酯基在口腔环境中缓慢水解，释放出的羟基苯氧基乙酸能够与口腔细菌的蛋白质和酶分子发生反应，增强了生物肽的抑菌作用，从而提高了漱口水的抑菌效果和持久度。

综上所述，本发明的生物肽抑菌漱口水与现有技术相比，无论是与传统漱口水还是单一生物肽漱口水相比，在抑菌效果方面均表现出显著的增效作用，具有更好的应用前景和市场潜力，有望为口腔护理提供更安全、高效的解决方案。

Claims (9)

1.一种生物肽抑菌漱口水，其特征在于，包含小分子肽通过与口腔细菌细胞壁合成过程中的转糖基酶的活性位点特异性结合，阻碍肽聚糖合成过程中糖链的延伸，从而抑制细菌生长。

2.一种生物肽抑菌漱口水，其特征在于，还包含小分子肽通过与口腔细菌细胞膜上的ATP结合盒式转运蛋白的底物结合位点相互作用，阻止其对营养物质的摄取以及有害物质的排出，进而抑制细菌增殖。

3.一种生物肽抑菌漱口水，其特征在于，还包含小分子肽通过与口腔细菌细胞膜上的质子动力势相关蛋白结合，干扰其正常的构象和功能，破坏细菌细胞膜的能量转换和物质运输平衡，从而抑制细菌生长。

4.一种生物肽抑菌漱口水，其特征在于，还包含缓释有机化合物：2-(2-羟基苯氧基)乙酸乙酯。

5.一种生物肽抑菌漱口水，其特征在于，包含以下重量百分比的成分：

SEQ NO.1：Leu-His-Pro-Gly-Tyr-Lys-Glu小分子肽：0.15份-0.35份；

SEQ NO.2：Arg-Trp-Ser-Ile-Asp-Met-Cys小分子肽：0.1份-0.2份；

SEQ NO.3：Phe-Ala-Val-Gln-Thr-Asn-Leu小分子肽：0.1份-0.2份；

保湿剂：甘油5份-10份和透明质酸钠0.1份-0.3份；

表面活性剂：椰油酰胺丙基甜菜碱1份-3份；

调味剂：薄荷脑0.1份-0.3份和木糖醇2份-5份；

防腐剂：山梨酸钾0.05份-0.15份；

缓冲剂：磷酸氢二钠0.2份-0.5份和柠檬酸0.1份-0.3份；

缓释有机化合物:2-(2-羟基苯氧基)乙酸乙酯,1份-3份。

6.根据权利要求1所述的生物肽抑菌漱口水，其中所述SEQ NO.1：

Leu-His-Pro-Gly-Tyr-Lys-Gl、SEQ NO.2：Arg-Trp-Ser-Ile-Asp-Met-Cys、SEQNO.3SEQ NO.3：Phe-Ala-Val-Gln-Thr-Asn-Leu。

7.根据权利要求1所述的生物肽抑菌漱口水，其特征在于，SEQ NO.1、SEQ NO.2和SEQNO.3.小分子肽按照比例3:2:2的组合，在总肽浓度为0.3mg/mL。

8.一种制备权利要求1-8任一项所述生物肽抑菌漱口水的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1分别采用化学合成法制备SEQ NO.1、SEQ NO.2和SEQ NO.3小分子肽，在合成过程中，选择合适的固相合成树脂，用保护基团对相应氨基酸修饰后，依序将氨基酸偶联到树脂上，控制反应温度在20-30℃，pH值在6-8，每个氨基酸偶联时间为1-2小时，肽链合成完成后去除保护基团并切割，再经高效液相色谱纯化鉴定，使肽的纯度达95份以上；

S2将纯化后的SEQ NO.1、SEQ NO.2和SEQ NO.3小分子肽按照权利要求1所述比例与保湿剂、表面活性剂、调味剂、防腐剂以及缓冲剂等成分在适量去离子水中混合，先分别溶解小分子肽于少量去离子水，再依次加入其他成分，在搅拌器中以200-400转/分钟的速度缓慢搅拌30-60分钟直至均匀；

S3最后用0.22μm微孔滤膜过滤混合溶液以去除杂质，得到生物肽抑菌漱口水成品，并进行无菌包装。

9.权利要求1-7任一项所述生物肽抑菌漱口水在口腔护理中的应用，用于预防和改善由变形链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌引起的口腔疾病，包括龋齿、牙龈炎、口臭。