CN117940425A

CN117940425A - Her2突变抑制剂

Info

Publication number: CN117940425A
Application number: CN202280058129.0A
Authority: CN
Inventors: B·D·埃利斯; E·J·希肯; E·R·莱尔德; N·C·拉扎拉; B·J·纽豪斯; S·P·帕吉克; R·Z·罗森; R·A·谢尔普
Original assignee: Array Biopharma Inc
Current assignee: Array Biopharma Inc
Priority date: 2021-06-26
Filing date: 2022-06-23
Publication date: 2024-04-26

Abstract

本发明是关于式(I)化合物：及其对映异构体，以及式(I)及该对映异构体的药学上可接受的盐，其中A、L²、R¹、R²、R³、R⁴及n如本文所定义。本发明进一步是关于包含此类化合物及盐的药物组合物，以及此类化合物、盐及组合物用于治疗有需要受试者的异常细胞生长(包括癌症)的方法及用途。

Description

HER2突变抑制剂

发明背景

关于序列表

本申请经由EFS-Web以电子方式申请且包括呈.txt格式的以电子方式提交的序列表。该.txt文件含有2022年6月13日创建且大小为6KB的名称为“PC072760A_SEQ_LISTING_ST25.txt”的序列表。此.txt文件中所含的序列表是说明书的一部分且以全文引用的方式并入本文中。

发明的领域

本发明涉及作为共价HER2抑制剂起作用的吡啶并[3,2-d]嘧啶化合物。本发明涉及式(I)化合物及其药学上可接受的盐，涉及包含此类化合物及盐的药物组合物，以及其用途。本发明还涉及本发明化合物及其制备中的中间体、含有本发明化合物的组合物的制备，及本发明化合物的用途，包括治疗受试者的异常细胞生长、诸如癌症。

对现有技术的描述

人表皮生长因子受体2(ErbB2，也称为HER2)为一种受体酪氨酸激酶，其属于四种激酶(EGFR、ErbB2、ErbB3及ErbB4)的家族。HER2扩增在肿瘤学中的作用是众所周知的，尤其乳腺癌、胃癌、肺癌及结肠癌。HER2扩增性乳腺癌及肺癌也已知为转移性的且产生脑转移。HER2抑制剂是已知的，诸如图卡替尼(tucatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、来那替尼(neratinib)、沙匹替尼(sapitinib)、波奇替尼(poziotinib)、卡奈替尼(canertinib)、TAK-285及伐利替尼(varlitinib)，但并非所有这些HER2抑制剂均是选择性的。另外，存在用于HER2阳性癌症的单克隆抗体，诸如曲妥珠单抗(trastuzumab)及帕妥珠单抗(pertuzumab)。

HER2基因的激活突变的报道越来越多。HER2突变的一种常见类型为插入突变。频繁发生的插入突变为外显子20中的HER2 YVMA突变。HER2突变癌症也已知为转移性的且产生脑转移。参见Subramanian,Janakiraman等人“Emergence of ErbB2 Mutation as aBiomarker and an Actionable Target in Solid Cancers.”The Oncologist.24(12)(2019):第e1303至e1314页；及Offin,Michael等人“Frequency and outcomes of BrainMetastases in Patients with HER2-Mutant Lung Cancers.”Cancer.125(24)(2019):第4380至4387页。

仍需要发现具有新活性谱的HER2突变抑制剂，诸如选择性HER2突变抑制剂，其可用于治疗HER2突变癌症或其他增殖性疾病或病状。此外，HER2突变的脑渗透性抑制剂可用于治疗HER2扩增性或HER2阳性癌症的脑转移，包括HER2突变扩增性或HER2突变阳性癌症的脑转移。

发明内容

本发明部分提供式(I)化合物及其药学上可接受的盐。此类化合物可共价抑制HER2(包括HER2突变)的活性，由此影响生物功能。在一些实施方案中，本发明提供了对HER2突变具有选择性的化合物。在一些实施方案中，本发明提供了对抑制HER2及HER2突变的亲和力大于其对抑制EGFR的亲和力的化合物。在一些实施方案中，本发明提供了可抑制HER2阳性或HER2扩增性癌症的脑转移的活性的化合物。在另一实施方案中，本发明提供了可抑制HER2突变阳性或HER2突变扩增性癌症的脑转移的活性的化合物。也提供药物组合物及药剂，其包含单独或与另外的抗癌治疗剂组合的本发明的化合物或盐。

本发明也部分提供制备本发明的化合物、药学上可接受的盐及组合物的方法及使用前述物质的方法。

在一个方面中，本发明提供一种式(I)化合物：

或其药学上可接受的盐，其中A、L₁、L₂、R¹、R²、R³、R⁴及n如本文所定义。

在另一方面中，本发明提供一种药物组合物，其包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐。在又一方面中，本发明提供一种药物组合物，其包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐及药学上可接受的赋形剂。在又另一方面中，所述药物组合物包含两种或更多种药学上可接受的赋形剂。

在另一方面中，本发明提供一种用于治疗适用HER2突变抑制剂的疾病或病状的药物组合物，其包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种用于治疗适用HER2的脑渗透性抑制剂的疾病或病状的药物组合物，其包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐。在又一方面中，本发明提供一种用于治疗适用HER2突变的脑渗透性抑制剂的疾病或病状的药物组合物，其包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

本发明也提供治疗方法及用途，其包含向受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗需要此类治疗的受试者。在一些实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗受试者的异常细胞生长、尤其癌症。

在另一方面中，本发明提供一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用作药剂，尤其用于治疗异常细胞生长(诸如癌症)的药剂。

在又另一方面中，本发明提供如本文所描述的任何实施方案中所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造用于治疗适用HER2突变的抑制剂的疾病或病状的药剂。

在又另一方面中，本发明提供如本文所描述的任何实施方案中所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造用于治疗适用HER2的脑渗透性抑制剂的疾病或病状的药剂。在又一方面中，本发明提供如本文所描述的任何实施方案中所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造用于治疗HER2突变的脑渗透性抑制剂的疾病或病状的药剂。

在又另一方面中，本发明提供如本文所描述的任何实施方案中所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗适用HER2突变的抑制剂的疾病或病状。

在又另一方面中，本发明提供如本文所描述的任何实施方案中所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗适用HER2的脑渗透性抑制剂的疾病或病状。在又一方面中，本发明提供如本文所描述的任何实施方案中所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗适用HER2突变的脑渗透性抑制剂的疾病或病状。

在另一方面中，本发明提供如本文任何实施方案中所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗癌症。

在另一方面中，本发明提供如本文任何实施方案中所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用作药剂。

在另一方面中，本发明提供如本文任何实施方案中所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于疗法中。

在又另一方面中，本发明提供如本文任何实施方案中所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗适用HER2的脑渗透性抑制剂的疾病或病状。在又一方面中，本发明提供如本文任何实施方案中所定义的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗适用HER2突变的脑渗透性抑制剂的疾病或病状。

在一个方面中，本发明提供一种用于治疗有需要的受试者的异常细胞生长、尤其癌症的方法，其包含向该受试者施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。式(I)化合物可作为单一药剂施用，或可与其他抗癌治疗剂、尤其与适合于特定癌症的标准护理剂组合施用。

在另一方面中，本发明提供一种用于治疗异常细胞生长、尤其癌症的方法，其包含施用治疗有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种用于治疗或改善有需要的患者的异常细胞生长、尤其癌症的方法，其包含向该患者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种用于治疗受试者的由HER2突变介导的病症的方法，其包含以有效治疗该病症、尤其癌症的量向该受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种用于治疗受试者的由HER2扩增性或HER2阳性癌症的脑转移介导的病症的方法，其包含以有效治疗该病症的量向该受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种用于治疗或预防由HER2突变调节的疾病或病症的方法，其包含向需要此类治疗的哺乳动物施用有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种用于治疗或预防由HER2扩增性或HER2阳性癌症的脑转移调节的疾病或病症的方法，其包含向需要此类治疗的哺乳动物施用有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在又一方面中，本发明提供一种用于治疗有需要的受试者的异常细胞生长、尤其癌症的方法，其包含向该受试者施用一定量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐与一定量的额外抗癌治疗剂的组合，这些量一起有效治疗该异常细胞生长。

在另一方面中，本发明提供一种抑制有需要的患者的HER2突变活性的方法，其包含向该患者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种抑制有需要的患者的HER2扩增性或HER2阳性癌症的脑转移活性的方法，其包含向该患者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

下文所描述的本发明化合物的各实施方案可与本文所描述的本发明化合物的一个或多个其他实施方案组合，该一个或多个其他实施方案与其所组合的实施方案不一致。

另外，下面描述本发明的各实施方案设想本发明化合物的药学上可接受的盐在其范畴内。因此，除非明确相反指示，否则词组”或其药学上可接受的盐”隐含于本文所描述的所有化合物的描述中。

除适用于人类治疗以外，式(I)化合物也适用于伴侣动物、野外动物及农场动物的兽医学治疗。

具体实施方式

参考以下本发明的优选的实施方案及本文中所包括的实施例的详细描述，可更容易理解本发明。应理解，本文所用的术语仅出于描述特定实施方案的目的且并不意欲进行限制。应进一步理解，除非在本文中特定地定义，否则本文所用的术语具有其在相关领域中已知的传统含义。如果所并入的文献及类似材料中的一者或多者(包括但不限于所定义的术语、术语使用、所描述的技术等)与本申请不同或矛盾，则以本申请为准。

定义

如本文所用，除非另有说明，否则单数形式”一(a/an)”及“该(the)”包括复数个提及物。例如，“一(a)”取代基包括一个或多个取代基。

本文所描述的本发明可在不存在本文未具体公开的任何要素的情况下实践。因此，例如，在本文的各情况下，术语”包含”、“基本上由…组成”及“由…组成”中的任一者可用另两个术语中的任一者替换。

本发明化合物是指式(I)、式(Ia)、式(II)或式(III)的化合物以及所有实施例。

如本文所用，“烷基”是指具有特定数目的碳原子的饱和单价脂族烃基，包括直链及支链基团。

一些烷基部分具有缩写，例如甲基(“Me”)、乙基(“Et”)、丙基(“Pr”)及丁基(“Bu”)，且使用其他缩写来表示化合物的特定异构体，例如1-丙基或正丙基(“n-Pr”)、2-丙基或异丙基(“i-Pr)”、1-丁基或正丁基(“n-Bu”)、2-甲基-1-丙基或异丁基(“i-Bu”)、1-甲基丙基或仲丁基(“s-Bu”)、1,1-二甲基乙基或叔丁基(“t-Bu”)等。这些缩写有时与元素缩写及化学结构结合使用，例如甲醇(“MeOH”)或乙醇(“EtOH”)。

当取代基被定义为两个基团的组合(例如烷氧基烷基)时，所关注的部分始终通过所命名的两个基团中的第二个(在此情况下烷基)连接。因此，例如，乙氧基甲基对应于CH₂CH₃-O-CH₂-。

如本文所用，“杂环”或“杂环的“或“杂环基”可互换使用以意指含有指定数目的环原子且含有至少一个选自N、O及S的杂原子作为环成员的非芳族饱和环系统，其中环S原子任选经一个或两个氧代基取代(即S(O)_q，其中q为0、1或2)，且其中杂环经由可为C或N的环原子连接至基础分子。杂环包括与一个或多个其他杂环或碳环螺环接、桥接或稠合的环，条件为与基础分子的连接点为环系统的杂环部分的原子。优选地，杂环含有1至4个选自N、O及S(O)_q的杂原子作为环成员，且更优选1至2个环杂原子，条件为此类杂环不含两个邻接氧原子。

根据本文中的定义，杂环通常包括3至10元杂环基，且更优选为4至10元或4至7元杂环基。

饱和杂环的实施例包括但不限于环氧乙烷(环氧乙烷基)、环硫乙烷(环硫乙烷基)、氮丙啶(氮丙啶基)、氧杂环丁烷(氧杂环丁烷基)、硫杂环丁烷(硫杂环丁烷基)、氮杂环丁烷(氮杂环丁烷基)、四氢呋喃(四氢呋喃基)、四氢噻吩(四氢噻吩基)、吡咯烷(吡咯烷基)、四氢吡喃(四氢吡喃基)、四氢噻喃(四氢噻喃基)、哌啶(哌啶基)、1,4-二噁烷(1,4-二噁烷基)、1,4-氧杂环硫乙烷(oxathiarane)(1,4-氧杂环硫乙烷基)、吗啉(吗啉基)、1,4-二噻烷(1,4-二噻烷基)、哌嗪(哌嗪基)、硫代吗啉(硫代吗啉基)、氧杂环庚烷(氧杂环庚烷基)、硫杂环庚烷(硫杂环庚烷基)、氮杂环庚烷(氮杂环庚烷基)、1,4-二氧杂环庚烷(1,4-二氧杂环庚烷基)、1,4-氧硫杂环庚烷(1,4-氧硫杂环庚烷基)、1,4-氧氮杂环庚烷(1,4-氧氮杂环庚烷基)、1,4-硫氮杂环庚烷(1,4-硫氮杂环庚烷基)、1,4-二氮杂环庚烷(1,4-二氮杂环庚烷基)及1,4-二硫杂环庚烷(1,4-二硫杂环庚烷基)。

应理解，通常不超过两个N、O或S原子依次连接，例外为氧代基连接至S以形成磺酰基的情况，或在某些杂芳基环的情况下，诸如三唑、四唑、噁二唑、噻二唑、三嗪等。

如本文所用，“芳基”是指具有众所周知的芳香性特征的任选取代的单环或稠合双环或多环环系统，其中至少一个环含有完全共轭的π电子系统。

如本文所用，“杂芳基”是指具有众所周知的芳香性特征的如下单环或稠合双环或多环环系统，其含有如上文在“芳基”下所定义的指定数目的环原子，其包括至少一个选自N、O及S的杂原子作为芳族环中的环成员。包括杂原子使得5元环以及6元环具有芳香性。通常，杂芳基含有5至12个环原子(“5至12元杂芳基”)，更优选5至10个环原子(“5至10元杂芳基”)。在优选的实施方案中，杂芳基含有9至10个成员(“9至10元杂芳基”)。杂芳基环经由杂芳环的环原子连接至基础分子，以使得保持芳香性。因此，6元杂芳基环可经由环C原子连接至基础分子，而5元杂芳基环可经由环C或N原子连接至基础分子。杂芳基也可与另一芳基或杂芳基环稠合，或与饱和或部分不饱和的碳环或杂环稠合。未取代的杂芳基的实施例包括但不限于单环杂芳基，诸如吡咯(吡咯基)、呋喃(呋喃基)、噻吩(噻吩基)、吡唑(吡唑基)、咪唑(咪唑基)、异噁唑(异噁唑基)、噁唑(噁唑基)、异噻唑(异噻唑基)、噻唑(噻唑基)、1,2,3-三唑(1,2,3-三唑基)、1,3,4-三唑(1,3,4-三唑基)、1-氧杂-2,3-二唑(1-氧杂-2,3-二唑基)、1-氧杂-2,4-二唑(1-氧杂-2,4-二唑基)、1-氧杂-2,5-二唑(1-氧杂-2,5-二唑基)、1-氧杂-3,4-二唑(1-氧杂-3,4-二唑基)、1-硫杂-2,3-二唑(1-硫杂-2,3-二唑基)、1-硫杂-2,4-二唑(1-硫杂-2,4-二唑基)、1-硫杂-2,5-二唑(1-硫杂-2,5-二唑基)、1-硫杂-3,4-二唑(1-硫杂-3,4-二唑基)、四唑(四唑基)、吡啶(吡啶基)、哒嗪(哒嗪基)、嘧啶(嘧啶基)及吡嗪(吡嗪基)；及稠合杂芳基，诸如苯并呋喃(苯并呋喃基)、苯并噻吩(苯并噻吩基)、吲哚(吲哚基)、苯并咪唑(苯并咪唑基)、吲唑(吲唑基)、苯并三唑(苯并三唑基)、吡咯并[2,3-b]吡啶(吡咯并[2,3-b]吡啶基)、吡咯并[2,3-c]吡啶(吡咯并[2,3-c]吡啶基)、吡咯并[3,2-c]吡啶(吡咯并[3,2-c]吡啶基)、吡咯并[3,2-b]吡啶(吡咯并[3,2-b]吡啶基)、咪唑并[4,5-b]吡啶(咪唑并[4,5-b]吡啶基)、咪唑并[4,5-c]吡啶(咪唑并[4,5-c]吡啶基)、吡唑并[4,3-d]吡啶(吡唑并[4,3-d]吡啶基)、吡唑并[4,3-c]吡啶(吡唑并[4,3-c]吡啶基)、吡唑并[3,4-c]吡啶(吡唑并[3,4-c]吡啶基)、吡唑并[3,4-b]吡啶(吡唑并[3,4-b]吡啶基)、异吲哚(异吲哚基)、吲唑(吲唑基)、嘌呤(嘌呤基)、吲嗪(吲嗪基)、咪唑并[1,2-a]吡啶(咪唑并[1,2-a]吡啶基)、咪唑并[1,5-a]吡啶(咪唑并[1,5-a]吡啶基)、吡唑并[1,5-a]吡啶(吡唑并[1,5-a]吡啶基)、吡咯并[1,2-b]哒嗪(吡咯并[1,2-b]哒嗪基)、咪唑并[1,2-c]嘧啶(咪唑并[1,2-b]哒嗪基)、喹啉(喹啉基)、异喹啉(异喹啉基)、噌啉(噌啉基)、喹唑啉(喹唑啉基)、喹喔啉(喹喔啉基)、呔嗪(呔嗪基)、1,5-萘啶(1,5-萘啶基)、1,6-萘啶(1,6-萘啶基)、1,7-萘啶(1,7-萘啶基)、1,8-萘啶(1,8-萘啶基)、2,6-萘啶(2,6-萘啶基)、2,7-萘啶(2,7-萘啶基)、吡啶并[3,2-d]嘧啶(吡啶并[3,2-d]嘧啶基)、吡啶并[4,3-d]嘧啶(吡啶并[4,3-d]嘧啶基)、吡啶并[3,4-d]嘧啶(吡啶并[3,4-d]嘧啶基)、吡啶并[2,3-d]嘧啶(吡啶并[2,3-d]嘧啶基)、吡啶并[2,3-b]吡嗪(吡啶并[2,3-b]吡嗪基)、吡啶并[3,4-b]吡嗪(吡啶并[3,4-b]吡嗪基)、嘧啶并[5,4-d]嘧啶(嘧啶并[5,4-d]嘧啶基)、吡嗪并[2,3-b]吡嗪(吡嗪并[2,3-b]吡嗪基)及嘧啶并[4,5-d]嘧啶(嘧啶并[4,5-d]嘧啶基)。杂芳基未被取代或如本文进一步所描述的那样被取代。

如本文所用，“丙烯酰胺”是指CH₂＝CHC(＝O)NH₂基团，其中该基团可经由氮连接(CH₂＝CHC(＝O)NH-)或经由碳连接(-CHCHC(＝O)NH₂)。丙烯酰氨基团可经取代，诸如N-甲基-3-丙烯酰胺(-CH＝CHC(＝O)NHCH₃)。

如本文所用，“卤素”或“卤代”是指氟、氯、溴及碘(F、Cl、Br、I)。优选地，卤基是指氟或氯(F或Cl)。

如本文所用，“氧代”是指双键氧(＝O)。

如本文所用，“乙烯基磺酰基”是指-S(＝O)₂CH＝CH₂基团。

“任选的(optional)”或“任选地(optionally)”是指随后描述的事件或情形可能发生但非必须发生，且该描述包括事件或情形发生的实例及不发生的实例。

术语”任选取代的”和“取代的或未取代的”可互换使用以表示所描述的特定基团可不具有非氢取代基(即未取代的)，或该基团可具有一个或多个非氢取代基(即取代的)。若未另外规定，则可存在的取代基的总数目等于所描述基团的未取代形式上存在的H原子数目。在任选的取代基经由双键、诸如氧代(＝O)取代基连接的情况下，该基团占据两个可用的化合价，因此所包括的其他取代基的总数目减少两个。在任选的取代基独立地选自一系列可供选择的基团的情况下，所选基团相同或不同。在整个本发明中，应理解，任选的取代基的数目及性质将限于此类取代在化学上合理的程度。

通常，本文描述为任选经“一个或多个”取代基取代的基团任选经1至4个此类取代基取代，优选任选经1至3个此类取代基取代，且更优选任选经1至2个此类取代基取代。本文中对基团“任选经一系列任选的取代基中的一个或多个取代”的叙述可替换为“任选经1至4个此类任选的取代基取代”、“任选经1至3个此类任选的取代基取代”、“任选经1至2个此类任选的取代基取代”、“任选经一个、两个、三个或四个此类任选的取代基取代”、“任选经一个、两个或三个此类任选的取代基取代”或“任选经一个或两个此类任选的取代基取代”。

若取代基被描述为“独立地选自”一个组，则各取代基独立于其他取代基而被选择。因此各取代基可与其他取代基相同或不同。

如本文所用，“药学上可接受”是指物质或组合物在化学上和/或毒理学上与包含制剂的其他成分和/或用其治疗的哺乳动物相容。

如本文所用，“HER2突变”是指HER2受体酪氨酸蛋白激酶中的一个或多个突变。在某些实施方案中，HER2突变为HER2的外显子20处的YVMA(SEQ ID NO:2)插入(“HER2-YVMA”)。HER2突变可以指HER2受体酪氨酸蛋白激酶中的一个或多个突变。

如本文用于描述功能上定义的受体配体或酶抑制剂的“选择性”是指与同一家族中的其他受体或酶亚型相比较，对所定义的受体或酶亚型具有选择性。例如，选择性HER2突变抑制剂为相较于EGFR酶亚型更有效地抑制HER2-YVMA(SEQ ID NO:2)插入酶亚型的化合物。这种选择性在一个实施方案中为至少2倍(使用常规结合分析所测量)，或在另一实施方案中为至少10倍，或在又一实施方案中为至少100倍。

在整个申请中使用的其他缩写包括：大约(“～”)、乙酰基(“Ac”)、乙腈(“ACN”)、乙酰氧基(“AcO”或“OAc”)、水性(“aq”)、苯甲基(“Bn”)、亚甲基氯(methylene chloride)/二氯甲烷/CH₂Cl₂(“DCM”)、二乙胺(“DEA”)、二异丙基乙胺(“DIPEA”)、N,N-二甲基乙酰胺(“DMA”)、4-二甲基氨基吡啶(“DMAP”)、N,N-二甲基甲酰胺(“DMF”)、二甲亚砜(“DMSO”)、乙酸乙酯(“EtOAc”)、小时(“h”)、1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(“HATU”)、乙酸(“HOAc”或“AcOH”)、异丙醇(“IPA”)、分钟(“min”)、质谱(“MS”)、甲基叔丁基醚(“MTBE”)、苯基(“Ph”)、保留级分(“Rf”)、保留时间(“rt”)、饱和(“sat.”)、超临界流体层析(“SFC”)、丙基膦酸酐(“T3P”)、三氟乙酸(“TFA”)、四氢呋喃(“THF”)、薄层色谱(“TLC”)。

绘制至环系统中(而不是在确切顶点处连接)的键表明该键可连接至适合环原子中的任一者。穿过键的波浪线表示连接点。

HER2突变抑制剂化合物

在一个方面中，本发明提供一种式(I)化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

A选自碳和氮，其中R³可在A为碳时与其结合；

R¹选自由以下组成的组：-L¹-R⁵、-NR⁶R⁷、N-甲基-3-丙烯酰胺及丙-1-烯-2-基；

R²为含有一个、两个或三个选自N、O及S的杂原子的9至10元双环杂芳基，其中该双环杂芳基可任选经一个或两个选自卤素及C₁-C₃烷基的基团取代；

各R³独立地选自卤素、甲基、二氟甲基及三氟甲基；

R⁴为氢、氯或甲氧基；

L¹选自由以下组成的组：键、CHR⁸、O、NR⁸及S；

L²选自NH及O；

R⁵为含有1至3个选自由N、O及S组成的组的杂原子的4至10元杂环，其中该杂环经一个R⁶取代，且另外任选经1或2个独立地选自以下的基团取代：甲基、乙基、异丙基、叔丁基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基、乙炔基、环丙基及环丁基；

R⁶选自由以下组成的组：氰基、1-丙-2-烯-1-酮、1-(2-氟丙-2-烯-1-酮)、1-(2-甲基丙-2-烯-1-酮)、N-(N-甲基丙烯酰胺)、1-丁-2-炔-1-酮、乙烯基磺酰基及(双环[1.1.0]丁-1-基)甲酮；

R⁷及R⁸独立地为氢或甲基；且

n为0、1或2。

在式(I)的优选的实施方案中，A为碳，其中R³可结合至A。

在式(I)的优选的实施方案中，L²为NH。

在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：

-L¹-R⁵、-NR⁶R⁷、N-甲基-3-丙烯酰胺及丙-1-烯-2-基。在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基、1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、1-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)硫基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-6-基、4-丙烯酰基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)(甲基)氨基、1-丙烯酰基哌啶-3-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基、1-丙烯酰基哌啶-4-基、3-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)硫基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、6-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基、N-丙烯酰胺、N-丁-2-炔酰胺、N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-3-丙烯酰胺、N-甲基-N-丙烯酰胺、丙-2-烯-1-酮、9-丙烯酰基-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-7-基、4-丙烯酰基-3-环丙基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-乙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-2,6-二甲基哌啶-4-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-6-甲基哌啶-3-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛-2-基、2-(丁-2-炔酰基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)哌嗪-1-基、4-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、1-(丁-2-炔酰基)-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-6-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-6-基、8-(2-氟丙烯酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-(丁-2-炔酰基)氮杂环庚烷-4-基、7-丙烯酰基-7-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-5-基、3-丙烯酰基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、8-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、3-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-氰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、3-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-丙烯酰基-3-异丙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基、4-丙烯酰基-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、6-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-1-基、4-丙烯酰基-3-(叔丁基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5,5-二甲基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)甲基、1-(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)乙基、1-丙烯酰基-5-环丙基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-环丁基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.4]辛-6-基、5-丙烯酰基-5,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基、5-(丁-2-炔酰基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-乙炔基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬-3-基、4-甲基丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、N-(1-吡咯烷-3-基)-N-甲基丙烯酰胺、4-甲基丙烯酰基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-6-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-4-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-基及8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基。

在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：-L¹-R⁵、-NR⁶R⁷、N-甲基-3-丙烯酰胺及丙-1-烯-2-基。在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基、1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、1-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)硫基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-丙烯酰基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)(甲基)氨基、1-丙烯酰基哌啶-3-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基、1-丙烯酰基哌啶-4-基、3-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)硫基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、6-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基、N-丙烯酰胺、N-丁-2-炔酰胺、N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-3-丙烯酰胺、N-甲基-N-丙烯酰胺及丙-2-烯-1-酮。

在式(I)的优选的实施方案中，R¹选自由-L¹-R⁵及-NR⁶R⁷组成的组。在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基、1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、1-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)硫基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-丙烯酰基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)(甲基)氨基、1-丙烯酰基哌啶-3-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基、1-丙烯酰基哌啶-4-基、3-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)硫基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、6-丙烯酰基

-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基、N-丙烯酰胺、N-丁-2-炔酰胺、N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-N-丙烯酰胺、9-丙烯酰基-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-7-基、4-丙烯酰基-3-环丙基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-乙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-2,6-二甲基哌啶-4-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-6-甲基哌啶-3-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛-2-基、2-(丁-2-炔酰基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)哌嗪-1-基、4-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、1-(丁-2-炔酰基)-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-6-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-6-基、8-(2-氟丙烯酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-(丁-2-炔酰基)氮杂环庚烷-4-基、7-丙烯酰基-7-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-5-基、3-丙烯酰基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、8-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、3-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-氰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、3-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-丙烯酰基-3-异丙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基、4-丙烯酰基-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、6-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-1-基、4-丙烯酰基-3-(叔丁基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5,5-二甲基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)甲基、1-(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)乙基、1-丙烯酰基-5-环丙基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-环丁基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.4]辛-6-基、5-丙烯酰基-5,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基、5-(丁-2-炔酰基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-乙炔基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬-3-基、4-甲基丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、N-(1-吡咯烷-3-基)-N-甲基丙烯酰胺、4-甲基丙烯酰基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-6-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-4-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-基及8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基。

-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基、N-丙烯酰胺、N-丁-2-炔酰胺、N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-N-乙烯基磺酰胺及N-甲基-N-丙烯酰胺。

在式(I)的更优选的实施方案中，R¹为-L¹-R⁵。在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基、1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、1-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)硫基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-丙烯酰基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)(甲基)氨基、1-丙烯酰基哌啶-3-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基、1-丙烯酰基哌啶-4-基、3-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)硫基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基

-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、6-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基、9-丙烯酰基-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-7-基、4-丙烯酰基-3-环丙基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-乙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-2,6-二甲基哌啶-4-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-6-甲基哌啶-3-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛-2-基、2-(丁-2-炔酰基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)哌嗪-1-基、4-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、1-(丁-2-炔酰基)-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-6-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-6-基、8-(2-氟丙烯酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-(丁-2-炔酰基)氮杂环庚烷-4-基、7-丙烯酰基-7-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-5-基、3-丙烯酰基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、8-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、3-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-氰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、3-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-丙烯酰基-3-异丙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基、4-丙烯酰基-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、6-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-1-基、4-丙烯酰基-3-(叔丁基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5,5-二甲基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)甲基、1-(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)乙基、1-丙烯酰基-5-环丙基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-环丁基哌嗪

-1-基、1-丙烯酰基-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.4]辛-6-基、5-丙烯酰基-5,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基、5-(丁-2-炔酰基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-乙炔基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬-3-基、4-甲基丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、N-(1-吡咯烷-3-基)-N-甲基丙烯酰胺、4-甲基丙烯酰基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-6-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-4-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-基及8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基。在式(I)的更优选的实施方案中，R¹为-L¹-R⁵。在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基、1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、1-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)硫基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-丙烯酰基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)(甲基)氨基、1-丙烯酰基哌啶-3-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基、1-丙烯酰基哌啶-4-基、3-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)硫基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、6-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷

-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基及1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基。

在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：-L¹-R⁵、-NR⁶R⁷、N-甲基-3-丙烯酰胺及丙-1-烯-2-基，其中R¹不为1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯。在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基、1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、1-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)硫基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-丙烯酰基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)(甲基)氨基、1-丙烯酰基哌啶-3-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基、1-丙烯酰基哌啶-4-基、3-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)硫基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、6-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基、N-丙烯酰胺、N-丁-2-炔酰胺、N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-3-丙烯酰胺、N-甲基-N-丙烯酰胺、丙-2-烯-1-酮、9-丙烯酰基-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-7-基、4-丙烯酰基-3-环丙基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-乙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-2,6-二甲基哌啶-4-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-6-甲基哌啶-3-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛-2-基、2-(丁-2-炔酰基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)哌嗪-1-基、4-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、1-(丁-2-炔酰基)-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-6-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-6-基、8-(2-氟丙烯酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-(丁-2-炔酰基)氮杂环庚烷-4-基、7-丙烯酰基-7-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-5-基、3-丙烯酰基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、8-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、3-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-氰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、3-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-丙烯酰基-3-异丙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基、4-丙烯酰基-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、6-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-1-基、4-丙烯酰基-3-(叔丁基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5,5-二甲基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)甲基、1-(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)乙基、1-丙烯酰基-5-环丙基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-环丁基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.4]辛-6-基、5-丙烯酰基-5,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基、5-(丁-2-炔酰基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-乙炔基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬-3-基、4-甲基丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、N-(1-吡咯烷-3-基)-N-甲基丙烯酰胺、4-甲基丙烯酰基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-6-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-4-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-基及8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基。

在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：-L¹-R⁵、-NR⁶R⁷、N-甲基-3-丙烯酰胺及丙-1-烯-2-基，其中R¹不为1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯。在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基、1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、1-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)硫基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-丙烯酰基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)(甲基)氨基、1-丙烯酰基哌啶-3-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基、1-丙烯酰基哌啶-4-基、3-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)硫基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、6-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基、N-丙烯酰胺、N-丁-2-炔酰胺、N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-3-丙烯酰胺、N-甲基-N-丙烯酰胺及丙-2-烯-1-酮。

在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：-L¹-R⁵、-NR⁶R⁷、N-甲基-3-丙烯酰胺及丙-1-烯-2-基，其中R¹不为4-丙烯酰基哌嗪-1-基。在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基、1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、1-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)硫基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)(甲基)氨基、1-丙烯酰基哌啶-3-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基、1-丙烯酰基哌啶-4-基、3-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)硫基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、6-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基、N-丙烯酰胺、N-丁-2-炔酰胺、N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-3-丙烯酰胺、N-甲基-N-丙烯酰胺、丙-2-烯-1-酮、9-丙烯酰基-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-7-基、4-丙烯酰基-3-环丙基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-乙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-2,6-二甲基哌啶-4-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-6-甲基哌啶-3-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛-2-基、2-(丁-2-炔酰基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)哌嗪-1-基、4-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、1-(丁-2-炔酰基)-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-6-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-6-基、8-(2-氟丙烯酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁

-2-炔酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-(丁-2-炔酰基)氮杂环庚烷-4-基、7-丙烯酰基-7-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-5-基、3-丙烯酰基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、8-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、3-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-氰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、3-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-丙烯酰基-3-异丙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基、4-丙烯酰基-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、6-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-1-基、4-丙烯酰基-3-(叔丁基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5,5-二甲基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)甲基、1-(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)乙基、1-丙烯酰基-5-环丙基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-环丁基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.4]辛-6-基、5-丙烯酰基-5,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基、5-(丁-2-炔酰基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-乙炔基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬-3-基、4-甲基丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、N-(1-吡咯烷-3-基)-N-甲基丙烯酰胺、4-甲基丙烯酰基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-6-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-4-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-基及8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基。

在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：-L¹-R⁵、-NR⁶R⁷、N-甲基-3-丙烯酰胺及丙-1-烯-2-基，其中R¹不为4-丙烯酰基哌嗪-1-基。在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基、1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、1-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)硫基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)(甲基)氨基、1-丙烯酰基哌啶-3-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基、1-丙烯酰基哌啶-4-基、3-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)硫基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、6-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基、N-丙烯酰胺、N-丁-2-炔酰胺、N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-3-丙烯酰胺、N-甲基-N-丙烯酰胺及丙-2-烯-1-酮。

在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：-L¹-R⁵、-NR⁶R⁷、N-甲基-3-丙烯酰胺及丙-1-烯-2-基，其中R¹不为1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯或4-丙烯酰基哌嗪-1-基。在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基、1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、1-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)硫基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)(甲基)氨基、1-丙烯酰基哌啶-3-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基、1-丙烯酰基哌啶-4-基、3-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)硫基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、6-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基、N-丙烯酰胺、N-丁-2-炔酰胺、N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-3-丙烯酰胺、N-甲基-N-丙烯酰胺、丙-2-烯-1-酮、9-丙烯酰基-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-7-基、4-丙烯酰基-3-环丙基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-乙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-2,6-二甲基哌啶-4-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-6-甲基哌啶-3-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛-2-基、2-(丁-2-炔酰基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)哌嗪-1-基、4-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、1-(丁-2-炔酰基)-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-6-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-6-基、8-(2-氟丙烯酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-(丁-2-炔酰基)氮杂环庚烷-4-基、7-丙烯酰基-7-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-5-基、3-丙烯酰基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、8-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、3-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-氰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、3-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-丙烯酰基-3-异丙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基、4-丙烯酰基-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、6-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-1-基、4-丙烯酰基-3-(叔丁基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5,5-二甲基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)甲基、1-(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)乙基、1-丙烯酰基-5-环丙基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-环丁基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.4]辛-6-基、5-丙烯酰基-5,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基、5-(丁-2-炔酰基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-乙炔基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬-3-基、4-甲基丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、N-(1-吡咯烷-3-基)-N-甲基丙烯酰胺、4-甲基丙烯酰基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-6-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-4-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-基及8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基。

在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：-L¹-R⁵、-NR⁶R⁷、N-甲基-3-丙烯酰胺及丙-1-烯-2-基，其中R¹不为1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯或4-丙烯酰基哌嗪-1-基。在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基、1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、1-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)硫基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)(甲基)氨基、1-丙烯酰基哌啶-3-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基、1-丙烯酰基哌啶-4-基、3-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)硫基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、6-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基、N-丙烯酰胺、N-丁-2-炔酰胺、N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-3-丙烯酰胺、N-甲基-N-丙烯酰胺及丙-2-烯-1-酮。

在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：-L¹-R⁵、-NR⁶R⁷、N-甲基-3-丙烯酰胺及丙-1-烯-2-基，其中R¹不为1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯、4-丙烯酰基哌嗪-1-基或1-丙烯酰基哌啶-4-基。在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基、1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、1-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)硫基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)(甲基)氨基、1-丙烯酰基哌啶-3-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基、3-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)硫基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、6-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基、N-丙烯酰胺、N-丁-2-炔酰胺、N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-3-丙烯酰胺、N-甲基-N-丙烯酰胺、丙-2-烯-1-酮、9-丙烯酰基-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-7-基、4-丙烯酰基-3-环丙基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-乙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-2,6-二甲基哌啶-4-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-6-甲基哌啶-3-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛-2-基、2-(丁-2-炔酰基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)哌嗪-1-基、4-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、1-(丁-2-炔酰基)-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-6-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-6-基、8-(2-氟丙烯酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-(丁-2-炔酰基)氮杂环庚烷-4-基、7-丙烯酰基-7-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-5-基、3-丙烯酰基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、8-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、3-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-氰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、3-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-丙烯酰基-3-异丙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基、4-丙烯酰基-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、6-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-1-基、4-丙烯酰基-3-(叔丁基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5,5-二甲基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)甲基、1-(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)乙基、1-丙烯酰基-5-环丙基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-环丁基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.4]辛-6-基、5-丙烯酰基-5,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基、5-(丁-2-炔酰基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-乙炔基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬-3-基、4-甲基丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、N-(1-吡咯烷-3-基)-N-甲基丙烯酰胺、4-甲基丙烯酰基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-6-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-4-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-基及8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基。

在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：-L¹-R⁵、-NR⁶R⁷、N-甲基-3-丙烯酰胺及丙-1-烯-2-基，其中R¹不为1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯、4-丙烯酰基哌嗪-1-基或1-丙烯酰基哌啶-4-基。在式(I)的一个实施方案中，R¹选自由以下组成的组：6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基、1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、1-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)硫基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)(甲基)氨基、1-丙烯酰基哌啶-3-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基、3-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)硫基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、6-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基、N-丙烯酰胺、N-丁-2-炔酰胺、N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-3-丙烯酰胺、N-甲基-N-丙烯酰胺及丙-2-烯-1-酮。

在式(I)的优选的实施方案中，R¹选自由以下组成的组：4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基及8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基。

在式(I)的一个实施方案中，L¹选自由以下组成的组：键、O、NR⁸及S。在式(I)的优选的实施方案中，L¹选自由键或O组成的组。在更优选的实施方案中，L¹为键(即，R¹为R⁵)。

在式(I)的一个实施方案中，R⁵为含有1或2个选自氮及氧的杂原子的4至9元杂环，其中该杂环经一个R⁶取代，且另外任选经1或2个独立地选自以下的基团取代：甲基、乙基、异丙基、叔丁基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基、乙炔基、环丙基及环丁基。在式(I)的一些实施方案中，R⁵经由杂环中的氮杂原子连接至L¹。在式(I)的一些实施方案中，R⁵经由杂环中的碳原子连接至L¹。在式(I)的一个实施方案中，R⁶为R⁵的环氮原子上的取代。

在式(I)的一个实施方案中，R⁵为含有1或2个氮杂原子的4至8元杂环，其中该杂环经一个R⁶取代，且另外任选经1或2个独立地选自甲基及三氟甲基的基团取代。在式(I)的一些实施方案中，R⁵经由杂环中的氮杂原子连接至L¹。在式(I)的一些实施方案中，R⁵经由杂环中的碳原子连接至L¹。在式(I)的一个实施方案中，R⁶为R⁵的环氮原子上的取代基团。

在式(I)的优选的实施方案中，R⁵为含有1或2个氮杂原子的4至8元杂环，其中该杂环经一个R⁶取代，且也经1或2个基团甲基取代。在式(I)的更优选的实施方案中，R⁵为含有1或2个氮杂原子的4至8元杂环，其中该杂环经一个R⁶取代，且也经2个基团甲基取代。在式(I)的再更优选的实施方案中，R⁵为含有1或2个氮杂原子的6元杂环，其中该杂环经一个R⁶取代，且也经2个基团甲基取代。在式(I)的某些实施方案中，R⁵选自由以下组成的组：4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基及1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基。

在式(I)的优选的实施方案中，L¹为键，且R⁵为含有1或2个选自由N及O组成的组的杂原子的4至7元单环杂环，其中该杂环经由环氮原子连接，其中该杂环经一个R⁶取代，且另外任选经1或2个独立地选自以下的基团取代：甲基、乙基、异丙基、叔丁基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基、乙炔基、环丙基及环丁基。在式(I)的更优选的实施方案中，R⁶选自1-丙-2-烯-1-酮及1-丁-2-炔-1-酮。在式(I)的优选的实施方案中，R⁶为1-丙-2-烯-1-酮。在式(I)的另一实施方案中，R⁵为含有1或2个氮杂原子的6元单环杂环，其中该杂环经由环氮原子连接，其中该杂环经一个R⁶取代，且另外任选经1或2个甲基取代。在式(I)的优选的实施方案中，R⁵为含有2个氮杂原子的6元单环杂环，其中该杂环经由环氮原子连接，其中该杂环经一个R⁶取代，且经1或2个甲基取代。

在式(I)的一个实施方案中，R⁶选自由以下组成的组：氰基、1-丙-2-烯-1-酮(-C(＝O)C(H)＝CH₂)、1-(2-氟丙-2-烯-1-酮)(-C(＝O)C(F)＝CH₂)、1-(2-甲基丙-2-烯-1-酮)(-C(＝O)C(CH₃)＝CH₂)、N-(N-甲基丙烯酰胺)(-N(CH₃)C(＝O)C(H)＝CH₂)、1-丁-2-炔-1-酮(-C(＝O)C≡CCH₃)、乙烯基磺酰基及(双环[1.1.0]丁-1-基)甲酮。在式(I)的另一实施方案中，R⁶选自由以下组成的组：1-丙-2-烯-1-酮、1-丁-2-炔-1-酮、乙烯基磺酰基及(双环[1.1.0]丁-1-基)甲酮。在式(I)的优选的实施方案中，R⁶为1-丙-2-烯-1-酮。

在另一实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物，其中R²为含有两至三个选自N及S的杂原子的9元双环杂芳基，其中该双环杂芳基可任选经一个甲基取代。

在式(I)的一个实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物，其中R²选自由以下组成的组：三唑并吡啶、吲唑、苯并噻唑、咪唑并吡啶、吡唑并吡啶、苯并咪唑及咪唑并哒嗪，其中各基团可任选经一个或两个选自卤素及C₁-C₃烷基的基团取代。在式(I)的另一实施方案中，R²选自由以下组成的组：三唑并吡啶、吲唑、苯并噻唑、咪唑并吡啶、吡唑并吡啶、苯并咪唑及咪唑并哒嗪，其中各基团可任选经一个选自卤素及C₁-C₃烷基的基团取代。在式(I)的另一其他实施方案中，R²选自由以下组成的组：三唑并吡啶、吲唑、苯并噻唑、咪唑并吡啶、吡唑并吡啶及苯并咪唑，其中各基团可任选经一个或两个选自甲基及氟的基团取代。在式(I)的另一其他实施方案中，R²选自由以下组成的组：三唑并吡啶、吲唑、苯并噻唑、咪唑并吡啶、吡唑并吡啶及苯并咪唑，其中各基团可任选经一个甲基取代。

在另一实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物，其中R²选自由以下组成的组：[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基、2H-吲唑-6-基、苯并[d]噻唑-5-基、咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基、2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基、1H-苯并[d]咪唑-5-基、2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-基及3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基，其中各基团可任选经一个或两个选自卤素及C₁-C₃烷基的基团取代。在式(I)的另一实施方案中，R²选自由以下组成的组：[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基、2H-吲唑-6-基、苯并[d]噻唑-5-基、咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基、2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、及咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基、1H-苯并[d]咪唑-5-基、2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-基及3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基，其中各基团可任选经一个或两个选自甲基及氟的基团取代。在式(I)的另一实施方案中，R²选自由以下组成的组：[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基、2H-吲唑-6-基、苯并[d]噻唑-5-基、咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基、2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、及咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基、1H-苯并[d]咪唑-5-基、2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-基及3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基，其中各基团可任选经一个甲基取代。

在优选的实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物，其中R²选自由以下组成的组：

及

在另一实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物，其中R²选自由以下组成的组：

及

在式(I)的甚至更优选的实施方案中，R²选自由以下组成的组：及在更优选的实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物，其中R²选自由以下组成的组：及在更优选的实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物，其中R²为：在另一更优选的实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物，其中R²为：

在另一实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物，其中各R³独立地选自由氟、氯及甲基组成的组。

在另一实施方案中，本发明提供一种式(I)化合物，其中n为1或2。

在式(I)的另一实施方案中，各R³独立地选自由氟、氯、二氟甲基、三氟甲基及甲基组成的组，且n为1或2。在另一实施方案中，各R³独立地选自卤素及甲基。在式(I)的优选的实施方案中，各R³独立地选自由氟、氯及甲基组成的组，且n为1或2。

在式(I)的一个实施方案中，R⁴为氢、氯或甲氧基。在式(I)的优选的实施方案中，R⁴为氢。

在式I的一个实施方案中，提供实施例1至456的化合物。在式I的一个实施方案中，提供实施例1至160的化合物。

在另一方面中，本发明提供一种式(Ia)化合物：

或其药学上可接受的盐。在适当时(即，不为与L²相关的实施方案等)，以上式(I)的实施方案也适用于式(Ia)。在式(Ia)的一个实施方案中：

各R³独立地选自卤素及甲基；

R⁴为氢、氯或甲氧基；

L¹选自由以下组成的组：键、O、NR⁸及S；

R⁵为含有1至3个选自由N、O及S组成的组的杂原子的4至8元杂环，其中该杂环经一个R⁶取代，且另外任选经1或2个独立地选自甲基及三氟甲基的基团取代；

R⁶选自由以下组成的组：1-丙-2-烯-1-酮、1-丁-2-炔-1-酮、乙烯基磺酰基及(双环[1.1.0]丁-1-基)甲酮；

R⁷及R⁸独立地为氢或甲基；且

n为0、1或2。

在另一方面中，本发明提供一种式(II)化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

R¹为1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯；

各R³独立地选自卤素及甲基；且

n为0、1或2。

在另一实施方案中，本发明提供式(II)化合物或其药学上可接受的盐，其中：

R¹为1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯；

R²选自由以下组成的组：[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基、2H-吲唑-6-基、苯并[d]噻唑-5-基、咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基、2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基，其中各基团可任选经一个甲基取代；

各R³独立地选自由氟、氯及甲基组成的组；且

n为1或2。

在另一实施方案中，本发明提供一种式(II)化合物，其中R²为含有两至三个选自N及S的杂原子的9元双环杂芳基，其中该双环杂芳基可任选经一个甲基取代。

在另一实施方案中，本发明提供一种式(II)化合物，其中R²选自由以下组成的组：三唑并吡啶、吲唑、苯并噻唑、咪唑并吡啶及吡唑并吡啶，其中各基团可任选经一个或两个选自卤素及C₁-C₃烷基的基团取代。在另一实施方案中，R²选自由以下组成的组：三唑并吡啶、吲唑、苯并噻唑、咪唑并吡啶及吡唑并吡啶，其中各基团可任选经一个选自卤素及C₁-C₃烷基的基团取代。在另一其他实施方案中，R²选自由以下组成的组：三唑并吡啶、吲唑、苯并噻唑、咪唑并吡啶及吡唑并吡啶，其中各基团可任选经一个甲基取代。

在另一实施方案中，本发明提供一种式(II)化合物，其中R²选自由以下组成的组：[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基、2H-吲唑-6-基、苯并[d]噻唑-5-基、咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基、2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基、1H-苯并[d]咪唑-5-基、2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-基及3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基，其中各基团可任选经一个或两个选自卤素及C₁-C₃烷基的基团取代。在式(II)的另一实施方案中，R²选自由以下组成的组：[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基、2H-吲唑-6-基、苯并[d]噻唑-5-基、咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基、2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基、及咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基、1H-苯并[d]咪唑-5-基、2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-基及3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基，其中各基团可任选经一个甲基取代。

在另一实施方案中，本发明提供一种式(II)化合物，其中R²选自由以下组成的组：[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基、2H-吲唑-6-基、苯并[d]噻唑-5-基、咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基、2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基及咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基，其中各基团可任选经一个或两个选自卤素及C₁-C₃烷基的基团取代。在另一实施方案中，R²选自由以下组成的组：[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基、2H-吲唑-6-基、苯并[d]噻唑-5-基、咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基、2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基及咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基，其中各基团可任选经一个甲基取代。

在一个实施方案中，本发明提供一种式(II)化合物，其中R²选自由以下组成的组：

及

在另一实施方案中，本发明提供一种式(II)化合物，其中R²选自由以下组成的组：

及

在优选的实施方案中，本发明提供一种式(II)化合物，其中R²选自由以下组成的组：

及

在另一实施方案中，本发明提供一种式(II)化合物，其中各R³独立地选自由氟、氯及甲基组成的组。

在另一实施方案中，本发明提供一种式(II)化合物，其中n为1或2。

在式(II)的优选的实施方案中，各R³独立地选自由氟、氯及甲基组成的组，且n为1或2。

在另一实施方案中，提供实施例1至17的化合物。

在另一方面中，本发明提供一种式(III)化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

各R³独立地选自卤素及甲基；

R⁵为含有1至3个选自由N、O及S组成的组的杂原子的4至9元杂环，其中该杂环经一个R⁶取代，且另外任选经1或2个独立地选自以下的基团取代：甲基、乙基、异丙基、叔丁基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基、乙炔基、环丙基及环丁基；

R⁶选自由以下组成的组：1-丙-2-烯-1-酮、1-(2-氟丙-2-烯-1-酮)、1-(2-甲基丙-2-烯-1-酮)及1-丁-2-炔-1-酮；

n为1或2。

在一个实施方案中，本发明提供一种式(III)化合物，其中R²选自由以下组成的组：

及

在另一实施方案中，本发明提供一种式(III)化合物，其中R⁵为含有1或2个选自由N及O组成的组的杂原子的4至7元单环杂环，其中该杂环经由环氮原子连接，其中该杂环经一个R⁶取代，且另外任选经1或2个独立地选自以下的基团取代：甲基、乙基、异丙基、叔丁基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基、乙炔基、环丙基及环丁基。在式(III)的另一实施方案中，R⁶选自1-丙-2-烯-1-酮及1-丁-2-炔-1-酮。在式(III)的优选的实施方案中，R⁶为1-丙-2-烯-1-酮。在式(III)的另一实施方案中，R⁵为含有1或2个氮杂原子的6元单环杂环，其中该杂环经由环氮原子连接，其中该杂环经一个R⁶取代，且另外任选经1或2个甲基取代。在式(III)的优选的实施方案中，R⁵为含有2个氮杂原子的6元单环杂环，其中该杂环经由环氮原子连接，其中该杂环经一个R⁶取代，且经1或2个甲基取代。

除非另有说明，否则本文对本发明化合物的所有提及均包括对其盐、溶剂化物、水合物及复合物的提及，以及对其盐的溶剂化物、水合物及复合物的提及，包括其多晶型物、立体异构体及经同位素标记的形式。

本发明化合物可以以药学上可接受的盐的形式存在，诸如本文所提供的式子中的一者的化合物的酸加成盐及碱加成盐。

如本文所用，“药学上可接受的盐”是指保留母体化合物的生物有效性及特性的这些盐。除非另外指明，否则如本文所用，词组”药学上可接受的盐”包括可存在于本文所公开的式子的化合物中的酸性或碱性基团的盐。

本文所描述的化合物也包括此类化合物的其他盐，其未必为药学上可接受的盐且其可用作用于制备和/或纯化本文所描述化合物和/或分离本文所描述化合物的对映异构体的中间体。例如，本质上呈碱性的本发明化合物能够与各种无机及有机酸形成广泛多种盐。尽管此类盐在向动物施用时必须为药学上可接受的，但在实践中常常需要首先自反应混合物中分离呈药学上不可接受的盐形式的本发明化合物，且接着通过用碱性试剂处理来简单地将后者(该药学上不可接受的盐)重新转化为游离碱化合物，且随后将后一游离碱转化为药学上可接受的酸加成盐。本发明的碱性化合物的酸加成盐可通过在水性溶剂介质中或在诸如甲醇或乙醇的合适有机溶剂中，用大体上等量的所选无机或有机酸处理碱性化合物来制备。在蒸发溶剂后，获得所需固体盐。所需酸式盐也可通过向溶液中添加适当的无机或有机酸而自游离碱于有机溶剂中的溶液中沉淀。

可用于制备此类碱性化合物的药学上可接受的酸加成盐的酸为形成无毒酸加成盐的这些酸，该无毒酸加成盐即含有药理学上可接受的阴离子的盐，诸如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟碱酸盐、乙酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、柠檬酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、丁二酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、葡糖二酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐及1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸盐)(即，双羟萘酸盐)。

盐的实施例包括但不限于乙酸盐、丙烯酸盐、己二酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐(诸如氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐及甲氧基苯甲酸盐)、苯磺酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、亚硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、丁炔-1,4-二酸盐、乙二胺四乙酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、己酸盐、辛酸盐、棒酸盐、柠檬酸盐、癸酸盐、二盐酸盐、磷酸二氢盐、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐、依托酸盐(estolate)、乙磺酸盐、乙基丁二酸盐、甲酸盐、反丁烯二酸酯、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、乙内酰胺苯胂酸盐、庚酸盐、六氟磷酸盐、己炔-1,6-二酸盐、己基间苯二酚酸盐、海苯酸盐(hibenzate)、海卓胺(hydrabamine)、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、γ-羟基丁酸盐、碘化物、异丁酸盐、羟乙磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、杏仁酸盐、甲磺酸盐、偏磷酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、磷酸一氢盐、粘酸盐、萘磺酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-1,5-二磺酸、萘-2-磺酸盐、萘二甲酸盐、2-萘磺酸盐、烟碱酸盐、硝酸盐、油酸盐、乳清酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐(恩波酸盐(embonate))、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、泛酸盐、苯基乙酸盐、苯基丁酸盐、苯基丙酸盐、邻苯二甲酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、丙磺酸盐、丙酸盐、丙炔酸盐、焦谷氨酸盐、焦磷酸盐、焦硫酸盐、葡糖二酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、次乙酸盐、辛二酸盐、丁二酸盐、硫酸盐、磺酸盐、亚硫酸盐、丹宁酸盐(tannate)、酒石酸盐、茶氯酸盐、甲苯磺酸盐、三乙碘化物、三氟乙酸盐、戊酸盐及羟萘甲酸盐(xinofoate)。

适合盐的说明性实施例包括衍生自氨基酸(诸如甘氨酸及精氨酸)、氨、伯胺、仲胺及叔胺以及环胺(诸如哌啶、吗啉及哌嗪)的有机盐，及衍生自钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝及锂的无机盐。

包括碱基部分(诸如氨基)的本发明化合物可与除上文所提及的酸以外的各种氨基酸形成药学上可接受的盐。

替代地，本质上为酸性的化合物可能够与各种药理学上可接受的阳离子形成碱盐。此类盐的实施例包括碱金属盐或碱土金属盐，且尤其钠盐及钾盐。这些盐全部通过常规技术来制备。用作制备本发明的药学上可接受的碱盐的试剂的化学碱是与本文的酸性化合物形成无毒碱盐的这些碱。这些盐可通过任何适合的方法来制备，例如用无机或有机碱来处理游离酸，这些碱诸如胺(伯、仲或叔胺)、碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物等。这些盐也可通过用含有所需药理学上可接受的阳离子的水溶液处理相应酸性化合物，且接着优选在减压下将所得溶液蒸发至干燥来制备。替代地，其也可通过将酸性化合物的低级烷醇溶液与所需碱金属醇盐混合在一起，且随后以与之前相同的方式将所得溶液蒸发至干燥来制备。在任一情况下，优选采用化学计量的量的试剂以确保反应完全及所需最终产物的最大产率。

可用作制备本质上为酸性的本发明化合物的药学上可接受的碱盐的试剂的化学碱是与这些化合物形成无毒碱盐的那些碱。这样的无毒碱盐包括但不限于衍生自这样的药理学上可接受的阳离子(诸如碱金属阳离子(例如钾及钠)及碱土金属阳离子(例如钙及镁))的这些碱盐、铵或水溶性胺加成盐(诸如N-甲基葡糖胺(葡甲胺))、及药学上可接受的有机胺的低级烷醇铵及其他碱盐。

适合的碱盐由形成无毒盐的碱形成。实例包括铝盐、精氨酸盐、苄星青霉素盐、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二乙醇胺盐、甘氨酸盐、赖氨酸盐、镁盐、葡甲胺盐、乙醇胺盐、钾盐、钠盐、氨丁三醇盐及锌盐。

也可形成酸及碱的半盐，例如半硫酸盐及半钙盐。

关于适合盐的综述，参见Stahl,P.Heinrich及Camilli G.Wermuth编Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use.New York:Wiley-VCH,2011。用于制得本发明的化合物及互换盐及游离碱形式的药学上可接受的盐的方法为本领域技术人员已知的。

本发明的盐可根据本领域技术人员已知的方法来制备。本发明化合物的药学上可接受的盐可容易通过将化合物的溶液及所需酸或碱(适当时)混合在一起来制备。盐可自溶液沉淀且通过过滤来收集或可通过溶剂蒸发来回收。盐的离子化程度可在完全离子化至几乎不离子化的范围内变化。

本领域技术人员应理解，具有碱性官能团的呈游离碱形式的式(I)或(II)化合物可通过用化学计量过量的适当酸处理而转化为酸加成盐。本发明化合物的酸加成盐可通过通常在水性溶剂存在下及在约0℃与100℃之间的温度下用化学计量过量的适合碱(诸如碳酸钾或氢氧化钠)处理再转化为相应的游离碱。游离碱形式可通过常规方式，诸如用有机溶剂萃取来分离。另外，本发明化合物的酸加成盐可利用盐的不同溶解度、酸的挥发性或酸性或通过用适当负载的离子交换树脂处理来进行交换。例如，交换可能受本发明化合物的盐与略微化学计量过量的酸的反应影响，该酸的pK低于起始盐的酸组分。这种转化通常在约0℃与用作该程序用介质的溶剂的沸点之间的温度下进行。类似交换可能用碱加成盐，通常经由游离碱形式的中间性实现。

本领域技术人员也应理解，一些实施方案包括可以各种盐形式或游离碱形式存在的化合物，而其他化合物可不形成盐。例如，拉帕替尼可以其游离碱形式，以拉帕替尼二甲苯磺酸盐形式或以另一盐形式存在。为方便起见，本发明的某些实施方案通过其名称(例如式(I)或(II)化合物或拉帕替尼)与命名法“或其盐”或“或其药学上可接受的盐”来列举化合物。在这些情况下，本领域技术人员将认识到，尽管该措辞看起来是应用于列表中的所有化合物，但列表中的这些化合物中的一些可以各种盐形式或以游离碱形式存在(例如式(I)或(II)化合物或拉帕替尼)，而其他化合物不可以盐形式存在(例如曲妥珠单抗)。

本发明化合物可以非溶剂化及溶剂化形式两者存在。当紧密地结合溶剂或水时，复合物将具有与湿度无关的明确化学计量。然而，当溶剂或水弱结合时(如在通道溶剂化物及吸湿化合物中)，水/溶剂含量将取决于湿度及干燥条件。在这些情况下，非化学计量将为标准。如本文所用，“溶剂化物”是指包含式(I)或(II)化合物及一种或多种药学上可接受的溶剂分子(例如乙醇)的分子复合物。如本文所用，“水合物”是指溶剂为水的溶剂化物。根据本发明的药学上可接受的溶剂化物包括其中结晶的溶剂可经同位素取代的水合物及溶剂化物，例如D₂O、d₆-丙酮((CD₃)₂CO)、d₆-DMSO((CD₃)₂SO)。

当前公认的有机水合物的分类系统为定义分离的位点、通道或金属-离子配位水合物的系统，参见Brittain,Harry G.编Polymorphism in Pharmaceutical Solids.NewYork:Informa Healthcare USA,Inc.,2016。分离位点水合物为其中水分子通过插入有机分子彼此分离而不直接接触的水合物。在通道水合物中，水分子处于紧挨着其他水分子的晶格通道中。在金属-离子配位水合物中，水分子与金属离子结合。

当溶剂或水紧密结合时，复合物可具有不依赖于湿度的明确界定的化学计量。然而当溶剂或水弱结合时，如在通道溶剂化物及吸湿化合物中，水/溶剂含量可视湿度及干燥条件而定。在这些情况下，非化学计量将为标准。

本发明的范畴内也包括复合物，诸如笼形物，药物-主体包合复合物，其中与上述溶剂化物相比，药物及主体以化学计量或非化学计量的量存在。也包括含有两种或更多种有机和/或无机组分的药物的复合物，这些组分可呈化学计量或非化学计量的量。所得复合物可为离子化、部分离子化或非离子化的。关于此类复合物的综述，参见Haleblian,JK.“Characterization of habits and crystalline modification of solids and theirpharmaceutical applications”.J Pharm Sci.64(8)(1975):第1269-1288页，其公开内容以全文引用的方式并入本文中。

本发明也关于本文中所提供的式子的化合物的前药。因此，自身可能具有极少药理学活性或无药理学活性的式(I)或(II)化合物的某些衍生物在向患者施用时可例如通过水解裂解转化成具有所需活性的本发明化合物。此类衍生物被称为“前药”。关于前药使用的其他信息可见于Higuchi,T.及V.Stella编Pro-drugs as Novel Delivery Systems.ACSSymposium Series第14卷,Washington DC:American Chemical Society,1975以及Roche,Edward P.Bioreversible Carriers in Drug Design:Theory and Application.NewYork:Pergamon Press,1987，其公开内容以全文引用的方式并入本文中。

根据本发明的前药可例如通过用本领域技术人员已知的某些部分作为“前部分”置换本发明化合物中存在的适当官能团来产生，如例如Bundgaard,Hans编Design of Prodrugs.New York:Elsevier,1985中所描述，其公开内容以全文引用的方式并入本文中。

因此，根据本发明的前药为(a)式(I)或(II)化合物中羧酸的酯或酰胺衍生物；(b)式(I)或(II)化合物中羟基的酯、碳酸酯、氨基甲酸酯、磷酸酯或醚衍生物；(c)式(I)或(II)化合物中氨基的酰胺、亚胺、氨基甲酸酯或胺衍生物；(d)式(I)或(II)化合物中硫醇基的硫酯、硫代碳酸酯、硫代氨基甲酸酯或硫醚衍生物；或(e)式(I)或(II)化合物中羰基的肟或亚胺衍生物。

根据本发明的前药的一些非限制性实例包括：

(i)其中本发明化合物含有羧酸官能团(-COOH)、其酯，例如用C₁-C₈烷基置换氢；

(ii)其中化合物含有醇官能团(-OH)、其醚，例如用C₁-C₆烷酰氧基甲基或用磷酸酯醚基置换氢；及

(iii)其中化合物含有伯或仲氨基官能团(-NH₂或-NHR，其中R≠H)、其酰胺，例如用适当代谢不稳定的基团，诸如酰胺、氨基甲酸酯、脲、膦酸酯、磺酸酯等置换一个或两个氢。

根据前述实例的置换基团的其他实例及其他前药类型的实例可见于前述参考文献中。最后，某些本发明化合物自身可充当其他本发明化合物的前药。

本发明的范畴内也包括本文中所描述的式的化合物的代谢物，即施用药物时在活体内形成的化合物。

本文所提供的式子的化合物可具有作为取代基或连接至这些基团的任选存在的取代基的一部分的不对称碳原子。在这样的不对称中心处，除非另有说明，否则使用实线表示包括彼碳原子处的所有可能立体异构体，而实心或点线楔形表示仅意欲包括在这样的立体中心处的异构体。本文中的式的化合物可包括含有顺式及反式几何异构体、旋转异构体、阻转异构体、构象异构体及互变异构体的取代基，包括呈现超过一种异构类型的化合物。

也包括酸加成盐或碱加成盐，其中抗衡离子具有光学活性(例如d-乳酸盐或l-赖氨酸)或外消旋性(例如dl-酒石酸盐或dl-精氨酸)。

当任一种外消旋体结晶时，可能有两种不同类型的晶体。第一种类型为上文所提及的外消旋化合物(真实外消旋体)，其中产生含有等摩尔量的两种对映异构体的一种均质晶体形式。第二种类型为外消旋混合物或聚结物，其中等摩尔量产生各包含单一对映异构体的两种晶体形式。

本发明的化合物可展现互变异构及结构异构的现象。例如，化合物可以几种互变异构形式存在，包括烯醇与亚胺形式、及酮与烯胺形式、以及几何异构体及其混合物。所有这些互变异构形式均包括在本发明化合物的范畴内。互变异构体是以溶液中互变异构集合的混合物形式存在。在固体形式中，通常以一种互变异构体占主导。尽管可描述一种互变异构体，但本发明包括所提供的式子的化合物的所有互变异构体。必须强调的是，虽然为简洁起见在本文中以单一互变异构形式绘制式(I)或式(II)化合物，但所有可能的互变异构形式均包括在本发明的范畴内。

另外，本发明的一些化合物可形成阻转异构体(例如经取代的联芳)。阻转异构体为当由于与分子的其他部分的立体相互作用及单键两端的取代基不对称而阻止或大大减缓围绕分子中的单键的旋转时所存在的构象立体异构体。阻转异构体的互变足够缓慢以使得在预定条件下分开并分离。热外消旋化的能垒可通过形成手性轴的一个或多个键的自由旋转的空间位阻来测定。

含有一个或多个不对称碳原子的式(I)或(II)化合物可以两种或更多种立体异构体的形式存在。当本发明化合物含有烯基时，几何顺式/反式(或Z/E)异构体是可能的。顺式/反式异构体可通过本领域技术人员熟知的常规技术(例如色谱法及分步结晶)来分离。因此单个化合物可呈现超过一种类型的异构现象。

用于制备/分离个别对映异构体的常规技术包括自适合的光学纯前体进行手性合成或使用例如手性高效液相色谱(“HPLC”)或超临界流体色谱(“SFC”)拆分外消旋物(或盐或衍生物的外消旋物)。

替代地，外消旋物(或外消旋前体)可与适合的光学活性化合物(例如醇)反应，或在化合物含有酸性或碱性部分的情况下与酸或碱(诸如酒石酸或1-苯乙胺)反应。所得的非对映体混合物可通过色谱法和/或分步结晶来分离，且通过本领域技术人员熟知的手段将非对映异构体中的一者或两者转化为相应的纯对映异构体。

本发明的手性化合物(及其手性前体)可使用色谱法(通常HPLC)在不对称树脂上用流动相来以对映体富集形式获得，该流动相由烃(通常庚烷或己烷)组成且含有0％至50％(通常2％至20％)异丙醇及0％至5％烷基胺(通常0.1％二乙胺)。洗脱液的浓缩提供富集的混合物。

立体异构聚结物可通过本领域技术人员已知的常规技术来分离；参见例如Eliel,E.及Wilen,S.Stereochemistry of Organic Compounds.New York:John Wiley&Sons,Inc.,1994；及Lochmuller,C.H.等人“Chromatographic resolution of enantiomers:Selective review”.J.Chromatogr.113(3)(1975):第283-302页，其公开内容以全文引用的方式并入本文中。

本文所描述的化合物的对映体纯度可以对映体过量(“ee”)描述，其表示样品含有一种对映异构体的量大于另一种的程度。外消旋混合物的ee为0％，而单一完全纯的对映异构体的ee为100％。类似地，非对映体纯度可以非对映体过量(“de”)描述。如本文所用，“对映体纯”或“实质上对映体纯”是指包含化合物的一种对映异构体且实质上不含该化合物的相反对映异构体的化合物。典型对映体纯化合物包含大于约95重量％的化合物的一种对映异构体及小于约5重量％的化合物的相反对映异构体，优选大于约97重量％的化合物的一种对映异构体及小于约3重量％的化合物的相反对映异构体，更优选大于约98重量％的化合物的一种对映异构体及小于约2重量％的化合物的相反对映异构体，且甚至更优选大于约99重量％的化合物的一种对映异构体及小于约1重量％的化合物的相反对映异构体。

本发明也包括经同位素标记的化合物，其与所提供式中的一者所述的化合物相同，但事实是一个或多个原子经原子质量或质量数与自然界中所常见的原子质量或质量数不同的原子置换。经同位素标记的化合物一般可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过类似于本文所述的方法，使用经适当同位素标记的试剂代替原本使用的未经标记的试剂来制备。可并入本发明化合物中的同位素的实施例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟及氯的同位素，诸如但不限于²H、³H、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸O、¹⁷O、³¹P、³²P、³⁵S、¹⁸F及³⁶Cl。某些经同位素标记的本发明化合物(例如其中掺入诸如³H及¹⁴C的放射性同位素的化合物)适用于药物和/或底物组织分布分析。氚化(即³H)及碳-14(即¹⁴C)同位素因其容易制备及可检测性而特别优选。此外，用诸如氘(即²H)的较重同位素进行取代可得到由更大代谢稳定性产生的某些治疗优势，例如增加的活体内半衰期或降低的剂量需求，因此在某些情况下可为优选的。经同位素标记的化合物一般可通过进行下文流程和/或实施例中所公开的程序、通过用经同位素标记的试剂代替未经同位素标记的试剂来制备。

意在用于药物用途的本发明的化合物可作为结晶或非晶形产物或其混合物施用。其可通过诸如沉淀、结晶、冷冻干燥、喷雾干燥或蒸发干燥的方法以例如固体塞、粉末或薄膜形式获得。微波或射频干燥可用于此目的。

本发明的化合物可以自完全非晶形至完全结晶的范围内的连续固态形式存在。如本文所用，“非晶形”是指材料在分子水平上缺乏长程有序且取决于温度可展现固体或液体的物理特性的状态。这种材料通常不产生独特X射线衍射图案，且在展现固体的特性同时，更正式地描述为液体。在加热后，发生从固体至液体特性的改变，特征为状态的改变，通常为二阶(玻璃化转变)。如本文所用，“结晶”是指材料在分子水平上具有规则有序内部结构且产生具有经定义峰值的独特X射线衍射图案的固相。这种材料在充分加热时也将呈现液体的特性，但从固体至液体的变化的特征在于相变，通常为一阶(熔点)。

式(I)或(II)化合物也可在经受适合条件时以介晶态(中间相或液晶)形式存在。介晶态为真正结晶状态与真正液态(熔体或溶液)之间的中间态。因温度变化而出现的介晶现象描述为热致性的，而因添加第二组分(诸如水或另一种溶剂)而产生的介晶现象描述为溶致性的。能够形成溶致性中间相的化合物描述为两亲性的，且由具有离子极性头基团(诸如-COO^-Na⁺、-COO^-K⁺或-SO₃ ^-Na⁺)或非离子极性头基团(诸如-N^-N⁺(CH₃)₃)的分子组成，参见Hartshorne,N.H.及A.Stuart.Crystals and the Polarizing Microscope.London:Edward Arnold Publishers Ltd.,1970。

式(I)或(II)化合物可展现多态性和/或一种或多种异构(例如光学异构、几何异构或互变异构)。式(I)或(II)化合物也可经同位素标记。这种变化隐含于式(I)或(II)化合物中，因为它们通过参考其结构特征而被定义，因此在本发明的范畴内。

化合物的合成

本文所描述的化合物可通过合成途径合成，该合成途径包括类似于化学技术中熟知的这些方法的方法，特别是根据本文中含有的描述来合成。起始物质一般可购自诸如MilliporeSigma(St.Louis,MO)、Alfa Aesar(Ward Hill,MA)、TCI(Portland,OR)等的商业来源，或使用本领域技术人员熟知的方法容易地制备(例如通过一般描述于LouisF.Fieser及Mary Fieser,Reagents for Organic Synthesis,第1-23卷,New York:Wiley1967-2006版(也可经由Wiley网站获得)；或Beilsteins Handbuch der organischen Chemie,4,Aufl.编Springer-Verlag,Berlin,包括增刊(也可经由Beilstein在线数据库获得)中的方法制备)。

制备式(I)或(II)化合物时，可能需要保护中间体的远程官能团(例如伯或仲胺等)。这种保护的需要将视远程官能团的性质及制备方法的条件而变化。适合的氨基保护基(NH-Pg)包括乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧基羰基(“Boc”)、苯甲氧基羰基(“CBz”)及9-芴基亚甲基氧基羰基(“Fmoc”)。对这种保护的需要容易地由本领域技术人员确定。关于保护基及其使用的一般描述，参见T.W.Greene等人Greene's Protective Groups in Organic Synthesis.New York:Wiley Interscience,2006。

制剂及施用

通过混合本文所描述的化合物与载体或赋形剂来制备典型的制剂或组合物。适合的载体及赋形剂为本领域技术人员所熟知的且详细描述于例如Ansel,Howard C.等人,Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2004；Gennaro,Alfonso R.等人Remington:The Science and Practice of Pharmacy.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2000；及Rowe,Raymond C.Handbook of Pharmaceutical Excipients.Chicago,PharmaceuticalPress,2005中，其公开内容以引用的方式并入本文中。

如本文所用，“药物组合物”是指作为活性成分的式(I)或(II)化合物中的一种或多种或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或前药与至少一种药学上可接受的赋形剂的混合物。在另一实施方案中，药物组合物包含两种或更多种药学上可接受的载体和/或赋形剂。在另一实施方案中，药物组合物进一步包含至少一种额外的抗癌治疗剂，无论是作为固定剂量组合还是单独的组合物。在另一实施方案中，组合提供累加抗癌作用，超过累加的抗癌作用或协同抗癌作用。

在一个方面中，本发明提供一种药物组合物，其包含式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。在另一方面中，本发明提供一种药物组合物，其包含式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体或赋形剂。在另一实施方案中，药物组合物包含两种或更多种药学上可接受的载体和/或赋形剂。

在另一方面中，本发明提供一种用于治疗适用HER2突变抑制剂的疾病或病状的药物组合物，其包含式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种用于治疗适用HER2的脑渗透性抑制剂的疾病或病状的药物组合物，其包含式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。在另一方面中，本发明提供一种用于治疗适用HER2突变的脑渗透性抑制剂的疾病或病状的药物组合物，其包含式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种包含式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物，其用于治疗异常细胞生长。

在又另一方面中，本发明提供一种用于治疗有需要的受试者的异常细胞生长的药物组合物，该药物组合物包含式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。在另一方面中，本发明提供一种用于治疗有需要的受试者的异常细胞生长的药物组合物，该药物组合物包含式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。

如本文所用，“累加”是指两种化合物、组分或靶向剂的组合的结果不超过单独地各化合物、组分或靶向剂的总和。

如本文所用，“协同”或“协同性”是指两种化合物、组分或靶向剂的组合的结果超过单独地各化合物、组分或靶向剂的总和。经治疗的疾病、病状或病症的这种改善为“协同性”效果。“协同量”为产生协同作用的两种化合物、组分或靶向剂的组合的量。

测定一或两种组分之间的协同相互作用，该作用的最佳范围及用于该作用的每一组分的绝对剂量范围可通过按不同剂量范围和/或剂量比率向需要治疗的患者施用组分来明确地测量。然而，活体外模型或活体内模型中的协同作用观察可预测如本文所描述的在人体及其他物种内以及活体外模型或活体内模型存在的作用，以测量协同作用。此类研究结果也可用于诸如通过应用药物动力学和/或药效学方法来预测人体及其他物种内需要的有效剂量及血浆浓度比率范围以及绝对剂量及血浆浓度。

如本文所用，“药学上可接受的载体”是指不会对生物体造成显著的刺激且不消除所施用化合物的生物活性及特性的载体或稀释剂。

药学上可接受的载体可包含任何常规的药物载体或赋形剂。载体和/或赋形剂的选择在很大程度上将视以下因素而定，诸如特定施用模式、载体或赋形剂对溶解性及稳定性的作用及剂型性质。

适合的药物载体包括惰性稀释剂或填充剂、水及各种有机溶剂(诸如水合物及溶剂化物)。视需要，药物组合物可含有额外成分，诸如调味剂、粘合剂、赋形剂等。因此，对于口服，含有各种赋形剂(诸如柠檬酸)的片剂可与各种崩解剂(诸如淀粉、褐藻酸及某些复合硅酸盐)以及粘合剂(诸如蔗糖、明胶及阿拉伯胶)一起使用。赋形剂的实例非限制性地包括碳酸钙、磷酸钙、各种糖及各种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油及聚乙二醇。此外，润滑剂(诸如硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠及滑石)常适用于压片的目的。类似类型的固体组合物也可以软及硬填充的明胶胶囊形式使用。因此，材料的非限制性实例包括乳糖或牛奶糖及高分子量聚乙二醇。当需要将水性悬浮液或酏剂用于口服时，其中活性化合物可与各种甜味剂或调味剂、着色物或染料、及(若需要)乳化剂或悬浮剂、以及与稀释剂(诸如水、乙醇、丙二醇、甘油或其组合)一起组合。

式(I)或(II)化合物的施用可由使得能够将化合物递送至作用位点的任何方法来实现。这些方法包括口服途径、十二指肠内途径、肠胃外注射(包括静脉内、皮下、肌肉内、血管内或输注)、局部及直肠施用。

药物组合物可例如呈适用于口服的形式(如片剂、胶囊、丸剂、粉末、缓释制剂、溶液悬浮液)，适合于肠胃外注射的形式(如无菌溶液、悬浮液或乳液)；适合于局部施用的形式(如软膏或乳膏)，或适合于直肠施用的形式(如栓剂)。

例示性的肠胃外施用形式包括活性化合物在无菌水溶液(例如丙二醇或葡萄糖水溶液)中的溶液或悬浮液。必要时，此类剂型可被适当地缓冲。

药物组合物可呈适合于精确剂量的单次施用的单位剂型。

适用于递送式(I)或(II)化合物的药物组合物及其制备方法对本领域技术人员而言是显而易见的。此类组合物及其制备方法可见于例如Gennaro,同前文献中。

本发明的化合物可口服。口服可包括吞咽，以使得化合物进入胃肠道，或可使用颊内或舌下施用，由此使得化合物直接自口腔进入血流中。

适用于口服的制剂包括固体制剂，诸如片剂、含有颗粒、液体、粉末的胶囊、口含片(包括液体填充口含片)、咀嚼片、多颗粒及纳米颗粒、凝胶、固溶体、脂质体、膜(包括粘膜粘合剂)、珠剂、喷雾剂及液体制剂。

液体制剂包括悬浮液、溶液、糖浆及酏剂。这种制剂可作为填充剂用于软胶囊或硬胶囊中，且通常包括例如水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纤维素或合适的油的载体，及一种或多种乳化剂和/或悬浮剂。液体制剂也可通过将固体(例如来自药囊的固体)重构来制备。

本发明的化合物也可用于快速溶解、快速崩解的剂型中，诸如以下文献中所描述的这些剂型：Liang,Alfred C.及Li-lan H.Chen.“Fast-dissolving intraoral drugdelivery systems”.ExpertOpinion in Therapeutic Patents.第11卷,第6期(2001):第981-986页，其公开内容以全文引用的方式并入本文中。

对于片剂剂型而言，视剂量而定，药物可占剂型的1wt％至80wt％，更通常占剂型的5wt％至60wt％。除药物的外，片剂通常含有崩解剂。崩解剂的实施例包括羟基乙酸淀粉钠、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、交联羧甲纤维素钠、交联聚维酮(crospovidone)、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、微晶纤维素、经低级烷基取代的羟丙基纤维素、淀粉、预胶凝化淀粉及褐藻酸钠。一般而言，崩解剂将占剂型的1wt％至25wt％，优选5wt％至20wt％。

粘合剂一般用于向片剂制剂赋予内聚性。适合的粘合剂包括微晶纤维素、明胶、糖、聚乙二醇、天然及合成胶、聚乙烯吡咯烷酮、预胶凝化淀粉、羟丙基纤维素及羟丙基甲基纤维素。片剂也可含有稀释剂，诸如乳糖(单水合物、喷雾干燥的单水合物、无水物等)、甘露糖醇、木糖醇、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、微晶纤维素、淀粉及二水合磷酸氢钙。

片剂也可任选包括表面活性剂，诸如十二烷基硫酸钠及聚山梨醇酯80；及滑动剂，诸如二氧化硅及滑石。当存在时，表面活性剂通常呈片剂的0.2wt％至5wt％的量，且滑动剂通常呈片剂的0.2wt％至1wt％的量。

片剂一般也含有润滑剂，诸如硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、硬脂酰反丁烯二酸钠、及硬脂酸镁与十二烷基硫酸钠的混合物。润滑剂一般以片剂的0.25wt％至10wt％，优选0.5wt％至3wt％的量存在。

其他常规成分包括抗氧化剂、着色剂、调味剂、防腐剂及遮味剂。

例示性的片剂含有至多约80wt％药物、约10wt％至约90wt％粘合剂、约0wt％至约85wt％稀释剂、约2wt％至约10wt％崩解剂及约0.25wt％至约10wt％润滑剂。

片剂掺合物可直接或通过滚筒压缩以形成片剂。片剂掺合物或掺合物的一部分可在压片之前交替地进行湿式、干式或熔融粒化、熔融聚结或挤出。最终制剂可包括一个或多个层，且可被涂覆、未被涂覆或经囊封。片剂的配制详细论述于Ansel,同前文献中。

用于口服的固体制剂可配制为立即释放和/或调节释放。调节释放制剂包括延迟、持续、脉冲、受控、靶向及程序化释放。

适合的调节释放制剂描述于美国专利第6,106,864号中。其他适合的释放技术(诸如高能分散液及渗透及包衣颗粒)的细节可见于Verma,Rajan K.及Sanjay Garg.“CurrentStatus of Drug Delivery Technologies and Future Directions”.Pharmaceutical Technology On-Line.25(2)(2001):第1-14页中。用以达成受控释放的香口胶的使用描述于WO 00/35298中。这些参考文献的公开内容以全文引用的方式并入本文中。

式(I)或(II)化合物也可直接施用至血流、肌肉或内部器官中。适合于肠胃外施用的方式包括静脉内、动脉内、腹膜内、鞘内、心室内、尿道内、胸骨内、颅内、肌肉内及皮下。适用于肠胃外施用的装置包括针(包括微针)注射器、无针注射器及输注技术。

肠胃外制剂通常为水溶液，其可含有赋形剂，诸如盐、碳水化合物及缓冲剂(优选pH为3至9)，但在一些应用中，肠胃外制剂可更适合配制为无菌非水性溶液或待与适合媒介(诸如无菌无热原质水)结合使用的干燥形式。

在无菌条件下例如通过冻干来制备肠胃外制剂可使用本领域技术人员熟知的标准药物技术来容易地实现。

用于制备肠胃外溶液的式(I)或(II)化合物的溶解度可使用诸如并入溶解度增强剂的适当配制技术来增加。

用于肠胃外施用的制剂可配制为立即释放和/或调节释放。调节释放制剂包括延迟、持续、脉冲、受控、靶向及程序化释放。因此，本发明化合物可配制为固体、半固体或触变液体以按植入式储槽形式施用，从而提供活性化合物的调节释放。此类制剂的实例包括涂覆药物的血管内支架及PGLA微球体。

本发明化合物也可局部施用至皮肤或粘膜，即经真皮或经皮。用于此目的的典型制剂包括凝胶、水凝胶、洗剂、溶液、乳膏、软膏、敷粉、敷料、泡沫剂、薄膜、皮肤贴剂、粉片、植入物、海绵体、纤维、绷带及微乳液。也可使用脂质体。典型载体包括醇、水、矿物油、液体石蜡脂、白石蜡脂、甘油、聚乙二醇及丙二醇。可并入渗透增强剂；参见例如Finnin,BarrieC.及Timothy M.Morgan.“Transdermal penetration enhancers:Applications,limitations,and potential”.J Pharm Sci.88(10)(1999):第955-958页，其公开内容以全文引用的方式并入本文中。局部施用的其他方式包括通过电穿孔、离子导入疗法、超声波药物透入疗法、超声波电渗法及微针或无针(例如Powderject^TM、Bioject^TM等)注射来递送。

用于局部施用的制剂可配制为立即释放和/或调节释放。调节释放制剂包括延迟、持续、脉冲、受控、靶向及程序化释放。

式(I)或(II)化合物也可经鼻内或通过吸入施用，通常以干粉形式(单独地，呈混合物形式，例如呈与乳糖的干掺合物形式；或呈混合组分颗粒形式，例如与磷脂(诸如磷脂酰胆碱)混合)由干粉吸入器进行施用；或在使用或不使用适合的推进剂(诸如1,1,1,2-四氟乙烷或1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷)的情况下以气溶胶喷雾形式由加压容器、泵、喷雾器、雾化器(优选使用电流体动力学产生细雾的雾化器)或气雾器进行施用。对于鼻内用途，散剂可包括生物粘着剂，例如壳聚糖或环糊精。

加压容器、泵、喷雾器、雾化器或气雾器含有式(I)或(II)化合物的溶液或悬浮液，该溶液或悬浮液包含例如乙醇、乙醇水溶液或适用于分散、溶解活性物质或延长活性物质的释放的替代剂、作为溶剂的推进剂及任选存在的表面活性剂(诸如脱水山梨糖醇、三油酸酯、油酸或低聚乳酸)。

在于干粉或悬浮液制剂中使用之前，药品经微粉化至适合于通过吸入来递送的尺寸(通常小于5微米)。这可通过任何适当的粉碎方法达成，诸如螺旋喷射研磨、流化床喷射研磨、形成纳米粒子的超临界流体加工、高压均质化或喷雾干燥。

用于吸入器或吹入器中的胶囊(由例如明胶或HPMC制得)、泡壳及药筒可经配制而含有式(I)或(II)化合物、适合的粉末基质(诸如乳糖或淀粉)及效能调节剂(诸如l-亮氨酸、甘露糖醇或硬脂酸镁)的粉末混合物。乳糖可为无水的或呈单水合乳糖形式，优选为后者。其他适合的赋形剂包括聚葡萄糖、葡萄糖、麦芽糖、山梨糖醇、木糖醇、果糖、蔗糖及海藻糖。

适用于使用电流体动力学来产生细雾的雾化器的溶液制剂可含有每次致动1μg至20mg的式(I)或(II)化合物，且致动体积可在1μL至100μL的范围内变化。典型制剂包括式(I)或(II)化合物、丙二醇、无菌水、乙醇及氯化钠。可代替丙二醇使用的替代性溶剂包括甘油及聚乙二醇。

可将适合的调味剂，诸如薄荷醇及左薄荷脑；或甜味剂，诸如糖精或糖精钠，添加至欲用于吸入/鼻内施用的那些制剂中。

用于吸入/鼻内施用的制剂可使用例如聚(D,L-乳酸-共-乙醇酸)(PGLA)配制为立即和/或调节释放。调节释放制剂包括延迟、持续、脉冲、受控、靶向及程序化释放。

在干粉吸入器及气雾剂的情况下，通过递送定量的阀门来确定剂量单位。根据本发明的单元通常经配置以施用含有所需量的式(I)或(II)化合物的计量剂量或“每喷一次剂量(puff)”。总日剂量可以单次剂量，或更通常在一整天中以分次剂量施用。

式(I)或(II)化合物可例如以栓剂、子宫托或灌肠形式经直肠或经阴道施用。可可脂为传统栓剂基质，但适当时可使用各种替代物。

用于经直肠/经阴道施用的制剂可配制为立即释放和/或调节释放。调节释放制剂包括延迟、持续、脉冲、受控、靶向及程序化释放。

式(I)或(II)化合物也可直接向眼睛或耳朵施用，通常呈在等张、pH值经调整的无菌生理盐水中的微粉化悬浮液或溶液的滴剂形式。适合于眼部及耳部施用的其他制剂包括软膏、可生物降解(例如可吸收凝胶海绵体、胶原蛋白)及不可生物降解(例如硅酮)植入物、薄片、镜片及颗粒或囊泡系统，诸如非离子表面活性剂囊泡(niosome)或脂质体。诸如交联聚丙烯酸、聚乙烯醇、透明质酸、纤维素聚合物(例如羟丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素或甲基纤维素)或杂多醣聚合物(例如结冷胶)的聚合物可与诸如苯扎氯铵的防腐剂一起并入。这样的制剂也可通过离子电渗疗法递送。

用于经眼/经耳施用的制剂可配制为立即和/或调节释放。调节释放制剂包括延迟、持续、脉冲、受控、靶向或程序化释放。

式(I)或(II)化合物可与可溶性大分子实体(诸如环糊精及其适合的衍生物或含聚乙二醇的聚合物)组合，以便改良在前述施用模式中的任一者中使用的溶解度、溶解速率、味觉遮蔽、生物可用度和/或稳定性。

例如，发现药物-环糊精复合物一般适用于大部分剂型及施用途径。可使用包合复合物及非包合复合物两者。作为与药物直接复合的替代方案，环糊精可用作辅助添加剂，即用作载体、稀释剂或增溶剂。α-环糊精、β-环糊精及γ-环糊精最常用于这些目的，其实施例可见于PCT公开号第WO 91/11172、WO 94/02518及WO 98/55148号中，其公开内容以全文引用的方式并入本文中。

可调整给药方案以提供最佳所需反应。例如，可施用单一大丸剂，可随时间施用若干分次剂量，或可如治疗情形的紧急程度所指示而按比例减少或增加剂量。就容易施用及剂量均匀而言，肠胃外组合物配制成单位剂型特别有利。如本文所用，“单位剂型”是指适合作为用于待治疗的哺乳动物受试者的单位剂量的物理离散单位；各单位含有与所需医药载体相关联的经计算以产生所要治疗作用的预定量的活性化合物。本发明的单位剂型的规格是由下列情况指定且直接取决于下列情况：(a)治疗剂的独特特征及待实现的特定治疗或预防作用，及(b)混合此类用于治疗个体敏感性的活性化合物的技术中的固有的局限性。

因此，本领域技术人员应了解，基于本文提供的公开内容，根据治疗技术中熟知的方法调整剂量及给药方案。即，可容易确定最大可耐受剂量，且也可确定向患者提供可检测治疗益处的有效量，也可确定施用各药剂的暂时需要以向患者提供可检测的治疗益处。因此，尽管本文中例示某些剂量及投药方案，但这些实施例决不限制在实践本发明时可向患者提供的剂量及投药方案。

应注意，剂量值可随待减轻的病状的类型及严重程度而变化，且可包括单次或多次剂量。此外应了解，对任何特定受试者而言，特定剂量方案应根据个体需要及施用组合物或监督组合物施用的人的专业判断而随时间调整，且本文所阐述的剂量范围仅为例示性的，且不意欲限制所主张的组合物的范畴或实践。例如，可基于药物动力学或药效学参数来调整剂量，该参数可包括临床效应，诸如毒性效应和/或实验值。因此，本发明涵盖如本领域技术人员所确定的患者内剂量递增。确定用于施用化学治疗剂的适当剂量及方案在相关技术中熟知，且一旦提供本文中所公开的教示，则本领域技术人员应理解该确定涵盖于该教示中。

所施用的式(I)或(II)化合物的量将视所治疗的受试者、病症或病状的严重程度、给药的频率、化合物的配置及处方医师的判断而定。然而，有效剂量在每天约0.001至约100mg/kg体重、优选每天约1至约35mg/kg范围内，呈单次或分次剂量。对于70kg的人而言，这将相当于每天约0.05至约7g、优选每天约0.1至约2.5g。在一些情况下，低于前述范围的下限的剂量浓度可能已完全足够，而在其他情况下，在不产生任何有害副作用的情况下可采用再更大剂量，其前提为首先将此类较大剂量分为用于在一整天中施用的若干较小剂量。

治疗方法及用途

本发明进一步提供治疗方法及用途，其包含单独或与其他治疗剂或姑息性药剂组合施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。

在一个方面中，本发明提供一种用于治疗有需要的受试者的异常细胞生长的方法，其包含向该受试者施用治疗有效量的式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种用于治疗异常细胞生长的方法，其包含向有需要的患者施用治疗有效量的式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种用于治疗或改善有需要的患者的异常细胞生长严重程度的方法，其包含向该患者施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。在另一实施方案中，本发明提供一种用于治疗有需要的患者的异常细胞生长严重程度的方法，其包含向该患者施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。在另一其他实施方案中，本发明提供一种用于改善有需要的患者的异常细胞生长严重程度的方法，其包含向该患者施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。

在一个优选的方面，本发明提供一种用于治疗受试者的由HER2突变介导的病症的方法，其包含以有效治疗该病症、尤其癌症的量向该受试者施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。

在一个优选的方面，本发明提供一种用于治疗受试者的由HER2扩增性或HER2阳性癌症的脑转移介导的病症的方法，其包含以有效治疗该病症、尤其癌症的量向该受试者施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。在更优选的方面，本发明提供一种用于治疗受试者的由HER2突变扩增性或HER2突变阳性癌症的脑转移介导的病症的方法，其包含以有效治疗该病症、尤其癌症的量向该受试者施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。在优选的实施方案中，治疗方法是针对由HER2扩增性癌症的脑转移介导的病症。在优选的实施方案中，治疗方法是针对由HER2阳性癌症的脑转移介导的病症。在优选的实施方案中，治疗方法是针对由HER2突变扩增性癌症的脑转移介导的病症。在优选的实施方案中，治疗方法是针对由HER2突变阳性癌症的脑转移介导的病症。

在本发明的一些方法中，该方法用于治疗脑转移。这些脑转移在癌细胞自其原始部位扩散至脑中时发生。在本发明的优选的实施方案中，脑转移来自HER2阳性或HER2扩增性癌症。在本发明的另一优选的实施方案中，脑转移来自HER2突变阳性或HER2突变扩增性癌症。

在另一优选的方面，本发明提供一种用于治疗由HER2突变调节的疾病或病症的方法，其包含向需要此类治疗的哺乳动物施用一定量的式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。在另一优选的方面，本发明提供一种用于治疗或预防由HER2突变调节的疾病或病症的方法，其包含向需要此类治疗的哺乳动物施用有效量的式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一优选的方面，本发明提供一种用于治疗或预防由HER2扩增性或HER2阳性癌症的脑转移调节的疾病或病症的方法，其包含向需要此类治疗的哺乳动物施用一定量的式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。在更优选的方面，本发明提供一种用于治疗或预防由HER2突变扩增性或HER2突变阳性癌症的脑转移调节的疾病或病症的方法，其包含向需要此类治疗的哺乳动物施用一定量的式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。在另一优选的方面，本发明提供一种用于治疗或预防由HER2扩增性或HER2阳性癌症的脑转移调节的疾病或病症的方法，其包含向需要此类治疗的哺乳动物施用有效量的式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。在更优选的方面，本发明提供一种用于治疗或预防由HER2突变扩增性或HER2突变阳性癌症的脑转移调节的疾病或病症的方法，其包含向需要此类治疗的哺乳动物施用有效量的式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。在某些实施方案中，治疗或预防方法是针对由HER2扩增性癌症调节的疾病或病症。在优选的实施方案中，治疗或预防方法是针对由HER2阳性癌症调节的疾病或病症。在另一优选的实施方案中，治疗或预防方法是针对由HER2突变扩增性癌症调节的疾病或病症。在另一优选的实施方案中，治疗或预防方法是针对由HER2突变阳性癌症调节的疾病或病症。

在另一方面中，本发明提供一种抑制受试者的癌细胞增殖的方法，其包含以有效抑制细胞增殖的量向该受试者施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种抑制受试者的癌细胞侵袭性的方法，其包含以有效抑制细胞侵袭性的量向该受试者施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种诱导受试者的癌细胞的细胞凋亡的方法，其包含以有效诱导细胞凋亡的量向该受试者施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种抑制受试者的癌细胞转移的方法，其包含以有效抑制细胞转移的量向该受试者施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。

在另一方面中，本发明提供一种抑制受试者的血管生成的方法，其包含以有效抑制血管生成的量向该受试者施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐。

在一个方面中，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗。在另一方面中，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗异常细胞生长。在另一方面中，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗受试者的异常细胞生长。

在另一方面中，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗需要此类治疗的受试者。在另一实施方案中，治疗是针对异常细胞生长。

在另一方面中，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用作药剂。在另一方面中，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用作用于治疗受试者的异常细胞生长的药剂。

在另一方面中，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于疗法中。在另一方面中，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于用以治疗异常细胞生长的疗法中。在另一方面中，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于用以治疗受试者的异常细胞生长的疗法中。

在一个方面中，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗适用HER2突变抑制剂的疾病或病状。在另一方面中，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗患有适用HER2突变抑制剂的疾病或病状的受试者。

在一个优选的方面，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗适用HER2的脑渗透性抑制剂的疾病或病状。在更优选的方面，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗适用HER2突变的脑渗透性抑制剂的疾病或病状。在另一优选的方面，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗患有适用HER2的脑渗透性抑制剂的疾病或病状的受试者。在更优选的方面，本发明提供一种式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗患有适用HER2突变的脑渗透性抑制剂的疾病或病状的受试者。

在另一方面中，本发明提供式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于治疗需要此类治疗的受试者。在另一方面中，本发明提供式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于治疗患有异常细胞生长的受试者。

在又另一方面中，本发明提供式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造供治疗所用的药剂。在另一方面中，本发明提供式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造供治疗受试者所用的药剂。在另一方面中，本发明提供式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造供治疗受试者的异常细胞生长所用的药剂。

在另一优选的方面，本发明提供式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造供治疗适用HER2突变抑制剂的疾病或病状所用的药剂。在另一优选的方面，本发明提供式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造供治疗受试者的适用HER2突变抑制剂的疾病或病状所用的药剂。

在另一优选的方面，本发明提供式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造供治疗适用HER2的脑渗透性抑制剂的疾病或病状所用的药剂。在更优选的方面，本发明提供式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造供治疗适用HER2突变的脑渗透性抑制剂的疾病或病状所用的药剂。在另一优选的方面，本发明提供式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造供治疗受试者的适用HER2的脑渗透性抑制剂的疾病或病状所用的药剂。在更优选的方面，本发明提供式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制造供治疗受试者的适用HER2突变的脑渗透性抑制剂的疾病或病状所用的药剂。

除非另有说明，否则如本文所用，“异常细胞生长”是指不依赖于正常调节机制的细胞生长(例如接触抑制丧失)。异常细胞生长可为良性(非癌性)或恶性(癌性)的。

异常细胞生长包括以下的异常生长：(1)显示HER2突变表达增加的肿瘤细胞(肿瘤)；(2)由异常HER2突变活化而增殖的肿瘤；(3)由HER2突变的扩增或过度表达表征的肿瘤；及(4)对HER2疗法或HER2抑制具有耐受性的肿瘤。

在本文所提供的方法的常见优选的实施方案中，异常细胞生长为癌症。如本文所用，“癌症”是指哺乳动物中通常以不受调控的细胞生长为特征的生理病状。癌症包括以形成其的细胞的类型命名的实体肿瘤，血液、骨髓或淋巴系统的癌症。实体肿瘤的实例包括肉瘤及癌瘤。血液癌症包括但不限于白血病、淋巴瘤及骨髓瘤。癌症也包括源自身体特定部位的原发性癌症、自开始的位置扩散至身体其他部分的转移性癌症、初始原发性癌症在缓解后的复发及作为个人的新原发性癌症的第二原发性癌症，该个人的先前癌症病史与后一癌症的类型不同。

在另一实施方案中，所提供的方法产生以下效果中的一种或多种：(1)抑制癌细胞增殖；(2)抑制癌细胞侵袭性；(3)诱导癌细胞的细胞凋亡；(4)抑制癌细胞转移；或(5)抑制血管生成。

如本文所用，“改善”是指与未施用化合物相比，在用本文所描述的化合物治疗之后一种或多种症状减轻或好转。改善也包括缩短或减少症状的持续时间。

如本文所用，药物、化合物或药物组合物的“有效剂量”或“有效量”为足以影响疾病、其并发症及在疾病发展期间出现的中间病理表型的任何一种或多种有益或所需症状(包括生物化学、组织学和/或行为症状)的量。对于治疗用途，“治疗有效量”是指将在一定程度上缓解所治疗的病症的症状中的一种或多种的化合物施用量。参考癌症治疗，治疗有效量是指具有以下效果的量：(1)减小肿瘤的大小；(2)抑制(即，在一定程度上减缓，优选停止)肿瘤转移；(3)在一定程度上抑制(即，在一定程度上减缓，优选停止)肿瘤生长或肿瘤侵袭性；(4)在一定程度上减轻(或优选地，消除)与癌症相关的一种或多种病征或症状；(5)减小治疗疾病所需的其他药剂的剂量；和/或(6)增强另一药剂的效果；和/或(7)推迟患者的疾病的进展。

有效剂量可以一或多次施用形式施用。出于本发明的目的，药物、化合物或药物组合物的有效剂量为足以直接或间接地实现预防性或治疗性治疗的量。如在临床情形下所理解，药物、化合物或药物组合物的有效剂量可与另一药物、化合物或药物组合物结合而实现，也可以不与之结合而实现。

“肿瘤”在应用于经诊断患有或疑似患有癌症的受试者时是指任何尺寸的恶性或潜在恶性赘瘤或组织块状物，包括原发性肿瘤及继发性赘瘤。实体肿瘤为通常不含囊肿或液体区的组织的异常生长或块状物。实体肿瘤的实例为肉瘤、癌瘤及淋巴瘤。白血病(血液癌症)一般不形成实体肿瘤。

如本文所用，“肿瘤负荷”或“肿瘤负载”是指分布在整个身体中的肿瘤物质的总量。肿瘤负荷是指整个身体(包括淋巴结及骨髓)中癌细胞的总数目或肿瘤的总大小。肿瘤负荷可通过此项技术中已知的多种方法测定，诸如(例如)使用测径规，或在身体内时使用成像技术，例如超声波、骨骼扫描、计算机断层扫描(CT)或磁共振成像(MRI)扫描。

如本文所用，“肿瘤大小”是指可作为肿瘤的长度及宽度测量的肿瘤的总大小。肿瘤大小可通过此项技术中已知的多种方法测定，诸如(例如)通过在自受试者移出之后例如使用测径规，或当在身体内时使用成像技术，例如骨骼扫描、超音波、CR或MRI扫描来测量肿瘤的尺寸。

如本文所用，“哺乳动物”是指患有或有风险患上本文所描述的疾病的温血动物，且包括(但不限于)天竺鼠、狗、猫、大鼠、小鼠、仓鼠及灵长类动物，包括人。

如本文所用，“受试者”是指人类或动物受试者。在另一实施方案中，受试者为哺乳动物。在优选的实施方案中，受试者为人。

如本文所用，“治疗(treat/treating)”是指向患有待治疗的病状的受试者施用式(I)或(II)化合物以实现至少一种积极治疗效果。例如，治疗癌症是指向患有癌症或经诊断患有癌症的受试者施用式(I)或(II)化合物以实现至少一种积极治疗效果，诸如减少癌细胞数目、减小肿瘤大小、减缓癌细胞浸润至周边器官中的速率、或减缓肿瘤转移或肿瘤生长的速率，逆转、缓解或抑制此类术语所应用的病症或病状或此类病症或病状的一种或多种症状的进展。除非另有说明，否则如本文所用，术语”治疗(treatment)”是指如紧接上文所定义的“治疗(treating)”的治疗行为。术语”治疗”也包括对受试者的辅助治疗及新辅助治疗。

出于本发明的目的，有益或所需临床结果包括但不限于以下中的一或多者：减少(或破坏)赘生性或癌性细胞的增殖；抑制转移性或赘生性细胞；使肿瘤大小缩小或减小；缓解癌症；减少由癌症引起的症状；提高罹患癌症的这些患者的生活质量；减少治疗癌症所需的其他药剂的剂量；推迟癌症的进展；治愈癌症；克服癌症的一种或多种抗性机制；和/或延长癌症患者的存活期。对癌症的积极治疗效果可以多种方式测量(参见例如Weber,Wolfgang A.“Assessing Tumor Response to Therapy”.J.Nucl.Med.50增刊1(2009):1S-10S)。

在另一实施方案中，通过式(I)或(II)化合物实现的治疗参考以下中的任一者定义：部分反应(PR)、完全反应(CR)、总体反应(OR)、无进展存活期(PFS)、无疾病存活期(DFS)及总存活期(OS)。PFS(也称为“肿瘤进展时间”)表示在癌症不生长的治疗期间及之后的时间长度，且包括患者已经历CR或PR的时间量以及患者已经历稳定疾病(SD)的时间量。DFS是指在治疗期间及之后患者保持无疾病的时间长度。OS是指与未处理或未治疗受试者或患者相比的预期寿命延长。在另一实施方案中，对本发明的组合的反应为使用实体肿瘤中的反应评估准则(RECIST)1.1反应准则评定的PR、CR、PFS、DFS、OR或OS中的任一者。

有效治疗癌症患者的用于式(I)或(II)化合物的治疗方案可根据诸如以下因素而变化：患者的疾病病况、年龄及体重，及疗法引发受试者中的抗癌反应的能力。尽管本发明的方面的任一者的实施方案可能未有效地在每一受试者中达成积极治疗效果，但其应在通过此项技术中已知的任何统计检验所测定的统计显著数目的受试者中实现积极治疗效果，该检验诸如司图顿t检验(Student's t-test)、chi2检验、曼-惠特尼U检验(U-testaccording to Mann and Whitney)、Kruskal-Wallis检验(H检验)、Jonckheere-Terpstrat检验及Wilcoxon检验。

术语”治疗方案”、“给药规程”及“给药方案”可互换使用以指代各式(I)或(II)化合物单独或与另一治疗剂组合的剂量及施用时序。

在本文所描述的化合物、组合物、方法及用途的优选的实施方案中，式(I)或(II)化合物相对于EGFR抑制选择性抑制HER2突变。在优选的实施方案中，本发明化合物相对于EGFR对HER2-YVMA(SEQ ID NO:2)具有选择性。

在本文所提供的方法的常见实施方案中，异常细胞生长为癌症。在另一实施方案中，癌症是选自乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、子宫癌、前列腺癌、肺癌(包括NSCLC、SCLC、鳞状细胞癌或腺癌)、食道癌、头颈癌、大肠直肠癌、肾癌(包括RCC)、肝癌(包括HCC)、胰脏癌、胃癌(stomach cancer)(即胃癌(gastric cancer))或甲状腺癌。在本文中所提供的方法的其他实施方案中，癌症为乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、子宫癌、前列腺癌、肺癌、食道癌、肝癌、胰脏癌或胃癌。

在优选的实施方案中，癌症选自乳腺癌、肺癌、大肠癌、卵巢癌及胃癌。在优选的实施方案中，癌症选自乳腺癌、肺癌及大肠癌。在优选的实施方案中，癌症为乳腺癌。在优选的实施方案中，癌症为肺癌。在优选的实施方案中，癌症为大肠癌。在优选的实施方案中，癌症为卵巢癌。在优选的实施方案中，癌症为胃癌。

在另一实施方案中，癌症为乳腺癌，包括例如ER阳性/HR阳性、HER2阴性乳腺癌；ER阳性/HR阳性、HER2阳性乳腺癌；三阴性乳腺癌(TNBC)；或发炎性乳腺癌。在优选的实施方案中，乳腺癌为耐内分泌乳腺癌、耐曲妥珠单抗乳腺癌或对HER2抑制展现先天或后天抗性的乳腺癌。在另一实施方案中，乳腺癌为晚期或转移性乳腺癌。在前述各者的优选的实施方案中，乳腺癌的特征为HER2突变或HER2-YVMA(SEQ ID NO:2)的扩增或过度表达。

在本文所提供的方法的另一实施方案中，癌症为乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌、子宫癌、前列腺癌、肺癌(包括SCLC或NSCLC)、食道癌、肝癌、胰脏癌或胃癌。

在优选的实施方案中，癌症为HER2阳性的。在另一优选的实施方案中，癌症为HER2突变阳性的。

在优选的实施方案中，癌症为HER2扩增性的。在另一优选的实施方案中，癌症为HER2突变扩增性的。

在本文所提供的方法的优选的实施方案中，异常细胞生长是特征为HER2突变的扩增或过度表达的癌症。在本文所提供的方法的另一优选的实施方案中，受试者经鉴别为患有特征为HER2突变的扩增或过度表达的癌症。

在本文所提供的方法的优选的实施方案中，异常细胞生长是特征为脑转移的癌症。在本文所提供的方法的另一优选的实施方案中，受试者经鉴别为患有特征为脑转移的癌症。

在本文所提供的方法的优选的实施方案中，异常细胞生长是特征为具有HER2突变的扩增或过度表达的脑转移的癌症。在本文所提供的方法的另一优选的实施方案中，受试者经鉴别为患有特征为具有HER2突变的扩增或过度表达的脑转移的癌症。

在另一实施方案中，癌症选自由以下组成的组：乳腺癌、肺癌、大肠癌、卵巢癌及胃癌。在优选的此类实施方案中，癌症是特征为HER2突变的扩增或过度表达的乳腺癌、肺癌、大肠癌、卵巢癌或胃癌。在另一优选的实施方案中，癌症为(a)乳腺癌或卵巢癌；(b)特征为HER2突变的扩增或过度表达；或(c)(a)及(b)两者。

在优选的实施方案中，癌症是由特征为HER2的扩增或过度表达的其他癌症引起的脑转移。在更优选的实施方案中，癌症是由特征为HER2突变的扩增或过度表达的其他癌症引起的脑转移。

在优选的实施方案中，癌症是由特征为HER2的扩增或过度表达的其他癌症引起的特征为HER2的扩增或过度表达的脑转移。在更优选的实施方案中，癌症为由特征为HER2突变的扩增或过度表达的其他癌症引起的特征为HER2突变的扩增或过度表达的脑转移。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐作为一线疗法施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物作为二线(或后线)疗法施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐在用曲妥珠单抗治疗后作为二线(或后线)疗法施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐在用曲妥珠单抗、帕妥珠单抗及紫杉醇(paclitaxel)或多西他赛(docetaxel)治疗后作为二线(或后线)疗法施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐在用单克隆抗体(诸如曲妥珠单抗、帕妥珠单抗或玛格妥昔单抗(margetuximab))、抗体-药物结合物(诸如曲妥珠单抗-美坦新偶联物(ado-trastuzumab emtansine)(“t-dm1”)、沙西妥珠单抗(sacituzumab)或戈维替康(govitecan)-hziy)、HER2抑制剂(诸如来那替尼、拉帕替尼或图卡替尼)、CDK 4/6抑制剂(诸如帕布昔利布(palbociclib)、瑞博西尼(ribociclib)或阿贝西利(abemaciclib))、mTOR抑制剂(诸如依维莫司(everolimus))、PI3K抑制剂(诸如阿培利司(alpelisib))或PARP抑制剂(诸如奥拉帕尼(olaparib)或他拉唑帕尼(talazoparib))治疗后作为二线(或后线)疗法施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐在用单克隆抗体(诸如曲妥珠单抗、帕妥珠单抗或玛格妥昔单抗)治疗后作为二线(或后线)疗法施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐在用抗体-药物结合物(诸如t-dm1、沙西妥珠单抗或戈维替康-hziy)治疗后作为二线(或后线)疗法施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐在用HER2抑制剂(诸如来那替尼、拉帕替尼或图卡替尼)治疗后作为二线(或后线)疗法施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐在用CDK 4/6抑制剂(诸如帕布昔利布、瑞博西尼或阿贝西利)治疗后作为二线(或后线)疗法施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐在用mTOR抑制剂(诸如依维莫司)治疗后作为二线(或后线)疗法施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐在用PI3K抑制剂(诸如阿培利司)治疗后作为二线(或后线)疗法施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐在用PARP抑制剂(诸如奥拉帕尼或他拉唑帕尼)治疗后作为二线(或后线)疗法施用。

组合疗法

式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可作为单一药剂施用，或可与其他抗癌治疗剂，尤其适合于特定癌症的标准护理剂组合施用。在另一实施方案中，该方法及用途包含式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其与至少一种其他抗癌治疗剂共同施用。在另一实施方案中，该方法及用途包含式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其与至少一种用以治疗或改善异常细胞生长的其他抗癌治疗剂共同施用。在另一其他实施方案中，该方法及用途包含式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐，其与至少一种用以治疗异常细胞生长的其他抗癌治疗剂共同施用。

如本文所用，“组合疗法”或“共同施用”是指施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐以及至少一种额外医药剂或治疗剂(例如抗癌剂)，其中该式(I)或(II)化合物及该额外医药剂或治疗剂为同一或分开的剂型的一部分，并且经由相同或不同施用途径且按相同或不同日程施用。

如上文所提及，本发明化合物可与一种或多种额外抗癌剂组合使用。式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐在某些肿瘤中的功效可通过与其他经批准的或实验性的癌症疗法组合来增强，该癌症疗法例如辐射、手术、化学治疗剂、靶向疗法、抑制肿瘤中失调的其他信号传导路径的药剂及其他免疫增强剂(诸如PD-1拮抗剂等)。

在一个方面中，本发明提供一种用于治疗有需要的受试者的异常细胞生长的方法，其包含向该受试者施用一定量的式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐与一定量的额外治疗剂(例如抗癌治疗剂)的组合，该量一起有效治疗该异常细胞生长。

当使用组合疗法时，一种或多种额外抗癌剂可与式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐依序或同时施用。在一个实施方案中，额外抗癌剂在施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐之前向哺乳动物(例如人)施用。在另一实施方案中，额外抗癌剂在施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐之后向哺乳动物施用。在另一实施方案中，额外抗癌剂在施用式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐的同时向哺乳动物(例如人)施用。

本发明还是关于一种用于治疗哺乳动物(包括人)的异常细胞生长的药物组合物，其包含一定量的式(I)或(II)化合物(包括其水合物、溶剂化物及多晶型物或药学上可接受的盐)与一种或多种(优选一种、两种或三种)额外抗癌治疗剂的组合。

如本文所用，“额外抗癌治疗剂”是指除式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐以外的用于或可用于治疗癌症的任何一种或多种治疗剂。在另一实施方案中，此类额外抗癌治疗剂包括源自以下类别的化合物：有丝分裂抑制剂、烷基化剂、抗代谢物、抗肿瘤抗生素、抗血管生成剂、拓朴异构酶I及II抑制剂、植物碱、激素剂及拮抗剂、生长因子抑制剂、辐射、信号转导抑制剂(诸如蛋白质酪氨酸激酶和/或丝氨酸/苏氨酸激酶的抑制剂)、细胞周期抑制剂、生物反应调节剂、酶抑制剂、反义寡核苷酸或寡核苷酸衍生物、细胞毒剂、免疫肿瘤学药剂等。在另一实施方案中，额外抗癌治疗剂为标准护理剂。在另一实施方案中，额外抗癌治疗剂在下文论述于此组合疗法部分中，诸如单克隆抗体、抗体-药物结合物、HER2抑制剂、CDK4/6抑制剂、mTOR抑制剂、PI3K抑制剂、PARP抑制剂、化学疗法、抗PD-1单克隆抗体、芳香酶抑制剂、内分泌疗法、化学治疗剂及抗HER2药剂。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与单克隆抗体(诸如曲妥珠单抗、帕妥珠单抗或玛格妥昔单抗)、抗体-药物结合物(诸如t-dm1、沙西妥珠单抗或戈维替康-hziy)、HER2抑制剂(诸如来那替尼、拉帕替尼或图卡替尼)、CDK 4/6抑制剂(诸如帕布昔利布、瑞博西尼或阿贝西利)、mTOR抑制剂(诸如依维莫司)、PI3K抑制剂(诸如阿培利司)、PARP抑制剂(诸如奥拉帕尼或他拉唑帕尼)及其药学上可接受的盐或其组合一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与单克隆抗体(诸如曲妥珠单抗、帕妥珠单抗或玛格妥昔单抗)、抗体-药物结合物(诸如t-dm1、沙西妥珠单抗或戈维替康-hziy)、HER2抑制剂(诸如来那替尼、拉帕替尼或图卡替尼)、CDK4/6抑制剂(诸如帕布昔利布、瑞博西尼或阿贝西利)、mTOR抑制剂(诸如依维莫司)、PI3K抑制剂(诸如阿培利司)或PARP抑制剂(诸如奥拉帕尼或他拉唑帕尼)及其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与单克隆抗体(诸如曲妥珠单抗、帕妥珠单抗或玛格妥昔单抗)、抗体-药物结合物(诸如t-dm1、沙西妥珠单抗或戈维替康-hziy)、HER2抑制剂(诸如来那替尼、拉帕替尼或图卡替尼)、CDK4/6抑制剂(诸如帕布昔利布、瑞博西尼或阿贝西利)、mTOR抑制剂(诸如依维莫司)、PI3K抑制剂(诸如阿培利司)、PARP抑制剂(诸如奥拉帕尼或他拉唑帕尼)及其药学上可接受的盐或其组合一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与标准护理剂组合施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与曲妥珠单抗一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物可与曲妥珠单抗、阿霉素(doxorubicin)、环磷酰胺(cyclophosphamide)及紫杉醇或多西他赛一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与曲妥珠单抗、多西他赛及卡铂(carboplatin)一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与曲妥珠单抗及紫杉醇一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与曲妥珠单抗、顺铂(cisplatin)及卡培他滨(capecitabine)或5-氟尿嘧啶一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与帕妥珠单抗一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与帕妥珠单抗及曲妥珠单抗一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与帕妥珠单抗、曲妥珠单抗及多西他赛一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与帕妥珠单抗、曲妥珠单抗及化学疗法一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与玛格妥昔单抗一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与玛格妥昔单抗及化学疗法一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与玛格妥昔单抗及抗PD-1单克隆抗体一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与玛格妥昔单抗及抗PD-1单克隆抗体一起施用，该抗PD-1单克隆抗体选自由以下组成的组：西米普利单抗(cemiplimab)、纳武利尤单抗(nivolumab)、帕博利珠单抗(pembrolizumab)、阿维单抗(avelumab)、德瓦鲁单抗(durvalumab)及阿替利珠单抗(atezolizumab)。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与t-dm1一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与戈沙妥珠单抗(sacituzumab govitecan-hziy)一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与来那替尼或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与来那替尼及卡培他滨或其药学上可接受的盐一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与拉帕替尼或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与拉帕替尼及卡培他滨或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与拉帕替尼及来曲唑(letrozole)或其药学上可接受的盐一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与图卡替尼或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与图卡替尼、曲妥珠单抗及卡培他滨或其药学上可接受的盐一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与帕布昔利布或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与帕布昔利布及氟维司群(fulvestrant)或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与帕布昔利布及芳香酶抑制剂或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与帕布昔利布及芳香酶抑制剂或其药学上可接受的盐一起施用，该芳香酶抑制剂选自由以下组成的组：氨鲁米特(aminoglutethimide)、睾内酯、阿那曲唑(anastrozole)、来曲唑、依西美坦(exemestane)、伏氯唑(vorozole)、福美司坦(formetsane)、法倔唑(fadrozole)、1,4,6-雄甾三烯-3,17-二酮(“ATD”)及4-雄甾烯-3,6,17-三酮(“6-OXO”)。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与瑞博西尼或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与瑞博西尼及氟维司群或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与瑞博西尼及芳香酶抑制剂或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与瑞博西尼及芳香酶抑制剂或其药学上可接受的盐一起施用，该芳香酶抑制剂选自由以下组成的组：氨鲁米特、睾内酯、阿那曲唑、来曲唑、依西美坦、伏氯唑、福美司坦、法倔唑、ATD及6-OXO。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与阿贝西利或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与阿贝西利及氟维司群或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与阿贝西利及芳香酶抑制剂或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与阿贝西利及芳香酶抑制剂或其药学上可接受的盐一起施用，该芳香酶抑制剂选自由以下组成的组：氨鲁米特、睾内酯、阿那曲唑、来曲唑、依西美坦、伏氯唑、福美司坦、法倔唑、ATD及6-OXO。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与依维莫司一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与依维莫司及依西美坦一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与依维莫司及舒尼替尼(sunitinib)或索拉非尼(sorafenib)或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与依维莫司及舒尼替尼或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与依维莫司及索拉非尼或其药学上可接受的盐一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与阿培利司或其药学上可接受的盐一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与阿培利司及氟维司群或其药学上可接受的盐一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与奥拉帕尼一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与奥拉帕尼及贝伐珠单抗(bevacizumab)一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与他拉唑帕尼或其药学上可接受的盐一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与卢卡帕尼(rucaparib)或其药学上可接受的盐一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与紫杉醇或多西他赛一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与紫杉醇一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与多西他赛一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与多西他赛及卡铂一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与卡铂一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与顺铂及卡培他滨或5-氟尿嘧啶一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与顺铂及卡培他滨一起施用。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与顺铂及5-氟尿嘧啶一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与顺铂一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与5-氟尿嘧啶一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与卡培他滨一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与来曲唑一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与曲妥珠单抗及卡培他滨一起施用。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与化学疗法一起施用。在另一实施方案中，化学疗法选自由以下组成的组：环磷酰胺、甲氨喋呤(methotrexate)、5-氟尿嘧啶、长春瑞滨(vinorelbine)、阿霉素、紫杉醇、多西他赛、博来霉素(bleomycin)、长春碱(vinblastine)、达卡巴嗪(dacarbazine)、氮芥(mustine)、长春新碱(vincristine)、甲基苄肼(procarbazine)、泼尼松龙(prednisolone)、依托泊苷(etoposide)、顺铂、卡铂、表阿霉素(epirubicin)、卡培他滨、醛叶酸及奥沙利铂(oxaliplatin)。在另一实施方案中，化学疗法选自由以下组成的组：环磷酰胺、甲氨喋呤、5-氟尿嘧啶、长春瑞滨及阿霉素。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与以下一起施用：曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、玛格妥昔单抗、t-dm1、戈沙妥珠单抗、来那替尼、拉帕替尼、图卡替尼、帕布昔利布、瑞博西尼、阿贝西利、依维莫司、阿培利司、奥拉帕尼、他拉唑帕尼、化学疗法(诸如环磷酰胺、甲氨喋呤、5-氟尿嘧啶、长春瑞滨、阿霉素、紫杉醇、多西他赛、博来霉素、长春碱、达卡巴嗪、氮芥、长春新碱、甲基苄肼、泼尼松龙、依托泊苷、顺铂、卡铂、表阿霉素、卡培他滨、醛叶酸及奥沙利铂)、抗PD-1单克隆抗体(诸如西米普利单抗、纳武利尤单抗、帕博利珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗及阿替利珠单抗)、芳香酶抑制剂(诸如氨鲁米特、睾内酯、阿那曲唑、来曲唑、依西美坦、伏氯唑、福美司坦、法倔唑、ATD及6-OXO)、氟维司群、舒尼替尼、索拉非尼、贝伐珠单抗及其药学上可接受的盐或其组合。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与以下一起施用：曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、玛格妥昔单抗、t-dm1、戈沙妥珠单抗、来那替尼、拉帕替尼、图卡替尼、帕布昔利布、瑞博西尼、阿贝西利、依维莫司、阿培利司、奥拉帕尼、他拉唑帕尼、环磷酰胺、甲氨喋呤、5-氟尿嘧啶、长春瑞滨、阿霉素、紫杉醇、多西他赛、博来霉素、长春碱、达卡巴嗪、氮芥、长春新碱、甲基苄肼、泼尼松龙、依托泊苷、顺铂、卡铂、表阿霉素、卡培他滨、醛叶酸、奥沙利铂、西米普利单抗、纳武利尤单抗、帕博利珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗、阿替利珠单抗、氨鲁米特、睾内酯、阿那曲唑、来曲唑、依西美坦、伏氯唑、福美司坦、法倔唑、ATD、6-OXO、氟维司群、舒尼替尼、索拉非尼、贝伐珠单抗及其药学上可接受的盐或其组合。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与以下一起施用：曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、玛格妥昔单抗、t-dm1、戈沙妥珠单抗、来那替尼、拉帕替尼、图卡替尼、帕布昔利布、瑞博西尼、阿贝西利、依维莫司、阿培利司、奥拉帕尼、他拉唑帕尼、环磷酰胺、甲氨喋呤、5-氟尿嘧啶、长春瑞滨、阿霉素、紫杉醇、多西他赛、博来霉素、长春碱、达卡巴嗪、氮芥、长春新碱、甲基苄肼、泼尼松龙、依托泊苷、顺铂、卡铂、表阿霉素、卡培他滨、醛叶酸、奥沙利铂、西米普利单抗、纳武利尤单抗、帕博利珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗、阿替利珠单抗、氨鲁米特、睾内酯、阿那曲唑、来曲唑、依西美坦、伏氯唑、福美司坦、法倔唑、ATD、6-OXO、氟维司群、舒尼替尼、索拉非尼及贝伐珠单抗及其药学上可接受的盐。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与以下一起施用：化学疗法(诸如环磷酰胺、甲氨喋呤、5-氟尿嘧啶、长春瑞滨、阿霉素、紫杉醇、多西他赛、博来霉素、长春碱、达卡巴嗪、氮芥、长春新碱、甲基苄肼、泼尼松龙、依托泊苷、顺铂、卡铂、表阿霉素、卡培他滨、醛叶酸及奥沙利铂)、抗PD-1单克隆抗体(诸如西米普利单抗、纳武利尤单抗、帕博利珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗及阿替利珠单抗)、芳香酶抑制剂(诸如氨鲁米特、睾内酯、阿那曲唑、来曲唑、依西美坦、伏氯唑、福美司坦、法倔唑、ATD及6-OXO)、氟维司群、舒尼替尼、索拉非尼、贝伐珠单抗及其药学上可接受的盐或其组合。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与以下一起施用：环磷酰胺、甲氨喋呤、5-氟尿嘧啶、长春瑞滨、阿霉素、紫杉醇、多西他赛、博来霉素、长春碱、达卡巴嗪、氮芥、长春新碱、甲基苄肼、泼尼松龙、依托泊苷、顺铂、卡铂、表阿霉素、卡培他滨、醛叶酸、奥沙利铂、西米普利单抗、纳武利尤单抗、帕博利珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗、阿替利珠单抗、氨鲁米特、睾内酯、阿那曲唑、来曲唑、依西美坦、伏氯唑、福美司坦、法倔唑、ATD、6-OXO、氟维司群、舒尼替尼、索拉非尼、贝伐珠单抗及其药学上可接受的盐或其组合。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与以下一起施用：环磷酰胺、甲氨喋呤、5-氟尿嘧啶、长春瑞滨、阿霉素、紫杉醇、多西他赛、博来霉素、长春碱、达卡巴嗪、氮芥、长春新碱、甲基苄肼、泼尼松龙、依托泊苷、顺铂、卡铂、表阿霉素、卡培他滨、醛叶酸、奥沙利铂、西米普利单抗、纳武利尤单抗、帕博利珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗、阿替利珠单抗、氨鲁米特、睾内酯、阿那曲唑、来曲唑、依西美坦、伏氯唑、福美司坦、法倔唑、ATD、6-OXO、氟维司群、舒尼替尼、索拉非尼及贝伐珠单抗及其药学上可接受的盐。

在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与内分泌疗法组合施用，该内分泌疗法例如诸如来曲唑、氟维司群、他莫昔芬(tamoxifen)、依西美坦或阿那曲唑的药剂。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与化学治疗剂组合施用，该化学治疗剂例如多西他赛、紫杉醇、顺铂、卡铂、卡培他滨、吉西他滨(gemcitabine)或长春瑞滨。在另一实施方案中，式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐可与抗HER2药剂组合施用，该抗HER2药剂例如曲妥珠单抗和/或帕妥珠单抗。

在另一实施方案中，额外抗癌治疗剂为抗血管生成剂，包括例如VEGF抑制剂、VEGFR抑制剂、TIE-2抑制剂、PDGFR抑制剂、血管生成素抑制剂、PKCβ抑制剂、COX-2(环加氧酶II)抑制剂、整合素(α-v/β-3)、MMP-2(基质金属蛋白酶2)抑制剂及MMP-9(基质金属蛋白酶9)抑制剂。优选抗血管生成剂包括舒尼替尼(Sutent^TM)、贝伐珠单抗(Avastin^TM)、阿西替尼(axitinib)(AG 13736)、SU 14813(Pfizer)及AG 13958(Pfizer)。额外抗血管生成剂包括凡塔蓝尼(vatalanib)(CGP79787)、索拉非尼(Nexavar^TM)、哌加他尼八钠(pegaptaniboctasodium)(Macugen^TM)、凡德他尼(vandetanib)(Zactima^TM)、PF-0337210(Pfizer)、SU14843(Pfizer)、AZD 2171(AstraZeneca)、雷珠单抗(ranibizumab)(Lucentis^TM)、Neovastat^TM(AE 941)、四硫莫里德塔(tetrathiomolybdata)(Coprexa^TM)、AMG 706(Amgen)、VEGF Trap(AVE 0005)、CEP 7055(Sanofi-Aventis)、XL 880(Exelixis)、特拉替尼(telatinib)(BAY 57-9352)及CP-868,596(Pfizer)。其他抗血管生成剂包括恩扎妥林(enzastaurin)(LY317615)、米哚妥林(midostaurin)(CGP41251)、哌立福新(perifosine)(KRX 0401)、替普瑞酮(teprenone)(Selbex^TM)及UCN 01(Kyowa Hakko)。抗血管生成剂的其他实施例包括塞内昔布(celecoxib)(Celebrex^TM)、帕瑞昔布(parecoxib)(Dynastat^TM)、德拉昔布(deracoxib)(SC 59046)、罗美昔布(lumiracoxib)(Preige^TM)、伐地昔布(valdecoxib)(Bextra^TM)、罗非昔布(rofecoxib)(Vioxx^TM)、埃拉莫德(iguratimod)(Careram^TM)、IP 751(Invedus)、SC-58125(Pharmacia)及依托昔布(etoricoxib)(Arcoxia^TM)。又其他抗血管生成剂包括依昔舒林(exisulind)(Aptosyn^TM)、双水杨酸酯(salsalate)(Amigesic^TM)、二氟尼柳(diflunisal)(Dolobid^TM)、布洛芬(ibuprofen)(Motrin^TM)、酮基布洛芬(ketoprofen)(Orudis^TM)、萘丁美酮(nabumetone)(Relafen^TM)、吡罗昔康(piroxicam)(Feldene^TM)、萘普生(naproxen)(Aleve^TM、Naprosyn^TM)、双氯芬酸(diclofenac)(Voltaren^TM)、吲哚美辛(indomethacin)(Indocin^TM)、舒林酸(sulindac)(Clinoril^TM)、托美丁(tolmetin)(Tolectin^TM)、依托度酸(etodolac)(Lodine^TM)、酮咯酸(ketorolac)(Toradol^TM)及奥沙普嗪(oxaprozin)(Daypro^TM)。又其他抗血管生成剂包括ABT 510(Abbott)、阿雷司他(apratastat)(TMI 005)、AZD 8955(AstraZeneca)、英环奈德(incyclinide)(Metastat^TM)及PCK 3145(Procyon)。又其他抗血管生成剂包括阿曲汀(acitretin)(Neotigason^TM)、普利肽新(plitidepsin)(aplidine^TM)、希伦泰德(cilengtide)(EMD 121974)、康柏斯达汀A4(combretastatin A4)(CA4P)、芬维A胺(fenretinide)(4HPR)、卤夫酮(halofuginone)(Tempostatin^TM)、Panzem^TM(2-甲氧雌二醇)、PF-03446962(Pfizer)、瑞马司他(rebimastat)(BMS275291)、卡妥索单抗(catumaxomab)(Removab^TM)、来那度胺(lenalidomide)(Revlimid^TM)、角鲨胺(squalamine)(EVIZON^TM)、沙立度胺(thalidomide)(Thalomid^TM)、Ukrain^TM(NSC 631570)、Vitaxin^TM(MEDI522)及唑来膦酸(zoledronic acid)(Zometa^TM)。

在另一实施方案中，额外抗癌治疗剂为信号转导抑制剂(例如抑制调节分子借以控制细胞生长、分化及细胞内存活率传达的基本过程的途径)。信号转导抑制剂包括小分子、抗体及反义分子。信号转导抑制剂包括例如激酶抑制剂(例如，酪氨酸激酶抑制剂或丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂)以及细胞周期抑制剂。更特定地，信号转导抑制剂包括例如法呢基蛋白质转移酶抑制剂、EGF抑制剂、ErbB-1(EGFR)抑制剂、ErbB2抑制剂、泛ErbB抑制剂、IGF1R抑制剂、MEK抑制剂、c-Kit抑制剂、FLT-3抑制剂、K-Ras抑制剂、PI3激酶抑制剂、JAK抑制剂、STAT抑制剂、Raf激酶抑制剂、Akt抑制剂、mTOR抑制剂、P70S6激酶抑制剂、WNT路径抑制剂及多靶向激酶抑制剂。可与本文所描述的式(I)或(II)化合物及药物组合物结合使用的信号转导抑制剂的额外实施例包括BMS 214662(Bristol-Myers Squibb)、洛那法尼(lonafarnib)(Sarasar^TM)、培利曲索(pelitrexol)(AG2037)、马妥珠单抗(matuzumab)(EMD7200)、尼妥珠单抗(nimotuzumab)(TheraCIM h-R3^TM)、帕尼单抗(panitumumab)(Vectibix^TM)、凡德他尼(Zactima^TM)、帕唑帕尼(pazopanib)(SB 786034)、ALT 110(Alteris Therapeutics)、BIBW 2992(Boehringer Ingelheim)及Cervene^TM(TP 38)。信号转导抑制剂的其他实施例包括吉非替尼(gefitinib)(Iressa^TM)、西妥昔单抗(cetuximab)(Erbitux^TM)、埃罗替尼(erlotinib)(Tarceva^TM)、曲妥珠单抗(Herceptin^TM)、舒尼替尼(Sutent^TM)、伊马替尼(imatinib)(Gleevec^TM)、图卡替尼(Tukysa^TM)、克唑替尼(crizotinib)(Pfizer)、劳拉替尼(lorlatinib)(Pfizer)、达可替尼(dacomitinib)(Pfizer)、伯舒替尼(bosutinib)(Pfizer)、吉达昔布(gedatolisib)(Pfizer)、卡奈替尼(CI 1033)、帕妥珠单抗(Omnitarg^TM)、拉帕替尼(Tykerb^TM)、培利替尼(pelitinib)(EKB569)、米替福新(miltefosine)(Miltefosin^TM)、BMS 599626(Bristol-Myers Squibb)、Lapuleucel-T(Neuvenge^TM)、NeuVax^TM(E75 cancer vaccine)、Osidem^TM(IDM 1)、木利替尼(mubritinib)(TAK-165)、CP-724,714(Pfizer)、帕尼单抗(Vectibix^TM)、司美替尼(selumetinib)(AstraZeneca)、依维莫司(Certican^TM)、佐他莫司(zotarolimus)(Endeavor^TM)、替西罗莫司(temsirolimus)(Torisel^TM)、AP 23573(ARIAD)、VX 680(Vertex)、XL 647(Exelixis)、索拉非尼(Nexavar^TM)、LE-AON(Georgetown University)、GI-4000(Globelmmune)、贝美替尼(binimetinib)及恩拉非尼(encorafenib)。其他信号转导抑制剂包括ABT 751(Abbott)、阿沃西地(alvocidib)(夫拉平度(flavopiridol))、BMS387032(Bristol Myers)、EM 1421(Erimos)、依地苏兰(indisulam)(E 7070)、塞利昔布(seliciclib)(CYC 200)、BIO 112(One Bio)、BMS 387032(Bristol-Myers Squibb)、帕布昔利布(Pfizer)及AG 024322(Pfizer)。

在另一实施方案中，额外抗癌治疗剂为典型抗肿瘤药。典型抗肿瘤药包括但不限于：激素调节剂(诸如激素、抗激素、雄激素促效剂、雄激素拮抗剂及抗雌激素治疗剂)、组蛋白去乙酰基酶(HDAC)抑制剂、DNA甲基转移酶抑制剂、沉默剂或基因活化剂、核糖核酸酶、蛋白质体(proteomics)、拓朴异构酶I抑制剂、喜树碱衍生物、拓朴异构酶II抑制剂、烷基化剂、抗代谢物、聚(ADP-核糖)聚合酶-1(PARP-1)抑制剂(诸如(例如)他拉唑帕尼、奥拉帕尼、卢卡帕尼、尼拉帕尼(niraparib)、依尼帕尼(iniparib)、维利帕尼(veliparib))、微管蛋白抑制剂、抗生素、植物衍生的纺锤体抑制剂、铂配位化合物、基因治疗剂、反义寡核苷酸、血管靶向剂(VTA)及士他汀(statins)。与式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐组合使用且任选与一种或多种其他药剂组合使用的典型抗肿瘤药的实施例包括(但不限于)糖皮质激素，诸如地塞米松(dexamethasone)、普赖松(prednisone)、泼尼松龙、甲基泼尼松龙(methylprednisolone)、氢皮质酮(hydrocortisone)及孕酮，诸如甲羟孕酮(medroxyprogesterone)、乙酸甲地孕酮(megestrol acetate)(Megace)、米非司酮(mifepristone)(RU-486)、选择性雌激素受体调节剂(SERM；诸如他莫昔芬、雷洛昔芬(raloxifene)、拉索昔芬(lasofoxifene)、阿非昔芬(afimoxifene)、阿佐昔芬(arzoxifene)、巴多昔芬(bazedoxifene)、非培米芬(fispemifene)、奥美昔芬(ormeloxifene)、奥培米芬(ospemifene)、替米利芬(tesmilifene)、托瑞米芬(toremifene)及CHF 4227(Chiesi))、曲洛司坦(trilostane)、选择性雌激素受体下调剂(SERD；诸如氟维司群)、依西美坦(Aromasin)、阿那曲唑(Arimidex)、阿他美坦(atamestane)、法倔唑、来曲唑(Femara)、福美司坦、促性腺激素释放激素(GnRH；通常也称为促黄体激素释放激素[LHRH])促效剂，诸如布舍瑞林(buserelin)(Suprefact)、戈舍瑞林(goserelin)(Zoladex)、亮丙瑞林(leuprorelin)(Lupron)及曲普瑞林(triptorelin)(Trelstar)、阿巴瑞克(abarelix)(Plenaxis)、环丙孕酮(cyproterone)、氟他胺(flutamide)(Eulexin)、甲地孕酮、尼鲁胺(nilutamide)(Nilandron)及奥沙特隆(osaterone)、度他雄胺(dutasteride)、依立雄胺(epristeride)、非那雄安(finasteride)、赛润瑞潘(Serenoa repens)、PHL 00801、阿巴瑞克、戈舍瑞林、亮丙瑞林、曲普瑞林、比卡鲁胺(bicalutamide)、抗雄激素剂，诸如恩杂鲁胺(enzalutamide)、乙酸阿比特龙(abiraterone acetate)、比卡鲁胺(Casodex)及其组合。与式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐组合使用的典型抗肿瘤药的其他实施例包括(但不限于)环庚醇苯胺异羟肟酸(SAHA，Merck Inc./Aton Pharmaceuticals)、缩酚酞(FR901228或FK228)、G2M-777、MS-275、丁酸特戊酰氧基甲酯及PXD-101、Onconase(豹蛙酶(ranpirnase))、PS-341(MLN-341)、Velcade(硼替佐米(bortezomib))、9-氨基喜树碱、贝洛替康(belotecan)、BN-80915(Roche)、喜树碱、二氟替康(diflomotecan)、埃多卡林(edotecarin)、依沙替康(exatecan)(Daiichi)、吉马替康(gimatecan)、10-羟基喜树碱、伊立替康HCl(irinotecan HCl)(Camptosar)、勒托替康(lurtotecan)、Orathecin(卢比替康(rubitecan)，Supergen)、SN-38、拓朴替康、喜树碱、10-羟基喜树碱、9-氨基喜树碱、伊立替康、埃多卡林、拓朴替康、阿克拉霉素(aclarubicin)、阿德力霉素(adriamycin)、胺萘非特(amonafide)、胺柔比星(amrubicin)、安那霉素(annamycin)、道诺霉素(daunorubicin)、阿霉素、依沙芦星(doxorubicin)、表阿霉素、依托泊苷、埃达霉素(idarubicin)、加柔比星(galarubicin)、羟基脲(hydroxycarbamide)、奈莫柔比星(nemorubicin)、诺安托(novantrone)(米托蒽醌(mitoxantrone))、吡柔比星(pirarubicin)、吡蒽醌(pixantrone)、甲基苄肼、蝴蝶霉素(rebeccamycin)、索布佐生(sobuzoxane)、塔呋泊苷(tafluposide)、伐柔比星(valrubicin)、Zinecard(右雷佐生(dexrazoxane))、氮芥N-氧化物、环磷酰胺、AMD-473、六甲蜜胺(altretamine)、AP-5280、阿帕喹酮(apaziquone)、溴他立星(brostallicin)、苯达莫司汀(bendamustine)、白消安(busulfan)、卡波醌(carboquone)、卡莫司汀(carmustine)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、达卡巴嗪、雌氮芥、福莫司汀(fotemustine)、葡磷酰胺、异环磷酰胺、KW-2170、洛莫司汀(lomustine)、马磷酰胺(mafosfamide)、甲氮芥(mechlorethamine)、美法仑(melphalan)、二溴甘露醇(mitobronitol)、二溴卫矛醇(mitolactol)、丝裂霉素C、米托蒽醌(mitoxatrone)、尼莫司汀(nimustine)、雷莫司汀(ranimustine)、替莫唑胺(temozolomide)、噻替派(thiotepa)及铂配位烷基化化合物，诸如顺铂、Paraplatin(卡铂)、依铂(eptaplatin)、洛铂(lobaplatin)、奈达铂(nedaplatin)、Eloxatin(奥沙利铂，Sanofi)、赛特铂(satraplatin)、链脲菌素(streptozocin)及其组合。

在再一实施方案中，额外抗癌治疗剂为：二氢叶酸还原酶抑制剂，诸如甲氨喋呤及NeuTrexin(葡糖醛酸三甲曲沙(trimetresate glucuronate))；嘌呤拮抗剂，诸如6-巯基嘌呤核糖苷、巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、克拉屈滨(cladribine)、氯法拉滨(clofarabine)(Clolar)、氟达拉滨(fludarabine)、奈拉滨(nelarabine)及雷替曲塞(raltitrexed)；嘧啶拮抗剂，诸如5-氟尿嘧啶(5-FU)、Alimta(培美曲塞二钠(premetrexed disodium)、LY231514、MTA)、卡培他滨(Xeloda^TM)、胞嘧啶阿拉伯糖苷、Gemzar^TM(吉西他滨)、喃氟啶(Tegafur)(UFT Orzel或Uforal，且包括喃氟啶、吉莫斯特(gimestat)及奥托斯特(otostat)的TS-1组合)、脱氧氟尿苷(doxifluridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(包括烷磷酯(ocfosfate)、磷酸酯、硬脂酸酯、持续释放及脂质体形式)、依诺他滨(enocitabine)、5-氮胞苷(Vidaza)、地西他滨(decitabine)及乙炔基胞苷；及其他抗代谢物，诸如依氟鸟氨酸(eflornithine)、羟基脲、甲酰四氢叶酸(leucovorin)、诺拉曲特(nolatrexed)(Thymitaq)、三安平(triapine)、三甲曲沙(trimetrexate)、雷替曲塞、AG-014699(Pfizer Inc.)、ABT-472(Abbott Laboratories)、INO-1001(InotekPharmaceuticals)、KU-0687(KuDOS Pharmaceuticals)及GPI 18180(Guilford PharmInc)及其组合。

典型抗肿瘤细胞毒素剂的其他实施例包括但不限于：Abraxane(AbraxisBioScience,Inc.)、Batabulin(Amgen)、EPO 906(Novartis)、Vinflunine(Bristol-MyersSquibb Company)、放线菌素D、博来霉素、丝裂霉素C、新抑癌蛋白(neocarzinostatin)(Zinostatin)、长春碱、长春新碱、长春地辛(vindesine)、长春瑞滨(Navelbine)、多西他赛(Taxotere^TM)、奥他赛(Ortataxel)、紫杉醇(包括Taxoprexin，一种DHA/紫杉醇结合物)、顺铂、卡铂、奈达铂、奥沙利铂(Eloxatin)、赛特铂、开普拓(Camptosar)、卡培他滨(Xeloda)、奥沙利铂(Eloxatin)、多西他赛阿利维A酸(Taxotere alitretinoin)、Canfosfamide(Telcyta^TM)、DMXAA(Antisoma)、伊班膦酸(ibandronic acid)、L-天冬酰胺酶、培门冬酶(Oncaspar^TM)、Efaproxiral(Efaproxyn^TM)、贝沙罗汀(bexarotene)(Targretin^TM)、替米利芬(tesmilifene)、Theratope^TM(Biomira)、维A酸(Tretinoin)(Vesanoid^TM)、替拉扎明(tirapazamine)(Trizaone^TM)、莫特沙芬钆(motexafin gadolinium)(Xcytrin^TM)、Cotara^TM(mAb)、NBI-3001(Protox Therapeutics)、聚谷氨酸酯-紫杉醇(Xyotax^TM)及其组合。典型抗肿瘤药的其他实施例包括但不限于Advexin(ING 201)、TNFerade(GeneVec)、RB94(BaylorCollege ofMedicine)、Genasense(Oblimersen，Genta)、康柏斯达汀A4P(CA4P)、Oxi-4503、AVE-8062、ZD-6126、TZT-1027、阿托伐他汀(atorvastatin)、普伐他汀(pravastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、西立伐他汀(cerivastatin)、罗素他汀(rosuvastatin)、烟酸、苯磺酸氨氯地平(amlodipinebesylate)及阿托伐他汀钙、托西曲匹(torcetrapib)及其组合。

在另一实施方案中，额外抗癌治疗剂为表观遗传调节剂，例如EZH2、SMARCA4、PBRM1、ARID1A、ARID2、ARID1B、DNMT3A、TET2、MLL1/2/3、NSD1/2、SETD2、BRD4、DOT1L、HKMTsanti、PRMT1-9、LSD1、UTX、IDH1/2或BCL6的抑制剂。

在其他实施方案中，额外抗癌治疗剂为免疫调节剂，诸如CTLA-4、PD-1或PD-L1(例如帕博利珠单抗、纳武利尤单抗或阿维单抗)、LAG-3、TIM-3、TIGIT、4-1BB、OX40、GITR、CD40的抑制剂或CAR-T细胞疗法。

分装式试剂盒

由于可能需要施用活性化合物的组合，例如出于治疗特定疾病或病状的目的，因此在本发明的范畴内，两种或更多种药物组合物(其中至少一者含有式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐)可方便地以适合于共同施用组合物的试剂盒的形式组合。因此，本发明的试剂盒包括两种或更多种独立的药物组合物，其中的至少一者含有式(I)或(II)化合物或其药学上可接受的盐；及用于分别保持该组合物的构件，诸如容器、分隔瓶或分隔式箔包。这种试剂盒的实例为用于片剂、胶囊等的封装的常用泡壳包装。

本发明的试剂盒尤其适用于施用不同剂型(例如经口及肠胃外)，用于以不同给药时间间隔施用单独的组合物，或用于针对彼此滴定单独的组合物。为了有助于依从性，试剂盒通常包括施用说明，且可提供记忆辅助。

实施例

为了能更好地理解本发明，阐述以下实施例。这些实施例仅用于说明的目的，且不应理解为以任何方式限制本发明的范畴。本领域技术人员将认识到，所描述的化学反应可容易地适于制备多种本文所描述的其他化合物，且用于制备化合物的替代性方法被视为在本发明的范畴内。例如，非例示化合物的合成可通过本领域技术人员显而易知的修改，例如通过适当地保护干扰基团、通过利用此项技术中已知的除所描述的这些试剂以外的其他适合试剂和/或通过对反应条件进行惯例修改而成功地进行。替代地，本文所公开或此项技术中已知的其他反应将被认为适用于制备本文所描述的其他化合物。

在下文所描述的实施例中，除非另有说明，否则所有温度均以摄氏度为单位阐述。试剂是购自商业供应商，诸如MilliporeSigma、Alfa Aesar、TCI等，且除非另有说明，否则该试剂不经进一步纯化即使用。

下文所阐述的反应一般是在氮气或氩气的正压力下或在无水溶剂中利用干燥管完成(除非另外陈述)，且反应烧瓶通常装配有橡胶膈膜以便经由注射器引入底物及试剂。将玻璃器皿烘干和/或热干燥。

柱层析是在具有硅胶柱的Biotage系统(制造商：Dyax Corporation)上或在硅胶SepPak滤筒(Waters)上进行(除非另外陈述)。¹H NMR光谱记录于在400MHz下操作的Varian仪器上。¹H-NMR光谱是使用四甲基硅烷(0.00ppm)或残余溶剂(CDCl₃：7.26ppm；CD₃OD：3.31ppm；D₂O：4.79ppm；(CD₃)₂SO：2.50ppm；(CD₃)₂CO：2.05ppm；C₆D₆：7.16ppm；CD₃CN：1.94ppm)作为参考标准物，以CDCl₃、CD₃OD、D₂O、(CD₃)₂SO、(CD₃)₂CO、C₆D₆、CD₃CN溶液的形式获得(以ppm为单位报告)。当报告峰值多峰性时，使用以下缩写：s(单峰)、d(二重峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、m(多重峰)、br(宽峰)、dd(双二重峰)、dt(双三重峰)。偶合常数在给出时以赫兹(Hertz)(Hz)为单位报告。

本文所描述的化合物及中间体是使用由ChemDraw Professional版本19.0.0.22(Perkin Elmer Informatics,Inc.,Waltham,Mass.)提供的命名准规进行命名。

各实施例或其药学上可接受的盐可个别地要求保护或与本文所描述的任何数目的每个实施方案以任何组合分组在一起。

中间体实施例A

3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯胺

步骤A：将1-氟-2-甲基-4-硝基苯(1.05g，6.75mmol)及1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-醇(1.0g，6.75mmol)于DMF(22mL)中的溶液用Cs₂CO₃(4.40g，13.5mmol)处理。使混合物升温至50℃且搅拌2小时。将混合物冷却至环境温度，接着用EtOAc稀释。混合物接着用盐水(2×)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩，得到1-甲基-5-(2-甲基-4-硝基苯氧基)-1H-苯并[d]咪唑(1.9g，定量)。m/z(APCI-正)M⁺1＝284.1。

步骤B：将1-甲基-5-(2-甲基-4-硝基苯氧基)-1H-苯并[d]咪唑(2.2g，7.8mmol)于MeOH(78mL)中的溶液用氢氧化钯/碳(2.0g，10wt％)处理。接着用氢气使混合物通过真空/吹扫循环三次。接着将混合物保持在气球压力下，搅拌5.5小时。用氩气吹扫反应混合物且过滤，且用MeOH洗涤滤饼。接着浓缩滤液，得到呈固体状的3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯胺(1.5g，76％)，其直接用于后续步骤中。m/z(APCI-正)M⁺1＝254.1。

中间体实施例B

4-(苯并[c]异噻唑-6-基氧基)-3-甲基苯胺

步骤A：将亚硫酰氯(28.6mL，394.3mmol)添加至甲磺酰胺(25g，263mmol)于苯(45.0mL)中的溶液中，且使混合物在90℃下回流16小时。接着减压移除苯。在0.3mmHg压力下在99至100℃下蒸馏残余物，得到呈液体状的N-(氧代-λ⁴-亚硫烷基)甲磺酰胺(28g，75％产率)。m/z(M⁺)＝141.0(GC-MS)。

步骤B：将N-(氧代-λ⁴-亚硫烷基)甲磺酰胺(20.6g，146mmol，于20mL苯中)添加至5-甲氧基-2-甲基苯胺(5g，36.4mmol)于苯(20mL)中的溶液中，接着添加吡啶(5.9mL，72.9mmol，于10mL苯中)。使混合物在90℃下回流48小时。接着通过减压蒸发来移除苯，且用冰水及DCM稀释残余物。分离有机层，用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，得到粗物质，其通过硅胶柱层析(10-12％EtOAc/己烷)纯化，得到呈油状物的6-甲氧基苯并[c]异噻唑(1.2gm，20％产率)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.05(s,1H),7.60(d,J＝9.2Hz,1H),7.07(s,1H),6.94(dd,J＝9.2,1.2Hz,2H)；m/z(M⁺)＝165.1。

步骤C：在0℃下将BBr₃(2.85mL，30.12mmol)添加至6-甲氧基苯并[c]异噻唑(1g，6.02mmol)于DCM(8mL)中的经搅拌溶液中，且在0℃下搅拌混合物2小时。减压蒸发挥发物，且用冰水及DCM稀释反应混合物。分离有机层，用饱和NaHCO₃溶液洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，得到粗产物。将粗产物与另一批料(批量200mg)混合，且合并的物质通过硅胶柱层析(40-45％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的苯并[c]异噻唑-6-醇(850mg，78％产率)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ10.37(s,1H),9.56(s,1H),7.72(d,J＝9.2Hz,1H),6.92-6.91(m,2H)；m/z(M⁺)＝151.0。

步骤D：将苯并[c]异噻唑-6-醇(0.05g，0.33mmol)及1-氟-2-甲基-4-硝基苯(0.062g，0.4mmol)于DMF(3.3mL)中的溶液用Cs₂CO₃(0.22g，0.66mmol)处理。使混合物升温至100℃且搅拌17小时。将混合物冷却至环境温度，且用EtOAc及H₂O稀释。用EtOAc(2×)萃取水层。有机物用盐水(3×)洗涤，经Na₂SO₄干燥且浓缩，得到6-(2-甲基-4-硝基苯氧基)苯并[c]异噻唑(0.095，定量)。m/z(APCI-正)M⁺1＝287。

步骤E：将6-(2-甲基-4-硝基苯氧基)苯并[c]异噻唑(0.33g，5.1mmol)于THF(5.1mL)中的溶液用氯化铵水溶液(5.1mL)处理且冷却至0℃。将锌粉(0.22g，3.3mmol)添加至混合物中。使混合物升温至环境温度。48小时后，用H₂O及EtOAc稀释混合物，且过滤。用EtOAc洗涤滤饼。用EtOAc(3×)萃取水层，有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥且浓缩。产物经由正相层析(0至40％EtOAc/己烷)纯化。汇集含有所要产物的级分且浓缩，得到4-(苯并[c]异噻唑-6-基氧基)-3-甲基苯胺(0.053g，20％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝257.1。

中间体实施例C

4-(苯并[c][1,2,5]噻二唑-5-基氧基)-3-甲基苯胺

步骤A：将苯并[c][1,2,5]噻二唑-5-醇(0.25g，1.64mmol)及1-氟-2-甲基-4-硝基苯(0.305g，1.97mmol)于DMA(8.2mL)中的溶液用Cs₂CO₃(1.07g，3.29mmol)处理。将混合物加热至50℃且搅拌6小时。混合物用盐水稀释，用EtOAc(2×)萃取，经Na₂SO₄干燥且浓缩。产物经由正相层析(5至75％EtOAc/己烷)纯化。汇集含有所要产物的级分且浓缩，得到呈固体状的5-(2-甲基-4-硝基苯氧基)苯并[c][1,2,5]噻二唑(0.326g，69.1％)。

步骤B：将5-(2-甲基-4-硝基苯氧基)苯并[c][1,2,5]噻二唑(0.326g，1.13mmol)于THF(10mL)及饱和氯化铵水溶液(10mL)中的溶液用锌粉(0.742g，11.3mmol)处理。将混合物在环境温度下搅拌1.5小时。用H₂O及EtOAc稀释混合物，且过滤。用EtOAc(2×)萃取滤液，合并的有机物经Na₂SO₄干燥且浓缩，得到呈固体状的4-(苯并[c][1,2,5]噻二唑-5-基氧基)-3-甲基苯胺(0.291g，99.7％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝257.1。

中间体实施例D

3-甲基-4-((3-甲基苯并[c]异噁唑-6-基)氧基)苯胺

步骤A：将(4-羟基-3-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.175g，0.784g)及1-(4-氟-2-硝基苯基)乙-1-酮(0.144g，0.784mmol)于DMF(7.8mL)中的溶液用Cs₂CO₃(0.511g，1.57mmol)处理。将混合物加热至50℃且搅拌17小时。用H₂O及DCM稀释混合物。用DCM(3×)萃取水层，合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥且浓缩，得到呈固体状的(4-(4-乙酰基-3-硝基苯氧基)-3-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.300g，99.1％)，其不经纯化即用于后续步骤中。m/z(APCI-正)M^-Boc＝287.1。

步骤B：将(4-(4-乙酰基-3-硝基苯氧基)-3-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.0814g，0.211mmol)于1:1EtOAc/MeOH(2mL)中的溶液用二氯-I2-锡烷二水合物(0.143g，0.632mmol)处理。将混合物在环境温度下搅拌19小时。用饱和NaHCO₃水溶液稀释混合物。用EtOAc(3×)萃取水层。合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥且浓缩，得到呈固体状的(3-甲基-4-((3-甲基苯并[c]异噁唑-6-基)氧基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.0792g，定量)。m/z(APCI-正)M+1＝355.2。

步骤C：将三氟乙酸(1.19mL，15.5mmol)添加至(3-甲基-4-((3-甲基苯并[c]异噁唑-6-基)氧基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.11g，0.31mmol)于DCM(3.1mL)中的溶液中。将反应混合物在环境温度下搅拌90分钟。将反应混合物用10％碳酸钾水溶液稀释，且搅拌10分钟。用DCM(3×)萃取水层。合并的有机物用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥且浓缩，得到3-甲基-4-((3-甲基苯并[c]异噁唑-6-基)氧基)苯胺(0.020，25.3％)。m/z(APCI-正)M+1＝255.1。

中间体实施例E

4-(苯并[c]异噁唑-6-基氧基)-3-甲基苯胺

步骤A：将(4-羟基-3-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.51g，2.3mmol)、4-氟-2-硝基苯甲醛(0.39g，2.3mmol)、DMF(23mL)及碳酸铯(1.5g，4.6mmol)的混合物加热至60℃后保持2小时，使其冷却至环境温度。混合物用水/盐水稀释且用EtOAc萃取。有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(己烷:EtOAc，5-15％)得到(4-(4-甲酰基-3-硝基苯氧基)-3-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.31g，36％)。m/z(APCI-正)M^-Boc＝273.1。

步骤B：将(4-(4-甲酰基-3-硝基苯氧基)-3-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.31g，0.82mmol)、SnCl₂·2H₂O(0.55g，2.5mmol)及1:1的甲醇/EtOAc(8mL)的混合物在室温下搅拌20小时。混合物用10％碳酸钾水溶液稀释且用EtOAc萃取。有机物经硫酸钠干燥且减压浓缩。快速色谱法(5％EtOAc/己烷至50％EtOAc/己烷)得到(4-(苯并[c]异噁唑-6-基氧基)-3-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.19g，67％)。m/z(APCI-正)M+1＝341.1。

步骤C：将(4-(苯并[c]异噁唑-6-基氧基)-3-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.19g，0.55mmol)、DCM(5mL)及TFA(20当量)的混合物在室温下搅拌30分钟。混合物接着用EtOAc稀释且用10％碳酸钾水溶液洗涤。有机物经硫酸钠干燥且减压浓缩，得到4-(苯并[c]异噁唑-6-基氧基)-3-甲基苯胺(0.12g，94％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝241.1。

中间体实施例F

3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺

步骤A：将原甲酸三甲酯(20.4mL，186.6mmol)及H₂SO₄(1mL)添加至1H-吲唑-6-醇(5g，37.3mmol)于甲苯(150mL)中的经搅拌溶液中。使反应混合物回流16小时。将反应混合物冷却至环境温度且倾入水中，用EtOAc萃取混合物。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(50％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的2-甲基-2H-吲唑-6-醇(1.2g，22％产率)。m/z(esi)M⁺1＝148.8。

步骤B：将1-氟-2-甲基-4-硝基苯(523mg，3.37mmol)及K₂CO₃(933mg，6.74mmol)添加至2-甲基-2H-吲唑-6-醇(500mg，3.37mmol)于DMSO(15mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在80℃下加热6小时。反应物用水淬灭且用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(50％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的2-甲基-6-(2-甲基-4-硝基苯氧基)-2H-吲唑(800mg，84％产率)。m/z(esi)M⁺1＝284。

步骤C：将Pd/C(50mg，10％湿润)添加至2-甲基-6-(2-甲基-4-硝基苯氧基)-2H-吲唑(500mg，1.76mmol)于THF(10mL)中的经搅拌溶液中，且用N₂吹扫10分钟。将反应混合物在室温下在H₂气球氛围下搅拌16小时。反应完成后，反应混合物经由床过滤，用DCM洗涤，且减压浓缩滤液，得到呈固体状的3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(粗物质)，其不经进一步纯化即直接使用。m/z(esi)M⁺1＝253.9。

中间体实施例G

4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯酚

步骤A：向装备有搅拌棒的20mL玻璃微波容器中装入磷酸三钾(2.15g，10.2mmol)、碘化铜(I)(0.193g，1.02mmol)、4-(苯甲氧基)-2-甲基苯酚(2.17g，10.2mmol)、7-溴咪唑并[1,2-a]吡啶(1.0g，5.08mmol)、二甲基甘氨酸(0.314g，3.05mmol)及DMSO(10.2mL)。将混合物在90℃下搅拌过夜。将混合物冷却至室温，接着用H₂O及NH₄Cl稀释。用CHCl₃(3×)萃取水层。合并的有机萃取物用盐水(5×)洗涤，经Na₂SO₄干燥，且真空浓缩，得到油状物。通过柱层析(Redisep 40g，50-100％乙酸乙酯/己烷)纯化，得到7-(4-(苯甲氧基)-2-甲基苯氧基)咪唑并[1,2-a]吡啶(1.09g，65％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝331.1。

步骤B：向装备有搅拌棒的100mL圆底烧瓶中装入7-(4-(苯甲氧基)-2-甲基苯氧基)咪唑并[1,2-a]吡啶(1.09g，3.45mmol)、二羟基钯(0.8g，1.14mmol)及MeOH(34.5mL，3.45mmol)。将混合物置于N₂氛围下且在室温下搅拌。经由双壁气球及亚管线用H₂吹扫混合物2分钟。移除氮气入口，且将混合物在室温下搅拌2小时。混合物用氮气鼓泡，用MeOH稀释，且过滤。真空浓缩有机物且通过柱层析(Redisep 40g，0-20％MeOH/DCM)纯化，得到4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯酚(0.284g，34％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝241.1。

中间体实施例H

3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯酚

根据实施例23步骤A及B，在步骤A中用6-溴-2-甲基-2H-吲唑代替5-溴-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑来制备3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯酚。m/z(APCI-正)M+1＝255.1。

中间体实施例I

4-((7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)-3-甲基苯胺

步骤A：将粉末状的碳酸钾(0.96g，1.5mmol)添加至5-溴-7-氟-1H-苯并[d]咪唑(1.0g，4.7mmol)于DMA(23mL)中的混合物中，接着添加MeI(0.86g，1.3mmol)。将此混合物在室温下搅拌48小时。混合物用水/盐水稀释且用EtOAc萃取。有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。产物经由反相柱层析(5至85％ACN/H₂O+1％TFA缓冲液)纯化。将含有位置异构体的级分分别汇集，接着用10％K₂CO₃水溶液处理。混合物接着用20％IPA/CH₂Cl₂萃取，合并萃取物，经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩，得到两种位置异构体，其中需要的5-溴-7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(0.19g，17％)首先洗脱。m/z(APCI-正)M⁺1＝255.1。不需要的位置异构体以23％产率(0.25g)分离。

步骤B：遵循根据实施例24步骤A的程序，用(4-羟基-3-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯代替4-(苯甲氧基)-2-甲基苯酚且用5-溴-7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑代替5-溴-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑来分离4-((7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)-3-甲基苯胺。m/z(APCI-正)M⁺1＝272.1。

中间体实施例J

4-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基氧基)-3-甲基苯胺

将7-氯咪唑并[1,2-b]哒嗪(0.36g，2.35mmol)、(4-羟基-3-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(0.58g，2.61mmol)及碳酸铯(2.55g，7.83mmol)于DMF(5.22mL)中的溶液加热至100℃后保持18小时。冷却至环境温度后，将混合物在EtOAc与NH₄Cl(饱和水溶液)之间分配。分离各相，且用EtOAc(2×)进一步萃取水相。合并的有机萃取物用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。通过C18反相HPLC(10-95％水/MeCN+0.1％TFA缓冲液)纯化，得到4-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基氧基)-3-甲基苯胺(0.99g，11％产率)。m/z(APCI-正)M⁺1＝241.1。

中间体实施例K

4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯胺

步骤A：将TEA(0.25mL，1.65mmol)添加至6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-醇(150mg，0.83mmol)于甲苯(3.0mL)中的经搅拌溶液中，接着添加磷酰氯(0.39mL，4.13mmol)。将混合物在120℃下搅拌2小时。反应完成后，将反应混合物蒸发至干燥。在0℃下用饱和NaHCO₃水溶液中和粗产物。用EtOAc萃取反应混合物，且用盐水洗涤合并的有机层。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，得到4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(122mg，粗物质)，其不经进一步纯化即用于后续反应中。m/z(esi)M⁺1＝199.0。

步骤B：将K₂CO₃(484.7mg，3.51mmol)添加至[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-醇盐酸盐(200mg，1.17mmol)于DMSO:THF(1:2)溶液(4.5mL)中的经搅拌溶液中，且将混合物在室温下搅拌5分钟。将1-氟-2-甲基-4-硝基苯(181.3mg，1.17mmol)添加至混合物中，且将混合物在80℃下搅拌4小时。反应完成后，用EtOAc萃取反应混合物，且合并的有机层用冷水、接着用盐水洗涤。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(35％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的7-(2-甲基-4-硝基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(220mg，70％产率)。m/z(esi)M⁺1＝271.2。

步骤C：在0℃下将Zn粉(675.5mg，10.3mmol)添加至7-(2-甲基-4-硝基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(280mg，1.03mmol)于THF(5.0mL)中的经搅拌溶液中。在0℃下将含NH₄Cl(552.7mg，10.3mmol)的水(1.0mL)添加至溶液中，且将反应混合物在室温下搅拌30分钟。反应完成后，经由烧结漏斗过滤反应混合物，且减压浓缩滤液，得到粗产物。将粗产物溶解于EtOAc中，且用水、接着用盐水洗涤。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，得到4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯胺，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。m/z(esi)M⁺1＝241.2。

中间体实施例L

4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯胺

步骤A：向7-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(300mg，1.95mmol)及4-溴-5-氟-2-甲基苯酚(600.79mg，2.93mmol)于DMA(6mL)中的经搅拌溶液中添加Cs₂CO₃(1.27g，3.90mmol)及CsF(593.mg，3.90mmol)。密封容器，且将反应混合物在150℃下加热3小时。接着用水稀释反应混合物，且用EtOAc萃取混合物。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩，得到粗产物，其通过柱层析(15％EtOAc-己烷)纯化，得到呈固体状的7-(4-溴-5-氟-2-甲基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(350mg，56％产率)。m/z(esi)M+1＝321.9。

步骤B：向7-(4-溴-5-氟-2-甲基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(350mg，1.09mmol)于二噁烷(3mL)中的经搅拌溶液中添加Boc-NH₂(191mg，1.63mmol)及Cs₂CO₃(708mg，2.17mmol)，且使混合物在氩气氛围下脱气5分钟。最后，添加Pd₂dba₃(199mg，0.21mmol)及X-Phos(103.6mg，0.21mmol)；使混合物再脱气5分钟，接着在100℃下加热16小时。接着用EtOAc稀释反应混合物，且经由垫过滤混合物。有机滤液用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩，得到粗产物，其通过硅胶柱层析(3％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(210mg，54％产率)。m/z(esi)M+1＝359.0。

步骤C：在氩气氛围下向(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(210mg，0.58mmol)于DCM(2mL)中的经搅拌溶液中添加TFA(0.6mL)。将反应混合物在0℃下搅拌2小时。接着浓缩反应混合物，残余物接着用5％MeOH-DCM稀释，且用H₂O、接着用饱和NaHCO₃溶液洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩，得到4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯胺(150mg粗物质)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。m/z(esi)M+1＝258.8。

中间体实施例M

4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯胺

步骤A：向7-氯-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(400mg，2.61mmol)及4-溴-3-氟-2-甲基苯酚(504mg，2.48mmol)于DMA(4mL)中的经搅拌溶液中添加Cs₂CO₃(1.7g，5.22mmol)及CsF(790mg，5.22mmol)，且将混合物在150℃下搅拌4小时。反应混合物用水稀释且用EtOAc萃取。合并的有机层用水、接着用盐水洗涤，接着干燥且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(15-20％EtOAC-己烷)纯化，得到呈固体状的7-(4-溴-3-氟-2-甲基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(350mg，42％产率)。m/z(esi)M+1＝321.7。

步骤B：向7-(4-溴-3-氟-2-甲基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(500mg，1.55mol)及氨基甲酸叔丁酯(547mg，4.67mmol)于二噁烷(5mL)中的经搅拌溶液中添加Cs₂CO₃(1.51g，4.67mmol)，接着用氩气脱气5分钟。添加Xphos(148mg，0.31mmol)及Pd₂(dba)₃(285mg，0.31mmol)，且使混合物再脱气5分钟。将反应混合物在密封管中在100℃下搅拌16小时。反应混合物经由垫过滤且用DCM洗涤。浓缩滤液，且粗残余物通过硅胶柱层析(20-30％EtOAC-己烷)纯化，得到呈胶质液体状的(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，71％产率)。m/z(esi)M+1＝358.6。

步骤C：在0℃下向(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，1.11mmol)于DCM(5mL)中的经搅拌溶液中添加TFA(3mL)，且搅拌1小时。接着浓缩反应混合物，且粗残余物用饱和NaHCO₃溶液稀释，且用10％MeOH-DCM萃取两次。合并的有机层经干燥且浓缩，得到呈固体状的4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯胺(260mg，90％产率)。m/z(esi)M+1＝259.0。

中间体实施例N

4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯胺

步骤A：向[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-醇(50mg，0.37mmol)及2-氯-1,3-二氟-4-硝基苯(71.7mg，0.37mmol)于DMSO(1mL)中的经搅拌溶液中添加K₂CO₃(102.2mg，0.74mmol)，且将混合物在100℃下搅拌4小时。反应混合物接着用水稀释且用EtOAc萃取。合并的有机层用水、接着用盐水洗涤，干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析纯化，得到呈固体状的7-(2-氯-3-氟-4-硝基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶的异构体混合物(50mg，异构体混合物)。m/z(esi)M+1＝309.0及309.2。

步骤B：在0℃下向7-(2-氯-3-氟-4-硝基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶的异构体混合物(150mg，0.49mmol)于THF:H₂O(5:1)(6mL)中的经搅拌溶液中添加Zn(331.2mg，4.87mmol)及NH₄Cl(263mg，4.87mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时。经由烧结漏斗过滤混合物，且用EtOAc洗涤固体。滤液用水洗涤，干燥，过滤且浓缩，得到粗产物，其通过硅胶柱层析(0-2％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯胺(120mg，88％产率)。m/z(esi)M+1＝278.9。

中间体实施例O

2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯胺

步骤A：向2-氯-4-氟-3-甲基-1-硝基苯(10.0g，52.7mmol)及1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-醇(7.8g，52mmol)于DMA(45ml)中的经搅拌溶液中添加Cs₂CO₃(42.8g，131.9mmol)，且将混合物在80℃下搅拌2小时。反应混合物用EtOAc稀释，用水、接着用盐水洗涤。有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩，得到粗物质，其通过硅胶柱层析(0-2％MeOH-DCM)纯化，得到呈固体状的5-(3-氯-2-甲基-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(14.5g，85％产率)。m/z(Esi)M+1＝317.4。

步骤B：向5-(3-氯-2-甲基-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(2.0g，6.3mmol)于DMSO(25.2mL)中的经搅拌溶液中添加CsF(9.5g，63.1mmol)，且在110℃下搅拌16小时。反应混合物用EtOAc稀释，用水、接着用盐水洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(0-1％MeOH-DCM)纯化，得到呈固体状的5-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(1.4g，不纯)。m/z(esi)M+1＝301.6。

步骤C：向5-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(1.4g，4.65mmol)于MeOH(10.0mL)中的经搅拌溶液中添加Pd/C(900mg)。将反应混合物用H₂吹扫，接着在氢气氛围下搅拌3小时。反应混合物经由过滤。浓缩滤液，且粗产物通过柱层析(0-1％MeOH-DCM)纯化，接着用二乙醚湿磨，得到2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯胺(800mg，2个步骤的产率47％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.12(s,1H),7.49(d,J＝8.6Hz,1H),6.96-6.86(m,2H),6.62(t,J＝9.3Hz,1H),6.55(d,J＝8.8Hz,1H),4.92(s,2H),3.81(s,3H),2.02(s,3H)。m/z(esi)M+1＝272.09。

中间体实施例P

2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯胺

步骤A：向1-氯-5-氟-4-甲基-2-硝基苯(10g，52.743mmol)及1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-醇(7.8g，52.7mmol)于DMA(500ml)中的经搅拌溶液中添加Cs₂CO₃(34.4g，105.485mmol)，且将混合物加热至80℃后保持2小时。将混合物冷却至室温且用EtOAc稀释。混合物用水、接着用盐水洗涤，接着经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物用10％EtOAc/己烷湿磨，且将固体减压干燥，得到呈固体状的5-(5-氯-2-甲基-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(14g，84％产率)。m/z(esi)M+1＝317.4。

步骤B：向5-(5-氯-2-甲基-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(5.0g，15.8mmol)于DMSO(64mL)中的经搅拌溶液中添加CsF(23.9g，157.7mmol)，且在110℃下搅拌16小时。接着将反应混合物冷却至室温且用EtOAc稀释。混合物随后用水、接着用盐水洗涤，接着经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(1-2％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的5-(5-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(3.2g，67％产率)。m/z(esi)M+1＝302.0。

步骤C：向5-(5-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(2.0g，6.645mmol)于MeOH(20mL)及THF(2mL)中的经搅拌溶液中添加Pd/C(1.0g)。接着将混合物在氢气氛围下在室温下搅拌4小时。反应混合物接着经由硅藻土床过滤且用MeOH洗涤。减压浓缩滤液，且粗物质通过硅胶柱层析(2-3％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯胺(1.2g，67％产率)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ8.13(s,1H),7.50(d,J＝8.6Hz,1H),6.96-6.86(m,2H),6.67(dd,J＝11.0,15.2Hz,2H),4.92(s,2H),3.81(s,3H),2.00(s,3H)。m/z(esi)M+1＝272.20。

中间体实施例Q

2-氟-3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺

步骤A：在0℃下向6-甲氧基-1H-吲唑(1.0g，6.75mmol)于DMF(7.0mL)中的经搅拌溶液中添加K₂CO₃(1.8g，13.5mmol)及MeI(0.9mL，13.5mmol)，且将混合物在50℃下搅拌1小时。经冷却的反应混合物用EtOAc稀释，用水、接着用盐水洗涤。有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，得到粗产物，其通过硅胶柱层析(10-25％EtOAc-己烷)纯化，得到呈液体状的6-甲氧基-2-甲基-2H-吲唑(350mg，32％产率)。m/z(esi)M+1＝162.9。

步骤B：在氩气氛围下在0℃下向6-甲氧基-2-甲基-2H-吲唑(1.4g，8.6mmol)于DCM(8mL)中的溶液中添加含BBr₃的DCM(17.0mL，17.2mmol)，且将反应混合物在室温下搅拌3小时。接着浓缩反应混合物，且通过添加饱和NaHCO₃溶液来淬灭反应物。接着用EtOAc萃取混合物，且合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩，得到粗产物，其通过柱层析(10-50％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的2-甲基-2H-吲唑-6-醇(1.0g，78％产率)。m/z(esi)M+1＝148.8。

步骤C：向2-甲基-2H-吲唑-6-醇(2.7g，18.24mmol)于DMSO(16mL)中的经搅拌溶液中添加K₂CO₃(7.5g，54.73mmol)及1,3-二氟-2-甲基-4-硝基苯(3.47g，20.07mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，且接着用EtOAc萃取粗反应混合物。合并的有机相用水及盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(20-50％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的6-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(4.0g，两种位置异构体的混合物)。m/z(esi)M+1＝302.2。

步骤D：在0℃下向6-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(4.0g，13.3mmol)于THF(40.0mL)中的经搅拌溶液中添加Zn粉(8.7g，132.9mmol)，接着添加含NH₄Cl(7.1g，132.9mmol)的水(10mL)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。过滤反应混合物，且减压浓缩滤液，得到粗混合物，将其用EtOAc萃取，用水及盐水洗涤。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过制备型SFC(45-55％CO₂:(含0.3％异丙胺的MeOH)，25g/min)纯化，得到呈固体状的2-氟-3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺的需要异构体(900mg，2个步骤的产率18％)。m/z(esi)M+1＝272.0。

中间体实施例R

2,2-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯

步骤A：在氮气氛围下向装备有搅拌棒的圆底烧瓶中装入2,2-二甲基-4-氧代基哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，2.20mmol)及22mL无水THF。将此混合物冷却至-78℃且通过注射器添加LiHMDS(2.86mL，于THF中1M)，且将混合物在-78℃下搅拌1小时。此时，通过注射器添加苯基三氟甲磺酰胺的THF溶液(1.02g，2.86mmol，于10mL THF中)。添加完成后，将混合物在-78℃下搅拌15分钟，接着使其升温至室温。在室温下两小时之后，将混合物用饱和氯化铵溶液淬灭，用水稀释，用EtOAc萃取，萃取物经硫酸钠干燥且减压浓缩。快速色谱法纯化，得到2,2-二甲基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(477mg，60％)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.77(ddd,J＝3.7,2.6,1.1Hz,1H),4.07(dt,J＝3.7,2.6Hz,2H),2.39(td,J＝2.5,1.1Hz,2H),1.49(s,6H),1.46(s,9H)。

步骤B：向含有2,2-二甲基-4-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(475mg，1.32mmol)的压力管中装入4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼戊烷)(839mg，3.30mmol)、二噁烷(13mL)、KOAc(389mg，3.97mmol)及PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂加合物(108mg，0.132mmol)。混合物用氩气吹扫几分钟，密封试管，且使混合物升温至100℃后保持16小时，接着使其冷却至室温。混合物用EtOAc/水稀释，且经由GF/F滤纸过滤。用EtOAc萃取滤液，萃取物经硫酸钠干燥且减压浓缩。快速色谱法纯化，得到2,2-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(187mg，42％)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.68-6.61(m,1H),3.93(dt,J＝3.8,1.8Hz,2H),2.21(d,J＝1.6Hz,2H),1.46(s,9H),1.38(s,6H),1.27(s,12H)。

中间体实施例S

7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-4-氮杂螺[2.5]辛-6-烯-4-甲酸叔丁酯

步骤A：向装备有搅拌棒及氮气入口的圆底烧瓶中装入7-氧代基-4-氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(576mg，2.56mmol)及25mL无水THF。将此混合物冷却至-78℃，且接着通过注射器添加LiHMDS(3.32mL，3.32mmol，1MTHF溶液)。添加完成后，将混合物在-78℃下搅拌45分钟。此时，添加1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺的THF溶液(1.19g，3.32mmol，于10mLTHF中)，将混合物在-78℃下搅拌10分钟，接着使其升温至室温。混合物接着用饱和氯化铵溶液淬灭，用水稀释，用EtOAc萃取，萃取物经硫酸钠干燥且减压浓缩。所得粗物质通过快速色谱法纯化，得到7-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-4-氮杂螺[2.5]辛-6-烯-4-甲酸叔丁酯(746mg，82％)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.87(tt,J＝3.2,1.4Hz,1H),4.07(s,2H),2.35(s,2H),1.01-0.93(m,2H),0.76(s,2H)。

步骤B：向含有7-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-4-氮杂螺[2.5]辛-6-烯-4-甲酸叔丁酯(745mg，2.08mmol)的压力管中装入二噁烷(21mL)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼戊烷)(1.06g，4.17mmol)、KOAc(614mg，6.25mmol)及PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂加合物(170mg，4.17mmol)。此混合物用氩气吹扫几分钟，密封试管，且使混合物升温至100℃后保持16小时，接着使其冷却至室温。混合物用EtOAc/水稀释，且经由GF/F滤纸过滤。用EtOAc萃取滤液，萃取物经硫酸钠干燥且减压浓缩。快速色谱法纯化，得到7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-4-氮杂螺[2.5]辛-6-烯-4-甲酸叔丁酯(557mg，80％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.54(s,1H),4.07-4.00(m,2H),2.14(s,2H),1.44(s,9H),1.26(d,J＝1.5Hz,12H),0.90-0.82(m,2H),0.66-0.58(m,2H)。

中间体实施例T

4,6-二氯-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶

步骤A：向装备有搅拌棒的125mL圆底烧瓶中装入3-氨基-6-氯-5-甲氧基吡啶甲酸(4.9g，24mmol)及甲酰胺(31mL)。将混合物加热至150℃后保持30小时。用水稀释反应物，且经由真空过滤收集固体。固体用水、乙酸乙酯洗涤，且在100℃下高真空干燥过夜，得到6-氯-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-醇(3.6g，70％)，其以粗物质形式继续进行反应。m/z(APCI-正)M⁺1＝212.1。

步骤B：在装备有搅拌棒的25mL圆底烧瓶中，将6-氯-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-醇(0.28g，1.3mmol)及Hunig氏碱(Hunig'sbase)(0.34g，2.7mmol)添加至POCl₃(6.6mL，1.32mmol)中。将混合物加热至110℃后保持2.5小时，接着真空浓缩，且用EtOAc稀释。有机物用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次，经Na₂SO₄干燥，过滤且真空浓缩。物质通过柱层析(0至40％EtOAc/庚烷)纯化，得到4,6-二氯-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶(0.16g，53％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝230.1。

中间体实施例U

4-氯-7-甲氧基-6-(甲硫基)吡啶并[3,2-d]嘧啶

在装备有搅拌棒的50mL回收烧瓶中装入Hunig氏碱(0.78mL，4.5mmol)、7-甲氧基-6-(甲硫基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-醇(0.50g，2.2mmol)及POCl₃(11mL，2.2mmol)。混合物装备有冷水冷凝器，且将其加热至110℃后保持1.5小时。真空移除挥发物，且在乙酸乙酯中产生混合物。有机物用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤3次，经硫酸钠干燥，且真空浓缩。粗残余物经由24g硅胶滤筒纯化，用0％至20％EtOAc/庚烷梯度洗脱，得到4-氯-7-甲氧基-6-(甲硫基)吡啶并[3,2-d]嘧啶(0.30g，56％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝242.1。

中间体实施例V

4,6,7-三氯吡啶并[3,2-d]嘧啶

以中间体实施例T的方式，在步骤A中用3-氨基-5,6-二氯吡啶甲酸代替3-氨基-6-氯-5-甲氧基吡啶甲酸来合成，得到4,6,7-三氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(50mg，13％)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.12(s,1H),8.48(s,1H)。

中间体实施例W

6-氯-N-(3-氯-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺

步骤A：在65℃下将3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-醇(431mg，1当量，2.89mmol)添加至2-氯-1-氟-4-硝基苯(507mg，1当量，2.89mmol)及Cs₂CO₃(1.88g，2当量，5.78mmol)于DMSO(29mL)中的经搅拌溶液中后保持16小时，接着使其冷却至室温。将反应物在水与EtOAc之间分配。有机层用水/盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到6-(2-氯-4-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(756mg，86％)。m/z(APCI-正)M+1＝305.20。

步骤B：将锌(1.62g，10当量，24.8mmol)添加至6-(2-氯-4-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(756mg，1当量，2.48mmol)及饱和氯化铵(12mL)溶液于THF(12mL)中的经搅拌溶液中。将此混合物在室温下搅拌16小时。将反应物在水与EtOAc之间分配，且经由GF/F滤纸过滤。滤液用EtOAc萃取，经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到3-氯-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺(127mg，19％)。m/z(APCI-正)M+1＝275.20。

步骤C：将3-氯-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺(55mg，1当量，0.20mmol)添加至4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(40mg，1当量，0.20mmol)于2-丙醇(2mL)中的经搅拌溶液中。将此混合物升温至65℃后保持3小时，接着使其冷却至室温。混合物用DCM稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到6-氯-N-(3-氯-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(77.5mg，88％)。m/z(APCI-正)M+1＝438.1。

中间体实施例X

5-氯-2-氟-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯胺

步骤A：向1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-醇(5.00g，33.8mmol)及1-氯-2,4-二氟-5-硝基苯(7.82g，40.5mmol)于ACN(50mL)中的经搅拌溶液中添加DIPEA(17.62mL，101.4mmol)，且在室温下搅拌48小时。过滤反应混合物，且残余物用二乙醚洗涤，接着用EtOAc萃取。有机相用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，得到呈固体状的纯5-(2-氯-5-氟-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(2.90gm，27％产率)。m/z(esi)M+1＝322.02。

步骤B：在0℃下向5-(2-氯-5-氟-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(3.5g，10.90mmol)于THF:H₂O(4:1；35mL)中的混合物中添加Zn(6.11g，109mmol)及NH₄Cl(5.83g，109mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时。反应混合物通过EtOAc稀释，经由垫过滤，滤液用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，减压浓缩，得到呈固体状的5-氯-2-氟-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯胺(1.8g，57％产率)。通过HMBC确认化合物的结构。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.16(s,1H),7.52(d,J＝8.7Hz,1H),7.00(d,J＝2.0Hz,1H),6.98-6.88(m,3H),5.29(d,J＝7.1Hz,2H),3.82(s,3H)。m/z(esi)M+1＝292.18。

中间体实施例Y

3-氯-2-氟-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯胺

步骤A：将碳酸铯(776mg，2.38mmol)添加至2,3-二氯-1-氟-4-硝基苯(250mg，1.19mmol)及1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-醇(176mg，1.19mmol)于DMA(11.9mL)中的经搅拌溶液中。使混合物升温至80℃且搅拌2小时，之后将其冷却至室温。将反应物在H₂O与EtOAc之间分配。有机层用H₂O及盐水(2×)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩。粗残余物经由柱层析纯化，用10％MeOH/CH₂Cl₂洗脱，得到5-(2,3-二氯-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(299mg)。m/z(APCI-正)M+1＝338.00。

步骤B：在烘干的小瓶中，在氮气下将5-(2,3-二氯-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(200mg，591μmol)及氟化铯(359mg，2.37mmol)悬浮于无水DMF中。将反应混合物在100℃下搅拌4小时，之后将其冷却至室温。用氯仿稀释反应物，且滤出固体。滤液用NaHCO₃及H₂O洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且浓缩。粗残余物经由柱层析纯化，用1至8％(MeOH/CH₂Cl₂)梯度洗脱，得到5-(2-氯-3-氟-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(95.8mg)。m/z(esi)M+1322.0。

步骤C：将皮尔曼氏催化剂(Pearlman's catalyst)(13mg)添加至5-(2-氯-3-氟-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(30mg，93μmol)于甲醇(0.93mL)中的经搅拌溶液中。使反应混合物在45℃下经受氢气气球1小时。混合物用氮气吹扫，用甲醇稀释，且经由过滤，得到3-氯-2-氟-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯胺(27mg)。m/z(APCI-正)M+1＝292.05。

中间体实施例Z

4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-5-氯-2-氟苯胺

步骤A：向[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-醇(10g，51.82mmol)及1-氯-2,4-二氟-5-硝基苯(7gm，51.82mmol)于DMF(50mL)中的经搅拌溶液中添加DIPEA(27mL，155.46mmol)，且在25℃下搅拌7小时。反应完成后，将其用EtOAc稀释，且用水、盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(0-20％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的7-(2-氯-5-氟-4-硝基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶化合物及7-(4-氯-5-氟-2-硝基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶的混合物(11.0gm，69％产率)。m/z(esi)M+1＝309.0。

步骤B：向7-(2-氯-5-氟-4-硝基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶及7-(4-氯-5-氟-2-硝基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(11g，35.71mmol)于THF:H₂O(120mL)中的经搅拌溶液中添加Zn粉尘(23.21g，357.13mmol)及NH₄Cl(19.10g，357.13mmol)，且将反应物在室温下搅拌2小时。反应完成后，其经由床过滤，且滤液用水洗涤且使用EtOAc萃取。有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(20-65％EtOAc/己烷)纯化，接着通过硅胶柱层析(0-1.5MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-5-氯-2-氟苯胺(4.60g，63％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.90(d,J＝7.2Hz,1H),8.39(s,1H),7.27(d,J＝11.4Hz,1H),7.03-6.94(m,2H),6.82(d,J＝2.4Hz,1H),5.52(d,J＝6.2Hz,2H)。m/z(esi)M+1＝279.15。

中间体实施例AB

2-氟-4-((7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)-5-甲基苯胺

步骤A：在密封圆底烧瓶中，向5-溴-1,2-二氟-3-硝基苯(8g，33.61mmol)及甲胺(84.04mL，168.07mmol)于THF(15mL)中的经搅拌溶液中添加DIPEA(11.71mL，67.23mmol)，且将混合物在60℃下搅拌16小时。完成后，浓缩反应混合物，得到呈固体状的4-溴-2-氟-N-甲基-6-硝基苯胺(7.1g，85％产率)。

步骤B：向4-溴-2-氟-N-甲基-6-硝基苯胺(5.1g，20.47mmol)于THF(42mL)及H₂O(8mL)中的经搅拌溶液中添加Zn粉(13.38g，204.78mmol)及NH₄Cl(10.95g，204.78mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。完成后，反应混合物经由垫过滤且用EtOAc洗涤。分离滤液的有机层，且经无水Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(1％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的4-溴-6-氟-N1-甲基苯-1,2-二胺(3.8g，85％产率)。m/z(esi)M+1＝219.1。

步骤C：在氩气下将原甲酸乙酯(6.83mL，41.08mmol)及PTSA(35mg，0.20mmol)添加至4-溴-6-氟-N1-甲基苯-1,2-二胺(4.5g，20.54mmol)于甲苯(50mL)中的混合物中，且将所得溶液在回流下加热2小时。浓缩经冷却的反应混合物，且残余物通过硅胶柱层析(1％MeOH-DCM)纯化，得到呈固体状的5-溴-7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(3.8g，82％产率)。m/z(esi)M+1＝229.2。

步骤D：向5-溴-7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑(6.5g，28.37mmol)及4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼戊烷)(14.41g，56.75mmol)于二噁烷(80mL)中的经搅拌溶液中添加KOAc(5.57g，56.75mmol)，且使其在氩气氛围下脱气5分钟。最后，添加Pd(dppf)Cl₂.DCM(3.47g，4.25mmol)，再脱气5分钟，且在90℃下加热5小时。完成后，反应混合物经由垫过滤，且浓缩滤液。粗物质用EtOAc稀释，且用水、接着用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗物质通过硅胶柱层析(1％MeOH-DCM)纯化，得到呈固体状的7-氟-1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(5.9g，75％产率)。m/z(esi)M+1＝276.9。

步骤E：向7-氟-1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-1H-苯并[d]咪唑(5.5g，19.91mmol)于THF/H₂O(1:1)(100mL)中的经搅拌溶液中添加过硼酸钠四水合物(15.32g，99.59mmol)，且将反应混合物在室温下搅拌4小时。完成后，浓缩反应混合物。将粗物质溶解于乙酸乙酯中，且用水、接着用饱和氯化钠水溶液洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-醇(3.0g粗物质)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。

步骤F：向7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-醇(4.5g，27.08mmol)及1,5-二氟-2-甲基-4-硝基苯(4.65g，29.79mmol)于DMSO(50mL)中的经搅拌溶液中添加K₂CO₃(11.21g，81.24mmol)，且在室温下搅拌4小时。反应完成后，将其用EtOAc稀释，用水、接着用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗物质通过硅胶柱层析(1％MeOH-DCM)纯化，得到呈固体状的7-氟-5-(5-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑及另一位置异构体的混合物(7.2g，异构体混合物)。m/z(esi)M+1＝319.8.

步骤G：向7-氟-5-(5-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑及另一位置异构体(异构体混合物)(250mg，0.78mmol)于THF(4mL)及H₂O(1mL)中的经搅拌溶液中添加Zn粉(510.33mg，7.80mmol)、NH₄Cl(417.52mg，7.80mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。完成后，反应混合物经由垫过滤且用EtOAc洗涤。分离有机层，经无水Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗物质通过反相制备型HPLC(30-95％ACN:水(20mM碳酸氢铵))纯化，得到呈固体状的2-氟-4-((7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)-5-甲基苯胺(50mg，2个步骤的产率22％)。¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.18(s,1H),6.79(dd,J1＝1.84Hz,J2＝12.36Hz,1H),6.69(d,J＝9.8Hz,1H),6.53-6.49(m,2H),4.05(s,3H),1.91(s,3H)。m/z(esi)M+1＝289.8。

中间体实施例AC

2-氟-4-((7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)-3-甲基苯胺

步骤A：在密封管中向7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-醇(200mg，1.35mmol)及1,3-二氟-2-甲基-4-硝基苯(261mg，1.35mmol)于DMSO(10mL)中的经搅拌溶液中添加K₂CO₃(373mg，2.70mmol)，且在室温下搅拌2小时。反应完成后，将其用EtOAc稀释，且用水、接着用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(0-22％EtOAc/己烷)纯化，得到7-氟-5-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑以及另一位置异构体。¹H NMR及LC/MS显示物质为两种位置异构体的混合物。不经进一步纯化即进行至下一步骤，呈固体状的(300mg，异构体混合物)。m/z(esi)M+1＝319.9。

步骤B：向7-氟-5-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑以及另一位置异构体(300mg，0.94mmol)于THF:H₂O(4:1)(5mL)中的经搅拌溶液中添加Zn粉尘(611.15mg，9.40mmol)及NH₄Cl(502.93mg，9.40mmol)，且将反应物在25℃下搅拌2小时。反应完成后，其经由床过滤，且用EtOAc洗涤滤液。滤液的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过反相层析利用制备型HPLC(Xterra C18(250×19mm，10μ)，30-95％ACN:水(20mM碳酸氢铵)，16mL/min)纯化，得到呈固体状的2-氟-4-((7-氟-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)-3-甲基苯胺(70mg，2个步骤的产率26％)。通过HMBC确认需要的异构体的结构。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.13(s,1H),6.80-6.57(m,4H),4.97(d,J＝8.6Hz,2H),3.93(s,3H),2.00(s,3H)。m/z(esi)M+1＝290.1。

中间体实施例AD

3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺

步骤A：在密封管中合并3-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(2.5g，9.65mmol)、过硼酸钠四水合物(7.42g，48.24mmol)、THF(36mL)及水(36mL)，得到溶液。将反应物在25℃下搅拌4小时，接着浓缩。将所得粗物质溶解于乙酸乙酯中，且用水、接着用饱和氯化钠水溶液洗涤。有机层经硫酸钠干燥，过滤且浓缩，得到3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-醇(300mg)。接着将水层浓缩至干燥，且所得固体用四氢呋喃处理且剧烈搅拌3小时。接着过滤混合物，得到额外的3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-醇(1g)。此物质不经进一步纯化即用于下一步骤中。呈固体状的(1.3g，粗物质)。m/z(esi)M+1＝150.0。

步骤B：向1-氟-2-甲基-4-硝基苯(1.5g，9.68mmol)及3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-醇(1.44g，9.68mmol)于DMSO(10mL)中的经搅拌溶液中添加K₂CO₃(4.01g，29.03mmol)，且在80℃下搅拌4小时。反应完成后，将其用EtOAc稀释，且用水、接着用盐水洗涤，随后经Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗物质通过硅胶柱层析(0-20％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的3-甲基-6-(2-甲基-4-硝基苯氧基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(1.8g，65％产率，2个步骤)。m/z(esi)M+1＝285.0。

步骤C：向3-甲基-6-(2-甲基-4-硝基苯氧基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(2g，7.04mmol)于THF:H₂O(4:1)(30mL)中的经搅拌溶液中添加Zn粉尘(4.58g，70.42mmol)及NH₄Cl(3.77mg，70.42mmol)，且将反应物在室温下搅拌2小时。反应完成后，其经由床过滤，且用EtOAc及水洗涤滤液的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗物质通过硅胶柱层析(1-2％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺(1.6g，89％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.36(s,1H),8.12(d,J＝2.1Hz,1H),7.30(d,J＝2.2Hz,1H),6.68(d,J＝8.4Hz,1H),6.50(d,J＝1.6Hz,1H),6.42(dd,J＝2.6,8.5Hz,1H),4.93(s,2H),3.81(s,3H),2.02(s,3H)。m/z(esi)M+1＝255。

中间体实施例AE

2-氟-5-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺

步骤A：向3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-醇(2g，13.42mmol)及1,5-二氟-2-甲基-4-硝基苯(2.32g，13.42mmol)于DMSO(20mL)中的经搅拌溶液中添加K₂CO₃(5.55g)，且在室温下搅拌4小时。反应完成后，将其用EtOAc稀释，且用水、接着用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(1-2％MeOH/DCM)纯化，得到6-(5-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶以及另一位置异构体。¹H NMR及LCMS显示物质为两种位置异构体的混合物。不经进一步纯化即进行至下一步骤。呈胶状物的(3g，异构体混合物)。m/z(esi)M+1＝303.0。

步骤B：向6-(5-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶以及另一位置异构体(6g，19.86mmol)于THF:H₂O(4:1)(80mL)中的经搅拌溶液中添加Zn粉尘(12.9g，198.67mmol)及NH₄Cl(10.62g，198.67mmol)，且将反应物在25℃下搅拌2小时。反应完成后，其经由床过滤，且用EtOAc洗涤滤液的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶combiflash(0.5-1％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的2-氟-5-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺(3.9g，2个步骤的产率72％)。通过HMBC确认需要的异构体的结构。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.39(s,1H),8.14(d,J＝1.9Hz,1H),7.40(d,J＝1.9Hz,1H),6.71(dd,J＝6.7,11.0Hz,2H),4.97(s,2H),3.82(s,3H),2.03(s,3H)。m/z(esi)M+1＝273.2。

中间体实施例AF

2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺

步骤A：向3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-醇(7.7g，51.68mmol)及1,3-二氟-2-甲基-4-硝基苯(9.77g，51.68mmol)于DMSO(60mL)中的经搅拌溶液中添加K₂CO₃(14.26g，103.35mmol)，且在室温下搅拌16小时。完成后，反应混合物用EtOAc稀释，用冷水、接着用盐水洗涤。有机部分经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩，得到粗物质，其通过硅胶柱层析(0-1％MeOH-DCM)纯化，得到呈固体状的6-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(10g，两种位置异构体的混合物)。m/z(esi)M+1＝302.8。

步骤B：在0℃下向6-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(两种位置异构体的混合物)(9.5g，31.46mmol)于THF:H₂O(5:1)(120mL)中的经搅拌溶液中添加Zn(21.4g，314.5mmol)及NH₄Cl(16.98g，314.5mmol)，且在室温下搅拌2小时。完成后，反应混合物经由烧结漏斗过滤且用EtOAc洗涤。用水洗涤滤液，且分离有机层且经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗物质通过制备型SFC(50％CO₂+50％(MEOH)，60g/min)纯化，得到呈固体状的2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺(1.5g，2个步骤11％)。m/z(esi)M+1＝273.1。(注意：通过HMBC确认结构)

中间体实施例AG

N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺

将4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯胺(0.302g，1.17mmol)及4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(257mg，1.29mmol)于IPA(11.7mL)中的混合物加热至70℃，将其搅拌4小时。接着将混合物冷却至环境温度，且用水及饱和NaHCO₃水溶液稀释。通过真空过滤分离所得固体。接着将固体溶解于CH₂Cl₂中，且经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物接着经由柱层析(1-5％MeOH/CHCl₃)纯化，得到呈固体状的所要产物(466mg，94％)。m/z(APCI-正)M+1＝422.1。

使用与中间体实施例AG所采用的方法类似的方法，使用适当中间体来制备表1中的化合物。

表1

中间体实施例AY

4-(苯并[d]噻唑-5-基氧基)-3-甲基苯胺

步骤A：向装备有搅拌棒的250mL圆底烧瓶中装入1-氟-2-甲基-4-硝基苯(1.710g，11mmol)、苯并[d]噻唑-5-醇(2.000g，13.23mmol)、碳酸钾(3.047g，22mmol)及DMSO(26mL)。在环境温度下搅拌2小时后，用水淬灭反应物。用EtOAc萃取反应混合物两次。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，且浓缩成固体。粗物质通过硅胶层析(0至8％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的产物5-(2-甲基-4-硝基苯氧基)苯并[d]噻唑(2.7522g，87％)。m/z(esi)M+1＝287.1。

步骤B：向500mL圆底烧瓶中装入5-(2-甲基-4-硝基苯氧基)苯并[d]噻唑(2.7522g，9.6mmol)、饱和氯化铵水溶液(2.7mL)及THF(48mL)。将反应混合物冷却至0℃，且一次性添加锌(6.285g，96.1mmol)。5分钟后，自冰浴移出烧瓶，且在环境温度下搅拌24小时。反应混合物经由GF/F滤纸过滤。用EtOAc洗涤过滤垫若干次。收集合并的有机层，且用水及盐水洗涤。有机层经MgSO₄干燥，过滤，且浓缩成稠油状物。粗物质通过硅胶层析(10至60％EtOAc/正庚烷)纯化，得到4-(苯并[d]噻唑-5-基氧基)-3-甲基苯胺(1.7099g，69％)。m/z(esi)M+1＝257.1。

中间体实施例AZ

3-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺

步骤A：向250mL圆底烧瓶中装入2-氯-1,3-二氟-4-硝基苯(882mg，4.56mmol)、碳酸铯(2.97g，9.12mmol)及DMSO(23mL)。一次性添加3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-醇(0.680g，4.56mmol)。将反应混合物在环境温度下搅拌17小时。通过添加水(150mL)来淬灭混合物。用EtOAc(50mL)萃取混合物三次。合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，且浓缩成稠油状物。粗物质通过硅胶柱层析(0至8％MeOH/DCM)纯化，得到位置异构体6-(2-氯-3-氟-4-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶及6-(2-氯-3-氟-6-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶的混合物(1.059g，72％)。m/z(esi)M+1＝323.1。

步骤B：将来自步骤A的混合物(1.059g)装入250mL烧瓶中。添加THF(16mL)及饱和氯化铵水溶液(1mL)。在环境温度下一次性添加锌(2.146g，33mmol)。搅拌17小时后，经由GF/F滤纸过滤反应混合物。用EtOAc洗涤过滤垫若干次。收集有机层，且用盐水(25mL)洗涤，经MgSO₄干燥且浓缩。粗物质进行硅胶层析(0至5％MeOH/EtOAc)。混合级分通过第二轮硅胶层析(0至15％MeOH/EtOAc)进一步纯化，得到产物3-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺(32.6mg，3％)。m/z(esi)M+1＝293.1。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.31(d,J＝2.5Hz,1H),8.13(s,1H),7.52(d,J＝2.6Hz,1H),6.76-6.61(m,2H),4.39(br s,2H),3.93(s,3H)。

中间体实施例BA

N-(4-(苯并[d]噻唑-5-基氧基)-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺

将4-(苯并[d]噻唑-5-基氧基)-3-甲基苯胺(449mg，1.75mmol)及4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(350mg，1.75mmol)于IPA(8.75mL)中的混合物加热至70℃，将其搅拌75分钟。接着将混合物冷却至环境温度，且减压移除挥发物。所得固体通过硅胶层析(0至16％MeOH/DCM)纯化，得到固体N-(4-(苯并[d]噻唑-5-基氧基)-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(547mg，74％)。m/z(APCI-正)M+1＝420.1。

实施例1

1-(4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯胺(80mg，0.33mmol)于异丙醇(3.0mL)中的经搅拌溶液中添加4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(93.45mg，0.47mmol)，且使反应混合物在85℃下回流1小时。完成后，将反应混合物蒸发至干燥，得到粗产物。用正戊烷洗涤粗产物，得到呈固体状的N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺，其不经进一步纯化即用于下一步骤。m/z(esi)M⁺1＝404.0。

步骤B：将氢化钠(于矿物油中的60％分散液)(57mg，1.42mmol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(286.58mg，1.42mmol)于DMA(0.5mL)中的经搅拌溶液中，且将反应混合物在N₂氛围下在室温下搅拌15分钟。将N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(230mg，0.57mmol)添加至反应混合物中，且将反应混合物在120℃下搅拌3小时。反应完成后，将反应混合物溶解于EtOAc中，且用冷水、接着用盐水洗涤。有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，且粗产物通过硅胶柱层析(0-1％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(250mg，三个步骤的产率57％)。m/z(esi)M⁺1＝569.4。

步骤C：在0℃下将含HCl(4M)的1,4-二噁烷(2.5mL)添加至4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.35mmol)于DCM(2.5mL)中的经搅拌溶液中。接着使反应混合物升温至环境温度，且搅拌1小时。将反应混合物减压蒸发至干燥，且用正戊烷洗涤，得到呈固体状的N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。m/z(esi)M⁺1-HCl＝469.4。

步骤D：在0℃下将DIPEA(0.13mL,0.45mmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(190mg，0.38mmol)于DMF(1mL)中的经搅拌溶液中，且搅拌反应混合物2分钟。接着在0℃下将丙烯酸(0.03mL，0.42mmol)及T₃P(50％于EtOAc中)(0.3mL，0.45mmol)添加至反应混合物，且将混合物在0℃下搅拌1小时。接着用水淬灭反应混合物。接着减压蒸发，且粗产物通过反相制备型HPLC(20-95％ACN:H₂O(20mM碳酸氢铵))纯化，得到呈粘性固体状的1-(4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(19.95mg，2个步骤的产率11％)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.51(s,1H),8.95(d,J＝7.5Hz,1H),8.59(s,1H),8.38(s,1H),8.13(d,J＝9.0Hz,1H),7.99-7.88(m,2H),7.38(d,J＝9.0Hz,1H),7.26(d,J＝8.6Hz,1H),7.04(dd,J＝2.6,7.5Hz,1H),6.87(dd,J＝10.5,16.7Hz,1H),6.79(d,J＝2.6Hz,1H),6.13(dd,J＝2.5,16.7Hz,1H),5.94-5.83(m,1H),5.69(dd,J＝2.5,10.4Hz,1H),4.10-3.78(m,2H),3.70-3.43(m,2H),2.21(s,3H),2.17-2.02(m,2H),1.81-1.62(m,2H)；m/z(esi)M⁺1＝523.2。

实施例2

1-(4-((4-((2,5-二氯-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在室温下将1,4-二氯-2-氟-5-硝基苯(282.4mg，1.35mmol)及K₂CO₃(559.5mg，4.05mmol)添加至2-甲基-2H-吲唑-6-醇(200mg，1.35mmol)于THF(3mL)及DMSO(1.5mL)中的经搅拌溶液中，接着使其升温至80℃，将其搅拌16小时。反应混合物用EtOAc稀释且用水洗涤。有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(50％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的6-(2,5-二氯-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(410mg，90％产率)。m/z(esi)M⁺1＝337.8。

步骤B：在室温下将NH₄Cl(666.8mg，12.46mmol)添加至6-(2,5-二氯-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(420mg，1.25mmol)于THF:H₂O(5:1)(10mL)中的经搅拌溶液中。添加Zn粉尘(815.1mg，12.46mmol)，且将混合物在相同温度下搅拌15分钟。完成后，反应混合物经由床过滤，且减压浓缩滤液。将粗残余物溶解于水及CH₂Cl₂中，且用CH₂Cl₂萃取混合物。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，得到呈固体状的粗物质2,5-二氯-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(335mg，粗物质)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。m/z(esi)M+1＝308.0。

步骤C：将2,5-二氯-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(45mg，0.15mmol)及4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(40.84mg，0.21mmol)于异丙醇(1mL)中的经搅拌溶液加热至80℃，且搅拌1小时。减压蒸发溶剂，且粗产物通过硅胶柱层析(2％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的6-氯-N-(2,5-二氯-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(60mg，87％产率)。m/z(esi)M⁺1＝292.0。

步骤D：在0℃下将NaH(于矿物油中的60％分散液)(20.39mg，0.53mmol)添加至6-氯-N-(2,5-二氯-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.21mmol)及4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(85.53mg，0.43mmol)于DMA(2mL)中的经搅拌溶液中。将混合物在0℃下搅拌10分钟，接着在130℃下搅拌16小时。将混合物冷却至环境温度，用EtOAc稀释，且用水洗涤。有机部分经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，得到粗产物，其通过硅胶柱层析(0-5％MeOH/DCM)纯化，得到呈粘性物质的4-((4-((2,5-二氯-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(90mg，66％产率)。m/z(esi)M^-1＝649.4。

步骤E：在0℃下将含HCl(4N)的1,4-二噁烷(2mL)添加至4-((4-((2,5-二氯-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(90mg，0.14mmol)于DCM(2mL)中的经搅拌溶液中，且搅拌2小时。减压蒸发溶剂，得到粗产物N-(2,5-二氯-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。m/z(esi)M⁺1-HCl＝549.0。

步骤F：在0℃下将DIPEA(0.05mL，0.28mmol)添加至N-(2,5-二氯-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(81mg，0.14mmol)于DMF(1mL)中的经搅拌溶液中，接着添加丙烯酸(0.011mL，0.16mmol)及T₃P(50％于EtOAc中)(0.1mL，0.17mmol)。将混合物在相同温度下搅拌1小时。接着用EtOAc稀释且用水洗涤。有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，得到粗产物，其通过反相制备型HPLC(40-95％ACN:水(20mM碳酸氢铵))纯化，得到呈固体状的1-(4-((4-((2,5-二氯-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(8mg，2个步骤10％)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.51(s,1H),8.88(s,1H),8.70(s,1H),8.36(s,1H),8.20(d,J＝9.2Hz,1H),7.78(d,J＝8.9Hz,1H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),6.97(s,1H),6.92-6.80(m,2H),6.11(dd,J＝2.5,16.7Hz,1H),5.68(dd,J＝2.5,10.5Hz,1H),5.56-5.47(m,1H),4.13(s,3H),4.08-3.99(m,1H),3.99-3.89(m,1H),3.55-3.44(m,1H),3.41-3.35(m,1H),2.25-2.10(m,2H),1.83-1.63(m,2H)；m/z(esi)M⁺1＝590.1。

实施例3

1-(4-((4-((3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(154mg，0.77mmol)添加至3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(150mg，0.59mmol)于异丙醇(5mL)中的经搅拌溶液中，且将混合物在80℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，且粗产物通过硅胶柱层析(2％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的6-氯-N-(3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(230mg，92％产率)。m/z(esi)M⁺1＝417.0。

步骤B：将NaH(60wt％于石蜡中)(40mg，0.96mmol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(193mg，0.96mmol)于DMA(5mL)中的经搅拌溶液中，且将混合物在室温下搅拌10分钟。添加6-氯-N-(3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(200mg，0.48mmol)，且将混合物在130℃下搅拌16小时。反应混合物用水稀释且用EtOAc萃取。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(2％MeOH-DCM)纯化，得到呈固体状的4-((4-((3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(130mg，46％产率)。m/z(esi)M⁺1＝582.0。

步骤C：在0℃下将含HCl(4M)的1,4-二噁烷(3mL)添加至4-((4-((3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(120mg，0.20mmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中，且将混合物在室温下搅拌1小时。接着将反应混合物浓缩至干燥，且粗产物用Et₂O湿磨，得到呈固体状的N-(3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(105mg，粗物质)。m/z(esi)M⁺1-HCl＝482.0。

步骤D：在0℃下将DIPEA(0.33mL，1.80mmol)添加至N-(3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(100mg，0.18mmol)于DCM(2mL)中的经搅拌溶液中，接着添加含丙烯酰氯(16mg，0.18mmol)的DCM(0.2mL)，且将混合物在0℃下搅拌1小时。反应混合物用冰淬灭且减压浓缩。粗产物通过反相制备型HPLC(30-75％ACN:水(20mM碳酸氢铵)，16mL/min)纯化，得到呈固体状的1-(4-((4-((3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(30mg，2个步骤的产率31％)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.45(s,1H),8.55(s,1H),8.29(s,1H),8.11(d,J＝9.0Hz,1H),7.83(s,1H),7.79(dd,J＝2.6,8.6Hz,1H),7.71(d,J＝9.0Hz,1H),7.36(d,J＝9.0Hz,1H),7.05(d,J＝8.6Hz,1H),6.92-6.80(m,2H),6.71(d,J＝2.0Hz,1H),6.12(dd,J＝2.5,16.7Hz,1H),5.91-5.82(m,1H),5.69(dd,J＝2.5,10.5Hz,1H),4.09(s,3H),4.03-3.79(m,2H),3.68-3.41(m,2H),2.23(s,3H),2.17-2.01(m,2H),1.80-1.60(m,2H)；m/z(esi)M⁺1＝536.3。

实施例4

1-(4-((4-((5-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将1-氯-2,4-二氟-5-硝基苯(652mg，3.37mmol)及K₂CO₃(933mg，6.74mmol)添加至2-甲基-2H-吲唑-6-醇(500mg，3.37mmol)于DMSO(15mL)中的经搅拌溶液中，且将混合物加热至80℃并搅拌1小时。添加水，且用乙酸乙酯萃取混合物。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(50％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的两种异构体6-(2-氯-5-氟-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑及6-(4-氯-5-氟-2-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑的混合物(600mg)，其直接用于下一步骤中。m/z(esi)M⁺1＝322。

步骤B：在0℃下将氯化铵(711mg，11mmol)及Zn粉(608mg，11mmol)添加至6-(2-氯-5-氟-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑及6-(4-氯-5-氟-2-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(350mg，1.08mmol)于两相溶剂THF/水(3:1)中的混合物中。接着将反应混合物在室温下搅拌1小时。混合物经由过滤且用DCM洗涤，且减压浓缩滤液，得到粗残余物。将残余物溶解于DCM中且用水洗涤。有机层用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，且过滤。减压蒸发溶剂。粗产物通过制备型HPLC(SFC)(NP)纯化，得到呈固体状的需要的化合物5-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(120mg，38％)。m/z(esi)M⁺1＝291.8。

步骤C：将4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(75mg，0.4mmol)添加至5-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(100mg，0.34mmol)于IPA(4mL)中的经搅拌溶液中，且将反应混合物在80℃下加热1小时。接着蒸发溶剂，且粗混合物经由硅胶柱层析(1％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的6-氯-N-(5-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(130mg，83％产率)。m/z(esi)M⁺1＝455.1。

步骤D：将t-BuOK(220mg，1.97mmol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(442mg，2.2mmol)于DMSO(2mL)中的溶液中，且搅拌30分钟。添加6-氯-N-(5-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.22mmol)，且将混合物加热至100℃并搅拌1.5小时。混合物用水稀释且用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。有机层用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥且过滤，且减压蒸发溶剂。粗产物通过硅胶柱层析(90％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的4-((4-((5-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(85mg，62％产率)。m/z(esi)M⁺1＝620.3。

步骤E：在0℃下将含HCl(4M)的1,4-二噁烷(3mL)添加至4-((4-((5-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(60.0mg，0.09mmol)于DCM(2mL)中的经搅拌溶液中，且接着使混合物升温至室温并搅拌1小时。浓缩反应混合物，且粗固体用Et₂O湿磨，得到呈固体状的N-(5-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(70mg，粗物质)。m/z(esi)M⁺1-HCl＝520.4。

步骤F：在0℃下将DIPEA(0.2mL，1.44mmol)添加至N-(5-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(80mg，0.144mmol)于DCM(2mL)中的经搅拌溶液中，接着添加丙烯酰氯(13mg，0.144mmol)，且将混合物在0℃下搅拌3小时。浓缩反应混合物，且粗产物通过反相制备型HPLC(30-95％ACN:水(20mM碳酸氢铵)，16mL/min)纯化，得到呈固体状的1-(4-((4-((5-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(20mg，20％)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.44(s,1H),8.58(s,1H),8.36(s,1H),8.30(d,J＝8.0Hz,1H),8.15(d,J＝9.0Hz,1H),7.79(d,J＝9.0Hz,1H),7.40(d,J＝9.0Hz,1H),7.25(d,J＝11.0Hz,1H),6.98(d,J＝2.1Hz,1H),6.92-6.80(m,2H),6.12(dd,J＝2.5,16.7Hz,1H),5.74-5.60(m,2H),4.13(s,3H),4.08-3.87(m,2H),3.60-3.45(m,1H),3.45-3.34(m,1H),2.22-2.01(m,2H),1.80-1.62(m,2H)；m/z(esi)M⁺1＝574.1。

实施例5

1-(4-((4-((2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将K₂CO₃(431mg，3.12mmol)添加至1,5-二氟-2-甲基-4-硝基苯(180.0mg，1.04mmol)、2-甲基-2H-吲唑-6-醇(154.03mg，1.04mmol)于DMSO(2mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在室温下搅拌16小时。混合物用EtOAc稀释，用水、接着用盐水洗涤，随后浓缩。将粗产物与另一批通过相同方法获得的粗产物(60mg化合物1,5-二氟-2-甲基-4-硝基苯)混合，且通过硅胶柱层析(50-55％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的6-(5-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(347mg，83％产率)。分离的化合物含有两种可能的异构体。m/z(esi)M⁺1＝302.2。

步骤B：在0℃下将Zn粉尘(577.44mg，8.83mmol)添加至6-(5-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(以及另一异构体)(266.0mg，0.883mmol)于THF(3mL)及水(0.6mL)中的经搅拌溶液中，接着添加NH₄Cl(472.37mg，8.829mmol)。接着将混合物在室温下搅拌1小时。反应混合物经由垫过滤，且减压浓缩滤液，得到粗产物，将其与另一批料(50mg化合物6-(5-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑)混合。合并的物质通过制备型HPLC SFC(Chiralpak IG(250×21mm)5μ55％CO₂+45％(含0.3％异丙胺的甲醇)，25g/min，ABPR：110巴，温度：35℃)纯化，得到呈半固体状的需要的异构体2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(210mg，69％产率)。通过HMBC确认化合物的结构。m/z(esi)M⁺1＝272.4。

步骤C：将4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(119.44mg，0.597mmol)添加至2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(162mg，0.597mmol)于IPA(3mL)中的经搅拌溶液中，且接着将混合物在90℃下搅拌1小时。浓缩反应混合物，且粗产物通过硅胶柱层析(0-10％MeOH/DCM)纯化，得到呈半固体状的6-氯-N-(2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(258mg，99％产率)。m/z(esi)M⁺1＝435.2。

步骤D：在惰性氛围下在0℃下将NaH(60％于矿物油中，24mg，0.575mmol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(115.71mg，0.575mmol)于DMA(1mL)中的经搅拌溶液中。使混合物升温至环境温度，且搅拌15分钟。将6-氯-N-(2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(100.0mg，0.23mmol)添加至溶液中，且将反应混合物在140℃下搅拌5小时。将反应混合物冷却至室温且用EtOAc稀释。混合物用水、接着用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，且减压浓缩，得到粗产物。粗物质通过硅胶柱层析(2-3％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的4-((4-((2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(110mg，80％产率)。m/z(esi)M⁺1＝600.2。

步骤E：在0℃下将含HCl(4M)的1,4-二噁烷(3mL)添加至4-((4-((2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(110.0mg，0.184mmol)于DCM(3mL)中的经搅拌溶液中，且将混合物在0℃下搅拌1小时。减压浓缩混合物，得到呈固体状的N-(2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(91mg，粗物质)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。m/z(esi)M⁺1＝500.4。

步骤F：在0℃下将DIPEA(0.08mL，0.48mmol)添加至N-(2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(80.0mg，0.16mmol)及丙烯酸(12.69mg，0.176mmol)于DMF(1mL)中的经搅拌溶液中，接着添加T₃P(50％于EtOAc中)(0.06mL，0.192mmol)，且搅拌混合物1小时。混合物接着用EtOAc稀释，且用水、接着用盐水洗涤。混合物经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，得到粗产物，将其与另一批料(90mg化合物N-(2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐)混合，且合并的物质通过反相制备型HPLC(20-95％ACN:水(20mM碳酸氢铵)，16mL/min)纯化，得到呈固体状的1-(4-((4-((2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(25mg，2个步骤的产率11％)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.42(s,1H),8.50(s,1H),8.34(s,1H),8.12(d,J＝9.0Hz,1H),7.84(d,J＝8.7Hz,1H),7.76(d,J＝9.6Hz,1H),7.37(d,J＝9.0Hz,1H),6.97(d,J＝11.0Hz,1H),6.92-6.80(m,3H),6.12(dd,J＝2.5,16.6Hz,1H),5.69(dd,J＝2.8,10.7Hz,2H),4.12(s,3H),4.09-3.87(m,2H),3.59-3.45(m,1H),3.46-3.34(m,1H),2.23(s,3H),2.20-2.02(m,2H),1.78-1.57(m,2H)；m/z(esi)M⁺1＝554.2。

实施例6

1-(4-((4-((2-氟-3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将K₂CO₃(839.2mg，6.08mmol)添加至2-甲基-2H-吲唑-6-醇(300mg，2.03mmol)于DMSO(4mL)中的经搅拌溶液中，接着添加1,3-二氟-2-甲基-4-硝基苯(346.62mg，2.03mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。接着减压浓缩混合物，且用EtOAc稀释粗反应混合物。有机相用水及盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(40-55％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的6-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(520mg，两种异构化合物的混合物)。m/z(esi)M⁺1＝302.2。

步骤B：在0℃下将Zn粉(1130mg，17.28mmol)添加至6-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(520mg，1.73mmol)于THF(7.5mL)中的经搅拌溶液中，接着添加含NH₄Cl(924mg，17.3mmol)的水(1.5mL)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。过滤反应混合物且减压浓缩，得到粗产物。粗产物用EtOAc稀释，且用水及盐水洗涤。有机层接着经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，得到粗产物，将其与另一批料(批量310mg的6-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑)混合。合并的物质通过制备型HPLC(SFC)(含0.3％异丙胺的MeOH)纯化，得到呈固体状的需要的异构体2-氟-3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(180mg，两个步骤27％)以及另一不需要的异构体(520mg)。m/z(esi)M⁺1＝272.0。通过HMBC NMR确认所要化合物的结构。

步骤C：将4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(97mg，0.48mmol)添加至2-氟-3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(110mg，0.405mmol)于IPA(2mL)中的经搅拌溶液中，且使反应混合物在80℃下回流1小时。将反应混合物蒸发至干燥，得到粗产物，用戊烷洗涤，得到呈固体状的6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(210mg，粗物质)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。m/z(esi)M⁺1＝435.2。

步骤D：在Ar氛围下在室温下将NaH(于矿物油中的60％分散液)(24mg，0.58mmol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.23mmol)于DMA(1.5mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在室温下搅拌15分钟。将6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺添加至溶液中，且将混合物在140℃下搅拌5小时。反应混合物用EtOAc稀释，且用水及盐水洗涤。有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，得到粗产物，其通过硅胶柱层析(1％MeOH/DCM)纯化，得到呈粘性固体状的4-((4-((2-氟-3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(135mg，两个步骤83％)。m/z(esi)M⁺1＝600.4。

步骤E：在0℃下将含HCl(4M)的1,4-二噁烷(3.0mL)添加至4-((4-((2-氟-3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(270mg，0.45mmol)于DCM(3.0mL)中的经搅拌溶液中。接着将反应混合物在室温下搅拌1小时。将反应混合物浓缩至干燥，且用戊烷洗涤固体，得到呈固体状的N-(2-氟-3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(230mg，粗物质)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。m/z(esi)M⁺1-HCl＝500.2。

步骤F：在0℃下将DIPEA(0.1mL，0.6mmol)添加至N-(2-氟-3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(160mg，0.3mmol)于DMF(1.4mL)中的经搅拌溶液中，且搅拌反应混合物2分钟。接着在0℃下将丙烯酸(0.02mL，0.33mmol)及T₃P(50％于EtOAc中)(0.2mL，0.36mmol)添加至反应混合物中，且在0℃下搅拌2小时。用一滴水淬灭反应物，且将反应混合物蒸发至干燥，得到粗产物，将其与另一批料(批量50.0mg的N-(2-氟-3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐)混合。合并的物质通过反相制备型HPLC(10-90％ACN:水(50μL TFA))纯化，得到呈固体状的1-(4-((4-((2-氟-3-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(15mg，2个步骤的产率10％)。¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.51(s,1H),8.22-8.11(m,2H),8.07(d,J＝9.0Hz,1H),7.71(d,J＝9.0Hz,1H),7.35(d,J＝9.1Hz,1H),6.96-6.77(m,5H),6.22(dd,J＝2.0,16.8Hz,1H),5.76(dd,J＝2.0,10.6Hz,1H),5.67(dt,J＝4.0,7.7Hz,1H),4.15(s,3H),4.11-3.93(m,2H),3.66(d,J＝12.2Hz,2H),2.28-2.11(m,4H),2.00-1.81(m,2H)；m/z(esi)M⁺1＝554.2。

实施例7

1-(4-((4-((3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将1-氟-2-甲基-4-硝基苯(282mg，1.82mmol)及K₂CO₃(502.4mg，3.67mmol)添加至2-甲基苯并[d]噻唑-5-醇(300mg，1.82mmol)于DMSO(10mL)中的溶液中。将混合物在40℃下加热3小时。完成后，添加水，且用EtOAc萃取混合物。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(30-40％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的2-甲基-5-(2-甲基-4-硝基苯氧基)苯并[d]噻唑(500mg，90％产率)。m/z(esi)M⁺1＝300.9。

步骤B：在室温下将氯化铵(446mg，8.33mmol)及Fe粉(930.6mg，1.7mmol)添加至2-甲基-5-(2-甲基-4-硝基苯氧基)苯并[d]噻唑(500mg，1.7mmol)于甲醇/水混合物(1:1；6mL)中的经搅拌溶液中。使反应混合物在80℃下回流2小时。完成后，反应混合物经由垫过滤，用DCM洗涤且减压浓缩，得到粗残余物，将其用水稀释且用DCM萃取。有机相用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，且过滤。减压蒸发溶剂，得到呈固体状的3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯胺(410mg，90％产率)。m/z(esi)M⁺1＝271.3。

步骤C：将4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(97.25mg，0.48mmol)添加至3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯胺(120mg，0.444mmol)于IPA(4mL)中的经搅拌溶液中，且将反应混合物在80℃下加热2小时。减压蒸发反应溶剂，且粗物质通过硅胶柱层析(0-1％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的6-氯-N-(3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(84mg，43％产率)。m/z(esi)M⁺1＝433.7。

步骤D：将NaH(37mg，0.92mmol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(747.28mg，3.69mmol)于DMA(5mL)中的溶液中，且搅拌混合物30分钟。添加6-氯-N-(3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(200mg，0.462mmol)，且在120℃下加热16小时。反应完成后，添加水。用EtOAc萃取混合物。有机相经无水硫酸钠干燥，过滤且减压蒸发。粗产物通过层析经由硅胶柱层析(0-10％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的4-((4-((3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，54％)。m/z(esi)M⁺1＝598.9。

步骤E：在0℃下将含4M HCl的二噁烷(5mL)添加至4-((4-((3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(150.0mg，0.24mmol)于DCM(3mL)中的经搅拌溶液中，且搅拌1小时。浓缩反应混合物且用醚湿磨，得到呈固体状的粗物质N-(3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(140mg，粗物质)。m/z(esi)M⁺1-HCl＝498.9。

步骤F：在0℃下将丙烯酰氯(20.33mg，0.225mmol)添加至N-(3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(120mg，0.24mmol)于DCM(2mL)及DIPEA(0.41mL，2.24mmol)中的经搅拌溶液中，且搅拌3小时。浓缩反应混合物，且粗物质通过制备型HPLC(20-80％ACN:H₂O(20mM碳酸氢铵))纯化，得到呈固体状的1-(4-((4-((3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(15.17mg，2个步骤12％)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.46(s,1H),8.55(s,1H),8.11(d,J＝9.0Hz,1H),8.00(d,J＝8.8Hz,1H),7.85(d,J＝2.6Hz,1H),7.80(dd,J＝2.7,8.6Hz,1H),7.37(d,J＝9.0Hz,1H),7.29(d,J＝2.4Hz,1H),7.12-7.03(m,2H),6.86(dd,J＝10.4,16.7Hz,1H),6.12(dd,J＝2.5,16.7Hz,1H),5.86(d,J＝5.3Hz,1H),5.69(dd,J＝2.5,10.4Hz,1H),4.04-3.81(m,2H),3.70-3.40(m,2H),2.77(s,3H),2.23(s,3H),2.17-2.00(m,2H),1.81-1.61(m,2H)；m/z(esi)M⁺1＝553.20。

实施例8

1-(4-((4-((4-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将K₂CO₃(612.74mg，4.44mmol)添加至咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-醇(400mg，2.96mmol)及1-氟-2-甲基-4-硝基苯(505.12mg，3.25mmol)于DMSO(4mL)中的经搅拌溶液中，且将混合物在80℃下搅拌4小时。反应混合物用水淬灭且用EtOAc萃取。合并的有机层经干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(0-5％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的7-(2-甲基-4-硝基苯氧基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(500mg，62％)。m/z(esi)M⁺1＝270.6。

步骤B：向7-(2-甲基-4-硝基苯氧基)咪唑并[1,2-b]哒嗪(500mg，1.85mmol)于MeOH(10mL)中的经搅拌溶液中添加10％Pd/C(50％湿润；250mg)，且在H₂氛围下搅拌2小时。反应混合物经由垫过滤且用10％MeOH-DCM洗涤。浓缩滤液，得到呈固体状的4-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基氧基)-3-甲基苯胺(400mg，90％产率)。m/z(esi)M⁺1＝241.2。

步骤C：将4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(182mg，0.91mmol)添加至4-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基氧基)-3-甲基苯胺(200mg，0.83mmol)于IPA(4mL)中的经搅拌溶液中，且在80℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩且用戊烷及醚湿磨，得到呈固体状的6-氯-N-(4-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基氧基)-3-甲基苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(320mg，95％产率)。m/z(esi)M⁺1＝404.0。

步骤D：将NaH(60重量％于石蜡中；60mg，1.55mol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(311mg，1.55mmol)于DMA(3mL)中的经搅拌溶液中，且将混合物在室温下搅拌10分钟。添加6-氯-N-(4-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基氧基)-3-甲基苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(250mg，0.62mol)，且将混合物在微波中加热至130℃后保持1小时。将反应混合物冷却至环境温度，且用水稀释。用EtOAc萃取混合物，且合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(0-1％MeOH-DCM)纯化，得到呈胶质固体状的4-((4-((4-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(90mg，21％)。m/z(esi)M⁺1＝569.2。

步骤E：在0℃下将二噁烷-HCl(4M；1mL)添加至4-((4-((4-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(90mg，1.58mmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中，且搅拌混合物1小时。完成后，浓缩反应混合物。粗物质用饱和NaHCO₃水溶液碱化且用10％MeOH-DCM萃取。合并的有机层经干燥，过滤，浓缩，接着通过胺硅胶柱层析(0-5％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的N-(4-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基氧基)-3-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(50mg，67％)。m/z(esi)M⁺1＝469.1。

步骤F：在0℃下将含丙烯酰氯(10mg，0.11mmol)的DCM(1mL)添加至N-(4-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基氧基)-3-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.09mmol)于DCM(2mL)及DIPEA(0.04mL，0.24mmol)中的经搅拌溶液中，且搅拌1小时。用冰淬灭反应混合物且浓缩。粗产物通过反相制备型HPLC(5-95％ACN:H₂O(0.1％NH₄HCO₃))纯化，得到呈固体状的1-(4-((4-((4-(咪唑并[1,2-b]哒嗪-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(7mg，13％)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.49(s,1H),8.63(d,J＝2.8Hz,1H),8.58(s,1H),8.21(s,1H),8.12(d,J＝9.0Hz,1H),7.97-7.86(m,2H),7.65(s,1H),7.38(d,J＝9.0Hz,1H),7.25(d,J＝8.7Hz,1H),7.06(d,J＝2.8Hz,1H),6.86(dd,J＝10.4,16.7Hz,1H),6.12(dd,J＝2.4,16.7Hz,1H),5.96-5.82(m,1H),5.69(dd,J＝2.5,10.5Hz,1H),4.05-3.78(m,2H),3.64-3.45(m,2H),2.26(s,3H),2.14-2.04(m,2H),1.79-1.62(m,2H)；m/z(esi)M⁺1＝523.1。

实施例9

1-(4-((4-((3-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将2-氯-1,3-二氟-4-硝基苯(652.03mg，3.38mmol)及K₂CO₃(699.32mg，5.07mmol)添加至2-甲基-2H-吲唑-6-醇(500mg，3.38mmol)于DMSO(4.0mL)中的经搅拌溶液中，且将混合物在80℃下搅拌4小时。反应混合物接着用水稀释且用EtOAc萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(0-1％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的6-(2-氯-3-氟-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(750mg，两种异构体的混合物)。m/z(esi)M+1＝322.2。

步骤B：将Zn粉(3.26g，49.84mmol)及NH₄Cl(2.67g，49.84mmol)添加至6-(2-氯-3-氟-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(以及另一异构体；1.6g，5.0mmol)于THF(15mL)及H₂O(3mL)中的溶液中。将反应物在室温下搅拌2小时。反应混合物经由烧结漏斗过滤且用EtOAc洗涤。分离滤液层，且有机相经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过SFC(CAmyloseA(250x30 mm)5μ，120巴，35℃，50％CO₂+50％(含0.3％异丙胺的MeOH))纯化，得到呈固体状的3-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(350mg，24％产率)。m/z(esi)M⁺1＝292.1。通过HMBC确认所要异构体的结构。

步骤C：将叔丁醇钾(153mg，1.3mmol)添加至3-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(200mg，0.68mmol)及4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(150mg，0.75mmol)于DMSO(3mL)中的经搅拌溶液中，且在80℃下搅拌2小时。反应混合物用水淬灭且用EtOAc萃取。有机层经硫酸钠干燥且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析使用(0-2％MeOH-DCM)纯化，得到呈半固体状的6-氯-N-(3-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(280mg，45％产率)。m/z(esi)M⁺1＝455.0。

步骤D：在0℃下将NaH(60重量％于石蜡中；22mg，0.54mmol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(100mg，0.22mmol)于DMA(1.5mL)中的经搅拌溶液中，且搅拌混合物30分钟。接着将6-氯-N-(3-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(132mg,0.65mmol)添加至反应混合物中，将其在60℃下搅拌16小时。反应混合物用水淬灭且用EtOAc萃取。合并的有机层用冰冷的水洗涤且经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(0-1％MeOH-DCM)纯化，得到呈半固体状的4-((4-((3-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(130mg，80％产率)。m/z(esi)M+1＝620.2。

步骤E：将含4N HCl的1,4-二噁烷(1.5mL)添加至4-((4-((3-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(45mg，0.07mmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中，且在室温下搅拌1小时。浓缩反应混合物。粗物质用二乙醚湿磨，得到固体化合物，其通过真空过滤分离，接着真空干燥，得到呈固体状的N-(3-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(45mg，粗物质)。m/z(esi)M⁺1＝520.0。

步骤F：将含丙烯酰氯(11mg，0.12mmol)的DCM(1mL)添加至N-(3-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(70mg，0.12mmol)于DCM(1mL)及DIPEA(0.3mL，1.3mmol)中的0℃经搅拌溶液中，且搅拌30分钟。反应混合物用水淬灭且用10％MeOH-DCM萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过反相制备型HPLC(20-95％ACN:H₂O(20mM碳酸氢铵))纯化，得到呈白色固体状的1-(4-((4-((3-氯-2-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(12mg，2个步骤产率15％)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.54(s,1H),8.52(d,J＝2.3Hz,1H),8.37(s,1H),8.13(d,J＝9.0Hz,1H),7.82(dd,J＝9.1,21.6Hz,2H),7.39(d,J＝9.0Hz,1H),7.04(d,J＝6.9Hz,2H),6.93-6.81(m,2H),6.12(dd,J＝2.6,16.7Hz,1H),5.69(dd,J＝2.7,10.8Hz,2H),4.14(s,3H),4.07-3.86(m,2H),3.60-3.35(m,2H),2.19-2.01(m,2H),1.81-1.60(m,2H)；m/z(esi)M+1＝574.2。

实施例10

1-(4-((4-((2-氟-3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将K₂CO₃(5g，36.36mmol)及1,3-二氟-2-甲基-4-硝基苯(2.3g，13.33mmol)添加至2-甲基苯并[d]噻唑-5-醇(2.0g，12.21mmol)于DMSO(10mL)中的经搅拌溶液中。将混合物在环境温度下搅拌16小时。反应混合物用EtOAc稀释，随后用冷水、接着用冷盐水溶液洗涤。有机相经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(10-20％EtOAc-己烷)纯化，得到呈固体状的包括5-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-2-甲基苯并[d]噻唑的两种异构体的混合物(3.3g，两种异构体的混合物)。m/z(esi)M⁺1＝319。

步骤B：将NH₄Cl(5.89g，110.06mmol)及Zn粉尘(7.2g，110.06mmol)添加至5-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-2-甲基苯并[d]噻唑的两种异构体(3.5g，11.01mmol)于THF:H₂O(5:1，36mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在0℃下搅拌1小时。反应物接着经由床过滤且用EtOAc洗涤。浓缩滤液，接着用水稀释且用EtOAc萃取。浓缩合并的有机相，得到呈固体状的异构体混合物(3g)。两种异构体通过制备型SFC(50％CO₂+50％MeOH，25g/min)分离，得到呈固体状的所需要的产物2-氟-3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯胺(520mg，产率15％，2个步骤)。m/z(esi)M⁺1＝289.0。通过HMBC确认所要异构体的结构。

步骤C：将4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(114mg，0.6mmol)添加至2-氟-3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯胺(150mg，0.52mmol)于IPA(3.0mL)中的溶液中。将混合物加热至90℃，将其搅拌1小时。接着将反应混合物蒸发至干燥，得到粗产物，其通过硅胶柱层析(30-50％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(190mg，82％)。m/z(esi)M⁺1＝452.0。

步骤D：将t-BuOK(75mg，0.67mmol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(155mg，0.78mmol)于THF(2mL)中的经搅拌溶液中，且在室温下搅拌30分钟。添加6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.11mmol)，且将混合物加热至100℃，将其搅拌16小时。将反应物冷却至环境温度，且用水稀释。用5％MeOH-DCM萃取反应物，且用盐水洗涤合并的萃取物。有机相经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩，得到呈固体状的4-((4-((2-氟-3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，粗物质)。m/z(esi)M⁺1＝617.2。

步骤-E：将含HCl(4M)的1,4-二噁烷(3.0mL)添加至4-((4-((2-氟-3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.33mmol)于DCM(3.0mL)中的0℃经搅拌溶液中，且搅拌1小时。接着浓缩反应混合物。将残余物溶解于5％MeOH-DCM中，且用饱和NaHCO₃水溶液洗涤。有机相经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩，得到粗产物，其通过硅胶柱层析(10-15％MeOH-DCM)纯化，得到呈固体状的N-(2-氟-3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(60mg，2个步骤的产率40％)。m/z(esi)M⁺1＝517.0。

步骤F：将丙烯酰氯(18mg，0.20mmol)添加至N-(2-氟-3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(105mg，0.20mmol)于DCM(2mL)及DIPEA(0.1mL，0.4mmol)中的经搅拌溶液中，且将混合物在0℃下搅拌1小时。接着用冰淬灭反应物，且将混合物浓缩至干燥。粗产物通过制备型HPLC(20-95％ACN:H₂O(20mM碳酸氢铵))纯化，得到呈固体状的1-(4-((4-((2-氟-3-甲基-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(37mg，32％产率)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.39(s,1H),8.51(s,1H),8.13(d,J＝9.0Hz,1H),8.05(d,J＝8.7Hz,1H),7.92-7.80(m,1H),7.44-7.34(m,2H),7.14(dd,J＝2.4,8.7Hz,1H),6.95-6.81(m,2H),6.12(dd,J＝2.4,16.7Hz,1H),5.69(dd,J＝2.3,10.6Hz,2H),4.09-3.86(m,2H),3.60-3.48(m,1H),3.47-3.36(m,1H),2.79(s,3H),2.21(s,3H),2.17-2.06(m,2H),1.80-1.61(m,2H)；m/z(esi)M⁺1＝571.5。

实施例11

步骤A：将K₂CO₃(431mg，3.12mmol)添加至1,5-二氟-2-甲基-4-硝基苯(180.0mg，1.04mmol)及2-甲基-2H-吲唑-6-醇(154.03mg，1.04mmol)于DMSO(2mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在室温下搅拌16小时。混合物接着用EtOAc稀释，且用水、接着用盐水洗涤。接着浓缩有机相，得到粗产物，将其与另一批粗物质合并(450mg合并的粗物质)。粗产物通过硅胶柱层析(50-55％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的6-(5-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(347mg)。分离的化合物含有两种可能的异构体。m/z(esi)M⁺1＝302.2。

步骤B：在0℃下将Zn粉尘(577.44mg，8.83mmol)添加至6-(5-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(以及另一异构体；266.0mg，0.883mmol)于THF(3mL)及水(0.6mL)中的经搅拌溶液中，接着添加NH₄Cl(472.37mg，8.829mmol)，且搅拌1小时。反应混合物经由垫过滤，且减压浓缩滤液。将粗产物与另一批粗物质(另外50mg粗物质)混合，且合并的批料通过制备型HPLC SFC(Chiralpak IG(250×21mm)5μ55％CO₂+45％(含0.3％异丙胺的甲醇)，25g/min，ABPR：110巴，温度：35℃)纯化，得到呈半固体状的所要异构体2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(210mg，69％产率)。通过HMBC确认化合物的结构。m/z(esi)M⁺1＝272.4。

步骤C：将4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(119.44mg，0.597mmol)添加至2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(162mg，0.597mmol)于IPA(3mL)中的经搅拌溶液中，且将混合物在90℃下搅拌1小时。接着浓缩反应混合物，且粗物质通过硅胶柱层析(0-10％MeOH/DCM)纯化，得到呈半固体状的6-氯-N-(2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(258mg，99％产率)。m/z(esi)M⁺1＝435.2。

步骤D：在惰性氛围下在0℃下将NaH(60％于矿物油中，24mg，0.575mmol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(115.71mg，0.575mmol)于DMA(1mL)中的经搅拌溶液中，接着在室温下搅拌15分钟。将6-氯-N-(2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.23mmol)添加至溶液中，且使混合物升温至140℃，将其搅拌5小时。将混合物冷却至室温且用EtOAc稀释。混合物用水、接着用盐水洗涤，随后经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(2-3％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的4-{[4-({2-氟-5-甲基-4-[(2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基]苯基}氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基]氧基}哌啶-1-甲酸叔丁酯(110mg，80％产率)。m/z(esi)M⁺1＝600.2。

步骤E：将含HCl(4M)的1,4-二噁烷(3mL)添加至4-((4-((2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(110.0mg，0.184mmol)于DCM(3mL)中的0℃经搅拌溶液中，且在0℃下搅拌1小时。减压浓缩混合物，且其不经进一步纯化即用于下一步骤中，得到呈固体状的N-(2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(91mg，粗物质)。m/z(esi)M⁺1＝500.4。

步骤F：在0℃下将DIPEA(0.08mL，0.48mmol)添加至N-(2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(80.0mg，0.16mmol)及丙烯酸(12.69mg，0.176mmol)于DMF(1mL)中的经搅拌溶液中，接着添加T3P(50％于EtOAc中；0.06mL，0.192mmol)，且在0℃下搅拌1小时。将混合物溶解于EtOAc中，且用水、接着用盐水洗涤，且经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。将粗产物与另一批物质混合(添加另外90mg)，且合并的物质通过反相制备型HPLC(20-95％ACN:水(20mM碳酸氢铵)，16mL/min)纯化，得到呈固体状的1-(4-((4-((2-氟-5-甲基-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(25mg，2个步骤的产率11％)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.42(s,1H),8.50(s,1H),8.34(s,1H),8.12(d,J＝9.0Hz,1H),7.84(d,J＝8.7Hz,1H),7.76(d,J＝9.6Hz,1H),7.37(d,J＝9.0Hz,1H),6.97(d,J＝11.0Hz,1H),6.92-6.80(m,3H),6.12(dd,J＝2.5,16.6Hz,1H),5.69(dd,J＝2.8,10.7Hz,2H),4.12(s,3H),4.09-3.87(m,2H),3.59-3.45(m,1H),3.46-3.34(m,1H),2.23(s,3H),2.20-2.02(m,2H),1.78-1.57(m,2H)；m/z(esi)M⁺1＝554.2。

实施例12

1-(4-((4-((3-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将1,2-二氟-4-硝基苯(430mg，2.7mmol)及K₂CO₃(746mg，5.4mmol)添加至2-甲基-2H-吲唑-6-醇(400mg，2.7mmol)于DMSO(15mL)中的经搅拌溶液中，且使反应混合物升温至40℃，将其搅拌1小时。冷却至环境温度后，添加水，且用乙酸乙酯(3×)萃取混合物。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶快速柱层析(洗脱剂：50％EtOAc-己烷)纯化，得到呈固体状的6-(2-氟-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(550mg，70％)。m/z(esi)M⁺1＝288.0。

步骤B：在室温下将氯化铵(205mg，3.82mmol)及Fe粉(1.07g，0.35mmol)添加至6-(2-氟-4-硝基苯氧基)-2-甲基-2H-吲唑(550mg，1.9mmol)于甲醇/水混合物(1:1)中的溶液中，且使反应混合物在80℃下回流2小时。接着将反应混合物冷却至环境温度，经由过滤，且用二氯甲烷洗涤。减压浓缩滤液，得到粗残余物，将其用水稀释且用二氯甲烷(3×30mL)萃取。有机层用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，得到呈固体状的3-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(450mg，90％)。m/z(esi)M⁺1＝258.1。

步骤C：将4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(103mg，0.5mmol)添加至3-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯胺(120mg，0.46mmol)于IPA(4mL)中的经搅拌溶液中，且将反应混合物加热至80℃，将其搅拌1小时。将混合物冷却至环境温度。蒸发溶剂，且粗物质通过硅胶(100-200)快速柱层析(洗脱剂：1％MeOH-二氯甲烷)纯化，得到呈固体状的6-氯-N-(3-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(180mg，90％)。m/z(esi)M⁺1＝421.0。

步骤D：将t-BuOK(240mg，2.14mmol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(478mg，2.37mmol)于DMSO(2mL)中的溶液中，且在室温下搅拌30分钟。添加6-氯-N-(3-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.23mmol)，且将反应物在100℃下加热1小时。冷却至环境温度后，反应混合物用水稀释且用乙酸乙酯(3×)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压蒸发。粗产物通过硅胶快速柱层析(洗脱剂：70％EtOAc-己烷)纯化，得到呈固体状的4-((4-((3-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(70mg，50％)。m/z(esi)M⁺1＝586.1。

步骤E：在0℃下将含HCl(4M)的二噁烷(4mL)添加至4-((4-((3-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(70.0mg，0.12mmol)于二氯甲烷(2mL)中的经搅拌溶液中，且搅拌1小时。浓缩反应混合物，且粗残余物用二乙醚湿磨，得到呈粗固体状的N-(3-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺HCl盐(72mg)。m/z(esi)M⁺1-HCl＝485.9。

步骤F：在0℃下将丙烯酰氯(12.5mg，0.13mmol)添加至N-(3-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺HCl盐(72.0mg，0.138mmol)于二氯甲烷(2mL)及DIPEA(0.25mL，1.38mmol)中的经搅拌溶液中，将其搅拌3小时。浓缩反应混合物，且粗产物通过反相制备型HPLC(30-95％ACN:水(20mM碳酸氢铵)，流动速率16mL/min)纯化，得到呈固体状的1-(4-((4-((3-氟-4-((2-甲基-2H-吲唑-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(18mg，24％，2个步骤)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.59(s,1H),8.62(s,1H),8.32(s,1H),8.24-8.11(m,2H),7.76(dd,J＝8.7,22.6Hz,2H),7.39(d,J＝9.1Hz,1H),7.32(t,J＝9.1Hz,1H),6.93-6.80(m,3H),6.12(d,J＝14.7Hz,1H),5.95-5.82(m,1H),5.69(d,J＝9.6Hz,1H),4.11(s,3H),4.04-3.79(m,2H),3.66-3.40(m,2H),2.21-1.98(m,2H),1.79-1.61(m,2H)；m/z(esi)M⁺1＝540.12。

实施例13

1-(4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在室温下将2-氯-1,3-二氟-4-硝基苯(112mg，0.58mmol)及K₂CO₃(241mg，1.75mmol)添加至[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-醇盐酸盐(100mg，0.58mmol)于THF(1.4mL)及DMSO(0.7mL)中的经搅拌溶液中，且在80℃下搅拌1小时。将反应物冷却至环境温度，且用水稀释。用EtOAc萃取反应混合物。合并的层经Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。异构体的粗混合物通过硅胶柱层析(20-60％EtOAc/己烷)纯化，且分离呈固体状的7-(2-氯-3-氟-4-硝基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶的两种异构体(分别45mg及35mg)。m/z(esi)M⁺1＝309；m/z(esi)M⁺1＝308.8。

步骤B：在室温下将NH₄Cl(347.4mg，6.49mmol)添加至7-(2-氯-3-氟-4-硝基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(200mg，0.65mmol)于THF:H₂O(5:1；3.6mL)中的经搅拌溶液中，且将反应混合物冷却至0℃。接着添加Zn粉尘(424.68mg，6.49mmol)，且将混合物在相同温度下搅拌1小时。完成后，混合物经由床过滤且用EtOAc洗涤。浓缩滤液，且残余物用水处理且用EtOAc萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩，接着用二乙醚湿磨，得到呈固体状的4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯胺(154mg，85％产率)。通过HMBC确认结构。m/z(esi)M⁺1＝279.1。

步骤C：将4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯胺(150mg，0.54mmol)及4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(161.06mg，0.81mmol)于IPA(5mL)中的经搅拌溶液在80℃下加热1小时。接着浓缩反应混合物，且粗产物通过硅胶柱层析(5-10％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(200mg，83％产率)。m/z(esi)M⁺1＝442.0。

步骤D：将NaH(60％于矿物油中；30mg，0.79mmol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(319.05mg，1.58mmol)于DMA(1mL)中的0℃经搅拌溶液中，且搅拌30分钟。接着添加N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(70mg，0.16mmol)，且将混合物加热至60℃，将其搅拌16小时。将混合物冷却至环境温度，接着添加饱和NH₄Cl水溶液。用EtOAc萃取混合物。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(0-2％MeOH/DCM)纯化，得到呈粘性物质的4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(50mg，52％产率)。m/z(esi)M⁺1＝607.4。

步骤E：将含4N HCl的二噁烷(0.5mL)添加至4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(50mg，0.08mmol)于DCM(0.5mL)中的0℃经搅拌溶液中，且搅拌1小时。接着浓缩混合物且用二乙醚湿磨，得到呈固体状的N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(40mg，粗物质)，其用于下一步骤。m/z(esi)M⁺1＝507.0。

步骤F：将含丙烯酰氯(6.63mg，0.07mmol)的DCM(0.2mL)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(40mg，0.07mmol)于DCM(0.8mL)及DIPEA(0.05mL，0.3mmol)中的0℃经搅拌溶液中，且将混合物在0℃下搅拌1小时。接着混合物用DCM稀释且用水洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过反相制备型HPLC层析(20-80％ACN:水(20mM碳酸氢铵))纯化，得到呈固体状的1-(4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(7mg，2个步骤的产率15％)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.55(s,1H),9.01(d,J＝7.9Hz,1H),8.57(s,1H),8.45(s,1H),8.16(d,J＝9.1Hz,1H),8.09(t,J＝8.6Hz,1H),7.45-7.36(m,2H),7.12(d,J＝6.4Hz,2H),6.87(dd,J＝10.5,16.7Hz,1H),6.12(dd,J＝2.4,16.6Hz,1H),5.69(dd,J＝2.4,10.3Hz,2H),4.10-3.81(m,2H),3.65-3.36(m,2H),2.25-2.03(m,2H),1.82-1.62(m,2H)；m/z(esi)M⁺1＝561.08。

实施例14

1-(4-((4-((3-甲基-4-((2-甲基-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将四氟硼酸三甲基氧鎓(1.45g，9.84mmol)添加至6-溴-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶(1.5g，7.57mmol)于EtOAc(30mL)中的经搅拌溶液中。将混合物在N氛围下在室温下搅拌5小时。反应混合物用EtOAc稀释且用饱和NaHCO₃水溶液洗涤。分离有机层，且用EtOAc萃取水层。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(10-50％EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的6-溴-2-甲基-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶(600mg，37％产率)。m/z(esi)M⁺1＝212.2。

步骤B：将氢氧化钾添加至6-溴-2-甲基-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶(450mg，2.12mmol)于1,4-二噁烷:水(2:1；9mL)中的经搅拌溶液中，且反应混合物在氩气鼓泡下脱气15分钟。接着将t-BuXPhos及Pd₂(dba)₃添加至反应混合物中，且继续Ar吹扫另外10分钟。将反应混合物在100℃下加热4小时。浓缩反应混合物，且用正戊烷及二乙醚湿磨残余物以移除有色杂质及非极性斑点，得到呈固体状的粗物质2-甲基-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-醇(350mg，71％产率)，其直接用于下一步骤中。m/z(esi)M⁺1＝150.0。

步骤C：将1-氟-2-甲基-4-硝基苯(312mg，2.01mmol)及K₂CO₃(556mg，4.02mmol)添加至2-甲基-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-醇(300mg，2.01mmol)于DMSO(5mL)中的经搅拌溶液中，且将混合物在80℃下搅拌4小时。冷却至环境温度后，添加水，且用EtOAc萃取混合物。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(20-50％EtOAc-己烷)纯化，得到呈固体状的2-甲基-6-(2-甲基-4-硝基苯氧基)-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶(370mg，65％产率)。m/z(esi)M⁺1＝285.2。

步骤D：将Zn粉尘(644mg，9.85mmol)及NH₄Cl(527mg，9.85mmol)添加至2-甲基-6-(2-甲基-4-硝基苯氧基)-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶(280mg，0.98mmol)于THF-H₂O(5:1；12mL)中的0℃溶液中。将反应物在0℃下搅拌1小时。反应混合物经由床过滤，且减压浓缩滤液。向残余物中添加水，且用DCM萃取混合物。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(0-2％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的3-甲基-4-((2-甲基-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺(240mg，95％产率)。m/z(esi)M⁺1＝254.6。

步骤E：将4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(77mg，0.386mmol)添加至3-甲基-4-((2-甲基-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺(90mg，0.354mmol)于IPA(5mL)中的经搅拌溶液中，且将混合物在80℃下搅拌2小时。减压浓缩反应混合物。用正戊烷及二乙醚湿磨粗产物，得到呈固体状的所需要的化合物6-氯-N-(3-甲基-4-((2-甲基-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(90mg，60％产率)。m/z(esi)M⁺1＝418.12。

步骤F：将t-BuOK(1.135g，10.12mmol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.263g，11.24mmol)于DMSO(10mL)中的溶液中，且搅拌混合物30分钟。添加6-氯-N-(3-甲基-4-((2-甲基-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(470mg，1.12mmol)，且将反应物在100℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至环境温度，接着用水稀释且用EtOAc萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(0-5％MeOH-DCM)纯化，得到呈固体状的4-((4-((3-甲基-4-((2-甲基-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(350mg，产率53％)。m/z(esi)M⁺1＝583.1。

步骤G：将含HCl(4M)的二噁烷(5mL)添加至4-((4-((3-甲基-4-((2-甲基-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(350mg，0.60mmol)于DCM(5mL)中的0℃经搅拌溶液中，且搅拌2小时。浓缩反应混合物，且残余物用二乙醚湿磨，得到呈固体状的N-(3-甲基-4-((2-甲基-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(350mg，粗物质)。m/z(esi)M⁺1-HCl＝482.9。

步骤H：将丙烯酰氯(34.87mg，0.385mmol)添加至N-(3-甲基-4-((2-甲基-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(200mg，0.385mmol)于DCM(3mL)及DIPEA(0.71mL，3.85mmol)中的0℃经搅拌溶液中，且在0℃下搅拌1小时。完成后，用冰淬灭反应混合物，接着浓缩。粗产物通过反相制备型HPLC(20-95％ACN:水(20mM碳酸氢铵))纯化，得到呈粘性固体状的1-(4-((4-((3-甲基-4-((2-甲基-2H-吡唑并[4,3-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(28mg，2个步骤的产率14％)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.47(s,1H),8.63(s,1H),8.56(s,1H),8.44(d,J＝2.6Hz,1H),8.11(d,J＝9.0Hz,1H),7.89(s,1H),7.83(d,J＝8.4Hz,1H),7.37(d,J＝9.0Hz,1H),7.11(d,J＝8.8Hz,2H),6.86(dd,J＝10.4,16.6Hz,1H),6.12(dd,J＝2.5,16.6Hz,1H),5.87(s,1H),5.69(dd,J＝2.5,10.5Hz,1H),4.15(s,3H),4.05-3.82(m,2H),3.66-3.42(m,2H),2.25(s,3H),2.17-1.99(m,2H),1.81-1.57(m,2H)；m/z(esi)M⁺1＝537.2。

实施例15

1-(4-((4-((4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将1-氟-2-甲基-4-硝基苯(347mg，2.23mmol)及K₂CO₃(618mg，4.47mmol)添加至咪唑并[1,2-a]吡啶-7-醇(300mg，2.23mmol)于DMSO(10mL)中的经搅拌溶液中，且将反应混合物在40℃下加热1小时。冷却至环境温度后，添加水，且用乙酸乙酯(3×)萃取混合物。合并的有机层经无水Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶(100-200)快速柱层析(洗脱剂：50％EtOAc-己烷)纯化，得到呈固体状的7-(2-甲基-4-硝基苯氧基)咪唑并[1,2-a]吡啶(400mg，66％)。m/z(esi)M⁺1＝269.7

步骤B：在室温下将氯化铵(378mg，7.06mmol)及Fe粉(789mg，14.12mmol)添加至7-(2-甲基-4-硝基苯氧基)咪唑并[1,2-a]吡啶(380mg，1.4mmol)于甲醇/水混合物(1:1)中的溶液中，且使反应混合物在80℃下回流2小时。冷却至环境温度后，反应混合物经由过滤且用二氯甲烷洗涤，且减压浓缩滤液。用水处理粗残余物，且用二氯甲烷(3×)萃取混合物。合并的有机层用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤，且减压蒸发溶剂，得到呈固体状的4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯胺(300mg，88％)。m/z(esi)M⁺1＝239.8

步骤C：将4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(110mg，0.55mmol)添加至4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯胺(120mg，0.50mmol)于IPA(4mL)中的经搅拌溶液中，且将反应混合物在80℃下加热1小时。接着浓缩混合物，且粗物质通过硅胶(100-200)快速柱层析(洗脱剂：1％MeOH-二氯甲烷)纯化，得到呈固体状的6-氯-N-(4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(130mg，64％)。m/z(esi)M⁺1＝403。

步骤D：将t-BuOK(201mg，1.79mmol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(402mg，1.99mmol)于DMSO(3mL)中的溶液中，且搅拌30分钟。添加6-氯-N-(4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(80mg，0.2mmol)，且在100℃下加热反应物，将其搅拌1.5小时。冷却至环境温度后，反应混合物用水稀释且用乙酸乙酯(3×)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经无水Na₂SO₄干燥，过滤，且减压蒸发溶剂。粗产物通过硅胶(100-200)快速柱层析(洗脱剂：70％EtOAc-己烷)纯化，得到呈固体状的4-((4-((4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(70mg，50％)。m/z(esi)M⁺1＝568.6。

步骤E：将含HCl(4M)的二噁烷(4mL)添加至4-((4-((4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(70.0mg，0.12mmol)于二氯甲烷(2mL)中的0℃经搅拌溶液中，且搅拌1小时。接着浓缩反应混合物且用二乙醚湿磨，得到呈粗固体状的N-(4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺HCl盐(55mg)。m/z(esi)M⁺1-HCl＝468.4。

步骤F：将丙烯酰氯(11mg，0.12mmol)添加至N-(4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺HCl盐(60mg，0.12mmol)于二氯甲烷(2mL)及DIPEA(0.22mL，1.2mmol)中的0℃经搅拌溶液中，将其搅拌3小时。浓缩反应混合物，且粗产物通过反相制备型HPLC(30-100％ACN:水(20mM碳酸氢铵)，流动速率16mL/min)纯化，得到呈固体状的1-(4-((4-((4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(10.27mg，16％)。¹HNMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.48(s,1H),8.60-8.52(m,2H),8.12(d,J＝9.0Hz,1H),7.92-7.81(m,3H),7.43(s,1H),7.37(d,J＝9.0Hz,1H),7.19(d,J＝8.6Hz,1H),6.92-6.77(m,2H),6.53(d,J＝2.5Hz,1H),6.12(dd,J＝2.6,16.8Hz,1H),5.94-5.80(m,1H),5.69(dd,J＝2.6,10.4Hz,1H),4.07-3.81(m,2H),3.68-3.41(m,2H),2.22(s,3H),2.17-2.02(m,2H),1.80-1.60(m,2H)。m/z(esi)M⁺1＝522.38。

实施例16

1-(4-((4-((3-氯-2-氟-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将K₂CO₃(2.50g，18.2mmol)添加至2-甲基苯并[d]噻唑-5-醇(1.0g，6.06mmol)于DMSO(5.0mL)中的经搅拌溶液中，且搅拌5分钟。将2-氯-1,3-二氟-4-硝基苯(1.28g，6.7mmol)添加至溶液中，且在室温下搅拌16小时。反应混合物接着用水稀释且用EtOAc萃取。合并的有机层用冷水、接着用盐水溶液洗涤，随后经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(10-20％EtOAc-己烷)纯化，得到呈固体状的5-(2-氯-3-氟-4-硝基苯氧基)-2-甲基苯并[d]噻唑(1.6g，异构体混合物)。m/z(esi)M⁺1＝338.6。

步骤B：将Zn粉(3.3g，50.2mmol)添加至5-(2-氯-3-氟-4-硝基苯氧基)-2-甲基苯并[d]噻唑(1.7g，5.02mmol)于THF(16mL)中的0℃经搅拌溶液中。在0℃将含NH₄Cl(2.7g，50.2mmol)的水(4mL)添加至溶液中，且搅拌1小时。反应混合物接着经由床过滤且用EtOAc洗涤。滤液用水稀释且用EtOAc萃取。合并的有机层用水及盐水洗涤，接着经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩，得到粗产物(1.5g)。两种异构体的粗混合物通过制备型SFC(70％CO₂+30％(含0.5％异丙胺的EtOH)，25g/min)分离，得到呈固体状的3-氯-2-氟-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯胺(250mg，14％产率，2个步骤)。m/z(esi)M⁺1＝308.9。

步骤C：将4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(116mg，0.6mmol)添加至3-氯-2-氟-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯胺(150mg，0.58mmol)于IPA(3mL)中的经搅拌溶液中，在90℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩至干燥，得到粗产物，其通过硅胶柱层析(1-5％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的6-氯-N-(3-氯-2-氟-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(205mg，87％产率)。m/z(esi)M⁺1＝472.0。

步骤D：将t-BuOK(53mg，0.49mmol)添加至4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(107mg，0.53mmol)于THF(2.0mL)中的经搅拌溶液中，且在室温下搅拌30分钟。将6-氯-N-(3-氯-2-氟-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.11mmol)添加至溶液中，且在100℃下加热16小时。冷却至环境温度后，反应混合物用水稀释且用EtOAc萃取。合并的有机层用盐水洗涤，干燥且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析使用胺硅胶(0-15％DCM-己烷)纯化，得到呈粘性固体状的4-((4-((3-氯-2-氟-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(25mg，35％产率)。m/z(esi)M⁺1＝637.2。

步骤E：将含HCl(4M)的二噁烷(1.0mL)添加至4-((4-((3-氯-2-氟-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(60mg，0.1mmol)于DCM(1.0mL)中的0℃经搅拌溶液中，且搅拌1小时。将反应混合物浓缩至干燥，接着用戊烷洗涤，得到呈粘性固体状的N-(3-氯-4-((3-(2,4-二甲基噻唑-5-基)烯丙基)氧基)-2-氟苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(60mg，粗物质)。m/z(esi)M⁺1＝537.2。

步骤F：将丙烯酰氯(14mg，0.15mmol)添加至N-(3-氯-4-((3-(2,4-二甲基噻唑-5-基)烯丙基)氧基)-2-氟苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(85mg，0.15mmol)于DCM(2.0mL)及DIPEA(0.05mL，0.3mmol)中的0℃经搅拌溶液中，且将反应物在0℃下搅拌1小时。反应物用冰淬灭且浓缩至干燥，得到粗产物，其通过反相制备型HPLC((30％-95％ACN:水)，20MmNH₄HCO₃)纯化，得到呈固体状的1-(4-((4-((3-氯-2-氟-4-((2-甲基苯并[d]噻唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(19mg，2个步骤的产率21％)。¹H NMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ9.55(s,1H),8.52(d,J＝2.4Hz,1H),8.12(dd,J＝8.9,17.2Hz,2H),7.87(q,J＝9.2Hz,1H),7.53(d,J＝2.5Hz,1H),7.39(d,J＝9.0Hz,1H),7.20(dd,J＝2.6,8.7Hz,1H),7.07(d,J＝9.2Hz,1H),6.87(dd,J＝10.5,16.7Hz,1H),6.12(dd,J＝2.5,16.7Hz,1H),5.79-5.63(m,2H),4.06-3.83(m,2H),3.60-3.50(m,1H),3.48-3.36(m,1H),2.80(s,3H),2.11(s,2H),1.70(s,2H)；m/z(esi)M⁺1＝591.04。

实施例17

1-(4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-醇(1.0g，7.4mmol)于DMSO(8mL)中的经搅拌溶液中添加K₂CO₃(3.0g，2.22mmol)及1,3-二氟-2-甲基-4-硝基苯(1.4g，8.15mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌2小时。完成后，反应混合物用EtOAc稀释，用冷水、盐水洗涤。有机部分经Na₂SO₄干燥且浓缩，得到粗物质，其通过柱层析(0-30％EtOAc-己烷)纯化，得到呈固体状的7-(3-氟-2-甲基-6-硝基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(900mg，44％产率)及7-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(220mg，10％产率)。m/Z(Esi)M⁺1＝289.3。

步骤B：在冰冷条件下向7-(3-氟-2-甲基-4-硝基苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(200mg，0.69mmol)于THF:H₂O(5.0mL)中的经搅拌溶液中添加Zn(456mg，6.9mmol)、NH₄Cl(371mg，6.94mmol)，且在室温下搅拌1小时。完成后，反应混合物经由用EtOAc过滤，用盐水洗涤滤液部分。有机部分经Na₂SO₄干燥且蒸发至干燥，得到呈粘性固体状的4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯胺(170mg，粗物质)。m/z(esi)M⁺1＝259.3。注意：通过HMBC确认结构。

步骤C：向4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯胺(200mg，0.77mmol)于IPA(3mL)中的经搅拌溶液中添加4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(154mg，0.775mmol)，且在80℃下搅拌1小时。完成后，将反应混合物蒸发至干燥且用5％MeOH-DCM稀释，用水及盐水洗涤。有机部分经Na₂SO₄干燥，浓缩，得到粗物质，其通过硅胶柱层析(0-2％MeOH-DCM)纯化，得到呈固体状的N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(230mg，2个步骤的产率66％)。m/z(esi)M+1＝421.4。

步骤D：向4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(716mg，3.56mmol)于THF(6mL)中的经搅拌溶液中添加Kt-BuO(360mg，3.20mmol)，且搅拌30分钟。随后添加N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(150mg，0.36mmol)，且在80℃下搅拌16小时。完成后，反应混合物用5％MeOH-DCM稀释，用水、盐水洗涤。有机部分经Na₂SO₄干燥，浓缩，得到呈固体状的4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，粗物质)。m/z(esi)M+1＝587.2。

步骤E：在冰冷条件下向4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.26mmol)于DCM(3mL)中的经搅拌溶液中添加含4MHCl的二噁烷(2.0mL)，且搅拌反应混合物1小时。完成后，浓缩反应混合物，且用5％MeOH-DCM稀释，用NaHCO₃溶液洗涤。有机部分经Na₂SO₄干燥，浓缩，得到粗物质，其通过胺结合的硅胶柱层析(0-5％MeOH-DCM)纯化，得到呈固体状的N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(68mg，2个步骤的产率39％)。m/z(esi)M+1＝486.8。

步骤F：在0℃下向N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(哌啶-4-基氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(60mg，0.12mmol)于DCM(1.5mL)中的经搅拌溶液中添加DIPEA(0.04mL，0.24mmol)，且搅拌反应混合物5分钟。将含丙烯酰氯(11mg，0.12mmol)的DCM(0.5mL)添加至溶液中，且在0℃下搅拌1小时。完成后，反应物用少许冰淬灭且蒸发至干燥，得到粗物质，其通过制备型HPLC(30-70％ACN:H₂O(20mM碳酸氢铵))纯化，得到呈粘性固体状的1-(4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(30mg，44％)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.41(s,1H),8.98(d,J＝7.5Hz,1H),8.56(s,1H),8.41(s,1H),8.15(d,J＝9.0Hz,1H),8.04(t,J＝8.8Hz,1H),7.40(d,J＝9.1Hz,1H),7.17(d,J＝8.9Hz,1H),7.07(dd,J＝2.7,7.5Hz,1H),6.96-6.81(m,2H),6.13(dd,J＝2.5,16.7Hz,1H),5.73-5.64(m,2H),4.10-3.85(m,2H),3.63-3.33(m,2H),2.21-2.11(m,5H),1.72(s,2H)。m/z(esi)M+1＝541.3。

实施例18

N-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)丙烯酰胺

步骤A：将K₂CO₃(1957mg，14mmol)添加至1-氟-2-甲基-4-硝基苯(700mg，4.73mmol)、1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-醇(733mg，4.73mmol)于THF:DMSO(2:1，9mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在80℃下搅拌16小时。冷却至环境温度后，反应混合物用EtOAc稀释，且用水、接着用盐水洗涤，随后浓缩。所获得的粗产物通过硅胶柱层析(30-55EtOAc/己烷)纯化，得到呈固体状的1-甲基-5-(2-甲基-4-硝基苯氧基)-1H-苯并[d]咪唑(1.24g，93％产率)。m/z(esi)M⁺1＝283.8。

步骤B：将10％Pd/C(300mg)添加至1-甲基-5-(2-甲基-4-硝基苯氧基)-1H-苯并[d]咪唑(600mg，2.12mmol)于MeOH(12mL)中的溶液中。将反应物在氢气氛围下在室温下搅拌2小时。反应混合物接着经由烧结漏斗过滤且用10％MeOH-DCM洗涤。浓缩滤液，得到呈固体状的3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯胺(500mg，93％产率)。m/z(esi)M⁺1＝254.1。

步骤C：将4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(432mg，2.17mmol)添加至3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯胺(500mg，1.98mmol)于IPA(3mL)中的经搅拌溶液中，且在80℃下搅拌1小时。接着真空浓缩反应混合物，且将残余物溶解于EtOAc中，且用水、接着用饱和NaHCO₃水溶液洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(0-4％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的6-氯-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(750mg，91％产率)。m/z(esi)M⁺1＝416.8。

步骤D：将KOtBu(80.92mg，0.72mmol)添加至6-氯-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(150mg，0.361mmol)及丙烯酰胺(61.29mg，0.721mmol)于1,4-二噁烷中的经搅拌溶液中。混合物在氩气鼓泡下脱气5分钟。添加Xantphos(42mg，0.072mmol)及Pd₂(dba)₃(33mg，0.036mmol)，且混合物在氩气下再脱气5分钟。将反应混合物在100℃下搅拌8小时。反应混合物经由垫过滤且用DCM洗涤。蒸发滤液，且粗物质通过硅胶柱层析(2-5％MeOH/DCM)纯化，接着通过反相制备型HPLC(20-95％ACN:水(20mM碳酸氢铵))纯化，得到呈固体状的N-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)丙烯酰胺(14mg，9％产率)。¹HNMR(400MHz,(CD₃)₂SO)δ11.15(s,1H),9.27(s,1H),8.68(d,J＝9.2Hz,1H),8.63(s,1H),8.26(d,J＝9.2Hz,1H),8.17(s,1H),7.92(s,1H),7.74(d,J＝8.8Hz,1H),7.57(d,J＝8.7Hz,1H),7.11(s,1H),7.01(d,J＝8.8Hz,1H),6.89(d,J＝8.8Hz,1H),6.67(dd,J＝10.2,17.0Hz,1H),6.41(d,J＝16.9Hz,1H),5.90(d,J＝11.1Hz,1H),3.84(s,3H),2.27(s,3H)。m/z(esi)M⁺1＝452.0。

实施例19

N-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)丁-2-炔酰胺

步骤A：在0℃下向丁-2-炔酸乙酯(5g，44.64mmol)中添加NH₄OH(17mL)，且搅拌混合物6小时，此时其逐渐升温至环境温度。通过真空过滤收集所得白色固体，且通过硅胶柱层析(3-5％MeOH-DCM)纯化，得到呈固体状的丁-2-炔酰胺(1.6g，43％产率)。

步骤B：向6-氯-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(200mg，0.48mmol)及丁-2-炔酰胺(200mg，2.40mmol)于二噁烷(6mL)中的经搅拌溶液中添加KO^tBu(108mg，0.96mmol)，且混合物在氩气鼓泡下脱气5分钟。添加t-BuBrettphos钯环Gen-3(131mg，0.14mmol)，且混合物在氩气下再脱气5分钟。使反应混合物升温至100℃，将其搅拌8小时。冷却至环境温度后，混合物经由硅藻土垫过滤且用DCM洗涤。蒸发滤液，且粗物质通过硅胶柱层析(1-2％MeOH-DCM)纯化，分离产物(约50mg)，其通过制备型HPLC(20-90％ACN:H₂O(0.1％NH₄HCO₃))进一步纯化，得到呈固体状的N-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)丁-2-炔酰胺(11mg，5％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.37(s,1H),9.27(s,1H),8.63(s,1H),8.40(d,J＝9.0Hz,1H),8.24(d,J＝9.2Hz,1H),8.17(s,1H),7.89(s,1H),7.75(d,J＝8.8Hz,1H),7.57(d,J＝8.7Hz,1H),7.11(d,J＝2.3Hz,1H),7.00(dd,J＝2.3,8.8Hz,1H),6.91(d,J＝8.8Hz,1H),3.84(s,3H),2.28(s,3H),2.10(s,3H)。m/z(esi)M+1＝464.3。

实施例20

N-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)乙烯基磺酰胺

向6-氯-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(200mg，0.481mmol)及乙烯基磺酰胺(103mg，0.962mmol)于1,4二噁烷中的经搅拌溶液中添加KOtBu(107.89mg，0.962mmol)，且混合物在氩气鼓泡下脱气5分钟。添加Xantphos(55.57mg，0.096mmol)及Pd₂(dba)₃(43.99mg，0.048mmol)，且混合物在氩气下再脱气5分钟。将反应混合物在100℃下搅拌8小时。冷却至环境温度后，反应混合物经由硅藻土垫过滤且用DCM洗涤。浓缩滤液，且粗产物通过硅胶柱层析(2-5％MeOH/DCM)纯化，接着通过反相制备型HPLC(20-95％ACN:水(20mM碳酸氢铵))纯化，接着冻干，得到呈淡黄色固体状的N-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)乙烯基磺酰胺(26mg，11％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ11.70-11.37(m,1H),8.86(s,1H),8.58(s,1H),8.19-8.10(m,2H),7.81(s,1H),7.68(d,J＝8.9Hz,1H),7.56(d,J＝8.7Hz,1H),7.43(d,J＝8.9Hz,1H),7.29(dd,J＝9.9,16.3Hz,1H),7.10(d,J＝2.3Hz,1H),7.00(dd,J＝2.4,8.7Hz,1H),6.92(d,J＝8.7Hz,1H),6.45(d,J＝16.5Hz,1H),6.23(d,J＝9.9Hz,1H),3.84(s,3H),2.27(s,3H)。m/z(esi)M+1＝488.3。

实施例21

N-甲基-N-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)乙烯基磺酰胺

步骤A：向3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯胺(500mg，1.98mmol)于IPA(3mL)中的经搅拌溶液中添加4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(432.6mg，2.17mmol)，且将混合物在80℃下搅拌1小时。浓缩反应混合物，且将残余物溶解于EtOAc中，且用水、接着用饱和NaHCO₃水溶液洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩，且粗物质通过硅胶柱层析(0-4％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的6-氯-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(750mg，91％产率)。m/z(esi)M+1＝416.8。

步骤B：向6-氯-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.24mmol)及N-甲基乙烯基磺酰胺(58.18mg，0.481mmol)于二噁烷中的经搅拌溶液中添加KOt-Bu(54mg，0.48mmol)，且混合物在氩气鼓泡下脱气5分钟。添加Xantphos(27.78mg，0.048mmol)及Pd₂dba₃(21.99mg，0.024mmol)，且混合物在氩气下再脱气5分钟。将反应混合物在100℃下搅拌10小时。接着浓缩混合物，且将残余物溶解于5％MeOH/DCM中，且用水、接着用盐水洗涤，随后经Na₂SO₄干燥，过滤且减压浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(2-4％MeOH/DCM)纯化，接着通过反相制备型HPLC(LYMC Triart C18(250×4.6mm，5μ)，20-95％ACN:水(20mM碳酸氢铵)，16mL/min)纯化，得到呈固体状的N-甲基-N-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)乙烯基磺酰胺(4mg，3％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.56(s,1H),8.60(s,1H),8.26-8.09(m,2H),8.01(d,J＝9.1Hz,1H),7.80(s,1H),7.72(d,J＝8.5Hz,1H),7.57(d,J＝8.6Hz,1H),7.15-7.05(m,2H),7.00(d,J＝8.8Hz,1H),6.90(d,J＝8.8Hz,1H),6.37-6.23(m,2H),3.84(s,3H),3.55(s,3H),2.26(s,3H)。m/z(esi)M+1＝502.39。

实施例22

(E)-N-甲基-3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)丙烯酰胺

向6-氯-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(150mg，0.36mmol)及N-甲基丙烯酰胺(61mg，0.48mmol)于二噁烷(5mL)中的经搅拌溶液中添加KOt-Bu(81mg，0.72mmol)，且反应混合物在氩气鼓泡下脱气5分钟。添加Xantphos(42mg，0.07mmol)及Pd₂(dba₃)(33mg，0.04mmol)，且混合物在氩气下再脱气5分钟。在密封管中将反应混合物在100℃下搅拌8小时。完成后，反应混合物经由垫过滤且用DCM洗涤。浓缩滤液，且粗产物通过硅胶柱层析(2-3％MeOH-DCM)纯化，得到产物，其通过制备型HPLC(12-90％ACN:H₂O(0.1％NH₄HCO₃))进一步纯化，得到呈固体状的(E)-N-甲基-3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)丙烯酰胺(15mg，19％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.98(s,1H),8.64(s,1H),8.22(d,J＝9.0Hz,2H),8.17(s,1H),8.12(d,J＝8.7Hz,1H),7.94(s,1H),7.85(d,J＝11.1Hz,1H),7.68(d,J＝15.7Hz,1H),7.57(d,J＝8.8Hz,1H),7.30(d,J＝15.7Hz,1H),7.11(d,J＝2.4Hz,1H),7.00(dd,J＝2.3,8.8Hz,1H),6.90(d,J＝8.8Hz,1H),3.84(s,3H),2.76(d,J＝4.6Hz,3H),2.27(s,3H)。m/z(esi)M+1＝466.43。

实施例23

N-甲基-N-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)丙烯酰胺

向6-氯-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(400mg，0.96mmol)及N-甲基丙烯酰胺(163mg，1.92mmol)于二噁烷(5mL)中的经搅拌溶液中添加KOtBu(215mg，1.92mmol)，且混合物在氩气鼓泡下脱气5分钟。添加Xantphos(111mg，0.19mmol)及Pd₂(dba₃)(88mg，0.09mmol)，且混合物在氩气下再脱气5分钟。将反应混合物在100℃下搅拌8小时。反应混合物经由垫过滤且用DCM洗涤。浓缩滤液，且粗产物通过硅胶柱层析(2-3％MeOH-DCM)纯化，得到产物，其通过制备型HPLC(7-65％ACN:H₂O(0.1％NH₄HCO₃))进一步纯化，得到呈固体状的N-甲基-N-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)丙烯酰胺(22mg，5％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.72(s,1H),8.63(s,1H),8.22(d,J＝8.9Hz,1H),8.17(s,1H),7.93(d,J＝8.9Hz,1H),7.86(s,1H),7.76(d,J＝11.6Hz,1H),7.56(d,J＝8.7Hz,1H),7.10(d,J＝2.4Hz,1H),6.99(dd,J＝2.4,8.6Hz,1H),6.88(d,J＝8.8Hz,1H),6.60(dd,J＝10.4,16.7Hz,1H),6.28(dd,J＝2.2,16.7Hz,1H),5.76(dd,J＝2.3,10.3Hz,1H),3.84(s,3H),3.59(s,3H),2.25(s,3H)。m/z(esi)M⁺1＝466.2。

实施例24

N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)-6-(丙-1-烯-2-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺

向装备有搅拌棒的10mL玻璃微波容器中装入6-氯-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.060g，0.14mmol)、三氟(丙-1-烯-2-基)硼酸钾(0.021g，0.14mmol)、碳酸钾(2M水溶液)(0.22ml，0.43mmol)、四钯(0.017g，0.014mmol)及二噁烷(1.4mL，0.14mmol)。混合物用氩气鼓泡，密封，且加热至100℃后保持过夜。用水及乙酸乙酯稀释混合物。用乙酸乙酯萃取有机层3次，且合并有机物，经Na₂SO₄干燥，且真空浓缩。粗物质通过柱层析(Redisep12g，0至10％MeOH/DCM+2％NH₄OH)纯化，得到N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)-6-(丙-1-烯-2-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(45.0mg，74％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.07(s,1H),8.73(s,1H),8.10(d,J＝8.8Hz,1H),8.02(d,J＝8.9Hz,1H),7.85(s,1H),7.77(d,J＝2.7Hz,1H),7.68(dd,J＝8.7,2.7Hz,1H),7.36-7.30(m,2H),7.06(dd,J＝8.8,2.2Hz,1H),6.95(d,J＝8.7Hz,1H),5.97(t,J＝1.0Hz,1H),5.56(s,1H),3.85(s,3H),2.37(dd,J＝1.5,0.8Hz,3H),2.36(s,3H)；m/z(APCI-正)M+1＝423.2。

实施例25

1-(3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向1打兰(dram)小瓶中装入3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(67mg，0.34mmol)、N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.050g，0.11mmol)及DMSO(1.1mL)。将小瓶加盖且加热至100℃后保持2小时，接着将混合物在EtOAc与K₂CO₃(饱和水溶液)之间分配。分离各相，且有机萃取物用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。通过柱层析(硅胶，12g，0-6％MeOH/DCM)纯化，得到3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(46mg，67％)。m/z(APCI-正)M+1＝604.2。

步骤B：向1打兰小瓶中装入3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯(46mg，76μmol)及DCM(0.50mL)。将混合物冷却至0℃，且添加2,2,2-三氟乙酸(0.17mL，2.3mmol)。搅拌30分钟后，反应混合物用DCM稀释，且用K₂CO₃(饱和水溶液，2×)及盐水洗涤。有机萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(40mg，定量)。不进行进一步纯化。m/z(APCI-正)M+1＝504.2。

步骤C：向1打兰小瓶中装入N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(40mg，79μmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(34μL，200μmol)及DCM(0.80mL)。用冰/水浴将烧瓶的内容物冷却至0℃，且在一个等分试样中添加丙烯酰氯(5.2μL，34μmol)。将小瓶加盖且搅拌2小时，接着将混合物在DCM与K₂CO₃(饱和水溶液)之间分配。分离各相，且有机萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。通过柱层析(硅胶，12g，0-8％MeOH/DCM)纯化，得到1-(3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)丙-2-烯-1-酮(29mg，65％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.16(d,J＝3.4Hz,1H),9.02(t,J＝8.9Hz,1H),8.66(s,1H),8.57-8.50(m,1H),8.25(s,1H),8.04(d,J＝9.3Hz,1H),7.22-7.12(m,2H),6.96-6.89(m,2H),6.37(dd,J＝17.0,2.1Hz,1H),6.29(dd,J＝16.9,9.9Hz,1H),5.73(dd,J＝9.9,2.1Hz,1H),4.76(dd,J＝11.8,6.1Hz,2H),4.37(d,J＝11.1Hz,1H),4.00(s,2H),3.79(t,J＝11.6Hz,1H),2.92(dt,J＝8.7,6.4Hz,1H),1.77(d,J＝8.8Hz,1H)；m/z(APCI-正)M+1＝558.2。

实施例26

1-((3aS,6aS)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯胺(120mg，0.46mmol)及4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(139.4mg，0.69mmol)悬浮于IPA(3mL)中。将反应混合物在80℃下搅拌2小时。接着将反应混合物浓缩至干燥，且粗产物通过硅胶柱层析(75％EtOAc-己烷)纯化，得到呈固体状的N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(150mg，两个步骤的产率61％)。m/z(esi)M+1＝421.8。

步骤B：向N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.11mmol)及(3aS,6aS)-六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(37.7mg，0.17mmol)于DMSO(1mL)中的经搅拌溶液中添加DIPEA(0.04mg，0.23mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌2小时。反应混合物用H₂O稀释且用EtOAc萃取。合并的有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过硅胶柱层析(0.5％MeOH-DCM)纯化，得到呈固体状的(3aS,6aS)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(55mg，78％产率)。m/z(esi)M+1＝598.4。

步骤C：在氩气氛围下向(3aS,6aS)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(50mg，0.08mmol)于DCM(2mL)中的经搅拌溶液中添加TFA(0.3mL)。将反应混合物在0℃下搅拌2小时。接着在旋转式蒸发器中浓缩反应混合物，且残余物用5％MeOH-DCM稀释，且用H₂O、接着用饱和NaHCO₃溶液洗涤。有机层经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-((3aS,6aS)-六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(40mg，粗物质)，其不经进一步纯化即用于下一步骤中。m/z(esi)M+1＝498.2。

步骤D：在0℃下向N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-((3aS,6aS)-六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(40mg，0.07mmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中添加DIPEA(0.13mL，0.79mmol)，接着添加含丙烯酰氯(7.1mg，0.07mmol)的DCM(1mL)，且在0℃下搅拌1小时。反应混合物用冰淬灭且减压浓缩。粗产物通过反相制备型HPLC纯化(30-55％ACN:水(20mM碳酸氢铵))纯化，得到呈固体状的1-((3aS,6aS)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-基)丙-2-烯-1-酮(25.1mg，55％产率)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.06(s,1H),8.86(d,J＝6.8Hz,1H),8.45(d,J＝10.4Hz,2H),8.32(s,1H),7.93(d,J＝9.2Hz,1H),7.24(t,J＝11.2Hz,2H),7.03-6.94(m,2H),6.60(d,J＝12.4Hz,1H),6.18(d,J＝16.8Hz,1H),5.68(d,J＝10.4Hz,1H),4.69(s,1H),4.01(s,1H),3.87(t,J＝10.4,10.8Hz,1H),3.78-3.56(m,4H),3.21(d,J＝6.6Hz,1H),2.23(s,3H),2.22-2.09(m,1H),2.00-1.84(m,1H)。m/z(esi)M+1＝552.2。

实施例27

((3aS,6aS)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-基)(双环[1.1.0]丁-1-基)甲酮

向N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-((3aS,6aS)-六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.10mmol)及双环[1.1.0]丁烷-1-甲酸钾(23mg，0.20mmol)于DMF(1mL)中的经搅拌溶液中添加DIPEA(0.10mL，0.50mmol)，接着添加T₃P(于EtOAc中的50％溶液，127mg，0.20mmol)，且在室温下搅拌16小时。反应混合物用水稀释且用EtOAc萃取。合并的有机层经干燥，过滤且浓缩。粗产物通过反相制备型HPLC(20-95％ACN:水(20mM碳酸氢铵))纯化，得到呈固体状的((3aS,6aS)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-基)(双环[1.1.0]丁-1-基)甲酮(15mg，26％产率)。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ9.10(s,1H),8.85(d,J＝7.4Hz,1H),8.53-8.43(m,2H),8.32(s,1H),7.94(d,J＝9.2Hz,1H),7.26(d,J＝9.3Hz,1H),7.11(dd,J＝1.7,8.9Hz,1H),7.00(dd,J＝2.6,7.4Hz,1H),6.96(d,J＝2.6Hz,1H),4.73(s,1H),4.01-3.81(m,3H),3.80-3.66(m,2H),3.59(dd,J＝5.2,11.4Hz,1H),3.24-3.11(m,1H),2.31-2.06(m,7H),1.98-1.85(m,1H),1.08(dd,J＝2.3,14.6Hz,2H)。m/z(esi)M+1＝578.4。

实施例28

1-(4-((4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)硫基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(40mg，92μmol)及4-巯基哌啶-1-甲酸叔丁酯(30mg，0.14mmol)于无水DMF(0.46mL)中的溶液中添加Cs₂CO₃(60mg，0.18mmol)。接着使混合物升温至80℃，将其搅拌1.5小时。接着将反应物冷却至环境温度，且通过添加水(5mL)及饱和NH₄Cl水溶液(5mL)而淬灭。搅拌混合物5分钟，且通过真空过滤分离固体。接着将固体溶解于EtOAc中，经无水硫酸钠干燥，过滤且浓缩。粗产物按原样用于下一步骤。m/z(APCI-正)M+1＝616.2。

步骤B：向含有4-((4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)硫基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(57mg，93μmol)的小瓶中添加CH₂Cl₂(0.62mL)，且用三氟乙酸(0.14mL，1.9mmol)处理溶液。接着将混合物在环境温度下搅拌1.5小时。用饱和NaHCO₃水溶液中和混合物，且用CHCl₃(3×)萃取所得混合物。合并的萃取物接着经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物直接用于后续步骤中。m/z(APCI-正)M+1＝516.2。

步骤C：向小瓶中添加N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基硫基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(47mg，91μmol)、CH₂Cl₂(0.91mL)及Hunig氏碱(32μL，0.18mmol)。在冰/水浴中将混合物冷却至0℃，接着添加丙烯酰氯(7.4μL，91μmol)。将混合物在0℃下搅拌1小时，接着用饱和NaHCO₃水溶液处理。用CHCl₃(3×)萃取混合物，且合并的有机萃取物经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物接着经由柱层析(2至5％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，得到呈固体状的1-(4-((4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)硫基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(37mg，68％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.17(d,J＝3.6Hz,1H),8.72(s,1H),8.65(t,J＝9.2Hz,1H),7.95(d,J＝8.8Hz,1H),7.86(s,1H),7.50(d,J＝8.8Hz,1H),7.35(dd,J＝8.7,0.6Hz,1H),7.32(dd,J＝2.3,0.6Hz,1H),7.07(dd,J＝8.7,2.3Hz,1H),6.79(dd,J＝9.1,1.7Hz,1H),6.64(dd,J＝16.8,10.6Hz,1H),6.32(dd,J＝16.8,1.9Hz,1H),5.72(dd,J＝10.6,1.9Hz,1H),4.47(d,J＝13.5Hz,1H),4.29(tt,J＝10.0,4.0Hz,1H),4.08-3.98(m,1H),3.86(s,3H),3.50(t,J＝12.0Hz,1H),3.32(t,J＝11.8Hz,1H),2.40-2.31(m,2H),2.30(d,J＝2.1Hz,3H),1.85(q,J＝10.0Hz,2H)。m/z(APCI-正)M+1＝570.1。

实施例29

1-((1S,5R)-6-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向小瓶中添加6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(28mg，64μmol)及(1S,5R)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-甲酸叔丁酯(27mg，0.13mmol)，接着添加DMSO(0.43mL)。接着使混合物升温至100℃，将其搅拌3小时。接着将混合物冷却至环境温度且用水稀释。通过真空过滤分离固体。接着将固体溶解于CH₂Cl₂中，且滤液经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物接着经由柱层析((1-8％MeOH/CHCl₃)纯化，得到呈固体状的(1S,5R)-6-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-甲酸叔丁酯(34mg，86％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝611.2。

步骤B：向含有(1S,5R)-6-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-甲酸叔丁酯(34mg，56μmol)的小瓶中添加CH₂Cl₂(0.56mL)，且用TFA(86μL，1.1mmol)处理溶液。接着将混合物在环境温度下搅拌1.5小时。用饱和NaHCO₃水溶液中和混合物，且用CHCl₃(3×)萃取所得混合物。合并的萃取物接着经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物(27mg，95％)直接用于后续步骤中。m/z(APCI-正)M⁺1＝511.2。

步骤C：向小瓶中添加6-((1S,5R)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(27mg，53μmol)、CH₂Cl₂(1.1mL)及i-Pr₂EtN(18μL，0.11mmol)。在冰/水浴中将混合物冷却至0℃，接着添加丙烯酰氯(4.8mg，53μmol)。接着将混合物在0℃下搅拌1小时。接着用饱和NaHCO₃水溶液处理混合物，且用CHCl₃(3×)萃取混合物。合并的有机萃取物经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物接着经由柱层析(2至5％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，得到呈固体状的1-((1S,5R)-6-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮(19mg，64％)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.04(s,1H),8.61-8.51(m,2H),7.95(d,J＝9.1Hz,1H),7.85(s,1H),7.37-7.30(m,2H),7.06(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),7.01(d,J＝9.4Hz,1H),6.77(dd,J＝9.1,1.7Hz,1H),6.71-6.49(m,1H),6.38-6.27(m,1H),5.75(dd,J＝17.5,10.6Hz,1H),4.95-4.41(m,2H),3.96-3.86(m,2H),3.85(s,3H),3.81-3.51(m,1H),3.37-2.80(m,2H),2.32-2.19(m,1H),2.28(d,J＝2.1Hz,3H),2.20-2.10(m,1H),2.02-1.80(m,2H)。m/z(APCI-正)M⁺1＝565.2。

实施例30

1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在密封管下在80℃下将4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(72.5mg，362μmol)添加至4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯胺(0.101g，362μmol)于2-丙醇(4mL)中的经搅拌溶液中。1小时后，浓缩反应混合物，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(160mg，99.8％)。m/z(APCI-正)M+1＝442.0。

步骤B：在密封管下在100℃下将Hunig氏碱(0.07g，0.6mmol)添加至哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.06g，0.3mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.1mmol)于DMSO(1mL)中的经搅拌溶液中。4小时30分钟后，将反应混合物冷却至环境温度，且浓缩反应混合物。此粗物质经由正相层析使用0至30％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度纯化，得到4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.046g，70％)。m/z(APCI-正)M+1＝592.1。

步骤C：在环境温度下将2,2,2-三氟乙酸(0.18g，1.6mmol)添加至4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.046g，78μmol)于DCM(2mL)中的经搅拌溶液中。2小时后，浓缩反应混合物，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-6-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.038g，99％)。m/z(APCI-正)M+1＝492.1。

步骤D：在0℃下将丙烯酰氯(4.6μL，57μmol)添加至Hunig氏碱(0.18g，1.4mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.035g，71μmol)于CH₂Cl₂(1mL)中的经搅拌溶液中。15分钟后，浓缩反应混合物，且经由正相层析(40g，SiO₂)使用0至50％(含20％MeOH之DCM)/DCM梯度纯化。合并含有产物的级分且浓缩，得到1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(0.011g，28％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.10(m,1H),9.00(t,J＝8.9Hz,1H),8.68(s,1H),8.54(dd,J＝7.1,1.1Hz,1H),8.25(s,1H),8.04(d,J＝9.3Hz,1H),7.33(d,J＝9.4Hz,2H),7.16(dd,J＝9.2,2.1Hz,1H),6.92(m,1H),6.65(m,1H),6.39(m,1H),5.80(m,1H),3.86(m,8H)；m/z(APCI-正)M+1＝546.1。

实施例31

1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在密封管中在100℃下将2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(73mg，0.34mmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.050g，0.11mmol)于DMSO中的经搅拌溶液中。48小时后，将反应混合物加热至120℃。72小时后，用水及DCM稀释物质，且分离水相与有机相。用DCM(2×)萃取水相，且合并的有机相用盐水(3×)洗涤，经Na₂SO₄干燥且浓缩，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(40.6mg，69％)。m/z(APCI-正)M+1＝520.2。

步骤B：在0℃下将丙烯酰氯(8.1μL，100μmol)添加至N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(80.9mg，626μmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.0625g，125μmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中。15分钟后，浓缩反应混合物。所得粗油状物经由正相层析(24g，SiO₂)使用0至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度纯化，得到1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(0.007g，10％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.12(d,J＝3.6Hz,1H),8.84(t,J＝9.1Hz,1H),8.64(s,1H),8.51(dd,J＝7.2,0.9Hz,1H),8.23(s,1H),8.01(d,J＝9.3Hz,1H),7.16(d,J＝9.4Hz,1H),7.01(m,1H),6.88(m,1H),6.58(dd,J＝16.8,10.6Hz,1H),6.26(dd,J＝16.8,1.8Hz,1H),5.69(dd,10.6,1.8Hz,1H),4.01(t,J＝5.7Hz,2H),3.93(s,3H),3.85(t,J＝5.7Hz,2H),2.21(d,J＝2.2Hz,3H),1.63(s,6H)；m/z(APCI-正)；M+1＝554.3。

实施例32

1-(4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)(甲基)氨基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在密封管下在100℃下将N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(1.55mL，8.91mmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.376g，8.91μmol)及4-(甲氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.91g，8.91mmol)于DMSO(1mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与CHCl₃之间分配。合并的有机层用盐水(5×)洗涤，经硫酸钠干燥，且真空浓缩，得到4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)(甲基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.53g，99％)。m/z(APCI-正)M+1＝600.3。

步骤B：在环境温度下将2,2,2-三氟乙酸(1.37mL，17.8mmol)添加至4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)(甲基)氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.535g，892μmol)于DCM(10mL)中的经搅拌溶液中。1小时后，添加另外20当量TFA(共40当量)。21小时后，添加另外40当量TFA(80当量)。再过23小时后，反应混合物用DCM稀释，且经由添加10％K₂CO₃(水溶液)淬灭。10分钟后，水溶液用CHCl₃(3×)萃取，经Na₂SO₄干燥且浓缩。所得粗固体经由反相层析使用10至50％ACN(0.1％TFA)/水(0.1％TFA)梯度纯化，历时65分钟。合并含有产物的级分且用10％K₂CO₃(水溶液)处理。10分钟后，水溶液用CHCl₃(3×)萃取，经Na₂SO₄干燥且浓缩，得到N4-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-N6-甲基-N6-(哌啶-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4,6-二胺(0.225g，50.5％)。m/z(APCI-正)M+1＝500.3。

步骤C：在0℃下将丙烯酰氯(37.1μL，456μmol)添加至N4-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-N6-甲基-N6-(哌啶-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4,6-二胺(0.228g，456μmol)及丙烯酰氯(37.1μL，456μmol)于DCM(5mL)中的经搅拌溶液中。10分钟后，反应混合物用DCM稀释，用10％K₂CO₃(水溶液)(2×)、接着用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥且浓缩。粗残余物经由反相层析使用5至50％ACN(0.1％TFA)/水(0.1％TFA)梯度纯化，历时65分钟。合并含有产物的级分且用10％饱和K₂CO₃(水溶液)处理。10分钟后，水溶液用CHCl₃(5×)萃取，经Na₂SO₄干燥且浓缩，得到1-(4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)(甲基)氨基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(0.114g，45％产率)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.19(d,J＝3.7Hz,1H),8.92(t,J＝9.1Hz,1H),8.63(s,1H),8.51(dd,J＝7.4,0.8Hz,1H),8.23(s,1H),7.98(d,J＝9.4Hz,1H),7.20(d,J＝9.3Hz,1H),7.01(dd,J＝9.0,1.8Hz,1H),6.88(m,2H),6.67(dd,J＝16.8,10.5Hz,1H),6.35(dd,J＝16.8,2.0Hz,1H),5.74(dd,J＝10.6,2.0Hz,1H),4.95(m,2H),4.24(m,1H),3.32(m,1H),3.06(s,3H),2.84(m,1H),2.21(d,J＝2.1Hz,3H),1.97(m,2H),1.80(m,2H)；m/z(APCI-正)M+1＝554.3。

实施例33

1-(4-(4-((3-氯-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在65℃下将3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-醇(892mg，5.98mmol)添加至2-氯-1-氟-4-硝基苯(1.05g，5.98mmol)及Cs₂CO₃(3.90g，12.0mmol)于DMSO(60mL)中的经搅拌溶液中后保持16小时，接着使其冷却至室温。将反应混合物分配于水与EtOAc之间。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到6-(2-氯-4-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(1.75g，96％)。m/z(APCI-正)M+1＝305.1。

步骤B：在70℃下将SnCl₂(H₂O)(3.7g，16mmol)添加至6-(2-氯-4-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(1.0g，3.3mmol)于甲醇(33mL)中的经搅拌溶液中。将混合物在70℃下搅拌16小时，接着减压浓缩。将所得粗物质溶解于EtOAc/1N NaOH水溶液中，分离有机物且经硫酸钠干燥，接着减压浓缩，得到3-氯-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺(708mg，79％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝275.0。

步骤C：在60℃下将3-氯-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺(91mg，0.33mmol)添加至4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(66mg，0.33mmol)于2-丙醇(3mL)中的经搅拌溶液中后保持1.5小时。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到6-氯-N-(3-氯-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(131mg，91％)。m/z(APCI-正)M+1＝438.0。

步骤D：在100℃下将哌嗪-1-甲酸叔丁酯(96mg，0.51mmol)添加至6-氯-N-(3-氯-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(75mg，0.17mmol)于DMSO(1.7mL)中的经搅拌溶液中后保持20小时，接着使其冷却至室温。将反应物在水与EtOAc之间分配。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。快速色谱法纯化，得到4-(4-((3-氯-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(74.3mg，74％)。m/z(APCI-正)M+1＝588.3。

步骤E：在25℃下将TFA(0.48mL，6.3mmol)添加至4-(4-((3-氯-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(74mg，0.13mmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中后保持2小时。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到N-(3-氯-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)-6-(哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(56.3mg，92％)。m/z(APCI-正)M+1＝488.2。

步骤F：在0℃下将丙烯酰氯(7.5μL，92μmol)添加至N-(3-氯-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)-6-(哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(56mg，0.11mmol)及DIEA(40μL，0.23mmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中。将此混合物在0℃下搅拌30分钟。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法纯化，得到1-(4-(4-((3-氯-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(23mg，37％)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ9.46(s,1H),8.46(s,2H),8.36(d,J＝2.6Hz,1H),8.28(d,J＝2.5Hz,1H),8.01-7.93(m,2H),7.70(d,J＝2.5Hz,1H),7.60(d,J＝9.4Hz,1H),7.15(d,J＝8.9Hz,1H),6.89(dd,J＝16.7,10.5Hz,1H),6.17(dd,J＝16.7,2.3Hz,1H),5.74(dd,J＝10.5,2.3Hz,1H),3.97-3.82(m,7H),3.82-3.61(m,4H)。m/z(APCI-正)M+1＝542.2。

实施例34

1-(4-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向装备有搅拌棒的压力管中装入6-氯-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(250mg，0.6mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(556mg，1.8mmol)、二噁烷(6mL)、2M碳酸钾水溶液(0.9mL)及Pd(PPh₃)₄(69.3mg，0.06mmol)。此混合物用氩气吹扫几分钟，密封试管，且使混合物升温至100℃后保持过夜，接着使其冷却至室温。混合物用EtOAc稀释，用水/盐水洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法纯化，得到4-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(264mg，78％)。m/z(APCI-正)M+1＝564.3。

步骤B：向含有4-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(164mg，0.291mmol)的压力管中装入3mL甲醇及150mg皮尔曼氏催化剂(Pearlman's catalyst)。密封试管，且混合物经受氢气气球，同时使其升温至45℃。3.5小时后，使混合物冷却至室温且用氮气吹扫。向混合物中添加甲醇及搅拌混合物且经由GF/F滤纸过滤。减压浓缩滤液，得到4-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(130mg，79％)。m/z(APCI-正)M+1＝566.3。

步骤C：在圆底烧瓶中，将4-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(130mg，0.23mmol)溶解于2mL DCM中。向其中添加TFA(25当量)，且将混合物在室温下搅拌2小时。混合物接着用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(93.4mg，87％)。m/z(APCI-正)M+1＝466.3。

步骤D：在0℃下将丙烯酰氯(2.8μL，34μmol)添加至N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(20mg，43μmol)及DIEA(15μL，86μmol)于DCM(0.5mL)中的经搅拌溶液中。将温度维持在0℃下30分钟。混合物接着用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法纯化，得到1-(4-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(9.6mg)。¹H NMRδ1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.78(s,1H),8.60(s,1H),8.19-8.10(m,2H),7.91-7.83(m,2H),7.78(dd,J＝8.7,2.6Hz,1H),7.57(d,J＝8.7Hz,1H),7.10(d,J＝2.2Hz,1H),7.00(dd,J＝8.7,2.3Hz,1H),6.96-6.79(m,2H),6.13(dd,J＝16.7,2.5Hz,1H),5.69(dd,J＝10.5,2.5Hz,1H),4.65(d,J＝13.0Hz,1H),4.25(d,J＝12.8Hz,1H),3.84(s,3H),3.29-3.18(m,2H),2.80(t,J＝12.6Hz,1H),2.26(s,3H),2.07-1.97(m,2H),1.97-1.80(m,2H)。m/z(APCI-正)M+1＝520.3。

实施例35

1-(3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向压力管装入6-氯-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.24mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(223mg，0.72mmol)、二噁烷(2.4mL)、3当量2M碳酸钾水溶液及Pd(PPh₃)₄(27.7mg，0.024mmol)。此混合物用氩气吹扫几分钟，密封试管，且使混合物升温至100℃后保持16小时，接着使其冷却至室温。混合物用EtOAc/水稀释，用EtOAc萃取，萃取物经硫酸钠干燥且减压浓缩。快速色谱法纯化，得到5-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(111mg，82％)。m/z(APCI-正)M+1＝564.30。

步骤B：在压力管中在75℃下，将甲酸铵(90mg，1.4mmol)添加至5-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(80mg，0.14mmol)及10％Pd/C(80mg)于MeOH(1.4mL)中的经搅拌溶液中后保持1小时。使混合物冷却至室温。用甲醇稀释混合物且过滤。减压浓缩滤液。所得物质用CHCl₃湿磨，且再次过滤以完全移除Pd固体。减压浓缩滤液，得到3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(70mg，87％)。m/z(APCI-正)M+1＝566.30。

步骤C：在20℃下将TFA(0.19mL，2.5mmol)添加至3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(70mg，0.12mmol)于DCM(1.2mL)中的经搅拌溶液中后保持2小时。混合物接着用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(49mg，85％)。m/z(APCI-正)M+1＝466.25。

步骤D：在氮气下在0℃下将丙烯酰氯(6.8μL，84μmol)添加至N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)-6-(哌啶-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(49mg，0.11mmol)及DIEA(27mg，0.21mmol)于DCM(1.1mL)中的经搅拌溶液中。30分钟后，混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法纯化，得到1-(3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(35mg，64％)。¹H NMR(400MHz,DMSO)δ10.01-9.63(m,1H),8.62(d,J＝4.2Hz,1H),8.19-8.12(m,2H),8.09-7.75(m,3H),7.57(d,J＝8.7Hz,1H),7.10(d,J＝2.2Hz,1H),7.00(dd,J＝8.7,2.3Hz,1H),6.97-6.79(m,2H),6.10(dd,J＝16.7,2.4Hz,1H),5.69-5.59(m,1H),4.44-3.95(m,2H),3.93-3.71(m,4H),3.58-3.47(m,1H),3.05-2.88(m,1H),2.27(s,3H),2.18-2.11(m,2H),2.02-1.74(m,1H),1.58-1.53(m,2H)。m/z(APCI-正)M+1＝520.30。

实施例36

1-(5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在8mL小瓶中，将Irppy₂dtbbpy(1.3mg，1.4μmol)、NiBr₂dtbbpy(3.4mg，6.9μmol)、奎宁环(0.02g，0.2mmol)及6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(40mg，92μmol)溶解/悬浮于DMA(1.0mL)中。在氮气下向含有5,7-二-叔丁基-3-苯基-3-(四氟-l5-硼烷基)-2,3-二氢苯并[d]噁唑-3-鎓-2-化物(-ide)(63mg，0.16mmol)及5-羟基-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(35mg，0.15mmol)的另一8mL小瓶中添加经脱气的MTBE(1.0mL)。搅拌1分钟后，穿过隔膜添加吡啶(12μL，0.15mmol)，同时剧烈搅拌。搅拌10分钟后，将溶液吸入注射器中，且经由注射器式过滤器过滤至含有镍及铱组分的反应小瓶中。接着将小瓶加盖，且用氮气鼓泡10分钟，覆上石蜡膜，且在整合式光反应器中用450nm光照射4小时(100％强度，1200rpm搅拌，最大风扇速度)。真空浓缩反应物，且粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用1至10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到呈固体状的5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(33.0mg，59％)。m/z(APCI-正)M+1＝612.30。

步骤B：将TFA(0.21mL，2.7mmol)添加至5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(33mg，54μmol)于DCM(0.54mL)中的经搅拌溶液中。搅拌反应混合物2小时。将反应物分配于EtOAc与10％K₂CO₃之间。用EtOAc(×3)萃取水相。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。产物不经进一步纯化即按原样用于下一反应中。呈固体状的6-(6,6-二甲基哌啶-3-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(25.4mg，92％)。m/z(APCI-正)M+1＝512.30。

步骤C：在0℃下将丙烯酰氯(75μL，0.5摩尔CH₂Cl₂，38μmol)添加至6-(6,6-二甲基哌啶-3-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(24mg，47μmol)及DIPEA(16μL，94μmol)于DCM中的经搅拌溶液中。搅拌反应物30分钟。将反应物在DCM与10％K₂CO₃之间分配。用DCM(×3)萃取水相。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1％至10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到呈固体状的1-(5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(13.5mg，51％)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.37(s,1H),8.76(s,1H),8.51(t,J＝9.1Hz,1H),8.18(d,J＝8.6Hz,1H),8.05(s,1H),7.67(d,J＝8.6Hz,1H),7.41-7.32(m,2H),7.10(dd,J＝8.7,2.3Hz,1H),6.82-6.74(m,1H),6.50(dd,J＝16.9,10.5Hz,1H),6.20-6.11(m,1H),5.60-5.52(m,1H),4.03(dd,J＝14.2,4.6Hz,1H),3.90(s,3H),3.62(dd,J＝14.2,10.1Hz,1H),3.40-3.28(m,1H),2.30(d,J＝2.1Hz,3H),2.24-2.01(m,2H),1.98-1.71(m,2H),1.70(s,3H),1.56(s,3H)；m/z(APCI-正)M+1＝566.2。

实施例37

1-(5-(4-((2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：将5-氧代基六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(100mg，0.45mmol)添加至无水THF(2.2mL)中且冷却至0℃。向此溶液中添加呈于THF中的1M溶液形式的LiHMDS(0.488mL，0.49mmol)，接着分两等份添加Comin试剂(174mg，0.44mmol)。在0℃下60分钟后，TLC分析显示起始物质耗尽。反应物用盐水淬灭，且用EtOAc及H₂O稀释。分离各层，且用EtOAc(3×)萃取水层。合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到油状物。粗残余物经由柱层析纯化，用0％至30％EtOAc/庚烷梯度洗脱，得到5-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,3a,6,6a-四氢环戊[b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(138.6mg，87.4％)，其直接用于下一步骤。

步骤B：将5-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)-3,3a,6,6a-四氢环戊[b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(138.6mg，387.9μmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼戊烷)(108.3mg，426.7μmol)、乙酸钾(114.2mg，1.164mmol)、1,4-二噁烷(3.879mL)、PdCl₂(dppf)-CH₂Cl₂加合物(9.5mg，11.64μmol)及dppf(6.45mg，11.64μmol)合并，且反应物用氩气吹扫10分钟。将反应物密封且在60℃下搅拌16小时。反应物用盐水淬灭，且在EtOAc与水之间分配。用EtOAc(×3)萃取水相。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用0％至60％EtOAc/庚烷梯度洗脱，得到5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-3,3a,6,6a-四氢环戊[b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(126mg，376μmol，96.9％)。

步骤C：将6-氯-N-(2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.11mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-3,3a,6,6a-四氢环戊[b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(77mg，0.23mmol)、Pd(Ph₃P)₄(13mg，11μmol)及K₂CO₃(0.17mL，2摩尔水溶液，0.34mmol)溶解于1,4-二噁烷(1.1mL)中。反应混合物用氩气鼓泡15分钟，随后将反应容器密封且在100℃下搅拌16小时。将反应物冷却至室温，接着在CHCl₃与H₂O之间分配。用CHCl₃(×3)萃取水相。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1％至10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到5-(4-((2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,3a,6,6a-四氢环戊[b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(62.2mg，102μmol，89％)。m/z(APCI-正)M+1＝608.2。

步骤D：将Pd/C(109mg，10％Wt，102μmol)及甲酸铵(64.5mg，1.02mmol)添加至5-(4-((2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,3a,6,6a-四氢环戊[b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(62.2mg，102μmol)于甲醇(1.02mL)中的经搅拌溶液中，且在64℃下搅拌1小时，随后冷却至室温。反应物经由硅藻土过滤且浓缩。将粗物质溶解于最少量的CHCl₃中以使任何残余甲酸铵沉淀，且过滤。产物5-(4-((2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(50.5mg，81％)不经进一步纯化即直接用于下一反应中。m/z(APCI-正)M+1＝610.3。

步骤E：将TFA(0.13mL，1.6mmol)添加至5-(4-((2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(50mg，82μmol)于DCM(0.82mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在室温下搅拌2小时。反应物用10％K₂CO₃淬灭且用EtOAc萃取。产物N-(2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)-6-(八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(36.3mg，87％)不经进一步纯化即直接用于下一反应中。m/z(APCI-正)M+1＝510.2。

步骤F：在0℃下将丙烯酰氯(0.12mL，0.4摩尔，47μmol)添加至N-(2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)-6-(八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(30mg，59μmol)及DIPEA(21μL，0.12mmol)于DCM(0.59mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在此温度下搅拌30分钟。反应物用10％K₂CO₃淬灭且用DCM萃取。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物通过反相制备型HPLC纯化，用0％至40％乙腈(0.1％TFA)/水(0.1％TFA)梯度洗脱，得到呈固体状的1-(5-(4-((2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-基)丙-2-烯-1-酮(4.8mg，8.5μmol，14％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.26-9.15(m,1H),8.83-8.72(m,1H),8.62-8.53(m,1H),8.13-8.04(m,1H),7.88(s,1H),7.64-7.56(m,1H),7.40-7.33(m,2H),7.10-7.02(m,1H),6.74-6.65(m,1H),6.60-6.42(m,1H),6.36(ddd,J＝19.0,16.8,2.2Hz,1H),5.65(ddd,J＝12.2,10.1,2.2Hz,1H),4.65-4.43(m,1H),4.08-3.97(m,1H),3.87(s,3H),3.82-3.63(m,1H),3.59-3.42(m,1H),3.11-2.67(m,2H),2.48-2.38(m,1H),2.37(s,3H),2.18-1.80(m,4H)[NMR指示酰胺的旋转异构体]；m/z(APCI-正)M+1＝564.2。

实施例38

1-(5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向25mL圆底烧瓶中装入4-氯-7-甲氧基-6-(甲硫基)吡啶并[3,2-d]嘧啶(0.15g，0.63mmol)、4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯胺(0.18g，0.63mmol)及丙-2-醇(3.1mL)。将混合物在70℃下搅拌1小时，接着用25％IPA/CHCl₃稀释，且用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤一次。有机物经Na₂SO₄干燥，过滤且真空浓缩，接着通过柱层析(0至10％MeOH/DCM)纯化，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-7-甲氧基-6-(甲硫基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.29g，95％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝484.1。

步骤B：向25mL圆底烧瓶中装入N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-7-甲氧基-6-(甲硫基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.16g，0.33mmol)及DCM(3.3mL，0.33mmol)，且在搅拌下将其冷却至0℃。将m-CPBA(70％wt于水中，94mg，0.38mmol)添加至烧瓶中，且将混合物在0℃下搅拌90分钟。反应物用DCM稀释，且用饱和硫代硫酸钠水溶液洗涤一次，并且用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次。有机物经Na₂SO₄干燥，过滤且真空浓缩，得到呈砜(25％)、亚砜(75％)及杂质的混合物的N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-7-甲氧基-6-(甲基亚磺酰基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.19g，112％)，其以粗物质形式使用。

步骤C：向装备有搅拌棒的打兰小瓶中装入N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-7-甲氧基-6-(甲基亚磺酰基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(25mg，50μmol)、DMA(0.20mL)、Hunig氏碱(44μL，0.25mmol)及六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯HCl(37mg，0.15mmol)。将混合物加热至140℃后保持2小时。将物质干燥装载至硅胶上且通过柱层析(0至10％MeOH/DCM)纯化，得到5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(8.4mg，26％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝648.2。

步骤D：向装备有搅拌棒的打兰小瓶中装入5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(8mg，12μmol)及DCM(0.12mL)。将混合物冷却至0℃，且将TFA(19μL，0.25mmol)添加至搅拌的溶液中。移除冰浴，且将混合物在室温下搅拌2小时。用乙酸乙酯及饱和碳酸氢钠水溶液稀释混合物。有机物经Na₂SO₄干燥且真空浓缩，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(7mg，100％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝548.2。

步骤E：向打兰小瓶中装入N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基)-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(9mg，16μmol)、DCM(0.16mL)及Hunig氏碱(3.4μL，20μmol)。搅拌溶液且将其冷却至0℃，接着逐滴添加丙烯酰氯(12μL，12μmol)。使混合物升温至室温且搅拌4小时。将反应物干燥装载至硅胶上且通过柱层析(0至10％MeOH/DCM)纯化，得到1-(5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-基)丙-2-烯-1-酮(1.42mg，13％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝602.2。1HNMR(400MHz,cdcl3)δ8.96-8.90(m,2H),8.60(d,J＝9.0Hz,1H),8.56-8.49(m,1H),8.25(s,1H),7.22(d,J＝15.1Hz,1H),7.16-7.10(m,1H),6.94-6.88(m,2H),6.53-6.36(m,2H),5.72(dd,J＝9.6,2.8Hz,1H),4.29-4.16(m,2H),4.07-3.97(m,1H),3.97-3.92(m,4H),3.90-3.78(m,1H),3.80-3.71(m,3H),3.07(d,J＝6.6Hz,1H),2.28-2.19(m,1H),2.12-2.02(m,1H)。

实施例39

1-(4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向装备有搅拌棒的打兰小瓶中装入N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-7-甲氧基-6-(甲基亚磺酰基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(25mg，50μmol)、DMA(0.20mL)及4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(81mg，0.40mmol)。将混合物冷却至0℃，且将NaH(60％wt于矿物油中)(8.0mg，0.20mmol)添加至搅拌的溶液中。移除冰浴，且将混合物在40℃下搅拌2小时，接着在50℃下搅拌1小时。将物质干燥装载至硅胶上且通过柱层析(Redisep 12g，0至10％MeOH/DCM)纯化，得到4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(17mg，52％)。m/z(APCI-正)M+1＝637.2。

根据实施例38步骤D至E合成，得到1-(4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(5.9mg，30％)。m/z(APCI-正)M+1＝591.3。1H NMR(400MHz,cdcl3)δ8.97(t,J＝8.9Hz,1H),8.84-8.78(m,1H),8.72(s,1H),8.53(dd,J＝7.4,0.8Hz,1H),8.25(s,1H),7.40(s,1H),7.15(dd,J＝9.2,2.0Hz,1H),6.96-6.86(m,1H),6.64(dd,J＝16.8,10.6Hz,1H),6.31(dd,J＝16.8,1.9Hz,1H),5.72(dd,J＝10.6,1.9Hz,1H),5.58-5.49(m,1H),4.15(s,1H),4.02(s,3H),3.95(s,1H),3.61(s,3H),2.23(s,2H),2.11-1.95(m,2H)。

实施例40

1-(4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向装备有搅拌棒的25mL圆底烧瓶中装入4,6-二氯-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶(98mg，043mmol)、IPA(2.1mL)及4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯胺(0.11g，0.43mmol)。将混合物加热至60℃后保持2小时。物质用25％IPA/CHCl₃稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次，经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物通过柱层析(0至10％MeOH/DCM)纯化，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.19g，99％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝452.1。

根据实施例39，在步骤A中用N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-7-甲氧基-6-(甲基亚磺酰基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺来合成，得到1-(4-((4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氧基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(3.8mg，45％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝571.2。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.87-8.78(m,1H),8.71(s,1H),8.51(dd,J＝7.4,0.8Hz,1H),8.23(s,1H),7.38(s,1H),7.01(dd,J＝9.0,1.8Hz,1H),6.90(dd,J＝7.4,2.6Hz,1H),6.86(dd,J＝2.6,0.8Hz,1H),6.65(dd,J＝16.8,10.6Hz,1H),6.32(dd,J＝16.8,1.9Hz,1H),5.73(dd,J＝10.6,1.9Hz,1H),5.60-5.50(m,1H),4.18(s,1H),4.03(s,3H),3.99-3.95(m,1H),3.61(s,2H),2.32-2.13(m,6H),2.02(d,J＝8.8Hz,2H)。

实施例41

1-(4-(7-甲氧基-4-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向圆底烧瓶中装入4,6-二氯-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶(0.15g，0.65mmol)、3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯酚(0.17g，0.65mmol)、DMA(3.3mL)及Cs₂CO₃(0.43g，1.3mmol)。在搅拌下将混合物加热至80℃后保持4小时，接着用水稀释。经由真空过滤收集所得固体，得到6-氯-7-甲氧基-4-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶(0.19g，63％)。m/z(APCI-正)M+1＝448.2。

根据实施例38步骤C至E，用6-氯-7-甲氧基-4-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-7-甲氧基-6-(甲基亚磺酰基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺来合成，得到1-(4-(7-甲氧基-4-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯氧基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(1.8mg，61％)。m/z(APCI-正)M+1＝552.3。1H NMR(400MHz,cdcl3)δ8.60(s,1H),7.86(s,1H),7.42-7.31(m,3H),7.16(d,J＝2.8Hz,1H),7.09(dd,J＝8.8,2.3Hz,1H),7.01(dd,J＝8.8,2.9Hz,1H),6.90(d,J＝8.8Hz,1H),6.62(dd,J＝16.8,10.6Hz,1H),6.33(dd,J＝16.8,1.9Hz,1H),5.74(dd,J＝10.6,1.9Hz,1H),4.04(s,3H),3.87-3.83(m,4H),3.77-3.73(m,4H),3.49(s,3H),2.33(s,3H)。

实施例42

1-(4-(7-甲氧基-4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向装备有搅拌棒的25mL圆底烧瓶中装入3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯胺(0.18g，0.72mmol)、4,6-二氯-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶(0.17g，0.72mmol)及2-丙醇(3.6mL)。将混合物在70℃下搅拌1小时，接着用25％IPA/CHCl₃稀释。有机物用2M饱和碳酸氢钠水溶液洗涤两次，经Na₂SO₄干燥，过滤且真空浓缩，得到6-氯-7-甲氧基-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.32g，定量)。m/z(APCI-正)M⁺1＝447.2。

步骤B：向圆锥形玻璃微波容器中装入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(28mg，90μmol)、6-氯-7-甲氧基-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(20mg，45μmol)、1,4-二噁烷(0.45mL)、K₂CO₃(19mg，0.13mmol)及Pd(PPh₃)₄(7.8mg，6.7μmol)。混合物用氩气鼓泡，接着将其加热至100℃后保持16小时。物质通过柱层析(0至10％MeOH/DCM)直接纯化，得到4-(7-甲氧基-4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(19mg，72％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝594.4。

步骤C：向装备有搅拌棒的小瓶中装入4-(7-甲氧基-4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(19mg，32μmol)、甲醇(0.32mL)、甲酸铵(20mg，0.32mmol)及钯(10％wt于碳上，34mg，32μmol)。将混合物加热至70℃后保持1小时。物质用DCM稀释且过滤，得到4-(7-甲氧基-4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(19mg，100％)，其不经进一步纯化即继续用于后续步骤。m/z(APCI-正)M⁺1＝596.3。

其余步骤遵循实施例38步骤D至E，用4-(7-甲氧基-4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯代替5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)-7-甲氧基吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯，得到1-(4-(7-甲氧基-4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(1.3mg，28％)。m/z(APCI-正)M⁺1＝550.3。1H NMR(400MHz,cdcl3)δ8.77(s,1H),8.67(s,1H),7.84(s,1H),7.75-7.66(m,2H),7.38(s,1H),7.35-7.29(m,2H),7.05(dd,J＝8.8,2.2Hz,1H),6.94(d,J＝8.5Hz,1H),6.67(dd,J＝16.8,10.6Hz,1H),6.33(dd,J＝16.8,2.0Hz,1H),5.72(dd,J＝10.5,2.0Hz,1H),4.90(d,J＝13.2Hz,1H),4.19(d,J＝13.2Hz,1H),4.00(s,3H),3.84(s,3H),3.58-3.47(m,2H),3.29(s,1H),2.86(s,1H),2.35(s,3H),2.03(d,J＝13.0Hz,3H)。

本发明的其他化合物通过修改上文所例示的方法来制备，且展示于下表2中。表2中的方法是指上文的实施例编号程序，其中该表中的化合物是以与该实施例类似的程序、改变适当中间体或反应物来制备。

表2

实施例161

1-(7-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-9-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向含有6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.23mmol)的压力管中装入7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-9-甲酸叔丁酯(121mg，0.345mmol)、二噁烷(2.3mL)、2M碳酸钾水溶液(0.345mL，3当量)及Pd(PPh₃)₄(26.6mg，0.023mmol)。混合物用氩气吹扫几分钟，且密封试管。使混合物升温至100℃后保持16小时，接着使其冷却至室温。混合物接着用EtOAc/水稀释，用EtOAc萃取，萃取物经硫酸钠干燥且减压浓缩。柱层析(DCM至10％MeOH-DCM)得到7-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-9-甲酸叔丁酯(91.3mg，64％)。m/z(APCI-正)M+1＝624.30。

步骤B：向含有7-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-6-烯-9-甲酸叔丁酯(91.3mg，0.146mmol)的压力管中装入甲醇(1.5mL)、甲酸铵(92.3mg，1.46mmol)及10％Pd/C(90mg)。密封试管，且使混合物升温至75℃后保持1.5小时，接着使其冷却至室温。混合物用MeOH稀释，经由连接至注射器末端的acrodisc过滤器过滤，且减压浓缩滤液。将所得粗产物溶解于EtOAc/10％碳酸钾水溶液中，经硫酸钠干燥且减压浓缩，得到7-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-甲酸叔丁酯(61mg，67％)。m/z(APCI-正)M+1＝626.35。

步骤C：在20℃下将TFA(0.22g，20当量，1.9mmol)添加至7-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬烷-9-甲酸叔丁酯(61mg，97μmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中后保持2小时。混合物接着用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到6-(3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-7-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(43.1mg，84％)。m/z(APCI-正)M+1＝526.30。

步骤D：在氮气下在0℃下将丙烯酰氯(5.9mg，0.8当量，65μmol)添加至6-(3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-7-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(43mg，1当量，82μmol)及DIEA(21mg，2当量，0.16mmol)于DCM(0.8mL)中的经搅拌溶液中后保持30分钟。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH-DCM)，得到1-(7-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-9-基)丙-2-烯-1-酮(45mg，95％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.35-9.27(m,1H),8.76-8.71(m,1H),8.50-8.39(m,1H),8.11(d,J＝8.7Hz,1H),7.90(s,1H),7.72-7.62(m,1H),7.39-7.32(m,2H),7.08(dd,J＝8.8,2.1Hz,1H),6.76(d,J＝9.0Hz,1H),6.70-6.57(m,1H),6.48-6.39(m,1H),5.85-5.76(m,1H),5.02-4.77(m,1H),4.64-4.05(m,2H),4.02-3.56(m,7H),3.03-2.90(m,1H),2.59-2.39(m,2H),2.35-2.23(m,5H)。m/z(APCI-正)M+1＝580.35。

实施例162

(S)-1-(2-环丙基-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在100℃下将(S)-2-环丙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(59mg，1.5当量，0.26mmol)添加至6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(75mg，1当量，0.17mmol)及DIEA(67mg，3当量，0.52mmol)于DMSO(1.7mL)中的经搅拌溶液中后保持16小时，接着使其冷却至室温。将反应物在水与EtOAc之间分配。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。快速色谱法得到(S)-2-环丙基-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(67mg，62％)。m/z(APCI-正)M+1＝625.30。

步骤B：在20℃下将TFA(0.24g，20当量，2.1mmol)添加至(S)-2-环丙基-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(67mg，1当量，0.11mmol)于DCM(1.1mL)中的经搅拌溶液中后保持2小时。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到(S)-6-(3-环丙基哌嗪-1-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(35.5mg，63％)。m/z(APCI-正)M+1＝525.30。

步骤C：在氮气下在0℃下将丙烯酰氯(4.9mg，0.8当量，54μmol)添加至(S)-6-(3-环丙基哌嗪-1-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(36mg，1当量，68μmol)及DIEA(26mg，3当量，0.20mmol)于DCM(0.8mL)中的经搅拌溶液中后保持30分钟。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法得到(S)-1-(2-环丙基-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(21.8mg)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.99(s,1H),8.68-8.42(m,2H),7.97(d,J＝9.3Hz,1H),7.86(s,1H),7.37-7.28(m,3H),7.06(dd,J＝8.7,2.1Hz,1H),6.77(d,J＝8.8Hz,1H),6.63-6.58(m,1H),6.36(d,J＝16.4Hz,1H),5.76(d,J＝10.6Hz,1H),4.88-2.89(m,7H),3.85(s,3H),2.30(s,3H),1.40-1.16(m,1H),0.74-0.30(m,4H)。m/z(APCI-正)M+1＝579.30。

实施例163

外消旋-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-环丙基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在100℃下将2-环丙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(132mg，2当量，585μmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺HCl(134mg，1当量，292μmol)及DIEA(151mg，4当量，1.17mmol)于DMSO(3mL)中的经搅拌溶液中后保持16小时，接着使其冷却至室温。混合物用EtOAc稀释，用盐水/水洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法得到外消旋-(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-环丙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯产物(106mg，59％)。m/z(APCI-正)M+1＝612.30。

步骤B：在20℃下将TFA(395mg，20当量，3.47mmol)添加至4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-环丙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(106mg，1当量，173μmol)于DCM(1.7mL)中的经搅拌溶液中后保持2小时。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到外消旋-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3-环丙基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(79mg，89％)。m/z(APCI-正)M+1＝512.20。

步骤C：在氮气下在0℃下将丙烯酰氯(6.49mg，1当量，71.7μmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3-环丙基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(36.7mg，1当量，71.7μmol)及DIEA(27.8mg，3当量，215μmol)于DCM(0.7mL)中的经搅拌溶液中后保持30分钟。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH-DCM)得到外消旋-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-环丙基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(24.6mg)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.11(d,J＝3.4Hz,1H),8.84(t,J＝9.0Hz,1H),8.65(s,1H),8.51(dd,J＝7.3,0.7Hz,1H),8.24(s,1H),8.00(d,J＝9.3Hz,1H),7.34(d,J＝9.4Hz,1H),7.01(dd,J＝9.0,1.5Hz,1H),6.93-6.85(m,2H),6.67-6.56(m,1H),6.37(dd,J＝16.7,1.5Hz,1H),5.76(dd,J＝10.5,1.7Hz,1H),4.60-4.55(m,2H),3.35(dd,J＝13.1,3.6Hz,1H),3.19(td,J＝12.7,3.5Hz,1H),2.21(s,3H),1.43-1.17(m,1H),0.77-0.36(m,4H)。m/z(APCI-正)M+1＝566.20。

实施例164

(R)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-乙基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在100℃下将(R)-2-乙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(76mg，2当量，0.36mmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(75mg，1当量，0.18mmol)及DIEA(92mg，4当量，0.71mmol)于DMSO(1.7mL)中的经搅拌溶液中后保持16小时，接着使其冷却至室温。混合物用EtOAc稀释，用水/盐水洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH-DCM)得到(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-乙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(74mg，69％)。m/z(APCI-正)M+1＝600.30。

步骤B：在20℃下将TFA(0.42g，30当量，3.7mmol)添加至(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-乙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(74mg，1当量，0.12mmol)于DCM(1.2mL)中的经搅拌溶液中后保持16小时。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-(3-乙基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(62mg，100％)。m/z(APCI-正)M+1＝500.30。

步骤C：在0℃下将丙烯酰氯(11mg，1当量，0.12mmol)添加至(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-(3-乙基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(62mg，1当量，0.12mmol)及DIEA(48mg，3当量，0.37mmol)于DCM(1.2mL)中的经搅拌溶液中后保持30分钟。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH-DCM)得到(R)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-乙基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(41.5mg，60％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.02(d,J＝3.0Hz,1H),8.89(d,J＝9.1Hz,1H),8.67(s,1H),8.51(dd,J＝6.6,1.6Hz,1H),8.24(s,1H),8.00(d,J＝9.3Hz,1H),7.26(d,1H),6.95(d,J＝11.1Hz,1H),6.92-6.85(m,2H),6.64(dd,J＝16.7,10.5Hz,1H),6.38(d,J＝16.8Hz,1H),5.77(dd,J＝10.5,1.8Hz,1H),5.04-3.79(m,4H),3.68-2.98(m,3H),2.27(s,3H),1.76(s,2H),0.98(t,J＝7.4Hz,3H)。m/z(APCI-正)M+1＝554.30。

实施例165

(R)-1-(2-环丙基-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在100℃下将(R)-2-环丙基哌嗪-1-甲酸叔丁酯盐酸盐(90mg，2当量，0.34mmol)添加至6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(75mg，1当量，0.17mmol)及DIEA(89mg，4当量，0.69mmol)于DMSO(1.7mL)中的经搅拌溶液中后保持16小时，接着使其冷却至室温。混合物用EtOAc稀释，用盐水/水洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH-DCM)得到(R)-2-环丙基-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(48.3mg，45％)。m/z(APCI-正)M+1＝626.35。

步骤B：在20℃下将TFA(264mg，30当量，2.32mmol)添加至(R)-2-环丙基-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(48.3mg，1当量，77.2μmol)于DCM(0.8mL)中的经搅拌溶液中后保持16小时。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到(R)-6-(3-环丙基哌嗪-1-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(34.5mg，85％)。此物质直接用于下一步骤。

步骤C：在氮气下在0℃下将丙烯酰氯(5.94mg，1当量，65.6μmol)添加至(R)-6-(3-环丙基哌嗪-1-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(34.5mg，1当量，65.6μmol)及DIEA(25.5mg，3当量，197μmol)于DCM(0.7mL)中的经搅拌溶液中后保持30分钟。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH-DCM)得到(R)-1-(2-环丙基-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(24.4mg，64％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.03-8.98(m,1H),8.66-8.57(m,2H),8.30(d,J＝2.3Hz,1H),8.04(s,1H),7.97(d,J＝9.3Hz,1H),7.61(d,J＝2.4Hz,1H),7.32(d,J＝9.3Hz,1H),6.76(d,J＝8.9Hz,1H),6.67-6.56(m,1H),6.36(d,J＝16.6Hz,1H),5.76(d,J＝11.2Hz,1H),5.02-3.00(m,7H),3.94(s,3H),2.31(s,3H),1.45-1.13(m,1H),0.77-0.33(m,4H)。m/z(APCI-正)M+1＝580.30。

实施例166

1-((2R,4SR,6S)-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二甲基哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在8mL小瓶中，将六氟磷酸(4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶)双[2-(2-吡啶基-kN)苯基-kC]铱(III)(1.6mg，1.7μmol)、(SP-4-2)-[4,4'-双(1,1-二甲基乙基)-2,2'-联吡啶-κN1,κN1']二溴-镍(4.2mg，8.6μmol)、奎宁环(26mg，0.23mmol)、邻苯二甲酰亚胺(3.8mg，0.026mmol)及6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.11mmol)溶解于DMA(1mL)中。在氮气下向另一8ml小瓶中添加5,7-二-叔丁基-3-苯基-3-(四氟-l5-硼烷基)-2,3-二氢苯并[d]噁唑-3-鎓-2-化物(95mg，0.24mmol)、(2S,4r,6R)-4-羟基-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(53mg，0.23mmol)及无水MTBE(1mL)。搅拌1分钟后，添加吡啶(19μL，0.23mmol)，且剧烈搅拌混合物5分钟。将此混合物吸入注射器中，且经由acrodisc过滤至第一小瓶中。将此小瓶加盖，用氮气吹扫几分钟，覆上石蜡膜，且在光反应器中用450nm光照射4小时(100％强度，750rpm搅拌，最大速度风扇)。混合物用EtOAc稀释，用盐水洗涤若干次，经硫酸钠干燥且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH-DCM)得到(2R,4SR,6S)-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(32mg，45％)。m/z(APCI-正)M+1＝612.40。

步骤B：在20℃下将TFA(0.17g，30当量，1.5mmol)添加至(2R,4SR,6S)-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(30mg，1当量，49μmol)于DCM(0.5mL)中的经搅拌溶液中后保持5小时。混合物接着用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到6-((2R,4SR,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(24mg，96％)。m/z(APCI-正)M+1＝512.30。

步骤C：在氮气下在0℃下将丙烯酰氯(3.4mg，0.8当量，38μmol)添加至6-((2R,4SR,6S)-2,6-二甲基哌啶-4-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(24mg，1当量，47μmol)及DIEA(18mg，3当量，0.14mmol)于DCM(0.5mL)中的经搅拌溶液中后保持30分钟。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH-DCM)得到1-((2R,4SR,6S)-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二甲基哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(12mg，45％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.42-9.25(m,1H),8.74(s,1H),8.56-8.43(m,1H),8.17-8.08(m,1H),7.86(s,1H),7.71-7.58(m,1H),7.38-7.32(m,2H),7.11-7.03(m,1H),6.80-6.62(m,2H),6.43-6.31(m,1H),5.76-5.68(m,1H),5.21-4.32(m,2H),3.86(s,3H),3.68-2.99(m,1H),2.57-1.90(m,5H),2.32(s,3H),1.54-1.38(m,6H)。m/z(APCI-正)M+1＝566.30。此物质为6:1比率的非对映异构体。

实施例167

(S)-1-(2-环丙基-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在100℃下将(S)-2-环丙基哌嗪盐酸盐(86mg，2.5当量，0.43mmol)添加至6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(75mg，1当量，0.17mmol)及DIEA(0.11g，5当量，0.86mmol)于DMSO(1.7mL)中的经搅拌溶液中后保持16小时，接着使其冷却至室温。混合物用EtOAc稀释，用盐水/水、接着用10％碳酸钾水溶液(2×)洗涤，经硫酸钠干燥且减压浓缩。快速色谱法(DCM至20％MeOH/DCM)得到(S)-6-(3-环丙基哌嗪-1-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(34.3mg，38％)。m/z(APCI-正)M+1＝526.20。

步骤B：在氮气下在0℃下将丙烯酰氯(5.91mg，1当量，65.3μmol)添加至(S)-6-(3-环丙基哌嗪-1-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(34.3mg，1当量，65.3μmol)及DIEA(25.3mg，3当量，196μmol)于DCM(0.7mL)中的经搅拌溶液中后保持30分钟。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MEOH/DCM)得到(S)-1-(2-环丙基-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(20mg，53％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.01(s,1H),8.66-8.57(m,2H),8.30(s,1H),8.04(s,1H),7.98(d,J＝9.2Hz,1H),7.61(s,1H),7.35-7.28(m,1H),6.76(d,J＝8.8Hz,1H),6.67-6.56(m,1H),6.36(d,J＝16.6Hz,1H),5.76(d,J＝10.3Hz,1H),4.95-2.94(m,7H),3.93(s,3H),2.31(s,3H),1.45-1.11(m,2H),0.75-0.32(m,4H)。m/z(APCI-正)M+1＝580.3。

实施例168

外消旋-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-(二氟甲基)哌嗪-1-基)丁-2-炔-1-酮

步骤A：在100℃下将外消旋-(R)-2-(二氟甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(140mg，2当量，593μmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(125mg，1当量，296μmol)及DIEA(153mg，4当量，1.19mmol)于DMSO(2.4mL)中的经搅拌溶液中后保持16小时。添加另外1当量哌嗪及2当量DIEA，且将混合物在100℃下再搅拌24小时，接着使其冷却至室温。混合物用EtOAc稀释，用水/盐水洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH/DCM)得到外消旋-(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-(二氟甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(128mg，70％)。m/z(APCI-正)M+1＝622.3。

步骤B：在20℃下将TFA(0.27g，30当量，2.4mmol)添加至外消旋-(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-(二氟甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(49mg，1当量，79μmol)于DCM(0.8mL)中的经搅拌溶液中后保持16小时。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤2次，经硫酸钠干燥且减压浓缩，得到外消旋-(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3-(二氟甲基)哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(41mg，100％)。m/z(APCI-正)M+1＝522.20。

步骤C：在20℃下将2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(0.13g，50％Wt，2.5当量，0.20mmol)添加至外消旋-(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3-(二氟甲基)哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(41mg，1当量，79μmol)、丁-2-炔酸(9.9mg，1.5当量，0.12mmol)及DIEA(51mg，0.39mmol)于DMF(0.8mL)中的经搅拌溶液中后保持16小时。混合物用EtOAc稀释，用水/盐水(3×)、10％碳酸钾水溶液(1×)洗涤，经硫酸钠干燥且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH/DCM)得到外消旋-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-(二氟甲基)哌嗪-1-基)丁-2-炔-1-酮(32mg，69％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.05(s,1H),8.82(t,J＝9.0Hz,1H),8.67(d,J＝4.4Hz,1H),8.54-8.47(m,1H),8.24(s,1H),8.04(dd,J＝9.3,4.9Hz,1H),7.31(dd,J＝11.1,9.3Hz,1H),7.01(dd,J＝9.3,1.7Hz,1H),6.93-6.85(m,2H),6.26-5.82(m,1H),5.09-4.78(m,1H),4.70(dd,J＝13.9,7.9Hz,1H),4.59-4.29(m,1H),3.74-3.62(m,1H),3.56(ddd,J＝14.3,4.9,2.4Hz,1H),3.45-3.28(m,1H),3.25-3.05(m,1H),2.21(t,J＝1.7Hz,3H),2.09(d,J＝1.6Hz,3H)。m/z(APCI-正)M+1＝588.20。

实施例169

1-((2R,5R)-5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向含有6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.23mmol)的压力管中装入(R)-2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(149mg，0.460mmol)、二噁烷(2.3mL)、2M碳酸钾水溶液(0.345mL，3当量)及Pd(PPh₃)₄(26.6mg，0.023mmol)。混合物用氩气吹扫几分钟，密封试管，且使混合物升温至100℃后保持16小时，接着使其冷却至室温。混合物接着用EtOAc/水稀释，用EtOAc萃取，萃取物经硫酸钠干燥且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH/DCM)得到(R)-5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(79.5mg，58％)。m/z(APCI-正)M+1＝596.30。

步骤B：向含有(R)-5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基-3,6-二氢吡啶-1(2H)-甲酸叔丁酯(79.5mg，0.133mmol)的压力管中装入甲醇(1.3mL)、甲酸铵(84.2mg，1.33mmol)及10％Pd/C(80mg)。密封试管，且使混合物升温至75℃后保持2小时，接着使其冷却至室温。混合物用甲醇稀释，经由连接至注射器末端的acrodisc过滤器过滤，且减压浓缩滤液。将所得粗产物溶解于EtOAc/10％碳酸钾水溶液中，经硫酸钠干燥且减压浓缩，得到非对映体混合物(56.1mg)。手性OD-H层析(MeOH:IPA:DEA，80:20:0.01，5％-70％历时16分钟)分离非对映异构体，得到(2R,5R)-5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(20.7mg，峰1)及(2R,5S)-5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(17.7mg，峰2，总共70％)。峰1：m/z(APCI-正)M+1＝598.40；及峰2：m/z(APCI-正)M+1＝598.35。

步骤C：在20℃下将TFA(79.0mg，53.4μL，20当量，693μmol)添加至(2R,5R)-5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(20.7mg，0.1摩尔，1当量，34.6μmol)于DCM(0.4mL)中的经搅拌溶液中后保持2小时。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)-6-((3R,6R)-6-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(12.7mg，74％)。m/z(APCI-正)M+1＝498.30。

步骤D：在氮气下在0℃下将丙烯酰氯(1.85mg，0.8当量，20.4μmol)添加至N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)-6-((3R,6R)-6-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(12.7mg，1当量，25.5μmol)及DIEA(9.90mg，3当量，76.6μmol)于DCM(0.3mL)中的经搅拌溶液中后保持30分钟。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH/DCM)得到1-((2R,5R)-5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(7.2mg，51％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.56(s,1H),8.68(s,1H),8.08(d,J＝8.7Hz,1H),8.00-7.82(m,2H),7.73(d,J＝8.7Hz,1H),7.40(d,J＝2.2Hz,1H),7.35(d,J＝8.7Hz,1H),7.07(dd,J＝8.7,2.2Hz,1H),6.70(d,J＝8.9Hz,1H),6.55(dd,J＝16.7,10.6Hz,1H),6.13(dd,J＝16.7,1.9Hz,1H),5.59-5.52(m,1H),4.43(s,1H),3.86(s,3H),3.47-3.24(m,2H),2.43-2.22(m,5H),1.91-1.42(m,2H),1.35(d,J＝6.8Hz,3H)。m/z(APCI-正)M+1＝552.30。

实施例170

1-((2R,5S)-5-(4-((2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在20℃下将TFA(76.7mg，30当量，673μmol)添加至(2R,5S)-5-(4-((2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(13.4mg，1当量，22.4μmol，实施例169步骤B)于DCM(0.2mL)中的经搅拌溶液中后保持2小时。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到N-(2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)-6-((3S,6R)-6-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(7.8mg，70％)。m/z(APCI-正)M+1＝498.30。

步骤B：在氮气下在0℃下将丙烯酰氯(1.1mg，0.8当量，13μmol)添加至N-(2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)-6-((3S,6R)-6-甲基哌啶-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(7.8mg，1当量，16μmol)及DIEA(6.1mg，3当量，47μmol)于DCM(0.16mL)中的经搅拌溶液中后保持30分钟。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH/DCM)得到(2.4mg，28％)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.25(s,1H),8.80(s,1H),8.67-8.52(m,1H),8.21-8.03(m,1H),7.88(s,1H),7.66(d,J＝8.6Hz,1H),7.40-7.33(m,2H),7.07(d,J＝8.6Hz,1H),6.74-6.59(m,2H),6.34-6.22(m,1H),5.74-5.64(m,1H),5.20-4.77(m,1H),4.49-4.07(m,1H),3.87(s,3H),3.71-2.93(m,2H),2.38(s,3H),2.26-1.71(m,4H),1.47-1.22(m,3H)。m/z(APCI-正)M+1＝552.25。

实施例171

rel-(R)-1-(3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向含有6-氯-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(110mg，0.264mmol)的压力管中装入6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-2,3,4,7-四氢-1H-氮呯-1-甲酸叔丁酯(128mg，0.396mmol)、二噁烷(2.6mL)、碳酸钾水溶液(3当量2M溶液)及Pd(PPh₃)₄(30.5mg，0.0264mmol)。此混合物用氩气吹扫几分钟，密封试管，且使混合物升温至100℃后保持16小时，接着使其冷却至室温。混合物用EtOAc稀释，用水/盐水洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH/DCM)得到rel-(R)-1-(3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(101mg，66％)。m/z(APCI-正)M+1＝578.30。

步骤B：向含有6-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,3,4,7-四氢-1H-氮呯-1-甲酸叔丁酯(101mg，0.175mmol)的压力管中装入甲醇(1.75mL)、甲酸铵(110mg，1.75mmol)及10％Pd/C(100mg)。密封试管，且使混合物升温至75℃后保持1小时，接着使其冷却至室温。混合物用MeOH稀释，经由连接至注射器的acrodisc过滤器过滤，且减压浓缩滤液。将所得粗物质溶解于EtOAc/10％碳酸钾水溶液中，用EtOAc萃取，萃取物经硫酸钠干燥且减压浓缩，得到外消旋-3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(67.4mg，67％)。m/z(APCI-正)M+1＝580.30。手性分离(AS-H(2×25cm)20％甲醇(0.1％DEA)/CO₂，100巴，60mL/min，220nm，注射体积：0.5mL，2mg/mL DCM:甲醇)，得到rel-(R)-3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(29mg)及rel-(S)-3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(27mg)。两种异构体：m/z(APCI-正)M+1＝580.30。

步骤C：在20℃下将TFA(0.17g，30当量，1.5mmol)添加至rel-(R)-3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(29mg，1当量，50μmol)于DCM(0.5mL)中的经搅拌溶液中后保持2小时。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到rel-(R)-6-(氮杂环庚烷-3-基)-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(20.8mg，87％)。m/z(APCI-正)M+1＝480.30。

步骤D：在氮气下在0℃下将丙烯酰氯(3.93mg，1当量，43.4μmol)添加至rel-(R)-6-(氮杂环庚烷-3-基)-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(20.8mg，1当量，43.4μmol)及DIEA(16.8mg，3当量，130μmol)于DCM(0.5mL)中的经搅拌溶液中后保持30分钟。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH/DCM)得到rel-(R)-1-(3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(11.3mg，49％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.29-8.90(m,1H),8.78-8.71(m,1H),8.17-8.05(m,1H),7.87-7.81(m,2H),7.81-7.57(m,2H),7.37-7.29(m,2H),7.11-7.03(m,1H),6.99-6.91(m,1H),6.71-6.59(m,1H),6.46-6.37(m,1H),5.78-5.67(m,1H),4.34-4.10；3.83-3.60；3.52-3.22(m,5H),3.88-3.83(m,3H),2.39-2.33(m,3H),2.22-1.76(m,5H),1.69-1.48(m,1H)。m/z(APCI-正)M⁺1＝534.30。

实施例172

rel-(S)-1-(3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在20℃下将TFA(0.16g，30当量，1.4mmol)添加至rel-(R)-3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(27mg，1当量，47μmol，实施例171步骤B)于DCM(0.4mL)中的经搅拌溶液中后保持2小时。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到rel-(S)-6-(氮杂环庚烷-3-基)-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(20mg，90％)。m/z(APCI-正)M+1＝480.30。

步骤B：在氮气下在0℃下将丙烯酰氯(3.8mg，1当量，42μmol)添加至rel-(R)-6-(氮杂环庚烷-3-基)-N-(3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(20mg，1当量，42μmol)及DIEA(16mg，3当量，0.13mmol)于DCM(0.5mL)中的经搅拌溶液中后保持30分钟。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH/DCM)得到rel-(S)-1-(3-(4-((3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(11.7mg，53％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.29-8.90(m,1H),8.78-8.71(m,1H),8.17-8.05(m,1H),7.87-7.81(m,2H),7.80-7.58(m,2H),7.37-7.29(m,2H),7.11-7.02(m,1H),6.99-6.91(m,1H),6.71-6.59(m,1H),6.46-6.37(m,1H),5.78-5.67(m,1H),4.34-4.10；3.83-3.60；3.52-3.22(m,5H),3.87-3.83(m,3H),2.39-2.34(m,3H),2.23-1.75(m,5H),1.70-1.49(m,1H)。m/z(APCI-正)M+1＝534.30。

实施例173

rel-(R)-1-(7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4-氮杂螺[2.5]辛-4-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在8mL小瓶中，将六氟磷酸(4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶)双[(2-吡啶基)苯基]铱(III)(6.51mg，0.0071mmol)、(SP-4-2)-[4,4'-双(1,1-二甲基乙基)-2,2'-联吡啶-κN1,κN1']二溴-镍(17.3mg，0.0356mmol)、奎宁环(105mg，0.948mmol)、邻苯二甲酰亚胺(15.7mg，0.107mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(200mg，0.474mmol)溶解于DMA(2.0mL)中。在氮气下向另一8ml小瓶中添加5,7-二-叔丁基-3-苯基-3-(四氟-l5-硼烷基)-2,3-二氢苯并[d]噁唑-3-鎓-2-化物(394mg，0.996mmol)、7-羟基-4-氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(216mg，0.948mmol)及无水MTBE(3.0mL)。搅拌1分钟后，添加吡啶(76.4μL，0.948mmol)，且剧烈搅拌混合物5分钟。将此混合物吸入注射器中，且经由acrodisc过滤至第一小瓶中。将此小瓶加盖，用氮气吹扫几分钟，覆上石蜡膜，且在光反应器中用450nm光照射8小时(100％强度，750rpm搅拌，最大速度风扇)。混合物用EtOAc稀释，用盐水洗涤若干次，经硫酸钠干燥且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH/DCM)得到rel-(R)-7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4-氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(83mg，29％)。m/z(APCI-正)M+1＝597.20。手性分离此物质(ChiralTechOD-H，250(L)×20(ID)mm，40％i-PrOH(0.1％DEA)+CO₂)，得到rel-(R)-7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4-氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(34mg)及rel-(S)-7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4-氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(35mg)。

步骤B：在20℃下将TFA(0.19g，30当量，1.7mmol)添加至rel-(R)-7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4-氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(34mg，1当量，57μmol)于DCM(0.6mL)中的经搅拌溶液中后保持16小时。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤2次，经硫酸钠干燥且减压浓缩，得到rel-(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(4-氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(21.2mg，75％)。m/z(APCI-正)M+1＝497.25。

步骤C：在氮气下在0℃下将丙烯酰氯(3.86mg，1当量，42.7μmol)添加至rel-(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(4-氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(21.2mg，1当量，42.7μmol)及DIEA(16.6mg，3当量，128μmol)于DCM(0.5mL)中的经搅拌溶液中后保持30分钟。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH/DCM)得到rel-(R)-1-(7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4-氮杂螺[2.5]辛-4-基)丙-2-烯-1-酮(16.1mg，69％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.41(d,J＝3.3Hz,1H),8.80(s,1H),8.75(t,J＝9.0Hz,1H),8.56-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.14(d,J＝8.7Hz,1H),7.64(d,J＝8.7Hz,1H),7.01(dd,J＝9.1,1.8Hz,1H),6.95-6.86(m,2H),6.41(d,J＝16.8Hz,1H),5.74(dd,J＝10.4,2.1Hz,1H),4.93-4.70(m,1H),3.60-3.38(m,1H),3.20-2.99(m,1H),2.54-2.31(m,1H),2.22(d,J＝2.1Hz,3H),2.17-1.85(m,2H),1.52-1.05(m,3H),0.93-0.69(m,2H)。m/z(APCI-正)M+1＝551.20。

实施例174

rel-(S)-1-(7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4-氮杂螺[2.5]辛-4-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在20℃下将TFA(0.20g，30当量，1.8mmol)添加至rel-(R)-7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4-氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(35mg，1当量，59μmol)于DCM(0.6mL)中的经搅拌溶液中后保持16小时。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤2次，经硫酸钠干燥，且减压浓缩，得到rel-(S)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(4-氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(20.2mg，69％)。m/z(APCI-正)M+1＝497.30。

步骤B：在氮气下在0℃下将丙烯酰氯(3.68mg，1当量，40.7μmol)添加至rel-(S)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(4-氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(20.2mg，1当量，40.7μmol)及DIEA(15.8mg，3当量，122μmol)于DCM(0.5mL)中的经搅拌溶液中后保持30分钟。混合物用EtOAc稀释，用10％碳酸钾水溶液洗涤，经硫酸钠干燥，且减压浓缩。快速色谱法(DCM至10％MeOH/DCM)得到rel-(S)-1-(7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4-氮杂螺[2.5]辛-4-基)丙-2-烯-1-酮(16.5mg)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.41(d,J＝3.2Hz,1H),8.80(s,1H),8.75(t,J＝8.9Hz,1H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.14(d,J＝8.7Hz,1H),7.64(d,J＝8.7Hz,1H),7.01(dd,J＝9.0,1.8Hz,1H),6.97-6.82(m,2H),6.41(d,J＝16.8Hz,1H),5.74(dd,J＝10.3,2.1Hz,1H),4.92-4.68(m,1H),3.60-3.36(m,1H),3.22-2.95(m,1H),2.51-2.32(m,1H),2.22(d,J＝2.1Hz,3H),2.16-1.83(m,2H),1.52-1.07(m,3H),0.91-0.69(m,2H)。m/z(APCI-正)M+1＝551.30。

实施例175

1-((1R,4R)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向小瓶中添加N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(35mg，83μmol)及(1R,4R)-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸叔丁酯(35mg，0.17mmol)，接着添加DMSO(0.83mL)及N,N-二异丙基乙胺(22μL，0.12mmol)。接着使混合物升温至100℃，将其搅拌4小时。接着将混合物冷却至环境温度且用水稀释。接着用CHCl₃(3×)萃取混合物，且合并的萃取物经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物接着经由柱层析(1-8％MeOH/CHCl₃)纯化，得到呈固体状的(1R,4R)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸叔丁酯(42mg，85％)。m/z(APCI-正)M+1＝598.2。

步骤B：向含有(1R,4R)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸叔丁酯(42mg，70μmol)的小瓶中添加CH₂Cl₂(1.4mL)，且用TFA(0.11mL，1.4mmol)处理溶液。接着将混合物在环境温度下搅拌1小时。用饱和NaHCO₃水溶液中和混合物，且用20％IPA/CHCl₃(3×)萃取所得混合物。合并的萃取物接着经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物(32mg)直接用于后续步骤中。m/z(APCI-正)M+1＝498.2。

步骤C：接着将粗产物溶解于CH₂Cl₂(1.4mL)及N,N-二异丙基乙胺(24μL，0.14mmol)中。在冰/水浴中将混合物冷却至0℃，接着添加丙烯酰氯(5.7μL，70μmol)。接着将混合物在0℃下搅拌0.5小时。接着用饱和NaHCO₃水溶液处理混合物，且用CHCl₃(3×)萃取混合物。合并的有机萃取物经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物接着经由柱层析(2至8％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，得到呈固体状的1-((1R,4R)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮(26mg，两个步骤59％)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.07(s,1H),8.82(td,J＝9.0,2.2Hz,1H),8.63(s,1H),8.53-8.47(m,1H),8.23(s,1H),7.99(dd,J＝9.3,3.1Hz,1H),7.06(d,J＝9.2Hz,1H),7.03-6.97(m,1H),6.92-6.84(m,2H),6.64-6.36(m,2H),5.80-5.73(m,1H),4.76(d,J＝260.6Hz,2H),4.02-3.68(m,4H),2.25-2.13(m,5H),2.09-1.92(m,2H)。(NMR中存在酰胺旋转异构体)m/z(APCI-正)M+1＝552.2。

实施例176

1-((1S,5R)-6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-2-基)丁-2-炔-1-酮

步骤A：向小瓶中添加N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(100mg，237μmol)及(1S,5R)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-甲酸叔丁酯(101mg，474μmol)，接着添加DMSO(1.58mL)。接着添加N,N-二异丙基乙胺(82.6μL，474μmol)，且接着使混合物升温至100℃，将其搅拌3小时。接着将混合物冷却至环境温度且用水稀释。通过真空过滤分离固体且用水洗涤。接着将固体溶解于CH₂Cl₂中，且滤液经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物接着经由柱层析(1-8％MeOH/CHCl₃)纯化，得到呈固体状的(1S,5R)-6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-甲酸叔丁酯(135mg，95％)。m/z(APCI-正)M+1＝598.3。

步骤B：向含有(1S,5R)-6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-甲酸叔丁酯(135mg，226μmol)的小瓶中添加CH₂Cl₂(4.52mL)，且用TFA(348μL，4.52mmol)处理溶液。接着将混合物在环境温度下搅拌1小时。用饱和NaHCO₃水溶液中和混合物，且用20％IPA/CHCl₃(3×)萃取所得混合物。合并的萃取物接着经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物(118mg)直接用于后续步骤中。m/z(APCI-正)M+1＝498.2。

步骤C：接着将粗产物溶解于CH₂Cl₂(4.52mL)及N,N-二异丙基乙胺(157μL，904μmol)中。随后向混合物中添加丁-2-炔酸(22.8mg，271μmol)，接着添加HATU(94.5mg，248μmol)。接着搅拌混合物0.5小时。接着用1:1的水:饱和NaHCO₃水溶液处理混合物，且用CHCl₃(3×)萃取混合物。合并的有机萃取物经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物接着经由柱层析(2至8％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，得到呈固体状的1-((1S,5R)-6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-2-基)丁-2-炔-1-酮(108mg，2个步骤97％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.16(dd,J＝7.9,3.6Hz,1H),8.84(t,J＝9.0Hz,1H),8.62(d,J＝0.9Hz,1H),8.53-8.48(m,1H),8.23(s,1H),7.98(dd,J＝9.2,2.5Hz,1H),7.07-6.98(m,2H),6.92-6.85(m,2H),5.52-5.30(m,1H),4.79(br s,1H),4.38(ddd,J＝66.0,14.0,6.4Hz,1H),3.91(dd,J＝26.0,10.8Hz,1H),3.70(br s,1H),3.32-2.80(m,1H),2.36-2.10(obs m,2H),2.22-2.18(m,3H),2.05(d,J＝30Hz,3H),2.00-1.78(m,2H)。(NMR中存在酰胺旋转异构体)m/z(APCI-正)M+1＝564.2。

实施例177

1-((1S,5R)-6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-5-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向小瓶中添加N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-5-氯-2-氟苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(35mg，79μmol)及(1S,5R)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-甲酸叔丁酯(30mg，0.14mmol)以及DMSO(0.53mL)，接着添加N,N-二异丙基乙胺(21μL，0.12mmol)。接着使混合物升温至100℃，将其搅拌5小时。接着将混合物冷却至环境温度且用水稀释。通过真空过滤分离固体且用水洗涤。接着将固体溶解于CH₂Cl₂中，且滤液经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物接着经由柱层析(1-8％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，得到呈固体状的(1S,5R)-6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-5-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-甲酸叔丁酯(49mg，定量)。m/z(APCI-正)M+1＝618.2。

步骤B：向含有(1S,5R)-6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-5-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-甲酸叔丁酯(49mg，79μmol)的小瓶中添加CH₂Cl₂(1.6mL)，且用TFA(0.12mL，1.6mmol)处理溶液。接着将混合物在环境温度下搅拌1小时。用饱和NaHCO₃水溶液中和混合物，且用20％IPA/CHCl₃(3×)萃取所得混合物。合并的萃取物接着经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物(40mg)直接用于后续步骤中。m/z(APCI-正)M+1＝518.2。

步骤C：接着将粗产物溶解于CH₂Cl₂(1.6mL)及N,N-二异丙基乙胺(28μL，0.16mmol)中。在冰/水浴中将混合物冷却至0℃，接着添加丙烯酰氯(6.4μL，79μmol)。接着将混合物在0℃下搅拌0.5小时。混合物接着用饱和NaHCO₃水溶液处理且用CHCl₃(3×)萃取。合并的有机萃取物经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物接着经由柱层析(2至8％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，得到呈固体状的1-((1S,5R)-6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-5-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮(36mg，2个步骤75％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.29(d,J＝8.3Hz,1H),9.16(s,1H),8.68(s,1H),8.54-8.51(m,J＝8.3Hz,1H),8.25(s,1H),7.99(d,J＝9.3Hz,1H),7.11(d,J＝10.8Hz,1H),7.06(d,J＝9.2Hz,1H),6.94-6.88(m,2H),6.71-6.49(m,1H),6.33(d,J＝16.6Hz,1H),5.78-5.71(m,1H),5.61-4.88(m,1H),4.77(br s,1H),4.53-3.85(m,2H),3.68(br s,1H),3.36-2.86(m,1H),2.26-2.11(m,2H),2.06-1.81(m,2H)。(NMR中存在酰胺旋转异构体)m/z(APCI-正)M+1＝572.2。

实施例178

(R)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌嗪-1-基)丁-2-炔-1-酮

步骤A：向小瓶中添加N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.11mmol)、(2R)-2-甲基-1-哌嗪甲酸叔丁酯(45mg，0.23mmol)及DMSO(0.75mL)，接着添加N,N-二异丙基乙胺(30μL，0.17mmol)。接着使混合物升温至90℃，将其搅拌16小时。接着将混合物冷却至环境温度且用水稀释，且通过真空过滤分离固体。接着将固体溶解于CH₂Cl₂中，且滤液经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗物质(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(68mg，99％)足够纯，其不经进一步纯化即继续至后续步骤。m/z(APCI-正)M+1＝606.2。

步骤B：向含有(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(68mg，0.11mmol)的小瓶中添加CH₂Cl₂(2.2mL)，且用TFA(0.17mL，2.2mmol)处理溶液。接着将混合物在环境温度下搅拌2小时。用饱和NaHCO₃水溶液中和混合物，且用20％IPA/CHCl₃(3×)萃取所得混合物。合并的萃取物接着经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物直接用于后续步骤中。m/z(APCI-正)M+1＝506.1。

步骤C：接着将粗产物溶解于DMF(0.56mL)及N,N-二异丙基乙胺(98μL)中。随后向混合物中添加2-丁炔酸(15μL，0.17mmol)，接着添加丙基膦酸酐(0.17mL，50％Wt，0.28mmol)。接着搅拌混合物5小时。接着用饱和NaHCO₃水溶液处理混合物，且用CHCl₃(3×)萃取混合物。合并的有机萃取物经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物随后经由柱层析(2至8％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，接着经由反相层析(10至70％ACN/H₂O+0.1％TFA缓冲液)纯化。接着浓缩含有纯净产物的级分，用饱和NaHCO₃水溶液处理，接着用CHCl₃(3×)萃取。合并的有机萃取物经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩，得到呈固体状的(R)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌嗪-1-基)丁-2-炔-1-酮(24mg，两个步骤35％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.10(d,J＝3.4Hz,1H),9.01(t,J＝8.9Hz,1H),8.67(s,1H),8.54(dd,J＝7.2,1.0Hz,1H),8.25(s,1H),8.02(dd,J＝9.4,1.4Hz,1H),7.30(dd,J＝9.4,6.9Hz,1H),7.16(dd,J＝9.2,2.0Hz,1H),6.95-6.89(m,2H),4.95-4.78(m,1H),4.60-4.12(m,3H),3.67-3.16(m,3H),2.08(d,J＝4.3Hz,3H),1.33(dd,J＝38.3,6.8Hz,3H)。m/z(APCI-正)M+1＝572.2。

实施例179

1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)丁-2-炔-1-酮

步骤A：在密封管中在100℃下，将DIPEA(0.11g，0.87mmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(0.080g，0.17mmol)及2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.11g，0.52mmol)于DMSO(1.5mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与CH₂Cl₂之间分配。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用0％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.078g，0.13mmol，75％)。m/z(APCI-正)M+1＝600.3。

步骤B：将三氟乙酸(0.30g，2.6mmol)添加至4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.078g，0.13mmol)于DCM中的经搅拌溶液中。反应混合物用DCM稀释且经由添加饱和NaHCO₃淬灭。搅拌10分钟后，分离水相及有机相，且用DCM萃取水层，合并的有机层经Na₂SO₄干燥且浓缩，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(58.7mg，118μmol，90％)。m/z(APCI-正)M+1＝500.2。

步骤C：将2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(0.16g，0.15mL，50％Wt，2.5当量，0.25mmol)添加至DIPEA(65mg，0.50mmol)、N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.050g，0.10mmol)、丁-2-炔酸(13mg，0.15mmol)于DMF(1.5mL)中的经搅拌溶液中。16小时后，用水及EtOAc稀释反应混合物。分离水层及有机层。用EtOAc萃取水层。合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥且浓缩。所得粗油状物经由正相层析(12g，SiO₂)使用0％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度纯化，得到1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)丁-2-炔-1-酮(9.1mg，16μmol，16％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.11(d,J＝3.6Hz,1H),8.84(t,J＝9.1Hz,1H),8.64(s,1H),8.51(dd,J＝7.2,1.0Hz,1H),8.23(s,1H),8.01(d,J＝9.3Hz,1H),7.15(d,J＝9.3Hz,1H),7.01(m,1H),6.89(m,2H),4.25(t,J＝5.7Hz,1H),3.92(s,2H),3.85(t,J＝5,7Hz,2H),2.21(d,J＝2.1Hz,3H),2.04(s,3H),1.55(s,6H)。m/z(esi)M+1＝566.2。

实施例180

(R)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)丁-2-炔-1-酮

步骤A：在密封管中在100℃下，将N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(46mg，0.36mmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.050g，0.12mmol)及(R)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(55mg，0.24mmol)于DMSO(1mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与EtOAc之间分配。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用5％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(57mg，93μmol，78％)。m/z(esi)M+1＝616.3。

步骤B：将三氟乙酸(0.21g，1.9mmol)添加至(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(57mg，93μmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在饱和NaHCO₃与CH₂Cl₂之间分配。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(45mg，94％)。m/z(esi)M+1＝516.2。

步骤C：将2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(0.14g，0.22mmol)添加至丁-2-炔酸(11mg，0.13mmol)、DIPEA(56mg，0.44mmol)及(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(45mg，87μmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与EtOAc之间分配。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用5％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到(R)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基)丁-2-炔-1-酮(13.3mg，22.9μmol，26％)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.08(dd,J＝6.3,3.6Hz,1H),8.82(td,J＝9.0,3.2Hz,1H),8.65(s,1H),8.51(d,J＝7.3Hz,1H),8.24(s,1H),8.00(dd,J＝9.3,3.0Hz,1H),7.32(d,J＝9.4Hz,1H),7.01(m,1H),6.89(m,2H),4.58(m,4H),3.49(m,2H),3.33(m,4H),3.13(m,1H),2.21(d,J＝2.2Hz,3H),2.07(d,J＝1.5Hz,3H)。m/z(esi)M+1＝582.2。

实施例181

1-(7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-4-基)丁-2-炔-1-酮

步骤A：在密封管中在100℃下，将N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.07g，0.5mmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(0.05g，0.1mmol)及4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(0.07g，0.3mmol)于DMSO(1.5mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与EtOAc之间分配。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用5％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(59mg，95μmol，90％)。m/z(esi)M+1＝618.2。

步骤B：将三氟乙酸(0.16g，1.4mmol)添加至7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(0.059g，95μmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中。45分钟后，反应混合物用DCM稀释且经由添加饱和NaHCO₃淬灭。搅拌10分钟后，分离水层及有机层，且用DCM萃取水层。合并的有机层经Na₂SO₄干燥且浓缩，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(48mg，93μmol，97％)。m/z(esi)M+1＝518.2。

步骤C：将2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(0.15g，0.23mmol)添加至丁-2-炔酸(12mg，1.5当量，0.14mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(60mg，0.46mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(48mg，93μmol)于DMF(1mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与EtOAc之间分配。有机层用盐水(2×)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用5％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到1-(7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-4-基)丁-2-炔-1-酮(9.6mg，16μmol，18％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.01(m,2H),8.66(d,J＝1.0Hz,1H),8.53(dd,J＝7.1,1.1Hz,1H),8.25(s,1H),8.00(dd,J＝9.3,2.3Hz,1H),7.27(m,1H),7.15(dd,J＝9.2,2.0Hz,1H),6.92(m,2H),4.06(m,1H),3.95(m,2H),3.82(m,1H),3.75(s,1H),3.63(s,1H),2.09(s,3H),1.34(m,1H),1.23(m,1H),1.11(m,1H)1.02(m,1H)。m/z(esi)M+1＝584.2。

实施例182

1-(7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-4-基)丁-2-炔-1-酮

步骤A：在密封管中在100℃下，将DIEPA(0.07g，0.5mmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(0.05g，0.1mmol)及4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(0.07g，0.3mmol)于DMSO(1mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与EtOAc之间分配。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用5％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(57mg，95μmol，90％)。m/z(esi)M+1＝598.3。

步骤B：将三氟乙酸(0.16g，1.4mmol)添加至7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯(0.057g，95μmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在饱和NaHCO₃与CH₂Cl₂之间分配。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(39mg，78μmol，82％)。m/z(esi)M+1＝498.2。

步骤C：将2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(0.12g，0.20mmol)添加至丁-2-炔酸(9.9mg，0.12mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(51mg，0.39mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(39mg，78μmol)于DMF(1mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与EtOAc之间分配。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用5％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到1-(7-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-4-基)丁-2-炔-1-酮(11.9mg，21.1μmol，27％)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.03(m,1H),8.82(t,J＝9.0Hz,1H),8.64(s,1H),8.51(dd,J＝7.3,0.9Hz,1H),8.23(s,1H),7.98(d,J＝9.4Hz,1H),7.23(m,1H),7.00(dd,J＝9.1,1.8Hz,1H),6.88(m,2H),4.06(m,1H)3.94(m,2H),3.83(m,1H),3.73(s,1H),3.65(m,1H),2.21(d,J＝2.1Hz,3H),2.09(s,3H),1.34(m,1H),1.23(m,1H),1.10(m,1H),1.03(m,1H)。m/z(esi)M+1＝564.2。

实施例183

(R)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-(三氟甲基)哌嗪-1-基)丁-2-炔-1-酮

步骤A：在密封管中在100℃下，将DIPEA(0.09g，0.7mmol)添加至(R)-2-(三氟甲基)哌嗪二盐酸盐(0.05g，0.2mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.1mmol)于DMSO(1mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与EtOAc之间分配。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用5％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(3-(三氟甲基)哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(50.7mg，90.6μmol，80％)。m/z(esi)M+1＝560.2。

步骤B：将2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(144mg，226μmol)添加至丁-2-炔酸(11.4mg，136μmol)、DIPEA(58.5mg，453μmol)及(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(3-(三氟甲基)哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.0507g，90.6μmol)于DMF(1mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在水与EtOAc之间分配，用EtOAc萃取水层，合并的有机层经Na₂SO₄干燥且浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用5％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到(R)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-(三氟甲基)哌嗪-1-基)丁-2-炔-1-酮(5.1mg，8.1μmol，9.0％)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.11(m,1H),9.03(m,1H),8.71(s,1H),8.28(s,1H),8.10(dd,J＝9.3,0.8Hz,1H),7.34(dd,J＝9.4,2.8Hz,1H),7.19(m,1H),6.92(m,2H),5.35(m,1H),5.15(m,1H),4.88(m,1H),4.72(m,1H),4.62(m,1H),3.49(m,1H),3.26(m,1H),2.13(d,J＝4.8Hz,3H)。m/z(esi)M+1＝626.2。

实施例184

(R)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌嗪-1-基)丁-2-炔-1-酮

步骤A：在密封管中在100℃下，将N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(212mg，1.64mmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(0.150g，327μmol)及(R)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(197mg，982μmol)于DMSO(3mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与CH₂Cl₂之间分配。用DCM萃取水层，合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用0％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(129mg，220μmol，67.3％)。m/z(esi)M+1＝586.3。

步骤B：将三氟乙酸(502mg，4.41mmol)添加至(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(129mg，220μmol)于DCM(2mL)中的经搅拌溶液中。反应物用DCM稀释且用饱和NaHCO₃淬灭。搅拌10分钟后，分离水层及有机层，用DCM萃取水层，合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(86mg，0.18mmol，80％)。m/z(esi)M+1＝486.3。

步骤C：将2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(0.13g，0.20mmol)添加至N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(87mg，0.67mmol)、丁-2-炔酸(28mg，0.33mmol)及(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3-甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(65mg，0.13mmol)于DMF(1mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与EtOAc之间分配。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用5％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到(R)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基哌嗪-1-基)丁-2-炔-1-酮(13.4mg，24.3μmol，18％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.08(d,J＝3.6Hz,1H),8.84(t,J＝8.8Hz,1H),8.66(s,1H),8.53(dd,J＝7.4,0.9Hz,1H),8.23(s,1H),7.30(m,1H),7.02(dd,J＝9.0,1.8Hz,1H),6.90(m,2H),4.89(m,1H),4.55(m,1H),4.41(m,1H),4.22(m,1H),3.64(m,1H),3.42(m,1H),3.22(m,1H),2.23(d,J＝2.1Hz,3H),2.09(d,J＝4.2Hz,3H),1.35(d,J＝6.8Hz,3H)。m/z(esi)M+1＝552.2。

实施例185

1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮

步骤A：在密封管中在100℃下，将DIPEA(212mg，1.64mmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(0.150g，327μmol)及哌嗪-1-甲酸叔丁酯(183mg，982μmol)于DMSO(3.5mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与CH₂Cl₂之间分配。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由24g硅胶滤筒纯化，用0％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.100g，175μmol，53.4％)。m/z(esi)M+1＝572.3。

步骤B：将三氟乙酸(399mg，3.50mmol)添加至4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.100g，175μmol)于DCM(1.5mL)中的经搅拌溶液中。反应物用DCM稀释且经由添加饱和NaHCO₃淬灭。搅拌10分钟后，分离水层及有机层，用DCM萃取水层，且合并的有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(68mg，0.14mmol，82％)。m/z(esi)M+1＝472.2。

步骤C：将2-氟丙烯酸(41mg，0.46mmol)添加至2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(0.58g，0.91mmol)、N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.043g，91μmol)及N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.24g，1.8mmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中。20分钟后，将反应混合物加热至50℃。40分钟后，用EtOAc及水稀释反应混合物。分离水层及有机层，有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥且浓缩。粗物质经由正相层析(12g，SiO₂)使用5至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度纯化，得到1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(0.9mg，2μmol,2％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.09(d,J＝3.6Hz,1H),8.85(t,J＝9.0Hz,1H),8.69(s,1H),8.53(dd,J＝7.3,0.9Hz,1H),8.26(s,1H),8.05(d,J＝9.3Hz,1H),7.33(d,J＝9.3Hz,1H),7.03(dd,J＝9.2,1.7Hz,1H),6.91(m,2H),5.41(dd,J＝47.5,3.6Hz,1H),5.25(dd,J＝16.8,3.6Hz,1H)3.88(s,8H),2.23(d,J＝2.1Hz,3H)。m/z(esi)M+1＝544.2。

实施例186

(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)(双环[1.1.0]丁-1-基)甲酮

步骤A：在密封管中在100℃下，将DIPEA(0.11g，0.87mmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(0.080g，0.17mmol)及2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.11g，0.52mmol)于DMSO(1.5mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与CH₂Cl₂之间分配。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用0％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.078g，0.13mmol，75％)。m/z(esi)M+1＝600.3。

步骤B：将三氟乙酸(0.30g，2.6mmol)添加至4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.078g，0.13mmol)于DCM中的经搅拌溶液中。反应混合物用DCM稀释且经由添加饱和NaHCO₃淬灭。搅拌10分钟后，分离水相及有机相，且用DCM萃取水层。合并的有机层经Na₂SO₄干燥且浓缩，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(58.7mg，118μmol，90％)。m/z(esi)M+1＝500.2。

步骤C：将2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(80mg，0.25mmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.10mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(65mg，0.50mmol)及双环[1.1.0]丁烷-1-甲酸钾(20mg，0.15mmol)于DMF(1mL)中的经搅拌溶液中。浓缩反应混合物，且粗残余物经由正相层析(12g，SiO₂)使用5至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度纯化，得到(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)(双环[1.1.0]丁-1-基)甲酮(5.3mg，9.1μmol，9.1％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.15(d,J＝3.3Hz,1H),8.86(t,J＝9.1Hz,1H),8.66(s,1H),8.53(dd,J＝7.2,0.9Hz,1H),8.25(s,1H),8.03(d,J＝9.3Hz,1H),7.19(d,J＝9.3Hz,1H),7.03(m,1H),6.91(m,2H),4.32(m,2H),3.92(s,2H),3.88(m,2H),2.28(d,J＝3.5Hz,2H),2.23(d,J＝2.1Hz,3H),2.04(m,2H),1.61(s,6H)。m/z(esi)M+1＝580.3。

实施例187

1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮

步骤B：将三氟乙酸(0.30g，2.6mmol)添加至4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(0.078g，0.13mmol)于DCM中的经搅拌溶液中。反应混合物用DCM稀释且经由添加饱和NaHCO₃淬灭。搅拌10分钟后，分离水相及有机相。用DCM萃取水层，且合并的有机层经Na₂SO₄干燥且浓缩，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(58.7mg，118μmol，90％)。m/z(esi)M+1＝500.2。

步骤C：在50℃下将2-氟丙烯酸(0.05g，0.5mmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.1mmol)、N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.3g，2mmol)、2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(0.6g，1mmol)于DMF(2mL)中的经搅拌溶液中。1小时后，将反应物在水与25％IPA/CHCl₃之间分配。合并的有机层用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥且浓缩。所得粗物质经由正相层析(12g，SiO₂)纯化，用0％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(10.8mg，18.9μmol，20％)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.17(d,J＝3.6Hz,1H),8.86(t,J＝8.9Hz,1H),8.66(s,1H),8.53(dd,J＝7.3,0.9Hz,1H),8.25(s,1H),8.03(d,J＝9.3Hz,1H),7.18(d,J＝9.3Hz,1H),7.03(dd,J＝9.0,1.8Hz,1H),6.91(m,2H),5.31(dd,J＝47.7,3.5Hz,1H),5.15(dd,J＝16.9,3.5Hz,1H),3.95(m,4H),3.87(m,2H)2.23(d,J＝2.1Hz,3H),1.63(s,6H)。m/z(esi)M+1＝572.2。

实施例188

1-(6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-1-基)丁-2-炔-1-酮

步骤A：在密封管中在100℃下，将1,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-1-甲酸叔丁酯(50mg，0.25mmol)添加至N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.053g，0.13mmol)及DIPEA(49mg，0.38mmol)于DMSO(1.5mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与EtOAc之间分配。有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用5％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-1,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-1-甲酸叔丁酯(46.6mg，79.8μmol，64％)。m/z(esi)M+1＝584.3。

步骤B：将三氟乙酸(182mg，1.60mmol)添加至6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-1,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-1-甲酸叔丁酯(46.6mg，1当量，79.8μmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在饱和NaHCO₃与EtOAc之间分配。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-(1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(37.5mg，77.6μmol，97.1％)。m/z(esi)M+1＝484.2。

步骤C：将2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(123mg，194μmol)添加至丁-2-炔酸(9.78mg，116μmol)、N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-(1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(37.5mg，77.6μmol)及DIPEA(50.1mg，388μmol)于DMF(1mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在水与EtOAc之间分配。有机层经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用5％至50％(含20％MeOH的CH₂Cl₂)/CH₂Cl₂梯度洗脱，得到1-(6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-1-基)丁-2-炔-1-酮(20.2mg，36.8μmol，47.4％)。¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.08(d,J＝3.1Hz,1H),8.87(d,J＝9.1Hz,1H),8.65(d,J＝8.7Hz,1H),8.51(m,1H),8.24(s,1H),7.96(m,1H),6.91(m,4H),4.97(m,1H),4.41(dd,J＝9.6,1.3Hz,1H),4.24(d,J＝9.0Hz,1H),4.13(m,1H),4.02(m,1H),2.65(m,2H)2.27(d,J＝3.1Hz,3H),1.36(s,3H)。m/z(esi)M+1＝550.2。

实施例189

1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在8mL小瓶中，将六氟磷酸(4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶)双[(2-吡啶基)苯基]铱(III)(1.3mg，1.4μmol)、(SP-4-2)-[4,4'-双(1,1-二甲基乙基)-2,2'-联吡啶-κN1,κN1′]二溴-镍(3.5mg，7.1μmol)、奎宁环(21mg，0.19mmol)、邻苯二甲酰亚胺(3.1mg，0.02mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(40mg，0.10mmol)溶解/悬浮于DMA(1.0mL)中。在氮气下向含有5,7-二-叔丁基-3-苯基-3-(四氟-l5-硼烷基)-2,3-二氢苯并[d]噁唑-3-鎓-2-化物(79mg，0.20mmol)及4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(41mg，0.19mmol)的另一8mL小瓶中添加经脱气的MTBE(1.0mL)。搅拌5分钟后，添加吡啶(15μL，0.19mmol)。再搅拌10分钟后，将溶液吸入注射器中，且经由注射器式过滤器过滤至含有镍及铱组分的反应小瓶中。接着将小瓶加盖，且用氮气鼓泡10分钟，覆上石蜡膜，且在整合式光反应器中用450nm光照射6小时(100％强度，1200rpm搅拌，最大风扇速度)。真空浓缩反应物，且粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到呈对映异构体混合物的4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(16.4mg，30％)。m/z(esi)M+1＝585.2。

步骤B：将三氟乙酸(43μL，0.56mmol)添加至4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(16.4mg，0.04μmol)于DCM(0.4mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在23℃下搅拌2小时，随后用EtOAc稀释且用10％K₂CO₃淬灭。用EtOAc(3×)萃取水相，且用10％K₂CO₃洗涤合并的有机层。有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(氮杂环庚烷-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(12.0mg，88％)，其不经进一步纯化即直接用于下一反应中。m/z(esi)M+1＝485.2。

步骤C：在0℃下将呈于DCM中的0.5M溶液形式的丙烯酰氯(40μL，0.02mmol)添加至所得N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(氮杂环庚烷-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(12.0mg，0.03mmol)及DIPEA(8.6μL，0.05mmol)于DCM(0.4mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在此温度下搅拌10分钟，随后将其在10％K₂CO₃与DCM之间分配。用DCM(3×)萃取水相。合并的有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，且粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(4.9mg，37％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.44(s,1H),8.83-8.72(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.17-8.09(m,1H),7.66-7.59(m,1H),7.05-6.98(m,1H),6.93-6.85(m,2H),6.73-6.60(m,1H),6.47-6.36(m,1H),5.78-5.70(m,1H),4.00-3.53(m,4H),3.20-3.10(m,1H),2.36-2.25(m,1H),2.24-2.20(m,3H),2.21-2.05(m,3H),2.03-1.80(m,2H)。m/z(esi)M+1＝539.2。

实施例190

1-((2S,4S)-4-(4-((2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用6-氯-N-(2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用(2S,4S)-4-羟基-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((2S,4S)-4-(4-((2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(10.2mg，52％)。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ9.26-9.04(m,1H),8.82-8.76(m,1H),8.50-8.41(m,1H),8.17-8.11(m,1H),7.88(s,1H),7.68-7.63(m,1H),7.41-7.34(m,2H),7.10-7.04(m,1H),6.73-6.65(m,1H),6.59-6.33(m,2H),5.76-5.65(m,1H),4.62-4.32(m,1H),4.22-3.94(m,2H),3.93-3.60(m,4H),2.85-2.40(m,1H),2.39-2.35(m,4H),2.29-1.95(m,1H),1.46-1.38(m,3H)。m/z(esi)M+1＝538.2。

实施例191

1-((2S,4S)-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用(2S,4S)-4-羟基-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((2S,4S)-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(16.2mg，66％)。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ9.38-9.14(m,1H),8.77-8.72(m,1H),8.56-8.32(m,1H),8.17-8.11(m,1H),7.86(s,1H),7.69-7.63(m,1H),7.39-7.32(m,2H),7.10-7.04(m,1H),6.79-6.71(m,1H),6.66-6.32(m,2H),5.78-5.68(m,1H),4.66-4.32(m,1H),4.23-3.95(m,2H),3.94-3.63(m,4H),2.88-2.39(m,1H),2.36-2.28(m,3H),2.28-1.94(m,1H),1.51-1.37(m,3H)。m/z(esi)M+1＝538.1。

实施例192

1-((2R,4R)-4-(4-((2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用6-氯-N-(2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用(2R,4R)-4-羟基-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((2R,4R)-4-(4-((2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(14.7mg，66％)。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ9.26-9.04(m,1H),8.82-8.76(m,1H),8.50-8.41(m,1H),8.17-8.11(m,1H),7.88(s,1H),7.68-7.63(m,1H),7.41-7.34(m,2H),7.10-7.04(m,1H),6.73-6.65(m,1H),6.59-6.33(m,2H),5.76-5.65(m,1H),4.62-4.32(m,1H),4.22-3.94(m,2H),3.93-3.60(m,4H),2.85-2.40(m,1H),2.39-2.35(m,4H),2.29-1.95(m,1H),1.46-1.38(m,3H)。m/z(esi)M+1＝538.2。

实施例193

1-((2R,4R)-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用(2R,4R)-4-羟基-2-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((2R,4R)-4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-甲基吡咯烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(12.6mg，58％)。¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ9.38-9.14(m,1H),8.77-8.72(m,1H),8.56-8.32(m,1H),8.17-8.11(m,1H),7.86(s,1H),7.69-7.63(m,1H),7.39-7.32(m,2H),7.10-7.04(m,1H),6.79-6.71(m,1H),6.66-6.32(m,2H),5.78-5.68(m,1H),4.66-4.32(m,1H),4.23-3.95(m,2H),3.94-3.63(m,4H),2.88-2.39(m,1H),2.36-2.28(m,3H),2.28-1.94(m,1H),1.51-1.37(m,3H)。m/z(esi)M+1＝538.1。

实施例194

1-((1R,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向装备有搅拌棒的小瓶中装入N-(4-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.12mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-烯-8-甲酸叔丁酯(79mg，0.24mmol)、Pd(Ph₃P)₄(14mg，0.01mmol)、2M K₂CO₃水溶液(0.18mL，0.36mmol)及1,4-二噁烷(1.2mL)。此混合物用氩气吹扫10分钟，且密封试管。使混合物升温至100℃后保持16小时，接着使其冷却至室温。混合物用水/DCM稀释，用DCM萃取，合并的萃取物经硫酸钠干燥且减压浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到(1R,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-烯-8-甲酸叔丁酯(55.2mg，78％)。m/z(esi)M+1＝595.2。

步骤B：将10％Pd/C(98mg，0.09mmol)及甲酸铵(58mg，0.92mmol)添加至(1R,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-烯-8-甲酸叔丁酯(55mg，0.09mmol)于MeOH(1.0mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在64℃下搅拌1小时，随后冷却至室温。过滤反应物且浓缩。为了移除过量甲酸铵，将残余物溶解于最少量的CHCl₃中，过滤且浓缩。产物(1R,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(16.9mg，31％)不经进一步纯化即直接使用。m/z(esi)M+1＝597.2。

步骤C：将三氟乙酸(45μL，0.57mmol)添加至(1R,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(16.9mg，0.03mmol)于DCM(0.4mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在23℃下搅拌2小时，随后用EtOAc稀释且用10％K₂CO₃淬灭。用EtOAc(3×)萃取水相，且用10％K₂CO₃洗涤合并的有机层。有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-((1R,5S)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(13.7mg，97％)，其不经进一步纯化即直接用于下一反应中。m/z(esi)M+1＝497.2。

步骤D：在0℃下将呈于DCM中的0.5M溶液形式的丙烯酰氯(42μL，0.02mmol)添加至所得N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-((1R,5S)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(13.0mg，0.03mmol)及DIPEA(9.1μL，0.05mmol)于DCM(0.5mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在此温度下搅拌10分钟，随后将其在10％K₂CO₃与DCM之间分配。用DCM(3×)萃取水相。合并的有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，且粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到1-((1R,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮(5.4mg，37％)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.50-9.24(m,1H),8.92-8.76(m,2H),8.55-8.47(m,1H),8.24(s,1H),8.15(t,J＝8.5Hz,1H),7.88-7.58(m,1H),7.02-6.93(m,1H),6.93-6.84(m,2H),6.65-6.57(m,1H),6.48-6.40(m,1H),5.79-5.70(m,1H),5.01-4.81(m,1H),4.58-4.42(m,1H),3.70-3.25(m,1H),2.73-2.35(m,2H),2.28(d,J＝5.3Hz,3H),2.26-1.77(m,6H)。m/z(esi)M+1＝551.2。

实施例195

1-((1R,3s,5S)-3-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向装备有搅拌棒的小瓶中装入6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(150mg，0.35mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊烷-2-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-烯-8-甲酸叔丁酯(231mg，0.69mmol)、Pd(Ph₃P)₄(40mg，0.04mmol)、2MK₂CO₃水溶液(0.52mL，1.0mmol)及1,4-二噁烷(3.5mL)。此混合物用氩气吹扫10分钟，密封试管，且使混合物升温至100℃后保持16小时，接着使其冷却至室温。混合物用水/DCM稀释，用DCM萃取，合并的萃取物经硫酸钠干燥且减压浓缩。粗残余物经由12g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到(1R,5S)-3-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-烯-8-甲酸叔丁酯(180.7mg，86％)。m/z(esi)M+1＝608.2。

步骤B：将10％Pd/C(316mg，0.30mmol)及甲酸铵(188mg，3.0mmol)添加至(1R,5S)-3-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-烯-8-甲酸叔丁酯(180.7mg，3.0mmol)于MeOH(3.0mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在64℃下搅拌1小时，随后冷却至室温。过滤反应物且浓缩。为了移除过量甲酸铵，将残余物溶解于最少量的CHCl₃中，过滤且浓缩。产物(1R,3sr,5S)-3-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(166.5mg，92％)不经进一步纯化即直接使用。m/z(esi)M+1＝610.2。

步骤C：将三氟乙酸(0.4mL，5.2mmol)添加至(1R,3sr,5S)-3-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(160mg，0.26mmol)于DCM(2.7mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在23℃下搅拌2小时，随后用EtOAc稀释且用10％K₂CO₃淬灭。用EtOAc(3×)萃取水相，且用10％K₂CO₃洗涤合并的有机层。有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩。粗残余物使用HPLC纯化，用0％至50％乙腈+0.1％TFA/水+0.1％TFA洗脱，得到次要非对映异构体6-((1R,3,2,5S)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(7.3mg，5.5％)。m/z(esi)M+1＝510.2。

步骤D：在0℃下将呈于DCM中的0.5M溶液形式的丙烯酰氯(28μL，0.01μmol)添加至所得6-((1R,3,2,5S)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(7.3mg，0.01mmol)及DIPEA(4.9μL，0.03mmol)于DCM(0.4mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在此温度下搅拌10分钟，随后将其在10％K₂CO₃与DCM之间分配。用DCM(3×)萃取水相。合并的有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，且粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到1-((1R,3s,5S)-3-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮(6.4mg，80％)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.50-9.24(m,1H),8.92-8.76(m,2H),8.55-8.47(m,1H),8.24(s,1H),8.15(t,J＝8.5Hz,1H),7.88-7.58(m,1H),7.02-6.93(m,1H),6.93-6.84(m,2H),6.65-6.57(m,1H),6.48-6.40(m,1H),5.79-5.70(m,1H),5.01-4.81(m,1H),4.58-4.42(m,1H),3.70-3.25(m,1H),2.73-2.35(m,2H),2.28(d,J＝5.3Hz,3H),2.26-1.77(m,6H)。m/z(esi)M+1＝564.2。

实施例196

1-(6-(4-((2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4-氮杂螺[2.5]辛-4-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用6-氯-N-(2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用6-羟基-4-氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-(6-(4-((2-氟-5-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4-氮杂螺[2.5]辛-4-基)丙-2-烯-1-酮(9.3mg，70％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.37-9.21(m,1H),8.78(s,1H),8.60-8.40(m,1H),8.15-8.08(m,1H),7.87(s,1H),7.70-7.63(m,1H),7.41-7.33(m,2H),7.10-7.03(m,1H),6.95-6.79(m,1H),6.74-6.66(m,1H),6.40-6.32(m,1H),5.73-5.66(m,1H),4.80(s,1H),3.86(s,3H),3.20(s,2H),2.37(s,3H),2.31-1.92(m,3H),1.28(d,J＝18.2Hz,2H),1.11(s,1H),0.92-0.68(m,2H)。m/z(esi)M+1＝564.2。

实施例197

1-(6-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4-氮杂螺[2.5]辛-4-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用6-羟基-4-氮杂螺[2.5]辛烷-4-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-(6-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-4-氮杂螺[2.5]辛-4-基)丙-2-烯-1-酮(14.0mg，70％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.41(s,1H),8.74(s,1H),8.47-8.43(m,1H),8.15-8.08(m,1H),7.86(s,1H),7.71-7.64(m,1H),7.38-7.31(m,2H),7.10-7.03(m,1H),6.98-6.87(m,1H),6.80-6.73(m,1H),6.42-6.34(m,1H),5.75-5.68(m,1H),5.00-4.66(m,1H),3.86(s,3H),3.47-3.05(m,2H),2.31(d,J＝2.1Hz,3H),2.26(s,3H),1.44-1.28(m,2H),1.19-1.04(m,1H),0.94-0.67(m,2H)。m/z(esi)M+1＝564.2。

实施例198

1-(3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-(3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-基)丙-2-烯-1-酮(12.3mg，54％)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.63-9.39(m,1H),8.87-8.66(m,2H),8.55-8.49(m,1H),8.24(s,1H),8.20-8.13(m,1H),7.74-7.65(m,1H),7.05-6.98(m,1H),6.94-6.87(m,2H),6.72-6.60(m,1H),6.36-6.27(m,1H),5.75-5.68(m,1H),4.91-4.67(m,1H),4.44-3.96(m,1H),3.65-3.25(m,1H),3.23-2.77(m,2H),2.44-2.15(m,4H),2.13-1.82(m,2H),1.83-1.62(m,1H)。m/z(esi)M+1＝525.2。

实施例199

外消旋-1-((1S,4R,5R)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用5-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到外消旋-1-((1S,4R,5R)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)丙-2-烯-1-酮(16.6mg，60％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.46(s,1H),8.88-8.77(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.22-8.11(m,1H),7.88-7.57(m,1H),7.11-6.83(m,3H),6.70-6.32(m,2H),5.79-5.71(m,1H),4.96-4.63(m,1H),3.66-3.47(m,2H),3.45-3.33(m,1H),2.95-2.86(m,1H),2.75-2.30(m,1H),2.25-2.19(m,3H),2.16-1.93(m,2H),1.89-1.64(m,1H)。m/z(esi)M+1＝537.2。

实施例200

1-((3aR,5s,6aS)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用5-羟基六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((3aR,5s,6aS)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮(6.8mg，25％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.52-9.47(m,1H),8.86-8.76(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.16-8.09(m,1H),7.68-7.61(m,1H),7.06-6.98(m,1H),6.94-6.85(m,2H),6.58-6.45(m,1H),6.45-6.33(m,1H),5.75-5.63(m,1H),3.95-3.48(m,5H),3.18-3.01(m,2H),2.59-2.26(m,2H),2.22(t,J＝2.5Hz,3H),2.20-1.87(m,2H)。m/z(esi)M+1＝551.1。

实施例201

1-((3aR,5s,6aS)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用N-(4-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用5-羟基六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((3aR,5s,6aS)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[c]吡咯-2(1H)-基)丙-2-烯-1-酮(15.1mg，50％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.46-9.39(m,1H),8.90-8.80(m,2H),8.56-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.18-8.09(m,1H),7.68-7.61(m,1H),7.01-6.93(m,1H),6.93-6.85(m,2H),6.56-6.33(m,2H),5.74-5.62(m,1H),3.99-3.45(m,4H),3.20-2.98(m,2H),2.61-2.29(m,2H),2.30-2.24(m,3H),2.19-2.03(m,2H),2.02-1.84(m,1H)。m/z(esi)M+1＝551。

实施例202

外消旋-1-((1R,4R,6R)-6-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用6-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到外消旋-1-((1R,4R,6R)-6-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)丙-2-烯-1-酮(8.7mg，50％)。¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ9.35-9.30(m,1H),8.77-8.73(m,1H),8.57-8.48(m,1H),8.15-8.09(m,1H),7.88(s,1H),7.69-7.61(m,1H),7.38-7.31(m,2H),7.10-7.04(m,1H),6.81-6.74(m,1H),6.63-6.32(m,2H),5.76-5.69(m,1H),4.97-4.52(m,1H),3.86(s,3H),3.71-3.42(m,2H),3.37-3.29(m,1H),3.10-2.90(m,1H),2.52-2.21(m,6H),2.20-2.08(m,1H),1.84-1.73(m,1H)。m/z(esi)M+1＝550.2。

实施例203

外消旋-1-((1S,4R,5R)-5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用5-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到外消旋-1-((1S,4R,5R)-5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)丙-2-烯-1-酮(12.3mg，51％)。¹HNMR(500MHz,CDCl₃)δ9.35-9.31(m,1H),8.78-8.73(m,1H),8.57-8.48(m,1H),8.17-8.08(m,1H),7.88(s,1H),7.81-7.59(m,1H),7.38-7.32(m,2H),7.11-7.04(m,1H),6.81-6.74(m,1H),6.68-6.34(m,2H),5.78-5.71(m,1H),4.93-4.63(m,1H),3.86(s,3H),3.70-3.45(m,2H),3.44-3.32(m,1H),2.96-2.85(m,1H),2.72-2.33(m,1H),2.34-2.28(m,3H),2.16-1.92(m,2H),1.85-1.59(m,1H)。m/z(esi)M+1＝550.2。

实施例204

1-(3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用3-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-(3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(18.1mg，67％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.57-9.00(m,1H),8.82-8.75(m,1H),8.53-8.46(m,1H),8.22(s,1H),8.20-8.11(m,1H),8.05-7.83(m,2H),7.77-7.59(m,1H),7.19-7.10(m,1H),6.94-6.83(m,2H),6.71-6.59(m,1H),6.47-6.37(m,1H),5.78-5.67(m,1H),4.27-3.93(m,2H),3.85-3.64(m,2H),3.57-3.21(m,1H),2.28(d,J＝3.9Hz,3H),2.21-1.78(m,5H),1.66-1.59(m,1H)。m/z(esi)M+1＝521.2。

实施例205

外消旋-1-((3aR,5S,6aR)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用N-(4-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用(3aS,6aR)-5-羟基六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到外消旋-1-((3aR,5S,6aR)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-基)丙-2-烯-1-酮(29.0mg，74％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.43-9.39(m,1H),8.91-8.79(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.17-8.08(m,1H),7.68-7.61(m,1H),7.02-6.93(m,1H),6.93-6.86(m,2H),6.64-6.48(m,1H),6.46-6.34(m,1H),5.74-5.66(m,1H),4.71-4.59(m,1H),4.02-3.91(m,1H),3.84-3.45(m,2H),3.22-2.96(m,1H),2.60-2.26(m,6H),2.25-1.99(m,2H),1.97-1.77(m,1H)。m/z(esi)M+1＝551.2。

实施例206

1-((1R,3r,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用N-(4-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用3-羟基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((1R,3r,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮(15.3mg，68％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.33(d,J＝2.9Hz,1H),8.84-8.76(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.14(d,J＝8.7Hz,1H),7.64(d,J＝8.7Hz,1H),6.97(d,J＝10.9Hz,1H),6.92-6.83(m,2H),6.59(dd,J＝16.8,10.2Hz,1H),6.44(dd,J＝16.8,2.1Hz,1H),5.74(dd,J＝10.2,2.1Hz,1H),4.99-4.92(m,1H),4.56-4.50(m,1H),3.65-3.52(m,1H),2.27(s,3H),2.26-2.06(m,5H),2.06-1.90(m,3H)。m/z(esi)M+1＝551.2。

实施例207

1-((1R,3r,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮

步骤A：在40mL小瓶中，将Ir(dtbbpy)(ppy)₂(6.5mg，7.1μmol)、NiBr₂ dtbbpy(17.3mg，36μmol)、奎宁环(105mg，0.95mmol)、邻苯二甲酰亚胺(15.7mg，0.11mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(200mg，0.47mmol)溶解/悬浮于DMA(4.8mL)中。在氮气下向含有5,7-二-叔丁基-3-苯基-3-(四氟-l5-硼烷基)-2,3-二氢苯并[d]噁唑-3-鎓-2-物(394mg，1.0mmol)、3-羟基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(216mg，0.95mmol)的另一40mL小瓶中添加经脱气的MTBE(4.8mL)。搅拌5分钟后，添加吡啶(76μL，0.95mmol)。再搅拌10分钟后，将溶液吸入注射器中，且经由注射器式过滤器过滤至含有镍及铱组分的反应小瓶中。接着将小瓶加盖，且用氮气鼓泡10分钟，覆上石蜡膜，且在整合式光反应器中用450nm光照射12小时(100％强度，750rpm搅拌，最大风扇速度)。真空浓缩反应物，且粗残余物经由40g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到(1R,3r,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(105.4mg，37％)。m/z(esi)M+1＝597.2。

步骤B：将三氟乙酸(262μL，3.4mmol)添加至(1R,3r,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(101.5mg，0.17mmol)于DCM(1.7mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在23℃下搅拌2小时，随后用EtOAc稀释且用10％K₂CO₃淬灭。用EtOAc(3×)萃取水相，且用10％K₂CO₃洗涤合并的有机层。有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-((1R,3r,5S)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(84.3mg，100％)，其不经进一步纯化即直接用于下一反应中。m/z(esi)M+1＝497.2。

步骤C：在空气下在23℃下，将含2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(50wt％)的DMF(240μL，0.40mmol)添加至DIPEA(0.14mL，0.81mmol)、N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-((1R,3r,5S)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(20mg，0.04mmol)及2-氟丙烯酸(18mg，0.20mmol)于DMF(0.75mL)中的经搅拌溶液中。在50℃下1小时后，将反应混合物冷却至室温，用水及EtOAc稀释，且用EtOAc(3×)萃取水层。合并的有机层用盐水(3×)洗涤，经硫酸钠干燥，且真空浓缩。粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到1-((1R,3r,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)-2-氟丙-2-烯-1-酮(5.0mg，22％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.36(d,J＝3.0Hz,1H),8.84-8.78(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.15(d,J＝8.7Hz,1H),7.66(d,J＝8.7Hz,1H),6.98(d,J＝10.9Hz,1H),6.92-6.86(m,2H),5.51(dd,J＝47.3,3.2Hz,1H),5.17(dd,J＝16.5,3.2Hz,1H),4.96-4.92(m,1H),4.76-4.71(m,1H),3.57(tt,J＝11.8,5.4Hz,1H),2.27(s,3H),2.26-2.13(m,3H),2.13-1.90(m,5H)。19F NMR(376MHz,CDCl3)δ-109.05(dd,J＝47.2,16.6Hz,1F),-130.09(t,J＝10.0Hz,1F)。m/z(esi)M+1＝569.2。

实施例208

1-((1R,3r,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丁-2-炔-1-酮

根据实施例207的程序，使用丁-2-炔酸代替2-氟丙烯酸来制备，得到1-((1R,3r,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丁-2-炔-1-酮(7.5mg，33％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.35(d,J＝2.8Hz,1H),8.82(s,1H),8.79(d,J＝8.9Hz,1H),8.52(dd,J＝6.8,1.4Hz,1H),8.24(s,1H),8.14(d,J＝8.7Hz,1H),7.66(d,J＝8.7Hz,1H),6.97(d,J＝10.8Hz,1H),6.92-6.85(m,2H),4.85(dt,J＝6.3,2.9Hz,1H),4.70(dt,J＝6.3,2.9Hz,1H),3.57(tt,J＝11.7,5.4Hz,1H),2.27(s,3H),2.26-2.06(m,5H),2.02(s,3H),2.01-1.89(m,3H)。m/z(esi)M+1＝563.2。

实施例209

rel-(R)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在40mL小瓶中，将六氟磷酸(4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶)双[(2-吡啶基)苯基]铱(III)(6.5mg，7.1μmol)、(SP-4-2)-[4,4'-双(1,1-二甲基乙基)-2,2'-联吡啶-κN1,κN1′]二溴-镍(17.2mg，36μmol)、奎宁环(105mg，0.95mmol)、邻苯二甲酰亚胺(15.7mg，0.11mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(中间体S，200mg，0.47mmol)溶解/悬浮于DMA(4.8mL)中。在氮气下向含有5,7-二-叔丁基-3-苯基-3-(四氟-l5-硼烷基)-2,3-二氢苯并[d]噁唑-3-鎓-2-物(394mg，1.0mmol)及4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(204mg，0.95mmol)的另一20mL小瓶中添加经脱气的MTBE(4.8mL)。搅拌5分钟后，添加吡啶(76μL，0.95mmol)。再搅拌10分钟后，将溶液吸入注射器中，且经由注射器式过滤器过滤至含有镍及铱组分的反应小瓶中。接着将小瓶加盖，且用氮气鼓泡10分钟，覆上石蜡膜，且在整合式光反应器中用450nm光照射12小时(100％强度，750rpm搅拌，最大风扇速度)。真空浓缩反应物，且粗残余物经由40g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到外消旋-(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯。对映异构体混合物随后通过手性制备型SFC(30％EtOH/CO₂，60mL/min；100巴出口压力，2cm×25cmWhelk-01RR管柱)分离，得到rel-(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(38mg，14％)。m/z(esi)M+1＝585.3。

步骤B：将三氟乙酸(0.10mL，1.3mmol)添加至rel-(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(38mg，0.07mmol)于DCM(0.7mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在23℃下搅拌2小时，随后用EtOAc稀释且用10％K₂CO₃淬灭。用EtOAc(3×)萃取水相，且用10％K₂CO₃洗涤合并的有机层。有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到rel-(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(氮杂环庚烷-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(19.9mg，63％)，其不经进一步纯化即直接用于下一反应中。m/z(esi)M+1＝485.2。

步骤C：在0℃下将呈于DCM中的0.5M溶液形式的丙烯酰氯(25μL，0.01mmol)添加至rel-(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(氮杂环庚烷-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(7.6mg，0.02mmol)及DIPEA(5.5μL，0.03mmol)于DCM(0.4mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在此温度下搅拌10分钟，随后将其在10％K₂CO₃与DCM之间分配。用DCM(3×)萃取水相。合并的有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，且粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到rel-(R)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(5.6mg，66％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.44(s,1H),8.83-8.72(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.17-8.09(m,1H),7.66-7.59(m,1H),7.05-6.98(m,1H),6.94-6.85(m,2H),6.73-6.60(m,1H),6.47-6.36(m,1H),5.78-5.70(m,1H),4.00-3.53(m,4H),3.20-3.10(m,1H),2.39-2.24(m,1H),2.22(d,J＝2.1Hz,3H),2.20-2.05(m,3H),2.03-1.75(m,2H)。m/z(esi)M+1＝539.2。

实施例210

rel-(S)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在40mL小瓶中，将六氟磷酸(4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶)双[(2-吡啶基)苯基]铱(III)(6.5mg，7.1μmol)、(SP-4-2)-[4,4'-双(1,1-二甲基乙基)-2,2'-联吡啶-κN1,κN1′]二溴-镍(17.2mg，36μmol)、奎宁环(105mg，0.95mmol)、邻苯二甲酰亚胺(15.7mg，0.11mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(200mg，0.47mmol)溶解/悬浮于DMA(4.8mL)中。在氮气下向含有5,7-二-叔丁基-3-苯基-3-(四氟-l5-硼烷基)-2,3-二氢苯并[d]噁唑-3-鎓-2-化物(394mg，1.0mmol)及4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(204mg，0.95mmol)的另一20mL小瓶中添加经脱气的MTBE(4.8mL)。搅拌5分钟后，添加吡啶(76μL，0.95mmol)。再搅拌10分钟后，将溶液吸入注射器中，且经由注射器式过滤器过滤至含有镍及铱组分的反应小瓶中。接着将小瓶加盖，且用氮气鼓泡10分钟，覆上石蜡膜，且在整合式光反应器中用450nm光照射12小时(100％强度，750rpm搅拌，最大风扇速度)。真空浓缩反应物，且粗残余物经由40g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到外消旋-(S)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯。经纯化的对映异构体混合物随后通过手性制备型SFC(30％EtOH/CO₂，60mL/min；100巴出口压力，2cm×25cm Whelk-01 RR管柱)分离，得到rel-(S)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(42mg，15％)。m/z(esi)M+1＝585.3。

步骤B：将三氟乙酸(0.11mL，1.4mmol)添加至rel-(S)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(40mg，0.07mmol)于DCM(0.7mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在23℃下搅拌2小时，随后用EtOAc稀释且用10％K₂CO₃淬灭。用EtOAc(3×)萃取水相，且用10％K₂CO₃洗涤合并的有机层。有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到rel-(S)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(氮杂环庚烷-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(29.1mg，88％)，其不经进一步纯化即直接用于下一反应中。m/z(esi)M+1＝485.2。

步骤C：在0℃下将呈于DCM中的0.5M溶液形式的丙烯酰氯(33μL，0.02mmol)添加至rel-(S)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(氮杂环庚烷-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(10mg，0.02mmol)及DIPEA(7.2μL，0.04mmol)于DCM(0.4mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在此温度下搅拌10分钟，随后将其在10％K₂CO₃与DCM之间分配。用DCM(3×)萃取水相。合并的有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，且粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到rel-(S)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丙-2-烯-1-酮(5.2mg，47％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.44(s,1H),8.83-8.72(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.17-8.09(m,1H),7.66-7.59(m,1H),7.05-6.98(m,1H),6.94-6.85(m,2H),6.73-6.60(m,1H),6.47-6.36(m,1H),5.78-5.70(m,1H),4.00-3.53(m,4H),3.20-3.10(m,1H),2.39-2.24(m,1H),2.22(d,J＝2.1Hz,3H),2.20-2.05(m,3H),2.03-1.75(m,2H)。m/z(esi)M+1＝539.2。

实施例211

rel-(R)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丁-2-炔-1-酮

步骤A：在40mL小瓶中，将六氟磷酸(4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶)双[(2-吡啶基)苯基]铱(III)(6.5mg，7.1μmol)、(SP-4-2)-[4,4'-双(1,1-二甲基乙基)-2,2'-联吡啶-κN1,κN1′]二溴-镍(17.2mg，36μmol)、奎宁环(105mg，0.95mmol)、邻苯二甲酰亚胺(15.7mg，0.11mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(200mg，0.47mmol)溶解/悬浮于DMA(4.8mL)中。在氮气下向含有5,7-二-叔丁基-3-苯基-3-(四氟-l5-硼烷基)-2,3-二氢苯并[d]噁唑-3-鎓-2-化物(394mg，1.0mmol)及4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(204mg，0.95mmol)的另一20mL小瓶中添加经脱气的MTBE(4.8mL)。搅拌5分钟后，添加吡啶(76μL，0.95mmol)。再搅拌10分钟后，将溶液吸入注射器中，且经由注射器式过滤器过滤至含有镍及铱组分的反应小瓶中。接着将小瓶加盖，且用氮气鼓泡10分钟，覆上石蜡膜，且在整合式光反应器中用450nm光照射12小时(100％强度，750rpm搅拌，最大风扇速度)。真空浓缩反应物，且粗残余物经由40g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到外消旋-(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯。对映异构体混合物随后通过手性制备型SFC(30％EtOH/CO₂，60mL/min；100巴出口压力，2cm×25cm Whelk-01RR管柱)分离，得到rel-(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(38mg，14％)。m/z(esi)M+1＝585.3。

步骤B：将三氟乙酸(0.1mL，1.3mmol)添加至rel-(R)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(38mg，0.07mmol)于DCM(0.7mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在23℃下搅拌2小时，随后用EtOAc稀释且用10％K₂CO₃淬灭。用EtOAc(3×)萃取水相，且用10％K₂CO₃洗涤合并的有机层。有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到rel-(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(氮杂环庚烷-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(19.9mg，63％)，其不经进一步纯化即直接用于下一反应中。m/z(esi)M+1＝485.2。

步骤C：在空气下在23℃下，将含2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(50wt％)的DMF(23μL，0.04mmol)添加至DIPEA(14μL，0.08mmol)、rel-(R)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(氮杂环庚烷-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(7.7mg，0.02mmol)及丁-2-炔酸(2.0mg，0.02mmol)于DMF(0.75mL)中的经搅拌溶液中。2小时后，用水及EtOAc稀释反应混合物，且用EtOAc(3×)萃取水层。合并的有机层用盐水(3×)洗涤，经硫酸钠干燥，且真空浓缩。粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到rel-(R)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丁-2-炔-1-酮(2.2mg，25％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.45(s,1H),8.84-8.72(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.18-8.10(m,1H),7.68-7.59(m,1H),7.06-6.98(m,1H),6.91-6.87(m,2H),4.18-3.84(m,2H),3.82-3.62(m,2H),3.17-3.09(m,1H),2.39-2.25(m,1H),2.22(d,J＝2.1Hz,3H),2.20-2.06(m,3H),2.07-2.01(m,3H),2.00-1.83(m,2H)。m/z(esi)M+1＝551.2。

实施例212

rel-(S)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丁-2-炔-1-酮

步骤A：在40mL小瓶中，将六氟磷酸(4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶)双[(2-吡啶基)苯基]铱(III)(6.5mg，7.1μmol)、(SP-4-2)-[4,4'-双(1,1-二甲基乙基)-2,2'-联吡啶-κN1,κN1′]二溴-镍(17.2mg，36μmol)、奎宁环(105mg，0.95mmol)、邻苯二甲酰亚胺(15.7mg，0.11mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(200mg，0.47mmol)溶解/悬浮于DMA(4.8mL)中。在氮气下向含有5,7-二-叔丁基-3-苯基-3-(四氟-l5-硼烷基)-2,3-二氢苯并[d]噁唑-3-鎓-2-化物(394mg，1.0mmol)及4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(204mg，0.95mmol)的另一20mL小瓶中添加经脱气的MTBE(4.8mL)。搅拌5分钟后，添加吡啶(76μL，0.95mmol)。再搅拌10分钟后，将溶液吸入注射器中，且经由注射器式过滤器过滤至含有镍及铱组分的反应小瓶中。接着将小瓶加盖，且用氮气鼓泡10分钟，覆上石蜡膜，且在整合式光反应器中用450nm光照射12小时(100％强度，750rpm搅拌，最大风扇速度)。真空浓缩反应物，且粗残余物经由40g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到外消旋-(S)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯。经纯化的对映异构体混合物随后通过手性制备型SFC(30％EtOH/CO₂，60mL/min；100巴出口压力，2cm×25cm Whelk-01 RR管柱)分离，得到rel-(S)-4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯(42mg，15％产率，99％纯度)。m/z(esi)M+1＝585.3。

步骤C：在空气下在23℃下，将含2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(50wt％)的DMF(32μL，0.06mmol)添加至DIPEA(19μL，0.11mmol)、rel-(S)-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(氮杂环庚烷-4-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(10.7mg，0.02mmol)及丁-2-炔酸(2.8mg，0.03mmol)于DMF(0.75mL)中的经搅拌溶液中。2小时后，用水及EtOAc稀释反应混合物，且用EtOAc(3×)萃取水层。合并的有机层用盐水(3×)洗涤，经硫酸钠干燥，且真空浓缩。粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到rel-(S)-1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)氮杂环庚烷-1-基)丁-2-炔-1-酮(4.3mg，35％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.45(s,1H),8.84-8.72(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.18-8.10(m,1H),7.68-7.59(m,1H),7.06-6.98(m,1H),6.91-6.87(m,2H),4.18-3.84(m,2H),3.82-3.62(m,2H),3.17-3.09(m,1H),2.39-2.25(m,1H),2.22(d,J＝2.1Hz,3H),2.20-2.06(m,3H),2.07-2.01(m,3H),2.00-1.83(m,2H)。m/z(esi)M+1＝551.2。

实施例213

外消旋-1-((1S,2R,4R)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用2-羟基-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到外消旋-1-((1S,2R,4R)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)丙-2-烯-1-酮(6.0mg，54％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.79-9.25(m,1H),8.76-8.71(m,1H),8.55-8.48(m,1H),8.48-8.29(m,1H),8.24(s,1H),8.14-8.07(m,1H),7.67-7.58(m,1H),7.02-6.86(m,3H),6.56-6.25(m,1H),6.20-6.03(m,1H),5.76-5.35(m,1H),5.28-4.95(m,1H),4.62-4.45(m,1H),3.48-3.38(m,1H),2.58-2.18(m,5H),2.15-1.61(m,4H)。m/z(esi)M+1＝537.2。

实施例214

1-((1R,3r,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用3-羟基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((1R,3r,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮(6.8mg，54％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.43(d,J＝3.1Hz,1H),8.92(dd,J＝9.1,8.5Hz,1H),8.82(s,1H),8.57-8.51(m,1H),8.26(s,1H),8.16(d,J＝8.7Hz,1H),7.67(d,J＝8.7Hz,1H),7.16(dd,J＝9.1,2.1Hz,1H),6.96-6.89(m,2H),6.60(dd,J＝16.8,10.2Hz,1H),6.47(dd,J＝16.8,2.2Hz,1H),5.77(dd,J＝10.2,2.2Hz,1H),4.99-4.93(m,1H),4.58-4.52(m,1H),3.60(tt,J＝12.0,6.3Hz,1H),2.37-1.86(m,8H)。m/z(esi)M+1＝571.2。

实施例215

1-((1R,3r,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用3-羟基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((1R,3r,5S)-3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮(24.1mg，74％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.08(s,1H),8.77(s,1H),8.50(dd,J＝7.4,0.8Hz,1H),8.22(s,1H),8.11(d,J＝8.7Hz,1H),7.93-7.85(m,2H),7.62(d,J＝8.7Hz,1H),7.17-7.10(m,1H),6.93-6.84(m,2H),6.60(dd,J＝16.8,10.2Hz,1H),6.46(dd,J＝16.8,2.2Hz,1H),5.75(dd,J＝10.2,2.2Hz,1H),5.01-4.95(m,1H),4.57-4.50(m,1H),3.58(tt,J＝11.6,5.5Hz,1H),2.38-2.26(m,4H),2.26-1.90(m,7H)。m/z(esi)M+1＝533.2。

实施例216

外消旋-1-((1R,4S,5S)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用5-羟基-2-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到外消旋-1-((1R,4S,5S)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮(6.4mg，64％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.53-9.47(m,1H),8.96-8.84(m,2H),8.55-8.49(m,1H),8.24(s,1H),8.21-8.14(m,1H),7.74-7.66(m,1H),7.00-6.83(m,3H),6.67-6.52(m,1H),6.50-6.31(m,1H),5.81-5.66(m,1H),4.93-4.20(m,1H),3.94-3.45(m,3H),2.81-2.53(m,1H),2.43-2.24(m,5H),2.06-1.68(m,4H)。m/z(esi)M+1＝551.2。

实施例217

外消旋-1-((1R,4S,5S)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用5-羟基-2-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到外消旋-1-((1R,4S,5S)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮(9.1mg，63％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.58-9.53(m,1H),8.93-8.81(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.21-8.14(m,1H),7.74-7.66(m,1H),7.07-6.99(m,1H),6.94-6.84(m,2H),6.68-6.53(m,1H),6.52-6.30(m,1H),5.84-5.65(m,1H),5.00-4.20(m,1H),3.93-3.82(m,2H),3.79-3.65(m,1H),3.55-3.48(m,1H),2.89-2.58(m,1H),2.49-2.29(m,2H),2.23(s,3H),2.14-1.87(m,2H),1.86-1.57(m,1H)。m/z(esi)M+1＝551.2。

实施例218

外消旋-1-((1R,4S,5R)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用5-羟基-2-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到外消旋-1-((1R,4S,5R)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮(5.2mg，64％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.39-9.34(m,1H),8.83-8.77(m,1H),8.74-8.60(m,1H),8.55-8.48(m,1H),8.26-8.22(m,1H),8.19-8.11(m,1H),7.71-7.63(m,1H),7.04-6.96(m,1H),6.95-6.84(m,2H),6.69-6.25(m,2H),5.70-5.59(m,1H),4.95-4.18(m,1H),3.89-3.60(m,1H),3.53-3.41(m,2H),2.81-2.67(m,1H),2.51-2.22(m,2H),2.22-2.16(m,3H),2.14-1.79(m,4H)。m/z(esi)M+1＝551.2。

实施例219

1-((1R,3r,5S)-3-(4-((3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用6-氯-N-(3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用3-羟基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((1R,3r,5S)-3-(4-((3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮(9.1mg，59％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.99(s,1H),8.73(s,1H),8.30(d,J＝2.4Hz,1H),8.09(d,J＝8.7Hz,1H),8.02(s,1H),7.80(d,J＝2.7Hz,1H),7.73(dd,J＝8.7,2.7Hz,1H),7.63-7.57(m,2H),6.92(d,J＝8.7Hz,1H),6.59(dd,J＝16.8,10.2Hz,1H),6.46(dd,J＝16.8,2.2Hz,1H),5.75(dd,J＝10.2,2.2Hz,1H),5.00-4.94(m,1H),4.56-4.50(m,1H),3.93(s,3H),3.57(tt,J＝11.6,5.6Hz,1H),2.37(s,3H),2.33-1.88(m,8H)。m/z(esi)M+1＝547.3。

实施例220

外消旋-1-((1S,2R,4R)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用2-羟基-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到外消旋-1-((1S,2R,4R)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)丙-2-烯-1-酮(13.4mg，62％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.34-9.39(m,1H),8.73(s,1H),8.52-8.45(m,1H),8.39-8.23(m,2H),8.22(s,1H),8.09-8.01(m,1H),7.61-7.40(m,1H),7.18-7.09(m,1H),6.93-6.85(m,2H),6.57-5.85(m,2H),5.73-5.49(m,1H),5.28-4.99(m,1H),4.63-4.16(m,1H),3.44-3.32(m,1H),2.74-2.30(m,1H),2.30-2.25(m,3H),2.18-1.89(m,3H),1.89-1.60(m,2H)。m/z(esi)M+1＝519.2。

实施例221

1-((1R,5S,8r)-8-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用(1R,5S,8r)-8-羟基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((1R,5S,8r)-8-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)丙-2-烯-1-酮(4.9mg，51％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.09(s,1H),8.79(s,1H),8.50(dd,J＝7.4,0.7Hz,1H),8.23(s,1H),8.15(d,J＝8.7Hz,1H),7.91-7.82(m,2H),7.73(d,J＝8.7Hz,1H),7.15(d,J＝8.4Hz,1H),6.93-6.83(m,2H),6.65(dd,J＝16.8,10.6Hz,1H),6.34(dd,J＝16.8,1.9Hz,1H),5.73(dd,J＝10.6,1.9Hz,1H),4.69(d,J＝13.1Hz,1H),4.02(d,J＝12.3Hz,1H),3.49(d,J＝12.3Hz,1H),3.30(s,1H),3.06(d,J＝13.1Hz,1H),2.97(s,2H),2.28(s,3H),1.91-1.73(m,2H),1.73-1.57(m,2H)。m/z(esi)M+1＝533.3。

实施例222

1-((1R,5S,8r)-8-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用(1R,5S,8r)-8-羟基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((1R,5S,8r)-8-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)丙-2-烯-1-酮(2.0mg，33％)。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.43(d,J＝3.2Hz,1H),8.91-8.82(m,2H),8.52(dd,J＝7.0,1.1Hz,1H),8.24(s,1H),8.17(d,J＝8.7Hz,1H),7.75(d,J＝8.7Hz,1H),7.01-6.94(m,1H),6.92-6.85(m,2H),6.65(dd,J＝16.8,10.6Hz,1H),6.33(dd,J＝16.8,1.9Hz,1H),5.72(dd,J＝10.6,1.9Hz,1H),4.71-4.64(m,1H),4.01(d,J＝12.2Hz,1H),3.47(d,J＝12.2Hz,1H),3.30(s,1H),3.05(d,J＝13.2Hz,1H),2.98-2.87(m,2H),2.28(s,3H),1.95-1.73(m,2H),1.71-1.57(m,2H)。m/z(esi)M+1＝551.3。

实施例223

1-((1R,5S,8r)-8-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用(1R,5S,8r)-8-羟基-3-氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((1R,5S,8r)-8-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)丙-2-烯-1-酮(1.7mg，27％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.49(d,J＝3.5Hz,1H),8.88-8.79(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.17(d,J＝8.7Hz,1H),7.75(d,J＝8.7Hz,1H),7.06-6.98(m,1H),6.93-6.85(m,2H),6.66(dd,J＝16.8,10.6Hz,1H),6.33(dd,J＝16.8,1.9Hz,1H),5.72(dd,J＝10.6,2.0Hz,1H),4.72-4.64(m,1H),4.06-3.99(m,1H),3.48(d,J＝12.3Hz,1H),3.31(s,1H),3.10-3.02(m,1H),2.99-2.90(m,2H),2.22(d,J＝2.1Hz,3H),2.01-1.76(m,2H),1.71-1.60(m,2H)。m/z(esi)M+1＝551.3。

实施例224

rel-1-((3aR,5S,6aR)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在40mL小瓶中，将六氟磷酸(4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶)双[(2-吡啶基)苯基]铱(III)(6.5mg，7.1μmol)、(SP-4-2)-[4,4'-双(1,1-二甲基乙基)-2,2'-联吡啶-κN1,κN1′]二溴-镍(17.3mg，36μmol)、奎宁环(105mg，0.95mmol)、邻苯二甲酰亚胺(15.7mg，0.11mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(200mg，0.47mmol)溶解/悬浮于DMA(4.8mL)中。在氮气下向含有5,7-二-叔丁基-3-苯基-3-(四氟-l5-硼烷基)-2,3-二氢苯并[d]噁唑-3-鎓-2-化物(394mg，1.0mmol)及外消旋-(3aS,6aR)-5-羟基六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(216mg，0.95mmol)的另一40mL小瓶中添加经脱气的MTBE(4.8mL)。搅拌5分钟后，添加吡啶(77μL，0.95mmol)。再搅拌10分钟后，将溶液吸入注射器中，且经由注射器式过滤器过滤至含有镍及铱组分的反应小瓶中。接着将小瓶加盖，且用氮气鼓泡10分钟，覆上石蜡膜，且在整合式光反应器中用450nm光照射12小时(100％强度，750rpm搅拌，最大风扇速度)。真空浓缩反应物，且粗残余物经由40g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到外消旋-(3aR,5S,6aR)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯。对映异构体混合物接着使用手性制备型SFC(50％EtOH/CO₂，50mL/min，35℃；100巴出口压力，30mm×250mm AD-H管柱)分离，得到rel-(3aR,5S,6aR)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(22mg，7.8％)。m/z(esi)M+1＝597.3。

步骤B：将三氟乙酸(57μL，0.74mmol)添加至rel-(3aR,5S,6aR)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯(22mg，0.04mmol)于DCM(0.5mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在23℃下搅拌2小时，随后用EtOAc稀释且用10％K₂CO₃淬灭。用EtOAc(3×)萃取水相，且用10％K₂CO₃洗涤合并的有机层。有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到rel-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-((3aR,5S,6aR)-八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(14.3mg，78％)，其不经进一步纯化即直接用于下一反应中。m/z(esi)M+1＝497.2。

步骤C：在0℃下将呈于DCM中的0.5M溶液形式的丙烯酰氯(46μL，0.02mmol)添加至rel-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-((3aR,5S,6aR)-八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(14.3mg，0.03mmol)及DIPEA(0.01mL，0.06mmol)于DCM(0.5mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在此温度下搅拌10分钟，随后将其在10％K₂CO₃与DCM之间分配。用DCM(3×)萃取水相。合并的有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，且粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到rel-1-((3aR,5S,6aR)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-基)丙-2-烯-1-酮(10.2mg，64％)。此单一对映异构体的立体化学任意指定。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.43-9.39(m,1H),8.91-8.79(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.17-8.08(m,1H),7.68-7.61(m,1H),7.02-6.93(m,1H),6.93-6.86(m,2H),6.64-6.48(m,1H),6.46-6.34(m,1H),5.74-5.66(m,1H),4.71-4.59(m,1H),4.02-3.91(m,1H),3.84-3.45(m,2H),3.22-2.96(m,1H),2.60-2.26(m,6H),2.25-1.99(m,2H),1.97-1.77(m,1H)。m/z(esi)M+1＝551.2。

实施例225

rel-1-((3aS,5R,6aS)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)六氢环戊[b]吡咯-1(2H)-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例224的程序，使用手性制备型SFC后的剩余对映异构体来制备。此单一对映异构体的立体化学任意指定。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.43-9.39(m,1H),8.91-8.79(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.17-8.08(m,1H),7.68-7.61(m,1H),7.02-6.93(m,1H),6.93-6.86(m,2H),6.64-6.48(m,1H),6.46-6.34(m,1H),5.74-5.66(m,1H),4.71-4.59(m,1H),4.02-3.91(m,1H),3.84-3.45(m,2H),3.22-2.96(m,1H),2.60-2.26(m,6H),2.25-1.99(m,2H),1.97-1.77(m,1H)。m/z(esi)M+1＝551.2。

实施例226

1-((1R,3r,5S)-3-(4-((2-氟-5-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用6-氯-N-(2-氟-5-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用3-羟基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((1R,3r,5S)-3-(4-((2-氟-5-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮(22.1mg，74％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.17(d,J＝2.5Hz,1H),8.78(s,1H),8.60(d,J＝8.8Hz,1H),8.30(d,J＝2.5Hz,1H),8.11(d,J＝8.8Hz,1H),8.05(s,1H),7.68-7.58(m,2H),6.68(d,J＝11.5Hz,1H),6.57(dd,J＝16.8,10.2Hz,1H),6.42(dd,J＝16.8,2.1Hz,1H),5.72(dd,J＝10.2,2.1Hz,1H),4.97-4.91(m,1H),4.55-4.48(m,1H),3.94(s,3H),3.63-3.50(m,1H),2.38(d,J＝1.0Hz,3H),2.29-1.85(m,6H)。m/z(esi)M+1＝565.2。

实施例227

1-((1R,3r,5S)-3-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，使用6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且使用3-羟基-8-氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((1R,3r,5S)-3-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮(10.0mg，44％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.29(d,J＝2.9Hz,1H),8.73(s,1H),8.49(t,J＝9.0Hz,1H),8.30(d,J＝2.5Hz,1H),8.10(d,J＝8.6Hz,1H),8.04(s,1H),7.66-7.58(m,2H),6.73(dd,J＝9.0,1.7Hz,1H),6.60(dd,J＝16.8,10.2Hz,1H),6.46(dd,J＝16.8,2.2Hz,1H),5.75(dd,J＝10.2,2.2Hz,1H),5.00-4.93(m,1H),4.57-4.51(m,1H),3.94(s,3H),3.64-3.51(m,1H),2.32(d,J＝2.1Hz,3H),2.26-1.89(m,6H)。m/z(esi)M+1＝565.2。

实施例228

rel-1-((1S,2R,4R)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在8mL小瓶中，将六氟磷酸(4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶)双[(2-吡啶基)苯基]铱(III)(1.3mg，1.4μmol)、(SP-4-2)-[4,4'-双(1,1-二甲基乙基)-2,2'-联吡啶-κN1,κN1′]二溴-镍(3.5mg，7.1μmol)、奎宁环(21mg，0.19mmol)、邻苯二甲酰亚胺(3.1mg，0.02mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(中间体S，40mg，0.10mol)溶解/悬浮于DMA(1.0mL)中。在氮气下向含有5,7-二-叔丁基-3-苯基-3-(四氟-l5-硼烷基)-2,3-二氢苯并[d]噁唑-3-鎓-2-化物(79mg，0.20mmol)及2-羟基-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-甲酸叔丁酯(43mg，0.19mmol)的另一8mL小瓶中添加经脱气的MTBE(1.0mL)。搅拌5分钟后，添加吡啶(15μL，0.19mmol)。再搅拌10分钟后，将溶液吸入注射器中，且经由注射器式过滤器过滤至含有镍及铱组分的反应小瓶中。接着将小瓶加盖，且用氮气鼓泡10分钟，覆上石蜡膜，且在整合式光反应器中用450nm光照射12小时(100％强度，1200rpm搅拌，最大风扇速度)。并行进行四个反应，手性分离后得到所需量的产物。合并反应物且真空浓缩，且粗残余物经由40g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到外消旋-(1S,2R,4R)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-甲酸叔丁酯。对映异构体混合物随后通过手性制备型SFC(40％EtOH(0.1％DEA)/CO₂，85mL/min，35℃；100巴出口压力，30mm×250mm Regis Whelk-01 RR管柱)分离，得到rel-(1S,2R,4R)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-甲酸叔丁酯(26mg，12％)。m/z(esi)M+1＝583.2。

步骤B：将三氟乙酸(69μL，0.89mmol)添加至rel-(1S,2R,4R)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-甲酸叔丁酯(26mg，0.04mmol)于DCM(0.5mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在23℃下搅拌2小时，随后用EtOAc稀释且用10％K₂CO₃淬灭。用EtOAc(3×)萃取水相，且用10％K₂CO₃洗涤合并的有机层。有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到rel-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-((1S,2R,4R)-7-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(18.8mg，87％)，其不经进一步纯化即直接用于下一反应中。m/z(esi)M+1＝483.2。

步骤C：在0℃下将呈于DCM中的0.5M溶液形式的丙烯酰氯(44μL，0.02mmol)添加至rel-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-((1S,2R,4R)-7-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(13.2mg，0.03mmol)及DIPEA(9.5μL，0.06mmol)于DCM(0.4mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在此温度下搅拌10分钟，随后将其在10％K₂CO₃与DCM之间分配。用DCM(3×)萃取水相。合并的有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，且粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到rel-1-((1S,2R,4R)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)丙-2-烯-1-酮(8.1mg，55％)。此单一对映异构体的立体化学任意指定。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.79-9.25(m,1H),8.76-8.71(m,1H),8.55-8.48(m,1H),8.48-8.29(m,1H),8.24(s,1H),8.14-8.07(m,1H),7.67-7.58(m,1H),7.02-6.86(m,3H),6.56-6.25(m,1H),6.20-6.03(m,1H),5.76-5.35(m,1H),5.28-4.95(m,1H),4.62-4.45(m,1H),3.48-3.38(m,1H),2.58-2.18(m,5H),2.15-1.61(m,4H)。m/z(esi)M+1＝537.2。

实施例229

rel-1-((1R,2S,4S)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例228的程序，使用手性制备型SFC后的剩余对映异构体来制备。此单一对映异构体的立体化学任意指定。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.79-9.25(m,1H),8.76-8.71(m,1H),8.55-8.48(m,1H),8.48-8.29(m,1H),8.24(s,1H),8.14-8.07(m,1H),7.67-7.58(m,1H),7.02-6.86(m,3H),6.56-6.25(m,1H),6.20-6.03(m,1H),5.76-5.35(m,1H),5.28-4.95(m,1H),4.62-4.45(m,1H),3.48-3.38(m,1H),2.58-2.18(m,5H),2.15-1.61(m,4H)。m/z(esi)M+1＝537.2。

实施例230

1-((1S,4S,6S)-6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，用N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且用(1S,4R,6S)-6-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((1S,4S,6S)-6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)丙-2-烯-1-酮(6.1mg，56％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.52-9.44(m,1H),9.04-8.94(m,1H),8.88-8.82(m,1H),8.58-8.51(m,1H),8.26(s,1H),8.24-8.14(m,1H),7.91-7.61(m,1H),7.22-7.14(m,1H),6.97-6.88(m,2H),6.71-6.31(m,2H),5.80-5.71(m,1H),4.95-4.64(m,1H),3.67-3.47(m,2H),3.45-3.33(m,1H),2.95-2.86(m,1H),2.71-2.29(m,1H),2.20-1.92(m,2H),1.87-1.64(m,1H)。m/z(esi)M+1＝557.1。

实施例231

1-((1R,4R,6R)-6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例189的程序，用N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且用(1R,4S,6R)-6-羟基-2-氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-甲酸叔丁酯代替4-羟基氮杂环庚烷-1-甲酸叔丁酯来制备，得到1-((1R,4R,6R)-6-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)丙-2-烯-1-酮(6.3mg，57％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.52-9.44(m,1H),9.04-8.94(m,1H),8.88-8.82(m,1H),8.58-8.51(m,1H),8.26(s,1H),8.24-8.14(m,1H),7.91-7.61(m,1H),7.22-7.14(m,1H),6.97-6.88(m,2H),6.71-6.31(m,2H),5.80-5.71(m,1H),4.95-4.64(m,1H),3.67-3.47(m,2H),3.45-3.33(m,1H),2.95-2.86(m,1H),2.71-2.29(m,1H),2.20-1.92(m,2H),1.87-1.64(m,1H)。m/z(esi)M+1＝557.1。

实施例232

rel-1-((1S,2R,4R)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在8mL小瓶中，将六氟磷酸(4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶)双[(2-吡啶基)苯基]铱(III)(1.4mg，1.5μmol)、(SP-4-2)-[4,4'-双(1,1-二甲基乙基)-2,2'-联吡啶-κN1,κN1′]二溴-镍(3.6mg，7.4μmol)、奎宁环(22mg，0.20mmol)、邻苯二甲酰亚胺(3.3mg，0.02mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(中间体Y，40mg，0.10mmol)溶解/悬浮于DMA(1.0mL)中。在氮气下向含有5,7-二-叔丁基-3-苯基-3-(四氟-l5-硼烷基)-2,3-二氢苯并[d]噁唑-3-鎓-2-化物(82mg，0.21mmol)及2-羟基-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-甲酸叔丁酯(42mg，0.2mmol)的另一8mL小瓶中添加经脱气的MTBE(1.0mL)。搅拌5分钟后，添加吡啶(16μL，0.20mmol)。再搅拌10分钟后，将溶液吸入注射器中，且经由注射器式过滤器过滤至含有镍及铱组分的反应小瓶中。接着将小瓶加盖，且用氮气鼓泡10分钟，覆上石蜡膜，且在整合式光反应器中用450nm光照射12小时(100％强度，1200rpm搅拌，最大风扇速度)。并行进行三个反应，手性分离后得到所需量的产物。合并反应物且真空浓缩，且粗残余物经由24g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到外消旋-(1S,2R,4R)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-甲酸叔丁酯。对映异构体混合物随后通过手性制备型SFC(40％iPrOH(0.1％DEA)/CO₂，70mL/min；100巴出口压力，30mm×250mm AD-H管柱)分离，得到rel-(1S,2R,4R)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-甲酸叔丁酯(32mg，19％)。m/z(esi)M+1＝565.2。

步骤B：将三氟乙酸(87μL，1.1mmol)添加至rel-(1S,2R,4R)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚烷-7-甲酸叔丁酯(32mg，0.06mmol)于DCM(0.6mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在23℃下搅拌2小时，随后用EtOAc稀释且用10％K₂CO₃淬灭。用EtOAc(3×)萃取水相，且用10％K₂CO₃洗涤合并的有机层。有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到rel-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)-6-((1S,2R,4R)-7-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(22.3mg，85％)，其不经进一步纯化即直接用于下一反应中。m/z(esi)M+1＝465.2。

步骤C：在0℃下将呈于DCM中的0.5M溶液形式的丙烯酰氯(96μL，0.05mmol)添加至rel-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-((1S,4R,5R)-2-氮杂双环[2.2.2]辛-5-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(22.3mg，0.05mmol)及DIPEA(15.7μL，0.10mmol)于DCM(0.5mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在此温度下搅拌10分钟，随后将其在10％K₂CO₃与DCM之间分配。用DCM(3×)萃取水相。合并的有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，且粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到rel-1-((1S,2R,4R)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)丙-2-烯-1-酮(18.0mg，72％)。此单一对映异构体的立体化学任意指定。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.28-9.38(m,1H),8.77-8.71(m,1H),8.52-8.45(m,1H),8.41-8.23(m,2H),8.22(s,1H),8.09-8.01(m,1H),7.63-7.41(m,1H),7.20-7.06(m,1H),6.93-6.85(m,2H),6.54-5.85(m,2H),5.73-4.95(m,2H),4.61-4.17(m,1H),3.44-3.32(m,1H),2.80-2.31(m,1H),2.31-2.25(m,3H),2.16-1.88(m,2H),1.87-1.61(m,3H)。m/z(esi)M+1＝519.2。

实施例233

rel-1-((1R,2S,4S)-2-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例232的程序，使用手性制备型SFC后的剩余对映异构体来制备。此单一对映异构体的立体化学任意指定。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ10.28-9.38(m,1H),8.77-8.71(m,1H),8.52-8.45(m,1H),8.41-8.23(m,2H),8.22(s,1H),8.09-8.01(m,1H),7.63-7.41(m,1H),7.20-7.06(m,1H),6.93-6.85(m,2H),6.54-5.85(m,2H),5.73-4.95(m,2H),4.61-4.17(m,1H),3.44-3.32(m,1H),2.80-2.31(m,1H),2.31-2.25(m,3H),2.16-1.88(m,2H),1.87-1.61(m,3H)。m/z(esi)M+1＝519.2。

实施例234

rel-1-((1R,4S,5S)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在8mL小瓶中，将六氟磷酸(4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶)双[(2-吡啶基)苯基]铱(III)(1.3mg，1.4μmol)、(SP-4-2)-[4,4'-双(1,1-二甲基乙基)-2,2'-联吡啶-κN1,κN1′]二溴-镍(3.5mg，7.1μmol)、奎宁环(21mg，0.19mmol)、邻苯二甲酰亚胺(3.1mg，0.02mmol)及N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(40mg，0.10mmol)溶解/悬浮于DMA(1.0mL)中。在氮气下向含有5,7-二-叔丁基-3-苯基-3-(四氟-l5-硼烷基)-2,3-二氢苯并[d]噁唑-3-鎓-2-化物(79mg，0.20mmol)及5-羟基-2-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸叔丁酯(43mg，0.19mmol)的另一8mL小瓶中添加经脱气的MTBE(1.0mL)。搅拌5分钟后，添加吡啶(15μL，0.19mmol)。再搅拌10分钟后，将溶液吸入注射器中，且经由注射器式过滤器过滤至含有镍及铱组分的反应小瓶中。接着将小瓶加盖，且用氮气鼓泡10分钟，覆上石蜡膜，且在整合式光反应器中用450nm光照射12小时(100％强度，1200rpm搅拌，最大风扇速度)。并行进行四个反应，手性分离后得到所需量的产物。合并反应物且真空浓缩，且粗残余物经由40g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到外消旋-(1R,4S,5S)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸叔丁酯。对映异构体混合物随后通过手性制备型SFC(30％MeOH(0.1％DEA)/CO₂，60mL/min；100巴出口压力，30mm×250mm OD-H管柱)分离，得到rel-(1R,4S,5S)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸叔丁酯(23mg，10％)。m/z(esi)M+1＝597.2。

步骤B：将三氟乙酸(59μL，0.77mmol)添加至rel-(1R,4S,5S)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸叔丁酯(23mg，0.04mmol)于DCM(0.4mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在23℃下搅拌2小时，随后用EtOAc稀释且用10％K₂CO₃淬灭。用EtOAc(3×)萃取水相，且用10％K₂CO₃洗涤合并的有机层。有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到rel-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-((1R,4S,5S)-2-氮杂双环[2.2.2]辛-5-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(17.1mg，89％)，其不经进一步纯化即直接用于下一反应中。m/z(esi)M+1＝497.1。

步骤C：在0℃下将呈于DCM中的0.5M溶液形式的丙烯酰氯(69μL，0.03mmol)添加至rel-N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-((1R,4S,5S)-2-氮杂双环[2.2.2]辛-5-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(17.1mg，0.03mmol)及DIPEA(11.1μL，0.07mmol)于DCM(0.4mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在此温度下搅拌10分钟，随后将其分配于10％K₂CO₃与DCM之间。用DCM(3×)萃取水相。合并的有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，且粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到rel-1-((1R,4S,5S)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮(15.0mg，79％)。此单一对映异构体的立体化学任意指定。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.58-9.53(m,1H),8.93-8.81(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.21-8.14(m,1H),7.74-7.66(m,1H),7.07-6.99(m,1H),6.94-6.84(m,2H),6.68-6.53(m,1H),6.52-6.30(m,1H),5.84-5.65(m,1H),5.00-4.20(m,1H),3.93-3.82(m,2H),3.79-3.65(m,1H),3.55-3.48(m,1H),2.89-2.58(m,1H),2.49-2.29(m,2H),2.23(s,3H),2.14-1.87(m,2H),1.86-1.57(m,1H)。m/z(esi)M+1＝551.2。

实施例235

rel-1-((1S,4R,5R)-5-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2-氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例234的程序，使用手性制备型SFC后的剩余对映异构体来制备。此单一对映异构体的立体化学任意指定。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.58-9.53(m,1H),8.93-8.81(m,2H),8.55-8.48(m,1H),8.24(s,1H),8.21-8.14(m,1H),7.74-7.66(m,1H),7.07-6.99(m,1H),6.94-6.84(m,2H),6.68-6.53(m,1H),6.52-6.30(m,1H),5.84-5.65(m,1H),5.00-4.20(m,1H),3.93-3.82(m,2H),3.79-3.65(m,1H),3.55-3.48(m,1H),2.89-2.58(m,1H),2.49-2.29(m,2H),2.23(s,3H),2.14-1.87(m,2H),1.86-1.57(m,1H)。m/z(esi)M+1＝551.2。

实施例236

1-((1R,4R)-5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向小瓶中添加6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(中间体HH，30mg，0.07mmol)及(1R,4R)-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸叔丁酯(29mg，0.14mmol)，接着添加DMSO(0.46mL)及DIPEA(24μL，0.14mmol)。接着使混合物升温至100℃，将其搅拌6小时。接着将混合物冷却至环境温度，且用水及饱和NaHCO₃水溶液稀释。通过真空过滤分离所得固体，且用水洗涤固体，接着将其溶解于CHCl₃中且经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物接着经由柱层析(12GRediSep，2至8％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，得到呈固体状的(1R,4R)-5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸叔丁酯(38mg，90％)。m/z(esi)M+1＝612.2。

步骤B：将三氟乙酸(91μL，1.2mmol)添加至(1R,4R)-5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-甲酸叔丁酯(36.1mg，0.06mmol)于DCM(1.2mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在23℃下搅拌1小时，随后用EtOAc稀释且用10％K₂CO₃淬灭。用EtOAc(3×)萃取水相，且用10％K₂CO₃洗涤合并的有机层。有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到6-((1R,4R)-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(29.0mg，96％)，其不经进一步纯化即直接用于下一反应中。m/z(esi)M+1＝512.2。

步骤C：在0℃下将呈于DCM中的0.5M溶液形式的丙烯酰氯(0.11mL，0.06mmol)添加至6-((1R,4R)-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(29.0mg，0.06mmol)及DIPEA(19.7μL，0.11mmol)于DCM(0.6mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在此温度下搅拌10分钟，随后将其在10％K₂CO₃与DCM之间分配。用DCM(3×)萃取水相。合并的有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，且粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到1-((1R,4R)-5-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮(25.8mg，81％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.97(s,1H),8.63-8.53(m,2H),8.32-8.27(m,1H),8.14-7.94(m,2H),7.63-7.58(m,1H),7.10-7.01(m,1H),6.79-6.72(m,1H),6.66-6.35(m,2H),5.81-5.72(m,1H),5.11-4.38(m,1H),4.04-3.96(m,1H),3.93(s,3H),3.90-3.79(m,1H),3.76-3.58(m,2H),3.14-3.03(m,2H),2.33-2.28(m,3H),2.27-2.10(m,2H),2.09-1.90(m,2H)。m/z(esi)M+1＝566.2。

实施例237

1-((1R,5S)-6-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向小瓶中添加6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(34mg，0.08mmol)及(1R,5S)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-甲酸叔丁酯(33mg，0.16mmol)，接着添加DMSO(0.52mL)及DIPEA(20μL，0.12mmol)。接着使混合物升温至100℃，将其搅拌6小时。接着将混合物冷却至环境温度，且用水及饱和NaHCO₃水溶液稀释。通过真空过滤分离所得固体，且用水洗涤固体，将其溶解于CHCl₃中，且经Na₂SO₄干燥，过滤且浓缩。粗产物接着经由柱层析(12G RediSep，2至8％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，得到呈固体状的(1R,5S)-6-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-甲酸叔丁酯(45.9mg，96％)。m/z(esi)M+1＝612.3。

步骤B：将三氟乙酸(0.12mL，1.5mmol)添加至(1R,5S)-6-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-2-甲酸叔丁酯(45.9mg，0.08mmol)于DCM(1.5mL)中的经搅拌溶液中。将反应物在23℃下搅拌1小时，随后用EtOAc稀释且用10％K₂CO₃淬灭。用EtOAc(3×)萃取水相，且用10％K₂CO₃洗涤合并的有机层。有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，得到6-((1R,5S)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(36.5mg，95％)，其不经进一步纯化即直接用于下一反应中。m/z(esi)M+1＝512.2。

步骤C：在0℃下将呈于DCM中的0.5M溶液形式的丙烯酰氯(0.14mL，0.07mmol)添加至6-((1R,5S)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基)-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(36.5mg，0.07mmol)及DIPEA(24.9μL，0.14mmol)于DCM(0.8mL)中的经搅拌溶液中。将反应混合物在此温度下搅拌10分钟，随后将其在10％K₂CO₃与DCM之间分配。用DCM(3×)萃取水相。合并的有机层接着经硫酸钠干燥，过滤且真空浓缩，且粗残余物经由4g硅胶滤筒纯化，用1-10％MeOH/DCM梯度洗脱，得到1-((1R,5S)-6-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-2-基)丙-2-烯-1-酮(37.5mg，92％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.08(s,1H),8.65-8.56(m,2H),8.32-8.26(m,1H),8.03(s,1H),8.00-7.93(m,1H),7.62-7.57(m,1H),7.05-6.98(m,1H),6.82-6.72(m,1H),6.71-6.47(m,1H),6.37-6.29(m,1H),5.81-5.69(m,1H),5.64-4.84(m,1H),4.57-3.84(m,4H),3.73-3.58(m,2H),3.42-3.21(m,1H),3.14-3.03(m,3H),2.32-2.27(m,3H),2.21-2.12(m,1H),2.04-1.82(m,2H)。m/z(esi)M+1＝566.2。

实施例238

1-(3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：在小瓶中合并N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(40mg，0.084mmol)、3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(53mg，0.25mmol)、DMSO(0.5mL)及DIPEA(73μL，0.42mmol)。将混合物在120℃下搅拌16小时，接着冷却至环境温度。将反应混合物倾入水(10mL)中且用DCM(10mL)萃取两次。合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤且浓缩。粗物质通过硅胶柱层析(0至16％MeOH/DCM)纯化，得到固体3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(43mg，82％)。m/z(esi)M+1＝618.2。

步骤B：向3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯(43mg，0.069mmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中添加三氟乙酸(0.11mL)。搅拌反应混合物30分钟，接着用K₂CO₃水溶液淬灭。用3:1的CHCl₃/IPA溶液萃取混合物。合并的有机层经MgSO₄干燥，过滤且浓缩，得到固体N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺，其不经进一步纯化即用于下一步骤中，假定定量产率(36mg，100％)。m/z(esi)M+1＝518.1。

步骤C：向N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)-6-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(36mg，0.069mmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中添加DIPEA(36μL，0.21mmol)。将溶液冷却至0℃，且添加丙烯酰氯(共2.2μL)。在0℃下搅拌1小时后，将反应混合物减压浓缩。粗物质通过硅胶柱层析(0至16％MeOH/DCM)纯化，得到呈固体状的产物1-(3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-氯-2-氟苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丙-2-烯-1-酮(9.9mg，25％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.10(d,J＝3.4Hz,1H),8.99(t,J＝8.9Hz,1H),8.67(s,1H),8.54(dd,J＝7.1,1.1Hz,1H),8.25(s,1H),8.02(d,J＝9.4Hz,1H),7.26(d,J＝9.4Hz,1H),7.16(dd,J＝9.1,2.0Hz,1H),6.96-6.88(m,2H),6.60(dd,J＝16.8,10.2Hz,1H),6.46(dd,J＝16.8,2.0Hz,1H),5.80(dd,J＝10.2,2.0Hz,1H),5.03(d,J＝4.9Hz,1H),4.59(d,J＝4.9Hz,1H),4.35(d,J＝12.3Hz,1H),4.07(d,J＝11.9Hz,1H),3.45(d,J＝11.8Hz,1H),3.27(d,J＝12.3Hz,1H),2.19-1.84(m,4H)。m/z(esi)M+1＝572.2。

实施例239

1-(4-(4-((3-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向闪烁瓶中装入4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(22.3mg，0.11mmol)、3-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺(中间体LL，32.6mg，0.11mmol)及2-丙醇(1.1mL)。将混合物在70℃下搅拌1.5小时，接着冷却至环境温度，且用水稀释且用DCM萃取三次。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，且浓缩成橙色固体。粗物质通过硅胶层析(0至16％MeOH/DCM)纯化，得到呈橙色固体状的产物6-氯-N-(3-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(24.4mg，48.0％)。m/z(esi)M+1＝456.1。

步骤B：向4mL小瓶中装入2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(34.4mg，0.16mmol)、6-氯-N-(3-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(24.4mg，0.053μmol)、DMSO(0.5mL)及DIPEA(0.047mL，0.27mmol)，且在100℃下搅拌18小时。将反应混合物冷却至环境温度，且用水稀释。用DCM萃取混合物三次。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，且浓缩成油状物，其不经进一步纯化即用于下一步骤中，假定定量产率(34mg，100％)。m/z(esi)M+1＝634.2。

步骤C：向4-(4-((3-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(34mg，0.053mmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中添加三氟乙酸(0.08mL)。搅拌反应混合物3小时，接着用K₂CO₃水溶液淬灭。用DCM萃取混合物。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤且浓缩。粗物质通过硅胶层析(0至16％MeOH/DCM)纯化，得到N-(3-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(11.9mg，42％)。m/z(esi)M+1＝534.2。

步骤D：向N-(3-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(11.9mg，22μmol)于DCM(1mL)中的经搅拌溶液中添加DIPEA(12μL，67μmol)。将溶液冷却至0℃，且添加丙烯酰氯(1.5μL)。在0℃下搅拌15分钟后，将反应混合物减压浓缩。粗物质通过硅胶柱层析(0至16％MeOH/DCM)纯化，得到产物1-(4-(4-((3-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(7.3mg，56％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.02(d,J＝3.1Hz,1H),8.77(t,J＝9.0Hz,1H),8.59(s,1H),8.33(d,J＝2.5Hz,1H),8.06(s,1H),7.99(d,J＝9.3Hz,1H),7.67(d,J＝2.5Hz,1H),7.16(d,J＝9.3Hz,1H),6.86(dd,J＝9.3,2.1Hz,1H),6.58(dd,J＝16.8,10.6Hz,1H),6.26(dd,J＝16.8,1.8Hz,1H),5.69(dd,J＝10.5,1.8Hz,1H),4.00(t,J＝5.7Hz,2H),3.94(s,3H),3.90(s,2H)3.84(t,J＝6.4,4.9Hz,2H),1.62(s,6H)。m/z(esi)M+1＝588.2。

实施例240

1-(3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丁-2-炔-1-酮

向烧瓶中装入N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(9.1mg，18μmol)、DMF(0.18mL)、2-丁炔酸(2.3mg，27μmol)及DIPEA(16μL，91μmol)。接着添加丙基膦酸酐(27μL于EtOAc中的50％wt溶液，46μmol)。将混合物在室温下搅拌2小时，接着用EtOAc稀释且用水洗涤。用EtOAc萃取水层两次。合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤且浓缩。粗物质通过硅胶层析(0至16％MeOH/DCM)纯化，得到固体1-(3-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)丁-2-炔-1-酮(6.3mg，61％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.06(d,J＝3.6Hz,1H),8.82(t,J＝9.0Hz,1H),8.65(s,1H),8.51(dd,J＝7.3,0.9Hz,1H),8.24(s,1H),8.00(d,J＝9.4Hz,1H),7.24(d,J＝9.4Hz,1H),7.01(dd,J＝8.8,1.8Hz,1H),6.93-6.85(m,2H),4.93(d,J＝6.2Hz,1H),4.75(d,J＝6.2Hz,1H),4.32(d,J＝12.3Hz,1H),4.17-4.09(m,1H),3.36(dt,J＝12.4,3.0Hz,2H),2.21(d,J＝2.1Hz,3H),2.13-2.00(m,5H),1.98-1.85(m,2H)。m/z(esi)M+1＝564.2。

实施例241

1-(3-(4-((5-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向50mL圆底烧瓶中装入3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-醇(0.54g，3.6mmol)、1-氯-2,4-二氟-5-硝基苯(0.70g，3.6mmol)、Cs₂CO₃(1.4g，4.3mmol)及DMSO(18mL)。将混合物在室温下搅拌过夜，接着用乙酸乙酯稀释且用盐水(10×)洗涤。有机物经Na₂SO₄干燥，干燥装载至硅胶上，且通过柱层析(Redisep 40g，0-10％MeOH/DCM)纯化，得到呈不可分离混合物的6-(2-氯-5-氟-4-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶及6-(4-氯-5-氟-2-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(0.85g，73％)。m/z(esi)M+1＝323.1。

步骤B：向50mL回收烧瓶中装入6-(4-氯-5-氟-2-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶及6-(2-氯-5-氟-4-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶的混合物(0.85g，2.6mmol)、四氢呋喃(13mL)、饱和氯化铵水溶液(13mL)及锌(1.7g，26mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，用乙酸乙酯稀释且经由GF/F滤纸过滤。将有机物干燥装载至硅胶上且通过柱层析(Redisep 40g，100％乙酸乙酯)纯化，得到5-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺(0.29g，37％)。m/z(esi)M+1＝293.1。

步骤C：向50mL回收烧瓶中装入4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(0.18g，0.90mmol)、IPA(9.0mL)及5-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺(0.29g，0.90mmol)。将混合物在70℃下搅拌1小时，接着用25％IPA/CHCl₃稀释，且用2M K₂CO₃水溶液洗涤一次。有机物经Na₂SO₄干燥且真空浓缩，得到6-氯-N-(5-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.41g，100％)。m/z(esi)M+1＝456.0。

步骤D：根据实施例239步骤A至C，用6-氯-N-(5-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且用3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚烷-6-甲酸叔丁酯代替(3aS,6aS)-六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯来合成，得到1-(3-(4-((5-氯-2-氟-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基)丙-2-烯-1-酮(10mg，40％)。m/z(esi)M+1＝572.2。¹H NMR(400MHz,MeOD)δ8.70(s,2H),8.41(d,J＝2.5Hz,1H),8.36(d,J＝7.8Hz,1H),8.05(d,J＝9.4Hz,1H),7.79(d,J＝2.5Hz,1H),7.56(d,J＝9.5Hz,1H),7.11(d,J＝10.9Hz,1H),6.48(dd,J＝17.0,10.4Hz,1H),6.26(dd,J＝16.9,1.8Hz,1H),5.75(dd,J＝10.4,1.8Hz,1H),4.96-4.90(m,1H),4.72-4.68(m,1H),4.25(s,1H),4.11-3.88(m,6H),2.98-2.88(m,1H),1.79(d,J＝9.1Hz,1H)。

实施例242

1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-(三氟甲基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向装备有搅拌棒的20mL小瓶中装入1-氟-4-硝基-2-(三氟甲基)苯(0.20g，0.96mmol)、[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-醇(0.11g，0.80mmol)、DMSO(4.0mL)及Cs₂CO₃(0.31g，0.96mmol)。将混合物加热至80℃后保持45分钟，接着加热至100℃后保持1小时。混合物用乙酸乙酯稀释且用盐水(10×)洗涤。将有机物干燥装载至硅胶上且通过柱层析(Redisep 24g，30-80％乙酸乙酯/庚烷)纯化，得到7-(4-硝基-2-(三氟甲基)苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶(0.20g，76％)。m/z(esi)M+1＝325.1。

步骤B：根据实施例241步骤B至C，用7-(4-硝基-2-(三氟甲基)苯氧基)-[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶代替6-(4-氯-5-氟-2-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶及6-(2-氯-5-氟-4-硝基苯氧基)-3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶的混合物来制备，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-(三氟甲基)苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(84mg，100％)。m/z(esi)M+1＝458.1。

步骤C：根据实施例238步骤A至C，用N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-(三氟甲基)苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且用2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯代替(3aS,6aS)-六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯来制备，得到1-(4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-3-(三氟甲基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(12mg，70％)。m/z(esi)M+1＝590.2。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.81(s,1H),8.64(s,1H),8.53(dd,J＝7.5,0.7Hz,1H),8.32-8.23(m,3H),8.02(d,J＝9.3Hz,1H),7.26(d,J＝8.7Hz,1H),7.19(d,J＝9.3Hz,1H),6.99(dd,J＝2.6,0.7Hz,1H),6.92(dd,J＝7.5,2.6Hz,1H),6.58(dd,J＝16.8,10.6Hz,1H),6.26(dd,J＝16.8,1.8Hz,1H),5.70(dd,J＝10.5,1.8Hz,1H),4.05-3.98(m,2H),3.91-3.84(m,4H),1.62(s,6H)。

实施例243

1-(4-(4-((4-(苯并[d]噻唑-5-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例242步骤A至C，在步骤A中用1,3-二氟-2-甲基-4-硝基苯代替1-氟-4-硝基-2-(三氟甲基)苯且用苯并[d]噻唑-5-醇代替[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-醇来合成，得到1-(4-(4-((4-(苯并[d]噻唑-5-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(9.6mg，58％)。m/z(esi)M+1＝570.2。¹HNMR(400MHz,CDCl₃)δ9.05(d,J＝3.4Hz,1H),9.00(s,1H),8.69(t,J＝9.1Hz,1H),8.58(s,1H),7.99(dd,J＝9.3,2.4Hz,1H),7.88(d,J＝8.8Hz,1H),7.59(d,J＝2.3Hz,1H),7.19(dd,J＝8.5,2.2Hz,1H),7.16-7.09(m,1H),6.91(dd,J＝9.0,1.7Hz,1H),6.58(dd,J＝16.8,10.5Hz,1H),6.26(dd,J＝16.8,1.8Hz,1H),5.69(dd,J＝10.5,1.8Hz,1H),4.04-3.97(m,2H),3.92(s,2H),3.87-3.77(m,2H),2.26(d,J＝2.1Hz,3H),1.62(s,6H)。

实施例244

1-(8-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)丙-2-烯-1-酮

步骤A：向50mL回收烧瓶中装入4,6-二氯吡啶并[3,2-d]嘧啶(0.32g，1.6mmol)、2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯胺(0.43g，1.6mmol)及2-丙醇(16mL)。将混合物在70℃下搅拌20分钟，接着用25％IPA/CHCl₃及2M K₂CO₃水溶液稀释。有机物经Na₂SO₄干燥且真空浓缩，得到6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(0.59g，85％)，其以粗物质形式继续。

步骤B：根据实施例238步骤A至C，用6-氯-N-(2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺且用3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯代替(3aS,6aS)-六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯来合成，得到1-(8-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)丙-2-烯-1-酮(8.1mg，41％)。m/z(esi)M+1＝566.3。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.00(d,J＝3.4Hz,1H),8.60(t,J＝11.0Hz,1H),8.30(d,J＝2.5Hz,1H),8.04(s,1H),7.98(d,J＝9.2Hz,1H),7.61(d,J＝2.5Hz,1H),7.21(d,J＝9.3Hz,1H),6.75(dd,J＝9.1,1.7Hz,1H),6.56(dd,J＝16.8,10.5Hz,1H),6.33(dd,J＝16.8,1.9Hz,1H),5.74(dd,J＝10.5,1.9Hz,1H),4.88-4.83(m,1H),4.74-4.69(m,1H),4.54(d,J＝13.4Hz,1H),3.93(s,3H),3.81(d,J＝12.5Hz,1H),3.68(d,J＝12.6Hz,1H),3.14(d,J＝13.3Hz,1H),2.31(d,J＝2.1Hz,3H),2.17-2.12(m,2H),2.01-1.93(m,1H),1.93-1.85(m,1H)。

实施例245

4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-甲腈

将N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(20mg，40μmol)添加至含有Cs₂CO₃(52mg，0.16mmol)及溴化氰(8.5mg，80μmol)的DMF(0.40mL)中。将混合物在室温下搅拌20分钟，接着将混合物干燥装载至硅胶上，且通过柱层析(Redisep 12g，0-16％MeOH/DCM)纯化，得到4-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-甲腈(9.5mg，45％)。m/z(esi)M+1＝525.3。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.03(d,J＝3.6Hz,1H),8.82(t,J＝9.0Hz,1H),8.65(s,1H),8.51(dd,J＝7.4,0.8Hz,1H),8.23(s,1H),8.01(d,J＝9.3Hz,1H),7.25(d,J＝9.3Hz,1H),7.01(dd,J＝9.0,1.8Hz,1H),6.90(dd,J＝7.4,2.6Hz,1H),6.86(dd,J＝2.6,0.7Hz,1H),3.94-3.87(m,2H),3.69(s,2H),3.55-3.47(m,3H),2.21(d,J＝2.1Hz,3H),1.46(s,6H)。

实施例246

1-(8-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)丁-2-炔-1-酮

步骤A：根据实施例238步骤A至B，在步骤A中用3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-3-甲酸叔丁酯代替(3aS,6aS)-六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-1(2H)-甲酸叔丁酯且用N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺代替N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-5-甲基苯基)-6-氯吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺来合成，得到N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(5.4mg，100％)。m/z(esi)M+1＝498.3。

步骤B：向打兰小瓶中装入2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三磷杂环己烷2,4,6-三氧化物(50％wt于2-甲基四氢呋喃中)(17mg，27μmol)、丁-2-炔酸(1.4mg，16μmol)、N-(4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)-6-(3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-4-胺(5.4mg，11μmol)、Hunig氏碱(7.0mg，54μmol)及DMF(0.11mL)。将混合物在100℃下搅拌过夜。将混合物干燥装载至硅胶上且通过柱层析(Redisep 12g，0至14％MeOH/DCM)纯化，得到1-(8-(4-((4-([1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基氧基)-2-氟-3-甲基苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基)丁-2-炔-1-酮(1.1mg，18％)。m/z(esi)M+1＝564.3。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.09(d,J＝3.6Hz,1H),8.82(t,J＝9.0Hz,1H),8.65(s,1H),8.51(dd,J＝7.2,0.9Hz,1H),8.24(s,1H),8.01(d,J＝9.2Hz,1H),7.22(d,J＝9.3Hz,1H),7.04-6.97(m,1H),6.93-6.85(m,2H),4.84(d,J＝5.9Hz,1H),4.72(d,J＝5.9Hz,1H),4.43(d,J＝13.1Hz,1H),4.25(d,J＝12.9Hz,1H),3.61(d,J＝12.8Hz,1H),3.16(d,J＝13.2Hz,1H),2.21(d,J＝2.2Hz,3H),2.16(s,2H),2.03-1.88(m,2H),1.56(s,3H)。

实施例247

1-(4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮

根据实施例244，在步骤B中用2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯代替3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛烷-8-甲酸叔丁酯来合成，得到1-(4-(4-((2-氟-3-甲基-4-((3-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)氧基)苯基)氨基)吡啶并[3,2-d]嘧啶-6-基)-2,2-二甲基哌嗪-1-基)丙-2-烯-1-酮(6.0mg，59％)。m/z(esi)M+1＝568.2。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.02(d,J＝3.4Hz,1H),8.66-8.55(m,2H),8.29(d,J＝2.4Hz,1H),8.04(s,1H),7.99(d,J＝9.3Hz,1H),7.60(d,J＝2.5Hz,1H),7.14(d,J＝9.3Hz,1H),6.76(dd,J＝9.0,1.7Hz,1H),6.58(dd,J＝16.8,10.5Hz,1H),6.26(dd,J＝16.8,1.8Hz,1H),5.69(dd,J＝10.6,1.8Hz,1H),4.00(t,J＝5.7Hz,2H),3.93(s,3H),3.92(s,2H),3.84(t,2H),2.30(d,J＝2.1Hz,3H),1.62(s,6H)。

本发明的其他化合物通过修改上文所例示的方法来制备，且展示于下表3中。表3中的方法是指上文的实施例编号程序，其中该表中的化合物是以与该实施例类似的程序、改变适当中间体或反应物来制备。

表3

生物化学测试(Biochemical assays)

His8x-Tb-ErbB2(676-775)YVMA_insert(776-1255)表达载体的构建及蛋白表达

用5’-侧翼的NcoI限制性内切酶位点和两个终止密码子、随后在3’-末端的NotI限制性内切酶位点合成了一种优化用于昆虫细胞表达的DNA片段，该片段编码具有SEQ IDNO:1所示氨基酸序列的重组蛋白。在下文所示的序列中，ErbB2(676-775)YVMA_insert(776-1255)氨基序列带下划线。YVMA(SEQ ID NO:2)插入序列用双下划线标记。

SEQ ID NO:1：重组His8x-Tb-ErbB2(676-775)YVMA_insert(776-1255)蛋白质的氨基序列

随后将此合成的DNA片段克隆到杆状病毒转移载体pAcSG2的NcoI与NotI位点之间。所得质粒与来自Expression Systems(Davis,CA,USA)的BestBac^TM线性化杆状病毒DNA一起用于转染Sf9细胞，以产生表达His8x-Tb-ErbB2(676-775)YVMA_insert(776-1255)(被称作为HER2-YVMA(SEQ ID NO:2))蛋白质的重组杆状病毒。通过自初始转染扩增病毒两次来获得高效价杆状病毒原液。对于HER2-YVMA(SEQ ID NO:2)蛋白质表达，在Wave细胞袋(Cytiva,Marlborough,MA,USA)中生长的10L Sf9细胞培养物用重组病毒原液以等于2.5的感染复数(“MOI”)感染68小时。在感染期结束时，通过离心收获细胞。

HER2-YVMA(SEQ ID NO:2)蛋白质纯化

表达HER2-YVMA(SEQ ID NO:2)的昆虫细胞用流化装置在由以下组成的冷溶解缓冲液中破坏：50mM Tris-HCl(pH 8.0)、500mM NaCl、5mM咪唑、10％甘油、1mM TCEP[Tris-2-羧乙基)膦]、0.25％CHAPS{3-[(3-胆酰胺丙基)二甲基氨基]-1-丙磺酸内盐}及蛋白酶抑制剂混合物(完全不含EDTA,RocheApplied Science)。在4℃下通过离心从均浆中移除细胞碎片。使用Talon金属亲和树脂(TaKaRaBio USA,MountainView,CA,USA)从溶解物中富集HER2-YVMA(SEQ ID NO:2)蛋白质，且在除咪唑浓度增加至200mM且省略蛋白酶抑制剂外与溶解缓冲液类似的缓冲液中从金属树脂洗脱。将从Talon亲和树脂收集的HER2-YVMA(SEQID NO:2)合并物在具有500mM NaCl、10％甘油、1mM TCEP及0.25％CHAPS的25mM Tris-Cl(pH 8.5)缓冲液中通过Superdex-200尺寸排阻柱(Cytiva Life Sciences,Marlborough,MA,USA)。从尺寸排阻柱洗脱的单体HER2-YVMA(SEQ ID NO:2)蛋白质在含有25mM Tris-HCl(pH 8.5)、10％甘油、1mM TCEP及0.25％CHAPS的缓冲液中通过Resource Q阴离子交换柱(Cytiva Life Sciences,Marlborough,MA,USA)用50至250mM NaCl的线性盐梯度进一步分级分离。将具有最高激酶活性的HER2-YVMA(SEQ ID NO:2)级分合并且指定为HER2-YVMA(SEQ ID NO:2)体外测试及研究的来源。

ErbB酶测试

使用CisBio的HTRF Kinease-TK分析技术来测定化合物效力。以8μL体积，在由25mM HEPES(pH 7.4)、10mM MgCl₂、0.01％Triton X-100及2％DMSO组成的缓冲液中，将激酶与250nM TK底物生物素(CisBio，cat#62TK0PEC的部分)在1mM ATP下与试验化合物一起孵育。化合物在DMSO中以三倍连续稀释度制备且添加至测试中，得到适当的最终浓度。在22℃下孵育30分钟之后，通过添加8μL淬灭溶液来淬灭反应，该淬灭溶液在HTRF检测缓冲液中含有62.5nM Sa-XL665及0.25×TK-Ab-穴状化合物(皆来自CisBio，cat#62TK0PEC的部分)。在22℃下孵育1小时之后，使用PerkinElmerEnVision多功能酶标仪，经由HTRF双波长检测来测定反应程度，且使用比率发射因子计算对照百分比(POC)。使用仅含DMSO的样品(不存在化合物)测定100POC，且使用预先淬灭的对照反应物测定0POC。将4参数逻辑曲线拟合为作为化合物浓度的函数的POC值，并且IC₅₀值是最佳拟合曲线与50POC相交的点。

所用酶批次及浓度示于表4中。

表4

细胞磷酸化测试

使用在酶测试中表现出一定水平活性的化合物，通过以下体外细胞机制测试来测定组成性ErbB2及EGF刺激的EGFR磷酸化的抑制。

将NIH 3T3细胞进行工程改造以表达具有外显子20YVMA插入序列的ErbB2(HER2-YVMA(SEQ ID NO:2)；测试4)或野生型EGFR(EGFR WT；测试5)，其具有获自GenScript且在补充有10％胎牛血清及15μg/ml blasticin的DMEM中生长的构建体。将细胞分别以40,000或45,000个细胞/孔接种于96孔板中以用于HER2-YVMA(SEQ ID NO:2)及EGFRWT测试，并允许其在37℃/5％ CO₂下附着过夜。在37℃/5％ CO₂下将连续稀释的化合物添加至板中后保持1小时。在37℃/5％ CO₂下用100ng/mlrEGF再刺激EGFRWT细胞10分钟。在化合物孵育之后，从细胞中移除培养基，然后在室温下将其在含3.7％甲醛的PBS中固定20分钟。用PBS洗涤之后，细胞在室温下用100％甲醇渗透10分钟。细胞随后用PBS/0.05％Tween-20洗涤，且在室温下用Odyssey封闭缓冲液(LI-COR Biosciences)封闭至少1小时。将磷酸化ErbB2(Y1196，Cell Signaling#6942)或磷酸化EGFR(Y1068，Cell Signaling#3777)及GAPDH(Millipore#MAB374)的抗体添加至在含有0.05％叠氮化物的封闭缓冲液中的细胞中，且在4℃下孵育过夜。用PBS/0.05％Tween-20洗涤后，将细胞与荧光标记的二级抗兔抗体(LiCOR,IRDye800CW#926-32211)及抗小鼠抗体(Molecular Probes,Alexa Fluor 680#A21058)一起在暗处在室温下孵育1小时。随后洗涤细胞，且使用Odyssey红外成像系统(LI-CORBiosciences)分析两个波长下的荧光。将磷酸化ErbB2及EGFR信号归一化为GAPDH信号以产生曲线且计算IC₅₀值。

MDR1 LLC-PK1(测试6)及BCRP MDCKII(测试7)细胞培养及实验条件

除了传代培养基仅含有2％胎牛血清以延长传代时间至七天之外，根据制造商的建议将经LLC-PK1及MDR1转染的LLC-PK1细胞培养及接种。

根据制造商的建议培养及接种经BCRP转染的MDCKII细胞。测试条件包括存在及不存在0.3μM浓度的BCRP特异性抑制剂KO143，以确定BCRP对试验化合物的流出值的贡献。

使用阳性对照及阴性对照来评定测试中P-gp或BCRP流出的功能。在DMSO中分别针对10μM及1μM的最终试验浓度制备用于测试对照物及试验物的储备溶液。测试中的最终有机物浓度为1％。所有给药溶液均含有10μM荧光黄以监测LLC PK1或MDCKII细胞单层完整性。

对于顶部至底外侧的测定(A至B)，将75μL在转运缓冲液中的试验物添加至个别跨孔(transwell)的顶侧，且将不含化合物或荧光黄的250μL底外侧培养基添加至各孔中。对于底外侧至顶部的测定(B至A)，将250μL在转运缓冲液中的测试物添加至各孔中，且将不含化合物或荧光黄的75μL转运缓冲液添加至各跨孔中。所有试验均一式三份进行，且测试各化合物的顶部至底外侧及底外侧至顶部转运。在50rpm及37℃以及5％CO₂下，将在Lab-LineInstruments效价定轨振荡器(VWR,West Chester,PA)上孵育2小时。从培养箱中移出所有培养板，从各孔的顶部及底外侧部分取出50μL培养基，添加至150μL含1μM拉贝洛尔(labetalol)的2:1乙腈(ACN):H₂O v/v中。

使用Molecular Devices(Sunnyvale,CA)Gemini荧光计读取板以评估425/535nm激发/发射波长下的荧光黄浓度。当发现跨越经MDR1转染的LLC-PK1细胞单层或经BCRP转染的MDCKII细胞单层的顶部至底外侧流量小于2％且底外侧至顶部流量小于5％时，接受这些值。将板密封且通过LC MS/MS分析各孔的内含物。相较于给药溶液，根据化合物与内标物(拉贝洛尔)的峰值面积比来确定化合物浓度。

LC-MS/MS系统包含HTS-PAL自动进样器(Leap Technologies,Carrboro,NC)、HP1200 HPLC(Agilent,PaloAlto,CA)及MDS Sciex4000Q Trap系统(Applied Biosystems,Foster City,CA)。在室温下，结合使用流动相A(含有1％异丙醇及0.1％甲酸的水)及B(含0.1％甲酸的ACN)的梯度条件，使用C18柱(50×300mm,2.6μm粒度,Phenomenex,Torrance,CA)来实现分析物与内标物的色谱分离。单次注射的总操作时间(包括再平衡)为1.2分钟。使用离子喷雾正离子模式实现分析物的质谱检测。通过对各化合物(各试验物的质子化前体离子及所选产物离子，且对于拉贝洛尔(内标物)为m/z 329至m/z162)特有的转变的多反应监测(MRM)来测量分析物响应。

由以下方程式计算渗透系数(P_app)：

P_app＝[((C_d*V*(1x10⁶))/(t*0.12cm²*C₀)]

其中C_d、V、t及C₀分别为经检测浓度(μM)、给药侧的体积(mL)、孵育时间(s)及初始给药浓度(μM)。针对各重复实验进行P_app的计算，然后进行平均。

根据平均顶部至底外侧(A-B)Papp数据及底外侧至顶部(B-A)Papp数据计算流出比率：

流出比率＝P_app(B-A)/P_app(A-B)

本发明的代表性化合物的生物活性数据提供于下表5中。

表5

本说明书中所引用的所有出版物及专利申请均以全文引用的方式并入本文中。对于本领域技术人员而言显而易见的是，可在不脱离所附权利要求书的精神或范畴的情况下对其作出某些改变及修改。

Claims

1.一种式(I)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

A选自碳和氮，其中当A为碳时，R³可与A结合；

R¹选自由以下组成的组：-L¹-R⁵、-NR⁶R⁷、N-甲基-3-丙烯酰胺和丙-1-烯-2-基；

R²为含有一至三个选自N、O和S中的杂原子的9至10元双环杂芳基，其中该双环杂芳基可任选经一个或两个选自卤素和C₁-C₃烷基中的基团取代；

各R³独立地选自卤素、甲基、二氟甲基和三氟甲基；

R⁴为氢、Cl或甲氧基；

L¹选自由以下组成的组：键、CHR⁸、O、NR⁸和S；

L²选自NH和O；

R⁵为含有1至3个选自由N、O和S组成的组的杂原子的4至10元杂环，其中该杂环经R⁶取代，且其中该杂环可任选经1或2个独立地选自以下的基团取代：甲基、乙基、异丙基、叔丁基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基、乙炔基、环丙基和环丁基；

R⁶选自由以下组成的组：氰基、1-丙-2-烯-1-酮、1-(2-氟丙-2-烯-1-酮)、1-(2-甲基丙-2-烯-1-酮)、N-(N-甲基丙烯酰胺)、1-丁-2-炔-1-酮、乙烯基磺酰基和(双环[1.1.0]丁-1-基)甲酮；

R⁷和R⁸独立地为氢或甲基；且

n为0、1或2。

2.根据权利要求1的化合物或盐，其中R⁴为氢。

3.根据权利要求1或2中任一项的化合物或盐，其中各R³独立地选自由氟、氯和甲基组成的组，且n为1或2。

4.根据权利要求1至3中任一项的化合物或盐，其中R²选自由以下组成的组：

及

5.根据权利要求1至4中任一项的化合物或盐，其中R²选自由以下组成的组：

及

6.根据权利要求1至5中任一项的化合物或盐，其中R¹选自由以下组成的组：1-丙烯酰基哌啶-4-醇酯、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-3-基、1-丙烯酰基六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、1-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)六氢吡咯并[3,4-b]吡咯-5(1H)-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)硫基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-丙烯酰基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基哌啶-4-基)(甲基)氨基、1-丙烯酰基哌啶-3-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基哌啶-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-5-基、1-丙烯酰基哌啶-4-基、3-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.1.1]庚-6-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)硫基、4-丙烯酰基-5,5-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、4-丙烯酰基-3,3-二甲基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-1,4-二氮杂环庚烷-1-基、6-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.3]庚-2-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、4-丙烯酰基-3,5-二甲基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.0]庚-3-基、1-丙烯酰基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-4-基、1-丙烯酰基-2-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基-5-甲基吡咯烷-3-基、1-丙烯酰基-3-甲基哌啶-4-基、1-丙烯酰基氮杂环庚烷-3-基、1-丙烯酰基-2,2-二甲基哌啶-4-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-7-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-丙烯酰基八氢环戊二烯并[b]吡咯-4-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-5-基、1-丙烯酰基-6,6-二甲基氮杂环庚烷-4-基、N-丙烯酰胺、N-丁-2-炔酰胺、N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-N-乙烯基磺酰胺、N-甲基-3-丙烯酰胺、N-甲基-N-丙烯酰胺、丙-2-烯-1-酮、9-丙烯酰基-3-氧杂-9-氮杂双环[3.3.1]壬-7-基、4-丙烯酰基-3-环丙基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-乙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-2,6-二甲基哌啶-4-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-6-甲基哌啶-3-基、5-丙烯酰基-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛-2-基、2-(丁-2-炔酰基)-2,6-二氮杂双环[3.2.1]辛-6-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、4-(丁-2-炔酰基)-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、4-(丁-2-炔酰基)-3-(三氟甲基)哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)哌嗪-1-基、4-(双环[1.1.0]丁烷-1-羰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-(2-氟丙烯酰基)-3,3-二甲基哌嗪-1-基、1-(丁-2-炔酰基)-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、4-丙烯酰基-4-氮杂螺[2.5]辛-6-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.1]庚-6-基、8-(2-氟丙烯酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、1-(丁-2-炔酰基)氮杂环庚烷-4-基、7-丙烯酰基-7-氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-5-基、3-丙烯酰基-3-氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、8-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、8-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、3-丙烯酰基-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-氰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、3-(丁-2-炔酰基)-3,8-二氮杂双环[3.2.1]辛-8-基、4-丙烯酰基-3-异丙基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-6-基、1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基、4-丙烯酰基-4,7-二氮杂螺[2.5]辛-7-基、6-丙烯酰基-1,6-二氮杂螺[3.3]庚-1-基、4-丙烯酰基-3-(叔丁基)哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5,5-二甲基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-(二氟甲基)哌嗪-1-基、(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)甲基、1-(1-丙烯酰基氮杂环丁烷-3-基)乙基、1-丙烯酰基-5-环丙基吡咯烷-3-基、4-丙烯酰基-3-环丁基哌嗪-1-基、1-丙烯酰基-5-(甲氧基甲基)吡咯烷-3-基、2-丙烯酰基-2,6-二氮杂螺[3.4]辛-6-基、5-丙烯酰基-5,8-二氮杂螺[3.5]壬-8-基、5-(丁-2-炔酰基)-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚-2-基、4-丙烯酰基-3-乙炔基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-3,6-二氮杂双环[3.2.2]壬-3-基、4-甲基丙烯酰基-3,3-二甲基哌嗪-1-基、4-丙烯酰基-3-(甲氧基甲基)哌嗪-1-基、N-(1-吡咯烷-3-基)-N-甲基丙烯酰胺、4-甲基丙烯酰基哌嗪-1-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基、6-丙烯酰基-6-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基、2-丙烯酰基-2-氮杂双环[2.2.2]辛-6-基、2-丙烯酰基八氢环戊二烯并[c]吡咯-4-基、8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-6-基和8-丙烯酰基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-2-基。

7.一种式(III)的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中：

各R³独立地选自卤素和甲基；

R⁵为含有1至3个选自由N、O及S组成的组的杂原子的4至9元杂环，其中该杂环经R⁶取代，且其中该杂环可任选经1或2个独立地选自以下的基团取代：甲基、乙基、异丙基、叔丁基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基甲基、乙炔基、环丙基和环丁基；

R⁶选自由以下组成的组：1-丙-2-烯-1-酮、1-(2-氟丙-2-烯-1-酮)、1-(2-甲基丙-2-烯-1-酮)和1-丁-2-炔-1-酮；

n为1或2。

8.根据权利要求7的化合物，其中R²选自由以下组成的组：

及

9.根据权利要求8的化合物，其中R⁵为含有1或2个氮杂原子的6元单环杂环，其中该杂环经由环氮原子连接，其中该杂环经R⁶取代，且其中该杂环可任选经1或2个甲基取代。

10.根据权利要求8或9的化合物，其中R⁶为1-丙-2-烯-1-酮。

11.根据权利要求1的化合物，其中该化合物选自实施例1至460或其药学上可接受的盐。

12.一种化合物：

或其药学上可接受的盐。

13.一种化合物：

或其药学上可接受的盐。

14.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至13中任一项的化合物或其药学上可接受的盐以及至少一种药学上可接受的赋形剂。

15.根据权利要求1至13中任一项的化合物或其药学上可接受的盐在制造用于治疗癌症的药物中的用途。

16.根据权利要求1至13中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗癌症。

17.根据权利要求1至13中任一项的化合物或其药学上可接受的盐，其用作药物。

18.一种治疗有需要的受试者中癌症的方法，其包含向该受试者施用治疗有效量的根据权利要求1至13中任一项的化合物或其药学上可接受的盐。

19.根据权利要求18的方法，其进一步包含施用至少一种额外的抗癌治疗剂。

20.根据权利要求19的方法，其中该额外的抗癌治疗剂选自由以下组成的组：曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、玛格妥昔单抗、t-dm1、戈沙妥珠单抗、来那替尼、拉帕替尼、图卡替尼、帕布昔利布、瑞博西尼、阿贝西利、依维莫司、阿培利司、奥拉帕尼、他拉唑帕尼、环磷酰胺、甲氨喋呤、5-氟尿嘧啶、长春瑞滨、阿霉素、紫杉醇、多西他赛、博来霉素、长春碱、达卡巴嗪、氮芥、长春新碱、甲基苄肼、泼尼松龙、依托泊苷、顺铂、卡铂、表阿霉素、卡培他滨、醛叶酸及奥沙利铂、西米普利单抗、纳武利尤单抗、帕博利珠单抗、阿维单抗、德瓦鲁单抗、阿替利珠单抗、氨鲁米特、睾内酯、阿那曲唑、来曲唑、依西美坦、伏氯唑、福美司坦、法倔唑、ATD、6-OXO、氟维司群、舒尼替尼、索拉非尼、贝伐珠单抗及其药学上可接受的盐及其组合。