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CN117919379A - 一种负载神经肽p物质的功能性水凝胶及制备方法和应用 - Google Patents

一种负载神经肽p物质的功能性水凝胶及制备方法和应用 Download PDF

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CN117919379A
CN117919379A CN202311849785.5A CN202311849785A CN117919379A CN 117919379 A CN117919379 A CN 117919379A CN 202311849785 A CN202311849785 A CN 202311849785A CN 117919379 A CN117919379 A CN 117919379A
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China
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neuropeptide
substance
hydrogel
solution
rada16
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党旭红
郭玉凤
刘晓明
李超
田连琛
林海鹏
刘红艳
原雅艺
张晓泉
李建国
孟倩倩
王超
张睿凤
董娟聪
任越
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China Institute for Radiation Protection
Original Assignee
China Institute for Radiation Protection
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Abstract

本发明涉及一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶及制备方法和应用,所述水凝胶的原料包括:神经肽P物质溶液、RADA16储存液;以自组装肽RADA16作为支架材料,与神经肽P物质多肽形成负载神经肽P物质的功能性水凝胶;并通过透射电镜和扫描电镜显示负载神经肽P物质的功能性水凝胶具有交联的纳米纤维网络状结构,可观察到有物质覆盖于表面;通过傅里叶红外光谱和圆二色光谱仪分析表明负载神经肽P物质的功能性水凝胶具有β‑折叠构象的二级结构;通过流变仪分析表明负载神经肽P物质的功能性水凝胶仍然具有自组装成胶的能力,有较好的机械性能。同时,本发明验证了所述水凝胶能够促进放射性皮肤损伤创面愈合,为皮肤损伤创面修复提供新的救治策略与材料方法。

Description

一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶及制备方法和应用
技术领域
本发明属于水凝胶技术领域,涉及一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶及制备方法和应用。
背景技术
皮肤是人体最大的器官,是机体最基本的保护屏障,受损的皮肤可导致微生物入侵机体引发感染,伤口感染是导致发病率和死亡率增加的重要原因。因此,皮肤损伤后功能恢复一直是组织工程研究的重点。
目前,伤口敷料产品以传统敷料为主,一般由棉花、软麻布和亚麻布加工而成,如创可贴,此类伤口敷料只用于保持伤口干燥,对创面的修复无明显作用。尤其是放射性皮肤损伤,其伤口常常反复破溃、迁延不愈,是目前临床救治的难点。
发明内容
本发明的首要目的是提供一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶及制备方法和应用,采用自组装肽RADA16作为支架材料,与神经肽P物质多肽形成负载神经肽P物质的功能性水凝胶,为放射性皮肤损伤创面修复提供新的救治策略与材料方法。
为实现以上目的,在基础的技术方案中,本发明提供一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶,所述水凝胶的原料包括:神经肽P物质溶液、RADA16储存液。
进一步,所述神经肽P物质溶液通过将神经肽P物质多肽冻干粉溶解在PBS缓冲液中获得;
所述神经肽P物质多肽冻干粉的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
进一步,所述神经肽P物质溶液的浓度为2×10-7mmol/l。
进一步,所述RADA16储存液通过将RADA16冻干粉溶解在超纯水中获得;
所述RADA16冻干粉的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
进一步,所述RADA16储存液的浓度为10mg/ml。
进一步,所述神经肽P物质溶液与RADA16储存液的体积比为40:60~60:40。
进一步,所述神经肽P物质溶液与RADA16储存液的体积比为50:50。
本发明的第二个目的是提供一种所述负载神经肽P物质的功能性水凝胶的制备方法,所述方法包括如下步骤:
S1、制备RADA16储存液:取RADA16冻干粉,用一定量超纯水溶解RADA16冻干粉末,超声助溶制得RADA16储存液;
S2、制备神经肽P物质溶液:取神经肽P物质多肽冻干粉,加入设定量PBS缓冲液溶解神经肽P物质多肽冻干粉末,超声助溶制得神经肽P物质溶液;
S3、诱导成胶:将RADA16储存液与神经肽P物质溶液按指定比例混合后,超声震荡,获得水凝胶溶液,将所述水凝胶溶液静置1h以上,得到负载神经肽P物质的功能性水凝胶。
进一步,所述方法还包括如下步骤:
S4、鉴定所述水凝胶的性能:观察所述水凝胶的内部纳米纤维结构、水凝胶表面结构、分析水凝胶二级结构、分析水凝胶机械性能。
本发明的第三个目的是提供一种所述负载神经肽P物质的功能性水凝胶在制备放射性皮肤损伤救治药物中的应用。
本发明的第四个目的是提供一种放射性皮肤损伤救治药物,所述药物的活性成分包括所述负载神经肽P物质的功能性水凝胶。
本发明的有益效果在于,本发明提供的所述一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶及制备方法和应用,所述水凝胶的原料包括:神经肽P物质溶液、RADA16储存液;以自组装肽RADA16作为支架材料,与神经肽P物质多肽形成负载神经肽P物质的功能性水凝胶。本发明通过透射电镜和扫描电镜显示负载神经肽P物质的功能性水凝胶具有交联的纳米纤维网络状结构,且可观察到有物质覆盖于表面;通过傅里叶红外光谱和圆二色光谱仪分析表明形成的负载神经肽P物质的功能性水凝胶具有β-折叠构象的二级结构;通过流变仪分析表明负载神经肽P物质的功能性水凝胶仍然具有自组装成胶的能力,以及较好的机械性能。同时,本发明通过建立放射性皮肤损伤动物模型,验证了负载神经肽P物质的功能性水凝胶作为放射性皮肤损伤救治药物应用在放射性皮肤损伤救治中时,具有促进放射性皮肤损伤创面愈合的作用。本发明提供的负载神经肽P物质的功能性水凝胶及其制备方法为皮肤损伤创面修复提供新的救治策略与材料方法。
附图说明
图1是本发明实施方式所述的一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶的制备方法示意图;
图2是本发明实施方式所述的透射电镜(TEM)下负载神经肽P物质的功能性水凝胶的内部纳米纤维结构图;
图3是本发明实施方式所述的扫描电镜(SEM)下负载神经肽P物质的功能性水凝胶的表面结构图;
图4是本发明实施方式所述的负载神经肽P物质的功能性水凝胶的傅里叶红外光谱(FITR)二级结构分析图;
图5是本发明实施方式所述的负载神经肽P物质的功能性水凝胶的圆二色光谱仪二级结构分析图;
图6是本发明实施方式所述的负载神经肽P物质的功能性水凝胶机械性能分析图;
图7是本发明实施方式所述的负载神经肽P物质的功能性水凝胶细胞毒性鉴定图;
图8是本发明实施方式所述的负载神经肽P物质的功能性水凝胶干预创面愈合病理学观察图。
具体实施方式
以下将结合附图和实施例对本发明实施方式中的技术方案进行进一步清楚、完整地描述,显然,所描述的实施方式仅仅是本发明一部分实施方式,而不是全部的实施方式,基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下而获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
自组装多肽具有良好的生物相容性和生物降解性,通过合理调控多肽的分子结构及改变外界的环境,多肽分子可利用非共价键作用力自组装形成纳米纤维结构,进而形成水凝胶。由于其具有含水量高、稳定的机械性能、良好的生物相容性和可注射性等优良特性,因此在组织修复、药物缓释和创伤愈合方面是极具潜力的支架材料。
自组装肽材料的独特功能使其成为皮肤组织修复很有前途的生物材料。神经肽P物质(Substance P,SP)具有镇痛、调节免疫反应,加快细胞的更新,促进细胞增殖和迁移,激活细胞因子分泌的作用。
本实施方式中,采用自组装肽RADA16作为支架材料,与神经肽P物质多肽形成负载神经肽P物质的功能性水凝胶,透射电镜显示负载神经肽P物质的功能性水凝胶具有交联的纳米纤维内部结构;扫描电镜显示负载神经肽P物质的功能性水凝胶具有纤维网络状结构,且可观察到有物质覆盖于表面;傅里叶红外光谱和圆二色光谱仪分析表明形成的负载神经肽P物质的功能性水凝胶具有β-折叠构象的二级结构;流变仪分析表明负载神经肽P物质的功能性水凝胶仍然具有自组装成胶的能力,并且有较好的机械性能。同时,本实施方式通过建立放射性皮肤损伤动物模型,验证了将负载神经肽P物质的功能性水凝胶作为放射性皮肤损伤救治药物,应用在放射性皮肤损伤救治中时,具有促进放射性皮肤损伤创面愈合的作用。本实施方式提供的负载神经肽P物质的功能性水凝胶的研制为皮肤损伤创面修复提供新的救治策略与材料方法。
需要说明的是,若无特殊说明,本实施方式中所使用的原料或试剂均为本领域技术人员熟知的市售商品或制备方法制备得到。
本实施方式提供的一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶,所述水凝胶的原料包括:神经肽P物质溶液、RADA16储存液。
可选的,所述神经肽P物质溶液通过将神经肽P物质多肽冻干粉溶解在0.01mol/l的PBS缓冲液中获得,所述神经肽P物质溶液的浓度为2×10-7mmol/l。所述神经肽P物质多肽冻干粉的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,委托上海强耀生物科技有限公司合成得到。
具体的,所述SEQ ID NO:1为:RPKPQQFFGLM。
可选的,所述RADA16储存液通过将RADA16冻干粉溶解在超纯水中获得,所述RADA16储存液的浓度为10mg/ml。所述RADA16冻干粉的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示,委托上海强耀生物科技有限公司合成得到。
具体的,所述SEQ ID NO:2为:RADARADARADARADA。
可选的,所述水凝胶中,所述神经肽P物质溶液与RADA16储存液的体积比为40:60~60:40。
在一个具体的实施例中,所述水凝胶中,所述神经肽P物质溶液与RADA16储存液的体积比为50:50。
如图1所示,本实施方式还提供一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶的制备方法,所述方法包括如下步骤:
S1、制备RADA16储存液:取RADA16冻干粉,用一定量超纯水溶解RADA16冻干粉末,超声助溶10min,制得RADA16储存液;
具体的,所述RADA16储存液的浓度为10mg/ml。
S2、制备神经肽P物质溶液:取神经肽P物质多肽冻干粉,加入设定量PBS缓冲液溶解神经肽P物质多肽冻干粉末,超声助溶10min,制得神经肽P物质溶液;
具体的,所述神经肽P物质溶液的浓度为2×10-7mmol/l。
可选的,所述PBS缓冲液的浓度为0.01mol/l、pH值为7.2~7.4。
S3、诱导成胶:将RADA16储存液与神经肽P物质溶液按指定比例混合后,超声震荡10min,获得水凝胶溶液,将所述水凝胶溶液静置1h以上得到水凝胶,然后倒置后观察成胶效果;
可选的,所述水凝胶溶液中,所述神经肽P物质溶液与RADA16储存液的混合体积比为50:50,所述水凝胶溶液的浓度为5mg/ml。
可选的,所述水凝胶溶液的静置环境为37℃或室温。
S4、鉴定所述水凝胶的性能:观察水凝胶的内部纳米纤维结构、水凝胶表面结构、分析水凝胶二级结构、分析水凝胶机械性能。
具体的,利用透射电镜(TEM)观察水凝胶的内部纳米纤维结构特征;利用扫描电镜(SEM)观察水凝胶表面结构;利用傅里叶红外光谱(FITR)和圆二色光谱仪分析水凝胶二级结构;利用流变仪对水凝胶进行机械性能进行分析。
实施例1制备负载神经肽P物质的功能性水凝胶
S1、制备RADA16储存液:取RADA16冻干粉,用一定量体积超纯水溶解RADA16冻干粉末,超声助溶10min,制得浓度为10mg/ml的RADA16储存液;
S2、制备神经肽P物质溶液:取神经肽P物质多肽冻干粉,加入设定量体积的0.01mol/l PBS缓冲液溶解神经肽P物质多肽冻干粉末,超声助溶10min,制得浓度为1mmol/l的神经肽P物质溶液,依次梯度稀释得到浓度为2×10-7mmol/l的神经肽P物质溶液;
S3、诱导成胶:将RADA16储存液与浓度为2×10-7mmol/l的神经肽P物质溶液等体积混合后,超声震荡10min,获得浓度为5mg/ml的水凝胶溶液,将所述水凝胶溶液于37℃或室温静置1h得到水凝胶,然后倒置后观察成胶效果;可观察到对照组RADA16水凝胶、RADA16负载神经肽P物质的功能性水凝胶倒置后流动性很小,呈现果冻状。
实施例2检测所述负载神经肽P物质的功能性水凝胶的理化性质
2.1透射电镜(TEM)观察水凝胶的内部纳米纤维结构特征
取上述制备好的水凝胶样品,采用悬滴法,用吸管吸一滴样品(100ul)悬液滴在铜网(300目碳支持膜)上,滴液后静置数分钟。然后用滤纸从铜网边缘吸去多余的液体,滴加磷钨酸负染色液,染色1~2min用滤纸吸去负染色液,再用蒸馏水滴在铜网上洗1~2次,用滤纸吸去水,待干后用透射电镜观察样品,在200千伏电压下采集样品的图像。
透射电镜(TEM)负载神经肽P物质的功能性水凝胶的内部纳米纤维结构如图2所示,对照组RADA16水凝胶可见交联的纳米纤维结构;RADA16负载神经肽P物质的功能性水凝胶可见交联的纳米纤维结构,但较RADA16稀疏。
2.2扫描电镜(SEM)观察水凝胶表面结构
取上述制备好的水凝胶样品,吸取100ul放入-20℃预冷20min防止离心管骤冷炸裂,再放入液氮中迅速冰冻5min,将所得样品立即脆断,放入培养皿中,真空冷冻干燥24h,冷陷温度-45℃,待样品完全干燥后置于样品台上对其表面喷金,电镜下对其微观形貌进行观察。
扫描电镜(SEM)下负载神经肽P物质的功能性水凝胶的表面结构如图3所示,对照组RADA16水凝胶有纤维网络状结构的形成,纳米纤维孔径在200-800nm之间;RADA16负载神经肽P物质的功能性水凝胶有纤维网络状结构,且可观察到有物质覆盖于表面。
2.3水凝胶二级结构分析
2.3.1傅里叶红外光谱(FTIR)分析水凝胶二级结构
取上述制备好的水凝胶样品;吸取100ul样品放入真空冷冻干燥仪24h,冷陷温度-45℃,待样品完全干燥后置于样品台,波长4000-400cm-1检测样品。负载神经肽P物质的功能性水凝胶的傅里叶红外光谱(FTIR)二级结构如图4所示,FTIR光谱在1630cm-1和1557cm-1处有很强的吸收,并在3280cm-1处有N-H拉伸模式。1630cm-1处中等强度的酰胺I带(C-O羰基拉伸)与3280cm-1处的NH拉伸模式表明该肽为β-折叠构象的二级结构。
2.3.2圆二色光谱仪分析水凝胶二级结构
将5mg/ml的水凝胶样品用PBS缓冲液稀释到1mg/ml,取适量的水凝胶溶液加入到CD比色皿(光径长度1mm)中,用J-1500圆二色光谱仪行CD光谱测量分析(温度约25℃,平衡30s)。负载神经肽P物质的功能性水凝胶的圆二色光谱仪二级结构如图5所示,对照组RADA16水凝胶与RADA16负载神经肽P物质的功能性水凝胶两个样本CD特征峰位置相似,在191nm附近出现明显正峰,在200nm和223nm处存在明显的负峰。拟合结果显示,RADA16水凝胶二级结构主要以β-sheet为主,其相对含量为46.9%,RADA16负载神经肽P物质的功能性水凝胶中β-sheet含量为43.2%,是主要二级结构。
2.4流变仪分析水凝胶机械性能
将自组装肽RADA16的冻干粉溶于超纯水中,充分混合,制备浓度为10mg/ml的母液,将神经肽P物质冻干粉用PBS溶液溶解,制备1×10-3mol/l的溶液,并依次梯度稀释,得到2×10-7mol/L的神经肽P物质溶液,将RADA16母液和2×10-7mol/L的神经肽P物质溶液等体积混合,置于37℃环境中过夜。次日,将所得的RADA16负载神经肽P物质的功能性水凝胶样品,滴加于流变仪椎板上,在频率范围为10-0.1rad/s,恒定应力1Pa的限制条件下进行检测样品的储能模量(G')和损耗模量(G”),负载神经肽P物质的功能性水凝胶机械性能分析结果如图6所示,RADA16负载神经肽P物质的功能性水凝胶储能模量(G')均大于损耗模量(G”),且G'和G”随角频率增大不断增大,表明RADA16负载神经肽P物质的功能性水凝胶仍然具有自组装成胶的能力,并且有较好的机械性能。
基于此,本实施方式又提供了一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶在制备放射性皮肤损伤救治药物中的应用。
具体的,本实施方式提供了一种放射性皮肤损伤救治药物,所述药物的活性成分包括所述负载神经肽P物质的功能性水凝胶。
实施例3负载神经肽P物质的功能性水凝胶在制备放射性皮肤损伤救治药物中的应用
3.1水凝胶细胞毒性分析
将细胞于细胞培养瓶中消化后,制备终浓度为5×105个/ml的细胞悬液,加入24孔板,每孔300ul,放入细胞培养箱过夜;次日,将孔内培养基吸出后,分别于对应孔内加入30ul完全培养基(空白对照)、RADA16水凝胶、RADA16负载神经肽P物质的功能性水凝胶,缓慢加入300ul完全培养基孵育过夜。分别于共同培养1天、3天后取出24孔板,PBS清洗3次,加入200ul 1.2mmol/l的钙黄绿素-AM(染活细胞质)和200ul 1ug/ml PI染液(与死细胞核结合),避光孵育25min,PBS清洗3次,加入DAPI染液(定位细胞核),避光孵育10min后,PBS清洗3次,于荧光显微镜下观察。
负载神经肽P物质的功能性水凝胶细胞毒性鉴定结果如图7所示,RADA16负载神经肽P物质的功能性水凝胶组中细胞几乎全部存活(绿色为活细胞,红色为死细胞),与空白对照组相比均无明显的差异,RADA16负载神经肽P物质的功能性水凝胶未呈现出明显的生物毒性,且细胞趋于水凝胶生长。
3.2建立电子线致大鼠放射性皮肤损伤模型
实验前1日,对大鼠进行称重、标记、编号。实验时,大鼠用2.5%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(每100g注射2.5%戊巴比妥钠0.2ml)。麻醉显效后,对大鼠臀背部皮肤进行剃毛,固定于本实验室自行设计照射笼内,标记照射野,非照射部位铝板屏蔽,以Elekta Synergy医用电子直线加速器产生的能量4Mev吸收剂量率300cGy/min高能电子线,皮源距离100cm,照射面积直径32mm圆形,单次吸收剂量45Gy,照射野直径32mm圆形,照射大鼠臀背部皮肤,构建电子线致放射性皮肤损伤动物模型。
照射后大鼠保暖处理,清醒后迁入饲养笼内。所有大鼠饲养管理于中国辐射防护研究院啮齿动物实验室,自由活动、摄食、饮水,室内恒定温度23℃,相对湿度60%,24h通风系统通风,定期消毒,更换垫料,无其它不良因素影响,昼夜节律为12h人工光照,12h黑暗环境。实验操作严格按照中国辐射防护研究院GLP中心实验动物操作规范进行。
3.3负载神经肽P物质的功能性水凝胶在制备放射性皮肤损伤救治药物中的应用
3.3.1动物处理
为了连续观察所述负载神经肽P物质的功能性水凝胶对电子线致放射性皮肤损伤干预后的影响,实验安排了照射后2D(2天)、1W(1周)、2W、3W、4W、6W、8W共计7组时间点,并选择了4W及8W皮肤变化比较典型的时间点观察负载神经肽P物质的功能性水凝胶对电子线致放射性皮肤损伤干预后的影响。采用随机对照实验分组设计,分为2组:
照射组,大鼠数量n=49,45Gy照射后不予特殊处理;
负载SP水凝胶干预组(即负载神经肽P物质的功能性水凝胶干预组),大鼠数量n=49,45Gy照射后,照射野真皮涂抹所述负载神经肽P物质的功能性水凝胶。
3.3.2皮肤组织的取样
于照射后2D、1W、2W、3W、4W、6W、8W,负载神经肽P物质的功能性水凝胶干预组随机各选取7只大鼠进行组织取样。
用2.5%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(每100g注射2.5%戊巴比妥钠0.2ml)。麻醉显效后,将大鼠四肢固定在解剖盘上,取照射野及周围全层皮肤组织,0.9%氯化钠注射液将残留血迹及脱落毛发冲净,平铺于滤纸表面吸干水分,置于10%中性福尔马林溶液中固定,用于制备石蜡切片。
3.3.3创面愈合病理学观察
各组于创面、创周交界区、创周各切取约5mm×5mm全层皮肤放入脱水盒,于全自动组织脱水机中充分脱水。然后,纵向放置皮肤组织石蜡包埋、制片。切片烘干后经过脱蜡水化、苏木素-伊红染色、脱水、透明、封片后,于光学显微镜下进行观察负载神经肽P物质的功能性水凝胶对电子线致放射性皮肤损伤组织病理学改变。
图8为负载神经肽P物质的功能性水凝胶干预创面愈合病理学观察结果,由图8可看出,(1)愈合早期①照射组:表皮细胞完全破坏,大量炎性细胞浸润表皮,一同形成痂皮,痂皮下新生上皮生长,部分细胞肿涨,少量连接成片形成水泡,新生表皮下可见新生毛细血管,分布稀疏,真皮肉芽组织间断分布,周围沉积的胶原蛋白逐渐增多。②负载SP水凝胶干预组:痂皮交界区,新生表皮棘层、颗粒层增厚,棘层细胞形态规则,排列整齐,水肿细胞少量,表皮下毛细血管丰富,溃疡底部肉芽组织生长增加,胶原蛋白分泌、沉积增加。(2)愈合晚期①照射组:新生上皮覆盖,角质层及角化栓形成,部分形成表皮脚,创面中心新生表皮部分细胞肿胀,部分融合成水泡,胶原蛋白分泌沉积增加,部分转归的成纤维细胞延胶原纤维平行于表面分布,区域内未见皮肤附属器结构重建。②负载SP水凝胶干预组:表皮结构与正常大鼠皮肤已无明显差别,部分皮肤形成褶皱深入真皮,并形成角质层及角化栓,新生表皮下胶原纤维组织改建,结构疏松,波浪线样平行于表面分布,成纤维细胞及血管少见,部分真皮内可见附属器再生。
上述实施例只是对本发明的举例说明,本发明也可以以其它的特定方式或其它的特定形式实施,而不偏离本发明的要旨或本质特征。因此,描述的实施方式从任何方面来看均应视为说明性而非限定性的。本发明的范围应由附加的权利要求说明,任何与权利要求的意图和范围等效的变化也应包含在本发明的范围内。

Claims (11)

1.一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶,其特征在于,所述水凝胶的原料包括:神经肽P物质溶液、RADA16储存液。
2.根据权利要求1所述的一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶,其特征在于,所述神经肽P物质溶液通过将神经肽P物质多肽冻干粉溶解在PBS缓冲液中获得;
所述神经肽P物质多肽冻干粉的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
3.根据权利要求1所述的一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶,其特征在于,所述神经肽P物质溶液的浓度为2×10-7mmol/l。
4.根据权利要求1所述的一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶,其特征在于,所述RADA16储存液通过将RADA16冻干粉溶解在超纯水中获得;
所述RADA16冻干粉的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
5.根据权利要求1所述的一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶,其特征在于,所述RADA16储存液的浓度为10mg/ml。
6.根据权利要求1所述的一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶,其特征在于,所述神经肽P物质溶液与RADA16储存液的体积比为40:60~60:40。
7.根据权利要求1所述的一种负载神经肽P物质的功能性水凝胶,其特征在于,所述神经肽P物质溶液与RADA16储存液的体积比为50:50。
8.一种根据权利要求1-7任一项所述负载神经肽P物质的功能性水凝胶的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
S1、制备RADA16储存液:取RADA16冻干粉,用一定量超纯水溶解RADA16冻干粉末,超声助溶制得RADA16储存液;
S2、制备神经肽P物质溶液:取神经肽P物质多肽冻干粉,加入设定量PBS缓冲液溶解神经肽P物质多肽冻干粉末,超声助溶制得神经肽P物质溶液;
S3、诱导成胶:将RADA16储存液与神经肽P物质溶液按指定比例混合后,超声震荡,获得水凝胶溶液,将所述水凝胶溶液静置1h以上,得到负载神经肽P物质的功能性水凝胶。
9.根据权利要求8所述的负载神经肽P物质的功能性水凝胶的制备方法,其特征在于,所述方法还包括如下步骤:
S4、鉴定所述水凝胶的性能:观察所述水凝胶的内部纳米纤维结构、水凝胶表面结构、分析水凝胶二级结构、分析水凝胶机械性能。
10.一种根据权利要求1-7任一项所述负载神经肽P物质的功能性水凝胶在制备放射性皮肤损伤救治药物中的应用。
11.一种放射性皮肤损伤救治药物,其特征在于,所述药物的活性成分包括权利要求1-7任一项所述负载神经肽P物质的功能性水凝胶。
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