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CN117337295A - 特异于trem2的双环肽配体 - Google Patents

特异于trem2的双环肽配体 Download PDF

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CN117337295A
CN117337295A CN202280031106.0A CN202280031106A CN117337295A CN 117337295 A CN117337295 A CN 117337295A CN 202280031106 A CN202280031106 A CN 202280031106A CN 117337295 A CN117337295 A CN 117337295A
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CN202280031106.0A
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P·布伦南
A·布朗
L·陈
J·戴维斯
Y·德米德丘克
D·迪恩佐
E·戈万斯
R·麦克罗里
E·迈阿德
E·摩菲
M·里格比
M·斯金纳
T·史密斯
S·斯坦威
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BicycleTx Ltd
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BicycleTx Ltd
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Abstract

本发明涉及共价结合分子支架的多肽，使得两个或更多个肽环在与支架的连接点之间对向存在。具体地，本发明描述了与TREM2结合的肽。本发明还涉及包含至少两个所述双环肽配体的多聚结合复合物。本发明还包括包含所述肽配体和多聚结合复合物的药物组合物以及所述肽配体、多聚结合复合物和药物组合物在预防、抑制或治疗由TREM2介导的疾病或病症中的用途。

Description

特异于TREM2的双环肽配体
技术领域
本发明涉及共价结合分子支架的多肽，使得两个或更多个肽环在与支架的连接点之间对向存在。具体地，本发明描述了与TREM2结合的肽。本发明还涉及包含至少两个所述双环肽配体的多聚结合复合物。本发明还包括包含所述肽配体和多聚结合复合物的药物组合物以及所述肽配体、多聚结合复合物和药物组合物在预防、抑制或治疗由TREM2介导的疾病或病症中的用途。
背景技术
环肽能够以高亲和力和特异性结合蛋白质靶标，因此是对于治疗剂开发有吸引力的分子类型。事实上，临床上已经成功使用了几种环肽，例如抗菌肽万古霉素、免疫抑制剂药物环孢菌素或抗癌药奥曲肽(Driggers等人(2008)，Nat Rev Drug Discov 7(7)，608-24)。良好的结合特性是由肽和靶标之间形成的相对较大的相互作用表面以及环状结构的构象柔韧性降低导致的。通常，大环结合数百平方埃的表面，例如环肽CXCR4拮抗剂CVX15(Wu等人(2007)，Science 330，1066-71)，一种具有与整合素αVb3结合的Arg-Gly-Asp基序的环肽(Xiong等人(2002)，Science 296(5565),151-5)，或与尿激酶型纤溶酶原活化剂结合的环肽抑制剂upain-1(Zhao等人(2007)，J.Struct.Biol.160(1),1-10)。
由于其环状构型，大环肽比线性肽柔性低，导致在结合靶标时熵损失较少，得到了较高的结合亲和性。降低的柔性还导致锁定靶标特异性构象，与线性肽相比增加结合特异性。这种作用已经通过一种有效的、选择性的基质金属蛋白酶8(MMP-8)抑制剂来例证，当其环被打开时该抑制剂丧失对其他MMP的选择性(Cherney等人(1998)，JMed Chem 41(11)，1749-51)。通过大环化获得的有利的结合性质在具有多于一个肽环的多环肽(例如在万古霉素、乳链菌肽和放线菌素中)中更为显著。
不同的研究团队先前已经将具有半胱氨酸残基的多肽连接到合成分子结构上(Kemp和McNamara(1985),J.Org.Chem；Timmerman等人(2005)，ChemBioChem)。Meloen及其同事已经使用三(溴甲基)苯和相关分子将多个肽环快速和定量地环化到合成支架上，用于蛋白质表面的结构模拟(Timmerman等人(2005)，ChemBioChem)。产生候选药物化合物的方法，其中通过将含半胱氨酸的多肽连接至分子支架(例如，1,1’,1”-(1,3,5-三嗪烷-1,3,5-三基)三丙-2-烯-1-酮(TATA))来产生所述化合物(Heinis等人(2014)，AngewandteChemie，国际版，53(6)1602-1606)。
已经开发了基于噬菌体展示的组合方法以产生并筛选出针对目标靶标的双环肽的大型文库(Heinis等人(2009)，Nat.Chem.Biol.5(7)，502-7和WO 2009/098450)。简而言之，在噬菌体上展示含有三个半胱氨酸残基和两个区域的六个随机氨基酸的线性肽(Cys-(Xaa)6-Cys-(Xaa)6-Cys)的组合文库，并通过将半胱氨酸侧链共价连接至一个小分子支架而环化。
发明内容
根据本发明的第一方面，提供了特异于TREM2的肽配体，其包含多肽和分子支架，所述多肽包含被至少两个环序列隔开的至少三个反应性基团，所述分子支架与所述多肽的反应性基团形成共价键，使得在分子支架上形成至少两个多肽环。
根据本发明的另一方面，提供了多聚结合复合物，其包含至少两个双环肽配体，其中所述肽配体可以相同或不同，每个肽配体包含特异于TREM2的肽配体，其包含多肽和分子支架，所述多肽包含被至少两个环序列隔开的至少三个反应性基团，所述分子支架与所述多肽的反应性基团形成共价键，使得在分子支架上形成至少两个多肽环。
根据本发明的又一个方面，提供了药物组合物，其包含与一种或多种药学上可接受的赋形剂组合的本文定义的肽配体或多聚结合复合物。
根据本发明的另一方面，提供了如本文所定义的肽配体、多聚结合复合物或药物组合物，其用于预防、抑制或治疗由TREM2介导的疾病或病症。
附图说明
图1：使用本发明选定的双环肽的生物层干涉测量法(BLI)直接结合测定结果。
图2：使用本发明选定的双环肽的pSYK均质时间分辨荧光(HTRF)测定结果。
发明详述
应当理解，本发明既涉及“单体”双环肽(即含有单个(单体)双环肽配体的肽)也涉及“多聚体”双环肽，即含有通过一个或多个接头缀合的多于一个双环肽(例如，2、3或4)的肽。
单体双环肽配体
根据本发明的第一方面，提供了一种特异于TREM2的肽配体，其包含多肽和分子支架，所述多肽含有被至少两个环序列隔开的至少三个反应性基团，所述分子支架与所述多肽的反应性基团形成共价键，使得在分子支架上形成至少两个多肽环。
在一个实施方案中，所述反应性基团包括半胱氨酸残基。
应当理解，术语“特异于TREM2”是指肽配体结合TREM2的能力。
在进一步的实施方案中，所述环序列包含3或6个氨基酸。
在一个实施方案中，所述环序列包含被两个环序列隔开的三个半胱氨酸残基，第一个环序列由3个氨基酸组成，第二个环序列由6个氨基酸组成。
在另一个实施方案中，所述环序列包含被两个环序列隔开的三个半胱氨酸残基，其中第一个环序列由3个氨基酸组成，第二个环序列由6个氨基酸组成，并且所述环序列包含具有下式的氨基酸序列：
Ci-X1-X2-X3-Cii-X4-X5-X6-X7-X8-X9-Ciii(SEQ ID NO:43)；
其中
X1代表选自A、dA、S、T、D和E的氨基酸或非天然氨基酸K(戊炔酸)(K(PYA))；
X2代表选自A、dA、E、Y、S和N的氨基酸或非天然氨基酸K(戊炔酸)(K(PYA))；
X3代表选自A、Y和Q的氨基酸或选自以下的非天然氨基酸：2,6-二甲基-酪氨酸(2,6-DiMeTyr)、3,4-二羟基-苯丙氨酸(DOPA)和3-氟-色氨酸(3FTyr)；
X4代表选自I和F的氨基酸或选自4-甲基-苯丙氨酸(4MePhe)、高苯丙氨酸(HPhe)、1-萘基丙氨酸(1Nal)、2-氟-苯丙氨酸(2FPhe)、3-氟-苯丙氨酸(3FPhe)、4-氟-苯丙氨酸(4FPhe)和4-吡啶基丙氨酸(4Pal)的非天然氨基酸；
X5代表选自R和W的氨基酸或选自1-萘基丙氨酸(1Nal)、2-萘基丙氨酸(2Nal)、6-氯-色氨酸(6ClTrp)、5-氟-色氨酸(5FTrp)、6-氟-色氨酸(6FTrp)、6-甲基色氨酸(6MeTrp)、氮杂色氨酸(AzaTrp)、甲基色氨酸(Trp(Me))、2-甲基苯丙氨酸(2MePhe)、3-甲基苯丙氨酸(3MePhe)和三氯甲基苯丙氨酸(4CF3Phe)的非天然氨基酸；
X6代表选自P和A的氨基酸或选自N-甲基丙氨酸(NMeAla)、氨基异丁酸(Aib)、哌可酸(Pip)、氮杂环丁烷(Aze)、顺式-羟基脯氨酸(Cys-HyP)和4,4-二氟脯氨酸(44DFP)的非天然氨基酸；
X7代表选自L、F和Y的氨基酸或选自高苯丙氨酸(HPhe)、2-甲基苯丙氨酸(2MePhe)、3-甲基苯丙氨酸(3MePhe)、4-甲基-苯丙氨酸(4MePhe)、1-萘基丙氨酸(1Nal)、2-萘基丙氨酸(2Nal)、4-氟-苯丙氨酸(4FPhe)、叔丁基丙氨酸(tBuAla)、4,4-联苯丙氨酸(44BPA)、4-吡啶丙氨酸(4Pal)和K(戊炔酸)(K(PYA))的非天然氨基酸；
X8代表选自W、Y、F、Q、A、dA、D和E的氨基酸或选自4-氟-苯丙氨酸(4FPhe)、1-萘基丙氨酸(1Nal)、2-萘基丙氨酸(2Nal)、3-叔丁基酪氨酸(3tBuTyr)和K(戊炔酸)(K(PYA))的非天然氨基酸；和
X9代表选自H、S、P、N、G、Y、Q、W、L、V、A、dA、D、E和F的氨基酸或选自高精氨酸(HArg)和K(戊炔酸)(K(PYA))的非天然氨基酸；
其中Ci、Cii和Ciii分别代表第一、第二和第三半胱氨酸残基或其药学上可接受的盐。
在可提及的另一实施方案中，所述环序列包含被两个环序列隔开的三个半胱氨酸残基，第一个环序列由3个氨基酸组成，第二个环序列由6个氨基酸组成，并且所述环序列包含具有下式的氨基酸序列:
Ci-X1-X2-X3-Cii-X4-X5-X6-X7-X8-X9-Ciii(SEQ ID NO:43)；
其中
X1代表选自A、S和T的氨基酸；
X2代表选自A、E、Y、S和N的氨基酸；
X3代表选自A、Y和Q的氨基酸或非天然氨基酸2,6-二甲基-酪氨酸(2,6-DiMeTyr)；
X4代表选自I和F的氨基酸或选自4-甲基-苯丙氨酸(4MePhe)和高苯丙氨酸(HPhe)的非天然氨基酸；
X5代表选自R和W的氨基酸或选自1-萘基丙氨酸(1Nal)、2-萘基丙氨酸(2Nal)和6-氯-色氨酸(6ClTrp)的非天然氨基酸；
X6代表选自P和A的氨基酸或选自N-甲基丙氨酸(NMeAla)和氨基异丁酸(Aib)的非天然氨基酸；
X7代表选自L和F的氨基酸或选自高苯丙氨酸(HPhe)、4-甲基-苯丙氨酸(4MePhe)和1-萘基丙氨酸(1Nal)的非天然氨基酸；
X8代表选自W、Y、F、Q和A的氨基酸；和
X9代表选自H、S、P、N、G、Y、Q、W、L、V和A的氨基酸；
其中Ci、Cii和Ciii分别代表第一、第二和第三半胱氨酸残基或其药学上可接受的盐。
在进一步的实施方案中，SEQ ID NO：43的肽配体包含选自以下的氨基酸序列：
CiSEYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:1；本文称为BCY18219)；
CiSEYCiiFWPFYSCiii(SEQ ID NO:2)；
CiSEYCiiFWPFYPCiii(SEQ ID NO:3)；
CiSEYCiiFWPFWNCiii(SEQ ID NO:4)；
CiSEYCiiFWPLWGCiii(SEQ ID NO:5)；
CiSAQCiiIRPFYHCiii(SEQ ID NO:6)；
CiSEYCiiFWPLFGCiii(SEQ ID NO:7)；
CiSYYCiiFWPFQSCiii(SEQ ID NO:8)；
CiSYYCiiFWPFQYCiii(SEQ ID NO:9)；
CiTSYCiiFWPFYQCiii(SEQ ID NO:10)；
CiTNYCiiFWPFWSCiii(SEQ ID NO:11)；
CiSNYCiiFWPFWQCiii(SEQ ID NO:12)；
CiSEYCiiFWPFQWCiii(SEQ ID NO:13)；
CiSNYCiiFWPFFQCiii(SEQ ID NO:14)；
CiSEYCiiFWPFFLCiii(SEQ ID NO:15)；
CiSEYCiiFWPFYLCiii(SEQ ID NO:16)；
CiSEYCiiFWPFWQCiii(SEQ ID NO:17)；
CiTNYCiiFWPFQYCiii(SEQ ID NO:18)；
CiTNYCiiFWPFQSCiii(SEQ ID NO:19)；
CiTNYCiiFWPFYSCiii(SEQ ID NO:20)；
CiTNYCiiFWPFYLCiii(SEQ ID NO:21)；
CiTNYCiiFWPFAVCiii(SEQ ID NO:22)；
CiSEYCiiFWPFQYCiii(SEQ ID NO:23)；
CiAEYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:24)；
CiSAYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:25)；
CiSEYCiiFWAFYHCiii(SEQ ID NO:26)；
CiSEYCiiFWPFAHCiii(SEQ ID NO:27)；
CiSEYCiiFWPFYACiii(SEQ ID NO:28)；
CiSE[2,6-DiMeTyr]CiiFWPFYACiii(SEQ ID NO:29)；
CiSEYCii[4MePhe]WPFYACiii(SEQ ID NO:30)；
CiSEYCii[HPhe]WPFYACiii(SEQ ID NO:31)；
CiSEYCiiF[1Nal]PFYACiii(SEQ ID NO:32)；
CiSEYCiiF[2Nal]PFYACiii(SEQ ID NO:33)；
CiSEYCiiFW[NMeAla]FYACiii(SEQ ID NO:34)；
CiSEYCiiFWP[HPhe]YACiii(SEQ ID NO:35)；
CiSEYCiiFWP[4MePhe]YACiii(SEQ ID NO:36)；
CiSEYCiiF[1Nal]PFYHCiii(SEQ ID NO:37)；
CiSEYCiiFWP[HPhe]YHCiii(SEQ ID NO:38)；
CiSEYCiiF[1Nal]P[HPhe]YHCiii(SEQ ID NO:39)；
CiSEYCiiFWP[1Nal]YHCiii(SEQ ID NO:40)；
CiSEYCiiFW[Aib]FYHCiii(SEQ ID NO:41)；
CiSEYCiiF[6ClTrp]PFYHCiii(SEQ ID NO:42)；
CiSEYCiiFWPFFNCiii(SEQ ID NO:45)；
CiSEYCiiFWP[1Nal]YACiii(SEQ ID NO:46)；
CiSE[DOPA]CiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:47)；
CiSE[3FTyr]CiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:48)；
CiSEYCii[1Nal]WPFYHCiii(SEQ ID NO:49)；
CiSEYCii[4FPhe]WPFYHCiii(SEQ ID NO:50)；
CiSEYCii[2FPhe]WPFYHCiii(SEQ ID NO:51)；
CiSEYCii[3FPhe]WPFYHCiii(SEQ ID NO:52)；
CiSEYCiiF[Trp(Me)]PFYHCiii(SEQ ID NO:53)；
CiSEYCiiF[6MeTrp]PFYHCiii(SEQ ID NO:54)；
CiSEYCiiF[5FTrp]PFYHCiii(SEQ ID NO:55)；
CiSEYCiiF[6FTrp]PFYHCiii(SEQ ID NO:56)；
CiSEYCiiF[3MePhe]PFYHCiii(SEQ ID NO:57)；
CiSEYCiiF[2Nal]PFYHCiii(SEQ ID NO:58)；
CiSEYCiiF[AzaTrp]PFYHCiii(SEQ ID NO:59)；
CiSEYCiiF[CF3Phe]PFYHCiii(SEQ ID NO:60)；
CiSEYCiiF[2MePhe]PFYHCiii(SEQ ID NO:61)；
CiSEYCiiFW[Pip]FYHCiii(SEQ ID NO:62)；
CiSEYCiiFW[44DFP]FYHCiii(SEQ ID NO:63)；
CiSEYCiiFW[Aze]FYHCiii(SEQ ID NO:64)；
CiSEYCiiFW[Cis-HyP]FYHCiii(SEQ ID NO:65)；
CiSEYCiiFWP[2MePhe]YHCiii(SEQ ID NO:66)；
CiSEYCiiFWP[4FPhe]YHCiii(SEQ ID NO:67)；
CiSEYCiiFWP[tBuAla]YHCiii(SEQ ID NO:68)；
CiSEYCiiFWPLYHCiii(SEQ ID NO:69)；
CiSEYCiiFWP[3MePhe]YHCiii(SEQ ID NO:70)；
CiSEYCiiFWP[44BPA]YHCiii(SEQ ID NO:71)；
CiSEYCiiFWP[2Nal]YHCiii(SEQ ID NO:72)；
CiSEYCiiFWPFWHCiii(SEQ ID NO:73)；
CiSEYCiiFWPF[4FPhe]HCiii(SEQ ID NO:74)；
CiSEYCiiFWPF[2Nal]HCiii(SEQ ID NO:75)；
CiSEYCiiFWPF[3tBuTyr]HCiii(SEQ ID NO:76)；
CiSEYCiiFWPF[1Nal]HCiii(SEQ ID NO:77)；
CiSEYCiiFWPFYNCiii(SEQ ID NO:78)；
Ci[dA]EYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:79)；
CiS[dA]YCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:80)；
CiSEYCiiFWPF[dA]HCiii(SEQ ID NO:81)；
CiSEYCiiFWPFY[dA]Ciii(SEQ ID NO:82)；
Ci[K(PYA)]EYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:83)；
CiS[K(PYA)]YCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:84)；
CiSEYCiiFWP[K(PYA)]YHCiii(SEQ ID NO:85)；
CiSEYCiiFWPF[K(PYA)]HCiii(SEQ ID NO:86)；
CiSEYCiiFWPFY[K(PYA)]Ciii(SEQ ID NO:87)；
CiSEYCiiFWP[HPhe]QYCiii(SEQ ID NO:88)；
CiSEYCiiFWP[1Nal]QYCiii(SEQ ID NO:89)；
CiDEYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:90)；
CiEEYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:91)；
CiSEYCiiYWPFYHCiii(SEQ ID NO:92)；
CiSEYCii[4Pal]WPFYHCiii(SEQ ID NO:93)；
CiSEYCiiFWPYYHCiii(SEQ ID NO:94)；
CiSEYCiiFWP[4Pal]YHCiii(SEQ ID NO:95)；
CiSEYCiiFWPFDHCiii(SEQ ID NO:96)；
CiSEYCiiFWPFEHCiii(SEQ ID NO:97)；
CiSEYCiiFWPFYQCiii(SEQ ID NO:98)；
CiSEYCiiFWPFYDCiii(SEQ ID NO:99)；
CiSEYCiiFWPFYECiii(SEQ ID NO:100)；
CiSEYCiiFWPFY[HArg]Ciii(SEQ ID NO:101)；和
CiSEYCiiFWPFYFCiii(SEQ ID NO:102)；
其中Ci、Cii和Ciii分别代表第一、第二和第三半胱氨酸残基或其药学上可接受的盐。
在可提及的另一个实施方案中，SEQ ID NO：43的肽配体包含选自以下的氨基酸序列：
CiSEYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:1；本文称为BCY18219)；
CiSEYCiiFWPFYSCiii(SEQ ID NO:2)；
CiSEYCiiFWPFYPCiii(SEQ ID NO:3)；
CiSEYCiiFWPFWNCiii(SEQ ID NO:4)；
CiSEYCiiFWPLWGCiii(SEQ ID NO:5)；
CiSAQCiiIRPFYHCiii(SEQ ID NO:6)；
CiSEYCiiFWPLFGCiii(SEQ ID NO:7)；
CiSYYCiiFWPFQSCiii(SEQ ID NO:8)；
CiSYYCiiFWPFQYCiii(SEQ ID NO:9)；
CiTSYCiiFWPFYQCiii(SEQ ID NO:10)；
CiTNYCiiFWPFWSCiii(SEQ ID NO:11)；
CiSNYCiiFWPFWQCiii(SEQ ID NO:12)；
CiSEYCiiFWPFQWCiii(SEQ ID NO:13)；
CiSNYCiiFWPFFQCiii(SEQ ID NO:14)；
CiSEYCiiFWPFFLCiii(SEQ ID NO:15)；
CiSEYCiiFWPFYLCiii(SEQ ID NO:16)；
CiSEYCiiFWPFWQCiii(SEQ ID NO:17)；
CiTNYCiiFWPFQYCiii(SEQ ID NO:18)；
CiTNYCiiFWPFQSCiii(SEQ ID NO:19)；
CiTNYCiiFWPFYSCiii(SEQ ID NO:20)；
CiTNYCiiFWPFYLCiii(SEQ ID NO:21)；
CiTNYCiiFWPFAVCiii(SEQ ID NO:22)；
CiSEYCiiFWPFQYCiii(SEQ ID NO:23)；
CiAEYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:24)；
CiSAYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:25)；
CiSEYCiiFWAFYHCiii(SEQ ID NO:26)；
CiSEYCiiFWPFAHCiii(SEQ ID NO:27)；
CiSEYCiiFWPFYACiii(SEQ ID NO:28)；
CiSE[2,6-DiMeTyr]CiiFWPFYACiii(SEQ ID NO:29)；
CiSEYCii[4MePhe]WPFYACiii(SEQ ID NO:30)；
CiSEYCii[HPhe]WPFYACiii(SEQ ID NO:31)；
CiSEYCiiF[1Nal]PFYACiii(SEQ ID NO:32)；
CiSEYCiiF[2Nal]PFYACiii(SEQ ID NO:33)；
CiSEYCiiFW[NMeAla]FYACiii(SEQ ID NO:34)；
CiSEYCiiFWP[HPhe]YACiii(SEQ ID NO:35)；
CiSEYCiiFWP[4MePhe]YACiii(SEQ ID NO:36)；
CiSEYCiiF[1Nal]PFYHCiii(SEQ ID NO:37)；
CiSEYCiiFWP[HPhe]YHCiii(SEQ ID NO:38)；
CiSEYCiiF[1Nal]P[HPhe]YHCiii(SEQ ID NO:39)；
CiSEYCiiFWP[1Nal]YHCiii(SEQ ID NO:40)；
CiSEYCiiFW[Aib]FYHCiii(SEQ ID NO:41)；
CiSEYCiiF[6ClTrp]PFYHCiii(SEQ ID NO:42)；和
CiSEYCiiFWPFFNCiii(SEQ ID NO:45)；
其中Ci、Cii和Ciii分别代表第一、第二和第三半胱氨酸残基或其药学上可接受的盐。
在另一个实施方案中，所述环序列包含被两个环序列隔开的三个半胱氨酸残基，第一个环序列由3个氨基酸组成，第二个环序列由6个氨基酸组成，并且所述环序列包含具有下式的氨基酸序列：
Ci-S-E-Y-Cii-F-W-P-X7-X8-X9-Ciii(SEQ ID NO:44)；
其中X1、X2和X3代表任何氨基酸残基，Ci、Cii和Ciii分别代表第一、第二和第三半胱氨酸残基或其药学上可接受的盐。
在进一步的实施方案中，X7代表L或F。
在进一步的实施方案中，X8代表F、W或Y。
在进一步的实施方案中，X9代表G、N、P、S或H。
在进一步的实施方案中，所述环序列包含被两个环序列隔开的三个半胱氨酸残基，第一个环序列由3个氨基酸组成，第二个环序列由6个氨基酸组成，并且所述环序列包含选自以下的氨基酸序列：
CiSEYCiiFWPFYHCiii.(SEQ ID NO：1；本文称为BCY18219)；
CiSEYCiiFWPFYSCiii(SEQ ID NO：2)；
CiSEYCiiFWPFYPCiii(SEQ ID NO：3)；
CiSEYCiiFWPFWNCiii(SEQ ID NO：4)；
CiSEYCiiFWPLWGCiii(SEQ ID NO：5)；
CiSEYCiiFWPLFGCiii(SEQ ID NO：7)；和
CiSEYCiiFWPFFNCiii(SEQ ID NO：45)。
在另一个实施方案中，SEQ ID NO：43的肽配体包含分子支架TATA并且肽配体包含N-和/或C-末端添加物，并且选自：
A-(SEQ ID NO:1)-A-[Sar6]-[KBiot](本文称为BCY15059)；
A-(SEQ ID NO:1)-A-[Sar6]-[KFl](本文称为BCY15263)；
A-(SEQ ID NO:1)-A(本文称为BCY16054)；
A-(SEQ ID NO:1)-A-[K(PYA)](本文称为BCY16821)；
[K(PYA)]-(SEQ ID NO:1)(本文称为BCY20042)；
Ac-(SEQ ID NO:1)(本文称为BCY18217)；
Ac-(SEQ ID NO:1)-[K(PYA)](本文称为BCY20085)；
Ac-A-(SEQ ID NO:1)-A(本文称为BCY18218)；
A-(SEQ ID NO:2)-A(本文称为BCY17669)；
Ac-(SEQ ID NO:2)(本文称为BCY20084)；
A-(SEQ ID NO:3)-A(本文称为BCY17670)；
Ac-(SEQ ID NO:3)(本文称为BCY20082)；
A-(SEQ ID NO:4)-A(本文称为BCY17671)；
A-(SEQ ID NO:5)-A(本文称为BCY17673)；
A-(SEQ ID NO:6)-A(本文称为BCY17674)；
A-(SEQ ID NO:7)-A(本文称为BCY17675)；
A-(SEQ ID NO:8)-A(本文称为BCY19766)；
A-(SEQ ID NO:9)-A(本文称为BCY19767)；
Ac-(SEQ ID NO:9)(本文称为BCY20221)；
A-(SEQ ID NO:10)-A(本文称为BCY19768)；
A-(SEQ ID NO:11)-A(本文称为BCY19769)；
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Ac-(SEQ ID NO:101)(本文称为BCY20575)；和
Ac-(SEQ ID NO:102)(本文称为BCY20576)；
其中Ac代表乙酰基，Sar代表肌氨酸，KBiot代表生物素化的赖氨酸，KFl代表荧光素化的赖氨酸并且PYA代表戊炔酸。
在可提及的又一个实施方案中，SEQ ID NO：43的肽配体包含分子支架TATA，并且肽配体包含N-和/或C-末端添加物，并且选自：
A-(SEQ ID NO:1)-A-[Sar6]-[KBiot](本文称为BCY15059)；
A-(SEQ ID NO:1)-A-[Sar6]-[KFl](本文称为BCY15263)；
A-(SEQ ID NO:1)-A(本文称为BCY16054)；
A-(SEQ ID NO:1)-A-[K(PYA)](本文称为BCY16821)；
Ac-(SEQ ID NO:1)(本文称为BCY18217)；
Ac-A-(SEQ ID NO:1)-A(本文称为BCY18218)；
A-(SEQ ID NO:2)-A(本文称为BCY17669)；
A-(SEQ ID NO:3)-A(本文称为BCY17670)；
A-(SEQ ID NO:4)-A(本文称为BCY17671)；
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A-(SEQ ID NO:7)-A(本文称为BCY17675)；
A-(SEQ ID NO:8)-A(本文称为BCY19766)；
A-(SEQ ID NO:9)-A(本文称为BCY19767)；
A-(SEQ ID NO:10)-A(本文称为BCY19768)；
A-(SEQ ID NO:11)-A(本文称为BCY19769)；
A-(SEQ ID NO:12)-A(本文称为BCY19770)；
A-(SEQ ID NO:13)-A(本文称为BCY19771)；
A-(SEQ ID NO:14)-A(本文称为BCY19772)；
A-(SEQ ID NO:15)-A(本文称为BCY19776)；
A-(SEQ ID NO:16)-A(本文称为BCY19777)；
A-(SEQ ID NO:17)-A(本文称为BCY19778)；
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Ac-(SEQ ID NO:41)(本文称为BCY19670)；
Ac-(SEQ ID NO:42)(本文称为BCY19671)；和
A-(SEQ ID NO:45)-A(本文称为BCY17672)；
其中Sar代表肌氨酸，KBiot代表生物素化的赖氨酸，KFl代表荧光素化的赖氨酸并且PYA代表戊炔酸。
在另一个实施方案中，肽配体包含N-和/或C-末端添加物并且选自：
A-(SEQ ID NO:1)-A(本文称为BCY16054).
A-(SEQ ID NO:2)-A(本文称为BCY17669)；
A-(SEQ ID NO:3)-A(本文称为BCY17670)；
A-(SEQ ID NO:4)-A(本文称为BCY17671)；
A-(SEQ ID NO:5)-A(本文称为BCY17673)；
A-(SEQ ID NO:7)-A(本文称为BCY17675)；和
A-(SEQ ID NO:45)-A(本文称为BCY17672)。
出于本说明书的目的，假定双环肽与TATA环化，并产生三取代结构。然而，如从本文呈现的本发明的说明书清楚说明的那样，可以用任何合适的分子支架进行环化，所述分子支架与多肽的反应性基团形成共价键，从而形成至少两个多肽环。环化发生在Ci、Cii和Ciii上。
在进一步的实施方案中，药学上可接受的盐选自游离酸或钠盐、钾盐、钙盐或铵盐。
除非另有定义，否则本文所用的所有技术和科学术语具有与本领域普通技术人员通常理解的相同含义，例如肽化学、细胞培养和噬菌体展示、核酸化学和生物化学领域。对于分子生物学、遗传和生化方法使用标准技术(参见Sambrook等人,Molecular Cloning：ALaboratory Manual,第3版，2001,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold SpringHarbor,NY；Ausubel等人，Short Protocols in Molecular Biology(1999)第4版，JohnWiley&Sons,Inc.)，其通过引用并入本文。
多聚体双环肽配体
根据本发明的另一方面，提供了包含至少两个双环肽配体的多聚结合复合物，其中所述肽配体可以相同或不同，每个肽配体包含特异于TREM2的肽配体，所述肽配体包含含有被至少两个环序列隔开的至少三个反应性基团的多肽，以及与所述多肽的反应性基团形成共价键的分子支架，使得在分子支架上形成至少两个多肽环。
因此，在本发明的这个方面，多聚结合复合物包含至少两个(即，2个、3个或4个)本文定义的任何单体双环肽配体。
本发明的该方面描述了一系列多聚化的双环肽，其通过使用所述双环肽内的不同连接位点具有各种长度和刚性的各种化学接头和铰链，以广泛的效力和功效结合和活化TREM2。
技术人员将理解，本发明的该方面显示，相较于包含单个双环肽的相应单体结合复合物，多重排列的(多聚体)双环肽由于所述多聚结合复合物的所得特性，提供了协同益处。例如，本发明该方面的多聚结合复合物通常具有比其单体对应物更高水平的结合效力或亲合力(本文通过Kd值测量)。此外，本发明的多聚结合复合物设计得足够小以被肾脏清除。
不受理论的束缚，据信多聚化的双环肽能够通过同型交联多于一个的相同受体以活化受体。因此，在一个实施方案中，所述双环肽配体特异于TREM2内的相同靶标。在另一个实施方案中，多聚结合复合物包含至少两个相同的双环肽配体。“相同”是指具有相同氨基酸序列的双环肽，最重要的是相同氨基酸序列是指所述双环肽的结合部分(例如，序列在连接位置上可能不同)。在这个实施方案中，多聚结合复合物中的每个双环肽将通过TREM2的相同靶标精确结合相同表位—因此，所得靶标结合复合物将产生同二聚体(如果多聚复合物包含两个相同的双环肽)、同三聚体(如果多聚复合物包含三个相同的双环肽)或同四聚体(如果多聚复合物包含四个相同的双环肽)等。
在替代实施方案中，多聚结合复合物包含至少两个不同的双环肽配体。“不同”是指具有不同氨基酸序列的双环肽。在该实施方案中，多聚结合复合物中的不同双环肽配体将结合TREM2上的不同表位—因此，所得的靶标结合复合物将产生双互补位(如果多聚复合物包含两个不同的双环肽)、三互补位(如果多聚复合物包含三个不同的双环肽)或四互补位(如果多聚复合物包含四个不同的双环肽)等。
不受理论的束缚，据信多聚化的双环肽能够通过异型交联不同的靶标(例如在TREM2上的不同靶标受体)以活化受体。因此，在一个实施方案中，所述双环肽配体特异于TREM2上的不同靶标。应当理解，在该实施方案中，多聚结合复合物包含至少两个不同的双环肽配体(即具有不同氨基酸序列的双环肽配体)。在该实施方案中，多聚结合复合物中的每个双环肽将结合TREM2上的不同表位—因此，所得靶标结合复合物将产生双特异性的多聚结合复合物(如果多聚复合物包含两个不同的双环肽)、三特异性多聚结合复合物(如果多聚复合物包含三个不同的双环肽)、四特异性多聚结合复合物(如果多聚复合物包含四个不同的双环肽)等。
应当理解，本发明的多聚结合复合物可以设计成能够结合TREM2上一系列不同的靶标，例如受体。
本发明的多聚结合复合物中的双环肽可以通过多种不同的选择进行组装。例如，可能存在中央铰链或分支部分，其具有从所述铰链或分支点延伸出去(radiate)的间隔或臂元件，其中的每个将包含双环肽。或者，可以设想圆形支撑构件可以容纳许多向内或向外突出的双环肽。
在一个实施方案中，每个双环肽配体通过间隔基团连接至中央铰链部分。
应当理解，间隔基团可以是线性的，其将单个双环肽与中央铰链部分连接。因此，在一个实施方案中，多聚结合复合物包含式(I)的化合物：
其中CHM代表中央铰链部分；
双环代表如本文所定义的双环肽配体；以及
m代表选自2至10的整数。
在一个实施方案中，m代表选自3至10的整数。在进一步的实施方案中，m代表选自2、3或4的整数。
在进一步的实施方案中，m代表2。
当m代表2时，应当理解中央铰链部分将需要2个连接点。因此，在一个实施方案中，m代表2以及CHM是式(A)的基序：
其中BCY代表如本文所定义的双环肽配体并且n代表PEG单元值的合适整数，例如1至50。
在替代实施方案中，m代表3。
当m代表3时，应当理解中央铰链部分将需要3个连接点。因此，在一个实施方案中，m代表3并且CHM是式(B)的基序：
其中BCY代表如本文所定义的双环肽配体并且n代表PEG单元值的合适整数，例如1至50。
在替代实施方案中，m代表4。
当m代表4时，应当理解中央铰链部分将需要4个连接点。因此，在一个实施方案中，m代表4并且CHM是式(C)的基序：
其中BCY代表如本文所定义的双环肽配体并且n代表PEG单元值的合适整数，例如1至50。
二聚体
在一个实施方案中，多聚结合复合物包含两个相同的双环肽并且包含下表1中描述的二聚结合复合物：
表1：本发明的示例性二聚结合复合物
BCY18117和BCY18119在结构上可以表示为：
BCY18117和BCY18119
其中BCY代表BCY16821并且[PEG]n代表PEG10(BCY18119)或PEG23(BCY18117)。
三聚体
在替代实施方案中，多聚结合复合物包含三个相同的双环肽并且包含下表2中描述的三聚结合复合物：
表2：本发明的示例性三聚结合复合物
BCY18118和BCY18122在结构上可以表示为：
BCY18118和BCY18122
其中BCY代表BCY16821且[PEG]n代表PEG10(BCY18122)或PEG23(BCY18118)。
四聚体
在一个实施方案中，多聚结合复合物包含四个相同的双环肽并且包含下表3中描述的四聚结合复合物：
表3：本发明的示例性四聚结合复合物
BCY18120和18121在结构上可以表示为：
BCY18120和BCY18121
其中BCY代表BCY16821并且[PEG]n代表PEG10(BCY18121)或PEG23(BCY18120)。
编号
当提及本发明的肽内的氨基酸残基位置时，由于半胱氨酸残基是不变的，因而从编号中省略了半胱氨酸残基(Ci、Cii和Ciii)，因此本发明的肽内的氨基酸残基的编号参考如下：
-Ci-S1-E2-Y3-Cii-F4-W5-P6-F7-Y8-H9-Ciii-(SEQ ID NO:1)。
分子形式
将双环核心序列的N-或C-末端延伸添加至序列的左侧或右侧，用连字符隔开。例如，N末端生物素-G-Sar5尾将表示为：
[Biot]-G-[Sar5]-A-(SEQ ID NO:X)。
反向肽序列
根据Nair等人(2003)J Immunol 170(3)，1362-1373中公开的，设想本文公开的肽序列也将以其逆反形式使用。例如，序列是反向的(即，N-末端变成C-末端，反之亦然)，并且其立体化学也同样被颠倒(即，D-氨基酸变成L-氨基酸，反之亦然)。
肽配体定义
本文所指的肽配体是指共价结合分子支架的肽、缩氨酸或肽模拟物。通常，此类肽、缩氨酸或肽模拟物包含具有天然或非天然氨基酸的肽、能够与支架形成共价键的两个或更多个反应性基团(即，半胱氨酸残基)以及在所述反应性基团之间对向存在的序列(称为环序列，因为当肽、缩氨酸或肽模拟物与支架结合时，其形成环)。在本申请的情况下，肽、缩氨酸或肽模拟物包含至少三个半胱氨酸残基(本文称为Ci、Cii和Ciii)，其在支架上形成至少两个环。
肽配体的优势
本发明的某些双环肽具有许多有利的性质，使它们被认为是适合注射、吸入、鼻、眼、口或局部施用的类药物分子。这些有利的性质包括：
-物种交叉反应性。这是临床前药效学和药代动力学评价的典型要求；
-蛋白酶稳定性。双环肽配体应在大多数情况下显示出对血浆蛋白酶、上皮(“膜锚定”)蛋白酶、胃和肠蛋白酶、肺表面蛋白酶、细胞内蛋白酶等的稳定性。蛋白酶的稳定性应当在不同物种之间保持，使得可以在动物模型中开发双环肽先导候选物，并可以有把握地对人施用；
-理想的溶解度曲线。这是带电荷的亲水残基与疏水残基的比例和分子内/分子间H键的函数，其对于配制和吸收目的是重要的；和
-循环中最佳的血浆半衰期。根据临床适应症和治疗方案，可能需要开发双环肽用于在慢性或急性疾病状态管理中短期或延长的体内暴露时间。最佳暴露时间将取决于持续暴露的要求(最大治疗功效)与短暴露时间的要求，以最大限度地减少因持续暴露于试剂而产生的毒理学效应。
药学上可接受的盐
将理解盐的形式在本发明的范围内，并且提及肽配体则包括所述配体的盐形式。
本发明的盐可以通过常规化学方法由含有碱性或酸性部分的母体化合物合成，如Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use,P.Heinrich Stahl(编辑),Camille G.Wermuth(编辑),ISBN:3-90639-026-8,Hardcover,第388页,August 2002中描述的方法。通常，这些盐可以通过将这些化合物的游离酸或碱形式与适当的碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中进行反应来制备。
酸加成盐(单盐或二盐)可以用各种酸(无机和有机酸)形成。酸加成盐的示例包括与酸形成的单盐或二盐，所述酸选自乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸、藻酸、抗坏血酸(例如L-抗坏血酸)、L-天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、丁酸、(+)樟脑、樟脑磺酸、(+)-(1S)-樟脑-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、肉桂酸、柠檬酸、环己氨磺酸、十二烷基硫酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基乙磺酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸、D-葡萄糖酸、葡糖醛酸(例如D-葡糖醛酸)、谷氨酸(例如L-谷氨酸)、α-氧代戊二酸、乙醇酸、马尿酸、氢卤酸(例如氢溴酸、盐酸、氢碘酸)、羟基乙磺酸、乳酸(例如(+)-L-乳酸、(±)-DL-乳酸)、乳糖酸、马来酸、苹果酸、(-)-L-苹果酸、丙二酸、(±)-DL-扁桃酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、萘-1,5-二磺酸、1-羟基-2-萘酸、烟酸、硝酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、扑酸、磷酸、丙酸、丙酮酸、L-焦谷氨酸、水杨酸、4-氨基水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、鞣酸、(+)-L-酒石酸、硫氰酸、对甲苯磺酸、十一碳烯酸和戊酸，以及酰化的氨基酸和阳离子交换树脂。
一组具体的盐包括由以下形成的盐：乙酸、盐酸、氢碘酸、磷酸、硝酸、硫酸、柠檬酸、乳酸、琥珀酸、马来酸、苹果酸、羟乙磺酸、富马酸、苯磺酸、甲苯磺酸、硫酸、甲磺酸(甲磺酸盐)、乙磺酸、萘磺酸、戊酸、丙酸、丁酸、丙二酸、葡萄糖醛酸和乳糖醛酸。一种具体的盐是盐酸盐。另一种具体的盐是乙酸盐。
如果化合物是阴离子的或具有可以是阴离子的官能团(例如，-COOH可以是-COO-)，则可以用产生适当的阳离子的有机或无机碱形成盐。合适的无机阳离子的示例包括但不限于碱金属离子，例如Li+、Na+和K+，碱土金属阳离子，例如Ca2+和Mg2+，和其他阳离子，例如Al3+或Zn+。合适的有机阳离子的示例包括但不限于铵离子(即NH4 +)和取代的铵离子(例如NH3R+、NH2R2 +、NHR3 +、NR4 +)。一些合适的取代的铵离子的示例为衍生自以下的那些：甲胺、乙胺、二乙胺、丙胺、二环己胺、三乙胺、丁胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪、苄胺、苯基苄胺、胆碱、葡甲胺和氨丁三醇，以及氨基酸，例如赖氨酸和精氨酸。常见的季铵离子的示例是N(CH3)4 +。
当本发明的肽含有胺官能团时，例如根据本领域技术人员熟知的方法通过与烷基化剂反应，它们可以形成季铵盐。这样的季铵化合物在本发明的肽的范围内。
修饰的衍生物
应当理解，如本文定义的肽配体的修饰的衍生物在本发明的范围内。这种合适的修饰衍生物的示例包含一个或多个选自以下的修饰：N-末端和/或C-末端修饰；用一个或多个非天然氨基酸残基替换一个或多个氨基酸残基(例如用一个或多个等排或等电子氨基酸替换一个或多个极性氨基酸残基；用其他非天然的等排或等电子氨基酸替换一个或多个非极性氨基酸残基)；加入间隔基团；用一个或多个氧化耐受性氨基酸残基替换一个或多个氧化敏感性氨基酸残基；用一个或多个替换氨基酸(例如丙氨酸)替换一个或多个氨基酸残基，用一个或多个D-氨基酸残基替换一个或多个L-氨基酸残基；双环肽配体中一个或多个酰胺键的N-烷基化；用替代键(surrogate bond)替换一个或多个肽键；肽骨架长度修饰；用另一个化学基团取代一个或多个氨基酸残基的α-碳上的氢；用合适的胺、硫醇、羧酸和酚反应性试剂修饰氨基酸，如半胱氨酸、赖氨酸、谷氨酸/天冬氨酸和酪氨酸，以功能化所述氨基酸；和引入或替换氨基酸，以引入适合于官能化的正交反应性，例如携带叠氮化物或炔烃基团的氨基酸分别允许用携带炔烃或叠氮化物的部分进行官能化。
在一个实施方案中，修饰的衍生物包含N-末端和/或C-末端修饰。在进一步的实施方案中，其中所述修饰的衍生物包含使用合适的氨基反应性化学的N-末端修饰，和/或使用合适的羧基反应性化学的C-末端修饰。在进一步的实施方案中，所述N-末端或C-末端修饰包括添加效应物基团，其包括但不限于细胞毒性剂、放射螯合剂(radiochelator)或发色团。
在进一步的实施方案中，修饰的衍生物包含N-末端修饰。在进一步的实施方案中，N-末端修饰包含N-末端乙酰基。在该实施方案中，在肽合成期间，N-末端残基被乙酸酐或其他合适的试剂封端，产生N-末端乙酰化的分子。该实施方案提供了去除氨基肽酶的潜在识别位点并避免双环肽降解可能性的优点。
在替代实施方案中，N-末端修饰包含添加有助于效应物基团缀合和保持双环肽对其靶标的效力的分子间隔基团。
在进一步的实施方案中，修饰的衍生物包含C-末端修饰。在进一步的实施方案中，C-末端修饰包含酰胺基。在该实施方案中，C-末端残基在肽合成期间被合成为酰胺，产生C末端酰胺化的分子。该实施方案提供了去除羧肽酶的潜在识别位点，以及降低双环肽的蛋白水解降解可能性的优点。
在一个实施方案中，修饰的衍生物包含用一个或多个非天然氨基酸残基替换一个或多个氨基酸残基。在该实施方案中，可以选择非天然氨基酸，其具有不被降解性蛋白酶识别，也不对靶标效力产生任何副作用的等排/等电子侧链。
可替代地，可以使用具有约束的氨基酸侧链的非天然氨基酸，使得在构象和空间上阻碍邻近肽键的蛋白水解。具体而言，这些涉及脯氨酸类似物、大体积侧链、Cα-二取代衍生物(例如，氨基异丁酸，Aib)和环氨基酸、为氨基-环丙基羧酸的简单衍生物。
在一个实施方案中，修饰的衍生物包含添加间隔基团。在进一步的实施方案中，修饰的衍生物包含向N-末端半胱氨酸(Ci)和/或C-末端半胱氨酸(Ciii)添加间隔基团。
在一个实施方案中，修饰的衍生物包含用一个或多个氧化耐受性氨基酸残基替换一个或多个氧化敏感性氨基酸残基。在进一步的实施方案中，修饰的衍生物包含用萘基丙氨酸或丙氨酸残基替换色氨酸残基。该实施方案提供了改善所得双环肽配体的药物稳定性特征的优点。
在一个实施方案中，修饰的衍生物包含用一个或多个疏水性氨基酸残基替换一个或多个带电荷的氨基酸残基。在替代实施方案中，修饰的衍生物包含用一个或多个带电荷的氨基酸残基替换一个或多个疏水性氨基酸残基。带电荷的氨基酸残基与疏水性氨基酸残基的正确平衡是双环肽配体的重要特征。例如，疏水性氨基酸残基影响血浆蛋白结合的程度，因此影响血浆中可利用的游离级分的浓度，而带电荷的氨基酸残基(具体是精氨酸)可以影响肽与细胞表面上的磷脂膜的相互作用。两者组合可以影响肽药物的半衰期、分布容积和暴露，并可以根据临床终点进行调整。另外，带电荷的氨基酸残基与疏水性氨基酸残基的正确组合和数量可以减少注射部位的刺激(如果肽药物已经皮下施用)。
在一个实施方案中，修饰的衍生物包含用一个或多个D-氨基酸残基替换一个或多个L-氨基酸残基。据信该实施方案通过空间位阻和通过D-氨基酸稳定β-转角构象的倾向来增加蛋白水解稳定性(Tugyi等人(2005)PNAS，102(2)，413-418)。
在一个实施方案中，修饰的衍生物包括去除任何氨基酸残基并用丙氨酸(例如D-丙氨酸)进行取代。该实施方案提供了识别关键结合残基和去除潜在的蛋白水解攻击位点的优势。
应当注意，上述提及的每种修饰用于有意地改善肽的效力或稳定性。基于修饰的进一步的效力改善可以通过以下机制来实现：
-并入展现疏水效应并导致降低的解离速率的疏水部分，从而实现更高的亲和力；
-并入展现大范围离子相互作用的带电荷基团，导致结合速率更快和更高的亲和力(参见，例如，Schreiber等人，Rapid,electrostatically assisted association ofproteins(1996),Nature Struct.Biol.3,427-31)；和
-在肽中合并入另外的约束，例如通过正确地约束氨基酸的侧链，从而使靶标结合后的熵损失最小化；约束骨架的扭转角，从而使靶标结合后的熵损失最小化；和出于相同的原因而在分子中引入另外的环化。
(综述参见Gentilucci等人，Curr.Pharmaceutical Design,(2010)，16,3185-203和Nestor等人，Curr.Medicinal Chem(2009),16,4399-418)。
同位素变体
本发明包括本发明的所有药学上可接受的(放射性)同位素标记的肽配体，其中一个或多个原子被具有相同原子数的原子替换，但原子质量或质量数不同于通常在自然界中发现的原子质量或质量数，和本发明的肽配体，其中连接能够容纳相关的(放射性)同位素的金属螯合基团(称为“效应物”)，和本发明的肽配体，其中某些官能团被共价替换为相关的(放射性)同位素或同位素标记的官能团。
适合于包含在本发明肽配体中的同位素的示例包括氢的同位素(例如2H(D)和3H(T))、碳的同位素(例如11C、13C和14C)、氯的同位素(例如36Cl)、氟的同位素(例如18F)、碘的同位素(例如123I、125I和131I)、氮的同位素(例如13N和15N)、氧的同位素(例如15O、17O和18O)、磷的同位素(例如32P)、硫的同位素(例如35S)、铜的同位素(例如64Cu)、镓的同位素(例如67Ga或68Ga)、钇的同位素(例如90Y)和镥的同位素(例如177Lu)以及铋的同位素(例如213Bi)。
某些同位素标记的本发明肽配体，例如并入放射性同位素的那些，可用于药物和/或底物组织分布的研究中，并用于临床评估患病组织中靶标的存在和/或不存在。本发明的肽配体可以进一步具有有价值的诊断性质，因为它们可用于检测或识别标记化合物与其他分子、肽、蛋白质、酶或受体之间的复合物的形成。检测或识别方法可以使用用标记试剂标记的化合物，标记试剂例如放射性同位素、酶、荧光物质、发光物质(例如，鲁米诺、鲁米诺衍生物、萤光素、发光蛋白和萤光素酶)等。放射性同位素氚(即3H(T))和碳-14(即14C)，鉴于其容易并入和方便的检测手段，而特别用于该目的。
用较重的同位素例如氘(即2H(D))的取代可以提供由更大的代谢稳定性产生的某些治疗优势，例如增加的体内半衰期或降低的剂量需求，因此在一些情况下可能是优选的。
用正电子发射同位素(例如11C、18F、15O和13N)取代可用于正电子发射断层扫描(PET)研究以检查靶标占有率。
本发明的肽配体的同位素标记的化合物通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与所附实施例中描述的那些类似的方法来制备，使用适当的同位素标记的试剂代替之前使用的非标记的试剂。
分子支架
在一个实施方案中，分子支架包括非芳族分子支架。本文提及的“非芳族分子支架”是指本文定义的任何分子支架，其不包含芳族(即不饱和)碳环或杂环环体系。
非芳族分子支架的合适示例描述在Heinis等人(2014)Angewandte Chemie，国际版53(6)1602-1606。
如之前的文件中所述，分子支架可以是小分子，例如有机小分子。
在一个实施方案中，分子支架可以是大分子。在一个实施方案中，分子支架是由氨基酸、核苷酸或碳水化合物组成的大分子。
在一个实施方案中，分子支架包含能够与多肽的官能团反应形成共价键的反应性基团。
分子支架可以包括与肽形成连接的化学基团，例如胺、硫醇、醇、酮、醛、腈、羧酸、酯、烯烃、炔烃、叠氮化物、酸酐、琥珀酰亚胺、马来酰亚胺、烷基卤化物和酰基卤化物。
在一个实施方案中，所述分子支架是1,1’,1”-(1,3,5-三嗪烷-1,3,5-三基)三丙-2-烯-1-酮(也已知为三丙烯酰基六氢-s-三嗪)(TATA)：
因此，在用本发明的双环肽在Ci、Cii和Ciii半胱氨酸残基上环化后，分子支架形成TATA的三取代的1,1’,1”-(1,3,5-三嗪烷-1,3,5-三基)三丙-1-酮衍生物，其具有以下结构：
其中*表示三个半胱氨酸残基的连接点。
合成
本发明的肽可以通过标准技术合成制备，然后在体外与分子支架反应。当进行此操作时，可以使用标准化学方法。这使得能够快速大规模制备可溶性材料用于进一步的下游实验或验证。这样的方法可以使用如Timmerman等人(同上)中公开的常规化学方法来实现。
因此，本发明还涉及如本文所示所选择的多肽或缀合物的制备，其中制备包括任选的如下解释的进一步步骤。在一个实施方案中，这些步骤在通过化学合成制备的最终产物多肽/缀合物上进行。
当制备缀合物或复合物时，感兴趣的多肽中的任选的氨基酸残基可以被取代。
肽也可以延伸以并入，例如另一个环，因此引入多特异性。
为了延伸肽，可以使用标准固相或溶液相化学法，使用正交保护的赖氨酸(和类似物)，简单地在其N-末端或C-末端或在环内化学延伸。可以使用标准(生物)缀合技术来引入活化的或可活化的N-或C-末端。可替代地，添加可以通过片段缩合或天然化学连接进行，例如，描述于(Dawson等人,1994.Synthesis of Proteins by Native ChemicalLigation.Science 266:776-779)，或通过酶进行，例如使用描述的变位酶(subtiligase)，描述见于(Chang等人，Proc Natl Acad Sci U S A.1994年12月20日；91(26):12544-8或Hikari等人，Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters，第18卷，第22期，2008年11月15日，第6000-6003页)。
可替代地，可以通过二硫键进一步缀合以延伸或修饰肽。这具有一旦处于细胞还原环境中时，允许第一和第二肽彼此分离的额外优点。在这种情况下，可以在第一肽的化学合成期间添加分子支架(例如，TATA)，以使得与三个半胱氨酸基团反应；然后可以将另外的半胱氨酸或硫醇附加至第一肽的N或C末端，使得该半胱氨酸或硫醇仅与第二肽的游离半胱氨酸或硫醇反应，形成二硫键连接的双环肽-肽缀合物。
此外，可以以相同的方式，使用适当的化学方法，在N-或C-末端或通过侧链的偶联来完成其他官能团或效应物基团的加入。在一个实施方案中，以不阻断任一实体活性的方式进行偶联。
药物组合物
根据本发明的进一步的方面，提供了一种药物组合物，其包含与一种或多种药学上可接受的赋形剂组合的如本文所定义的肽配体或多聚结合复合物。
一般地，本发明的肽配体将与药理学上适当的赋形剂或载体一起以纯化的形式使用。通常地，这些赋形剂或载体包括水或醇/水溶液、乳剂或混悬液，包括生理盐水和/或缓冲介质。肠胃外媒介物包括氯化钠溶液、林格氏右旋糖、右旋糖和氯化钠和乳酸林格氏试剂。如果需要将多肽复合物保持在混悬液中，合适的生理学上可接受的佐剂可以选自增稠剂如羧甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、明胶和海藻酸盐。
静脉内赋形剂包括液体和营养补充剂和电解质补充剂，例如基于林格氏右旋糖的那些。还可以存在防腐剂和其他添加剂，例如抗微生物剂、抗氧化剂、螯合剂和惰性气体(Mack(1982)Remington'sPharmaceutical Sciences，第16版)。
本发明的肽配体可以用作单独施用的组合物，或者与其他试剂联合施用。这些可包括抗体、抗体片段和各种免疫治疗药物，例如环孢菌素、甲氨蝶呤、阿霉素或顺铂以及免疫毒素。可以单独或与本发明的肽配体一起施用的其他试剂的进一步示例包括细胞因子、淋巴因子、其他造血因子、溶栓因子和抗血栓形成因子。药物组合物可以包括与本发明的蛋白配体联合的各种细胞毒性剂或其他试剂的“鸡尾酒混合物”，或甚至包括具有不同特异性的根据本发明选择的多肽的组合，例如使用不同靶标配体选择的多肽，无论是否在施用之前合并。
根据本发明的药物组合物的施用途径可以是本领域普通技术人员通常已知的那些。对于治疗，本发明的肽配体可以根据标准技术施用于任何患者。施用可以通过任何适当的模式，包括肠胃外、静脉内、肌肉内、腹腔内、经皮、经肺途径、或者适当地通过直接导管输注。优选地，根据本发明的药物组合物将是静脉内施用。施用的剂量和频率取决于患者的年龄、性别和状况，其他药物的同时施用，禁忌症和临床医生要考虑的其他参数。
本发明的肽配体可以被冻干储存并在使用前重构在合适的载体中。已经证明这种技术是有效的，并且可以采用本领域已知的冻干和重构技术。本领域技术人员将理解，冻干和重构可导致不同程度的活性损失，并且可能必须向上调整水平以进行补偿。
可以施用含有本发明肽配体或其鸡尾酒混合物的组合物用于预防性和/或治疗性治疗。在某些治疗应用中，将实现所选细胞群体的至少部分抑制、阻遏、调节、杀死或某些其他可测量参数的足够量定义为“治疗有效剂量”。实现该剂量所需的量将取决于疾病的严重程度，但通常范围为每千克体重0.005至5.0mg的所选择的肽配体，更常用的剂量是0.05至2.0mg/kg/剂量。对于预防性应用，含有本发明肽配体或其鸡尾酒混合物的组合物也可以以相似或稍低的剂量施用。
包含根据本发明的肽配体的组合物可以用于在预防和治疗环境中帮助改变、灭活、杀死或去除哺乳动物中选择的靶细胞群体。此外，本文所述的肽配体可以选择性地用于在离体(extracorporeally)或体外(in vitro)从细胞的异质集合物中杀死、消耗或以其他方式有效去除靶细胞群体。来自哺乳动物的血液可以与选择的肽配体离体组合，由此从血液中将不期望的细胞杀死或以其他方式去除，并根据标准技术返回至哺乳动物。
治疗用途
本发明的双环肽作为TREM2结合剂具有特异性用途。根据本发明的另一方面，提供了如本文限定的肽配体或药物组合物，其用于预防、抑制或治疗TREM2介导的疾病或病症。
TREM2也被称为“骨髓细胞上表达的触发受体2”，是人类中由TREM2基因编码的蛋白质。TREM2是免疫球蛋白超家族的跨膜受体。TREM2的配体涵盖多种阴离子分子，包括游离的和与质膜结合的分子，包括细菌产物、DNA、脂蛋白和磷脂。TREM2由包含单个V型免疫球蛋白结构域的胞外结构域、短胞外域、单个跨膜螺旋和缺乏任何信号转导或运输基序的短胞质尾部组成。相反，对小鼠巨噬细胞的研究表明，TREM2通过跨膜域中带相反电荷的残基与接头蛋白DNAX激活蛋白12(DAP12)和DAP10结合。TREM2-配体相互作用后，这些共受体被磷酸化并募集细胞内信号转导机制。DAP12，也称为TYRO蛋白酪氨酸激酶结合蛋白(TYROBP)，介导脾酪氨酸激酶Syk的激活，而DAP10通过招募磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)来促进信号传播。TREM2可以结合DAP12或DAP10，并可能形成TREM2-DAP12-DAP10异二聚体(Peng等人，2010)。下游信号传导严重依赖于这些布置；例如，在小鼠巨噬细胞中，DAP12是Ca2+动员所必需的，而DAP10对于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)和细胞外信号调节激酶(ERK)的激活至关重要。
TREM2最近被发现与许多病症有关，特别是阿尔茨海默病、肥胖相关代谢综合征和癌症(Deczkowska等人(2020)Cell 181,1207-1217)。该参考文献提供了TREM2结合剂与以下病症之间的明确联系：炎性病症、神经系统病症(例如阿尔茨海默病)、癌症、分子病症(例如肥胖症、脂肪肝和动脉粥样硬化)。因此，在一个实施方案中，由TREM2介导的疾病或病症选自：炎性病症、神经系统病症例如阿尔茨海默病、癌症、分子病症例如肥胖症、脂肪肝和动脉粥样硬化。在进一步的实施方案中，所述癌症选自：膀胱癌、脑癌、乳腺癌、结肠癌、直肠癌、子宫内膜癌、肾癌、肾细胞癌、肾盂癌、白血病、肺癌、黑素瘤、非霍奇金癌淋巴瘤、胰腺癌、前列腺癌、卵巢癌、纤维肉瘤和甲状腺癌。
在一个替代实施方案中，TREM2介导的疾病或病症选自：痴呆、额颞叶痴呆、阿尔茨海默病、血管性痴呆、混合性痴呆、克雅氏病、正常压力脑积水、肌萎缩侧索硬化、亨廷顿病、Tau蛋白病、Nasu-Hakola病、中风、急性创伤、慢性创伤、狼疮、急慢性结肠炎、伤口愈合、克罗恩病、炎性肠病、溃疡性结肠炎、肥胖、疟疾、特发性震颤、中枢神经系统狼疮、白塞病、帕金森病、路易体痴呆、多系统萎缩、Shy-Drager综合征、进行性核上性麻痹、皮质基底神经节变性、急性播散性脑脊髓炎、肉芽肿病、结节病、衰老疾病、癫痫、脊髓损伤、创伤性脑损伤、年龄相关性黄斑变性、青光眼、视网膜色素变性、视网膜变性、呼吸道感染、败血症、眼部感染、全身感染、狼疮、关节炎、多发性硬化症、低骨密度、骨质疏松症、成骨、骨石症、佩吉特骨病、癌症、
在进一步的实施方案中，由TREM2介导的疾病或病症选自：痴呆、额颞叶痴呆、阿尔茨海默病、Nasu-Hakola病和多发性硬化症。
本文提到的术语“预防”涉及在诱发疾病之前施用保护性组合物。“抑制”是指在诱导事件之后、但在疾病的临床出现之前施用组合物。“治疗”涉及在疾病症状变得明显之后施用保护性组合物。
可获得用于筛选肽配体在预防或治疗疾病中的有效性的动物模型系统。本发明促进了动物模型系统的使用，其允许开发可以与人和动物靶标交叉反应的多肽配体，从而允许使用动物模型。
下面参考以下实施例进一步描述本发明。
实施例
材料和方法
双环肽配体的制备(一般方法)
使用标准Fmoc(9-芴基甲氧羰基)固相肽合成，通过手动偶联(大规模)或使用Biotage SyroII自动肽合成仪(小规模)，在Rink酰胺树脂上合成双环肽。在进行基于TFA的从树脂上切割后，将肽用二乙醚沉淀，溶解在50:50的乙腈/水中。然后将粗肽(浓度为约1mM)与1.3当量的支架环化，使用碳酸氢铵(100mM)作为碱。由基质辅助的激光解吸电离飞行时间(MALDI-TOF)或LC-MS确定环化的完成。完成后，使用N-乙酰半胱氨酸(相对于肽为10当量)淬灭环化反应，将溶液冻干。将残余物溶解在合适的溶剂中，通过RP-HPLC纯化。将具有足够纯度和正确分子量(通过MALDI-TOF和HPLC或LC-MS验证)的肽级分汇集并冻干。使用280nm处的消光系数通过UV吸收测定浓度，该消光系数基于Trp/Tyr含量。
除非另有说明，所有氨基酸均以L-构型使用。
生物数据
1.生物层干涉测量(BLI)直接结合测定
生物层干涉测量在Octet系统(Sartorius)上在含有50mM HEPES(pH7.5)、150mM NaCl和0.1％Tween的缓冲液中于25℃进行。将TREM2胞外域(ECD)(残基19-131，C末端生物素化、去糖基化或糖基化)以0.0125mg/ml加载到Superstreptavidin生物传感器(SSA，18-5070，Sartorius)上300秒。使用Echo液体处理器将双环肽(DMSO中的10mM)分配到384孔斜底板(18-5076，Sartorius)中，使所有孔(包括对照孔)中的最终DMSO浓度为0.125％。记录规定浓度的双环肽(0-12.5μM，1:2稀释7个浓度点)的缔合超过120秒，然后在缓冲液中解离超过120秒。不含双环肽的参考孔和装载不相关蛋白(His标记的MLLT3a)的参考传感器接受相同的测定方案，并使用双参考减法进行处理以考虑非特异性结合。使用Octet软件(版本11.0)对迹线进行分析。将缔合和解离曲线进行全局拟合，并针对浓度绘制平衡时的响应(Req)，以获得稳态KD值。
在上述测定中测试了本发明选定的肽，结果显示在表4A和4B中：
表4A：本发明选定的肽配体的人和食蟹猴BLI结合测定结果
nt＝未测试
表4B：本发明选定的肽配体的人和食蟹猴BLI结合测定结果
nt＝未测试
进一步的数据在本文的图1A至1D中呈现，其中可以看出BCY16054在BLI(生物层干涉测量法)测定中显示出与人TREM2胞外结构域的结合，KD为～700nM。
2.pSYK均质时间分辨荧光(HTRF)测定
使用CisBio总SYK和磷酸化SYK HTRF试剂盒(目录号分别为64SYKTPGG和64SYKY525-PEG)在iPSC巨噬细胞上对总SYK和磷酸化(Tyr 525/526)SYK进行定量评估。将源自胚状体的人iPSC巨噬细胞前体在100μl巨噬细胞培养基(XVIVO15(Lonza，#BE04-418F)，1％青霉素-链霉素(Gibco，#15140-122)、1％ GlutaMAXTM补充剂(Gibco，#35050-038)、0.1％M-CSF(Invitrogen，#PHC9501))中以每孔40k个细胞密度接种于96孔板(PerkinElmer Cell Carrier ultra，黑壁板，#6055800)中。细胞生长7天以诱导完全分化为iPSC巨噬细胞。将亲本(表达TREM2)和同基因TREM2 KO iPSC巨噬细胞铺板以测试肽结合的特异性。分化后，用对照TREM2激活抗体(R&D Systems，#AF1828)、人IgG对照(R&D Systems，#AB-108-C)或双环肽的10点CRC(从100μM的起始浓度开始连续2倍稀释)刺激细胞5分钟。刺激后去除培养基，并在每孔50μl裂解缓冲液(随试剂盒提供)中裂解细胞。将细胞在LB3中孵育30分钟，伴随在室温下的摇动。裂解后，取出16μl样品并添加至白色384孔板(ProxiPlate-384Plus(Perkin Elmer，#6008280))，并将4μl预混合抗体溶液添加至板的每个孔中。将板在室温下孵育过夜，第二天，使用Pherastar FSX测量665nm和620nm处的吸光度。使用相同的细胞裂解物来评估总SYK和磷酸化SYK，以使得能够在每个样品中生成一定比例的磷酸化SYK。
在上述测定中测试了本发明选定的肽，结果显示在表5中：
表5：本发明选定的肽配体的pSYK测定结果
NB＝无结合
进一步的数据在本文的图2A至2D中呈现，其中可以看出BCY16054表现出磷酸化SYK的浓度依赖性增加，EC50为10.69μM，表明BCY16054对TREM2受体具有激动剂活性。其他双环肽的结果显示出一系列活性，其与BLI测定中的亲和力大致一致。
序列表
<110> 拜斯科技术开发有限公司
<120> 特异于TREM2的双环肽配体
<130> BIC-C-P3032PCT
<150> GB 2103870.8
<151> 2021-03-19
<150> GB 2114729.3
<151> 2021-10-14
<160> 102
<170> PatentIn version 3.5
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<210> 17
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 17
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Trp Gln Cys
1 5 10
<210> 18
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 18
Cys Thr Asn Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Gln Tyr Cys
1 5 10
<210> 19
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 19
Cys Thr Asn Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Gln Ser Cys
1 5 10
<210> 20
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 20
Cys Thr Asn Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr Ser Cys
1 5 10
<210> 21
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 21
Cys Thr Asn Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr Leu Cys
1 5 10
<210> 22
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 22
Cys Thr Asn Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Ala Val Cys
1 5 10
<210> 23
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 23
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Gln Tyr Cys
1 5 10
<210> 24
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 24
Cys Ala Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 25
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 25
Cys Ser Ala Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 26
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 26
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Ala Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 27
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 27
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Ala His Cys
1 5 10
<210> 28
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 28
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr Ala Cys
1 5 10
<210> 29
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (4)..(4)
<223> Xaa是2,6-DiMeTyr
<400> 29
Cys Ser Glu Xaa Cys Phe Trp Pro Phe Tyr Ala Cys
1 5 10
<210> 30
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (6)..(6)
<223> Xaa是4MePhe
<400> 30
Cys Ser Glu Tyr Cys Xaa Trp Pro Phe Tyr Ala Cys
1 5 10
<210> 31
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (6)..(6)
<223> Xaa是HPhe
<400> 31
Cys Ser Glu Tyr Cys Xaa Trp Pro Phe Tyr Ala Cys
1 5 10
<210> 32
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (7)..(7)
<223> Xaa是1Nal
<400> 32
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Xaa Pro Phe Tyr Ala Cys
1 5 10
<210> 33
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (7)..(7)
<223> Xaa是2Nal
<400> 33
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Xaa Pro Phe Tyr Ala Cys
1 5 10
<210> 34
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (8)..(8)
<223> Xaa是NMeAla
<400> 34
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Xaa Phe Tyr Ala Cys
1 5 10
<210> 35
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是HPhe
<400> 35
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Tyr Ala Cys
1 5 10
<210> 36
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是4MePhe
<400> 36
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Tyr Ala Cys
1 5 10
<210> 37
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (7)..(7)
<223> Xaa是1Nal
<400> 37
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Xaa Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 38
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是HPhe
<400> 38
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Tyr His Cys
1 5 10
<210> 39
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (7)..(7)
<223> Xaa是1Nal
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是HPhe
<400> 39
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Xaa Pro Xaa Tyr His Cys
1 5 10
<210> 40
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是1Nal
<400> 40
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Tyr His Cys
1 5 10
<210> 41
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (8)..(8)
<223> Xaa是Aib
<400> 41
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Xaa Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 42
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (7)..(7)
<223> Xaa是6ClTrp
<400> 42
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Xaa Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 43
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (2)..(4)
<223> Xaa代表选定的氨基酸或非天然氨基酸
<220>
<221> Xaa
<222> (6)..(11)
<223> Xaa代表选定的氨基酸或非天然氨基酸
<400> 43
Cys Xaa Xaa Xaa Cys Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Cys
1 5 10
<210> 44
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(11)
<223> Xaa是任何氨基酸
<400> 44
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Xaa Xaa Cys
1 5 10
<210> 45
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 45
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Phe Asn Cys
1 5 10
<210> 46
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是1Nal
<400> 46
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Tyr Ala Cys
1 5 10
<210> 47
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (4)..(4)
<223> Xaa是DOPA
<400> 47
Cys Ser Glu Xaa Cys Phe Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 48
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (4)..(4)
<223> Xaa是3FTyr
<400> 48
Cys Ser Glu Xaa Cys Phe Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 49
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (6)..(6)
<223> Xaa是1Nal
<400> 49
Cys Ser Glu Tyr Cys Xaa Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 50
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (6)..(6)
<223> Xaa是4FPhe
<400> 50
Cys Ser Glu Tyr Cys Xaa Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 51
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (6)..(6)
<223> Xaa是2FPhe
<400> 51
Cys Ser Glu Tyr Cys Xaa Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 52
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (6)..(6)
<223> Xaa是3FPhe
<400> 52
Cys Ser Glu Tyr Cys Xaa Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 53
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (7)..(7)
<223> Xaa是Trp(Me)
<400> 53
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Xaa Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 54
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (7)..(7)
<223> Xaa是6MeTrp
<400> 54
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Xaa Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 55
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (7)..(7)
<223> Xaa是5FTrp
<400> 55
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Xaa Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 56
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (7)..(7)
<223> Xaa是6FTrp
<400> 56
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Xaa Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 57
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (7)..(7)
<223> Xaa是3MePhe
<400> 57
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Xaa Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 58
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (7)..(7)
<223> Xaa是2Nal
<400> 58
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Xaa Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 59
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (7)..(7)
<223> Xaa是AzaTrp
<400> 59
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Xaa Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 60
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (7)..(7)
<223> Xaa是CF3Phe
<400> 60
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Xaa Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 61
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (7)..(7)
<223> Xaa是2MePhe
<400> 61
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Xaa Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 62
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (8)..(8)
<223> Xaa是Pip
<400> 62
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Xaa Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 63
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (8)..(8)
<223> Xaa是44DFP
<400> 63
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Xaa Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 64
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (8)..(8)
<223> Xaa是Aze
<400> 64
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Xaa Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 65
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (8)..(8)
<223> Xaa是Cis-HyP
<400> 65
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Xaa Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 66
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是2MePhe
<400> 66
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Tyr His Cys
1 5 10
<210> 67
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是4FPhe
<400> 67
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Tyr His Cys
1 5 10
<210> 68
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是tBuAla
<400> 68
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Tyr His Cys
1 5 10
<210> 69
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 69
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Leu Tyr His Cys
1 5 10
<210> 70
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是3MePhe
<400> 70
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Tyr His Cys
1 5 10
<210> 71
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是44BPA
<400> 71
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Tyr His Cys
1 5 10
<210> 72
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是2Nal
<400> 72
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Tyr His Cys
1 5 10
<210> 73
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 73
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Trp His Cys
1 5 10
<210> 74
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (10)..(10)
<223> Xaa是4FPhe
<400> 74
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Xaa His Cys
1 5 10
<210> 75
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (10)..(10)
<223> Xaa是2Nal
<400> 75
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Xaa His Cys
1 5 10
<210> 76
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (10)..(10)
<223> Xaa是3tBuTyr
<400> 76
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Xaa His Cys
1 5 10
<210> 77
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (10)..(10)
<223> Xaa是1Nal
<400> 77
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Xaa His Cys
1 5 10
<210> 78
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 78
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr Asn Cys
1 5 10
<210> 79
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 79
Cys Ala Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 80
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 80
Cys Ser Ala Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 81
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 81
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Ala His Cys
1 5 10
<210> 82
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 82
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr Ala Cys
1 5 10
<210> 83
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (2)..(2)
<223> Xaa是K(PYA)
<400> 83
Cys Xaa Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 84
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (3)..(3)
<223> Xaa是K(PYA)
<400> 84
Cys Ser Xaa Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 85
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是K(PYA)
<400> 85
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Tyr His Cys
1 5 10
<210> 86
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (10)..(10)
<223> Xaa是K(PYA)
<400> 86
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Xaa His Cys
1 5 10
<210> 87
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (11)..(11)
<223> Xaa是K(PYA)
<400> 87
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr Xaa Cys
1 5 10
<210> 88
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是HPhe
<400> 88
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Gln Tyr Cys
1 5 10
<210> 89
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是1Nal
<400> 89
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Gln Tyr Cys
1 5 10
<210> 90
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 90
Cys Asp Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 91
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 91
Cys Glu Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 92
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 92
Cys Ser Glu Tyr Cys Tyr Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 93
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (6)..(6)
<223> Xaa是4Pal
<400> 93
Cys Ser Glu Tyr Cys Xaa Trp Pro Phe Tyr His Cys
1 5 10
<210> 94
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 94
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Tyr Tyr His Cys
1 5 10
<210> 95
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (9)..(9)
<223> Xaa是4Pal
<400> 95
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Xaa Tyr His Cys
1 5 10
<210> 96
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 96
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Asp His Cys
1 5 10
<210> 97
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 97
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Glu His Cys
1 5 10
<210> 98
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 98
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr Gln Cys
1 5 10
<210> 99
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 99
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr Asp Cys
1 5 10
<210> 100
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 100
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr Glu Cys
1 5 10
<210> 101
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<220>
<221> Xaa
<222> (11)..(11)
<223> Xaa是HArg
<400> 101
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr Xaa Cys
1 5 10
<210> 102
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工
<220>
<223> 合成肽
<400> 102
Cys Ser Glu Tyr Cys Phe Trp Pro Phe Tyr Phe Cys
1 5 10

Claims (14)

1.一种特异于TREM2的肽配体，其包含多肽和分子支架，所述多肽包含被至少两个环序列隔开的至少三个反应性基团，所述分子支架与所述多肽的反应性基团形成共价键，使得在分子支架上形成至少两个多肽环。
2.根据权利要求1所述的肽配体，其中所述反应性基团包含半胱氨酸残基。
3.根据权利要求1或权利要求2所述的肽配体，其中所述环序列包含3或6个氨基酸。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的肽配体，其中所述环序列包含被两个环序列隔开的三个半胱氨酸残基，其中第一个环序列由3个氨基酸组成，第二个环序列由6个氨基酸组成。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的肽配体，其中所述环序列包含被两个环序列隔开的三个半胱氨酸残基，其中第一个环序列由3个氨基酸组成，第二个环序列由6个氨基酸组成，并且所述环序列包含具有下式的氨基酸序列：
Ci-X1-X2-X3-Cii-X4-X5-X6-X7-X8-X9-Ciii(SEQ ID NO：43)；
其中
X1代表选自A、dA、S、T、D和E的氨基酸或非天然氨基酸K(戊炔酸)(K(PYA))；
X2代表选自A、dA、E、Y、S和N的氨基酸或非天然氨基酸K(戊炔酸)(K(PYA))；
X3代表选自A、Y和Q的氨基酸或选自以下的非天然氨基酸：2,6-二甲基-酪氨酸(2,6-DiMeTyr)、3,4-二羟基-苯丙氨酸(DOPA)和3-氟-色氨酸(3FTyr)；
X4代表选自I和F的氨基酸或选自4-甲基-苯丙氨酸(4MePhe)、高苯丙氨酸(HPhe)、1-萘基丙氨酸(1Nal)、2-氟-苯丙氨酸(2FPhe)、3-氟-苯丙氨酸(3FPhe)、4-氟-苯丙氨酸(4FPhe)和4-吡啶基丙氨酸(4Pal)的非天然氨基酸；
X5代表选自R和W的氨基酸或选自1-萘基丙氨酸(1Nal)、2-萘基丙氨酸(2Nal)、6-氯-色氨酸(6ClTrp)、5-氟-色氨酸(5FTrp)、6-氟-色氨酸(6FTrp)、6-甲基色氨酸(6MeTrp)、氮杂色氨酸(AzaTrp)、甲基色氨酸(Trp(Me))、2-甲基苯丙氨酸(2MePhe)、3-甲基苯丙氨酸(3MePhe)和三氯甲基苯丙氨酸(4CF3Phe)的非天然氨基酸；
X6代表选自P和A的氨基酸或选自N-甲基丙氨酸(NMeAla)、氨基异丁酸(Aib)、哌可酸(Pip)、氮杂环丁烷(Aze)、顺式-羟基脯氨酸(Cys-HyP)和4,4-二氟脯氨酸(44DFP)的非天然氨基酸；
X7代表选自L、F和Y的氨基酸或选自高苯丙氨酸(HPhe)、2-甲基苯丙氨酸(2MePhe)、3-甲基苯丙氨酸(3MePhe)、4-甲基-苯丙氨酸(4MePhe)、1-萘基丙氨酸(1Nal)、2-萘基丙氨酸(2Nal)、4-氟-苯丙氨酸(4FPhe)、叔丁基丙氨酸(tBuAla)、4,4-联苯丙氨酸(44BPA)、4-吡啶丙氨酸(4Pal)和K(戊炔酸)(K(PYA))的非天然氨基酸；
X8代表选自W、Y、F、Q、A、dA、D和E的氨基酸或选自4-氟-苯丙氨酸(4FPhe)、1-萘基丙氨酸(1Nal)、2-萘基丙氨酸(2Nal)、3-叔丁基酪氨酸(3tBuTyr)和K(戊炔酸)(K(PYA))的非天然氨基酸；和
X9代表选自H、S、P、N、G、Y、Q、W、L、V、A、dA、D、E和F的氨基酸或选自高精氨酸(HArg)和K(戊炔酸)(K(PYA))的非天然氨基酸；
其中Ci、Cii和Ciii分别代表第一、第二和第三半胱氨酸残基或其药学上可接受的盐，
例如其中SEQ ID NO：43的肽配体包含选自以下的氨基酸序列：
CiSEYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:1；本文称为BCY18219)；
CiSEYCiiFWPFYSCiii(SEQ ID NO:2)；
CiSEYCiiFWPFYPCiii(SEQ ID NO:3)；
CiSEYCiiFWPFWNCiii(SEQ ID NO:4)；
CiSEYCiiFWPLWGCiii(SEQ ID NO:5)；
CiSAQCiiIRPFYHCiii(SEQ ID NO:6)；
CiSEYCiiFWPLFGCiii(SEQ ID NO:7)；
CiSYYCiiFWPFQSCiii(SEQ ID NO:8)；
CiSYYCiiFWPFQYCiii(SEQ ID NO:9)；
CiTSYCiiFWPFYQCiii(SEQ ID NO:10)；
CiTNYCiiFWPFWSCiii(SEQ ID NO:11)；
CiSNYCiiFWPFWQCiii(SEQ ID NO:12)；
CiSEYCiiFWPFQWCiii(SEQ ID NO:13)；
CiSNYCiiFWPFFQCiii(SEQ ID NO:14)；
CiSEYCiiFWPFFLCiii(SEQ ID NO:15)；
CiSEYCiiFWPFYLCiii(SEQ ID NO:16)；
CiSEYCiiFWPFWQCiii(SEQ ID NO:17)；
CiTNYCiiFWPFQYCiii(SEQ ID NO:18)；
CiTNYCiiFWPFQSCiii(SEQ ID NO:19)；
CiTNYCiiFWPFYSCiii(SEQ ID NO:20)；
CiTNYCiiFWPFYLCiii(SEQ ID NO:21)；
CiTNYCiiFWPFAVCiii(SEQ ID NO:22)；
CiSEYCiiFWPFQYCiii(SEQ ID NO:23)；
CiAEYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:24)；
CiSAYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:25)；
CiSEYCiiFWAFYHCiii(SEQ ID NO:26)；
CiSEYCiiFWPFAHCiii(SEQ ID NO:27)；
CiSEYCiiFWPFYACiii(SEQ ID NO:28)；
CiSE[2,6-DiMeTyr]CiiFWPFYACiii(SEQ ID NO:29)；
CiSEYCii[4MePhe]WPFYACiii(SEQ ID NO:30)；
CiSEYCii[HPhe]WPFYACiii(SEQ ID NO:31)；
CiSEYCiiF[1Nal]PFYACiii(SEQ ID NO:32)；
CiSEYCiiF[2Nal]PFYACiii(SEQ ID NO:33)；
CiSEYCiiFW[NMeAla]FYACiii(SEQ ID NO:34)；
CiSEYCiiFWP[HPhe]YACiii(SEQ ID NO:35)；
CiSEYCiiFWP[4MePhe]YACiii(SEQ ID NO:36)；
CiSEYCiiF[1Nal]PFYHCiii(SEQ ID NO:37)；
CiSEYCiiFWP[HPhe]YHCiii(SEQ ID NO:38)；
CiSEYCiiF[1Nal]P[HPhe]YHCiii(SEQ ID NO:39)；
CiSEYCiiFWP[1Nal]YHCiii(SEQ ID NO:40)；
CiSEYCiiFW[Aib]FYHCiii(SEQ ID NO:41)；
CiSEYCiiF[6ClTrp]PFYHCiii(SEQ ID NO:42)；
CiSEYCiiFWPFFNCiii(SEQ ID NO:45)；
CiSEYCiiFWP[1Nal]YACiii(SEQ ID NO:46)；
CiSE[DOPA]CiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:47)；
CiSE[3FTyr]CiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:48)；
CiSEYCii[1Nal]WPFYHCiii(SEQ ID NO:49)；
CiSEYCii[4FPhe]WPFYHCiii(SEQ ID NO:50)；
CiSEYCii[2FPhe]WPFYHCiii(SEQ ID NO:51)；
CiSEYCii[3FPhe]WPFYHCiii(SEQ ID NO:52)；
CiSEYCiiF[Trp(Me)]PFYHCiii(SEQ ID NO:53)；
CiSEYCiiF[6MeTrp]PFYHCiii(SEQ ID NO:54)；
CiSEYCiiF[5FTrp]PFYHCiii(SEQ ID NO:55)；
CiSEYCiiF[6FTrp]PFYHCiii(SEQ ID NO:56)；
CiSEYCiiF[3MePhe]PFYHCiii(SEQ ID NO:57)；
CiSEYCiiF[2Nal]PFYHCiii(SEQ ID NO:58)；
CiSEYCiiF[AzaTrp]PFYHCiii(SEQ ID NO:59)；
CiSEYCiiF[CF3Phe]PFYHCiii(SEQ ID NO:60)；
CiSEYCiiF[2MePhe]PFYHCiii(SEQ ID NO:61)；
CiSEYCiiFW[Pip]FYHCiii(SEQ ID NO:62)；
CiSEYCiiFW[44DFP]FYHCiii(SEQ ID NO:63)；
CiSEYCiiFW[Aze]FYHCiii(SEQ ID NO:64)；
CiSEYCiiFW[Cis-HyP]FYHCiii(SEQ ID NO:65)；
CiSEYCiiFWP[2MePhe]YHCiii(SEQ ID NO:66)；
CiSEYCiiFWP[4FPhe]YHCiii(SEQ ID NO:67)；
CiSEYCiiFWP[tBuAla]YHCiii(SEQ ID NO:68)；
CiSEYCiiFWPLYHCiii(SEQ ID NO:69)；
CiSEYCiiFWP[3MePhe]YHCiii(SEQ ID NO:70)；
CiSEYCiiFWP[44BPA]YHCiii(SEQ ID NO:71)；
CiSEYCiiFWP[2Nal]YHCiii(SEQ ID NO:72)；
CiSEYCiiFWPFWHCiii(SEQ ID NO:73)；
CiSEYCiiFWPF[4FPhe]HCiii(SEQ ID NO:74)；
CiSEYCiiFWPF[2Nal]HCiii(SEQ ID NO:75)；
CiSEYCiiFWPF[3tBuTyr]HCiii(SEQ ID NO:76)；
CiSEYCiiFWPF[1Nal]HCiii(SEQ ID NO:77)；
CiSEYCiiFWPFYNCiii(SEQ ID NO:78)；
Ci[dA]EYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:79)；
CiS[dA]YCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:80)；
CiSEYCiiFWPF[dA]HCiii(SEQ ID NO:81)；
CiSEYCiiFWPFY[dA]Ciii(SEQ ID NO:82)；
Ci[K(PYA)]EYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:83)；
CiS[K(PYA)]YCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:84)；
CiSEYCiiFWP[K(PYA)]YHCiii(SEQ ID NO:85)；
CiSEYCiiFWPF[K(PYA)]HCiii(SEQ ID NO:86)；
CiSEYCiiFWPFY[K(PYA)]Ciii(SEQ ID NO:87)；
CiSEYCiiFWP[HPhe]QYCiii(SEQ ID NO:88)；
CiSEYCiiFWP[1Nal]QYCiii(SEQ ID NO:89)；
CiDEYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:90)；
CiEEYCiiFWPFYHCiii(SEQ ID NO:91)；
CiSEYCiiYWPFYHCiii(SEQ ID NO:92)；
CiSEYCii[4Pal]WPFYHCiii(SEQ ID NO:93)；
CiSEYCiiFWPYYHCiii(SEQ ID NO:94)；
CiSEYCiiFWP[4Pal]YHCiii(SEQ ID NO:95)；
CiSEYCiiFWPFDHCiii(SEQ ID NO:96)；
CiSEYCiiFWPFEHCiii(SEQ ID NO:97)；
CiSEYCiiFWPFYQCiii(SEQ ID NO:98)；
CiSEYCiiFWPFYDCiii(SEQ ID NO:99)；
CiSEYCiiFWPFYECiii(SEQ ID NO:100)；
CiSEYCiiFWPFY[HArg]Ciii(SEQ ID NO:101)；和
CiSEYCiiFWPFYFCiii(SEQ ID NO:102)；
其中Ci、Cii和Ciii分别代表第一、第二和第三半胱氨酸残基或其药学上可接受的盐，
具体地，其中SEQ ID NO：43的肽配体包含分子支架TATA，并且肽配体包含N-和/或C-末端添加物，并且选自：A-(SEQ ID NO:1)-A-[Sar6]-[KBiot](本文称为BCY15059)；
A-(SEQ ID NO:1)-A-[Sar6]-[KFl](本文称为BCY15263)；
A-(SEQ ID NO:1)-A(本文称为BCY16054)；
A-(SEQ ID NO:1)-A-[K(PYA)](本文称为BCY16821)；
[K(PYA)]-(SEQ ID NO:1)(本文称为BCY20042)；
Ac-(SEQ ID NO:1)(本文称为BCY18217)；
Ac-(SEQ ID NO:1)-[K(PYA)](本文称为BCY20085)；
Ac-A-(SEQ ID NO:1)-A(本文称为BCY18218)；
A-(SEQ ID NO:2)-A(本文称为BCY17669)；
Ac-(SEQ ID NO:2)(本文称为BCY20084)；
A-(SEQ ID NO:3)-A(本文称为BCY17670)；
Ac-(SEQ ID NO:3)(本文称为BCY20082)；
A-(SEQ ID NO:4)-A(本文称为BCY17671)；
A-(SEQ ID NO:5)-A(本文称为BCY17673)；
A-(SEQ ID NO:6)-A(本文称为BCY17674)；
A-(SEQ ID NO:7)-A(本文称为BCY17675)；
A-(SEQ ID NO:8)-A(本文称为BCY19766)；
A-(SEQ ID NO:9)-A(本文称为BCY19767)；
Ac-(SEQ ID NO:9)(本文称为BCY20221)；
A-(SEQ ID NO:10)-A(本文称为BCY19768)；
A-(SEQ ID NO:11)-A(本文称为BCY19769)；
A-(SEQ ID NO:12)-A(本文称为BCY19770)；
A-(SEQ ID NO:13)-A(本文称为BCY19771)；
A-(SEQ ID NO:14)-A(本文称为BCY19772)；
A-(SEQ ID NO:15)-A(本文称为BCY19776)；
Ac-(SEQ ID NO:15)(本文称为BCY20222)；
A-(SEQ ID NO:16)-A(本文称为BCY19777)；
A-(SEQ ID NO:17)-A(本文称为BCY19778)；
A-(SEQ ID NO:18)-A(本文称为BCY19779)；
A-(SEQ ID NO:19)-A(本文称为BCY19780)；
A-(SEQ ID NO:20)-A(本文称为BCY19781)；
A-(SEQ ID NO:21)-A(本文称为BCY19782)；
A-(SEQ ID NO:22)-A(本文称为BCY19783)；
A-(SEQ ID NO:23)-A(本文称为BCY19784)；
Ac-(SEQ ID NO:23)(本文称为BCY20220)；
A-(SEQ ID NO:24)-A(本文称为BCY18220)；
A-(SEQ ID NO:25)-A(本文称为BCY18221)；
A-(SEQ ID NO:26)-A(本文称为BCY18225)；
A-(SEQ ID NO:27)-A(本文称为BCY18227)；
A-(SEQ ID NO:28)-A(本文称为BCY18228)；
Ac-(SEQ ID NO:28)(本文称为BCY19293)；
Ac-(SEQ ID NO:29)(本文称为BCY19295)；
Ac-(SEQ ID NO:30)(本文称为BCY19298)；
Ac-(SEQ ID NO:31)(本文称为BCY19300)；
Ac-(SEQ ID NO:32)(本文称为BCY19294)；
Ac-(SEQ ID NO:33)(本文称为BCY19296)；
Ac-(SEQ ID NO:34)(本文称为BCY19303)；
Ac-(SEQ ID NO:35)(本文称为BCY19301)；
Ac-(SEQ ID NO:36)(本文称为BCY19299)；
Ac-(SEQ ID NO:37)(本文称为BCY19669)；
Ac-(SEQ ID NO:38)(本文称为BCY19667)；
Ac-(SEQ ID NO:39)(本文称为BCY19672)；
Ac-(SEQ ID NO:40)(本文称为BCY19668)；
Ac-(SEQ ID NO:41)(本文称为BCY19670)；
Ac-(SEQ ID NO:42)(本文称为BCY19671)；
A-(SEQ ID NO:45)-A(本文称为BCY17672)；
Ac-(SEQ ID NO:46)(本文称为BCY20722)；
Ac-(SEQ ID NO:47)(本文称为BCY20045)；
Ac-(SEQ ID NO:48)(本文称为BCY20044)；
Ac-(SEQ ID NO:49)(本文称为BCY20054)；
Ac-(SEQ ID NO:50)(本文称为BCY20053)；
Ac-(SEQ ID NO:51)(本文称为BCY20051)；
Ac-(SEQ ID NO:52)(本文称为BCY20052)；
Ac-(SEQ ID NO:53)(本文称为BCY20059)；
Ac-(SEQ ID NO:54)(本文称为BCY20060)；
Ac-(SEQ ID NO:55)(本文称为BCY20058)；
Ac-(SEQ ID NO:56)(本文称为BCY20057)；
Ac-(SEQ ID NO:57)(本文称为BCY20064)；
Ac-(SEQ ID NO:58)(本文称为BCY20056)；
Ac-(SEQ ID NO:59)(本文称为BCY20062)；
Ac-(SEQ ID NO:60)(本文称为BCY20065)；
Ac-(SEQ ID NO:61)(本文称为BCY20063)；
Ac-(SEQ ID NO:62)(本文称为BCY20069)；
Ac-(SEQ ID NO:63)(本文称为BCY20066)；
Ac-(SEQ ID NO:64)(本文称为BCY20068)；
Ac-(SEQ ID NO:65)(本文称为BCY20067)；
Ac-(SEQ ID NO:66)(本文称为BCY20071)；
Ac-(SEQ ID NO:67)(本文称为BCY20073)；
Ac-(SEQ ID NO:68)(本文称为BCY20074)；
Ac-(SEQ ID NO:69)(本文称为BCY20070)；
Ac-(SEQ ID NO:70)(本文称为BCY20072)；
Ac-(SEQ ID NO:71)(本文称为BCY20075)；
Ac-(SEQ ID NO:72)(本文称为BCY20076)；
Ac-(SEQ ID NO:73)(本文称为BCY20077)；
Ac-(SEQ ID NO:74)(本文称为BCY20078)；
Ac-(SEQ ID NO:75)(本文称为BCY20079)；
Ac-(SEQ ID NO:76)(本文称为BCY20080)；
Ac-(SEQ ID NO:77)(本文称为BCY20081)；
Ac-(SEQ ID NO:78)(本文称为BCY20083)；
Ac-(SEQ ID NO:79)(本文称为BCY20086)；
Ac-(SEQ ID NO:80)(本文称为BCY20087)；
Ac-(SEQ ID NO:81)(本文称为BCY20093)；
Ac-(SEQ ID NO:82)(本文称为BCY20094)；
Ac-(SEQ ID NO:83)(本文称为BCY20095)；
Ac-(SEQ ID NO:84)(本文称为BCY20096)；
Ac-(SEQ ID NO:85)(本文称为BCY20101)；
Ac-(SEQ ID NO:86)(本文称为BCY20102)；
Ac-(SEQ ID NO:87)(本文称为BCY20103)；
Ac-(SEQ ID NO:88)(本文称为BCY20223)；
Ac-(SEQ ID NO:89)(本文称为BCY20224)；
Ac-(SEQ ID NO:90)(本文称为BCY20563)；
Ac-(SEQ ID NO:91)(本文称为BCY20564)；
Ac-(SEQ ID NO:92)(本文称为BCY20566)；
Ac-(SEQ ID NO:93)(本文称为BCY20567)；
Ac-(SEQ ID NO:94)(本文称为BCY20568)；
Ac-(SEQ ID NO:95)(本文称为BCY20569)；
Ac-(SEQ ID NO:96)(本文称为BCY20570)；
Ac-(SEQ ID NO:97)(本文称为BCY20571)；
Ac-(SEQ ID NO:98)(本文称为BCY20572)；
Ac-(SEQ ID NO:99)(本文称为BCY20573)；
Ac-(SEQ ID NO:100)(本文称为BCY20574)；
Ac-(SEQ ID NO:101)(本文称为BCY20575)；和
Ac-(SEQ ID NO:102)(本文称为BCY20576)
其中Ac代表乙酰基，Sar代表肌氨酸，KBiot代表生物素化的赖氨酸，KFl代表荧光素化的赖氨酸并且PYA代表戊炔酸。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的肽配体，其中所述药学上可接受的盐选自游离酸或钠盐、钾盐、钙盐或铵盐。
7.一种多聚结合复合物，其包含至少两种根据权利要求1至6中任一项所述的肽配体。
8.根据权利要求7所述的多聚结合复合物，其包含式(I)的化合物：
其中CHM代表中央铰链部分；
双环代表根据权利要求1至6中任一项所述的双环肽配体；和
m代表选自2至10，例如3至10，特别是2、3或4的整数。
9.根据权利要求8所述的多聚结合复合物，其中m代表2并且CHM是式(A)的基序：
其中BCY代表根据权利要求1至6中任一项所述的肽配体并且n代表1至50，
例如BCY18117和BCY18119：
其中BCY代表根据权利要求5所述的BCY16821并且n代表10(BCY18119)和23(BCY18117)。
10.根据权利要求8所述的多聚结合复合物，其中m代表3并且CHM是式(B)的基序：
其中BCY代表根据权利要求1至6中任一项所述的双环肽配体并且n代表1至50，
例如BCY18118和BCY18122：
其中BCY代表根据权利要求5所述的BCY16821并且n代表10(BCY18122)或23(BCY18118)。
11.根据权利要求8所述的多聚结合复合物，其中m代表4并且CHM是式(C)的基序：
其中BCY代表根据权利要求1至6中任一项所述的双环肽配体并且n代表1至50，
例如BCY18120和BCY18121：
其中BCY代表根据权利要求5所述的BCY16821并且n代表10(BCY18121)或23(BCY18120)。
12.一种药物组合物，其包含与一种或多种药学上可接受的赋形剂组合的根据权利要求1至6中任一项所述的肽配体或根据权利要求7至11中任一项所述的多聚结合复合物。
13.根据权利要求1至11中任一项所述的肽配体或根据权利要求7至11中任一项所述的多聚结合复合物或根据权利要求12所述的药物组合物，其用于预防、抑制或治疗由TREM2介导的疾病或病症。
14.根据权利要求13所述使用的肽配体，其中所述由TREM2介导的疾病或病症选自痴呆、额颞叶痴呆、阿尔茨海默病、Nasu-Hakola病和多发性硬化症。
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