CN117177752A

CN117177752A - 用于治疗mpnst的化合物和组合物

Info

Publication number: CN117177752A
Application number: CN202280029051.XA
Authority: CN
Inventors: 郝淮湘; S·E·穆迪; C·普拉提拉斯; J·王
Original assignee: Novartis AG; Johns Hopkins University
Current assignee: Novartis AG; Johns Hopkins University
Priority date: 2021-05-05
Filing date: 2022-04-28
Publication date: 2023-12-05
Also published as: WO2022234409A1; JP2024517788A; TW202308631A; EP4333847A1; US20240238284A1

Abstract

本发明涉及包含SHP2抑制剂和CDK4/6抑制剂的药物组合；包含该药物组合的药物组合物；以及使用此类组合和组合物在治疗或预防其中SHP2抑制剂与CDK4/6抑制组合是有益的病症中、例如在治疗NF‑1相关的MPNST中的方法。

Description

用于治疗MPNST的化合物和组合物

技术领域

本发明涉及SHP2抑制剂、包含SHP2抑制剂和CDK4/6抑制剂的药物组合、以及包含MEK抑制剂和CDK4/6抑制剂的药物组合；包含它们的药物组合物；以及使用此类化合物、组合和组合物在治疗其中SHP2抑制或CDK4/6抑制与SHP2抑制或MEK抑制组合是有益的病症中、例如在治疗恶性外周神经鞘瘤(MPNST)中的方法。

背景技术

恶性外周神经鞘瘤(MPNST)是罕见的、侵袭性软组织肉瘤，具有高度未满足的临床需求，尤其是在转移性或不可切除性情况下。尽管软组织肉瘤化疗方案可以提供有限的益处，但还没有针对该适应证的标准疗法。MPNST可以散发性地发生(约45％)，与神经纤维瘤病1型(约45％)相关，或与先前的放射疗法相关(约10％)。神经纤维瘤病1型(NF1)是常见的神经遗传综合征，其特征在于神经认知效应、发展为良性和恶性肿瘤的倾向、皮肤的和其他身体的表现、以及30％-50％的患者中的丛状神经纤维瘤(pNF)。pNF是恶性对应物(恶性外周神经鞘瘤(MPNST))的前体肿瘤，并且其本身可能是引起疼痛、毁容和功能障碍的实质原因。

TNO155是含有蛋白酪氨酸磷酸酶-2(SHP2，由PTPN11基因编码)的口服生物可利用的Src同源-2结构域变构抑制剂，该蛋白酪氨酸磷酸酶-2将来自激活的受体酪氨酸激酶(RTK)的信号转导到下游途径(包括细胞外信号调节激酶(ERK)途径)。SHP2还涉及免疫检查点和细胞因子受体信号传导。TNO155已在多种RTK依赖性人癌细胞系和体内肿瘤异种移植物中显示出功效。

细胞周期蛋白D蛋白在癌细胞分裂中起关键作用并且与CDK4和CDK6蛋白激酶复合以通过高磷酸化和激活视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)促进G1至S期细胞周期进程。瑞博西尼抑制Rb的CDK4/6特异性磷酸化，从而阻止G1期中的细胞周期进程。细胞周期蛋白D1是突变EGFR和其他RTK下游信号传导的效应物，表明细胞周期蛋白D1-CDK4/6轴在RTK的下游增殖中起重要作用。

SHP2抑制、SHP2和CDK4/6抑制剂的组合、或CDK4/6和MEK抑制剂的组合在MPNST中具有活性并且产生持久的应答，代表了患有转移性或不可切除性MPNST的患者的一种新颖治疗策略。

发明内容

本发明提供了用于治疗转移性或不可切除性MPNST的SHP2抑制剂。

在另一实施例中，本发明提供了药物组合物，该药物组合物包含：

(a)SHP2抑制剂和(b)CDK4/6抑制剂，用于治疗MPNST。

(a)CDK4/6抑制剂和(b)MEK抑制剂，用于治疗MPNST。

SHP2i+CDK4/6i或CDK4/6i+MEKi的组合在本文中也将称为“本发明的组合”。

在本发明的组合的另一实施例中，SHP2i+CDK4/6i或CDK4/6i+MEKi在同一配制品中。

在本发明的组合的另一实施例中，SHP2i+CDK4/6i或CDK4/6i+MEKi在分开的配制品中。

在另一实施例中，本发明的组合用于同时或依序(以任何顺序)施用。

在另一实施例中是用于治疗有需要的患者的MPNST(散发性MPNST，或NF1相关的MPNST或与放射疗法相关的MPNST)的方法，该方法包括向该患者施用治疗有效量的SHP2i或SHP2i+CDK4/6i或CDK4/6i+MEKi的组合。

在另一个实施例中，SHP2i或SHP2i+CDK4/6i或CDK4/6i+MEKi的组合提供了在制造用于治疗有需要的患者的MPNST(散发性MPNST，或NF1相关的MPNST或与放射疗法相关的MPNST)的药物中的用途。

在另一实施例中是药物组合物，该药物组合物包含本发明的组合。

在另一个实施例中，药物组合物进一步包含一种或多种药学上可接受的赋形剂。

附图说明

图1示出了PDX模型JH-2-031、WU-225、WU-386、WU-545、JH-2-079和JH-2-002中SHP2i(TNO155)+CDK4/6i(瑞博西尼)的组合的结果。

图2示出了PDX模型JH-2-031、WU-225、WU-386、WU-545和JH-2-079中CDK4/6i(瑞博西尼)和MEKi(曲美替尼)的组合的结果。

图3示出了CDK4/6i(瑞博西尼)+SHP2i(TNO155)的组合在十个天然NF1-MPNST细胞系和两个曲美替尼抗性细胞系(ST8814Res和NF90.8Res)中的结果(作为热图)。

图4示出了CDK4/6i(瑞博西尼)+SHP2i(TNO155)的组合在11个NF1-MPNST细胞系中的结果。

定义

除非另外说明，否则上文和下文中使用的通用术语优选在本披露的上下文中具有以下含义，其中无论在什么情况下使用的更通用的术语可以彼此独立地由更具体的定义代替或保留，从而定义本发明的更详细实施例：

如本文所用，术语“治疗(treating或treatment)”包含解除、减轻或缓解患者的至少一种症状或者实现疾病进展延迟的治疗。例如，治疗可以是减弱障碍的一种或几种症状或者完全根除障碍(例如NF-1相关MPNST)。在本披露的含义范围内，术语“治疗”还表示阻止、延迟发作(即在疾病的临床表现之前的时间段)和/或降低疾病发展或疾病恶化的风险。

除非另外指明，否则术语“包含”和“包括”在本文中以其开放式和非限制性的含义使用。

除非本文另外指示或与上下文明显矛盾，否则在描述本发明的上下文中(尤其是下文权利要求的上下文中)，术语“一个/一种(a)”和“一个/一种(an)”和“该/所述(the)”以及相似的指示语应解释为包括单数和复数两者。当将复数形式用于化合物、盐等时，这也意指单一化合物、盐等。

术语“组合疗法”或“与……组合”是指施用两种或更多种治疗剂以治疗在本披露中描述的病症或障碍(例如散发性MPNST，或NF1相关的MPNST或与放射疗法相关的MPNST)。这种施用涵盖以基本上同时的方式共同施用这些治疗剂，如以具有固定比率的活性成分的单个胶囊施用。可替代地，这种施用涵盖在多个容器中或在每种活性成分的独立容器(例如，胶囊、粉末和液体)中共同施用。可以在施用之前将粉末和/或液体重构或稀释至所期望的剂量。另外，这种施用也涵盖在大致相同的时间或在不同的时间以依序方式使用每种类型的治疗剂。在任何一种情况下，治疗方案将在治疗本文所述的病症或障碍方面提供药物组合的有益效果。

组合疗法可以提供“协同”并且证明是“协同的”，即，当活性成分一起使用时所实现的效应大于由分别使用这些化合物所产生的效应的总和。当将活性成分为下述情形时可以获得协同效应：(1)共同配制并以组合的单位剂量配制品的形式同时施用或递送；(2)以分开的配制品的形式交替或平行递送；或(3)通过一些其他方案进行。当以交替疗法递送时，可以在依序(例如通过在单独注射器中不同的注射)施用或递送化合物时获得协同效应。通常，在交替疗法期间，将有效剂量的每种活性成分依序地即顺次地施用，而在组合疗法中，将有效剂量的两种或更多种活性成分一起施用。

如本文所用，术语“药物组合”是指在一个剂量单位形式中的固定组合、或用于组合施用的非固定组合或成套试剂盒(kit of parts)，其中两种或更多种治疗剂可以在同一时间独立地施用或在时间间隔内分别施用，特别地其中这些时间间隔允许组合配偶体显示合作性例如协同效应。

术语“SHP2i”包括但不限于TNO155、JAB-3068、JAB-3312、RMC-4630(或美国授权专利10,590,090中含有的任何SHP2抑制剂)、RLY-1971、BBP-398(IACS-15509)、ERAS-601和PF-07284892(ARRY-558)。

术语“CDK4/6i”包括但不限于瑞博西尼、帕博西尼和阿贝西利。

术语“MEKi”包括但不限于曲美替尼、考比替尼、贝美替尼、米达替尼(mirdametinib)和司美替尼。

如本文所用，术语“协同效应”是指两种治疗剂(例如像作为SHP2抑制剂的化合物TNO155、和作为CDK4/6抑制剂的瑞博西尼)的作用，以产生如下效果，例如减缓NF-1相关MPNST或其症状的症状进展，这比自身施用的每种药物的效果的简单加和要大。可以例如使用合适的方法计算协同效应，这些合适的方法如Sigmoid-Emax方程(Holford,N.H.G.和Scheiner,L.B.,Clin.Pharmacokinet.[临床药代动力学]6:429-453(1981))、Loewe可加性方程(Loewe,S.和Muischnek,H.,Arch.Exp.Pathol Pharmacol.[实验病理学与药理学档案]114:313-326(1926))以及中效方程(Chou,T.C.和Talalay,P.,Adv.Enzyme Regul.[酶调控研究进展]22:27-55(1984))。上面所指的每个方程都可以应用于实验数据以生成相应的图以帮助评估药物组合的效果。与上文提到的方程相关的相应的图分别是浓度-效果曲线、等效线图曲线和组合指数曲线。

本发明的特定组合(例如，TNO155和瑞博西尼)还旨在表示未经标记的形式以及化合物的同位素标记形式。同位素标记的化合物的一个或多个原子被具有选定原子质量或质量数的原子取代。可以掺入TNO155和瑞博西尼的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧和氯的同位素，例如²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、³⁵S、³⁶Cl。本发明包括同位素标记的TNO155和瑞博西尼，例如其中存在放射性同位素(如³H和¹⁴C)或非放射性同位素(如²H和¹³C)。同位素标记的TNO155和瑞博西尼可用于代谢研究(用¹⁴C)、反应动力学研究(例如用²H或³H)、检测或成像技术，例如正电子发射断层扫描(PET)或单光子发射计算机断层扫描(SPECT)，包括药物或底物组织分布测定，或用于患者的放射治疗。本发明的同位素标记的化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术或与在使用适当的同位素标记的试剂的所附实例中所述的那些类似的方法来制备。

此外，用较重的同位素，特别是氘(即，²H或D)取代可以提供来源于更大的代谢稳定性(例如，体内半衰期延长或剂量需求减少或治疗指数改进)的某些治疗优点。应当理解，在此上下文中，氘可以被认为是TNO155或瑞博西尼的取代基。这种较重的同位素(特别是氘)的浓度可以由同位素富集因子来定义。如本文所用，术语“同位素富集因子”意指指定同位素的同位素丰度与天然丰度之间的比率。如果TNO155或瑞博西尼中的取代基指示氘，这种化合物具有针对每个指定的氘原子的同位素富集因子为至少3500(在每个指定的氘原子上52.5％氘掺入)、至少4000(60％氘掺入)、至少4500(67.5％氘掺入)、至少5000(75％氘掺入)、至少5500(82.5％氘掺入)、至少6000(90％氘掺入)、至少6333.3(95％氘掺入)、至少6466.7(97％氘掺入)、至少6600(99％氘掺入)、或至少6633.3(99.5％氘掺入)。

具体实施方式

在一个实施例中是治疗恶性外周神经鞘瘤的方法，该方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的SHP2抑制剂。

在另一个实施例中，恶性外周神经鞘瘤是转移性的、不可切除的、散发性的、与神经纤维瘤病1型相关或与放射疗法相关。

在另一个实施例中，SHP2抑制剂选自TNO155、SHP099、JAB-3068、JAB-3312、RMC-4630(或美国授权专利10,590,090中含有的任何SHP2抑制剂)、RLY-1971、BBP-398(IACS-15509)、ERAS-601和PF-07284892(ARRY-558)。

在另一个实施例中，SHP2抑制剂是(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺或其药学上可接受的盐。

在另一个实施例中，药用盐是琥珀酸盐。

在另一个实施例中，将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺以约1.5mg/天、或3mg/天、或6mg/天、或10mg/天、或20mg/天、或30mg/天、或40mg/天、或50mg/天、或60mg/天、或70mg/天、或80mg/天、或90mg/天、或100mg/天的剂量口服施用。

在另一个实施例中，给药方案选自连续的、2周施用/1周停用或3周施用/1周停用。

在另一实施例中是治疗恶性外周神经鞘瘤的方法，该方法包括向有需要的患者施用药物组合物，该药物组合物包含：(a)SHP2抑制剂；和(b)CDK4/6抑制剂。

在另一个实施例中，恶性外周神经鞘瘤是散发性的、与神经纤维瘤病1型相关或与放射疗法相关。

在另一个实施例中，将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺每日一次口服施用，其中给药方案选自连续的、2周施用/1周停用或3周施用/1周停用。

在另一个实施例中，将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺每日一次口服施用，其中方案是2周施用与1周停用的治疗。

在另一个实施例中，CDK4/6抑制剂选自瑞博西尼、帕博西尼和阿贝西利。

在另一个实施例中，CDK4/6抑制剂是7-环戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺或其药学上可接受的盐。

在另一个实施例中，将7-环戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺以约100mg/天、或200mg/天、或300mg/天、或400mg/天、或500mg/天、或600mg/天的剂量口服施用。

在另一个实施例中，将7-环戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺以600mg口服施用，持续21天，随后中断治疗7天。

在另一实施例中是治疗恶性外周神经鞘瘤的方法，该方法包括向有需要的患者施用药物组合物，该药物组合物包含：(a)MEK抑制剂；和(b)CDK4/6抑制剂。

在另一个实施例中，MEKi选自曲美替尼、考比替尼、贝美替尼、米达替尼和司美替尼。

在另一个实施例中，MEK抑制剂是N-(3-(3-环丙基-5-((2-氟-4-碘苯基)氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-1(2H)-基)苯基)乙酰胺或其药学上可接受的盐。

在另一个实施例中，以每日约0.5、1、1.5和2mg的剂量，每天口服施用N-(3-(3-环丙基-5-((2-氟-4-碘苯基)氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-1(2H)-基)苯基)乙酰胺二甲基亚砜。

在另一实施例中，本发明提供了选自以下的SHP2抑制剂：(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺(TNO155)或其药学上可接受的盐，具有以下结构：

用于治疗MPNST(散发性MPNST，或与NF1相关的或与放射疗法相关的MPNST)。

(a)SHP2抑制剂，该抑制剂选自：(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺(TNO155)或其药学上可接受的盐，具有以下结构：

以及

(b)7-环戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺(瑞博西尼)或其药学上可接受的盐，具有以下结构：

(a)7-环戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺(瑞博西尼)或其药学上可接受的盐，具有以下结构：

(b)N-(3-(3-环丙基-5-((2-氟-4-碘苯基)氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-1(2H)-基)苯基)乙酰胺(曲美替尼)，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，具有以下结构：

在一个实施例中是治疗MPNST(散发性MPNST，或与NF1相关的或与放射疗法相关的MPNST)的方法，该方法包括向有需要的患者施用药物组合物，该药物组合物包含(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺或其药学上可接受的盐。

在另一实施例中是治疗MPNST(散发性MPNST，或与NF1相关的或与放射疗法相关的MPNST)的方法，该方法包括将药物组合物与第二治疗剂组合施用于有需要的患者，该药物组合物包含(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺或其药学上可接受的盐。

在另一个实施例中，将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺或其药学上可接受的盐和第二治疗剂同时地、分开地或在一段时间内施用。

在另一个实施例中，施用于有需要的患者的(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺或其药学上可接受的盐对治疗MPNST(散发性MPNST，或与NF1相关的或与放射疗法相关的MPNST)是有效的。

在另一个实施例中，方法包括第二治疗剂。

在另一个实施例中，施用于有需要的受试者的(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺或其药学上可接受的盐和第二治疗剂的量对治疗MPSNT(散发性MPNST，或与NF1相关的或与放射疗法相关的MPNST)是有效的。

在另一个实施例中，第二治疗剂是CDK4/6抑制剂。

在另一个实施例中，将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺以20mg/天的剂量口服施用，按2周给药随后是1周停药的21天周期进行。

在另一个实施例中，将7-环戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺以200mg口服施用，持续21天。

在另一个实施例中，将7-环戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺以300mg口服施用，持续21天，随后中断治疗7天。

在另一实施例中是治疗MPNST(散发性MPNST、或与NF1相关的或与放射疗法相关的MPNST)的方法，该方法包括将药物组合物与瑞博西尼组合施用于有需要的患者以克服MEKi(曲美替尼)抗性，该药物组合物包含(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺或其药学上可接受的盐。

在另一实施例中是治疗MPNST(散发性MPNST、或与NF1相关的或与放射疗法相关的MPNST)的方法，该方法包括将药物组合物与瑞博西尼组合施用于有需要的患者，用于因其先前的良性肿瘤神经纤维瘤而接受MEK抑制剂治疗并产生获得性抗性的MPNST患者，该药物组合物包含(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺或其药学上可接受的盐。

在另一实施例中是治疗MPNST(散发性MPNST、或与NF1相关的或与放射疗法相关的MPNST)的方法，该方法包括将药物组合物与瑞博西尼组合施用于有需要的患者，用于对MEK抑制剂表现出内源性抗性的MPNST患者，该药物组合物包含(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺或其药学上可接受的盐。

药理学及效用

神经纤维瘤病1型(NF1)是最常见的遗传性肿瘤易感综合征之一，在全球范围内影响1:2500-3000个的个体。因此，受影响的个体开始生活时，在其体内的每个细胞中都有一个NF1基因的失活拷贝(种系突变)和一个功能拷贝。种系突变的存在增加了肿瘤形成的风险，这仅需要体细胞的剩余功能性NF1基因的丧失。

NF1特征在于神经认知效应、发展为良性和恶性肿瘤的倾向、皮肤的和其他身体的表现、以及30％-50％的患者中的丛状神经纤维瘤(pNF)。pNF是恶性对应物(恶性外周神经鞘瘤(MPNST))的前体肿瘤，并且其本身可能是引起疼痛、毁容和功能障碍的实质原因。从pNF转化为MPNST的总体终生风险接近10％，并且NF1患者发展为MPNST的年龄显著低于患有自发性MPNST的那些患者。

MPNST是罕见的、侵袭性软组织肉瘤，具有高度未满足的临床需求，尤其是在转移性或不可切除性情况下。尽管软组织肉瘤化疗方案可以提供有限的益处，但还没有针对该适应证的标准疗法。与治疗患有MPNST的患者相关的挑战包括他们对常规全身性化学疗法和放射疗法的相对不敏感性，以及他们的转移倾向。MPNST的唯一已知确切疗法是广泛负切缘手术切除，但是由于位置或大小、相关的手术发病率或远端转移的存在，这通常是不可行的。尽管有许多化学疗法和靶向药剂的临床试验，但是患者总生存期进展甚微。对其中将各种此类方案用作初始疗法(即一线)的12项研究的回顾性汇总分析显示，应答率为21％，中位无进展存活期为17周，并且中位总生存期为48周。鉴于化学疗法的有限的益处，已经在MPNST患者中探索了许多分子靶向疗法，结果令人沮丧。此类药剂最近的临床试验始终达到0％的客观应答率，据报道，中位总生存期大约为4-5个月。

MPNST通常由肿瘤抑制因子NF1的丧失表征，并且其发病率富集在常染色体显性遗传NF1种系丧失癌症易感综合征(神经纤维瘤病1型(NF1))患者中。据估计，NF1综合征患者MPNST的终生发病率为8％-13％，年发病率为1.6人/1000人，而美国普通群体中散发性MPNST的发病率为1.46人/百万人年。

在所有MPNST中，大约22％-50％发生在种系NF1丧失患者中，而其余的则是散发性的。先前的放射疗法是MPNST的风险因素，大约10％的MPNST发生在这种情况下。所有与NF1相关的MPNST以及大多数散发性或在先前放射疗法的情况中发生的MPNST由NF1的丧失表征，并且在每种情况下检测到的第二最常见的基因改变是肿瘤抑制因子的丧失。在种系NF1丧失患者中，CDKN2A的丧失被认为是恶性进展的早期步骤，发生在良性丛状神经纤维瘤向非典型神经纤维瘤的转变过程中，后者是MPNST的前体。

神经纤维瘤蛋白(NF1的基因产物)是RAS GTP酶活化蛋白(RAS-GAP)，参与将活性RAS-GTP水解成非活性RAS-GDP。其在近90％的MPNST中发生了遗传改变。因此，异常的RAS激活是NF1突变型癌症发病机制的基础。然而，尚不清楚单个RAS家族成员是否是在NF1缺陷型MPNST中激活的主要RAS，也不清楚在这种肿瘤类型中熟知的经典RAS家族成员HRAS、NRAS和KRAS的功能冗余程度。在很好地表征的RAS效应物途径中有RAF/MEK/ERK、PI3K/AKT和Ral-GDS信号传导。其中，ERK信号传导是关键的下游效应物，并且因此药理性MEK抑制的概念已经应用于MPNST的模型。MEK抑制剂(MEKi)司美替尼在71％的具有NF1相关pNF的儿童中导致部分应答(NCT01362803)。然而，MPNST对单剂MEKi的临床前应答是部分的。这表明需要更好地理解ERK和其他RAS效应物途径的作用。MPNST肿瘤发生中还已经牵涉到另外的信号传导途径，包括mTOR信号传导，并且已经提出了对这些途径的药理学抑制。此外，经由SUZ12或EED的功能丧失(LOF)，多梳抑制复合体-2(PRC2)的失活在MPNST中反复地并且特别地发生，但在其良性对应物pNF中没有发生，并且已经牵涉到RAS驱动的转录扩增。肿瘤抑制因子失活和致癌途径激活之间的复杂合作可能发生在NF1驱动的肿瘤发生中，并且抑制多于一种RAS效应物途径可能是完全抗肿瘤作用所必需的。

NF1基因失活和NF1蛋白(神经纤维瘤蛋白)表达丧失是大多数NF1-MPNST的特征。虽然NF1丧失对于MPNST的发展是必要的，但是对于恶性转化来说还不足。约50％的MPNST是散发性的(即，出现在没有种系NF1丧失并且因此未患NF1综合征的患者中)。大多数散发性MPNST在肿瘤中具有体细胞NF1丧失。

已经报道，TP53、CDKN2A和EED/SUZ12基因的改变是促进MPNST发展的协同次级遗传改变。然而，这些LOF改变中的每一个的分子靶向性代表一个独特的挑战。此外，转录分析研究已经揭示了细胞周期促进基因(包括RB1的负调节因子RABL6A)的表达上调。CDKN2A(编码p16 INK4a的基因)的丧失、RB的失活和细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)的过度激活表明小分子CDK4/6抑制剂(CDK4/6i)可能是治疗策略。然而，由于旁路机制(例如CDK2过度激活和E2F扩增)，使用CDK4/6i的单一疗法表现出有限的功效。其他研究表明细胞周期调节因子极光激酶A(AURKA)和极样(polo-like)激酶(PLK1)的上调，但是使用极光激酶或PLK1抑制剂的单剂治疗具有狭窄的治疗指数、适度的体内抗肿瘤活性，并且在人体试验中未观察到客观应答。此外，组合CDK4/6i和MEKi在黑素瘤、神经母细胞瘤、胰腺癌和KRAS突变型结直肠癌的临床前模型中显示出协同效应。鉴于D-细胞周期蛋白对RAS信号传导的依赖性和CDKN2A在MPNST中的反复丧失，CDK4/6i的细胞抑制作用可能会增强，从而在MPNST中与靶向上游RTK/RAS调节因子(SHP2)或下游RAS信号传导(例如ERK途径(MEKi))的药物一起诱导凋亡。

单独的MEK抑制剂在MPNST中无效，这促使探索使用MEKi和药剂的组合治疗剂，这些药剂靶向短期MEK抑制后出现的适应性变化的信号传导元件。对MEK和其他小分子抑制剂的“适应性抗性”涉及信号传导网络和非基因组旁路机制的动态变化，这些变化经由受体酪氨酸激酶(RTK)或其配体的基因转录诱导经常发生，从而导致短暂和部分应答。无法预测哪种RTK将作为对MEKi的信号传导适应而严重上调，这代表设计MEKi+RTKi的组合疗法中的挑战。

在NF1丧失的情况下，RAS-MAPK途径(充分验证的致癌驱动因子)由于RAS失活的损害而过度激活。SHP2是细胞质磷酸酶，该细胞质磷酸酶参与RAS GTP负载，加速RAS从非活性GDP结合态向活性GTP结合态的转变。因此，预期SHP2的抑制可对抗NF1丧失的RAS激活作用。

因此一种共同靶向代表来自上游RTK信号传导的汇合点的信号传导节点，同时抑制RAS效应物途径的策略成为必要，并且PTPN11/SHP2磷酸酶代表了这种有希望的靶点。SHP2是多种癌症模型中由RTK再激活和MEKi驱动的适应性抗性的中心节点。SHP2磷酸酶促进RAS-GEF介导的RAS-GTP负载、加速RAS从非活性GDP结合态向活性GTP结合态的转变、和RAS向发生RTK激活的细胞膜的募集，因此大多数RTK激活RAS/ERK途径需要SHP2磷酸酶。SHP2抑制抵消NF1丧失的RAS激活效应。NF1参与去激活RAS，而SHP2参与激活RAS。

因此，SHP2抑制(SHP2i)和组合SHP2i可以作为一种策略，用来克服对例如由于NF1丧失而导致RAS极度活跃的肿瘤中MEKi的信号传导适应。有必要设计合理的组合疗法，这些疗法抑制抑制剂诱导的途径再激活，以识别有效靶向NF1相关的MPNST的最佳治疗策略。

TNO155是野生型SHP2的同类首个变构抑制剂。SHP2是由两个N末端SH2结构域、一个经典的PTP结构域和一个C末端尾部组成的、泛表达的非受体蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)。磷酸酶活性被结合到PTP结构域(封闭构象)的两个SHP2结构域自身抑制。当受体酪氨酸激酶(RTK)激活时，SHP2被募集到质膜上，在此处与激活的RTK和许多衔接蛋白结合，通过激活RAS/ERK途径来传递信号传导。TNO155结合SHP2的非活性或“封闭”构象，从而阻止其开口进入活性构象。这就阻止了从激活的RTK到下游RAS/ERK途径的信号传导的转导。

TNO155已在多种RTK依赖性人癌细胞系和体内异种移植物中显示出功效。可以通过评估ERK信号传导途径中的生物标志物(如磷酸化ERK1/2(pERK)水平的降低和双特异性磷酸酶6(DUSP6)mRNA转录物的下调)测量SHP2抑制。在KYSE-520(食管鳞状细胞癌)和DETROIT-562(咽部鳞状细胞癌)癌细胞系中，体外pERK IC50分别为8nM(3.4ng/mL)和35nM(14.8ng/mL)，并且抗增殖IC50分别为100nM(42.2ng/mL)和470nM(198.3ng/mL)。TNO155的抗增殖作用揭示其在依赖RTK信号传导的癌细胞系中最为有效。在体内，通过口服施用TNO155(20mg/kg)抑制SHP2达到了DUSP6 mRNA转录物在EGFR依赖性DETROIT-562癌细胞系中降低大约95％并且当以每日两次方案给药时消退47％。剂量分级研究连同肿瘤DUSP6生物标志物的调节表明当至少80％的给药间隔获得50％ PD抑制时达到最大功效。鉴于癌细胞中ERK途径和CDK4/6复合物之间存在广泛串扰(cross-talk)，探究了TNO155与选择性CDK4/6抑制剂瑞博西尼的组合。

瑞博西尼(LEE011，)是一种口服生物可利用的、高选择性的细胞周期蛋白依赖性激酶4和6(CDK4/6)的小分子抑制剂。瑞博西尼已获得包括美国食品和药物管理局(U.S.FDA)和欧盟委员会在内的多个卫生当局的批准，作为初始基于内分泌的疗法，与芳香酶抑制剂(AI)组合用于治疗患有激素受体(HR)阳性、人表皮生长因子受体2(HER2)阴性的晚期或转移性乳腺癌(基于随机、双盲、安慰剂对照、国际临床试验(MONALEESA-2[CLEE011A2301]))的绝经后女性。在2018年7月18日，U.S.FDA扩展了瑞博西尼与AI组合(作为初始基于内分泌的疗法)的适应症，将患有HR阳性、HER2阴性的晚期或转移性乳腺癌的绝经前/围绝经期女性纳入。扩展的适应症还包括瑞博西尼与氟维司群组合用于(作为初始基于内分泌的疗法)患有HR阳性、HER2阴性的晚期或转移性乳腺癌，或在内分泌疗法后有疾病进展的绝经后女性(分别为MONALEESA-7[CLEE011E2301]和MONALEESA-3[CLEE011F2301])。全球卫生当局正在审查HR阳性、HER2阴性的晚期或转移性乳腺癌的另外的上市许可。用于治疗HR阳性乳腺癌患者的另外的III期临床试验以及其他几项I期或II期临床研究正在进行中。

在生化测定中，瑞博西尼抑制CDK4/细胞周期蛋白D1和CDK6/细胞周期蛋白D3酶复合物，其中IC₅₀值分别为0.01μM和0.039μM，同时与其他细胞周期蛋白依赖性激酶相比显示出对CDK4/6高度的选择性。在来源于不同癌症类型的40多种Rb阳性细胞系中，瑞博西尼抑制视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)磷酸化并干扰G1期至S期细胞周期进程。相反，在谱系匹配的Rb阴性细胞系中，没有观察到瑞博西尼对细胞周期进程的影响。

瑞博西尼已在肿瘤异种移植模型亚组(包括但不限于乳腺癌，黑素瘤，神经母细胞瘤，恶性横纹肌样、肺、胰腺和血液系统恶性肿瘤)中显示出体内抗肿瘤活性。此外，当瑞博西尼与抑制已知调节细胞周期蛋白D水平的信号传导途径(包括RAF、丝裂原激活蛋白激酶激酶(MEK)、磷酸肌醇3-激酶(PI3K)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)途径)的靶向剂组合时表现出抗肿瘤活性。

目前正在研究CTNO155B12101中研究TNO155与瑞博西尼的组合。

目前对NF1-MPNST的治疗选择有限，其中局部疾病的手术和放射疗法可降低局部复发的风险。使用细胞毒性化学疗法的唯一一项前瞻性研究显示，患有NF1的患者接受阿霉素和异环磷酰胺治疗后，应答率为约17％(5/29名受试者)，这表明MPNST对化学疗法的应答最低。已经报道了，使用各种化疗剂用于转移性疾病也有类似的应答。此外，许多在鼠Nf1MPNST临床前研究中非常有效的分子靶向疗法在转化为人类临床试验时已经被证明无效。据信，临床前研究向病床的不良转化反映了两个主要障碍：(1)目前的临床前模型不能反映在人类MPNST中观察到的遗传异质性谱，和(2)治疗可能基于分子亚型表现出不同的功效，目前没有使用单一的遗传模型来捕获这些亚型。通过产生患者源性模型，MPNST的分子亚型谱可以被更好地表征，以确定各种MPNST将如何对疗法产生应答。

为了解决这一关键问题，已经产生了一系列患者源性MPNST异种移植物，它们更广泛地反映了人类病症中的遗传异质性。产生PDX品系而不是传统细胞系的偏好已经受到两个科学原则的指导。首先，已经在早期传代中显示了PDX品系，用来反映亲代肿瘤。其次，认为PDX品系比传统细胞系更不易受遗传漂变的影响，部分原因是它们不在塑料上生长，并且被迫适应宿主之外的生长。

下面的实例1使用在免疫受损的NRG或NSG小鼠中增殖的产生的NF1-MPNST患者源性异种移植物(PDX)品系。它们带有在患有NF1的患者中看到的基因组改变谱，包括种系和体细胞NF1突变，以及CDKN2A的丧失、TP53突变、EED/SUZ12突变和许多拷贝数变化。下面的实例1中提交的临床前数据提供了SHP2抑制剂、TNO155和CDK4/6抑制剂瑞博西尼的组合在NF-1相关MPNST中发挥组合益处的证据。

药物组合物

在另一个方面，本发明提供了药学上可接受的组合物，这些组合物包含治疗有效量的TNO155和瑞博西尼，其与一种或多种药学上可接受的载体(添加剂)和/或稀释剂配制在一起。如下面详细描述的，本发明的药物组合物可特别配制用于固体或液体形式施用(包括适合口服施用的那些，例如浸液(水性或非水性溶液或悬浮液)、片剂(例如，针对口腔、舌下和全身吸收的那些)、大丸剂、粉剂、颗粒剂、糊剂(应用于舌))。

如本文所使用，短语“治疗有效量”是指包含本发明化合物的化合物、材料或组合物的量，其对于在动物中的至少一个细胞亚群中以适用于任何医学治疗的合理的受益/风险比产生一些所期望的治疗效果是有效的。

本文使用的短语“药学上可接受的”是指在合理的医学判断的范围，适合用于与人和动物的组织接触而不产生过度毒性、刺激、过敏反应、或其他问题或并发症，同时具有相称的合理受益/风险比的那些化合物、材料、组合物、和/或剂型。

如本文所用，短语“药学上可接受的载体”是指药学上可接受的材料、组合物或媒介物，如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、制造助剂(例如润滑剂、滑石镁、硬脂酸钙或硬脂酸锌或硬脂酸)或溶剂包封材料，参与将主题化合物从一个器官或身体的一部分运送或运输到另一个器官或身体的一部分。在与配制品的其他成分相容并且对患者无害的意义上，每种载体必须是“可接受的”。可用作药学上可接受的载体的材料的一些实例包括：(1)糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；(4)粉状黄芪胶；(5)麦芽；(6)明胶；(7)滑石；(8)赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；(9)油类，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油、大豆油等；(10)二醇类，如丙二醇；(11)多元醇类，如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；(12)酯类，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)海藻酸；(16)无热原水；(17)等渗盐水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)pH缓冲溶液；(21)聚酯，聚碳酸酯和/或聚酸酐；以及(22)在药物配制品中使用的其他无毒相容物质。

如上文所述，本发明化合物的某些实施例可含有碱性官能团，例如氨基或烷基氨基，并且由此能够与药学上可接受的酸形成药学上可接受的盐。在这方面，术语“药学上可接受的盐”是指本发明的化合物的相对无毒的无机和有机酸加成盐。这些盐可以在施用媒介物或剂型制造过程中原位制备，或者通过使纯化的游离碱形式的本发明化合物与合适的有机或无机酸分别反应，并在随后的纯化期间分离由此形成的盐来制备。代表性盐包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、硝酸盐、乙酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、萘酸盐(napthylate)、甲磺酸盐、葡庚糖酸盐、乳糖醛酸盐和月桂基磺酸盐等。(参见例如Berge等人(1977)“Pharmaceutical Salts[药用盐]”,J.Pharm.Sci.[药物科学杂志]66:1-19)。

主题化合物的药学上可接受的盐包括化合物的常规的无毒盐或季铵盐，例如来自无毒的有机酸或无机酸。例如，此类常规无毒盐包括衍生自无机酸的那些，该无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、胺磺酸、磷酸、硝酸等；以及从有机酸制备的盐，该有机酸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、棕榈酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、磺胺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸、异硫磺酸等。例如，TNO155的药学上可接受的盐是琥珀酸盐。

在其他情况下，本发明的化合物可以含有一个或多个酸性官能团，并且因此能够与药学上可接受的碱形成药学上可接受的盐。在这些例子中，术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的相对无毒的无机和有机碱加成盐。这些盐也可以在施用媒介物或剂型制造过程中原位制备，或者通过使纯化的游离酸形式的化合物与合适的碱(例如，药学上可接受的金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐)与氨、或与药学上可接受的有机伯、仲或叔胺分别反应来制备。代表性的碱或碱土金属盐包括锂盐、钠盐、钾盐、钙盐、镁盐和铝盐等。可用于形成碱加成盐的代表性有机胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等(参见例如Berge等人，同上)。

在组合物中还可以存在润湿剂、乳化剂和润滑剂，如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂、释放剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂。

本发明的配制品包括适合于口服、鼻、局部(包括口腔和舌下)、直肠、阴道和/或肠胃外施用的那些。配制品可以方便地以单位剂型存在并且可以通过药学领域熟知的任何方法制备。可以与载体材料组合以产生单一剂型的活性成分的量将根据所治疗的宿主和特定的施用方式而变化。可以与载体材料组合以产生单一剂型的活性成分的量通常为产生治疗效果的化合物的量。通常，在百分之百的范围内，量的范围为从约0.1％至约99％的活性成分，优选从约5％至约70％，最优选从约10％至约30％。

在某些实施例中，本发明的配制品包含选自由以下组成的组的赋形剂：环糊精、纤维素、脂质体、胶束形成剂(例如胆汁酸)和聚合物载体(例如聚酯和聚酸酐)；和本发明的化合物。在某些实施例中，前述配制品使得本发明化合物在口服方面是生物可利用的。

制备这些配制品或组合物的方法包括将本发明的化合物与载体和任选的一种或多种辅助成分结合的步骤。通常，通过将本发明的化合物与液体载体或细碎固体载体或两者均匀且紧密地结合，并且然后如果需要，使产物成形来制备配制品。

适用于口服施用的本发明的配制品可以呈胶囊、扁囊剂、丸剂、片剂、锭剂(使用调味基质，通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄芪胶)、粉剂、颗粒剂的形式，或作为在水性或非水性液体中的溶液、悬浮液或固体分散体，或作为水包油或油包水液体乳剂，或作为酏剂或糖浆，或作为软锭剂(使用惰性基质，例如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶)，和/或作为漱口水等等，每一形式含有预定量的本发明的化合物作为活性成分。本发明的化合物还能以大丸剂、药糖剂或糊剂形式施用。

在本发明用于口服施用的固体剂型(胶囊、片剂、丸剂、糖衣丸、粉剂、颗粒剂、含片(trouches)等)中，将活性成分与以下混合：一种或多种药学上可接受的载体，如柠檬酸钠或磷酸二钙，和/或以下任何一种：(1)填充剂或增量剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；(2)粘合剂，例如像羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；(3)保湿剂，如甘油；(4)崩解剂，如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；(5)溶液阻滞剂，如石蜡；(6)吸收促进剂，如季铵化合物和表面活性剂，如泊洛沙姆和十二烷基硫酸钠；(7)润湿剂，例如像鲸蜡醇、单硬脂酸甘油酯和非离子表面活性剂；(8)吸收剂，如高岭土和膨润土；(9)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠、硬脂酸锌、硬脂酸钠、硬脂酸及其混合物；(10)着色剂；和(11)控释剂，如交聚维酮或乙基纤维素。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，药物组合物还可以包含缓冲剂。还可以使用此类赋形剂，如乳糖(lactose或milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等，将相似类型的固体组合物用作软壳和硬壳明胶胶囊中的填料。

片剂可以通过压缩或模制(任选地与一种或多种辅助成分一起)来制备。可以使用粘合剂(例如，明胶或羟丙基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如，羟基乙酸淀粉钠或交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂来制备压缩片剂。模制片剂可以通过在合适的机器中模制用惰性液体稀释剂润湿的粉状化合物的混合物来制备。

片剂和本发明的药物组合物的其他固体剂型(如糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂)可任选地进行刻痕或制备有包衣和外壳，例如肠溶包衣和药物配制领域熟知的其他包衣。也可以使用例如不同比例的羟丙基甲基纤维素将它们配制成使其中的活性成分缓慢或受控释放以提供所期望的释放曲线、其他聚合物基质、脂质体和/或微球。可以将它们配制用于快速释放，例如冷冻干燥。它们可以例如通过细菌截留过滤器滤过，或通过并入呈无菌固体组合物形式的灭菌剂来灭菌，这些无菌固体组合物可以在使用前立即溶解于无菌水或一些其他无菌可注射介质中。这些组合物也可以任选地包含遮光剂并且可以是如下组合物，该组合物在胃肠道的某一部分中，任选地以一种延迟的方式仅或者优先释放一种或多种活性成分。可利用的嵌入式组合物的实例包括聚合物质以及蜡。活性成分还可以是微囊化形式，如果适当的话，可包含一种或多种上述赋形剂。

用于口服施用本发明的化合物的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除了活性成分之外，液体剂型可以含有本领域常用的惰性稀释剂(例如像水或其他溶剂)、增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、醋酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油类(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃甲醇、聚乙二醇和脱水山梨醇脂肪酸酯，及其混合物。

除了惰性稀释剂之外，口服组合物还可包括辅助剂，例如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂、着色剂、芳香剂以及防腐剂。

除了含有活性化合物外，悬浮液还可以含有悬浮剂如，例如乙氧化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇、微晶纤维素、偏氢氧化铝(aluminum metahydroxide)、膨润土、琼脂-琼脂和黄芪胶，及其混合物。

可以在本发明的药物组合物中使用的合适的水性和非水性载体的实例包括水、乙醇、多元醇(如，甘油、丙二醇、聚乙二醇等)及其合适的混合物、植物油(如橄榄油)和可注射的有机酯(如油酸乙酯)。适当流动性可以例如通过以下方式来维持：通过使用包衣材料(如卵磷脂)，在分散体的情况下通过维持所需粒度，以及通过使用表面活性剂。

这些组合物也可以含有辅助剂如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。可以通过包括各种抗细菌剂和抗真菌剂(例如，对羟苯甲酸酯、三氯叔丁醇、山梨酸苯酚等)确保阻止微生物对主题化合物起作用。还令人希望的是在组合物中包括等渗剂，如糖、氯化钠等。

当将本发明的化合物作为药物向患者施用时，它们可以本身或作为药物组合物给予，该药物组合物含有例如与药学上可接受的载体组合的0.1％至99％(更优选10％至30％)的活性成分。

通过本领域技术人员已知的常规方法将本发明的化合物(其能以合适的水合形式使用)和/或本发明的药物组合物配制成药学上可接受的剂型。

可以改变本发明药物组合物中活性成分的实际剂量水平，以便获得一定量的活性成分，该活性成分的量有效地实现对于特定的患者、组合物和施用方式的所期望的治疗应答，而对患者没有毒性。

选择的剂量水平将取决于各种因素，包括所使用的本发明的特定化合物或其酯、盐或酰胺的活性，施用途径，施用时间，所采用的特定化合物的排泄率或代谢率，吸收的速度和程度，治疗的持续时间，与所采用的特定化合物组合使用的其他药物、化合物和/或材料，正被治疗的患者的年龄、性别、体重、病症、一般健康状况和先前病史，以及在医学领域中熟知的类似因素。

具有本领域普通技术的医师可以容易地确定并开出所需的药物组合物的有效量。例如，医师能以低于实现所期望的治疗效果所需的水平开始给药药物组合物中使用的本发明的化合物，并逐渐增加剂量直至达到所期望的效果。

通常，本发明的组合的合适日剂量将是每种化合物有效产生治疗效果的最低剂量的量。这样的有效剂量通常将取决于上述因素。

在另一个方面，本发明提供了药学上可接受的组合物，这些药学上可接受的组合物包含治疗有效量的一种或多种上述主题化合物，其与一种或多种药学上可接受的载体(添加剂)和/或稀释剂配制在一起。

实例

TNO155、瑞博西尼和曲美替尼

根据WO 2015/107495中的实例69合成(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺(TNO155)。根据WO2010/020675中的实例74合成7-环戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺(瑞博西尼)。根据WO 2005/121142的实例4-1，合成N-(3-(3-环丙基-5-((2-氟-4-碘苯基)氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-1(2H)-基)苯基)乙酰胺(曲美替尼)。WO 2015/107495、WO 2010/020675和WO 2005/121142通过引用以其全文并入本文。

SHP2、MEK和CDK4/6是MPNST中RAS效应物信号传导的关键节点，并且这些分子的抑制剂组合可以具有协同抗肿瘤活性。在PDX模型中测试了TNO155单剂和组合疗法(TNO155+瑞博西尼)、(瑞博西尼+曲美替尼)的体内抗肿瘤作用和毒性(实例1)。

实例1

在NF1-MPNST患者源性异种移植物(PDX)模型中的TNO155单剂和TNO155+瑞博西尼或瑞博西尼和曲美替尼的组合益处

根据Dehrner等人,JCI Insight[JCI见解]2021；6(6):e146351和Pollard,K.等人,Sci Data[科学数据],2020；7:184，开发并且表征了实例1的PDX模型。所有实验均使用NRG(NOD-Rag1^无效IL2rg^无效、NOD ragγ)小鼠。

将SHP2i(TNO155(A)7.5mg/kg)和CDK4/6i(瑞博西尼(B)，75mg/kg，每日一次(每周5天)，以半人当量RP2D)和MEKi(曲美替尼(C)0.075mg/kg或0.15mg/kg，每日一次)，通过口服填喂法给予NRG小鼠。收集并分析肿瘤应答、生存期和毒性数据。为了形成肿瘤，将50％基质胶(Matrigel)(BD生物科学公司(BD Biosciences))中的100万-200万个NF1-MPNST PDX衍生细胞(JH-2-031、JH-2-079、JH-2-002、WU-225、WU-386或WU-545)皮下注射到4至6周龄雌性NRG小鼠中。一旦肿瘤开始形成，每周两次测量肿瘤并对小鼠进行称重。当肿瘤达到150-200mm³时开始给予药物。小鼠用媒介物、单剂(A或B或C)或组合(A+B或B+C)治疗长达42天。每个组由三至五只小鼠组成。使用下式计算肿瘤体积：V＝L×W²(π/6)，其中L＝最长直径，并且W＝宽度。

在五种体内PDX测试中，组合益处明显。尽管在治疗的最初4周期间，一些PDX模型对SHP2i单独或SHP2i+CDK4/6i显示出类似的应答，但发现由组合产生了更持续的生长抑制。对从各个队列中收集的终点治疗后4小时(4周)的WU-386肿瘤的药效学研究表明，单独使用SHP2i或SHP2i/CDK4/6i组合治疗的肿瘤中p-ERK水平降低，并且该组合导致比TNO155更强的p-ERK抑制。这证明了在NF1相关的MPNST的患者源性模型中，SHP2和CDK4/6的组合抑制是有效的，并且产生持久的应答，并且代表了患有MPNST的患者的新颖治疗策略。

实例2

TNO155单剂和TNO155+瑞博西尼的组合在天然NF1-MPNST细胞系和曲美替尼抗性系中的体外分析

将十个天然NF1-MPNST细胞系(ST8814Par、NF90.8Par、S462、NF96.2、NF10.1、NF11.1、JH-2-002、JH-2-031、JH-2-079和JH-2-103)和两个曲美替尼抗性系(ST8814Res和NF90.8Res)用DMSO、TNO155(0.3、1和3μM)、瑞博西尼(1和3μM)或其组合处理约1周。使用台盼蓝排除测定法(西格玛-奥德里奇公司(Sigma-Aldrich))对细胞数进行计数，并将其相对于DMSO对照归一化。图3示出了热图的结果。十个天然NF1-MPNST细胞系对TNO155单剂表现出部分敏感性，并且相对于单独的TNO155，TNO155+瑞博西尼的组合观察到更深的应答。证明TNO155单剂活性有限，然而，在两种MEKi-抗性细胞系模型中显示出组合益处。

实例3

将11个NF1-MPNST细胞系用DMSO、TNO155(0.3、1和3μM)、瑞博西尼(1和3μM)或其组合处理约2周。将细胞用PBS洗涤，用10％中性福尔马林缓冲液固定，然后用0.1％结晶紫染色。图4示出了TNO155和瑞博西尼在几个NF1-MPNST细胞系中具有组合益处。

在MPNST的体外细胞系模型以及体内患者源性异种移植物(PDX)MPNST模型中研究了TNO155和瑞博西尼的组合。在细胞系模型中，观察到两种单剂的抗肿瘤活性，这两种单剂的组合活性增强(参见图1-4)。从机制上讲，与单独的任何一种药物相比，TNO155和瑞博西尼的组合导致ERK信号传导和CDK4-细胞周期蛋白D1活性降低。在NF1相关的MPNST的体内患者源性异种移植物(PDX)模型中，TNO155作为单剂显示出显著的抗肿瘤活性，该抗肿瘤活性通过添加瑞博西尼在几个模型中得到增强。体外和体内观察表明，TNO155和瑞博西尼的组合使用产生了更深、更持久的应答，并且可以克服MEKi(曲美替尼)抗性。TNO155和瑞博西尼的组合可能成为潜在治疗方法，用于因其先前的良性肿瘤神经纤维瘤而接受MEK抑制剂治疗并已产生获得性抗性的MPNST患者，以及对MEK抑制剂表现出内源性抗性的MPNST患者。

应理解，本文所述的实例和实施例仅用于举例说明目的，其各种修饰或改变对于本领域技术人员将是明了的，并包括在本申请的精神和范围内和所附权利要求书的范围内。

Claims

1.一种治疗恶性外周神经鞘瘤的方法，所述方法包括向有需要的患者施用治疗有效量的SHP2抑制剂。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述恶性外周神经鞘瘤是转移性的、不可切除的、散发性的、与神经纤维瘤病1型相关或与放射疗法相关。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中所述SHP2抑制剂是(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺或其药学上可接受的盐。

4.如权利要求1-3所述的方法，其中将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺以约1.5mg/天、或3mg/天、或6mg/天、或10mg/天、或20mg/天、或30mg/天、或40mg/天、或50mg/天、或60mg/天、或70mg/天、或80mg/天、或90mg/天、或100mg/天的剂量口服施用。

5.如权利要求1-4所述的方法，其中所述给药方案选自连续的、2周施用/1周停用或3周施用/1周停用。

6.一种治疗恶性外周神经鞘瘤的方法，所述方法包括向有需要的患者施用药物组合物，所述药物组合物包含：(a)SHP2抑制剂；和(b)CDK4/6抑制剂。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述恶性外周神经鞘瘤是散发性的、与神经纤维瘤病1型相关或与放射疗法相关。

8.如权利要求6或7所述的方法，其中所述SHP2抑制剂是(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺或其药学上可接受的盐。

9.如权利要求6-8所述的方法，其中将(3S,4S)-8-(6-氨基-5-((2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫代)吡嗪-2-基)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-4-胺以约1.5mg/天、或3mg/天、或6mg/天、或10mg/天、或20mg/天、或30mg/天、或40mg/天、或50mg/天、或60mg/天、或70mg/天、或80mg/天、或90mg/天、或100mg/天的剂量口服施用。

10.如权利要求6-9所述的方法，其中所述给药方案选自连续的、2周施用/1周停用或3周施用/1周停用。

11.如权利要求6-10所述的方法，其中所述CDK4/6抑制剂是7-环戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺或其药学上可接受的盐。

12.如权利要求6-11所述的方法，其中将7-环戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺以约100mg/天、或200mg/天、或300mg/天、或400mg/天、或500mg/天、或600mg/天的剂量口服施用。

13.如权利要求6-12所述的方法，其中将7-环戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺以600mg口服施用，持续21天，随后中断治疗7天。

14.一种治疗恶性外周神经鞘瘤的方法，所述方法包括向有需要的患者施用药物组合物，所述药物组合物包含：(a)MEK抑制剂；和(b)CDK4/6抑制剂。

15.如权利要求14所述的方法，其中所述恶性外周神经鞘瘤是散发性的、与神经纤维瘤病1型相关或与放射疗法相关。

16.如权利要求14或15所述的方法，其中所述MEK抑制剂是N-(3-(3-环丙基-5-((2-氟-4-碘苯基)氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-1(2H)-基)苯基)乙酰胺或其药学上可接受的盐。

17.如权利要求14-16所述的方法，其中以每日约0.5、1、1.5和2mg的剂量，每天口服施用N-(3-(3-环丙基-5-((2-氟-4-碘苯基)氨基)-6,8-二甲基-2,4,7-三氧代-3,4,6,7-四氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-1(2H)-基)苯基)乙酰胺二甲基亚砜。

18.如权利要求14-17所述的方法，其中所述CDK4/6抑制剂是7-环戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺或其药学上可接受的盐。

19.如权利要求14-18所述的方法，其中将7-环戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺以约100mg/天、或200mg/天、或300mg/天、或400mg/天、或500mg/天、或600mg/天的剂量口服施用。

20.如权利要求14-19所述的方法，其中将7-环戊基-N,N-二甲基-2-((5-(哌嗪-1-基)吡啶-2-基)氨基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酰胺以600mg口服施用，持续21天，随后中断治疗7天。