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CN116803248B - 自交不亲和的双单倍体马铃薯品系及其选育方法和杂交马铃薯及其制种方法 - Google Patents

自交不亲和的双单倍体马铃薯品系及其选育方法和杂交马铃薯及其制种方法 Download PDF

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CN116803248B
CN116803248B CN202210258745.2A CN202210258745A CN116803248B CN 116803248 B CN116803248 B CN 116803248B CN 202210258745 A CN202210258745 A CN 202210258745A CN 116803248 B CN116803248 B CN 116803248B
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Shenzhen Institute Of Agricultural Genome Chinese Academy Of Agricultural Sciences Shenzhen Branch Of Guangdong Provincial Laboratory Of Lingnan Modern Agricultural Science And Technology
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Abstract

本申请涉及育种技术领域，特别涉及自交不亲和的双单倍体马铃薯及其选育方法和杂交马铃薯及其制种方法。该选育方法包括如下步骤：将携带杂合自交亲和基因的二倍体马铃薯与单倍体诱导系进行杂交，从杂交后代中筛选单倍体后代；从单倍体后代中筛选不含有自交亲和基因的单倍体后代；对不含有自交亲和基因的单倍体后代进行染色体加倍，获得自交不亲和的双单倍体马铃薯。采用该自交不亲和的双单倍体马铃薯作为母本进行制种，不仅可以避免去雄，而且还可实现杂交种不结果实，提高马铃薯产量。

Description

自交不亲和的双单倍体马铃薯品系及其选育方法和杂交马铃 薯及其制种方法
技术领域
本发明涉及育种技术领域，特别涉及自交不亲和的双单倍体马铃薯品系及其选育方法和杂交马铃薯及其制种方法。
背景技术
马铃薯是全球第四大主粮。但是相对于水稻、玉米等作物，马铃薯的遗传增益有限，主要是其四倍体的特性决定的。栽培马铃薯主要是同源四倍体，基因组高度杂合，遗传分析困难，导致育种周期长，品种更新慢。另外，现有马铃薯主要采用薯块进行无性繁殖，存在繁殖系数低、储运成本高、易感染病虫害等问题。为了解决马铃薯产业面临的结构性障碍，许多科学家呼吁开展杂交马铃薯育种，即用二倍体替代四倍体育种，加快育种速度，用杂交种子替代薯块繁殖，降低生产成本并减少病虫害传播，因此杂交育种将变革马铃薯的育种和繁殖方式(Jansky et al.,2016；Lindhout et al.,2011；Stokstad,2019；Zhang etal.,2021)。
杂交马铃薯育种的主要流程是首先选择合适的二倍体起始材料，打破自交不亲和，然后通过多代自交获得基因组高度纯合的自交系，最后将不同的自交系进行杂交产生F1杂交组合，从中筛选出性状优良的杂交种。因为作为杂交亲本的自交系是自交亲和的，不同自交系之间杂交时需要将母本去雄，以避免母本自交的种子混进杂交种中，造成杂交种纯度不够，影响了商品性。目前，由于马铃薯自交系自交亲和的特性，柱头极易沾染雄蕊花粉，马铃薯杂交制种仍然采用人工去雄的方法，尚未有公开报道的方法可以避免杂交制种过程中去雄且避免杂交种结实的方法。马铃薯去雄过程是非常费时费力的，造成杂交种生产成本过高，而且人工去雄存在一定的偏差，可能发生去雄不及时或不彻底的问题，导致最终出现一定的假杂种率。另外，不同自交系杂交产生的杂交种也是自交亲和的，在实际生产过程中，也会发生地上部分天然大量结实的情况，地上果实和地下薯块竞争养分，在一定程度上影响了地下块茎的产量(Zhang et al.,2021)。因此，寻找一种制种过程中不用去雄且杂交种不结果实的方法是十分必要且紧迫的。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了自交不亲和的双单倍体马铃薯品系及其选育方法和杂交马铃薯及其制种方法。采用该自交不亲和的双单倍体马铃薯作为母本进行制种，不仅可以避免去雄，而且还可实现杂交种不结果实，提高马铃薯产量。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种自交不亲和的双单倍体马铃薯品系的选育方法，包括如下步骤：
(1)将携带杂合自交亲和基因的二倍体马铃薯与单倍体诱导系进行杂交，从杂交后代中筛选单倍体后代；
(2)从单倍体后代中筛选不含有自交亲和基因的单倍体后代；
(3)对不含有自交亲和基因的单倍体后代进行染色体加倍，获得自交不亲和的双单倍体马铃薯品系。
在本申请之前，由于马铃薯的有害突变积累了太多、效率太低，因此育种家主要依靠通过自交获得有活力的纯合系的方案，将自交不亲和视为一种育种的不利性状进行打破，以便于通过自交获得纯合系。而本发明跳出了固有思维，在育种的不同阶段灵活利用马铃薯自交亲和和不亲和的性状，最终组合创造出了一种简单、高效的马铃薯制种方法，并且可以提高薯块产量。
在本发明提供的具体实施例中，自交亲和基因包括但不限于SS11基因和/或Sli基因。
在本发明提供的具体实施例中，杂合自交亲和基因的二倍体马铃薯为包含两个处于杂合状态的自交亲和基因的二倍体马铃薯。但本发明并非仅限于此，含有一个及以上的处于杂合状态的自交亲和基因的二倍体马铃薯均可实现本发明技术效果。
在本发明提供的具体实施例中，单倍体诱导系包括但不限于利用PLA1/MTL/NLD和DMP等单倍体诱导(HI)基因获得的单倍体诱导系。
具体的，所述单倍体诱导系包括但不限于单倍体诱导系PL4和/或利用马铃薯StDMP基因获得的单倍体诱导系。所述马铃薯StDMP基因是Soltu.DM.05G005100.1基因(可在http://spuddb.uga.edu/中查询具体信息)的简称。所述利用马铃薯StDMP基因获得的单倍体诱导系记载于CN202210109081.3中。
作为优选，筛选单倍体后代的方法包括种子外形特征标记、分子标记、荧光标记或流式细胞术中的一种或几种。
在本发明提供的具体实施例中，种子外形特征标记为有无胚斑。种子有胚斑，则种子为二倍体杂交种，需要淘汰；种子无胚斑，则可能为单倍体，需要保留做进一步检测。但种子外形特征标记并非仅限于此，本领域技术人员认可的外形特征标记均在本发明保护范围之内。
所述分子标记、荧光标记或流式细胞术筛选单倍体后代的方法可参考Zhong etal.,2020和/或CN202210109081.3中的相关记载(Zhong,Y.,et al."ADMP-triggered invivo maternal haploid induction system in the dicotyledonous Arabidopsis."Nature Plants 6.5(2020):466-472)。
在本发明中，携带杂合自交亲和基因的二倍体马铃薯作为母本，母本是自交亲和的，有可能由于去雄不及时或不彻底产生一定概率的自交种子，这些种子也是不含有胚斑的，可以通过分子标记来淘汰这部分种子。在本发明提供的具体实施例中，分子标记引物序列包括：
1)chr01_623388：
正向引物：5’-TACAAATATTCAGCGAAGGG-3’；
反向引物：5’-GCTCAATTGTCTTCTTCAATCC-3’。
2)chr02_112634：
正向引物：5’-TCCTCCATCTCAGATTCACT-3’；
反向引物：5’-GGGTACGATTGTGAACATCT-3’。
3)chr03_265493：
正向引物：5’-CTATAATTTGGGCACGTGAT-3’；
反向引物：5’-CTAGTTGCATTCAGCCTTCT-3’。
4)chr06_537151：
正向引物：5’-CAGAGACAGGAACAGAAAATG-3’；
反向引物：5’-TGAAGGGACTAATTTGGCTA-3’。
5)chr07_377300：
正向引物：5’-GGGATCATTTCGATCTTTCT-3’；
反向引物：5’-GTAAATTGGAAATCCCTCCT-3’。
6)chr08_844961：
正向引物：5’-TGACCCTTTGGATGAAATAC-3’；
反向引物：5’-CACCTTATCAAACGAAGCTC-3’。
但用于淘汰母本自交种子的分子标记并非限定于上述标记。只要能够区分出是母本自交种子的分子标记均在本发明保护范围之内。
在本发明步骤(2)中，从单倍体后代中筛选不含有自交亲和基因的单倍体后代的方法为：利用自交亲和基因的特异性引物检测自交亲和基因的存在情况。
在本发明提供的具体实施例中，Ss11基因特异性的引物如下：
正向引物：5’-GAAGAAAGGAAATGAAGTGAGTTGTTC-3’；
反向引物：5’-GAATAATAACTTATTTCTTGATGGGATTG-3’
在本发明提供的具体实施例中，Sli基因特异性的引物如下：
正向引物：5’-CGTCGGATTCAGCAGCAGAGTT-3’；
反向引物：5’-AAGCGAATTACAAGCCTGTTTAGATTGAC-3’
在本发明提供的具体实施例中，所述的后代选自种子、植株、组织细胞中的一种或几种。
在本发明提供的具体实施例中，组织细胞选自芽、茎段、根、叶、花中的一种或几种。
在本发明提供的具体实施例中，步骤(1)中杂交后代为种子或植株。
在本发明提供的具体实施例中，步骤(2)中单倍体后代为种子或植株。
在本发明提供的具体实施例中，步骤(3)中单倍体后代为组织细胞。
在本发明提供的一个具体实施例中，步骤(3)中单倍体后代为芽。
作为优选，染色体加倍的方法包括但不限于采用化学诱导方法、低温诱导方法、愈伤组织再生方法等。
优选的，染色体加倍的方法为化学诱导方法。
所述化学诱导方法包括但不限于利用秋水仙素、细胞松弛素B和/或富民农等中的一种或几种对单倍体后代进行处理，优选利用秋水仙素对单倍体后代进行处理。
在本发明提供的具体实施例中，秋水仙素的处理浓度为0.1％～1.0％。
在本发明提供的一个具体实施例中，秋水仙素的处理浓度为0.35％～0.55％。
在本发明提供的具体实施例中，秋水仙素的处理时间为至少2天。
本发明还提供了一种自交不亲和的双单倍体马铃薯品系，所述双单倍体马铃薯品系的植物不含有自交亲和基因，且该植物可育。
在本发明提供的具体实施例中，所述双单倍体马铃薯品系的植物进一步包含一个或多个有益的等位基因，优选的，所述有益的等位基因包括：Yellow Leaf 1(YL1)等位基因(具有正常叶子)，Floral Bud Abortion 1(FBA1)等位基因(具有可育性)，和/或Yellow(Y)等位基因(具有黄色块茎肉)。
在本发明提供的具体实施例中，所述双单倍体马铃薯品系的植物进一步不含有一个或多个有害的等位基因，优选的，所述有害的等位基因包括：floral bud abortion 1(fba1)等位基因(具有不可育性)，yellow leaf 1(yl1)等位基因(具有不正常叶子)，和/或large-effect deleterious mutation 1(led1)等位基因(影响存活)。
在本发明提供的具体实施例中，所述的双单倍体马铃薯品系可由上述选育方法获得。
在本发明提供的具体实施例中，所述的双单倍体马铃薯品系包括但不限于YS1-187、YS1-192、YS1-311或YS1-366中的一种或多种。
本发明还提供了上述双单倍体马铃薯品系的植物，其植物部分，块茎或块茎部分，或其植物细胞、花粉或种子。
本发明还提供了一种杂交马铃薯的制种方法，采用上述选育方法获得的自交不亲和的双单倍体马铃薯品系的植物或上述自交不亲和的双单倍体马铃薯品系的植物作为母本进行杂交制种。
在本发明提供的具体实施例中，杂交制种的父本选自上述选育方法获得的自交不亲和的双单倍体马铃薯品系的植物、上述自交不亲和的双单倍体马铃薯品系的植物或其他自交不亲和的马铃薯品系的植物。
在本发明提供的另一具体实施例中，杂交制种的父本为自交亲和的马铃薯品系的植物。
本发明还提供了由上述制种方法获得的杂交马铃薯种子，其种子生长成为的植物，其植物部分，块茎或块茎部分，或其植物细胞、花粉或种子。
本发明还提供了由上述杂交马铃薯植物，其植物部分，块茎或块茎部分，或其植物细胞、花粉或种子制成的饲料或食品。
具体的，所述饲料包括但不限于：液态饲料、固态饲料、半固态饲料或饲料原料；所述的食品包括但不限于：新鲜的马铃薯、干燥的马铃薯、冷冻的马铃薯、薯条、薯片、马铃薯面粉或马铃薯淀粉。
本发明还提供了一种制造商业植物产品的方法，其包括获得上述的植物，其植物部分，块茎或块茎部分制造所述商业植物产品，其中所述植物产品是选自由以下组成的群组：新鲜的马铃薯材料、冷冻的马铃薯材料、脱水马铃薯材料、马铃薯液、马铃薯条、马铃薯片、马铃薯颗粒、马铃薯粉及马铃薯淀粉。
与现有技术相比，本发明具有的技术效果为：
(1)本发明首次获得了自交不亲和的、可育的双单倍体马铃薯材料；
(2)利用本申请方法获得的自交不亲和的双单倍体材料作为母本进行杂交，可以避免人工去雄，降低杂交马铃薯制种的成本，保证杂种率。
(3)利用本申请方法获得的自交不亲和的双单倍体材料作为亲本进行杂交，不仅可以避免人工去雄和提高杂种率，由于产生的杂交种也是自交不亲和的，还避免了地上部分结实的问题，可以提高马铃薯的产量。
附图说明
图1为自交不亲和的双单倍体马铃薯选育示意图；
图2为无胚斑种子和有胚斑种子的对比；
图3为自交不亲和的单倍体和二倍体植株。
具体实施方式
本发明公开了自交不亲和的双单倍体马铃薯及其选育方法和杂交马铃薯及其制种方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明提供了一种避免制种过程中去雄且可以抑制杂交种地上结实的方法，主要包括以下几个步骤：
(1)将携带杂合自交亲和基因的二倍体马铃薯与单倍体诱导系进行杂交，从杂交后代中筛选单倍体后代；
选择携带杂合自交亲和基因的二倍体马铃薯进行单倍体诱导。一般的二倍体马铃薯直接进行单倍体诱导，获得的单倍体很难成活，主要是携带大效应的有害突变。携带自交亲和基因的二倍体材料可以通过自交淘汰一些大效应的有害突变，选用已经去除大效应有害突变的材料之后再进行单倍体诱导获得单倍体后代有较高的概率可以成活。
(2)从诱导的单倍体中筛选不含有自交亲和基因的单株，并进行染色体加倍，获得双单倍体植株，这些植物是自交不亲和的；
从诱导的单倍体中筛选不含有自交亲和基因的单株。利用携带杂合自交亲和基因的二倍体材料进行单倍体诱导，后代中有自交亲和与自交不亲和的分离，利用分子标记筛选自交不亲和的单株进行染色体加倍，获得基因组纯合但是自交不亲和的二倍体材料，即双单倍体品系。
(3)以上述自交不亲和的双单倍体材料作为亲本进行杂交，可以不用去雄，而且获得杂交种也是自交不亲和的。
将步骤(1)-(2)获得的双单倍体植株做为母本与其它亲本进行杂交，可以避免去雄的问题；此步骤仅限定母本自交不亲和，不必去雄。
利用步骤(1)-(2)创制不同遗传背景的双单倍体材料，这些材料之间杂交制种时不仅避免了去雄，而且产生的杂交后代也是自交不亲和的，避免了地上部分自交结实影响地下产量的问题。此步骤父母本均为自交不亲和，简化制种的同时提高产量。
术语解释：
等位基因：是指位于一对同源染色体的相同位置上，控制着相对性状的基因。由相同基因的配子结合成的合子发育成的个体叫做纯合子(如AA和aa)，由不同基因的配子结合成的合子发育成的个体叫做杂合子(如Aa)；
自交不亲和：指具有完全花并可以形成正常雌、雄配子，但缺乏自花授粉结实能力的一种自交不育性。
可育(fertile)：指一种植物或种子，当生长成植物时，具有完全花并可以形成正常雌、雄配子，能够作为父本或母本通过可育花粉或可育胚珠(即雄花和雌花都是有活力的)而产生后代。
染色体倍性(chromosome ploidy)：是指细胞中包含的染色体组数或基因组数。正常的配子细胞中所包含的染色体数或半数的体细胞染色体数称为一套单倍染色体，用符号n表示。某种生物的完整的一套单倍染色体称为该种生物的基因组或染色体组。具有一个染色体组的细胞和由这样的细胞组成的个体称为单倍体(n)，具有两个染色体组的细胞或个体称为二倍体(2n)，具有两个以上整套染色体组的细胞或个体则称为多倍体，包括三倍体(3n)、四倍体(4n)等。由相同来源染色体组形成的多倍体称为同源多倍体，由不同来源不同染色体组形成的多倍体称为异源多倍体。
双单倍体(doubled haploid)：指单倍体经染色体加倍获得的细胞或个体，通常具有很高的基因组纯合率(≥99.99％)。
杂交：两个基因型不同的个体相交。也指不同品种间的交配。植物可指不同品种间的异花传粉。
自交：两个基因型相同的个体相交。植物指自花传粉。
父本：是指参与杂交的亲本之一，在动植物中是雄性个体或产生雄性生殖细胞的个体。
母本：是指不同植株的花进行异花传粉时，接收花粉的植株。植株繁殖中，上一代的雌性植株。
下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
本发明实施例中所用生物材料、序列、试剂或仪器均可由市场购得。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1：自交不亲和双单倍体材料的创制
选择杂交马铃薯品种“优薯1号”作为父母本进行杂交，制备F1杂交种。其母本和父本分别含有不同的自交亲和基因，母本含有位于1号染色体上的SS11基因，父本含有位于12号染色体上的Sli基因，而在F1杂交种中这两个基因均处于杂合状态(图1)。
利用从美国农业部引进的单倍体诱导系PL4为父本(其他单倍体诱导系也可以)，与获得的杂交种进行授粉，从后代中筛选单倍体。筛选单倍体主要分为了3个步骤：
(1)淘汰含有紫色胚斑的种子。因为父本PL4是紫色胚斑纯合的材料(图2)，母本的种子不含有胚斑，理论上杂交之后产生的种子都应该携带有紫色胚斑，如果没有的话，则说明可能是单倍体，由母本的雌配子发育而来。
(2)利用分子标记检测不含有胚斑的种子是否是自交的。因为母本是自交亲和的，有可能由于去雄不及时或不彻底产生一定概率的自交种子，这些种子也是不含有胚斑的，可以通过分子标记来淘汰这部分种子。分子标记引物序列包括：
1)chr01_623388：
正向引物：5’-TACAAATATTCAGCGAAGGG-3’；
反向引物：5’-GCTCAATTGTCTTCTTCAATCC-3’。
2)chr02_112634：
正向引物：5’-TCCTCCATCTCAGATTCACT-3’；
反向引物：5’-GGGTACGATTGTGAACATCT-3’。
3)chr03_265493：
正向引物：5’-CTATAATTTGGGCACGTGAT-3’；
反向引物：5’-CTAGTTGCATTCAGCCTTCT-3’。
4)chr06_537151：
正向引物：5’-CAGAGACAGGAACAGAAAATG-3’；
反向引物：5’-TGAAGGGACTAATTTGGCTA-3’。
5)chr07_377300：
正向引物：5’-GGGATCATTTCGATCTTTCT-3’；
反向引物：5’-GTAAATTGGAAATCCCTCCT-3’。
6)chr08_844961：
正向引物：5’-TGACCCTTTGGATGAAATAC-3’；
反向引物：5’-CACCTTATCAAACGAAGCTC-3’。
(3)利用流式细胞仪检测疑似单倍体植株的染色体倍性，最终确定哪些是单倍体植株。
利用上述方法，从36801粒杂交种子中筛选出17株单倍体。随后利用两个自交亲和基因Ss11和Sli基因特异性的引物去检测它们的存在情况，发现有4个单株均不含有这两个基因，编号分别为YS1-187、YS1-192、YS1-311和YS1-366。
Ss11基因特异性的引物：
正向引物：5’-GAAGAAAGGAAATGAAGTGAGTTGTTC-3’；
反向引物：5’-GAATAATAACTTATTTCTTGATGGGATTG-3’
Sli基因特异性的引物：
正向引物：5’-CGTCGGATTCAGCAGCAGAGTT-3’；
反向引物：5’-AAGCGAATTACAAGCCTGTTTAGATTGAC-3’
然后取单倍体植物的顶端嫩芽，采用0.35％～0.55％秋水仙素进行染色体加倍处理至少2天，得到双单倍体植物(图3)。将这些双单倍体植株移栽到温室，开花时进行自花授粉，发现都没有结果，证明确实是自交不亲和的。通过上述流程，最终获得了自交不亲和的双单倍体植株，可用于杂交马铃薯育种。
实施例2：利用自交不亲和亲本制种提高杂种率
以实施例1获得的自交不亲和的双单倍体材料为母本，以自交亲和的纯合二倍体材料D180【D180由CIP 703280和E172(Cell,184:3873-3883,2021)杂交获得】为父本进行杂交，授粉过程中母本不去雄。对照组母本A6-26(A6-26由CIP 705468自交获得)和父本E4-63【E4-63由CIP 703767和E172(Cell,184:3873-3883,2021)杂交获得】均为自交亲和的纯合二倍体材料，杂交过程中母本采取人工去雄的方法。
利用上述两种方法均获得了足够多的杂交种，但是第一种方法更加省时省力。每种方法选取500粒种子通过分子标记进行杂交种纯度检测，结果证明第一种方法的杂种率为100％，第二种方法的杂种率为97.5％。因此，以自交不亲和的双单倍体材料为母本进行杂交制种，不仅可以避免杂交过程中去雄，节省人力，也可以提高杂种率。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (14)

1.一种自交不亲和的双单倍体马铃薯品系的选育方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将携带杂合自交亲和基因的二倍体马铃薯与单倍体诱导系进行杂交，从杂交后代中筛选单倍体后代；
（2）从所述单倍体后代中筛选不含有自交亲和基因的单倍体后代；
（3）对所述不含有自交亲和基因的单倍体后代进行染色体加倍，获得自交不亲和的双单倍体马铃薯品系。
2.根据权利要求1所述的选育方法，其特征在于，所述自交亲和基因包括S S11 基因和/或Sli基因。
3.根据权利要求1所述的选育方法，其特征在于，所述筛选单倍体后代的方法包括种子外形特征标记、分子标记、荧光标记或流式细胞术中的一种或几种。
4.根据权利要求3所述的选育方法，其特征在于，所述种子外形特征标记包括有无胚斑。
5.根据权利要求1所述的选育方法，其特征在于，所述杂交后代或单倍体后代选自种子、植株、组织细胞中的一种或几种。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的选育方法，其特征在于，所述染色体加倍的方法包括化学诱导方法、低温诱导方法、愈伤组织再生方法中的一种或几种。
7.根据权利要求6所述的选育方法，其特征在于，所述染色体加倍的方法为化学诱导方法；
所述化学诱导方法包括利用秋水仙素、细胞松弛素B和/或富民农中的一种或几种对不含有自交亲和基因的单倍体后代进行处理。
8.根据权利要求7所述的选育方法，其特征在于，利用秋水仙素对不含有自交亲和基因的单倍体后代进行处理。
9.根据权利要求1所述的选育方法，其特征在于，所述双单倍体马铃薯品系的植物不含有自交亲和基因，且该植物可育。
10.根据权利要求9所述的选育方法，其特征在于，所述双单倍体马铃薯品系的植物进一步包含一个或多个有益的等位基因，所述有益的等位基因包括：Yellow Leaf 1 (YL1)等位基因，Floral Bud Abortion 1 (FBA1) 等位基因，和/或Yellow (Y)等位基因。
11.根据权利要求9所述的选育方法，其特征在于，所述双单倍体马铃薯品系的植物进一步不含有一个或多个有害的等位基因，所述有害的等位基因包括：floral bud abortion 1 (fba1)等位基因，yellow leaf 1 (yl1)等位基因，和/或large-effect deleterious mutation 1 (led1)等位基因。
12.一种杂交马铃薯的制种方法，其特征在于，采用权利要求1至11中任一项所述选育方法获得的双单倍体马铃薯品系的植物作为母本进行杂交制种。
13.根据权利要求12所述的制种方法，其特征在于，所述杂交制种的父本选自权利要求1至11中任一项所述选育方法获得的双单倍体马铃薯品系的植物，或其他自交不亲和的马铃薯品系的植物；
或者，所述杂交制种的父本为自交亲和的马铃薯品系的植物。
14.一种制造商业植物产品的方法，其包括采用权利要求12或13所述制种方法获得杂交马铃薯种子，以及种子生长成为的植物，所述植物包括植物部分，所述植物部分包括块茎、植物细胞中的至少一种；采用所得的植物，制造所述商业植物产品，其中所述植物产品是选自由以下组成的群组：新鲜的马铃薯材料、冷冻的马铃薯材料、脱水马铃薯材料，或者所述植物产品是选自由以下组成的群组：马铃薯液、马铃薯条、马铃薯片、马铃薯颗粒、马铃薯粉及马铃薯淀粉。
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