CN116655605B - 一种苯基吡唑类化合物、及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种苯基吡唑类化合物、及其制备方法和应用。本发明提供了一种如式I所示的苯基吡唑类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐。该类化合物能够在分子水平上有效地、选择性地抑制细胞凋亡过程中的关键蛋白MCL‑1，或者，它们对癌细胞，尤其是人浆细胞白血病细胞H929和人髓性单核细胞白血病细胞MV‑4‑11具有明显的杀伤作用和高选择性，具有制备成为新型抗急性髓性白血病药物的潜力，具有较好的市场化前景。

Description

一种苯基吡唑类化合物、及其制备方法和应用

技术领域

本发明公开了一种苯基吡唑类化合物、及其制备方法和应用。

背景技术

细胞凋亡和细胞增殖是生命的基本现象。现代研究认为肿瘤的发生实际上是细胞的增殖与凋亡失衡所致。因此，恢复肿瘤细胞中固有的凋亡机制是公认的科学有效的抗肿瘤策略。作为线粒体细胞凋亡途径中的关键调控因子，靶向BCL-2家族蛋白开发小分子药物成为抗肿瘤研究的热点。维奈托克的成功上市验证了这一靶点及其巨大的市场潜力。

然而，作为BCL-2蛋白的选择性抑制剂，维奈托克通过与BCL-2蛋白结合而释放出的促凋亡因子仍然可以被该家族的另一成员MCL-1蛋白所捕获，因而抑制促凋亡因子的激活，引起MCL-1蛋白过表达肿瘤细胞中(如白血病、多发性骨髓瘤等)的耐药性问题。此外，大量研究表明MCL-1是急性髓性白血病发生过程中的主要驱动致癌因素之一，是治疗急性髓性白血病的潜在靶点，具有巨大的市场需求和开发潜力。因此，发展靶向MCL-1蛋白的选择性小分子抑制剂不仅可以有效地解决现有靶向BCL-2药物的耐药性问题，拓展它们的抗肿瘤应用范围，同时也为MCL-1蛋白为主要驱动的恶性肿瘤提供新的治疗策略。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是具有高选择性、高抑制活性的MCL-1小分子抑制剂或蛋白酶降解剂缺乏的技术问题，而提供了一种苯基吡唑类化合物、药物组合物、其制备方法及应用。该类化合物能够在分子水平上有效地、选择性地抑制细胞凋亡过程中的关键蛋白MCL-1。或者，它们对癌细胞，尤其是人浆细胞白血病细胞H929和人髓性单核细胞白血病细胞MV-4-11具有明显的杀伤作用和高选择性，具有制备成为新型抗急性髓性白血病药物的潜力，具有较好的市场化前景。

本发明提供了一种如式I所示的苯基吡唑类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，

其中，

R^a为R¹-(CH₂)_m-；

所述m为0、1、2、3、4、5或6；

所述的R¹为苯基或被一个或多个R^1-1取代的苯基；当存在多个取代基时，取代基相同或不同；

所述的R^1-1独立地为-NH₂、-OH、-SH、C₁-C₄烷氧基、3-8元环烷基或3-8元杂环烷基；所述的3-8元杂环烷基中的杂原子个数为1，2，3或4个，杂原子独立地为N、O和S；

R^b1、R^b2和R^b3独立地为H、卤素或C₁～C₆烷基；

R^c为H或C₁～C₄烷基；

R^d为苯基、3-10元杂芳基、被一个或多个R²取代的苯基或被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基；所述“3-10元杂芳基”和“被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基”里的3-10元杂芳基中，杂原子个数独立地为1，2，3或4个，杂原子独立地为N、O和S；当存在多个取代基时，取代基相同或不同；

所述R²独立地为羟基或C₁～C₆烷基；

表示z构型E构型或其混合；

“*”标记的手性碳为S构型、R构型或其混合。

在某一方案中，所述的R¹为R^1-1取代的苯基。

在某一方案中，所述的R^1-1独立地为-NH₂、-OH、C₁-C₄烷氧基、3-8元环烷基或3-8元杂环烷基；所述的3-8元杂环烷基中的杂原子个数为1，2，3或4个，杂原子独立地为N、O和S。

在某一方案中，所述的R^1-1独立地为-NH₂、-OH、-SH或3-8元环烷基。

在某一方案中，所述的R^1-1独立地为-NH₂、-OH、或3-8元环烷基。

在某一方案中，所述的R^1-1独立地为C₁-C₄烷氧基或3-8元杂环烷基；所述的3-8元杂环烷基中的杂原子个数为1，2，3或4个，杂原子独立地为N、O和S。

在某一方案中，所述的R^b1、R^b2和R^b3中的一个为卤素或C₁～C₆烷基，其余为H；较佳地，R^b2为卤素或C₁～C₆烷基，R^b1和R^b3为H；更佳地，R^b2为卤素，R^b1和R^b3为H。

在某一方案中，所述的R^d为3-10元杂芳基、被一个或多个R²取代的苯基或被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基；所述“3-10元杂芳基”和“被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基”里的3-10元杂芳基中，杂原子个数为1，2，3或4个，杂原子独立地为N、O和S。

在某一方案中，所述的R^d为3-10元杂芳基；所述的3-10元杂芳基中杂原子个数为1，2，3或4个，杂原子独立地为N、O和S。

在某一方案中，所述的R²为C₁～C₆烷基。

在某一方案中，其中

R^a为R¹-(CH₂)_m-；

所述的m为0；

所述的R¹为R^1-1取代的苯基；

所述的R^1-1独立地为-NH₂、-OH、或3-8元环烷基；

R^b1、R^b2和R^b3独立地为H、卤素或C₁～C₆烷基；

R^c为H或C₁～C₄烷基；

R^d为3-10元杂芳基或“被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基”；所述“3-10元杂芳基”和“被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基”里的3-10元杂芳基中，杂原子个数为1或2个，杂原子为N；

所述R²为C₁～C₆烷基。

在某一方案中，其中

R^a为R¹-(CH₂)_m-；

所述m为0；

所述的R¹为R^1-1取代的苯基；

所述的R^1-1独立地为C₁-C₄烷氧基或3-8元杂环烷基；所述的3-8元杂环烷基中的杂原子个数为1，2，3或4个，杂原子独立地为N、O和S；

R^b1、R^b2和R^b3独立地为H、卤素或C₁～C₆烷基；

R^c为H或C₁～C₄烷基；

R^d为3-10元杂芳基或“被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基”；所述“3-10元杂芳基”和“被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基”里的3-10元杂芳基中，杂原子个数为1或2个，杂原子为N；

所述R²为C₁～C₆烷基。

在某一方案中，所述m为0、1、2、3或4。

在某一方案中，所述m为0。

在某一方案中，所述的R^1-1取代的个数可为一个或多个，例如2个、3个、4个或5个，当存在多个R^1-1时，R^1-1相同或不同。

在某一方案中，所述的R^1-1可独立地位于“苯基与吡唑连接位点”的邻位、间位或对位，优选为对位。

在某一方案中，当R^1-1为C₁-C₄烷氧基时，所述C₁-C₄烷氧基为甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基，优选为甲氧基。

在某一方案中，当R^1-1为3-8元环烷基时，所述3-8元环烷基为环丙基、环戊基、环己基或环庚基，优选为环己基。

在某一方案中，当R^1-1为3-8元杂环烷基时，所述3-8元杂环烷基为杂原子选自N和/或O，杂原子数为1～2个的5～6元杂环烷基，例如吗啉基。

在某一方案中，当R^b1、R^b2和R^b3独立地为卤素时，所述卤素为氟、氯、溴或碘，优选为氯。

在某一方案中，当R^b1、R^b2和R^b3独立地为C₁～C₆烷基时，所述C₁～C₆烷基优选为C₁～C₄烷基，例如甲基、乙基、丙基或丁基。

在某一方案中，当R^c为C₁～C₄烷基时，所述C₁～C₄烷基为甲基、乙基、丙基或丁基。

在某一方案中，当R^d为“3-10元杂芳基”或“被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基”时，所述3-10元杂芳基为杂原子选自N，杂原子数为1～2个的5-10元杂芳基，例如吲哚基。

在某一方案中，当R^d为被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基时，当存在多个R²时，R²相同或不同。

在某一方案中，当R^d为被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基时，R²独立地位于与其它基团连接位点的邻位、间位或对位；

在某一方案中，当R²为C₁～C₆烷基时，所述C₁～C₆烷基为C₁～C₄烷基，例如甲基、乙基、丙基或丁基。

在某一方案中，所述R^a为

在某一方案中，所述R^a为

在某一方案中，所述R^a为

在某一方案中，所述R^a为

在某一方案中，所述R^d为

在某一方案中，所述的R^1-1独立地为-NH₂、-OH、C₁-C₄烷氧基、3-8元环烷基或3-8元杂环烷基；所述3-8元杂环烷基为杂原子选自N和/或O，杂原子数为1～2个的5～6元杂环烷基。

在某一方案中，所述的R^1-1独立地为-NH₂、-OH、C₁-C₄烷氧基、3-8元环烷基或吗啉基。

在某一方案中，所述的R^d为苯基、3-10元杂芳基、被一个或多个R²取代的苯基或被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基；所述“3-10元杂芳基”和“被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基”里的3-10元杂芳基中，杂原子个数为1或2个，杂原子为N。

在某一方案中，所述的R^d为3-10元杂芳基或被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基；所述“3-10元杂芳基”和“被一个或多个R²取代的3-10元杂芳基”里的3-10元杂芳基中，杂原子个数为1或2个，杂原子为N。

在某一方案中，所述的R^d为苯基、吲哚基或被一个或多个R²取代的吲哚基。

在某一方案中，所述的R^d为吲哚基或被一个或多个R²取代的吲哚基。

在某一方案中，所述的R²独立地为羟基或C₁～C₄烷基。

在某一方案中，所述的苯基吡唑类化合物I可为如下任一化合物：

本发明提供了一种如式II所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，

其中，

X为E3(泛素)连接酶的配体(结合物，binder)，其为

L为连接子(1inker)，例如

a端与Y相连，b端与X相连；

n1和n2独立地为0、1、2、3、4或5；

L¹和L²独立地为-O-、-S-或-NH-；

Y为(靶蛋白结合物binder)；

R^b1、R^b2、R^b3、R^c和R^d的定义如上任一方案所述；

L³为R³-(CH₂)_m-；

所述m为0、1、2、3、4、5或6；

所述的R³为苯基或R^3-1取代的苯基；

所述L连接于L³与吡唑连接位点的邻位、间位或对位；

所述R^3-1独立地为-NH₂、-OH、-SH、C₁-C₄烷氧基、3-8元环烷基或3-8元杂环烷基；所述的3-8元杂环烷基中的杂原子个数为1，2，3或4个，杂原子独立地为N、O和S；

表示Z构型、E构型或其混合；

“*”标记的手性碳为S构型、R构型或其混合。

在本发明某一方案中，所述的L为

在本发明某一方案中，所述的L¹为-O-。

在本发明某一方案中，所述的L²为-O-。

在本发明某一方案中，所述L连接于L³与吡唑连接位点的对位。

在本发明某一方案中，所述的R³为苯基。

在本发明某一方案中，所述R^3-1独立地为-NH₂、-OH、C₁-C₄烷氧基、3-8元环烷基或3-8元杂环烷基；所述的3-8元杂环烷基中的杂原子个数为1，2，3或4个，杂原子独立地为N、O和S。

在某一方案中，所述的R^3-1独立地为-NH₂、-OH、-SH或3-8元环烷基。

在某一方案中，所述的R^3-1独立地为-NH₂、-OH、或3-8元环烷基。

在某一方案中，所述的R^3-1独立地为C₁-C₄烷氧基或3-8元杂环烷基。

在某一方案中，所述的n1为0、1、2或3。

在某一方案中，所述的n2为0、1、2或3。

在某一方案中，所述的所述m为0、1、2、3或4。

在某一方案中，所述m为0。

在某一方案中，所述的R^3-1取代的个数可为一个或多个，例如2个、3个、4个或5个，当存在多个R^3-1时，R^3-1相同或不同。

在某一方案中，当R^3-1为C₁-C₄烷氧基时，所述C₁-C₄烷氧基为甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基，优选为甲氧基。

在某一方案中，当R^3-1为3-8元环烷基时，所述3-8元环烷基为环丙基、环戊基、环己基或环庚基，优选为环己基。

在某一方案中，当R^3-1为3-8元杂环烷基时，所述3-8元杂环烷基为杂原子选自N和/或O，杂原子数为1～2个的5～6元杂环烷基，例如吗啉基。

在某一方案中，所述的R^3-1独立地为.NH₂、-OH、C₁-C₄烷氧基、3-8元环烷基或3-8元杂环烷基；所述3-8元杂环烷基为杂原子选自N和/或O，杂原子数为1～2个的5～6元杂环烷基。

在某一方案中，所述的R^3-1独立地为-NH₂、-OH、C₁-C₄烷氧基、3-8元环烷基或吗啉基。

在某一方案中，所述的X为

在某一方案中，所述的L为

在某一方案中，所述的Y为

在本发明某一方案中，所述的式II所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，可为如下式II-a

其中，R^c、R^b1、R^b2、R^b3和R^d的定义如上所述；

n为1、2、3、4或5。

在本发明某一方案中，所述的式II所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，可为如下任一化合物：

本发明还提供了所述式I化合物的制备方法，其包括方法1或方法2；

方法1包括如下述步骤：在有机溶剂中，在催化剂存在下，将所述化合物III与化合物IV进行如下所示的酰胺化反应，得到所述的化合物I，即可；

其中，R^a、R^b1、R^b2、R^b3和R^d的定义如上所述。

方法2包括如下述步骤：在有机溶剂中，将“R^c为C₁～C₄烷基”的所述化合物I进行如下所示的水解反应，得到“R^c为-OH”的所述化合物I即可；

其中，R^a、R^b1、R^b2、R^b3和R^d的定义如上所述。

方法1中，所述的酰胺化反应的条件可为本领域该反应常规的条件，例如下述条件：

所述的有机溶剂可为酰胺类溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺)。所述的有机溶剂的用量可为本领域中常规的用量，以不影响反应即可。

所述的催化剂可为N，N′-二异丙基乙胺(DIPEA)、2-(7-氧化苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)中的一种或多种。

所述的化合物III与所述的化合物IV的摩尔比较佳地为1∶1～1∶2(例如1∶2)。

所述的酰胺化反应的进程可采用本领域中的常规监测方法(例如TLC、HPLC或NMR)进行监测，一般以化合物III不再反应时为反应终点，反应时间可为6h。

方法2中，所述的水解反应的条件可为本领域该反应常规的条件，例如下述条件：

所述的有机溶剂可为醚类溶剂(例如四氢呋喃)。所述的有机溶剂的用量可为本领域中常规的用量，以不影响反应即可。

所述的水解较佳地为在碱存在下进行，所述的碱可为碱金属氢氧化物(例如NaOH)。

所述的化合物I的制备方法还可进一步包括下述步骤：在有机溶剂中，在碱存在下，将化合物IV与化合物V进行如下所示的加成消除反应，得到所述的化合物III即可；

其中，R^a、R^b1、R^b2和R^b3如上所述；

所述R^e为C₁～C₄烷基(例如乙基)。

所述的加成消除反应的条件可为本领域该反应常规的条件，例如下述条件：

所述的有机溶剂可为醚类溶剂(例如四氢呋喃)。所述的有机溶剂的用量可为本领域中常规的用量，以不影响反应即可。

所述化合物V与所述化合物VI的摩尔比较佳地为1∶2～1∶3(例如1∶2.2)。

所述的化合物I的制备方法还可进一步包括下述步骤：在有机溶剂中，在催化剂存在下，将化合物VII与二取代甲酰胺进行如下所示的维尔斯迈尔-哈克(Vilsmeier-Haack)甲酰化反应，得到所述的化合物V即可；

其中，R^a、R^b1、R^b2和R^b3如上所述。

所述的Vilsmeier-Haack甲酰化反应的条件可为本领域该反应常规的条件，例如下述条件：

所述的有机溶剂可为甲酰胺类溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺)。所述的有机溶剂的用量可为本领域中常规的用量，以不影响反应即可。

所述的二取代甲酰胺可为N，N-二甲基甲酰胺。

所述的催化剂为POCl₃。

所述的化合物VII与催化剂的摩尔比较佳地为1∶2～1∶5(例如1∶4)。

所述的化合物I的制备方法还可进一步包括下述步骤：在有机溶剂中，在催化剂存在下，将化合物VIII与化合物IX进行如下所示的缩合反应，得到所述的化合物VII即可；

其中，R^a、R^b1、R^b2和R^b3如上所述。

所述的缩合反应的条件可为本领域该反应常规的条件，例如下述条件：

所述的有机溶剂可为醇类溶剂(例如乙醇)。所述的有机溶剂的用量可为本领域中常规的用量，以不影响反应即可。

所述的催化剂可为醋酸。

本发明中所述的化合物VIII与化合物IX的摩尔比较佳地为1∶1～1∶1.5(例如1∶1.2)。

本发明还提供了所述化合物II-a的制备方法，其包括如下述步骤：溶剂中，在催化剂的作用下，化合物II-b与化合物II-c反应，得到如式II-a所示的化合物；

其中，R^b1、R^b2、R^b3、R^c和R^d的定义如上所述；

n为1、2、3、4或5。

所述反应的条件可为本领域该反应常规的条件，例如下述条件：

所述的溶剂可为甲酰胺类溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺)。所述的溶剂的用量可为本领域中常规的用量，以不影响反应即可。

所述的催化剂可为N，N′-二异丙基乙胺(DIPEA)。

所述的化合物II-b与所述的化合物II-c的摩尔比较佳地为1∶1～1∶1.5。

在某一方案中，所述化合物II-a的制备方法还可进一步包括如下步骤：溶剂中，化合物II-d脱除保护基，得到如式II-b所示的化合物；

其中，R^b1、R^b2、R^b3、R^c和R^d的定义如上所述；

n为1、2、3、4或5。

所述反应的条件可为本领域该反应常规的条件，例如下述条件：

所述的溶剂可为卤代烷烃类溶剂(例如二氯甲烷)。所述的溶剂的用量可为本领域中常规的用量，以不影响反应即可。

所述脱保护基的试剂可采用酸类试剂，例如三氟乙酸。

在某一方案中，所述化合物II-a的制备方法还可进一步包括如下步骤：溶剂中，在碱和缩合试剂的存在下，化合物II-e与化合物II-f反应，得到如式II-d所示的化合物；

其中，R^b1、R^b2、R^b3、R^c和R^d的定义如上所述；

n为1、2、3、4或5。

所述反应的条件可为本领域该反应常规的条件，例如下述条件：

所述的溶剂可为甲酰胺类溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺)。所述的溶剂的用量可为本领域中常规的用量，以不影响反应即可。

所述的催化剂可为N，N′-二异丙基乙胺(DIPEA)和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)。

所述式II-e化合物与所述的化合物II-f的摩尔比较佳地为1∶1～1∶1.5，更佳地为1∶1.1～1∶1.2。

本发明提供了一种药物组合物，其包括物质A、其立体异构体或其药学上可接受的盐，和药用辅料；所述的物质A为如式I或II所示化合物；所述的物质A、其立体异构体或其药学上可接受的盐可为治疗有效量。

本发明还提供了物质A、其立体异构体或其药学上可接受的盐在制备Bcl抗凋亡蛋白抑制剂、或者制备用于治疗和/或预防与Bcl抗凋亡蛋白相关的疾病的药物中的应用；

所述的物质A为上述的化合物I或化合物II；

所述的“Bcl抗凋亡蛋白”例如Bc1-XL、Bc1-2和Mcl-1蛋白中的一种或多种，优选为Mcl-1；

所述的“与Bcl抗凋亡蛋白相关的疾病”可为癌症；所述的癌症优选为白血病；所述的白血病例如人急性淋巴细胞白血病或人浆细胞白血病。

本发明还提供了物质B、其立体异构体或其药学上可接受的盐在制备蛋白酶降解剂中的应用；所述的物质B为化合物II。

本发明还提供了一种治疗Bcl抗凋亡蛋白相关疾病的方法，其包括向患者施用治疗有效量的物质A、其立体异构体、其药学上可接受的盐、或上述的药物组合物；

所述的“Bcl抗凋亡蛋白”例如Bcl-XL、Bcl-2和Mcl-1蛋白中的一种或多种，优选为Mcl-1；

所述的“Bcl抗凋亡蛋白相关的疾病”可为癌症；所述的癌症可为白血病；所述的白血病例如人急性淋巴细胞白血病或人浆细胞白血病。

在所述的应用中，所述的Bc1抗凋亡蛋白抑制剂可用于哺乳动物生物体内；也可用于生物体外，主要作为实验用途，例如：作为标准样或对照样提供比对，或按照本领域常规方法制成试剂盒，为Bcl抗凋亡蛋白抑制效果提供快速检测。

所述的药用辅料可为药物生产领域中广泛采用的那些辅料。辅料主要用于提供一个安全、稳定和功能性的药物组合物，还可以提供方法，使受试者接受给药后活性成分以所期望速率溶出，或促进受试者接受组合物给药后活性成分得到有效吸收。所述的药用辅料可以是惰性填充剂，或者提供某种功能，例如稳定该组合物的整体pH值或防止组合物活性成分的降解。所述的药用辅料可以包括下列辅料中的一种或多种：粘合剂、助悬剂、乳化剂、稀释剂、填充剂、成粒剂、胶粘剂、崩解剂、润滑剂、抗粘着剂、助流剂、润湿剂、胶凝剂、吸收延迟剂、溶解抑制剂、增强剂、吸附剂、缓冲剂、螯合剂、防腐剂、着色剂、矫味剂和甜味剂。

本发明的药物组合物可根据公开的内容使用本领域技术人员已知的任何方法来制备。例如，常规混合、溶解、造粒、乳化、磨细、包封、包埋或冻干工艺。

本发明所述的药物组合物可以任何形式给药，包括注射(静脉内)、粘膜、口服(固体和液体制剂)、吸入、眼部、直肠、局部或胃肠外(输注、注射、植入、皮下、静脉内、动脉内、肌内)给药。本发明的药物组合物还可以是控释或延迟释放剂型(例如脂质体或微球)。固体口服制剂的实例包括但不限于粉末、胶囊、囊片、软胶囊剂和片剂。口服或粘膜给药的液体制剂实例包括但不限于悬浮液、乳液、酏剂和溶液。局部用制剂的实例包括但不限于乳剂、凝胶剂、软膏剂、乳膏剂、贴剂、糊剂、泡沫剂、洗剂、滴剂或血清制剂。胃肠外给药的制剂实例包括但不限于注射用溶液、可以溶解或悬浮在药学上可接受载体中的干制剂、注射用悬浮液和注射用乳剂。所述的药物组合物的其它合适制剂的实例包括但不限于滴眼液和其他眼科制剂；气雾剂：如鼻腔喷雾剂或吸入剂；适于胃肠外给药的液体剂型；栓剂以及锭剂。

除非另有规定，本文使用的所有技术术语和科学术语具有要求保护主题所属领域的标准含义。倘若对于某术语存在多个定义，则以本文定义为准。

应该理解，上述的一般性说明和下面的详细说明仅是举例说明，对本发明并不受此限制。在本发明中使用的单数形式，如“一种”或“一个”，包括复数指代，除非另有规定。此外，术语“包括”是开放性限定并非封闭式。

除非另有说明，本发明采用质谱、NMR、HPLC、蛋白化学、生物化学、重组DNA技术或药理检测的传统方法，各步骤和条件可参照本领域常规的操作步骤和条件。

除非另有指明，本发明采用分析化学、有机合成化学和医药化学的标准命名及标准实验室步骤和技术。在某些情况下，标准技术被用于化学合成、化学分析、药物制备、配方和药物递送以及患者的治疗。

在本发明中所使用的术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。

术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物的中性形式接触的方式获得碱加成盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物的中性形式接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的实例包括无机酸盐，本发明的某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团，从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。优选地，以常规方式使盐与碱或酸接触，再分离母体化合物，由此再生化合物的中性形式。化合物的母体形式与其各种盐的形式的不同之处在于某些物理性质，例如在极性溶剂中的溶解度不同。

本发明的“药学上可接受的盐”可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。一般地，优选醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈等非水介质。

本发明所述的小分子Bcl抗凋亡蛋白抑制剂可以用作单剂，或与其他治疗剂联用，以增强这些治疗剂的效果。

术语“活性成分”、“治疗剂”、或“活性物质”是指一种化学实体，它可以有效地治疗目标紊乱、疾病或病症。

术语“包含”为开放式表达，即包括本发明所指明的内容，但并不排除其他方面的内容。

本发明中，术语“C₁-C₆烷基”较佳地各自独立地为甲基、乙基、丙基、丁基、戊基或己基；其中，丙基为C₃烷基(包括同分异构体，例如正丙基或异丙基)；丁基为C₄烷基(包括同分异构体，例如正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基)；戊基为C₅烷基(包括同分异构体，例如正戊基＜例如 ＞、异戊基＜例如＞或新戊基＜例如＞)；己基为C₆烷基(包括同分异构体，例如正己基)；

本发明中，术语“C₁-C₄烷基”较佳地各自独立地为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基或叔丁基。

本发明中，术语“C₁-C₄烷氧基”较佳地各自独立地为甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、异丁氧基或叔丁氧基。

本发明中，术语“取代”的个数可为一个或多个＜例如2个、3个、4个或5个＞，当存在多个“取代”时，所述“取代”相同或不同。

本发明中，术语“取代”的位置，如未做特别说明，位置可为任意。

本文术语“立体异构体”是指顺反异构体或旋光异构体。这些立体异构体可以通过不对称合成方法或手性分离法(包括但不限于薄层色谱、旋转色谱、柱色谱、气相色谱、高压液相色谱等)分离、纯化及富集，还可以通过与其它手性化合物成键(化学结合等)或成盐(物理结合等)等方式进行手性拆分获得。术语“单一的立体异构体”是指本发明化合物的一种立体异构体相对于该化合物的所有立体异构体的质量含量不低于95％。

本文术语“芳基”是指具有指定碳原子数(例如，C₆～C₁₀)的、环状的、不饱和的一价烃基，其为单环或多环(例如，2个或3个)，为多环时，单环之间共用两个原子和一根键，且每个环均具有芳香性。芳基通过具有芳香性的环分子其余部分相连。芳基包括但不限于：苯基、萘基。

本文术语“杂芳基”是指具有指定环原子数(例如，3～10元)的、指定杂原子数(例如，1个、2个或3个)的、指定杂原子种类(N、O和S中的一种或多种)的、环状的、不饱和的一价基团，其为单环或多环，多环为单环之间共用两个原子和一根键(稠合)，且每个环均具有芳香性。杂芳基通过碳原子或杂原子与分子其余部分相连；杂芳基通过具有杂原子的环或不具有杂原子的环与分子其余部分相连。杂芳基包括但不限于： 等。

本文术语“杂环烷基”是指具有指定环原子数(例如，3～8元)的、指定杂原子数(例如，1个、2个或3个)的、指定杂原子种类(N、O和S中的一种或多种)的、环状的、饱和的一价基团，其可为单环、双环或多环(优选为单环)。杂环烷基通过碳原子或杂原子与分子其余部分相连。(单环)杂环烷基包括但不限于：等。

本文术语“环烷基”是指具有指定碳原子数(例如，C₃～C₈)的、环状的、饱和的一价烃基，其可为单环、双环或多环(优选为单环)。环烷基包括但不限于：等。

本文术语“配体”是一个生物领域概念，指能与目标蛋白结合的分子或基团。

在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。

本发明所用试剂和原料均市售可得。

本发明的积极进步效果在于：本明提供的苯基吡唑类化合物能够在分子水平上有效地、选择性地抑制细胞凋亡过程中的关键蛋白MCL-1。或者，它们对癌细胞，尤其是人浆细胞白血病细胞H929和人髓性单核细胞白血病细胞MV-4-11具有明显的杀伤作用和高选择性。具有制备成为新型抗急性髓性白血病药物的潜力，具有较好的市场化前景。

具体实施方式

下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。

实施例1(E)-1-(1-(2-萘基)亚乙基)-2-(间甲苯基)肼(1)的制备

100mL茄形瓶中加入2-萘乙酮(3.54g，20.8mmol)，乙醇(50mL)，乙酸(0.5mL)，及间甲苯基肼盐酸盐(4g，25mmol)，搅拌下加热回流2h。加入水(150mL)，二氯甲烷(30mL)萃取3次，干燥，过滤，浓缩直接投下一步。

实施例2 3-(2-基萘)-1-(间甲苯基)-1H-吡唑-4-甲醛(2)的制备

100mL茄形瓶中加入(E)-1-(1-(2-萘基)亚乙基)-2-(间甲苯基)肼(4.93g，18mmol)，DMF(50mL)，0℃下滴加三氯氧磷(5.6mL，61.9mmol)，室温搅拌6h。加入碳酸氢钠水溶液(150mL)，二氯甲烷(50mL)萃取3次，干燥，过滤，浓缩。石油醚∶乙酸乙酯＝5∶1柱层析得固体产物3-(2-基萘)-1-(间甲苯基)-1H-吡唑-4-甲醛(2.8g，50％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ10.14(s，1H)，8.57(s，1H)，8.33(s，1H)，8.02-7.84(m，4H)，7.68(s，1H)，7.64-7.49(m，3H)，7.40(s，1H)，7.23(s，1H)，2.47(s，3H)。

实施例3 2-(二苯氧基磷酰基)乙酸乙酯(3)的制备

100mL茄形瓶中加入磷酸二苯酯(8.23g，43mmol)，无水二氯甲烷(20mL)，溴乙酸乙酯(6.2mL，55.9mmol)，0℃下滴加三乙胺(7.77mL，55.9mmol)，室温搅拌6h。加入水溶液(100ml)，二氯甲烷(40ml)萃取3次，干燥，过滤，浓缩。石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1柱层析得透明油状物(7g，51％)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.39-7.30(m，4H)，7.26-7.12(m，6H)，4.25-4.20(m，2H)，3.35-3.12(m，2H)，1.30-1.26(m，3H)。

实施例4(Z/E)-3-(3-(2-基萘)-1-(间甲苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酸乙酯(4)的制备

100mL茄形瓶中加入2-(二苯氧基磷酰基)乙酸乙酯(2.8g，8.8mmol)，无水四氢呋喃(20mL)，搅拌下滴加3-(2-基萘)-1-(间甲苯基)-1H-吡唑-4-甲醛的四氢呋喃溶液(1.25g，4mmol)，室温搅拌3h。加入水溶液(100mL)，二氯甲烷(30mL)萃取3次，干燥，过滤，浓缩，直接投下一步。

实施例5(Z/E)-3-(3-(2-萘基)-1-(间甲苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酸(5)的制备

100mL茄形瓶中加入(Z)-3-(3-(2-基萘)-1-(间甲苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酸乙酯和(E)-3-(3-(2-基萘)-1-(间甲苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酸乙酯的混合物，四氢呋喃(20mL)，搅拌下滴加氢氧化钠水溶液(960mg，24mmol)，加热搅拌6h。加入稀盐酸调节pH至酸性，乙酸乙酯(20mL)萃取3次，干燥，过滤，浓缩。石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1柱层析得黄色固体cis-5(0.7g，49％)和trans-5(0.5g，35％)。cis-5：¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ12.36(s，1H)，9.24(d，J＝0.6Hz，1H)，8.15(dd，J＝1.6，0.8Hz，1H)，8.07-8.05(m，2H)，8.01-7.99(m，1H)，7.82(dd，J＝8.4，1.7Hz，1H)，7.74(d，J＝2.0Hz，1H)，7.70-7.67(m，1H)，7.60-7.57(m，2H)，7.45(t，J＝7.8Hz，1H)，7.22(ddt，J＝7.5，1.7，0.9Hz，1H)，6.97(dd，J＝12.5，0.7Hz，1H)，5.94(d，J＝12.5Hz，1H)，2.43(s，3H)；¹³C NMR(151 MHz，DMSO-d6)δ167.74，153.74，139.92，139.60，133.46，133.29，133.13，131.43，130.06，129.92，128.79，128.73，128.29，128.24，128.10，127.14，127.06，126.89，119.93，118.39，116.57，116.20，21.50；ESI-MS：m/z 355.1[M+H]+，ESI-HRMS：calcd for C₂₃H₁₉O₂N₂[M+H]⁺ 355.1441，found 355.1439.

trans-5：¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ12.26(s，1H)，9.26(s，1H)，8.18(d，J＝1.7Hz，1H)，8.11-8.04(m，2H)，8.01(dd，J＝6.1，3.4Hz，1H)，7.82(d，J＝2.0Hz，1H)，7.80(dd，J＝8.4，1.7Hz，1H)，7.76(dd，J＝8.0，2.2Hz，1H)，7.64-7.58(m，3H)，7.45(t，J＝7.8Hz，1H)，7.22(dd，J＝7.6，1.6Hz，1H)，6.48(d，J＝15.8Hz，1H)，2.43(s，3H)；¹³C NMR(151MHz，DMSO-d6)δ168.18，152.45，139.80，139.46，134.65，133.35，133.16，130.04，129.97，129.06，128.89，128.72，128.19，128.17，127.91，127.20，127.18，126.65，119.63，119.12，117.71，116.28，21.53；ESI-MS：m/z 355.1[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₂₃H₁₉O₂N₂[M+H]⁺ 355.1441，found 355.1440.

实施例6(Z/E)-(3-(3-(2-萘基)-1-(间甲苯基)-1H-4-吡唑基)丙烯酰基)色氨酸(I-1，I-2)的制备

50mL茄形瓶中加入5(70mg，0.2mmol)，无水DMF(10mL)，HATU(114mg，0.3mmol)，DIPEA(100μL，0.6mmol)，L-色氨酸甲酯盐酸盐(102mg，0.4mmol)，室温搅拌6h。加入水(60mL)，乙酸乙酯(15mL)萃取3次，干燥，过滤，浓缩，投下一步。50mL茄形瓶加入上步原料，四氢呋喃(10mL)，氢氧化钾水溶液(60mg)，加热搅拌2h。加入稀盐酸调节pH至酸性，乙酸乙酯(15mL)萃取3次，干燥，过滤，浓缩。石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1柱层析得黄色固体I-1(83mg，77％)，I-2一样操作得到。

(Z)-(3-(3-(2-萘基)-1-(间甲苯基)-1H-4-吡唑基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-1)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ12.64(s，1H)，10.85(d，J＝2.5Hz，1H)，9.32(s，1H)，8.54(d，J＝7.8Hz，1H)，8.13(d，J＝1.7Hz，1H)，8.07-8.03(m，2H)，7.99(dt，J＝6.9，3.5Hz，1H)，7.79(dd，J＝8.4，1.7Hz，1H)，7.68(d，J＝2.0Hz，1H)，7.62(dd，J＝8.1，2.3Hz，1H)，7.60-7.56(m，3H)，7.42(t，J＝7.8Hz，1H)，7.35-7.31(m，1H)，7.22-7.17(m，2H)，7.07(ddd，J＝8.1，7.0，1.2Hz，1H)，6.99(ddd，J＝7.9，6.9，1.0Hz，1H)，6.70(d，J＝12.5Hz，1H)，6.04(d，J＝12.6Hz，1H)，4.63(ddd，J＝9.2，7.8，4.8Hz，1H)，3.26(dd，J＝14.7，4.8Hz，1H)，3.08(dd，J＝14.7，9.2Hz，1H)，2.42(s，3H)；¹³C NMR(151MHz，DMSO-d6)δ174.09，166.12，153.66，139.86，139.65，136.57，133.28，133.07，131.58，130.10，130.03，128.79，128.77，128.65，128.33，128.10，128.06，127.62，127.08，127.06，127.02，124.10，121.42，120.93，119.74，118.87，118.65，116.53，116.47，111.88，110.49，53.57，27.58，21.51；ESI-MS：m/z 541.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₄H₂₉O₃N₄[M+H]⁺ 541.2234，found 541.2234.

(E)-(3-(3-(2-萘基)-1-(间甲苯基)-1H-4-吡唑基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-2)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ12.48(s，1H)，10.85(d，J＝2.4Hz，1H)，8.98(s，1H)，8.39(d，J＝7.9Hz，1H)，8.16(d，J＝1.7Hz，1H)，8.09-7.97(m，3H)，7.84-7.74(m，3H)，7.61-7.54(m，3H)，7.48-7.42(m，2H)，7.34(d，J＝8.1Hz，1H)，7.20(d，J＝7.5Hz，1H)，7.16(d，J＝2.4Hz，1H)，7.06(ddd，J＝8.2，6.9，1.2Hz，1H)，6.97(ddd，J＝8.0，6.9，1.0Hz，1H)，6.58(d，J＝15.7Hz，1H)，4.60(ddd，J＝9.2，7.8，4.8Hz，1H)，3.23(dd，J＝14.6，4.8Hz，1H)，3.08(dd，J＝14.7，9.2Hz，1H)，2.42(s，3H)；¹³C NMR(151 MHz，DMSO-d6)δ174.04，172.48，165.62，152.08，139.75，139.56，136.58，133.37，133.12，130.27，129.93，129.87，128.80，128.73，128.23，128.14，128.05，127.71，127.62，127.10，126.63，124.05，122.13，121.41，119.70，118.86，118.63，118.16，116.32，111.86，110.51，53.64，27.53，21.54；ESI-MS：m/z541.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₄H₂₉O₃N₄[M+H]⁺ 541.2234，found 541.2235.

实施例7将2-萘乙酮换为对甲氧基苯乙酮，间甲基苯肼盐酸盐换成间氯苯肼盐酸盐，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例6，保留酯化产物(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯，进一步水解得到产物(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸。同样操作得到(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯和(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸。

(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-31)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ10.87(d，J＝2.4Hz，1H)，9.21(s，1H)，8.66(d，J＝7.5Hz，1H)，7.89(t，J＝2.1Hz，1H)，7.76(ddd，J＝8.2，2.2，0.9Hz，1H)，7.54(td，J＝7.9，5.7Hz，4H)，7.41(ddd，J＝8.0，2.0，0.9Hz，1H)，7.33(dt，J＝8.1，0.9Hz，1H)，7.18(d，J＝2.2Hz，1H)，7.07(dd，J＝8.8，2.2Hz，3H)，6.99(ddd，J＝7.9，7.0，1.0Hz，1H)，6.58(d，J＝12.6Hz，1H)，6.01(d，J＝12.6Hz，1H)，4.66(ddt，J＝7.4，5.4，3.7Hz，1H)，3.82(s，3H)，3.63(s，3H)，3.22(dd，J＝14.6，5.4Hz，1H)，3.10(dd，J＝14.6，8.8Hz，1H)；¹³C NMR(151MHz，DMSO-d6)δ173.13，166.13，160.04，154.00，140.77，136.57，134.53，131.92，131.46，130.52(2C)，128.81，127.49，126.90，124.61，124.22，121.47，120.97，118.92，118.87，118.48，117.62，116.50，114.63(2C)，111.94，109.99，55.71，53.68，52.40，27.55；ESI-MS：m/z 555.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₁H₂₈O₄N₄Cl[M+H]⁺ 555.1794，found 555.1792.

(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-32)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ12.71(s，1H)，10.84(d，J＝2.4Hz，1H)，9.26(s，1H)，8.51(d，J＝7.8Hz，1H)，7.88(t，J＝2.1Hz，1H)，7.75(ddd，J＝8.2，2.2，0.9Hz，1H)，7.58-7.51(m，4H)，7.41(ddd，J＝8.0，2.1，0.9Hz，1H)，7.32(d，J＝8.0Hz，1H)，7.17(d，J＝2.1Hz，1H)，7.09-7.04(m，3H)，6.99(ddd，J＝8.0，7.0，1.0Hz，1H)，6.56(d，J＝12.6Hz，1H)，6.01(d，J＝12.6Hz，1H)，4.61(ddt，J＝9.2，4.9，3.1Hz，1H)，3.82(s，3H)，3.25(dd，J＝14.7，4.8Hz，1H)，3.07(dd，J＝14.7，9.1Hz，1H)；¹³C NMR(151MHz，DMSO-d6)δ174.05，166.01，160.03，154.05，140.78，136.56，134.54，131.92，131.57，130.54(2C)，128.59，127.62，126.88，124.62，124.10，121.41，121.17，118.90，118.86，118.65，117.58，116.54，114.62(2C)，111.86，110.46，60.23，55.70，27.57；ESI-MS：m/z 541.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcdfor C₃₀H₂₆O₄N₄Cl[M+H]⁺ 541.1637，found 541.1637.

(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-33)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ10.88(d，J＝2.5Hz，1H)，9.04(d，J＝0.7Hz，1H)，8.58(d，J＝7.6Hz，1H)，8.05(t，J＝2.1Hz，1H)，7.92(ddd，J＝8.3，2.2，0.9Hz，1H)，7.58-7.51(m，4H)，7.42(ddd，J＝8.0，2.0，0.9Hz，1H)，7.38-7.33(m，2H)，7.17(d，J＝2.2Hz，1H)，7.11-7.05(m，3H)，6.99(ddd，J＝8.0，7.0，1.1Hz，1H)，6.52(d，J＝15.7Hz，1H)，4.62(ddt，J＝7.3，5.5，3.7Hz，1H)，3.82(s，3H)，3.62(s，3H)，3.21(dd，J＝14.8，5.2Hz，1H)，3.11(dd，J＝14.7，8.9Hz，1H)；¹³C NMR(151MHz，DMSO-d6)δ173.06，165.63，162.78，160.11，152.59，140.71，136.59，134.53，131.81，130.07(2C)，128.39，127.49，126.89，124.71，124.16，121.75，121.47，118.92，118.73，118.46，118.11，117.52，114.76(2C)，111.93，110.07，55.71，53.81，52.35，27.48；ESI-MS：m/z 555.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₁H₂₈O₄N₄Cl[M+H]⁺ 555.1794，found 555.1788.

(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-34)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ12.69(s，1H)，10.85(d，J＝2.4Hz，1H)，9.02(s，1H)，8.42(d，J＝7.9Hz，1H)，8.04(t，J＝2.1Hz，1H)，7.92(ddd，J＝8.2，2.2，0.9Hz，1H)，7.58-7.53(m，4H)，7.41(ddd，J＝8.0，2.1，0.9Hz，1H)，7.37-7.32(m，2H)，7.16(d，J＝2.1Hz，1H)，7.10-7.05(m，3H)，6.98(ddd，J＝7.9，7.0，1.0Hz，1H)，6.53(d，J＝15.7Hz，1H)，4.59(ddt，J＝9.4，4.9，3.1Hz，1H)，3.82(s，3H)，3.24(dd，J＝14.7，4.8Hz，1H)，3.09(dd，J＝14.7，9.3Hz，1H)；¹³C NMR(151 MHz，DMSO-d6)δ174.02，165.54，160.09，152.55，140.72，136.57，134.53，131.80，130.06(2C)，129.79，128.31，127.62，126.86，124.74，124.05，122.14，121.41，118.86，118.72，118.63，118.18，117.51，114.75(2C)，111.86，110.53，60.23，55.71，27.51；ESI-MS：m/z 541.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₀H₂₆O₄N₄Cl[M+H]⁺541.1637，found 541.1629.

实施例8将2-萘乙酮换为3-甲氧基苯丙酮，间甲基苯肼盐酸盐换成间氯苯肼盐酸盐，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例6，保留酯化产物(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(3-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯，同样操作得到(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(3-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯。

(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(3-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-35)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ10.87(s，1H)，9.21(s，1H)，8.67(d，J＝7.5Hz，1H)，7.91(q，J＝1.9Hz，1H)，7.78(d，J＝8.2Hz，1H)，7.59-7.51(m，2H)，7.47-7.41(m，2H)，7.33(d，J＝8.1Hz，1H)，7.20-7.15(m，2H)，7.14(s，1H)，7.10-7.03(m，2H)，7.00(t，J＝7.5Hz，1H)，6.62(d，J＝12.6Hz，1H)，6.04(d，J＝12.6Hz，1H)，4.69-4.62(m，1H)，3.83(d，J＝1.7Hz，3H)，3.63(s，3H)，3.23(dd，J＝14.7，5.4Hz，1H)，3.10(dd，J＝14.7，8.8Hz，1H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ172.47，165.47，159.19，153.27，140.09，135.94，133.92，132.97，131.30，130.93，129.65，127.95，126.86，126.44，123.58，120.92，120.84，120.68，118.38，118.29，117.84，117.15，116.12，114.10，113.88，111.30，109.36，55.03，53.06，51.76，26.90.ESI-MS：m/z 555.2[M+H]⁺，

(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(3-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-36)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ10.87(d，J＝2.3Hz，1H)，9.06(s，1H)，8.59(d，J＝7.5Hz，1H)，8.06(t，J＝2.0Hz，1H)，7.94(dd，J＝8.2，2.2Hz，1H)，7.58(td，J＝8.1，1.3Hz，1H)，7.52(d，J＝7.9Hz，1H)，7.48-7.33(m，4H)，7.20-7.16(m，3H)，7.10-7.04(m，2H)，6.99(t，J＝7.4Hz，1H)，6.54(dd，J＝15.8，1.3Hz，1H)，4.64(td，J＝8.4，6.3Hz，1H)，3.82(s，3H)，3.62(s，3H)，3.22(dd，J＝14.6，5.5Hz，1H)，3.11(dd，J＝14.6，8.9Hz，1H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ172.39，164.96，159.28，151.86，140.02，135.96，133.92，133.04，131.20，129.81，129.29，127.95，126.86，126.44，123.50，121.41，120.84，120.47，118.29，118.25，117.82，117.75，117.05，114.13，113.50，111.30，109.42，55.03，53.17，51.71，26.84.ESI-MS：m/z 555.2[M+H]⁺，

实施例9将2-萘乙酮换为2-甲氧基苯丙酮，间甲基苯肼盐酸盐换成间氯苯肼盐酸盐，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例6，保留酯化产物(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(2-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯，同样操作得到(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(2-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯。

(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(2-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-37)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ10.87(s，1H)，9.34(d，J＝3.0Hz，1H)，8.63-8.59(m，1H)，7.85(s，1H)，7.74(d，J＝8.2Hz，1H)，7.55(tt，J＝8.3，3.0Hz，2H)，7.52-7.46(m，1H)，7.44-7.39(m，1H)，7.367.32(m，2H)，7.19-7.15(m，2H)，7.10-7.04(m，2H)，7.03-6.98(m，1H)，6.21(dd，J＝12.9，3.0Hz，1H)，5.88(dd，J＝12.8，3.0Hz，1H)，4.67(dd，J＝9.2，5.3Hz，1H)，3.75(d，J＝3.0Hz，3H)，3.64(d，J＝3.0Hz，3H)，3.25-3.20(m，1H)，3.13-3.06(m，1H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ172.51，165.63，156.88，152.58，140.18，135.95，133.90，131.33(2C)，130.48，130.23，128.76，126.86，126.23，123.55，120.84，120.48，120.32，118.90，118.29，118.20，117.84，117.72，116.95，111.49，111.30，109.39，55.23，53.03，51.77，26.91.ESI-MS：m/z 555.2[M+H]⁺，

(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(2-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-38)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ10.86(s，1H)，9.00(d，J＝2.7Hz，1H)，8.48(d，J＝7.6Hz，1H)，8.01(s，1H)，7.89(d，J＝8.4Hz，1H)，7.56(td，J＝8.2，2.6Hz，1H)，7.50(t，J＝8.2Hz，2H)，7.41(d，J＝8.1Hz，1H)，7.39-7.32(m，2H)，7.20-7.16(m，1H)，7.15(s，1H)，7.11-7.05(m，3H)，7.01-6.96(m，1H)，6.32(dd，J＝15.8，2.8Hz，1H)，4.59(d，J＝7.6Hz，1H)，3.71(d，J＝2.7Hz，3H)，3.60(d，J＝2.7Hz，3H)，3.223.17(m，1H)，3.123.05(m，1H).¹³CNMR(151MHz，DMSO-d₆)δ172.44，165.14，156.77，150.52，140.13，135.93，133.89，131.18，130.99，130.46，130.18，127.08，126.84，126.16，123.46，120.82，120.76，120.36，119.85，119.32，118.28，118.00，117.80，116.80，111.67，111.28，109.47，55.21，53.10，51.67，26.76.ESI-MS：m/z 555.2[M+H]⁺，

实施例10将2-萘乙酮换为对甲氧基苯丙酮，间甲基苯肼盐酸盐换成3，5-二甲基苯肼盐酸盐，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例6，保留酯化产物(Z)-(3-(1-(3，5-二甲苯基)-3-(2-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯。

(Z)-(3-(1-(3，5-二甲苯基)-3-(2-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-39)

¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ10.87(s，1H)，9.17(s，1H)，8.64(d，J＝7.5Hz，1H)，7.52-7.49(m，3H)，7.40(s，2H)，7.32(d，J＝8.0Hz，1H)，7.17(d，J＝2.5Hz，1H)，7.07-7.05(m，3H)，6.99(d，J＝8.8Hz，2H)，6.56(d，J＝12.6Hz，1H)，5.95(d，J＝12.6Hz，1H)，4.63(q，J＝7.6Hz，1H)，3.81(d，J＝2.1Hz，3H)，3.61(s，3H)，3.25-3.16(m，1H)，3.12-3.05(m，1H)，2.34(s，6H).ESI-MS：m/z 549.2[M+H]⁺，

实施例11将2-萘乙酮换为4′-环己基苯乙酮，间甲基苯肼盐酸盐换成间氯苯肼盐酸盐，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例6，保留酯化产物(Z)-(3-(1-(3-(间氯苯基)-3-(4-环己基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯，进一步水解得到产物(Z)-(3-(1-(3-(间氯苯基)-3-(4-环己基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸。同样操作得到(E)-(3-(1-(3-(间氯苯基)-3-(4-环己基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯和(E)-(3-(1-(3-(间氯苯基)-3-(4-环己基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸。

(Z)-(3-(1-(3-(间氯苯基)-3-(4-环己基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-40)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ10.87(d，J＝2.4Hz，1H)，9.22(s，1H)，8.66(d，J＝7.5Hz，1H)，7.89(t，J＝2.1Hz，1H)，7.76(ddd，J＝8.2，2.2，0.9Hz，1H)，7.57-7.50(m，4H)，7.42(ddd，J＝8.1，2.0，0.9Hz，1H)，7.37-7.32(m，3H)，7.18(d，J＝2.2Hz，1H)，7.06(ddd，J＝8.1，6.9，1.2Hz，1H)，6.99(ddd，J＝7.9，7.0，1.0Hz，1H)，6.61(dd，J＝12.6，0.7Hz，1H)，6.02(d，J＝12.6Hz，1H)，4.69-4.62(m，1H)，3.63(s，3H)，3.22(dd，J＝14.6，5.4Hz，1H)，3.10(dd，J＝14.6，8.8Hz，1H)，2.57(tt，J＝11.6，3.3Hz，1H)，1.82(dq，J＝8.9，3.0，2.4Hz，4H)，1.75-1.70(m，1H)，1.50-1.34(m，4H)，1.31-1.21(m，1H)；¹³C NMR(151MHz，DMSO-d6)δ173.13，166.13，154.18，148.52，140.76，136.57，134.54，131.94，131.52，129.86，129.19(2C)，128.77，127.49，127.47(2C)，126.96，124.21，121.47，121.06，118.92，118.90，118.47，117.64，116.61，111.94，110.00，53.68，52.40，44.06，34.34(2C)，27.50，26.81(2C)，26.06；ESI-MS：m/z 607.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₆H₃₆O₃N₄Cl[M+H]⁺607.2470，found 607.2476.

(Z)-(3-(1-(3-(间氯苯基)-3-(4-环己基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-41)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ12.69(s，1H)，10.84(d，J＝2.4Hz，1H)，9.28(s，1H)，8.52(d，J＝7.8Hz，1H)，7.88(t，J＝2.1Hz，1H)，7.75(ddd，J＝8.2，2.2，0.9Hz，1H)，7.59-7.48(m，4H)，7.42(ddd，J＝8.0，2.1，0.9Hz，1H)，7.38-7.34(m，2H)，7.34-7.31(m，1H)，7.17(d，J＝2.1Hz，1H)，7.06(ddd，J＝8.0，6.9，1.2Hz，1H)，6.98(ddd，J＝8.0，7.0，1.0Hz，1H)，6.58(d，J＝12.6Hz，1H)，6.02(d，J＝12.7Hz，1H)，4.61(ddt，J＝9.2，4.9，3.2Hz，1H)，3.25(dd，J＝14.7，4.8Hz，1H)，3.07(dd，J＝14.7，9.2Hz，1H)，2.57(tt，J＝11.8，3.3Hz，1H)，1.82(td，J＝10.4，9.9，5.1Hz，4H)，1.75-1.69(m，1H)，1.50-1.34(m，4H)，1.31-1.22(m，1H)；¹³C NMR(151MHz，DMSO-d6)δ174.04，166.01，154.24，148.51，140.77，136.56，134.54，131.94，131.63，129.87，129.21(2C)，128.56，127.61，127.47(2C)，126.94，124.10，121.41，121.25，118.93，118.86，118.64，117.60，116.65，111.87，110.45，60.23，44.06，34.34(2C)，27.56，26.81(2C)，26.06；ESI-MS：m/z 593.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd forC₃₅H₃₄O₃N₄Cl[M+H]⁺ 593.2314，found 593.2313.

(E)-(3-(1-(3-(间氯苯基)-3-(4-环己基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-42)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ10.88(d，J＝2.5Hz，1H)，9.07(s，1H)，8.59(d，J＝7.5Hz，1H)，8.05(t，J＝2.1Hz，1H)，7.95-7.90(m，1H)，7.57(t，J＝8.1Hz，1H)，7.53(dd，J＝8.0，3.5Hz，3H)，7.44-7.41(m，1H)，7.39-7.33(m，4H)，7.17(d，J＝2.1Hz，1H)，7.09-7.05(m，1H)，7.01-6.97(m，1H)，6.54(d，J＝15.7Hz，1H)，4.66-4.59(m，1H)，3.62(s，3H)，3.21(dd，J＝14.6，5.4Hz，1H)，3.11(dd，J＝14.6，9.0Hz，1H)，2.57(tt，J＝11.8，3.3Hz，1H)，1.86-1.79(m，4H)，1.72(dd，J＝13.0，4.0Hz，1H)，1.50-1.34(m，4H)，1.26(dddd，J＝15.9，12.6，8.2，3.7Hz，1H)；¹³C NMR(151 MHz，DMSO-d6)δ173.06，165.64，152.84，148.65，140.71，136.59，134.54，131.83，130.05，129.91，128.74(2C)，128.29，127.60(2C)，127.49，126.96，124.15，121.86，121.47，118.92，118.78，118.47，118.25，117.56，111.93，110.07，53.82，52.35，44.06，34.32(2C)，27.47，26.80(2C)，26.05；ESI-MS：m/z 607.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₆H₃₆O₃N₄Cl[M+H]⁺ 607.2470，found 607.2478.

(E)-(3-(1-(3-(间氯苯基)-3-(4-环己基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-43)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ12.67(s，1H)，10.86(s，1H)，9.05(s，1H)，8.44(d，J＝7.8Hz，1H)，8.05(s，1H)，7.93(d，J＝8.3Hz，1H)，7.55(dd，J＝23.6，7.9Hz，4H)，7.44-7.32(m，5H)，7.18(s，1H)，7.07(t，J＝7.5Hz，1H)，6.99(t，J＝7.5Hz，1H)，6.56(d，J＝15.6Hz，1H)，4.62-4.59(m，1H)，3.25(dd，J＝15.1，4.7Hz，1H)，3.10(dd，J＝14.7，9.3Hz，1H)，2.57(t，J＝12.1Hz，1H)，1.82(t，J＝13.8Hz，4H)，1.72(d，J＝13.0Hz，1H)，1.43(dq，J＝25.5，12.7Hz，4H)，1.28-1.21(m，1H)；¹³C NMR(151MHz，DMSO-d6)δ174.04，165.56，152.79，148.62，140.72，136.58，134.54，131.81，129.93，129.73，128.72(2C)，128.20，127.63，127.59(2C)，126.93，124.04，122.25，121.41，118.86，118.76，118.64，118.32，117.53，111.86，110.54，53.71，44.07，34.31(2C)，27.52，26.80(2C)，26.05；ESI-MS：m/z 593.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₅H₃₄O₃N₄Cl[M+H]⁺ 593.2314，found 593.2323.

实施例12将2-萘乙酮换为苯丙酮，间甲基苯肼盐酸盐换成间氯苯肼盐酸盐，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例6，保留酯化产物(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-苯乙基-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯，进一步水解得到产物(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-苯乙基-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸。同样操作得到(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-苯乙基-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯和(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-苯乙基-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸。

(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-苯乙基-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-52)

¹H NMR(600MHz，Chloroform-d)δ9.11(s，1H)，8.02(s，1H)，7.75(d，J＝2.0Hz，1H)，7.58(dd，J＝8.1，2.1Hz，1H)，7.51(d，J＝7.9Hz，1H)，7.33(t，J＝8.0Hz，1H)，7.31-7.27(m，3H)，7.25-7.24(m，1H)，7.23(s，1H)，7.22(d，J＝7.1Hz，1H)，7.19(d，J＝7.3Hz，1H)，7.16(t，J＝7.6Hz，1H)，7.09(t，J＝7.5Hz，1H)，6.93(d，J＝2.3Hz，1H)，6.45(d，J＝12.4Hz，1H)，6.15(d，J＝7.9Hz，1H)，5.59(d，J＝12.5Hz，1H)，5.03(dt，J＝8.6，5.3Hz，1H)，3.74(s，3H)，3.37(d，J＝5.2Hz，2H)，3.02(t，J＝2.6Hz，4H).¹³C NMR(151MHz，Chloroform-d)δ172.40，165.92，155.02，141.49，140.73，136.07，135.11，130.67，130.31，128.97，128.49(2C)，128.46(2C)，127.57，126.34，126.13，122.65，122.35，119.80，119.40，118.51，118.15，117.11，116.39，111.25，110.01，52.92，52.47，35.59，28.44，27.62.ESI-MS：m/z 553.2[M+H]⁺.

(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-苯乙基-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-53)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ12.70(s，1H)，10.85(d，J＝5.2Hz，1H)，9.25(d，J＝10.1Hz，1H)，8.49(d，J＝7.5Hz，1H)，7.79(s，1H)，7.67(d，J＝8.2Hz，1H)，7.59(d，J＝8.0Hz，1H)，7.51(td，J＝8.2，2.5Hz，1H)，7.35(dt，J＝14.5，7.5Hz，2H)，7.29(d，J＝4.4Hz，4H)，7.18(d，J＝7.8Hz，2H)，7.07(t，J＝7.2Hz，1H)，7.00(q，J＝6.9Hz，1H)，6.61(d，J＝12.8Hz，1H)，5.96(d，J＝12.2Hz，1H)，4.65-4.61(m，1H)，3.30-3.24(m，1H)，3.12-3.06(m，1H)，3.01-2.95(m，4H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ173.51，165.53，154.57，141.15，140.19，135.94，133.86，131.24，130.43，128.26(2C)，128.08(2C)，127.41，127.01，125.85，125.78，123.44，120.78，119.38，118.23，118.02，117.95，116.58(2C)，111.24，109.87，52.93，34.51，27.46，26.98.ESI-MS：m/z 539.2[M+H]⁺

(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-苯乙基-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-54)

¹H NMR(600MHz，Chloroform-d)δ8.12(s，1H)，7.96(s，1H)，7.71(t，J＝1.9Hz，1H)，7.57-7.50(m，2H)，7.47(d，J＝15.6Hz，1H)，7.40-7.33(m，2H)，7.28(s，2H)，7.25(s，1H)，7.23-7.15(m，4H)，7.09(t，J＝7.5Hz，1H)，7.01-6.98(m，1H)，6.07-6.01(m，2H)，5.09(dd，J＝8.2，4.8Hz，1H)，3.73(s，3H)，3.453.34(m，2H)，3.05(s，4H).¹³C NMR(151MHz，Chloroform-d)δ172.43，165.48，153.81，141.36，140.47，136.11，135.35，131.11，130.52，128.53(2C)，128.45(2C)，127.76，126.64，126.27，126.14，122.77，122.33，119.79，119.33，119.05，118.71，118.36，116.79，111.28，110.17，53.17，52.43，34.92，29.23，27.74.ESI-MS：m/z 553.2[M+H]⁺

(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-苯乙基-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-55)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ10.85(s，1H)，8.84(s，1H)，8.40(t，J＝6.1Hz，1H)，7.92(s，1H)，7.81(d，J＝8.2Hz，1H)，7.57(dd，J＝8.3，3.9Hz，1H)，7.53(td，J＝8.2，2.3Hz，1H)，7.39-7.26(m，7H)，7.217.15(m，2H)，7.06(t，J＝7.5Hz，1H)，7.00-6.95(m，1H)，6.47(dd，J＝16.3，4.9Hz，1H)，4.63(t，J＝7.4Hz，1H)，3.25(dd，J＝14.1，6.3Hz，1H)，3.09(q，J＝7.4Hz，1H)，3.03(s，4H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ173.45，165.07，152.51，141.14，140.08，135.94，133.85，131.12，128.88，128.31(3C)，128.11(2C)，127.05，125.78(2C)，123.35，120.76，120.45，118.20，118.05，117.97，117.65，116.43，111.21，109.90，53.05，33.60，28.64，27.07.ESI-MS：m/z 539.2[M+H]⁺

实施例13

向50mL茄形瓶中加入(Z)-(3-(3-(4-硝基苯基)-1-(间甲苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯28.5mg，0.05mmol)，甲醇(10mL)，铁粉(14mg，0.25mmol)，氯化铵水溶液(8mg，0.15mmol)，加热回流搅拌5h；硅藻土抽滤除去铁粉，加水(10mL)，二氯甲烷(10mL)萃取3次，干燥，过滤，浓缩，石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1柱层析得固体(Z)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(27mg，100％)。用甲醇水解得到(Z)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸。同样的操作得到(E)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯和(E)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸

(Z)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-56)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ10.87(s，1H)，9.18(s，1H)，8.63(d，J＝7.5Hz，1H)，7.86(t，J＝2.0Hz，1H)，7.74(d，J＝8.1Hz，1H)，7.53(dt，J＝7.9，4.1Hz，2H)，7.41-7.30(m，2H)，7.28(d，J＝8.0Hz，2H)，7.19(s，1H)，7.07(t，J＝7.5Hz，1H)，7.00(t，J＝7.4Hz，1H)，6.68(d，J＝8.0Hz，2H)，6.59(d，J＝12.5Hz，1H)，5.98(d，J＝12.6Hz，1H)，5.40(s，2H)，4.66(q，J＝7.4Hz，1H)，3.63(s，3H)，3.26-3.20(m，1H)，3.14-3.07(m，1H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ172.53，165.61，154.40，149.09，140.24，135.95，133.87，131.24，130.60，129.43(2C)，128.69，126.87，125.97，123.58，120.84，119.68，118.71，118.29，118.05，117.85，116.77，115.58，113.52(2C)，111.31，109.39，53.04，51.76，26.92.ESI-MS：m/z 540.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₀H₂₆ClN₅O₃[M+H]⁺ 540.1797，found 540.1796.

(Z)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-57)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ10.85(s，1H)，9.23(s，1H)，8.48(d，J＝7.8Hz，1H)，7.86(s，1H)，7.72(d，J＝8.2Hz，1H)，7.57(d，J＝7.9Hz，1H)，7.53(t，J＝8.1Hz，1H)，7.39(dd，J＝8.0，2.0Hz，1H)，7.33(d，J＝8.1Hz，1H)，7.28(d，J＝8.2Hz，2H)，7.18(s，1H)，7.06(t，J＝7.5Hz，1H)，6.99(t，J＝7.4Hz，1H)，6.68(d，J＝8.2Hz，2H)，6.57(d，J＝12.6Hz，1H)，5.98(d，J＝12.6Hz，1H)，4.61(td，J＝8.4，4.8Hz，1H)，3.25(dd，J＝14.7，4.8Hz，1H)，3.08(dd，J＝14.7，9.1Hz，1H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ173.46，165.49，154.44，149.04，140.24，135.93，133.87，131.25，130.71，129.44(2C)，128.47，126.99，125.96，123.46，120.77，119.88，118.74，118.23，118.08，118.01，116.73，115.62，113.53(2C)，111.23，109.84，52.92，26.94.ESI-MS：m/z 526.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₂₉H₂₄ClN₅O₃[M+H]⁺526.1640，found 526.1627.

(E)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-58)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ10.88(s，1H)，8.98(s，1H)，8.56(d，J＝7.5Hz，1H)，8.03(d，J＝2.5Hz，1H)，7.91(d，J＝8.2Hz，1H)，7.577.51(m，2H)，7.40(d，J＝7.4Hz，2H)，7.37-7.33(m，1H)，7.32-7.28(m，2H)，7.18(s，1H)，7.08(t，J＝7.5Hz，1H)，7.00(t，J＝7.6Hz，1H)，6.69(d，J＝8.0Hz，2H)，6.51(dd，J＝15.7，2.0Hz，1H)，5.42(s，2H)，4.64(q，J＝7.5Hz，1H)，3.62(s，3H)，3.22(dd，J＝14.8，5.4Hz，1H)，3.12(dd，J＝14.6，8.5Hz，1H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ172.46，165.13，152.92，149.15，140.18，135.96，133.87，131.13，129.99，128.94(2C)，127.41，126.87，125.96，123.52，120.84，120.59，118.86，118.29，117.91，117.84，117.18，116.70，113.62(2C)，111.30，109.46，53.17，51.71，26.86.ESI-MS：m/z 540.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₀H₂₆ClN₅O₃[M+H]⁺ 540.1797，found540.1790.

(E)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-59)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ10.85(s，1H)，8.96(s，1H)，8.40(d，J＝7.8Hz，1H)，8.02(s，1H)，7.90(d，J＝8.2Hz，1H)，7.59-7.53(m，2H)，7.41-7.36(m，2H)，7.36-7.32(m，2H)，7.30(d，J＝8.0Hz，2H)，7.17(s，1H)，7.07(t，J＝7.5Hz，1H)，6.99(t，J＝7.5Hz，1H)，6.69(d，J＝8.0Hz，2H)，6.52(d，J＝15.7Hz，1H)，4.60(td，J＝8.5，4.8Hz，1H)，3.24(dd，J＝14.7，4.9Hz，1H)，3.09(dd，J＝14.6，9.5Hz，1H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ173.43，165.04，152.89，149.17，140.18，135.94，133.86，131.12，129.67，128.93(2C)，127.31，126.98，125.93，123.41，120.94，120.78，118.85，118.23，118.00，117.90，117.23，116.68，113.59(2C)，111.23，109.90，53.02，26.89.ESI-MS：m/z 526.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcdfor C₂₉H₂₄ClN₅O₃[M+H]⁺ 526.1640，found 526.1632.

实施例14

向50mL二颈瓶中加入(Z)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(54mg，0.1mmol)，无水DMF(8mL)，DIPEA(39mg，0.3mmol)，氮气保护下加入1-溴-2-(2-溴乙氧基)乙烷(30mg，0.13mmol)，75℃加热下搅拌6h；加水(10mL)，乙酸乙酯(10mL)萃取3次，干燥，过滤，浓缩；石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1柱层析得固体(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-吗啉代苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(16mg，27％)。用甲醇水解得到(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-吗啉代苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸。同样的操作得到(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-吗啉代苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯和(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-吗啉代苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸

(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-吗啉代苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-60)

¹H NMR(600MHz，CDCl3)δ9.10(s，1H)，8.06(s，1H)，7.80(s，1H)，7.64(d，J＝8.1Hz，1H)，7.57(s，2H)，7.50(d，J＝7.7Hz，1H)，7.33(t，J＝8.0Hz，1H)，7.24(d，J＝8.0Hz，2H)，7.09(dt，J＝29.3，7.2Hz，4H)，6.92(s，1H)，6.66(s，1H)，6.33-6.23(m，1H)，5.71(s，1H)，5.04(d，J＝5.5Hz，1H)，3.94(s，4H)，3.75(s，3H)，3.37(s，2H)，3.27(s，4H).¹³C NMR(151MHz，CDCl₃)δ171.81，165.35，153.71，140.01，135.44，134.48，130.19，129.68(2C)，129.48(2C)，126.85，125.90(2C)，122.05，121.73(2C)，119.18，118.83(2C)，118.70，117.79，116.54，115.28，110.65(2C)，109.29，65.98(2C)，52.29，51.90，48.96，29.07，26.91.ESI-MS：m/z 610.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₄H₃₂ClN₅O₄[M+H]⁺ 610.2216，found 610.2195.

(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-吗啉代苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-61)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ12.74(s，1H)，10.85(s，1H)，9.27-9.24(m，1H)，8.50(d，J＝7.6Hz，1H)，7.88(s，1H)，7.77-7.72(m，1H)，7.58(dd，J＝8.2，2.9Hz，1H)，7.54(t，J＝8.1Hz，1H)，7.48(d，J＝8.4Hz，2H)，7.41(d，J＝7.9Hz，1H)，7.33(d，J＝8.0Hz，1H)，7.19(s，1H)，7.08-7.04(m，3H)，6.99(t，J＝7.5Hz，1H)，6.58(d，J＝12.5Hz，1H)，6.04-5.99(m，1H)，4.62(dd，J＝8.5，5.0Hz，1H)，3.77(t，J＝4.6Hz，3H)，3.26(dd，J＝14.7，4.8Hz，1H)，3.21-3.17(m，4H)，3.08(ddd，J＝14.8，9.5，3.6Hz，1H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ173.48，165.42，153.67，150.90，140.19，135.93，133.90，131.27，130.88，129.33(2C)，128.13，127.01，126.14，123.46，122.04，120.77，120.35，118.22，118.21，118.02，116.86，115.86，114.56(2C)，111.23，109.87，65.87(2C)，52.97，47.78(2C)，26.96.ESI-MS：m/z 596.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₃H₃₀ClN₅O₄[M+H]⁺ 596.2059，found 596.2044.

(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-吗啉代苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-62)

¹H NMR(600MHz，CDCl₃)δ8.09(s，1H)，7.79(s，1H)，7.68-7.56(m，4H)，7.56-7.48(m，2H)，7.44-7.35(m，2H)，7.28(s，2H)，7.21-7.15(m，2H)，7.14-7.06(m，2H)，7.05-6.94(m，1H)，6.16(s，1H)，5.10(s，1H)，3.97(s，4H)，3.73(s，3H)，3.40(s，2H)，3.26(s，4H).¹³CNMR(151MHz，CDCl₃)δ172.51，165.42，140.38，136.18，135.39，130.62(2C)，129.75(2C)，127.75，126.90(2C)，123.07，122.23(3C)，119.69(2C)，119.50(2C)，118.67(2C)，118.09，117.04，111.42(2C)，109.99，72.14，70.92，61.73，53.00，52.54，29.70，27.76.ESI-MS：m/z610.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₄H₃₂ClN₅O₄[M+H]⁺ 610.2216，found 610.2188.

(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-吗啉代苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-63)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ10.85(s，1H)，9.00(s，1H)，8.38(d，J＝7.8Hz，1H)，8.04(s，1H)，7.91(d，J＝8.2Hz，1H)，7.59-7.47(m，4H)，7.43-7.36(m，1H)，7.36-7.32(m，2H)，7.17(s，1H)，7.10-7.04(m，3H)，6.98(t，J＝7.5Hz，1H)，6.54(d，J＝15.7Hz，1H)，4.59(dt，J＝8.9，4.8Hz，1H)，3.76(t，J＝4.8Hz，4H)，3.25(dd，J＝14.7，4.5Hz，1H)，3.19(t，J＝4.9Hz，4H)，3.15-3.06(m，1H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ173.54，164.90，152.15，150.95，140.13，135.93，133.88，131.15，129.27，128.82(2C)，127.51，127.05，126.11，123.38，122.13，121.46，120.74，118.20，118.02，117.52，116.80，114.65(2C)，114.47，111.20，110.02，65.86(2C)，53.20，47.74(2C)，26.93.ESI-MS：m/z 596.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcdfor C₃₃H₃₀ClN₅O₄[M+H]⁺ 596.2059，found 596.2041.

实施例15

向50mL茄形瓶中加入(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(55mg，0.1mmo1)，二氯甲烷(5mL)，三溴化硼(5mL)，室温搅拌5h；甲醇淬灭反应，二氯甲烷∶甲醇＝20∶1柱层析得固体(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-羟基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(37mg，67％)。用甲醇水解得到(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-羟基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸。同样的操作得到(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-羟基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯和(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-羟基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸.

(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-羟基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-64)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ10.87(s，1H)，9.74(s，1H)，9.21(s，1H)，8.65(d，J＝7.5Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.76(d，J＝8.2Hz，1H)，7.57-7.52(m，2H)，7.47-7.38(m，3H)，7.38-7.33(m，1H)，7.19(s，1H)，7.07(t，J＝7.4Hz，1H)，7.00(t，J＝7.4Hz，1H)，6.91(d，J＝8.0Hz，2H)，6.59(d，J＝12.6Hz，1H)，6.01(d，J＝12.5Hz，1H)，4.66(dq，J＝16.0，7.4Hz，1H)，3.64(s，3H)，3.24(dd，J＝14.6，5.4Hz，1H)，3.12(dd，J＝14.4，8.3Hz，1H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ172.50，165.55，157.76，153.78，140.17，135.95，133.90，131.25，130.73，129.92(2C)，128.34，126.88，126.15，123.58，122.35，120.84，120.11，118.29，118.17，117.85，116.90，115.77，115.33(2C)，111.31，109.38，53.05，51.76，26.92.ESI-MS：m/z 541.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₀H₂₅ClN₄O₄[M+H]⁺ 541.1637，found541.1621.

(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-羟基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-65)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ12.68(s，1H)，10.84(s，1H)，9.74(s，1H)，9.26(s，1H)，8.50(d，J＝7.7Hz，1H)，7.88(d，J＝2.2Hz，1H)，7.74(d，J＝8.3Hz，1H)，7.63-7.50(m，2H)，7.47-7.39(m，3H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)，7.18(s，1H)，7.10-7.04(m，1H)，7.04-6.97(m，1H)，6.90(d，J＝8.0Hz，2H)，6.57(d，J＝12.6Hz，1H)，6.01(d，J＝12.6Hz，1H)，4.62(td，J＝8.8，5.1Hz，1H)，3.26(dd，J＝14.8，5.1Hz，1H)，3.08(dd，J＝14.8，9.0Hz，1H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ173.45，165.43，157.74，153.83，140.18，135.93，133.90，131.27，130.85，129.94(2C)，129.44，128.13，127.00，126.15，123.46，122.36，120.77，120.31，118.22，118.01，116.86，115.80，115.32(2C)，111.23，109.84，52.93，26.94.ESI-MS：m/z527.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₂₉H₂₃ClN₄O₄[M+H]⁺ 527.1481，found 527.1460.

(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-羟基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-66)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ10.99(s，1H)，9.90(s，1H)，9.03(s，1H)，8.63(d，J＝7.5Hz，1H)，8.04(s，1H)，7.92(d，J＝8.2Hz，1H)，7.58-7.50(m，2H)，7.44(d，J＝7.9Hz，2H)，7.40(d，J＝8.0Hz，1H)，7.38-7.33(m，2H)，7.20(s，1H)，7.07(t，J＝7.6Hz，1H)，6.99(t，J＝7.5Hz，1H)，6.94(d，J＝7.9Hz，2H)，6.55(d，J＝15.7Hz，1H)，4.63(q，J＝7.3Hz，1H)，3.62(s，3H)，3.22(dd，J＝14.7，5.2Hz，1H)，3.13(dd，J＝14.6，9.3Hz，1H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ172.44，165.10，157.90，152.35，140.10，135.96，133.89，131.16，129.62，129.42(2C)，127.64，126.84，126.15，123.60，122.40，120.97，120.80，118.27，118.02，117.79，117.38，116.81，115.48(2C)，111.33，109.38，53.22，51.71，26.83.ESI-MS：m/z541.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₀H₂₅ClN₄O₄[M+H]⁺ 541.1637，found 541.1622.

(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-羟基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-67)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ12.60(s，1H)，10.85(d，J＝2.4Hz，1H)，9.76(s，1H)，9.00(s，1H)，8.42(d，J＝7.9Hz，1H)，8.04(s，1H)，7.92(d，J＝8.3Hz，1H)，7.59-7.51(m，2H)，7.47-7.43(m，2H)，7.41(dd，J＝7.9，1.9Hz，1H)，7.38-7.32(m，2H)，7.17(d，J＝2.5Hz，1H)，7.07(t，J＝7.5Hz，1H)，6.99(t，J＝7.5Hz，1H)，6.94-6.89(m，2H)，6.53(d，J＝15.7Hz，1H)，4.60(tt，J＝8.3，3.8Hz，1H)，3.24(dd，J＝14.7，4.7Hz，1H)，3.09(dd，J＝15.0，9.6Hz，1H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ173.42，164.96，157.81，152.29，140.12，135.95，133.89，131.15，129.44(2C)，129.34，127.55，126.98，126.13，123.41，122.49，121.29，120.78，118.23，118.03，118.00，117.43，116.81，115.44(2C)，111.24，109.90，53.04，26.89.ESI-MS：m/z 527.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₂₉H₂₃ClN₄O₄[M+H]⁺ 527.1481，found527.1464.

实施例16

50mL茄形瓶中加入(E)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(I-58，73mg，0.135mmol)，无水DMF(10mL)，HATU(77mg，0.202mmol)，DIPEA(67μL，0.405mmol)，3-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙氧基)丙酸(35mg，0.16mmol)，室温搅拌过夜。加入水(20mL)，乙酸乙酯(20mL)萃取3次，干燥，过滤，浓缩。石油醚∶乙酸乙酯＝1∶1柱层析得固体I-58-Linker-NHBoc。随后50mL茄形瓶中加入I-58-Linker-NHBoc，无水二氯甲烷(2mL)，三氟乙酸(2mL)，室温搅拌1h。加入碳酸氢钠水溶液(5mL)，二氯甲烷(5mL)萃取3次，干燥，过滤，浓缩投入下一步反应。无水DMF(10mL)，HATU(68mg，0.178mmol)，DIPEA(60μL，0.365mmol)，沙利度安乙酸(48mg，0.144mmol)，室温搅拌过夜。加入水(10mL)，乙酸乙酯(10mL)萃取3次，干燥，过滤，浓缩。二氯甲烷∶甲醇＝20∶1柱层析得固体I-58-PROTAC2，对甲酯水解得I-59-PROTAC2。

I-58-PROTAC2(I-68)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ11.12(s，1H)，10.87(s，1H)，10.12(s，1H)，9.05(s，1H)，8.59(d，J＝7.6Hz，1H)，8.078.02(m，2H)，7.93(d，J＝8.3Hz，1H)，7.80(t，J＝7.9Hz，1H)，7.74(d，J＝8.2Hz，2H)，7.61-7.50(m，4H)，7.47(d，J＝7.3Hz，1H)，7.43(d，J＝8.1Hz，1H)，7.41-7.32(m，3H)，7.18(s，1H)，7.07(t，J＝7.6Hz，1H)，6.99(t，J＝7.6Hz，1H)，6.53(d，J＝15.7Hz，1H)，5.12(dd，J＝12.9，5.4Hz，1H)，4.78(s，2H)，4.63(q，J＝7.5Hz，1H)，3.74(t，J＝6.4Hz，2H)，3.62(s，3H)，3.49(t，J＝6.0Hz，2H)，3.42-3.37(m，2H)，3.22(dd，J＝14.9，5.3Hz，1H)，3.18(s，1H)，3.11(dd，J＝14.7，8.9Hz，1H)，2.89(ddd，J＝18.1，14.1，5.4Hz，1H)，2.64-2.53(m，4H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ172.60，172.42，169.72，169.21，166.77，166.55，165.27，164.98，154.84，151.76，140.05，139.43，136.73，135.95，133.90，132.86，131.19，129.41，128.50(2C)127.83，126.85，126.31(2C)，123.52，121.24，120.83，120.18，118.95(2C)，118.29，118.14，117.83，117.55，116.92，116.61，115.86，111.29，109.43，68.43，67.35，66.21，64.75，53.18，51.72，48.63，36.91，30.78，26.86，21.83.ESI-MS：m/z 969.2[M+H]⁺，

I-59-PROTAC2(I-69)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ12.61(s，1H)，10.84(s，1H)，10.14(s，1H)，9.03(s，1H)，8.49-8.41(m，1H)，8.05(s，1H)，7.97-7.86(m，2H)，7.81-7.73(m，2H)，7.60-7.55(m，4H)，7.49-7.40(m，2H)，7.39-7.33(m，2H)，7.29-7.25(m，1H)，7.23-7.14(m，2H)，7.07(t，J＝7.5Hz，1H)，6.99(t，J＝7.5Hz，1H)，6.82(s，1H)，6.54(d，J＝15.7Hz，1H)，4.64-4.49(m，3H)，4.33(q，J＝8.0，7.5Hz，1H)，3.72(t，J＝6.3Hz，2H)，3.47(t，J＝6.0Hz，2H)，3.33-3.30(m，6H)，3.27-3.16(m，1H)，3.09(dd，J＝14.8，9.2Hz，1H)，2.60(q，J＝6.9Hz，2H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ173.55，173.39，173.05，171.85，170.18，169.23，166.26，164.91，154.36，151.76，140.06，139.43，135.94，134.61，133.90，131.18，130.89，129.85，129.62，129.08，128.53(2C)，127.77，126.97，126.42，126.29，123.41，121.61，120.78，120.27，118.98(2C)，118.23，118.13，118.00，117.63，116.92，111.23，109.88，68.41，66.23，59.59，53.03，52.04，36.91，31.33，26.89，20.89，20.60.ESI-MS：m/z 955.2[M+H]⁺，

实施例17

将(E)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯换成(z)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯，3-(2-((叔丁氧基羰基)氨基)乙氧基)丙酸换为N-Boc-3-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]丙酸，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例16，得到产物I-56-PROTAC1(I-70)

I-56-PROTAC1(I-70)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ11.12(s，1H)，10.95(s，1H)，10.29(s，1H)，9.20(s，1H)，8.74-8.70(m，1H)，8.10-8.07(m，1H)，7.89(s，1H)，7.83-7.75(m，4H)，7.58-7.50(m，4H)，7.48(d，J＝7.2Hz，1H)，7.44-7.37(m，2H)，7.34(d，J＝8.1Hz，1H)，7.20(s，1H)，7.06(t，J＝7.5Hz，1H)，6.99(t，J＝7.4Hz，1H)，6.60(d，J＝12.5Hz，1H)，6.04(d，J＝12.6Hz，1H)，5.12(dd，J＝12.9，5.4Hz，1H)，4.80(s，2H)，4.64(q，J＝7.5Hz，1H)，3.72(t，J＝6.3Hz，2H)，3.63(s，3H)，3.563.52(m，4H)，3.47(t，J＝5.7Hz，2H)，3.31(q，J＝5.8Hz，2H)，3.25-3.15(m，2H)，3.11(dd，J＝14.6，8.8Hz，1H)，2.90(ddd，J＝18.0，13.9，5.5Hz，1H)，2.63-2.57(m，4H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ172.62，172.49，169.72，169.34，166.75，166.57，165.50，165.27，154.84，153.21，140.11，139.46，136.76，135.94，133.89，132.86，131.29，130.88，128.92(2C)，128.09，126.84，126.29，126.20，123.64，120.79，120.48，120.15，118.82(2C)，118.26(2C)，117.80，117.02，116.55，115.95，115.83，111.32，109.32，69.44，69.39，68.65，67.29，66.47，53.09，51.76，48.63，38.23，37.01，30.78，26.87，21.83.ESI-MS：m/z1013.2[M+H]⁺，

实施例18

将(E)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯换成(Z)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例16，得到产物I-58-PROTAC1(I-71)，水解得到I-59-PROTAC1(I-72)。

I-58-PROTAC1(I-71)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ11.12(s，1H)，10.87(s，1H)，10.13(s，1H)，9.05(s，1H)，8.58(d，J＝7.6Hz，1H)，8.05(s，1H)，8.027.99(m，1H)，7.93(d，J＝8.3Hz，1H)，7.79(t，J＝8.0Hz，1H)，7.75(d，J＝8.3Hz，2H)，7.597.55(m，3H)，7.52(d，J＝8.0Hz，1H)，7.48(d，J＝7.1Hz，1H)，7.43(d，J＝8.1Hz，1H)，7.41-7.33(m，3H)，7.18(s，1H)，7.07(t，J＝7.5Hz，1H)，6.99(t，J＝7.4Hz，1H)，6.53(d，J＝15.4Hz，1H)，5.12(dd，J＝12.9，5.4Hz，1H)，4.79(s，2H)，4.63(q，J＝7.4Hz，1H)，3.72(t，J＝6.3Hz，2H)，3.62(s，3H)，3.54(d，J＝5.3Hz，4H)，3.47(t，J＝5.7Hz，2H)，3.31(q，J＝5.8Hz，2H)，3.25-3.16(m，2H)，3.11(dd，J＝14.8，8.8Hz，1H)，2.89(ddd，J＝18.2，13.8，5.4Hz，1H)，2.62-2.57(m，4H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ172.61，172.42，169.71，169.29，166.73，166.56，165.27，164.99，154.81，151.78，140.05，139.45，136.74，135.95，133.91，132.86，131.19，129.40，128.53(2C)，127.85，126.86，126.37，126.31，123.52，121.24，120.84，120.15，118.94(2C)，118.29，118.14，117.83，117.57，116.92，116.58，115.85，111.29，109.43，69.45，69.39，68.66，67.31，66.44，53.18，51.72，48.63，38.23，37.05，30.78，26.86，21.86.ESI-MS：m/z 1013.2[M+H]⁺，

I-59-PROTAC1(I-72)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ10.85(s，1H)，10.15(s，1H)，9.04(s，1H)，8.74(d，J＝8.0Hz，1H)，8.43(d，J＝8.0Hz，1H)，8.05(s，1H)，7.94(d，J＝8.2Hz，1H)，7.77(d，J＝8.2Hz，2H)，7.62-7.55(m，4H)，7.48-7.37(m，3H)，7.37-7.32(m，2H)，7.28(d，J＝8.6Hz，1H)，7.21(d，J＝8.7Hz，1H)，7.19-7.16(m，1H)，7.07(t，J＝7.6Hz，1H)，6.99(t，J＝7.5Hz，1H)，6.82(d，J＝9.4Hz，1H)，6.54(d，J＝15.4Hz 1H)，4.64-4.50(m，3H)，4.33(t，J＝8.7Hz，1H)，3.72(q，J＝5.0，3.9Hz，2H)，3.54-3.50(m，5H)，3.48-3.43(m，3H)，3.42-3.35(m，2H)，3.30(t，J＝5.6Hz，2H)，3.24(dd，J＝14.6，4.7Hz，1H)，3.15-3.05(m，1H)，2.60(t，J＝6.4Hz，2H).¹³CNMR(151MHz，DMSO-d₆)δ173.56，173.40，173.06，170.18，169.29，167.58，167.43，164.91，154.35，151.76，140.06，139.45，135.94，134.61，133.91，131.18，129.83，129.08，128.53(2C)，127.78，126.98，126.41，126.29，124.55，123.41，121.62，120.78，120.25，118.95(2C)，118.23，118.13，118.00，117.63，116.92，115.56，111.23，109.89，69.40，69.36，68.61，67.73，66.44，53.03，52.03，38.22，37.04，31.33，26.89，20.89.ESI-MS：m/z 999.2[M+H]⁺，

实施例19

将(E)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯换成(Z)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例16，得到产物I-56-PROTAC2(I-73)，水解得到I-57-PROTAC2(I-74)。

I-56-PROTAC2(I-73)

¹³C NMR(151MHz，Chloroform-d)δ171.93，170.46，169.60，168.04，167.96，166.18，165.62，165.42，153.47，152.99，139.85，137.81，136.51，135.49，134.49，132.72，130.08，129.73，128.87(2C)，128.72，127.07，126.63，125.99，122.21，121.58，119.58，119.08(2C)，119.06，118.73，117.80，117.11，116.68，116.50，115.30，115.24，110.65，108.95，69.15，66.90，66.29，65.24，51.92，48.64，38.16，37.59，30.64，26.83，21.86.ESI-MS：m/z 969.2[M+H]⁺，

I-57-PROTAC2(I-74)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ12.70(s，1H)，10.85(s，1H)，10.12(s，1H)，9.27(s，1H)，8.53(d，J＝7.8Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.78-7.73(m，3H)，7.59-7.50(m，4H)，7.49-7.44(m，1H)，7.42(d，J＝8.1Hz，1H)，7.33(d，J＝8.3Hz，1H)，7.30-7.20(m，2H)，7.18(s，1H)，7.06(t，J＝7.6Hz，1H)，6.99(t，J＝7.5Hz，1H)，6.83(s，1H)，6.59(d，J＝12.5Hz，1H)，6.03(d，J＝12.6Hz，1H)，4.64-4.49(m，3H)，4.37-4.28(m，1H)，3.72(t，J＝6.4Hz，2H)，3.48(t，J＝6.0Hz，2H)，3.42-3.37(m，1H)，3.33-3.30(m，4H)，3.25(dd，J＝14.9，4.8Hz，1H)，3.18(s，1H)，3.08(dd，J＝14.8，9.2Hz，1H)，2.60(q，J＝7.1Hz，2H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ173.55，173.44，173.06，170.18，169.25，166.90，166.27，165.38，154.36，153.27，140.13，139.35，135.93，134.62，133.91，131.30，130.95，129.86，129.62，129.01(2C)，127.91，126.98，126.30(2C)，123.47，122.17，120.77，120.64，120.27，118.86(2C)，118.31,118.23，118.00，116.98，115.99，111.23，109.82，68.38，67.76，66.25，64.75，52.94，52.16，36.92，31.23，26.89，20.60.ESI-MS：m/z 955.2[M+H]⁺，

实施例20

将(N-Boc-3-[2-(2-氨基乙氧基)乙氧基]丙酸换为2，2-二甲基-4-氧代-3，8，11，14-四氧杂-5-氮杂十七烷-17-酸，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例17，得到产物I-56-PROTAC3(I-75)，水解得到I-57-PROTAC3(I-76)。

I-56-PROTAC3(I-75)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ11.12(s，1H)，10.87(s，1H)，10.12(s，1H)，9.21(s，1H)，8.66(d，J＝7.5Hz，1H)，8.02-7.99(m，1H)，7.96(s，1H)，7.90(s，1H)，7.82-7.78(m，1H)，7.77-7.73(m，2H)，7.58-7.52(m，4H)，7.49(d，J＝7.3Hz，1H)，7.40(dd，J＝20.4，8.3Hz，2H)，7.33(d，J＝8.1Hz，1H)，7.19(s，1H)，7.07(t，J＝7.6Hz，1H)，7.00(t，J＝7.5Hz，1H)，6.61(d，J＝12.5Hz，1H)，6.02(d，J＝12.6Hz，1H)，5.12(dd，J＝12.9，5.6Hz，1H)，4.78(s，2H)，4.66(q，J＝7.5Hz，1H)，3.72(t，J＝6.3Hz，2H)，3.63(s，3H)，3.54-3.49(m，8H)，3.46(t，J＝5.8Hz，2H)，3.42-3.37(m，1H)，3.33-3.29(m，1H)，3.23(dd，J＝14.7，5.4Hz，1H)，3.10(dd，J＝14.7，8.8Hz，1H)，2.90(s，2H)，2.64-2.53(m，4H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ172.60，172.49，169.70，169.28，166.72，166.56，165.48，165.27，162.14，154.80,153.20，140.11，139.38，136.76,135.94，133.90，132.86，131.29，130.88，128.98(2C)，128.12，126.86，126.30，126.26，123.58，120.83，120.44，120.15，118.81(2C)，118.27，117.84，117.01，116.59，115.94，115.87，111.30，109.36，69.56，69.53，69.45，68.64，67.32，66.44，64.75，53.05，51.77，48.64，37.05，35.62，30.69，26.91，21.83.ESI-MS：m/z 1057.2[M+H]⁺，

I-57-PROTAC3(I-76)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ12.64(s，1H)，10.84(d，J＝2.5Hz，1H)，10.13(s，1H)，9.27(s，1H)，8.52(d，J＝7.8Hz，1H)，7.89(d，J＝2.3Hz，1H)，7.84(t，J＝5.7Hz，1H)，7.75(d，J＝8.2Hz，3H)，7.56(q，J＝8.1Hz，4H)，7.487.40(m，2H)，7.377.26(m，2H)，7.227.16(m，2H)，7.06(t，J＝7.5Hz，1H)，6.99(t，J＝7.4Hz，1H)，6.82(d，J＝11.6Hz，1H)，6.59(d，J＝12.5Hz，1H)，6.03(d，J＝12.6Hz，1H)，4.64-4.55(m，3H)，4.32(q，J＝6.2，5.4Hz，1H)，3.72(t，J＝6.2Hz，2H)，3.51(d，J＝19.9Hz，9H)，3.44(t，J＝5.9Hz，2H)，3.42-3.37(m，1H)，3.30(t，J＝5.5Hz，1H)，3.28-3.23(m，1H)，3.18(s，1H)，3.08(dd，J＝14.7，9.1Hz，1H)，2.89(s，1H)，2.60(t，J＝6.3Hz，2H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ173.56，173.44，171.85，170.18,169.29，167.44，166.22，165.38，154.35，153.27，140.13，139.38，135.93,134.61，133.91,131.30，131.00，129.84，129.60,129.02(2C)，127.90,126.98，126.29,124.56，123.47，120.77,120.64，120.25，118.82(2C)，118.31，118.23，118.00，116.98，115.98，115.56，111.23，109.82，69.51，69.42，69.37，68.54，67.74，66.45，64.75，52.93，52.03，37.06，31.33，28.70，26.93，20.89.ESI-MS：m/z 1043.2[M+H]⁺，

实施例21

将(Z)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯换成(E)-(3-(3-(4-氨基苯基)-1-(3-氯苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例20，得到产物I-56-PROTAC3(I-77)，水解得到I-57-PROTAC3(I-78)。

I-58-PROTAC3(I-77)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ11.12(s，1H)，10.87(s，1H)，10.14(s，1H)，9.05(s，1H)，8.59(d，J＝7.6Hz，1H)，8.05(s，1H)，8.00(t，J＝5.8Hz，1H)，7.93(d，J＝8.3Hz，1H)，7.82-7.74(m，3H)，7.60-7.55(m，3H)，7.53(d，J＝8.0Hz，1H)，7.49(d，J＝7.3Hz，1H)，7.43(d，J＝8.1Hz，1H)，7.40-7.33(m，3H)，7.18(s，1H)，7.07(t，J＝7.6Hz，1H)，6.99(t，J＝7.5Hz，1H)，6.53(d，J＝15.7Hz，1H)，5.12(dd，J＝12.9，5.4Hz，1H)，4.78(s，2H)，4.64(q，J＝7.5Hz，1H)，3.72(t，J＝6.3Hz，2H)，3.62(s，3H)，3.51(d，J＝10.4Hz，9H)，3.45(t，J＝5.8Hz，2H)，3.42-3.37(m，1H)，3.333.29(m，1H)，3.22(dd，J＝14.8，5.3Hz，1H)，3.12(dt，J＝14.7，8.8Hz，1H)，2.90(td，J＝16.3，14.1，5.5Hz，1H)，2.66-2.52(m，4H).¹³C NMR(151MHz，DMSO-d₆)δ172.60,172.42,169.70，169.28，166.71,166.56，165.26,164.98，154.81，151.79,140.04，139.47,136.74，135.95，133.90，132.86，131.18，129.40，128.53(2C)，127.85，126.86，126.37，126.30，123.52，121.25，120.83，120.14，118.93(2C)，118.29，118.13，117.83，117.56，116.92，116.58，115.86，111.29，109.43，69.55，69.53，69.44，68.64，67.31，66.43，64.75，53.43，53.18，51.71，48.64，37.04，30.78，26.86，21.83.ESI-MS：m/z1057.2[M+H]⁺，

I-59-PROTAC3(I-78)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d₆)δ12.63(s，1H)，10.84(d，J＝2.3Hz，1H)，10.15(s，1H)，9.03(s，1H)，8.43(d，J＝8.0Hz，1H)，8.05(d，J＝2.2Hz，1H)，7.967.86(m，1H)，7.84(t，J＝5.8Hz，1H)，7.77(d，J＝8.2Hz，2H)，7.57(td，J＝6.2，4.7，2.3Hz，4H)，7.487.40(m，2H)，7.397.29(m，2H)，7.297.19(m，2H)，7.18(d，J＝7.4Hz，1H)，7.07(t，J＝7.5Hz，1H)，6.99(t，J＝7.5Hz，1H)，6.82(d，J＝11.6Hz，1H)，6.54(d，J＝15.7Hz，1H)，4.654.55(m，3H)，4.32(q，J＝6.7，5.8Hz，1H)，3.72(t，J＝6.2Hz，2H)，3.543.47(m，8H)，3.463.42(m，2H)，3.373.34(m，5H)，3.323.27(m，1H)，3.273.20(m，1H)，3.153.04(m，1H)，2.60(t，J＝6.4Hz，2H).¹³CNMR(151MHz，DMSO-d₆)δ173.56，173.40，173.05，169.29，167.44，166.22，165.69，164.911，154.35，151.76，140.06，139.46，135.94，134.61，133.90，131.18，130.89，129.83，129.59，129.08，128.53(2C)，127.78，126.98，126.41，126.29，124.56，123.41，121.61，120.78，118.95(2C)，118.23，118.13，118.00，117.63，116.92，111.23，109.88，69.51，69.41，69.36，68.54，67.73，67.56，66.43，53.03，52.03，48.43，37.04，31.33，26.89，20.89.ESI-MS：m/z 1042.2[M+H]⁺，

对比实施例1

(E)-(3-(3-(萘基-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸

(对比化合物1)

所需的原料、试剂及制备方法同CN 110746355 A中的实施例64，得到对比化合物1(E)-(3-(3-(萘基-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸。¹H NMR(400MHz，Methanol-d₄)δ8.68(s，1H)，8.14(d，J＝1.6Hz，1H)，8.03-7.86(m，6H)，7.83(dd，J＝8.5，1.7Hz，1H)，7.68(d，J＝15.7Hz，1H)，7.60(d，J＝7.9Hz，1H)，7.58-7.53(m，4H)，7.40(t，J＝7.4Hz，1H)，7.33(d，J＝8.1Hz，1H)，7.12(s，1H)，7.09(t，J＝7.5Hz，1H)，7.04-6.95(m，1H)，6.55(d，J＝15.7Hz，1H)，4.87-4.83(m，4H)，3.44(dd，J＝14.8，4.5Hz，1H)，3.26(dd，J＝14.7，7.3Hz，1H).MS(ESI，m/z)：525.0[M-H]^-.

对比实施例2

(Z)-(3-(3-(萘基-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸

(对比化合物2)

所需的原料、试剂及制备方法CN 110746355 A中的实施例64，得到对比化合物2(Z)-(3-(3-(萘基-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)δ10.70(s，1H)，9.44(s，1H)，8.12(s，1H)，8.04(d，J＝8.1Hz，2H)，8.007.97(m，1H)，7.88(d，J＝8.1Hz，2H)，7.79(dd，J＝8.5，1.8Hz，2H)，7.59-7.52(m，6H)，7.37(t，J＝7.4Hz，1H)，7.31-7.23(m，1H)，7.10(s，1H)，6.99(dd，J＝8.1，6.9Hz，1H)，6.88(t，J＝7.4Hz，1H)，6.57(d，J＝12.5Hz，1H)，6.00(d，J＝12.6Hz，1H)，4.34-4.27(m，1H)，3.16(d，J＝4.7Hz，1H)，3.02(dd，J＝14.7，7.4Hz，1H).MS(ESI，m/z)：527.2[M+H]⁺.

对比实施例3

(Z)-(3-(3-(2-萘基)-1-(间甲苯基)-1H-4-吡唑基)丙烯酰基)-L-色氨酸(对比化合物3)

对比化合物3同实施例6中的化合物(I-1)

对比实施例4

将间甲基苯肼盐酸盐换成邻甲基苯肼盐酸盐，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例6，得到对比化合物4(Z)-(3-(3-(2-萘基)-1-(邻甲苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸。

(Z)-(3-(3-(2-萘基)-1-(邻甲苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(对比化合物4)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ12.49(s，1H)，10.84(d，J＝2.4Hz，1H)，8.98(d，J＝0.5Hz，1H)，8.49(d，J＝7.8Hz，1H)，8.15-8.09(m，1H)，8.05-8.01(m，2H)，8.00-7.95(m，1H)，7.76(dd，J＝8.5，1.7Hz，1H)，7.60-7.53(m，3H)，7.48-7.36(m，4H)，7.32(dt，J＝8.1，0.9Hz，1H)，7.17(d，J＝2.4Hz，1H)，7.05(ddd，J＝8.1，6.9，1.2Hz，1H)，6.97(ddd，J＝8.0，7.0，1.1Hz，1H)，6.76-6.71(m，1H)，6.01(d，J＝12.7Hz，1H)，4.58(ddd，J＝9.2，7.8，4.9Hz，1H)，3.24(dd，J＝14.7，4.5Hz，1H)，3.06(dd，J＝14.7，9.1Hz，1H)，2.30(s，3H)；¹³C NMR(151MHz，DMSO-d6)δ174.05，172.49，166.19，153.03，139.62，136.56，135.67，133.31，133.22，132.98，131.93，130.27，129.08，129.02，128.73，128.63，128.31，128.07，127.61，127.36，127.15，126.98，126.09，124.07，121.40，120.29，118.85，118.62，115.31，111.86，110.48，53.51，27.55，18.45；ESI-MS：m/z541.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₄H₂₉O₃N₃[M+H]⁺ 541.2234，found 541.2234.

对比实施例5

将间甲基苯肼盐酸盐换成对甲基苯肼盐酸盐，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例6，得到对比化合物5(Z)-(3-(3-(2-萘基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸。

(Z)-(3-(3-(2-萘基)-1-(对甲苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(对比化合物5)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ12.68(s，1H)，10.86(d，J＝2.4Hz，1H)，9.29(s，1H)，8.53(d，J＝7.8Hz，1H)，8.12(d，J＝1.7Hz，1H)，8.09-8.02(m，2H)，7.99(dt，J＝7.1，3.6Hz，1H)，7.79(dd，J＝8.4，1.7Hz，1H)，7.74-7.70(m，2H)，7.63-7.56(m，3H)，7.34(dd，J＝8.2，6.2Hz，3H)，7.19(d，J＝2.2Hz，1H)，7.07(t，J＝7.3Hz，1H)，7.00(t，J＝7.4Hz，1H)，6.70(d，J＝12.6Hz，1H)，6.03(d，J＝12.6Hz，1H)，4.66-4.61(m，1H)，3.27(dd，J＝14.7，4.8Hz，1H)，3.09(dd，J＝14.7，9.2Hz，1H)，2.37(s，3H)；¹³C NMR(151MHz，DMSO-d6)δ174.09，166.15，153.49，137.45，136.74，136.58，133.29，133.05，131.38，130.58(2C)，130.15，128.76，128.65，128.29，128.09，127.63，127.60，127.06(2C)，127.02，124.10，121.42，120.83，119.20(2C)，118.88，118.65，116.44，111.89，110.50，53.57，27.57，20.98；ESI-MS：m/z541.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₄H₂₉O₃N₄[M+H]⁺ 541.2234，found 541.2233.

对比实施例6将2-萘乙酮换为对硝基苯乙酮，将间甲基苯肼盐酸盐换成间氯苯肼盐酸盐，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例6，得到对比化合物6(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-硝基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸和对比化合物7(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-硝基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸

(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3一(4-硝基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(对比化合物6)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ12.52(s，1H)，10.84(s，1H)，9.23(s，1H)，8.57(d，J＝7.8Hz，1H)，8.38-8.30(m，2H)，7.98-7.88(m，3H)，7.79(ddd，J＝8.2，2.2，0.9Hz，1H)，7.56(t，J＝8.0Hz，2H)，7.46(ddd，J＝8.1，2.0，0.9Hz，1H)，7.32(dd，J＝8.0，1.0Hz，1H)，7.17(d，J＝2.2Hz，1H)，7.05(ddd，J＝8.1，7.0，1.2Hz，1H)，6.98(ddd，J＝7.9，6.9，1.0Hz，1H)，6.65(d，J＝12.5Hz，1H)，6.11(d，J＝12.5Hz，1H)，4.63-4.56(m，1H)，3.24(dd，J＝14.7，4.8Hz，1H)，3.07(dd，J＝14.7，9.1Hz，1H)；¹³C NMR(151 MHz，DMSO-d6)δ173.96，165.63，151.46，147.64，140.53，138.89，136.56，134.61，132.10，131.98，130.06(2C)，127.81，127.61，127.42，124.38(2C)，124.11，122.82，121.41，119.23，118.86，118.64，117.90，117.35，111.86，110.39，53.56，27.58；ESI-MS：m/z 556.1[M+H]+，ESI-HRMS：calcd forC₂₉H₂₃O₅N₄Cl[M+H]⁺ 556.1382，found 556.1381.

(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(4-硝基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(对比化合物7)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ12.71(s，1H)，10.86(s，1H)，9.12(s，1H)，8.48(d，J＝7.8Hz，1H)，8.38(d，J＝8.4Hz，2H)，8.08(s，1H)，7.94(dd，J＝14.1，8.2Hz，3H)，7.62-7.54(m，2H)，7.46(d，J＝8.0Hz，1H)，7.38(d，J＝15.6Hz，1H)，7.34(d，J＝8.1Hz，1H)，7.17(s，1H)，7.07(t，J＝7.5Hz，1H)，6.98(t，J＝7.5Hz，1H)，6.57(d，J＝15.7Hz，1H)，4.62(dt，J＝12.5，6.2Hz，1H)，3.25(dd，J＝14.8，4.8Hz，1H)，3.09(dd，J＝14.7，9.3Hz，1H)；¹³C NMR(151MHz，DMSO-d6)δ173.98，165.29，150.22，147.77，140.46，138.91，136.58，134.61，131.90，129.75(2C)，129.31，128.88，127.61，127.46，124.58(2C)，124.07，123.46，121.42，119.07，119.02，118.87，118.63，117.83，111.87，110.47，53.69，27.54；ESI-MS：m/z 556.1[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₂₉H₂₃O₅N₄Cl[M+H]⁺ 556.1382，found 556.1384.

对比实施例7

将2-萘乙酮换为对乙基苯乙酮，间甲基苯肼盐酸盐换成间氯苯肼盐酸盐，其余所需的原料、试剂及制备方法同实施例6，保留酯化产物(Z)-(3-(1-(3-(间氯苯基)-3-(4-乙基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯，进一步水解得到对比化合物8(Z)-(3-(1-(3-(间氯苯基)-3-(4-乙基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸。

(Z)-(3-(1-(3-(间氯苯基)-3-(4-乙基苯基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸甲酯(对比化合物8)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ10.87(d，J＝2.4Hz，1H)，9.22(s，1H)，8.67(d，J＝7.5Hz，1H)，7.89(t，J＝2.1Hz，1H)，7.77(ddd，J＝8.2，2.2，0.9Hz，1H)，7.57-7.51(m，4H)，7.42(ddd，J＝8.0，2.1，0.9Hz，1H)，7.38-7.31(m，3H)，7.18(d，J＝2.3Hz，1H)，7.06(ddd，J＝8.1，6.9，1.2Hz，1H)，6.99(ddd，J＝7.9，6.9，1.0Hz，1H)，6.60(d，J＝12.5Hz，1H)，6.02(d，J＝12.6Hz，1H)，4.66(ddd，J＝8.9，7.5，5.4Hz，1H)，3.63(s，3H)，3.22(dd，J＝14.6，5.4Hz，1H)，3.10(dd，J＝14.6，8.8Hz，1H)，2.71一2.65(m，2H)，1.23(t，J＝7.6Hz，3H)；¹³CNMR(151MHz，DMSO-d6)δ173.12，166.12，154.18，144.77，140.76，136.57，134.54，131.93，131.53，129.70，129.20(2C)，128.74，128.56(2C)，127.49，126.97，124.22，121.47，121.07，118.92(2C)，118.47，117.67，116.63，111.94，110.00，53.68，52.40，28.45，27.54，16.00；ESI-MS：m/z 553.2[M+H]⁺，ESI-HRMS：calcd for C₃₂H₃₀O₃N₄Cl[M+H]⁺ 553.2001，found 553.2013.

对比实施例8

I-8-PROTAC(对比化合物9)

50mL茄形瓶中加入(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(2-萘基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸(I-8，184mg，0.33mmol)，无水DMF(10mL)，HATU(194mg，0.5mmol)，DIPEA(112μL，0.66mmol)，2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁酯(127mg，0.5mmol)，室温搅拌6h。加入水(60mL)，二氯甲烷(20mL)萃取3次，干燥，过滤，浓缩。二氯甲烷∶甲醇＝20∶1柱层析得黄色油状物I-8-Linker-NHBoc(260mg，99％)。¹H NMR(400MHz，Chloroform-d)δ8.68(s，1H)，8.27(s，1H)，8.11(s，1H)，8.00(d，J＝3.7Hz，2H)，7.95-7.84(m，3H)，7.79(d，J＝8.2Hz，1H)，7.69(dd，J＝18.3，11.1Hz，2H)，7.51(q，J＝4.3Hz，2H)，7.43-7.31(m，2H)，7.29(d，J＝7.7Hz，1H)，7.19-7.06(m，2H)，6.62(s，1H)，6.35(d，J＝15.5Hz，1H)，6.15(s，1H)，5.95(s，1H)，5.05(s，1H)，4.93-4.74(m，1H)，3.68-3.01(m，7H)，3.04-2.91(m，5H)，2.88-2.85(m，2H)，1.48-1.33(m，9H).

50mL茄形瓶加入I-8-Linker-NHBoc，二氯甲烷(4mL)，三氟乙酸(1mL)，室温搅拌1h。氢氧化钠水溶液调节pH至碱性，二氯甲烷(5mL)萃取3次，干燥，过滤，浓缩，投下一步(189mg，0.27mmol)，DMF(10mL)，DIPEA(90μL，0.54mmol)，F代沙利度安(68.7mg，0.25mmol)，搅拌并加热回流2h。加入水(30mL)，二氯甲烷(10mL)萃取3次，干燥，过滤，浓缩。二氯甲烷∶甲醇＝20∶1柱层析得黄色油状物I-8-PROTAC(50mg，20％)。

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ11.10(s，1H)，10.81(s，1H)，9.07(s，1H)，8.32(d，J＝8.2Hz，1H)，8.16(s，1H)，8.09(s，2H)，8.04(dd，J＝13.8，6.9Hz，2H)，7.99-7.94(m，2H)，7.78(d，J＝8.5Hz，1H)，7.64(d，J＝7.9Hz，1H)，7.58(d，J＝7.6Hz，3H)，7.52(t，J＝7.8Hz，1H)，7.47-7.42(m，1H)，7.32(d，J＝8.1Hz，1H)，7.17-7.14(m，1H)，7.05(t，J＝7.9Hz，2H)，7.00(d，J＝6.9Hz，1H)，6.96(t，J＝7.4Hz，1H)，6.58(d，J＝16.3Hz，2H)，5.76(s，1H)，5.05(dd，J＝12.9，5.5Hz，1H)，4.65(q，J＝7.9Hz，1H)，3.60-3.40(m，10H)，3.26-3.17(m，2H)，3.15-3.10(m，1H)，3.03-2.96(m，1H)，2.91-2.84(m，2H)，2.73(s，2H)，2.61-2.56(m，1H)；¹³CNMR(151MHz，DMSO-d6)δ172.64，171.59，169.92，168.75，167.11，164.66，162.16，151.92，146.17，140.04，135.99，135.89，132.70，132.54，131.88，131.20，129.33，128.76，128.20，128.10，127.93，127.50，127.18，127.13，126.54，126.48，126.42，125.91，123.45，122.19，120.67，118.37，118.23，118.08，118.02，117.16，117.00，111.09，110.47，110.05，109.04，69.46(2C)，68.75，68.69，54.74，53.51，48.38，41.49，30.81，27.86，21.96；ESI-MS：m/z969.2[M+Na]⁺.

对比实施例9

将(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(2-萘基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸换成(Z)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(5，6，7，8-四氢萘-2-基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸，其余所需的原料、试剂及制备方法同对比实施例8，得到产物I-25-PROTAC。

I-25-PROTAC(对比化合物10)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ11.09(s，1H)，10.82-10.79(m，1H)，9.23(s，1H)，8.43(d，J＝8.0Hz，1H)，8.16(t，J＝5.7Hz，1H)，7.96(s，1H)，7.88(s，1H)，7.77-7.72(m，1H)，7.66(d，J＝7.9Hz，1H)，7.53(t，J＝7.6Hz，2H)，7.39(d，J＝8.1Hz，1H)，7.30(d，J＝8.1Hz，1H)，7.27(d，J＝6.4Hz，2H)，7.17(d，J＝8.6Hz，2H)，7.106.94(m，3H)，6.58-6.50(m，2H)，6.00(d，J＝12.6Hz，1H)，5.05(dd，J＝12.8，5.5Hz，1H)，4.65(td，J＝8.5，5.1Hz，1H)，3.59-3.45(m，5H)，3.43-3.37(m，3H)，3.28-3.21(m，2H)，3.14(dd，J＝14.6，5.2Hz，1H)，2.98(dd，J＝14.5，9.2Hz，1H)，2.89(s，3H)，2.81-2.74(m，4H)，2.73(s，3H)，1.77(dd，J＝7.2，3.6Hz，4H)；¹³C NMR(151 MHz，DMSO-d6)δ172.62，171.71，169.90，168.74，167.11，165.33，162.14，153.58，146.17，140.14，137.03，136.81，135.98，135.87，133.90，131.88，131.21，130.73，128.99,128.93，127.23，127.11，126.19，125.70，123.53,121.11，120.66,118.40，118.12，118.00，117.16，116.88，116.09，111.08，110.46,110.02,109.05,69.48,69.45,68.76,68.70,53.43,48.38,41.48,35.61,30.81,30.60,28.60，28.47，27.86，22.49，21.97；ESI-MS：m/z 973.3[M+Na]⁺.

对比实施例10

将(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(2-萘基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸换成(E)-(3-(1-(3-氯苯基)-3-(5，6，7，8-四氢萘-2-基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酰基)-L-色氨酸，其余所需的原料、试剂及制备方法同对比实施例8，得到产物I-26-PROTAC。

I-26-PROTAC(对比化合物11)

¹H NMR(600MHz，DMSO-d6)δ11.10(s，1H)，10.82-10.80(m，1H)，8.98(s，1H)，8.29(d，J＝8.2Hz，1H)，8.09(t，J＝5.7Hz，1H)，8.03(q，J＝3.3，2.2Hz，1H)，7.96(s，3H)，7.79(d，J＝7.3Hz，1H)，7.73(t，J＝8.8Hz，1H)，7.65-7.62(m，1H)，7.56-7.52(m，1H)，7.41(dd，J＝8.1，2.1Hz，1H)，7.33-7.30(m，2H)，7.27-7.22(m，1H)，7.19-7.14(m，1H)，7.10-6.99(m，2H)，6.97(t，J＝7.4Hz，1H)，6.58(t，J＝5.8Hz，1H)，6.53(d，J＝15.7Hz，1H)，5.17(dd，J＝12.9，5.4Hz，1H)，4.64(td，J＝8.5，5.1Hz，1H)，3.62-3.47(m，5H)，3.45-3.38(m，3H)，3.27-3.18(m，2H)，3.16-3.10(m，1H)，3.02-2.95(m，1H)，2.91-2.86(s，3H)，2.79-2.74(m，4H)，2.73-2.72(s，3H)，1.84-1.67(s，4H)；

效果实施例1部分化合物与Bcl-xL、Bcl-2和Mcl-1的亲合性测试结果

合成一个带有26个氨基酸残基的BidBH3多肽(氨基酸79-104：QEDIIRNIARHLAQVGDSMDRSIPPG)，并在N端标记上6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯(FAM)作为荧光标签(FAM-Bid)。将His-Bcl-xL蛋白或His-Bcl-2蛋白或His-Mcl-1蛋白和待测小分子化合物溶于磷酸缓冲盐溶液中，在37度避光孵育30分钟，然后再加入FAM-Bid多肽，混匀后37度避光孵育20分钟。His-Bcl-XL蛋白，His-Bcl-2蛋白，His-Mcl-1蛋白和FAM-Bid多肽的终浓度分别为230nM，425nM，200nM和10nM。化合物在体系中的终浓度分别为1nM，10nM，100nM，1μM，10μM，50μM和100μM。将以上反应液各取60μl加入到384孔板中(平行三组)，立即在酶标仪上进行荧光偏振的检测。荧光极化值(mP)在由485nm波长激发产生的535nm发射波长下测量。同时设立两个对照组，一个对照组为反应体系中只含有Bcl-xL或Bcl-2或Mcl-1和FAM-Bid(相当于0％抑制率)，另一对照组为反应体系中只含有FAM-Bid多肽。根据对照组以及受测化合物极化值的测定结果计算蛋白抑制率。以蛋白抑制率对化合物浓度的对数作图求出IC₅₀值。根据公式Ki＝[I]50/([L]50/Kd+[P]0/Kd+1)推导计算得出化合物与蛋白的竞争抑制常数Ki值。公式中[I]50为蛋白抑制率为50％时的化合物浓度，[L]50为蛋白抑制率为50％时的游离FAM-Bid浓度，Kd为靶蛋白与FAM-Bid多肽的解离常数，[P]0为蛋白抑制率为0％时的游离蛋白浓度。具体结果见表1。

表1本发明化合物对Bcl-X_L，Bcl-2和Mcl-1蛋白的竞争抑制常数K_i

N.A.表示无活性。

由上表可见，本明提供的苯基吡唑类化合物能够在分子水平上有效地、选择性地抑制细胞凋亡过程中的关键蛋白MCL-1。

效用实施例2部分化合物在若干肿瘤细胞株上的抑制增殖活性

将要检测的人浆细胞白血病细胞H929和人急性淋巴细胞白血病细胞RS4；11用含10％胎牛血清的RPMI1640培养液培养，人髓性单核细胞白血病细胞MV-4-11用含10％胎牛血清的IMDM培养液培养，人胚肾细胞293T细胞用含10％胎牛血清的DMEM培养液培养。在96孔培养板中种细胞，H929和MV-4-11的细胞浓度为8000个/100μL，RS4；11细胞浓度为16000个/100μL，293T细胞浓度为10000个/100μL；调零组只加培养基。在96孔板中分别加入化合物(设定五个不同浓度40μM，20μM，10μM，5μM和2.5μM，每个浓度下平行三组)，然后在37℃下放在CO₂培养箱中孵育48小时。向每孔加入10μLCCK-8溶液并在37℃下孵育2小时，使用酶标仪在450nm波长处测定各孔光吸收值。计算细胞存活率＝(实验组光吸收值-调零组光吸收值)/(对照组光吸收值-调零组光吸收值)。用细胞存活率对化合物浓度对数作图求出IC₅₀值。具体结果见表2和表3。

表2本发明化合物在H929，MV-4-11，RS4；11和293T细胞系上的细胞毒性测试结果

/：表示无测试数据

由上表可见，本明提供的苯基吡唑类化合物对癌细胞，尤其是人浆细胞白血病细胞H929和人髓性单核细胞白血病细胞MV-4-11具有明显的杀伤作用和高选择性。

效用实施例3化合物I-66活细胞内动力学研究

MV-4-11细胞接种于6孔细胞培养板，每孔1.2×106个细胞，所有细胞均用40μM的I-66处理孵育(5‰DMSO)。在以下时间点(0、1、2、3、5、7和8h)，收集一孔细胞，立即在4℃和200g下离心5分钟。上清液作为细胞外成分进行LC-MS/MS定量分析。沉淀细胞在RIPA裂解缓冲液(50mMTris，pH 7.4，150mM NaCl，1％Triton X-100，0.1％SDS，1％脱氧胆酸钠)中裂解30min。细胞裂解后在12000rpm下离心20min，收集上清液作为细胞内成分进行LC-MS/MS分析。细胞内或细胞外化合物的百分比计算如下式：

用40μM的I-66与MV-4-11细胞共孵育，分别在0、1、2、3、5和8小时准确测量在细胞内和细胞外中I-66和其羧酸形式(i-67)的含量。如表4所示，I-66和I-67在0h时未在细胞中出现，完全暴露在细胞外。I-66与细胞孵育1h后，只在细胞内检测到I-67，占总重量的20％。I-66未能在细胞内检测到，证实I-66进入细胞后完全水解成羧酸I-67发挥细胞内生物学作用。随着I-66治疗时间延长，细胞内I-67的重量随时间的推移迅速增加。伴随着细胞凋亡和死亡，原细胞内I-67转变为细胞外I-67而被检测到，使活细胞内I-67占比出现缓慢减少。

表4

该实验通过动态的活细胞内化合物量监测，阐明了I-66具有较好的膜透性，在细胞内完全水解成I-67发挥生物学功能。

Claims (39)

1.一种如式I所示的苯基吡唑类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，

其中，

R^a为R¹-(CH₂)_m-或

所述m为0；

所述的R¹为被一个R^1-1取代的苯基；

所述的R^1-1独立地为-NH₂、-OH、C₁-C₄烷氧基、杂原子选自N和/或O，杂原子数为1～2个的5～6元杂环烷基或3-8元环烷基；

R^b1、R^b2和R^b3独立地为H或卤素；

R^c为H或C₁～C₄烷基；

R^d为

表示Z构型、E构型或其混合；

“*”标记的手性碳为S构型、R构型或其混合。

2.如权利要求1所述的式I所示的苯基吡唑类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，其满足以下条件中的一种或两种：

(1)所述的R^1-1独立地为-NH₂、-OH或3-8元环烷基；或者，所述的R^1-1独立地为C₁-C₄烷氧基或5-6元杂环烷基；

(2)所述的R^b1、R^b2和R^b3中的一个为卤素，其余为H。

3.如权利要求2所述的式I所示的苯基吡唑类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，R^b2为卤素，R^b1和R^b3为H。

4.如权利要求1所述的式I所示的苯基吡唑类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，其满足以下条件中的一种或多种：

(1)所述的R^1-1独立地位于“苯基与吡唑连接位点”的邻位、间位或对位；

(2)当R^1-1为C₁-C₄烷氧基时，所述C₁-C₄烷氧基为甲氧基、乙氧基、丙氧基或丁氧基；

(3)当R^1-1为3-8元环烷基时，所述3-8元环烷基为环丙基、环戊基、环己基或环庚基；

(4)当R^b1、R^b2和R^b3独立地为卤素时，所述卤素为氟、氯、溴或碘；

(5)当R^c为C₁～C₄烷基时，所述C₁～C₄烷基为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基或叔丁基。

5.如权利要求1所述的式I所示的苯基吡唑类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，其满足以下条件中的一种或多种：

(1)所述的R^1-1独立地位于“苯基与吡唑连接位点”的对位；

(2)当R^1-1为C₁-C₄烷氧基时，所述C₁-C₄烷氧基为甲氧基；

(3)当R^1-1为3-8元环烷基时，所述3-8元环烷基为环己基；

(4)当R^1-1为5-6元杂环烷基时，所述5-6元杂环烷基为吗啉基；

(5)当R^b1、R^b2和R^b3独立地为卤素时，所述卤素为氯。

6.如权利要求1所述的式I所示的苯基吡唑类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，其为如下方案一或方案二；

方案一：

R^a为R¹-(CH₂)_m-；

所述的m为0；

所述的R¹为被一个R^1-1取代的苯基；

所述的R^1-1独立地为-NH₂、-OH或3-8元环烷基；

R^b1、R^b2和R^b3独立地为H或卤素；

R^c为H或C₁～C₄烷基；

方案二：

R^a为R¹-(CH₂)_m-；

所述m为0；

所述的R¹为被一个R^1-1取代的苯基；

所述的R^1-1独立地为C₁-C₄烷氧基或杂原子选自N和/或O，杂原子数为1～2个的5-6元杂环烷基；

R^b1、R^b2和R^b3独立地为H或卤素；

R^c为H或C₁～C₄烷基。

7.如权利要求1所述的式I所示的苯基吡唑类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，其满足以下条件中的一种或两种：

(1)所述R^a为

(2)为

8.如权利要求1所述的式I所示的苯基吡唑类化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，为如下任一化合物：

9.一种如式II所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，

其中，

X为

L为

a端与Y相连，b端与X相连；

n1为1、2、3、4或5；

L¹为-O-或-S-；

Y为

R^b1、R^b2、R^b3、R^c和R^d的定义如权利要求1-8任一项所述；

L³为-R³-(CH₂)_m-；-(CH₂)_m-端与吡唑相连；

所述m为0；

所述的R³为苯基；

L连接于L³与吡唑连接位点的邻位、间位或对位；

表示Z构型、E构型或其混合；

“*”标记的手性碳为S构型、R构型或其混合。

10.如权利要求9所述的式II所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，其满足以下条件中的一种或两种：

(1)所述的L¹为-O-；

(2)所述L连接于L³与吡唑连接位点的对位。

11.如权利要求9所述的式II所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，

所述的n1为1、2或3。

12.如权利要求9所述的式II所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，其满足以下条件中的一种或多种：

(1)所述的X为

(2)所述的L为

(3)所述的Y为

13.如权利要求9所述的式II所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，其为如下式II-a

其中，R^c、R^b1、R^b2、R^b3和R^d的定义如权利要求9-12任一项所述；

n为1、2、3、4或5。

14.如权利要求9-12任一项所述的式II所示的化合物、其立体异构体或其药学上可接受的盐，其特征在于，其为如下任一化合物：

15.一种如权利要求1～8任一项所述的式I化合物的制备方法，其特征在于，其包括方法1或方法2；

方法1、其包括如下述步骤：在有机溶剂中，在催化剂存在下，将化合物III与化合物IV进行如下所示的酰胺化反应，得到所述的化合物I，即可；

其中，R^a、R^b1、R^b2、R^b3和R^d的定义如权利要求1-8任一项所述；

方法2、其包括如下述步骤：在有机溶剂中，将“R^c为C₁～C₄烷基”的所述化合物I进行如下所示的水解反应，得到“R^c为H”的所述化合物I即可；

其中，R^a、R^b1、R^b2、R^b3和R^d的定义如权利要求1-8任一项所述。

16.如权利要求15所述的式I化合物的制备方法，其特征在于，所述方法1和方法2的反应条件满足以下条件中的一种或多种：

(1)方法1中，所述的有机溶剂为酰胺类溶剂；

(2)方法1中，所述的催化剂为N,N'-二异丙基乙胺、2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐中的一种或多种；

(3)方法1中，所述的化合物III与所述的化合物IV的摩尔比为1:1～1:2；

(4)方法2中，所述的有机溶剂为醚类溶剂；

(5)方法2中，所述的水解在碱存在下进行，所述的碱为碱金属氢氧化物。

17.如权利要求16所述的式I化合物的制备方法，其特征在于，所述方法1和方法2的反应条件满足以下条件中的一种或多种：

(1)方法1中，所述的有机溶剂为N,N-二甲基甲酰胺；

(2)方法2中，所述的有机溶剂为四氢呋喃；

(3)方法2中，所述的水解在碱存在下进行，所述的碱为NaOH。

18.如权利要求15所述的式I化合物的制备方法，其特征在于，进一步包括下述步骤：

其中，R^a、R^b1、R^b2和R^b3如权利要求15所述；R^e为C₁～C₄烷基；

步骤一：在有机溶剂中，在催化剂存在下，将化合物VIII与化合物IX进行示的缩合反应，得到所述的化合物VII即可；

步骤二：在有机溶剂中，在催化剂存在下，将化合物VII与二取代甲酰胺进行所示的维尔斯迈尔-哈克甲酰化反应，得到所述的化合物V即可；

步骤三：在有机溶剂中，在碱存在下，将化合物IV与化合物V进行所示的加成消除反应，得到所述的化合物III即可。

19.如权利要求18所述的式I化合物的制备方法，其特征在于，在步骤一中其满足以下条件中的一种或两种：

(1)所述的有机溶剂为醇类溶剂；

(2)所述的催化剂为醋酸。

20.如权利要求19所述的式I化合物的制备方法，其特征在于，在步骤一中，所述的有机溶剂为乙醇。

21.如权利要求18所述的式I化合物的制备方法，其特征在于，在步骤二中其满足以下条件中的一种或多种：

(1)所述的有机溶剂为甲酰胺类溶剂；

(2)所述的二取代甲酰胺为N,N-二甲基甲酰胺；

(3)所述的催化剂为POCl₃；

(4)所述的化合物VII与所述的催化剂的摩尔比为1:2～1:5。

22.如权利要求21所述的式I化合物的制备方法，其特征在于，在步骤二中其满足以下条件中的一种或两种：

(1)所述的有机溶剂为N,N-二甲基甲酰胺；

(2)所述的化合物VII与所述的催化剂的摩尔比为1:4。

23.如权利要求18所述的式I化合物的制备方法，其特征在于，在步骤三中其满足以下条件中的一种或多种：

(1)所述R^e为乙基；

(2)所述的有机溶剂为醚类溶剂；

(3)所述化合物V与所述化合物VI的摩尔比为1:2～1:3。

24.如权利要求23所述的式I化合物的制备方法，其特征在于，步骤三中其满足以下条件中的一种或两种：

(1)所述的有机溶剂为四氢呋喃；

(2)所述化合物V与所述化合物VI的摩尔比为1:2.2。

25.一种如权利要求13-14任一项所述的式II化合物的制备方法，其特征在于，其包括如下述步骤：溶剂中，在催化剂的作用下，化合物II-b与化合物II-c反应，得到如式II-a所示的化合物；

其中，R^b1、R^b2、R^b3、R^c和R^d的定义如权利要求9-14任一项所述；

n为1、2、3、4或5。

26.如权利要求25所述的式II化合物的制备方法，其特征在于，所述反应的条件满足以下条件中的一种或多种：

(1)所述的溶剂为甲酰胺类溶剂；

(2)所述的催化剂为N,N'-二异丙基乙胺；

(3)所述的化合物II-b与所述的化合物II-c的摩尔比为1:1～1:1.5。

27.如权利要求26所述的式II化合物的制备方法，其特征在于，所述的溶剂为N,N-二甲基甲酰胺。

28.如权利要求25所述的式II化合物的制备方法，其特征在于，进一步包括下述步骤：

其中，R^b1、R^b2、R^b3、R^c和R^d的定义如权利要求25所述；

n为1、2、3、4或5；

步骤一：溶剂中，在碱和缩合试剂的存在下，化合物II-e与化合物II-f反应，得到如式II-d所示的化合物；

步骤二：溶剂中，化合物II-d脱除保护基，得到如式II-b所示的化合物。

29.如权利要求28所述的式II化合物的制备方法，其特征在于，在步骤一中其满足以下条件中的一种或多种：

(1)所述的溶剂为甲酰胺类溶剂；

(2)所述的催化剂为N,N'-二异丙基乙胺和2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯；

(3)所述化合物II-e与所述的化合物II-f的摩尔比为1:1～1:1.5。

30.如权利要求29所述的式II化合物的制备方法，其特征在于，在步骤一中其满足以下条件中的一种或两种：

(1)所述的溶剂为N,N-二甲基甲酰胺；

(2)所述化合物II-e与所述的化合物II-f的摩尔比为1:1.1～1:1.2。

31.如权利要求28所述的式II化合物的制备方法，其特征在于，在步骤二中其满足以下条件中的一种或两种：

(1)所述的溶剂为卤代烷烃类溶剂；

(2)所述脱除保护基的试剂为酸类试剂。

32.如权利要求31所述的式II化合物的制备方法，其特征在于，在步骤二中其满足以下条件中的一种或两种：

(1)所述的溶剂为二氯甲烷；

(2)所述脱除保护基的试剂为三氟乙酸。

33.一种药物组合物，其包括物质A、其立体异构体或其药学上可接受的盐，和药用辅料；所述的物质A为如权利要求1-8任一项所述的式I化合物或如权利要求9-14任一项所述的式II化合物。

34.一种物质A、其立体异构体或其药学上可接受的盐在制备BCL-2抗凋亡蛋白抑制剂、或者制备用于治疗和/或预防与BCL-2抗凋亡蛋白相关的疾病的药物中的应用；

所述的物质A为如权利要求1-8任一项所述的式I化合物或如权利要求9-14任一项所述的式II化合物。

35.如权利要求34所述的应用，其特征在于，

所述的“BCL-2抗凋亡蛋白”为BCL-X_L、BCL-2和MCL-1蛋白中的一种或多种。

36.如权利要求35所述的应用，其特征在于，

所述的“BCL-2抗凋亡蛋白”为MCL-1。

37.如权利要求34所述的应用，其特征在于，所述的“与BCL-2抗凋亡蛋白相关的疾病”为癌症。

38.如权利要求37所述的应用，其特征在于，

所述的癌症为白血病。

39.如权利要求38所述的应用，其特征在于，

所述的白血病为人急性淋巴细胞白血病或人浆细胞白血病。