[go: up one dir, main page]

CN116286649A - Ogd模型及在鉴定神经干细胞的有效性中的应用 - Google Patents

Ogd模型及在鉴定神经干细胞的有效性中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN116286649A
CN116286649A CN202211682469.9A CN202211682469A CN116286649A CN 116286649 A CN116286649 A CN 116286649A CN 202211682469 A CN202211682469 A CN 202211682469A CN 116286649 A CN116286649 A CN 116286649A
Authority
CN
China
Prior art keywords
cells
nsc
ogd model
ogd
neural stem
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202211682469.9A
Other languages
English (en)
Inventor
李明煜
王培培
王楠
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beijing Yinfeng Dingcheng Biological Engineering Technology Co ltd
Yinfeng Biological Group Ltd
Original Assignee
Beijing Yinfeng Dingcheng Biological Engineering Technology Co ltd
Yinfeng Biological Group Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Beijing Yinfeng Dingcheng Biological Engineering Technology Co ltd, Yinfeng Biological Group Ltd filed Critical Beijing Yinfeng Dingcheng Biological Engineering Technology Co ltd
Priority to CN202211682469.9A priority Critical patent/CN116286649A/zh
Publication of CN116286649A publication Critical patent/CN116286649A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0693—Tumour cells; Cancer cells
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/02—Atmosphere, e.g. low oxygen conditions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/10—Growth factors
    • C12N2501/13—Nerve growth factor [NGF]; Brain-derived neurotrophic factor [BDNF]; Cilliary neurotrophic factor [CNTF]; Glial-derived neurotrophic factor [GDNF]; Neurotrophins [NT]; Neuregulins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2502/00—Coculture with; Conditioned medium produced by
    • C12N2502/08—Coculture with; Conditioned medium produced by cells of the nervous system
    • C12N2502/088—Coculture with; Conditioned medium produced by cells of the nervous system neural stem cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2503/00—Use of cells in diagnostics
    • C12N2503/02—Drug screening
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种OGD模型，其构建方法为：利用鼠神经生长因子NGF刺激PC12细胞，将其诱导为交感神经元样细胞；然后利用无糖DMEM进行氧‑葡萄糖剥夺构建OGD模型，体外模拟神经元缺血性损伤。所述OGD模型在鉴定用于移植治疗的神经干细胞的有效性中的应用。本发明构建的OGD模型可以鉴定神经干细胞移植治疗的有效性和神经保护功能，本发明将OGD模型与NSC进行共培养，通过观察PC12细胞的形态及检测PC12细胞的存活率来分析NSC对凋亡的PC12细胞的作用及作用机理，从而进一步为NSC移植治疗神经系统疾病提供相应的实验和理论依据，为临床研究神经干细胞移植治疗提供了有效的基础依据。

Description

OGD模型及在鉴定神经干细胞的有效性中的应用
技术领域
本发明涉及一种模拟神经元损伤的OGD模型，以及其在鉴定用于移植治疗的神经干细胞的有效性中的应用，属于神经干细胞技术领域。
背景技术
脑部疾病，包括脑肿瘤、神经退行性疾病、脑血管疾病和创伤性脑损伤，是影响人类健康的主要疾病，目前没有有效的治疗方法。由于神经元再生能力低下，神经营养因子分泌不足，神经损伤后缺血缺氧加重，会发生不可逆的功能神经元丧失和神经组织损伤，中枢神经系统在损伤后很难修复和再生。神经干细胞是仅存在于中枢神经系统中的多能干细胞，它们具有良好的自我更新潜力和分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力，并改善细胞微环境。基于神经干细胞的再生能力，神经干细胞移植方法已被用于治疗各种神经退行性疾病。
为研究脑部疾病治疗的有效性，需要构建神经系统的损伤。体内模拟神经系统损伤受多种条件制约，结果易受很多因素干扰而出现偏差，可信度因而受到置疑。体外原代神经元培养可使实验结果避免多因素干扰，提高可靠度，但原代培养效率低，神经元自然老化等原因而致神经元无法保证持续传代，这促使了大量体外缺血模型的设计。这些实验模型有助于阐明分子、细胞和整个生物体水平的损伤机制。此外，这些模型还用于测试靶向受损的神经网络的化合物是否有减少发病率和神经细胞损伤的作用。
神经干细胞移植治疗中常用的体外模型为OGD模型，对神经元或神经元样细胞进行氧-葡萄糖剥夺(oxygen-glucose deprivation，OGD)构建OGD模型，可以体外模拟神经元缺血性损伤。PC12细胞是一种已经在分子、细胞、功能和应激研究中被广泛表征的克隆系，用PC12细胞构建的OGD模型已被用于测试临床治疗中许多化合物的有效性。PC12细胞来源于成年大白鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤，其在体外经鼠神经生长因子NGF刺激诱导后可向交感神经元分化，诱导分化后的PC12细胞在生理、生化方面都具有神经元样的功能，广泛应用于神经生理和神经药理学研究。通过研究神经干细胞对OGD的作用，可进一步为NSC移植治疗神经系统疾病提供相应的实验和理论依据。
发明内容
针对上述现有技术，本发明提供了一种模拟神经元损伤的OGD模型，以及其在鉴定用于移植治疗的神经干细胞的有效性中的应用。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种OGD模型，其构建方法为：首先，利用鼠神经生长因子NGF刺激PC12细胞，将其诱导为交感神经元样细胞；然后，利用无糖DMEM进行氧-葡萄糖剥夺构建OGD模型，体外模拟神经元缺血性损伤，包括以下步骤：
(1)将PC12细胞按照每孔20000个细胞接种于24孔板；
(2)24小时后，添加含100ng/mL大鼠NGFβ的DMEM培养基，诱导分化；
(3)每两天更换分化培养基，连续刺激6天，诱导PC12细胞神经元样转化；
6天后，镜下观察可见细胞形态改变，胞体变圆，细胞突起较为粗大，并且交织形成网状；进行神经元标志物DCX和MAP2染色，确定诱导分化是否成功；
(4)将培养基换成无糖DMEM培养基，置于缺氧细胞培养箱中，在5％CO2、1％O2、94％N2、37℃条件下培养3h。
所述OGD模型在鉴定用于移植治疗的神经干细胞的有效性中的应用。将OGD模型与NSC进行共培养，通过研究神经干细胞对OGD细胞的作用，进一步为NSC移植治疗神经系统疾病提供相应的实验和理论依据。
具体地，利用上述OGD模型鉴定用于移植治疗的神经干细胞的有效性的方法为：
(1)向OGD模型中加入NSC上清，置于37℃、5％CO2及饱和湿度的孵箱中培养2天；
所述NSC上清，是通过以下方法制备得到的：将NSC细胞置于DMEM/F12培养基中培养3天，离心，取上清，即得，分装冻存，并进行细胞计数；
(2)培养2天后，弃去上清，加入含10％ CCK-8的DMEM/F12培养基，在细胞培养箱中培养1h；在450nm波长处检测OD值，该检测结果用于评价、鉴定神经干细胞对神经损伤的保护作用。
本发明将大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞连续诱导6天，并达到90％以上的神经元诱导成功率，以更好地接近神经系统的生理结构。将诱导成功的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞通过氧糖剥夺/复氧损伤构建神经元缺血性损伤模型，为筛选保护脑缺血损伤的药物提供工具。本发明将大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞氧糖剥夺损伤模型与神经干细胞共培养，并确定了最佳的共培养方式和细胞剂量。通过共培养后大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞损伤恢复的程度，可以鉴定神经干细胞移植治疗的有效性，以及比较不同批次神经干细胞有效性的差异。
本发明构建的OGD模型可以鉴定神经干细胞移植治疗的有效性和神经保护功能，本发明将OGD模型与NSC进行共培养，通过观察PC12细胞的形态及检测PC12细胞的存活率来分析NSC对凋亡的PC12细胞的作用及作用机理，从而进一步为NSC移植治疗神经系统疾病提供相应的实验和理论依据，为临床研究神经干细胞移植治疗提供了有效的基础依据。
附图说明
图1：大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞诱导分化6天后的白光采图。
图2：大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞诱导分化6天后的DCX染色图。
图3：大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞诱导分化6天后的MAP2染色图。
图4：不同细胞数的NSC间接共培养和NSC上清对OGD模型的保护作用示意图。
图5：不同细胞数的NSC上清对OGD模型的保护作用示意图。
图6：不同批次的NSC对OGD模型的保护作用示意图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域技术人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。
下述实施例中所涉及的仪器、试剂、材料，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规仪器、试剂、材料，可通过正规商业途径获得。下述实施例中所涉及的实验方法、检测方法，若无特别说明，均为现有技术中已有的常规实验方法、检测方法。
本发明中所涉及的部分英文专业名词的中文含义：
OGD：oxygen-glucose deprivation，氧-葡萄糖剥夺；
OGD/R：oxygen-glucose deprivation/Reperfusion，氧糖剥夺/复氧；
PC12：成年大白鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤细胞；
NGF：Nerve growth factor，鼠神经生长因子；
MAP2：microtubule-associated protein 2，微管关联蛋白2；
DCX：Doublecortin，双皮质素抗原；
NSC：neural stem cell，神经干细胞。
试剂来源：Mouse NGF 2.5S Native Protein(Thermo Fisher,13257-019)、Cellcounting kit-8(MCE，HY-K0301)、MAP2抗体(Abcam，ab5392)、DCX抗体(Santa Cruz，SC-271390)、山羊抗小鼠二抗-Cy3(Jackson，115-165-068)、山羊抗鸡二抗(Jackson，103-545-155)。
实验1利用体外诱导神经元样细胞构建氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤模型
步骤如下：
(1)将PC12细胞按照每孔20000个细胞接种于24孔板；
(2)24小时后，添加含100ng/mL大鼠NGFβ的DMEM培养基，诱导分化；
(3)每两天更换分化培养基，连续刺激6天，诱导PC12细胞神经元样转化；
6天后，镜下观察可见细胞形态改变，胞体变圆，细胞突起较为粗大，并且交织形成网状(如图1所示)；进行神经元标志物DCX和MAP2染色(结果如图2、图3所示)，确定诱导分化成功；
(4)将培养基换成无糖DMEM培养基，置于缺氧细胞培养箱中，在5％CO2、1％O2、94％N2、37℃条件下培养3h，即得OGD模型。
实验2OGD模型与NSC以不同的方式进行共培养
实验1得到的OGD模型，分为三组：OGD模型组，NSC共培养组，NSC上清组。
OGD模型组加入DMEM/F12培养基，置于37℃、5％CO2及饱和湿度的孵箱中常规培养2天。
NSC共培养组以transwell方式分别加入1×103、2×103、3×103个NSC细胞，置于37℃、5％CO2及饱和湿度的孵箱中常规培养2天。
NSC上清组分别加入1×103、2×103、3×103个NSC对应的上清量，置于37℃、5％CO2及饱和湿度的孵箱中常规培养2天。所述NSC上清，是通过以下方法制备得到的：将生长7天的NSC细胞置于DMEM/F12培养基中培养3天，离心，取上清，即得，分装冻存，并进行细胞计数。
培养2天后弃去上清，每孔加入400μL含10％ CCK-8的DMEM/F12培养基，在正常细胞培养箱中培养1h；在450nm波长处检测OD值。
OGD模型组代表OGD损害的程度，NSC组与其相比有显著性差异，说明NSC对神经损害的保护作用。
将相同NSC细胞数的共培养组和上清组进行比较，发现NSC上清对OGD的保护效果好于NSC直接共培养(如图4所示)，故选择NSC上清作为NSC与OGD细胞共培养的方式。
重复实验，NSC上清组加入1×103、2×103、3×103、5×103、8×103、1×104、2×104、5×104个NSC对应的上清量，结果如图5所示，结果显示：5×104个NSC对应的上清量对OGD的保护效果最好，故在NSC与OGD细胞共培养时选择5×104个NSC对应的上清为宜。
实验3利用OGD模型检测不同批次神经干细胞的有效性
采用不同批次的神经干细胞进行实验，实验方法同实验2。结果如图6所示，结果显示：DSN019-1细胞对神经损伤保护的有效性最好，DSN024P18-A-1、DSN024P19-A-1等也有明显的神经保护效果，DSN024P19-B-1、DSN024P20-A-3等未显示神经保护作用。
给本领域技术人员提供上述实施例，以完全公开和描述如何实施和使用所主张的实施方案，而不是用于限制本文公开的范围。对于本领域技术人员而言显而易见的修饰将在所附权利要求的范围内。

Claims (5)

1.一种OGD模型的构建方法，其特征在于：首先，利用鼠神经生长因子NGF刺激PC12细胞，将其诱导为交感神经元样细胞；然后，利用无糖DMEM进行氧-葡萄糖剥夺构建OGD模型，体外模拟神经元缺血性损伤，包括以下步骤：
(1)将PC12细胞按照每孔20000个细胞接种于24孔板；
(2)24小时后，添加含100ng/mL大鼠NGFβ的DMEM培养基，诱导分化；
(3)每两天更换分化培养基，连续刺激6天，诱导PC12细胞神经元样转化；
(4)将培养基换成无糖DMEM培养基，置于缺氧细胞培养箱中，在5％CO2、1％O2、94％N2、37℃条件下培养3h。
2.根据权利要求1所述的OGD模型的构建方法，其特征在于：步骤(3)联系刺激6天后，显微镜下观察细胞形态，并进行神经元标志物DCX和MAP2染色，以确定诱导分化是否成功。
3.利用权利要求1或2所述的构建方法得到的OGD模型。
4.权利要求3所述的OGD模型在鉴定神经干细胞的有效性中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，利用OGD模型鉴定神经干细胞的有效性的方法为：
(1)向OGD模型中加入NSC上清，置于37℃、5％CO2及饱和湿度的孵箱中培养2天；
所述NSC上清，是通过以下方法制备得到的：将NSC细胞置于DMEM/F12培养基中培养3天，离心，取上清，即得；
(2)培养2天后，弃去上清，加入含10％CCK-8的DMEM/F12培养基，在细胞培养箱中培养1h；在450nm波长处检测OD值，该检测结果用于评价、鉴定神经干细胞对神经损伤的保护作用。
CN202211682469.9A 2022-12-27 2022-12-27 Ogd模型及在鉴定神经干细胞的有效性中的应用 Pending CN116286649A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211682469.9A CN116286649A (zh) 2022-12-27 2022-12-27 Ogd模型及在鉴定神经干细胞的有效性中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202211682469.9A CN116286649A (zh) 2022-12-27 2022-12-27 Ogd模型及在鉴定神经干细胞的有效性中的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116286649A true CN116286649A (zh) 2023-06-23

Family

ID=86822865

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202211682469.9A Pending CN116286649A (zh) 2022-12-27 2022-12-27 Ogd模型及在鉴定神经干细胞的有效性中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN116286649A (zh)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010056988A2 (en) * 2008-11-13 2010-05-20 University Of South Florida Methods of treating stroke using stem cell-like menstrual blood cells
CN107050038A (zh) * 2017-01-24 2017-08-18 中南大学湘雅三医院 糖酵解抑制剂2‑脱氧‑d葡萄糖在制备治疗缺血缺氧性脑病药物中的应用
CN111334473A (zh) * 2018-12-03 2020-06-26 北京银丰鼎诚生物工程技术有限公司 一种人成体神经干细胞的制备方法及其防治脑卒中的用途
CN114732811A (zh) * 2022-04-19 2022-07-12 中国中医科学院中药研究所 3’-羟基葛根素在制备神经保护药物中的应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010056988A2 (en) * 2008-11-13 2010-05-20 University Of South Florida Methods of treating stroke using stem cell-like menstrual blood cells
CN107050038A (zh) * 2017-01-24 2017-08-18 中南大学湘雅三医院 糖酵解抑制剂2‑脱氧‑d葡萄糖在制备治疗缺血缺氧性脑病药物中的应用
CN111334473A (zh) * 2018-12-03 2020-06-26 北京银丰鼎诚生物工程技术有限公司 一种人成体神经干细胞的制备方法及其防治脑卒中的用途
CN114732811A (zh) * 2022-04-19 2022-07-12 中国中医科学院中药研究所 3’-羟基葛根素在制备神经保护药物中的应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHUNLI MEI 等: ""Nerve growth factor (NGF) combined with oxygen glucose deprivation OGD induces neural ischemia tolerance in PC12 cells"", AFRICAN JOURNAL OF BIOCHEMISTRY RESEARCH, vol. 5, no. 10, 30 September 2011 (2011-09-30), pages 316 *
QIAN LIU 等: ""Co-culturing improves the OGD-injured neuron repairing and NSCs differentiation via Notch pathway activation"", NEUROSCIENCE LETTERS, vol. 559, 31 December 2014 (2014-12-31), pages 2 *
李慧勇 等: "过表达NGF的间充质干细胞对神经元损伤的修复作用研究", 浙江医学, no. 19, 10 October 2018 (2018-10-10), pages 42 - 45 *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Taupin Therapeutic potential of adult neural stem cells
Neuhuber et al. Axon growth and recovery of function supported by human bone marrow stromal cells in the injured spinal cord exhibit donor variations
Fujimoto et al. Treatment of a mouse model of spinal cord injury by transplantation of human induced pluripotent stem cell-derived long-term self-renewing neuroepithelial-like stem cells
Ihrie et al. Cells in the astroglial lineage are neural stem cells
RU2646099C2 (ru) Способ получения индуцированных нервных стволовых клеток, перепрограммированных из клеток, не являющихся нервными, с использованием hmga2
CN111849899B (zh) 定向诱导hiPSC分化为神经细胞体系的诱导培养基
Goulão et al. Astrocyte progenitor transplantation promotes regeneration of bulbospinal respiratory axons, recovery of diaphragm function, and a reduced macrophage response following cervical spinal cord injury
KR101210988B1 (ko) 전자기장을 이용한 성체 줄기세포의 신경세포 분화유도 방법
CN103146649A (zh) 神经干细胞
CN106701824B (zh) 基于人iPS细胞获取脊髓运动神经元及其功能性细胞的方法
Krejčí et al. In vitro differences of neonatal and later postnatal keratinocytes and dermal fibroblasts
Han et al. Efficient and fast differentiation of human neural stem cells from human embryonic stem cells for cell therapy
CN106399248B (zh) 一种诱导成纤维细胞转分化为神经细胞的方法
Lu et al. Retrovirus delivered neurotrophin-3 promotes survival, proliferation and neuronal differentiation of human fetal neural stem cells in vitro
Kim et al. Therapeutic effect of a hydrogel-based neural stem cell delivery sheet for mild traumatic brain injury
CN105754935B (zh) 一种诱导成纤维细胞转分化为脂肪细胞的诱导培养基及其应用
KR20140120834A (ko) 샤르코-마리-투스 질환 치료제의 스크리닝 방법 및 이에 이용되는 자가 분화 운동신경세포
Marei et al. Therapeutic potential of human olfactory bulb neural stem cells for spinal cord injury in rats
Li et al. Induction of functional recovery by co-transplantation of neural stem cells and Schwann cells in a rat spinal cord contusion injury model
CN105670989A (zh) 高效诱导成体细胞表观重编程的试剂盒及其方法
CN116286649A (zh) Ogd模型及在鉴定神经干细胞的有效性中的应用
Gancheva et al. Effect of octamer-binding transcription factor 4 overexpression on the neural induction of human dental pulp stem cells
CN110396500A (zh) 诱导成纤维细胞直接向神经元转分化的组合物及其应用
Liard et al. In vitro isolation of neural precursor cells from the adult pig subventricular zone
Jakeman et al. Fetal spinal cord transplantation after spinal cord injury: around and back again

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination