CN116270399A

CN116270399A - 脐带提取物的制备方法及其美白组合物

Info

Publication number: CN116270399A
Application number: CN202310285852.9A
Authority: CN
Inventors: 吴道贫; 谢秀风; 邹洁宜; 莫乾强; 陈菊
Original assignee: Guangzhou Zhunyou Biological Technology Co ltd
Current assignee: Guangzhou Zhunyou Biological Technology Co ltd
Priority date: 2023-03-22
Filing date: 2023-03-22
Publication date: 2023-06-23

Abstract

本发明属于医用、牙科用或化妆用的配制品领域，具体涉及一种脐带提取物的制备方法及其美白组合物。所述脐带提取物使用在化妆品中时，包括脐带提取物、二裂酵母发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、膜英黄芪根提取物、防风根提取物、金盏花花提取物、合欢花提取物、天麻根提取物。本发明提供的含有脐带提取物的美白组合物具有美白、保湿、祛斑、修复、保护皮肤屏障和抗皱抗衰的效果。

Description

脐带提取物的制备方法及其美白组合物

技术领域

本发明属于医用、牙科用或化妆用的配制品领域，具体涉及一种脐带提取物的制备方法及其美白组合物。

背景技术

皮肤老化是指皮肤功能衰老性损伤，使皮肤对机体的防护能力，调节能力等减退，由此皮肤不能适应内外环境的变化，出现颜色、色泽、形态、质感等外观整体状况的改变。皮肤衰老有很多原因，其中主要分为内源性老化和外源性老化二类。内源性老化是年龄因素，随着年龄的增长，人体会逐渐衰老，皮肤也会随之衰老、松弛，出现皱纹等，这是一个自然的现象，是不可逆的。由于人们的生活中会持续的进行肢体活动，面部的比如微笑、大笑、皱眉等，皮肤都会随之活动，那么使用频率越高的肌肉和皮肤，就更加容易衰老。外源性老化是环境因素，这随着不同人的生活环境、生活习惯，而有不同的差别。有的人由于工作或生活的原因，长期处于户外，经受风吹日晒，皮肤会更加容易变得粗糙，乃至变黑、长斑等。

而从细胞上来说，皮肤衰老分为表皮层和真皮层细胞活力下降。前者下降会导致皮肤对外界抵抗力下降、防护力降低，在紫外线的作用下代谢紊乱、色素累积增多。后者下降会导致其中的成纤维细胞分泌胶原蛋白和弹性蛋白减少。胶原蛋白的作用是保持蓄水能力，含量下降，会导致皮肤松弛、皱纹增多；弹性蛋白纤维的作用是起到支撑作用，含量下降会导致皮肤失去弹性。

黑色素是生物的保护性色素，广泛存在动物中，是类结构复杂多样的酚类或吲哚类生物大分子色素的总称。，它为生物体提供结构性强度或保护生物免受紫外线、电离辐射、重金污染、低温和高温等环境胁迫的伤害。黑色素是一类光保护剂、抗辐射剂、螯合剂、生物抗氧剂和免疫促进剂。当皮肤受到线照射，皮肤会自我保护，通过分泌麦拉宁色素来激活酪氨酸酶氧化多巴形成黑色素，从而达到来保护皮肤细胞。由于细胞代谢活动的导致黑色素移动，转移到了皮肤表皮层形成雀斑、晒斑、黑斑等形状。

发明内容

本发明的目的在于提供一种脐带提取物的制备方法及其含有脐带提取物的美白组合物，该美白组合物具有祛斑、美白、保湿、稳定性好的修复肌肤的精华液。

一种脐带提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取哺乳动物脐带在放置到缓冲液中清洗，脐带除去血液和血管；

(2)剩余脐带组织为华通氏胶，将华通氏胶剪成碎片后放置于缓冲液中低温搅动；

(3)搅动后离心取上清液，得脐带提取物。

特别地，所述缓冲液为PBS缓冲液；

步骤(2)中的碎片长度为0.5-3cm；

步骤(2)中，温度范围为3-8℃，搅动时间为10-30h；

步骤(2)中，缓冲液的添加量为脐带原始质量的1-5倍；

步骤(3)中，离心时间为10-20min，转速为2500-5500rpm。

本发明还提供前述脐带提取物在化妆品领域中的应用，具体为：

一种美白组合物，按质量份计算包括以下原料：

特别地，还包括保湿剂、水、乳化剂、增稠剂和防腐剂。

特别地，按质量份计算，还包括：

特别地，所述保湿剂为甘油、透明质酸、聚谷氨酸钠或裂裥菌素中的至少一种。

特别地，述防腐剂为1,2-己二醇、或丁二醇中至少一种。

特别地，所述乳化剂为PEG/PPG-17/6共聚物、霍霍巴蜡PEG-120酯类或霍霍巴油PEG-150酯类中至少一种。

本发明还提供前述美白组合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将水、乳化剂、增稠剂和保湿剂混合，加热；

(2)降温，加入脐带提取物、二裂酵母发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、膜英黄芪根提取物、防风根提取物、金盏花花提取物、合欢花提取物、天麻(根提取物；

(3)继续降温，再加入防腐剂搅拌后出料，即得美白组合物，

步骤(1)所述加热的温度为80℃-90℃；

步骤(2)所述降温是降至40℃-50℃；

步骤(3)所述继续降温是降至35℃-39℃；

步骤(2)和步骤(3)中所述搅拌的时间为15-30min。

脐带提取物：含有硫酸软骨素、糖元和脂质。且有大量蛋白质与胶原，皮肤有很好调理作用。先是通过修复内源性细胞，抑制衰老死亡，加快新陈代谢，修复了肌肤屏障，延缓衰老；再后是深入滋养这些细胞，让它们重新充满活力，这一步能让肌肤充满光泽，红润细腻。

膜英黄芪(ASTRAGALUSMEMBRANACEUS)根提取物：其含有的重要活性成分黄芪皂苷，可刺激皮层细胞的增殖，有调理皮肤的效果。具有抗衰老，预防皱纹的作用。

防风(SAPOSHNIKOVIA DIVARICATA)根提取物：对多种自由基有消除作用，可用作抗氧化剂；对黑色素有一定的抑制作用，有很好美白作用；可以收缩毛孔，用作收敛剂；同时具有抗菌消炎的作用。

金盏花(CALENDULA OFFICINALIS)花提取物：抗炎抗菌的作用，金盏花提取物对表皮细胞和真皮细胞的增殖作用，对弹性蛋白酶活性的抑制，结合它的优秀抗氧性，因此可增强皮肤活性，同时具有保湿作用。

合欢(ALBIZIA JUUBRISSIN)花提取物：特征活性成分是合欢皂苷，具有抗氧化活性，还具有抗糖化作用，防止还原糖与蛋白发生“褐变反应”，同时逆转已糖化的胶原蛋白，保护和恢复胶原蛋白的结构以及活性，减少皮肤皱纹，改善色素沉着。

天麻(GASTRODIA ELATA)根提取物：对超氧歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶有很好的活化作用，可有效地消除自由基起到抗衰作用；天麻提取物还对黑色素细胞有激活作用。

聚谷氨酸钠：特殊的分子结构，使其具有极强的保湿能力，能有效地增加皮肤的保湿能力，促进皮肤健康，其超强的保湿能力更优于玻尿酸以及胶原蛋白，为新一代的生物科技保湿成份。作为增白剂具有长期持久的抗折皱的性能。

裂裥菌素：是理想的用于化妆品的成分，具有抗炎和增强免疫力的功效。可有效修护晒伤肌肤，对皮肤有保湿和抗皱作用，使肌肤水嫩饱满。

与现有技术相比：

1.本发明提供的含有脐带提取物的美白组合物具有美白、保湿、祛斑、修复、保护皮肤屏障和抗皱抗衰的效果。

2.本发明使用的原料成分二裂酵母发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、脐带提取物具有降低了生物毒性，具有渗透性高、提高细胞活性高、加快新陈代谢速度的效果

3.本发明添加了美白保湿和抗敏成分等物质，细胞吸收后，抑制黑色素合成，让色素沉淀失败，达到美白效果，含有抵抗炎症物质，有效抑制损伤部位引发炎症的相关细胞增殖与迁移，加强了细胞再生能力，从而达到修复、抗衰效果。

4.本发明加入的聚谷氨酸是一种具有黏性的氨基酸阴离子聚合物，又称γ-PGA，具备优秀的护肤保养功效，促进皮肤天然保湿因子PCA的合成；保护透明质酸，并与透明质酸具有协同效应，增强皮肤持水能力；抑制酪氨酸酶活性，减少黑色素合成；活化纤维母细胞，使其合成胶原蛋白和弹性蛋白，使皮肤富有弹性，更水润、透亮。γ-PGA可用于构建包埋缓释体系，促进皮肤吸收，在皮肤表面成膜，隔离环境刺激，减少皮肤炎症。

附图说明

下面结合附图和实施例对本发明进一步说明。

图1为本发明脐带提取物提取过程。

具体实施方式

下面结合具体实施例，对本发明作进一步详细的阐述，下述实施例不用于限制本发明，仅用于说明本发明。以下实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，下述实施例中所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

在具体实施例中，没有详细说明的步骤、材料选择、数值参数均为现有技术中的常规选择，或者任何现有公开的现有技术。

本发明采用的脐带提取物来源于符合伦理的合法来源的羊脐带。

实施例1

一种美白组合物的制备方法，包括步骤：

(1)按如下称取原料备用，并将水、乳化剂、增稠剂和保湿剂混合，加热至85℃；

裂裥菌素1

(2)降温至45℃，加入脐带提取物、二裂酵母发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、膜英黄芪根提取物、防风根提取物、金盏花花提取物、合欢花提取物、天麻根提取物，搅拌15min；

(3)继续降温至37℃，再加入防腐剂搅拌15min后出料，即得一种美白组合物。

其中的脐带提取物制备方法为:

(1)将羊的脐带在放置到磷酸盐缓冲液(PBS)中清洗；

(2)将脐带除去血和血管，剩余脐带组织为华通氏胶，将华通氏胶剪成长度为1cm至2cm，浸泡在磷酸盐缓冲液中，磷酸盐缓冲液的质量为脐带的3倍。

(3)在4℃下，搅动浸透在磷酸盐缓冲液中的华通氏胶24h。

(4)以4000rpm的速率离心15min，取上清液，上清液即为脐带提取物。

实施例2

一种美白组合物的制备方法，包括步骤：

(1)按如下称取原料备用，并将水、乳化剂、增稠剂和保湿剂混合，加热至90℃；

脐带提取物2

二裂酵母发酵产物滤液2

二裂酵母发酵产物溶胞物2

霍霍巴蜡PEG-120酯类3

丙烯酰二甲基牛磺酸铵VP共聚物 3

丁二醇 1.5。

(2)降温至50℃，加入脐带提取物、二裂酵母发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、膜英黄芪根提取物、防风根提取物、金盏花花提取物、合欢花提取物、天麻根提取物，搅拌15min；

(3)继续降温至39℃，再加入防腐剂搅拌30min后出料，即得一种美白组合物。

其中的脐带提取物制备方法为:

(1)将羊的脐带在放置到磷酸盐缓冲液(PBS)中清洗；

(2)将脐带除去血和血管，剩余脐带组织为华通氏胶，将华通氏胶剪成长度为0.5cm至2cm，浸泡在磷酸盐缓冲液中，磷酸盐缓冲液的质量为脐带的5倍。

(3)在3℃下，搅动浸透在磷酸盐缓冲液中的华通氏胶30h。

(4)以2500rpm的速率离心20min，取上清液，上清液即为脐带提取物。

实施例3

一种美白组合物的制备方法，包括步骤：

(1)按如下称取原料备用，并将水、乳化剂、增稠剂和保湿剂混合，加热至80℃；

脐带提取物2

二裂酵母发酵产物滤液2

二裂酵母发酵产物溶胞物2

膜英黄芪根提取物1

防风根提取物1

金盏花花提取物1

合欢花提取物1

天麻根提取物1

甘油 2

裂裥菌素 3

水 74.5

霍霍巴蜡PEG-120酯类3

丙烯酰二甲基牛磺酸铵VP共聚物 3

丁二醇 1.5。

(2)降温至40℃，加入脐带提取物、二裂酵母发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物、膜英黄芪根提取物、防风根提取物、金盏花花提取物、合欢花提取物、天麻根提取物，搅拌30min；

(3)继续降温至35℃，再加入防腐剂搅拌15min后出料，即得一种美白组合物。

其中的脐带提取物制备方法为:

(1)将羊的脐带在放置到磷酸盐缓冲液(PBS)中清洗；

(2)将脐带除去血和血管，剩余脐带组织为华通氏胶，将华通氏胶剪成长度为1.5cm至3cm，浸泡在磷酸盐缓冲液中，磷酸盐缓冲液的质量为脐带的1倍。

(3)在8℃下，搅动浸透在磷酸盐缓冲液中的华通氏胶10h。

(4)以5500rpm的速率离心10min，取上清液，上清液即为脐带提取物。

实施例4

一种美白组合物的制备方法，包括步骤：

其中的脐带提取物制备方法为:

(1)将羊的脐带在放置到磷酸盐缓冲液(PBS)中清洗；

(3)在4℃下，搅动浸透在磷酸盐缓冲液中的华通氏胶24h。

对比例1

与实施例1的区别在于，包括以下组分：

脐带提取物2

二裂酵母发酵产物滤液2

二裂酵母发酵产物溶胞物2

甘油 2

裂裥菌素 3

水 77

霍霍巴蜡PEG-120酯类3

丙烯酰二甲基牛磺酸铵VP共聚物3

丁二醇1.5。

制备方法除了不含脐带提取物、二裂酵母发酵产物滤液、二裂酵母发酵产物溶胞物的相关步骤其余与实施例1相同。

对比例2

与实施例1的区别在于，包括以下组分：

制备方法除了不含膜英黄芪根提取物、防风根提取物、金盏花花提取物、合欢花提取物、天麻根提取物的相关步骤其余与实施例1相同。

样品稳定性测试

1、耐热测试：恒温培养箱调节到40℃，将前述制取的四个实施例，每个实施例取三支装于透明玻璃瓶中，装样量为20ml/瓶，封口后置于恒温培养箱内，三个月后取出，恢复至室温，观察外观变化。

2、耐寒测试：恒温培养箱调节到-10℃，将前述制取的四个实施例，每个实施例取三支装于透明玻璃瓶中，装样量为20ml/瓶，封口后置于恒温培养箱内，三个月后取出，恢复至室温，观察外观变化。

3、常温测试：将前述制取的四个实施例，每个实施例取三支装于透明玻璃瓶中，装样量为20ml/瓶，封口后常温下放置6个月后，观察精华液的外观变化。

耐热测试、耐寒测试、常温测试均未观察到析出、沉淀等现象，保持原来外观。

人体皮肤斑贴测试

将获得的四个实施例参照《2022化妆品安全技术规范》中的人体皮肤斑贴实验。

分别于30min(待压痕消失后)、24h和48h按标准观察皮肤反应，并记录观察结果，见表1。

表1人体安全性测试结果

人体主观感受测试

招募90名女性，年龄20-50岁，分成6组，每组15人。6组受试者分别每天晚上涂抹对应试样，第1组敷实施例1的成品、第2组敷实施例2的成品、第3组敷实施例的的成品、第4组敷实施例4的成品、第5组敷对比例1的成品、第6组敷对比例2的成品，连续使用1个月，使用前后的效果如表2所示。

表2人体主观感受测试结果

注：表2中，对于每个受试者发出调查问卷，认为没有对应效果的记录分数为0、认为有轻微效果的记录分数为50、认为有明显效果的记录分数为100，最后计算最后的平均分值。

细胞活性测试

(1)细胞接种：按2.2*10⁴个/孔的接种密度接种细胞至96孔板，放置培养箱孵育过夜(37℃、5％CO₂)。

(2)实验分组：实验设置空白对照组与实验组，另设3个无细胞的孔做调零孔，实验组中样品前述实施例为基础，设置5个浓度梯度，每个梯度浓度下设置3个复孔。

(3)配液：按实验设计，用基础培养基配置不同浓度的受试物。

表3测试浓度设定表

(4)给药：24h后取出96孔板，废除旧培养基，空白对照组每孔加100μL培养液,样品组每孔加入100μL含有相应浓度样品的培养液；调零组无细胞接种，仅加入100μL细胞培养液。给药完成后放回培养箱继续培养。

(5)检测：细胞培养24h后，弃掉上清，加入MTT工作液。37℃避光孵育4h，孵育结束后，弃掉上清，每孔加100μL DMSO，在490nm处读取OD值。

(6)细胞相对活力计算：根据公式计算；

(7)利用SPSS 19.0统计软件包进行统计学分析，对测试区域的测量值进行描述性统计。计算分析数值的变化，对照组与样品组之间的差异。如测试数据为正态分布，则采用独立T检验方法进行统计分析；如测试数据为非正态分布，则采用秩和检验方法进行统计分析。统计方法均采用双尾检验，检验水准α＝0.05。

结果如表4所示。

表4MTT检测结果

人体仪器测试

通过仪器测定，科学的评价实施例的效果。

总共招募10名志愿者，分别在左右脸随机使用实施例4所制备的样品以及基质样品，分别在0W、2W、4W、6W进行CK探头采集皮肤个体类型角ITA°值、黑素指数(MI值)、皮肤白度(L*值)、皮肤水分含量(MMV值)、经皮失水率(TEWL值)指标。

实验仪器：

皮肤颜色测试仪(Colormeter CL400；德国CK)：通过用一种特殊的颜色矩阵来校正探头测得的反射光量后利用三基色法得出XYZ值，并计算转换成L*a*b*ITA°值。

皮肤黑色素和血红素测试仪(Mexameter MX18)：测定原理是基于光谱吸收的原理(RGB),通过测定特定波长的光照在人体皮肤上的反射量来确定皮肤中黑色素的含量。

皮肤水分含量测试仪(Cormeter CM825，德国CK)：采用电容法测量人体皮肤角质层的水分含量。

经皮失水率测试仪(Tewameter TM300；德国CK)：通过两组温度、湿度不同的传感器测定表皮由角度层水分分散失形成的不同点的水蒸气压梯度，测量经表皮蒸发的水分量。

面部图像分析仪VISIA(德国CK)：采用5种不同的光源进行面部图像拍摄，能直观观察面部皮肤状态的变化。

实验样品：

实施例4所制得样品，以及如下表5所示的基质；

表5基质配方

商品名	名称	添加量
			去离子水	水	77.1
EDTA-2NA	EDTA二钠	0.05
			AC Yeast Beta-Glucan匍聚糖	β-葡聚糖	0.05
ALLANTOIN(尿囊素)	尿囊素	0.2
			甘油	甘油	5
ULTREZ 21 POLYMER	丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物	0.15
			低分子透明质酸钠	透明质酸钠	0.05
T.I.O	甘油三(乙基己酸)酯	2
			DM10	聚二甲基硅氧烷	3
合成角鲨烷Squalane Syn	氢化聚异丁烯	4
			ELDEW PS-203	植物甾醇/辛基十二醇月桂酰谷氨酸酯	0.15
olivem 1000	鲸蜡硬脂醇橄榄油酸酯	1.6
			SEPINOV EMT10	丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物	1
Spectrastat PHL	辛酰羟肟酸	1
			己二醇	1,2-己二醇	0.5
1.3丁二醇	丁二醇	4
			三乙醇胺TEA	三乙醇胺	0.15

试验方法：

(1)志愿者要求

招募志愿者10人，测试志愿者左右脸分别的斑区及非斑区共计四个区域的皮肤个体类型角ITA°值、黑素指数(MI值)、皮肤白度(L*值)、皮肤水分含量(MMV值)、经皮失水率(TEWL值)共计五项指标。受试部位禁止使用影响美白祛斑测试的制剂；受试者禁止点滴、注射、口服或其他形式摄入影响美白祛斑测试的制剂；受试者以室内活动为主,避免长期暴露在光照下。

1.1纳入标准

25～60岁，健康女性或男性；

受试部位至少有一个和周围邻近皮肤的ITA°差值大于10°的明显色斑，且直径不小于3mm(不能是临床上使用外用制剂难以改善的雀斑、色素痣等)；

无过敏性疾病，无化妆品及其它外用制剂过敏史；

既往无光感性疾病史，近期内未使用影响光感性的药物；

受试部位皮肤应无胎记、炎症、瘢痕、多毛等现象；

能够理解试验过程，自愿参加试验并签署书面知情同意书者。

1.2排除标准

a)妊娠或哺乳期妇女，或近期有备孕计划者；

b)患有银屑病、湿疹、异位性皮炎、严重痤疮等皮肤病史者；或患有其他慢性系统性疾病者；

c)近1个月内口服或外用过皮质类固醇激素等抗炎药物者；

d)近2个月内使用过果酸、水杨酸等任何影响皮肤颜色的产品或药物(如氢醌类制剂)者；

e)近3个月内试验部位使用过维A酸类制剂或进行过化学剥脱、激光、脉冲光等医美治疗者；

f)不可避免长时间日光暴露者；

g)近2月内参加过其他临床试验者；

h)其他临床评估认为不适合参加试验者。

1.3受试者限制

a)在试验期间受试部位必须使用试验机构提供的试验产品或对照产品，不能使用其他任何具有祛斑美白功效或者可能对测试结果产生影响的产品；

b)在试验期间不能有暴晒情况，并应做好试验部位的防晒工作。

(2)测试指标

皮肤个体类型角ITA°值：ITA°值通过皮肤色度计或反射分光光度计测量皮肤L*a*b*颜色空间数据来表征人体皮肤颜色的参数，ITA°值越大，皮肤肤色越浅，反之越深。计算公式如下：

黑素指数(MI值):MI值表征黑色素指数，数值范围为0～999，测量数值越高说明皮肤颜色越深。

皮肤亮度(L*值)：表示从黑色至白色的平衡，L*值越大，表示皮肤越白。

皮肤水分含量(MMV值)：MMV值表征皮肤水分，MMV值越大，角质层含水量越高。

经皮水分流失(TEWL值)：TEWL值用来评价皮肤屏障功能，是使用产品后考察皮肤屏障的重要参数，其数值越小皮肤经皮失水越少。

(3)评价方法与数据统计方法

实验采用双盲法，测试周期为6周，皮肤数据采集次数为4次，分别为0W、2W、4W、6W。按照要求筛选出合格的受试者，在志愿者第一次来访时，与其签订志愿者知情同意书、采集0周数据、圈定测试区域(包括左右脸的斑区及非斑区共计四个区域)以及发放样品。志愿者每次来访时，用指定洁面清洗脸部后，在测试环境静坐20-30min，静坐结束，开始采集脸部数据。

应用统计分析软件进行数据的统计分析。计量资料表示为：均值±标准差，并进行正态分布检验，符合正态分布要求，自身前后的比较采用配对t检验，否则采用两个相关样本秩和检验；等级资料使用前后的比较，采用两个相关样本秩和检验；试验产品和对照组之间比较采用独立样本t检验或秩和检验。上述统计分析均为双尾检验，显著性水平为α＝0.05。

(4)测试注意事项

4.1试验环境

实验室温度21±1℃；相对湿度50％±10％

4.2试验部位

左右脸部斑区和非斑区共计四个区域

4.3样品使用方法

2次/天，早晚各一次，分别均匀涂抹于脸部两侧。

(5)测试结果

5.1个体类型角ITA°值，如表6所示。

表6ITA°值测试结果

注“-”：P>0.05,表示无显著性差异，“*”：P<0.05，表示有显著性差异，“**”：P<0.01，“***”：P<0.001，表示非常显著性差异。

5.2黑素指数MI值，如表7所示。

表7黑素指数MI值测试结果

5.3皮肤白度L*值，如表8所示。

表8皮肤白度L*值测试结果

5.4皮肤水分含量MMV值，如表9所示。

表9皮肤水分含量MMV值测试结果

5.5皮肤经皮失水率TEWL值，如表10所示。

表10皮肤经皮失水率TEWL值测试结果

上述详细说明是针对本发明其中之一可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本发明技术方案的范围内。