CN116159037A - 一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于兽用药技术领域，具体公开一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物及其制备方法，靶向微丸组合物为独立的微丸颗粒物形态，单个微丸颗粒物包括丸芯和将丸芯包裹的包衣层；其中丸芯以微丸颗粒物总质量计，包括45‑80%的含有谷氨酰胺和氧化锌成分的药效部分，以及5‑20%的辅料；包衣层包括外结肠靶向衣层和内功能层，外结肠靶向衣层占微丸总质量的10‑25%，内功能层占微丸总质量的5‑15%，内功能层具有吸水成分。本发明通过内服给药，在消化道上部不释放药效成分，到达结肠后溶解释放出药效成分，在结肠处直接发挥作用，对结肠疾病能起到靶向定位治疗的效果。

Description

一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于兽用药技术领域，具体涉及一种用于仔猪结肠炎的防治药剂和制备方法。

背景技术

近年来乳仔猪、保育猪结肠炎发生率较高，尤其是断奶后由于转群应激和换料应激等多种因素影响下发病率极高，是仔猪断奶后消瘦和死亡的最常见病因之一。目前，当乳仔猪、保育猪出现结肠炎引起持续腹泻时，一般采用内服抗菌药物或注射抗菌药物的治疗方式，由于消化生理结构，结肠处于消化道的后段，往往治疗效果并不理想。并且长期使用抗菌药物，容易破坏机体肠道的菌群平衡，影响仔猪后期生长性能。究其原因，主要是在断奶后，因饲料中蛋白质来源不同，导致仔猪蛋白消化率下降，且结合转群、换料等应激因素，导致小肠功能产生影响，此时蛋白未完全消化便进入大肠内，导致大肠内菌群环境发生变化，形成致病条件。

现有技术中，多采用抗生素或其他微生物抑制剂添加在饲料中解决相应问题，但抗生素因为添加量的问题导致菌群产生抗药性，一定时间后还是会影响大肠菌群类型，导致大肠肠道粘膜受损，出现炎症、溃疡等情况，一味的使用抗生素无法根本解决结肠炎的问题。而作为抗生素替代的手段，氧化锌的使用不仅能够抑制致病菌的生长，同时其作为收敛药，也能够作用于肠道粘膜解决其炎症的问题。但由于内服的氧化锌药物会因为缓释控制不准确，常常会在胃酸环境中释放一部分，从而消耗胃酸引起胃部的不适；而且单一氧化锌的大量使用同样会导致肠道粘膜发生改变，造成小肠的粘膜厚度和绒毛高度的增加，影响营养物质的吸收。

且现有技术中，采用单一包衣层的药丸，虽然能够根据需求调整材料从而达到靶向释放的效果，虽然这种靶向释放的原理是通过pH值的变化而发生变化，但并不是绝对的不释放或释放的情况。实际情况中，在不考虑制作工艺的稳定性问题，以形成均质厚度的包衣层的微丸会在小肠就会释放一定药剂，常规的结肠靶向药都会在结肠前释放10-20%的药剂量。为了改善这一状况，一种手段是调整包衣层的厚度，通过加厚的方式来降低除结肠外的其他消化道的释放率。但这种加厚的方式也有弊端，因为药剂达到结肠的时间在12-14h左右，过厚的包衣层会导致其在结肠处的释放率不足，无法起效。则现有技术中并未采用大厚度的包衣层方案，因为无论如何调整厚度或者包衣材料本身，均存在一个临界值，即增大包衣厚度定会减小结肠处释放率，只能是保持结肠释放率的前提下尽可能降低在其他消化道的释放率。

因此，当前急需一种既能精准定位释放，又不影响动物肠道菌群的解决结肠炎的治疗性产品。

发明内容

为了解决现有技术存在的问题，本发明提供一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物及其制备方法，通过内服给药，在消化道上部不释放药效成分，到达结肠后溶解释放出药效成分，在结肠处直接发挥作用，对结肠疾病能起到靶向定位治疗的效果。

本发明所采用的技术方案为：

第一方面，本发明提供一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物，为独立的微丸颗粒物形态，单个微丸颗粒物包括丸芯和将丸芯包裹的包衣层；

其中丸芯以微丸颗粒物总质量计，包括45-80%的含有谷氨酰胺和氧化锌成分的药效部分，以及5-20%的辅料；

包衣层包括外结肠靶向衣层和内功能层，外结肠靶向衣层占微丸总质量的10-25%，内功能层占微丸总质量的5-15%，内功能层具有吸水成分。

结合第一方面，本发明提供第一方面的第一种实施方式，所述外结肠靶向衣层以质量计包括6-15%的丙烯酸树脂、2-5%的乙基纤维素、1.5-4%的柠檬酸三乙酯、1-4%的滑石粉以及75-88%的纯水；

所述内功能层以质量分数计包括1-5%的卡波姆934P、1-4%的羟丙基甲基纤维素、0.5-3%的滑石粉和90-97%的溶剂组成。

结合第一方面的第一种实施方式，本发明提供第一方面的第二种实施方式，所述丙烯酸树脂包括聚丙烯酸树脂Ⅱ和聚丙烯酸树脂Ⅲ；所述溶剂为乙醇溶液。

结合第一方面的第二种实施方式，本发明提供第一方面的第三种实施方式，所述外结肠靶向衣层以质量计包括4%的聚丙烯酸树脂Ⅱ、6%的聚丙烯酸树脂Ⅲ、3.5%的乙基纤维素、2.5%的柠檬酸三乙酯、2%的1200目的滑石粉以及82%的纯水；

所述内功能层以质量分数计包括2%的卡波姆934P、2%的羟丙基甲基纤维素、1%的1200目滑石粉和95%的溶剂组成。

结合第一方面的第三种实施方式，本发明提供第一方面的第四种实施方式，所述药效部分以微丸颗粒物总质量计，包括20-35%的谷氨酰胺、20-30%的纳米氧化锌以及5-15%碳酸氢钠。

结合第一方面的第三种实施方式，本发明提供第一方面的第五种实施方式，包括：以质量计28%的谷氨酰胺、20%的纳米氧化锌、15%的碳酸氢钠、12.8%的微晶纤维素、0.4%的十二烷基硫酸钠、0.8%的羟丙基甲基纤维素、15%的外结肠靶向衣层以及8%的内功能层。

结合第一方面的第四或五种实施方式，本发明提供第一方面的第六种实施方式，所述辅料以微丸颗粒物总质量计，包括4-15%的微晶纤维素、0.2-2%的十二烷基硫酸钠以及0.5-3%羟丙基甲基纤维素。

第二方面，本发明提供一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物的制备方法，用于制备上述实施方式中的防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物，步骤如下：

S100.选取材料同时配置外结肠靶向衣层液和内功能层液，然后按照质量分数比分别称取谷氨酰胺、纳米氧化锌、碳酸氢钠、微晶纤维素、十二烷基硫酸钠混合均匀形成干混合粉；

S200.配制浓度为4%的用作粘合剂的羟丙基甲基纤维素水溶液，与步骤S100中的干混合粉混合制备软材；

S300.将软材加入挤出机，并在形成条状物料后等量剪切进入滚圆机制成球状的丸芯，并将其烘干；

S400.将干燥的丸芯加入流化床包衣机中，先缓慢定量喷入步骤S100中制得的内功能层液在丸芯表面形成内功能层，喷完后在喷入步骤S100中制得的外结肠靶向衣层液，待其干燥后获得微丸颗粒物。

结合第二方面，本发明提供第二方面的第一种实施方式，所述步骤S100中，配置外结肠靶向衣层液的步骤为：按质量比称取丙烯酸树脂、乙基纤维素和纯化水混合后在均质机中形成水分散体，向水分散体加入滑石粉和柠檬酸三乙酯均匀混合形成外结肠靶向衣层液；

配置内功能层液的步骤为：按质量比称取经超微粉碎的卡波姆934P、羟丙基甲基纤维素、滑石粉和溶剂，混合均匀，充分搅拌使分散均匀形成内功能层液。

结合第二方面，本发明提供第二方面的第二种实施方式，步骤S200中在制备软材时，粘合剂的用量为干混合粉质量的20-25%；

步骤S300中的挤出机孔板孔径0.8mm，转速为35r/min；

步骤S300中烘干的进风温度为60℃，风机频率40Hz，抖袋延时6s；

步骤S400中的流化床风机频率28Hz，转速600r/min，每次投料3.0kg；喷入包衣液时调节进风温度，使物料温度始终维持在38±2℃。

需要说明的是，本发明中区别于现有技术，采用了双效成分共同解决现有猪结肠炎的问题，而这种药剂成分在其他消化道释放后可能会引起不适感，谷氨酰胺常用于治疗胃酸过多，但进入正常胃部会引起不利影响。故精准释放能够配合药剂的优化从而起到较好的效果，若单纯优化药剂成分不配合包衣层的优化，会引起其他的问题出现。尤其是兽药，本身有效成分较高。

本发明的有益效果为：

（1）本发明根据现有治疗仔猪因断奶后应激反应产生的结肠炎情况，区别于现有的抗生素治疗药物，尤其是采用氧化锌为主的药剂，该药剂会导致肠道内壁通透性减小影响营养物质的吸收，本申请在添加有谷氨酰胺后与氧化锌配合，谷氨酰胺本身致力于改善肠道受损的粘膜，通过供应合成粘膜细胞所必需的营养物质，结合氧化锌共同起效，从而预防因断奶后一系列应激反应产生的结肠炎；

（2）本发明通过优化包衣层的材料，采用外结肠靶向衣层配合添加的丸芯的辅料成分，在对应的结肠处缓释，减少在胃肠道上部的释放量，并在结肠处快速释放，从而起到对应的效果，有效修复仔猪的肠道黏膜；

（3）本发明通过优化包衣层的材料，增加的内功能层配合外结肠靶向衣层，可在加厚外结肠靶向衣层的设计方案中提高其在结肠内快速崩解的效果，相较于现有技术能够给增加外结肠靶向衣层厚度的方式来降低除结肠部位外的其他消化道部分的释放率，同时又能够提高在结肠停留的有限时间内的溶解率，从而保证在采用新的药物成分后避免其在其他消化道溶解造成影响。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步阐释。

实施例1：

本实施例提供一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物以及制备方法，改善现有技术手段中采用抗生素或采用单一起效成分所导致的其他衍生问题的出现。

具体的，该靶向微丸组合物为单颗颗粒状微丸形态，从结构上分为丸芯部分和包衣层，包衣层将丸芯包裹，制丸后其外表形成较为平滑有光泽的衣层。

其中，丸芯以谷氨酰胺和纳米氧化锌作为主要起效成分，还包括部分辅料，用于粘合有效成分并在对应环境中水解释放。

包衣层包括外结肠靶向衣层和内功能层，外结肠靶向衣层以丙烯酸树脂为主要粘合成分形成的衣层，内功能层内具有吸水材料和崩解材料。具体的，外结肠靶向衣层占微丸总质量的10-25%，内功能层占微丸总质量的5-15%，内功能层具有吸水成分，同时可添加有崩解成分。

丸芯以微丸颗粒物总质量计，包括45-80%的含有谷氨酰胺和氧化锌成分的药效部分，以及5-20%的辅料。

同时还公开该微丸的制备工艺，具体如下：

将丸芯所需的药剂按照上述比例配置好，混合均匀形成干混合粉；再将包衣层的材料混合形成两种包衣液；用辅料中与干混合粉混合制备软材。

将软材加入挤出机，并在形成条状物料后等量剪切进入滚圆机制成球状的丸芯，并将其烘干。

将干燥的丸芯加入流化床包衣机中，按顺序缓慢定量喷入包衣液在丸芯表面形成包衣层，包衣液喷完后干燥获得微丸颗粒物。

进一步的，为了实施该方案，在上述材料和结构的基础上进行优化限定，提供更优选的配比和材料。

其中，外结肠靶向衣层以质量计包括6-15%的丙烯酸树脂、2-5%的乙基纤维素、1.5-4%的柠檬酸三乙酯、1-4%的滑石粉以及75-88%的纯水；内功能层以质量分数计包括1-5%的卡波姆934P、1-4%的羟丙基甲基纤维素、0.5-3%的滑石粉和90-97%的溶剂组成。

药效部分以微丸颗粒物总质量计，包括20-35%的谷氨酰胺、20-30%的纳米氧化锌以及5-15%碳酸氢钠。

辅料以微丸颗粒物总质量计，包括4-15%的微晶纤维素、0.2-2%的十二烷基硫酸钠以及0.5-3%羟丙基甲基纤维素。

然后公开一种制备方法，具体如下：

准备材料；选取材料同时配置外结肠靶向衣层液和内功能层液，配置外结肠靶向衣层液的步骤为：按质量比称取丙烯酸树脂、乙基纤维素和纯化水混合后在均质机中形成水分散体，向水分散体加入滑石粉和柠檬酸三乙酯均匀混合形成外结肠靶向衣层液；配置内功能层液的步骤为：按质量比称取经超微粉碎的卡波姆934P、羟丙基甲基纤维素、滑石粉和溶剂，混合均匀，充分搅拌使分散均匀形成内功能层液。

然后按照质量比分别称取谷氨酰胺、纳米氧化锌、碳酸氢钠、微晶纤维素、十二烷基硫酸钠混合均匀形成干混合粉；再按质量比称取丙烯酸树脂、乙基纤维素和纯化水混合后在均质机中形成水分散体，向水分散体加入滑石粉和柠檬酸三乙酯均匀混合形成包衣液。

需要说明的是，材料准备的时间根据具体的工艺要求对应制备，不以描述的前后顺序以及并列关系作为依据。

制作丸芯：配制浓度为4%的用作粘合剂的羟丙基甲基纤维素水溶液，与干混合粉混合制备软材；将软材加入挤出机，并在形成条状物料后等量剪切进入滚圆机制成球状的丸芯，并将其烘干。

制作微丸：将干燥的丸芯加入流化床包衣机中，缓慢定量喷入制得的包衣液在丸芯表面形成包衣层，包衣液喷完后干燥获得微丸颗粒物。

实施例2：

本实施例是在上述实施例1的选材范围中，优选出若干个实施方案，具体如下：

方案一：

单颗微丸成品包括丸芯和包衣层，其中以质量计包衣层占微丸颗粒物总质量的20%，其中包括14%的外结肠靶向衣层以及6%的内功能层。

丸芯以微丸颗粒物总质量计，包括药效部分和辅料。药效部分以微丸颗粒物总质量计，包括30%的谷氨酰胺、25%的纳米氧化锌以及15%碳酸氢钠。辅料以微丸颗粒物总质量计，包括7.5%的微晶纤维素、1%的十二烷基硫酸钠以及1.5%羟丙基甲基纤维素。

而外结肠靶向衣层包括以其该层结构的总质量计包括12%的丙烯酸树脂、3%的乙基纤维素、2%的柠檬酸三乙酯、3%的滑石粉以及80%的纯水。

内功能层以该层结构总质量计包括2%的卡波姆934P、2%的羟丙基甲基纤维素、1%的1200目滑石粉和95%的溶剂组成，溶剂为65%的乙醇溶液。

方案二：

单颗微丸成品包括丸芯和包衣层，其中以质量计包衣层占微丸颗粒物总质量的20%，其中包括14%的外结肠靶向衣层以及6%的内功能层。

丸芯以微丸颗粒物总质量计，包括药效部分和辅料。药效部分以微丸颗粒物总质量计，包括32%的谷氨酰胺、28%的纳米氧化锌以及8%碳酸氢钠。辅料以微丸颗粒物总质量计，包括9%的微晶纤维素、0.9%的十二烷基硫酸钠以及2.1%羟丙基甲基纤维素。

而外结肠靶向衣层包括以其该层结构的总质量计包括12%的丙烯酸树脂、3%的乙基纤维素、2%的柠檬酸三乙酯、3%的滑石粉以及80%的纯水。

内功能层以该层结构总质量计包括2%的卡波姆934P、2%的羟丙基甲基纤维素、1%的1200目滑石粉和95%的溶剂组成，溶剂为65%的乙醇溶液。

方案三：

单颗微丸成品包括丸芯和包衣层，其中以质量计包衣层占微丸颗粒物总质量的20%，其中包括14%的外结肠靶向衣层以及6%的内功能层。

丸芯以微丸颗粒物总质量计，包括药效部分和辅料。药效部分以微丸颗粒物总质量计，包括30%的谷氨酰胺、25%的纳米氧化锌以及11%碳酸氢钠。辅料以微丸颗粒物总质量计，包括12.8%的微晶纤维素、0.4%的十二烷基硫酸钠以及0.8%羟丙基甲基纤维素。

而外结肠靶向衣层以其该层结构的总质量计包括12%的丙烯酸树脂、3%的乙基纤维素、2%的柠檬酸三乙酯、3%的滑石粉以及80%的纯水。

内功能层以该层结构总质量计包括2%的卡波姆934P、2%的羟丙基甲基纤维素、1%的1200目滑石粉和95%的溶剂组成，溶剂为65%的乙醇溶液。

上述三种方案的制备方法，采用挤出滚圆法制备该微丸的丸芯，以流化床包衣机包被外层的包衣层。具体步骤如下：

先按照上述三种方案的配比分别称取谷氨酰胺、纳米氧化锌、碳酸氢钠、微晶纤维素、十二烷基硫酸钠混合均匀形成干混合粉；

配制浓度为4%的羟丙基甲基纤维素水溶液，用作粘合剂，粘合剂的用量占干混合粉的23.8%，将粘合剂与干混合粉混合制备软材；

将制得的软材加入双螺杆挤出机中，制备条状物料，再将条状物料加入滚圆机中，通过剪切和滚圆制备出真球度极高的微丸的丸芯，并将制得的丸芯用流化床烘干机烘干；

配制外结肠靶向衣层液，称取经超微粉碎的丙烯酸树脂、乙基纤维素和纯化水，搅拌至混悬状态后经高压均质机均质后制成水分散体，加超细滑石粉（粒径1200目）、柠檬酸三乙酯混合均匀，充分搅拌使分散均匀；

配制内功能层液，称取经超微粉碎的卡波姆934P、羟丙基甲基纤维素、超细滑石粉（粒径1200目）和溶剂，该溶剂为65%的乙醇溶液，混合均匀，充分搅拌使分散均匀；

将制得的干燥的丸芯加入到流化床包衣机中，在药物处于良好的流化状态下，缓慢依次喷入外结肠靶向衣层液和内功能层液，喷入过程中，调节进风温度，使物料温度始终维持在38±2℃。待外结肠靶向衣层液和内功能层液喷完后，干燥即得该靶向微丸。

其中，挤出机孔板孔径0.8mm，转速为35r/min；滚圆机风机频率28Hz，转速600r/min，时间5s，每次投料3.0kg；在流化床的烘干机中，烘干进风温度为60℃，风机频率40Hz，抖袋延时6s。

进一步地，为了改善包衣层的精准释放效果，对包衣层中的材料进行优化，并提供以下多种方案。

方案四：

单颗微丸成品包括丸芯和包衣层，其中以质量计包衣层占微丸颗粒物总质量的23%，其中包衣层包括15%的外结肠靶向衣层以及8%的内功能层。

丸芯以微丸颗粒物总质量计，包括药效部分和辅料。药效部分以微丸颗粒物总质量计，包括28%的谷氨酰胺、23%的纳米氧化锌以及12%碳酸氢钠。辅料以微丸颗粒物总质量计，包括12.8%的微晶纤维素、0.4%的十二烷基硫酸钠以及0.8%羟丙基甲基纤维素。

而外结肠靶向衣层以其该层结构的总质量计包括4%的聚丙烯酸树脂Ⅱ、6%的聚丙烯酸树脂Ⅲ、3.5%的乙基纤维素、2.5%的柠檬酸三乙酯、2%的1200目的滑石粉以及82%的纯水。

内功能层以该层结构总质量计包括3%的卡波姆934P、4%的羟丙基甲基纤维素、2%的滑石粉和91%的溶剂组成，溶剂为65%的乙醇溶液。

方案五：

单颗微丸成品包括丸芯和包衣层，其中以质量计包衣层占微丸颗粒物总质量的26%，其中包衣层包括19%的外结肠靶向衣层以及7%的内功能层。

丸芯以微丸颗粒物总质量计，包括药效部分和辅料。药效部分以微丸颗粒物总质量计，包括27%的谷氨酰胺、23%的纳米氧化锌以及10%碳酸氢钠。辅料以微丸颗粒物总质量计，包括12.8%的微晶纤维素、0.4%的十二烷基硫酸钠以及0.8%羟丙基甲基纤维素。

而外结肠靶向衣层以其该层结构的总质量计包括5%的聚丙烯酸树脂Ⅱ、6%的聚丙烯酸树脂Ⅲ、2.5%的乙基纤维素、2.5%的柠檬酸三乙酯、2%的1200目的滑石粉以及82%的纯水。

内功能层以该层结构总质量计包括2%的卡波姆934P、3%的羟丙基甲基纤维素、2%的滑石粉和93%的溶剂组成，溶剂为65%的乙醇溶液。

方案六：

单颗微丸成品包括丸芯和包衣层，其中以质量计包衣层占微丸颗粒物总质量的29%，其中包衣层包括19%的外结肠靶向衣层以及10%的内功能层。

丸芯以微丸颗粒物总质量计，包括药效部分和辅料。药效部分以微丸颗粒物总质量计，包括26%的谷氨酰胺、24%的纳米氧化锌以及9%碳酸氢钠。辅料以微丸颗粒物总质量计，包括10.8%的微晶纤维素、0.4%的十二烷基硫酸钠以及0.8%羟丙基甲基纤维素。

而外结肠靶向衣层以其该层结构的总质量计包括5%的聚丙烯酸树脂Ⅱ、5%的聚丙烯酸树脂Ⅲ、2.5%的乙基纤维素、1.5%的柠檬酸三乙酯、1%的1200目的滑石粉以及85%的纯水。

内功能层以该层结构总质量计包括1%的卡波姆934P、3%的羟丙基甲基纤维素、1%的滑石粉和95%的溶剂组成，溶剂为65%的乙醇溶液。

本实施例中的若干种方案，区别与现有技术的包含三个主要特征，即丸芯的药剂选择和配比不同、包衣层材料和占比以及对应的制备工艺。

第一，针对第一个特征，即药剂的选择与现有采用氧化锌成分作为主要药剂成分的技术手段进行对比，具体实验步骤如下：

需要说明的是，仔猪断奶后在保育阶段极容易出现顽固性腹泻、且经抗生素治疗无效，临床解剖往往出现结肠炎症和结肠壁增厚等特征。本实验旨在对比研究在饲料中添加结肠靶向氧锌和结肠靶向氧化锌谷氨酰胺复合物，对改善断奶仔猪的采食量、营养物质的吸收以及减少腹泻比例等改善猪只生产性能等指标。

药剂选择：结肠靶向氧化锌、结肠靶向氧化锌谷氨酰胺复合物，其中结肠靶向氧化锌谷氨酰胺复合物采用上述实施例中任意一组方案中的药剂配方制备获得，而结肠靶向氧化锌为现有技术中的常用药剂；

实验对象：108头断奶仔猪，日龄22-30天；

实验方法为：将108头仔猪分为3个处理组，每组36头，第1组日粮中加入结肠靶向氧锌1kg/吨，第2组日粮中加入结肠靶向氧化锌谷氨酰胺复合物1kg/吨，第3组为空白对照组，连续饲喂1个月。

其中腹泻率、采食量、料肉比实验结果：

组别	腹泻率	平均日增重	平均日采食量	料肉比
					第1组	24.16%	0.30 kg	0.53 kg	1.75：1
第2组	19.24%	0.35 kg	0.56 kg	1.59：1
					第3组	41.71%	0.27 kg	0.49 kg	1.81：1

被毛情况：

第一组中，典型特征是，被毛较粗、密、长，手触摸后呈现坚硬，稍卷曲；

第二组中，典型特征是，被毛较疏、细，短，手触摸后呈现柔软；

第三组中，典型特征是，被毛较疏、细、短，手触摸后呈现柔软。

根据实验结果表明，采用氧化锌谷氨酰胺复合物为主要药剂成分的第二组仔猪中平均腹泻率最低，日增重和日采食量均最高，区别于第一组仔猪，说明采用氧化锌谷氨酰胺复合物相较于氧化锌药物能够更好的解决其结肠炎的问题。同时，通过被毛情况可知，第一组采用氧化锌为主要药剂成分的仔猪被毛变硬，说明过量的锌元素确实会导致仔猪毛发过量生长，则该药剂会导致猪结肠道内壁绒毛增生，并影响仔猪的消化吸收，从而也反应在日采食量的影响。

第二，针对在后的两个特征，主要为了让改进后的药剂能够精准的进入结肠中释放所进行的优化，并通过实验进行验证，同时提供有以现有技术作为对照组所获取到的结果，具体如下：

（1）搭建体外模拟胃肠道上部消化环境的测试环境和流程

1a．量取pH1.2的稀盐酸溶液750ml于溶出度测定仪的溶出杯中，待溶出介质温度恒定在37℃，取靶向微丸3.0g，投入溶出度测定仪中，启动搅拌浆，4小时后取出溶出杯，滤纸过滤，测定滤液中谷氨酰胺的含量，计算溶出率。

1b．然后采用高效液相色谱法测定溶液中谷氨酰胺的含量，其中色谱条件如下：

色谱柱：氨基柱，长250mm，内径4.6mm。

柱温：35℃

流动相：乙腈＋0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至4.0）＝30+70（体积比）。

流速：1.0mL/min。

检测波长：215nm。

进样量：20μL。

1c．再进行试样测定，取1a中过滤后的溶液20mL，加流动相定容至100mL，作为试样溶液，照1b的色谱条件测定，另取谷氨酰胺标准储备液，同法测定。按外标法以峰面积计算出滤液中谷氨酰胺的质量，从而计算出谷氨酰胺结肠靶向微丸在稀盐酸溶液中的释放率。

（2）搭建体外模拟结肠液消化的测试环境和流程

2a．量取pH7.8的磷酸盐缓冲溶液750ml于溶出度测定仪的溶出杯中，待溶出介质温度恒定在37℃，取微丸3.0g，投入溶出度测定仪中，启动搅拌浆，40分钟后取出溶出杯，滤纸过滤，测定滤液中谷氨酰胺的含量，计算溶出率。

2b．试样测定，取2a过滤后的溶液2mL，加流动相定容至100mL，作为试样溶液，照1.2.1色谱条件测定，另取谷氨酰胺标准储备液，同法测定。按外标法以峰面积计算出滤液中谷氨酰胺的质量，从而计算出谷氨酰胺结肠靶向微丸在结肠液中的释放率。

（3）测试对象

两个测试流程的对象一致，均包含有本实施例中方案一至方案六中的六组实验组，每个实验组中，按照其对应的每个方案的配方和制备方式制作2批次的微丸药剂进行测试，则实验组总共包含有12批次的微丸样品。

还设置有验证组，验证组包括两个组别，即采用现有的丙烯酸树脂为主的材料作为包衣层制得的第一微丸组合物；以及另一组采用上述方案中的单外结肠靶向衣层的第二微丸组合物，两个验证组的丸芯采用本实施例中方案一至方案六中任一组配方，验证组每组包含有12批次的微丸药剂进行测试。

值得说明的是，实验组中的包衣厚度均有确定具体的包衣层厚度，而验证组中需要先确定该微丸组合物的临界点，即在结肠内最佳的释放率的同时在其他胃肠道内具有最小的释放率，通过该临界点与上述实验组进行比对验证获取结果。

以确定的丸芯材料、质量和体积不变为前提条件，以10%-50%的包衣厚度设置验证组组别，分别以上述实验方法进行实验，经检测，第一组微丸组合物的最佳厚度临界点在10-15%内，第二组微丸组合物的最佳厚度临界点在10-15%内，以该厚度范围内的微丸样品结果进行比对。

（4）结果及分析

	体外模拟胃肠道上部消化环境中以谷氨酰胺测定的平均释放率	体外模拟结肠液消化环境中以谷氨酰胺测定的平均释放率
			实验组	7.2%	88.5%
第一微丸组合物（包衣层厚度10-15%）	14.2%	73.4%
			第一微丸组合物（包衣层厚度25%）	＜10%	＜70%
第一微丸组合物（包衣层厚度40%）	＜3%	＜50%
			第二微丸组合物（包衣层厚度10-15%）	17.8%	78.1%
第二微丸组合物（包衣层厚度25%）	＜10%	＜60%
			第二微丸组合物（包衣层厚度40%）	＜3%	＜50%

实验组的微丸样品在稀盐酸溶液中处理4小时，均外观完好未溶散，平均释放率为7.2%；而在人工结肠液中40分种左右绝大部分都能释放，平均释放率达到88.5%。因此制备的防治仔猪结肠炎的靶向微丸，符合结肠定位制剂的要求，即在胃肠道上部基本不释放、在结肠内大部分释放，从而达到对结肠疾病能起到靶向定位治疗的效果。

而第一微丸组合物在胃肠道上部消化环境中的平均释放率在14.2%左右，在结肠液消化环境中的平均释放率在73.4%；第二微丸组合物在胃肠道上部消化环境中的平均释放率在17.8%左右，在结肠液消化环境中的平均释放率在78.1%。

其中，两个组别测试时，将包衣层的厚度增加至25%以上，其在胃肠道上部消化环境中的平均释放率能够降低至10%以内，若厚度增加至40%以上，则在胃肠道上部消化环境中的平均释放率能够到3%以内。但两个组别在结肠液消化环境中的释放率都在50%以下，其无法达到较好的释放效果。

在试验过程中，实施例2中的六个方案由于采用了内功能层的包衣层设置，其带来的效果提升是显著的。通过实验发现，即使是采用加厚的丙烯酸树脂为主的包衣层，在进入结肠内环境中，20min内也能够产生一定的空隙露出部分药剂成分表面，但由于该空隙较小，普通的药剂成分中辅料材质较少，局部接触水分无法起到崩解的效果。而采用本实施例中的内功能层材料，其中的羟丙基甲基纤维素以及卡波姆材料具有较强的吸水特性，能够快速将外部环境中的水吸入该层结构内。由于该层材料将整个丸芯覆盖，其增强的吸水特性能够在前10min内就使丸芯表面与润湿，从而配合辅料中的羧甲基淀粉钠迅速膨胀使丸芯快速崩解，从而在20min内，本实施例中的若干种方案都能够基本崩解起效。

进一步地，本实施例中采用内功能层中的卡波姆与丸芯溶解出的碱性的碳酸氢钠可以形成凝胶，该凝胶使该丸芯崩解后的部分结构粘附与结肠内壁，从而进一步提高其在结肠内的释放率。

本发明不局限于上述可选的实施方式，任何人在本发明的启示下都可得出其他各种形式的产品。上述具体实施方式不应理解成对本发明的保护范围的限制，本发明的保护范围应当以权利要求书中界定的为准，并且说明书可以用于解释权利要求书。

Claims (10)

1.一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物，其特征在于：为独立的微丸颗粒物形态，单个微丸颗粒物包括丸芯和将丸芯包裹的包衣层；

其中丸芯以微丸颗粒物总质量计，包括45-80%的含有谷氨酰胺和氧化锌成分的药效部分，以及5-20%的辅料；

包衣层包括外结肠靶向衣层和内功能层，外结肠靶向衣层占微丸总质量的10-25%，内功能层占微丸总质量的5-15%，内功能层具有吸水成分。

2.根据权利要求1所述的一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物，其特征在于：所述外结肠靶向衣层以质量分数计包括6-15%的丙烯酸树脂、2-5%的乙基纤维素、1.5-4%的柠檬酸三乙酯、1-4%的滑石粉以及75-88%的纯水；

所述内功能层以质量分数计包括1-5%的卡波姆934P、1-4%的羟丙基甲基纤维素、0.5-3%的滑石粉和90-97%的溶剂组成。

3.根据权利要求2所述的一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物，其特征在于：所述丙烯酸树脂包括聚丙烯酸树脂Ⅱ和聚丙烯酸树脂Ⅲ；所述溶剂为65%的乙醇溶液。

4.根据权利要求3所述的一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物，其特征在于：所述外结肠靶向衣层以质量分数计包括4%的聚丙烯酸树脂Ⅱ、6%的聚丙烯酸树脂Ⅲ、3.5%的乙基纤维素、2.5%的柠檬酸三乙酯、2%的1200目滑石粉以及82%的纯水；

所述内功能层以质量分数计包括2%的卡波姆934P、2%的羟丙基甲基纤维素、1%的1200目滑石粉和95%的溶剂组成。

5.根据权利要求4所述的一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物，其特征在于：所述药效部分以微丸颗粒物总质量计，包括20-35%的谷氨酰胺、20-30%的纳米氧化锌以及5-15%碳酸氢钠。

6.根据权利要求4所述的一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物，其特征在于：包括：以质量计28%的谷氨酰胺、20%的纳米氧化锌、15%的碳酸氢钠、12.8%的微晶纤维素、0.4%的十二烷基硫酸钠、0.8%的羟丙基甲基纤维素、15%的外结肠靶向衣层以及8%的内功能层。

7.根据权利要求5或6所述的一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物，其特征在于：所述辅料以微丸颗粒物总质量计，包括4-15%的微晶纤维素、0.2-2%的十二烷基硫酸钠以及0.5-3%羟丙基甲基纤维素。

8.一种防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物的制备方法，其特征在于：用于制备权利要求7中的防治仔猪结肠炎的靶向微丸组合物，步骤如下：

S100.选取材料同时配置外结肠靶向衣层液和内功能层液，然后按照质量分数比分别称取谷氨酰胺、纳米氧化锌、碳酸氢钠、微晶纤维素、十二烷基硫酸钠混合均匀形成干混合粉；

S200.配制浓度为4%的用作粘合剂的羟丙基甲基纤维素水溶液，与步骤S100中的干混合粉混合制备软材；

S300.将软材加入挤出机，并在形成条状物料后等量剪切进入滚圆机制成球状的丸芯，并将其烘干；

S400.将干燥的丸芯加入流化床包衣机中，先缓慢定量喷入步骤S100中制得的内功能层液在丸芯表面形成内功能层，喷完后在喷入步骤S100中制得的外结肠靶向衣层液，待其干燥后获得微丸颗粒物。

9.根据权利要求8中所述的一种制备方法，其特征在于：所述步骤S100中，配置外结肠靶向衣层液的步骤为：按质量比称取丙烯酸树脂、乙基纤维素和纯化水混合后在均质机中形成水分散体，向水分散体加入滑石粉和柠檬酸三乙酯均匀混合形成外结肠靶向衣层液；

配置内功能层液的步骤为：按质量比称取经超微粉碎的卡波姆934P、羟丙基甲基纤维素、滑石粉和溶剂，混合均匀，充分搅拌使分散均匀形成内功能层液。

10.根据权利要求8中所述的一种制备方法，其特征在于：步骤S200中在制备软材时，粘合剂的用量为干混合粉质量的20-25%；

步骤S300中的挤出机孔板孔径0.8mm，转速为35r/min；

步骤S300中烘干的进风温度为60℃，风机频率40Hz，抖袋延时6s；

步骤S400中的流化床风机频率28Hz，转速600r/min，每次投料3.0kg；喷入包衣液时调节进风温度，使物料温度始终维持在38±2℃。