CN116113636A - 4-硼-l-苯基丙氨酸及其中间体的制造方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种4‑硼‑L‑苯基丙氨酸及其中间体的制造方法。本发明提供一种制造方法，是由式(I)所示的化合物来制造式(II)所示的化合物；X表示Cl、F、Br或I，R¹表示NR¹¹R¹²，R¹¹表示H或氨基的保护基，R¹²表示氨基的保护基，R²表示COOR²¹，R²¹表示H、或者直链状或分支状的C1～C10的烷基或苄基，R³表示H或COOR³¹，R³¹表示直链状或分支状的C1～C10烷基或苄基；R⁴表示硼酸(B(OH)₂)、硼酸酯或硼酸酰胺中的任一个；上述制造方法包括：第一工序，在金属卤化物的存在下，式(I)所示的化合物与直链状或分支状的C1～C10烷基镁卤化物进行反应；以及第二工序，上述第一工序中所得的化合物与硼酸酯或硼酸酰胺进行反应。

Description

4-硼-L-苯基丙氨酸及其中间体的制造方法

技术领域

本发明涉及一种4-硼-L-苯基丙氨酸及其中间体的制造方法。

背景技术

作为癌症的治疗方法，硼中子捕获疗法(BNCT)备受关注。硼中子捕获疗法是使含有硼10同位素(¹⁰B)的硼化合物被癌细胞摄取，照射低能量的中子束(例如热中子)，通过在细胞内引起的核反应而由此局部地破坏癌细胞的治疗方法。该治疗方法中，在提高治疗效果的方面而言，重要的是使含有¹⁰B的硼化合物选择性地蓄积于癌组织的细胞，故而需要开发选择性地被癌细胞摄取的硼化合物。

作为用于BNCT的药剂，合成了在基本骨架导入有硼原子或硼原子团的含硼化合物。作为实际用于临床的药剂，有4-硼-L-苯基丙氨酸(L-BPA；borono-L-phenylalanine)或巯基十一氢十二硼酸盐(BSH；mercaptoundecahydrododecaborate)。4-硼-L-苯基丙氨酸是以苯基丙氨酸的模拟物(mimic)的形式被作为氨基酸转运体的一种的LAT1摄取。在癌细胞中，LAT1的表达亢进，故而L-BPA容易蓄积，利用该性质而用于癌症的治疗(例如参照非专利文献1)。

作为4-硼-L-苯基丙氨酸的制造方法，提出了将硼甲苯用于原料的方法(参照专利文献1)。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2008-214319号公报

非专利文献

非专利文献1：Wongthai P等人，癌症科学(Cancer Sci.)，2015Mar；106(3):279-86。

发明内容

此种含有硼10同位素(¹⁰B)的4-硼-L-苯基丙氨酸的制造方法中，将硼甲苯用于原料的上述专利文献1的方法由于直至中间体或L-BPA为止的工序为多阶段，故而有时损耗昂贵的¹⁰B或产生副产物。因此，认为在制造包含硼10同位素(¹⁰B)的4-硼-L-苯基丙氨酸时，通过设法在原料或前体的制造方法下功夫，从而有提高含有¹⁰B的前体的收率并减少副产物的余地。另外，在制造仅含有硼(¹¹B)作为硼原子的4-硼-L-苯基丙氨酸时，也有减少副产物的余地。

本发明的目的在于提供一种4-硼-L-苯基丙氨酸的新的制造方法。

本发明人为了解决所述课题而反复进行潜心研究，结果发现了4-硼-L-苯基丙氨酸的新的合成法，以至完成了本发明。

即，本发明提供下述制造方法。

[1]一种制造方法，是由下述式(I)所示的化合物来制造式(II)所示的化合物的方法，包括：第一工序，在金属卤化物的存在下，式(I)所示的化合物与直链状或分支状的C1～C10烷基镁卤化物进行反应；以及第二工序，所述第一工序中所得的化合物与硼酸酯或硼酸酰胺进行反应，

其中，式(I)和式(II)中，X表示Cl、F、Br或I，R¹表示NR¹¹R¹²，R¹¹表示H或氨基的保护基，R¹²表示氨基的保护基，R²表示COOR²¹，R²¹表示H、或者直链状或分支状的C1～C10的烷基或苄基，R³表示H或COOR³¹，R³¹表示直链状或分支状的C1～C10烷基或苄基，R⁴表示硼酸(B(OH)₂)、硼酸酯或硼酸酰胺中的任一个。

[2]如[1]所述的制造方法，其中，所述金属卤化物为氯化锂，所述烷基镁卤化物为异丙基镁氯化物或仲丁基镁氯化物。

[3]如[1]或[2]所述的制造方法，其中，所述X表示Br或I，所述R³为COOR³¹，R³¹表示直链状或分支状的C1～C10的烷基。

[4]如[1]～[3]中任一项所述的制造方法，其中，所述X表示Br或I，所述R²表示COOH，所述R³表示H。

[5]如[1]～[4]中任一项所述的制造方法，其中，所述第一反应工序和第二反应工序均包括下述工序：使用选自醚系溶剂和烃系溶剂中的至少一种作为溶剂。

[6]如[1]～[5]中任一项所述的制造方法，其中，所述第一反应工序和第二反应工序均是在-78℃～0℃的范围的反应温度下进行。

[7]如[1]～[6]中任一项所述的制造方法，其中，在式(I)所示的化合物中混合金属卤化物-烷基镁卤化物的混合物和B(OR)₃所示的硼酸酯(R为直链状或分支状的C1～C10烷基、苯基或苄基)，由此进行所述第一工序和第二工序的反应。

[8]如[7]所述的制造方法，其中，金属卤化物和烷基镁卤化物的混合物与硼酸酯的量比以当量比计为1:0.5～2。

[9]一种4-硼-L-苯基丙氨酸的制造方法，包括下述工序：将由[1]～[8]中任一项的工序所得的所述式(II)的化合物进一步去保护。

本发明的新制造方法尤其能够在4-硼-L-苯基丙氨酸的制造中减少副产物而提高收率。

具体实施方式

本说明书中，在表示具有不对称碳的化合物的情形时，只要无特别表示，则视为该化合物可为外消旋体、L体、D体中的任一个。

本说明书中，在4-硼-L-苯基丙氨酸或其中间体(前体)具有B原子的情形时，只要无特别表示，则视为B原子可为包含¹⁰B的情形与仅由¹¹B构成的情形中的任一个。

制造4-硼-L-苯基丙氨酸的代表性的现有方法中，是将硼甲苯用于原料，B加成处于制造过程的开始阶段，故而尤其在不仅使用¹¹B原子而且还使用¹⁰B原子的情形时，在后续的制造过程中损耗昂贵的¹⁰B，导致制造成本上升。进而，在合成前体时，包含使用光作为活性源的光溴化反应。存在下述问题：该溴化反应的原料不溶解于溶剂，生成目标化合物以外的副产物，总体的收率下降。

[中间体(前体)的制造方法]

在本发明中，新的4-硼-L-苯基丙氨酸的制造方法包括下述工序：由下述式(I)所示的化合物来制造式(II)所示的成为4-硼-L-苯基丙氨酸的中间体的化合物。在本说明书中，有时将下述通式(II)所示的化合物特别表示为中间体或前体。

其中，式(I)和式(II)中，X表示Cl、F、Br或I；R¹表示NR¹¹R¹²，R¹¹表示H、氨基的保护基，R¹²表示氨基的保护基；R²表示COOR²¹，R²¹表示H、或者直链状或分支状的C1～C10的烷基或苄基；R³表示H或COOR³¹，R³¹表示直链状或分支状的C1～C10烷基或苄基；R⁴表示硼酸(B(OH)₂)、硼酸酯或硼酸酰胺中的任一个；在金属卤化物的存在下，式(I)所示的化合物与直链状或分支状的C1～C10烷基镁卤化物进行反应的第一工序；以及所述第一工序中所得的化合物与硼酸酯或硼酸酰胺进行反应的第二工序。

在本发明的制造方法中，氨基的保护基是指可以保护氨基酸的任意的基团，并无限定，优选为酰基系保护基、烷基保护基或氨基甲酸酯系保护基等。此处，作为酰基系保护基，可列举乙酰基、三甲基乙酰基、苯甲酰基等，作为烷基保护基，可列举苄基等，作为氨基甲酸酯系保护基，可列举叔丁氧基羰基、苄氧基羰基、9-芴基甲氧基羰基等。在本发明中，更优选使用酰基系保护基或氨基甲酸酯系保护基。

在本发明的制造方法中，在提及硼酸酯或硼酸酰胺时，并无限定，优选是指B(OR)₃、B(NR)₃、B(OR)₂(NR)、B(OR)(NR)₂(R为直链状或分支状的C1～C10烷基、苯基或苄基)所示的化合物。进而，其中特别优选为使用B(OR)₃所示的化合物。此处，在提及“直链状或分支状的C1～C10的烷基”时，可为碳原子数1～10的任意的烷基，优选为直链状或分支状的C1～C8的烷基，更优选为直链状或分支状的C1～C6的烷基。作为这些基团，并无限定，例如可列举甲基、乙基、异丙基或丁基等。

上述式(I)所示的化合物例如可将市售的乙酰胺丙二酸二乙酯等乙酰胺丙二酸二酯作为起始物质而合成。例如，将乙醇等醇或醚系溶剂、DMF这样的非质子性极性溶剂用于溶剂，滴加以锂或钠等所例示的金属烷氧化物，制备乙酰胺丙二酸二酯的烯醇盐。继而，滴加对应的卤化苄基溴、例如4-碘苄基溴、4-溴苄基溴、4-氯苄基溴等进行烷基化反应。针对产物，例如也可通过将反应液的pH调整至中性附近，在固体析出的情形时加以过滤并进行减压下干燥来获得。或者，也可萃取粗产物后利用柱层析等进行纯化来获取。

作为上述式(I)所示的化合物的更具体且优选的制造方法的一例，可列举以下的方法。将乙酰胺丙二酸二乙酯作为起始物质进行合成。例如，添加乙醇等醇，在该溶液中于室温下滴加乙醇钠。滴加结束后，进行30分钟～1小时的回流下搅拌，在冰浴下冷却，添加4-碘苄基溴、4-溴苄基溴或4-氯苄基溴等卤化苄基溴，进而进行1小时～10小时的回流下反应。在冰浴下冷却，将pH调整至6～7，将析出的固体加以过滤、清洗，进行减压下干燥，由此可获得上述式(I)所示的化合物。

如上所述，R²表示COOR²¹，R³表示H或COOR³¹，R²¹表示H或者直链状或分支状的C1～C10的烷基或苄基，R³¹表示直链状或分支状的C1～C10的烷基或苄基。在提及此时的R²¹或R³¹的“直链状或分支状的C1～C10的烷基”时，可为碳原子数1～10的任意的烷基。优选为直链状或分支状的C1～C8的烷基，更优选为直链状或分支状的C1～C6的烷基。作为这些基团，并无限定，例如可列举甲基、乙基、异丙基或丁基等。

在本发明的制造方法中，R⁴表示硼酸(B(OH)₂)、硼酸酯或硼酸酰胺的基团中的任一个，作为该定义中的硼酸酯或硼酸酰胺的基团的例子，表示于R⁴的位置具有B(NR⁴¹)₂或B(OR⁴¹)₂这样的链状结构的基、或者与原子B一起具有环状结构的基团。此处，R⁴¹表示直链状或分支状的C1～C10的烷基。此处，在提及“直链状或分支状的C1～C10的烷基”时，与上述同样地，可为碳原子数1～10的任意的烷基。优选为直链状或分支状的C1～C8的烷基，更优选为直链状或分支状的C1～C6的烷基。作为这些基团，并无限定，例如可列举甲基、乙基、异丙基、丁基等。进而，此处提及的环状结构中，未必是仅插入有O原子的环状结构，也可为插入有N原子的环状结构。并无限定，例如为由选自频哪醇、2,2-二甲基-1,3-丙二醇、N-甲基二乙醇胺、1,8-二氨基萘、N-甲基亚氨基二乙酸、1,1,1-三羟甲基乙烷及邻苯二酚中的任一个与原子B所构成的酯或酯类似物。关于这些酯或酯类似物并无限定，例如包含硼酸频哪醇酯、硼酸MIDA酯、硼酸1,3-丙二醇酯、硼酸新戊二醇酯、硼酸邻苯二酚酯、硼酸蒎烷二醇酯、硼酸双环己基二醇酯、硼酸MPM酯、三氟硼酸盐、环状三醇硼酸盐、二氨基萘酰胺与硼的环状物等。

其中，R⁴特别优选为硼酸(B(OH)₂)、或者链状或环状结构的硼酸酯，最优选为硼酸。

在本发明的制造方法中，构成所述金属卤化物的金属优选为锂、钠、钾、铷、铯等碱金属。作为金属卤化物，可例示氯化锂、溴化锂及碘化锂等卤化锂，氯化钠、溴化钠及碘化钠等卤化钠等。其中，特别优选使用氯化锂。

在本发明的制造方法中，作为所述烷基镁卤化物，只要含有直链状或分支状的C1～C10烷基，则并无特别限定。此处，在提及“直链状或分支状的C1～C10的烷基”时，可为碳原子数1～10的任意的烷基，优选为直链状或分支状的C1～C8的烷基，更优选为直链状或分支状的C1～C6的烷基。作为这些基团，并无限定，例如可列举甲基、乙基、异丙基或丁基等。作为烷基镁卤化物，可优选地使用甲基镁氯化物、乙基镁氯化物、丁基镁氯化物(例如仲丁基镁氯化物)、己基镁氯化物、异丙基镁氯化物、甲基镁溴化物、乙基镁溴化物、丁基镁溴化物(仲丁基镁溴化物等)、或己基镁溴化物、异丙基镁溴化物等。

所述化合物中并无限定，优选为X由Br或I所示的化合物。

优选所述R²为COOH，所述R³为H。进而，也优选所述R²为COOR²¹(其中，此处R²¹为直链状或分支状的C1～C10的烷基)，所述R³为H。

优选所述第一反应工序和第二反应工序均包含下述工序：使用选自醚系溶剂和烃系溶剂中的至少一种作为溶剂。更优选为使用选自醚系溶剂和烃系溶剂中的至少一种作为溶剂的工序。第一工序与第二工序中，也可使用不同溶剂。此处，作为醚系溶剂并无限定，可例示二乙基醚、二异丙基醚、四氢呋喃(THF)、2-甲基四氢呋喃、二

烷、环戊基甲基醚、乙二醇二甲醚、二乙二醇二甲醚等。作为烃系溶剂并无限定，可例示甲苯、二甲苯、苯等芳香族烃系溶剂。在本发明中，特别优选使用四氢呋喃或甲苯，也可将这些溶剂组合使用。

所述第一反应工序和第二反应工序均是在-78℃～0℃的范围的反应温度下进行。反应温度优选为-60℃～0℃的范围，更优选为-50℃～-10℃的范围。

所述第一反应工序和第二反应工序的反应时间分别为10分钟～72小时，更优选为20分钟～60小时，进一步优选为30分钟～48小时。另外，也可于第一反应工序与第二反应工序之间设置间隔。

可通过对式(I)所示的化合物混合金属卤化物-烷基镁卤化物及硼酸酯，从而进行所述第一工序及第二工序的反应。

金属卤化物和烷基镁卤化物的混合物与B(OR)₃的量比可设为以当量比计而优选为1:0.5～2，更优选为1:0.7～1.5，进一步优选为1:0.8～1.3。

如上所述的工序中所得的所述式(II)的粗产物直接供给至后续的去保护的工序，或者供给至任意进行的萃取、清洗、纯化工序后再供给至后续的去保护的工序。

萃取、清洗、纯化工序典型而言包含如下工序。

即，可将包含所述式(II)的粗产物的反应产物设为-78℃以上的温度、优选为室温(20℃)左右，并任意进行pH调节。作为pH调节剂可使用无机酸或有机酸，作为无机酸可使用盐酸、硫酸、氢溴酸、氢碘酸等，有机酸中可例示柠檬酸、乙酸、三氟乙酸等。pH以调整至优选为1～5、更优选为1～3为宜。可在反应混合物混合有机溶剂，将有机相回收并清洗。此处所用的有机溶剂例如为乙酸乙酯等酯系、甲基叔丁基醚等醚系、酮类、卤素系溶剂等。清洗可利用饱和食盐水等进行。

可将其干燥，加以过滤而去除杂质，并将滤液加以减压浓缩。或者，可在反应混合物添加醇类、醚系、酮类、非质子性极性溶剂、水、卤素系溶剂等而使固体析出，进行过滤而获取目标物。

或者，也可在有机相添加水，调整为碱性而将目标物转移至水相，以有机溶剂将水相加以清洗。此处例示的有机溶剂例如为乙酸乙酯等酯系、甲基叔丁基醚等醚系、1-丁醇或异丁醇等醇系、酮类、卤素系溶剂等。继而，也可将水相调整为酸性而使固体析出，获取目标物。

也可将如此得到的粗产物加以清洗。此处所用的用于清洗的溶剂并无限定，可例示醚系、醇类、卤素系、酮类、非质子性极性溶剂或水等。

也可使如此得到的固体干燥，以高纯度获得式(II)所示的化合物。也可使所得的固体进行重结晶而进一步提高纯度。

可进一步将所得的式(II)所示的化合物加以去保护，制造4-硼-L-苯基丙氨酸。去保护依据常规方法，例如可通过水解或催化氢化、去碳酸而进行。

纯化依据常规方法，另外可适当改变。

尤其在化合物为外消旋体的情形时，可直接使用，例如也可为了获得用于硼中子捕获疗法的优选化合物而提高L体的光学纯度。

4-硼-L-苯基丙氨酸衍生物的光学分离可适当使用公知的方法，例如除了由式(II)所示的化合物经由水解工序、酯化工序而进行光学分离(使用α胰凝乳蛋白酶等)的方法以外，也可采用包含下述简略工序的经简化的方法：由式(II)所示的化合物经由水解工序，使用酰基转移酶。或者，式(II)所示的化合物中，若是R³为H的化合物，则可省略使用酰基转移酶等的工序。

关于上述酰基转移酶，可利用市售的酰基转移酶。

另外，使用上述酰基转移酶的光学分离处理可于反应温度为30℃～60℃的范围、pH为7.0～9.0的范围以反应时间24小时～60小时进行。就反应收率和抑制杂质的方面而言，优选在反应温度50℃、pH8.0以反应时间48小时进行。

本发明的新的化合物制造方法并无限定，如上文所述，特别优选为纳入至4-硼-L-苯基丙氨酸的制造方法的工序而提供，尤其是纳入至含有¹⁰B的4-硼-L-苯基丙氨酸的制造方法的工序而提供。

通过使用本发明的方法，能以收率良好且纯度高的良好状态获得此种化合物。尤其在化合物含有¹⁰B的情形时，可减少昂贵的¹⁰B的损耗，可方便地使用本发明的方法。

本发明涉及下述制造方法及其具体方式。

[1]一种制造方法，是由下述式(I)所示的化合物来制造式(II)所示的化合物的方法，包括：第一工序，在金属卤化物的存在下，式(I)所示的化合物与直链状或分支状的C1～C10烷基镁卤化物进行反应；以及第二工序，所述第一工序中所得的化合物与硼酸酯或硼酸酰胺进行反应，

其中，式(I)和式(II)中，X表示Cl、F、Br或I，R¹表示NR¹¹R¹²，R¹¹表示H或氨基的保护基，R¹²表示氨基的保护基，R²表示COOR²¹，R²¹表示H、或者直链状或分支状的C1～C10的烷基或苄基，R³表示H或COOR³¹，R³¹表示直链状或分支状的C1～C10烷基或苄基，R⁴表示硼酸(B(OH)₂)、硼酸酯或硼酸酰胺中的任一个。

[2]如[1]所述的制造方法，其中，所述金属卤化物为氯化锂，所述烷基镁卤化物为异丙基镁氯化物或仲丁基镁氯化物。

[3]如[1]或[2]所述的制造方法，其中，所述X表示Br或I，所述R³为COOR³¹，R³¹表示直链状或分支状的C1～C10的烷基。

[4]如[1]或[2]所述的制造方法，其中，所述X表示Br或I，所述R³表示H。

[5]如[1]～[4]中任一项所述的制造方法，其中，所述X表示Br或I，R²表示COOR²¹，R²¹表示H、或者甲基、乙基、异丙基或丁基。

[6]如[1]～[5]中任一项所述的制造方法，其中，所述R⁴为硼酸(B(OH)₂)。

[7]如[1]～[6]中任一项所述的制造方法，其中，所述R¹表示NR¹¹R¹²，R¹¹表示H、丁氧基羰基或苄基，R¹²表示丁氧基羰基或苄基。

[8]如[1]～[7]中任一项所述的制造方法，其中，所述X表示Br或I，所述R²表示COOH，所述R³表示H。

[9]如[1]～[8]中任一项所述的制造方法，其中，所述第一反应工序和第二反应工序均包含下述工序：使用选自醚系溶剂及烃系溶剂中的至少一种作为溶剂。

[10]如[9]所述的制造方法，其中，所述溶剂为四氢呋喃或甲苯、或者这些溶剂的组合。

[11]如[1]～[10]中任一项所述的制造方法，其中，所述第一反应工序及第二反应工序均在-78℃～0℃的范围的反应温度下进行。

[12]如[1]～[11]中任一项所述的制造方法，其中，对式(I)所示的化合物混合金属卤化物-烷基镁卤化物的混合物及B(OR)₃所示的硼酸酯(R为直链状或分支状的C1～C10烷基、苯基或者苄基)，由此进行所述第一工序及第二工序的反应。

[13]如[1]～[12]中任一项所述的制造方法，其中，所述B(OR)₃所示的硼酸酯为硼酸三乙酯或硼酸三丁酯。

[14]如[12]或[13]所述的制造方法，其中，金属卤化物和烷基镁卤化物的混合物与硼酸酯的量比以当量比计为1:0.5～2。

[15]如[1]～[14]中任一项所述的制造方法，其中，所述式(II)所示的化合物中的B原子包含¹⁰B。

[16]如[12]～[14]中任一项所述的制造方法，其中，所述B(OR)₃所示的硼酸酯包含¹⁰B。

[17]一种4-硼-L-苯基丙氨酸的制造方法，包含下述工序：将由[1]～[16]中任一项的工序所得的所述式(II)的化合物进一步去保护。

实施例

通过以下的实施例对本发明进一步加以详述，但本发明不限定于此。

应予说明，下述实施例中，化合物的分析及分离纯化使用以下的机种或试剂进行。

·NMR谱：(JEOL RESONANCE/JNM-ECZ500R/500MHz(参考制造例2)(实施例2、4、7)(比较例2))(日本电子公司制造/JNM-AL Series AL400/400MHz(比较例1、实施例1))

作为现有技术的将硼甲苯用于原料的方法，示出比较例，示出直至制造作为最终目标物的L-BPA的参考制造例1。

(比较例1)

(4-溴甲基苯基硼酸频哪醇酯的合成)

将使频哪醇14.2g(120mmol)和4-甲基苯基硼酸16.3g(120mmol)溶解于乙酸乙酯240mL而得的溶液于90℃加热回流2小时。将该溶液冷却至25℃，添加正己烷240mL进行稀释。进而添加将溴酸钠40.6g(269mmol)溶解于水138ml而得的溶液，于该溶液中以内温保持于35℃以下的方式耗费12分钟滴加亚硫酸氢钠28.8g(276mmol)的水溶液278mL后，于室温搅拌4小时。在反应液添加乙酸乙酯20mL进行分液，以5％Na₂S₂O₃水溶液将有机相清洗，以无水硫酸镁加以干燥后，在减压下将溶剂馏去。获得粗产物的白色粉末32.8g。使所得的白色粉末悬浮于己烷5mL进行清洗，继而过滤分离并进行减压干燥，获得4-溴甲基苯基硼酸频哪醇酯的白色粉末18.5g。收率为52％。

针对所得的白色粉末，以¹H-NMR(400MHz)进行鉴定，确认该白色粉末为4-溴甲基苯基硼酸频哪醇酯。在¹H-NMR谱的测定中，使用氘代氯仿作为溶剂，使用四甲基硅烷作为内部标准物质。将所得的数据显示于以下。

·¹H-NMR(CDCl₃)δ(ppm):1.34(s,12H),4.49(s,2H),2.96(m,2H),7.39(d,2H,J＝8.05Hz),7.79(d,2H,J＝8.05Hz)。

(2-乙酰胺-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)丙二酸二乙酯的合成)

在以乙醇19.5mL将20％乙醇钠5.10g(15.0mmol)稀释而得的溶液中，添加乙酰胺丙二酸二乙酯3.04g(14.0mmol)，于25℃搅拌30分钟。继而添加4-溴甲基苯基硼酸频哪醇酯2.97g(10.0mmol)，于100℃进行12小时加热回流。将该溶液冷却至25℃，添加3N盐酸3.3mL。于减压下将乙醇馏去后，以乙酸乙酯95mL稀释，以饱和食盐水清洗。以无水硫酸镁加以干燥后，于减压下将溶剂馏去，获得粗产物的橙色油4.60g。将该粗产物供于硅胶柱层析(洗脱溶剂；正己烷:乙酸乙酯＝4:1)，获得2-乙酰胺-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)丙二酸二乙酯的橙色无定形物质3.45g。收率为80％。

针对所得的橙色无定形物质，以¹H-NMR(400MHz)进行鉴定，确认该橙色无定形物质为2-乙酰胺-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)丙二酸二乙酯。在¹H-NMR谱的测定中，使用氘代氯仿作为溶剂，使用四甲基硅烷作为内部标准物质。将所得的数据显示于以下。

·¹H-NMR(CDCl₃)δ(ppm):1.30(t,6H,J＝7.08Hz),1.33(s,12H),2.02(s,3H),3.66(s,2H),4.27(q,4H,J＝7.08Hz),6.50(s,1H),7.01(d,2H,J＝7.81Hz),7.70(d,2H,J＝7.81Hz)。

(参考制造例1)

(4-(2-乙酰胺-3-乙氧基-2-(乙氧基羰基)-3-氧代丙基)苯基硼酸的合成)

在将所得的2-乙酰胺-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)苄基)丙二酸二乙酯0.5g(1.15mmol)溶解于丙酮40mL而得的溶液中，添加过碘酸钠0.74g(3.45mmol)、乙酸铵0.27g(3.45mmol)及水20mL，于25℃搅拌48小时。将析出物过滤分离，于减压下将丙酮馏去后，以乙酸乙酯50mL稀释，以水、饱和食盐水清洗。于减压下将溶剂馏去，获得4-(2-乙酰胺-3-乙氧基-2-(乙氧基羰基)-3-氧代丙基)苯基硼酸的白色粉末0.40g。收率为99％。

针对所得的白色粉末，以¹H-NMR(400MHz)进行鉴定，确认该白色粉末为4-(2-乙酰胺-3-乙氧基-2-(乙氧基羰基)-3-氧代丙基)苯基硼酸。于¹H-NMR谱的测定中，使用氘代氯仿+氘代甲醇作为溶剂，使用四甲基硅烷作为内部标准物质。将所得的数据显示于以下。

·¹H-NMR(CDCl₃+CD₃OD)δ(ppm):1.30(t,6H,J＝7.08Hz),1.92(s,2H),2.02(s,3H),3.64(s,2H),4.21-4.30(m,4H),6.63(s,1H),7.00(d,2H,J＝7.56Hz),7.63(d,2H,J＝7.56Hz)。

(2-乙酰胺-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸的合成)

将4-(2-乙酰胺-3-乙氧基-2-(乙氧基羰基)-3-氧代丙基)苯基硼酸21.6g(61.7mmol)、5％氢氧化钠水溶液179mL于85.0℃～91.0℃搅拌4小时。冷却到43℃～53℃，添加3N盐酸90mL，进而于85.0℃～90.0℃搅拌1小时。冷却至45℃，将反应液减压浓缩。于残留物中添加水32mL并于20℃搅拌30分钟，将所析出的结晶加以过滤，以水20mL清洗。将结晶于45℃减压干燥，获得2-乙酰胺-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸的白色粉末11.5g。收率为74.6％。

针对所得的白色粉末，以¹H-NMR(400MHz)进行鉴定，确认该白色粉末为2-乙酰胺-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸。于¹H-NMR谱的测定中，使用氘代甲醇作为溶剂，使用甲醇作为内部标准物质。将所得的数据显示于以下。

·¹H-NMR(CD₃OD)δ(ppm):1.87(s,3H),2.92(dd,2H,J＝13.7,8.30Hz),3.20(dd,2H,J＝13.7,4.64Hz),4.53(dd,1H,J＝8.30,4.64Hz),7.20(d,2H,J＝7.56Hz),7.59(br.s,2H)。

((2S)-2-氨基-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸的合成)

将氢氧化钠1.84g(46.0mmol)溶解于水58mL，于50℃添加2-乙酰胺-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸11.5g(46.0mmol)进行搅拌。于该溶液中添加浓盐酸而调整为pH8.0，继而添加酰基转移酶(天野酶制剂(Amano-Enzyme)公司制造，酰基转移酶“Amano”)0.575g进行搅拌。一边添加浓盐酸调整反应液的pH8.0，一边于50℃搅拌48小时。将反应液冷却至25℃，添加浓盐酸而调整为pH6.4。于5℃静置1小时后，添加水23mL进行稀释，将析出的结晶加以过滤，以水23mL、乙醇12mL清洗。将结晶减压干燥，获得(2S)-2-氨基-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸的白色粉末4.54g。收率为47.5％。

针对所得的白色粉末，以¹H-NMR(400MHz)进行鉴定，确认该白色粉末为(2S)-2-氨基-3-(4-(二羟基氧硼基-¹⁰B)苯基)丙酸。于¹H-NMR谱的测定中，使用重水+氘代盐酸作为溶剂，使用3-三甲基甲硅烷基丙酸钠-d4(TSP)作为内部标准物质。将所得的数据显示于以下。

·1H-NMR(D₂O+DCl)δ(ppm):3.27(dd,1H,J＝14.8,7.6Hz),3.40(dd,1H,J＝14.8,6.0Hz),4.42(dd,1H,J＝7.6,6.0Hz),7.38(d,2H,J＝8.0Hz),7.77(d,2H,J＝8.0Hz)。

进而，所得的(2S)-2-氨基-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸的光学纯度通过HPLC分析进行确认。HPLC的测定是HPLC柱使用大赛璐(Daicel)化学工业公司制造的CROWN PAKCR(+)(流动相：60％HClO₄/H₂O＝12/3000，检测器波长：223nm，柱温度：25℃)进行分析。将装置调节为在(2S)-2-氨基-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸为9.7分钟附近的保留时间时、(2R)-2-氨基-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸为6.7分钟附近的保留时间，进行所得的(2S)-2-氨基-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸的分析，结果于6.7分钟附近未观测到波峰，确认到光学纯度为99.9％e.e.以上。

该方法中，虽获得了光学纯度为99.9％e.e.以上的产物，但显示由比较例1的方法所得的化合物的制造中，B原子的损耗非常大。

继而，作为本发明的一实施方式，示出参考制造例及实施例。

(参考制造例2)

2-乙酰胺-2-(4-碘苄基)丙二酸二乙酯的制造

在乙酰胺丙二酸二乙酯(10.0g，46.0mmol)中添加乙醇(75mL)而制成溶液(0.6M)。在该溶液中于室温下耗费20分钟滴加乙醇钠(20％乙醇溶液，18.8g，55.2mmol)。滴加结束后，于回流下搅拌45分钟后，于冰浴下冷却，添加4-碘苄基溴(15.0g，50.5mmol)，进而于回流下反应4小时。于冰浴下冷却，滴加2N盐酸将pH调整为6～7，将所析出的固体加以过滤。依序以水、己烷将所得的固体清洗，进行减压下干燥，由此以黄色固体的形式获得2-乙酰胺-2-(4-碘苄基)丙二酸二乙酯(15.1g，34.9mmol，75％)。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ7.59(d,J＝5.0Hz,2H,ArH),6.75(d,J＝5.0Hz,2H,ArH),4.27(q,J＝5.0Hz,4H,CH₂),3.59(s,2H,CH₂),2.03(s,3H,CH₃),1.30(t,J＝5.0Hz,6H,CH₃)。

(实施例1)

(4-(2-乙酰胺-3-乙氧基-2-(乙氧基羰基)-3-氧代丙基)苯基)硼酸的制造

在氮气氛围下，在参考制造例2中所得的2-乙酰胺-2-(4-碘苄基)丙二酸二乙酯(433mg，1.00mmol)中添加无水四氢呋喃(2.0mL)制成溶液(0.5M)。在该溶液中于-20℃下滴加氯化异丙基镁-氯化锂配合物(1.29M四氢呋喃溶液，2.2eq.，1.7mL，2.2mmol)。于相同温度下搅拌30分钟后，于-20℃下滴加硼酸三乙酯(1.3eq.，0.22mL，1.3mmol)。于相同温度下搅拌21.5小时后，于室温下添加1M盐酸而调整至pH3左右。在反应混合物中添加乙酸乙酯(50mL×2)进行萃取后，以饱和食盐水(30mL)将有机相清洗。在该有机相中添加无水硫酸钠，加以干燥并进行过滤，将滤液减压浓缩。将二异丙基醚(约50mL)用于清洗溶剂而将所得的粗产物进行薄膜过滤，进而以二异丙基醚(约50mL)将过滤物清洗。使所得的固体减压干燥，以白色固体的形式获得(4-(2-乙酰胺-3-乙氧基-2-(乙氧基羰基)-3-氧代丙基)苯基)硼酸(256mg，0.729mmol，73％)。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):7.96(s,2H,OH),7.68(d,J＝8.0Hz,2H,ArH),6.94(d,J＝8.0Hz,2H,ArH),4.15(q,J＝8.0Hz,4H,CH₂),3.43(s,1H,NH),1.94(s,3H,CH₃),1.17(t,J＝8.0Hz,6H,CH₃)。

在实施例的方法中，使用硼酸酯后的收率为70％左右，即便使硼酸酯以等当量以上与2-乙酰胺-2-(4-碘苄基)丙二酸二乙酯反应(1.3当量)，所使用的B原子的损耗也得到抑制，可确认为优异的方法。通过进一步调整硼酸酯的量，也能够进一步抑制¹⁰B原子的损耗。

关于实施例1中所得的4-(2-乙酰胺-3-乙氧基-2-(乙氧基羰基)-3-氧代丙基)苯基硼酸，可依据常规方法而最终获得(2S)-2-氨基-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸。具体而言，也可采用与参考制造例1同样的方法。

(实施例2)

(S)-(4-(3-叔丁氧基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氧代丙基)苯基)硼酸的制造

在氮气氛围下，在(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-碘苯基)丙酸叔丁酯(6.71g，15.0mmol)中添加无水甲苯/无水四氢呋喃混合溶液(1/1，75mL)。在该溶液中于-20℃下耗费30分钟滴加氯化异丙基镁-氯化锂配合物(1.3M四氢呋喃溶液，24mL，32mmol)。于相同温度下搅拌5小时后，耗费10分钟滴加硼酸三丁酯(3.80g，16.5mmol)。搅拌17小时后，以不超过10℃的方式添加3％盐酸来停止反应，调整为pH1左右。将反应混合物减压浓缩而将四氢呋喃馏去后，添加乙酸乙酯(50mL×2)进行萃取，以饱和食盐水(30mL)将有机相清洗。于该有机相中添加无水硫酸钠，加以干燥并进行过滤，将滤液减压浓缩。所得的粗产物(6.74g)是以淡黄色油状物的形式获得，直接用于后续工序。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆):δ7.95(s,2H,OH),7.69(d,J＝10.0Hz,2H,ArH),7.18(d,J＝10.0Hz,2H,ArH),7.14(d,J＝5.0Hz,1H,NH),4.02(m,1H,CH),2.93(dd,J＝5.0,15.0Hz,1H,CH₂),2.84(dd,J＝10.0,15.0Hz,1H,CH₂),1.34(s,18H,CH₃)。

(实施例3)

(2S)-2-氨基-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸的制造

在实施例2中所得的(S)-(4-(3-叔丁氧基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氧代丙基)苯基)硼酸(6.74g)中添加异丙醇水(1/4，30mL)。在该溶液中添加浓盐酸(15.6g，150mmol)。于55℃下搅拌4小时后，冷却至室温，添加水(50mL)，以乙酸乙酯(50mL)清洗。在所得的水相中滴加氢氧化钠水溶液将pH调整为6.2，使固体析出。进行过滤，依序以水(50mL)、丙酮(50mL)清洗后，进行减压下干燥，以白色固体的形式获得(2S)-2-氨基-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸(2.35g，11.2mmol，75％(二阶段)，98％ee)。

¹H NMR(D₂O+DCl):7.77(d,J＝8.0Hz,2H,ArH),7.38(d,J＝8.0Hz,2H,ArH),4.42(dd,J＝6.0,7.6Hz,1H,CH),3.40(dd,J＝6.0,14.8Hz,1H,CH₂),3.27(dd,J＝7.6,14.8Hz,1H,CH₂)。

通过使用如实施例2这样得到的化合物，能够不经由光学分离的工序而以高收率获得(2S)-2-氨基-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸。即，能够不使用酰基转移酶这样的酶而获得最终的光学活性物质。另外，硼酸三丁酯仅使用1.1当量，也能够进一步抑制¹⁰B原子的损耗。

(实施例4)

(S)-(4-(2-(双(叔丁氧基羰基)氨基)-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基)苯基)硼酸的制造

在氮气氛围下，在(S)-2-(双(叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-碘苯基)丙酸叔丁酯(566mg，1.03mmol)中添加无水四氢呋喃(2.1mL)。在该溶液中于-20℃下耗费5分钟滴加氯化异丙基镁-氯化锂配合物(1.29M四氢呋喃溶液，1.0mL，1.2mmol)。于相同温度下搅拌30分钟后，滴加硼酸三丁酯(195mg，1.34mmol)。搅拌16小时后，以不超过10℃的方式添加3％盐酸来停止反应，调整为pH5左右。在反应混合物中添加乙酸乙酯(50mL×2)进行萃取，以饱和食盐水(30mL)将有机相清洗。在该有机相中添加无水硫酸钠，加以干燥并进行过滤，将滤液减压浓缩。通过硅胶柱层析(己烷/乙酸乙酯＝1/1至1/2)将所得的粗产物纯化，以无色油状物的形式获得(S)-(4-(2-(双(叔丁氧基羰基)氨基)-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基)苯基)硼酸(397mg，0.852mmol，83％)。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ7.58(dd,J＝5.0,10.0Hz,2H,ArH),6.93(dd,J＝5.0,10.0Hz,2H,ArH),5.00(dd,J＝5.0,10.0Hz,1H,CH),3.33(dd,J＝5.0,15.0Hz,1H,CH₂),3.15(dd,J＝10.0,15.0Hz,1H,CH₂),1.47(s,9H,CH₃),1.42(s,18H,CH₃)。

(实施例5)

(2S)-2-氨基-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸的制造

在(S)-(4-(2-(双(叔丁氧基羰基)氨基)-3-(叔丁氧基)-3-氧代丙基)苯基)硼酸(590mg，1.27mmol)中于室温下添加三氟乙酸(4.34g，38.1mmol)。搅拌22小时后，减压浓缩而将三氟乙酸馏去。进行3次添加甲苯(50mL)进而减压浓缩的操作，将大部分的三氟乙酸馏去。将二氯甲烷(50mL)用于清洗溶剂而将所得的固体过滤，于50℃下减压干燥，以白色固体的形式获得(2S)-2-氨基-3-[4-(二羟基氧硼基)苯基]丙酸的三氟乙酸盐(359mg，1.11mmol，88％)。

¹H NMR(500MHz,D₂O):δ7.77(d,J＝10.0Hz,2H,ArH),7.37(d,J＝10.0Hz,2H,ArH),4.34(dd,J＝5.0,10.0Hz,1H,CH),3.38(dd,J＝5.0,15.0Hz,1H,CH₂),3.25(dd,J＝10.0,15.0Hz,1H,CH₂)。

(比较例2)

(S)-(4-(3-(苄氧基)-2-(二苄基氨基)-3-氧代丙基)苯基)硼酸的制造

在氮气氛围下，在双(2-二甲基氨基乙基)醚(394mg，2.46mmol)中添加四氢呋喃(1.1mL)，继而于冰浴下添加氯化异丙基镁(0.9M四氢呋喃溶液，2.7mL，2.5mmol)。一边调整为0℃～5℃，一边添加(S)-2-(二苄基氨基)-3-(4-碘苯基)丙酸苄酯(1.15g，2.05mmol)的四氢呋喃溶液(3.0mL)。搅拌1小时后，冷却至-20℃，添加硼酸三乙酯(449mg，3.08mmol)。升温至室温并搅拌24小时后，添加3％盐酸来停止反应，添加4％氢氧化钠水溶液调整为pH7。添加乙酸乙酯(30mL)进行2次萃取后，以饱和食盐水(30mL)将有机相清洗。以无水硫酸钠将该有机相加以干燥并进行过滤后，将所得的滤液加以减压浓缩。通过硅胶柱层析(己烷/乙酸乙酯＝1/1)将所得的粗产物纯化，以无色油状物的形式获得(S)-(4-(3-(苄氧基)-2-(二苄基氨基)-3-氧代丙基)苯基)硼酸(490mg，1.02mmol，50％)。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃):δ8.10(s,2H,OH),7.40-7.12(m,19H,ArH),5.26(d,J＝15.0Hz,1H,CH₂),5.15(d,J＝15.0Hz,1H,CH₂),3.96(d,J＝15.0Hz,2H,CH₂),3.80(t,J＝5.0Hz,1H,CH),3.57(d,J＝15.0Hz,2H,CH₂),3.23(dd,J＝5.0,15.0Hz,1H,CH₂),3.11(d,J＝5.0,15.0Hz,1H,CH₂)。

(实施例6)

(S)-(4-(3-(苄氧基)-2-(二苄基氨基)-3-氧代丙基)苯基)硼酸的制造

在氮气氛围下添加(S)-2-(二苄基氨基)-3-(4-碘苯基)丙酸苄酯(1.12g，2.00mmol)的四氢呋喃溶液(4.0mL)。冷却至-20℃，滴加氯化异丙基镁-氯化锂配合物(1.29M四氢呋喃溶液，1.9mL，2.4mmol)。于相同温度下搅拌30分钟后，滴加硼酸三乙酯(436mg，2.99mmol)。搅拌16小时后，添加3％盐酸来停止反应，添加4％氢氧化钠水溶液调整为pH7。添加乙酸乙酯(30mL)进行2次萃取后，以饱和食盐水(30mL)将有机相清洗。以无水硫酸钠将该有机相加以干燥并进行过滤后，将所得的滤液加以减压浓缩。通过硅胶柱层析(己烷/乙酸乙酯＝1/1)将所得的粗产物纯化，以无色油状物的形式获得(S)-(4-(3-(苄氧基)-2-(二苄基氨基)-3-氧代丙基)苯基)硼酸(750mg，1.56mmol，79％)。

若将实施例6与比较例2比较，则确认到实施例6是卤素/镁交换反应、硼化反应均反应时间短，而且收率也提高，显示出实施例的技术的经时收率的优越性。

(实施例7)

(S)-3-(4-硼苯基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸的制造

在氮气氛围下，在(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-碘苯基)丙酸(3.13g，8.00mmol)中添加无水四氢呋喃(8.0mL)。冷却至-30℃，耗费15分钟滴加氯化异丙基镁-氯化锂配合物(1.3M四氢呋喃溶液，25mL，32mmol)。搅拌4小时后，于相同温度下滴加硼酸三丁酯(1.84g，8.00mmol)。搅拌1.5小时后，以不超过10℃的方式滴加3％盐酸(20mL)。继而，以不超过10℃的方式滴加浓盐酸，调整为pH1。添加乙酸乙酯(30mL×2)进行萃取后，以饱和食盐水(30mL)将有机相清洗。以无水硫酸钠将该有机相加以干燥并进行过滤后，将所得的滤液加以减压浓缩。在所得的粗产物中添加二氯甲烷(100mL)使固体析出后，进行过滤，以二氯甲烷(50mL)清洗。获得固体并且于滤液中确认到固体的析出，进而将滤液加以过滤。将该操作进行2次，将所得的固体于60℃下减压干燥，以白色固体的形式获得(S)-3-(4-硼苯基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸(1.84g，5.95mmol，74％)。

¹H NMR(500MHz,丙酮-d₆):δ7.81(d,J＝10.0Hz,2H,ArH),7.28(d,J＝10.0Hz,2H,ArH),7.11(brs,1H,OH),6.01(d,J＝10.0Hz,1H,NH),4.45(m,1H,CH),3.22(dd,J＝5.0,15.0Hz,1H,CH₂),3.03(dd,J＝10.0,15.0Hz,1H,CH₂),1.36(s,9H,CH₃)。

确认到创造出即便在将硼酸三丁酯设为1.0当量的情形时，也以74％的收率获得目标物，且昂贵的¹⁰B的损耗极少的状态。

(比较例3)

在氮气氛围下，在氢化钠(60％油悬浮液(oil suspension)，121mg，3.02mmol)、硼酸三丁酯(2.09g，9.06mmol)中添加(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-碘苯基)丙酸(1.18g，3.02mmol)。于冰浴下以不超过20℃的方式耗费10分钟滴加氯化叔丁基镁(0.88M四氢呋喃溶液，27mL，24mmol)。升温至室温并搅拌24小时后，于冰浴下添加3％盐酸来停止反应，调整为pH1。添加叔丁基甲基醚(30mL)进行2次萃取后，以饱和食盐水(30mL)将有机相清洗。以无水硫酸钠将该有机相加以干燥并进行过滤后，将所得的滤液加以减压浓缩。测定所得的粗产物的¹H NMR，结果大部分为原料回收。

(实施例8)

(S)-2-氨基-3-(4-硼苯基)丙酸的制造

在实施例7中所得的(S)-3-(4-硼苯基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸(1.84g，5.95mmol)中添加丙酮水(10/1，12mL)。在该悬浮液中添加浓盐酸(1.86g，17.9mmol)，升温至55℃。搅拌1.5小时后，冷却至室温，将丙酮减压馏去。添加水(59mL)，以乙酸异丙酯(50mL)清洗。在所得的水相中滴加氢氧化钠水溶液将pH调整为6.2，使固体析出。过滤后，依序以水(50mL)、丙酮(10mL)清洗，于60℃下减压干燥，以白色固体的形式获得(S)-2-氨基-3-(4-硼苯基)丙酸(1.12g，5.36mmol，90％，纯度＞99％，＞99％ee)。(二阶段收率：67％)

可通过将保护基去保护而获得(S)-2-氨基-3-(4-硼苯基)丙酸，可确认即使二阶段的收率也为67％，能够减少¹⁰B的损耗，并且纯度、镜像异构体过剩率均优异。

(实施例9)

(S)-3-(4-硼苯基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸的制造

在氮气氛围下，在(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-碘苯基)丙酸(2.35g，6.01mmol)、于130℃下经减压干燥的氯化锂(1.02g，24.0mmol)中添加无水四氢呋喃(6.0mL)。冷却至-30℃，耗费35分钟滴加氯化异丙基镁(0.9M四氢呋喃溶液，27mL，24mmol)。搅拌16.5小时后，于相同温度下滴加硼酸三丁酯(2.07g，9.02mmol)。搅拌5小时后，以不超过10℃的方式滴加3％盐酸(20mL)，调整为pH1。添加乙酸乙酯(30mL×2)进行萃取后，以饱和食盐水(30mL)将有机相清洗。以无水硫酸钠将该有机相加以干燥并进行过滤后，将所得的滤液加以减压浓缩。在所得的粗产物中添加二氯甲烷(50mL)使固体析出后，进行过滤，以二氯甲烷(50mL)清洗。获得固体并且于滤液中确认到固体的析出，进而将滤液加以过滤。将该操作进行2次，将所得的固体于60℃下减压干燥，以白色固体的形式获得(S)-3-(4-硼苯基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸(1.57g，5.08mmol，85％)。

实施例9的方法收率高，为良好的结果。

(实施例10)

(S)-3-(4-硼苯基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸的制造

在氮气氛围下，在(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-碘苯基)丙酸(12.5g，32.0mmol)中添加四氢呋喃(64mL)制成溶液。将该溶液冷却至-35℃下，耗费45分钟以不超过-30℃的方式滴加氯化异丙基镁-氯化锂配合物(1.3M四氢呋喃溶液，98mL，128mmol)。于-30℃下搅拌4小时后，于相同温度下滴加¹⁰B硼酸三丁酯(7.34g，32.0mmol)。搅拌2小时后，以不超过0℃的方式滴加水(40mL)。继而以不超过10℃的方式滴加浓盐酸(约12mL)，调整为pH1。将溶液分离，以甲基叔丁基醚(80mL)萃取水相。将先前所得的有机相与MTBE相合并，一边添加水(100mL)以冰浴进行冷却，一边添加8M氢氧化钠水溶液调整为pH12.8。将溶液分离，在所得的水相中添加3％盐酸，调整为pH10～pH11。在该水相中添加1-丁醇(60mL×2)进行清洗。一边以冰浴将清洗后的水相加以冷却一边滴加浓盐酸调整为pH3左右，使固体析出。进行过滤并以水(适量)清洗后，获得湿(wet)晶。添加异丙醇(40mL)并升温至70℃而完全溶解，添加水(120mL)进行冷却而重结晶。进行过滤，以水(适量)将所得的固体清洗，于50℃下减压干燥，由此以白色固体的形式获得(S)-3-(4-硼苯基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸(5.77g，18.7mmol，58％)。

本方法中在交换反应时未析出固体，能够高效率地搅拌，能够以¹⁰B为基准高效率地以58％获得目标物。

(比较例4)

(S)-3-(4-硼苯基)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)丙酸的制造

在氮气氛围下，在(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-(4-碘苯基)丙酸(12.5g，32.0mmol)中添加四氢呋喃(64mL)制成溶液。将该溶液冷却至-35℃下，耗费45分钟以不超过-30℃的方式滴加氯化异丙基镁(2.0M四氢呋喃溶液，64mL，128mmol)。于-30℃下搅拌3小时而固体析出并凝固，成为完全无法搅拌的状况。

若通过比较例4的方法进行反应，则在反应系统中引起固体的析出，变得无法搅拌。

Claims (9)

1.一种制造方法，是由下述式(I)所示的化合物来制造式(II)所示的化合物的方法，包括：

第一工序，在金属卤化物的存在下，式(I)所示的化合物与直链状或分支状的C1～C10烷基镁卤化物进行反应，以及

第二工序，所述第一工序中所得的化合物与硼酸酯或硼酸酰胺进行反应；

其中，式(I)和式(II)中，

X表示Cl、F、Br或I，

R¹表示NR¹¹R¹²，R¹¹表示H或氨基的保护基，R¹²表示氨基的保护基，

R²表示COOR²¹，R²¹表示H、或者直链状或分支状的C1～C10的烷基或苄基，

R³表示H或COOR³¹，R³¹表示直链状或分支状的C1～C10烷基或苄基，

R⁴表示硼酸即B(OH)₂、硼酸酯或硼酸酰胺中的任一个。

2.根据权利要求1所述的制造方法，其中，所述金属卤化物为氯化锂，所述烷基镁卤化物为异丙基镁氯化物或仲丁基镁氯化物。

3.根据权利要求1或2所述的制造方法，其中，所述X表示Br或I，

所述R³为COOR³¹，R³¹表示直链状或分支状的C1～C10的烷基。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的制造方法，其中，所述X表示Br或I，所述R²表示COOH，所述R³表示H。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的制造方法，其中，所述第一工序和第二工序均包括下述工序：使用选自醚系溶剂和烃系溶剂中的至少一种作为溶剂。

6.根据权利要求1～5中任一项所述的制造方法，其中，所述第一工序和第二工序均在-78℃～0℃的范围的反应温度下进行。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的制造方法，其中，对式(I)所示的化合物混合金属卤化物-烷基镁卤化物和通式B(OR)₃的硼酸酯，由此进行所述第一工序和第二工序的反应，R为直链状或分支状的C1～C10的烷基、苯基或者苄基。

8.根据权利要求7所述的制造方法，其中，金属卤化物和烷基镁卤化物的混合物与硼酸酯的量比以当量比计为1:0.5～2。

9.一种4-硼-L-苯基丙氨酸的制造方法，包括下述工序：将由权利要求1～8中任一项工序所得的所述式(II)的化合物进一步去保护。