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CN116059339B - 一种治疗和预防癌症的药物和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种治疗和/或预防癌症的药物组合物和应用。本发明所述药物组合物包括重组MBP‑MUC1‑N融合蛋白疫苗和PD‑1抗体和/或奥沙利铂，所述药物打破体内和肿瘤微环境的免疫耐受状态，增强MUC1特异性抗肿瘤免疫应答，并且有望完全清除肿瘤，为广大癌症患者带来福音。

Description

一种治疗和预防癌症的药物和应用
技术领域
本发明涉及免疫学治疗药物技术领域，具体涉及一种治疗和/或预防癌症的药物和应用。
背景技术
癌症疫苗是一种主动免疫疗法，通过靶向肿瘤抗原而特异性杀伤癌细胞，癌症疫苗主要包括有DNA疫苗、DC疫苗、溶瘤病毒疫苗或重组病毒载体疫苗、以及基于肽或蛋白质的疫苗。至今为止，癌症疫苗的研究多数处于I-II期临床试验阶段，有10余个产品进入III期临床试验阶段，有两个上市的治疗性癌症疫苗：一是2010年被美国FDA批准的治疗前列腺癌的Provenge疫苗，二是2015年被美国FDA批准的治疗晚期结肠癌的T-VEC疫苗。二者在III期临床试验中分别延长患者生存期为4个月和4.4个月，均只能产生适度的临床效益。其中Provenge疫苗还因不能延长患者的疾病进展时间以及价格昂贵等因素而在使用中存在争议。此外，由于在III期临床试验中缺乏对患者的临床效益，PROSTVAC重组病毒载体疫苗以及针对MAGE-A3融合蛋白疫苗的III期临床试验被终止。长期以来，人们一直设想将癌症疫苗设计为通过主动免疫提高肿瘤特异性免疫应答，尤其是T细胞应答，并将其作为有效癌症免疫疗法的关键工具，然而，由于体内的免疫耐受微环境的存在，癌症疫苗只能产生适度的临床效益。因此，打破免疫耐受微环境，提高疫苗的临床效益尤为重要！
在癌症疫苗单一疗法方面，只能产生适度的临床效益，不能克服免疫耐受的微环境，而PD-1抗体可以弥补癌症疫苗的缺陷，打破免疫耐受微环境，从而激发肿瘤抗原特异性的免疫应答，特异性杀伤肿瘤细胞；在PD-1单一疗法方面，其在大多数癌症中客观缓解率仅约20-30％，并且对先前具有肿瘤浸润免疫反应的肿瘤疗效显著，对非免疫原性肿瘤效果较差，杀伤肿瘤缺乏特异性，容易引起自身免疫。而癌症疫苗恰能弥补PD-1抗体的不足，癌症疫苗可以在肿瘤部位产生免疫反应，并且疫苗介导的肿瘤细胞死亡导致更多的级联抗原的释放。癌症疫苗与PD-1抗体的联合应用能互补不足，进而提高肿瘤杀伤活性。基于上述的理论基础，癌症疫苗联合PD-1抗体成为目前研究的热点之一。迄今为止，关于癌症疫苗和PD-1抗体的联用还处于早期研究阶段，其中T-VEC联合pembrolizumab(PD-1抗体)在晚期结肠癌和头颈部晚期鳞状细胞癌患者中进行Ⅰ期临床试验，联合疗法与单独疗法相比，客观缓解率都明显提高，尤其在晚期结肠癌患者中，联合疗法的客观缓解率达到单独疗法的2-3倍。并且联合疗法具有可控的安全性。此外，Nivolumab(PD-1抗体)联合肽疫苗(MART-1/NY-ESO-1/gp100联合Montanide)在晚期结肠癌患者的Ⅰ期临床试验显示：联合疗法的的无复发生存率是疫苗单独疗法的两倍(47.1个月vs.12-21个月)。然后癌症疫苗联合PD-1抗体也有失败的案例，其中PD-1抗体联合肽疫苗在难治性和初治性结肠癌的I期临床实验中未能改善PD-1单一疗法的临床疗效。因此，癌症疫苗与PD-1抗体的联用急需注入新鲜的血液。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗和/或预防癌症的药物和应用。本发明所述药物将重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗与抗PD-1的抗体和/或奥沙利铂联用可以清除肿瘤微环境的免疫细胞尤其是T细胞的免疫耐受状态，增强MUC1特异性抗肿瘤免疫应答，并且有望完全清除肿瘤，为广大癌症患者带来福音。本发明通过如下技术方案实现：
一种治疗和/或预防癌症的药物组合物，所述药物组合物包括重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗和抗PD-1抗体和/或奥沙利铂。
根据本发明，所述重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗包括蛋白MBP和/或蛋白MUC1-N。优选地，包括麦芽糖结合蛋白MBP和/或人黏蛋白MUC1-N。
根据本发明，所述重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗由麦芽糖结合蛋白MBP基因和人黏蛋白MUC1-N基因串联而成。
更进一步地，所述MUC1-N基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述MBP基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
根据本发明，所述重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示。
更进一步地，所述癌症包括所有表达MUC1的癌症，优选地，包括表达MUC1的腺癌或表达MUC1的血液肿瘤。
根据本发明，所述癌症选自表达MUC1的胰腺癌，或者结直肠癌。
根据本发明，所述癌症为胰腺癌或结直肠癌。
根据本发明，所述药物包括重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗和抗PD-1抗体。
根据本发明，所述药物包括重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗和奥沙利铂。
根据本发明，所述药物包括重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗，抗PD-1抗体和奥沙利铂。
本发明还提供了本发明的药物组合物在制备预防和/或治疗癌症的药物中的应用。
本发明还提供了本发明的药物组合物在制备预防和/或治疗结直肠癌的药物中的应用。
本发明还提供了本发明的药物组合物在制备预防和/或治疗胰腺癌的药物中的应用。
根据本发明，所述重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗包括蛋白MBP和/或蛋白MUC1-N。优选地，包括麦芽糖结合蛋白MBP和/或黏蛋白MUC1-N。
根据本发明，所述重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗包括麦芽糖结合蛋白MBP基因和人黏蛋白MUC1-N基因串联而成。
根据本发明，所述MUC1-N基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述MBP基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。
更优选，所述重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示。
根据本发明，所述癌症包括所有表达MUC1的癌症，包括表达MUC1的腺癌或表达MUC1的血液肿瘤。
根据本发明，所述癌症选自表达MUC1的胰腺癌，或者结直肠癌。
根据本发明，所述癌症为胰腺癌或结直肠癌。
如上所述，本发明提供一种治疗和/或预防癌症的药物，所述药物包括重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗和抗PD-1抗体。
本发明还提供了一种治疗和/或预防癌症的药物，其特征在于，所述药物包括重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗和奥沙利铂。
本发明还提供一种治疗和/或预防癌症的药物，所述药物包括重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗、抗PD-1抗体和奥沙利铂。
本发明还提供一种治疗和/或预防癌症的方法，所述方法包括施用重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗和抗PD-1抗体和/或奥沙利铂。
优选地，所述方法包括施用重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗和抗PD-1抗体。优选地，所述方法包括施用重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗和奥沙利铂。
还优选地，所述方法包括施用重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗、抗PD-1抗体，和奥沙利铂。
本发明所述药物将重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗和抗PD-1抗体联用，能够显著增强重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗的抗肿瘤效果，能够高效抑制表达MUC1的结肠癌生长。试验结果表明，与抗PD-1抗体或者重组MUC1融合蛋白疫苗单独疗法相比，重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗与抗PD-1抗体联用可显著提高肿瘤抑制率，肿瘤抑制率达到87％以上，并且肿瘤治愈率明显提高，肿瘤治愈率在83％以上。显著延长患者生存期。因此，重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗与抗PD-1抗体联用可以打破肿瘤微环境的免疫耐受状态，增强MUC1特异性抗肿瘤免疫应答，并且有望完全清除肿瘤，为广大癌症患者带来福音。此外，本发明所述药物将重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗和奥沙利铂联用，能够显著增强重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗的抗肿瘤效果，能够高效抑制表达MUC1的结肠癌生长。试验结果表明，与奥沙利铂或者重组MUC1融合蛋白疫苗单独疗法相比，重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗与奥沙利铂联用可显著提高肿瘤抑制率，肿瘤抑制率达到58％以上，并且肿瘤治愈率明显提高，肿瘤治愈率在37.5％以上，延长患者生存期。因此，重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗与奥沙利铂联用可以打破肿瘤微环境的免疫耐受状态，增强MUC1特异性抗肿瘤免疫应答，并且有望完全清除肿瘤，为广大癌症患者带来福音。
最后，本发明所述药物将重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗、奥沙利铂和抗PD-1抗体联用，能够显著增强重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗的抗肿瘤效果，能够高效抑制表达MUC1的结肠癌生长，可显著延长患者生存期。
附图说明
图1为本发明提供的重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗联合抗PD-1抗体对MC38结肠癌的抑制作用结果；
图2为本发明提供的重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗联合奥沙利铂对MC38结肠癌的抑制作用结果；
图3为本发明提供的重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗联合奥沙利铂对患癌小鼠的寿命产生的影响结果。
具体实施方式
本发明提供了一种治疗和/或预防癌症的药物，所述药物包括重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗和抗PD-1抗体和/或奥沙利铂联。本发明对所述抗PD-1抗体和/或奥沙利铂联的来源没有特殊限定，采用常规市售抗PD-1抗体和/或奥沙利铂联即可。
1、重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗的制备；
1.基因优化
(1)MUC1-N基因的优化
本发明根据Muc1-N氨基酸序列SEQ ID NO.1的特点，进行密码子优化获得SEQ IDNO.3，经比对，优化修改了28％的碱基序列；
①SEQ ID NO.1
②优化前基因序列SEQ ID NO.2
③优化后基因序列SEQ ID NO.3
④优化1前后基因对比(同源性72％，修改28％)
(2)MBP基因的优化
根据MBP氨基酸序列SEQ ID NO.4的特点，利用DNA软件进行密码子优化，获得优化后的序列SEQ ID NO.6，经比对，优化序列有15％的碱基序列改变。
①氨基酸序列SEQ ID NO.4
②优化前基因序列SEQ ID NO.5
③优化后基因序列SEQ ID NO.6
④优化1前后基因对比(同源性85％，修改15％)
(3)MUC1-N融合MBP优化基因序列的合成
MBP和Muc1-N的依次串联表达，获得融合蛋白序列为SEQ ID NO.7，其序列为：
KIEEGKLVIWINGDKGYNGLAEVGKKFEKDTGIKVTVEHPDKLEEKFPQVAATGDGPDIIFWAHDRFGGYAQSGLLAEITPDKAFQDKLYPFTWDAVRYNGKLIAYPIAVEALSLIYNKDLLPNPPKTWEEIPALDKELKAKGKSALMFNLQEPYFTWPLIAADGGYAFKYENGKYDIKDVGVDNAGAKAGLTFLVDLIKNKHMNADTDYSIAEAAFNKGETAMTINGPWAWSNIDTSKVNYGVTVLPTFKGQPSKPFVGVLSAGINAASPNKELAKEFLENYLLTDEGLEAVNKDKPLGAVALKSYEEELVKDPRIAATMENAQKGEIMPNIPQMSAFWYAVRTAVINAASGRQTVDEALKDAQTNSSSNNNNNNNNNNLGIEGRISGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAPGSTAPPAH
制备方法如下：根据MBP和Muc1-N融合蛋白质的基因序列进行串联合成。为此，先合成1a_1、1a_2、1a_3、1a_4、1a_5、1a_6、1a_7、1a_8、1a_9、1a_10、1a_11、1a_12、1a_13、1a_14、1a_15、1a_16、1a_17、1a_18、1a_19、1a_20、1a_21、1a_22、1a_23、1a_24、1a_25、1a_26、1a_27、1a_28、1a_29、1a_30寡核苷酸序列，再合成1b_1、1b_2、1b_3、1b_4序列，利用1-seq2、1-R序列进行基因扩增，获得MUC1-N融合MBP优化基因序列。
2、蛋白质重组表达与纯化
将融合基因的5’PCR引物附加NcoI酶切位点，3’PCR引物附加EcoI酶切位点，扩增出的基因双酶切，插入到同样双酶切的pET26b(+)大肠杆菌表达载体中。经过抗性细菌培养板的筛选和单克隆挑选，用卡那霉素抗性的培养基培养和IPTG诱导操纵子的表达。将未优化的序列、优化的序列进行实验。最后得到的全菌液用含有SDS的缓冲液进行95℃预处理，用5％-12％聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分析。结果显示：优化前的序列MBP-Muc1-N表达量只有总蛋白的2％，优化后的序列1MBP-Muc1-N表达量占总蛋白的51％，上升了25.5倍。经过亲和柱纯化后，未优化的基因表达的蛋白质进行10倍浓缩才能上样观察，浓缩后纯化蛋白质产量为100ml培养物0.8mg，而优化后的序列MBP-Muc1-N产量为9.6mg，上升了12倍。
下面结合具体实施例对本发明所述的一种治疗和/或预防癌症的药物和应用做进一步详细的介绍，本发明的技术方案包括但不限于以下实施例。
实施例1
1.材料
实验试剂：使用本申请的方法重组MBP-MUC1-N融合蛋白，采用常规疫苗制备方法进行制备得到，抗PD-1抗体购自上海君实生物医药科技股份有限公司；MC38结肠癌细胞购自国家实验细胞资源中心；注射生理盐水购自北京天坛生物制品股份有限公司。
实验动物：C57 BL/6J小鼠购自北京华阜康生物科技有限公司。
2.方法
2.1小鼠免疫
将小鼠称重，随机分组，每组6只鼠，将MC38结肠癌细胞按照5×105个细胞/只用IMDM基础培养液稀释，总量100μl/只)接种到C57BL/J小鼠右侧腋下，建模。待肿瘤直径达到5mm后分为4组，分别是生理盐水对照组(NS组)、免疫检测点抑制剂抗PD-1抗体注射组(PD-1组)、重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗组(疫苗组)、重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗制剂联合免疫检测点抑制剂抗PD1抗体组(联合组)。于荷瘤后第3、7、10、14、17天肌肉进行免疫重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗制剂注射剂量为100μg/只(用NS稀释，总量200μl)、腹腔注射免疫检测点抑制剂抗PD-1抗体，注射剂量250μg/只(用NS稀释，总量500μl/只)。
2.2重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗联合抗PD-1抗体对MC38结肠癌的抑制作用
计算各组皮下结肠癌移植瘤抑制率和肿瘤抑制率。公式如下：[肿瘤抑制率＝(对照组平均瘤重－实验组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100％]。[肿瘤治愈率＝(未长肿瘤小鼠个数/6只))×100％]。
3.结果
表1小鼠肿瘤瘤重(g)及肿瘤抑制率(％)和肿瘤治愈率
和NS组对比，**，p<0.01；***,p<0.001；和PD-1组对比，##，p<0.01；和疫苗组对比，$$,p<0.01
从表1和图1中可以看出，PD-1抗体联合MBP-Muc1-N相对于单独使用PD-1抗体，可以显著消除肿瘤。注射PD-1抗体联合MBP-Muc1-N后的3、5、7、10、12、14、17、19天，肿瘤显著缩小。分别从0.58±0.21cm3缩小到0.31±0.06cm3；从0.74±0.24cm3缩小到0.34±0.99cm3；从0.52±0.20cm3缩小到0.30±0.10cm3；从0.57±0.19cm3缩小到0.30±0.15cm3；从0.89±0.42cm3缩小到0.22±0.15cm3；从0.98±0.31cm3缩小到0.30±0.11cm3；从2.34±1.30cm3缩小到0.66±0.56cm3；从2.22±1.11cm3缩小到0.80±0.55cm3；p值分别为0.024、0.008、0.049、0.023、0.01、0.002、0.022、和0.025，存在显著差异。重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗能够对肿瘤有一定的抑制作用，与免疫检测点抑制剂PD-1抗体联合给药后能够极显著抑制MC38结肠癌肿瘤生长，抑制率高达87％，远远大于两者单独抑制MC38结肠癌肿瘤生长的抑制率，并且具有极显著结肠癌肿瘤治愈率，远远高于两者单独使用对于结肠癌肿瘤的治愈率。
4.结论
重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗与抗PD-1抗体联用可显著提高肿瘤抑制率，肿瘤抑制率达到87％以上，并且肿瘤治愈率明显提高，肿瘤治愈率在83以上％，因此，重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗与抗PD-1抗体联用有望打破肿瘤微环境的免疫耐受状态，增强MUC1特异性抗肿瘤免疫应答，并且有望完全清除肿瘤，为广大癌症患者带来福音。
实施例2
实验试剂：使用本申请的方法重组MBP-MUC1-N融合蛋白，采用常规疫苗制备方法进行制备得到，奥沙利铂购自Sigma-Aldrich(美国)；MC38结肠癌细胞购自国家实验细胞资源中心；注射生理盐水购自北京天坛生物制品股份有限公司。
实验动物：C57 BL/6小鼠购自北京华阜康生物科技有限公司。
2.方法
2.1小鼠免疫
将小鼠称重，随机分组，每组8只鼠，将MC38结肠癌细胞按照5×105个细胞/只用IMDM基础培养液稀释，总量100μl/只)接种到C57BL/J小鼠右侧腋下，建模。待肿瘤直径达到5mm后分为4组，分别是生理盐水对照组(NS组)、奥沙利铂注射组(奥沙利铂组)、重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗组(疫苗组)、奥沙利铂联合重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗制剂组(联合组)。于荷瘤后第3、7、10、14、17天肌肉进行免疫重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗制剂注射剂量为100μg/只(用NS稀释，总量200μl)、腹腔注射奥沙利铂，注射剂量3mg/Kg(用12％DMSO稀释)。
2.2重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗联合奥沙利铂对MC38结肠癌的抑制作用
计算各组皮下结肠癌移植瘤抑制率和肿瘤抑制率。公式如下：[肿瘤抑制率＝(对照组平均瘤重－实验组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100％]。[肿瘤治愈率＝(未长肿瘤小鼠个数/8只))×100％]。
3.结果
表2小鼠肿瘤瘤重(g)及肿瘤抑制率(％)和肿瘤治愈率(％)
和NS组对比，*，p<0.05；**，p<0.01
由表2和图2可知，与疫苗单独疗法组相比，奥沙利铂联合MBP-Muc1-N相对于单独使用奥沙利铂，可以显著消除肿瘤。注射奥沙利铂联合MBP-Muc1-N后的5、7天，肿瘤极显著缩小。分别从0.46±0.12cm3缩小到0.29±0.12cm3；从0.81±0.20cm3缩小到0.46±0.12cm3。与奥沙利铂或者重组MUC1融合蛋白疫苗单独疗法相比，重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗与奥沙利铂联用可显著提高肿瘤抑制率，肿瘤抑制率达到58％以上，并且肿瘤治愈率明显提高，肿瘤治愈率在37.5％以上，高于两者单独使用的治愈率之和。
如图3所示，奥沙利铂联合MBP-Muc1-N相对于单独使用奥沙利铂，可以延长患癌小鼠的寿命。患癌存活期从29天延长到32天，延长10.34％的生存率。
4.结论
重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗与奥沙利铂联合给药后能够更加有效抑制MC38结肠癌肿瘤生长，且能提高肿瘤治愈率，高达37.5％，高于两者单独使用的治愈率之和。
由此可见，MBP-Muc1-N与奥沙利铂联合使用，能够显著消除结肠癌肿瘤，并延长寿命。
实施例3
实验试剂：使用本申请的方法重组MBP-MUC1-N融合蛋白，采用常规疫苗制备方法进行制备得到，奥沙利铂购自Sigma-Aldrich(美国)；抗PD-1抗体购自上海君实生物医药科技股份有限公司；MC38结肠癌细胞购自国家实验细胞资源中心；注射生理盐水购自北京天坛生物制品股份有限公司。
实验动物：C57 BL/6小鼠购自北京华阜康生物科技有限公司。
2.方法
2.1小鼠免疫
将小鼠称重，随机分组，每组8只鼠，将MC38结肠癌细胞按照5×105个细胞/只用IMDM基础培养液稀释，总量100μl/只)接种到C57BL/J小鼠右侧腋下，建模。待肿瘤直径达到5mm后分为5组，分别是生理盐水对照组(NS组)、免疫检测点抑制剂抗PD-1抗体注射组(PD-1组)、奥沙利铂注射组(奥沙利铂组)、重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗组(疫苗组)、奥沙利铂、免疫检测点抑制剂抗PD1抗体联合重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗制剂组(联合组)。于荷瘤后第3、7、10、14、17天肌肉进行免疫重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗制剂注射剂量为100μg/只(用NS稀释，总量200μl)、腹腔注射奥沙利铂注射剂量3mg/Kg(用12％DMSO稀释、腹腔注射免疫检测点抑制剂抗PD-1抗体，注射剂量250μg/只(用NS稀释，总量500μl/只)。
2.2重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗联合奥沙利铂和免疫检测点抑制剂抗PD-1抗体注射组(PD-1组)对MC38结肠癌的抑制作用
计算各组皮下结肠癌移植瘤抑制率和肿瘤抑制率。公式如下：[肿瘤抑制率＝(对照组平均瘤重－实验组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100％]。[肿瘤治愈率＝(未长肿瘤小鼠个数/8只))×100％]。
3.结果
奥沙利铂、免疫检测点抑制剂抗PD-1抗体注射联合MBP-Muc1-N相对于单独使用奥沙利铂和单独免疫检测点抑制剂抗PD-1抗体注射，均可以显著延长患癌小鼠的寿命。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 元本（珠海横琴）生物科技有限公司
<120> 一种治疗和预防癌症的药物和应用
<130> 2021
<160> 7
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 140
<212> PRT
<213> 未知
<400> 1
Gly Val Thr Ser Ala Pro Asp Thr Arg Pro Ala Pro Gly Ser Thr Ala
1 5 10 15
Pro Pro Ala His Gly Val Thr Ser Ala Pro Asp Thr Arg Pro Ala Pro
20 25 30
Gly Ser Thr Ala Pro Pro Ala His Gly Val Thr Ser Ala Pro Asp Thr
35 40 45
Arg Pro Ala Pro Gly Ser Thr Ala Pro Pro Ala His Gly Val Thr Ser
50 55 60
Ala Pro Asp Thr Arg Pro Ala Pro Gly Ser Thr Ala Pro Pro Ala His
65 70 75 80
Gly Val Thr Ser Ala Pro Asp Thr Arg Pro Ala Pro Gly Ser Thr Ala
85 90 95
Pro Pro Ala His Gly Val Thr Ser Ala Pro Asp Thr Arg Pro Ala Pro
100 105 110
Gly Ser Thr Ala Pro Pro Ala His Gly Val Thr Ser Ala Pro Asp Thr
115 120 125
Arg Pro Ala Pro Gly Ser Thr Ala Pro Pro Ala His
130 135 140
<210> 2
<211> 420
<212> DNA
<213> 未知
<400> 2
ggtgtcacct cggccccgga caccaggccg gccccgggct ccaccgcccc cccagcccac 60
ggtgtcacct cggccccgga gagcaggccg gccccgggct ccaccgcccc cccagcccac 120
ggtgtcacct cggccccgga gagcaggccg gccccgggct ccaccgcgcc cgcagcccac 180
ggtgtcacct cggccccgga gagcaggccg gccccgggct ccaccgcgcc cgcagcccac 240
ggtgtcacct cggccccgga gagcaggccg gccccgggct ccaccgcccc ccgagcccac 300
ggtgtcacct cggccccgga caccaggccg gccccgggct ccaccgcccc cccagcccac 360
ggtgtcacct cggccccgga caccaggccg gccccgggct ccaccgcccc cccagcccac 420
<210> 3
<211> 420
<212> DNA
<213> 人工合成
<400> 3
ggtgttactt ctgctcctga tactcgtcct gctcctggtt ctactgcacc gccagcacat 60
ggcgtgacgt ctgcgccaga tacccgtccg gcaccgggtt ccaccgcccc accggcacac 120
ggcgtaacct ccgcgccaga cacccgtcca gcgccaggtt ctaccgctcc gcctgctcat 180
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ggcgttacct ctgcaccgga tactcgtccg gctccgggct ctaccgcacc acctgctcat 360
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<210> 4
<211> 388
<212> PRT
<213> 未知
<400> 4
Lys Ile Glu Glu Gly Lys Leu Val Ile Trp Ile Asn Gly Asp Lys Gly
1 5 10 15
Tyr Asn Gly Leu Ala Glu Val Gly Lys Lys Phe Glu Lys Asp Thr Gly
20 25 30
Ile Lys Val Thr Val Glu His Pro Asp Lys Leu Glu Glu Lys Phe Pro
35 40 45
Gln Val Ala Ala Thr Gly Asp Gly Pro Asp Ile Ile Phe Trp Ala His
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Asp Arg Phe Gly Gly Tyr Ala Gln Ser Gly Leu Leu Ala Glu Ile Thr
65 70 75 80
Pro Asp Lys Ala Phe Gln Asp Lys Leu Tyr Pro Phe Thr Trp Asp Ala
85 90 95
Val Arg Tyr Asn Gly Lys Leu Ile Ala Tyr Pro Ile Ala Val Glu Ala
100 105 110
Leu Ser Leu Ile Tyr Asn Lys Asp Leu Leu Pro Asn Pro Pro Lys Thr
115 120 125
Trp Glu Glu Ile Pro Ala Leu Asp Lys Glu Leu Lys Ala Lys Gly Lys
130 135 140
Ser Ala Leu Met Phe Asn Leu Gln Glu Pro Tyr Phe Thr Trp Pro Leu
145 150 155 160
Ile Ala Ala Asp Gly Gly Tyr Ala Phe Lys Tyr Glu Asn Gly Lys Tyr
165 170 175
Asp Ile Lys Asp Val Gly Val Asp Asn Ala Gly Ala Lys Ala Gly Leu
180 185 190
Thr Phe Leu Val Asp Leu Ile Lys Asn Lys His Met Asn Ala Asp Thr
195 200 205
Asp Tyr Ser Ile Ala Glu Ala Ala Phe Asn Lys Gly Glu Thr Ala Met
210 215 220
Thr Ile Asn Gly Pro Trp Ala Trp Ser Asn Ile Asp Thr Ser Lys Val
225 230 235 240
Asn Tyr Gly Val Thr Val Leu Pro Thr Phe Lys Gly Gln Pro Ser Lys
245 250 255
Pro Phe Val Gly Val Leu Ser Ala Gly Ile Asn Ala Ala Ser Pro Asn
260 265 270
Lys Glu Leu Ala Lys Glu Phe Leu Glu Asn Tyr Leu Leu Thr Asp Glu
275 280 285
Gly Leu Glu Ala Val Asn Lys Asp Lys Pro Leu Gly Ala Val Ala Leu
290 295 300
Lys Ser Tyr Glu Glu Glu Leu Val Lys Asp Pro Arg Ile Ala Ala Thr
305 310 315 320
Met Glu Asn Ala Gln Lys Gly Glu Ile Met Pro Asn Ile Pro Gln Met
325 330 335
Ser Ala Phe Trp Tyr Ala Val Arg Thr Ala Val Ile Asn Ala Ala Ser
340 345 350
Gly Arg Gln Thr Val Asp Glu Ala Leu Lys Asp Ala Gln Thr Asn Ser
355 360 365
Ser Ser Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Asn Leu Gly Ile Glu
370 375 380
Gly Arg Ile Ser
385
<210> 5
<211> 1164
<212> DNA
<213> 未知
<400> 5
aaaatcgaag aaggtaaact ggtaatctgg attaacggcg ataaaggcta taacggtctc 60
gctgaagtcg gtaagaaatt cgagaaagat accggaatta aagtcaccgt tgagcatccg 120
gataaactgg aagagaaatt cccacaggtt gcggcaactg gcgatggccc tgacattatc 180
ttctgggcac acgaccgctt tggtggctac gctcaatctg gcctgttggc tgaaatcacc 240
ccggacaaag cgttccagga caagctgtat ccgtttacct gggatgccgt acgttacaac 300
ggcaagctga ttgcttaccc gatcgctgtt gaagcgttat cgctgattta taacaaagat 360
ctgctgccga acccgccaaa aacctgggaa gagatcccgg cgctggataa agaactgaaa 420
gcgaaaggta agagcgcgct gatgttcaac ctgcaagaac cgtacttcac ctggccgctg 480
attgctgctg acgggggtta tgcgttcaag tatgaaaacg gcaagtacga cattaaagac 540
gtgggcgtgg ataacgctgg cgcgaaagcg ggtctgacct tcctggttga cctgattaaa 600
aacaaacaca tgaatgcaga caccgattac tccatcgcag aagctgcctt taataaaggc 660
gaaacagcga tgaccatcaa cggcccgtgg gcatggtcca acatcgacac cagcaaagtg 720
aattatggtg taacggtact gccgaccttc aagggtcaac catccaaacc gttcgttggc 780
gtgctgagcg caggtattaa cgccgccagt ccgaacaaag agctggcaaa agagttcctc 840
gaaaactatc tgctgactga tgaaggtctg gaagcggtta ataaagacaa accgctgggt 900
gccgtagcgc tgaagtctta cgaggaagag ttggtgaaag atccgcgtat tgccgccact 960
atggaaaacg cccagaaagg tgaaatcatg ccgaacatcc cgcagatgtc cgctttctgg 1020
tatgccgtgc gtactgcggt gatcaacgcc gccagcggtc gtcagactgt cgatgaagcc 1080
ctgaaagacg cgcagactaa ttcgagctcg aacaacaaca acaataacaa taacaacaac 1140
ctcgggatcg agggaaggat ttca 1164
<210> 6
<211> 1164
<212> DNA
<213> 人工合成
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gcaaaaggta agagcgctct gatgttcaat ctgcaggaac cgtacttcac ttggccgctg 480
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gagaccgcaa tgaccatcaa cggtccgtgg gcttggtcta acatcgacac ctccaaagta 720
aattacggtg ttaccgtcct gccgaccttc aaaggtcaac cgagcaaacc gttcgtgggc 780
gtgctgtccg caggtatcaa cgctgcctcc ccaaacaaag agctggccaa agagttcctg 840
gaaaactatc tgctgaccga cgaaggcctg gaagctgtta ataaagacaa accgctgggt 900
gctgttgcac tgaaatccta tgaagaagaa ctggtcaaag atccgcgtat tgccgccact 960
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tacgcggtgc gtaccgctgt aattaacgcg gcgtccggtc gtcagactgt cgatgaagcg 1080
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ctgggtattg aaggtcgcat ctct 1164
<210> 7
<211> 528
<212> PRT
<213> 人工合成
<400> 7
Lys Ile Glu Glu Gly Lys Leu Val Ile Trp Ile Asn Gly Asp Lys Gly
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195 200 205
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Thr Ile Asn Gly Pro Trp Ala Trp Ser Asn Ile Asp Thr Ser Lys Val
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275 280 285
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305 310 315 320
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325 330 335
Ser Ala Phe Trp Tyr Ala Val Arg Thr Ala Val Ile Asn Ala Ala Ser
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Gly Arg Gln Thr Val Asp Glu Ala Leu Lys Asp Ala Gln Thr Asn Ser
355 360 365
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Claims (2)

1.麦芽糖结合蛋白MBP基因和人黏蛋白MUC1-N基因的串联与奥沙利铂联合制备预防和/或治疗癌症的药物中的应用，所述药物包括重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗和奥沙利铂，所述重组MBP-MUC1-N融合蛋白疫苗的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述癌症为结直肠癌，所述MUC1-N基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述MBP基因的核苷酸序列如SEQID NO.6所示。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物进一步包括抗PD-1抗体。
CN202111302270.4A 2021-11-04 2021-11-04 一种治疗和预防癌症的药物和应用 Active CN116059339B (zh)

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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1513556A (zh) * 2003-02-19 2004-07-21 台桂香 重组人muc1-mbp融合蛋白抗肿瘤疫苗及生产工艺
CN106177947A (zh) * 2016-07-25 2016-12-07 中国医学科学院北京协和医院 免疫监测点阻断药物和肿瘤疫苗联合的制药用途
CN107406857A (zh) * 2015-01-09 2017-11-28 埃图比克斯公司 用于联合免疫治疗的方法和组合物
WO2019219889A1 (en) * 2018-05-18 2019-11-21 Glycotope Gmbh Anti-muc1 antibody
CN111298111A (zh) * 2020-04-08 2020-06-19 长春康悦生物科技有限公司 一种治疗和/或预防癌症的药物和应用

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106432460A (zh) * 2016-09-19 2017-02-22 蔡炯 肿瘤抗原蛋白及肿瘤疫苗

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1513556A (zh) * 2003-02-19 2004-07-21 台桂香 重组人muc1-mbp融合蛋白抗肿瘤疫苗及生产工艺
CN107406857A (zh) * 2015-01-09 2017-11-28 埃图比克斯公司 用于联合免疫治疗的方法和组合物
CN106177947A (zh) * 2016-07-25 2016-12-07 中国医学科学院北京协和医院 免疫监测点阻断药物和肿瘤疫苗联合的制药用途
WO2019219889A1 (en) * 2018-05-18 2019-11-21 Glycotope Gmbh Anti-muc1 antibody
CN112351999A (zh) * 2018-05-18 2021-02-09 第一三共株式会社 抗-muc1抗体-药物缀合物
CN111298111A (zh) * 2020-04-08 2020-06-19 长春康悦生物科技有限公司 一种治疗和/或预防癌症的药物和应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Chenlu Liu et al..Soluble PD-1-based vaccine targeting MUC1 VNTR and survivin improves anti-tumor effect.《Immunology Letters》.2018,第200卷第33页摘要. *
Mei Guo et al..Colorectal cancer stem cell vaccine with high expression of MUC1 serves as a novel prophylactic vaccine for colorectal cancer.《International Immunopharmacology》.2020,第88卷第1-14页. *
王硕等.可溶性 PD-1、PD-L1 分子在肿瘤免疫中研究进展.《临床军医杂志》.2015,第43卷(第12期),第1308-1311页. *

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