CN115656511A - 用于消化系统肿瘤体外诊断的标志物及试剂盒 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种用于消化系统肿瘤体外诊断的标志物及试剂盒，所述标志物包括粪便样本中的异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1。本发明的标志物组合与结肠癌具有极高的关联度，敏感性和特异性高达0.8以上，即本发明的诊断标志物和试剂盒具有极高的灵敏度和特异性；这在临床上是非常难得的，可用于结肠癌的早期发现，为患者争取时间，尽早开始治疗，提高患者的生存率，降低死亡率，减轻我国的医疗负担具有重大的意义。
Description
技术领域
本发明属于诊断技术领域，具体而言，本发明涉及一种用于消化系统肿瘤体外诊断的标志物及试剂盒。
背景技术
结肠癌是由于结肠粘膜上皮在环境和遗传等多种致癌因素作用下发生的恶性癌变，是世界上最常见的恶性肿瘤之一，其发病率占胃肠道肿瘤的第3位，在许多国家是导致死亡的主要病因。近年随着人民生活水平的提高和饮食结构的改变，其发病率呈逐年上升趋势，严重地威胁着人类健康。结肠癌起病隐匿，早期常无明显的临床症状，而且病情发展较慢，病人出现明显症状时大多已经到了中晚期。目前，结肠的治疗主要是以手术为主，但结肠癌转移后的化疗效果差，术后约有40％的患者出现复发，且晚期患者术后生存率较低。因此，寻找发现有价值的肿瘤标志物对于提高结肠癌的诊断和预测发生、发展及改善预后具有重要的临床指导意义。结肠癌是一种多因素协同作用的结果，与饮食、环境、遗传等密切相关，但其具体的分子机制尚未完全阐明。尽管有许多学者已经做了大量成功的关于结肠癌分子水平的研究，但是目前仍然缺乏有效地早期诊断结肠癌的分子标志物。肿瘤标志物可以有效地作为临床诊断依据，可以监听高位人群、早期诊断、指导治疗、判断治疗疗效、检测复发及转移，是肿瘤患者的重要检查指标、具有重要的临床意义。结肠癌的发生前期会有一段时间的癌前病变，如结肠息肉，因此在早期发现并阻断或延迟癌症的发展，有极其重要的意义。
结肠癌常用的诊断方法有大便潜血检查、钡剂造影、结肠镜检查和血清肿瘤标志物(tumormarkers，TM)，前两种方法敏感性较低，结肠镜检查为侵入性检查，较多患者难以接受。TM检测在癌症筛查、诊断和治疗后随访、复发的检出和预后判断中发挥着重要作用。早期大肠癌患者预后较好，但患者常无临床症状，诊断率很低。因此，筛选和建立用于癌症早期诊断的、高敏感、高特异的血清学诊断技术，提供癌症早期预警普查，具有重大意义，市场前景可观。
目前国内外广泛采用检测血清中CEA、CA242来检测结肠癌。CEA是一种糖蛋白抗原，从结肠腺癌和胚结肠黏膜组织中分离得到，是常见的结直肠癌肿瘤标记物。由于内胚层来源的恶性肿瘤如结直肠癌、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌等均存在CEA异常表达，且CEA释放入体循环时先经门静脉进入肝脏,而肝脏对CEA有降解作用，可影响其在外周血液中的浓度,因此CEA诊断结直肠癌不具备特异性。CA242最早是从人结直肠癌细胞Colo205单抗发现的，是一种唾液酸化的糖类抗原，与肿瘤局部宿主抗肿瘤免疫反应有关，机体免疫抑制越明显，血清CA242水平越高。研究者认为CA242更适用于胰腺癌和消化道恶性肿瘤尤其是结直肠癌的诊断。
此外，中国发明专利CN102998452B公开了一种多肽标志物Pep5酶联免疫检测试剂盒，所述检测试剂盒含有经酶标记的由保藏号为CGMCC No.5269的单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体。该发明所提供的由所述杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体制备的检测试剂盒可用于检测肠腺癌，操作步骤简便快捷，有利于高通量地临床检测，而且检测成本低。
再例如，中国发明专利CN104808004B公开了METRNL蛋白在作为检测结肠癌的蛋白质分子标记物及在制备检测结肠癌诊断试剂或试剂盒中的用途。本发明通过免疫组织化学实验，对30对人类结肠癌组织与癌旁组织进行免疫组织化学，证实了METRNL蛋白在人类结肠癌的癌组织与癌旁组织中存在差异表达。因此，可根据METRNL蛋白在结肠组织中的表达量来检测患者是否患有结肠癌。
然而，现有技术主要针对血清进行检测，现有技术未公开从患者的粪便中获取诊断标志物。因此，对于如何提供更多的用于检测消化系统肿瘤的标志物及试剂盒，特别是结肠癌，仍然是本领域技术人员亟待解决的技术问题。
发明内容
本发明主要提供了一种用于消化系统肿瘤体外诊断的标志物及试剂盒。为了实现本发明的目的，拟采用如下技术方案：
本发明一方面涉及一种用于消化系统肿瘤体外诊断的标志物，其包括粪便样本中的异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1。
本发明另一方面还涉及一种用于消化系统肿瘤体外诊断的试剂盒，其包括用于定量检测粪便样本中的异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1的试剂盒。
在本发明的一个优选实施方式中，所述用于定量检测粪便样本中的异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1的试剂盒是异戊烯半胱氨酸氧化酶1ELISA试剂盒和人凝血酶敏感蛋白1ELISA试剂盒。
本发明另一方面还涉及上述标志物或试剂盒在制备诊断消化系统肿瘤的试剂盒中的应用。
在本发明的一个优选实施方式中，所述消化系统肿瘤是结肠癌。
在本发明的一个优选实施方式中，所述诊断消化系统肿瘤的试剂盒用于定量检测粪便样本中的异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1。
在本发明的一个优选实施方式中，所述定量检测包括：用2倍重量的PBS分散粪便样本，离心取上清液，测定粪便样本上清液中异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1的含量
本发明的有益效果
本发明的标志物组合与结肠癌具有极高的关联度，敏感性和特异性高达0.8以上，即本发明的诊断标志物和试剂盒具有极高的灵敏度和特异性；这在临床上是非常难得的，可用于结肠癌的早期发现，为患者争取时间，尽早开始治疗，提高患者的生存率，降低死亡率，减轻我国的医疗负担具有重大的意义。
附图说明
图1、结肠癌患者、肝癌患者和健康人群异戊烯半胱氨酸氧化酶1定量检测结果散点图；
图2、结肠癌患者、肝癌患者和健康人群人凝血酶敏感蛋白1定量检测结果散点图。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，并参照附图，对本发明作进一步的详细说明。
实施例1：
1.1一般资料
抽取2020年1月-2021年12月期间收治的80例结肠癌患者，均经影像学、细胞学和病理活检。另外收集34例肝癌患者和40例健康人群分别作为阳性对照和阴性对照。结肠癌患者中男女比例为5：3，年龄49岁-72岁，平均年龄(63.6±2.6)岁，肝癌患者中男女为10：7，年龄50岁-70岁，平均年龄(64.1±2.8)岁，健康人群男女比例为3：2，年龄52岁-71岁，平均年龄(64.3±2.9)岁，三组基线资料之间均无统计学差异(P＞0.05)。
1.2检测方法
粪便样本在粪块中央挑取，不能混入肛门、直肠的出血，粪便应新鲜，用2倍重量的PBS分散粪便样本，离心取上清液，使用异戊烯半胱氨酸氧化酶1(PCYOX1)ELISA和人凝血酶敏感蛋白1(TSP1)ELISA试剂盒，分别按照试剂盒说明书进行操作，测定粪便样本上清液中异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1的含量，检测结果如图1和图2所示。其中，三组的异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1的含量平均值见表1，结肠癌组与健康人群组和结肠癌组与肝癌组之间均具有统计学差异(P＜0.05)。
表1：异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1的含量检测结果
| 组别 | 结肠癌组 | 健康人群组 | 肝癌组 |
| 异戊烯半胱氨酸氧化酶1(U/mL) | 91.2±14.3 | 54.7±10.6 | 56.0±14.1 |
| 人凝血酶敏感蛋白1(ng/mL) | 38.5±5.9 | 24.7±6.4 | 28.4±5.3 |
肿瘤标志物异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1单项检测及联合检测对结肠癌筛查的特异性和准确性的统计结果见表2。
表2：肿瘤标志物对结肠癌筛查的特异性和准确性
| 组别 | 特异性 | 准确性 |
| PCYOX1 | 63.1％ | 77.5％ |
| TSP1 | 61.8％ | 68.9％ |
| PCYOX1+TSP1 | 85.3％ | 83.2％ |
以上所述的具体实施例，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施例而已，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种用于消化系统肿瘤体外诊断的标志物，其包括粪便样本中的异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1。
2.一种用于消化系统肿瘤体外诊断的试剂盒，其包括用于定量检测粪便样本中的异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1的试剂盒。
3.根据权利要求1所述的用于消化系统肿瘤体外诊断的试剂盒，所述用于定量检测粪便样本中的异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1的试剂盒是异戊烯半胱氨酸氧化酶1ELISA试剂盒和人凝血酶敏感蛋白1ELISA试剂盒。
4.权利要求1所述的标志物在制备诊断消化系统肿瘤的试剂盒中的应用。
5.权利要求2或3所述的用于消化系统肿瘤体外诊断的试剂盒在制备诊断消化系统肿瘤的试剂盒中的应用。
6.根据权利要求4或5所述的应用，所述消化系统肿瘤是结肠癌。
7.根据权利要求4或5所述的应用，所述诊断消化系统肿瘤的试剂盒用于定量检测粪便样本中的异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1。
8.根据权利要求7所述的应用，所述定量检测包括：用2倍重量的PBS分散粪便样本，离心取上清液，测定粪便样本上清液中异戊烯半胱氨酸氧化酶1和人凝血酶敏感蛋白1的含量。
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| CN202211416536.2A CN115656511A (zh) | 2022-11-13 | 2022-11-13 | 用于消化系统肿瘤体外诊断的标志物及试剂盒 |
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|---|---|
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116449018A (zh) * | 2023-02-14 | 2023-07-18 | 浙江大学 | 一种用于肠腺瘤腺癌诊断的血浆蛋白标记物及应用 |
Citations (4)
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| CN105572355A (zh) * | 2015-03-13 | 2016-05-11 | 中国医学科学院肿瘤医院 | 检测食管癌的生物标志物 |
| CN110373465A (zh) * | 2019-07-25 | 2019-10-25 | 中山大学附属第六医院 | 一种结直肠癌标记物组合及其应用 |
| CN112609002A (zh) * | 2021-01-11 | 2021-04-06 | 中国医科大学 | 一种外周血miRNA结肠癌诊断标志物组合及其检测试剂盒 |
| CN114441760A (zh) * | 2022-04-07 | 2022-05-06 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 一种用于肝癌诊断的生物标志物和试剂盒及检测方法 |
-
2022
- 2022-11-13 CN CN202211416536.2A patent/CN115656511A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105572355A (zh) * | 2015-03-13 | 2016-05-11 | 中国医学科学院肿瘤医院 | 检测食管癌的生物标志物 |
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Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN116449018A (zh) * | 2023-02-14 | 2023-07-18 | 浙江大学 | 一种用于肠腺瘤腺癌诊断的血浆蛋白标记物及应用 |
| CN116449018B (zh) * | 2023-02-14 | 2023-09-05 | 浙江大学 | 一种用于肠腺瘤腺癌诊断的血浆蛋白标记物及应用 |
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