[go: up one dir, main page]

CN114174265A - 作为c-MYC靶向剂的取代的杂环 - Google Patents

作为c-MYC靶向剂的取代的杂环 Download PDF

Info

Publication number
CN114174265A
CN114174265A CN201880099196.0A CN201880099196A CN114174265A CN 114174265 A CN114174265 A CN 114174265A CN 201880099196 A CN201880099196 A CN 201880099196A CN 114174265 A CN114174265 A CN 114174265A
Authority
CN
China
Prior art keywords
alkyl
alkoxy
aryl
halogen
hydroxy
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201880099196.0A
Other languages
English (en)
Inventor
G·E·席尔茨
R·K·米什拉
H·韩
S·A·阿卜杜勒卡迪尔
J·伊兹基尔多-费勒
A·D·杰恩
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
NORTHWEST UNIVERSITY
Original Assignee
NORTHWEST UNIVERSITY
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by NORTHWEST UNIVERSITY filed Critical NORTHWEST UNIVERSITY
Priority to CN202510602198.9A priority Critical patent/CN120842150A/zh
Publication of CN114174265A publication Critical patent/CN114174265A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D231/18—One oxygen or sulfur atom
    • C07D231/20—One oxygen atom attached in position 3 or 5
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D231/18—One oxygen or sulfur atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/12—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/26—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/32—One oxygen, sulfur or nitrogen atom
    • C07D239/42—One nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D249/04—1,2,3-Triazoles; Hydrogenated 1,2,3-triazoles
    • C07D249/06—1,2,3-Triazoles; Hydrogenated 1,2,3-triazoles with aryl radicals directly attached to ring atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D261/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings
    • C07D261/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D261/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings having two or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D261/08—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings having two or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/10—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

公开了取代的杂环化合物，包括取代的吡唑、取代的嘧啶和取代的三唑。本文公开的取代的杂环显示出可用于抑制c‑MYC并且可以用作治疗癌症和细胞增殖性疾病的治疗剂。

Description

作为c-MYC靶向剂的取代的杂环
关于联邦政府赞助的研究或开发的声明
本发明在National Institutes of Health授予的授权号R01CA123484的政府支持下完成。政府拥有本发明的某些权益。
背景
本发明的领域涉及作为c-MYC靶向剂的取代的杂环。特别地，本发明的领域涉及取代的吡唑、嘧啶或三唑作为c-MYC靶向剂，用于治疗细胞增殖性疾病和障碍，例如癌症。
c-MYC癌基因失调并且在大多数人类癌症中起因果作用，并且c-MYC抑制在多种模型中深刻影响肿瘤的生长或存活。MYC是人类癌症中最常见的癌基因，在多达一半的癌症中过表达。因此，开发c-MYC抑制剂是最具吸引力的潜在抗癌策略之一。令人遗憾地，由于难以用小分子靶向转录因子，因此c-MYC目前被认为是“不可药化的”。本文中，我们公开了一种靶向c-MYC的新方法，并开发了一系列新的小分子抑制剂。这些化合物选择性靶向c-MYC驱动的细胞增殖，并干扰c-MYC与DNA的结合。
概述
公开了可用作c-MYC靶向剂的取代的杂环。取代的杂环可包括取代的吡唑、取代的嘧啶和取代的三唑。所公开的杂环可以用于治疗细胞增殖性疾病例如癌症的药物组合物和方法中。
所公开的取代的杂环可以包括具有式I的取代的吡唑：
Figure GDA0003506612730000011
其中
R1为氢，或R1为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，任选地R1在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
n为0、1或2；
p为0或1；
X为O或NH，或R1(CH2)n(X)p-为任选地被烷基N-取代的N-哌嗪基；
m为0或1；
R2为氢或卤素，或R2为烷基、芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，任选地R2在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
R3为氢、烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、苄基、羟基、卤素、酰氨基、腙基、羰基、羧基或烷氧基羰基；
R4为氢、氨基、烷基，或R4为芳基(例如苯基)或苄基；R4任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基(例如苯氧基)和烷基芳氧基(例如苄氧基)中的一个或多个取代；
R5为烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基或卤素；
R6为氢、氨基、烷基，或R6为芳基(例如苯基)或苄基；R6任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基(例如苯氧基)和烷基芳氧基(例如苄氧基)中的一个或多个取代，或R6和R5一起形成具有式
Figure GDA0003506612730000031
的环结构；
R7为氢或卤素，或R2为烷基、芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，任选地R7在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
任选地，条件是R4和R6中的至少一个为氢；
任选地，条件是如果R5为氢，则p为1且m为1；并且
且任选地，条件是如果R1(CH2)n(X)p-为氢、羟基或烷基，且R5为羟基，则m为1，或R2和R3中的至少一个不为氢。
在公开的式I中，Pyr为具有两个不相邻双键的吡唑环，例如，其中取代的吡唑具有式I(i)或I(ii):
Figure GDA0003506612730000041
特别地，取代的吡唑可以具有式Ia(i)、Ia(ii)、Ib(i)、Ib(ii)、Ic(i)或Ic(ii):
Figure GDA0003506612730000042
所公开的化合物可以展示出一种或多种生物活性。所公开的化合物可以抑制MYC/Max复合物结合至DNA(例如在DNA凝胶位移测定(gel shifting assay)中)。所公开的化合物可以不产生明显的DNA损伤(例如以大于约0.001μM、0.005μM、0.01μM、0.1μM、1.0μM、10μM、100μM或更高的浓度在rH2AX染色测定中)。所公开的化合物可以抑制表达c-MYC的细胞的生长(优选以小于约100μM、50μM、10μM、1μM、0.1μM、0.05μM、0.01μM、0.005μM、0.001μM或更低的浓度)。所公开的化合物可以不抑制不表达c-MYC的细胞的生长(优选以大于约0.001μM、0.005μM、0.01μM、0.5μM、0.1μM、1.0μM、10μM和100μM或更高的浓度)。
还公开了包含所公开的化合物和适合的药用载体、赋形剂或稀释剂的药物组合物。所公开的药物组合物可以包含有效量的在施用于有此需要的受试者时用于抑制癌细胞生长的化合物。
还公开了用于治疗细胞增殖性疾病和障碍例如癌症的方法。该方法可以包括对有此需要的受试者例如对患有癌症的受试者施用所公开的化合物或包含所公开的化合物的药物组合物。可以将所公开的化合物或包含所公开的化合物的药物组合物与另外的治疗剂、任选地以组合的方式一起施用，以便治疗细胞增殖性疾病和障碍。由所公开的方法治疗的细胞增殖性疾病和障碍包括、但不限于癌症，其选自多发性骨髓瘤、白血病、非小细胞肺癌、结肠癌、中枢神经系统癌症、黑素瘤、卵巢癌、肾癌、前列腺癌和乳腺癌。
附图简述
图1.鉴定c-MYC抑制剂的计算机筛选(in silico screen)方案。
图2. 32种化合物的相对MYC E-盒荧光素酶抑制活性。
图3.选定命中的化合物对MYC WT和KO成纤维细胞的生长抑制。
图4.用Min9(NUCC-0176234)处理后的细胞存活率。
图5. 200μM测试化合物存在下的电泳迁移率位移测定(Electrophoreticmobility shift assay)(EMSA)。
图6.(B)200μM测试化合物的DNA结合的相对值。
图7.(C)相对MYC/Max DNA结合与化合物浓度的关系。
图8.DNA损伤的rH2AX测定。
图9.NUCC-176242与NUCC-176248的体外代谢。
图10. 5mg/kg IV给药后NUCC-176242在小鼠中的药代动力学研究。
图11.Myc抑制剂361特异性地抑制Myc依赖性细胞系PC3的增殖，但不抑制Myc非依赖性细胞系PC12的增殖。
图12.在影响细胞存活率之前Myc抑制剂361抑制作为早期事件的c-Myc转录活性。
图13.在影响细胞存活率之前Myc抑制剂361抑制作为早期事件的c-Myc转录活性。
图14.Myc抑制剂Min9-S1损伤MYC转录程序。
图15.Myc抑制剂361减小小鼠前列腺癌同种异体移植物模型中的肿瘤体积。
图16.Myc抑制剂361与免疫疗法组合显著地阻断肿瘤进程。
图17.Myc抑制剂975和031在AML小鼠异种移植物模型中显示显著的与Ara-C的协同抗肿瘤作用。
图18. 10uM单一浓度下化合物201195的NCI60的性能分析。
图19. 10uM单一浓度下化合物200975的NCI60的性能分析。
图20. 10uM单一浓度下化合物196361的NCI60的性能分析。
详细描述
使用如下举出和贯穿于本申请中的几种定义在本文中描述本发明。
除非另有指定或上下文中另有指示，否则，术语“一种(a)”、“一个(an)”和“该(the)”是指“一种或多种”。例如“一种化合物”应解释为是指“一种或多种化合物”。
如本文所用，本领域普通技术人员将理解“约”、“大约”、“基本上”和“显著地”，并且在使用它们的上下文中将在某种程度上变化。如果在给定上下文中使用它们的情况下使用这些术语对本领域普通技术人员而言尚不清楚，则“约”和“大约”表示特定术语的正负≤10％，而“基本上”和“显著地”是指该特定术语的正负>10％。
如本文所用，术语“包括”和“包含”具有与术语“含有”和“含”相同的含义，即这些后面的术语是“开放式”的过渡术语，其并不仅将权利要求限制于在这些过渡术语之后的所列举的要素。术语“由……组成”虽然被术语“包括”所涵盖，但应被解释为“封闭式的”过渡术语，其仅将权利要求限制于该过渡术语之后的所述要素。术语“基本上由...组成”虽然由在术语“包含”所涵盖，但应解释为“部分封闭式的”过渡术语，其允许在该过渡术语之后有其他要素，但唯一的前提在于这些附加要素不会对权利要求的基本和新颖特征产生实质性影响。
如本文所用，“受试者”可以与“患者”或“个体”互换使用，并且是指需要治疗的动物，其可以是人或非人的动物。
“需要治疗的受试者”可以包括患有对取代的杂环如本公开的取代的吡唑、取代的嘧啶和取代的三唑的疗法有反应的疾病、障碍或病症的受试者。例如，“需要治疗的受试者”可以包括患有细胞增殖性疾病、障碍或病症例如癌症的受试者(例如癌症，例如多发性骨髓瘤，白血病，非小细胞肺癌，结肠癌，中枢神经系统癌症，黑素瘤，卵巢癌，肾癌，前列腺癌和乳腺癌)。“需要治疗的受试者”可以包括患有与c-MYC活性相关和/或可以通过施用有效量的调节c-MYC活性的活性剂来治疗的细胞增殖性疾病、障碍或病症例如癌症的受试者。
如本文所用，措词“有效量”应指提供在需要这种治疗的大量受试者中施用药物的特定药理反应的药物剂量。即使在本领域技术人员认为这种剂量是治疗有效量的情况下，在特定情况下向特定受试者施用的药物的有效量也不始终可以有效地治疗本文所述的病症/疾病。
如本文所用，术语“调节”是指降低或抑制活性和/或增加或增强活性。例如，调节c-MYC活性可以意味着增加或增强c-MYC活性和/或减少或抑制c-MYC活性。可以施用本文公开的化合物以调节c-MYC活性。
化学实体
本文公开了新的化学实体和化学实体的用途。可以使用本领域已知的术语描述化学实体，并在下文中进一步讨论、
如本文所用，可以使用星号“*”或加号“+”来表示任何基团或取代基的连接点。
本文关注的术语“烷基”包括其所有异构形式的直链或支链烷基，例如1-12、1-10或1-6个碳原子的直链或支链基团，在本文中分别称作C1-C12烷基、C1-C10-烷基和C1-C6-烷基。
术语“亚烷基”是指烷基的二基(例如-(CH2)n-，其中n为整数，例如1至20之间的整数)。示例性的亚烷基为-CH2CH2-。
术语“卤代烷基”是指被至少一个卤素取代的烷基。例如-CH2F、-CHF2、-CF3、-CH2CF3、-CF2CF3等。
如本文所用，术语“杂烷基”是指“烷基”，其中的至少一个碳原子被杂原子(例如O、N或S原子)替代。一种类型的杂烷基为“烷氧基”。
如本文所用，术语“烯基”是指具有至少一个碳-碳双键的不饱和直链或支链烃，例如2-12、2-10或2-6个碳原子的直链或支链基团，在本文中分别称作C2-C12-烯基、C2-C10-烯基和C2-C6-烯基。
如本文所用，术语“炔基”是指具有至少一个碳-碳三键的不饱和直链或支链烃，例如2-12、2-10或2-6个碳原子的直链或支链基团，在本文中分别称作C2-C12-炔基、C2-C10-炔基和C2-C6-炔基。
术语“环烷基”是指碳原子数为3-12、3-8、4-8或4-6的一价饱和环状、双环或桥环(例如金刚烷基)烃基，例如，在本文中称作“C4-8-环烷基”，其衍生自环烷烃。除非另有说明，否则环烷基在一个或多个环位置任选地被例如烷酰基，烷氧基，烷基，卤代烷基，烯基，炔基，酰氨基，脒基，氨基，芳基，芳基烷基，叠氮基，氨基甲酸酯，碳酸酯，羧基，氰基，环烷基，酯，醚，甲酰基，卤素，卤代烷基，杂芳基，杂环基，羟基，亚氨基，酮，硝基，磷酸酯，膦酸酯基，亚膦酸酯基，硫酸酯，硫化物，磺酰氨基，磺酰基或硫代羰基取代。在某些实施方案中，环烷基未被取代，即，其为未取代的。
术语“环杂烷基”是指3-12、3-8、4-8或4-6个碳的一价饱和环状、双环或桥环烃基，其中环烷烃的至少一个碳被杂原子例如N、O和/或S替代。
术语“环烯烃”是指额外在一个或多个环键上不饱和的环烷基。
术语“部分不饱和碳环基”是指在环原子之间包含至少一个双键的一价环状烃，其中碳环基的至少一个环不是芳族的。部分不饱和碳环基可以根据环碳原子数来表征。例如，部分不饱和碳环基可包含5-14、5-12、5-8或5-6个环碳原子，且分别由此称作5-14、5-12、5-8或5-6元部分不饱和碳环基。部分不饱和碳环基可以是单环碳环，双环碳环，三环碳环，桥连碳环，螺环碳环或其他碳环系统的形式。示例性的部分不饱和碳环基包括部分不饱和环烯基和双环碳环基。除非另有说明，否则部分不饱和碳环基任选在一个或多个环位置被例如烷酰基，烷氧基，烷基，卤代烷基，烯基，炔基，酰氨基，脒基，氨基，芳基，芳基烷基，叠氮基，氨基甲酸酯，碳酸酯，羧基，氰基，环烷基，酯，醚，甲酰基，卤素，卤代烷基，杂芳基，杂环基，羟基，亚氨基，酮，硝基，磷酸酯，膦酸酯基，亚膦酸酯基，硫酸酯，硫化物，磺酰氨基，磺酰基或硫代羰基取代。在某些实施方案中，部分不饱和碳环基未被取代，即，其为未取代的。
术语“芳基”是本领域公认的，并且是指碳环芳族基团。代表性的芳基包括苯基、萘基、蒽基等。术语“芳基”包括具有两个或多个碳环的多环系统，其中两个或多个碳原子为两个相邻的环所共有(环为“稠合环”)，其中至少一个环为芳族环，且例如，另一个环可以是环烷基、环烯基、环炔基和/或芳基。除非另有说明，否则芳族环可以在一个或多个环位置被例如卤素，叠氮化物，烷基，芳烷基，烯基，炔基，环烷基，羟基，烷氧基，氨基，硝基，硫氢基，亚氨基，酰氨基，羧酸，-C(O)烷基，-CO2烷基，羰基，羧基，烷硫基，磺酰基，磺酰氨基，磺酰胺，酮，醛，酯，杂环基，芳基或杂芳基部分，-CF3，-CN等取代。在某些实施方案中，芳族环在一个或多个环位置被卤素、烷基、羟基或烷氧基取代。在某些其他实施方案中，芳族环未被取代，即，其为未取代的。在某些实施方案中，芳基为6-10元环结构。
术语“杂环基”和“杂环基团”是本领域公认的，并且是指饱和的、部分不饱和的或芳族的3-至10-元环结构，或者是3-至7-元环，其环结构包含1-4个杂原子，例如氮、氧和硫。杂环基中的环原子数可使用Cx-Cx命名法指定，其中x是指定环原子数的整数。例如，C3-C7杂环基是指含有1-4个杂原子，例如氮、氧和硫的饱和或部分不饱和的3-至7-元环结构。名称“C3-C7”表示杂环包含总计3-7个环原子，包括占据环原子位置的任何杂原子。
术语“胺”和“氨基”是本领域公知的，并且是指未取代的和取代的胺(例如单取代的胺或二取代的胺)，其中取代基可以包括例如烷基、环烷基、杂环基、烯基和芳基。
术语“烷氧基”是本领域公认的，并且是指具有与之连接的氧基团的如上所定义的烷基。代表性的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、叔丁氧基等。
“醚”是通过氧共价连接的两个烃。因此，使烷基成为醚的烷基的取代基是或类似于烷氧基的取代基例如可以用-O-烷基、-O-烯基、-O-炔基等表示。
如本文所用，术语“羰基”是指基团-C(O)-。
术语“氧代”是指二价氧原子-O-。
如本文所用，术语“甲酰氨基”是指基团-C(O)NRR'，其中R和R'可以相同或不同。例如，R和R'可以独立地为烷基、芳基、芳基烷基、环烷基、甲酰基、卤代烷基、杂芳基或杂环基。
如本文所用，术语“羧基”是指基团-COOH或其相应的盐，例如-COONa等。
如本文所用，术语“酰胺”或“酰氨基”或“酰胺基”是指形式-R1C(O)N(R2)-、-R1C(O)N(R2)R3-、-C(O)NR2R3或-C(O)NH2的基团，其中，例如R1、R2和R3各自独立地为烷氧基、烷基、烯基、炔基、酰胺、氨基、芳基、芳基烷基、氨基甲酸酯、环烷基、酯、醚、甲酰基、卤素、卤代烷基、杂芳基、杂环基、氢、羟基、酮或硝基。
本公开的化合物可包含一个或多个手性中心和/或双键，因此，作为立体异构体的形式存在，例如几何异构体、对映异构体或非对映异构体。当在本文中使用时，术语“立体异构体”由所有几何异构体、对映异构体或非对映异构体组成。取决于立体碳原子周围的取代基的构型和/或观察到的旋光性，这些化合物可以用符号“R”或“S”或“+”或“-”表示。本发明包括这些化合物的各种立体异构体及其混合物。立体异构体包括对映异构体和非对映异构体。对映异构体或非对映异构体的混合物可以用命名法命名为(±)”，但是本领域技术人员将认识到，结构可以隐含地表示手性中心。应当理解，除非另有说明，否则化学结构，例如通用化学结构的图形描述涵盖了指定化合物的所有立体异构形式。本文还关注包含对映异构体纯的化合物、基本上由其组成或由其组成的组合物，该组合物可以包含至少约50％、60％、70％、80％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的指定化合物的单一对映异构体，主要由其组成或由其组成(例如，至少约99％的指定化合物的R对映异构体)。
用于抑制C-MYC的生物活性的取代的杂环及其用途
本文公开了取代的杂环。已经证实所公开的杂环抑制c-MYC的生物活性。所公开的取代的杂环可以包括取代的吡唑、取代的嘧啶和取代的三唑。
在一些实施方案中，所公开的取代的杂环可以包括具有式I的取代的吡唑：
Figure GDA0003506612730000111
其中
R1为氢，或R1为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，任选地R1在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
n为0、1或2；
p为0或1；
X为O或NH，或R1(CH2)n(X)p-为任选地被烷基N-取代的N-哌嗪基；
m为0或1；
R2为氢或卤素，或R2为烷基、芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，R2任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
R3为氢、烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、苄基、羟基、卤素、酰氨基、腙基、羰基、羧基或烷氧基羰基；
R4为氢、氨基、烷基，或R4为芳基(例如苯基)或苄基；R4任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基(例如苯氧基)和烷基芳氧基(例如苄氧基)中的一个或多个取代；
R5为烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基或卤素；
R6为氢、氨基、烷基，或R6为芳基(例如苯基)或苄基；R6任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基(例如苯氧基)和烷基芳氧基(例如苄氧基)中的一个或多个取代，或R6和R5一起形成具有式
Figure GDA0003506612730000131
的环结构；
R7为氢或卤素，或R7为烷基、芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，R7任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
任选地，条件是R4和R6中的至少一个为氢；
任选地，条件是如果R5为氢，则p为1且m为1；并且
任选地，条件是如果R1(CH2)n(X)p-为氢、羟基或烷基，且R5为羟基，则m为1，或R2和R3中的至少一个不为氢。
在这些公开的取代的吡唑的一些实施方案中，R2和R7中的至少一个为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R2和R7任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。在所公开的化合物的一些实施方案中，m为0且R2为氢，或R7为氢。
在这些公开的取代的吡唑的一些实施方案中，R2为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R2任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；且R7为氢。
在这些公开的取代的吡唑的一些实施方案中，m为0且R2为氢；且R7为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R7任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。
在所公开的式I中，Pyr为具有两个不相邻双键的吡唑环，其中取代的吡唑具有式I(i)或I(ii):
Figure GDA0003506612730000141
特别地，取代的吡唑可以具有式Ia(i)、Ia(ii)、Ib(i)、Ib(ii)、Ic(i)或Ic(ii):
Figure GDA0003506612730000151
在一些实施方案中，所公开的取代的杂环可以包括具有式II的取代的吡唑:
Figure GDA0003506612730000152
其中
Y为C或N；
R1为氢，或R1为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，任选地R1在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
n为0、1或2；
p为0或1；
X为O或NH，或R1(CH2)n(X)p-为任选地被烷基N-取代的N-哌嗪基；
m为0或1；
R2为氢或卤素，或R2为烷基、芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，任选地R2在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
R3为氢、烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、苄基、羟基、卤素、酰氨基、腙基、羰基、羧基或烷氧基羰基；
R4为氢、氨基、烷基，或R4为芳基(例如苯基)或苄基；R4任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基(例如苯氧基)和烷基芳氧基(例如苄氧基)中的一个或多个取代；
R6为氢、氨基、烷基，或R6为芳基(例如苯基)或苄基；R6任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基(例如苯氧基)和烷基芳氧基(例如苄氧基)中的一个或多个取代；且
R7为氢或卤素，或R7为烷基、芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，R7任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
任选地，条件是R4和R6中的至少一个为氢；
任选地，条件是如果R5为氢，则p为1且m为1；并且
任选地，条件是如果R1(CH2)n(X)p-为氢、羟基或烷基，且R5为羟基，则m为1，或R2和R3中的至少一个不为氢。
在这些公开的取代的吡唑的一些实施方案中，R2和R7中的至少一个为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R2和R7任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。在所公开的化合物的一些实施方案中，m为0且R2为氢，或R7为氢。
在这些公开的取代的吡唑的一些实施方案中，R2为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R2任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；且R7为氢。
在这些公开的取代的吡唑的一些实施方案中，m为0且R2为氢；且R7为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R7任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。
特别地，取代的吡唑可以具有式IIa:
Figure GDA0003506612730000181
在一些实施方案中，所公开的取代的杂环可以包括具有式III的取代的嘧啶:
Figure GDA0003506612730000182
其中：
R1为氢，或R1为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，任选地R1在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
n为0、1或2；
p为0或1；
X为O、NH，或R1(CH2)n(X)p-为任选地被烷基N-取代的N-哌嗪基；
m为0或1；
R2为氢或卤素，或R2为烷基、芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，任选地R2在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
R4为氢、氨基、烷基，或R4为芳基(例如苯基)或苄基；R4任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基(例如苯氧基)和烷基芳氧基(例如苄氧基)中的一个或多个取代；
R5为烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基或卤素；且
R7为氢或卤素，或R7为烷基、芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，R7任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。
在这些公开的取代的嘧啶的一些实施方案中，R2和R7中的至少一个为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R2和R7任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。在所公开的化合物的一些实施方案中，m为0且R2为氢，或R7为氢。
在这些公开的取代的嘧啶的一些实施方案中，R2为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R2任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；且R7为氢。
在这些公开的取代的嘧啶的一些实施方案中，m为0且R2为氢；且R7为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R7任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。
特别地，取代的嘧啶可以具有式IIIa或IIIb:
Figure GDA0003506612730000211
在一些实施方案中，所公开的取代的杂环可以包括具有式IV的取代的吡唑:
Figure GDA0003506612730000212
其中：
R1为氢，或R1为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，任选地R1在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
n为0、1或2；
p为0或1；
X为O、NH，或R1(CH2)n(X)p-为任选地被烷基N-取代的N-哌嗪基；
Y为N或C；
Z为N或C；
m为0或1；
R2为氢或卤素，或R2为烷基、芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，任选地R2在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
R4为氢、氨基、烷基，或R4为芳基(例如苯基)或苄基；R4任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基(例如苯氧基)和烷基芳氧基(例如苄氧基)中的一个或多个取代；
R5为烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基或卤素；且
R7为氢或卤素，或R7为烷基、芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，任选地R7在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。
在这些公开的取代的吡唑的一些实施方案中，R2和R7中的至少一个为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R2和R7任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。在所公开的化合物的一些实施方案中，m为0且R2为氢，或R7为氢。
在这些公开的取代的吡唑的一些实施方案中，R2为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R2任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；且R7为氢。
在这些公开的取代的吡唑的一些实施方案中，m为0且R2为氢；且R7为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R7任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。
在一些实施方案中，所公开的取代的杂环可以包括具有式V的取代的三唑:
Figure GDA0003506612730000231
其中：
R1为氢，或R1为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，任选地R1在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
n为0、1或2；
p为0或1；
X为O或NH，或R1(CH2)n(X)p-为任选地被烷基N-取代的N-哌嗪基；
m为0或1；
R2为氢或卤素，或R2为烷基、芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，任选地R2在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
R5为烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基或卤素；且
R7为氢或卤素，或R7为烷基、芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，任选地R7在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。
在这些公开的取代的三唑的一些实施方案中，R2和R7中的至少一个为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R2和R7任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。在所公开的化合物的一些实施方案中，m为0且R2为氢，或R7为氢。
在这些公开的取代的三唑的一些实施方案中，R2为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R2任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；且R7为氢。
在这些公开的取代的三唑的一些实施方案中，m为0且R2为氢；且R7为芳基(例如苯基)、苄基、杂芳基(例如N-吡啶基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡唑-1-基、吡唑-3-基、吡唑-4-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-5-基、1,3-苯并间二氧杂环戊烯-6-基、呋喃-2-基、呋喃-3-基)、环烷基(例如环己基)、环杂烷基(例如哌啶基、吗啉基)，且R7任选地在一个或多个位置上被烷基(例如C1-C6烷基)、烷氧基(例如C1-C6烷氧基)、卤代烷基(例如三氟甲基)、卤代烷氧基(例如三氟甲氧基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。
本文公开的化合物的通式应解释为涵盖化合物的所有可能的立体异构体、对映异构体或差向异构体，该通式指示特定的立体异构体、对映异构体或差向异构体的情况除外。本文公开的化合物的通式应解释为包括该化合物的盐、酯、酰胺或溶剂合物。
所公开的抑制C-MYC活性的化合物的用途
所公开的化合物可以表现出一种或多种生物学活性。所公开的化合物可以抑制MYC/Max复合物与DNA的结合(例如在DNA凝胶迁移测定中)。在一些实施方案中，所公开的化合物在低于约100μM、50μM、10μM、1μM、0.1μM、0.05μM、0.01μM、0.005μM、0.001μM或更低的浓度下将MYC/Max复合物与DNA的结合抑制至少50％、60％、70％、80％、90％、95％、96％、97％、98％或99％。所公开的化合物可以不产生明显的DNA损伤(例如，在浓度大于0.001μM、0.005μM、0.01μM、0.1μM、1.0μM、10μM、100μM或更高的rH2AX染色测定中)。所公开的化合物可以抑制表达c-MYC的细胞的生长(优选在低于约100μM、50μM、10μM、1μM、0.1μM、0.05μM、0.01μM、0.005μM、0.001μM或更低的浓度下至少50％、60％、70％、80％、90％、95％、96％、97％、98％或99％)。所公开的化合物可以不抑制不表达c-MYC的细胞的生长(优选在大于约0.001μM、0.005μM、0.01μM、0.5μM、0.1μM、1.0μM、10μM和100μM或更高的浓度下不超过50％、40％、30％、20％、10％、5％、4％、3％、2％或更低)。本文也关注浓度范围，例如，以选自0.001μM、0.005μM、0.01μM、0.5μM、0.1μM、1.0μM、10μM和100μM的端点浓度限定的浓度范围。
所公开的化合物可有效抑制癌细胞的细胞增殖，所述癌细胞包括表达c-MYC且其增殖通过抑制c-MYC的生物学活性而被抑制的癌细胞。所公开的化合物可以有效地抑制一种或多种类型的癌细胞的细胞增殖，所述癌细胞包括：多发性骨髓瘤细胞，例如MM.1S细胞；白血病细胞，例如CCRF-CEM、HL-60(TB)、MOLT-4、RPMI-8226和SR；非小细胞肺癌细胞，例如A549/ATCC、EKVX、HOP-62、HOP-92、NCI-H226、NCI-H23、NCI-H322M、NCI-H460和NCI-H522；结肠癌细胞，例如COLO 205、HCC-2998、HCT-116、HCT-15、HT29、KM12和SW-620；CNS；SF-268、SF-295、SF-539、SNB-19、SNB-75和U251；黑素瘤癌细胞，例如LOX IMVI、MALME-3M、M14、MDA-MB-435、SK-MEL-2、SK-MEL-28、SK-MEL-5、UACC-257和UACC-62；卵巢癌细胞例如IGR-OV1、OVCAR-3、OVCAR-4、OVCAR-5、OVCAR-8、NCI/ADR-RES和SK-OV-3；肾癌细胞，例如786-0、A498、ACHN、CAKI-1、RXF 393、SN12C、TK-10和UO-31；前列腺癌细胞，例如DU-145和PC-3；和乳腺癌细胞，例如MCF7、MDA-MB-231/ATCC、MDA-MB-468、HS 578T、BT-549和T-47D。
可以通过本领域公开的细胞存活率方法，包括利用染料例如MTT、XTT和MTS评估细胞存活率的比色测定法，评估本公开的化合物对细胞的增殖及其抑制作用。优选地，在所选择的测定中，所公开的化合物具有10μM、5μM、1μM、0.5μM、0.01μM、0.005μM、0.001μM或以下的IC50。
可以将所公开的化合物配制成抗癌治疗剂，包括血液系统恶性肿瘤，乳腺，肺，胰腺和前列腺的恶性肿瘤。也可以将所公开的化合物配制成抗炎治疗剂。
可以将本文公开的方法中使用的化合物配制成药物组合物，其包括：(a)治疗有效量的一种或多种本文公开的化合物；和(b)一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂。该药物组合物可以包含约0.1至2000mg(优选约0.5至500mg、更优选约1至100mg)的化合物。可以施用所述药物组合物以便提供0.1至约1000mg/kg体重(优选约0.5至约500mg/kg体重，更优选约50至约100mg/kg体重)的每日剂量。在一些实施方案中，在将药物组合物施用于受试者后(例如，在施用后约1、2、3、4、5或6小时后)，作用部位的化合物浓度可以在端点所限定的浓度范围内，所述端点选自0.001μM、0.005μM、0.01μM、0.5μM、0.1μM、1.0μM、10μM和100μM(例如0.1μM至1.0μM)。
所公开的化合物和包含所公开的化合物的药物组合物可以在有此需要的受试者的治疗方法中施用。例如，在治疗方法中，有此需要的受试者可以包括患有细胞增殖性疾病、障碍或病症的受试者，例如癌症(例如多发性骨髓瘤，白血病，非小细胞肺癌，结肠癌，中枢神经系统癌症，黑素瘤，卵巢癌，肾癌，前列腺癌和乳腺癌)。
在所公开的治疗方法的一些实施方案中，可以给受试者施用低至如下剂量的化合物：1.25mg、2.5mg、5mg、7.5mg、10mg、12.5mg、15mg、17.5mg、20mg、22.5mg、25mg、27.5mg、30mg、32.5mg、35mg、37.5mg、40mg、42.5mg、45mg、47.5mg、50mg、52.5mg、55mg、57.5mg、60mg、62.5mg、65mg、67.5mg、70mg、72.5mg、75mg、77.5mg、80mg、82.5mg、85mg、87.5mg、90mg、100mg、200mg、500mg、1000mg或2000mg，每日1次，每日2次，每日3次，每日4次，每周1次，每周2次或每周3次，以便治疗受试者的疾病或障碍。在一些实施方案中，给受试者施用高至如下剂量的化合物：1.25mg、2.5mg、5mg、7.5mg、10mg、12.5mg、15mg、17.5mg、20mg、22.5mg、25mg、27.5mg、30mg、32.5mg、35mg、37.5mg、40mg、42.5mg、45mg、47.5mg、50mg、52.5mg、55mg、57.5mg、60mg、62.5mg、65mg、67.5mg、70mg、72.5mg、75mg、77.5mg、80mg、82.5mg、85mg、87.5mg、90mg、100mg、200mg、500mg、1000mg或2000mg，每日1次，每日2次，每日3次，每日4次，每周1次，每周2次或每周3次，以便治疗受试者的疾病或障碍。化合物的最低和/或最高剂量可以包括落入具有这些所公开的剂量的任一个作为端点的剂量范围内的剂量(例如2.5mg-200mg)。
在一些实施方案中，用于在所公开的治疗方法中实现疗法的最低剂量水平可以为至少约10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000、1200、1400、1600、1800、1900、2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000、15000或20000ng/kg体重受试者。在一些实施方案中，用于在所公开的治疗方法中实现疗法的最高剂量水平可以为不超过约10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000、1200、1400、1600、1800、1900、2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000、15000或20000ng/kg体重受试者。用于在所公开的治疗方法中实现疗法的最低和/或最高剂量水平可以包括落入具有这些所公开的剂量水平的任一个作为端点的剂量范围内的剂量水平(例如500-2000ng/kg体重受试者)。
尽管可以使用任何药学上可接受的剂型，但是可以将本文公开的方法中使用的化合物配制成固体剂型的药物组合物。示例性固体剂型包括、但不限于片剂，胶囊剂，香囊剂，锭剂，粉剂，丸剂或颗粒剂，并且固体剂型可以是例如速熔剂型，控释剂型，冻干剂型，延迟释放剂型，延长释放剂型，搏动释放剂型，混合速释和控释剂型或其组合。
可以将本文公开的方法中使用的化合物配制成包括载体的药物组合物。例如，载体可以选自蛋白质，碳水化合物，糖，滑石粉，硬脂酸镁，纤维素，碳酸钙和淀粉-明胶糊。
可以将本文公开的方法中使用的化合物，其包括一种或多种粘合剂，填充剂，润滑剂，助悬剂，甜味剂，矫味剂，防腐剂，缓冲剂，湿润剂，崩解剂和泡腾剂。填充剂可以包括乳糖一水合物，无水乳糖和各种淀粉；粘合剂的实例为各种纤维素和交联的聚乙烯吡咯烷酮，微晶纤维素，例如
Figure GDA0003506612730000291
PH101和
Figure GDA0003506612730000292
PH102，微晶纤维素和硅化微晶纤维素(ProSolv SMCCTM)。适合的润滑剂，包括影响待压缩粉末的流动性的试剂，可以包括胶体二氧化硅，例如
Figure GDA0003506612730000293
200，滑石粉，硬脂酸，硬脂酸镁，硬脂酸钙和硅胶。甜味剂的实例可包括任何天然或人工甜味剂，例如蔗糖，木糖醇，糖精钠，环氨酸盐，阿司帕坦和乙酰泛舒(acsulfame)。矫味剂的实例为
Figure GDA0003506612730000294
(商标(MAFCO的商标)，泡泡糖矫味剂和水果香精等。防腐剂的实例可以包括山梨酸钾，对羟基苯甲酸甲酯，对羟基苯甲酸丙酯，苯甲酸及其盐，对羟基苯甲酸的其他酯(例如对羟基苯甲酸丁酯)，醇(例如乙醇或苄醇)，酚类化合物(例如苯酚)或季铵化合物(例如苯扎氯铵)。
适合的稀释剂可包括药学上可接受的惰性填充剂，例如微晶纤维素，乳糖，磷酸氢钙，糖和前述任何一种的混合物。稀释剂的实例包括微晶纤维素，例如
Figure GDA0003506612730000301
PH101和
Figure GDA0003506612730000302
PH1022；乳糖，例如一水合乳糖，无水乳糖和
Figure GDA0003506612730000303
DCL21；磷酸氢钙，如
Figure GDA0003506612730000304
甘露糖醇；淀粉；山梨醇；蔗糖；和葡萄糖。
适合的崩解剂包括轻度交联的聚乙烯吡咯烷酮，玉米淀粉，马铃薯淀粉，玉米淀粉和改性淀粉，交联羧甲基纤维素钠，交联聚维酮，羟乙酸淀粉钠及其混合物。
泡腾剂的实例是泡腾对，例如有机酸和碳酸盐或碳酸氢盐。适合的有机酸包括例如柠檬酸，酒石酸，苹果酸，富马酸，己二酸，琥珀酸和藻酸以及酸酐和酸盐。适合的碳酸盐和碳酸氢盐包括，例如碳酸钠，碳酸氢钠，碳酸钾，碳酸氢钾，碳酸镁，甘氨酸碳酸钠，L-赖氨酸碳酸盐和精氨酸碳酸盐。或者，可以仅存在泡腾对的碳酸氢钠成分。
可以将本文公开的方法中使用的化合物配制成用于通过任何适合的途径递送的药物组合物。例如，可以通过口服，静脉内，肌内，皮下，局部和肺途径施用药物组合物。用于口服施用的药物组合物的实例包括胶囊剂，糖浆剂，浓缩剂，粉末和颗粒剂。在一些实施方案中，将化合物配制成用于口服施用的组合物(例如在溶剂如5％DMSO，在油如植物油中)。
本文公开的方法中使用的化合物可以以常规剂型施用，所述常规剂型根据本领域公知的常规方法通过将活性成分与标准药物载体或稀释剂混合而制备。这些方法可以牵涉将成分适当地混合，制粒，压制或溶解成期望的制剂。
包含所述化合物的药物组合物可以适于通过任何适合的途径施用，例如通过口服(包括口含或舌下)，直肠，鼻，局部(包括口含，舌下或经皮)，阴道或肠胃外(包括皮下，肌内，静脉内或皮内)途径。这样的制剂可以通过药学领域已知的任何方法制备，例如通过将活性成分与载体或赋形剂混合。
适用于口服施用的药物组合物可以离散单位存在，例如胶囊或片剂；粉末或颗粒；在水性或非水性液体中的溶液或悬浮液；可食用的泡沫或汁液(whip)；或水包油型液体乳剂或油包水型液体乳剂。
适用于透皮施用的药物组合物可以作为离散的贴剂存在，意在与接受者的表皮保持紧密接触一段延长的时间期限。例如，活性成分可以通过离子电渗疗法从贴剂中递送。
可以将适用于局部施用的药物组合物配制成软膏剂，乳膏剂，混悬剂，洗剂，粉末，溶液剂，糊剂，凝胶剂，浸渍敷料，喷雾剂，气雾剂或油剂，并且可以含有适当的常规添加剂，例如防腐剂，辅助药物渗透的溶剂和软膏和乳膏中的润肤剂。
为了施用于眼或其他外部组织，例如口腔和皮肤，药物组合物优选以局部软膏剂或乳膏剂形式施用。当配制成软膏剂时，该化合物可与石蜡或与水混溶的软膏剂基质一起使用。或者，可以将化合物与水包油型乳膏基质或油包水型基质一起配制成乳膏剂。适于局部施用于眼的药物组合物包括滴眼液，其中活性成分溶解或悬浮在适合的载体中，尤其是水性溶剂中。
当载体为固体时，适合于鼻腔施用的药物组合物包括具有一定粒径(例如在20-500微米)的粗粉，该粗粉以其中采取鼻烟的方式施用(即通过从靠近鼻部的粉末容器经鼻通道快速吸入)。如果载体为液体，则以鼻喷雾剂或滴鼻剂形式施用的适合制剂包括活性成分的水溶液或油溶液。
适用于肠胃外施用的药物组合物包括：水性和非水性无菌注射溶液，其可以包含抗氧化剂，缓冲剂，抑菌剂和溶质，其使制剂与预期接受者的血液等渗；水性和非水性无菌悬浮液，其可以包括助悬剂和增稠剂。所述制剂可以存在于单位剂量或多剂量容器中，例如密封的安瓿和小瓶，并且可以储存在冷冻干燥(冻干)条件下，仅需在使用前即刻添加无菌液体载体例如注射用水。临时注射溶液和悬浮液可以由无菌粉末、颗粒和片剂制备。
口服施用的片剂和胶囊剂可以为单位剂量呈递形式，并且可以包含常规赋形剂，例如粘合剂，例如糖浆，阿拉伯胶，明胶，山梨醇，黄蓍胶或聚乙烯吡咯烷酮；填充剂，例如乳糖，糖，玉米淀粉，磷酸钙，山梨醇或甘氨酸；压片润滑剂，例如硬脂酸镁，滑石粉，聚乙二醇或二氧化硅；崩解剂，例如马铃薯淀粉；或可接受的润湿剂，例如十二烷基硫酸钠。可以根据常规制药实践中众所周知的方法将片剂包衣。口服液体制剂可以为例如水性或油性悬浮液，溶液，乳剂，糖浆或酏剂的形式，或者可以作为干燥产品存在，以在使用前用水或其他适合的载体重构。此类液体制剂可包含常规添加剂，例如助悬剂，例如山梨醇，甲基纤维素，葡萄糖浆，明胶，羟乙基纤维素，羧甲基纤维素，硬脂酸铝凝胶或氢化食用脂肪，乳化剂，例如卵磷脂，脱水山梨醇单油酸酯或阿拉伯胶；非水媒介物(可以包括食用油)，例如杏仁油，油酯，如甘油，丙二醇或乙醇；防腐剂，例如，对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸，且如果期望，还有常规的矫味剂或着色剂。
联合疗法和药物组合物
可以在治疗方法中施用所公开的化合物或包含所公开的化合物的药物组合物。例如，可以在治疗细胞增殖性疾病和障碍的方法中施用所公开的化合物或包含所公开的化合物的药物组合物。通过公开的方法治疗的细胞增生性疾病和障碍可以包括、但不限于选自以下的癌症：多发性骨髓瘤，白血病，非小细胞肺癌，结肠癌，中枢神经系统癌症，黑素瘤，卵巢癌，肾癌，前列腺癌和乳腺癌。
任选地，可以将所公开的化合物或包含所公开的化合物的药物组合物与另外的治疗剂(任选地组合)一起施用，以便治疗细胞增生性疾病和病症。在所公开方法的一些实施方案中，一种或多种另外的治疗剂与所公开的化合物或包含所公开的化合物的药物组合物一起施用，其中另外的治疗剂在施用所公开的化合物或包含所公开的化合物的药物组合物之前、与之同时或之后施用。在一些实施方案中，将所公开的药物组合物配制为包含所公开的化合物，并且进一步包含一种或多种其他治疗剂，例如，一种或多种用于治疗细胞增生性疾病和障碍的其他治疗剂。
在一些实施方案中，其他治疗剂可包括、但不限于用于治疗白血病和淋巴瘤的治疗剂，例如急性髓性白血病(AML)，急性淋巴细胞白血病(ALL)，慢性髓性白血病(CML)和非霍奇金淋巴瘤。
在一些实施方案中，其他治疗剂可包括、但不限于抑制DNA合成的抗代谢抗肿瘤药。抑制DNA合成的适合的抗代谢抗肿瘤药可以包括、但不限于核苷和/或核苷酸衍生物。适合的核苷和/或核苷酸衍生物可以包括、但不限于胞嘧啶阿拉伯糖苷(ara-C)，否则称为阿糖胞苷。
实施例
下列实施例为示例性的，而不预期用于限制要求保护的主题的范围。
实施例1-C-MYC DNA结合活性的小分子抑制剂的鉴定
引言
MYC是人类癌症中最频繁扩增的癌基因。在许多肿瘤组织学中，它已被广泛验证为对于肿瘤起始和维持是必不可少的。许多研究已经提供了确凿的证据，证明MYC的药理靶向作用将直接影响肿瘤的进展。一种实例为OmoMYC，其为MYC的显性阴性肽，其以防止MYC-Max异二聚化的方式竞争性结合MYC。OmoMYC表达在体外和体内都提示癌细胞中MYC靶基因的快速生长停滞和下调。MYC的小分子抑制剂将是药物开发的最佳形式。但是，通过小分子破坏MYC-Max相互作用是困难的，因为在界面中没有明显的结合区域。迄今为止，已经记录30多种小分子在体外具有MYC抑制活性，但缺乏其体内活性的证据，可能是由于它们的药物类性质较差所致。在这些化合物中，10058-f4和10075-G5因其特异性而众所周知，并且在中断MYC-Max结合方面机制相对较明确。但是，体内研究由于它们的新陈代谢很快而十分令人失望。因此，开发具有高效力和特异性以及良好的药物类特性的新型MYC抑制剂对于有效靶向MYC至关重要。
为此，我们进行了计算机筛选，以鉴定可能抑制c-MYC与DNA结合的化合物。将这些化合物在几种基于细胞的测定法中进行了测试，以确定最具有活性的命中目标。经证实，命中率最高的Min-9(NUCC-176234)及其相关类似物可防止c-MYC/DNA结合。然后，我们合成了一系列新颖的结构类似物，并在相同的c-MYC相关测定中进行了测试。我们的新化合物在抑制c-MYC/DNA结合方面显示出卓越的效能。我们使用新方法开发的化合物比现有的小分子(例如10058-f4)具有明显改善的药物类特性，因此代表了开发靶向MYC的治疗剂的极佳起点。
结果
在c-MYC/Max/DNA三元复合物中不存在规则的小分子配体结合袋的情况下，我们应用了多种独立的计算机方法，以增加我们成功鉴定新的小分子抑制剂的可能性。(参见图1)。我们对一千万个药物类文库进行了计算机筛选。在使用PAINS过滤器除去混杂的和非药物类的化合物后，我们应用了两种不同的方法来筛选ZINC化合物数据库。第一种方法基于三层对接协议，该协议使用已发布的与DNA结合的MYC/Max晶体结构。在定义了文献报道的假定的配体结合位点后，使用对接工具筛选化合物文库。第二种方法基于建立药效团模型，考虑到据报道抑制MYC的32种化合物，并针对该药效团筛选Zinc数据库。我们从基于结构的筛选中获得了69个命中结果，并且从基于配体的药效团筛选中获得了60个命中结果，这两种方法之间共有32种化合物。
为了测试化合物，我们在MYC E-Box荧光素酶报道分子测定中评估了计算机模拟命中记录，以确定这些化合物(称作Min-1至Min-32)对MYC转录活性的影响。如图2所示，与25μM的阳性对照10058-F4相比，约有10种化合物具有相似或更好的活性。(参见图2)。
我们接下来检查了化合物相对于具有MYC敲除的细胞选择性抑制表达MYC的野生型细胞的增殖的能力。我们在第一次筛选试验中测试了前13种活性化合物。图3显示了每种化合物以最大选择性对野生型和MYC敲除大鼠成纤维细胞的生长抑制示意图。与MYC KO细胞相比，超过一半的测试化合物对MYC WT表现出更好的生长抑制作用。Min9-S7(NUCC-0176248)由于其低有效浓度(6μM)和高特异性而非常富有前途。Min9-S9(NUCC-0176250)在可接受的剂量(50μM)下也显示出显著的选择性。
将Min9(NUCC-0176234)也已在针对cMYC野生型(WT)和cMYC KO品系的细胞存活率分析中进行了测试。如图4所示，该化合物在WT品系中的细胞存活率比KO细胞降低得多，这表明与cMYC直接相关的机制。
我们还在电泳迁移率位移测定(EMSA)中测试了最佳命中的化合物Min9(NUCC-0176234)和新合成的类似物的这些化合物对MYC/Max与DNA结合的影响。(参见图5a和图5b)。我们预期活性化合物会损害MYC/Max与DNA的结合。在多次剂量下测试了Min9的几种结构类似物对MYC-DNA结合的抑制作用，并且我们观察到了剂量依赖性抑制作用。(参见图5c)。
还在rH2AX染色测定中测试了Min9(NUCC-0176234)引起DNA损伤的能力。我们不期望cMYC靶向剂产生明显的DNA损伤。但是直接作用于DNA的化合物(例如多柔比星)的作用确实存在。我们观察到基本上没有Min9(NUCC-0176234)引起的DNA损伤。(参见图6)。
使用小鼠肝微粒体和小鼠S9级分测试了NUCC-176242和NUCC-176248的体外代谢。(参见图9)。根据小鼠S9级分与NUCC-176248的比较，NUCC-176242具有明显的新陈代谢，这可能是由于S9在吡唑环的N-1氮原子上缀合所致。
通过在小鼠中静脉内施用5mg/kg的剂量并测量血浆浓度随时间的变化，研究了NUCC-176242和NUCC-176248的药代动力学。(参见图10)。观察到的NUCC-176242和NUCC-176248的体内代谢与上文测试的NUCC-176242和NUCC-176248的体外代谢高度相关。
化学
一般实验.除非另有说明，否则所有化学试剂均购自商业供应商，且无需进一步纯化即可使用。无水溶剂购自Sigma-Aldrich，必要时用
Figure GDA0003506612730000361
分子筛干燥。DCM和THF通过活性氧化铝床纯化。使用Biotage Isolera快速纯化系统，使用Biotage KP-Sil 50μm硅胶柱和ACS级溶剂进行正相快速柱色谱。在EM Reagent 0.25mm硅胶60F254板上进行分析型薄层色谱(TLC)，并通过UV光或碘蒸气显色。使用Waters Acquity-H UPLC系统与2.1mm×50mm、1.7μm反相BEH C18柱和LCMS级溶剂进行液相色谱/质谱分析(LCMS)。在2分钟内从95％水+0.1％甲酸/5％乙腈+0.1％甲酸到95％乙腈+0.1％甲酸/5％水+0.1％甲酸的梯度洗脱，再对该混合物以0.85mL/min流速持续进行1分钟作为洗脱液。得到电喷雾正电离和负电离(ESI+/ESI-)的总离子流迹线。质子(1H)和碳(13C)NMR光谱使用Bruker Avance III w/直接冷冻探头光谱仪记录。化学位移以ppm(δ)报告，并使用残留的非氘代溶剂作为内标进行参比。将1H NMR和13C NMR的化学位移报告至小数点后第二位。质子耦合常数以赫兹(Hz)表示。以下缩写用于表示质子NMR的自旋多重性：s＝单峰，d＝双峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰，brs＝宽单峰，dd＝双联双峰，dt＝双联三重峰，quin＝五重峰，tt＝三联三重峰。在某些情况下，13C NMR光谱中会出现重叠信号。
一般合成方法的有代表性的实例
A.合成方法A
合成方法A
Figure GDA0003506612730000371
步骤1.向苯酚(1当量)在100mL丙酮中的溶液中加入溴乙腈(1当量)，然后加入碳酸钾(1.5当量)。然后将该溶液在60℃搅拌4.5h。通过添加30mL NaHCO3水溶液和水使反应停止，用EtOAc(3x30mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。然后减压除去溶剂，通过硅胶色谱法纯化残余物。
步骤2.向冷冰浴中乙腈-苯氧基中间体(1当量)在6.5mL苯中的溶液(1M溶液)中滴加HCL的二噁烷溶液(10当量)。将得到的溶液搅拌1h，然后缓慢地加入在10mL乙醚中的间苯二酚(1当量)和ZnCl2(1当量)。将得到的溶液从0℃搅拌至RT 16h。离心得到的悬浮液，分离固体。用水洗涤固体，真空干燥。
步骤3.将O-苯氧基-苯乙酮(1mmol)与TFFA(5当量)和吡啶(5当量)的悬浮液在120℃加热4h。然后冷却至r.t.。在某些情况下，沉淀产物，在另外的情况下，加入水，然后用EtOAc(3x10mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用Na2SO4干燥，过滤，浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物。
步骤4.将苯氧基-色烯酮(1当量)、K2CO3(2当量)和卤代烷(1.1当量)在5mL丙酮(0.8M)中的悬浮液在60℃加热16h。通过漏斗过滤该反应体系，减压除去溶剂。将粗产物与水一起研磨，减压干燥至干。
步骤5.将上述苯氧基-色烯酮(1当量)与期望的肼(3当量)在2mL EtOH(0.1M)中的溶液在70℃加热45分钟。将该溶液冷却至室温，浓缩。直接通过硅胶色谱法纯化固体(正己烷/乙酸乙酯＝5:1-1:1)，得到期望的吡唑。
实例
NUCC-200683：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.81(dd，J＝7.9，1.6Hz，1H)，7.18(td，J＝7.7，1.6Hz，1H)，7.10-7.02(m，2H)，6.92-6.86(m，2H)，6.86-6.79(m，2H)，2.56(q，J＝7.6Hz，2H)，1.17(t，J＝7.6Hz，3H)ppm。
NUCC-198411：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.00-6.92(m，3H)，6.80-6.68(m，2H)，6.44-6.38(m，1H)，6.32(d，J＝8.4Hz，1H)，2.52(q，J＝7.8Hz，2H)，1.13(t，J＝7.4Hz，3H)ppm。
NUCC-198406：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.64(d，J＝8.6Hz，1H)，7.06(d，J＝8.6Hz，2H)，6.82(d，J＝8.6Hz，2H)，6.41(d，J＝2.4Hz，1H)，6.33(dd，J＝8.6，2.4Hz，1H)，2.56(q，J＝7.5Hz，2H)，1.17(t，J＝7.7Hz，3H)ppm。
NUCC-196355：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.69(d，J＝8.7Hz，1H)，7.47(d，J＝2.0Hz，1H)，7.42(d，J＝8.3Hz，1H)，7.19(dd，J＝8.3，2.0Hz，1H)，7.07(d，J＝8.7Hz，2H)，6.86-6.76(m，2H)，6.48(d，J＝13.3Hz，2H)，4.95(s，2H)，2.57(q，J＝7.6Hz，2H)，1.18(t，J＝7.6Hz，3H)ppm。
NUCC-196342：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.69(d，J＝8.8Hz，1H)，7.43(dd，J＝7.7，1.5Hz，1H)，7.35-7.27(m，4H)，7.06(ddd，J＝8.3，7.7，1.6Hz，1H)，6.96(td，J＝7.6，1.4Hz，1H)，6.65(dd，J＝8.3，1.5Hz，1H)，6.50(d，J＝14.5Hz，2H)，4.97(s，2H)ppm。
NUCC-196295：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.70(d，J＝8.7Hz，1H)，7.37(s，1H)，7.28(dd，J＝5.4，1.2Hz，2H)，7.07(d，J＝8.7Hz，2H)，6.86-6.79(m，2H)，6.50(s，2H)，4.98(s，2H)，2.57(q，J＝7.6Hz，1H)，1.18(t，J＝7.6Hz，2H)ppm。
B.合成方法B
合成方法B
Figure GDA0003506612730000391
步骤1.向置于高压试管中的1-(2,4-二羟基苯基)乙-1-酮(5.00g，32.89mmol，1当量)在三氟乙酐(18.50mL，131,56mmol，4当量)中的悬浮液中加入2,2,2-三氟乙酸钠(9.84g，72.36mmol，2.2当量)，封盖该体系，在110℃搅拌24h。将该反应体系冷却至约70℃，然后用200mL EtOAc稀释。通过添加饱和K2CO3水溶液中和该混合物至不再观察到起泡。分离各层，再用EtOAc(3x150mL)萃取水相。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。然后将该溶液浓缩至100-150mL EtOAc。然后中室温封盖烧瓶1-2天，得到固体，过滤，真空干燥，得到4.09g纯的1，为白色固体，54％收率。
然后向得到的固体(4g，17.31mmol，1当量)和碘(17.57g，69.24mmol，4当量)在110mL CHCl3中的溶液中加入吡啶(5.59mL，69.24mmol，4当量)。将得到的溶液在室温搅拌16h。然后加入120mL饱和Na2S2O3水溶液，将得到的混合物搅拌1小时。分离有机层，用CH2Cl2(3x100mL)萃取水相。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。然后减压除去溶剂，将残余物与乙醚一起研磨几次，得到黄白色固体，90％收率(5.55g，15.60mmol)：mp 205-206℃。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.11(dd，J＝8.9，1.0Hz，1H)，7.15(dd，J＝8.9，1.0Hz，1H)，6.77-6.69(m，1H)，6.36(s，1H)ppm。13C NMR(126MHz，CDCl3)δ175.8，161.5，156.0，152.5(q，2J＝39.1Hz)，128.1，119.0，118.6(q，1J＝272.2Hz)，117.5，114.7，110.9ppm。LRMS(EI)：质量计算值C10H5F3IO3+[M+H]+＝356.9，测定值＝357.1。
步骤2.将7-羟基-3-碘-2-(三氟甲基)-4H-色烯-4-酮(1g，2.8mmol，1当量)、卤代烷(3.4mmol，1.2当量)和K2CO3(0.77g，5.6mmol，2当量)在5mL丙酮中的悬浮液在60℃加热16h。通过漏斗过滤该反应体系，减压除去溶剂。将粗产物与水一起研磨，减压干燥至干。
步骤3.用氮气使上述烷基化色烯酮(0.34mmol，1当量)与相应的硼酸(0.37mmol，1.1当量)、Na2CO3(0.68mmol，2当量)和Pd(dppf)Cl2(0.026mmol，0.08当量)在3.5mL 1:2:6EtOH:水:甲苯的混合物中的悬浮液起泡10分钟。然后覆盖烧瓶，将该混合物在90℃加热2h。将深色溶液冷却至室温，用EtOAc稀释。分离有机层，用EtOAc(3x3mL)萃取水相。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。然后减压除去溶剂，通过硅胶色谱法纯化残余物。
步骤4.将上述色烯酮(0.2mmol，1当量)与期望的肼(0.6mmol，3当量)在2mL EtOH中的溶液在70℃加热45分钟。将该溶液冷却至室温，浓缩。通过硅胶色谱法直接纯化固体产物(正己烷/乙酸乙酯＝5:1-1:1)，得到期望的吡唑。
实例
NUCC-201634：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.75(d，J＝2.2Hz，1H)，7.58(dd，J＝15.0，8.5Hz，2H)，7.52(dd，J＝8.5，2.2Hz，1H)，6.87(s，1H)，6.65(d，J＝8.8Hz，1H)，3.97(t，J＝6.5Hz，2H)，1.63-1.47(m，5H)，0.84(d，J＝6.5Hz，6H)ppm。
NUCC-201632：1H NMR(500MHz，MeOH-d4)δ8.82(d，J＝2.1Hz，1H)，8.77(d，J＝2.1Hz，1H)，8.13(t，J＝2.1Hz，1H)，7.33-7.25(m，2H)，7.23(d，J＝8.6Hz，1H)，7.20-7.14(m，2H)，6.77(d，J＝8.6Hz，1H)，6.56(s，1H)，5.08(s，2H)，3.80(s，3H)ppm。
NUCC-201227：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.59(s，1H)，7.80(d，J＝2.1Hz，1H)，7.57(dd，J＝8.2，2.1Hz，1H)，7.51(d，J＝8.2Hz，1H)，7.47(d，J＝8.7Hz，1H)，6.90(s，1H)，6.58(d，J＝8.7Hz，1H)，3.97(s，3H)，3.94(t，J＝6.3Hz，2H)，1.61(dq，J＝7.9，6.4Hz，2H)，1.33(h，J＝7.5Hz，2H)，0.87(t，J＝7.4Hz，3H)ppm。
NUCC-201226：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.75(d，J＝2.1Hz，1H)，7.59(d，J＝8.3Hz，1H)，7.50(dd，J＝8.3，2.1Hz，1H)，7.18(d，J＝8.5Hz，1H)，6.66(d，J＝8.5Hz，1H)，6.54(s，1H)，3.96(t，J＝6.3Hz，2H)，3.82(s，3H)，1.68-1.58(m，2H)，1.36-1.29(m，2H)，0.87(t，J＝7.4Hz，3H)ppm。
NUCC-0201213：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.81(dd，J＝20.5，2.0Hz，2H)，8.03(d，J＝1.9Hz，1H)，7.29-7.15(m，3H)，6.70(d，J＝8.6Hz，1H)，6.59(s，1H)，5.50(s，1H)，4.13-3.71(m，5H)，1.78-1.31(m，5H)，0.87(d，J＝6.3Hz，7H)ppm。
NUCC-201208：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.83(d，J＝2.1Hz，1H)，8.79(d，J＝2.1Hz，1H)，8.04(t，J＝2.1Hz，1H)，7.21(d，J＝8.7Hz，1H)，6.70(d，J＝8.7Hz，1H)，6.59(s，1H)，4.01(t，J＝6.4Hz，2H)，3.83(s，3H)，1.71-1.43(m，3H)，0.87(d，J＝6.4Hz，6H)ppm。
NUCC-0201207：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.93-8.66(m，2H)，8.04(d，J＝2.1Hz，1H)，7.34-7.12(m，2H)，6.82-6.45(m，3H)，5.85(s，1H)，4.10-3.71(m，7H)，1.65(q，J＝6.8Hz，3H)，1.40-1.01(m，9H)，1.01-0.58(m，4H)ppm。
NUCC-201206：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.82(s，2H)，8.01(d，J＝2.3Hz，1H)，7.21(d，J＝8.6Hz，1H)，6.70(d，J＝8.6Hz，1H)，6.58(s，1H)，4.00(t，J＝6.3Hz，2H)，3.84(s，3H)，1.65-1.53(m，3H)，0.84(dd，J＝6.5，2.6Hz，6H)ppm。
NUCC-0201205：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.74(d，J＝43.1Hz，2H)，8.04(s，1H)，7.30-7.14(m，2H)，6.74-6.48(m，2H)，3.96(t，J＝6.1Hz，3H)，3.83(d，J＝3.6Hz，2H)，1.62(q，J＝6.7Hz，3H)，1.38-1.06(m，8H)，0.82(t，J＝6.8Hz，4H)ppm。
NUCC-0201204：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.84-8.61(m，2H)，8.04(s，1H)，7.31-7.14(m，1H)，6.67(d，J＝8.6Hz，1H)，6.56(s，1H)，3.97(t，J＝6.2Hz，2H)，3.83(s，2H)，1.69-1.54(m，2H)，1.30(q，J＝7.5Hz，2H)，0.85(t，J＝7.5Hz，3H)ppm。
NUCC-0201201：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.05-7.74(m，5H)，7.57(d，J＝8.8Hz，1H)，7.09-6.85(m，4H)，6.75(d，J＝8.7Hz，1H)，6.59(d，J＝8.1Hz，3H)，4.95(s，2H)，2.90(d，J＝37.0Hz，2H)ppm。
NUCC-0201198：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.79(s，1H)，7.89(d，J＝40.7Hz，3H)，7.57(d，J＝8.7Hz，1H)，6.92(s，1H)，6.64(d，J＝8.8Hz，1H)，3.95(t，J＝6.2Hz，2H)，1.77-1.49(m，2H)，1.46-1.06(m，7H)，0.81(t，J＝6.8Hz，3H)ppm。
NUCC-0201197：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.08-7.75(m，1H)，3.92(t，J＝6.3Hz，1H)，1.65(q，J＝6.8Hz，1H)，0.87(t，J＝7.4Hz，1H)ppm。
NUCC-0201196：1H NMR(500MHz，氯仿-d)δ10.76(s，1H)，7.88(d，J＝35.4Hz，3H)，7.57(d，J＝8.7Hz，1H)，6.91(s，1H)，6.65(d，J＝8.7Hz，1H)，3.98(t，J＝6.3Hz，2H)，1.54(dq，J＝37.9，6.7Hz，3H)，0.83(d，J＝6.5Hz，7H)ppm。
NUCC-0201195：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ11.63(s，1H)，8.96(s，1H)，8.77(s，1H)，8.12(s，1H)，7.57(d，J＝8.7Hz，1H)，6.95(s，1H)，6.63(d，J＝8.7Hz，1H)，4.00(t，J＝6.5Hz，2H)，1.59(ddt，J＝32.4，13.3，6.6Hz，6H)，0.87(d，J＝6.4Hz，7H)ppm。
NUCC-0201193：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ11.25(s，1H)，8.93(d，J＝2.1Hz，1H)，8.78(d，J＝2.0Hz，1H)，8.11(d，J＝2.1Hz，1H)，7.57(d，J＝8.8Hz，1H)，6.96(s，1H)，6.63(d，J＝8.7Hz，1H)，3.98(t，J＝6.4Hz，2H)，1.81-1.45(m，7H)，1.32(p，J＝7.4Hz，2H)，0.89(t，J＝7.4Hz，4H)ppm。
NUCC-0201192：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ11.64(s，2H)，8.87(d，J＝77.5Hz，2H)，8.10(s，1H)，7.57(d，J＝8.7Hz，1H)，6.94(s，1H)，6.63(d，J＝8.7Hz，1H)，3.96(t，J＝6.3Hz，1H)，1.82-1.40(m，10H)，1.40-1.07(m，7H)，0.83(t，J＝6.7Hz，3H)ppm。
NUCC-0201039：1H NMR(500MHz，MeOH-d4)δ8.50(s，1H)，7.83(d，J＝2.6Hz，1H)，7.67(d，J＝8.5Hz，1H)，7.38-7.24(m，2H)，7.19(d，J＝8.1Hz，2H)，7.04-6.91(m，1H)，6.79(d，J＝8.7Hz，1H)，5.22-4.99(m，2H)，4.41(dd，J＝11.3，6.9Hz，2H)，2.05(s，2H)，1.26(t，J＝7.0Hz，3H)ppm；13C NMR(126MHz，MeOD)δ157.2，135.8，133.1，128.6，128.1，127.9，125.3，101.3，101.3，69.1，62.4，13.3ppm。
NUCC-0201037：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.70(d，J＝48.4Hz，2H)，8.01(s，1H)，7.56-7.38(m，1H)，7.17(td，J＝5.1，2.3Hz，2H)，7.04(dd，J＝8.1，3.8Hz，2H)，6.80(s，1H)，6.67-6.55(m，1H)，4.94(d，J＝4.0Hz，2H)ppm。
NUCC-0201036：1H NMR(500MHz，MeOH-d4)δ6.49(d，J＝1.8Hz，1H)，6.42(d，J＝7.7Hz，1H)，6.29-6.09(m，3H)，5.83-5.65(m，4H)，5.47(s，1H)，5.32(d，J＝8.7Hz，1H)，3.52(s，2H)，3.35(s，7H)，1.81(s，1H)，1.54(s，3H)；13C NMR(126MHz，甲醇-d4)δ161.71，155.20，134.93，134.06，131.66，128.50，126.96，126.72，126.63，99.87，67.78，41.46ppm。
NUCC-0201031：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.89(d，J＝5.8Hz，2H)，7.76(d，J＝5.6Hz，1H)，7.64-7.36(m，1H)，6.82(d，J＝5.9Hz，1H)，6.56(dd，J＝10.6，4.7Hz，1H)，3.85(q，J＝6.1，4.7Hz，2H)，3.24(s，2H)，1.59(p，J＝6.8Hz，2H)，0.99-0.65(m，3H)；13C NMR(126MHz，CDCl3)δ157.1，135.8，131.7，127.9，124.6，122.5，120.5，109.9，103.9，100.9，70.04，49.6，49.4，49.2，49.1，48.9，48.7，48.57，22.3，10.2ppm。
NUCC-0201027：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.88(d，J＝5.1Hz，3H)，7.55(d，J＝8.6Hz，1H)，7.35-7.16(m，1H)，7.03-6.80(m，3H)，6.80-6.66(m，2H)，6.61(d，J＝8.7Hz，1H)，4.11(t，J＝6.5Hz，2H)，3.74(d，J＝1.5Hz，3H)，2.84(t，J＝6.6Hz，2H)ppm；13C NMR(126MHz，CDCl3)δ158.2，157.1，131.6，129.8，129.7，128.2，124.5，122.4，115.6，113.7，109.3，101.5，69.7，55.2，34.6ppm。
NUCC-0201025：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.00(d，J＝39.3Hz，3H)，7.43-7.29(m，1H)，7.29-7.14(m，2H)，7.04-6.93(m，2H)，6.86-6.75(m，1H)，6.70(s，1H)，5.28(s，1H)，4.28(t，J＝6.6Hz，2H)，3.94(s，2H)，3.01(q，J＝6.6Hz，2H)ppm；13C NMR(126MHz，CDCl3)δ157.8，156.9，151.4，142.1，141.8，139.5，136.3，136.2，134.7，132.4，132.3，132.04，131.7，131.5，131.4，131.2，130.1，130.05，128.4，128.4，128.1，126.6，124.4，122.3，122.2，121.5，121.5，121.5，120.05，115.7，115.4，109.5，109.3，105.4，104.7，104.2，101.6，69.3，69.1，37.7，34.9，34.8ppm。
NUCC-200736：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.82(d，J＝1.8Hz，1H)，7.63(dd，J＝8.0，1.8Hz，1H)，7.47(d，J＝8.0Hz，1H)，7.28-7.20(m，3H)，7.11(dd，J＝8.5，3.5Hz，2H)，6.68(d，J＝8.5Hz，1H)，6.55(s，1H)，5.04(d，J＝2.6Hz，2H)，3.81(s，3H)ppm。
NUCC-200723：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ13.15(s，1H)，7.96-7.81(m，1H)，7.72(d，J＝8.9Hz，1H)，7.13(d，J＝8.5Hz，1H)，6.66(d，J＝8.5Hz，1H)，6.59(s，1H)，6.52(d，J＝8.9Hz，1H)，3.84(s，3H)ppm。
NUCC-200576：1H NMR(500MHz，MeOH-d4)δ7.49-7.44(m，2H)，7.42-7.37(m，2H)，7.34-7.30(m，1H)，7.30-7.24(m，1H)，7.13(d，J＝8.4Hz，1H)，7.05(s，1H)，6.91(d，J＝2.3Hz，2H)，5.07(s，2H)，4.95(s，1H)ppm。
NUCC-200495：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.96(d，J＝1.7Hz，2H)，7.90(s，1H)，7.50(d，J＝8.6Hz，1H)，6.97-6.90(m，1H)，6.60(d，J＝8.6Hz，1H)ppm。
NUCC-198407：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.45-7.33(m，4H)，7.13(d，J＝8.5Hz，1H)，6.59(d，J＝8.6Hz，1H)，6.48(s，1H)，5.15(s，2H)，3.79(s，3H)ppm。
NUCC-198399：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.79-7.72(m，2H)，7.68(dt，J＝7.8，1.4Hz，1H)，7.66-7.59(m，1H)，7.35-7.32(m，2H)，7.24(d，J＝8.6Hz，1H)，7.17(t，J＝6.9Hz，2H)，6.74(t，J＝5.7Hz，1H)，6.59(s，1H)，5.07(s，2H)，3.87(s，3H)ppm。
NUCC-198398：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.78(s，1H)，7.75-7.66(m，2H)，7.61(t，J＝8.5Hz，2H)，7.32(d，J＝8.5Hz，2H)，7.13(t，J＝12.8Hz，2H)，6.93(s，1H)，6.72(d，J＝8.8Hz，1H)，5.06(s，2H)ppm。
NUCC-198394：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.00(d，J＝8.3Hz，1H)，7.62(d，J＝8.6Hz，1H)，7.55(d，J＝8.3Hz，1H)，7.38(s，1H)，7.14(d，J＝8.3Hz，1H)，6.88(s，1H)，6.74(d，J＝8.9Hz，1H)，5.07(s，2H)ppm。
NUCC-198391：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.79(t，J＝8.4Hz，1H)，7.59(d，J＝8.4Hz，2H)，7.31(d，J＝8.4Hz，1H)，7.12(t，J＝10.8Hz，2H)，6.93(s，1H)，6.76-6.65(m，1H)，5.06(s，2H)ppm。
NUCC-198363：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.64(d，J＝8.7Hz，2H)，7.50-7.43(m，2H)，7.41-7.35(m，1H)，7.31-7.26(m，4H)，7.15(d，J＝8.5Hz，1H)，6.86(s，1H)，5.07(s，2H)ppm。
NUCC-196362：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.94(s，2H)，7.85(s，1H)，7.58(d，J＝8.7Hz，2H)，7.27(d，J＝2.0Hz，1H)，7.13(d，J＝8.3Hz，2H)，6.95(s，1H)，6.70(d，J＝8.7Hz，1H)，5.03(s，2H)ppm。
NUCC-196361：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.88(s，2H)，7.84(s，1H)，7.28-7.16(m，3H)，7.11(d，J＝8.1Hz，2H)，6.73(d，J＝8.5Hz，1H)，6.56(s，1H)，5.01(s，2H)，3.80(s，3H)ppm；13C NMR(126MHz，CDCl3)δ157.51，151.53，142.21，141.91，139.42，134.56，134.27，134.05，131.82，131.74，131.47，131.41，131.21，131.08，129.16，128.92，128.82，128.33，128.21，124.42，122.26，122.19，121.62，120.05，115.89，115.77，109.80，107.55，105.51，105.30，69.88ppm。
NUCC-196344：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.53(d，J＝8.7Hz，1H)，7.45(d，J＝8.3Hz，1H)，7.35(d，J＝7.7Hz，2H)，7.26(t，J＝6.9Hz，3H)，7.21(d，J＝7.7Hz，1H)，7.11(d，J＝8.3Hz，2H)，6.78(s，1H)，6.66(d，J＝8.8Hz，1H)，5.02(s，2H)，2.43(s，3H)ppm。
C.合成方法C
合成方法C
Figure GDA0003506612730000461
步骤1.向1-(2,4-二羟基苯基)乙酮(0.92g，6.05mmol)和对甲苯磺酸吡啶鎓(0.061g，0.242mmol)的溶液中导入9mL二氯甲烷，加入3,6-二氢-2H-吡喃(1.655ml，18.14mmol，1当量)。然后将得到的溶液在rt搅拌3h。通过添加9mL NaHCO3饱和水溶液使反应停止。分离各层，用二氯甲烷(2x10)mL萃取水层。用Na2SO4干燥合并的有机层，过滤，浓缩。此后，将得到的固体溶于50mL EtOH，加入草酸乙酯(18.15mmol，3当量)。向乙醇钠(30.3当量)在10mL乙醇的悬浮液中滴加得到的溶液。添加后，将该反应体系在90℃加热30分钟。将该反应体系冷却，加入50mL DCM和20mL HCl 3M。分离各层，用二氯甲烷(2x50mL)萃取水层。用Na2SO4干燥合并的有机层，过滤，浓缩。然后将得到的黄色固体溶于50mL 1:1二氯甲烷:THF的混合物，加入pTsOH(0.6mmol，1当量)，在RT搅拌1.5小时。直接减压浓缩该反应体系。最终，向得到的固体、碘(24mmol)在75mL CHCl3中的溶液中加入吡啶(24mmol，4当量)。将得到的溶液在室温搅拌16h。然后加入75mL饱和Na2S2O3水溶液，将得到的混合物搅拌1小时。分离有机层，用CH2Cl2(3x60mL)萃取水相。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。然后减压除去溶剂，将残余物与乙醚一起研磨几次。
步骤2.将2-羰基-色烯酮(3mmol)、卤代烷(3.6mmol，1.2当量)和K2CO3(6mmol)在30mL丙酮中的悬浮液在60℃加热16h。通过漏斗过滤该悬浮液，减压除去溶剂。将残余物与水一起研磨，减压干燥至干。
步骤3.用氮气使上述烷基化色烯酮(0.34mmol，1当量)与相应的硼酸(0.37mmol，1.1当量)、Na2CO3(0.68mmol，2当量)和Pd(dppf)Cl2(0.026mmol，0.08当量)在3.5mL 1:2:6EtOH:水:甲苯的混合物中的悬浮液起泡10分钟。然后覆盖烧瓶，将该混合物在90℃加热2h。将深色溶液冷却至室温，用EtOAc稀释。分离有机层，用EtOAc(3x3mL)萃取水相。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。然后减压除去溶剂，通过硅胶色谱法纯化残余物。
步骤4.将上述色烯酮(0.2mmol，1当量)与期望的肼(0.6mmol，3当量)在2mL EtOH中的溶液在70℃加热45分钟。将该溶液冷却至室温，浓缩。通过硅胶色谱法直接纯化固体产物(正己烷/乙酸乙酯＝5:1-1:1)，得到期望的吡唑。
步骤5.向乙基-酯吡唑(0.1mmol，1当量)在0.5mL THF:水1:1混合物中的溶液中加入1滴10％NaOH水溶液，在RT搅拌24h。将该反应体系浓缩至干。然后将得到的固体溶于1mLDMF和TSTU(0.1mmol，1当量)，加入DIPEA(0.2mmol)，将该溶液在RT搅拌20分钟。此后，加入胺(0.2mmol)，在RT搅拌30分钟。直接通过制备型反相HPLC纯化该反应体系。
实例
NUCC-201224：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ11.00(s，1H)，7.96(d，J＝1.6Hz，2H)，7.79(s，1H)，7.46(d，J＝8.7Hz，1H)，7.32-7.18(m，2H)，7.13(d，J＝8.4Hz，2H)，6.74(s，1H)，6.62(d，J＝8.7Hz，1H)，6.09(q，J＝4.9Hz，1H)，4.99(s，2H)，4.14(s，3H)，2.99(d，J＝4.9Hz，3H)ppm。
NUCC-200973：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.90(s，2H)，7.72(s，1H)，7.52(d，J＝8.6Hz，1H)，7.27(s，1H)，7.18(d，J＝8.0Hz，2H)，7.07(d，J＝8.5Hz，2H)，7.03(s，1H)，6.60(d，J＝8.6Hz，1H)，4.95(s，2H)ppm。
NUCC-200558：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.90(s，1H)，7.77(t，J＝1.6Hz，1H)，7.70(dt，J＝7.8，1.6Hz，1H)，7.60(dt，J＝7.8，1.6Hz，1H)，7.53-7.43(m，2H)，7.27(d，J＝8.3Hz，2H)，7.12(d，J＝8.3Hz，2H)，6.81(s，1H)，6.60(d，J＝8.7Hz，1H)，5.01(s，2H)，4.15(s，3H)ppm。
D.合成方法D
合成方法D
Figure GDA0003506612730000481
步骤1.在适当大小的小瓶中，加入在干丙酮中的取代的苯酚(1当量)、芳基/烷基氯(1.1当量)、K2CO3(3当量)，在60℃搅拌过夜。完成时，蒸发溶剂，将残余物混悬于EtOAc(10mL)。用H2O(2x10mL)洗涤有机部分。再用EtOAc(10mL)萃取合并的水性部分。用盐水洗涤合并的有机部分，用Na2SO4干燥，蒸发，得到粗残余物。将残余物不经进一步纯化用于下一步。
步骤2.在适当大小的小瓶中，加入在二噁烷:H2O(1:1)混合物中的(1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-基)硼酸(1当量)、步骤1产物(1当量)、Pd(dppf)2Cl2(0.05当量)、Na2CO3(3当量)。用N2吹扫小瓶1min，在100℃搅拌1h。完成时，将该反应混合物冷却至室温，使用DCM:MeOH(10:1)使其通过硅胶垫。蒸发溶剂，得到粗残余物。通过制备型HPLC纯化粗产物没得到期望的产物。例如NUCC-0200813：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.32(s，1H)，7.28-7.19(m，4H)，7.12(s，1H)，7.05(d，J＝8.4Hz，1H)，7.01(d，J＝2.8Hz，1H)，6.77(dd，J＝8.5，2.8Hz，1H)，4.94(s，2H)，4.34(s，2H)，3.86(s，3H)；13C NMR(126MHz，CDCl3)δ158.7，140.9，135.3，133.9，132.5，131.9，128.8，121.7，118.9，114.3，113.7，69.3，63.3，39.6。
步骤3.在适当大小的小瓶中，加入在甲醇中的步骤2的产物(1当量)和NaBH4(1.2当量)，在室温下搅拌7h。完成时，浓缩该反应体系，混悬于H2O。用EtOAc(3x3mL)萃取该悬浮液，蒸发合并的有机部分，得到粗残余物，通过制备型HPLC纯化。
实例
NUCC-0200813：制备型HPLC条件(40-80％，5min，50x30mm，Rt＝3.74min)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.32(s，1H)，7.30-7.18(m，4H)，7.10-6.95(m，2H)，6.77(dd，J＝8.5，2.8Hz，1H)，4.94(s，2H)，4.34(s，2H)，3.86(s，3H)ppm；13C NMR(126MHz，CDCl3)δ158.7，140.9，135.3，133.8，132.5，131.9，128.8，121.73，118.9，114.3，113.7，69.3，63.3，39.6ppm。
步骤4.在适当大小的小瓶中，加入在无水DMF中的步骤2的产物(1当量)、NBS(5当量)，将试剂在室温下搅拌3天。完成时，用水(4mL)使反应停止，用EtOAc(3x3mL)萃取。干燥合并的有机部分，通过Biotage(5:1Hex/EtOAc；10g柱)纯化残余物。采集的级分：11-14，例如NUCC-0200979：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.42-7.34(m，6H)，7.31(dd，J＝8.7，2.6Hz，1H)，5.11(s，2H)，3.82(s，3H)；13C NMR(126MHz，CDCl3)δ159.7，140.2，140.1，139.8，134.6，133.6，133.3，129.1，128.8，123.1，120.1，119.4，119.3，116.3，115.1，93.7，70.0，38.8。
步骤5.在适当大小的小瓶中，加入在MeOH中的步骤2的产物(1当量)、H2O2(30％水溶液，1当量)、Na2CO3(3当量)，在室温下搅拌过夜。完成时，蒸发溶剂，将残余物混悬于水(1mL)，用EtOAc(3x1mL)萃取。蒸发合并的有机部分，得到粗产物，通过制备型HPLC纯化。例如，NUCC-0200816：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.33(d，J＝2.7Hz，1H)，7.24(s，4H)，7.19-7.04(m，2H)，6.99(dd，J＝8.5，2.7Hz，1H)，6.40(s，1H)，5.47(s，1H)，5.23(s，1H)，4.98(s，2H)，3.58(s，3H)；13C NMR(126MHz，CDCl3)δ168.6，159.7，142.6，136.6，134.4，134.2，132.8，128.9，128.8，119.3，117.8，115.1，104.9，69.6，37.5。
E.合成方法E
合成方法E
Figure GDA0003506612730000501
步骤1.向1-(2,4-二羟基苯基)乙酮(0.92g，6.05mmol，1当量)和对甲苯磺酸吡啶鎓(0.061g，0.242mmol，0.04当量)中的溶液中导入9mL二氯甲烷，加入3,6-二氢-2H-吡喃(1.655ml，18.14mmol，3当量)。然后将得到的溶液在rt搅拌3h。通过添加9mL饱和NaHCO3水溶液使反应停止。分离各层，用二氯甲烷(2x10)mL萃取水层。用干燥合并的有机层。然后将淡红色油状物-固体溶于DMF-DMA(9.1mmol)，在95℃加热3h。然后将其冷却，减压浓缩。然后见得到的固体溶于50mL 1:1的二氯甲烷:THF混合物，加入pTsOH(0.6mmol，1当量)，将其在RT搅拌1.5小时。直接减压浓缩该反应体系。最终，向得到的固体、碘(24mmol，4当量)在75mLCHCl3中的溶液中加入吡啶(24mmol，4当量)。将得到的溶液在室温搅拌16h。然后加入75mL饱和Na2S2O3水溶液，将得到的混合物搅拌1小时。分离有机层，用CH2Cl2(3x60mL)萃取水相。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。然后减压除去溶剂，将残余物与乙醚一起研磨几次。
步骤2.将色烯酮(3mmol,v)、卤代烷(3.6mmol，1.2当量)和K2CO3(6mmol)在30mL丙酮中的悬浮液在60℃加热16h。通过漏斗过滤该反应体系，减压除去溶剂。将粗产物与水一起研磨，减压干燥至干。
步骤3.用氮气使上述烷基化-色烯酮(0.34mmol，1当量)与相应的硼酸(0.37mmol，1.1当量)、Na2CO3(0.68mmol，2当量)和Pd(dppf)Cl2(0.026mmol，0.08当量)在3.5mL 1:2:6EtOH:水:甲苯混合物中的悬浮液起泡10分钟。然后封盖烧瓶，将该混合物在90℃加热2h。将深色溶液冷却至室温，用EtOAc稀释。分离有机层，用EtOAc(3x3mL)萃取水相。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。然后减压除去溶剂，通过硅胶色谱法纯化残余物。
步骤4.将上述色烯酮(0.2mmol，1当量)与期望的肼(0.6mmol，3当量)在2mL EtOH中的溶液在70℃加热45分钟。将该溶液冷却至室温，浓缩。通过硅胶色谱法直接纯化固体产物(正己烷/乙酸乙酯＝5:1-1:1)，得到期望的吡唑。
实例
NUCC-198359：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.45(s，1H)，7.35(s，3H)，7.00(s，2H)，6.82(d，J＝8.8Hz，1H)，6.62(d，J＝2.6Hz，1H)，6.22(dd，J＝8.8，2.6Hz，1H)，4.99(s，3H)，2.38(s，3H)，2.03(d，J＝6.1Hz，6H)ppm。
NUCC-198322：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.80(s，1H)，7.51(dt，J＝9.0、4.5Hz，1H)，7.40-7.37(m，4H)，7.32(d，J＝7.3Hz，1H)，6.66(d，J＝2.6Hz，1H)，6.52-6.41(m，3H)，5.05(s，2H)ppm。
NUCC-198318：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.87(s，1H)，7.85(s，2H)，7.77(s，1H)，7.38(s，4H)，6.95(d，J＝8.7Hz，1H)，6.69(d，J＝2.6Hz，1H)，6.34(dd，J＝8.7，2.6Hz，1H)，5.04(s，2H).
NUCC-196350：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.61(s，1H)，7.45(s，1H)，7.36(s，1H)，7.33(s，3H)，7.31-7.28(m，2H)，7.08-7.01(m，2H)，6.62(d，J＝2.6Hz，1H)，6.29(dd，J＝8.7，2.6Hz，1H)，4.99(s，2H)ppm。
NUCC-196348：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.41-7.33(m，2H)，7.31-7.06(m，7H)，6.66(d，J＝8.6Hz，1H)，6.51(s，1H)，5.02(s，2H)，3.82(s，3H)ppm。
F.合成方法F
合成方法F
Figure GDA0003506612730000521
步骤1.向2-苯乙酸衍生物(10.58mmol，1当量)和间苯二酚(1.165g，10.58mmol，1当量)的混合物中加入醚合三氟化硼ORON(4.02ml，31.7mmol，3当量)。密封小瓶，在90℃搅拌1.5h。将该反应体系冷却至RT。使得到的固体分配在20mL水与20mL二氯甲烷之间。分离各层，用二氯甲烷萃取水层3x10mL)。用Na2SO4干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物。
步骤2.将O-苯氧基-苯乙酮(1mmol)与TFFA(5当量)和吡啶(5当量)的悬浮液在120℃加热4h。然后将其冷却至r.t.。在一些情况下，沉淀产物，在另外的情况下，加入水，然后用EtOAc(3x10mL)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，用Na2SO4干燥，过滤，浓缩。通过硅胶色谱法纯化残余物。
步骤3.将色烯酮(0.5mmol，1当量)、K2CO3(1mmol)和卤代烷(0.6mmol)在5mL丙酮中的悬浮液在60℃加热16h。通过漏斗过滤该反应体系，减压除去溶剂。将粗产物与水一起研磨，减压干燥至干。
步骤4.将上述O-烷基化-色烯酮(0.2mmol)与期望的肼(0.6mmol，3当量)在2mLEtOH中的溶液在70℃加热45分钟。将该溶液冷却至室温，浓缩。通过硅胶色谱法直接纯化固体产物(正己烷/乙酸乙酯＝5:1-1:1)，得到期望的吡唑。
实例
NUCC-198309：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.38-7.33(m，5H)，7.00-6.84(m，4H)，6.55(s，1H)，6.35(s，1H)，5.00(s，2H)，3.81(s，3H)ppm。
NUCC-198295：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.44(d，J＝2.2Hz，3H)，7.38-7.31(m，6H)，6.89(s，1H)，6.55(s，1H)，6.32(s，1H)，5.00(s，2H)ppm。
NUCC-196340：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.97(s，1H)，7.45(d，J＝9.0Hz，1H)，7.37-7.28(m，2H)，7.18(d，J＝8.7Hz，2H)，6.86(d，J＝8.7Hz，2H)，6.45(d，J＝2.6Hz，1H)，6.37(dd，J＝9.0、2.6Hz，1H)，5.92(s，1H)，5.01(s，2H)，3.78(s，3H)ppm。
NUCC-196282：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.34-7.28(m，4H)，6.94(s，1H)，6.92-6.84(m，2H)，6.79(d，J＝1.8Hz，1H)，6.52(s，1H)，6.31(s，1H)，4.97(s，2H)，3.92(s，3H)，3.78(s，3H)p.
G.合成方法G
合成方法G
Figure GDA0003506612730000541
步骤1.向置于高压试管中的1-(2,4-二羟基苯基)乙-1-酮(5.00g，32.89mmol，1当量)在三氟乙酐(18.50mL，131,56mmol，4当量)中的悬浮液中加入2,2,2-三氟乙酸钠(9.84g，72.36mmol，2.2当量)，封盖该体系，在110℃搅拌24h。将该反应体系冷却至约70℃，然后用200mL EtOAc稀释。通过添加饱和K2CO3水溶液中和该混合物，直至不再观察到起泡。分离各层，再用EtOAc(3x150mL)萃取水相。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。然后将该溶液浓缩至100-150mL EtOAc。然后封盖烧瓶，保持在室温下1-2天，得到固体，过滤，真空干燥，得到4.09g的纯1，为白色固体，54％收率。
然后在氮气气氛中向得到的固体(2g，8.70mmol，1当量)和吡啶(2.81mL，34.8mmol，4当量)在18mL DCM中的冰浴溶液中滴加Tf2O(2.20mL，13.06mmol，1.5当量)，历时15min。然后将该混合物从0℃搅拌至室温16h。通过添加15mL水使反应停止。分离有机层，用EtOAc(3x15mL)萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。然后减压除去溶剂，通过硅胶色谱法纯化残余物(正己烷/乙酸乙酯＝10:1-4:1)，得到化合物2，为黄色固体，95％收率(3.0g)：mp 46-48℃。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ8.32-8.20(m，2H)，7.74(dd，J＝8.8，2.4Hz，1H)，7.17(s，1H)ppm。13C NMR(126MHz，DMSO-d6)δ175.4，155.6，152.4，151.4(q，2J(C,F)＝38.8Hz)，128.2，123.7，120.1，118.5(q，1J(C,F)＝274.7Hz)，112.9，111.5，111.4ppm。HRMS(ESI)：质量计算值C11H5F6O5S+[M+H]+＝362.9756，测定值＝362.9758。
步骤2.为了得到在2-CF3-色烯酮的7位上不同的Pd-催化的偶联产物，遵循不同条件：
条件A：苯胺偶联：用氮气使色烯酮-三氟甲磺酸酯(150mg，0.41mmol，1当量)与Cs2CO3(202mg，0.62mmol，1当量)、BINAP(25mg，0.04mmol，0.1当量)和PdOAc2(4.5mg，0.02mmol，0.05当量)在4mL甲苯中的悬浮液起泡10分钟。然后封盖烧瓶，将该混合物在90℃加热16h。将深色溶液冷却至室温，用5mL EtOAc和5mL水稀释。分离有机层，用EtOAc2(3x5mL)萃取水相。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。然后减压蒸发溶剂，通过硅胶色谱法纯化残余物。
条件B：苯酚偶联：用氮气使色烯酮-三氟甲磺酸酯(150mg，0.41mmol，1当量)与K2CO3(113mg、0.82mmol，2当量)、JohnPhos(12mg、0.04mmol，0.1当量)和Pd2dba3(19mg、0.02mmol，0.05当量)在4mL甲苯中的悬浮液起泡10分钟。然后封盖烧瓶，将该混合物在90℃加热16h。将深色溶液冷却至室温，用5mL EtOAc和5mL水稀释。分离有机层，用EtOAc2(3x5mL)萃取水相。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。然后减压蒸发溶剂，通过硅胶色谱法纯化残余物。
条件C：硼酸偶联至联芳基色烯酮：用氮气使色烯酮-三氟甲磺酸酯(150mg，0.41mmol，1当量)与相应的硼酸(0.46mmol，1.1当量)、Na2CO3(87mg，0.82mmol，2当量)和Pd(dppf)Cl2(23mg，0.03mmol，0.08当量)在4mL1:2:6EtOH:水:甲苯混合物中的悬浮液起泡10分钟。然后封盖烧瓶，将该混合物在90℃加热20min。将深色溶液冷却至室温，用EtOAc稀释。分离有机层，用EtOAc2(3x3mL)萃取水相。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。然后减压蒸发溶剂，通过硅胶色谱法纯化残余物。
步骤3.将上述7-官能化色烯酮(0.2mmol，1当量)与期望的肼(0.6mmol，3当量)在2mL EtOH中的溶液在70℃加热45分钟。将该溶液冷却至室温，浓缩。通过硅胶色谱法直接纯化固体产物(正己烷/乙酸乙酯＝5:1-1:1)，得到期望的吡唑。
实例
NUCC-201223：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.62(s，1H)，7.92(d，J＝1.7Hz，2H)，7.81(s，1H)，7.56(d，J＝8.7Hz，1H)，7.23-7.19(m，2H)，6.98(s，1H)，6.86-6.77(m，2H)，6.61(d，J＝8.7Hz，1H)ppm。
NUCC-200721：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.46(d，J＝8.4Hz，1H)，7.31(d，J＝8.7Hz，1H)，7.20(d，J＝2.7Hz，1H)，6.92(dd，J＝8.7，2.7Hz，1H)，6.84(s，1H)，6.62(d，J＝7.7Hz，2H)，5.78(s，1H)ppm。
NUCC-200681：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.72(d，J＝8.8Hz，1H)，7.28(d，J＝8.8Hz，2H)，7.07(d，J＝8.5Hz，2H)，6.94(d，J＝8.8Hz，2H)，6.81(d，J＝8.7Hz，1H)，6.52(d，J＝2.4Hz，1H)，6.45(d，J＝8.8Hz，1H)，2.57(q，J＝7.6Hz，2H)，1.18(t，J＝7.6Hz，3H)ppm。
NUCC-200679：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.51(d，J＝8.6Hz，1H)，7.33-7.28(m，2H)，7.01-6.97(m，2H)，6.88(s，1H)，6.60(dd，J＝8.5，2.4Hz，1H)，6.56(d，J＝2.4Hz，1H)ppm。
NUCC-200559：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.58(d，J＝8.7Hz，1H)，7.41(d，J＝8.4Hz，1H)，7.05(q，J＝9.1Hz，1H)，6.96-6.90(m，2H)，6.87(dd，J＝8.7，2.4Hz，1H)，6.77(d，J＝8.2Hz，2H)，6.56(dd，J＝8.5，2.2Hz，1H)，6.52(d，J＝2.2Hz，1H)，5.72(s，1H)ppm。
NUCC-200492：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.28-7.25(m，2H)，7.09-7.06(m，2H)，7.06-7.02(m，1H)，6.61(d，J＝7.7Hz，2H)，6.53(s，1H)，3.81(s，3H)ppm。
NUCC-200491：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.46(d，J＝9.0Hz，1H)，7.25(d，J＝8.7Hz，2H)，7.10-6.97(m，2H)，6.81(s，1H)，6.62(dq，J＝5.3，2.2Hz，2H)，5.80(s，1H)ppm。
H.合成方法H
合成方法H
Figure GDA0003506612730000571
步骤1.向置于高压试管中的1-(2,4-二羟基苯基)乙-1-酮(5.00g，32.89mmol，1当量)在三氟乙酐(18.50mL，131,56mmol，4当量)中的悬浮液中加入2,2,2-三氟乙酸钠(9.84g，72.36mmol，2.2当量)，封盖该体系，在110℃搅拌24h。将该反应体系冷却至约70℃，然后用200mL EtOAc稀释。通过添加饱和K2CO3水溶液中和该混合物，直至不再观察到起泡。分离各层，再用EtOAc(3x150mL)萃取水相。用盐水洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥。然后将该溶液浓缩至100-150mL EtOAc。然后封盖烧瓶，保持在室温下1-2天，得到固体，过滤，真空干燥，得到4.09g的纯1，为白色固体，54％收率。
步骤2.将7-羟基-2-(三氟甲基)-4H-色烯-4-酮(1g，2.8mmol，1当量)、卤代烷(3.4mmol，1.2当量)和K2CO3(0.77g，5.6mmol，2当量)在5mL丙酮中的悬浮液在60℃加热16h。通过漏斗过滤该反应体系，减压除去溶剂。将粗产物与水一起研磨，减压干燥至干。
步骤3.
吡唑的合成.将在2mL EtOH中的上述色烯酮(0.2mmol，1当量)与期望的肼(0.6mmol，3当量)的溶液在70℃加热45分钟。将该溶液冷却至室温，浓缩。通过硅胶色谱法直接纯化固体产物(正己烷/乙酸乙酯＝5:1-1:1)，得到期望的吡唑。
实例
NUCC-198314：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.12(s，1H)，6.97(d，J＝8.5Hz，1H)，6.51(dd，J＝8.5，2.4Hz，1H)，6.46(d，J＝2.4Hz，1H)，6.41(s，1H)，4.92(s，2H)，3.67(s，3H)ppm。
嘧啶的合成.将在10mL EtOH中的上述色烯酮(0.2mmol，1当量)与期望的苯甲酰亚胺(0.26mmol，1.3当量)和氢氧化钾(0.6mmol，3当量)的溶液在80℃加热14小时。用5mL水稀释该溶液，用3x15mL EtOAc萃取。用Na2SO4干燥合并的有机层，过滤，减压浓缩。通过硅胶色谱法直接纯化固体产物(正己烷/乙酸乙酯＝5:1-1:1)，得到期望的嘧啶。
实例
NUCC-0200500：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.80-8.73(m，2H)，8.07(s，1H)，7.95(s，1H)，7.81(d，J＝8.9Hz，1H)，7.37(s，4H)，6.69-6.59(m，2H)，5.10(s，2H)ppm。
I.合成方法I
合成方法I(PAL)
Figure GDA0003506612730000591
步骤1-4.与上述合成方法B相同。
步骤5.在100mL圆底烧瓶中，将在干丙酮中的丙二酸二甲酯(1.1当量)、炔丙基溴(1当量)、K2CO3(3当量)在室温搅拌36h。通过添加饱和NH4Cl溶液使该发氧化物或淬灭，用DCM萃取(3次)。用H2O(2次),洗涤合并的有机层，用Na2SO4干燥，减压蒸发溶剂，得到黄色油状物，静置时其转化成固体。(注意：可以通过TLC：H:EtOAc:：5:1监测转化率rf＝0.42)。将粗产物与KOH(1当量)的MeOH溶液一起在室温下搅拌4。完成时，蒸发溶剂，将残余物混悬于H2O，用Et2O(2次)洗涤。用酸化HCl(2N，至pH 3)水性部分，用EtOAc(2次)萃取。用Na2SO4干燥有机部分，蒸发，得到粗的黄色油状物。(注意：LCMS：显示m/z＝157和174(+18)).
步骤6.在适当大小的小瓶中，将在无水DMSO中的来自步骤5的产物(1当量)、IBX-SO3K(1.5当量)、NaI(0.2当量)、NaN3(3.3当量)在冰冷水浴中搅拌5min，再在60℃加热2h。完成时，用饱和Na2S2O3(25mL)使该反应混合物淬灭，用Et2O(2x25mL)萃取。用饱和NaHCO3(2x25mL)洗涤合并的有机部分，用Na2SO4干燥。蒸发有机部分，得到黄色残余物。将在THF:H2O(1:1)中的粗产物与LiOH(2当量)一起在室温下搅拌2h。(注意:LCMS显示SM的二聚体信号和表示反应完成的产物)。蒸发溶剂，取粗产物不经任何进一步纯化用于下一步。
步骤7.在适当大小的小瓶中，将在无水DCM中的来自步骤4的产物(1当量)、来自步骤5的产物(1.5当量)、HATU(1.5当量)、DIEA(4当量)在30℃搅拌6h。完成时，蒸发溶剂，得到粗产物。通过制备型HPLC纯化粗产物。
实例
NUCC_0201698：制备型HPLC：(25-90％、50x30，C18，50mL/min，Rt＝4.3min)。UVmax＝222nm 1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.84(dd，J＝10.0、1.9Hz，3H)，8.16(s，1H)，8.02(s，2H)，7.50(d，J＝8.5Hz，2H)，7.24(s，17H)，6.76(d，J＝8.6Hz，1H)，6.59(s，2H)，5.22(s，1H)，5.06(s，2H)，4.28(dd，J＝7.6，4.1Hz，1H)，3.83(s，3H)，3.09-2.75(m，3H)，2.23-2.06(m，1H)ppm。
NUCC-0201694：制备型HPLC：(25-90％、50x30，C18，50mL/min，Rt＝3.5min)。UVmax＝222nm 1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.63(s，1H)，7.80(d，J＝2.0Hz，1H)，7.70-7.37(m，3H)，6.91(s，1H)，6.58(d，J＝8.7Hz，1H)，6.41(s，1H)，4.13-3.85(m，4H)，3.27(dq，J＝34.6，6.8Hz，1H)，2.99-2.57(m，2H)，1.94-1.77(m，1H)，1.23(s，1H)，0.81(s，1H)ppm。
NUCC-0201695：制备型HPLC：(25-90％、50x30，C18，50mL/min，Rt＝4.5-5min)。UVmax＝222nm 1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.76(d，J＝2.0Hz，1H)，7.68-7.48(m，2H)，7.19(d，J＝8.6Hz，1H)，6.65(d，J＝8.7Hz，1H)，6.55(s，1H)，6.43(s，1H)，5.09(s，1H)，4.04(dt，J＝30.2，6.5Hz，3H)，3.82(s，3H)，3.27(dt，J＝36.6，6.8Hz，2H)，2.96-2.82(m，1H)，2.77-2.62(m，1H)，2.05(t，J＝2.7Hz，1H)，1.98-1.81(m，2H)ppm。
NUCC-0201696：制备型HPLC：(25-90％、50x30，C18，50mL/min，Rt＝4.6min)。UVmax＝222nm 1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.85(dd，J＝9.8，2.1Hz，3H)，8.06(d，J＝2.2Hz，1H)，7.24(s，13H)，6.69(d，J＝8.6Hz，1H)，6.59(s，1H)，6.45(s，1H)，5.27(s，1H)，4.19-3.93(m，3H)，3.84(s，3H)，3.28(ddd，J＝47.0、13.7，6.8Hz，2H)，2.88(ddd，J＝17.2，4.3，2.6Hz，1H)，2.69(ddd，J＝17.1，7.2，2.7Hz，1H)，1.90(dt，J＝7.7，3.9Hz，2H)ppm。
NUCC-0210697：制备型HPLC：(25-90％、50x30，C18，50mL/min，Rt＝3.8-4.1min)。UVmax＝222nm 1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.03-8.72(m，2H)，8.13(d，J＝11.1Hz，1H)，7.69-7.40(m，1H)，6.95(d，J＝5.2Hz，1H)，6.69-6.43(m，2H)，4.07(ddd，J＝11.4，8.8，5.1Hz，3H)，3.71-3.41(m，2H)，2.95-2.59(m，3H)，2.45(dq，J＝4.9，2.4Hz，1H)，2.04-1.88(m，1H)ppm。
J.合成方法J
合成方法J(PTOTAC)
Figure GDA0003506612730000611
步骤1-4.与上述合成方法B相同。
步骤5.在适当大小的小瓶中，将叠氮基-PEG羧酸(1当量)与亚硫酰氯(39当量)一起在室温下搅拌3h。完成时，(LCMS显示在指示反应完成中的甲酯)，蒸发过量的亚硫酰氯，得到粗的酰氯。加入来自步骤4的产物(1当量)在无水THF中的溶液至酰氯和TEA(5当量)，将该反应混合物在60℃搅拌3h。完成时，通过棉垫过滤该混合物，通过制备型HPLC(50x30，C18，50mL/min，Rt.3.3-3.6min)纯化，不经进一步纯化溶解用于偶联步骤(推定定量收率)。
步骤6.在适当大小的小瓶中，将在THF:H2O(1:1)中的来自步骤5的产物(1当量)、CuSO4(5当量)、抗坏血酸钠(5当量)、炔丙基-CRBN(1当量)在室温搅拌过夜。完成时，用ACN(1mL)稀释该反应混合物，通过制备型HPLC纯化。
实例
NUCC-0201202：制备型HPLC(45-95％50x30，C18，50mL/min，Rt＝3.2-3.7min)。UVmax＝222nm。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.80(s，1H)，8.26(s，1H)，7.90(s，2H)，7.79(s，1H)，7.71(s，1H)，7.65-7.43(m，5H)，7.37(t，J＝7.9Hz，2H)，7.13(d，J＝8.1Hz，2H)，6.86(s，1H)，6.68(d，J＝8.7Hz，1H)，5.26(s，2H)，5.04-4.79(m，3H)，4.32(s，2H)，4.08(s，2H)，3.84-3.45(m，13H)，3.04-2.51(m，5H)，2.23-1.95(m，4H)，1.57(s，4H)ppm。
NUCC-0201203：制备型HPLC(45-95％50x30，C18，50mL/min，Rt＝3.25-4min)。UVmax＝222nm。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.80(s，1H)，8.29(s，1H)，7.91(s，3H)，7.78(d，J＝11.5Hz，3H)，7.61(t，J＝7.9Hz，2H)，7.52(d，J＝8.3Hz，4H)，7.42(dd，J＝14.9，7.9Hz，3H)，7.14(d，J＝8.1Hz，2H)，6.87(s，1H)，6.68(d，J＝8.7Hz，1H)，5.31(s，2H)，5.07-4.79(m，4H)，4.37(t，J＝5.1Hz，2H)，4.07(s，3H)，3.85-3.32(m，20H)，3.01-2.53(m，5H)，2.26-1.93(m，4H)，1.58(s，4H)ppm。
NUCC_0201660：制备型HPLC(45-95％50x30，C18，50mL/min，Rt＝4.25min)。UVmax＝222nm.
NUCC-0201702：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.35(s，1H)，7.86(s，1H)，7.75(d，J＝2.0Hz，1H)，7.67(dd，J＝8.5，7.3Hz，1H)，7.61-7.37(m，4H)，7.17(d，J＝8.6Hz，1H)，6.96(t，J＝6.2Hz，1H)，6.64(d，J＝8.6Hz，1H)，6.53(s，1H)，5.39(d，J＝2.8Hz，3H)，4.89(dd，J＝12.3，5.4Hz，1H)，4.60-4.40(m，2H)，4.08-3.90(m，3H)，3.81(d，J＝5.3Hz，4H)，3.69-3.48(m，7H)，3.27(q，J＝6.8Hz，2H)，2.26-2.03(m，4H)，1.85(q，J＝6.4Hz，2H)，1.23(d，J＝2.2Hz，3H)ppm。
NUCC-0201703：制备型HPLC(20-80％50x30，C18，50mL/min，Rt＝4.15min)。Uvmax＝222nm.不能开放NMR-fid
NUCC-0201704：制备型HPLC(20-80％50x30，C18，50mL/min，Rt＝4min)。Uvmax＝222nm。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.82(d，J＝33.9Hz，2H)，8.07(s，1H)，7.97(s，1H)，7.77(s，1H)，7.63(t，J＝7.9Hz，1H)，7.53(d，J＝8.8Hz，1H)，7.48-7.37(m，1H)，7.02(d，J＝4.2Hz，1H)，6.88(s，1H)，6.61(d，J＝8.8Hz，1H)，5.28(d，J＝3.0Hz，1H)，4.92(dd，J＝11.9，5.5Hz，1H)，4.40(t，J＝5.1Hz，1H)，4.07(t，J＝5.1Hz，1H)，3.94(s，1H)，3.75(t，J＝5.1Hz，1H)，3.68-3.41(m，4H)，3.02-2.64(m，2H)，2.15(s，1H)，1.24(s，2H)，0.84(d，J＝22.7Hz，1H)ppm。
使用小鼠肝微粒体和小鼠S9级分测试了NUCC-176242和NUCC-176248的体外代谢。与NUCC-176248相比，使用小鼠S9级分显示NUCC-176242具有明显的代谢，这归因于S9在吡唑环的N-1氮原子上缀合。
通过静脉内施用5mg/kg的剂量并测量血浆浓度随时间的变化，在小鼠中研究了NUCC-176242和NUCC-176248的药代动力学。观察到的NUCC-176242和NUCC-176248的体内代谢与上文测试的NUCC-176242和NUCC-176248的体外代谢相关性良好。
表
表1.有代表性的化合物
Figure GDA0003506612730000631
Figure GDA0003506612730000641
Figure GDA0003506612730000651
Figure GDA0003506612730000661
Figure GDA0003506612730000671
Figure GDA0003506612730000681
Figure GDA0003506612730000691
Figure GDA0003506612730000701
Figure GDA0003506612730000711
Figure GDA0003506612730000721
Figure GDA0003506612730000731
Figure GDA0003506612730000741
Figure GDA0003506612730000751
Figure GDA0003506612730000761
Figure GDA0003506612730000771
Figure GDA0003506612730000781
Figure GDA0003506612730000791
Figure GDA0003506612730000801
Figure GDA0003506612730000811
Figure GDA0003506612730000821
Figure GDA0003506612730000831
Figure GDA0003506612730000841
Figure GDA0003506612730000851
Figure GDA0003506612730000861
Figure GDA0003506612730000871
Figure GDA0003506612730000881
Figure GDA0003506612730000891
Figure GDA0003506612730000901
Figure GDA0003506612730000911
Figure GDA0003506612730000921
Figure GDA0003506612730000931
Figure GDA0003506612730000941
Figure GDA0003506612730000951
Figure GDA0003506612730000961
Figure GDA0003506612730000971
Figure GDA0003506612730000981
Figure GDA0003506612730000991
Figure GDA0003506612730001001
Figure GDA0003506612730001011
Figure GDA0003506612730001021
Figure GDA0003506612730001031
Figure GDA0003506612730001041
Figure GDA0003506612730001051
Figure GDA0003506612730001061
Figure GDA0003506612730001071
Figure GDA0003506612730001081
Figure GDA0003506612730001091
Figure GDA0003506612730001101
Figure GDA0003506612730001111
Figure GDA0003506612730001121
Figure GDA0003506612730001131
Figure GDA0003506612730001141
Figure GDA0003506612730001151
Figure GDA0003506612730001161
Figure GDA0003506612730001171
Figure GDA0003506612730001181
Figure GDA0003506612730001191
Figure GDA0003506612730001201
Figure GDA0003506612730001211
Figure GDA0003506612730001221
Figure GDA0003506612730001231
Figure GDA0003506612730001241
Figure GDA0003506612730001251
Figure GDA0003506612730001261
Figure GDA0003506612730001271
Figure GDA0003506612730001281
Figure GDA0003506612730001291
Figure GDA0003506612730001301
Figure GDA0003506612730001311
Figure GDA0003506612730001321
Figure GDA0003506612730001331
表2.有代表性的化合物的生物活性
Figure GDA0003506612730001341
Figure GDA0003506612730001351
Figure GDA0003506612730001361
Figure GDA0003506612730001371
Figure GDA0003506612730001381
Figure GDA0003506612730001391
Figure GDA0003506612730001401
Figure GDA0003506612730001411
Figure GDA0003506612730001421
Figure GDA0003506612730001431
Figure GDA0003506612730001441
Figure GDA0003506612730001451
Figure GDA0003506612730001461
表3.有代表性的化合物的生物活性
Figure GDA0003506612730001462
Figure GDA0003506612730001471
Figure GDA0003506612730001481
a MycCap细胞的细胞存活率
b PC12细胞的细胞存活率
c与小鼠肝微粒体一起60min处理后剩余化合物的％
参考文献
[1]Huang M，Weiss WA.2013.Neuroblastoma and MYNC.Cold Spring HarbPerspect Med 3：a014415.
[2]Roussel MF，Robinson GW.2013.Role of MYC in medulloblastoma.ColdSpring Harb Perspect Med 3：a014308.
[3]Gabay M，Li Y，Felsher DW.2014.MYC activation is a hall mark ofcancer initiation and maintenance.Cold Spring Harb Perspect Med doi：10.1101/cshperspect.a014241.
[4]Schmitz R，Ceribelli M等人，2014.Oncogenic mechanisms in Burkittlymphoma.Cold Spring Harb Perspect Med 4：a014282.
[5]Michael R.McKeown and James E.Bradner，Cold Spring Harb PerspectMed 2014；4:a014266
[6]Soucek L，Whitfield JR等人，2013.Inhibition of MYC family proteinseradicates KRas-driven lung cancer in mice.Genes Dev 27：504-513.
[7]S.Fletcher，E.V.Prochownik，Small-molecule inhibitors of the MYConcoprotein，Biochim.Biophys.Acta(2014).
实施例2-生物学测定
增殖测定(图11)。从ATCC逐步分离出具有高Myc水平的PC3前列腺癌细胞系和不依赖Myc-Max复合物的具有非功能性Max蛋白的PC12嗜铬细胞瘤肿瘤细胞系。将细胞以每孔1000个细胞的量在96孔板上铺板，并在第二天将不同浓度的Myc抑制剂361添加到细胞中。处理3天后，再次添加具有361的新鲜培养基，并在处理后第5天通过MTS测定来测定细胞存活率。(参见图11)。
Myc Ebox荧光素酶报道试验(图12)。将稳定表达具有CMV启动子(MycCap-luc)的萤光素酶或c-Myc E-盒-荧光素酶报道分子(MycCap Ebox-luc)的MycCap细胞以每孔10000个细胞接种在96孔白板中。第二天处理361的系列稀释液。处理4小时时，向孔中加入150μg/ml荧光素后立即测定发光信号。(参见图12)。
细胞热移动测定(CETSA)(图13)。将在15cm培养皿中具有70％至80％汇合率的PC3细胞用6μM 361或媒介物(DMSO)处理30min。收获细胞并用PBS洗涤一次，然后悬浮于补充有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的1mL PBS中。因此，在此步骤中，PBS相应地含有6μM的361或媒介物(DMSO)。将细胞悬浮液分配到7到10个容量为100μl的0.2-ml PCR试管中(约100万个细胞)，并将每个试管指定为一个温度点。在AB 96-孔热循环仪中将样品在指定的温度下加热2min。加热后，立即移出试管，并在室温下将试管温育3分钟。温育这3min后，立即在液氮中速冻，并保存在-80℃下。为了裂解细胞，在LN中进行三个冷冻和融化循环。每次解冻后，将试管短暂涡旋。收集细胞裂解液，并通过在4℃下以20,000g离心20min来去除细胞碎片以及沉淀和聚集的蛋白质。加入加样缓冲液后，将细胞裂解样品在90℃下煮沸5min，并准备进行蛋白质印迹t分析。c-Myc抗体来自Abcam(Ab32072)。从三个独立的实验中产生数据，并且通过Imagel对c-Myc蛋白强度进行定量。(参见图13)。
基因表达谱分析(图14)。将PC3细胞用10μM Min9-S1处理24小时。使用RNAeasyPlus小型试剂盒(Qiagen，目录号74134)提取mRNA。使用来自Affymetrix的HTA 2.0分析基因表达谱。用Min9-S1或媒介物(VEH)处理的PC3转录谱中的四个Myc依赖性基因标记组的GSEA(Zeller等人，2003；Schuhmacher等人，2001；Kim等人，2006；Schlosser等人，2005)显示与Min9-S1处理的表达下调密切相关。在表中列出了在Min9-S1处理的PC3细胞中被抑制的基因组，包括每组中的基因数量(n)、校准的富集得分(NES)和统计学显著性检验(FDR q值)。(参见图14)。
MycCap FVB异体移植物模型(图15)。FVB小鼠分别在小鼠两侧皮下接种100ul基质胶中的1x106MycCap细胞。当肿瘤大小达到150mm3的平均大小时，基于肿瘤体积将小鼠随机分为2组。每天两次腹膜内给小鼠施用50mg/kg的361或媒介物(Veh)，持续2天。将治疗暂停10天，并以每天70mg/kg的较低剂量开始治疗，再持续9天。实验期间每周两次测量肿瘤大小。(参见图15)。
Myc抑制剂361与免疫疗法的组合(图16)。将MycCap FVB同种异体移植模型用361(50mg/kg)处理2天，随后用抗-PD-1抗体处理2天(100ug/天)，并保持此4-天处理周期4个周期。(参见图16)。
AML异种移植物模型中Myc抑制剂与Ara-C的联合治疗(图17)。用悬浮在PBS和基质胶(1:1)中的5x106密度的MV411细胞接种CB17SCID小鼠。在肿瘤达到～200至500mm3之后，基于肿瘤体积将小鼠随机分为6个不同的组。单独用媒介物NU031、NU975或与阿糖胞苷(Ara-C)组合治疗小鼠。与对照组相比，联合治疗显示出显著性差异。(参见图17)。
NCI60分布-NCI 60细胞一种剂量筛选
一般描述.截至2007年初，提交给NCI 60细胞筛选的所有化合物最初均在整个NCI60细胞组中以单一高剂量(10-5M)进行测试。只有在最少数量的细胞系中满足预定阈值抑制标准的化合物才能进行全部5-剂量测定。基于对DTP筛选历史数据的仔细分析，选择进入5-剂量筛选的阈值抑制标准，以有效捕获具有抗增殖活性的化合物。阈值标准可以随着其他可数据变得可利用而更新。
一-剂量数据的解释.将一-剂量数据报告为处理细胞生长百分比的平均值，并且从表面上来看与5-剂量试验的平均值相似。一-剂量测定报告的数字是相对于无药物对照和相对于时间为零值的的生长。这样既可以检测生长抑制率(数值在0到100之间)，也可以检测致死率(数值小于0)。这与下文所述的5剂量测定相同。例如，值为100表示没有生长抑制。数值为40将意味着60％的生长抑制率。数值为0表示在实验过程中没有净生长。-40的数值意味着40％的致死率。-100的数值表示所有细胞均已死亡。来自一-剂量平均值图表中的信息可用于比较分析。
NCI 60细胞5种剂量筛选(图18、图19和图20)。在5种剂量水平下，针对60细胞组评估了一种剂量筛选中显示出显著生长抑制作用的化合物。
使癌症筛选小组的人肿瘤细胞系在含有5％胎牛血清和2mM L-谷氨酰胺的RPMI1640培养基中生长。对于典型的筛选实验，根据单个细胞系的倍增时间的不同，将细胞接种到96孔微量滴定板的100μL中，板密度为5,000至40,000个细胞/孔。细胞接种后，在添加实验药物之前，将微量滴定板在37℃、5％CO2、95％空气和100％相对湿度下温育24h。
24h后，将每个细胞系的两个平板用TCA原位固定，以代表在添加药物时(Tz)每个细胞系的细胞群的测量值。将实验药物以所需最终最大测试浓度的400倍溶解在二甲亚砜中，并在使用前冷冻保存。在添加药物时，将等分的冷冻浓缩融化，并用含有50μg/ml庆大霉素的完全培养基稀释至所需的最终最大测试浓度的两倍。进行另外四次，10倍或1/2log连续稀释，得到总总计五种药物浓度加对照。将100μl这些不同药物稀释液的等分试样添加到已经包含100μl培养基的适合的微量滴定孔中，以达到所需的最终药物浓度。
添加药物后，将板在37℃、5％CO2、95％空气和100％相对湿度下再温育48h。对于贴壁细胞，可通过添加冷TCA终止测定。通过适度添加50μl冷的50％(w/v)TCA(终浓度，10％TCA)将细胞固定在原位，并在4℃下温育60分钟。弃去上清液，并用自来水将板洗涤五次并风干。向每个孔中加入在1％乙酸中的0.4％(w/v)的磺基罗丹明B(SRB)溶液(100μl)，并将板在室温下温育10分钟。染色后，通过用1％的乙酸洗涤5次来去除未结合的染料，并将板风干。随后将结合的污渍用10mM氨基丁三醇碱溶解，并在自动平板读出器上在515nm的波长处读取吸光度。对于悬浮细胞，方法是相同的，除外通过适度添加50μl 80％TCA(最终浓度，16％TCA)将沉降的细胞固定在孔的底部来终止测定。使用七个吸光度测量值[时间零(Tz)，对照生长(C)和在五个浓度水平的药物存在下测试生长(Ti)]，计算每种药物浓度水平下的生长百分比。将生长抑制百分比计算如下：
对于Ti>/＝Tz的浓度，[(Ti-Tz)/(C-Tz)]x100
对于Ti<Tz的浓度，[(Ti-Tz)/Tz]x100
对于每种实验试剂计算三个剂量响应参数。根据[(Ti-Tz)/(C-Tz)]x100＝50计算50％的生长抑制(GI50)，其为导致在药物温育过程中在对照细胞中净蛋白质增加减少50％的药物浓度(如通过SRB染色测定的)。根据Ti＝Tz计算导致总生长抑制(TGI)的药物浓度。根据[(Ti-Tz)/Tz]x100＝-50计算LC50(导致药物处理结束时与开始时相比测定的蛋白质降低50％的药物浓度)，表示处理后的细胞净缺失。如果达到活性水平，则为这三个参数中的每一个都计算出数值；然而，如果未达到或超过该效果，则将该参数的数值表示为大于或小于测试的最大或最小浓度。结果如图18、图19和图20中所示。
在上述描述中，对于本领域技术人员而言显而易见的是，在不脱离本发明的范围和精神的情况下，可以对本文公开的本发明进行各种替换和变型。本文示例性地描述的本发明可以在不存在本文未具体公开的任何一个要素或多个要素、一种或多种限制的情况下适当地实施。已经采用的术语和表述用作描述性术语，而不是限制性的，并且不意图在使用这样的术语和表达时排除所示出和描述的特征或其部分的任何等同形式，但是认识到在本发明的范围内可以进行各种变型。因此，应当理解，尽管已经通过特定实施方案和任选特征示例了本发明，但是本领域技术人员可以对本文所公开的理念进行变型和/或改变，并且将这样的变型和改变视为在本发明的范围内。
本文可以引用许多专利和非专利参考文献。所引用的参考文献通过引用整体并入本文。如果说明书中术语的定义与所引用参考文献中术语的定义之间存在不一致，则应基于本说明书中的定义来解释该术语。

Claims (23)

1.具有式I的化合物：
Figure FDA0003047485950000011
其中
R1为氢，或R1为芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R1在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、芳基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
n为0、1或2；
p为0或1；
X为O或NH，或R1(CH2)n(X)p-为任选地被烷基N-取代的N-哌嗪基；
m为0或1；
R2为氢或卤素，或R2为烷基、芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R2在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
R3为氢、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、芳基、苄基、羟基、卤素、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基；
R4为氢、氨基、烷基，或R4为芳基或苄基；R4任选地在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、芳基(例如苯基)、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基和烷基芳氧基中的一个或多个取代；
R5为烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基或卤素；
R6为氢、氨基、烷基，或R6为芳基或苄基；R6任选地在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、芳基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基和烷基芳氧基中的一个或多个取代；或R6和R5一起形成具有式
Figure FDA0003047485950000021
的环结构；
R7为氢或卤素，或R7为烷基、芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R7在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
条件是R4和R6中的至少一个为氢；
条件是如果R5为氢，则p为1且m为1；并且
条件是如果R1(CH2)n(X)p-为氢、羟基或烷基，且R5为羟基，则m为1，或R2和R3中的至少一个不为氢。
2.权利要求1的化合物，其中R2和R7中的至少一个为芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，且R2和R7任选地在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。
3.权利要求1的化合物，其中m为0且R2为氢；或其中R7为氢。
4.权利要求1的化合物，其中R2为芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，且R2任选地在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；且其中R7为氢。
5.权利要求1的化合物，其中m为0且R2为氢；且其中R7为芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，且R7任选地在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。
6.权利要求1的化合物，具有式I(i)或I(ii)：
Figure FDA0003047485950000031
7.权利要求1的化合物，具有选自Ia(i)、Ia(ii)、Ib(i)、Ib(ii)、Ic(i)和Ic(ii)的式：
Figure FDA0003047485950000032
8.具有式II的化合物：
Figure FDA0003047485950000033
其中
Y为C或N；
R1为氢或芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R1在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、芳基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
n为0、1或2；
p为0或1；
X为O或NH，或R1(CH2)n(X)p-为任选地被烷基N-取代的N-哌嗪基；
m为0或1；
R2为氢或卤素，或R2为烷基、芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R2在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
R3为氢、烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、芳基、苄基、羟基、卤素、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基；
R4为氢、氨基、烷基、芳基或苄基；R4任选地在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、芳基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基和烷基芳氧基中的一个或多个取代；
R5为烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基和卤素；
R6为氢、氨基、烷基、芳基或苄基；R6任选地在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、芳基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基和烷基芳氧基中的一个或多个取代；且
R7为氢或卤素，或R7为烷基、芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R7在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。
9.权利要求4的化合物，具有式IIa：
Figure FDA0003047485950000051
10.具有式III的化合物：
Figure FDA0003047485950000052
其中：
R1为氢或芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R1在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、芳基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
n为0、1或2；
p为0或1；
X为O或NH，或R1(CH2)n(X)p-为任选地被烷基N-取代的N-哌嗪基；
m为0或1；
R2为氢或卤素，或R2为烷基、芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R2在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
R4为氢、氨基、烷基、芳基或苄基；R4任选地在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、芳基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基和烷基芳氧基中的一个或多个取代；
R5为烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基和卤素；且
R7为氢或卤素，或R7为烷基、芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R7在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。
11.权利要求10的化合物，具有式IIIa或IIIb:
Figure FDA0003047485950000061
12.具有式IV的化合物：
Figure FDA0003047485950000062
其中：
R1为氢或芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R1在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、芳基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
n为0、1或2；
p为0或1；
X为O或NH，或R1(CH2)n(X)p-为任选地被烷基N-取代的N-哌嗪基；
Y为C或N；
Z为C或N；
m为0或1；
R2为氢或卤素，或R2为烷基、芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R2在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
R4为氢、氨基、烷基、芳基或苄基；R4任选地在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、芳基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基、烷氧基羰基、芳氧基和烷基芳氧基中的一个或多个取代；
R5为烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基和卤素；且
R7为氢或卤素，或R7为烷基、芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R7在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。
13.具有式V的化合物：
Figure FDA0003047485950000071
其中：
R1为氢或芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R1在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、芳基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
n为0、1或2；
p为0或1；
X为O或NH，或R1(CH2)n(X)p-为任选地被烷基N-取代的N-哌嗪基；
m为0或1；
R2为氢或卤素，或R2为烷基、芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R2在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代；
R5为烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基和卤素；且
R7为氢或卤素，或R7为烷基、芳基、苄基、杂芳基、环烷基或环杂烷基，任选地R7在一个或多个位置上被烷基、烷氧基、卤代烷基、卤代烷氧基、羟基、卤素、氰基、酰氨基、腙基、羰基、羧基和烷氧基羰基中的一个或多个取代。
14.药物组合物，包含权利要求1的化合物和适合的药用载体、赋形剂或稀释剂。
15.治疗癌症的方法，包括对患有癌症的患者施用权利要求14的组合物。
16.药物组合物，包含权利要求8的化合物和适合的药用载体、赋形剂或稀释剂。
17.治疗癌症的方法，包括对患有癌症的患者施用权利要求16的组合物。
18.药物组合物，包含权利要求10的化合物和适合的药用载体、赋形剂或稀释剂。
19.治疗癌症的方法，包括对患有癌症的患者施用权利要求18的组合物。
20.药物组合物，包含权利要求12的化合物和适合的药用载体、赋形剂或稀释剂。
21.治疗癌症的方法，包括对患有癌症的患者施用权利要求20的组合物。
22.药物组合物，包含权利要求13的化合物和适合的药用载体、赋形剂或稀释剂。
23.治疗癌症的方法，包括对患有癌症的患者施用权利要求22的组合物。
CN201880099196.0A 2018-08-31 2018-08-31 作为c-MYC靶向剂的取代的杂环 Pending CN114174265A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202510602198.9A CN120842150A (zh) 2018-08-31 2018-08-31 作为c-MYC靶向剂的取代的杂环

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/US2018/049175 WO2020046382A1 (en) 2018-08-31 2018-08-31 Substituted heterocycles as c-myc targeting agents

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202510602198.9A Division CN120842150A (zh) 2018-08-31 2018-08-31 作为c-MYC靶向剂的取代的杂环

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN114174265A true CN114174265A (zh) 2022-03-11

Family

ID=69645319

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201880099196.0A Pending CN114174265A (zh) 2018-08-31 2018-08-31 作为c-MYC靶向剂的取代的杂环
CN202510602198.9A Pending CN120842150A (zh) 2018-08-31 2018-08-31 作为c-MYC靶向剂的取代的杂环

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202510602198.9A Pending CN120842150A (zh) 2018-08-31 2018-08-31 作为c-MYC靶向剂的取代的杂环

Country Status (6)

Country Link
US (2) US12152007B2 (zh)
EP (2) EP4613331A2 (zh)
JP (1) JP2022511287A (zh)
CN (2) CN114174265A (zh)
ES (1) ES3028184T3 (zh)
WO (1) WO2020046382A1 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN118125978A (zh) * 2024-01-31 2024-06-04 安徽中医药大学 一种myc抑制剂及其制备方法和应用

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112675168A (zh) * 2020-12-23 2021-04-20 南京景瑞康分子医药科技有限公司 Itm-2c6在制备预防和/或治疗肿瘤药物中的应用
JP2025524199A (ja) * 2022-07-29 2025-07-25 ノースウェスタン ユニバーシティ Ｍｙｃの阻害剤及びその使用

Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR1396684A (fr) * 1963-05-04 1965-04-23 Ciba Geigy Nouvelles hydroxyaryl-pyrimidines, leur procédé de préparation et leur emploi
EP0280654A1 (de) * 1987-02-27 1988-08-31 Ciba-Geigy Ag Verfahren zur Verbesserung der fotochemischen Stabilität von Färbungen auf Polyesterfasermaterialien
JP2005225787A (ja) * 2004-02-12 2005-08-25 Nippon Kayaku Co Ltd Ｈｓｐ９０阻害剤
WO2006018082A1 (de) * 2004-08-13 2006-02-23 Merck Patent Gmbh 1,5-diphenyl-pyrazole
WO2007081966A2 (en) * 2006-01-09 2007-07-19 University Of Southern California Small molecules for treating cancer and abnormal cell proliferation disorders
CN101035766A (zh) * 2004-10-08 2007-09-12 默克专利有限公司 3－(2－羟基苯基)吡唑和它们作为hsp90调控剂的用途
WO2007136703A1 (en) * 2006-05-18 2007-11-29 Arena Pharmaceuticals, Inc. Primary amines and derivatives thereof as modulators of the 5-ht2a serotonin receptor useful for the treatment of disorders related thereto
US20120316182A1 (en) * 2011-06-10 2012-12-13 Calcimedica, Inc. Compounds that modulate intracellular calcium
US20130005666A1 (en) * 2011-06-29 2013-01-03 Cornell University Reporter system for high throughput screening of compounds and uses thereof
US20170253581A1 (en) * 2016-03-07 2017-09-07 Northwestern University SUBSTITUTED HETEROCYCLES AS c-MYC TARGETING AGENTS
CN107739337A (zh) * 2017-09-08 2018-02-27 长沙理工大学 一种镉、铝、铅离子螯合剂的制备方法

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA123484A (en) 1909-12-04 1910-01-25 John Henry Waterbury Milk strainer tank for cream separators
JP6142753B2 (ja) * 2012-09-28 2017-06-07 住友化学株式会社 テトラゾリノン化合物及びその用途
US10611730B2 (en) 2015-04-29 2020-04-07 Janssen Pharmaceutica Nv Benzimidazolone and benzothiazolone compounds and their use as AMPA receptor modulators

Patent Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR1396684A (fr) * 1963-05-04 1965-04-23 Ciba Geigy Nouvelles hydroxyaryl-pyrimidines, leur procédé de préparation et leur emploi
EP0280654A1 (de) * 1987-02-27 1988-08-31 Ciba-Geigy Ag Verfahren zur Verbesserung der fotochemischen Stabilität von Färbungen auf Polyesterfasermaterialien
JP2005225787A (ja) * 2004-02-12 2005-08-25 Nippon Kayaku Co Ltd Ｈｓｐ９０阻害剤
WO2006018082A1 (de) * 2004-08-13 2006-02-23 Merck Patent Gmbh 1,5-diphenyl-pyrazole
CN101035766A (zh) * 2004-10-08 2007-09-12 默克专利有限公司 3－(2－羟基苯基)吡唑和它们作为hsp90调控剂的用途
WO2007081966A2 (en) * 2006-01-09 2007-07-19 University Of Southern California Small molecules for treating cancer and abnormal cell proliferation disorders
WO2007136703A1 (en) * 2006-05-18 2007-11-29 Arena Pharmaceuticals, Inc. Primary amines and derivatives thereof as modulators of the 5-ht2a serotonin receptor useful for the treatment of disorders related thereto
US20120316182A1 (en) * 2011-06-10 2012-12-13 Calcimedica, Inc. Compounds that modulate intracellular calcium
US20130005666A1 (en) * 2011-06-29 2013-01-03 Cornell University Reporter system for high throughput screening of compounds and uses thereof
US20170253581A1 (en) * 2016-03-07 2017-09-07 Northwestern University SUBSTITUTED HETEROCYCLES AS c-MYC TARGETING AGENTS
WO2017155942A2 (en) * 2016-03-07 2017-09-14 Northwestern University Substituted heterocycles as c-myc targeting agents
CN107739337A (zh) * 2017-09-08 2018-02-27 长沙理工大学 一种镉、铝、铅离子螯合剂的制备方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALEXANDER V. SAPEGIN ET AL.: ""New tetracyclic 1, 4-oxazepines constructed via practically simple tandem condensation strategy from readily available synthons"", 《TETRAHEDRON》, vol. 70, 28 December 2013 (2013-12-28), pages 1077 - 1083, XP028808756, DOI: 10.1016/j.tet.2013.12.026 *
B. VISHNU NAYAK ET AL.: ""Monoamine oxidase inhibitory activity of 3, 5-biaryl-4, 5-dihydro-1Hpyrazole-1-carboxylate derivatives"", 《EUROPEAN JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY》, vol. 69, 18 September 2013 (2013-09-18), pages 762 - 767, XP028762837, DOI: 10.1016/j.ejmech.2013.09.010 *
HWANGSEO PARK ET AL.: ""A novel class of Hsp90 inhibitors isolated by structure-based virtual screening"", 《BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS》, vol. 17, 1 September 2007 (2007-09-01), pages 6345 - 6349, XP022297156, DOI: 10.1016/j.bmcl.2007.08.069 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN118125978A (zh) * 2024-01-31 2024-06-04 安徽中医药大学 一种myc抑制剂及其制备方法和应用
CN118125978B (zh) * 2024-01-31 2025-08-12 安徽中医药大学 一种myc抑制剂及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
EP3844152B1 (en) 2025-05-07
EP3844152A1 (en) 2021-07-07
CN120842150A (zh) 2025-10-28
US12152007B2 (en) 2024-11-26
WO2020046382A1 (en) 2020-03-05
EP3844152C0 (en) 2025-05-07
JP2022511287A (ja) 2022-01-31
EP3844152A4 (en) 2022-10-26
US20210395206A1 (en) 2021-12-23
US20250084040A1 (en) 2025-03-13
ES3028184T3 (en) 2025-06-18
EP4613331A2 (en) 2025-09-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10093668B2 (en) Substituted aromatic N-heterocyclic compounds as inhibitors of mitogen-activated protein kinase interacting kinase 1 (Mnk1) and 2 (Mnk2)
Diana et al. Synthesis and antitumor activity of 2, 5-bis (3′-indolyl)-furans and 3, 5-bis (3′-indolyl)-isoxazoles, nortopsentin analogues
US20250084040A1 (en) SUBSTITUTED HETEROCYCLES AS c-MYC TARGETING AGENTS
US11142504B2 (en) Substituted heterocycles as c-MYC targeting agents
Cheng et al. Design, synthesis and biological evaluation of novel indole derivatives as potential HDAC/BRD4 dual inhibitors and anti-leukemia agents
EP3426636B1 (en) Specific 2-(4-(phenoxy)-1h-pyrazol-3-yl)phenol derivatives as inhibitors of c-myc/dna binding activity for treating cancer
CN101896457A (zh) 组蛋白脱乙酰基酶抑制剂
Kassab et al. Novel benzotriazole N-acylarylhydrazone hybrids: Design, synthesis, anticancer activity, effects on cell cycle profile, caspase-3 mediated apoptosis and FAK inhibition
US20240207413A1 (en) Proteolysis-targeting chimeric molecules (protacs) that induce degradation of c-myc protein
EA023176B1 (ru) Арилсульфонилпиразолинкарбоксамидиновые производные в качестве антагонистов 5-нт
US11420957B2 (en) Substituted heterocycles as c-MYC targeting agents
WO2018237007A1 (en) Inhibitors of phosphoinositide 3-kinase and histone deacetylase for treatment of cancer
HK1203943A1 (zh) 喹唑啉二酮衍生物
KR20160003196A (ko) ＂니코틴아미드 포스포리보실트랜스퍼라제의 억제제, 조성물, 제품 및 그의 용도＂
JP2007501267A (ja) 新規イミダゾール誘導体、その製造法及びその医薬としての使用
Avanzo et al. 1, 2, 4-Triazole D-ribose derivatives: Design, synthesis and antitumoral evaluation
KR20100132553A (ko) 신규한 ｎ-(2-아미노-페닐)-아크릴아미드
KR20140057483A (ko) 술린닥의 유도체, 이의 사용 및 제조
HK40056420B (zh) 取代的杂环作为c-myc靶向剂
HK40056420A (zh) 取代的杂环作为c-myc靶向剂
KR20230133396A (ko) Rip2 키나아제 억제제로서의 헤테로아릴 화합물, 이의 조성물 및 용도
CN101684135B (zh) 甲基呋喃核苷类化合物及其制备方法和应用
Defant et al. Synthesis and In‐Vitro Cytotoxicity Evaluation of Novel Naphtindolizinedione Derivatives, Part II: Improved Activity for Aza‐Analogues
CN120018844A (zh) Myc的抑制剂及其用途
Miranda et al. Bifunctional compound and its use in immunotherapy

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20220311

RJ01 Rejection of invention patent application after publication