CN103819356A - 一种苦柯胺b的类似物或其药用盐的制备方法及用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及具有式（1）结构的苦柯胺B类似物和其药用盐，以及它们的制备方法和用途。

Description

一种苦柯胺B的类似物或其药用盐的制备方法及用途

技术领域

本发明属于医药技术领域，特别涉及多种苦柯胺B的类似物或其药用盐及其制备方法和苦柯胺B类似物和其盐用于制备预防和治疗脓毒症药物的用途。

背景技术

脓毒症是感染因素介导的全身炎症反应综合征(systemic inflammatory responsesyndrome,SIRS)，是烧伤、创伤、肿瘤和感染性疾病等患者的常见并发症，现已成为全球公认的导致重症监护病房（ICU）患者死亡的首要因素。脓毒症的现有临床治疗手段主要为早期使用抗生素和纠正缺血低氧性损害，采用常规治疗器官衰竭和休克的方法，尚无特效治疗措施。药物治疗通常以经验性地使用糖皮质激素、胰岛素、免疫调节剂等非特异性药物为主，但疗效一直未被肯定。20世纪90年代，抗lipid A的单抗HA-1A（Centoxin）曾在海湾战争期间用于美军战伤和烧伤后脓毒症的治疗，该药也曾在欧洲部分国家和日本临床使用,但因对脓毒症休克反而可能有不利作用，1992年未能获得美国FDA的批准，随即亦从欧洲市场消失。重组人活化蛋白C（recombinant human activated protein C，rhAPC）是目前唯一被FDA批准的治疗脓毒症的药物（商品名Xigris）。临床试验结果显示rhAPC可降低脓毒症病人28天死亡率，于2001年11月经FDA批准上市。然而2005年的第二次临床试验结果却显示rhAPC组28天的死亡率与对照组没有差异。2007年的临床试验中，rhAPC不仅不具有提高脓毒症病人生存率的作用，还具有导致患者严重出血倾向的副作用，因此组织此次临床试验的机构建议不要推荐使用其作为治疗脓毒症的临床药物。

病原体相关分子模式（pathogen-associated molecular patterns，PAMPs）及其模式识别受体（pattern recognition receptors，PRRs）的发现，使人类对脓毒症的认识发生了质的飞跃。现已证实脓毒症的发病机制是病原体侵入机体后，其菌体的PAMPs（主要包括脂多糖/内毒素（lipopolysaccharide/endotoxin,LPS）、细菌基因组DNA（CpG DNA）和肽聚糖（peptideglycan,PGN）等）被机体非特异性免疫系统中炎症反应细胞膜上/细胞内相应的PRRs识别，导致炎症反应细胞活化，释放炎症介质而引发全身性炎症反应，进而导致组织器官的损伤。因此，在既往拮抗炎症反应中的重要效应分子，纠正凝血、补体等系统的紊乱，以及单一拮抗LPS等治疗措施失败之际，寻找同时拮抗多个主要PAMPs（LPS、CpG DNA和PGN等）的药物，从源头阻断脓毒症的发生可能为其治疗带来突破性进展。

苦柯胺B（kukoamine B），又名地骨皮乙素，是从中药地骨皮中分离得到的一种天然存在的生物碱类化合物，化学结构如下：

苦柯胺B最早由日本的Shinji Funayama于1995年从地骨皮中发现，以游离碱形式存在（S.Funayama,G.Zhang和S.Nozoe.Phytochemistry.1995;38:1529-1531）。苦柯胺B在不同产地、采收期的地骨皮药材中含量差异较大，因此从植物中直接提取、分离和纯化苦柯胺B用以制备预防和治疗脓毒症的药物具有来源不稳定、生产成本高、能耗大等缺点。第三军医大学申请发明专利：苦柯胺B盐及制备方法和用途（申请号：201010539028.4），该发明专利公开了苦柯胺B盐化合物的化学结构和化学合成方法及其在治疗脓毒症药物中的作用。苦柯胺B盐化合物的合成经过14步的反应过程，才最终得到苦柯胺B盐化合物，反应路线过长。

发明内容

本发明针对上述苦柯胺B或其类似物的不足，在提供一种苦柯胺B的类似物或其药用盐。

本发明的技术方案是：

提供一种苦柯胺B的类似物或其药用盐，所述苦柯胺B类似物具有如下化学结构

其中，R₁为OH或OCH₃以及其他活性基团，R₂为H或CH₃以及其它活性基团，n=0-2。

优选的苦柯胺B的类似物为：

本发明的苦柯胺B的类似物的药用盐为无氧酸或含氧酸的无机酸或羧酸或羟基酸或磺酸或酸性氨基酸的有机酸。

所述无氧酸为盐酸和氢溴酸中的任意一种。

所述含氧酸为硫酸、磷酸和硝酸中的任意一种。

所述无机酸为盐酸、氢溴酸、硫酸和磷酸中的任意一种。

所述羧酸为醋酸、丙酸、丁酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、己二酸、苯甲酸、苯丙酸、肉桂酸、硬脂酸、三氟醋酸、马来酸、富马酸、烟酸和棕榈酸中的任意一种。

所述羟基酸为苹果酸、柠檬酸、乳酸、羟基丁酸、乳糖酸、酒石酸、扁桃酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸和抗坏血酸中的任意一种。

所述磺酸为甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸和樟脑磺酸中的任意一种。

所述酸性氨基酸为谷氨酸和天冬氨酸中的任意一种。

所述有机酸为醋酸、马来酸、琥珀酸、苹果酸、乳酸、酒石酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、谷氨酸和天冬氨酸中的任意一种。

所述的苦柯胺B类似物的盐中的酸广泛选自多种无机酸和/或有机酸，主要是从医药上允许使用的各类酸中分别选取2～3个具有代表性的酸对制备苦柯胺B盐的共性问题进行说明，包括从无机酸中的无氧酸中选取盐酸和氢溴酸，含氧酸中选取硫酸和磷酸，有机酸中的羧酸中选取醋酸、马来酸和琥珀酸，羟基酸中选取苹果酸、乳酸和酒石酸，磺酸中选取甲磺酸和对甲苯磺酸，酸性氨基酸中选取谷氨酸和天冬氨酸。虽然申请人的实验只提出了这四种无机酸和十种有机酸，但是其他无机酸和/或有机酸（包括本发明已例举的和未例举的酸）均是可以相同方式制备苦柯胺B盐。

优选的本发明的苦柯胺B类似物的盐为盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、醋酸盐。

最优选的为盐酸盐、氢溴酸盐。

本发明还提供含有苦柯胺B类似物及其盐的药物组合物，以及药物组合物在制备预防和治疗脓毒症的药物中的应用。

本发明的药物组合物可以制备成任何药用剂型，如可经胃肠道给药的剂型，如以散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、溶液剂、乳剂、混悬剂等剂型给药；或非经胃肠道给药的剂型，如注射给药，腔道给药，粘膜给药等方式给药。对成人而言，用药量以每公斤体重每天0.1～15mg为宜，用药方式可以为一天一次或多次。

本发明所述的苦柯胺B类似物及其盐的药物组合物，包含苦柯胺B类似物及其盐作为活性成分和药学上可接受的载体和/或稀释剂。

本发明的药物组合物，其口服给药的制剂可含有常用的赋形剂，诸如粘合剂、填充剂、稀释剂、压片剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、调味剂和湿润剂，必要时可对片剂进行包衣。

适用的填充剂包括纤维素、甘露糖醇、乳糖和其它类似的填充剂。适宜的崩解剂包括淀粉、聚乙烯吡咯烷酮和淀粉衍生物，例如羟基乙酸淀粉钠。适宜的润滑剂包括，例如硬脂酸镁。适宜的药物可接受的湿润剂包括十二烷基硫酸钠。

可通过混合，填充，压片等常用的方法制备固体口服组合物。进行反复混合可使活性物质分布在整个使用大量填充剂的那些组合物中。

口服液体制剂的形式例如可以是水性或油性悬浮液、溶液、乳剂、糖浆剂或酏剂，或者可以是一种在使用前可用水或其它适宜的载体复配的干燥产品。这种液体制剂可含有常规的添加剂，诸如悬浮剂，例如山梨醇、糖浆、甲基纤维素、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶或氢化食用脂肪，乳化剂，例如卵磷脂、脱水山梨醇一油酸酯或阿拉伯胶；非水性载体（它们可以包括食用油），例如杏仁油、分馏椰子油、诸如甘油的酯的油性酯、丙二醇或乙醇；防腐剂，例如对羟基苯甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸，并且如果需要，可含有常规的香味剂或着色剂。

对于注射剂，制备的液体单位剂型含有本发明的活性物质和无菌载体。根据载体和浓度，可以将此化合物悬浮或者溶解。溶液的制备通常是通过将活性物质溶解在一种载体中，在将其装入一种适宜的小瓶或安瓿前过滤消毒，然后密封。辅料例如一种局部麻醉剂、防腐剂和缓冲剂也可以溶解在这种载体中。为了提高其稳定性，可在装入小瓶以后将这种组合物冰冻，并在真空下将水除去。

本发明的药物组合物，在制备成药剂时可选择性的加入适合的药物可接受的载体，所述药物可接受的载体选自：甘露醇、山梨醇、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素C、EDTA二钠、EDTA钙钠，一价碱金属的碳酸盐、醋酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化钠、氯化钾、乳酸钠、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、β－环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。

本发明还提供苦柯胺B类似物及其盐的制备方法。

本发明所述的苦柯胺B类似物结构如下

其中，R₁为OH或OCH₃以及其他活性基团，R₂为H或CH₃以及其它活性基团，n=0-2。

该类似物的制备方法，包括以下步骤：

1，4-丁二胺与丙烯腈发生加成反应，得到端位的二氰基化合物。

上述二氰基化合物与保护的3,4-二羟基苯基丙酸反应，得到双酰胺双氰基化合物。

上述双酰胺双氰基化合物经氰基氢化还原及后续步骤得到目标化合物A2的甲磺酸盐。

本发明所述的苦柯胺B类似物及其盐可以用于制备预防和治疗脓毒症药物。

申请人通过药理活性实验显示：

本发明的苦柯胺B类似物与LPS的活性中心lipid A的结合能力比苦柯胺B的结合能力更强，有个别类似物甚至远远超过苦柯胺B的结合能力；这些具有较强结合能力的类似物在体外以剂量依赖的方式中和LPS；这些具有较强结合能力的类似物以剂量依赖的方式分别抑制LPS和CpG DNA诱导RAW264.7细胞释放炎症介质。

本发明使用苦柯胺B类似物及其盐的药物组合物，不同于现有的糖皮质激素、胰岛素、抗炎症介质药物、抗凝药物、抗LPS多肽及lipid A单抗等药物；疗效好，能够通过同时拮抗多个病原分子从而显著抑制其诱导的炎症反应，为脓毒症的治疗提供了更多的可选择的小分子化合物。

本发明广泛选取多种无机酸和/或有机酸对制备苦柯胺B类似物药学上可接受的盐的共性问题进行说明，化学和药学领域的技术人员可以理解，使用同类的无机酸和/或有机酸均可以相同的方式，通过化学领域熟知的方法制备苦柯胺B类似物药学上可接受的盐。因此应当说明，用其他无机酸和/或有机酸替代本发明列举的无机酸和/或有机酸，均应属于本发明的技术方案内容和专利保护范围，本领域技术人员在本说明的启示下对本发明实施所作的任何变动均在本申请的权利要求范围之内。

LPS和CpG DNA是导致脓毒症发病的关键致病因子，药物对LPS和CpG DNA的拮抗反映了其对脓毒症的防治作用。

具体实施方式

以下实施例是对本发明苦柯胺B类似物详细说明，通过这个说明揭示了本发明其他化合物使用的主要合成路线和实验方法。应当理解，以下所述仅为本发明的较佳实施例，其不以任何形式限制本发明。应当说明，如果不脱离本发明的精神和范围，对本发明进行修改或者等同替换的，均应涵盖在本发明的权利要求的保护范围当中。

实施例1：苦柯胺B类似物（A2）的合成

1.1实验方法：

(1)化合物1的合成：

16.7g丁二胺(0.19mol)溶于400ml甲醇中，室温搅拌下滴入丙烯腈(27.2ml,0.40mol)的甲醇(200ml)溶液，滴加结束后，室温反应5±2h，通过薄层层析监控反应终点，直至反应完全。浓缩得化合物1，无色至黄色油状物34.9g，收率94.7%。

(2)化合物2的合成：

34.9g化合物1(0.18mol)，56.3ml三乙胺(0.40mol)溶解于400ml干燥的二氯甲烷中，将34.3g3,4-二甲氧基苯丙酰氯(0.19mol)溶于干燥二氯甲烷200ml溶解，于冰浴搅拌下缓慢滴入，滴加结束后，在冰浴条件下继续反应，通过薄层层析监控反应终点（硅胶板：GF₂₅₄，展开剂：二氯甲烷：甲醇=10:1，紫外灯下检视），直至反应完全。浓缩有机溶剂，加入稀盐酸500ml、乙酸乙酯400ml×3萃取，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得化合物2,黄褐色至黑色油状物141.3g，收率88.8%。

(3)化合物3的合成：

141.3g化合物2(0.16mol)溶于20ml四氢呋喃中，加入饱和的氨的甲醇溶液1000ml和Raney Ni6g，排尽空气后，约3-8MPa的氢气压力下，于高压釜中50℃搅拌反应8±2h，通过薄层层析监控反应终点，直至反应完全。抽滤（硅藻土助滤），浓缩得化合物3，绿色油状物124.7g，收率87.5%。

(4)化合物4的合成：

124.7g化合物3(0.14mol)，39.2ml三乙胺(0.30mol)溶于400ml的二氯甲烷中，冰浴搅拌下，缓慢滴入氯甲酸苄酯(40.6ml,0.29mol)的二氯甲烷(100ml)溶液，滴加结束后，在冰浴条件下继续反应，通过薄层层析监控反应终点（直至反应完全。加入稀盐酸1000ml、二氯甲烷600ml×3萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得粗品。柱层析，得纯品化合物4，微黄色至黄色油状物114.1g，收率71.4%。

(5)化合物5的合成：

114.1g化合物4(0.10mol)溶于300ml四氢呋喃中，加入1000ml甲醇，先用有机滤膜过滤，再加入16.4ml甲磺酸(0.25mol)，11.4g10%钯/碳后，排尽空气，氢气常压下室温反应15±2h，通过薄层层析监控反应终点，直至反应完全。过滤，干燥乙酸乙酯洗涤，真空干燥得纯品化合物5，白色至类白色粉末50.6g，收率70.0%。

对化合物5的化学结构进行¹H NMR测定：

¹H NMR:6.8(2H),6.7(4H),5.4(4H),5.1(4H),3.2(8H),2.9(4H),2.8(6H),2.6(4H),2.5(4H),1.9(4H),1.6(4H)。

ESI-MS(M+1):531.3。

测定得到该物质的化学式为：

其他苦柯胺B类似物的制备方法如下：

其中，R为OH或OCH₃以及其他活性基团，n=0-2。

实施例2：苦柯胺B类似物有机酸盐的合成

实验方法：将实施例1中化合物5的合成中甲磺酸换为相应的有机酸，得到相对应的有机酸盐，如苹果酸盐，乳酸盐，琥珀酸盐，甲磺酸盐等。

实施例3：苦柯胺B类似物无机酸盐的合成

实验方法：将实施例1中化合物5的合成中甲磺酸换为相应的无机酸，得到相对应的无机酸盐，如盐酸盐，硫酸盐，磷酸盐，氢溴酸盐等。

实施例4：苦柯胺B类似物对LPS诱导RAW264.7细胞释放TNF-α的影响

实验方法：采用含有10%NCS（v/v）的DMEM培养液将RAW264.7细胞稀释至1×10⁶/mL，加入96孔板（200μl/孔），在37℃、体积分数为5%的CO₂条件下孵育4h贴壁后；更换新鲜培养液，加入终浓度为100μg/ml的各种苦柯胺B类似物，随即加入LPS（终浓度100ng/ml），同时设不加任何刺激物的空白对照组（medium），继续孵育4h；取上清按照ELISA试剂盒操作说明进行操作，检测TNF-α的浓度，结果以均值±标准差表示。

实验结果：苦柯胺B类似物可以抑制LPS诱导的TNF-α释放，与对照组相比具有显著差异（p<0.01）。TNF-α的大量或持续释放对脓毒症和自身免疫性疾病的病理损伤具有重要意义，因此抑制TNF-α的释放可以有效发挥对脓毒症和自身免疫性疾病的防治作用，结果如表1所示。

表1、苦柯胺B类似物抑制LPS诱导RAW264.7细胞释放炎症介质

实施例5苦柯胺B类似物的盐抑制LPS诱导RAW264.7细胞释放炎症介质实验：

实验方法：采用DMEM培养液将RAW264.7细胞稀释至1×10⁶/ml，加入96孔板（200μl/孔），在37℃、体积分数为5%的CO₂条件下孵育4小时，贴壁后更换细胞上清为200μl无血清的DMEM培养液，然后加入LPS（终浓度100ng/ml），同时分别加入终浓度为100μM的各种苦柯胺B类似物的盐（包括盐酸盐，氢溴酸盐，硫酸盐，磷酸盐，醋酸盐，苹果酸盐，乳酸盐），空白对照组（Medium）不加LPS，继续孵育4小时，取上清，按照ELISA试剂盒操作说明检测TNF-α的浓度,实验结果见表2。

表2、柯胺B类似物的盐抑制LPS诱导RAW264.7细胞释放炎症介质

实验结果表明多数苦柯胺B类似物的盐均能抑制LPS诱导RAW264.7细胞释放炎症介质TNF-α。

实施例6：苦柯胺B类似物（B1、B2、B3）药用盐的合成

化合物B2甲磺酸盐的具体制备方法：

(1)化合物6的合成：

16.7g1，4-丁二胺(0.19mol)溶于400ml甲醇中，室温搅拌下滴入丙烯腈(27.2ml,0.40mol)的甲醇(200ml)溶液，滴加结束后，室温反应5±2h，通过薄层层析监控反应终点，直至反应完全。浓缩得化合物6，无色至黄色油状物34.9g，收率94.7%。

(2)化合物7的合成：

34.9g化合物6(0.18mol)，56.3ml三乙胺(0.40mol)溶解于400ml干燥的二氯甲烷中，将84g3,4-二甲氧基苯丙酰氯(0.37mol)溶于干燥二氯甲烷200ml溶解，于冰浴搅拌下缓慢滴入，滴加结束后，在冰浴条件下继续反应，通过薄层层析监控反应终点（硅胶板：GF₂₅₄，展开剂：二氯甲烷：甲醇=10:1，紫外灯下检视），直至反应完全。浓缩有机溶剂，加入稀盐酸500ml、乙酸乙酯400ml×3萃取，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得化合物7,黄褐色油状物92g，收率88%。

(3)化合物8的合成：

92g化合物7(0.16mol)溶于20ml四氢呋喃中，加入饱和的氨的甲醇溶液1000ml和Raney Ni6g，排尽空气后，约3-8MPa的氢气压力下，于高压釜中50℃搅拌反应8±2h，通过薄层层析监控反应终点，直至反应完全。抽滤（硅藻土助滤），浓缩得化合物8，绿色油状物82g，收率88%。

(4)化合物9的合成：

82g化合物8(0.14mol)，39.2ml三乙胺(0.30mol)溶于400ml的二氯甲烷中，冰浴搅拌下，缓慢滴入氯甲酸苄酯(40.6ml,0.29mol)的二氯甲烷(100ml)溶液，滴加结束后，在冰浴条件下继续反应，通过薄层层析监控反应终点（直至反应完全。加入稀盐酸1000ml、二氯甲烷600ml×3萃取，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得粗品。柱层析，得纯品化合物9，微黄色至黄色油状物92g，收率79%。

(5)化合物10的合成：

92g化合物9(0.11mol)溶于300ml四氢呋喃中，加入1000ml甲醇，先用有机滤膜过滤，再加入16.4ml甲磺酸(0.25mol)，11.4g10%钯/碳后，排尽空气，氢气常压下室温反应15±2h，通过薄层层析监控反应终点，直至反应完全。过滤，干燥乙酸乙酯洗涤，真空干燥得纯品化合物10，白色至类白色粉末54g，收率73%。

对化合物10的化学结构进行测定，测定方法：

¹H NMR:6.8(2H),6.7(4H),5.1(4H),3.8(12H),3.2(8H),2.9(4H),2.8(6H),2.6(4H),2.5(4H),1.9(4H),1.6(4H)。

ESI-MS(M+1):587.3

测定得到该物质的化学式为：

使用1，3-丙二胺作为起始原料，得到化合物B1。使用1，5-戊二胺作为起始原料，得到化合物B3。

苦柯胺B类似物有机酸盐的合成

实验方法：将实施例6中化合物10的合成中甲磺酸换为相应的有机酸，得到相对应的有机酸盐，如苹果酸盐，乳酸盐，琥珀酸盐，甲磺酸盐等。

苦柯胺B类似物无机酸盐的合成

实验方法：将将实施例6中化合物10的合成中甲磺酸换为相应的无机酸，得到相对应的无机酸盐，如盐酸盐，硫酸盐，磷酸盐，氢溴酸盐等。

实施例7：苦柯胺B类似物（C1、C2、C3）药用盐的合成

化合物C2甲磺酸盐的具体制备方法：

(1)化合物11的合成：

16.7g丁二胺(0.19mol)溶于400ml甲醇中，室温搅拌下滴入丙烯腈(27.2ml,0.40mol)的甲醇(200ml)溶液，滴加结束后，室温反应5±2h，通过薄层层析监控反应终点，直至反应完全。浓缩得化合物11，无色至黄色油状物34.9g，收率94.7%。

(2)化合物12的合成：

34.9g化合物11(0.18mol)，56.3ml三乙胺(0.40mol)溶解于400ml干燥的二氯甲烷中，将140.6g3,4-二苄氧基苯丙酰氯(0.37mol)溶于干燥二氯甲烷200ml溶解，于冰浴搅拌下缓慢滴入，滴加结束后，在冰浴条件下继续反应，通过薄层层析监控反应终点（硅胶板：GF₂₅₄，展开剂：二氯甲烷：甲醇=10:1，紫外灯下检视），直至反应完全。浓缩有机溶剂，加入稀盐酸500ml、乙酸乙酯400ml×3萃取，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得化合物12，黄褐色至黑色油状物141.3g，收率88.8%。

(3)化合物13的合成：

141.3g化合物12(0.16mol)溶于20ml四氢呋喃中，加入饱和的氨的甲醇溶液1000ml和Raney Ni6g，排尽空气后，约3-8MPa的氢气压力下，于高压釜中50℃搅拌反应8±2h，通过薄层层析监控反应终点，直至反应完全。抽滤（硅藻土助滤），浓缩得化合物13，绿色油状物124.7g，收率87.5%。

(4)化合物14的合成：

124.7g化合物13(0.14mol)在冷却下缓慢加入72g90%甲酸水溶液中，滴加63ml37%甲醛溶液，加热至回流，产生大量气泡，回流反应8小时，冷却，加入4N盐酸，旋干，加入100ml水和500ml二氯甲烷，加入18N氢氧化钠水溶液，分液，用二氯甲烷萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，抽滤，旋干，得纯品化合物14，微黄色至黄色油状物83g，收率65%。

(5)化合物15的合成：

83g化合物14(0.09mol)溶于300ml四氢呋喃中，加入1000ml甲醇，先用有机滤膜过滤，再加入16.4ml甲磺酸(0.25mol)，11.4g10%钯/碳后，排尽空气，氢气常压下室温反应15±2h，通过薄层层析监控反应终点，直至反应完全。过滤，干燥乙酸乙酯洗涤，真空干燥得纯品化合物15，白色至类白色粉末50.6g，收率70.0%。

对化合物15的化学结构进行¹H NMR测定：

¹H NMR:6.8(2H),6.7(4H),5.4(4H),3.2(8H),2.9(4H),2.8(6H),2.6(4H),2.5(4H)，3(12H),1.9(4H),1.6(4H)。

ESI-MS(M+1):587.3。

测定得到该物质的化学式为：

使用1，3-丙二胺作为起始原料，得到化合物C1。使用1，5-戊二胺作为起始原料，得到化合物C3。

苦柯胺B类似物有机酸盐的合成

实验方法：将实施例7中化合物15的合成中甲磺酸换为相应的有机酸，得到相对应的有机酸盐，如苹果酸盐，乳酸盐，琥珀酸盐，甲磺酸盐等。

苦柯胺B类似物无机酸盐的合成

实验方法：将将实施例7中化合物15的合成中甲磺酸换为相应的无机酸，得到相对应的无机酸盐，如盐酸盐，硫酸盐，磷酸盐，氢溴酸盐等。

实施例8：苦柯胺B类似物（D1、D2、D3）药用盐的合成

化合物D2甲磺酸盐的具体制备方法：

(1)化合物16的合成：

16.7g1，4-丁二胺(0.19mol)溶于400ml甲醇中，室温搅拌下滴入丙烯腈(27.2ml,0.40mol)的甲醇(200ml)溶液，滴加结束后，室温反应5±2h，通过薄层层析监控反应终点，直至反应完全。浓缩得化合物16，无色至黄色油状物34.9g，收率94.7%。

(2)化合物17的合成：

34.9g化合物16(0.18mol)，56.3ml三乙胺(0.40mol)溶解于400ml干燥的二氯甲烷中，将84g3,4-二甲氧基苯丙酰氯(0.37mol)溶于干燥二氯甲烷200ml溶解，于冰浴搅拌下缓慢滴入，滴加结束后，在冰浴条件下继续反应，通过薄层层析监控反应终点（硅胶板：GF₂₅₄，展开剂：二氯甲烷：甲醇=10:1，紫外灯下检视），直至反应完全。浓缩有机溶剂，加入稀盐酸500ml、乙酸乙酯400ml×3萃取，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，浓缩得化合物17，黄褐色油状物92g，收率88%。

(3)化合物18的合成：

92g化合物17(0.16mol)溶于20ml四氢呋喃中，加入饱和的氨的甲醇溶液1000ml和Raney Ni6g，排尽空气后，约3-8MPa的氢气压力下，于高压釜中50℃搅拌反应8±2h，通过薄层层析监控反应终点，直至反应完全。抽滤（硅藻土助滤），浓缩得化合物18，绿色油状物82g，收率88%。

(4)化合物19的合成：

82g化合物18(0.14mol)在冷却下缓慢加入72g90%甲酸水溶液中，滴加63ml37%甲醛溶液，加热至回流，产生大量气泡，回流反应8小时，冷却，加入4N盐酸，旋干，加入100ml水和500ml二氯甲烷，加入18N氢氧化钠水溶液，分液，用二氯甲烷萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，抽滤，旋干，得纯品化合物19，微黄色至黄色油状物59g，收率66%。

(5)化合物20的合成：

59g化合物19(0.09mol)溶于300ml四氢呋喃中，加入1000ml甲醇，加入16.4ml甲磺酸(0.25mol)，室温反应1h，。旋干，干燥乙酸乙酯洗涤，真空干燥得纯品化合物20，白色至类白色粉末50g，收率68%。

对化合物20的化学结构进行¹H NMR测定：

¹H NMR:6.8(2H),6.7(4H),3.8(12H),3.2(8H),2.9(4H),2.8(6H),2.6(4H),2.5(4H),2.3(12H),1.9(4H),1.6(4H)。

ESI-MS(M+1):643.5。

测定得到该物质的化学式为：

使用1，3-丙二胺作为起始原料，得到化合物D1。使用1，5-戊二胺作为起始原料，得到化合物D2。

苦柯胺B类似物有机酸盐的合成

实验方法：将实施例8中化合物20的合成中甲磺酸换为相应的有机酸，得到相对应的有机酸盐，如苹果酸盐，乳酸盐，琥珀酸盐，甲磺酸盐等。

苦柯胺B类似物无机酸盐的合成

实验方法：将实施例8中化合物20的合成中甲磺酸换为相应的无机酸，得到相对应的无机酸盐，如盐酸盐，硫酸盐，磷酸盐，氢溴酸盐等。

Claims (10)

1.一种苦柯胺B的类似物或其药用盐，其特征在于：所述苦柯胺B类似物具有如下化学结构

其中，R₁为OH或OCH₃以及其他活性基团，R₂为H或CH₃以及其它活性基团，n=0-2，其中所述苦柯胺B的类似物的药用盐为无氧酸或含氧酸的无机酸或羧酸或羟基酸或磺酸或酸性氨基酸的有机酸。

2.根据权利要求1所述的苦柯胺B的类似物或其药用盐，其特征在于，所述苦柯胺B的类似物为下列化合物：

3.根据权利要求1或2所述的苦柯胺B的类似物或其药用盐，其特征在于，其中所述无氧酸为盐酸和氢溴酸中的任意一种。

4.根据权利要求1或2所述的苦柯胺B的类似物或其药用盐，其特征在于：其中所述含氧酸为硫酸、磷酸和硝酸中的任意一种。

5.根据权利要求1或2所述的苦柯胺B的类似物或其药用盐，其特征在于：其中所述羧酸为醋酸、丙酸、丁酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、己二酸、苯甲酸、苯丙酸、肉桂酸、硬脂酸、三氟醋酸、马来酸、富马酸、烟酸和棕榈酸中的任意一种。

6.根据权利要求1或2所述的苦柯胺B的类似物或其药用盐，其特征在于：其中所述羟基酸为苹果酸、柠檬酸、乳酸、羟基丁酸、乳糖酸、酒石酸、扁桃酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸和抗坏血酸中的任意一种。

7.根据权利要求1或2所述的苦柯胺B的类似物或其药用盐，其特征在于：所述磺酸为甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸和樟脑磺酸中的任意一种。

8.根据权利要求1或2所述的苦柯胺B的类似物或其药用盐，其特征在于：所述酸性氨基酸为谷氨酸和天冬氨酸中的任意一种。

9.一种药物组合物，包含权利要求1或2所述的苦柯胺B的类似物或其药用盐。

10.权利要求1或2的苦柯胺B的类似物或其药用盐以及含有它们的组合物在制备预防和治疗脓毒症药物中的应用。