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CN102918036A - 用作β-分泌酶(BACE)抑制剂的5-氨基-3,6-二氢-1H-吡嗪-2-酮衍生物 - Google Patents

用作β-分泌酶(BACE)抑制剂的5-氨基-3,6-二氢-1H-吡嗪-2-酮衍生物 Download PDF

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CN102918036A
CN102918036A CN2011800283715A CN201180028371A CN102918036A CN 102918036 A CN102918036 A CN 102918036A CN 2011800283715 A CN2011800283715 A CN 2011800283715A CN 201180028371 A CN201180028371 A CN 201180028371A CN 102918036 A CN102918036 A CN 102918036A
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alkyl
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hydrogen
cyano
heteroaryl
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Application number
CN2011800283715A
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A.A.特拉班科苏亚雷斯
G.J.特雷萨德恩
G.J.麦克唐纳德
J.A.维加拉米罗
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Janssen Pharmaceutica NV
Original Assignee
Janssen Pharmaceutica NV
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Abstract

本发明涉及作为β-分泌酶(也称为β-位点淀粉样蛋白裂解酶、BACE、BACE1、Asp2或膜天冬氨酸蛋白酶2)抑制剂的新的5-氨基-3,6-二氢-1H-吡嗪-2-酮衍生物。本发明也涉及包含此类化合物的药用组合物、制备此类化合物和组合物的方法以及此类化合物和组合物于预防和治疗其中涉及β-分泌酶的疾病，例如阿尔茨海默氏病(AD)、轻度认知损伤、衰老、痴呆、路易氏体痴呆、唐氏综合征、中风相关痴呆、帕金森氏病相关痴呆及β-淀粉样蛋白相关痴呆的用途。

Description

用作β-分泌酶(BACE)抑制剂的5-氨基-3,6-二氢-1H-吡嗪-2-酮衍生物
发明领域
本发明涉及作为β-分泌酶(也称为β-位点淀粉样蛋白裂解酶、BACE、BACE1、Asp2或膜天冬氨酸蛋白酶2 (memapsin2))抑制剂的新的5-氨基-3,6-二氢-1H-吡嗪-2-酮衍生物。本发明也涉及包含此类化合物的药用组合物、制备此类化合物和组合物的方法以及涉及此类化合物和组合物于预防和治疗其中涉及β-分泌酶的疾病，例如阿尔茨海默氏病(AD)、轻度认知损伤、衰老、痴呆、路易氏体痴呆、唐氏综合征、中风相关痴呆、帕金森氏病相关痴呆及β淀粉样蛋白相关痴呆的用途。
发明背景
阿尔茨海默氏病(AD)为与老化有关的神经退行性疾病。AD患者患有认知缺损和记忆丧失以及行为问题，如焦虑。患有AD的人超过90%为偶发型病例，而低于10%的病例为家族性或遗传性。在美国65岁的人中，每10个人约有1个患有AD，而85岁的人中，则每2个人有1个患有AD。最初确断后的平均期望寿命为7-10年，且AD患者需要昂贵的辅助生活设施或家人的密切照护。随着人口的衰老的人数的增加，AD为日益加重的医学问题。目前AD现有的疗法仅治疗疾病的症状并包括乙酰胆碱酯酶抑制剂用以改善认知性以及抗焦虑剂和抗精神病剂用以控制与疾病相关的行为问题。
AD患者脑中的标准病理特征为τ(tau)蛋白过度磷酸化所产生的神经纤维缠结及由β-淀粉样蛋白1-42 (Aβ1-42)肽聚集所形成的淀粉样蛋白斑块。Aβ1-42形成寡聚物，然后形成纤维，而最后为淀粉样蛋白斑块。相信寡聚物和纤维特别具神经毒性，且可能造成大多数与AD有关的神经损伤。预防Aβ1-42形成的药物具有治疗AD的疾病改善药物的潜在性。Aβ1-42由淀粉样蛋白前体蛋白(APP)所产生，其由770个胺基酸组成。Aβ1-42的N-端被β-分泌酶(BACE)裂解，然后γ-分泌酶裂解C-末端。除了Aβ1-42，γ-分泌酶也释放为主要裂解产物的Aβ1-40以及Aβ1-38和Aβ1-43。这些Aβ形式也可聚集形成寡聚物和纤维。因此，BACE抑制剂预期将防止Aβ1-42以及Aβ1-40、Aβ1-38和Aβ1-43的形成并将成为治疗AD的潜在治疗剂。
发明简述
本发明涉及式(I)的5-氨基-3,6-二氢-1H-吡嗪-2-酮
Figure 239666DEST_PATH_IMAGE001
及其立体异构形式，其中
R1、R2独立地选自氢、氟代、氰基、C1-3烷基、单-和多卤代-C1-3烷基和C3-6环烷基；或
R1和R2与它们连接的碳原子结合在一起，可形成C3-6环烷二基环；
R3、R4独立地选自氢、C1-3烷基、C3-6环烷基、单-和多卤代-C1-3烷基、同芳基(homoaryl)和杂芳基；
X1、X2、X3、X4独立地为C(R5)或N，条件是其中不超过二个代表N；各R5选自氢、卤代、C1-3烷基、单-和多卤代-C1-3烷基、氰基、C1-3烷氧基、单-和多卤代-C1-3烷氧基；
L为键或-N(R6)CO-，其中R6为氢或C1-3烷基；
Ar为同芳基或杂芳基；
其中同芳基为苯基或被一、二或三个选自下列的取代基取代的苯基：卤代、氰基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、单-和多卤代-C1-3烷基；
杂芳基选自吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基和噁二唑基，各自任选地被一、二或三个选自下列的取代基取代：卤代、氰基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、单-和多卤代-C1-3烷基；
及其加成盐和溶剂化物。
本发明的说明例证为包含药学上可接受的载体和任何上述化合物的药用组合物。本发明的说明例证为将任何上述化合物和药学上可接受的载体混合所制备的药用组合物。示例性说明本发明的为用于制备包含任何上述化合物和药学上可接受的载体的混合物的药用组合物的方法。
作为本发明例证的为治疗β分泌酶所介导的病症的方法，其包括给予有此需要的受试者治疗有效量的任何上述化合物或药用组合物。
作为本发明另一例证的为抑制β分泌酶的方法，其包括给予有此需要的受试者治疗有效量的任何上述化合物或药用组合物。
本发明的实例为治疗选自下列的病症的方法：阿尔茨海默氏病、轻度认知损伤、衰老、痴呆、路易氏体痴呆、唐氏综合征、中风相关痴呆、帕金森氏病相关痴呆及β淀粉样蛋白相关痴呆，优选阿尔茨海默氏病，其包括给予有此需要的受试者治疗有效量的任何上述化合物或药用组合物。
本发明的另一实例为任何上述化合物，其用于在有此需要的受试者中治疗下列疾病：(a)阿尔茨海默氏病，(b)轻度认知损伤，(c)衰老，(d)痴呆，(e)路易氏体痴呆，(f)唐氏综合征，(g)中风相关痴呆，(h)帕金森氏病相关痴呆及(i) β淀粉样蛋白相关痴呆。
发明详述
本发明涉及如上文中所定义的式(I)化合物及其药学上可接受的盐。式(I)化合物为β分泌酶(也称为β-位点淀粉样蛋白裂解酶、BACE、BACE1、Asp2或膜天冬氨酸蛋白酶2)的抑制剂，并可用于治疗阿尔茨海默氏病、轻度认知损伤、衰老、痴呆、中风相关痴呆、路易氏体痴呆、唐氏综合征、帕金森氏病相关痴呆及β淀粉样蛋白相关痴呆，优选阿尔茨海默氏病、轻度认知损伤或痴呆，更优选阿尔茨海默氏病。
在本发明的一个实施方案中，R1和R2独立地选自氢、氟代、氰基，和多卤代C1-3烷基；或
R1和R2与它们连接的碳原子结合在一起，可形成C3-6环烷二基环；
R3是C1-3烷基；
R4是C1-3烷基；
X1、X2、X3、X4独立地为C(R5)，其中各R5选自氢和卤代；
L为键或-N(R6)CO-，其中R6为氢；
Ar为同芳基或杂芳基；
其中同芳基为苯基或被一或二个选自下列的取代基取代的苯基：卤代、氰基、C1-3烷基和C1-3烷氧基；
杂芳基选自吡啶基、嘧啶基和吡嗪基，各自任选地被一或二个选自下列的取代基取代：卤代、氰基、C1-3烷基和C1-3烷氧基；或
其加成盐或溶剂化物。
在本发明的另一个实施方案中，R1和R2独立地选自氢、氟代、氰基，和三氟甲基；或
R1和R2与它们连接的碳原子结合在一起，可形成C3-6环丙基环；
R3是甲基；
R4是甲基；
X1、X2、X3、X4是CH；
L为键或-N(R6)CO-，其中R6是氢；
Ar为同芳基或杂芳基；
其中同芳基为苯基或被一或二个选自下列的取代基取代的苯基：卤代和氰基；
杂芳基选自吡啶基、嘧啶基和吡嗪基，各自任选地被一或二个选自下列的取代基取代：氯代、氟代、氰基、甲基和甲氧基；或
其加成盐或溶剂化物。
在另一个实施方案中，R1、R2是氢；R3、R4独立地为甲基或乙基；X1和X3是CH或CF；X2和X4是CH；L为键或–N(R6)CO-，其中R6是氢；Ar是杂芳基；杂芳基选自吡啶基、嘧啶基和吡嗪基，各自任选地被氯代、氰基、甲基、甲氧基或三氟甲基取代。
在另一个实施方案中，R1、R2是氢；R3、R4是甲基；X1、X2、X3、X4是CH；L是–N(R6)CO-，其中R6是氢；Ar是杂芳基；杂芳基是被氯代、氰基、甲氧基或三氟甲基取代的吡啶基；嘧啶基和被甲基取代的吡嗪基。
定义
“卤代”应指氟代、氯代和溴代；“C1-3烷基”应指具有1、2或3个碳原子的直链或支链饱和烷基基团，例如甲基、乙基、1-丙基和2-丙基；“C1-3烷氧基”应指其中C1-3烷基如前面所定义的醚基；“单-和多卤代C1-3烷基”应指被1、2、3个或如果可能被多个如前面所定义的卤代原子取代的如前面所定义的C1-3烷基；“单-和多卤代C1-3烷氧基”应指其中单-和多卤代C1-3烷基如前面所定义的醚基；“C3-6环烷基”应指环丙基、环丁基、环戊基和环己基；“C3-6环烷二基”应指二价基例如环丙二基、环丁二基、环戊二基和环己二基。
文中所用的术语“受试者”指为或已为治疗、观察或实验对象的动物，优选哺乳动物，最优选人。
文中所用的术语“治疗有效量”指研究人员、兽医、医师或其它临床医师所寻求的，在组织系统、动物或人类中引起生物或医疗反应的活性化合物或药物的量，所述反应包括减轻所欲治疗的疾病或病症的症状。
文中所用的术语“组合物”意欲涵盖包括特定量的特定成分的产品，以及直接或间接由特定量的特定成分的组合所产生的任何产品。
应该理解，某些依据式(I)的化合物及其加成盐、水合物和溶剂化物可含有一个或多个手性中心并作为立体异构形式存在。
在上文和下文中，术语“式(I)化合物”意欲包括其加成盐、溶剂化物和立体异构体。
在上文和下文中，术语“立体异构体”或“立体化学异构形式”可交换使用。
本发明包括作为纯立体异构体或作为二或多种立体异构体的混合物的式(I)化合物的所有立体异构体。
对映体为相互为不能重迭的镜像的立体异构体。成对对映体的1:1混合物为外消旋体或外消旋混合物。非对映体(或非对映异构体)为非对映体的立体异构体，也即其相对不为对映体关系。如果化合物含有双键，则取代基可为E或Z构型。如果化合物含有双取代的环烷基基团，则取代基可为顺式或反式构型。因此，本发明包括对映体、非对映异构体、外消旋体、E异构体、Z异构体、顺式异构体、反式异构体及其混合物。
绝对构型根据Cahn-Ingold-Prelog系统所指定。不对称原子的构型指定为R或S。依照其旋转平面偏振光的方向，其绝对构型未知的拆分化合物可指定为(+)或(-)。
当特定的立体异构体被鉴定，这意味着所述立体异构体基本上无，也即具有低于50%，优选低于20%，更有效地低于10%，甚至更有效地低于5%，特别是低于2%，及最优选低于1%的其它异构体。因此，当式(I)化合物例如被指定为(R)时，这意味着所述化合物基本上无(S)异构体；当式(I)化合物例如被指定为E时，这意味着所述化合物基本上无Z异构体；当式(I)化合物例如被指定为顺式时，这意味着该化合物基本上无反式异构体。
此外，本发明化合物的某些晶型可作为多晶型物存在并且同样地打算包括在本发明中。另外，本发明的某些化合物可与水形成溶剂合物(如水合物)或与常用的有机溶剂形成溶剂合物，而这样的溶剂合物也打算包括在本发明的范围内。
就医药用途而言，本发明化合物的盐指无毒的“药学上可接受的盐”。然而，其它盐可用于制备依据本发明的化合物或其药学上可接受的盐。适合的化合物的药学上可接受的盐包括酸加成盐，其可例如通过将化合物的溶液与药学上可接受的酸例如盐酸、硫酸、延胡索酸、马来酸、琥珀酸、乙酸、苯甲酸、柠檬酸、酒石酸、碳酸或磷酸的溶液混合来形成。此外，当本发明化合物带有酸性部分时，其适合的药学上可接受的盐可包括碱金属盐，例如钠盐或钾盐；碱土金属盐，例如钙盐或镁盐；及与适合的有机配体所形成的盐，例如季铵盐。
可用于制备药学上可接受的盐的代表性酸包括(但不限于)下列酸：乙酸、2,2-二氯乙酸、酰化氨基酸、己二酸、海藻酸、抗坏血酸、L-天门冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、(+)-樟脑酸、樟脑磺酸、癸酸、己酸、辛酸、肉桂酸、柠檬酸、环拉酸(cyclamic acid)、乙-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基-乙磺酸、甲酸、延胡索酸、粘酸、龙胆酸、葡庚糖酸、D-葡萄糖酸、D-葡萄糖醛酸、L-谷氨酸、β-氧代-戊二酸、乙醇酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、(+)-L-乳酸、(±)-DL-乳酸、乳糖酸、马来酸、(-)-L-苹果酸、丙二酸、(±)-DL-扁桃酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、萘-1,5-二磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟酸、硝酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、扑酸(pamoic acid)、磷酸、L-焦谷氨酸、水杨酸、4-氨基-水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、单宁酸、(+)-L-酒石酸、硫氰酸、对-甲苯磺酸、三氟甲磺酸及十一烯酸。可用于制备药学上可接受的盐的代表性碱包括(但不限于)下列碱：氨、L-精氨酸、苯乙苄胺(benethamine)、苄星(benzathine)、氢氧化钙、胆碱、二甲基乙醇胺、二乙醇胺、二乙胺、2-(二乙基氨基)-乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-甲基-葡萄糖胺、哈胺(hydrabamine)、1H-咪唑、L-赖氨酸、氢氧化镁、4-(2-羟乙基)-吗啉、哌嗪、氢氧化钾、1-(2-羟乙基)-吡咯烷、仲胺、氢氧化钠、三乙醇胺、氨基丁三醇及氢氧化锌。
本发明化合物的化学名称根据化学文摘社所认可的命名法则产生。
某些依据式(I)的化合物也可以其互变异构形式存在。虽然在上列化学式中并未明确地指出，但意欲将这样的形式包括在本发明的范围内。
化合物的制备
实验程序1
依据式(I)的最终化合物可通过将式(II)中间体化合物与适合的氨源，例如氯化铵或氨水，根据反应流程(1)的反应来制备，该反应在适合的反应惰性溶剂例如水或甲醇中，于热条件例如于60℃将反应混合物加热例如6小时来进行。在反应流程(1)中，所有的变量如式(I)中所定义：
Figure 360069DEST_PATH_IMAGE002
反应流程1
实验程序2
其中L为-N(R6)CO-的式(I-a)的最终化合物可通过将式(III-a)的中间体化合物与式(IV)化合物根据反应流程(2)的反应来制备，该反应在适合的反应惰性溶剂例如N,N-二甲基甲酰胺中，在适合的碱例如K3PO4、铜催化剂例如CuI和二胺例如(1R,2R)-(-)-1,2-二氨基环己烷的存在下，于热条件例如于180℃将反应混合物在微波照射下加热例如140分钟来进行。在反应流程(2)中，所有的变量如式(I)中所定义且W为卤代：
Figure 139806DEST_PATH_IMAGE003
反应流程2
实验程序3
另外，依据式(I-a)的最终化合物可通过将式(III-b)的中间体化合物与式(V)化合物根据反应流程(3)的反应来制备，该反应在适合的反应惰性溶剂如二氯甲烷中，于适合的碱例如三乙胺存在下，在缩合剂例如O-(7偶氮苯并三唑-1-基(azabenzotriazol-1-yl))-N,N,N ’,N ’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐[HATU, CAS 148893-10-1]的存在下，于热条件例如于25℃将反应混合物加热例如2小时来进行。在反应流程(3)中，所有的变量如式(I)中所定义：
Figure 535015DEST_PATH_IMAGE004
反应流程3
实验程序4
另外，依据式(I-a)的最终化合物可通过将式(III-b)的中间体化合物与式(VI)化合物，根据反应流程(4)的反应来制备，该反应在适合的反应惰性溶剂例如二氯甲烷中，于适合的碱例如吡啶的存在下，于热条件例如于25℃将反应混合物加热例如2小时来进行。在反应流程(4)中，所有的变量如式(I)中所定义且Y为卤代：
Figure 270759DEST_PATH_IMAGE005
反应流程4
实验程序5
其中L为键的依据式(I-b)的最终化合物可通过将式(III-a)的中间体化合物与式(VII)化合物根据反应流程(5)的反应来制备，该反应在适合的反应惰性溶剂例如乙醇或反应惰性溶剂的混合物，例如1,2-二甲氧基乙烷/水/乙醇中，于适合的碱例如K3PO4或Cs2CO3水溶液、Pd-复合物催化剂例如[1,1’-双(二苯膦基)二茂铁]二氯化钯(II)[CAS 72287-26-4]或反式-双二环己基)二乙酸钯[DAPCy, CAS 628339-96-8]的存在下，于热条件例如于80℃将反应混合物加热例如48小时，或例如于130℃将反应混合物在微波照射下加热例如10分钟来进行。在反应流程(5)中，所有的变量如式(I)中所定义且W为卤代。R7和R8可为氢或烷基，或可结合在一起，形成例如式–CH2CH2-、-CH2CH2CH2-或-C(CH3)2C(CH3)2-的二价基团：
Figure 93222DEST_PATH_IMAGE006
反应流程5
在前述制备中许多的中间体和起始原料为已知的化合物，其可根据制备所述化合物或类似化合物的本领域已知的方法来制备，而某些中间体为新的化合物。许多这样的制备方法将更详细描述于下文中。
实验程序6
依据式(II)的中间体可根据反应流程(6)，通过将式(VIII)的中间体化合物与用于合成硫代酰胺的供硫剂(sulphur donating reagent)例如五硫化二磷或2,4-双-(4-甲氧基苯基)-1,3-二硫杂-2,4-二磷杂环丁烷(diphosphetane) 2,4-二硫化物[Lawesson’s试剂, CAS 19172-47-5]反应来制备，该反应在反应惰性溶剂例如四氢呋喃或甲苯中，在合适的碱例如吡啶的存在下，于热条件例如于90℃将反应混合物加热例如18小时下进行。在反应流程(6)中，所有的变量如式(I)中所定义：
Figure 360255DEST_PATH_IMAGE007
反应流程6
实验程序7
依据式(VIII)的中间体(其中L为键)可根据反应流程(7)通过将式(IX-a)中间体化合物与式(VII)化合物根据反应流程(7)的反应来制备，该反应惰性溶剂如1,4-二噁烷/水的合适的混合物中，在合适的碱如Na2CO3水溶液、Pd-络合物催化剂如四-(三苯膦)钯(0) [CAS 14221-01-3]的存在下，于热条件例如于80℃将反应混合物加热例如20小时下进行，或者例如于150℃将反应混合物在微波照射下加热例如15分钟来进行。在反应流程(7)中，所有的变量如式(I)中所定义和W是卤代。R7和R8可以是氢或烷基，或可结合在一起，形成例如式–CH2CH2-、-CH2CH2CH2-或-C(CH3)2C(CH3)2-的二价基团：
反应流程7
实验程序8
式(III-a)、(III-b)和(III-c)的中间体化合物一般可依照下列反应流程(8)和(9)中所示的反应步骤来制备：
Figure 431296DEST_PATH_IMAGE009
反应流程8
A：甲氧基亚胺-至-脒转化
B：硫代酰胺-至-脒转化
C：酰胺-至-甲氧基亚胺转化
D：酰胺-至-硫代酰胺转化(硫化作用)
E：硝基-至-氨基还原
以上反应流程(8)中的式(III-a)、(III-b)和(III-c)的中间体化合物可由对应的式(XI-a)、(XI-b)和(XI-c)的中间体化合物，依照本领域已知的硫代酰胺-至-脒转化程序(反应步骤B)制备，或者作为选择，对于式(III-a)和(III-c)的中间体化合物，由对应的式(X-a)和(X-c)的中间体化合物，依照本领域已知的甲氧基亚胺-至-脒转化程序(反应步骤A)来制备。所述转化作用可方便地通过将对应的式(XI-a)、(XI-b)和(XI-c)或(X-a)和(X-c)的中间体化合物与氨源例如氯化铵或氨水，在适合的反应惰性溶剂例如水或甲醇等中处理，于热条件例如于70℃-85℃将反应混合物加热例如6-18小时来进行。
另外，在上述反应流程(8)中的式(III-b)的中间体化合物，其中R6 = H，可由对应的式(III-c)的中间体化合物，依照本领域已知的硝基-至-氨基还原程序(反应步骤E)来制备。所述还原作用可方便地依照本领域已知的催化的氢化程序来进行。例如所述还原可通过将反应物于氢气氛下及于适合的催化剂例如披钯碳、披铂碳、阮内镍等催化剂的存在下搅拌来进行。适合的溶剂有例如水、烷醇(例如甲醇、乙醇等)、酯(例如乙酸乙酯等)。为了增进所述还原反应的速率，有利地可提高反应混合物的温度和/或压力。可通过向反应混合物中加入催化剂毒物例如噻吩等来预防反应物及反应产物中某些功能团的不希望的进一步的氢化作用。
在上述反应流程(8)中，式(X-a)和(X-c)的中间体化合物可由对应的式(IX-a)和(IX-c)的中间体化合物，依照本领域已知的酰胺-至-甲氧基亚胺转化程序(反应步骤C)来制备。所述转化可方便地通过将所述式(IX-a)和(IX-c)的对应的中间体化合物，于适合的反应-惰性溶剂例如二氯甲烷中，于适当的高温例如25℃下处理例如60小时来进行。
上述反应流程(8)中的式(XI-a)、(XI-b)和(XI-c)硫代酰胺衍生物可由式(IX-a)、(IX-b)和(IX-c)的酰胺衍生物，依照本领域已知的硫化程序(反应步骤D)来制备。所述转化作用可方便地通过将所述酰胺用硫化剂例如五硫化二磷或2,4-双-(4-甲氧基苯基)-1,3-二硫杂-2,4-二磷杂环丁烷2,4-二硫化物[Lawesson’s试剂, CAS 19172-47-5]，在合适的碱例如吡啶的存在下，在反应惰性溶剂例如四氢呋喃或甲苯中处理，于热条件例如于90℃将反应混合物加热例如18小时下来进行：
Figure 424660DEST_PATH_IMAGE010
反应流程9
F: N-去保护
G: 环化
H: N-酰化
在上述反应流程(9)中，依据式(IX-b)的中间体可通过式(IX-d)的中间体化合物，其中Z是酰胺的保护基团例如对-甲氧基苄基，依照本领域已知的胺的N-去保护程序(反应步骤F)的反应来制备。所述N-去保护可便利地通过将式(IX-d)的对应的中间体化合物用合适的胺官能团的去保护剂例如硝酸铈(IV)铵，在惰性溶剂例如乙腈/水的混合物中，在适当的高温例如25℃处理例如4小时来进行。
在上述反应流程(9)中，依据式(IX-a)、(IX-c)和(IX-d)的中间体可通过式(XII-a)、(XII-c)和(XII-d)的中间体化合物，依照本领域已知的环化程序(反应步骤G)的反应来制备。所述环化可方便地通过将所述式(XII-a)、(XII-c)和(XII-d)的对应的中间体化合物用式(XIII)中间体化合物处理来进行。所述反应在合适的反应-惰性溶剂例如乙醇中，于热条件例如于70℃将反应混合物加热例如3小时下来进行。在反应流程(9)中，所有的变量如在式(I)中所定义，卤代是氯代或溴代和Alk的C1-3烷基。
在上述反应流程(9)中，依据式(XII-a)、(XII-c)和(XII-d)的中间体可通过式(XIV-a)、(XIV-c)和(XIV-d)的中间体化合物，依照本领域已知的N-酰化程序(反应步骤H)的反应来制备。所述N-酰化可方便地通过将式(XIV-a)、(XIV-c)和(XIV-d)的对应的中间体化合物用式(XV)的中间体化合物处理来进行。所述反应在合适的反应-惰性溶剂例如二氯甲烷中，在合适的碱例如三乙胺的存在下，于低温例如0℃进行例如1小时。在反应流程(9)中，所有的变量如在式(I)中所定义，卤代是氯代或溴代和Alk的C1-3烷基。
式(XIV-a)、(XIV-c)和(XIV-d)的中间体化合物，其中Z是合适的N-保护基团例如对-甲氧基苄基，通常可依照本领域已知的Strecker型程序来制备。
药用组合物
本发明也提供用于预防或治疗其中抑制β分泌酶为有利的的疾病，例如阿尔茨海默氏病(AD)、轻度认知损伤、衰老、痴呆、路易氏体痴呆、唐氏综合征、中风相关痴呆、帕金森氏病相关痴呆及β淀粉样蛋白相关痴呆的组合物。所述组合物包括治疗有效量的依据式(I)的化合物及药学上可接受的载体或稀释剂。
当活性成分可能单独给药时，优选其作为药用组合物呈现。因此，本发明还提供包含依据本发明的化合物与药学上可接受的载体或稀释剂一起的药用组合物。在与其它组合物的其它成分适配的意义下，载体或稀释剂必须为“可接受的”且对其接受者无害。
本发明的药用组合物可由任何制药技术中熟知的方法来制备。治疗有效量的特定化合物，以碱形式或加成盐形式作为活性成分，与药学上可接受的载体组合于紧密的混合物中，依照所欲给予的制剂的形式，其可采用广泛的各种形式。这些药用组合物理想地以适合(优选)全身给药例如口服、经皮或非经肠给药；或局部给药例如经由吸入、鼻喷剂、滴眼剂或经由乳膏、凝胶、洗发精等的单一剂型存在。例如，在制备口服剂型的组合物时，可使用任何常用的药用介质，例如在口服液体制剂例如悬浮液、糖浆剂、酏剂和溶液的情况，可使用例如水、甘油、油、醇等；或在散剂、片剂、胶囊及片剂的情况下，可使用固体载体例如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、结合剂、崩解剂等。因为片剂和胶囊给药容易，它们代表最有利的口服单位剂型，在此情况下，显然使用固体药用载体。对于非经肠组合物，虽然可包括例如帮助溶解的其它成分，但载体通常应包括(至少大部分)无菌水。可制备可注射溶液，例如，其中所述载体包括盐水溶液、葡萄糖溶液或盐水和葡萄糖溶液的混合物。也可制备可注射悬浮液，在此情况下可使用适合的液体载体、助悬剂等。在适合经皮给药的组合物中，载体任选地包括促渗透剂和/或适合的湿润剂，任选与较小比例的任何性质的适合添加剂组合，所述添加剂对皮肤不会引起显著的有害效应。所述添加剂可促进给药至皮肤和/或可有助于制备所需的组合物。这些组合物可以各种方式来给予，例如为透皮贴剂、点剂(spot-on)或软膏剂。
将前述的药用组合物配制成容易给药和剂量一致的单位剂型为特别有利的。本文的说明书和权利要求书中所用的单位剂型指适合用作单一剂量的物理上离散的单位，各单位含有经计算产生所需治疗效果的预定量的活性成分结合所需的药用载体。这样的单位剂型的实例有片剂(包括刻痕或包衣片)、胶囊、丸剂、散袋剂、糯米纸囊剂(wafers)、可注射溶液或悬浮液、茶匙剂(teaspoonfuls)、汤匙剂(tablespoonfuls)等，和其分开多剂量剂。
如本领域技术人员所熟知的，给药的精确剂量和频率依照所用的特定式(I)化合物、所治疗的特定病症、所治疗特定病症的严重程度、特定患者年龄、体重、性别、病症的范围及一般身体状况以及个体可能进行的其它医疗而定。此外，显然依照治疗受试者的反应和/或依照开具本发明化合物处方的医师的评估，所述有效日剂量可减少或增加。
依照给药的模式，药用组合物优选将包含从0.05至99%重量，有效地从0.1至70%重量，更有效地从0.1至50%重量的活性成分，及从1至99.95%重量，优选从30至99.9%重量，更有效地从50至99.9%重量的药学上可接受的载体，所有的百分比均以组合物的总重量为基准。
本发明化合物可用于全身给药例如口服、经皮或非经肠给药；或局部给药例如经由吸入、鼻喷剂、滴眼剂或经由乳膏、凝胶、洗发精等。化合物优选口服给药。如本领域技术人员所熟知的，给药的精确剂量和频率依照所用的特定的依据式(I)的化合物、所治疗的特定病症、所治疗特定病症的严重程度、特定患者的年龄、体重、性别、病症的范围及一般身体状况以及个体可能进行的其它医疗而定。此外，显然依照治疗受试者的反应和/或依照开具本发明化合物处方的医师的评估，所述有效日剂量可减少或增加。
可与载体物质组合制备单一剂型的式(I)化合物的量将随所治疗的疾病、哺乳动物的物种及特定的给药模式而不同。然而，就一般而言，本发明化合物适合的单位剂量例如(优选)可含有介于0.1 mg至约1000 mg的活性化合物。优选的单位剂量介于1 mg至约500 mg之间。更优选的单位剂量介于1 mg至约300 mg之间。甚至更优选的单位剂量介于1 mg至约100 mg之间。此单位剂量一天可给药一次以上，例如一天2、3、4、5或6次，但优选为每天1或2次，以使70公斤的成人的总剂量在每kg患者体重每次给药的0.001至约15 mg的范围内。每kg患者体重每次给药的优选剂量为0.01至约1.5 mg，且这样的疗法可延续数星期或数月，且在某些病例中可延续数年。然而，应了解，如本领域技术人员所熟知的，对于任何特定患者的特定剂量水平将依各种因素而定，其包括所用的特定化合物的活性；所治疗的个体的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；给药的次数和路径；排泄率；先前已给予的其它药物；及治疗中的特定疾病的严重程度。
典型的剂量可为一个1 mg至约100 mg的片剂或每天一次或每天多次服用1 mg至约300 mg，或每天一次服用的一个随时间释放的胶囊或片剂及含有比例较高的活性成分量。时间-释放效应可通过在不同pH值溶解的胶囊物质、利用渗透压缓慢释放的胶囊或通过任何已知的其它控制释放方法来取得。
如将为本领域技术人员所了解的，在某些情况下可能需要使用这些范围外的剂量。此外，请注意，结合个体患者的反应，临床医师或主治医师应了解如何和何时开始、中断、调整或终止治疗。
对于上文提供的组合物、方法和药剂盒，本领域技术人员应了解个别所用的优选化合物为上述所指出为优选的那些化合物。此外，用于组合物、方法和药剂盒的另外的优选化合物为下文非限定性实施例中所提供的那些化合物。
实验部分
下文中，术语“m.p.”指熔点，“THF”指四氢呋喃，“DMF”指二甲基甲酰胺，“DCM”指二氯甲烷，“AcOEt”指乙酸乙酯，“AcOH”指乙酸，“MeOH”指甲醇，“rac”指外消旋的。
A. 制备中间体
实施例A1
制备中间体 1：外消旋-2-氨基-2-(3-溴-苯基)-丙腈
Figure 100361DEST_PATH_IMAGE011
将三甲基氰硅烷(Trimethylsilylcyanide) (25.+-2 mL, 201 mmol)加到经搅拌的3-溴苯乙酮(25 g, 125.6 mmol)和NH4Cl (13.4 g, 251.2 mmol)的NH3/MeOH (500 mL)溶液中。将混合物于室温搅拌4天。然后于真空蒸发溶剂并将残余溶于AcOEt中处理。将固体滤出并于真空蒸发溶剂，得到中间体 1(26 g, 92%产率)，将其用于下一步骤而无须进一步纯化。
实施例A2
制备中间体 2：外消旋-2-氨基-2-(3-溴-苯基)-丙酸
Figure 837373DEST_PATH_IMAGE012
将中间体 1(26 g, 115.5 mmol)溶于6N HCl (139 mL)并将混合物回流18小时。冷却至室温后，真空蒸发溶剂，得到中间体 2(24 g, 85%产率) ，将其用于下一步骤而无须进一步纯化。
实施例A3
制备中间体 3：外消旋-2-氨基-2-(3-溴-苯基)-丙酸甲酯
Figure 360758DEST_PATH_IMAGE013
于0℃，将亚硫酰氯(8.97 mL, 122.9 mmol)滴加到经搅拌的中间体 2 (10 g, 41 mmol)的MeOH (125 mL)溶液中。然后，使混合物回流18小时。真空蒸发溶剂并使残余物分配于Na2CO3 (饱和水溶液)和DCM之间。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂。粗产物经快速柱层析纯化(硅胶；AcOEt在DCM中0/100-30/70)。收集所需的部分并于真空浓缩，得到中间体 3(4.1 g, 39%产率)，为无色油状物。
实施例 A4
制备中间体 4 : 2-(3- 溴代 - 苯基 )-2-(2- 氯代 - 乙酰基氨基 )- 丙酸甲酯
Figure 728285DEST_PATH_IMAGE014
于0℃。氮气下，将氯代乙酰氯(0.34 mL, 4.26 mmol)滴加到中间体 3 (1 g, 3.87 mmol)和Et3N (0.74 mL, 5.81 mmol)的DCM (35 mL)搅拌溶液中。于0℃搅拌该混合物1小时。然后用水稀释该混合物并用DCM提取。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂，得到中间体 4(1.3 g, 89%产率)。将其用于下一步骤而无须进一步纯化。
实施例 A5
制备中间体 5 ：外消旋 -3-(3- 溴代 - 苯基 )-1,3- 二甲基 - 哌嗪 -2,5- 二酮
于室温下，将甲胺33%的EtOH (5.36 mL, 43.04 mmol)溶液加入到在密封试管中的中间体 4 (2.4 g, 7.17 mmol)的EtOH (53 mL)搅拌溶液中。然后，于70℃搅拌该混合物3小时。真空蒸发溶剂，得到中间体 5 (1.95 g, 88%产率)。将其用于下一步骤而无须进一步纯化。
实施例 A6
制备中间体 6 ：外消旋 -1,3- 二甲基 -3-(3- 嘧啶 -5- 基 - 苯基 )- 哌嗪 -2,5- 二酮
Figure 245034DEST_PATH_IMAGE016
于室温下，将四(三苯膦)钯(0) (0.023 g, 0.020 mmol)加入到中间体 5 (0.3 g, 1.01 mmol)和嘧啶-5-硼酸(0.25 g, 2.02 mmol)的1,4-二噁烷(18 mL)和Na2CO3 (饱和水溶液) (4 mL)的搅拌的悬浮液中。于150℃微波照射下搅拌该混合物15分钟。用水稀释该混合物并用DCM提取。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂。粗产物经快速柱层析纯化(硅胶；7 M氨在甲醇中的DCM溶液0/100-3/97)。收集所需的部分并于真空浓缩，得到中间体 6 (0.26 g, 87%产率)，为灰白色固体。
实施例 A7
制备中间体 7 ：外消旋 -1,3- 二甲基 -3-(3- 嘧啶 -5- 基 - 苯基 )-5- 硫代 - 哌嗪 -2- 酮
Figure 341035DEST_PATH_IMAGE017
于室温下，将Lawesson’s试剂(0.27 g, 0.66 mmol)加入到中间体 6 (0.26 g, 0.60 mmol)和吡啶(0.053 mL, 0.66 mmol)在甲苯(9 mL)中的搅拌溶液中。于90℃搅拌该混合物18小时。真空蒸发溶剂和残余物经快速柱层析纯化(硅胶；7 M氨在甲醇中的DCM溶液0/100-6/94)。收集所需的部分并于真空浓缩，得到中间体 7 (0.17 g, 91%产率)，为白色固体。
实施例 A8
制备中间体 8 ：外消旋 -3-(3- 溴代 - 苯基 )-5- 甲氧基 -1,3- 二甲基 -3,6- 二氢 -1H- 吡嗪 -2- 酮
于室温下，将三甲基氧鎓四氟硼酸盐(Trimethyloxonium tetrafluoroborate) (0.87 g, 5.89 mmol)加入到中间体 5 (0.5 g, 1.68 mmol)的DCM (10 mL)的搅拌溶液中并于室温下搅拌该混合物60小时。然后使该混合物冷却至0℃，用冰冷的NaHCO3 (饱和水溶液)稀释并用DCM提取。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂，得到中间体 8 (0.51 g, 71%产率)。将其用于下一步骤而无须进一步纯化。
实施例 A9
制备中间体 9 ：外消旋 -5- 氨基 -3-(3- 溴代 - 苯基 )-1,3- 二甲基 -3,6- 二氢 -1H- 吡嗪 -2- 酮
方法A
于室温、氮气下，将氯化铵(0.47 g, 8.77 mmol)加入到在密封试管中的中间体 8 (0.45 g, 1.46 mmol)的MeOH (15 mL)的搅拌溶液中。于85℃搅拌该混合物18小时。真空除去溶剂和残余物用Na2CO3 (饱和水溶液)稀释并用DCM提取。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂。粗产物经离子层析纯化，使用ISOLUTE ® SCX2柱(先用MeOH，然后用7 M氨的甲醇溶液洗脱)。收集用7 M氨的甲醇溶液洗脱的所需部分并真空浓缩，得到中间体 9 (0.16 g, 24%产率)，为浅棕色油。
方法B
将32%氨水溶液(15 mL)加入到中间体 10(0.48 g, 1.53 mmol)中并于50℃在密封试管中搅拌该混合物18小时。冷却至室温后，用水稀释该混合物并用DCM提取。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂，得到中间体 9 (0.45 g, 定量产率)。将其用于下一步骤而无须进一步纯化。
实施例 A10
制备中间体 10 ：外消旋 -3-(3- 溴代 - 苯基 )-1,3- 二甲基 -5- 硫代 - 哌嗪 -2- 酮
Figure 156041DEST_PATH_IMAGE020
于室温下，将Lawesson’s试剂(1.63 g, 4.04 mmol)加入到中间体 5 (1.04 g, 3.36 mmol)和吡啶(0.30 mL, 3.70 mmol)的甲苯(33 mL)的搅拌溶液中。于90℃搅拌该混合物18小时。真空蒸发溶剂和残余物经快速柱层析纯化(硅胶；MeOH在DCM中0/100-4/96)。收集所需的部分并于真空浓缩，得到中间体 10(0.5 g, 47%产率)，为无色油状物。
实施例 A11
制备中间体 11 ：外消旋 -2- 氨基 -2-(3- 硝基 - 苯基 )- 丙腈
中间体 11按照与在实施例A1中所述的相同方法合成。由1-(3-硝基-苯基)-乙酮(10 g, 60.55 mmol)起始，获得中间体 11，为黄色固体(10.2 g, 88%产率)。
实施例 A12
制备中间体 12 ：外消旋 -2- 氨基 -2-(3- 硝基 - 苯基 )- 丙酸
Figure 612616DEST_PATH_IMAGE022
于室温下，将中间体 11 (10.2 g, 53.07 mmol)加入到6 N HCl溶液(79 mL)中。回流下搅拌该混合物24小时。冷却后，加入水(300 mL)和AcOEt (300 mL)。分离含水层，真空部分蒸发并通过加入25% NaOH水溶液中和。在冰水浴中冷却该混合物并滤出沉淀，用冷水洗涤，接着用Et2O洗涤并于真空干燥，得到中间体 12 (7 g, 63%产率)，为白色固体。
实施例 A13
制备中间体 13 ：外消旋 -2- 氨基 -2-(3- 硝基 - 苯基 )- 丙酸甲酯
中间体 13按照与在实施例A3中所述的相同方法合成。由中间体 12 (6 g, 28.55 mmol)起始，获得中间体 13，为无色油状物(4 g, 63%产率)。
实施例 A14
制备中间体 14 : 2-(2- 氯代 - 乙酰基氨基 )-2-(3- 硝基 - 苯基 )- 丙酸甲酯
中间体 14按照与在实施例A4中所述的相同方法合成。由中间体 13 (1.65 g, 7.36 mmol)起始，获得中间体 14 (2.2 g, 99%产率)。
实施例 A15
制备中间体 15 ：外消旋 -1,3- 二甲基 -3-(3- 硝基 - 苯基 )- 哌嗪 -2,5- 二酮
中间体 15按照与在实施例A5中所述的相同方法合成。由中间体 14 (2.2 g, 7.32 mmol)起始，获得中间体 15 (1.92 g, 定量产率)。
实施例 A16
制备中间体 16 ：外消旋 -1,3- 二甲基 -3-(3- 硝基 - 苯基 )-5- 硫代 - 哌嗪 -2- 酮
Figure 865426DEST_PATH_IMAGE026
中间体 16按照与在实施例A10中所述的相同方法合成。由中间体 15 (1.92 g, 7 mmol)起始，获得中间体 16，为无色油状物(0.315 g, 16%产率)。
实施例 A17
制备中间体 17 ：外消旋 -5- 氨基 -1,3- 二甲基 -3-(3- 硝基 - 苯基 )-3,6- 二氢 -1H- 吡嗪 -2- 酮
Figure 303361DEST_PATH_IMAGE027
将32%氨水溶液(3 mL)加入到中间体 16 (0.315 g, 1.13 mmol)在7 M氨的甲醇溶液(3 mL)中的混合物中并于67℃在密封试管中搅拌该混合物4小时。冷却至室温后，用水稀释该混合物并用DCM提取。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂。残余物经快速柱层析纯化(硅胶；MeOH在DCM中1/99-7/93)。收集所需的部分和真空浓缩。残余物再次经快速柱层析纯化(硅胶；7 M氨在甲醇中的DCM溶液7/93-10/90)。收集所需的部分并于真空浓缩，得到中间体 17 (0.11 g, 37%产率)。
实施例 A18
制备中间体 18 ：外消旋 -5- 氨基 -3-(3- 氨基 - 苯基 )-1,3- 二甲基 -3,6- 二氢 -1H- 吡嗪 -2- 酮
Figure 723978DEST_PATH_IMAGE028
将中间体 17 (0.46 g, 1.75 mmol)的EtOH (20 mL)和AcOEt (10 mL)溶液在H-Cube反应器(1 mL/min, 30 mm Pd/C 5%柱，全H2模式，于室温下，1个循环)氢化。然后，真空蒸发溶剂，得到中间体 18 (0.41 g, 定量产率)，为白色固体。
实施例 A19
制备中间体 19 : 1-(5- 溴代 -2,4- 二氟 - 苯基 )- 乙酮
Figure 399810DEST_PATH_IMAGE029
将AlCl3 (200 g, 1515.1 mmol)在1-溴代-2,4-二氟-苯(120 g, 621.79 mmol)中的混合物于60℃搅拌10分钟。然后，经4小时滴加入乙酰氯(73 g, 929.9 mmol)并于95℃搅拌该混合物6小时。于-10℃冷却该混合物并经1小时加入冰(300 g)。然后，加入AcOEt (500 mL)并用水洗涤分离的有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空浓缩。残余物经快速柱层析纯化(硅胶；AcOEt在庚烷中1/50)。收集所需的部分并于真空浓缩，得到中间体 19 (60 g, 41%产率)。
实施例 A20
制备中间体 20 ：外消旋 -2- 氨基 -2-(5- 溴代 -2,4- 二氟 - 苯基 )- 丙腈
Figure 513259DEST_PATH_IMAGE030
中间体 20按照与在实施例A1中所述的相同方法合成。由中间体 19 (60 g, 255.31 mmol)起始，获得中间体 20 (31 g, 47%产率)。
实施例 A21
制备中间体 21 外消旋 -2- 氨基 -2-(5- 溴代 -2,4- 二氟 - 苯基 )- 丙酸
Figure 438490DEST_PATH_IMAGE031
将中间体 20 (28 g, 107.65 mmol)和6N HCl (300 mL)在AcOH (300 mL)中的混合物加热至回流72小时。冷却至室温后，真空蒸发溶剂。加入AcOEt (400 mL)和水(300 mL)。用AcOEt (200 mL)洗涤分离的水层。分离含水层并调节至pH = 7。然后，加入AcOEt (250 mL)，分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂，得到中间体 21 (22 g, 72%产率)。
实施例 A22
制备中间体 22 ：外消旋 -2- 氨基 -2-(5- 溴代 -2,4- 二氟 - 苯基 )- 丙酸甲酯
Figure 584169DEST_PATH_IMAGE032
将中间体 21 (22 g, 78.55 mmol)的4N HCl在MeOH (400 mL)中的混合物加热至回流72小时。冷却至室温后，真空蒸发溶剂。加入AcOEt (400 mL)和水(300 mL)。用AcOEt (200 mL)洗涤分离的水层。分离含水层并调节至pH = 7。然后，加入AcOEt (250 mL)。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂，得到中间体 22 (20 g, 87%产率)。
实施例 A23
制备中间体 23 ：外消旋 -2-(5- 溴代 -2,4- 二氟 - 苯基 )-2-(2- 氯代 - 乙酰基氨基 )- 丙酸甲酯
Figure 645666DEST_PATH_IMAGE033
中间体 23按照与在实施例A4中所述的相同方法合成。由中间体 22 (4 g, 13.60 mmol)起始，获得中间体 23 (5 g, 99%产率)。
实施例 A24
制备中间体 24 ：外消旋 -2-(5- 溴代 -2,4- 二氟 - 苯基 )-2-(2- 乙基氨基 - 乙酰基氨基 )- 丙酸甲酯
于室温下，将乙基胺2 M的THF (4.05 mL, 8.1 mmol)溶液加入到在密封试管中的中间体 23 (1 g, 2.7 mmol)的EtOH (12 mL)搅拌溶液中。然后，于70℃搅拌该混合物3小时。真空蒸发溶剂，得到中间体 24 (0.55 g, 54%产率)。将其用于下一步骤而无须进一步纯化。
实施例 A25
制备中间体 25 ：外消旋 -3-(5- 溴代 -2,4- 二氟 - 苯基 )-1- 乙基 -3- 甲基 - 哌嗪 -2,5- 二酮
Figure 280227DEST_PATH_IMAGE035
于室温下，将AcOH (0.5 mL)加入到在密封试管中的中间体 24 (0.55 g, 1.45 mmol)的EtOH (25 mL)的搅拌溶液中。于95℃搅拌该混合物16小时。然后，用Na2CO3 (饱和水溶液)稀释混合物并用DCM提取。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂。粗产物经快速柱层析纯化(硅胶；7 M氨在甲醇中的DCM溶液0/100-2/98)。收集所需的部分并于真空浓缩，得到中间体 25 (0.33 g, 66%产率)。
实施例 A26
制备中间体 26 ：外消旋 -3-[2,4- 二氟 -5-(5- 甲氧基 - 吡啶 -3- 基 )- 苯基 ]-1- 乙基 -3- 甲基 - 哌嗪 -2,5- 二酮
Figure 308226DEST_PATH_IMAGE036
于室温下，将四(三苯膦)钯(0) (0.022 g, 0.019mmol)加入到中间体 25 (0.33 g, 0.95 mmol)和3-甲氧基-5-吡啶硼酸(0.19 g, 1.24 mmol)在1,4-二噁烷(12 mL)和Na2CO3 (饱和水溶液) (4 mL)中的搅拌悬浮液中。于150℃微波照射下搅拌该混合物15分钟。用NaHCO3 (饱和水溶液)稀释该混合物并用DCM提取。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂。粗产物经快速柱层析纯化(硅胶；MeOH在DCM中0/100-11/89)。收集所需的部分并于真空浓缩，得到中间体 26 (0.26 g, 73%产率)，为无色油状物。
实施例 A27
制备中间体 27 ：外消旋 -3-[2,4- 二氟 -5-(5- 甲氧基 - 吡啶 -3- 基 )- 苯基 ]-1- 乙基 -3- 甲基 -5- 硫代 - 哌嗪 -2- 酮
Figure 942338DEST_PATH_IMAGE037
于室温下，将Lawesson’s试剂(0.23 g, 0.57 mmol)加入到中间体 26 (0.26 g, 0.47 mmol)和吡啶(0.046 mL, 0.57 mmol)的甲苯(9 mL)的搅拌溶液中。于90℃搅拌该混合物18小时。然后，加入更多的Lawesson’s试剂(0.23 g, 0.57 mmol)并得到的混合物于85℃加热8小时。然后，加入更多的Lawesson’s试剂(0.30 g, 0.75 mmol)并将得到的混合物于85℃加热16小时。用Na2CO3 (饱和水溶液)稀释该混合物并用AcOEt提取。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂。粗产物经快速柱层析纯化(硅胶；MeOH在DCM中0/100-6/94)。收集所需的部分并于真空浓缩，得到中间体 27 (0.14 g, 76%产率)。
B. 制备最终化合物
实施例 B1
制备化合物 1 ：外消旋 -5- 氨基 -1,3- 二甲基 -3-(3- 嘧啶 -5- 基 - 苯基 )-3,6- 二氢 -1H- 吡嗪 -2- 酮
Figure 132011DEST_PATH_IMAGE038
将32%氨水溶液(2 mL)加入到中间体 7 (0.17 g, 0.54 mmol)中并在密封试管中于65℃搅拌该混合物2 小时，然后于70℃搅拌6小时。冷却至室温后，用水稀释该混合物并用DCM提取。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂。粗产物经快速柱层析纯化(硅胶；7 M氨在甲醇中的DCM溶液0/100-6/94)。收集所需的部分并于真空浓缩，得到化合物 1 (0.09 g, 56%产率)，为白色固体。
实施例 B2
制备化合物 2 ：外消旋 -5- 氨基 -3-[3-(5- 甲氧基 - 吡啶 -3- 基 )- 苯基 ]-1,3- 二甲基 -3,6- 二氢 -1H- 吡嗪 -2- 酮
将EtOH (3 mL)加入到中间体 9 (0.16 g, 0.35 mmol)、反式-双(二环己胺)二乙酸钯[DAPCy, CAS 628339-96-8] (0.021 g, 0.035 mmol)、磷酸钾(0.22 g, 1.05 mmol)和3-甲氧基-5-吡啶-硼酸频哪醇酯(0.12 g, 0.53 mmol)的混合物中。于80℃搅拌该混合物48小时。冷却后，用水和Na2CO3 (饱和水溶液)稀释该混合物并用DCM提取。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂。粗产物经快速柱层析纯化(硅胶；7 M氨在甲醇中的DCM溶液0/100-7/93)。收集所需的部分和真空浓缩，粗产物再次经快速柱层析纯化(硅胶；7 M氨在甲醇中的DCM溶液0/100-7/93)。收集所需的部分并于真空浓缩，得到化合物 2 (0.013 g, 11%产率)。
实施例 B3
制备化合物 3 ：外消旋 -5- 氯代 - 吡啶 -2- 甲酸 [3-(6- 氨基 -2,4- 二甲基 -3- 氧代 -2,3,4,5- 四氢 - 吡嗪 -2- 基 )- 苯基 ]- 酰胺
Figure 270049DEST_PATH_IMAGE040
方法A
于室温、氮气下，将反式-1,2-二氨基环己烷(0.002 g, 0.018 mmol)加入到在密封试管中中间体 9 (0.052 g, 0.176 mmol)、碘化亚铜(I) (0.002 g, 0.009 mmol)、5-氯代-2-吡啶甲酰胺(0.028 g, 0.176 mmol)和磷酸三钾(0.075 g, 0.351 mmol)在DMF (1 mL)中的搅拌悬浮液中。于180℃微波照射下搅拌该混合物140分钟。用NH4Cl (饱和水溶液)稀释该混合物并用DCM提取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤和真空蒸发溶剂。粗产物经快速柱层析纯化(硅胶；7 M氨在甲醇中的DCM溶液0/100-1/99)。收集所需的部分并于真空浓缩，得到化合物 3(0.004 g, 6%产率)。
方法B
于室温下，将5-氯代-2-吡啶甲酸(0.234 g, 1.485 mmol)加入到中间体 18 (0.3 g, 1.292 mmol)的DCM (13 mL)的悬浮液中。然后，加入N,N-二甲基苯胺(0.21 mL, 1.679 mmol)，于室温下搅拌5分钟后，加入HATU (0.54 g, 1.421 mmol)。于室温下搅拌该混合物16小时。用水稀释该混合物并用DCM提取。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂。粗产物经快速柱层析纯化(硅胶；甲醇在DCM中0/100-10/90)。收集所需的部分并于真空浓缩，得到化合物 3 (0.294 g, 61%产率)。
实施例 B4
制备化合物 4 : (S*)-5- 氯代 - 吡啶 -2- 甲酸 [3-(6- 氨基 -2,4- 二甲基 -3- 氧代 -2,3,4,5- 四氢 - 吡嗪 -2- 基 )- 苯基 ]- 酰胺和化合物 5 (R*)-5- 氯代 - 吡啶 -2- 甲酸 [3-(6- 氨基 -2,4- 二甲基 -3- 氧代 -2,3,4,5- 四氢 - 吡嗪 -2- 基 )- 苯基 ]- 酰胺
Figure 571717DEST_PATH_IMAGE040
通过在Chiralcel® OD-H (5μm 250 x 20 mm)上经制备型SFC将化合物 3 (294 mg)的样品分离为对应的对映体，流动相(0.3%异丙基-胺，60% CO2，40%的EtOH/iPrOH 50/50 v/v的混合物)，得到化合物 4 (0.11 g)和化合物 5 (0.15 g)。经快速柱层析再次纯化这种最后的衍生物(硅胶；0.5% NH4OH, 95% DCM, 5% EtOH)，得到纯化合物 5 (0.09 g)。
实施例 B5
制备化合物 6 ：外消旋 -5- 甲基 - 吡嗪 -2- 甲酸 [3-(6- 氨基 -2,4- 二甲基 -3- 氧代 -2,3,4,5- 四氢 - 吡嗪 -2- 基 )- 苯基 ]- 酰胺
Figure 932291DEST_PATH_IMAGE041
于室温下，将5-甲基吡嗪-2-甲酸(0.014 g, 0.104 mmol)加入到中间体 18 (0.021 g, 0.09 mmol)的DCM (1.5 mL)悬浮液中。然后，加入吡啶(0.01 mL, 0.118 mmol)，于室温下搅拌5分钟后，加入HATU (0.038 g, 0.099 mmol)。于室温下搅拌该混合物16小时。用水稀释该混合物并用DCM提取。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂。粗产物经快速柱层析纯化(硅胶；MeOH在DCM中0/100-10/90)。收集所需的部分和真空浓缩。残余物再次经快速柱层析纯化(硅胶；固体注射；7 M氨在甲醇中的DCM溶液0/100-2/98)。收集所需的部分并于真空浓缩，得到化合物 6 (0.009 g, 28%产率)。
实施例 B6
制备化合物 9 ：外消旋 -5- 氨基 -3-[2,4- 二氟 -5-(5- 甲氧基 - 吡啶 -3- 基 )- 苯基 ]-1- 乙基 -3- 甲基 -3,6- 二氢 -1H- 吡嗪 -2- 酮
将32%氨水溶液(8 mL)加入到中间体 27 (0.14 g, 0.36 mmol)在7 M氨的甲醇的溶液(4 mL)中并在密封试管中于65℃搅拌该混合物3小时。冷却至室温后，用水稀释该混合物并用DCM提取。分离有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂，得到化合物9 (0.12 g, 90%产率)，为白色固体。
表 1
Figure 876162DEST_PATH_IMAGE043
C.分析部分
LCMS
对于本发明化合物的(LC)MS-特征分析，使用下列方法。
通用程序A
UPLC (超高效液相层析)测量使用Acquity UPLC (Waters)系统进行，所述系统包含样本管理器、带有脱气器的二元泵、四柱加热炉、二极管阵列检测器(DAD)及各方法中所指定的柱。MS检测器配置有ESCI双电离源(电喷雾结合大气压力化学电离)。使用氮作为雾化气体。源温度维持在140℃。数据采集以MassLynx-Openlynx软件来进行。
方法 1:
除了通用程序A：于得自Waters的BEH-C18柱(1.7μm, 2.1 x 50 mm)上，以1.0 ml/min的流速，在无分流到MS检测器下，于50℃进行反相UPLC。所用的梯度条件为：95% A(0.5 g/l乙酸铵溶液+5%乙腈)，5% B(乙腈)于3.8分钟内至40% A，60%B，于4.6分钟内至5% A, 95% B，保持5.0分钟。注射量2μl。低分辨质谱(单四极杆, SQD检测器)使用0.08秒的通道间延迟时间，于0.1秒内从100扫描至1000来获得。毛细管针电压为3 kV。正离子化模式和负离子化模式的锥电压分别为25 V和30 V。
通用程序 B:
LC测量使用UPLC (超高效液相层析) Acquity(Waters)系统进行，所述系统包含带有脱气器的二元泵、自动取样器、二极管阵列检测器(DAD)及下列各方法中所指定的柱，柱保持在40℃的温度。液流由柱被带到MS检测器。MS检测器配置有电喷雾电离源。毛细管针电压为3 kV而源温度于Quattro (Waters的三重四极质谱仪)上维持在130℃。使用氮作为雾化气体。数据采集以MassLynx-Openlynx软件(Waters)来进行。
方法 2:
除了通用程序B：于Waters Acquity BEH(桥联乙基硅氧烷/二氧化硅混成)Phenyl-Hexyl柱(1.7 µm, 2.1 x 100 mm)上，以0.343 ml/min的流速进行反相UPLC。使用二个流动相(流动相A：95% 7mM乙酸铵/5%乙腈；流动相B：100%乙腈)进行梯度条件：于2.18分钟内从84.2% A和15.8% B(保持0.49分钟)至10.5% A和89.5% B，保持1.94分钟，并在0.73分钟内回到初始条件，保持0.73分钟。使用2 ml注射量。正和负离子化模式的锥电压皆为20 V。质谱使用0.1秒的中间扫描延迟时间，于0.2秒内从100扫描至1000来获得。
熔点
所述数值为或者峰值或者熔化范围，且所得到数值具实验不确定性，所述实验不确定性通常与分析方法有关。
Mettler FP 81HT/FP90装置(如表2中FP90所指)
对于许多化合物，熔点于开放的毛细管于Mettler FP 81HT/FP90装置上测定。熔点以1、3、5或10℃/分钟的温度梯度来测量。最高温度为300℃。熔点从数字显示器读取。
表 2 ：分析数据–Rt指保留时间(以分钟表示)，[M+H]+指化合物的质子化质量，方法指用于(LC)MS的方法；
n.d.指未测定
SFCMS
通用程序
SFC测量使用Berger Instruments公司(Newark, DE, USA)的分析SFC系统来进行，所述系统包含递送二氧化碳(CO2)的FCM-1200二元泵流体控制模块)及调节器、CTC Analytics自动液体取样器、用于将柱从室温加热到80℃的TCM-20000热控制模块。使用配置有耐受最高400巴的高压流通槽的Agilent 1100 UV二极管阵列检测器。液体流由柱分流到MS光谱仪。MS检测器配置有大气压离子化游离源。下列Waters ZQ质谱的离子化参数为：电晕电流：9 µa，源温度：140℃，锥孔：30 V，探针温度450℃，提取器3 V，脱溶剂气体400L/hr，锥孔气体70 L/hr。使用氮作为雾化气体。数据采集以Waters-Micromass MassLynx-Openlynx数据系统来进行。
方法 1:
除了通用程序：SFC的手性分离于Chiralcel® OD DAICEL柱(10 µm、4.6 x 250 mm)上，于35℃以3.0 ml/min的流速来进行。流动相为CO2、40%乙醇/异丙醇(1/1) (含0.3% iPrNH2)保持7分钟。
表 3 ：分析 SFC 数据–Rt指保留时间(以分钟表示)，[M+H]+指化合物的质子化质量，方法指用于对映异构体纯化合物的(SFC)MS分析的方法。
Figure 767075DEST_PATH_IMAGE045
旋光度 :
旋光度于Perkin-Elmer 341旋光仪上以钠灯测量并记载如下：[α]λ t℃(c g/100 mL, 溶剂)。
表 4 ：分析数据–对映异构体纯化合物的旋光值
Figure 375911DEST_PATH_IMAGE046
D.药理学实施例
本发明所提供的化合物为β位点APP-裂解酶1(BACE1)的抑制剂。抑制BACE1(一种天门冬氨酸蛋白酶)相信与治疗阿尔茨海默氏病有关(AD)。来自β-淀粉样蛋白前体蛋白(APP)的β-淀粉样蛋白肽(Aβ)的产生和积聚相信在AD的发生和进程上起重要作用。Aβ因淀粉样蛋白前体蛋白(APP)在Aβ域的N-和C-端分别被β-分泌酶和γ-分泌酶连续裂解所产生。
期望式(I)化合物借助于其抑制酶活性的能力对BACE1实质上具有效用。抑制剂使用基于生化荧光共振能量转移(FRET)的分析和在下述的SKNBE2细胞中的细胞αLisa试验来测试，结果示于表5和表6中。
生化 FRET分析
此分析为基于荧光共振能量转移(FRET)的分析。此分析的底物为由13个氨基酸肽所衍生的APP，其含有淀粉样蛋白前体蛋白(APP)β分泌酶裂解位点的“瑞典(Swedish)”Lys-Met/Asn-Leu突变。此物质也含有二个荧光团：(7-甲氧基香豆素-4-基)乙酸(Mca)为具有在320 nm激发波长和405 nm发射波长的荧光供体，和2,4-二硝基苯基(Dnp)为专有的猝灭剂受体。这二个基团间的距离被选择以便依照激发光，使供体荧光能量明显地通过共振能量转移被受体猝灭。一旦被BACE1裂解，荧光团Mca由猝灭基团Dnp分离出，使供体的完整荧光生产恢复。荧光的增加与蛋白水解率呈线性相关。
简言之，将最终浓度1 μg/ml的384-孔格式板的重组BACE1蛋白于室温以培养缓冲液(40 mM柠檬酸盐缓冲液pH 5.0, 0.04% PEG, 4% DMSO)的10 μm基质，在有或无化合物的存在下培养120分钟。接着于T=0和T=120直接以荧光测量来测量蛋白水解量(于320 nm激发及于405 nm发射)。结果以RFU(相对荧光单位)表示，为T120和T0间的差异。
最佳曲线以最小平方和法对% Controlmin相对于化合物浓度的作图进行拟合。由此可得到IC50值(引起50%抑制活性的抑制浓度)。
LC = 低对照值的中间值
　　　　 = 低对照：无酶的反应
HC = 高对照值的中间值
　 = 高对照：含酶的反应
%效用 = 100-[(样本-LC)/(HC-LC) *100]
%对照 = (样本/HC)*100
%Controlmin = (样本-LC)/(HC-LC) *100
下列作为示例的化合物基本上如上述进行试验并具有下列的活性：
表 5
Figure 470775DEST_PATH_IMAGE047
SKNBE2 细胞的细胞α Lisa 分析
以二个αLisa分析来定量人类神经母细胞瘤SKNBE2细胞的培养基中所产生和分泌的总Aβ和Aβ1-42的量。此分析以表达野生型淀粉样蛋白前体蛋白(hAPP695)的人神经母细胞瘤SKNBE2为基础。将化合物稀释并加入到这些细胞中，培养18小时，然后测量Aβ1-42和总Aβ。总Aβ和Aβ1-42以三明治αLisa来测量。αLisa为一种三明治分析，其使用与涂覆珠的链霉抗生物素相连接的生物素化抗体AbN/25及连接受体珠的抗体Ab4G8或cAb42/26，分别供检测总Aβ和Aβ1-42。在总Aβ和Aβ1-42的存在下，珠会紧密靠近。供体珠的激发引发单态氧分子释放，单态氧分子启动受体珠中能量转移级联，造成光发射。培养1小时后测量光发射量(于650 nm激发及于615 nm发射)。
最佳曲线以最小平方和法与% Controlmin对化合物浓度的作图进行拟合。由此可得到IC50值(引起50%活性抑制的抑制浓度) 。
LC= 低对照值的中间值
= 低对照：细胞于无化合物、无生物素化Ab的αLisa中预培养
HC= 高对照值的中间值
= 高对照：细胞于无化合物下预培养
%效用=100-[(样本-LC)/(HC-LC) *100]
%对照=(样本/HC)*100
% Controlmin = (样本-LC)/(HC-LC) *100
下列作为示例的化合物基本上如上述进行试验并表现出下列的活性：
表 6
Figure 481456DEST_PATH_IMAGE048
。

Claims (9)

1. 式(I)化合物
Figure 2011800283715100001DEST_PATH_IMAGE002
及其立体异构形式，其中
R1、R2独立地选自氢、氟代、氰基、C1-3烷基、单-和多卤代-C1-3烷基和C3-6环烷基；或
R1和R2与它们连接的碳原子结合在一起，可形成C3-6环烷二基环；
R3、R4独立地选自氢、C1-3烷基、C3-6环烷基、单-和多卤代-C1-3烷基、同芳基和杂芳基；
X1、X2、X3、X4独立地为C(R5)或N，条件是其中不超过二个代表N；各R5选自氢、卤代、C1-3烷基、单-和多卤代-C1-3烷基、氰基、C1-3烷氧基、单-和多卤代-C1-3烷氧基；
L为键或-N(R6)CO-，其中R6为氢或C1-3烷基；
Ar为同芳基或杂芳基；
其中同芳基为苯基或被一、二或三个选自下列的取代基取代的苯基：卤代、氰基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、单-和多卤代-C1-3烷基；
杂芳基选自吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基和噁二唑基，各自任选地被一、二或三个选自下列的取代基取代：卤代、氰基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、单-和多卤代-C1-3烷基；或
其加成盐或溶剂化物。
2. 依据权利要求1的化合物，其中
R1和R2独立地选自氢、氟代、氰基，和多卤代C1-3烷基；或
R1和R2与它们连接的碳原子结合在一起，可形成C3-6环烷二基环；
R3是C1-3烷基；
R4是C1-3烷基；
X1、X2、X3、X4独立地为C(R5)，其中各R5选自氢和卤代；
L为键或-N(R6)CO-，其中R6为氢；
Ar为同芳基或杂芳基；
其中同芳基为苯基或被一或二个选自下列的取代基取代的苯基：卤代、氰基、C1-3烷基和C1-3烷氧基；
杂芳基选自吡啶基、嘧啶基和吡嗪基，各自任选地被一或二个选自下列的取代基取代：卤代、氰基、C1-3烷基和C1-3烷氧基；或
其加成盐或溶剂化物。
3. 依据权利要求1的化合物，其中
R1和R2独立地选自氢、氟代、氰基，和三氟甲基；或R1和R2与它们连接的碳原子结合在一起，可形成C3-6环丙基环；
R3是甲基；
R4是甲基；
X1、X2、X3、X4是CH；
L为键或-N(R6)CO-，其中R6是氢；
Ar为同芳基或杂芳基；
其中同芳基为苯基或被一或二个选自下列的取代基取代的苯基：卤代和氰基；
杂芳基选自吡啶基、嘧啶基和吡嗪基，各自任选地被一或二个选自下列的取代基取代：氯代、氟代、氰基、甲基和甲氧基；或
其加成盐或溶剂化物。
4. 依据权利要求1的化合物，其中
R1、R2是氢；
R3、R4独立地为甲基或乙基；
X1和X3是CH或CF；
X2和X4是CH；
L为键或–N(R6)CO-，其中R6是氢；
Ar是杂芳基；
杂芳基选自吡啶基、嘧啶基和吡嗪基，各自任选地被氯代、氰基、甲基、甲氧基或三氟甲基取代。
5. 依据权利要求1的化合物，其中
R1、R2是氢；
R3、R4是甲基；
X1、X2、X3、X4是CH；
L是–N(R6)CO-，其中R6是氢；
Ar是杂芳基；
杂芳基是被氯代、氰基、甲氧基或三氟甲基取代的吡啶基；嘧啶基和被甲基取代的吡嗪基。
6. 一种药用组合物，其包含治疗有效量的如权利要求1-5中任一项定义的化合物及药学上可接受的载体。
7. 一种制备如权利要求6中定义的药用组合物的方法，其特征在于药学上可接受的载体与治疗有效量的如权利要求1-5中任一项定义的化合物紧密混合。
8. 一种如权利要求1-5中任一项定义的化合物，其用于治疗、防止或预防阿尔茨海默氏病(AD)、轻度认知损伤、衰老、痴呆、路易氏体痴呆、唐氏综合征、中风相关痴呆、帕金森氏病相关痴呆或β淀粉样蛋白相关痴呆。
9. 一种治疗选自阿尔茨海默氏病、轻度认知损伤、衰老、痴呆、路易氏体痴呆、唐氏综合征、中风相关痴呆、帕金森氏病相关痴呆及β淀粉样蛋白相关痴呆的方法，其包括给予有需要的受试者治疗有效量的如权利要求1-5中任一项定义的化合物或如权利要求6中定义的药用组合物。
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Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103936690B (zh) 2005-10-25 2016-06-08 盐野义制药株式会社 氨基二氢噻嗪衍生物
WO2008133273A1 (ja) 2007-04-24 2008-11-06 Shionogi & Co., Ltd. アルツハイマー症治療用医薬組成物
RU2476430C2 (ru) 2007-04-24 2013-02-27 Сионоги Энд Ко., Лтд. Производные аминодигидротиазина, замещенные циклической группой
ES2738123T3 (es) 2008-06-13 2020-01-20 Shionogi & Co Derivado heterocíclico que contiene azufre que tiene actividad inhibitoria de ß-secretasa
WO2010047372A1 (ja) 2008-10-22 2010-04-29 塩野義製薬株式会社 Ｂａｃｅ１阻害活性を有する２－アミノピリミジン－４－オンおよび２－アミノピリジン誘導体
AR077328A1 (es) 2009-07-24 2011-08-17 Novartis Ag Derivados de oxazina y su uso en el tratamiento de trastornos neurologicos
UA108363C2 (uk) 2009-10-08 2015-04-27 Похідні імінотіадіазиндіоксиду як інгібітори bace, композиція на їх основі і їх застосування
WO2011071135A1 (ja) 2009-12-11 2011-06-16 塩野義製薬株式会社 オキサジン誘導体
AU2010338365B2 (en) * 2009-12-31 2014-01-30 Novartis Ag Pyrazine derivatives and their use in the treatment of neurological disorders
PH12012502377A1 (en) 2010-06-09 2014-10-14 Janssen Pharmaceutica Nv 5,6-dihydro-2h-[1,4]oxazin-3-yl-amine derivatives useful as inhibitors of beta-secretase (bace)
WO2012057247A1 (ja) 2010-10-29 2012-05-03 塩野義製薬株式会社 縮合アミノジヒドロピリミジン誘導体
US8927721B2 (en) 2010-10-29 2015-01-06 Shionogi & Co., Ltd. Naphthyridine derivative
EP2655376B1 (en) 2010-12-22 2017-08-23 Janssen Pharmaceutica NV 5,6-DIHYDRO-IMIDAZO[1,2-a]PYRAZIN-8-YLAMINE DERIVATIVES USEFUL AS INHIBITORS OF BETA-SECRETASE (BACE)
US8524897B2 (en) 2011-01-12 2013-09-03 Novartis Ag Crystalline oxazine derivative
CN103403001B (zh) 2011-01-13 2016-08-17 诺瓦提斯公司 杂环衍生物及其在神经性疾病治疗中的应用
SG193342A1 (en) 2011-03-09 2013-10-30 Janssen Pharmaceutica Nv 3,4-DIHYDRO-PYRROLO[1,2-a]PYRAZIN-1-YLAMINE DERIVATIVES USEFUL AS INHIBITORS OF BETA-SECRETASE (BACE)
EP2694489B1 (en) 2011-04-07 2017-09-06 Merck Sharp & Dohme Corp. C5-c6 oxacyclic-fused thiadiazine dioxide compounds as bace inhibitors, compositions, and their use
EP2694521B1 (en) 2011-04-07 2015-11-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Pyrrolidine-fused thiadiazine dioxide compounds as bace inhibitors, compositions, and their use
RU2013150349A (ru) 2011-04-13 2015-05-20 Мерк Шарп И Доум Корп. 5-замещенные иминотиазины и их моно- и диоксиды в качестве ингибиторов васе, содержащие их композиции и их применение
JPWO2012147763A1 (ja) 2011-04-26 2014-07-28 塩野義製薬株式会社 オキサジン誘導体およびそれを含有するｂａｃｅ１阻害剤
US20130267699A1 (en) 2011-06-24 2013-10-10 California Institute Of Technology Quaternary heteroatom containing compounds
KR20140054295A (ko) 2011-08-22 2014-05-08 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 Bace 억제제로서의 2-스피로-치환된 이미노티아진 및 그의 모노- 및 디옥시드, 조성물 및 그의 용도
US8338413B1 (en) 2012-03-07 2012-12-25 Novartis Ag Oxazine derivatives and their use in the treatment of neurological disorders
WO2014062553A1 (en) 2012-10-17 2014-04-24 Merck Sharp & Dohme Corp. Tricyclic substituted thiadiazine dioxide compounds as bace inhibitors, compositions, and their use
WO2014062549A1 (en) 2012-10-17 2014-04-24 Merck Sharp & Dohme Corp. Tricyclic substituted thiadiazine dioxide compounds as bace inhibitors, compositions, and their use
EP2912035A4 (en) 2012-10-24 2016-06-15 Shionogi & Co DERIVATIVES OF DIHYDROOXAZINE OR OXAZEPINE HAVING BACE1 INHIBITING ACTIVITY
CN104870000A (zh) 2012-12-20 2015-08-26 默沙东公司 作为bace抑制剂的c5,c6氧杂环稠合的亚胺基噻嗪二氧化物化合物,组合物及其用途
AU2014280124B2 (en) 2013-06-12 2018-11-01 Janssen Pharmaceutica Nv 4-amino-6-phenyl-5,6-dihydroimidazo[1,5-a]pyrazine derivatives as inhibitors of beta-secretase (BACE)
JP6387402B2 (ja) 2013-06-12 2018-09-05 ヤンセン ファーマシューティカ エヌ．ベー． β−セクレターゼ（ＢＡＣＥ）の阻害剤としての４−アミノ−６−フェニル−５，６−ジヒドロイミダゾ［１，５−Ａ］ピラジン−３（２Ｈ）−オン誘導体
BR112015030597A2 (pt) 2013-06-12 2017-07-25 Janssen Pharmaceutica Nv derivados 4-amino-6-fenil-6,7-di-hidro[1,2,3]triazolo[1,5-a]pirazina como inibidores de beta-secretase (bace)
US10421696B2 (en) 2014-12-18 2019-09-24 California Institute Of Technology Enantioselective synthesis of α-quaternary mannich adducts by palladium-catalyzed allylic alkylation
CN107108582B (zh) 2014-12-18 2019-10-18 詹森药业有限公司 β-分泌酶的2，3，4，5-四氢吡啶-6-胺化合物抑制剂
US10040784B2 (en) 2016-03-11 2018-08-07 California Institute Of Technology Compositions and methods for acylating lactams
US10357493B2 (en) 2017-03-10 2019-07-23 Selenity Therapeutics (Bermuda), Ltd. Metalloenzyme inhibitor compounds
US11214568B2 (en) 2018-10-18 2022-01-04 California Institute Of Technology Gem-disubstituted pyrrolidines, piperazines, and diazepanes, and compositions and methods of making the same

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050282825A1 (en) * 2004-06-16 2005-12-22 Wyeth Amino-5,5-diphenylimidazolone derivatives for the inhibition of beta-secretase
CN101460480A (zh) * 2006-04-05 2009-06-17 阿斯利康(瑞典)有限公司 2-氨基嘧啶-4-酮类化合物及其用于治疗或预防Aβ相关病理的用途

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2007533740A (ja) * 2004-04-22 2007-11-22 イーライ リリー アンド カンパニー Ｂａｃｅ阻害剤としてのアミド
MX2008000212A (es) * 2005-06-30 2008-03-24 Wyeth Corp Compuestos amino-5-(6 miembros)heteroarilimidazolona y el uso de estos para la modulacion de la (-secretasa.
RU2476430C2 (ru) * 2007-04-24 2013-02-27 Сионоги Энд Ко., Лтд. Производные аминодигидротиазина, замещенные циклической группой
TWI431004B (zh) * 2008-05-02 2014-03-21 Lilly Co Eli Ｂａｃｅ抑制劑
AU2010338365B2 (en) * 2009-12-31 2014-01-30 Novartis Ag Pyrazine derivatives and their use in the treatment of neurological disorders

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050282825A1 (en) * 2004-06-16 2005-12-22 Wyeth Amino-5,5-diphenylimidazolone derivatives for the inhibition of beta-secretase
CN101460480A (zh) * 2006-04-05 2009-06-17 阿斯利康(瑞典)有限公司 2-氨基嘧啶-4-酮类化合物及其用于治疗或预防Aβ相关病理的用途

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