CN102196725A - 治疗和预防柑橘青果病的方法及组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及预防柑橘青果病的方法和组合物。在一种实施方案中，提供了一种驱逐或杀死柑橘青果病昆虫传播介体的方法，包括使传播介体暴露在有效量的表1和表2中所列的至少一种挥发性化合物中。在一种实施方案中，挥发性化合物是二甲基二硫。

Description

治疗和预防柑橘青果病的方法及组合物

相关申请的交叉引用

本申请要求美国专利申请61/091,500(申请日：2008年8月25日)为优先权，在这里全文引用61/091,500号申请。

技术领域

本发明涉及杀虫剂组合物，尤其涉及包含新确定的挥发性化合物的杀虫剂组合物以及用这种挥发性组合物驱逐或杀死柑橘青果病传播介体的方法。

背景技术

黄龙病(HLB)或柑橘青果病于1919年首次在中国南方报道(Reinkinget等，1919)，但普遍认为其起源于非洲。目前大约在40个不同的亚洲、非洲、北美和南美国家发现有这种病，近些年来在佛罗里达州、加利福尼亚州、路易斯安那州、德克萨斯州和巴西等主要的柑橘产地威胁日益严重。柑橘青果病是由局限于韧皮部的难培养的原核α-proteobacterium Candidatus Liberibacter spp.，Ca.africanus(非洲型)和Ca.L.americanus(美洲型)引起的。两种木虱，亚洲柑橘木虱(Diaphorina citri Kuwayama)和非洲柑橘木虱(Trioza erytreaei)是已知的传播这种疾病的介体(Manjunath等，2002)。柑橘树感染了这种毁灭性的柑橘青果病后，会变得倾斜、畸形、果实腥异味，然后在几年内死去。每年佛罗里达州约14亿美元的柑橘产业(Ewing等，2006-2007)严重受到这种传播介体疾病系统的威胁。每年加利福尼亚州柑橘产业受这种病的威胁损失130万美元。目前，对这种病没有治疗方法，树木一旦感染严重通常就被销毁。而且，也没有已知的相关栽培品种可以抵抗柑橘青果病。自2005年以来，据估计，为了减缓这种病的传播，巴西已经销毁了约650000棵树木，佛罗里达州也有类似的数字。

附图说明

图1为番石榴整叶(下迹线)和番石榴碎叶(上迹线)的硫色谱对比图。

图2为番石榴叶被粉碎后番石榴叶挥发物的峰面积变化图。

图3为番石榴碎叶样本的总离子流(TIC)色谱图。

图4显示了番石榴幼芽和柑橘幼芽的含硫挥发物的色谱对比图。色谱显示了番石榴整叶和碎叶分别产生的含硫挥发物，并与柑橘整叶和碎叶分别产生的含硫挥发物进行比较。为了获得这些色谱结果，分别收集番石榴或柑橘幼芽整叶的静态顶部空间挥发物，在收集之前先将样本在实验室环境条件下平衡约30分钟，或者经机械粉碎后每过一段时间(0、10、30或60分钟)收集一次样本的静态顶部空间挥发物。Y轴显示的是GC-PFPD响应(mV)，x轴是保留时间(分钟)。

图5显示了在4选择区嗅觉计中亚洲柑橘木虱(D.citri)对分别从柑橘整叶，柑橘碎叶与二甲基二硫(DMDS)组合，单独的二甲基二硫，番石榴碎叶与柑橘碎叶组合，番石榴整叶与柑橘整叶组合，番石榴碎叶与番石榴整叶组合，柑橘碎叶与柑橘整叶组合散发出的挥发物的响应对比。灰条代表受到吸引的亚洲柑橘木虱的百分数，而白条代表受到驱逐的亚洲柑橘木虱的百分数。白条或灰条后面跟着的字母相同就表示没有显著区别(Tukey’s HSD检验，P＜0.05)。

图6a-6b显示了当Y形管嗅觉计的两个臂提供从单独的柑橘整叶(柑橘)或从柑橘整叶与二甲基二硫组合(柑橘+二甲基二硫)散发出的挥发物时，亚洲柑橘木虱对挥发物的响应对比。灰条代表受到驱逐的亚洲柑橘木虱的百分数，而白条代表受到吸引的亚洲柑橘木虱的百分数(a)；和当嗅觉计的一个臂为实验室空气而另一个臂为从柑橘整叶(柑橘)或二甲基二硫的矿物油溶液(二甲基二硫)散发出的挥发物时，亚洲柑橘木虱的行为响应(b)。灰条代表受到驱逐的亚洲柑橘木虱的百分数，而白条代表受到吸引的亚洲柑橘木虱的百分数。

发明内容

本发明的发明人出乎意料的发现，由普通番石榴(Psidium guajava L.)释放出来的挥发性化合物对柑橘青果病的传播介体具有驱虫或杀虫效果。传播介体的典型例子如昆虫，它能携带柑橘青果病，包括但不限于木虱，亚洲柑橘木虱(Diaphorina citri Kuwayama)和非洲柑橘木虱(Trioza erytreaei)。木虱指韧皮部取食的昆虫类(木虱科，同翅目)，涉及蚜虫(aphids)蚧虫(coccids)和粉虱(whiteflies)。

这里所使用的“有效量”或类似术语的意思是为了达到需要的结果如驱逐或杀死柑橘青果病的传播介体，通常是昆虫传播介体，所必需的剂量以及持续一段时间的有效数量。

这里所使用的“驱逐”意思是在希望的区域内存在的柑橘青果病传播介体比没有采取措施时的传播介体有所减少。在希望的区域内传染柑橘青果病的传播介体是指在该希望的区域内至少有一种传播介体。驱逐也包括在没有害虫存在的希望区域内通过采取措施而预防传染，如果不采取措施就会有至少一种害虫存在。

这里所使用的“杀死”意思是用一种方法或组合物杀死传播介体和/或抑制或减少传播介体生长。如果在一希望或预定的区域内传播介体的数量有了相对减少，那么传播介体的生长就受到了抑制。如果传播介体的正常生长方式被改变，从而对每个传播介体个体产生了负面影响，那么也可以说传播介体的生长已经得到抑制。如果在希望的区域内通过采取措施后传播介体比没有采取措施时少了，那么采取措施已经减少了传播介体的数量。

根据本发明的一个方面，提供了一种杀死或驱逐柑橘青果病传播介体的方法，包括使传播介体暴露在有效量的表1和表2中(包括但不限于“未确认”的峰)所列的至少一种挥发性化合物中，以驱逐或杀死至少一种柑橘青果病传播介体。

根据本发明的另一个方面，提供了一种治疗感染了柑橘青果病传播介体的柑橘植物的方法，包括对柑橘植物或柑橘植物周围区域给药有效量的表1和表2中所列的至少一种挥发性化合物，以驱逐或杀死至少一种柑橘青果病的传播介体。

根据本发明的另一个方面，提供了一种组合物，该组合物包括表1和表2中所列的至少一种挥发性化合物和农业上可接受的载体，其中挥发性化合物的量为能驱逐或杀死柑橘青果病至少一种传播介体的有效量。

根据本发明的另一个方面，提供了一种给予、增加或提高用于驱逐或杀死柑橘青果病传播介体的组合物的驱虫或杀虫效果的方法，该方法是向该组合物中加入表1和表2中所列的至少一种挥发性化合物，该挥发性化合物的加入量为能杀死或驱逐柑橘青果病至少一种传播介体的有效量。

这里所描述的任何一个实施方案中，本发明的挥发性化合物(活性组分)可以用已知的方法合成制备或者可以从这里所述的普通番石榴(Psidium guajava L.)中获得。例如，合成的二甲基二硫可以作为挥发性化合物，很容易从合适的商业途径获得。另外，如下面实施例所述，本发明的发明人发现粉碎后的番石榴叶所产生的某些含硫和不含硫挥发性化合物的量更大(相对于没有粉碎的叶子)，而这些含硫和不含硫挥发性化合物被认为对柑橘青果病的传播介体具有驱虫或杀虫效果。因此，在本发明的一个实施方案中，普通番石榴叶经粉碎后提供一种或多种本发明使用的挥发性化合物。

因此，本发明的另一个方面提供了一种驱逐或杀死柑橘青果病传播介体的方法。该方法包括使传播介体暴露在有效量的二甲基二硫组合物中，以驱逐或杀死至少一种柑橘青果病的传播介体。

本发明的另一个方面提供了一种制造的产品。这种制造的产品包括能驱逐或杀死至少一种柑橘青果病传播介体的有效量的二甲基二硫和二甲基二硫的农业上可接受的载体。提供了一种容器，其包括了一定量的二甲基二硫和农业上可接受的载体。该容器具有整体或分离式的洒施机，用于将容器里的物质施加到希望的目标区域，如喷洒或类似的。该应用可以是本领域已知的任何合适的装置，如喷雾器，泵式喷雾器，喷雾嘴或类似物。

如上所述，用于该组合物、制造的产品以及用于这里所述的方法的(“至少一种”)挥发性化合物可以包括表1和表2中所述的一种或多种化合物。在一种实施方案中，挥发性化合物可以选自硫化氢、甲硫醇、二氧化硫、二甲基硫醚(DMS)、二甲基二硫(DMDS)、3-甲硫基丙醛和二甲基三硫(DTS)以及它们的组合。在一个特殊的实施方案中，挥发性化合物包括二甲基二硫。

在一个可替代的实施方案中，挥发性化合物可以替换为或者可以额外包括表4中所述的一种或多种组分。在另一个可替代的实施方案中，挥发性化合物可以替换为或者可以额外包括选自二甲基二硫、乙基甲基二硫、二乙基二硫、甲基丙基二硫、乙基丙基二硫、二丙基二硫、丙烯基丙基二硫和甲基2-丙烯基二硫其中之一的二硫化物。在这里所述的组合物中，一种或多种挥发性化合物可以以能获得希望的效果如驱逐或杀死柑橘青果病的传播介体通常是昆虫传播介体的有效量提供。例如，当挥发性化合物是二甲基二硫时，二甲基二硫可以以其合适的农业上可接受的载体如矿物油形式提供，浓度为2μg/ml(重量/体积)到8μg/ml，在一种实施方案中，浓度为4μg/ml(重量/体积)到5μg/ml。

本发明的另一个方面，本发明的挥发性含硫或不含硫化合物可以按需要配制并放入任何合适的装置应用于目标作物附近。例如，可以在一定压力下将挥发性含硫或不含硫化合物置于计量设备中。

本发明的另一个方面，向目标植物施加杀虫剂组合物可以通过向植物喷洒该组合物，而在一个实施方案中，可以控制性的释放该组合物。作为替代，也可以使用任何其他施加组合物的方法。通常，理想的是将组合物施加到植物顶部和下部的叶子上以及植物的干和根部系统周围的区域。给目标植物施加的组合物以能预防或实质上能减少昆虫数量所必需的量为宜。

在任何特定地点所施加的组合物的量根据许多因素如作物的种类、虫害的程度等而变化。

另外，组合物可以单独使用或与本领域已知的其他杀虫剂联合使用。当与本领域已知的其他杀虫剂联合使用时，本发明的组合物能改善其他杀虫剂的性能，因此起了佐剂的作用。还可以降低使用费用和频率并治疗柑橘青果病感染。

这里所描述的方法、组合物和制造的产品适合应用在任何感染了或可能感染柑橘青果病的树木和植物上。典型的植物包括柑橘属的任何栽培品种，包括但不限于甜橙(Citrus sinensis)、柠檬(C.limon)、青柠(C.latifolia)、葡萄柚(C.paradisi)、酸橙(C.aurantium)和瓯柑(C.reticulata)。

另外，本发明的杀虫剂组合物通常制成适合于按照常规方法配制农业/园艺杀虫剂的配方。即，表1或表2中的化合物可以与适合的农业上可接受的载体混合，如果需要，可以与助剂以合适的比例混合，合成的混合物受到溶解、分离、悬浮、混合、浸渍、吸附或黏着处理并且可以配制成实际应用中的任何希望的形式，如可溶液剂、乳油、可湿性粉剂、水溶性粉剂、水分散性粒剂、水溶性粒剂、悬浮剂、浓乳剂、悬乳剂、微乳剂、粉剂、颗粒剂、片剂和乳胶剂。“农业上可接受的载体”意思是对这里所描述的活性成分(挥发性化合物)的活性以及目标作物没有实质性有害效果的药剂。

农业上可接受的载体可以是固体、液体或气体。可用作固体载体的材料的例子包括豆粉，谷粉，木粉，树皮粉，锯木粉，烟草茎粉，胡桃壳粉，麸皮，纤维素粉末，植物提取后的残渣，合成聚合物如合成树脂粉末，黏土(如高岭土、膨润土或酸性白黏土)，滑石粉(如滑石粉或叶蜡石)，硅石(例如硅藻土、硅石粉末)，云母，活性碳，硫粉末，浮石，焙烧硅藻土，砖粉末，飞尘，沙子，无机矿物粉末如碳酸钙和磷酸钙，化学肥料如硫酸铵、磷酸铵、硝酸铵、尿素和氯化铵，以及混合肥料。

适合的液体载体可以是有溶解能力的或是没有溶解能力但能帮助活性成分化合物分散的材料。液体载体的例子包括水，醇(如甲醇、乙醇、异丙醇、丁醇和乙二醇)；酮(如丙酮、甲基乙基酮、甲基异丁基甲酮、二异丁基甲酮和环己酮)；醚(如二乙醚、二氧六环、溶纤剂、二异丙醚和四氢呋喃)；脂肪烃(如煤油和矿物油)；芳烃(如苯、甲苯、二甲苯、石脑油溶剂和烷基萘)；卤代烃(如二氯甲烷、氯仿、四氯化碳和氯苯)；酯(如乙酸乙酯、乙酸丁酯、丙酸乙酯、邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二辛酯)；酰胺(如二甲基甲酰胺、二乙基甲酰胺和二甲基乙酰胺)；以及腈(如乙腈)。在一个特殊的实施方案中，农业上可接受的载体包括农业上可接受的载体油，包括但不限于矿物油或植物油如芥花籽油、葵花籽油、棉花籽油、棕榈油、豆油以及类似物。在另一个特殊的实施方案中，矿物油为农业上可接受的载体。

当组合物作为气雾剂使用时，可以添加推进剂如丙烷、丁烷、异丁烷、二甲醚、二氧化碳、一氧化二氮、氮气以及它们的组合。另外，应当理解的是本发明的组合物还可以额外包括任何合适的表面活性剂、渗透剂、扩散剂、增稠剂、防冻剂、粘合剂、防结块剂、崩解剂、防沫剂、防腐剂、稳定剂和类似物。

实施例1(叶子样本)

采摘番石榴(Psidium guajava L.；桃金娘科)，甜橙(Citrus sinensis L.芸香科)的两个栽培品种(哈姆林和瓦伦西亚)，Ray Ruby葡萄柚(C.paradisi Macf.)和粗柠檬(C.limon Burm.)的叶幼芽，在MettlerAE 160电子天平(瑞士Greifensee)上称重并立即放入隔膜密封的玻璃小瓶里。放入小瓶内的每种植物的叶子大约3.5克，并在室温平衡约30分钟。番石榴(Psidium guajava)和粗柠檬(C.limon)于2007年分别从佛罗里达州湖泊地区Cee Jay养殖场和佛罗里达州Lake Alfred的柑橘研究和教育中心(CREC)处获得，并且从那时起它们的树苗一直在屏幕房内。甜橙(C.sinensis)和葡萄柚(C.paradisi)的树苗于2007年从佛罗里达州Dundee的南方柑橘养殖公司获得。之所以选择这些柑橘栽培品种进行分析是因为哈姆林橙和瓦伦西亚橙以及Ray Ruby葡萄柚在佛罗里达州的柑橘品种中种植量最高(20)。

实施例2(SPME顶部空间取样)

手动将50/30μm二乙烯基苯/Carboxen/聚二甲基硅氧烷(DVB/Carboxen/PDMS)Stable Flex固相微萃取(SPME)纤维头(Supelco公司，宾西法尼亚州Bellefonte)插入用隔膜密封的40mL玻璃小瓶里约1分钟(GC-PFPD)或15分钟(GC-MS)，收集从未粉碎的番石榴或柑橘叶幼芽散发出的静态顶部空间挥发物，其中在收集之前番石榴或柑橘叶幼芽已经平衡达到室温环境条件。之后，打开小瓶，将叶子样本粉碎并快速封闭小瓶从而使挥发物损失最小化。随后，小瓶被封闭(0分钟)后立即将固相微萃取纤维头再次暴露于小瓶内的静态挥发物中。经过10分钟、30分钟和60分钟后对小瓶取样，以研究粉碎后的叶子产生的挥发物的动力学。挥发物收集后，将饱含挥发物的纤维头导入GC-PFPD或GC-MS的注射器并在200℃(对于ZB-5柱)和240℃(对于DB-wax柱)脱附约5分钟(见下面实施例3对使用的色谱柱的讨论)。

实施例3(气相色谱GC-脉冲火焰光度检测器，PFPD)

用脉冲火焰光度检测器(PFPD)(型号5380，德克萨斯州Station大学OI Analytical公司)设置为硫模式并与HP-5890 Series II气相色谱分离联机，对含硫化合物进行分析。用三种不同的毛细管柱来完成实验性的鉴定：(a)ZB-5(30m×0.32mm.i.d.×0.5μm，(Zebron ZB-5，Phenomenex公司，加利福尼亚州托兰斯市)；(b)DB-wax(30m×0.32mm.i.d.×0.5μm，J&W科学公司；加利福尼亚州福尔松市)；和(c)Gas Pro PLOT毛细管柱(30m×0.32mm.i.d.，Agilent技术公司，加利福尼亚州Palo Alto)。ZB-5毛细管柱炉温程序升温从40℃到265℃，DB-wax毛细管柱炉温程序升温从40℃到240℃，升温速度为7℃/min，并在最大温度保持5分钟。用氦气作为载气，流速1.5mL/min。注射器和检测器的温度分别为200℃和250℃。使用0.75mm注射器衬里以改善峰的形状和色谱能效。进样方式为不分流进样。含硫挥发物的定性通过用极性柱和非极性柱上的线性保留指数(LRI)值与权威标准进行匹配来确定。线性保留指数值是基于与感兴趣化学物相同的色谱柱上测量的正构烷烃标准的保留时间。线性保留指数值仅取决于所用的固定相的类型(如聚甲基硅氧烷，wax等)，而与色谱柱的维度无关。

实施例4(气相色谱-质谱GC-MS)

用装有TurboMass软件的PerkinElmer Clarus 500四极质谱仪(Perkin Elmer Las公司，康涅狄格州Shelton市)和RTX-5毛细管柱(Restek公司，宾西法尼亚州Bellafonte)(60m×0.25mm.i.d.×0.50μm)进行分析。用氦气作载气，流量恒定在2mL/min模式。源温度保持在200℃，接口传输线温度和注射器温度保持在260℃。炉温程序以7℃/min的线性变化率从40℃升高到260℃。使用正离子模式下的电子轰击离子化(70eV)，或者对质量范围25-300m/z进行扫描或者获得选定离子模式下的数据。通过比对NIST 2005 2.0版标准谱(NIST，马里兰州Gaithersburg)进行质谱匹配。只有谱匹配值等于或大于800且LRI值合适的那些化合物才可以被认为是正确定性。如果可能，使用权威标准进行确认。

实施例5(对含硫挥发物进行鉴定)

如下面表1所示，七种确定的番石榴叶含硫挥发物的初步定性是基于对三种不同色谱柱的标准化的保留指数值与权威标准进行比对。这些数值用仅对检测含硫挥发物有高选择性的脉冲火焰光度检测器获得。对于一些色谱柱类型，含硫挥发物产生的区别不足以提供明确的定性。而当使用所有三种色谱柱的线性保留指数时，这些值结果唯一则被认为是明确的定性。即便对于一些色谱柱相对洗脱顺序不相同，例如3-甲硫基丙醛和二甲基三硫用ZB-5柱和DB-wax柱分离。这就对于按照峰进行定性提供了额外的唯一信息。另一方面，在所有三种色谱系统中第一个峰都是硫化氢。虽然在ZB-5柱上硫化氢的保留时间与甲硫醇非常接近，但它在wax柱和PLOT柱上都能很好的溶解。另外，甲硫醇在PLOT柱上不溶解，不能与二氧化硫分离，在ZB-5柱上仅微溶，但它在wax柱上能很好的溶解。3-甲硫基丙醛和二甲基三硫在PLOT柱上得不到数值，因为它们滞留太高，它们也达不到ZB-5柱的要求，而wax柱上的线性保留指数值足以提供令人满意的定性结果。

表1-番石榴的含硫挥发物在三种不同柱上的线性保留指数(LRI)值。用星号(*)表示的含硫挥发物是只在番石榴碎叶中观察到的。

表1

实施例6(番石榴碎叶和整叶中的含硫挥发物)

如图1较低位置的硫色谱所示，未损坏的番石榴叶有五种含硫挥发物。应该指出的是该硫色谱图采用脉冲火焰光度检测器(PFPD)的硫(平方根模式)获得的，脉冲火焰光度检测器对含硫挥发物具有高选择性和高灵敏度。用脉冲火焰光度检测器的碳模式对同样的样品进行检测得到的输出信号要复杂得多。已经确认的含硫挥发物有：硫化氢、二氧化硫、甲硫醇和二甲基硫醚。甲硫醇和二甲基硫醚之间的小峰目前还未确认。较高位置的色谱显示的是叶子被粉碎后立即产生的含硫挥发物。该色谱包含了所有之前已经确认的含硫挥发物和二甲基二硫(DMDS)。而且作为粉碎后的结果，还产生了3-甲硫基丙醛和微量的二甲基三硫，但没有显示。

实施例7(柑橘碎叶和整叶中的含硫挥发物)

由于柑橘叶极易感染木虱，而番石榴叶似乎对木虱有驱逐作用，因此起驱虫作用的挥发物只存在于番石榴叶中。于是我们将柑橘叶粉碎并用与番石榴叶相同的方法对其进行分析。对四种不同柑橘栽培品种叶子的含硫挥发物进行评估。受评估的栽培品种包括瓦伦西亚甜橙和哈姆林甜橙(Citrus sinensis)，柠檬(C.limon)、青柠(C.latifolia)、葡萄柚(C.paradisi)、酸橙(C.aurantium)和瓯柑(C.reticulata)。所有柑橘叶的未经粉碎叶子都产生了较低水平的二甲基硫醚，而当叶子被粉碎后二甲基硫醚的相对浓度增加超过十倍。虽然对损坏的响应增加了二甲基硫醚的浓度，但在任何受评估的柑橘栽培品种中无论叶子受损或未受损都没有产生二甲基二硫。因此，柑橘叶缺乏产生有效防御性的化学物质二甲基二硫(DMDS)的能力，而二甲基二硫则被认为可以部分解释番石榴所独具的驱虫能力，而柑橘却没有这种能力。

实施例8(番石榴碎叶中产生的二甲基二硫的动力学形成)

如图2所示，一旦番石榴叶被粉碎后，二甲基二硫快速形成。特别是在粉碎后的10分钟内，二甲基二硫成了静态顶部空间中最显著的挥发物，但随后它的浓度减少得如它形成时一样快-大概是由于转化成了二甲基三硫。3-甲硫基丙醛和二甲基硫醚也在增加，但没有二甲基二硫那么快，大约在粉碎后25分钟达到了最大浓度，然后缓慢减少。因为这个原因，我们希望在应用中对含二甲基二硫的组合物的释放进行控制，从而对目标植物在一段时间内反复给药二甲基二硫。

实施例9(用气相色谱-质谱鉴定番石榴叶挥发物)

图3显示的是新鲜的、新长出的并粉碎的番石榴叶室温时的总离子流(TIC)色谱图，相应的峰鉴定如下面的表2所示。确认了48种含硫和不含硫挥发物。在高分辨率的毛细管色谱中观察到了超过100个色谱峰，但表2仅包括了其中50个最大的峰。这50个峰占总峰面积的92％，而剩余的峰仅由8％剩余的总峰面积组成。正如人们对复杂样本如番石榴挥发物所预期的，出现了一些共洗脱。从表2可以看到，在8.67分钟处峰的前一半由3-甲基丁酸甲酯组成，而后半部分由α-蒎烯组成。在此项研究中番石榴碎叶在19.01分钟处发现了α-可巴烯，据已知报道，α-可巴烯是番石榴果实中的一种组分(8，22)，并有报道它对地中海果蝇Ceratitis capitata具有诱惑力(23)。α-可巴烯也被发现存在于柑橘中。从表2也可以看到，番石榴顶部空间主要的挥发物包括酯：3-甲基丁酸异戊酯(19.33％)，2-甲基丁酸异戊酯(10.68％)，2-甲基丁酸2-甲基丁酯(8.21％)和醛：Z-3-己烯醛，14.6％。

用质谱以m/z 79的提取离子模式可以检测到二甲基二硫(对应于CH₃S₂+，二甲基二硫除去甲基)，如图3中的插入图显示10.09分钟处的峰。在m/z 94，二甲基二硫也有强的M+离子峰，但不能用于定量，因为具有相同m/z的片段的另一种化合物在二甲基二硫峰的后半段洗脱出来。在总离子流模式下不容易观察到，尽管适当扣除本底后，正向匹配值801，反向匹配值875可以得到一种确定的分裂方式。标准的二甲基二硫也在10.09分钟处洗脱出来。

表2：总离子色谱的GC-MS鉴定。括号里的值表示匹配度，最大匹配度1000表示完全匹配。RT＝保留时间。

表2

接下来的实施例(从实施例10开始)探讨了番石榴叶挥发物对亚洲柑橘木虱(D.citri)对柑橘挥发物的行为响应所起的作用。另外，将番石榴叶挥发物对亚洲柑橘木虱行为产生的令人可信的作用与合成的二甲基二硫对亚洲柑橘木虱行为的作用进行对比。下面的实施例进一步确立了基于番石榴的合成驱虫剂对治疗感染了柑橘青果病的植物很有用。

实施例10(昆虫和叶子样本)

用于行为生物检测的成熟亚洲柑橘木虱来自于佛罗里达大学柑橘研究和教育中心(美国Lake Alfred)的持续养殖，并在佛罗里达州发现柑橘青果病之前于2000年从美国佛罗里达州(28.0′N，81.9′W)Polk公司的野生种群处确定。它们养殖在酸橙(Citrus aurantium L.)和哈姆林橙[C.sinensis(L.)]的树苗上，温度27±1℃，相对湿度63±2％，光周期L14∶D10。新出现的无性成熟木虱在用于实验之前首先放置在柑橘树苗上的普列克斯玻璃笼里7天直到性成熟。

次级植物代谢产物通常不会在植物内均匀分布(Loomis&Croteau，1980)。为了使静态挥发性代谢产物达到最大量以便分析，我们使用新叶幼芽[新长出的未成熟的叶子(Hall&Albrigo，2007)]，已知这种叶子所含植物代谢产物的比例比老叶或其他植物部位要高(Hruitfiord等，1974)。用静态固相微萃取(SPME)技术收集“白”番石榴(Psidium guajava L.；桃金娘科)或甜橙(哈姆林)(Citrus sinensis L.芸香科)叶幼芽的顶部空间挥发物，与Rouseff RL，Onagbola EO，Smoot JM&Stelinski LL(2008)番石榴(Psidium guajava L.)叶中的含硫挥发物：可能的防御机理，农业和食品化学杂志56：8905-8910.(Rouseff等.(2008))里描述的类似，这里对其全文引用。从番石榴和柑橘树上采摘叶幼芽并在Mettler

AE 160电子天平(瑞士Greifensee)上称重。重量约为3.5克的番石榴或柑橘叶放入40mL用隔膜密封的玻璃小瓶里，在实验室环境条件下平衡约30分钟。在暴露于实验室环境条件后0分钟、10分钟、30分钟和60分钟时，收集玻璃小瓶里积累的静态顶部空间挥发物。静态顶部空间挥发物用75μmCarboxen-聚二甲基硅氧烷(PDMS)Stable FlexSPME纤维头(Supelco公司，宾西法尼亚州Bellefonte)进行收集。每种静态挥发物样本至少重复分析三次。

在这些研究中使用的“白”番石榴和“哈姆林”柑橘植物的管理方法已经在前面描述过了(Rouseff等，2008)。选择“哈姆林”柑橘用于分析是因为它是佛罗里达州种植量最大的柑橘品种之一。一半样本轻轻碾碎(用一根干净的玻璃棒)以模拟植物受损，而剩下的一半不碾碎。所有样本(约3.5克叶幼芽/样本)用Kim无尘擦拭纸(Kimberly-Clark

，加拿大Ontario)包住，放在4-选择区嗅觉计[Analytical Research Systems，ARS公司(佛罗里达州甘斯威尔市)]2.5cm×12.5cm延伸的玻璃管内，用于下面所述的行为研究。

实施例11(4-选择区嗅觉计实验)

亚洲柑橘木虱(D.citri)对有或无番石榴或二甲基二硫挥发物存在的柑橘挥发物的行为响应用4-选择区嗅觉计(Analytical Research Systems公司.(ARS)，美国佛罗里达州甘斯威尔市)根据Pettersson(1970)，Vet等(1983)和Kalule&Wright(2004)的设计进行量化。该嗅觉计包括一个5cm×30cm×30cm的架台，该架台处在四个2.5cm×15cm的架腿上，在架台的四个侧面上有延伸的孔。用真空泵将经炭纯化和湿润的空气引入这些臂中，创造出四个潜在的气味场。吸入嗅觉计的空气通过架台底面的中心孔排出。在每轮实验过程中，架台侧面的四个孔中的两个指定用于气味刺激处理，而留其它两个作为空白。干净空气负控制为经炭过滤、纯化并湿润的实验室空气充满嗅觉计的所有四个臂，而宿主植物正控制为两个臂装有柑橘叶子，两个臂留为空白。化学驱虫剂的效果通过向嗅觉计两个臂中的柑橘幼芽添加番石榴叶或合成的二甲基二硫制剂来测量，具体如下面所述。嗅觉计的孔通过具有Teflon

衬里的玻璃管(ARS公司，佛罗里达州甘斯威尔市)连接器连接到带有真空泵(ARS公司，佛罗里达州甘斯威尔市)的空气传送系统(ADS)的四个泵上，该真空泵通过中心孔将空气从嗅觉计抽出。通过四个孔中任何一个的空气流速保持恒定在0.1L/min，并保持0.5L/min的抽气流速用真空泵将气味混合物从嗅觉计抽出。在嗅觉计的上方中央位置设置两束荧光光线(～250lux)，用76cm×81cm×86cm的白纤维板盒子将荧光罩住，以便光均匀扩散。第二个25cm×30cm×30cm盒子，其内壁和顶部具有黑布衬里，直接盖住嗅觉计，使嗅觉计的架台完全遮住光，但捕捉器和延伸臂不遮光。

首先探讨成熟亚洲柑橘木虱对干净的实验室空气的行为响应，将嗅觉计的四个空白臂作为负控制，以确保无位置偏差。随后，测量在有和无番石榴叶挥发物或合成的二甲基二硫挥发物存在时亚洲柑橘木虱对柑橘叶挥发物的响应。对于每次嗅觉处理的组合，随机指定两个嗅觉计臂用于挥发物，其它两个留作空白仅接收经炭过滤、纯化并湿润的实验室空气。对八次处理进行比较，结果汇总在下面的表3中。每次重复性实验检测十只亚洲柑橘木虱，持续1.5小时。刺激源放置在彼此相对或相邻的位置，并在每轮实验后旋转两次。

在研究用合成的二甲基二硫(DMDS)(Sigma-Aldrich公司，美国)处理时，用移液管将100μL浓度为4.3μg/μL(重量/体积)的二甲基二硫的矿物油溶液(Sigma-Aldrich公司，美国)滴到1cm×1cm Richmond棉芯编织片(Petty John Packaging公司，北卡罗来纳州Concord)上以减缓释放速度(Arthur，1996；Dugravot等，2002)。由于二甲基二硫的挥发性很高，它与矿物油混合可以降低它在生物检测过程中的释放速度(Dugravot等，2004)。选择这个剂量是根据初步研究表明：这一剂量与根据实验记录范围测试的较低剂量相比，最适合驱逐成熟亚洲柑橘木虱(数据没有列出)。

在每轮实验之后，先用肥皂水洗涤嗅觉计和玻璃管，并用蒸馏水冲洗。然后用丙酮冲洗玻璃管，嗅觉计架台(用普列克斯玻璃和Teflon

制成)用无水酒精清洁。之后，嗅觉计在空气中干燥。每个实验至少重复15次，因此每个处理浓度总共要检测至少150只亚洲柑橘木虱。所有的观察在25±1℃，相对湿度60±5％，白炽光～250lux的条件下进行。

表3：用4-选择区嗅觉计每次处理的气味组合汇总

表3

用student t检验比较受到驱逐的亚洲柑橘木虱/受到吸引的亚洲柑橘木虱的百分比得到t值(P＜0.05)

当提供干净的空气时，亚洲柑橘木虱对嗅觉计四个臂中每一个的响应都相等(F＝0.79，d.f.＝4，P＝0.534)，这表明生物检测过程中无位置偏差。具体来说，分别有20％，19％，22％和16％受测试的木虱(n＝200)移向了嗅觉计四个延伸臂中的一个，而接近24％的木虱留在了中心孔放入点处。与柑橘整叶或碎叶单独存在时相比，在番石榴整叶、番石榴碎叶或二甲基二硫与柑橘共存的处理中明显(F＝15.19，d.f.＝7，P＜0.0001)有更多的亚洲柑橘木虱受到驱逐(图5)。当番石榴或二甲基二硫与柑橘共存时，没有离开中心孔的亚洲柑橘木虱的百分数在62％至75％之间，而当柑橘单独存在时没有移动的亚洲柑橘木虱为32％至48％之间(图5)。

一般来说，移向柑橘整叶的亚洲柑橘木虱明显(Student t检验，＝-3.63，d.f.＝1，P＝0.001)比移向干净空气的亚洲柑橘木虱多(表3)。而亚洲柑橘木虱受柑橘整叶和碎叶挥发物组合的吸引并不显著(表3：t＝-0.51，d.f.＝1，P＝0.610)。番石榴整叶与碎叶对亚洲柑橘木虱在嗅觉计中的响应明显(t＝4.80，d.f.＝1，P＜0.0001)具有驱逐作用(表3)。210只受测试的亚洲柑橘木虱中大约有71％没有离开释放点。当番石榴整叶(Table 3；t＝3.21，d.f.＝1，P＝0.003)或番石榴碎叶(Table 1；t＝7.89，d.f.＝1，P＜0.0001)挥发物与柑橘共同释放时，在嗅觉计延伸臂中发现的亚洲柑橘木虱明显比释放点少(图5)。当木虱暴露于合成的二甲基二硫中时，在嗅觉计的放入点处发现的亚洲柑橘木虱明显(Table 3；t＝6.25，d.f.＝1，P＜0.0001)比延伸臂中的多。当二甲基二硫与柑橘整叶挥发物共同释放时，很明显(Table 3；t＝3.05，d.f.＝1，P＝0.004)也有更多的亚洲柑橘木虱受到了驱逐。

实施例12(气相色谱-脉冲火焰光度检测器(GC-PFPD)分析)

本项研究中用于挥发物分析的方法与Rouseff等(2008)中描述的那些类似。含硫化合物用脉冲火焰光度检测器(PFPD)(型号5380，OI Analytical公司，Station大学，美国得克萨斯州)设置在硫模式下并与HP-5890 Series II气相色谱仪联机进行分析。脉冲火焰光度检测器特别适合检测挥发物样本中硫和碳存在与否。气相色谱仪配备30m×0.32mm.i.d.×0.5μm ZB-5毛细管柱(Zebron ZB-5，Phenomenex公司，美国加利福尼亚州托兰斯市)，程序升温以7℃/min的速度从40℃升高到265℃，在最大温度保持5分钟。用氦气作为载气，流速1.5mL/min，注射器和检测器的温度分别设定在200℃和250℃。气相色谱采用不分流的模式操作。含硫挥发物通过线性保留指数(LRI)值与权威标准匹配的方法来确定(Rouseff等，2008)。

上面所述的脉冲火焰光度检测器(PFPD)对静态顶部空间挥发物的分析显示，在番石榴和柑橘的整叶(没有粉碎的)样本中都存在二硫化碳(CS₂)。柑橘幼芽整叶也释放二甲基硫醚(DMS)。无论是番石榴还是柑橘，轻轻粉碎叶子样本会导致CS₂的产量立即显著减少，但会引起番石榴中二甲基硫醚的产量逐渐增加(图4)。由柑橘幼芽碎叶产生的二甲基硫醚的量起初相对较少，但随着时间而增加(图4)。另外，番石榴碎叶产生了一点量的甲硫醇(CH₃SH)和二甲基二硫(DMDS)(图4)。

实施例13(气相色谱-质谱(GC-MS)分析)

在前述的4-选择区嗅觉计实验中，当对番石榴整叶挥发物和柑橘整叶挥发物进行实验时，我们观察到在玻璃捕捉器中捕获的一些亚洲柑橘木虱背躺着不动。我们因此收集了番石榴整叶和柑橘整叶的混合挥发物样本进行气相色谱-质谱分析。从4-选择区嗅觉计中心孔排出的挥发物混合物用泵抽到挥发物收集室(VCC)(ARS公司，美国佛罗里达州甘斯威尔市)，该挥发物收集室用Teflon

管与嗅觉计相连。将75μm的Carboxen-PDMS SPME纤维头插入挥发物收集室收集从番石榴整叶和柑橘整叶散发出的挥发物样本约1.5小时。另外，分别从约3.5克番石榴幼芽整叶样本和3.5克柑橘幼芽整叶样本收集静态顶部空间挥发物，根据前面所述的Rouseff等(2008)的方法，进行气相色谱-质谱分析。每种挥发物样本至少重复分析三次。

用联机的Perkin/Elmer

Clarus 500四极气相色谱仪与质谱仪联机(GC-MS)对收集的挥发物进行分析并定性。该GC-MS装有TurboMass软件(PerkinElmer公司，康涅狄格州Shelton市)并配备60m×0.25mm，i.d.×0.50μm Restek(RTX-5)毛细管柱。用氦气作为载气，流速恒定在2mL/min模式。源温度保持在200℃，接口传输线温度和注射器温度保持在260℃。炉温程序升温以7℃/min从40℃升高到260℃。用NIST 2005 2.0版标准谱(NIST，马里兰州Gaithersburg)进行质谱匹配。只有谱匹配值等于或大于800且LRI值合适的化合物才被认为是正确定性。如果可能，使用权威标准进行确认。然后，对已确认的番石榴整叶和柑橘整叶的挥发物进行比较。

表4显示了在4-选择区嗅觉计生物检测过程中番石榴整叶和柑橘整叶的混合物用GC-MS分析获得的各种化合物。有九种番石榴特有的化合物得到确认，包括：乙酸(3.8％)，苯甲醛(1.7％)，(Z)-3-己烯醛(1.5％)，乙酸(Z)-3-己烯酯(4.1％)。有15种柑橘特有的挥发物包括：dl-苧烯，桧烯，α-萜品油烯和τ-萜烯，约占总挥发物混合物的8.1％，13.6％，2.4％和3.4％。在两种植物类型的叶幼芽共有的15种挥发物中包括别罗勒烯，(Z)-3-己烯-1-醇，乙醇，(E)-石竹烯，α-可巴烯和β-月桂烯(表2)。

表4：对柑橘整叶和番石榴整叶的挥发物进行GC-MS分析所确认的挥发物化合物

表4

“RT”表示保留时间；“MW”表示分子量；“CAS#”表示化学文摘号；“LRI”表示线性保留指数。

实施例14(Y形管嗅觉计实验)

为了确定合成的二甲基二硫对亚洲柑橘木虱的驱虫效果，用Y形管嗅觉计(ARS公司，美国佛罗里达州甘斯威尔市)进行一项额外的研究。Y形管由一个中央柱(长13.5cm，外径2.4cm)和两个侧臂(长5.75cm，外径2.4cm)组成。两个侧臂与延伸的玻璃管(长14.5cm，外径1.9cm)相连并嵌入格筛(距连接处5.25cm)以防止昆虫逃走，同时作为侧臂的终点。实验室空气经过炭过滤，用空气泵以100mL/min的速度送入嗅觉计的每个延伸臂中。Y形管垂直悬挂在一个空的普列克斯玻璃盘上并罩上如上所述的白纤维板盒，以便光均匀扩散，同时使对成熟的亚洲柑橘木虱造成的视觉分散最小化。

进行两个Y形管实验，进一步探讨二甲基二硫抵抗亚洲柑橘木虱受柑橘挥发物吸引的驱虫效果。在第一个实验中，100μL如上所述的二甲基二硫的矿物油溶液和约3.5g柑橘幼芽的混合挥发物同时提供给两个延伸的嗅觉计臂中的成熟木虱。该实验的负控制为Y形管嗅觉计的每个臂中只有约3.5g柑橘幼芽(没有二甲基二硫)。在第二个实验中，向受测试的昆虫在嗅觉计的一个延伸臂中提供柑橘或二甲基二硫挥发物，而另一个延伸臂中提供干净的实验室空气。在第一个实验中，对没有离开它们被释放的地点(定义为受到驱逐)的亚洲柑橘木虱的数量进行量化，并与朝着挥发物源逆向前进(定义为受到吸引)的亚洲柑橘木虱的数量进行比较。在第二个实验中，我们比较了选择含挥发物源的臂(定义为受到吸引)与选择含干净空气的臂(定义为受到驱逐)各自亚洲柑橘木虱的数量。受测试的成熟木虱逐个从嗅觉计柱底座放出来，给它们300秒表达行为响应。测试完三只成熟木虱后将嗅觉计的臂旋转一次，测试完六只木虱后将整个系统清洁一遍。对于每个实验，每次处理至少测试20只成熟木虱。

亚洲柑橘木虱对柑橘与二甲基二硫共同释放的挥发物的响应比例明显(χ²＝2.57，d.f.＝1，P＝0.109)低于对单独的柑橘挥发物的响应比例(图6a)。选择流通着干净空气的Y形管臂的亚洲柑橘木虱比选择有二甲基二硫存在的臂明显(χ²＝5.0，d.f.＝1，P＝0.025)更多(图6b)。而与选择干净空气的臂相比，明显(χ²＝2.57，d.f.＝1，P＝0.108)有更多的亚洲柑橘木虱选择了有柑橘挥发物存在的臂(图6b)。上述Y形管嗅觉计的实验结果支持了二甲基二硫能驱逐亚洲柑橘木虱是因为二甲基二硫显著抑制了亚洲柑橘木虱对柑橘幼芽挥发物的响应这一论点。虽然，与干净空气相比，近70％的亚洲柑橘木虱受到柑橘的吸引，但近75％的亚洲柑橘木虱选择释放干净空气的臂而非二甲基二硫。而且，向柑橘添加了合成的二甲基二硫后，抑制了木虱朝着通常很有吸引力的柑橘宿主植物挥发物的方向移动。

实施例15(数据分析)

取向为嗅觉计四个臂中任何一个的成熟木虱被归类为受到吸引的木虱，而在过去的1.5小时实验期间一直留在嗅觉计中心孔(释放点)的那些木虱被归类为受到驱逐的木虱。为了比较各次处理中受到驱逐的木虱的数量，对数据进行单因素方差分析(ANOVA)并进行Tukey’s HSD检验(P＜0.05，SAS软件研究所，2003)。之后，用Student t检验分析(P＜0.05，SAS软件研究所，2003)比较每次处理中受到吸引的和受到驱逐的木虱的总数。随后，用单因素逐步方差分析并进行Tukey’s HSD检验(P＜0.05，SAS软件研究所，2003)对亚洲柑橘木虱对四个臂(两个挥发物源，两个实验室空气)的取向数据进行分析。从Y形管嗅觉计生物检测获得的数据用卡方(χ²)检验(Parker，1979)进行分析，比较受到吸引的亚洲柑橘木虱数量与受到驱逐的亚洲柑橘木虱数量(P＜0.05)。

以上描述的实施方案和构成既不完全也不详尽。应该理解的是，本发明其他的实施方案也可能单独或联合使用上面提出的或下面详细描述的一个或多个特征。另外，本发明，在各种实施方案中，包括如这里充分叙述的组分、方法、步骤、系统和/或装置，还包括各种实施方案以及它们的次级组合、子集等等。本领域熟练技术人员在理解本发明公开的内容后，能够理解怎样制造并使用本发明。本发明，在各种实施方案中包括提供装置和过程，尽管有一些项目在这里没有提到和/或没有被描述；或者在各种实施方案中包括这些缺少的项目，因为它们在以前的装置或过程中已经被使用，例如改善性能、提高容易度和/或降低实施成本等等。

本发明前面的讨论起举例说明和描述本发明的目的。之前的这些讨论目的不是将本发明限制到这里所公开的某一种或几种形式。之前对实施例的详细描述中，本发明的各个特征被组合起来放在一个或多个实施方案中，其目的是使公开内容简洁。这种公开方式不应该解释为这样的意图：本发明要求的特征比清楚表述在每个权利要求中的还要多。当然，如下面权利要求所反映的，有创造性方面的特征要少于前面公开的单个实施方案中的所有特征。因此，下面的权利要求在这里并入发明内容部分，每个权利要求本身就是本发明的一个独立的优选的实施方案。

另外，虽然本发明的描述已经包含了对一个或多个实施方案以及一些变体和改进的描述，但其它一些变体和改进也在本发明的范围内，例如在理解本发明公开的内容后本领域人员惯用和知晓的那些内容也可以在本发明的范围内。我们旨在在允许的程度内获得包括可替代实施方案在内的权利，包括替代体、与权利利要求可互换的和/或等价的结构、功能、范围或步骤，无论这样的替代体、可互换的和/或等价的结构、功能、范围或步骤在这里公开与否，而并没有公开奉献任何可专利性主题的意图。

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Claims (20)

1.一种驱逐或杀死柑橘青果病传播介体的方法，包括：

使传播介体暴露在有效量的表1和表2中所列的至少一种挥发性化合物中，以驱逐或杀死柑橘青果病的至少一种传播介体。

2.根据权利要求1所述的方法，其中至少一种挥发性化合物选自硫化氢、甲硫醇、二氧化硫、二甲基硫醚(DMS)、二甲基二硫(DMDS)、3-甲硫基丙醛和二甲基三硫(DMTS)以及它们的组合。

3.根据权利要求2所述的方法，其中至少一种挥发性化合物包括二甲基二硫。

4.根据权利要求1所述的方法，进一步包括从番石榴(Psidium guajava L.)粉碎的叶子中获取至少一种挥发性化合物。

5.一种治疗感染了柑橘青果病传播介体的柑橘植物的方法，包括：

对柑橘植物或柑橘植物周围区域给药有效量的表1和表2中所列的至少一种挥发性化合物，以驱逐或杀死柑橘青果病的至少一种传播介体。

6.根据权利要求5所述的方法，其中至少一种挥发性化合物选自硫化氢、甲硫醇、二氧化硫、二甲基硫醚(DMS)、二甲基二硫(DMDS)、3-甲硫基丙醛和二甲基三硫(DMTS)以及它们的组合。

7.根据权利要求6所述的方法，其中至少一种挥发性化合物包括二甲基二硫。

8.根据权利要求5所述的方法，进一步包括从番石榴(Psidium guajava L.)粉碎的叶子中获取至少一种挥发性化合物。

9.一种给予、增加或提高用于驱逐携带柑橘青果病的传播介体的组合物的驱虫效果的方法，包括：

向组合物中加入表1和表2中所列的至少一种挥发性化合物，所述挥发性化合物的加入量为能驱逐或杀死携带柑橘青果病的至少一种传播介体的有效量。

10.根据权利要求9所述的方法，其中至少一种挥发性化合物选自硫化氢、甲硫醇、二氧化硫、二甲基硫醚(DMS)、二甲基二硫(DMDS)、3-甲硫基丙醛和二甲基三硫(DMTS)以及它们的组合。

11.根据权利要求10所述的方法，其中至少一种化合物包括二甲基二硫。

12.根据权利要求10所述的方法，进一步包括从番石榴(Psidium guajava L.)粉碎的叶子中获取至少一种挥发性的含硫或不含硫的组分。

13.一种杀虫剂组合物，包括：

表1和表2中所列的至少一种挥发性化合物，所述挥发性化合物的量为能驱逐或杀死柑橘青果病的至少一种传播介体的有效量；和

农业上可接受的载体。

14.根据权利要求13所述的组合物，其中至少一种挥发性化合物选自硫化氢、甲硫醇、二氧化硫、二甲基硫醚(DMS)、二甲基二硫(DMDS)、3-甲硫基丙醛和二甲基三硫(DMTS)以及它们的组合。

15.根据权利要求14所述的组合物，其中至少一种挥发性化合物包括二甲基二硫，其中农业上可接受的载体是矿物油。

16.根据权利要求14所述的组合物，其中二甲基二硫在农业上可接受的载体中的浓度为2μg/ml-8μg/ml(重量/体积)。

17.一种驱逐或杀死柑橘青果病传播介体的方法，包括：

使传播介体暴露在有效量的二甲基二硫组合物中，以驱逐或杀死柑橘青果病的至少一种传播介体。

18.根据权利要求16所述的方法，其中二甲基二硫组合物进一步包括农业上可接受的载体油，其中二甲基二硫在农业上可接受的载体油中的浓度为2μg/ml-8μg/ml(重量/体积)。

19.一种制造的产品，包括：

能驱逐或杀死柑橘青果病至少一种传播介体的有效量的二甲基二硫；

二甲基二硫农业上可接受的载体；

一种容器，其包括一定量的二甲基二硫和农业上可接受的载体；以及

将容器里的二甲基二硫和农业上可接受的载体施加到目标区域的装置。

20.根据权利要求19所述的制造的产品，其中二甲基二硫组合物进一步包括农业上可接受的载体油，其中二甲基二硫在农业上可接受的载体油中的浓度为2μg/ml-8μg/ml。

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