CN102078300B - 托拉塞米脂质体固体制剂 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种托拉塞米脂质体固体制剂，其由包括以下重量配比的组分的原辅料制成：托拉塞米10份，大豆卵磷脂40-100份，胆固醇5-40份，甘氨胆酸钠4-20份，山梨醇60-200份，大豆甾醇5-20份。本发明提供的固体制剂溶解性高，稳定性高，制备方法简单，包封率高，粒径均匀，药物在体内的保留时间长，提高了制剂产品的质量，增加了生物利用度高，减少了毒副作用。

Description

托拉塞米脂质体固体制剂

技术领域

本发明涉及一种脂质体固体制剂，具体涉及一种托拉塞米脂质体固体制剂及其制法，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂和分散片，属于医药技术领域。

背景技术

托拉塞米，化学名为N-[[(1-甲基乙基)氨基]羰基]-4-[(3-甲基苯基)氨基]-3-吡啶磺酰胺，分子式：C₁₆H₂₀N₄O₃S，分子量：348.43，结构式为：

托拉塞米为磺酰尿吡啶类利尿剂，主要作用于亨利氏髓袢升支粗段，抑制Na⁺/K⁺/2Cl^-载体系统，使尿中Na⁺、K⁺、Cl^-和水的排泄增加但对肾小球滤过率、肾血浆流量或体内酸碱平衡无显著影响。临床上用于充血性心力衰竭、肾功能衰竭及肾脏疾病所致的水肿患者，也可用于原发性高血压患者。

托拉塞米不溶于水，目前上市的制剂有片剂、胶囊剂和注射剂，中国专利CN101632665A公开了一种托拉塞米口服药物组合物，由托拉塞米和明胶、甘露醇、阿斯帕坦制成掩味组合物，再和其他辅料制成分散片，该专利从一定程度上改善了分散片的服用口味，但托拉塞米的溶解性和稳定性并没有改善，导致服用后生物利用度低，影响药效。中国专利CN100372534C公开了一种托拉塞米冻干制剂及其制备方法，通过加入碳酸氢钠有效地增加了托拉塞米的溶解性，也有资料报道通过加入聚乙二醇-400增加托拉塞米的溶解性，制成注射剂，但托拉塞米结构中有酰胺键，其制备成液体制剂后易水解，导致药物含量减少，有关物质增加，影响疗效。

由于上述现有技术分别存在各自所述的缺点，托拉塞米作为活性药物在溶解性、稳定性、生物利用度、毒副作用等方面仍然具有改进的空间。

脂质体(liposomes)最早是1965年被英国Banghan等作为研究生物膜的模型提出的。Banghan等发现，当磷脂分散在水中时形成多层囊泡，而且每一层均为脂质双分子层，各层之间被水相隔开。后来将这种由脂质双分子组成，内部为水相的闭合囊泡称为脂质体。

人们通过研究发现，脂质体作为药物的载体能够控制药物的释放，提高药物靶向性，减少药物毒性和副作用，提高药物疗效。

如果能将托拉塞米制成脂质体，则有望克服现有的托拉塞米制剂存在的一系列问题，提高药物的溶解性和稳定性，延长药物在体内的保留时间，长久发挥药效，提高生物利用度，降低毒副作用，降低不良反应的发生率，改进治疗速度和治疗效果。

不过，制备脂质体的挑战在于选择适当的脂质体组成成分和制法。由于脂质体的性质如稳定性、包封率、起效时间、在体内的循环时间、生物利用度和毒副作用等与脂质体的组成直接地密切相关，而脂质体的组成与所要包封的药物性质直接地密切相关，因此，选择什么样的成分形成具有良好品质的托拉塞米脂质体是亟待解决的课题。

发明内容

本发明人经过长期认真地研究，发现可以将托拉塞米与大豆卵磷脂、胆固醇、甘氨胆酸钠、山梨醇和大豆甾醇这六种材料按照特定比例制备成脂质体，再将该脂质体制备成固体制剂，从而完成本发明。

本发明提供的托拉塞米脂质体品质优异，稳定性高，包封率高，生物利用度高，从而提供了品质优良的脂质体固体制剂。

本发明的目的在于提供一种托拉塞米脂质体及其固体制剂，通过将活性成分托拉塞米与大豆卵磷脂、胆固醇、甘氨胆酸钠、山梨醇和大豆甾醇制备成脂质体，再和其它药用辅料混合制成脂质体固体制剂。

本发明提供的固体制剂溶解性高，稳定性高，制备方法简单，包封率高，粒径均匀，药物在体内的保留时间长，生物利用度高，毒副作用低。

一方面，本发明提供托拉塞米脂质体，其由包括以下重量配比的组分的原辅料制成：

托拉塞米            10份

大豆卵磷脂          40-100份

胆固醇              5-40份

甘氨胆酸钠          4-20份

山梨醇              60-200份

大豆甾醇            5-20份。

另一方面，本发明提供上述托拉塞米脂质体的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)将托拉塞米、大豆卵磷脂、胆固醇、甘氨胆酸钠和大豆甾醇溶于适量乙醇中，得类脂溶液；

(2)将上述类脂溶液置于烧瓶中，于35-40℃恒温水浴中，旋转蒸发除去乙醇，在瓶壁上形成均匀类脂薄膜；

(3)将山梨醇溶于水中，缓慢倒入烧瓶中轻摇，使类脂薄膜洗脱并分散到水合介质溶解，即得脂质体混悬液；

(4)将上述混悬液用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，喷雾干燥，得到托拉塞米前体脂质体粉末。

再一方面，本发明提供托拉塞米脂质体固体制剂，其包括上述托拉塞米脂质体以及药学可接受的载体或赋形剂。

再一方面，本发明提供托拉塞米脂质体固体制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)将上述制备的托拉塞米前体脂质体粉末和药学上常用的其他辅料如填充剂、甜味剂和崩解剂混合，过筛混合均匀，加入粘合剂制备软材，过筛制粒，干燥，整粒；

(2)干颗粒加入润滑剂和/或芳香剂，混合均匀；

(3)压片或分装，制得托拉塞米脂质体固体制剂。

本发明提供的托拉塞米脂质体固体制剂及其制备方法，优点表现在以下几个方面：

(1)通过脂质体对托拉塞米进行包裹，大大提高了托拉塞米的溶解性，提高了口服后的生物利用度；

(2)通过脂质体对托拉塞米进行包裹，提高了托拉塞米的稳定性，保障了临床疗效；

(3)脂质体制备过程简单，包封率高，收率高，适合于工业化生产；

(4)提高了制剂产品质量，减少了毒副作用。

具体实施方式

以下结合具体实施方式对本发明进行详细描述。本发明的特点和优点会随着这些描述而变得更为清楚。

一方面，本发明提供托拉塞米脂质体，其由包括以下重量配比的组分的原辅料制成：

托拉塞米        10份

大豆卵磷脂      40-100份

胆固醇          5-40份

甘氨胆酸钠      4-20份

山梨醇          60-200份

大豆甾醇        5-20份。

在本发明托拉塞米脂质体的一个实施方案中，所用原辅料优选包括以下重量配比的组分：

托拉塞米        10份

大豆卵磷脂      60-80份

胆固醇          10-20份

甘氨胆酸钠      10-20份

山梨醇          80-150份

大豆甾醇        6-10份。

所用原辅料更优选包括以下重量配比的组分：

托拉塞米        10份

大豆卵磷脂      80份

胆固醇          10份

甘氨胆酸钠      15份

山梨醇          80份

大豆甾醇        8份。

在进一步优选的实施方式中，所用原辅料由上述重量配比的组分组成。

在本发明的托拉塞米脂质体中，使用的磷脂材料为大豆卵磷脂(Lecithin High Potency，也称为大豆蛋黄素，是一种天然磷脂)。

用于形成的常用磷脂材料种类繁多，包括大豆卵磷脂、卵磷脂、蛋黄卵磷脂、蛋黄磷脂酰丝氨酸、蛋黄磷脂酰肌醇、大豆磷脂酰甘油、大豆磷脂酰丝氨酸、大豆磷脂酰肌醇、二月桂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱、肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、棕榈酰肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、棕榈酰硬脂酰磷脂酰胆碱、硬脂酰棕榈酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酸、二棕榈酰磷脂酸、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二肉豆蔻酰磷脂酰丝氨酸、和二棕榈酰磷脂酰丝氨酸等。

本发明人经过锐意研究发现，在通常的磷脂材料中，适当量的大豆卵磷脂能用于形成品质优良的托拉塞米脂质体，通过本发明中提供的方法能形成溶解性和稳定性优异的脂质体，且脂质体的大小适当、结构成分适当、包封率高，而且这些成分，尤其是作为活性成分的托拉塞米在所形成的脂质体中不渗漏。大量试验结果表明，选用其它的磷脂材料，无法形成品质良好的脂质体。

本发明的托拉塞米脂质体中，基于10重量份托拉塞米而言，如果大豆卵磷脂的量低于40重量份，则无法形成稳定的脂质体，如果大豆卵磷脂的量高于100重量份，则托拉塞米的包封率降低，而且脂质体的稳定性有所下降。

本发明的托拉塞米脂质体中，胆固醇调节脂质体的膜结构，调节膜结构的流动性和通透性。基于10重量份托拉塞米而言，5-40重量份的胆固醇能形成稳定性良好的脂质体。

在本发明的托拉塞米脂质体中，甘氨胆酸钠起到增加脂质体溶解性和进一步增强脂质体的稳定性的作用。基于10重量份托拉塞米而言，4-20重量份的甘氨胆酸钠能形成稳定性良好的脂质体。

在本发明的托拉塞米脂质体中，山梨醇起到增加脂质体溶解性和进一步增强脂质体的稳定性的作用。基于10重量份托拉塞米而言，60-200重量份山梨醇能形成溶解性和稳定性良好的脂质体。

在本发明的托拉塞米脂质体中，大豆甾醇进一步增强脂质体的稳定性。基于10重量份托拉塞米而言，5-20重量份大豆甾醇能形成稳定性良好的脂质体。

所述大豆甾醇是大豆甾醇葡萄糖苷去葡萄糖残基的水解产物，而大豆甾醇葡萄糖苷是从经提炼豆油的大豆残渣中分离出来的甾醇葡萄糖苷的混合物，是天然来源的产物，安全性高，易于获得，且价格便宜。

本发明人出乎意料地发现，上述特定重量配比的胆固醇、甘氨胆酸钠、山梨醇和大豆甾醇能协同促进大豆卵磷脂的成膜效果，使得所形成的托拉塞米脂质体的溶解性和稳定性显著提高，而且所形成的托拉塞米脂质颗粒大小适当、粒径分布均匀，包封率高，毒副作用低。

另一方面，本发明提供上述托拉塞米脂质体的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)将托拉塞米、大豆卵磷脂、胆固醇、甘氨胆酸钠和大豆甾醇溶于适量乙醇中，得类脂溶液；

(2)将上述类脂溶液置于烧瓶中，于35-40℃恒温水浴中，旋转蒸发除去乙醇，在瓶壁上形成均匀类脂薄膜；

(3)将山梨醇溶于水中，缓慢倒入烧瓶中轻摇，使类脂薄膜洗脱并分散到水合介质溶解，即得脂质体混悬液；

(4)将上述混悬液用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，喷雾干燥，得到托拉塞米前体脂质体粉末。

通过本发明提供的方法制备的托拉塞米脂质体溶解性高，稳定性高，粉末粒径小、粒径分布均匀，包封率高。而且本方法工艺简单，便于工业化生产。

再一方面，本发明提供托拉塞米脂质体固体制剂，其包括上述托拉塞米脂质体以及药学上可接受的载体或赋形剂。

本发明所提供的托拉塞米脂质体固体制剂包括片剂、胶囊剂、颗粒剂和分散片等口服制剂。

根据希望的托拉塞米脂质体固体制剂剂型，可以选择适当的载体或赋形剂及其量。

例如，在本发明所述的托拉塞米脂质体固体制剂中，所用的药学上可接受的载体或赋形剂(有时也称之为辅料)包括填充剂、甜味剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、芳香剂和着色剂等。各种载体或赋形剂的用量范围为一般固体制剂的常规用量范围，没有特殊要求和规定，可以由本领域技术人员根据各种载体或赋形剂在固体制剂中的一般用量进行选择，这在本领域技术人员的能力范围内。

作为优选，填充剂可以选自淀粉、乳糖、微晶纤维素、预胶化淀粉、糊精中的一种或几种，优选为乳糖和淀粉。

作为优选，甜味剂选自蔗糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、阿斯帕坦、甜菊糖苷、糖精钠、三氯蔗糖中的一种或几种，优选为蔗糖和甜菊糖苷。

作为优选，崩解剂选自低取代羟丙纤维素、羧甲淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基纤维素钙中的一种或几种，优选为羧甲淀粉钠。

作为优选，粘合剂选自聚维酮K30、淀粉浆、羟丙甲纤维素、羧甲基纤维素钠、阿拉伯胶、黄原胶中的一种，优选为聚维酮K30。

作为优选，润滑剂选自硬脂酸镁、硬脂酸锌、滑石粉、微粉硅胶、PEG6000中的一种或几种，优选为硬脂酸镁。

作为优选，芳香剂选自桔子香精、草莓香精、巧克力香精、苹果香精中的一种，优选为草莓香精。

作为优选，着色剂选自日落黄。

在实践中，考虑到药物的有效剂量和用药的便利性，在本发明的托拉塞米脂质体固体制剂的优选实施方案中，托拉塞米的规格用量为2.5mg或5.0mg。

再一方面，本发明提供托拉塞米脂质体固体制剂的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)将上述制备的托拉塞米前体脂质体粉末与填充剂、甜味剂和崩解剂混合，过筛混合均匀，加入粘合剂制备软材，过筛制粒，干燥，整粒；

(2)干颗粒加入润滑剂和/或芳香剂，混合均匀；

(3)压片或分装，制得托拉塞米脂质体固体制剂。

在本发明提供的托拉塞米脂质体固体制剂的制备方法的一个优选实施方式中，在步骤(1)中，作为粘合剂的乙醇水溶液，使用浓度为20％-80％(重量/重量)的乙醇水溶液。

在本发明提供的托拉塞米脂质体固体制剂的制备方法的一个优选实施方式中，在步骤(1)中，托拉塞米和其它辅料过60目筛混合均匀，制软材后过20-30目筛制湿颗粒，50-60℃干燥，18目筛整粒。

在本发明的方法中，还可以根据需要对脂质体和/或脂质体固体制剂进行灭菌。灭菌方法没有特殊要求，可以使用制药领域中常用的脂质体灭菌方法，如加热灭菌、过滤除菌、辐射灭菌或无菌操作等。

本发明先通过活性成分托拉塞米和大豆卵磷脂、胆固醇、甘氨胆酸钠、山梨醇和大豆甾醇的特定的组合制备成脂质体，再和其它药用辅料混合制成固体制剂。所得固体制剂稳定性优异，粒径均匀，包封率高，在水中的溶解性大，药物在血液循环中保留时间长，疗效显著；所用辅料简单廉价，利用度高，污染小，经济价值高。本发明提供的托拉塞米脂质体固体制剂的制备方法提高了产品质量，降低了毒副作用，并且制备方法的设备简单，易于操作，极有利于工业化大生产。

在本文中，如果没有特别地说明，含量或用量都以重量份计，所采用的装置、仪器、原料、物质、用量、方法、时间、适度及其他条件都为本领域众所周知的，或者是本领域技术人员根据申请的描述结合现有技术可以获得的。

实施例

以下通过实施例进一步说明本发明，但是本发明并不限于这些实施例以及使用的制备方法。而且，本领域技术人员根据本发明的描述可以对本发明进行等同替换、组合、改良或修饰，但这些都将包括在本发明的范围内。

实施例1  托拉塞米脂质体片剂的制备

所用原辅料如下：

托拉塞米          5g

大豆卵磷脂        40g

胆固醇            5g

甘氨胆酸钠    7.5g

山梨醇        40g

大豆甾醇      4g

乳糖          50g

淀粉          65g

羧甲淀粉钠    10g

聚维酮K30     10g

硬脂酸镁      4g

制备工艺：

(1)将5g托拉塞米、40g大豆卵磷脂、5g胆固醇、7.5g甘氨胆酸钠和4g大豆甾醇溶于800ml乙醇中，得类脂溶液；

(2)将上述类脂溶液置于烧瓶中，于40℃恒温水浴中，旋转蒸发除去乙醇，瓶壁上形成均匀类脂薄膜；

(3)将40g山梨醇溶于400ml水中，缓慢倒入烧瓶中轻摇，使类脂薄膜洗脱并分散到水合介质溶解，即得脂质体混悬液；

(4)将上述混悬液用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，喷雾干燥，得到托拉塞米前体脂质体粉末；

(5)将上述制备的托拉塞米前体脂质体粉末和50g乳糖、65g淀粉、10g羧甲淀粉钠混合，过60目筛混合均匀，加入5％聚维酮K30的20％乙醇溶液制备软材，过20目筛制粒，50℃干燥，18目整粒；

(6)干颗粒加入4g硬脂酸镁，混合均匀；

(7)压片，制得1000片托拉塞米脂质体片剂。

实施例2  托拉塞米脂质体片剂的制备

所用原辅料如下：

托拉塞米      2.5g

大豆卵磷脂    12g

胆固醇        5g

甘氨胆酸钠    4g

山梨醇        20g

大豆甾醇      1.5g

乳糖          26g

淀粉          32g

羧甲淀粉钠    5g

聚维酮K30     5g

硬脂酸镁      2g

制备工艺：

(1)将2.5g托拉塞米、12g大豆卵磷脂、5g胆固醇、4g甘氨胆酸钠和1.5g大豆甾醇溶于400ml乙醇中，得类脂溶液；

(2)将上述类脂溶液置于烧瓶中，于40℃恒温水浴中，且旋转蒸发除去乙醇，瓶壁上形成均匀类脂薄膜；

(3)将20g山梨醇溶于200ml水中，缓慢倒入烧瓶中轻摇，使类脂薄膜洗脱并分散到水合介质溶解，即得脂质体混悬液；

(4)将上述混悬液用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，喷雾干燥，得到托拉塞米前体脂质体粉末；

(5)将上述制备的托拉塞米前体脂质体粉末和26g乳糖、32g淀粉、5g羧甲淀粉钠混合，过60目筛混合均匀，加入5％聚维酮K30的20％乙醇溶液制备软材，过20目筛制粒，50℃干燥，18目整粒；

(6)干颗粒加入2g硬脂酸镁，混合均匀；

(7)压片，制得1000片托拉塞米脂质体片剂。

实施例3  托拉塞米脂质体分散片的制备

所用原辅料如下：

托拉塞米      5g

大豆卵磷脂    30g

胆固醇        2.5g

甘氨胆酸钠    2g

山梨醇        30g

大豆甾醇      10g

甘露醇        40g

淀粉          30g

交联聚维酮    10g

甜菊糖苷      5g

羟丙甲纤维素  3g

滑石粉        10g

制备工艺

(1)将5g托拉塞米、30g大豆卵磷脂、2.5g胆固醇、2g甘氨胆酸钠和10g大豆甾醇溶于600ml乙醇中，得类脂溶液；

(2)将上述类脂溶液置于烧瓶中，于60℃恒温水浴中，且旋转蒸发除去乙醇，瓶壁上形成均匀类脂薄膜；

(3)将30g山梨醇溶于120ml水中，缓慢倒入烧瓶中轻摇，使类脂薄膜洗脱并分散到水合介质溶解，即得脂质体混悬液；

(4)将上述混悬液用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，喷雾干燥，得到托拉塞米前体脂质体粉末；

(5)将上述制备的托拉塞米前体脂质体粉末和40g甘露醇、30g淀粉、10g交联聚维酮、5g甜菊糖苷混合，过60目筛混合均匀，加入2％羟丙甲纤维素的50％乙醇溶液制备软材，过30目筛制粒，60℃干燥，18目整粒；

(6)干颗粒加入10g滑石粉，混合均匀；

(7)压片，制得1000片托拉塞米脂质体分散片。

实施例4  托拉塞米脂质体胶囊剂的制备

所用原辅料如下：

托拉塞米      10g

大豆卵磷脂    50g

胆固醇        30g

甘氨胆酸钠    12g

山梨醇        100g

大豆甾醇      7g

预胶化淀粉    120g

微粉硅胶      10g

制备工艺：

(1)将10g托拉塞米、50g大豆卵磷脂、30g胆固醇、12g甘氨胆酸钠和7g大豆甾醇溶于700ml乙醇中，得类脂溶液；

(2)将上述类脂溶液置于烧瓶中，于55℃恒温水浴中，且旋转蒸发除去乙醇，瓶壁上形成均匀类脂薄膜；

(3)将100g山梨醇溶于400ml水中，缓慢倒入烧瓶中轻摇，使类脂薄膜洗脱并分散到水合介质溶解，即得脂质体混悬液；

(4)将上述混悬液用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，喷雾干燥，得到托拉塞米前体脂质体粉末；

(5)将上述制备的托拉塞米前体脂质体粉末和120g预胶化淀粉、10g微粉硅胶混合，过60目筛混合均匀；

(6)填充胶囊，制得2000粒托拉塞米脂质体胶囊剂。

实施例5  托拉塞米脂质体颗粒剂的制备

所用原辅料如下：

托拉塞米      10g

大豆卵磷脂    100g

胆固醇        40g

甘氨胆酸钠    4g

山梨醇        200g

大豆甾醇      20g

蔗糖          300g

阿斯帕坦      15g

桔子香精      25g

聚维酮K30     7.5g

日落黄        0.5g

制备工艺

(1)将10g托拉塞米、100g大豆卵磷脂、40g胆固醇、4g甘氨胆酸钠和20g大豆甾醇溶于1500ml乙醇中，得类脂溶液；

(2)将上述类脂溶液置于烧瓶中，于60℃恒温水浴中，且旋转蒸发除去乙醇，瓶壁上形成均匀类脂薄膜；

(3)将200g山梨醇溶于800ml水中，缓慢倒入烧瓶中轻摇，使类脂薄膜洗脱并分散到水合介质溶解，即得脂质体混悬液；

(4)将上述混悬液用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，喷雾干燥，得到托拉塞米前体脂质体粉末；

(5)将上述制备的托拉塞米前体脂质体粉末和400g蔗糖、15g阿斯帕坦混合，过60目筛混合均匀，加入含有0.5g日落黄和25g桔子香精的5％聚维酮K30的80％乙醇溶液制备软材，过24目筛制粒，55℃干燥，18目整粒；

(6)装袋，制得2000袋托拉塞米脂质体颗粒剂。

对比例1  托拉塞米脂质体片剂的制备

所用原辅料如下：

托拉塞米      5g

大豆卵磷脂    20g

胆固醇        2g

甘氨胆酸钠    7.5g

山梨醇        40g

大豆甾醇      4g

乳糖          50g

淀粉          65g

羧甲淀粉钠    10g

聚维酮K30     10g

硬脂酸镁      4g

制备工艺与实施例1相同，制得1000片托拉塞米脂质体片剂。

对比例2  托拉塞米脂质体片剂的制备

所用原辅料如下：

托拉塞米      5g

大豆卵磷脂    40g

胆固醇        5g

甘氨胆酸钠    7.5g

山梨醇        40g

乳糖          50g

淀粉          65g

羧甲淀粉钠    10g

聚维酮K30     10g

硬脂酸镁      4g

制备工艺与实施例1相同，制得1000片托拉塞米脂质体片剂。

对比例3  托拉塞米脂质体片剂的制备

所用原辅料如下：

托拉塞米      5g

大豆卵磷脂    40g

胆固醇        5g

山梨醇        40g

大豆甾醇      4g

乳糖          50g

淀粉          65g

羧甲淀粉钠    10g

聚维酮K30     10g

硬脂酸镁      4g

制备工艺与实施例1相同，制得1000片托拉塞米脂质体片剂。

对比例4  托拉塞米脂质体片剂的制备

所用原辅料与实施例1中相同，制备工艺如下：

(1)将大豆卵磷脂、胆固醇、甘氨胆酸钠和大豆甾醇溶于300ml异丙醇中，得类脂溶液；

(2)将托拉塞米和山梨醇溶于200ml水中，将上述类脂溶液慢慢地滴入其中，同时用磁力搅拌器搅拌均匀，搅拌时间为90min，得到含有异丙醇的脂质体混悬液；

(3)将上述混悬液置于超声容器中超声至半透明胶体溶液；

(4)将上述半透明胶体用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，滤液置于-30℃条件下预冻6小时，然后以4℃/小时的速度缓慢升温至-6℃，保温2小时，再以6℃/小时的速度升温至30℃，保温干燥4小时，得到托拉塞米前体脂质体冻干粉；

(5)将上述制备的托拉塞米前体脂质体粉末和50g乳糖、65g淀粉、10g羧甲淀粉钠混合，过60目筛混合均匀，加入5％聚维酮K30的20％乙醇溶液制备软材，过20目筛制粒，50℃干燥，18目整粒；

(6)干颗粒加入4g硬脂酸镁，混合均匀；

(7)压片，制得1000片托拉塞米脂质体片剂。

试验例1  脂质体包封率的测定

采用超速离心的方法测定托拉塞米脂质体的包封率，具体操作步骤如下：

(1)离心样品溶液的制备：精密量取实施例1-5以及对比例1-4中制得的托拉塞米脂质体混悬液10ml，置于冷冻超速离心机中，13000r/min，4℃离心30min。取上清液，用于脂质体溶液中游离药物的含量测定。

(2)未离心的样品溶液的制备：精密量取实施例1-5和对比例1-4中制得的托拉塞米脂质体混悬液10ml，置于25ml棕色容量瓶中，加入5％的Triton X-100的乙醇溶液10ml破乳，用蒸馏水稀释并定容至刻度，摇匀，用于脂质体中总药物的含量测定。

(3)分别取上述(1)中所得托拉塞米脂质体的离心样品溶液与上述(2)中所得托拉塞米脂质体的未离心样品溶液，按相应色谱条件测定峰面积，并计算托拉塞米脂质体的离心样品溶液中药物浓度(C_游离)及托拉塞米脂质体的未离心样品溶液中药物浓度(C_总)，再分别乘以各自稀释倍数即得未包封药物的重量(W_游离)及脂质体中药物的总重量(W_总)，通过下式计算包封率，包封率＝(W_总-W_游离)/W_总×100％。

分别对实施例1-5以及对比例1-4的前体脂质体冻干粉末测量包封率，结果如下表1中所示。

表1  脂质体的包封率

由表1可知，与对比例中1-4的脂质体相比，本发明的托拉塞米脂质体的包封率要高出很多。

特别地，通过比较实施例1-5和缺少本发明范围内的成份的对比例2-3可知，本发明的脂质体具有更高的包封率。这表明，托拉塞米脂质体的包封率与用于形成脂质体的成分种类有关。

特别地，通过比较实施例1-5与重量配比不在本发明范围内的对比例1可知，本发明的脂质体具有更高的包封率。这表明，托拉塞米脂质体的包封率不仅与用于形成脂质体的成分有关，还与各成分的用量直接相关。

通过比较实施例1与对比例4可知，在使用同样的原辅料时，通过本发明方法制得的脂质体的包封率更高。

试验例2  脂质体粒径的测定

用电子显微镜观察实施例1-5和对比例1-4中于步骤(4)制得的托拉塞米前体脂质体冻干粉末的粒径，结果如下表2中所示。

表2  脂质体的粒径

由表2可知，本发明实施例1-5中所得脂质体的平均粒径比对比例1-4中所得脂质体的平均粒径小很多，而且粒径大小均一。

特别地，通过比较实施例和对比例4可知，虽然两者用于形成脂质体的原料相同，但在不同制备方法的情况下，通过本发明方法形成的脂质体具有更小的粒径、更均匀的粒径分布。

现有研究表明，脂质体颗粒大小和分布均匀程度与其稳定性和包封率以及在人体内的停留时间有关，脂质体颗粒越小、粒径分布越均匀，其稳定性和包封率越高，在人体循环系统内的停留时间越长(参见药物新剂型，第一版，第十八章，408-468页，朱盛山主编，化学工业出版社)。将该文献全文引入此处作为参考。

因此，本发明的托拉塞米脂质体平均粒径小、粒径分布均匀是进一步促进其稳定性、包封率、在体内的保留时间时间长、生物利用度等性能优异的一个因素。

试验例3  脂质体的稳定性研究

通过加速试验，评价本发明实施例1-5和对比例1-4中的托拉塞米脂质体固体制剂以及市售的托拉塞米片剂(湖北百科亨迪药业有限公司生产，批号20100306-2)的稳定性。在40℃的温度下，相对湿度75％±5％条件下6个月进行加速试验，结果如下表3所示。

表3  加速试验结果

由表3可知，本发明实施例1-5的托拉塞米脂质体固体制剂的稳定性高于对比例1-4的托拉塞米脂质体固体制剂以及市售的托拉塞米片剂。

Claims (9)

1.一种托拉塞米脂质体，其特征在于，该托拉塞米脂质体通过包括以下步骤的方法制备：

(1)将托拉塞米、大豆卵磷脂、胆固醇、甘氨胆酸钠和大豆甾醇溶于适量乙醇中，得类脂溶液；

(2)将上述类脂溶液置于烧瓶中，于35-40℃恒温水浴中，旋转蒸发除去乙醇，在瓶壁上形成均匀类脂薄膜；

(3)将山梨醇溶于水中，缓慢倒入烧瓶中轻摇，使类脂薄膜洗脱并分散到水合介质溶解，即得脂质体混悬液；

(4)将上述混悬液用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，喷雾干燥，得到托拉塞米脂质体粉末；

其中按重量配比：

2.根据权利要求1所述的托拉塞米脂质体，其特征在于，其中按重量配比：

3.权利要求1或2所述的托拉塞米脂质体的制备方法，该方法包括以下步骤：

(1)将托拉塞米、大豆卵磷脂、胆固醇、甘氨胆酸钠和大豆甾醇溶于适量乙醇中，得类脂溶液；

(2)将上述类脂溶液置于烧瓶中，于35-40℃恒温水浴中，旋转蒸发除去乙醇，在瓶壁上形成均匀类脂薄膜；

(3)将山梨醇溶于水中，缓慢倒入烧瓶中轻摇，使类脂薄膜洗脱并分散到水合介质溶解，即得脂质体混悬液；

(4)将上述混悬液用孔径为0.45μm微孔滤膜过滤，喷雾干燥，得到托拉塞米脂质体粉末。

4.一种托拉塞米脂质体固体制剂，其包括权利要求1或2所述的托拉塞米脂质体以及药学可接受的载体或赋形剂，所述载体或赋形剂包括填充剂、甜味剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、芳香剂和着色剂。

5.根据权利要求4所述的托拉塞米脂质体固体制剂，其为片剂、胶囊剂或颗粒剂。

6.根据权利要求5所述的托拉塞米脂质体固体制剂，其为咀嚼片。

7.一种托拉塞米脂质体固体制剂的制备方法，该方法包括：

(1)将权利要求1或2所述的托拉塞米脂质体粉末和药学上常用的填充剂、甜味剂和崩解剂混合，过筛混合均匀，加入粘合剂制备软材，过筛制粒，干燥，整粒；

(2)所得干颗粒加入润滑剂和/或芳香剂，混合均匀；

(3)压片或分装，制得托拉塞米脂质体固体制剂。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，粘合剂为浓度为20％-80％(重量/重量)的乙醇水溶液。

9.根据权利要求7或8任一项所述的制备方法，其特征在于，在步骤(1)中，托拉塞米脂质体粉末和填充剂、甜味剂和崩解剂过60目筛混合均匀，制软材后过20-30目筛制湿颗粒，50-60℃干燥，18目筛整粒。