[go: up one dir, main page]

CN101199559A - 用于治疗和/或预防肠内细菌失调的方法 - Google Patents

用于治疗和/或预防肠内细菌失调的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN101199559A
CN101199559A CNA2007101296807A CN200710129680A CN101199559A CN 101199559 A CN101199559 A CN 101199559A CN A2007101296807 A CNA2007101296807 A CN A2007101296807A CN 200710129680 A CN200710129680 A CN 200710129680A CN 101199559 A CN101199559 A CN 101199559A
Authority
CN
China
Prior art keywords
gls
group
shows
ibi
lactobacillus
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CNA2007101296807A
Other languages
English (en)
Inventor
张志强
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kindway International Ltd
Original Assignee
Kindway International Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kindway International Ltd filed Critical Kindway International Ltd
Publication of CN101199559A publication Critical patent/CN101199559A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
    • A61K36/074—Ganoderma
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明提供了一种用于治疗或预防哺乳动物肠内细菌失调(IBI)的方法。所述方法包括下述步骤：将一种组合物口服施用于正经受IBI或具有形成IBI倾向的哺乳动物，所述组合物含有萌发活化的破壁灵芝孢子粉(“GLS”)或GLS与肠内益生菌如双歧乳酸杆菌的混合物。

Description

用于治疗和/或预防肠内细菌失调的方法
发明领域
本发明涉及一种用于治疗和/或预防哺乳动物肠内细菌失调(IBI)的方法。特别地，所述方法包括下述步骤：将萌发活化的破壁灵芝孢子(“GLS”)或GLS与肠内益生菌组合口服施用于正经受IBI或具有形成IBI倾向的哺乳动物。
发明背景
据估计在人类的肠道中携带2-4磅的细菌。存在于消化道的许多细菌对人类有益。例如，某些细菌有助于产生维生素K以及某些其他的细菌有助于我们的免疫系统正常作用。这些益生菌存活于肠壁的成千上万的称为绒毛的指突之中，其中益生菌辅助消化并防止致病(引起疾病)菌的过度群集，所述致病菌例如大肠杆菌(Escherichia coli)和艰难梭状芽胞杆菌(Clostridium difficile)。因益生菌和致病菌竞争占据并保留在肠道中，从而它们形成恒定变化的平衡。
益生菌和致病菌之间这种微妙的平衡可受多种因素影响，如应激、疾病、污染的食物和抗生素。例如，肠内细菌失调(IBI)的一个常见原因是抗生素治疗。抗生素不加区分地杀灭益
生菌和致病菌，使得更富于侵略性的致病菌的生长失控，所述更富于侵略性的致病菌经检测通常与益生菌保持在85∶15的比例。
IBI可以引起肠道粘膜层的炎症、气体过多、胃气胀、腹泻或便秘和营养吸收不良。此外，IBI可以使食物留在肠中而不消化，其中食物腐败(腐烂)并释放出侵入身体和危及健康的毒素。IBI与疾病有关，所述疾病如酵母菌感染、肠易激综合征和类风湿性关节炎。
保持肠内微生物群健康的一种方法是给人类饮食性地补充益生菌。例如，乳酸杆菌(Lactobacillus)，其属于多种肠内益生微生物中的一种属并存在于大部分的乳制品中，认为乳酸杆菌特别有助于哺乳动物分解食物中的蛋白质、碳水化合物和脂肪的能力，并且有助于必需元素和营养素的吸收，如人类和其他动物存活所需的矿物质、氨基酸和维生素。
灵芝属于真菌家族的多孔菌科。灵芝作为多种医学病症的辅助治疗广泛地用于传统的中药，所述医学病症例如肝炎、AIDS、癌症和自身免疫性疾病。萌发活化的破壁灵芝孢子(“GLS”)是灵芝的精华并且含有下述活性成分，如多糖、甾醇、油酸、亚油酸、三萜类、神经酰胺和一些有机离子，上述物质均具有强生物活性。GLS还用于神经障碍的治疗。然而，迄今为止，仍没有关于GLS对IBI作用的报道。
发明内容
本发明提供了一种用于治疗哺乳动物肠内细菌失调(IBI)的方法。所述方法包括将有效量的萌发活化的破壁灵芝孢子(GLS)施用于具有IBI的哺乳动物。IBI可以由下述因素引起：应激、抗生素治疗、饮食失调或食用污染的食物或正经受某些紊乱，如酵母菌感染、肠易激综合征和类风湿性关节炎。引起IBI的最值得注意的原因是抗生素治疗，例如盐酸林可霉素治疗。
用于IBI治疗的GLS有效量在每天每kg体重0.005和20g之间。
此外，优选将GLS与有效量的肠内益生菌一起施用。肠内益生菌的例子包括乳酸杆菌(Lactobacilli)或双歧杆菌(Bifidobacteria)或它们的组合。优选的肠内益生菌为双歧乳酸杆菌(Lactobacillus bifidus)。结合GLS使用的肠内益生菌的优选量在每天每kg体重0.02和20g之间。
GLS单独或与肠内益生菌的组合可以增加哺乳动物的肠内需氧细菌和厌氧细菌的数量。
本发明还提供了一种用于预防哺乳动物肠内细菌失调(IBI)的方法，所述方法包括将有效量的萌发活化的破壁灵芝孢子(“GLS”)施用于哺乳动物。所述哺乳动物具有形成IBI的倾向，例如所述哺乳动物正接受抗生素治疗。优选在抗生素治疗之前或抗生素治疗的同时将GLS施用于哺乳动物。此外，优选将GLS与有效量的肠内益生菌一起施用，所述肠内益生菌例如乳酸杆菌或双歧杆菌或它们的组合。优选的肠内益生菌为双歧乳酸杆菌。
GLS单独或与肠内益生菌的组合可以增加哺乳动物的肠内需氧细菌和厌氧细菌的数量。
附图简述
图1是显示来自标准对照组小鼠肠粘膜的石蜡切片苏木精&伊红(HE)染色的显微照片，放大200×。
图2是显示来自IBI对照组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图3是显示来自低剂量GLS对照组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的显微照片，放大200×。
图4是显示来自中剂量GLS对照组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的显微照片，放大200×。
图5是显示来自高剂量GLS对照组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的显微照片，放大200×。
图6是显示来自低剂量双歧乳酸杆菌对照(LB对照)组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图7是显示来自中剂量LB对照组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图8是显示来自高剂量LB对照组小鼠肠粘膜的HE染色石蜡切片的一组显微照片，放大200×。
图9是显示来自低剂量GLS-双歧乳酸杆菌混合物对照(GLS-LB对照)组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图10是显示来自中剂量GLS-LB对照组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图11是显示来自高剂量GLS-LB对照组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图12是显示来自低剂量LB治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片。
图13是显示来自中剂量LB治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片。
图14是显示来自高剂量LB治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图15是显示来自低剂量GLS治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图16是显示来自中剂量GLS治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图17是显示来自高剂量GLS治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图18是显示来自低剂量GLS-LB治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图19是显示来自中剂量GLS-LB治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图20是显示来自高剂量GLS-LB治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图21是显示来自低剂量LB预治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图22是显示来自中剂量LB预治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图23是显示来自高剂量LB预治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图24是显示来自低剂量GLS预治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图25是显示来自中剂量GLS预治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图26是显示来自高剂量GLS预治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图27是显示来自低剂量GLS-LB预治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图28是显示来自中剂量GLS-LB预治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
图29是显示来自高剂量GLS-LB预治疗组小鼠肠粘膜的石蜡切片HE染色的一组显微照片，放大200×。
发明详述
在人类和动物的肠道中存在多种存活并形成微生物群的有害微生物。还存在多种对宿主具有有益作用的有益微生物。在健康的环境下，有害的微生物与有益的微生物在身体中保持着共生或对抗的关系。但是，有害微生物的过量生长打破有害微生物与有益微生物之间的平衡，由此引起肠内细菌失调(IBI)。
当有害微生物(例如细菌和酵母菌)在肠道中出现过量生长时，宿主产生称为微生态失调的状况。在人类中，微生态失调与疾病有关，所述疾病例如酵母菌感染、肠易激综合征和类风湿性关节炎。
酵母菌是单细胞的真菌。所有人体中均存在酵母菌，但是通常通过天然存在的微生物来防止酵母菌的“过量生长”(不受控制的增殖将导致症状的出现)。酵母菌感染，也称为念珠菌病，通常是由白念珠菌(Candidaalbicans)引起的。念珠菌病是引起阴道刺激或阴道炎的一种最常见的原因，并且还可能存在于男性生殖器，特别是可存在于未受割礼的(uncircumcised)男性生殖器。至少四分之三的女性在她们生命中的某个时段将会经历念珠菌病。几乎所有女性的阴道中均存在白念珠菌并且通常不会产生问题。然而，当白念珠菌与其他“正常菌群”例如乳酸杆菌的平衡被打破时，可能出现白念珠菌的过量生长并产生症状。妊娠、口服避孕药和某些抗生素的使用以及糖尿病可使酵母菌感染的发生率增加。
在肠胃病学中，肠易激综合征(IBS)或痉挛性结肠是经由腹痛和肠排便习惯改变表征的功能性肠紊乱，所述腹痛和肠排便习惯改变与常规临床检验中观察到的任何异常没有关联。对于胃肠病学家而言，肠易激综合征相当常见并且发生率达20-50％。与肠排便习惯改变和经由排便缓解的腹部不适相关的下腹部疼痛以及胃气胀是最经常出现的症状。患者中的腹部疼痛类型通常描述为腹泻型(IBS-D)、便秘型(IBS-C)或排便改变型的IBS(IBS-A)。在某些个体中，在经由下述的两种或更多种症状表征的传染性疾病之后IBS可急性发作并发展：发热、呕吐、急性腹泻和粪便培养物阳性(positive stool culture)。这种感染后的IBS称为“感染后IBS”(IBS-PI)。该病症表现较为均一，大部分为IBS-D，并且吸引了大量的临床研究。
IBS在西方相当普遍，尽管已经形成了多种理论，但是仍然没有确定确切的成因。近年来的研究发现78％-84％的IBS患者具有细菌过度生长。Pimentel M等人的Am J Gastroenterol，95(12)：3503-3506(2000)；Pimentel M等人的Am J Gastroenterol，98(2)：412-419(2003)。随后的研究也已经对明显的细菌过度生长进行了鉴别并且证明在对过量的菌株进行治疗，特别是进行特异性的抗生素治疗之后症状显著减轻。
微生态失调的另一个常见的原因与治疗患有炎症性类风湿性关节炎的患者所采用的抗生素疗法有关。抗生素疗法由著名的风湿病学家ThomasMcPherson Brown，M.D.(1906-1989)首次提出，Thomas McPherson Brown，M.D.基于下述发现而成为这种治疗的先驱：即炎症性风湿病具有传染病因，如支原体和其他的细菌L型，所述炎症性风湿病例如类风湿性关节炎、硬皮病、狼疮、幼年型类风湿关节炎、多肌炎、强直性脊柱炎等。这种治疗的意义在于使用了低剂量的抗生素(特别是四环素类或大环内酯类的抗生素)来从疾病的根源即传染源抗击疾病的过程。与较快速生长的细菌引起的普通急性细菌感染的治疗相比，触发慢性疾病感染过程的细菌是生长较缓慢的有机体，因此，针对风湿性疾病的治疗所开出的抗生素用药方案是基于长期的低剂量抗生素的使用，通常每周只给药三天-有时较频繁。
益生的或“有益的”肠内细菌施行多种重要的机体功能。例如，这些肠内益生菌中的某些可以缓解胃肠病症，如腹泻或便秘；某些可以预防癌症并且可以通过激活免疫系统来提高机体对感染的抵抗力；某些起抑制有害微生物产生的代谢产物的作用，所述代谢产物例如氨、硫化氢、胺或致癌原。最广泛了解的肠内益生菌包括乳酸杆菌属和双歧杆菌属。
乳酸杆菌是一种革兰氏阳性的兼性细菌。兼性细菌通常是厌氧菌，如果氧气存在时其经由需氧呼吸制备ATP，但也能够在缺氧情况下切换至发酵。乳酸杆菌是乳酸细菌群里的主要部分，之所以这么说是因为乳酸细菌群的大部分成员将乳糖和其他的单糖转化为乳酸。乳酸杆菌是人类和其他动物中常见的并且通常是良性的、甚至是必需的栖居生物。在人类中，乳酸杆菌存在于阴道和胃肠道并且是重要的消化道菌群种属。多种乳酸杆菌在分解植物材料中具有显著作用。乳酸的形成使环境变成酸性，其抑制了某些有害菌的生长。最公知的乳酸杆菌种类包括嗜酸乳酸杆菌(L.acidophilus)、双歧乳酸杆菌(L.bifidus)、保加利亚乳酸杆菌(L.bulgaricus)、干酪乳酸杆菌(L.casei)、德氏乳酸杆菌(L.delbrueckii)、发酵乳酸杆菌(L.fermentum)、植物乳酸杆菌(L.plantarum)、罗伊氏乳酸杆菌(L.reuteri)、敏捷乳酸杆菌(L.agilis)、鸟乳酸杆菌(L.aviarius)、嗜淀粉乳酸杆菌(L.amylovorus)、短乳酸杆菌(L.brevis)、卷曲乳酸杆菌(L.crispatus)、鸡乳酸杆菌(L.gallinarum)、格氏乳酸杆菌(L.gasseri)、约氏乳酸杆菌(L.johnsonii)、鼠乳酸杆菌(L.murinus)、哈氏乳酸杆菌(L.hamsteri)、肠乳酸杆菌(L.intestinalis)、瘤胃乳酸杆菌(L.ruminis)和唾液乳酸杆菌(L.salivarius)。
某些乳酸杆菌菌种在工业上用于生产酸乳酪、泡菜、酸菜及其他发酵食品，如青贮饲料。某些酸乳酪饮料含有作为食品添加物的乳酸杆菌细菌。韩国泡菜也可以使用乳酸发酵技术制作。由于乳酸杆菌的生长不需要铁并且具有非常高的过氧化氢耐受性，因此乳酸杆菌在生物中是独特的。
双歧杆菌属是一种革兰氏阳性厌氧分叉的杆状细菌。在肠中，双歧杆菌发酵糖类产生乳酸。双歧杆菌，称为益生菌，是人体中细菌菌群的天然部分并与人类具有细菌-宿主的共生关系。例如，长双歧杆菌促进良好的消化、增强免疫系统并产生控制肠内pH的乳酸和乙酸。这些细菌还抑制白念珠菌、大肠杆菌及其他比双歧杆菌更具致病性的细菌的生长。认为双歧杆菌与其他胃肠细菌竞争并占据胃肠部位的细菌菌群大量比例的能力可部分地归因于其能够使用的产生能量的多种分子。Schell，Mark A.等人，Proc Natl Acad Sci USA，99(22)：14422-14427(2002)。最为公知的双歧杆菌包括角双歧杆菌(B.angulatum)、动物型双歧杆菌(B.animalis)、星状双歧杆菌(B.asteroides)、两岐双歧杆菌(B.bifidum)、B.boum、短双歧杆菌(B.breve)、链状双歧杆菌(B.catenulatum)、猪双歧杆菌(B.choerinum)、棒状双歧杆菌(B.coryneforme)、家兔双歧杆菌(B.cuniculi)、齿双歧杆菌(B.dentium)、没食子双歧杆菌(B.gallicum)、鸡双歧杆菌(B.gallinarum)、印度双歧杆菌(B indicum)、长双歧杆菌(B.longum)、大双歧杆菌(B.magnum)、B.merycicum、最小双歧杆菌(B.minimum)、假链状双歧杆菌(B.pseudocatenulatum)、假长双歧杆菌(B.pseudolongum)、嗜冷双歧杆菌(B.psychraerophilum)、雏鸡双歧杆菌(B.pullorum)、反刍双歧杆菌(B.ruminantium)、波伦亚双歧杆菌(B.saeculare)、B.scardovii、猿猴双歧杆菌(B.simiae)、细长双歧杆菌(B.subtile)、嗜热酸双歧杆菌(B.thermacidophilum)、嗜热双歧杆菌(B.thermophilum)、B.urinalis。
目前通常认为术语“益生菌”是指“通过控制肠内菌群对宿主产生有益作用的微生物和/或物质”。Parker，R B：An.Nutr.Health，29，4-8(1974)。某些时候，益生菌可以指各种食物中存在的益生菌，所述益生菌可加至肠道以改善肠内的细菌平衡。在任何情况下，称为益生菌的物质具有缓解肠内紊乱的功能。
目前有三种可商购获得的益生菌，它们是嗜酸性乳酸杆菌、双歧乳酸杆菌和屎链球菌。
在许多商店，特别是健康食品商店中可以获得不同培养物的嗜酸菌制剂，如散剂、胶囊、片剂和液体并且经由每剂量的活菌数量进行测定。尽管在使用一段时间的抗生素药物后将益生菌再植入结肠以确保机体功能的恢复是众所周知的，但仍然存在许多针对嗜酸菌用途的保护请求。事实上，嗜酸菌自身起温和的抗生素作用-换言之，嗜酸菌具有抗细菌活性。就常规用途而言，嗜酸菌甚至可以替代结肠或女性阴道中的有害菌，其中嗜酸菌还经常用于治疗酵母菌感染。嗜酸菌可进一步用作肠内酵母菌过量生长的治疗的一部分以及作为肠内酵母菌过量生长可产生的多种症状治疗的一部分。这些细菌还有助于产生某些维生素B和维生素K并且有助于分解不同的食物。
双歧乳酸杆菌经常连同嗜酸菌一起成为肠内活体培养治疗的一部分。双歧杆菌的培养物在婴儿中更为普遍，其通常作为婴儿的第一种有机体，但是双歧杆菌的培养物也是成年人胃肠道的重要部分。像嗜酸菌，其有助于维生素B的合成、有助于食物消化并且有助于抑制大肠杆菌以及可能更具致病性的结肠细菌如沙门氏菌的生长。
屎链球菌(Streptococcus faecium)是最近受到关注的另一种重要的结肠细菌。其作用类似于嗜酸菌的作用。屎链球菌在维生素B的合成中是重要的，其可能通过形成某些酶而有助于食物消化并抑制其他更具毒性的细菌，因此补充屎链球菌在某些腹泻的病例中是有利的。粪链球菌(S.faecalis)，一种潜在的致病菌，已经在某些细菌替代产品中被错误地列为屎链球菌的替代。
这三种细菌可以个别地并且可以每周或每两周交替地服用。当这三种细菌用于平衡一个或多个疗程抗生素产生的作用时，在此常规的基础上它们也可以一起服用(具有一些含有全部三种细菌的产品)。与单个的有机体相比，细菌的组合有可能更好地发挥作用以便重新平衡结肠的健康。
本发明提供了一种方法，所述方法通过将萌发活化的破壁灵芝孢子(GLS)施用于哺乳动物而预防或改善哺乳动物的肠内细菌失调(IBI)。在这项研究中，建立动物模型以便模拟由抗生素治疗引起的人类IBI。使用这种模型来评价口服施用GLS、双岐乳酸杆菌或GLS与双岐乳酸杆菌的组合对正常和疾病状态下的肠内微生物群的影响。该动物模型的建立包括下述步骤：连续6天给正常小鼠胃灌注盐酸林可霉素以诱发IBI。在胃肠领域公认这种模型产生了类似于人类IBI的症状。
林可霉素是一种来自于细菌林可链霉菌的合成抗生素。已经对林可霉素进行结构修饰以使其成为更公知的7-氯-7-脱氧衍生物克林霉素。虽然在结构、抗菌谱以及作用机理上与大环内酯类相似，但是它们还能有效地对抗其他物种，即放线菌、支原体以及某些种类的疟原虫(plasmodium)。但是，由于其副作用和毒性，目前已经很少使用并且只给对青霉素过敏的患者或者给对细菌产生耐药性的患者保留。
已经广泛地使用动物模型来研究肠内微生物群的宿主-细菌的相互作用。例如，肠易激综合征(IBD)的动物模型已经为居留腔内的细菌在疾病发病机理中的作用提供了最强有力的证据，并且已经用于测试益生菌的治疗效力(单独或组合，并且以不同的剂量)。基于动物模型的数据，已经在IBD患者中启动了几项关于益生菌的临床试验。Mahida YR等人，Clinical Science，107：331-341(2004)。
参见下文，如以下实例所显示的，可以通过口服施用GLS或GLS与双岐乳酸杆菌的组合来预防或改善肠道组织与IBI相关的症状和病理学变化。
在本发明所描述的优选实施方案中，出于清楚的目的采用了专用术语。然而，本发明不意于受限于所选择的专用术语。应该理解的是每个具体要素包括以相似的方式操作而达到相似目的的所有技术等同物。
本发明的一方面涉及一种预防或治疗哺乳动物IBI的方法。所述方法包括将有效量的GLS施用于哺乳动物。
GLS为棕色粉末，其在水中微溶。可以按照包括下述步骤的方法来生产生物活性的GLS：
I.诱发萌发：仔细挑选成熟和理想的灵芝孢子，使其经受浸渍过程而诱发萌发。将孢子保持在清水或蒸馏水、生物学的盐水溶液或其他能够使灵芝孢子快速萌发的营养液中。营养液的例子包括椰子汁或1-5％的麦芽提取物溶液、0.5-25％的灵芝孢子果或灵芝孢丝提取物、含有0.1-5％生物素的溶液以及含有0.1-3％磷酸二氢钾和硫酸镁的溶液。溶液的选择将取决于所需的浸渍时间、有待加工的孢子数量和其他如材料可用性的因素。可以使用上述萌发溶液中的一种或多种，其中加入的量为灵芝孢子重量的0.1-5倍。可以根据水温来确定浸渍时间，并且通常使用温度为20-43℃的水施行浸渍30分钟至8小时。优选地，浸渍时间为2-4小时，水温为25-35℃。
II.活化培养：从浸渍溶液移出灵芝孢子并通过使其滴水而除去过量的溶液。然后将孢子放置在通风良好的恒温恒湿培养箱中以便可以施行孢子培养物的活化。一般将培养的相对湿度设置在65-98％，将培养的温度设置在18-48℃，并且活化时间可以持续30分钟至24小时。湿度优选为85-97％以及温度优选为25-35℃。在活化的过程中，灵芝孢子的细胞壁明显软化使得渗透孢子的细胞壁变得相对容易。灵芝孢子的活化通常达到超过95％的比例。
III.孢子外壁的处理：在萌发/活化过程后，通过酶解作用处理孢子。在低温和保持酶活性的条件下，使用工业上常用的甲壳酶、纤维素酶或其他酶来进行该过程。当孢子外壁丧失其弹性并变脆时，所述过程完成。可选地，进行物理处理以渗透细胞壁，例如，可以实施微粉化、碾压、研磨、超高压微流处理以及其他工业上常用的机械方法，其中渗透率超过99％。
IV.干燥或提取：在低温下使用标准方法进行干燥，所述方法包括工业上常用的冷冻干燥或真空干燥等。所得的产品具有低于4％的含水量。干燥后，通过水或乙醇，或者通过薄膜浓缩来提取生物活性的物质。可以通过透析来对所提取的生物活性物质作进一步纯化以确保终产品无污染。可以将终产品制备成纯的粉末、提取物糊、注射液或用于口服的溶液。
可以在专利号为6,316,002的美国专利中找到GLS生产的更为详细的描述，由此通过引用将其全文并入。GLS也可以由香港的KindwayInternational Limited/Holistol International Limited商购获得。
GLS的有效量是用于预防或改善IBI相关症状和发病的剂量。可以通过在细胞培养物中或实验动物模型中的标准药物规程来确定GLS的毒性和治疗效力，如确定LD50(群体50％的致死剂量)和ED50(群体50％的治疗有效剂量)。毒性和治疗作用之间的剂量比是治疗指标并且其可以表示为LD50/ED50的比例。由细胞培养分析和动物研究获得的数据可以用于配制人类使用的剂量范围。
通常，GLS施用的适宜剂量范围如每天每kg体重约0.005g至约20g。在一个实施方案中，GLS的有效量在每天每kg体重0.05和10g之间。在另一个实施方案中，GLS的有效量在每天每kg体重0.5和5g之间。
优选将GLS口服施用。所述施用可以是一次剂量，或者是间隔剂量，如每天三次、每天两次、每天一次、每隔一天一次或每周一次。典型的治疗方案是每天施用一次，施用两天或更多天，优选3-14天。可以基于个体的情况和对象的需求来调节GLS施用的剂量日程表。在推注剂量后也可以使用连续的输注。可以通过适宜的生物测试来监控任何特定剂量的效果。
GLS可以与一种或多种益生菌一起施用。益生菌的例子包括但不局限于乳酸杆菌属和双歧杆菌属，所述乳酸杆菌属细菌例如嗜酸乳酸杆菌(L.acidophilus)、双歧乳酸杆菌(L.bifidus)、保加利亚乳酸杆菌(L.bulgaricus)、干酪乳酸杆菌(L.casei)、德氏乳酸杆菌(L.delbrueckii)、发酵乳酸杆菌(L.fermentum)、植物乳酸杆菌(L.plantarum)、罗伊氏乳酸杆菌(L.reuteri)、敏捷乳酸杆菌(L.agilis)、鸟乳酸杆菌(L.aviarius)、嗜淀粉乳酸杆菌(L.amylovorus)、短乳酸杆菌(L.brevis)、卷曲乳酸杆菌(L.crispatus)、鹑鸡乳酸杆菌(L.gallinarum)、格氏乳酸杆菌(L.gasseri)、约氏乳酸杆菌(L.johnsonii)、鼠乳酸杆菌(L.murinus)、哈氏乳酸杆菌(L.hamsteri)、肠乳酸杆菌(L.intestinalis)、瘤胃乳酸杆菌(L.ruminis)和唾液乳酸杆菌(L.salivarius)；所述双歧杆菌属的细菌例如角双歧杆菌(B.angulatum)、动物型双歧杆菌(B.animalis)、星状双歧杆菌(B.asteroides)、两岐双歧杆菌(B.bifidum)、B.boum、短双歧杆菌(B.breve)、链状双歧杆菌(B.catenulatum)、猪双歧杆菌(B.choerinum)、棒状双歧杆菌(B.coryneforme)、家兔双歧杆菌(B.cuniculi)、齿双歧杆菌(B.dentium)、没食子双歧杆菌(B.gallicum)、鸡双歧杆菌(B.gallinarum)、印度双歧杆菌(B indicum)、长双歧杆菌(B.longum)、大双歧杆菌(B.magnum)、B.merycicum、最小双歧杆菌(B.minimum)、假链状双歧杆菌(B.pseudocatenulatum)、假长鞭双歧杆菌(B.pseudolongum)、嗜冷双歧杆菌(B.psychraerophilum)、雏鸡双歧杆菌(B.pullorum)、反刍双歧杆菌(B.ruminantium)、波伦亚双歧杆菌(B.saeculare)、B.scardovii、猿猴双歧杆菌(B.simiae)、细长双歧杆菌(B.subtile)、嗜热酸双歧杆菌(B.thermacidophilum)、嗜热双歧杆菌(B.thermophilam)、B.urinalis。此外，可以将屎链球菌单独加入或与乳酸杆菌或双歧杆菌任何组合加入。
益生菌的有效量是用于预防或改善IBI相关症状和发病的剂量。益生菌的适宜剂量范围可以为每天每kg体重约0.02g至约20g。在一个实施方案中，益生菌的有效量在每天每kg体重0.2和20g之间。在另一个实施方案中，益生菌的有效量在每天每kg体重1和10g之间。
GLS也可以与药学上可接受的载体配制成药物组合物。如此处所用，术语“药学上可接受的载体”意于包括任何和所有与药物施用相容的溶剂、增溶剂、填充剂、稳定剂、粘合剂、吸收剂、基质、缓冲剂、控制释放的载体、稀释剂、乳化剂、润湿剂、润滑剂、分散介质、涂层、抗菌剂或抗真菌剂以及吸收延迟剂等等。此类介质和制剂对于药物活性物质的用途为本领域公知。除了与所述活性化合物不相容的一些传统介质或制剂之外，考虑了在组合物中可以使用的介质和药剂。也可以将添加剂引入该组合物中。
本发明的药物组合物被配制成与其预期施用途径相符，例如口服或胃肠外施用。口服组合物通常包括惰性的稀释剂或可食用的载体。所述稀释剂和载体可以封装入明胶胶囊中或压制成片剂。出于口服施用治疗的目的，活性化合物可以与固体载体掺合并以片剂、锭剂或胶囊的形式使用。也可以使用流体载体来制备口服组合物。药物相容的粘合剂和/或辅助材料可以作为组合物的一部分包括在内。片剂、丸剂、胶囊、锭剂等可以包括任何下述的成分或相似性质的化合物：粘合剂，如微晶纤维素、西黄蓍胶或明胶；赋形剂，如淀粉或乳糖；崩解剂，如海藻酸、Primogel或玉米淀粉；润滑剂，如硬脂酸镁或Stertes；助流剂，如胶体二氧化硅；甜味剂，如蔗糖或糖精；或调味剂，如薄荷、水杨酸甲酯或橘子调味剂。
适用于注射使用的GLS药物组合物包括用于临时配制无菌注射液或分散体的无菌水溶液(水溶性)或分散体以及无菌粉末。对于静脉内施用，适宜的载体包括生理盐水、抑菌水、Cremophor ELTM(BASF，Parsippany，NJ)或磷酸盐缓冲盐水(PBS)。在所有的情况下，可注射的组合物应该是无菌的并且应该是容易注射的流体。所述可注射的组合物在制备和储存条件下必须稳定并且必须能够对抗微生物，如细菌和真菌的污染作用。载体可以是溶剂或分散介质，所述溶剂或分散介质包括，如水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等)及它们的适宜的混合物。例如，可以通过使用涂层如磷脂酰胆碱、在分散体的情况下通过维持所需的粒度并且通过使用表面活性剂来来保持适当的流动性。可以通过不同的抗菌剂和抗真菌剂来防止微生物的作用，所述抗菌剂和抗真菌剂例如对羟基苯甲酸酯、三氯叔丁醇、苯酚、抗坏血酸、硫柳汞等。在多数情况下，在组合物中优选包括等渗剂，如氯化钠、糖类、多元醇(如甘露醇、山梨醇等)。可以通过在组合物中包括延迟吸收的制剂来实现可注射组合物的延迟吸收，所述延迟吸收的制剂如单硬脂酸铝和明胶。
可以通过以所需量将GLS引入具有上述列举的一种成分或多种成分组合的适宜溶剂中而制备无菌注射溶液，如果需要，随后可以进行过滤灭菌。通常，通过将活性化合物引入无菌载体而制备分散体，所述无菌载体含有基本的分散介质和上述列举的所需的其他成分。在用于制备无菌注射液的无菌粉末的情况下，优选的制备方法是真空干燥和冻干，所述制备方法获得活性成分外加任何其他来自前述无菌过滤溶液的所需成分的粉末。
为方便施用以及使剂量均一，以剂量单元的形式配制口服或胃肠外的组合物是特别有利的。如此处所用的剂量单元包括适于作为单一剂量用于有待治疗的受治疗者的物理离散单元，每个单元包括经计算产生期望治疗作用的预定量的活性化合物和所需的药物载体。本发明对于剂量单元形式的说明通过下述因素描述并且直接取决于下述因素：活性化合物独特的性质和有待获得的特定治疗效果，以及为个体治疗而调配此类化合物的领域所固有的局限性。该药物组合物可以与施用说明书一起包括在容器、包装或分配器中。
可以通过标准的临床规程例如粪便分析来对正经受IBI的人或动物进行诊断。下述情况也得到了公认：采用抗生素治疗的、在持续的应激状态下、具有饮食失调或者接触污染的食物，或者正经受某种病症如酵母菌感染、肠易激综合征和类风湿性关节炎的人具有形成IBI的倾向。
以下实验设计和结果用于说明而不限制本发明的范围。此处可以在不脱离本发明的范围的情况下作出合理的变动，例如由本领域技术人员作出的变动。此外，在本发明的描述中，出于清楚的目的而采用了专用术语。然而，本发明不意于受限于所选择的专用术语。应该理解的是每个专用要素包括以相似的方式操作而达到相似目的的所有技术等同物。
实验设计
I.材料和方法
灵芝孢子：GLS以每粒含有0.3g GLS粉末的胶囊形式由KindwayInternational Limited/Holistol International Limited提供。
实验动物：纯种昆明小鼠，每只重20±2g，一半是雄性，一半是雌性，由贵州省实验动物中心提供，许可证号：SCXK(贵州)2002-0001。
MRS培养基：MRS培养基通过混合下列成分制备：
多价胨10g       胰胨3g             可溶淀粉0.5g
葡萄糖10g       FeSO4O 0.1g        MnSO4 0.00672g
Tween-80 1mL    半胱氨酸0.4g       MgSO4·7H2O 0.2g
KH2PO4 1g       K2HPO4 1g          NaCl 0.01g
柠檬酸钠1g      酵母提取物5g       乳糖5g
琼脂糖15g       蒸馏水加至1000mL
使用NaOH将培养基的pH值调节至7.2-7.4。培养基在121℃灭菌25分钟。
盐酸林可霉素：使用盐水将盐酸林可霉素溶液(0.6g/2mL)稀释至100mg/mL的终浓度，该盐酸林可霉素溶液由福建省福清药业有限公司生产。
双岐乳酸杆菌培养：通过下述方法来测定双岐乳酸杆菌的活力：将盐水稀释的0.1mL双岐乳酸杆菌培养物铺于MRS固体培养基并在37℃孵育24h。有活力的双岐乳酸杆菌产生了大量的菌落。
剂量：GLS的临床推荐剂量为每人每天1.8g，其相当于每天每kg体重0.03g的剂量(假设成年人的平均体重为60kg)。在小鼠实验中使用的最大剂量为每天每kg体重12g(高剂量组)，其超出临床剂量400倍。在实验过程中没有观察到死亡或毒性。还测试了其他两种剂量：6.0g/kg体重(中剂量)和3.0g/kg体重(低剂量)。
灵芝孢子混悬液的制备：将充分研磨的GLS混悬于蒸馏水中直至达到10％、5％和2.5％(w/v)的终浓度。例如，通过研磨10粒GLS胶囊(3.0g)并将蒸馏水加至研磨的GLS直到30mL的终体积而制备10％的混悬液。然后使用蒸馏水稀释所述10％的混悬液得到5％和2.5％的混悬液。
双岐乳酸杆菌混悬液的制备：使用无菌盐水将双岐乳酸杆菌稀释成35％、17.5％和8.75％(w/v)的浓度。
灵芝孢子与双岐乳酸杆菌混合物的制备：通过混合相同体积的70％双岐乳酸杆菌和20％GLS来制备GLS与双岐乳酸杆菌的混合物。然后稀释该高浓度的混合物(35％双岐乳酸杆菌与10％GLS)得到17.5％双岐乳酸杆菌与5％GLS的中浓度混合物以及低浓度(8.75％双岐乳酸杆菌与2.5％GLS)混合物。
动物分组：将小鼠随机分入11个对照组(每组10只小鼠)和18个治疗/预治疗组(每组20只小鼠)。
对照组为：标准对照组、盐酸林可霉素对照(IBI对照)组、三种GLS对照组(高(10％)、中(5％)和低(2.5％)剂量组)、三种双岐乳酸杆菌对照(LB对照)组(高(35％)、中(17.5％)和低(8.75％)剂量组)以及三种GLS-双岐乳酸杆菌混合物对照(GLS-LB对照)组(高(10％+35％)、中(5％+17.5％)和低(2.5％+8.75％)剂量组)。
治疗组为：三种GLS治疗组(高、中和低剂量组)、三种双岐乳酸杆菌治疗(LB治疗)组(高、中和低剂量组)、三种GLS-双岐乳酸杆菌混合物治疗(GLS-LB治疗)组(高、中和低剂量组)。
预治疗(或预防)组为：三种GLS预治疗组(高、中和低剂量组)、三种双岐乳酸杆菌预治疗(LB预治疗)组(高、中和低剂量组)以及三种GLS-双岐乳酸杆菌混合物预治疗(GLS-LB预治疗)组(高、中和低剂量组)。治疗
标准对照组：每天胃灌注0.7mL的无菌盐水，连续灌注12天。
IBI对照组：每天胃灌注0.7mL的10mg/mL盐酸林可霉素，连续灌注6天，随后每天胃灌注0.7mL的蒸馏水，连续灌注6天。
GLS对照组：每天胃灌注0.7mL高(10％)、中(5％)和低剂量(2.5％)的GLS，连续灌注6天，随后每天胃灌注0.7mL的蒸馏水，连续灌注6天。
LB对照组：每天胃灌注0.7mL高(35％)、中(17.5％)和低剂量(8.75％)的双岐乳酸杆菌，连续灌注6天，随后每天胃灌注0.7mL的蒸馏水，连续灌注6天。
GLS-LB对照组：每天胃灌注0.7mL高、中和低剂量的GLS-双岐乳酸杆菌混合物，连续灌注6天，随后每天胃灌注0.7mL的蒸馏水，连续灌注6天。
GLS治疗组：每天胃灌注0.7mL的10mg/mL可注射盐酸林可霉素，连续灌注6天，随后每天胃灌注0.7mL高(10％)、中(5％)和低剂量(2.5％)的GLS，连续灌注6天。
LB治疗组：每天胃灌注0.7mL的10mg/mL可注射盐酸林可霉素，连续灌注6天，随后每天胃灌注0.7mL高(35％)、中(19.5％)和低剂量(8.75％)的双岐乳酸杆菌，连续灌注6天。
GLS-LB治疗组：每天胃灌注0.7mL的10mg/mL可注射盐酸林可霉素，连续灌注6天，随后每天胃灌注0.7mL高、中和低剂量的GLS-双岐乳酸杆菌混合物，连续灌注6天。
GLS预治疗组：每天胃灌注0.7mL高(10％)、中(5％)和低剂量(2.5％)的GLS，连续灌注6天，随后每天胃灌注0.7mL的10mg/mL盐酸林可霉素，连续灌注6天。
LB预治疗组：每天胃灌注0.7mL高(35％)、中(17.5％)和低剂量(8.75％)的双岐乳酸杆菌，连续灌注6天，随后每天胃灌注0.7mL的10mg/mL可注射盐酸林可霉素，连续灌注6天。
GS-LB预治疗组：每天胃灌注0.7mL高、中和低剂量的GLS-双岐乳酸杆菌混合物，连续灌注6天，随后每天胃灌注0.7mL的10mg/mL可注射盐酸林可霉素，连续灌注6天。
全身症状和体重观察结果：每天观察每组实验小鼠的全身症状。在胃灌注和作出实验结论之前，观察每组中的每只小鼠的体重。
粪便标本的收集和细菌菌落计数：在每组小鼠的实验均完成后，通过颈脱位法处死小鼠。由肠内无菌地取出粪便，放入带有标记的无菌测试管中，称重，使用稀释剂稀释10倍，使其充分均匀且随后以10-5、10-6和10-7稀释度稀释。将0.1mL的各种稀释液铺于培养基并在37℃孵育24h。计数每个平板上的细菌菌落并测定每个标本的细菌数(CFU/g标本)。所有结果均使用常规的对数值并使用统计方法对数据进行分析。
肠标本的收集和病理学检查：除去粪便后，肠样品在无菌盐水中洗涤，于福尔马林中固定，于石蜡中包埋，切片，用HE染色，并在光学显微镜下观察病理学变化。病理学检查和载玻片的解读由贵阳医学院病理教研室助理教授龙易国(Long Yiguo)和助理技术主管唐慧(Tang Hui)进行。
II.实验结果
全身症状：IBI对照组的小鼠表现出稀便、体重减轻、皮毛光泽减弱和其他的症状。在使用GLS、双岐乳酸杆菌或两者治疗后，粪便含有较少的水、体重增加、皮毛光泽逐渐恢复，并且小鼠较活跃。LB治疗组中的一些小鼠具有稀便、毛发松蓬和其他症状，而GS治疗/预治疗组、GS-LB治疗/预治疗组、GS对照组和标准对照组的小鼠没有表现出异常。
体重变化：表1和表2显示不同的治疗对正常小鼠体重的影响。
表1.不同的对照组中小鼠的体重变化
胃灌注前和胃灌注后的净重值(单位：g)
Figure A20071012968000211
表2.不同对照组中体重的对比(t检验)
  对比的组   对比的组
  1和2   ##   3和10
  1和3   #   4和5   ##
  1和4   4和6   ##
  1和5   ##   4和7
  1和6   #   4和8
  1和7   #   4和9
  1和8   4和10
  1和9   5和6
  1和10   5和7   #
  2和3   #   5和8   ##
  2和4   ##   5和9   #
  2和5   ##   5和10   #
  2和6   ##   6和7   #
  2和7   ##   6和8   ##
  2和8   ##   6和9   #
  2和9   ##   6和10   #
  2和10   ##   7和8   #
  3和4   7和9
  3和5   ##   7和10
  3和6   ##   8和9  #
  3和7   #   8和10  #
  3和8   9和10
  3和9
注释：#：p＞0.05，#：p＜0.05，##：p＜0.01。
表3和表4显示不同的治疗对IBI小鼠体重的影响。
表3.细菌失调治疗对小鼠体重的影响。
胃灌注前和胃灌注后的净重(单位：g)
Figure A20071012968000221
表4.不同治疗组体重的对比(t检验)
  对比组   对比组   对比组
  1和2   ##   2和7   #   4和7   ##  6和10   ##
  1和3   ##   2和8   ##   4和8   ##  6和11   ##
  1和4   #   2和9   ##   4和9   #  7和8   #
  1和5   ##   2和10   ##   4和10   #  7和9   ##
  1和6   ##   3和4   #   4和11   #  7和10   ##
 1和7   ##  3和5   ##  5和6   7和11   ##
 1和8   ##  3和6   ##  5和7   #   8和9   ##
 1和9  3和7   ##  5和8   ##   8和10   ##
 1和10  3和8   ##  5和9   ##   8和11   ##
 1和11   #  3和9   ##  5和10   ##   9和10
 2和3   ##  3和10   ##  5和11   ##   9和11   #
 2和4   ##  3和11   ##  6和7   #   10和11
 2和5   ##  4和5   ##  6和8   ##
 2和6   ##  4和6   ##  6和9   ##
注释：#：p＞0.05，#：p＜0.05，##：p＜0.01。
表5和表6显示不同的治疗对IBI形成的预防效果。
表5.不同的药物治疗对预防小鼠模型细菌失调的效果
灌注前和灌注后的净重(单位：g)
表6.不同预治疗组体重的对比(t检验)
  对比组   对比组   对比组   对比组
  1和2   ##   2和7   ##   4和5   6和9
  1和3   2和8   #   4和6   ##   6和10
  1和4   #   2和9   ##   4和7   ##   6和11   ##
  1和5   #   2和10   ##   4和8   ##   7和8
  1和6   ##   2和11   #   4和9   ##   7和9   ##
  1和7   ##   3和4   #   4和10   7和10   ##
 1和8   ##  3和5   #  4和11   #   7和11   ##
 1和9   #  3和6   ##  5和6   ##   8和9   ##
 1和10   ##  3和7   ##  5和7   ##   8和10   ##
 1和11   ##  3和8   ##  5和8   ##   8和11   ##
 2和3   ##  3和9  5和9   ##   9和10   #
 2和4   ##  3和10   #  5和10   #   9和11   ##
 2和5   #  3和11   ##  5和11   #   10和11
 2和6
注释：#：p＞0.05，#：p＜0.05，##：p＜0.01。
肠内厌氧菌的变化：表7和表8显示不同治疗对正常小鼠肠内厌氧菌的作用。
表7.不同治疗对正常小鼠肠内厌氧菌的作用(单位：log CFU/g)
  样品#   标准对照组(a)   IBI对照组(b)   GLS高剂量对照组(c)   GLS中剂量对照组(d)   GLS低剂量对照组(e)   LB高剂量对照组(f)   LB中剂量对照组(g)   LB低剂量对照组(h)   GLS-LB高剂量对照组(i)   GLS-LB中剂量对照组(j)   GLS-LB低剂量对照组(k)
  1   11.28   8.55   12.69   12.18   11.31   13.71   11.3   11.7   13.66   12.63   11.62
  2   11.07   8.63   12.59   12.21   11.53   12.94   12.39   11.66   13.57   12.59   11.82
  3   11.47   8.25   12.87   12.11   11.23   12.95   12.48   11.64   13.87   12.45   11.68
  4   11.24   8.54   12.82   12.86   11.43   12.23   11.47   11.36   13.82   12.67   11.74
  5   11.77   8.43   12.82   12.15   11.23   13.13   11.37   10.84   13.37   12.73   11.79
  6   11.56   7.96   12.87   12.63   10.96   12.65   11.56   13.11   13.11   13.15   12.23
  7   12.96   8.25   12.69   12.53   11.85   12.85   11.47   12.36   13.45   13.25   12.42
  8   12.12   8.12   13.14   12.54   11.56   12.42   12.04   12.54   14.21   14.15   11.39
  9   13.1   8.32   13.23   12.41   11.54   12.30   12.31   12.74   13.56   13.68   11.48
  10   12.2   8.54   11.58   12.63   10.84   12.41   11.48   11.96   13.42   13.46   12.45
  总计   116.77   83.59   127.79   124.25   113.48   127.59   117.87   119.91   136.04   130.76   117.66
  平均   11.68   8.36   12.78   12.43   11.35   12.76   11.79   11.20   13.60   13.08   11.77
表8.不同治疗对正常小鼠肠内厌氧菌作用的对比(t检验)
Figure A20071012968000241
Figure A20071012968000251
注释：#为p＜0.05，##为p＜0.01。
表9和表10显示不同治疗对IBI小鼠肠内厌氧菌的作用。
表9.不同治疗对IBI小鼠肠内厌氧菌的作用(单位：log CFU/g)
  样品#   标准对照组(a)   IBI对照组(b)   GLS高剂量治疗组(c)   GLS中剂量治疗组(d)   GLS低剂量治疗组(e)   LB高剂量治疗组(f)   LB中剂量治疗组(g)   LB中剂量治疗组(h)   GLS-LB高剂量治疗组(i)   GLS-LB中剂量治疗组(j)   GLS-LB低剂量治疗组(k)
  1   11.28   8.55   11.39   11.08   10.45   11.54   10.45   10.3   11.36   10.65   9.68
  2   11.07   8.63   11.19   11.12   10.85   11.96   11.56   10.84   12.68   11.47   10.56
  3   11.47   8.25   11.37   12.41   10.63   11.53   11.85   10.36   12.63   11.01   10.12
  4   11.24   8.54   11.22   11.56   11.04   11.85   10.58   10.42   12.49   12.31   10.34
  5   11.77   8.43   11.12   12.10   10.56   12.03   10.56   10.34   12.64   11.62   9.98
  6   11.56   7.96   11.37   11.49   10.96   11.55   10.46   10.23   12.51   11.42   11.25
  7   12.96   8.25   11.49   11.23   11.23   11.85   10.74   11.38   12.32   11.31   10.45
  8   12.12   8.12   12.04   11.79   10.59   11.24   11.32   11.49   12.04   12.17   10.42
  9   13.1   8.32   12.23   12.14   10.47   11.28   11.42   11.47   13.11   11.69   10.24
  10   12.2   8.54   11.08   11.25   10.49   11.11   10.71   11.21   12.14   11.89   10.84
  总计 116.77 83.59. 114.9 116.17 107.27 115.94 109.06 108.04 123.92 115.54 103.88
  平均   11.68   8.36   11.49   11.62   10.73   11.59   10.91   10.80   12.39   11.56   10.39
表10.不同治疗对IBI小鼠肠内厌氧菌作用的比较(t检验)
  对比组   对比组   对比组
  a和b   ##   c和d   e和j   #
  a和c   c和e   #   e和k
  a和d   c和f   f和g   #
  a和e   #   c和g   #   f和h   #
  a和f   c和h   #   f和i   #
  a和g   #   c和i   #   f和j
  a和h   #   c和j   f和k   #
  a和i   #   c和k   #   g和h
  a和j   d和e   #   g和i   ##
  a和k   #   d和f   g和j   #
  b和c   #   d和g   g和k
  b和d   #   d和h   h和i   ##
  b和e   #   d和i   ##   h和j   #
  b和f   #   d和j   h和k
  b和g   #   d和k   i和j   #
  b和h   #   e和f   #   i和k   ##
  b和i   #   e和g   j和k   #
  b和j   #   e和h
  b和k   #   e和i   ##
注释：#为p＜0.05，##为p＜0.01。
表11和表12显示不同的治疗对IBI预防模型中肠内厌氧菌的作用。
表11.药物治疗预防小鼠模型肠内厌氧菌对细菌失调的效果
(单位：log CFU/g)
  样品#   标准对照组(a)   IBI对照组(b)   GLS高剂量预治疗组(c)   GLS中剂量预治疗组(d)   GLS低剂量预治疗组(e)   LB高剂量预治疗组(f)   LB中剂量预治疗组(g)   LB低剂量预治疗组(h)   GLS-LB高剂量预治疗组(i)   GLS-LB中剂量预治疗组(j)   GLS-LB低剂量预治疗组(k)
  1   11.28   8.55   11.02   10.82   10.57   10.24   10.89   9.66   11.74   10.85   10.66
  2   11.07   8.63   10.95   10.84   10.68   10.54   10.89   9.66   11.72   10.89   10.81
  3   11.47   8.25   10.92   10.85   10.64   10.54   10.82   9.54   11.3   10.86   10.68
  4   11.24   8.54   11.37   10.56   10.55   10.76   10.95   9.94   11.36   10.79   11.03
  5   11.77   8.43   11.11   10.91   10.78   10.48   10.96   10.05   11.22   10.82   10.97
  总计   56.83   42.4   55.37   53.98   53.22   52.56   54.51   48.85   57.34   54.21   54.15
  平均   11.366   8.48   11.074   10.796   10.644   10.512   10.902   9.77   11.468   10.842   10.83
表12.不同的治疗对IBI预防模型肠内厌氧菌作用的对比(t检验)
  对比组   对比组
  a和b   ##   d和f
  a和c   d和g
  a和d   ##   d和h   ##
  a和e   ##   d和i   ##
  a和f   ##   d和j   #
  a和g   #   d和k
  a和h   ##   e和f
  a和i   e和g   ##
  a和j   #   e和h   ##
  a和k   #   e和i   ##
  b和c   ##   e和j   ##
  b和d   ##   e和k
  b和e   ##   f和g   ##
  b和f   ##   f和h   ##
  b和g   ##   f和i   ##
  b和h   ##   f和j   #
  b和i   ##   f和k   ##
  b和j   ##   g和h   ##
  b和k   ##   g和i   ##
  c和d   g和j
  c和e   #   g和k
  c和f   ##   h和i   ##
  c和g   h和j   ##
  c和h   ##   h和k   ##
  c和i   i和j   ##
  c和j   i和k   #
  c和k   ##   j和k
  d和e   #
注释：#为p＜0.05，##为p＜0.01。
肠内需氧菌的变化：表13和表14显示不同治疗对正常小鼠肠内需氧菌的作用。
表13.不同治疗对正常小鼠肠内需氧菌的作用(单位：log CFU/g)
  样品#  标准对照组(a)   IBI对照组(b)   GLS高剂量对照组(c)   GLS中剂量对照组(d)  GLS低剂量对照组(e)   LB高剂量对照组(f)   LB中剂量对照组(g)  LB低剂量对照组(h)   GLS-LB高剂量对照组(i)   GLS-LB中剂量对照组(j)   GLS-LB低剂量对照组(k)
  1   9.67   6.27   11.47   10.32   8.69   11.07   10.2   8.23   11.88   10.92   9.13
  2   9.27   6.45   11.56   10.34   8.34   11.34   10.56   8.14   11.59   11.56   8.84
  3   9.61   6.89   11.36   11.23   9.13   11.12   11.02   9.09   11.74   11.56   9.22
  4   9.73   6.57   11.74   11.56   9.31   11.13   11.12   9.21   11.96   11.89   9.29
  5   9.8   7.28   10.89   10.31   8.33   10.62   10.61   8.44   11.98   11.52   8.84
  6   9.61   6.31   11.35   10.34   8.22   11.31   10.11   8.08   11.56   10.49   8.63
  7   9.23   6.11   11.47   10.11   8.35   11.03   10.02   8.17   11.87   10.98   8.34
  8   9.14   6.23   10.69   11.43   8.49   10.48   11.14   8.15   11.95   11.53   8.63
  9   9.18   6.25   10.74   10.32   8.47   10.36   10.17   8.25   11.54   10.84   8.94
  10   9.47   7.21   11.42   10.45   8.38   11.01   9.38   8.31   11.89   10.42   8.65
  总计   94.71   65.57   112.69   106.41   85.71   118.84   109.06   83.80   117.96   111.71   88.51
  平均   9.47   6.56   11.27   10.64   8.57   11.88   10.91   8.38   11.80   11.17   8.85
表14.不同的药物治疗对肠内需氧菌作用的对比(t检验)
Figure A20071012968000281
注释：#为p＜0.05，##为p＜0.01。
表15和表16显示不同的治疗对IBI小鼠肠内需氧菌的作用。
表15.不同的治疗对IBI小鼠肠内需氧菌的作用(单位：log CFU/g)
  样品#   标准对照组(1)   IBI对照组(2)   GLS高剂量治疗组(3)   GLS中剂量治疗组(4)   GLS低剂量治疗组(5)   LB高剂量治疗组(6)   LB中剂量治疗组(7)   LB低剂量治疗组(8)   GLS-LB高剂量治疗组(9)   GLS-LB中剂量治疗组(10)   GLS-LB低剂量治疗组(11)
  A   9.067   6.27   9.61   8.28   8.61   8.81   8.55   8.81   9.53   9.34   9.65
  B   9.27   6.45   9.64   8.65   8.73   8.85   8.56   8.84   9.61   9.4   9.71
  C   9.61   6.89   9.76   8.78   8.83   8.88   8.83   9.13   9.62   9.398   9.87
  D   9.73   6.57   9.94   9.45   8.88   9.11   8.86   9.28   9.74   9.46   9.897
  E   9.8   7.28   10.06   9.43   9.01   9.18   8.69   9.44   9.77   9.88   10.37
  平均值 9.5 6.7 9.81 8.92 8.82 8.97 8.7 9.1 9.66 9.5 9.9
表16.不同的治疗对IBI小鼠肠内需氧菌作用的对比(t检验)
  对比组   对比组
  1和11   ##   3和6   ##
  1和10   3和5   ##
  1和9   3和4   ##
  1和8   ##   4和11   ##
  1和7   ##   4和10   #
  1和6   ##   4和9   ##
  1和5   ##   4和8
  1和4   ##   4和7
  1和3   #   4和6
  1和2   ##   4和5
  2和11   ##   5和11   ##
  2和10   ##   5和10   ##
  2和9   ##   5和9   ##
  2和8   ##   5和8   ##
  2和7   ##   5和7
  2和6   ##   5和6   ##
  2和5   ##   6和11   ##
  2和4   ##   6和10   ##
  2和3   ##   6和9   ##
  3和11   6和8
  3和10   ##   6和7   #
  3和9   #   7和11   ##
  3和8   ##   7和10   ##
  3和7   ##
注释：#为p＜0.05，##为p＜0.01
表17和表18显示不同的治疗对IBI预防模型肠内需氧菌的作用。
表17.不同的治疗对IBI预防模型肠内需氧菌的作用(单位：log CFU/g)
  样品#   标准对照组(1)   IBI对照组(2)   GLS高剂量预治疗组(3)   GLS中剂量预治疗组(4)   GLS低剂量预治疗组(5)   LB高剂量预治疗组(6)   LB中剂量预治疗组(7)   LB低剂量预治疗组(8)   GLS-LB高剂量预治疗组(9)   GLS-LB中剂量预治疗组(10)   GLS-LB低剂量预治疗组(11)
  A   9.067   6.27   7.94   8.86   9.26   9.25   9.70   8.64   8.73   8.68   8.43
  B   9.27   6.45   7.82   9.26   9.22   9.29   9.66   8.68   8.75   8.68   8.46
  C   9.61   6.89   7.74   9.3   9.24   9.29   9.84   8.74   8.988   8.71   8.589
  D   9.73   6.57   7.69   9.6   9.41   9.38   9.88   8.76   9.22   8.81   8.589
  E   9.8   7.28   7.85   8.47   9.44   9.48   9.94   8.83   9.39   8.66   8.67
  平均值   9.5   6.7   7.81   9.1   9.32   9.34   9.81   8.53   9.02   8.71   8.55
表18.不同的治疗对IBI预防模型肠内需氧菌作用的对比(t检验)
  对比组   对比组
  1和11   ##   4和10
  1和10   ##   4和9
  1和9   ##   4和8
  1和8   ##   4和7   #
  1和7   #   4和6
  1和6   4和5
  1和5   5和11   ##
  1和4   5和10   ##
  1和3   ##   5和9   #
  1和2   ##   5和8   ##
  2和11   ##   5和7   ##
  2和10   ##   5和6
  2和9   ##   6和11   ##
  2和8   ##   6和10   ##
  2和7   ##   6和9   #
  2和6   ##   6和8
  2和5   ##   6和7   ##
  2和4   ##   7和11   ##
  2和3   ##   7和10   ##
  3和11   7和9   ##
  3和10   ##   7和8   ##
  3和9   ##   8和11   #
  3和8   ##   8和10
  3和7   ##   8和9   #
  3和6   ##   9和11
  3和5   ##   9和10
  3和4   ##   10和11   #
  4和11
注释：#为p＜0.05，##为p＜0.01。
病理学变化：收集来自不同组小鼠的肠样品，将肠内的粪便取出。使用无菌的生理盐水洗涤肠样品，在标准的福尔马林中固定，包埋于石蜡中，并进行切片。施行HE染色并在光学显微镜下观察病理学变化。IBI组小鼠的肠粘膜充血明显，而标准对照组和GLS-BL治疗组小鼠的肠粘膜充血不明显。
图1显示标准对照组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常。没有观察到炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，组织结构正常，无水肿、血管舒张、炎症性细胞浸润或其他的病理学变化。在肌肉和浆膜层，组织结构也正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图2显示IBI对照组小鼠具代表性的肠粘膜切片。小图A显示粘膜层中的炎症性细胞浸润和侵蚀。小图B显示粘膜下层中的血管舒张和炎症性细胞浸润。小图C显示肌肉层中的变性和炎症性细胞浸润。
图3显示GLS低剂量对照组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，组织结构正常，无水肿、血管舒张、炎症性细胞浸润或其他的病理学变化。在肌肉层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。在浆膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图4显示GLS中剂量对照组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，组织结构正常，无水肿、血管舒张、炎症性细胞浸润或其他的病理学变化。在肌肉层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。在浆膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图5显示GLS高剂量对照组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，组织结构正常，无水肿、血管舒张、炎症性细胞浸润或其他的病理学变化。在肌肉层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。在浆膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图6显示LB低剂量对照组小鼠具代表性的肠粘膜切片。小图A显示粘膜层中的轻微程度的炎症性细胞浸润和侵蚀。小图B显示粘膜下层中的轻微程度的血管舒张和炎症性细胞浸润以及肌肉层轻微程度的变性和炎症性细胞浸润。
图7显示LB中剂量对照组小鼠具代表性的肠粘膜切片。小图A显示粘膜层中的炎症性细胞浸润和侵蚀以及粘膜下层中的血管舒张和炎症性细胞浸润。小图B显示粘膜下层中的轻微程度的血管舒张和炎症性细胞浸润以及肌肉层中的轻微程度的变性和炎症性细胞浸润。
图8显示LB高剂量对照组小鼠具代表性的肠粘膜切片。小图A显示粘膜层中的炎症性细胞浸润和侵蚀。小图B显示粘膜下层中的血管舒张和炎症性细胞浸润以及肌肉层中的变性和炎症性细胞浸润。
图9显示GLS-LB低剂量对照组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，组织结构正常，无水肿、血管舒张、炎症性细胞浸润或其他的病理学变化。在肌肉层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。在浆膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图10显示GLS-LB中剂量对照组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，组织结构正常，无水肿、血管舒张、炎症性细胞浸润或其他的病理学变化。在肌肉层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图11显示GS-LB高剂量对照组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，组织结构正常，无水肿、血管舒张、炎症性细胞浸润或其他的病理学变化。在肌肉层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图12显示LB低剂量治疗组小鼠具代表性的肠粘膜切片。小图A显示粘膜层的炎症性细胞浸润。小图B显示粘膜下层的血管舒张和炎症性细胞浸润。小图C显示肌肉层的炎症性细胞浸润。
图13显示LB中剂量治疗组小鼠具代表性的肠粘膜切片。小图A显示粘膜层的炎症性细胞浸润。小图B显示粘膜下层的血管舒张和炎症性细胞浸润。小图C显示肌肉层的炎症性细胞浸润。
图14显示LB高剂量治疗组小鼠具代表性的肠粘膜切片。小图A显示粘膜层的炎症性细胞浸润。小图B显示粘膜下层的血管舒张、炎症性细胞浸润和水肿。小图C显示肌肉层的炎症性细胞浸润。
图15显示GLS低剂量治疗组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，无炎症性细胞浸润、水肿或其他的病理学变化。在肌肉层，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。在浆膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图16显示GLS中剂量治疗组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，无炎症性细胞浸润，无水肿或其他的病理学变化。在肌肉层，无炎症性细胞浸润，无变性坏死或其他的病理学变化。在浆膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图17显示GLS高剂量治疗组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，无炎症性细胞浸润，无水肿或其他的病理学变化。在肌肉层，无炎症性细胞浸润，无变性坏死或其他的病理学变化。在浆膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图18显示GLS-LB低剂量治疗组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，无炎症性细胞浸润，无水肿或其他的病理学变化。在肌肉层，无炎症性细胞浸润，无变性坏死或其他的病理学变化。在浆膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图19显示GLS-LB中剂量治疗组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，无炎症性细胞浸润，无水肿或其他的病理学变化。在肌肉层，无炎症性细胞浸润，无变性坏死或其他的病理学变化。在浆膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图20显示GLS-LB高剂量治疗组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，无炎症性细胞浸润，无水肿或其他的病理学变化。在肌肉层，无炎症性细胞浸润，无变性坏死或其他的病理学变化。在浆膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图21显示LB低剂量预防组小鼠具代表性的肠粘膜切片。小图A显示粘膜层中的炎症性细胞浸润。小图B显示粘膜下层中的血管舒张和炎症性细胞浸润。小图C显示肌肉层中的炎症性细胞浸润。
图22显示LB中剂量预防组小鼠具代表性的肠粘膜切片。小图A显示粘膜层中的炎症性细胞浸润和侵蚀。小图B显示粘膜下层中的血管舒张、炎症性细胞浸润和水肿。小图C显示肌肉层中的炎症性细胞浸润。
图23显示LB高剂量预防组小鼠具代表性的肠粘膜切片。小图A显示粘膜层中的炎症性细胞浸润和侵蚀。小图B显示粘膜下层中的血管舒张、炎症性细胞浸润和水肿。小图C显示肌肉层中的炎症性细胞浸润。
图24显示GLS低剂量预防组小鼠具代表性的肠粘膜切片。小图A显示粘膜层中的轻微程度的炎症性细胞浸润，但无侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。小图B显示粘膜下层中的轻微程度的炎症性细胞浸润。小图C显示肌肉层中的轻微程度的炎症性细胞浸润，但无变性坏死或其他的病理学变化。
图25显示GLS中剂量预防组小鼠具代表性的肠粘膜切片。小图A显示粘膜层中组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。小图B显示粘膜下层中无炎症性细胞浸润，无水肿或其他的病理学变化。小图C显示肌肉层中无炎症性细胞浸润，无变性坏死或其他的病理学变化。
图26显示GLS高剂量预防组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，无炎症性细胞浸润，无水肿或其他的病理学变化。在肌肉层，无炎症性细胞浸润，无变性坏死或其他的病理学变化。在浆膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图27显示GLS-LB低剂量预防组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，无炎症性细胞浸润，无水肿或其他的病理学变化。在肌肉层，无炎症性细胞浸润，无变性坏死或其他的病理学变化。在浆膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图28显示GLS-LB中剂量预防组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，无炎症性细胞浸润，无水肿或其他的病理学变化。在肌肉层，无炎症性细胞浸润，无变性坏死或其他的病理学变化。在浆膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
图29显示GLS-LB高剂量预防组小鼠具代表性的肠粘膜切片。在粘膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、侵蚀、坏死脱落、血管舒张、水肿、出血、溃疡或其他的病理学变化。在粘膜下层，无炎症性细胞浸润，无水肿或其他的病理学变化。在肌肉层，无炎症性细胞浸润，无变性坏死或其他的病理学变化。在浆膜层，组织结构正常，无炎症性细胞浸润、变性坏死或其他的病理学变化。
III.结论
标准对照组的小鼠显示出体重增益。IBI对照组的小鼠没有显示出体重增益。经受双岐乳酸杆菌单独治疗的小鼠也没有显示出体重增益。经受GLS单独治疗的小鼠以及经受GLS-双岐乳酸杆菌混合物治疗的小鼠显示出明显的体重增益。体重的增加与GLS的剂量相关。
在IBI小鼠模型中，GLS、双岐乳酸杆菌以及GLS-双岐乳酸杆菌混合物提高了肠内厌氧菌和需氧菌的水平。使用GLS-双岐乳酸杆菌混合物获得了最佳结果。施用GLS的结果优于施用双岐乳酸杆菌的结果。
肠样品的检查显示IBI组和LB治疗/预治疗组的小鼠肠粘膜充血，而标准对照组、GLS治疗/预治疗组和GLS-LB治疗/预治疗组的小鼠没有显示出充血。
肠切片的病理学检查表明IBI组和LB治疗/预治疗组小鼠的肠粘膜层具有炎症性细胞浸润、侵蚀和出血；粘膜下层具有轻微程度的血管舒张和炎症性细胞浸润；肌肉层和浆膜层也具有病理学变化。相比之下，标准对照组、GLS治疗/预治疗组以及GLS-LB治疗/预治疗组的小鼠肠粘膜层均没有显示出病理学变化。
结果显示GLS、双岐乳酸杆菌以及GLS-双岐乳酸杆菌混合物可以增加小鼠模型的肠内需氧菌和厌氧菌的计数，并且对于抗生素导致的减少的细菌计数具有明确的提升作用。然而，单独使用双岐乳酸杆菌进行治疗或预治疗未能使体重恢复至正常水平，并且还引起了肠粘膜的充血。病理学检查还表明IBI对照组和LB治疗/预治疗组小鼠的肠粘膜层存在炎症性细胞浸润、侵蚀和出血；粘膜下层显示出轻微程度的血管舒张和炎症性细胞浸润；并且肌肉层与浆膜层也存在病理学变化。相比之下，GLS治疗/预治疗组和GLS-LB治疗/预治疗组的小鼠显示出显著的体重增益并且经由肉眼观察和显微镜检查均未发现肠内具有病理学变化。因此，在治疗或预防IBI中施用GLS或GLS-双岐乳酸杆菌混合物比施用双岐乳酸杆菌获得了更好的效果。
本说明书所描述和讨论的实施方案仅意于将发明人已知的最佳方式教导给本领域的技术人员以便制备和使用本发明。不应将本说明书的任何内容认为是限制本发明的范围。如本领域技术人员依据上述教导所理解的，可以对本发明上述实施方案进行修改或变动以及增加或省略技术特征要素，且不脱离本发明。因此，应理解的是，在权利要求及其等同的范围内，可以使用除具体描述之外的其他方式来实施本发明。

Claims (10)

1.萌发活化的破壁灵芝孢子(GLS)用于制备用于治疗或预防哺乳动物的肠内细菌失调(IBI)的药物的用途，所述哺乳动物患有所述IBI或具有形成所述IBI的倾向。
2.根据权利要求1所述的用途，其中所述哺乳动物为人类。
3.根据权利要求1所述的用途，其中所述哺乳动物为啮齿动物。
4.根据权利要求1所述的用途，其中所述IBI由抗生素治疗引起。
5.根据权利要求4所述的用途，其中所述抗生素为盐酸林可霉素。
6.根据权利要求1所述的用途，其中所述药物包含肠内益生菌。
7.根据权利要求6所述的用途，其中所述肠内益生菌为乳酸杆菌或双歧杆菌或其组合。
8.根据权利要求6所述的用途，其中所述肠内益生菌为双岐乳酸杆菌。
9.根据权利要求1所述的用途，其中所述GLS增加所述哺乳动物肠内需氧菌和厌氧菌的计数。
10.根据权利要求6所述的用途，其中所述GLS和所述肠内益生菌增加所述哺乳动物肠内需氧菌和厌氧菌的计数。
CNA2007101296807A 2006-08-14 2007-08-14 用于治疗和/或预防肠内细菌失调的方法 Pending CN101199559A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US11/503,175 2006-08-14
US11/503,175 US20080038239A1 (en) 2006-08-14 2006-08-14 Method for treating and/or preventing intestinal bacterial imbalance

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN101199559A true CN101199559A (zh) 2008-06-18

Family

ID=38990471

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNA2007101296807A Pending CN101199559A (zh) 2006-08-14 2007-08-14 用于治疗和/或预防肠内细菌失调的方法

Country Status (3)

Country Link
US (1) US20080038239A1 (zh)
EP (1) EP1900371A1 (zh)
CN (1) CN101199559A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110607262A (zh) * 2019-09-25 2019-12-24 君维安(武汉)生命科技有限公司 一种干预炎性肠炎的益生菌组合物及其筛选方法和应用

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6908614B2 (en) * 1999-10-12 2005-06-21 Chee-Keung Chung Anti-aging/menopause symptoms relief using ganoderma lucidum spores
US6893641B2 (en) * 1999-10-12 2005-05-17 Chee-Keung Chung Ganoderma lucidum spores for treatment of autoimmune diseases
US6316002B1 (en) * 1999-10-12 2001-11-13 Xin Liu Germination activated red Ganoderma lucidum spores and method for producing the same
EP1155623A1 (en) * 2000-05-18 2001-11-21 N.V. Seghers Nutrition Sciences S.A. Growth promoter for animals
US7087233B2 (en) * 2002-07-05 2006-08-08 Chee-Keung Chung Antimutagenic effects of Ganoderma lucidum spores
US7132103B2 (en) * 2003-08-01 2006-11-07 Enhan Technology Holdings International Co., Ltd. Effects of sporoderm-broken germination activated ganoderma spores on treatment of spinal cord injury
US7060286B2 (en) * 2004-02-13 2006-06-13 Chee-Keung Chung External preparation for skin containing oleaginous substances extracted from Ganoderma lucidum

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110607262A (zh) * 2019-09-25 2019-12-24 君维安(武汉)生命科技有限公司 一种干预炎性肠炎的益生菌组合物及其筛选方法和应用
CN110607262B (zh) * 2019-09-25 2022-03-25 君维安(武汉)生命科技有限公司 一种干预炎性肠炎的益生菌组合物及其筛选方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
US20080038239A1 (en) 2008-02-14
EP1900371A1 (en) 2008-03-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110964655B (zh) 一种乳双歧杆菌bl-99及其应用
JP4455333B2 (ja) プロバイオティック細菌：Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｆｅｒｍｅｎｔｕｍ
CN109789170A (zh) 包含细菌菌株的组合物
CN104450590B (zh) 一株具有抑菌活性的枯草芽孢杆菌及其应用
EP2228067B1 (de) Probiotische Zusammensetzung und deren Verwendung
CN108883127A (zh) 用于预防和治疗阴道病的包含乳酸菌的组合物及其用途
EP4316270A1 (en) Composition capable of facilitating defecation and use thereof
CN103409334B (zh) 抑制阴道炎病原菌之乳酸杆菌及其用途
CN106883995A (zh) 乳酸片球菌jqii-5菌株及其用途
WO2019227418A1 (zh) 一种组合物及其应用
CN106389479B (zh) 凝结芽孢杆菌在制备预防或治疗孤独症制剂中的应用
CN101406489A (zh) 微生态复合菌剂及微生态复合菌剂的制备方法
US20220192246A1 (en) Composition and method for synbiotics supplement containing probiotics, digestive enzymes, prebiotics, yeast, protein, b vitamins, and flavoring agent
CN107854495B (zh) 凝结芽孢杆菌在制备降低血尿酸制剂中的应用
CN103099821B (zh) 一种高剂量地衣芽孢杆菌活菌组合物及其制备方法和用途
Liu et al. Characteristic properties of spray-drying Bifidobacterium adolescentis microcapsules with biosurfactant
Jaiswal et al. A study on the assessment of the antimicrobial susceptibility pattern of microorganisms present in yogurt
CN118406590B (zh) 利用新型干酪乳酪杆菌株中药发酵及其应用
CN101450083B (zh) 酪酸梭菌在制备治疗新生儿喂养不耐受组合物中的应用
CN101199559A (zh) 用于治疗和/或预防肠内细菌失调的方法
Hekmat et al. Microbial properties of probiotic fermented milk supplemented with ginseng extracts
CN101134052A (zh) 酪酸梭菌、凝结芽孢杆菌、双歧杆菌在制备防治口腔溃疡药物中的应用
WO2019227417A1 (zh) 一种组合物及其应用
CN118766972A (zh) 微生物制剂及其制备方法
US20240050493A1 (en) Strains, compositions and methods of use

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Open date: 20080618