CN109700726B - 一种改善皱纹的皮肤外用组合物及化妆品 - Google Patents
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Abstract
本申请提供了一种改善皱纹的皮肤外用组合物及化妆品，涉及化妆品领域。本申请提供的所述改善皱纹的皮肤外用组合物，以重量份数计，包括：榆绿木属提取物14‑23份、石榴属提取物9‑15份、棕榈科提取物4‑8份和玉竹提取物3‑6份。本申请提供的一种化妆品，包括所述的改善皱纹的皮肤外用组合物。本申请提供的改善皱纹的皮肤外用组合物及化妆品，解决了提取物的有效成分之间的相容性问题，通过抑制活性氧自由基形成、抑制MMPs活性、提高胶原蛋白合成来改善肌肤皱纹，抗衰效果更佳明显。
Description
技术领域
本发明涉及化妆品领域，具体而言，涉及一种改善皱纹的皮肤外用组合物及化妆品。
背景技术
真皮是一个致密的纤维及弹性组织的网络，由大量的胶原蛋白和弹性蛋白等纤维粒性蛋白质组成，透明质酸作为液态基质，三者相互共同充盈在细胞外基质中。随着年龄的增长，纤维原细胞中胶原蛋白和弹性蛋白合成减少，同时基质金属蛋白酶(MMPs)降解真皮中的胶原蛋白及弹性蛋白，内源性生化因子自由基也会促进胶原蛋白的交联结合，导致皮肤张力下降，同时自由基还会直接降解透明质酸，使真皮保水能力和支撑力下降。
为了改善肌肤皱纹，人们尝试着从增加肌肤中胶原蛋白、弹性蛋白，抑制MMPs活性、减少体内自由基等不同途径来延缓衰老。随着市场上对于天然、低副作用、效果明显的产品需求越来越高，通过添加具有抗衰老提取物或提取物组合物来代替传统的化学品作为护肤添加剂成为市场的趋势和潮流。在已有的研究中，均是以比较单一的途径来解决肌肤的衰老问题。另外，由于许多植物提取物中实际发挥功效的有效成分含量较低，或者提取物中有效成分与其他组合物相容性有问题，也会导致整个组合物在添加到化妆品中时会功效不佳。
有鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本申请的第一目的在于提供一种改善皱纹的皮肤外用组合物，通过抑制活性氧自由基形成、抑制MMPs活性、提高胶原蛋白合成三种途径协同功效来改善肌肤皱纹，通过合理设计组合物的组成、配比，解决提取物的有效成分之间相容性问题，使抗衰效果更佳明显。
本申请的第二目的在于提供一种化妆品，将所述改善皱纹的皮肤外用组合物作为活性成分应用到化妆品中，为其使用提供广泛的应用场景。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
一种改善皱纹的皮肤外用组合物，以重量份数计，包括：榆绿木属提取物14-23份、石榴属提取物9-15份、棕榈科提取物4-8份和玉竹提取物3-6份。
榆绿木属提取物具有抑制MMPs活性、抑制自由基形成等作用，这些功效作用主要基于榆绿木属的提取物中含有的3,3’-O-二甲基鞣花酸、鞣花酸等有效成分。申请人发现：在使用榆绿木属提取物时，由于提取物的有效成分水溶性问题，使得提取物添加到产品中受限，进而阻碍了其活性成分发挥更好的作用；当榆绿木属提取物与石榴属提取物同时使用时，能提高榆绿木属提取物的水溶性，使其在产品中的应用更广泛、效果更好；棕榈科提取物加入到组合物中，与榆绿木属提取物协同增效，防止胶原蛋白降解；玉竹提取物加入到组合物中，对榆绿木属提取物的抗自由基作用起到增效作用。
在可选的实施方式中，榆绿木属提取物可以取14份、15份、16份、17份、18份、19份、20份、21份、22份、23份及14-23份之间的任一重量份；石榴属提取物可以取9份、10份、11份、12份、13份、14份、15份以及9-15份之间的任一重量份；棕榈科提取物可以取4份、5份、6份、7份、8份以及4-8份之间的任一重量份；玉竹提取物可以取3份、4份、5份、6份以及3-6份之间的任一重量份。
优选地，所述榆绿木属提取物为光滑果榆绿木树皮提取物(ANOGEISSUSLEIOCARPUS BARK EXTRACT)，所述石榴属提取物为石榴皮提取物(PUNICA GRANATUMEXTRACT)，所述棕榈科提取物为蔬食埃塔棕果提取物(EUTERPE OLERACEA FRUITEXTRACT)。
对提取物进行优选，有助于优化和提高组合物本身的性能，使其抑制MMPs活性、抑制自由基形成、提高胶原蛋白合成的作用进一步加强，水溶性更好，协同增效作用更强。
进一步优选地，所述改善皱纹的皮肤外用组合物，以重量份数计，还包括长裙竹荪提取物1-5份。
长裙竹荪提取物(DICTYOPHORA INDUSIATA(MUSHROOM)EXTRACT)富含多糖、蛋白质、氨基酸、维生素和多种矿物质，能够帮助促进胶原蛋白生成。
在可选的实施方式中，长裙竹荪提取物可以取1份、2份、3份、4份、5份以及1-5份之间的任一重量份。
更为优选地，所述的改善皱纹的皮肤外用组合物，以重量份数计，包括：所述光滑果榆绿木树皮提取物18-20份、所述石榴皮提取物11-14份、所述蔬食埃塔棕果提取物5-7份、所述玉竹提取物4-5份、所述长裙竹荪提取物2-4份。
对各成分的用量进一步优化，可以获得效果更好的改善皱纹的皮肤外用组合物。
优选地，所述榆绿木属提取物的制备方法包括以下步骤：
将榆绿木属的树皮粉碎后过筛，然后加入第一溶剂浸泡；将浸泡后的混合物进行超声提取，得到提取液；
将所述提取液过滤得到滤液，在所述滤液中加入第二溶剂，搅拌降温，结晶析出得沉淀物，然后干燥得到所述榆绿木属提取物。
对榆绿木属提取物的提取工艺的优化，可以提高获得的榆绿木属提取物中有效成分的含量，减少有效成分在提取过程中的损失，从而保证组合物的整体抗衰效果。
粉碎之前，优选将榆绿木属的树皮进行清洗、干燥。
优选地，所述过筛使用的筛网目数为70-100目；所述第一溶剂为二甲基亚砜或N-甲基吡咯烷酮，浸泡时间为1-2.5h，料液比为1:10-15g/mL。
对筛网的目数的限定，是为了保证粉碎得到的物料的粒径保持在最佳范围，以利于后续浸泡提取。为了保证提取效果，对第一溶剂进行优选，这种优选是基于发明人对榆绿木属植物树皮的成分的认知以及各成分、各种溶剂的极性的分析，并通过试验获得合适的溶剂、浸泡时间及料液比。最优选的，该第一溶剂为二甲基亚砜。
优选地，所述超声提取的提取温度为70-90℃、超声功率为250-450W、提取时间为15-35min。
提取温度、超声功率和提取时间的选择，一方面是考虑有效成分在溶剂中超声提取时的溶出速率和溶解度，另一方面考虑有效成分在该温度下的稳定性，避免破坏其结构。
优选地，所述第二溶剂为甲醇、乙醇、水中的一种，所述第二溶剂与所述滤液的体积比为1:2-5。
第二溶剂的选择主要考虑有效成分在其内的溶解度以及降温结晶过程的可操作性。
可选地，所述降温的速率为2-4℃/s，所述结晶析出的温度为10-20℃。
对降温速率和结晶析出温度的控制，主要是为了保证提取物的纯度。
一种化妆品，包括所述的改善皱纹的皮肤外用组合物。
由于本申请提供的改善皱纹的皮肤外用组合物中功效性成分水溶性增强，可以作为化妆品活性成分应用到水、精华、乳液、膏霜、面膜、啫喱等多种剂型的产品中。本申请提供的改善皱纹的皮肤外用组合物的重量在整个化妆品中的重量占比优选为0.01-5.2％。如果组合物的含量低于0.01％，将不具有明显的效果，以至于不能作为活性成分；如果组合物的含量高于5.2％，将会带来剂型稳定性方面的问题。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)通过榆绿木属提取物、石榴属提取物、棕榈科提取物和玉竹提取物四种组分的协同作用，使得该组合物在抑制活性氧自由基形成、抑制MMPs活性、提高胶原蛋白合成三种途径分别达到协同增效的作用，多个途径改善肌肤皱纹，抗衰效果明显；
(2)将榆绿木属提取物和石榴属提取物复合使用，提高了榆绿木属提取物中鞣花酸的水溶性，使得组合物的效果更好，应用更广泛；
(3)将改善皱纹的皮肤外用组合物用于化妆品中，可以实现多种形式的应用。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
需要特别说明的是，本申请使用的蔬食埃塔棕果提取物、石榴皮提取物采购自广州瑞誉化工科技有限公司，玉竹提取物采购自莱博药妆技术(上海)股份有限公司，长裙竹荪提取物采购自淼森股份有限公司。除自制之外，榆绿木属提取物采购自广州市奥雪化工有限公司。
实施例1
按照重量份数取榆绿木属提取物14份、石榴属提取物11份、棕榈科提取物4份和玉竹提取物6份，制备得到改善皱纹的皮肤外用组合物。
实施例2
按照重量份数取光滑果榆绿木树皮提取物18份、石榴皮提取物9份、蔬食埃塔棕果提取物8份和玉竹提取物3份，制备得到改善皱纹的皮肤外用组合物。
实施例3
按照重量份数取光滑果榆绿木树皮提取物23份、石榴皮提取物15份、蔬食埃塔棕果提取物5份和玉竹提取物4份，制备得到改善皱纹的皮肤外用组合物。
实施例4
按照重量份数取光滑果榆绿木树皮提取物18份、石榴皮提取物11份、蔬食埃塔棕果提取物7份、玉竹提取物5份和长裙竹荪提取物1份，制备得到改善皱纹的皮肤外用组合物。
实施例5
按照重量份数取光滑果榆绿木树皮提取物20份、石榴皮提取物14份、蔬食埃塔棕果提取物6份、玉竹提取物4份和长裙竹荪提取物5份，制备得到改善皱纹的皮肤外用组合物。
实施例1-5使用的榆绿木属提取物均采购自广州市奥雪化工有限公司。
实施例6
按照重量份数取光滑果榆绿木树皮提取物19份、石榴皮提取物12份、蔬食埃塔棕果提取物6份、玉竹提取物4.5份和长裙竹荪提取物3份，制备得到改善皱纹的皮肤外用组合物。
其中，光滑果榆绿木树皮提取物的制备方法包括以下步骤：
将光滑果榆绿木的树皮粉碎后使用目数为70目的筛网过筛，然后按照料液比1:10g/mL加入第一溶剂二甲基亚砜浸泡1h；
将浸泡后的混合物进行超声提取，得到提取液，提取温度为70℃、超声功率为250W、提取时间为15min；
将提取液过滤得到滤液，在滤液中加入第二溶剂甲醇，第二溶剂与滤液的体积比为1:2；
搅拌降温并控制降温的速率为2℃/s，控制结晶析出的温度为20℃，待结晶析出后过滤、离心得沉淀物，用体积分数为40％的乙醇水溶液清洗沉淀物2次，然后真空干燥得到光滑果榆绿木树皮提取物。
实施例7
按照重量份数取光滑果榆绿木树皮提取物18.5份、石榴皮提取物13份、蔬食埃塔棕果提取物6.5份、玉竹提取物4份和长裙竹荪提取物2份，制备得到改善皱纹的皮肤外用组合物。
其中，光滑果榆绿木树皮提取物的制备方法包括以下步骤：
将光滑果榆绿木的树皮粉碎后使用目数为80目的筛网过筛，然后按照料液比1:12g/mL加入第一溶剂二甲基亚砜浸泡2h；
将浸泡后的混合物进行超声提取，得到提取液，提取温度为80℃、超声功率为300W、提取时间为25min；
将提取液过滤得到滤液，在滤液中加入第二溶剂水，第二溶剂与滤液的体积比为1:4；
搅拌降温并控制降温的速率为3℃/s，控制结晶析出的温度为15℃，待结晶析出后过滤、离心得沉淀物，用体积分数为40％的乙醇水溶液清洗沉淀物2次，然后真空干燥得到光滑果榆绿木树皮提取物。
实施例8
与实施例3中的组合物相同，不同之处在于，光滑果榆绿木属提取物的制备方法如下：
将光滑果榆绿木的树皮洗净、干燥、粉碎后使用目数为100目的筛网过筛，然后按照料液比1:15g/mL加入第一溶剂N-甲基吡咯烷酮浸泡2.5h；
将浸泡后的混合物进行超声提取，得到提取液，提取温度为90℃、超声功率为450W、提取时间为35min；
将提取液过滤得到滤液，在滤液中加入第二溶剂乙醇，第二溶剂与滤液的体积比为1:5；
搅拌降温并控制降温的速率为4℃/s，控制结晶析出的温度为10℃，待结晶析出后过滤、离心得沉淀物，用体积分数为40％的乙醇水溶液清洗沉淀物3次，然后真空干燥得到光滑果榆绿木树皮提取物。
本申请提供的改善皱纹的皮肤外用组合物，可作为护肤品添加剂添加到各种剂型的化妆品中，如水、精华、乳液、膏霜、面膜、啫喱等。
对比例1
一种组合物，主要包含如下重量份组分：光滑果榆绿木树皮提取物14份，蔬食埃塔棕果提取物4份，玉竹提取物6份。
对比例2
一种组合物，主要包含如下重量份组分：光滑果榆绿木树皮提取物14份，石榴皮提取物11份，玉竹提取物6份。
对比例3
一种组合物，主要包含如下重量份组分：光滑果榆绿木树皮提取物14份，石榴皮提取物11份，蔬食埃塔棕果提取物4份。
对实施例1-8及对比例1-3得到的组合物进行性能测试。
测试1：抑制活性氧的产生
为了荧光测量，将100μL人角化细胞HaCaT细胞株加入到96孔黑板的每个孔中，密度为2.0×105细胞/mL，在37℃、5％的二氧化碳的培养箱中培养24h。然后，用实施例1-8、对比例1-3的组合物处理细胞，组合物占总重量的0.05％。细胞连同各实施例和对比例组合物培养24h后，用HCSS(HEPES-缓冲对照盐溶液)洗涤每个孔以清除剩余的介质，以及将100μL的20μM DCFH-DA((2',7'-二氯二氢-荧光黄二醋酸盐)的HCSS溶液添加到每个孔。然后，细胞在37℃、5％的二氧化碳的培养箱中培养20min，再以HCSS清洗。然后，将100μL的HCSS溶液，含有不同实施例和对比例的组合物，添加到每个孔，并用UV-B光(30mJ/cm2)照射每个孔。3h后，每孔的荧光强度用荧光计(Ex＝485nm，Em＝530nm)测量，重复测量6次取平均值。在此，对照组为没有用实施例和对比例提供的组合物进行处理的组。
测量结果如表1所示：
表1活性氧抑制效果
| 试验材料 | 相对于对照组的比例(％) |
| 对照组 | 100 |
| 对照组+紫外线照射 | 186.4 |
| 实施例1+紫外线照射 | 142.1 |
| 实施例2+紫外线照射 | 140.3 |
| 实施例3+紫外线照射 | 139.4 |
| 实施例4+紫外线照射 | 135.6 |
| 实施例5+紫外线照射 | 128.3 |
| 实施例6+紫外线照射 | 114.8 |
| 实施例7+紫外线照射 | 115.6 |
| 实施例8+紫外线照射 | 119.4 |
| 对比例1+紫外线照射 | 165.4 |
| 对比例2+紫外线照射 | 166.2 |
| 对比例3+紫外线照射 | 171.7 |
从上表1的结果可以看出，当细胞经过紫外线照射后，细胞内活性氧的水平与对照组中没有紫外光照射的相比提高到186.4％。当细胞使用本申请提供的改善皱纹的皮肤外用组合物处理时，这种细胞内活性氧含量受限。特别是当加入本发明中制备方法所得的光滑果榆绿木树皮提取物后，整个组合物的活性氧抑制相比于对照组达114.8％。实施例比对比例的组合物在活性氧产生方面有更加明显的抑制作用。
测试2：抑制MMP-1表达的分析
为了评估组合物改善皱纹的效果，通过实验证明组合物能够抑制MMP-1的表达。人体纤维细胞(HS68细胞，购自ATCC(Rockville，MD，美国))以7.5×104细胞/孔的密度置于孔板中，在含10％FBS的DMEM中培育24h，然后用PBS(磷酸缓冲液)清洗，接着往其中加入0.5mlPBS，用紫外线照射(UVB30mJ/cm2)所得培育的细胞来诱导MMP-1的表达。再更换为无血清DMEM后，用实施例和对比例中的组合物(质量浓度1％)处理所得物。用MMP-1ELISA试剂盒测定培育48h后所得的上清液的量。用紫外线处理人真皮成纤维细胞HS68使MMP-1表达增加，然后用每个样品处理所得的HS68细胞，研究MMP-1的表达是否减少。其中，通过维甲酸(RA，5μM，已知其抑制MMP-1的表达)作为阳性对照组。测试结果如表2所示。
表2抑制MMP-1表达的效果
| 试验材料 | 相对于对照组的比例(％) |
| 对照组 | 100 |
| 对照组+紫外线照射 | 194 |
| 实施例1+紫外线照射 | 143 |
| 实施例2+紫外线照射 | 147 |
| 实施例3+紫外线照射 | 140 |
| 实施例4+紫外线照射 | 132 |
| 实施例5+紫外线照射 | 136 |
| 实施例6+紫外线照射 | 122 |
| 实施例7+紫外线照射 | 123 |
| 实施例8+紫外线照射 | 124 |
| 对比例1+紫外线照射 | 178 |
| 对比例2+紫外线照射 | 180 |
| 对比例3+紫外线照射 | 174 |
| RA+紫外线照射 | 118 |
从表2的实验结果可知，实施例1-8中的组合物能够抑制MMP-1表达的效果比对比例更佳明显，特别是当加入本发明制备方法所得的光滑果榆绿木树皮提取物后，本发明抑制MMP-1表达的效果与维甲酸的抑制效果相接近。
测试3：对人皮肤细胞的胶原生物合成的作用
在24孔微量培养板中培养人纤维原细胞，将它们的培养基变为含有质量分数1.5％的实施例和对比例组合物的培养基。培养3天时，每孔加入0.5mL含10％胎牛血清(FBS)的DMEM培养基，再向其中加入10μCi的L[2,3,4,5-3H]-脯氨酸。24h后，使每孔中所含的培养基和细胞倾斜，加入5％三氯乙酸溶液。然后将每个样品分装在2个试管中，向每对试管的一个试管中加入1单位/μL的Ⅰ型胶原酶，在37℃下培养90min；另一个试管在4℃储存。然后每个试管中都加入0.05ml的50％TCA，试管在4℃下放置20min，每个试管均以12000转/分(rpm)离心10min。每组上清液和沉淀都用液态闪烁计数器处理以获得CPM值，然后基于下面的数学公式一求得实施例和对照组的相对胶原蛋白合成值(RCB)。所得结果是相对值，设定不含有组合物的培养基的对照组的值为100。测试结果如表3所示。
公式一：
表3组合物对胶原生物合成的作用
从表3的实验结果可以看出，实施例中的组合物相对于对比例中的组合物对胶原生物合成的促进效果更好。
将实施例1-8及对比例1-3提供的组合物制备成眼霜，该眼霜主要组分(重量百分比)见下表4所示：
表4眼霜成分表
测试4：皮肤弹性测试
1)实验方法：选取年龄为30～45岁，皮肤健康无损伤的女性志愿者40名，男性志愿者20名。随机分成12组，每组5名，分别使用含有实施例1～8及对比例1～3组合物眼霜(见表4)，同时设置不含有实施例和对比例组合物的眼霜对照组。受试者早晚洁面后，取适量(黄豆大小)眼霜均匀涂抹于眼周围，连续使用4周。实验期间，受试者在实验部位不能涂抹任何其它化妆品。
2)试验仪器
皮肤弹性仪CotometerMPA580主机，Reviscometer RV600弹性纤维组织测试探头(德国CK公司)
3)弹性测试方法：使用皮肤弹性仪Cutometer MPA580分别测试第0周和4周的皮肤状态，测试部位为眼尾，测量时探头在同一受测区域重复测量3次，取平均值。测试参数为R2(无负压时皮肤的回弹量Ua与有负压时的最大拉伸量Uf之比)，R2越接近1，皮肤的弹性越好，R2平均变化率＝R2平均变化值/第0周R2值。测试参数R5表示在皮肤测试第一次循环中，皮肤恢复过程的弹性部分与加负压过程的弹性部分之比，该值越接近于1，说明皮肤弹性越好。R5平均变化率＝R5平均变化值/第0周R5值。具体皮肤弹性的测试结果如表5所示。
表5皮肤弹性的测试结果
从表5中数据可以看出，当使用含有实施例1～8组合物中的眼霜一段时间后，皮肤的弹性得到有效的改善。说明本发明组合物具有很好的改善皱纹，延缓衰老的效果。
本发明通过将榆绿木树皮提取物、石榴皮提取物、蔬食埃塔棕果提取物、玉竹提取物合理组配，科学配比，通过四个组分的协同作用，使其在抑制活性氧自由基形成、抑制MMPs活性、提高胶原蛋白合成三种途径分别达到协同增效的作用，多个途径改善肌肤皱纹。本发明将石榴皮提取物与榆绿木树皮提取物科学组配提高了榆绿木树皮提取物中鞣花酸的水溶性，使组合物在产品中应用更广。本发明的提取工艺中，通过选取二甲基亚砜、N-甲基吡咯烷酮作为第一溶剂，并且通过设计合理的第二溶剂及滤液的配比、降温速度和结晶温度等工艺条件，使得榆绿木树皮提取物中有效成分鞣花酸含量更好，当其应用到产品中，抗衰效果更明显。
尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。
Claims (7)
1.一种改善皱纹的皮肤外用组合物，其特征在于，以重量份数计，包括：榆绿木属提取物14-23份、石榴属提取物9-15份、棕榈科提取物4-8份和玉竹提取物3-6份；所述榆绿木属提取物为光滑果榆绿木树皮提取物，所述石榴属提取物为石榴皮提取物，所述棕榈科提取物为蔬食埃塔棕果提取物；
所述榆绿木属提取物的制备方法包括以下步骤：将榆绿木属的树皮粉碎后过筛，然后加入第一溶剂浸泡；将浸泡后的混合物进行超声提取，得到提取液；将所述提取液过滤得到滤液，在所述滤液中加入第二溶剂，搅拌降温，结晶析出后得沉淀物，然后干燥得到所述榆绿木属提取物；
所述第一溶剂为二甲基亚砜或N-甲基吡咯烷酮，浸泡时间为1-2.5h，料液比为1:10-15g/mL；所述第二溶剂为甲醇、乙醇、水中的一种，所述第二溶剂与所述滤液的体积比为1:2-5。
2.根据权利要求1所述的改善皱纹的皮肤外用组合物，其特征在于，以重量份数计，还包括长裙竹荪提取物1-5份。
3.根据权利要求2所述的改善皱纹的皮肤外用组合物，其特征在于，以重量份数计，包括：所述光滑果榆绿木树皮提取物18-20份、所述石榴皮提取物11-14份、所述蔬食埃塔棕果提取物5-7份、所述玉竹提取物4-5份、所述长裙竹荪提取物2-4份。
4.根据权利要求1所述的改善皱纹的皮肤外用组合物，其特征在于，所述过筛使用的筛网目数为70-100目。
5.根据权利要求1所述的改善皱纹的皮肤外用组合物，其特征在于，所述超声提取的提取温度为70-90℃、超声功率为250-450W、提取时间为15-35min。
6.根据权利要求1-5任一项所述的改善皱纹的皮肤外用组合物，其特征在于，所述降温的速率为2-4℃/s，所述结晶析出的温度为10-20℃。
7.一种化妆品，其特征在于，包括权利要求1-6任一项所述的改善皱纹的皮肤外用组合物。
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