CN109115915A - 一种芍药植株不同部位芍药苷含量的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种芍药植株不同部位芍药苷含量的检测方法，包括取材、分离，称取、提取芍药苷、过滤、色谱分离、记录吸收值、制备对照品溶液、确立线性关系、进行精密度试验、代入线性方程和获得芍药苷含量。将未粉碎完全的大颗粒筛除，在提取时能够确保提取的进度一致，过滤是使用0.45um的有机滤膜，将提取的芍药苷溶液中的流动相和里面的不溶性物质和气泡进行过滤，分别选取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0ml的对照品溶液置于10ml量瓶中，配置成梯度浓度，便于芍药苷回归方程的制定。
Description
技术领域
本发明涉及一种检测方法，具体为一种芍药植株不同部位芍药苷含量的检测方法，属于有机化合物检测技术领域。
背景技术
芍药是芍药科芍药属多年生草本植物，在我国已有4000多年的栽培历史，有着很高的观赏价值和药用价值，而芍药苷是白芍、赤芍及牡丹皮等多种常用中药材的主要有效成分，具有显著地镇痛镇静抗惊厥作用，能扩张冠状动脉,增加冠脉流量，对抗急性心肌缺血，降低血压，保护脑缺血，抗血栓形成，抗血小板聚集，抗高血脂，逆转低血压的作用，安徽亳州地区是白芍道地产区，因其产量大，质量好而闻名全国，现白芍的采收以3-5年生为多，部分企业是提取白芍中的芍药苷单体作为原料使用。
目前企业在提取芍药苷时往往是整棵植株进行提取，而芍药植株不同部位所含的芍药苷也有所不同，缺乏对不同部位芍药苷含量的检测，导致提取不充分，造成浪费。
发明内容
本发明的目的就在于为了解决上述问题而提供一种芍药植株不同部位芍药苷含量的检测方法。
本发明通过以下技术方案来实现上述目的：一种芍药植株不同部位芍药苷含量的检测方法，其检测方法包括
步骤A：取材，选取不同生长年份的芍药植株；
步骤B：分离，称取，将芍药植株的各部分花、叶、茎以及根分离，并称取相同重量的分量备用；
步骤C：提取芍药苷，粉碎后过筛，并加入乙醇超声处理30min；
步骤D：过滤，获得续滤液；
步骤E：色谱分离，将续滤液倒入色谱分析的样品小瓶，放入Agilent1200型高效液相色谱仪内，获得色谱图；
步骤F：记录吸收值，将所获得的数值进行记录；
步骤G：制备对照品溶液，精密称取芍药苷对照品，加入甲醇置于量瓶内，制成混合溶液；
步骤H：确立线性关系，取制备好的对照品溶液配置不同浓度，分别进样10ul，记录色谱图，由峰面积对相应的浓度直线回归，得芍药苷回归方程；
步骤I：进行精密度试验，精密吸取对照品溶液10ul，重复进样5次，测定芍药苷色谱峰面积值；
步骤J：代入线性方程，将记录的续滤液吸收值代入对照品溶液得到的芍药苷回归方程；
步骤K：获得芍药苷含量，根据线性方程，分别计算出不同部位芍药苷含量。
优选的，为了使检测时减少误差，所述步骤A中的取材，选取三颗不同生长年份的芍药植株，并使用蒸馏水进行清洗。
优选的，为了将未粉碎完全的大颗粒筛除，所述步骤C中，使用40目筛对粉碎后的芍药各部分进行过筛。
优选的，为了将提取的芍药苷溶液中的流动相和里面的不溶性物质和气泡进行过滤，所述步骤D中，过滤是使用0.45um的有机滤膜。
优选的，为了能够在较短的时间获得较高的分离度，所述步骤E中，色谱分离的条件为色谱柱Shim-pack vp，规格:150x4.6，流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(14:86)，检测波长230nm，柱温22C，进样器20u1，理论塔板数按芍药苷峰计算不低于2000。
优选的，为了便于芍药苷回归方程的制定，所述步骤H中，分别选取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0ml的对照品溶液置于10ml量瓶中。
本发明的有益效果是：该芍药植株不同部位芍药苷含量的检测方法设计合理，步骤A中的取材，选取三颗不同生长年份的芍药植株，并使用蒸馏水进行清洗，能够获得多个样本，使检测时减少误差，步骤C中，使用40目筛对粉碎后的芍药各部分进行过筛，将未粉碎完全的大颗粒筛除，在提取时能够确保提取的进度一致，步骤D中，过滤是使用0.45um的有机滤膜，将提取的芍药苷溶液中的流动相和里面的不溶性物质和气泡进行过滤，防止它们堵住仪器，步骤E中，色谱分离的条件为色谱柱Shim-pack vp，规格:150x4.6，流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(14:86)，检测波长230nm，柱温22C，进样器20u1，理论塔板数按芍药苷峰计算不低于2000，灵敏度较高，能够在较短的时间获得较高的分离度，步骤H中，分别选取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0ml的对照品溶液置于10ml量瓶中，配置成梯度浓度，便于芍药苷回归方程的制定。
附图说明
图1为本发明结构示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
请参阅图1，一种芍药植株不同部位芍药苷含量的检测方法，其检测方法包括
步骤A：取材，选取不同生长年份的芍药植株；
步骤B：分离，称取，将芍药植株的各部分花、叶、茎以及根分离，并称取相同重量的分量备用；
步骤C：提取芍药苷，粉碎后过筛，并加入乙醇超声处理30min；
步骤D：过滤，获得续滤液；
步骤E：色谱分离，将续滤液倒入色谱分析的样品小瓶，放入Agilent1200型高效液相色谱仪内，获得色谱图；
步骤F：记录吸收值，将所获得的数值进行记录；
步骤G：制备对照品溶液，精密称取芍药苷对照品，加入甲醇置于量瓶内，制成混合溶液；
步骤H：确立线性关系，取制备好的对照品溶液配置不同浓度，分别进样10ul，记录色谱图，由峰面积对相应的浓度直线回归，得芍药苷回归方程；
步骤I：进行精密度试验，精密吸取对照品溶液10ul，重复进样5次，测定芍药苷色谱峰面积值；
步骤J：代入线性方程，将记录的续滤液吸收值代入对照品溶液得到的芍药苷回归方程；
步骤K：获得芍药苷含量，根据线性方程，分别计算出不同部位芍药苷含量。
所述步骤A中的取材，选取三颗不同生长年份的芍药植株，并使用蒸馏水进行清洗，能够获得多个样本，使检测时减少误差，所述步骤C中，使用40目筛对粉碎后的芍药各部分进行过筛，将未粉碎完全的大颗粒筛除，在提取时能够确保提取的进度一致，所述步骤D中，过滤是使用0.45um的有机滤膜，将提取的芍药苷溶液中的流动相和里面的不溶性物质和气泡进行过滤，防止它们堵住仪器，所述步骤E中，色谱分离的条件为色谱柱Shim-packvp，规格:150x4.6，流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(14:86)，检测波长230nm，柱温22C，进样器20u1，理论塔板数按芍药苷峰计算不低于2000，灵敏度较高，能够在较短的时间获得较高的分离度，所述步骤H中，分别选取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0ml的对照品溶液置于10ml量瓶中，配置成梯度浓度，便于芍药苷回归方程的制定。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
Claims (6)
1.一种芍药植株不同部位芍药苷含量的检测方法，其特征在于：其检测方法包括
步骤A：取材，选取不同生长年份的芍药植株；
步骤B：分离，称取，将芍药植株的各部分花、叶、茎以及根分离，并称取相同重量的分量备用；
步骤C：提取芍药苷，粉碎后过筛，并加入乙醇超声处理30min；
步骤D：过滤，获得续滤液；
步骤E：色谱分离，将续滤液倒入色谱分析的样品小瓶，放入Agilent1200型高效液相色谱仪内，获得色谱图；
步骤F：记录吸收值，将所获得的数值进行记录；
步骤G：制备对照品溶液，精密称取芍药苷对照品，加入甲醇置于量瓶内，制成混合溶液；
步骤H：确立线性关系，取制备好的对照品溶液配置不同浓度，分别进样10ul，记录色谱图，由峰面积对相应的浓度直线回归，得芍药苷回归方程；
步骤I：进行精密度试验，精密吸取对照品溶液10ul，重复进样5次，测定芍药苷色谱峰面积值；
步骤J：代入线性方程，将记录的续滤液吸收值代入对照品溶液得到的芍药苷回归方程；
步骤K：获得芍药苷含量，根据线性方程，分别计算出不同部位芍药苷含量。
2.根据权利要求1所述的一种芍药植株不同部位芍药苷含量的检测方法，其特征在于：所述步骤A中的取材，选取三颗不同生长年份的芍药植株，并使用蒸馏水进行清洗。
3.根据权利要求1所述的一种芍药植株不同部位芍药苷含量的检测方法，其特征在于：所述步骤C中，使用40目筛对粉碎后的芍药各部分进行过筛。
4.根据权利要求1所述的一种芍药植株不同部位芍药苷含量的检测方法，其特征在于：所述步骤D中，过滤是使用0.45um的有机滤膜。
5.根据权利要求1所述的一种芍药植株不同部位芍药苷含量的检测方法，其特征在于：所述步骤E中，色谱分离的条件为色谱柱Shim-pack vp，规格:150x4.6，流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液(14:86)，检测波长230nm，柱温22C，进样器20u1，理论塔板数按芍药苷峰计算不低于2000。
6.根据权利要求1所述的一种芍药植株不同部位芍药苷含量的检测方法，其特征在于：所述步骤H中，分别选取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0ml的对照品溶液置于10ml量瓶中。
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Legal Events
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|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20190101 |