CN108601817A - 靶向前列腺内给予prx302用于治疗前列腺癌的方法 - Google Patents

Abstract

本申请涉及用于局部化前列腺癌的靶向局灶性治疗方法。

Description

靶向前列腺内给予PRX302用于治疗前列腺癌的方法

相关申请的交叉引用

本申请要求于2016年1月27日提交的美国临时申请号62/287,873的权益，其披露内容以其全文通过引用特此并入(就像在本文中书写一样)。

技术领域

本申请涉及靶向前列腺内给予PRX302用于治疗前列腺癌的方法。

背景技术

前列腺癌是第二最常见的男性恶性肿瘤。被诊断患有前列腺癌的男性人数不断上升是由于预期寿命延长以及目前使用前列腺特异性抗原(PSA)血液检测进行正式和非正式筛查的结果。

然而，自PSA筛查时代开始以来，疾病状况发生了变化，检测到低体积和低风险疾病。因此，过度治疗和治疗相关危害的风险很大。甚至治疗中间疾病的好处也显示出模棱两可。例如，预期寿命至少为10年的男性目前正在接受激进治疗，期望他们的生命会延长。

正在开展了解哪些男性将从治疗中受益。它本质上与癌症负担在临床上具有重要意义并需要治疗有关，并且与可以随着时间监测的疾病的阈值有关。患有局部化前列腺癌的男性当前选择中面临的问题之一是管理的选择处于护理的极端。在一个极端是根治性治疗，其具有显著的治疗相关的发病率。目前，男性可以从根治性治疗中预期以下毒性率：30％-90％的勃起功能障碍、5％-20％的尿失禁和5％-20％的直肠毒性。在护理极端的另一端是积极监测。这已证明中期存活率很高。然而，临床医生和患者对临床随访、PSA血液测试和活检程序(及其相关风险)的负担以及在未寻求到治愈性治疗前患有未经治疗的疾病生活的潜在心理发病率提出了担忧。尽管在积极监测期间没有生化或组织病理学进展，但很大比例的男性选择接受治疗(大多数系列中约10％)，证明了癌症诊断导致的复杂心理影响。

越来越多地使用多参数磁共振成像(mpMRI)以及针对病变的靶向活检意味着现在越来越可能进行更准确的风险分层，并且可以更好地鉴定患有临床上显著疾病的男性。临床上显著的疾病可以通过体积或Gleason分级来定义。在前者中，现在很好地接受Gleason评分为6的病变必须为大约>5mm的最大癌症核心长度(MCCL)。无论MCCL为多少，任何Gleason评分为7或更高通常被认为是显著的。这种范式转变现在允许男性在治疗和积极监测方面做出明智的决定。

发明内容

已经提出了几种治疗前列腺癌的替代方法。人们一直致力于开发一种方法，在局部疾病仍处于前列腺中的情况下积极筛查局部疾病，并且因此可通过明确的局部疗法进行治疗。局部化癌症通常是中度分化并且体积较小。在过去的几十年中，局部化前列腺癌的外科和放射治疗管理得到了改进。

如本文所公开的是用于治疗受试者中的前列腺癌的方法，所述方法包括使受试者的前列腺癌细胞与PRX302的一次性给予接触。

如本文所公开的是用于治疗受试者中的前列腺癌的方法，所述方法包括使受试者的前列腺癌细胞与一剂或多剂PRX302接触。

如本文所述的方法，其中PRX302的一次性给予直接进入受试者的预先确定的、临床上显著的前列腺肿瘤中和周围。

如本文所述的方法，其中PRX302的一次性给予是肿瘤内和/或前列腺内给予。

如本文所述的方法，其中临床上显著的肿瘤是局部化前列腺肿瘤。

如本文所述的方法，其中临床上显著的肿瘤是转移性前列腺肿瘤。

如本文所述的方法，其中PRX302的一次性给予高达5μg/g前列腺。

如本文所述的方法，其中PRX302的一次性给予高达12μg/g前列腺。

如本文所述的方法，其中PRX302的一次性给予大于12μg/g前列腺。

如本文所述的方法，其中PRX302的一次性给予在200μg/g肿瘤和1,000μg/g肿瘤之间。

如本文所述的方法，其中PRX302的一次性给予大于1,000μg/g肿瘤。

如本文所述的方法，其中PRX302的浓度范围为从20μg/mL至170μg/mL。

如本文所述的方法，其中PRX302的浓度大于170μg/mL。

如本文所述的方法，其中PRX302的一次性给予导致前列腺肿瘤体积减少。

如本文所述的方法，其中PRX302的一次性给予导致转移性前列腺肿瘤的减少。

如本文所述的方法，其中PRX302的一次性给予导致转移性前列腺肿瘤的治疗。

如本文所述的方法，其中PRX302的一次性给予导致Gleason模式的减少。

如本文所述的方法，其中PRX302的一次性给予导致最大癌症核心长度或Gleason模式减少。

如本文所述的方法，其中PRX302的一次性给予导致完全肿瘤消融或从临床上显著到非显著的降级，这可以描述为MCCL或Gleason分级的降低。

如本文所述的方法，其中肿瘤消融在再次活检中得到证实。

如本文所述的方法，其中肿瘤消融在mpMRI中得到证实。

附图说明

图1A.表示体积≥0.5mL的病变且存在显性Gleason模式4。

图1B.表示具有体积≥0.2mL和任何Gleason模式4的病变。

图1C.与非常低风险的癌症(并且可能是上皮起源的惰性病变，或‘IDLE’病变)一致。TCCL：总癌症核心长度。MCCL：最大癌症核心长度。

具体实施方式

缩写和术语

提供以下术语和方法的解释以更好的描述本披露并指导本领域普通技术人员实践本披露。当在本文和附带的权利要求中使用时，单数形式“一个/种(a)”或“一个/种(an)”或“所述/该(the)”包括复数指代物，除非上下文明确地指示其他的情况。

除非另外解释，否则在此所使用的所有技术和科学术语具有与本披露所属领域的普通技术人员通常所理解相同的含义。

在一个实施例中，增强是为了改善某物的质量、数量或强度。在一个实施例中，如果受试者在对抗肿瘤方面更有效，则治疗增强受试者减小肿瘤(例如受试者中的前列腺癌)的能力。在另一个实施例中，如果所述药剂在减小肿瘤方面更有效，则治疗增强了药剂减小肿瘤(例如受试者中的前列腺癌)的能力。可以使用本文公开的方法测量这种增强，例如确定肿瘤体积的减小。

治疗有效量是足以实现期望的生物学效应的量，例如有效减小前列腺癌的大小(即体积)、严重性/临床显著性/Gleason分级、副作用和/或转移的量。在一个实例中，治疗有效量是足以减少前列腺癌的症状或影响(例如肿瘤的大小)的量。在特定实例中，治疗有效量是有效减小前列腺肿瘤大小和/或减少前列腺转移至少30％、40％、50％、70％、80％、90％、95％、99％或甚至100％(完全消除肿瘤)的量。

在具体实施例中，治疗有效量是有效减少前列腺肿瘤的PRX302(topsalysin)量和/或由PRX302裂解的前列腺癌细胞的量，例如在给予治疗有效量的受试者(例如患有一种或多种前列腺癌的受试者)中。在其他实施例中，治疗有效量是有效降低前列腺癌转移的风险-即通过降低恶性Gleason分级的PRX302量和/或由PRX302裂解的前列腺癌细胞的量。

在一个实施例中，治疗有效量还包括PRX302的量和/或由PRX302裂解的前列腺癌细胞的量，所述量足以在被治疗的受试者中实现期望的效果。例如，这些可以是改善疾病(例如癌症，如前列腺癌)的体征和/或症状所必需的量。

在另一个实施例中，有效量的PRX302和/或由PRX302裂解的前列腺癌细胞可以在治疗过程中以单剂量或若干剂量给予，例如每天给予。然而，有效量将取决于接受治疗的受试者、所治疗病症的严重程度和类型、以及给药方式。例如，在一个实施例中，治疗有效量的PRX302可以给予重至少20g且肿瘤大小为0.1g-0.8g的前列腺，给予的总剂量高达5μg/g前列腺，高达1,000μg/g肿瘤。在另一个实施例中，治疗有效量的PRX302将在200μg/g肿瘤和1,000μg/g肿瘤之间，这取决于肿瘤的大小、总前列腺体积(PV)和12μg/g前列腺的剂量上限。在又另一个实施例中，治疗有效量的PRX302大于1,000μg/g肿瘤。

在一个实例中，治疗有效剂量是PRX302的剂量，其足以降低给予治疗有效剂量的受试者中的肿瘤细胞体积，例如前列腺癌，从而导致病理状态的消退，或者能缓解由该状态引起的体征或症状。在具体实例中，治疗有效剂量是足以减少前列腺癌的转移的PRX302剂量。

在又另一个实例中，治疗有效剂量是由细胞与PRX302接触产生的细胞裂解物的剂量，该剂量足以降低给予治疗有效剂量的受试者中的肿瘤细胞体积，例如前列腺癌，从而导致病理状态的消退，或者能缓解由该状态引起的体征或症状。在具体实例中，治疗有效剂量是由细胞与PRX302的接触产生的细胞裂解物的剂量，该剂量足以减少前列腺癌的转移。

肿瘤是赘生物。肿瘤包括但不限于实体瘤。

实体瘤的实例(例如肉瘤和癌)包括但不限于纤维肉瘤、粘膜肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、成骨肉瘤和其他肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、尤因氏肿瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、结肠癌、淋巴恶性肿瘤、胰腺癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、肾癌、甲状腺癌、结直肠癌、膀胱癌、胃癌、肝细胞癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌、乳头状腺癌、髓样癌、支气管癌、肾细胞癌、肝癌、胆管癌、绒毛膜癌、维尔姆斯瘤、宫颈癌、睾丸肿瘤、膀胱癌和中枢神经系统(CNS)肿瘤(如胶质瘤、星形细胞瘤、成神经管细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、血管母细胞瘤、听神经瘤、少突神经胶质瘤、脑膜瘤、黑素瘤、神经母细胞瘤和视网膜母细胞瘤)。

某些具体实例的公开并不意味着排除其他实施例。此外，本文描述的任何治疗不一定排除其他治疗，而是可以与其他生物活性剂或治疗方式组合。

基本原理

用于治疗前列腺癌的选择性靶向组织保存方法将允许治疗更紧密地符合癌症的一个或多个区域，同时保存周围的正常前列腺组织。这一概念被称为‘局灶性疗法’，并涵盖一系列治疗方案，所述方案提供组织保留方法，旨在减少对周围解剖结构的治疗损害，并且因此，可能导致生殖泌尿副作用发生率降低，同时保留全腺疗法提供的癌症控制益处。人们越来越关注局灶性疗法作为局部化前列腺癌治疗的潜在作用。

提出的这种前列腺癌治疗的改变反映了几乎所有其他实体器官癌的管理，其中器官保存是功能性保存的基础(乳腺、肾、肝、胰腺、甲状腺)。它也在其他中空器官癌(结肠直肠、膀胱、胃、肺)中进行。为了实现对前列腺的选择性治疗，需要能够精确定位临床上显著的前列腺癌区域的技术。多参数MRI和经会阴和/或经直肠活检(靶向和/或映射)与该要求的最佳属性紧密匹配。还需要可以处理不连续组织区域的技术。在临床实践和研究中已经有几种消融疗法，包括HIFU、冷冻手术、光动力疗法、短距离放射治疗和射频消融以及热激光。

所有疗法都处于不同的发展阶段，与其作为能够局部消融的技术的用途有关。最近，已经开始研究用于评估局灶性治疗设置中的放射疗法技术，例如低剂量率放射性种子短距离放射疗法。早期发表的研究数据已经证明了用于获得早期肿瘤学结果以及保留泌尿生殖功能的有希望的结果。平均而言，冷冻手术和HIFU局灶性消融的研究已显示尿失禁率低于5％以及阳痿率为5％-10％。

疾病检测和定位

有效、选择性、靶向的局灶性消融依赖于疾病的准确定位和靶向，最小化对周围正常组织的治疗。活检和成像技术是mpMRI和靶向经会阴/经直肠活检。使用针对经会阴模板活检的计算机模拟工作开发了在根治性前列腺切除术标本上验证的分类系统(参见图1)。虽然这代表了模板活检的理想设置，但这种分类系统都定义了，阳性活检核心内的癌症最小量准确地代表了显著且无关紧要的病变。

在具有Gleason模式3+3的男性中，我们规定了必须超过的最大癌症核心长度的下限以满足入选标准。入选的下限设定为最大癌症核心长度为5mm。

具有Gleason模式7(3+4或4+3)的男性被认为具有临床上显著的疾病。

PRX302：结构和作用机制

PRX302(topsalysin)，一种新型、一流的研究性成孔蛋白，目前正处于开发之中，用于治疗中度至重度良性前列腺增生(BPH)男性的下尿路症状(LUTS)和治疗患有前列腺癌的男性。PRX302通过直接前列腺内注射给予，并且不需要复杂的设备或大量额外的临床医师培训，部分原因是与常规前列腺活检相似。

PRX302(53kD，476个氨基酸)是使用杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)表达系统的基因工程化重组版本的天然细菌成孔蛋白(前气单胞菌溶素(proaerolysin))。用于将前气单胞菌溶素转化为活性气单胞菌溶素的天然弗林蛋白酶识别和活化序列已经被仅通过PSA识别和活化的肽序列取代。PSA是由上皮前列腺细胞产生的丝氨酸蛋白酶，并且在前列腺、正常精液和前列腺癌细胞周围的细胞外液中具有活性，但任何泄漏到血液循环中的PSA都会通过与丰富的血清蛋白酶抑制剂形成共价复合物而失活。

在PRX302快速结合前列腺细胞表面上大量表达的糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定蛋白后，通过PSA激活PRX302。通过PSA切割释放PRX302的C-末端抑制肽导致气单胞菌溶素蛋白的构象变化，引起寡聚化和快速且不可逆地插入质膜。得到的气单胞菌溶素七聚体孔跨越细胞膜，导致离子渗漏、细胞膨胀、膜完整性快速丧失，并且随后细胞死亡。

实例

实例1

通过多参数MRI和经会阴活检鉴定疾病

多参数MRI(mpMRI)将是非侵入性研究，其中将鉴定经组织学证明的、适合于局灶性消融的临床上显著病变的存在。在邀请参加所述之前，这已经已经进行过了。但是，如果在本研究中计划给药前超过6个月获得mpMRI，则在筛选时将获得另外的mpMRI。

使用1.5Tesla或3Tesla扫描仪进行预治疗和所有治疗后成像。在整个研究中，在相同的磁场强度下对男性进行扫描。T1和T2加权快速自旋回波图像和动态钆后体积采集的完整方案将用于预处理诊断和计划扫描以及PRX302效果的治疗后评估。

实例2

疾病定位：经会阴前列腺活检

在邀请参加该研究之前，已经进行了最初的经会阴活检，并将证明入选本研究的资格。经会阴或经直肠靶向活检需要与mpMRI上看到的病变一致。

在PRX302注射期间，图像配准将用于将mpMRI图像融合到超声图像中，以便更准确地通过基于成像表型的注射来靶向病变。

实例3

患者的研究药物治疗

PRX302(topsalysin)是一种研究性、遗传修饰的成孔蛋白，其中前气单胞菌溶素分子的天然弗林蛋白酶活化位点被仅对酶活性PSA高度特异的氨基酸序列取代。PRX302在没有酶活性PSA存在的情况下保持无活性，并且不会被远离前列腺细胞的PSA激活，例如体循环中的PSA。激活后，PRX302自发地寡聚成七聚体，其不可逆地穿过细胞膜插入，导致细胞死亡。

研究药物作为一次性2mL小瓶提供，其具有0.5mL填充物，经冷冻(-20℃±5℃)，由水溶液中的PRX302药物产品(浓度为300μg/mL)组成。

用于研究药物制备的稀释剂是重组人血清白蛋白(rHSA)，2％重量/体积(w/v)(0.02g/mL)，在20mL小瓶(冷藏(5℃±3℃))中以20mL提供的磷酸盐缓冲盐水中。

实例4

研究设计I

选择了十八名具有组织学上证明的、临床上显著的、局部化、中低风险前列腺癌的男性。这些男性均年龄至少40岁，且预期寿命至少为10岁。血清PSA水平等于或小于15ng/mL。患者具有在mpMRI上的临床上显著的肿瘤/可见病变，其能接近PRX302经会阴注射。患者具有组织学证明的前列腺癌，最大Gleason评分为7。如果Gleason总评分为6，则MCCL必须超过5mm。

对于先前获得的患者，使用融合软件将mpMRI图像映射到实时3D超声图像中，以促进PRX302注射到预先鉴定的、组织学证明的、临床上显著的病变中。

被选择参加该研究的合格男性在全身麻醉下单个病灶经皮下注射最多5mL是20ug/mL PRX302给药溶液(最大剂量为5ug/g前列腺)。

实例5

研究药物给药

将总共5mL(最多300μg)的制备的研究药物给药溶液(PRX302，固定浓度为20μg/mL)经腹膜内注射到1mL等分试样中的预先鉴定的病变中。将使用5mm模板来引导每次1mL注射，最多5次注射，注射到预先鉴定的病变内和周围。

参见表1，基于不同的前列腺体积注射药物的量。

表1.基于不同的前列腺体积注射的研究药物量(μg/g前列腺)。

实例6

研究设计I的结果

在重至少20g且具有肿瘤大小为0.1g-0.8g的前列腺中，给予的总剂量高达5μg/g前列腺和高达1,000μg/g肿瘤。值得注意的是，在对PRX302有阳性反应的3名患者中，定义为在治疗后24周时病变不再具有临床显著性，其针对肿瘤大小标准化的剂量为500μg/g肿瘤-1,000μg/g肿瘤。九名患者为无反应者(即，他们的疾病没有变化或进展缓慢)，并且他们已接受PRX302剂量，通常小于500μg/g肿瘤。其余6名患者被认为是部分反应者(例如，Gleason模式的改善或MCCL的减少)，并且他们接受PRX302剂量，跨越高达1,000μg/g肿瘤的整个范围。因此，数据表明肿瘤的较高局部剂量可能是增加潜在病变消融的一个因素，导致更有利的临床结果。

表2.基线人口统计学。

	平均值	标准差	中值	IQR
					肿瘤大小(cm3)	0.4	0.5	0.3	0.3
PSA水平(ng/ml)	6	1.9	6.3	2.5

表3.Gleason评分。

	基线处患者(N)	基线处患者(％)
			Gleason6(3+3)	18名中有4名	22％
Gleason7(4+3)	18名中有2名	11％
			Gleason7(3+4)	18名中有12名	67％

获得所有18名接受治疗的患者的六个月的活检数据。两名男性完成了其靶标肿瘤的消融。七名男性经历了对治疗的部分反应，无论是最大核心长度的减少还是Gleason模式的减少。九名男性对治疗没有反应。

表4.六个月的活检数据。

R：反应者

P：部分反应者

N：无反应者

实例7

研究设计II

研究设计II中的PRX302剂量将在200μg/g肿瘤和1,000μg/g肿瘤之间，这取决于肿瘤的大小、前列腺总体积(PV)和12μg/g前列腺的上限剂量。对该剂量范围的支持来自研究设计I(实例4-6，在患有组织学证明的、临床上显著的、局部的、中低风险的前列腺癌的18名男性中进行靶向前列腺内注射PRX302)。

所需的PRX302剂量范围为200μg/g肿瘤-1,000μg/g肿瘤，将以6mL的体积递送，总PV为20g或更高。因此，注射到前列腺中的最大体积将≤30％。由于PRX302在前列腺癌和BPH中的先前临床研究中递送的体积量，已经给予了该量的药物产品而没有观察到的临床后遗症(扩大的前列腺更容易受到体积负荷和对下泌尿道的负面影响的影响)。通过引导的经直肠超声(TRUS)将剂量以不小于1mL的等分试样递送到预先鉴定的靶病变中和周围，其旨在直接扩增PRX302对肿瘤细胞的药效学作用。

与研究设计I不同，研究设计II中的PRX302不是人工注入，而是一旦研究人员将针放入预先鉴定的肿瘤中及其周围进行治疗，针头将附接到输液泵或弹簧融合器上，以使研究药物从针尖缓慢扩散。PRX302的这种递送旨在最小化“微注射”的设置，从而允许药物通过致密堆积的肿瘤细胞偏离预期的注射部位。

研究设计II还包括在第一次PRX302剂量后26周可能再次治疗靶病变的选择，其中第二剂PRX302给予符合PRX302药理活性安全性和证据及一些临床效果的患者。具体而言，研究人员认为有资格接受第二剂量的患者将需要不具有由研究药物或给药程序导致的临床上显著的副作用、对第一次PRX302剂量的临床反应和持续存在的临床上显著的肿瘤。因此，完全消融其肿瘤的患者不会进行再次治疗。临床反应的确定不仅会考虑肿瘤大小的变化，还会考虑Gleason评分的变化。已经在猴子中显示了由于第二次前列腺内PRX302剂量造成的对前列腺组织的成功累积损伤，其中两次剂量相等(约14μg/g前列腺)并且相隔8周给予。两种剂量均具有良好全身耐受性，并且在每个给药期结束时前列腺恢复。在该研究方案中，通过间隔26周的剂量使得有更多用于前列腺恢复的时间，这是额外的安全措施。

在研究设计II中，所选择的剂量将提供数据以指导PRX302的最佳有效剂量的选择，用于治疗中低风险前列腺癌的指示中的关键性研究，同时平衡受试者的安全性。对于参加本研究的患者而言潜在的益处与潜在风险被认为是有利的，使得对研究方案中概述的PRX302的功效和安全性的评估对于治疗选择很少且通常面临不令人满意的治疗选择的患者群体而言是合理的。

Claims (22)

1.一种用于治疗对其有需要的受试者的前列腺癌或减小对其有需要的受试者的前列腺癌大小的方法，所述方法包括将一次性剂量的PRX302直接递送至由高强度聚焦超声引导的、预先鉴定的、临床上显著的病变中或周围。

2.一种用于治疗对其有需要的受试者的前列腺癌或减小对其有需要的受试者的前列腺癌大小的方法，所述方法包括将一次或多次剂量的PRX302直接递送至由高强度聚焦超声引导的、预先鉴定的、临床上显著的病变中或周围。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述一次性剂量的PRX302经肿瘤内和/或前列腺内给予。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述一次性剂量的PRX302将在200μg/g肿瘤和1,000μg/g肿瘤之间。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述一次性剂量的PRX302大于1,000μg/g肿瘤。

6.如权利要求1所述的方法，其中所述一次性剂量的PRX302范围为从20μg/mL至170μg/mL。

7.如权利要求1所述的方法，其中所述一次性剂量的PRX302大于170μg/mL。

8.如权利要求1所述的方法，其中所述一次性剂量的PRX302以不小于1mL的等分试样进行递送。

9.如权利要求1所述的方法，其中所述一次性剂量的PRX302高达5μg/g前列腺。

10.如权利要求1所述的方法，其中所述一次性剂量的PRX302高达12μg/g前列腺。

11.如权利要求1所述的方法，其中所述一次性剂量的PRX302大于12μg/g前列腺。

12.如权利要求1所述的方法，其中所述临床上显著的病变是局部化前列腺肿瘤。

13.如权利要求1所述的方法，其中所述临床上显著的病变是转移性前列腺肿瘤。

14.如权利要求1所述的方法，其中所述一次性剂量的PRX302导致前列腺肿瘤体积减小。

15.如权利要求1所述的方法，其中PRX302的一次性给予导致转移性前列腺肿瘤的减少。

16.如权利要求1所述的方法，其中PRX302的一次性给予导致转移性前列腺肿瘤的治疗。

17.如权利要求1所述的方法，其中PRX302的一次性给予导致Gleason模式减少。

18.如权利要求1所述的方法，其中PRX302的一次性给予导致最大癌症核心长度或Gleason模式减少。

19.如权利要求1所述的方法，其中所述高强度聚焦超声经直肠引导。

20.如权利要求1所述的方法，其中PRX302的一次性给予导致完全肿瘤消融。

21.如权利要求20所述的方法，其中肿瘤消融在再次活检中得到证实。

22.如权利要求20所述的方法，其中肿瘤消融在mpMRI中得到证实。