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CN108606979A - 包含六氧化四砷的多晶型物的用于预防或治疗癌的药物组合物 - Google Patents

包含六氧化四砷的多晶型物的用于预防或治疗癌的药物组合物 Download PDF

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CN108606979A
CN108606979A CN201710127742.4A CN201710127742A CN108606979A CN 108606979 A CN108606979 A CN 108606979A CN 201710127742 A CN201710127742 A CN 201710127742A CN 108606979 A CN108606979 A CN 108606979A
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CN
China
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cancer
pharmaceutical composition
preventing
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cancer cell
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CN201710127742.4A
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裴日周
连增林
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Chemas Co Ltd
Original Assignee
Chemas Co Ltd
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Abstract

本发明涉及一种包含99％以上的六氧化四砷的多晶型物作为有效成分的药物组合物a(As4O6‑a)的用于预防或治疗癌的药物组合物，其包含99％以上的具有下述i至iii的特性的六氧化四砷的多晶型物a；i、单位细胞常数：α＝β＝γ＝90°，ii、As‑O键长：iii、O‑As‑O键角：98.36°。本发明的组合物显示出优异的癌细胞增殖抑制效果，从而能够有效地用作抗癌剂。

Description

包含六氧化四砷的多晶型物的用于预防或治疗癌的药物组 合物
技术领域
本发明涉及一种包含六氧化四砷的多晶型物的用于预防或治疗癌的药物组合物。
背景技术
癌被特定为不可抑制的细胞生长，而这种非正常的细胞生长会形成被称作肿瘤(tumor)的细胞块，从而渗透到周围的组织中，严重时还会转移到身体的其它器官。从学术角度来说也被称为新生物(neoplasia)。癌以不同程度的患病率而对身体的所有的组织及脏器产生影响。
癌的种类根据癌细胞最初产生的组织及脏器进行分类，也可以根据癌细胞的形态和产生起源来进行分类。通常，肺癌、胃癌、大肠癌、宫颈癌等是将肿瘤最初产生的脏器为基准来命名的。此外，从产生起源方面来说，大致分为结缔组织性肿瘤、上皮性肿瘤、腺瘤等。在韩国最为多发的癌症为甲状腺癌，其次按照胃癌、大肠癌、肺癌的顺序发病率较高。
对于癌症的治疗可以分为去除固化在脏器上的癌组织或杀灭癌细胞的积极治疗方法和延迟癌细胞的进行，从而使副作用最小化的缓解疗法。在癌症产生的初期的情况下，可以选择使用通过手术、抗癌化学疗法、放射线治疗等来去除肿瘤或利用化学药物及放射线等来杀死癌细胞的治疗方法。但是，对于晚期癌症患者来说，由于积极的治疗方法带来的副作用相对要大，因此可以选择减缓癌细胞的进行，从而降低副作用，提高生活品质的治疗方法。一般情况下，抗癌剂是指属于积极治疗方法的抗癌化学疗法，包括将癌细胞利用毒性物质杀灭的细胞毒性抗癌剂、选择性地作用于癌细胞及组织周边的新生血管的靶标抗癌剂等(正根英，2016).
大部分的抗癌剂是作用于快速生长及分裂的癌细胞，从而显示出效果的药剂，其也会攻击快速生长分裂的部分正常细胞，从而引起副作用，目前为止还没有开发出能够完全治疗癌的治疗剂。因此，关于癌症的治疗，持续需要开发出一种具有优异的抗癌效果的治疗剂。
此外，本发明人已经以下述技术特征获得了韩国授权专利号为第272835号的专利。所述技术特征为，通过提纯技术从含有砷的自然产砷石中精制出的六氧化四砷在动物实验中显示出了抑制癌转移的效果，并且在对子宫癌、膀胱癌、肺癌、上颌窦癌、肾癌等晚期癌症患者进行给药时，具有优异的抗癌治疗效果。
本发明人通过对砷的持续地进行研究的结果为，发现了采用与上述授权专利中所公开的方法不同的新型制备方法能够制备出含有99％以上的六氧化四砷的多晶型物a的六氧化四砷，而包含这种六氧化四砷的组合物能够抑制多种癌的生长，从而在预防或治疗癌方面具有显著的效果，从而完成了本发明。
现有技术文献
专利文献
(专利文献0001)韩国授权专利第272835号(天然化学物质六氧化四砷作为新型抗肿瘤治疗剂的用途及其药物组合物，2000.08.30.授权)
非专利文献
(非专利文献0001)正根英，抗癌化学疗法的介绍及治疗动向，BRIC View动向报告，2016-T20，2016
发明内容
发明要解决的技术问题
本发明的目的在于，提供一种包含六氧化四砷(As4O6)的多晶型物作为有效成分的用于预防或治疗癌的药物组合物。
本发明的另一目的在于，提供一种包含六氧化四砷(As4O6)的多晶型物作为有效成分的用于预防或治疗癌的药物组合物的制备方法。
技术方案
本发明涉及一种包含六氧化四砷(As4O6)的多晶型物的用于预防或治疗癌的药物组合物，涉及一种包含99％以上的六氧化四砷的多晶型物a(As4O6-a)的组合物。
所述组合物可以包含小于1％的六氧化四砷的多晶型物b(As4O6-b)。
所述六氧化四砷的纯度可以为99.9％以上。
所述As4O6-a及As4O6-b可以为具有下述(i)～(iii)的特性的六氧化四砷多晶型物。
表1
所述As4O6-a的特征为，在X-射线粉末衍射分光图中，在光源波长为时，在衍射角2θ10°～50°的范围下，用1°/min的速度(扫描步进0.02°)表示的峰显示为13.84、27.88、32.32、35.3、39.84、42.38、46.34、48.6及49.34的晶型(参见图1)。此外，2θ值13.8和27.9中显示的主峰的比率为1：1.3。
所述As4O6-b的特征为，在X-射线粉末衍射分光图中，在光源波长为时，在衍射角2θ10°～50°的范围下，用1°/min的速度(扫描步进0.02°)表示的峰显示为13.86、27.92、32.36、35.34、39.9、42.44、46.4、48.66及49.4的晶型(参见图1)。此外，2θ值13.8和27.9中显示的主峰的比率为1：2.5。
所述癌可以选自肺癌、食道癌、胃癌、大肠癌、前列腺癌、胰腺癌、宫颈癌、卵巢癌及子宫内膜癌。
下面，对本发明进行更详细的说明。
本发明涉及一种包含六氧化四砷(As4O6)作为有效成分的用于预防或治疗癌的药物组合物，涉及一种包含99％以上的六氧化四砷的多晶型物a(As4O6-a)的药物组合物。
根据本发明的另一实施方式，涉及一种包含六氧化四砷(As4O6)的多晶型物作为有效成分的用于预防或治疗癌的药物组合物的制备方法，本发明的用于预防或治疗癌的药物组合物通过包括将氯化钠在100～800℃下加热后进行冷却的第一工序；将三氧化二砷(As2O3)置于氯化钠上，然后在密闭状态下从100℃加热至1000℃后进行冷却的第二工序；在滤纸中分离结晶化的结晶的第三工序；以及用上述第三工序中获得的结晶来代替第二工序中的三氧化二砷重复实施4～10次第二工序及第三工序，从而获得六氧化四砷结晶的第四工序的制备方法来制得，涉及在上述第四工序中获得的六氧化四砷结晶包含99％以上的六氧化四砷的多晶型物a(As4O6-a)的用于预防或治疗癌的药物组合物的制备方法。
准备高岭土材质的合成反应器，以及在合成反应器的上方能够安装过滤器的夹钳(clamp)，在合成反应器内放置氯化钠进行加热及冷却。在本发明的制备方法中使用氯化钠的原因是，在第二工序中将三氧化二砷放置在氯化钠上进行加热，能够使得热均匀地传递到砷化合物上，有助于砷化合物的升华，为了通过第一工序来去除这种氯化钠的杂质及水分，在100～800℃下加热2～6小时。在第一工序中，对氯化钠进行加热后，在室温下冷却3～10小时。
之后，进行第二工序。即，将三氧化二砷(As2O3)置于氯化钠上，然后在密闭状态下从100℃加热至1000℃后进行冷却。在此，放置三氧化二砷后，在夹钳上安装3～6个能够捕集升华的砷的过滤器(滤纸)，使得各过滤器与过滤器之间的间距为2mm～6mm。此时使用的过滤器优选使用基本重量(basic weight)为70～100g/m2，厚度(thickness)为0.17～0.25mm，过滤速度(filtration speed)为22～30s/100ml，以及保留粒径(retention rate)为5～10μm的过滤器。
安装过滤器之后进行密闭，然后在合成反应器下部从100℃阶段性地升温至1000℃，同时加热3～10小时，使得滤纸的最上部中心部的温度维持在150℃±100℃，使得六氧化四砷通过滤纸的同时被结晶化。然后，在常温下冷却5小时以上，优选冷却5～10小时。
然后，实施第三工序。即，对间隔层叠设置的3～6个滤纸所捕集的白色结晶进行分离。
去除合成反应器中的氯化钠上残留的微量的三氧化二砷后，放上所述捕集的白色结晶，然后以相同的条件重复实施4～10次第二工序及第三工序，最终获得六氧化四砷。对根据本发明的制备方法获得的结晶结构进行确认的结果为，大部分为As4O6-a，As4O6-a为99％以上。
所述癌可以选自肺癌、食道癌、胃癌、大肠癌、前列腺癌、胰腺癌、宫颈癌、卵巢癌及子宫内膜癌。
本发明的包含六氧化四砷的多晶型物的药物组合物能够有效地用于癌的预防或治疗。
本发明的药物组合物可以分别通过常规方法被剂型化为散剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、悬浮液、乳剂、糖浆剂、气雾剂等口服剂型、外用剂、栓剂及灭菌注射溶液形态而使用。所述药物组合物中可以包含的载体、赋形剂及稀释剂可列举如乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯树胶、藻朊酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石粉、硬脂酸镁及矿物油。在进行制剂化时，使用通常使用的填充剂、膨胀剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂等稀释剂或赋形剂而制备。用于口服的固体型制剂包括片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂等，这种固体型制剂在本发明的六氧化四砷中至少混合一种以上的如淀粉、碳酸钙、蔗糖或乳糖、明胶等赋形剂而制得。此外，除了简单的赋形剂之外，也使用硬脂酸镁、滑石粉等润滑剂。作为用于口服的液状制剂相当于悬浮剂、内溶液剂、乳剂、糖浆剂等，除了经常使用的作为简单稀释剂的水、液状石蜡之外，还可以包括多种赋形剂，例如润湿剂、甜味剂、芳香剂、防腐剂等。作为非口服给药的制剂，包括灭菌的水溶液、非水性溶剂、悬浮剂、乳剂、冷冻干燥剂、栓剂。作为非水性溶剂、悬浮剂，可以使用丙二醇、聚乙二醇、橄榄油等植物性油，油酸乙酯等可注射的酯等。作为栓剂的基材，可以使用witepsol、聚乙二醇(macrogol)、吐温(tween)61、可可脂、月桂脂、甘油明胶等。
所述药物组合物的给药量根据受治对象的年龄、性别、体重和所治疗的特定疾病或病理状态、疾病或病理状态的严重程度、给药途径及开药者的判断而有所不同。基于这种因素的给药量的确定在本领域技术人员的水平范围内，通常的给药量的范围在0.01mg/kg/天～约500mg/kg/天。更优选为0.01mg/kg/天～100mg/kg/天。可以一天给药一次，也可以分成数次给药。所述给药量从任何方面来说都不是为了限定本发明的范围。
所述药物组合物可以以多种途径对鼠、家畜、人等哺乳动物施用。施用的所有方式是可以预计的，例如，可以通过口服、直肠或静脉、肌肉、皮下、子宫内粘膜或脑血管内注射来进行给药。
发明的效果
本发明的预防或治疗癌的药物组合物由于包含99％以上的六氧化四砷的多晶型物a，从而具有优异的抗癌效果。
附图说明
图1为As4O6-a及As4O6-b的X-射线粉末衍射分光图。
图2为示出使用实施例1及比较例1～3对肺癌细胞系NCL-H226进行处理后，培养48小时(图2A)及72小时(图2B)后，评价细胞增殖抑制效果的结果的图。
图3为示出使用10μM实施例1对肺癌细胞系NCL-H226及SK-MES-1进行处理后，对根据处理时间的肺癌细胞增殖抑制效果进行评价的结果图。
图4为示出使用10μM实施例1对食道癌细胞系KYSE-150及TE-1进行处理后，对根据处理时间的(图4A)食道癌细胞增殖抑制效果进行评价的结果图，以及使用实施例1及比较例1～3对TE-1进行处理，培养72小时(图4B)后，对细胞增殖抑制效果进行评价的结果图。
图5为示出根据对胃癌细胞系AGS进行处理的实施例1的浓度及处理时间的胃癌细胞的增殖抑制效果的评价结果图(图5A)，以及使用实施例1及比较例1～3对AGS进行处理，培养72小时后，对细胞增殖抑制效果进行评价的结果图(图5B)。
图6为示出使用10μM实施例1对大肠癌细胞系HT29及HCT116进行处理后，对根据处理时间的(图6A)大肠癌细胞的增殖抑制效果进行评价的结果图，以及使用实施例1及比较例1～3对HT29进行处理，培养72小时(图6B)后，对细胞增殖抑制效果进行评价的结果图。
图7为示出使用实施例1及比较例1～3对前列腺癌细胞系PC-3进行处理后，培养48小时(图7A)及72小时(图7B)后，对细胞增殖抑制效果进行评价的结果图。
图8为示出使用实施例1及比较例1～3对胰腺癌细胞系BxPC-3进行处理，培养78小时(图8A)后的细胞增殖抑制效果，以及使用实施例1按照浓度对胰腺癌细胞系BxPC-3及PANC-1进行处理，培养72小时(图8B)后，对细胞增殖抑制效果进行评价的结果图。
图9为示出使用实施例1及比较例1～3对卵巢癌细胞系SK-OV-3(图9A)、宫颈癌细胞系HeLa(图9B)及子宫内膜癌细胞系HEC-1B(图9C)进行处理，然后处理72小时后，对细胞增殖抑制效果进行评价的结果图。
图10为利用IC50值来对实施例1的人肺癌、食道癌、胃癌、大肠癌、前列腺癌、胰腺癌、宫颈癌、卵巢癌及子宫内膜癌细胞系中的细胞增殖抑制程度进行比较的结果图。
具体实施方式
下面，对本发明的优选实施例进行详细说明。但是，本发明不仅限定于在此说明的实施例，也可以具体化为其它形态。是为了使得在此介绍的内容非常完整，向本领域技术人员充分地传递本发明的思想而提供的。
实施例1：本发明的六氧化四砷的制备
准备由高岭土特殊制得的合成反应器(高100mm，直径190mm)和可安装3～6个过滤器的夹钳。在距离合成反应器50mm处设置1次夹钳，在所述1次夹钳的上方，以2～6mm的间隔设置2次～6次夹钳，此时，各个夹钳的规格为直径210mm及厚度10mm。
将400g～600g的称量的粗盐(水分含量10％以下)加入到合成反应器内，以20mm左右的厚度铺展均匀，并压实，于100℃～800℃下缓慢加热3小时，同时进行连续加热，以使得反应器内部的盐表面温度为290±30℃，从而去除水分及杂质，并在室温下冷却5小时。
将作为原料物质的100gAs2O3(纯度98％以上，制备公司YUNNAN WENSHANJINCHIARSENIC CO.,LTD.)放置在合成反应器内的粗盐上，安装3～6个位于合成器上方的夹钳，以设置可捕集升华的砷的过滤器(滤纸)、各个过滤器之间的间隔为2～6mm。此时使用的过滤器优选使用基本重量为70～100g/m2，厚度为0.17～0.25mm，过滤速度为22～30s/100ml，以及保留粒径为5～10μm的过滤器。
利用夹钳固定过滤器，并在合成反应器下部加热，从100℃阶段性地升温至1000℃。首先，加热1小时，以使得合成反应器下部的外部温度为350℃±100℃左右，之后，进行加热，使得合成反应器下部的外部温度为600～650℃，以及700～1000℃，总的加热时间为5～10小时，使得过滤器最上方滤纸的中心部温度维持150℃±100℃后，在常温下冷却5～7小时。在该过程中，放置在合成反应器的盐上的粉末As2O3在合成反应器内部变成气体而上升，由于合成反应器外部的上部温度相对要低，因此变成液体，之后结晶化为固体，从而在过滤器上生成白色结晶体。
将采集的白色结晶体放置在合成反应器的粗盐上再次进行加热和冷却，重复实施4次采集结晶的工序，最终获得12.0g的结晶。对获得的砷化合物结晶的结构进行确认的结果，大部分为As4O6-a，As4O6-a为99％以上，As4O6-b为小于1％。
确认到DSC(示差扫描量热分析)值在升温速度为10℃/min时，As4O6-a在282.67℃的点处显示出了吸热峰(熔点)，As4O6-b在286.77℃的点处显示出了吸热峰(熔点)。
As4O6-a及As4O6-b的粉末X射线衍射分光图示于图1中，As4O6-a及As4O6-b的衍射数据如下述表2所示。
表2
由图1及表2可以确认，具有如下特征：As4O6-a在2θ值为13.8和27.9时显示出的主峰的比例为1：1.3，As4O6-b在2θ值为13.8和27.9时显示出的主峰的比例为1：2.5。对制备的化合物的DSC分析、结构确定及X射线衍射分析按照如下方法实施。
(1)DSC分析
在DSC装置(SDT Q600 V20.9 Build 20)中，使N2以100mL/min的速度流入，并以10℃/min的升温速度将温度升至310℃，同时对20.0mg的试样进行分析。
(2)X射线结晶学
将六氧化四砷(As4O6，MW＝395.6)的单结晶置于玻璃纤维(glass fiber)上，照射X-射线束，并观察是否存在衍射出的照片花纹和衍射数据的体系性，从而确定空间群(space group)，确定单位细胞常数(cell parameter)。衍射强度在10°<2θ<50°的范围下采集。使用结构确定程序(SHELXTL程序)对该数据进行处理，并利用重原子方法(Patterson方法)确认As4O6的结晶结构。
(3)X射线衍射分析法
将获得的结晶粉碎，制成10μm～30μm(-325目)的颗粒，填充到X-射线衍射分析用玻璃框(glass holder)(20mm×16mm×1mm)中后，用载玻片等进行压实后，使其变得平展，以使待测面和支撑面形成平衡，从而准备试样。利用XRD的Cu Kα1 在2θ10°～50°的范围下以1°/min的速度(扫描步进0.02°)绘出结晶的X-射线衍射分光图。
比较例1：六氧化四砷的制备
准备由高岭土特殊制得的合成反应器(高100mm，直径190mm)和3～6个可安装过滤器的夹钳。在距离合成反应器50mm处设置1次夹钳，在所述1次夹钳的上方，以2～6mm为间隔设置2次～6次夹钳，此时，各个夹钳的规格为直径210mm及厚度10mm。
将称量的400g～600g的粗盐(水分含量10％以下)加入到合成反应器中后，将其铺展均匀并压实，使厚度为20mm左右，以100℃～800℃缓慢加热3小时，并连续加热，使得反应器内部的盐表面温度成为290±30℃，以去除水分及杂质，并在室温下冷却5小时。
将100g的作为原料物质的As2O3(纯度98％以上，制备公司YUNNAN WENSHANJINCHIARSENIC CO.,LTD.)放到合成反应器内的粗盐上，在合成器的上方安装3～6个夹钳，使得位于合成器上方的能够捕集升华的砷的过滤器(滤纸)与过滤器之间的间隔为2～6mm。此时使用的过滤器优选使用基本重量为70～100g/m2，厚度为0.17～0.25mm，过滤速度为22～30s/100ml，以及保留粒径为5～10μm的过滤器。
利用夹钳固定过滤器，并在合成反应器的下部施加热量，从100℃阶段性地加热至1,000℃。首先，对合成反应器加热1小时，以使合成反应器下部的外部温度为350℃±100℃，然后，进行加热使得合成反应器的外部温度为600～650℃，以及700～1,000℃，总加热时间为5小时～10小时，以使得过滤器最上方滤纸的中心部温度维持在150℃±100℃，然后在常温下冷却5～7小时。在该过程中，放置在合成反应器中的盐上的As2O3粉末在合成反应器的内部变成气体上升后，由于合成反应器外部的上部温度相对要低，因此会变成液体，之后结晶成固体，从而在过滤器上生成白色结晶体。从过滤器中获取48.5g的结晶。对获取的砷化合物的结晶结构进行确认的结果为，99％以上为As4O6-b，即大部分为As4O6-b。
比较例2～3六氧化四砷的制备
将实施例1(多晶型物As4O6-a为99％以上的组合物)和比较例1(多晶型物As4O6-b为99％以上的组合物)分别以4：1及1：1的比例混合后，分别作为比较例2及比较例3。
实验例1：人癌细胞(cancer cell)增殖抑制效果实验
(1)实验材料及细胞培养
准备胎牛血清(FBS)和细胞培养基(Hyclone公司)，并准备二甲基亚砜(DMSO)和3-(4,5-二甲基-噻唑-2基)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(3-(4,5-Dimethyl-thiazol-2yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide，MTT)(Amresco LLC，USC)。
作为人癌细胞系，从中国科学研究院的上海细胞银行获得作为人肺癌细胞系(human lung cancer cell)的NCL-H226及SK-MES-1、人食道癌细胞系(human esophagealcancer cell)的KYSE-150及TE-1、人胃癌细胞系(human gastric cancer cell)的AGS、人大肠癌细胞系(human colon cancer cell)的HT29及HCT116、人前列腺癌细胞系(humanprostate cancer cell)的PC-3、人胰腺癌细系(human pancreaticcancer cell)的BxPC-3及PANC-1、人宫颈癌细胞系(human cervical cancercell)的SiHa及HeLa、人卵巢癌细胞系(human ovarian cancer cell)的SK-OV-3和人子宫内膜癌细胞系(human endometrialcancer cell)的Ishikawa、HEC-1A及HEC-1B细胞，利用含有10％FBS、50U/mL的青霉素，以及50μg/mL的链霉素的、适合于各个细胞的培养的培养基(RPMI-1640(NCL-H226、TE-1、BxPC-3、Ishikawa)，MEM(SK-MES-1、SiHa、HeLa、HEC-1B)，Ham's F-12K(AGS)，Ham's F-12(PC-3)，McCOY's 5A(HT29、HCT116、SK-OV-3、HEC-1A)，RPMI-1640：Ham's F-12＝1:1(v:v)(KYSE-150)，DMEM(PANC-1))在具有5％CO2及95％的空气和湿气的状态的培养器中培养细胞。培养基每3天更换一次。
(2)细胞增殖实验(MTT实验)
利用MTT实验来评价实施例1及比较例1～比较例3对于细胞增殖的效果。MTT实验是基于相对于MTT存活的细胞生成不溶性深蓝色甲臜反应物的能力的实验。通过使用胰蛋白酶进行处理而使细胞漂浮在培养基中而收集后，以4×103细胞/孔(cells/well)的密度接种到96孔培养皿(Costar，剑桥，马萨诸塞州，美国)中。24小时后，将实施例1及比较例1～比较例3作为处理试样分别添加到包含有含10％FBS的培养基的细胞中，以使实施例1及比较例1～比较例3成为0、0.625、1.25、2.5、5、10、20、40或80μM，并进行培养。此时，实施例1及比较例1～比较例3利用了以5×10-2M的浓度溶解到1M的氢氧化钠中的存储溶液。为了实施对于细胞增殖的MTT实验，从进行试样处理后培养24小时、48小时及72小时的细胞中去除上清液，在每孔(well)中添加20μl的5mg/mL的MTT溶液，然后，为了形成甲瓒结晶，在37℃下孵育4小时。在孵育之后，再次去除上清液，在所有的孔中以每孔100μl的量添加DMSO，使深蓝色结晶完全溶解而混合。在室温下放置15分钟，以使所有的结晶完全溶解，在570nm(A570)波长下利用微型板仪器测定吸光度。
(3)统计分析
将未用试样进行处理的对照组的吸光度值计算为100，并校准(calibration)相对于对照组用试样处理的处理组的吸光度值，并根据下述公式计算细胞增殖抑制率。
细胞增殖抑制率(％)＝((对照组细胞的平均吸光度-处理组细胞的平均吸光度)/对照组细胞的平均吸光度)×100
所有的数据以平均±标准误差(means±SEM)来表现。在进行单因素方差分析(one-way analysis of variance，ANOVA)后，通过新复极差法事后检验(Dunnett’s post-test)来进行多重比较。显著性水平为p＜0.05，各实验重复进行3次。
(4)肺癌细胞系的增殖抑制结果确认
使用实施例1及比较例1～比较例3对人肺癌细胞系NCL-H226及SK-MES-1进行处理，然后培养24小时、48小时及72小时，并进行MTT实验，利用NCL-H226获得的结果示于图2及图3中。
使用实施例1及比较例1～比较例3对NCL-H226进行处理后，培养48小时(图2A)及72小时(图2B)的实验结果中，均确认了与使用比较例1～3进行处理时相比，使用实施例1进行处理时的肺癌细胞系NCL-H226的增殖抑制率高。
此外，使用10μM的实施例1对NCL-H226及SK-MES-1进行处理，对根据处理时间的癌细胞增殖抑制效果进行确认的结果(图3)为，在肺癌细胞系NCL-H226及SK-MES-1中均确认到细胞的增殖抑制率根据处理时间而增加。
(5)食道癌细胞系的增殖抑制结果确认
使用实施例1及比较例1～比较例3对人食道癌细胞系KYSE-150及TE-1进行处理，然后培养24小时、48小时及72小时，并进行MTT实验，并将结果示于图4中。
使用10μM的实施例1对KYSE-150及TE-1进行处理，对根据处理时间的癌细胞增殖抑制效果进行确认的结果(图4A)为，确认了食道癌细胞系TE-1的细胞增殖抑制率根据处理时间而增加，在KYSE-150的情况下，细胞增殖抑制率在24小时及48小时时没有较大差异，但在72小时时，细胞增殖抑制率大大增加。
此外，使用实施例1及比较例1～3对TE-1进行处理后培养72小时(图4B)的实验结果中，均确认了与使用比较例1～3进行处理时相比，使用实施例1进行处理时，对食道癌细胞系TE-1的增殖抑制率高。
(6)胃癌细胞系的增殖抑制结果确认
使用实施例1及比较例1～比较例3对人胃癌细胞系AGS进行处理，然后培养24小时、48小时及72小时，并进行MTT实验，并将结果示于图5中。
使用实施例1对胃癌细胞系AGS根据实施例1的浓度进行处理，对根据处理时间的癌细胞增殖抑制进行确认的结果(图5A)，确认了在各个处理浓度下，细胞增殖抑制根据处理时间而增加，即使仅处理48小时也显示出了高的细胞增殖抑制率。
此外，使用实施例1及比较例1～3对AGS进行处理后培养72小时(图5B)的实验结果中，均确认了与使用比较例1～3进行处理时相比，使用实施例1进行处理时，对胃癌细胞系AGS的增殖抑制率高。
(7)大肠癌细胞系的增殖抑制结果确认
使用实施例1及比较例1～比较例3对人大肠癌细胞系HT29及HCT116进行处理，然后培养24小时、48小时及72小时，并进行MTT实验，并将结果示于图6中。
使用10μM的实施例1对HT29及HCT116进行处理，对根据处理时间的癌细胞增殖抑制效果进行确认的结果(图6A)为，确认了HT29及HCT116细胞的细胞增殖抑制率均根据处理时间而增加。
此外，使用实施例1及比较例1～3对HT29进行处理后培养72小时(图6B)的实验结果中，均确认了与使用比较例1～3进行处理时相比，使用实施例1进行处理时，对大肠癌细胞系HT29的增殖抑制率高。
(8)前列腺癌细胞系的增殖抑制结果确认
使用实施例1及比较例1～比较例3对人前列腺癌细胞系PC-3进行处理，然后培养48小时及72小时，并进行MTT实验，并将结果示于图7中。
使用实施例1及比较例1～3对PC-3进行处理后培养48小时(图7A)及72小时(图7B)的实验结果中，均确认了与使用比较例1～3进行处理时相比，使用实施例1进行处理时，对前列腺癌细胞系PC-3的增殖抑制率高。
(9)胰腺癌细胞系的增殖抑制结果确认
使用实施例1及比较例1～比较例3对人胰腺癌细胞系BxPC-3及PANC-1进行处理，然后培养24小时、48小时及72小时，并进行MTT实验，并将结果示于图8中。
使用实施例1及比较例1～3对BxPC-3进行处理后培养72小时(图8A)的实验结果中，均确认了与使用比较例1～3进行处理时相比，使用实施例1进行处理时，对胰腺癌细胞系BxPC-3的增殖抑制率高。
此外，使用实施例1对胰腺癌细胞系BxPC-3及PANC-1根据实施例1的浓度进行处理后培养72小时(图8B)的实验结果中，在两种细胞中均确认了细胞增殖增值率伴随实施例1的浓度而增加。
(10)卵巢癌、宫颈癌及子宫内膜癌细胞增殖抑制结果确认
使用实施例1及比较例1～比较例3对人卵巢癌细胞系SK-OV-3、人宫颈癌细胞系SiHa及HeLa和人子宫内膜癌细胞系Ishikawa、HEC-1A及HEC-1B进行处理，然后培养72小时，并进行MTT实验，并将结果示于图9中。
使用实施例1及比较例1～比较例3对人卵巢癌细胞系SK-OV-3(图9A)、人宫颈癌细胞系HeLa(图9B)及人子宫内膜癌细胞系HEC-1B(图9C)进行处理，然后培养72小时的实验结果中，均确认了与使用比较例1～3进行处理时相比，使用实施例1进行处理时，对卵巢癌细胞系、宫颈癌细胞系及子宫内膜癌细胞系的增殖抑制率高。
(11)在多种癌细胞系中的细胞增殖抑制活性的比较
在通过上述人肺癌、食道癌、胃癌、大肠癌、前列腺癌、胰腺癌、卵巢癌、宫颈癌及子宫内膜癌细胞的增殖抑制实验获得的结果中，基于使用实施例1处理72小时的结果，分析实施例1的IC50值，并将其结果示于表3及图10中。
表3
由上述表3及图10可知，与癌细胞增殖抑制活性相关的IC50值在所有的癌中均显示出低浓度。
由此可知，实施例1通过在肺癌、食道癌、胃癌、大肠癌、前列腺癌、胰腺癌、宫颈癌、卵巢癌及子宫内膜癌等多种癌中抑制癌细胞的生长来显示出优异的抗癌效果。

Claims (6)

1.一种用于预防或治疗癌的药物组合物，其特征在于，其为包含六氧化四砷(As4O6)的多晶型物作为有效成分的用于预防或治疗癌的药物组合物，其包含99％以上的具有下述i至iii的特性的六氧化四砷的多晶型物a；
i、单位细胞常数：
α＝β＝γ＝90°，
ii、As-O键长：
iii、O-As-O键角：98.36°。
2.根据权利要求1所述的用于预防或治疗癌的药物组合物，其特征在于，所述组合物包含小于1％的具有下述i至iii的特性的六氧化四砷的多晶型物b；
i、单位细胞常数：
α＝β＝γ＝90°，
ii、As-O键长：
iii、O-As-O键角：109.47°。
3.根据权利要求1所述的用于预防或治疗癌的药物组合物，其特征在于，所述六氧化四砷的纯度为99.9％以上。
4.根据权利要求1所述的用于预防或治疗癌的药物组合物，其特征在于，所述多晶型物a在X-射线粉末衍射分光图中，在光源波长为时，在衍射角2θ10°～50°的范围下，用1°/min的速度(扫描步进0.02°)表示的峰显示为13.84、27.88、32.32、35.3、39.84、42.38、46.34、48.6及49.34。
5.根据权利要求2所述的用于预防或治疗癌的药物组合物，其特征在于，所述多晶型物b在X-射线粉末衍射分光图中，在光源波长为时，在衍射角2θ10°～50°的范围下，用1°/min的速度(扫描步进0.02°)表示的峰显示为13.86、27.92、32.36、35.34、39.9、42.44、46.4、48.66及49.4。
6.根据权利要求1～5中任一项所述的用于预防或治疗癌的药物组合物，其特征在于，所述癌选自肺癌、食道癌、胃癌、大肠癌、前列腺癌、胰腺癌、宫颈癌、卵巢癌及子宫内膜癌。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115803090A (zh) * 2020-05-18 2023-03-14 凯马斯株式会社 包含六氧化四砷的用于预防或治疗冠状病毒感染症的药物组合物

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2984771T3 (es) 2012-06-13 2024-10-31 Incyte Holdings Corp Compuestos tricíclicos sustituidos como inhibidores de FGFR
EA035095B1 (ru) 2013-04-19 2020-04-27 Инсайт Холдингс Корпорейшн Бициклические гетероциклы в качестве ингибиторов fgfr
MA41551A (fr) 2015-02-20 2017-12-26 Incyte Corp Hétérocycles bicycliques utilisés en tant qu'inhibiteurs de fgfr4
EA038045B1 (ru) 2015-02-20 2021-06-28 Инсайт Корпорейшн Бициклические гетероциклы в качестве ингибиторов fgfr
AR111960A1 (es) 2017-05-26 2019-09-04 Incyte Corp Formas cristalinas de un inhibidor de fgfr y procesos para su preparación
US11174257B2 (en) 2018-05-04 2021-11-16 Incyte Corporation Salts of an FGFR inhibitor
RS66310B1 (sr) 2018-05-04 2025-01-31 Incyte Corp Čvrsti oblici inhibitora fgfr i procesi za njegovu pripremu
WO2020185532A1 (en) 2019-03-08 2020-09-17 Incyte Corporation Methods of treating cancer with an fgfr inhibitor
WO2021007269A1 (en) 2019-07-09 2021-01-14 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
WO2021067374A1 (en) 2019-10-01 2021-04-08 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
PH12022550892A1 (en) 2019-10-14 2023-05-03 Incyte Corp Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
US11566028B2 (en) 2019-10-16 2023-01-31 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
AU2020395185A1 (en) 2019-12-04 2022-06-02 Incyte Corporation Derivatives of an FGFR inhibitor
EP4069696A1 (en) 2019-12-04 2022-10-12 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
US12012409B2 (en) 2020-01-15 2024-06-18 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
JP2024513575A (ja) 2021-04-12 2024-03-26 インサイト・コーポレイション Ｆｇｆｒ阻害剤及びネクチン－４標的化剤を含む併用療法
TW202313610A (zh) 2021-06-09 2023-04-01 美商英塞特公司 作為ｆｇｆｒ抑制劑之三環雜環
WO2022261160A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
WO2025165158A1 (ko) * 2024-01-29 2025-08-07 배일주 육산화사비소(As4O6)를 포함하는 방광암 예방 또는 치료용 약학 조성물
KR20250118232A (ko) 2024-01-29 2025-08-05 배일주 육산화사비소(As4O6)를 포함하는 방광암 예방 또는 치료용 약학 조성물

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1235124A (zh) * 1998-05-08 1999-11-17 裴一周 作为抗癌治疗剂的天然化学物质六氧化四砷及其药物组合物
CN108079018A (zh) * 2016-11-21 2018-05-29 凯马斯株式会社 用于预防或治疗乳腺癌的药物组合物和用于抑制乳腺癌转移的药物组合物

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE407683T1 (de) 1997-10-15 2008-09-15 Polarx Biopharmaceuticals Inc Pharmazeutische zusammensetzungen enthaltend arsentrioxid zur behandlung von multiplen myelom
IL136051A0 (en) 1997-11-10 2001-05-20 Sloan Kettering Inst Cancer Process for producing arsenic trioxide formulations and methods for treating cancer using arsenic trioxide or melarsoprol
US7261906B2 (en) 1998-05-08 2007-08-28 Ill-Ju Bae Anti-cancer therapy agent of arsenic hexoxide (As4O6) of a natural chemical substance and its pharmaceutical composition
DE19821508C2 (de) 1998-05-13 2002-08-29 Trelleborg Automotive Tech Ct Zweikammer-Motorlager
AU2930501A (en) * 2000-01-07 2001-07-24 Transform Pharmaceuticals, Inc. High-throughput formation, identification, and analysis of diverse solid-forms
KR20020095835A (ko) * 2001-06-16 2002-12-28 배일주 아폽토시스 유도제
TWI296527B (en) 2003-04-23 2008-05-11 Inst Of Nuclear Energy Res Rocaec Radioactive aesenic-containing compounds and their uses in the treatment of tumors
US8945505B2 (en) * 2007-02-02 2015-02-03 Panaphix, Inc. Use of arsenic compounds for treatment of pain and inflammation
KR101572529B1 (ko) * 2008-11-14 2015-11-27 배일주 암 치료를 위한 육산화사비소의 병용요법
HRP20251032T1 (hr) 2015-02-01 2025-10-24 Quetzal Therapeutics, Llc Liofilizirani pripravci s visokim površinskim područjem koji sadrže arsen za oralnu primjenu kod pacijenata
KR101755556B1 (ko) * 2016-11-18 2017-07-07 주식회사 케마스 육산화사비소의 결정다형을 포함하는 뇌암 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 이의 제조방법
KR101844049B1 (ko) 2016-12-05 2018-03-30 주식회사 케마스 육산화사비소의 결정다형을 포함하는 간암 예방 또는 치료용 약학 조성물

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1235124A (zh) * 1998-05-08 1999-11-17 裴一周 作为抗癌治疗剂的天然化学物质六氧化四砷及其药物组合物
CN108079018A (zh) * 2016-11-21 2018-05-29 凯马斯株式会社 用于预防或治疗乳腺癌的药物组合物和用于抑制乳腺癌转移的药物组合物

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SEAN J. GILLIAM ETAL: "Raman spectroscopy of arsenolite: crystalline cubic As4O6", 《JOURNAL OF SOLID STATE CHEMISTRY》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115803090A (zh) * 2020-05-18 2023-03-14 凯马斯株式会社 包含六氧化四砷的用于预防或治疗冠状病毒感染症的药物组合物

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Publication number Publication date
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