CN107667112A

CN107667112A - 新型肽和含有其的组合物

Info

Publication number: CN107667112A
Application number: CN201680030122.2A
Authority: CN
Inventors: 金商在
Original assignee: Jane White Kell Co Ltd
Current assignee: Jane White Kell Co Ltd
Priority date: 2015-05-26
Filing date: 2016-05-25
Publication date: 2018-02-06
Anticipated expiration: 2036-05-25
Also published as: US20180134749A1; KR20180004752A; ES2879641T3; EP3305802A1; US10676507B2; CN107667112B; JP7000161B2; EP3305802B1; JP2018524290A; WO2016190660A1; KR20250073577A; EP3305802A4

Abstract

本发明涉及一种新型肽和含有其的组合物，更具体而言，涉及一种在抗炎、抗纤维化、创伤愈合和抗癌治疗中有效的新型肽和含有其的组合物。根据本发明的新型肽和含有其的组合物表现出缓解、预防或治疗炎症、纤维化、创伤和诸如包括这些症状的癌症等疾病的症状的作用，因此可以提供预防或治疗相关疾病的方法。

Description

新型肽和含有其的组合物

技术领域

本发明涉及一种新型肽和含有其的组合物，更具体而言，涉及一种包含新型肽并且在抗炎、抗纤维化、创伤愈合和抗癌治疗中有效的组合物。

背景技术

已知肿瘤坏死因子(TNF)，特别是TNF-α，是从炎性细胞释放的，因此引起各种细胞毒性、免疫和炎性响应。已知TNF-α参与许多炎性疾病和自身免疫性疾病的发展或延伸，当释放到血液中作用全身时，TNF-α引起严重的败血症和败血性休克。因此，由于TNF-α是广泛参与生物体免疫系统的因子，已经积极开发了抑制TNF-α的药物。TNF-α以非活性形式被生物合成，并被蛋白酶切割而变成活性形式，参与该活化的酶被称为肿瘤坏死因子转化酶(TACE)。因此，用于抑制TACE的物质可以治疗、缓解和预防由TNF-α引起的疾病、病症、异常状况、不良状况和不良主观症状等(KR2011-0060940A)。

纤维化是一种由成纤维细胞导致的细胞外基质的异常形成、积聚和沉积的疾病，并且是指由损伤或炎症引起的胶原基质的异常积累，其改变了各种组织的结构和功能。不管纤维化发生在何处，纤维化的大多数病因包括代替正常组织的胶原基质的过度积累。特别地，发生在肾、肝、肺、心脏、骨或骨髓以及皮肤中的纤维化诱导器官功能失常，并最坏情况下最终导致死亡。成纤维细胞通过在正常状态下产生细胞外基质前体来形成纤维组织。细胞外基质是结缔组织中的细胞之间的材料，以诸如纤连蛋白、层粘连蛋白、软骨素或胶原蛋白等蛋白质的形式存在。

同时，TGF-β在由成纤维细胞、细胞增殖、炎性响应和癌细胞转移引起的细胞外基质的异常形成和积累中起到多种作用，并且已经鉴定了许多细胞信号传导途径和靶。因此，在许多疾病模型中已经对TGF-β进行了研究，纤维化疾病和癌症的研究和药物开发已经被最为积极地进行。据报道，TGF-β是细胞增殖调节因子，其诱导或限制细胞增殖，因此在包括癌症、心脏病和糖尿病的各种疾病的发展中起重要作用，并且也已经报告了其各种生理活性。例如，存在例如下述作用：抑制TGF-β合成的作用(抑制细胞增殖调节因子的产生)、TGF-β拮抗剂作用(干扰TGF受体和信号转导障碍)、血小板衍生的生长因子(PDGF)拮抗剂作用(抑制血管生成诱导因子)、p38MAP激酶抑制剂作用(抑制细胞增殖信号传导酶)和抗炎(抑制TNF-α和MAPK的产生)等。因此，如果能够开发出更直接抑制TGF-β或阻断TGF-β所涉及的信号转导途径并且没有副作用的新药物组合物，则可以预防和治疗由纤维化引起的各种疾病和衰老。

创伤愈合过程主要分为炎症、肉芽发生、上皮形成和纤维组织形成。在炎症中，必要的细胞(成纤维细胞、上皮细胞等)被激活。随后，在肉芽发生中，成纤维细胞沉积胶原蛋白，因此胶原蛋白的量增加，创伤变得成熟。此外，角质形成细胞的变化发生在创伤部位，创伤部位的表皮变厚，并逐渐进入上皮细胞从表皮下面的基底细胞转移到表皮的状态，这被称为上皮形成。随着纤维组织形成通过上皮形成进行，胶原纤维形成胶原基质以填充创伤部位，并且该过程持续进行很长一段时间并终止，由此完成创伤愈合。因此，上皮细胞的增殖和胶原蛋白的产生也可以被认为是创伤愈合和抗衰老作用的重要机制。

发明内容

技术问题

在上述背景下，本发明的发明人开发了新型肽，并且发现这些新型肽通过减少TNF-α和抑制TGF-β而在炎症、抗纤维化、创伤愈合、抗癌治疗等方面是有效的，从而完成了本发明。

本发明的目的在于提供在抗炎、抗纤维化，创伤愈合和抗癌治疗中有效的新型肽，以及包括所述新型肽的用于预防或治疗疾病的组合物。

技术方案

本发明的一个实施方式是提供具有SEQ ID NO:1-12之一所示的氨基酸序列的肽，作为所述肽的序列的片段的肽，与所述肽的序列具有80％以上的序列同源性的肽或其片段，或其药学上可接受的盐。

本发明的一个实施方式是提供一种包含所述肽或其药学上可接受的盐的抗炎组合物。

在一个实施方式中，根据本发明的抗炎组合物可以通过抑制TNF-α而具有抗炎活性。

在一个实施方式中，根据本发明的抗炎组合物预防或治疗选自由以下组成的组中的任一种或多种炎症相关疾病：类风湿性关节炎、银屑病、银屑病性关节炎、特应性皮炎、诸如溃疡性结肠炎、克罗恩氏病等炎性肠病、强直性脊柱炎、多发性硬化症、系统性红斑狼疮(SLE)、慢性阻塞性肺病(COPD)、败血症、内毒素性休克、肝炎和I型糖尿病。

本发明的一个实施方式提供了一种用于预防、治疗或缓解身体器官纤维化的组合物，所述组合物包含所述肽或其药学上可接受的盐。

在一个实施方式中，根据本发明的用于预防、治疗或缓解身体器官纤维化的组合物通过抑制TGF-β信号传导而具有抑制身体器官纤维化的活性。

在一个实施方式中，根据本发明的用于预防、治疗或缓解身体器官纤维化的组合物预防或治疗由选自由癌症、抗癌药物的施用和辐射暴露组成的组中的一种或多种诱导的纤维化。

在一个实施方式中，根据本发明的用于预防、治疗或缓解身体器官纤维化的组合物预防或治疗选自由以下组成的组中的癌症的细胞组织的纤维化：胰腺癌、结肠癌、胃癌、前列腺癌、非小细胞肺癌症、乳腺癌、黑色素瘤和卵巢癌。

本发明的一个实施方式还提供了一种用于治疗或缓解创伤的组合物，所述组合物包含所述肽或其药学上可接受的盐。

在一个实施方式中，根据本发明的用于治疗或缓解创伤的组合物通过诱导胶原蛋白合成而具有创伤愈合作用。

在一个实施方式中，根据本发明的用于治疗或缓解创伤的组合物预防或治疗选自下由以下组成的组中的皮肤疾病：皮肤皱纹、皮肤干燥、皮肤凹陷、表皮灼伤、表皮撕裂伤、表皮创伤和其组合，或者它们的恶化。

在本发明的一个实施方式中，所述组合物可以是用于改善皮肤状况的组合物，其包含一种或多种所述肽或其盐。在一个实施方式中，所述皮肤状况可以是由皮肤老化、皮肤干燥、皮肤弹性降低和皮肤凹陷引起的任一种皮肤皱纹。在一个实施方式中，所述组合物可以是化妆品组合物。

在本发明的一个实施方式中，所述组合物可以是包含一种或多种所述肽或其盐的抗癌组合物。

本发明的一个实施方式还提供了为了选自抗炎、抗纤维化、抗癌治疗、创伤愈合和皮肤状况改善中的一种或多种作用而使用的试剂盒，所述试剂盒包括：包含所述肽或其药学上可接受的盐的组合物；以及指示选自剂量、施用途径、给药次数和组合物的适应症中的一个或多个的说明书。

本发明的一个实施方式案还提供了缓解、预防或治疗炎症、纤维化、癌症或创伤，或者改善皮肤状况的方法，所述方法包括对需要选自抗炎、抗纤维化、抗癌治疗、创伤愈合和皮肤状况的改善中的任一种或多种作用的受试者施用包含所述肽或其药学上可接受的盐的组合物。

本发明的一个实施方式提供了所述肽或其药学上可接受的盐的新用途。在一个实施方式中，所述用途可以是缓解、预防或治疗炎症、纤维化、癌症或创伤。在另一个实施方式中，所述用途可以是皮肤状况改善。在一个实施方式中，皮肤状况可以是由皮肤老化、皮肤干燥、皮肤弹性降低和皮肤凹陷引起的任一种或多种皮肤皱纹。例如，所述用途可以是作为化妆品组合物的用途。

本发明的一个实施方式提供了一种用于缓解、预防或治疗炎症、纤维化、癌症或创伤的肽，或其盐。

有益效果

根据本发明具有SEQ ID NO序列的肽在抗炎、抗纤维化、创伤愈合和抗癌治疗中是有效的，因此预计将提供预防或治疗与炎症、纤维化、创伤和癌症相关的疾病的方法。

附图说明

图1是示出了用各浓度(1μM、5μM和10μM)的Pep-WH-1至Pep-WH-12的每一种新型肽处理的经LPS处理的THP-1细胞系的TNF-α的mRNA表达量的RT-qPCR测量结果的图，其中测量结果表示为抑制率。

图2是示出了对其中通过LPS诱导炎症的THP-1细胞系施用各浓度(1μM、5μM和10μM)的Pep-WH-1至Pep-WH-12的每一种新型肽得到的实验组、未用任何物质处理的对照、和用雌二醇(E2)处理的阳性对照的TNF-α量的ELISA测定结果的图。

图3说明示出了通过western印迹和使用图像分析仪获得的其中HepG2细胞系未经处理的对照、仅用TGF-β处理的纤维化对照、各用TGF-β和SB43152处理的阳性对照及用各浓度(1μM和10μM)的Pep-WH-1至Pep-WH-4新型肽处理的实验组的作为纤维化标志物的磷光体-Smad2/3、Smad2/3和参照基因GAPDH的表达的测量结果的图像(上侧)和图表(下侧)。

图4说明示出了其中HepG2细胞系未经处理的对照、仅用TGF-β处理的纤维化对照、各用TGF-β和SB43152处理的阳性对照及用各浓度(1μM和10μM)的Pep-WH-5至Pep-WH-8的新型肽处理的实验组的作为纤维化标志物的磷光体-Smad2/3、Smad2/3和参照基因GAPDH的表达的测量结果的图像(上侧)和图表(下侧)。

图5说明示出了其中HepG2细胞系未经处理的对照、仅用TGF-β处理的纤维化对照、各用TGF-β和SB43152处理的阳性对照及用各浓度(1μM和10μM)的Pep-WH-9至Pep-WH-12的新型肽处理的实验组的作为纤维化标志物的磷光体-Smad2/3、Smad2/3和参照基因GAPDH的表达的测量结果的图像(上侧)和图表(下侧)。

图6是显示在创伤后立即(第0天)和第1天、第3天、第7天、第10天和第11天获得的未处理的对照和通过诱导SD大鼠的创伤获得的创伤诱导的动物模型的创伤面积的测量结果的图，其中创伤诱导的动物模型在创伤后立即和每两天用50μL浓度为100μg/mL的新型肽Pep-WH-8处理。

图7是显示在创伤后立即(第0天)和第1天、第3天、第7天、第10天和第11天获得的未处理的对照和通过诱导SD大鼠的创伤获得的创伤诱导的动物模型的创伤面积的测量结果的图，其中创伤诱导的动物模型在创伤后立即和每两天用50μL浓度为100μg/mL的新型肽Pep-WH-9处理。

图8是显示在创伤后立即(第0天)和第1天、第3天、第7天、第10天和第11天获得的未处理的对照和通过诱导SD大鼠的创伤获得的创伤诱导的动物模型的创伤面积的测量结果的图，其中创伤诱导的动物模型在创伤后立即和每两天用50μL浓度为100μg/mL的新型肽Pep-WH-11处理。

图9是显示在创伤后立即(第0天)和第1天、第3天、第7天、第10天和第11天获得的未处理的对照和通过诱导SD大鼠的创伤获得的创伤诱导的动物模型的创伤面积的测量结果的图，其中创伤诱导的动物模型在创伤后立即和每两天用50μL浓度为100μg/mL的新型肽Pep-WH-12处理。

图10是显示从未处理的对照和通过在创伤后立即和每两天用50μL浓度为100μg/mL的各种新型肽Pep-WH-8、Pep-WH-9、Pep-WH-11和Pep-WH-12处理作为创伤诱导的动物模型的创伤诱导的SD大鼠的实验组各自获得的在第3天和第5天两组大鼠的Masson三色染色活检组织的胶原蛋白产生程度的平均荧光强度测量结果的图。

具体实施方式

虽然本发明允许各种变化和多种实施方式，但是现在将更详细地描述本发明的具体实施方式。然而，本发明并不旨在将其限制于特定的实践模式，并且应当被理解为在本发明的精神和范围内包括所有改变、等同物和替代物。在本发明的描述中，当认为它们可能会不必要地模糊本发明的实质时，则省略相关技术的某些详细说明。

根据本发明的一个实施方式，提供了具有SEQ ID NO:1至12之一的序列的新型肽。

本说明书公开的肽可以包括与具有SEQ ID NO:1至12中的任一个序列的新型肽具有80％以上序列同源性、85％以上序列同源性、90％以上序列同源性、95％以上序列同源性、96％以上序列同源性、97％以上序列同源性、98％以上序列同源性和99％以上序列同源性的肽。此外，本说明书公开的肽可以包括具有SEQ ID NO:1至12中的任一个序列的肽，以及其中1个以上氨基酸、2个以上氨基酸、3个以上氨基酸、4个以上氨基酸、5个以上氨基酸、6个以上氨基酸或7个以上氨基酸被修饰的肽。

在本发明的一个实施方式中，氨基酸修饰是指肽的物理和化学性质的变化。例如，可以进行氨基酸修饰以改善肽的热稳定性、改变底物特异性和改变最优pH等。

本文使用的术语“氨基酸”不仅包括天然整合到肽中的22种标准氨基酸，而且包括D-异构体和其经修饰的氨基酸。因此，根据本发明的一个实施方式的肽可以是包含D-氨基酸的肽。同时，根据本发明另一实施方式的肽可以包括通过翻译后修饰产生的非标准氨基酸。翻译后修饰的实例包括磷酸化、糖基化、酰化(例如包括乙酰化、肉豆蔻酰化和棕榈酰化)、烷基化、羧化、羟基化、糖化、生物素化、泛素化、化学性质的修饰(例如β-去除脱酰亚胺化和脱酰胺)和结构修饰(例如二硫键的形成)。此外，翻译后修饰还包括当与交联剂偶联以形成肽缀合物时由于化学反应而发生的氨基酸的修饰，例如发生在氨基、羧基或侧链处的氨基酸的修饰。

本说明书中公开的肽可以是从天然存在的来源鉴定和分离的野生型肽。同时，本说明书中公开的肽可以是具有与作为SEQ ID NO:1的片段的肽相比，其中取代、缺失和/或插入一个或多个氨基酸的氨基酸序列的人工变体。野生型多肽以及人工变体中氨基酸的修饰包括保守氨基酸的取代，其对蛋白质的折叠和/或活性没有显著影响。保守性氨基酸取代的实例包括下述氨基酸的取代：碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸和组氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、极性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸和甲硫氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸)和小氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸和苏氨酸)。通常，不改变比活性的氨基酸取代是本领域已知的。最常发生的取代是Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu和Asp/Gly，反之亦然。保守性取代的其他实例示于下表中。

表1

原始氨基酸	示例性残基取代	优选残基取代
			Ala(A)	val；leu；ile	Val
Arg(R)	lys；gln；asn	Lys
			Asn(N)	gln；his；asp，lys；arg	Gln
Asp(D)	glu；asn	Glu
			Cys(C)	ser；ala	Ser
Gln(Q)	asn；glu	Asn
			Glu(E)	asp；gln	Asp
Gly(G)	Ala	Ala
			His(H)	asn；gln；lys；arg	Arg
Ile(I)	leu；val；met；ala；phe；正亮氨酸	Leu
			Leu(L)	正亮氨酸；ile；val；met；ala；phe	Ile
Lys(K)	arg；gln；asn	Arg
			Met(M)	leu；phe；ile	Leu
Phe(F)	leu；val；ile；ala；tyr	Tyr
			Pro(P)	Ala	Ala
Ser(S)	thr	Thr
			Thr(T)	Ser	Ser
Trp(W)	tyr；phe	Tyr
			Tyr(Y)	trp；phe；thr；ser	Phe
Val(V)	ile；leu；met；phe；ala；正亮氨酸	Leu

肽的生物学性质的实质性修饰可以通过选择取代位点而进行，在所述取代位点中，(a)实质性修饰在取代区域中保持多肽的主链结构的作用，例如折叠或螺旋状三维结构，(b)其在靶位点处保持分子的电荷或疏水性的作用，或(c)其保持侧链的体积的作用显著不同。基于侧链的一般性质，将天然残基分类为以下组：

(1)疏水性：正亮氨酸，met，ala，val，leu，ile；

(2)中性亲水性：cys，ser，thr；

(3)酸性：asp，glu；

(4)碱性：asn，gln，his，lys，arg；

(5)影响链取向的残基：gly，pro；and

(6)芳香性：trp，tyr，phe.

非保守性取代可以通过将这些类中任一类的成员更换为另一类的来进行。与维持肽的正确立体结构无关的任何半胱氨酸残基通常被取代为丝氨酸，从而可以改善分子的氧化稳定性并防止不适当的交联。相反地，可以通过向肽添加半胱氨酸键实现其稳定性的改善。

肽的另一种氨基酸变体是其中抗体的糖基化模式改变的那些。本文使用的术语“改变”是指在肽上发现的一个或多个碳水化合物残基的缺失和/或在肽中不存在的一个或多个糖基化位点的添加。

肽中的糖基化通常是N-或O-连接的。本文所用的术语“N-连接”是指碳水化合物残基与天冬酰胺残基的侧链的连接。作为三肽序列，天冬酰胺-X-丝氨酸和天冬酰胺-X-苏氨酸(其中X是除脯氨酸外的任何氨基酸)是用于将碳水化合物残基酶促连接到天冬酰胺侧链的识别序列。因此，当这些三肽序列之一存在于多肽中时，产生潜在的糖基化位点。本文所用的“O-连接”是指将糖N-乙酰半乳糖胺、半乳糖或木糖中的任一种糖连接到羟基氨基酸，最通常地连接到丝氨酸或苏氨酸，但是也可以使用5-羟基脯氨酸或5-羟基赖氨酸。

通过改变氨基酸序列以含有上述一个或多个三肽序列(在N-连接的糖基化位点的情况下)，方便地进行将糖基化位点添加到肽中。这种改变可以通过向初始抗体的序列添加一个或多个丝氨酸或苏氨酸残基或通过将其取代为这些残基(在O-连接的糖基化位点的情况下)来进行。

此外，根据本发明的一个实施方式的具有SEQ ID NO:1至12中任一序列的肽具有低细胞毒性和高体内稳定性。根据本发明的SEQ ID NO:1至12的各肽是如下具有8个氨基酸长度的肽。

SEQ ID NO:1至12的肽显示在下表2中。使用下表2中显示的“名称”以区分一种肽与另一种肽。

表2

本发明的一个实施方式还提供了一种药物组合物，其包含一种或多种选自具有SEQ ID NO:1至12的氨基酸序列的肽作为活性成分。

在根据本发明的一个实施方式的用于预防或治疗与炎症、纤维化、创伤和癌症相关的疾病的药物组合物中，SEQ ID NO:1至12中任一个肽的含量为0.01mg/kg至0.1mg/kg、1mg/kg、10mg/kg和100mg/mL。然而，当显示根据剂量的效果的差异时，可以适当地调整其含量。当各肽的含量在上述范围以内时，不仅足以表现出本发明的期望效果，而且可以满足组合物的稳定性和安全性，并且在相对于成本的效果方面可能是适当的。

根据本发明的一个实施方式的组合物可以应用于所有类型的动物，包括人、犬、鸡、猪、牛、羊、豚鼠和猴。

根据本发明的一个实施方式的药物组合物可以口服、直肠内、经皮、静脉内、肌内、腹膜内、骨髓内、硬膜内或皮下等方式施用。

用于口服施用的制剂可以是片剂、丸剂、软胶囊或硬胶囊、颗粒剂、粉剂、液体制剂或乳剂，但本发明不限于此。用于肠胃外施用的制剂可以是注射剂、滴液剂、洗剂、软膏剂、凝胶剂、乳膏剂、悬浮液、乳剂、栓剂、贴剂或喷雾剂，但本发明不限于此。

根据本发明的一个实施方式的药物组合物根据需要可以包括添加剂，例如稀释剂、赋形剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂、缓冲剂、分散剂、表面活性剂、着色剂、芳香剂、甜味剂等。根据本发明的一个实施方式的药物组合物可以使用本领域通常使用的方法制备。

根据本发明一个实施方式的药物组合物的活性成分可以根据要施用活性成分的受试者的年龄、性别、体重、病理状况和严重程度、施用途径或处方者的决定而变化。基于这些因素的适合剂量的决定可在本领域技术人员已知的范围内，且所述药物组合物的每日剂量例如可以在以下范围内：0.1μg/kg/天至100g/kg/天，特别是10μg/kg/天至10g/kg/天，更特别是100μg/kg/天至1g/kg/天，更特别是500μg/kg/天至100mg/kg/天。当根据剂量显示出不同效果时，日剂量是可以进行适当调整。根据本发明一个实施方式的药物组合物可以每天施用一次至三次，但本发明不限于此。

根据本发明一个实施方式的组合物的制剂不限于特别形式，可以例如是片剂、颗粒剂、粉剂、液体制剂、固体制剂等。每种制剂可由本领域技术人员在没有特别困难的情况下根据使用目的而配制本领域常用的成分以及活性成分，或者适当选择和混合所述成分而制备。此外，当与其他原料同时使用时，所述成分可具有协同效应。

根据本发明的一个实施方式的包含所述肽的组合物可以用作预防或治疗选自以下的一种或多种炎症相关疾病的药物组合物：类风湿性关节炎、银屑病、银屑病性关节炎、特应性皮炎、诸如溃疡性结肠炎、克罗恩氏病等炎性肠病、强直性脊柱炎、多发性硬化症、系统性红斑狼疮(SLE)、慢性阻塞性肺病(COPD)、败血症、内毒素性休克、肝炎和I型糖尿病。

包含根据本发明的一个实施方式的肽的组合物可以用作预防或治疗由选自由癌症、抗癌药物的施用和辐射暴露组成的组中的一种或多种诱导的纤维化。

包含根据本发明的一个实施方式的肽的用于预防或治疗纤维化的药物组合物可以表现出抑制癌症的细胞组织的纤维化的作用，所述癌症选自由以下组成的组：胰腺癌、结肠癌、胃癌、前列腺癌、非小细胞肺癌症、乳腺癌、黑色素瘤和卵巢癌。

包含根据本发明的一个实施方式的肽的组合物可以用作用于预防或治疗和缓解皮肤疾病的药物组合物，所述皮肤疾病选自由以下组成的组：皮肤皱纹、皮肤干燥、皮肤凹陷、表皮灼伤、表皮撕裂伤、表皮创伤及其组合；或者其恶化。

本发明的一个实施方式提供了包含所述肽或其盐的化妆品组合物。所述化妆品组合物包含化妆上或皮肤病学上可接受的介质或基质。化妆品组合物可以是适用于局部应用的任何形式，例如溶液、凝胶、固体、糊状无水产品、通过将油相分散在水相中获得的乳液、通过将水相分散在油相中获得的乳液、多相乳液(multi-emulsion)、悬浮液、微乳液、微胶囊、微粒剂、离子型(脂质体)和非离子型囊泡分散剂、泡沫剂和气溶胶或还包含压缩推进剂的贴片形式。这些制剂可以根据本领域常用的方法制备。

除了上述材料之外，所述化妆品组合物优选包括能够在对主要效果没有不利影响的范围内赋予主要效果的协同效果的其他成分，并且还可以与除活性成分外的其他成分混合，所述其他成分本领域普通技术人员根据其他化妆品组合物的制剂或其使用目的而没有任何不必要的困难进行适当选择。例如，除了活性成分之外，本发明的化妆品组合物可以根据需要包含混合在一般化妆品组合物中的其他成分，其实例包括油脂成分、保湿剂、润肤剂、表面活性剂、有机和无机颜料、有机粉末、紫外线吸收剂、防腐剂、杀菌剂、抗氧化剂、稳定剂、增稠剂、甘油、pH调节剂、醇类、染料、颜料、调味剂、血液循环促进剂、冷却剂、止汗剂、纯净水等。可以包含在化妆品组合物中的其他混合成分不限于上述实例，并且所述成分的混合量可以在不会不利地影响本发明的目的和效果的范围内。

化妆品组合物的制剂没有特别限制，可以根据使用目的适当选择。例如，化妆品组合物可以是选自由以下组成的组中的一种或多种制剂的形式：肥皂型制剂、爽肤水、营养乳液、精华液、营养霜、按摩霜、面膜、凝胶、妆前底霜、粉底、粉、唇膏、贴剂、气雾剂、眼霜、眼部精华、洁面霜、洁面泡沫、洁面水、洗面奶、洗发水、头发调理剂、头发护理剂、头发精华素、头发洗剂、头皮头发滋养剂、头皮精华素、发胶、头发喷雾剂、发膜、身体乳液、身体霜、身体油和身体精华，但是本发明不限于上述实例。

根据本说明书的食品组合物的制剂没有特别限制，但例如可以将食品组合物配制成片剂、颗粒剂、粉剂、诸如饮料等液体、焦糖、凝胶、棒等。各制剂的食品组合物除了活性成分之外，还可以包含本领域普通技术人员根据制剂或使用目的而没有任何困难进行适当选择的混合成分，并且当这些成分以及其他原料同时应用时，可以获得协同效应。

在根据本说明书的食品组合物中，活性成分的剂量可以由本领域普通技术人员确定，并且食品组合物的日剂量可以例如不限于0.1mg/kg/天至5,000mg/kg/天，更特别是50mg/kg/天至500mg/kg/天，并且可以根据如待施用受试者的年龄、健康状况、并发症等各种因素而变化。

根据本说明书的食品组合物可以例如是如口香糖、焦糖产品、糖果、冰淇淋、糕点糖果等各种食品，如酒精饮料等饮料产品，或包括维生素、矿物质等健康功能性食品。

此外，根据本发明的一个实施方式的食品组合物可以包括各种营养补充剂、维生素、矿物质(电解质)、诸如合成香料、天然香料等的香料、着色剂和增强剂(奶酪、巧克力等)、果胶酸及其盐、藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、醇类、碳酸饮料中使用的碳酸化剂等。此外，本发明的功能性食品组合物可以包含用于制备天然果汁、果汁饮料和蔬菜饮料的果肉。这些成分可以单独使用，或可以组合使用。这些添加剂的比例并不重要，相对于100重量份的本发明的组合物，添加剂的量通常为0重量份至20重量份。

提供本说明书中使用的术语仅用于描述特定实施方式，但不意在限制本发明。没有提及名词是单数还是复数的术语并非要限制数量，而是表明所提到的名词以单数或复数形式存在。术语“包含”、“具有”、“包括”被解释为开放式(即，包括但不限于)。

涉及数值范围是避免单独提及该范围内的每个单独值的简单方法，除非另外提出，每个单独数值被整合到本说明书中，如同在此单独提及的那样。所有范围的极限值均在该范围内，并且可以独立地组合。

除非另外提出或语境中明显矛盾，本文提出的所有方法均以适当的顺序进行。除非其被包含在权利要求中，使用任何一个实施方式和所有实施方式或者示例性语言(例如，“诸如”)是用来更完全地描述本发明，而不是限制本发明的范围。本说明书中除了权利要求以外的任何用语均不应该被解释为本发明实践的必要条件。除非另外限定，此处使用的科技术语具有本发明所属领域的技术人员通常理解的意义。

本发明示例性实施方式包括发明人所知的实施本发明的最佳实施方式。示例性实施方式的变化形式在本领域技术人员阅读上述说明后可变得显而易见。本发明的发明人希望本领域技术人员可以充分利用所述变化形式，并且期望本发明可以以与本文所述不同的方式进行实施。因此，本发明在专利法允许的情况下包括所附权利要求中所提及的本发明主题的等同形式和全部修改。此外，上述成分的全部可能组合都包括在本发明的所有可能的变化形式之内，除非另有明确以相反方式陈述或与明确与上下文相悖。虽然已参照其示例性实施方式详细描述了本发明，本领域技术人员可以清楚知晓，在不脱离本发明的精神和后文权利要求所限定的范围的情况下，可以进行形式和细节方面的各种变化。

实施例

在下文中，将参考实施例和实验例更详细地描述本发明的构造和效果。然而，出于说明的目的提供的这些实施例和实验例仅用于帮助理解本发明，但是本发明的精神和范围不限于此。

实施例1：新型肽的合成

SEQ ID NO:1至12的新型肽(以下称为“Pep-WH-1至Pep-WH-12”)根据常规已知的固相肽合成方法制备。具体地，通过使用ASP48S(Peptron，Inc.，Daejeon，Korea)的Fmoc固相肽合成(SPPS)从C末端逐个偶联氨基酸来合成肽。使用其中各肽的C末端处的第一个氨基酸连接到树脂的复合物。例如：

NH₂-Lys(Boc)-2-氯-三苯甲基树脂

NH₂-Ala-2-氯-三苯甲基树脂

NH₂-Arg(Pbf)-2-氯-三苯甲基树脂

用于肽合成的所有氨基酸通过Trt、Boc、叔丁酯(t-Bu)、2,2,4,6,7-五甲基二氢苯并呋喃-5-磺酰基(Pbf)等保护，而在N端通过Fmoc保护，在酸中移除所有残基。例如，所述氨基酸如下：

Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Met-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Ahx-OH、Fmoc-Gln-OH和Trt-巯基乙酸。

使用2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基胺(aminium)六氟磷酸酯(HBTU)/N-羟基苯并三唑(HOBt)]/4-甲基吗啉(NMM)作为偶联试剂。使用在DMF中的20％的哌啶移除Fmoc。使用了切割混合物[三氟乙酸(TFA)/三异丙基硅烷(TIS)/乙二硫醇(EDT)/H₂O＝92.5/2.5/2.5/2.5]，将每个合成的肽从树脂上分离并且移除残基的保护基。

通过重复下述过程合成每个肽：使对应的氨基酸与结合有起始氨基酸(其上结合有保护基)的固相载体反应，然后用溶剂冲洗，然后脱保护。将所合成的肽从树脂释放，利用高效液相色谱(HPLC)纯化，然后通过LC/MS鉴定是否合成所述肽，然后冻干。

作为对用于本实施方式的肽进行HPLC的结果，该肽的纯度为95％以上。

现在如下详细描述肽Pep-WH-1的制备过程。

1)偶联

将8当量的保护氨基酸与作为偶联试剂的HBTU(8当量)/HOBt(8当量)/NMM(16当量)溶于DMF中，并添加到NH₂-A-2-氯-三苯甲基树脂中，然后在室温下使其进行反应2小时，反应产物依次用DMF、MeOH和DMF冲洗。

2)Fmoc去保护

将在DMF中的20％的哌啶添加到所得产物中，并在室温下使其进行反应5分钟，进行2次，然后依次用DMF、MeOH和DMF冲洗。

3)重复1)和2)的反应来制造作为肽的主链的NH₂-A-L-S(tBu)-S(tBu)-R(Pbf)-L-R(Pbf)-A-2-氯-三苯甲基树脂。

4)切割：将完成合成的肽用切割混合物处理，以从树脂上分离肽。

5)将冷却的乙醚添加至所得混合物中，然后将所得混合物离心以使所得肽沉淀。

6)用Prep HPLC分离和纯化上述过程中得到的粗肽。使用Vydac EverestC18柱(250mm×22mm，10μm)作为柱。作为洗脱液，使用含有0.1％三氟乙酸的水-乙腈线性梯度(10％至75％(v/v)的乙腈)。

7)通过LC/MS(Agilent HP1100系列)确认分离的肽是否被合成为具有期望的序列。

8)通过分析HPLC确认分子量已被鉴定的肽是否被分离并纯化至95％纯度以上，随后冻干，以制备作为白色粉末的Pep-WH-1。

使用与制备肽Pep-WH-1所用方法相同的方法制备Pep-WH-2至Pep-WH-12的11个肽，不同之处在于Pep-WH-1的主链被每个肽的相应序列取代。

实施例2：新型肽的抗炎活性

为了验证各新型肽Pep-WH-1至Pep-WH-12的抗炎活性，使用RT-qPCR和ELISA对各肽测量已知是TNF-α的表达程度，TNF-α在其中已经用脂多糖(LPS)诱导炎症的细胞系中显示炎症活性。

实验试剂和材料的制备

使用作为人急性单核细胞白血病细胞系的THP-1细胞(American Type CultureCollection(ATCC)，Manassas，VA，USA)进行实验。在96孔板中，将THP-1细胞悬浮于RPMI1640培养基至每孔1×10⁵个细胞的浓度并温育24小时。此时，将THP-1细胞用佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(PMA)(Sigma)处理以分化成巨噬细胞。

将脂多糖(LPS，Sigma)溶解在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中，并将PMA溶解在二甲基亚砜(DMSO)中。

根据实施例1中使用的合成方法，在Peptron(Daejeon，Korea)中合成肽Pep-WH-1至Pep-WH-12，并使用其。

实验方法

RT-qPCR测试方法如下。将THP-1细胞以2×10⁶个细胞/孔的浓度接种于6孔板，用100ng/mL的PMA处理24小时以分化为巨噬细胞。除去培养基，用无血清培养基(SFM)洗涤分化的THP-1细胞两次，然后用各浓度为1μM、5μM和10μM的10ng/mLLPS处理各新型肽6个小时。使用Plus Mini试剂盒(Qiagen)提取RNA，对提取的RNA进行定量，然后使用逆转录系统(Promega)进行cDNA合成。使用CFX96实时系统(Bio-rad)进行RT-qPCR以分析TNF-α的mRNA表达，并使用GAPDH作为参照基因。在以下条件下进行40个循环的PCR：95℃15秒，55℃30秒和72℃30秒，并且使用的引物序列示于下表3中。

表3

ELISA测试方法如下。将从ATCC分发的单核细胞系THP-1在P3阶段进行继代培养和制备，将细胞系分配到孔板的孔中并用PMA处理以分化成巨噬细胞。用LPS处理分化的细胞以诱导炎性反应(诱导TNF-α的产生)，并用每种浓度(1μM、5μM和10μM)的各新型肽处理，采用ELISA测定TNF-α的含量。计算非炎症组和完全炎症组的相对值，并将雌激素(E2)设定为阳性对照，将未用新型肽处理的未处理细胞系设定为一般对照以进行比较分析。已知E2是抑制THP-1中TNF-α产生的类固醇。

统计处理

所有数据表示为平均值±平均值的标准误差(S.E.M.)，并且通过方差分析检验进行统计学处理。使用SigmaStat统计程序并使用Kruskal-Wallis检验和Mann-Whitney U-检验进行统计分析。此外，使用Tukey检验进行组间比较，将小于0.05的p值判定为统计学显著的。

实验结果和分析

通过实验方法测量的结果如下。

作为通过RT-qPCR比较TNF-α的mRNA抑制率，以及当用各浓度(1μM、5μM和10μM)的各新型肽处理已经通过LPS诱导炎症反应的THP-1细胞时，通过TNF-α的mRNA的表达量来表示各肽的抗炎活性的结果，所有肽在10μM显示50％以上的浓度依赖性抗炎活性，并且Pep-WH-11在1μM时显示出最高的抗炎活性，1μM是最低的处理浓度(参见图1)。

通过ELISA确认THP-1细胞抑制TNF-α产生的能力来评价新型肽的抗炎活性的结果，与未用新型肽处理的未处理的对照相比，在用0.5μM浓度的新型肽处理的所有情况中表现出TNF-α的低表达程度，即炎症诱导活性(参见图2)。当与用作阳性对照的E2相比，在所有浓度下，在新型肽Pep-WH-8、Pep-WH-9、Pep-WH-11和Pep-WH-12中显示出较低的炎症诱导活性。

通过这两个实验的结果，可以确认，根据本发明的新型肽显示出抗炎活性，这通过TNF-α的抑制得以确认。已知抑制TNF-α的实验是验证总体炎症抑制作用的最基本的实验，通过该实验确认本发明的新型肽可具有总体抗炎作用。

实施例3：新型肽的抗纤维化活性

为了确认新型肽Pep-WH-1至Pep-WH-12对TGF-β(其被认为是纤维化的主要原因)的抑制作用，如下进行确认HepG2细胞系中的TGF-β信号传导抑制作用的实验。

实验试剂和材料的制备

本实验中使用的试剂和材料如下。将粉末型新型肽溶解于0.2μm过滤的无菌水中，然后在-70℃下以等分试样的形式储存，并且在使用时将所储存的肽解冻。使用HepG2细胞系(ATCC HB-8065；美国典型培养物保藏中心)，并将重组人TGF-β溶解在4mM HCl中以制备10μg/mL储备液。在制备成10mM储备液后使用SB431542(Sigma)作为阳性对照。

细胞系的制备

将2×10⁶个HepG2细胞(ATCC HB-8065)接种在60mm培养皿中，然后在CO₂温育器中培养16小时。随后，将培养基换成无血清培养基(SFM)并进一步培养24小时。之后，用10ng/mL的TGF-β1代替培养基，用各浓度(1μM和10μM)的各新型肽处理HepG2细胞，然后培养72小时。用各新型肽处理的组在37℃的CO₂温育器中进一步培养1小时。

实验方法

为了测量新型肽的抗纤维化活性，通过western印迹进行测量TGF-β信号传导抑制程度的实验，实验方法的详细描述如下。

将用各肽处理过的细胞用PBS冲洗2次，使用细胞刮刀收集到1.5mL的EP管中，使用离心分离机(1,000rpm，4℃，2分钟)进行离心以去除上清液，然后将各自100μL加入到经RIPA处理的HepG2细胞中。将HepG2细胞在冰上温育40分钟，然后每10分钟振荡进行混合(vertex，预冷至4℃的微量离心机)，并使用1mL注射器将各样品混合40次至50次。最后，将所得混合物以13,000rpm离心15分钟，使用所得上清液。

对30μg蛋白进行8％的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)以转移到聚偏二氟乙烯(PVDF)膜(Millipore)上。PVDF膜用5％脱脂牛奶封闭并与特定的一抗温育。用于本实验的抗体如下：Smad 2/3(60，52kDa，5％BSA 1:1000，#3102，Cellsignaling)、pSmad2/3(cell signaling#3102)和GAPDH(37kDa，5％BSA 1:1000，#2118，Cell signaling)。随后，用含有0.1％Tween-20(TBST)的Tris缓冲盐水冲洗PVDF膜，然后与HRP缀合的抗兔抗体(由Jackson ImmunoResearch Laboratories,Inc.制造)反应。之后，在其上进行ECL检测(Amersham Pharmacia Biotech)，并使用图像分析仪(GE Healthcare，ImageQuant LAS 4000)分析所获得的图像。

为了测量TGF-β抑制作用，将pSmad2/3和Smad2/3用作TGF-β信号传导活性标志物，并将GAPDH用作电泳的参照组。使用当TGF-β受到抑制时以高浓度表达的TGF-β信号传导活性标记物。

统计学处理

所有数据均以平均值±S.E.M.表示，统计学处理通过方差分析检验进行。使用SigmaStat统计程序并使用Kruskal-Wallis检验和Mann-Whitney U-检验进行统计分析。另外，使用Tukey检验进行组间比较，将小于0.05的p值判定为统计学显著的。

实验结果和分析

通过实验方法测量的结果如下。

作为通过western印迹测量TGF-β被新型肽抑制的程度的结果，与仅用TGF-β处理的未处理的纤维化诱导组相比，在用浓度为10μM的新型肽处理的所有情况下，表现出随着TGF-β抑制的增加，标志物的表达程度高(参见图3至5)。从该结果可以确认，通过利用新型肽的处理抑制了TGF-β。此外，与用10μM的SB431542处理的阳性对照的情况相比，用10μM的Pep-WH-3、Pep-WH-4、Pep-WH-5、Pep-WH-6、Pep-WH-7和Pep-WH-12处理的组均表现出较高的TGF-β抑制活性。

从实验结果可以确认，根据本发明的新型肽显示出抗纤维化活性，其通过抑制TGF-β而显示。已知抑制TGF-β的实验是广泛使用的抗纤维化活性实验，通过该实验确认本发明的新型肽可以具有抗纤维化活性作用。

实施例4：新型肽的创伤愈合活性

为确认新型肽Pep-WH-8、Pep-WH-9、Pep-WH-11和Pep-WH-1的创伤愈合效果，用每种新型肽处理创伤诱导的动物模型，然后如下进行实验以确认每种肽在产生减小创伤尺寸所需的胶原蛋白中和在创伤愈合过程中的作用。

实验动物的制备

选择Sprague-Dawley(SD)大鼠，因为该鼠具有薄的皮肤，并且难以在鼠中均匀地诱导创伤。为了排除由激素改变引起的影响，选择雄性SD大鼠，购买6周龄的SD大鼠并适应大约1周。然而，为了更精确地获得实验结果，在6周龄SD大鼠变成11周龄后进行实验。由于实验动物对嗅觉响应敏感并且可能攻击其他个体，所以在创伤形成之后将个体彼此分离，诸如每只笼子1只大鼠，并观察。

实验方法

使用下列方法以在制备的实验动物中形成全层切除(full-thicknessexcision)。为了诱导麻醉，将10mg/kg(体重)盐酸赛拉嗪和100mg/kg(体重)盐酸氯胺酮的混合物腹腔内注射到实验动物中，或者将实验动物通过呼吸麻醉系统。麻醉诱导后，将俯卧位实验动物背部的毛发剃干净，背部用聚维酮碘(betadine)消毒，然后使用16mm的冲头在距离背部最高部分至左右两侧约1cm的距离处进行一次圆形全层切除。未在创伤部位单独敷料。

将全层切除诱导的动物模型分成以下组，并且在切除形成后立即和每两天将药物应用于每组。对于应用方法，将材料调整至1mg/mL的浓度，然后即将在实验前将材料稀释10倍至100μg/mL的浓度。在每次切除上滴加50μL材料。

1)对照：每次切除滴加50μL生理盐水

2)实验组1：每次切除滴加50μL量的0.1mg/mL的Pep-WH-8

3)实验组2：每次切除滴加50μL量的0.1mg/mL的Pep-WH-9

4)实验组3：每次切除滴加50μL量的0.1mg/mL的Pep-WH-11

5)实验组4：每次切除滴加50μL量的0.1mg/mL的Pep-WH-12

在切除形成后立即，以及在其后第2天、第4天、第7天、第9天、第11天和第14天后观察各组并照相。当创伤完全愈合时，记录创伤愈合日期。一般来说，大约在第9天，开始出现创伤尺寸减小到初始创伤的5％的个体。对创伤部位和尺子进行照相，然后使用Image J程序(NIH，USA)分析所获得的图像以计算创伤面积，并将创伤面积彼此进行比较。

在形成切除后的第3天和第5天，通过提取对照的两个个体和每个实验组的两个个体中每一个的背部的相对侧的创伤部位进行胶原蛋白形成的活检。为了比较是否合成了胶原蛋白，将各组进行Masson三色染色，并获得平均荧光强度测量值。

实验结果和分析

当将各实验组与对照进行比较时，Pep-WH-8和Pep-WH-12的情况在诱导全层切除后的第3天比对照显示更小的创伤尺寸(参见图6和9)。Pep-WH-9和Pep-WH-11的情况在诱导全层切除后的第1天比对照显示更小的创伤尺寸(见图7和8)。当在第11天观察对照组和实验组时，创伤尺寸无显著性差异并且创伤变得愈合，但是在切除形成后的早期阶段在各实验组中比在对照组中更小的创伤大小可以表明新型肽在切除形成的早期阶段是有效的。

此外，在诱导切除后的胶原蛋白形成的观察结果中，与对照相比，所有实验组都显示出胶原蛋白产生的平均荧光强度较高(参见图10)。这可能表明，当创伤部位愈合时，新型肽加速了必需的胶原蛋白形成。

由该实验结果可以确认，根据本发明的新型肽具有减少创伤形成面积和增加胶原蛋白合成的活性。从这个结果可以确定，本发明的新型肽可以具有创伤愈合活性作用。

综合实验例的结果，本发明的新型肽可以具有抗炎、抗纤维化和创伤愈合作用，并可以用于开发用于预防或治疗炎症、纤维化和创伤的治疗剂，还开发了用于预防或治疗癌症和具有炎症和纤维化的各种疾病的药物以及缓解其症状的药物。

<110> 珍白斯凯尔有限公司

金商在

<120> 新型肽和含有其的组合物

<130> OF16P100PCT

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<223> Pep-WH-1肽

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<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> Pep-WH-2肽

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Ala Leu Ser Thr Arg Leu Arg Gly

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<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

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<223> Pep-WH-12肽

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<212> DNA

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<223> TNF-a正向引物

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<212> DNA

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<223> GAPDH正向引物

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agggctgctt ttaactctgg t 21

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<213> 人工序列(Artificial Sequence)

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<223> GAPDH反向引物

<400> 16

ccccacttga ttttggaggg a 21

Claims

1.一种具有SEQ ID NO:1-12之一表示的氨基酸序列的肽，作为所述肽的序列的片段的肽，与所述肽的序列具有80％以上的序列同源性的肽或其片段，或其药学上可接受的盐。

2.一种抗炎组合物，其包含一种或多种权利要求1所述的肽或其药学上可接受的盐。

3.如权利要求2所述的抗炎组合物，其中，所述抗炎组合物由于减少TNF-α而具有抗炎活性。

4.如权利要求2所述的抗炎组合物，其中，所述抗炎组合物预防或治疗选自由以下疾病组成的组中的任一种或多种炎症相关疾病：类风湿性关节炎、银屑病、银屑病性关节炎、特应性皮炎、诸如溃疡性结肠炎、克罗恩氏病等炎性肠病、强直性脊柱炎、多发性硬化症、系统性红斑狼疮(SLE)、慢性阻塞性肺病(COPD)、败血症、内毒素性休克、肝炎和I型糖尿病。

5.一种用于预防、治疗或缓解身体器官纤维化的组合物，所述组合物包含一种或多种权利要求1所述的肽或其药学上可接受的盐。

6.如权利要求5所述的组合物，其中，用于预防、治疗或缓解身体器官纤维化的组合物通过抑制TGF-β信号传导而具有抑制身体器官纤维化的活性。

7.如权利要求5所述的组合物，其中，用于预防、治疗或缓解身体器官纤维化的组合物预防或治疗由选自由癌症、抗癌药物的施用和辐射暴露组成的组中的一种或多种诱导的纤维化。

8.如权利要求5所述的组合物，其中，用于预防、治疗或缓解身体器官纤维化的组合物预防或治疗选自由以下组成的组中的癌症的细胞组织的纤维化：胰腺癌、结肠癌、胃癌、前列腺癌、非小细胞肺癌症、乳腺癌、黑色素瘤和卵巢癌。

9.一种用于治疗或缓解创伤的组合物，所述组合物包含一种或多种权利要求1所述的肽或其药学上可接受的盐。

10.如权利要求9所述的组合物，其中，所述用于治疗或缓解创伤的组合物通过诱导胶原蛋白合成而具有创伤愈合作用。

11.如权利要求9所述的组合物，其中，所述用于治疗或缓解创伤的组合物治疗或缓解选自由表皮灼伤、表皮撕裂伤、表皮创伤和其组合组成的组中的创伤。

12.一种用于改善皮肤状况的组合物，所述组合物包含一种或多种权利要求1所述的肽或其药学上可接受的盐。

13.如权利要求12所述的组合物，其中，所述皮肤状况包括由皮肤老化、皮肤干燥、疤痕、皮肤弹性降低和皮肤凹陷引起的任一种或多种皮肤皱纹。

14.一种抗癌组合物，其包含一种或多种权利要求1所述的肽或其药学上可接受的盐。

15.一种为了选自抗炎、抗纤维化、抗癌治疗、创伤愈合和皮肤状况改善的一种或多种作用而使用的试剂盒，所述试剂盒包括：

包含一种或多种权利要求1所述的肽或其药学上可接受的盐的组合物，或如权利要求2～14中任一项所述的组合物；及

说明书，其指示选自由剂量、施用途径、给药次数和组合物的适应症中的一个或多个。

16.一种预防、缓解或治疗炎症、纤维化或癌症，或者治疗或缓解创伤，或者改善皮肤状况的方法，所述方法包括对需要选自抗炎、抗纤维化、抗癌治疗、创伤愈合和皮肤状况改善的一种或多种作用的受试者施用包含一种或多种权利要求1所述的肽或其药学上可接受的盐的组合物。