CN107656005A - 盐酸厄洛替尼与潜在杂质的分离与测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于分析化学领域，具体涉及盐酸厄洛替尼与相关的潜在杂质的分离与测定方法。该方法以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以甲醇‑乙腈混合液和磷酸缓冲盐为流动相进行洗脱，该方法能够实现盐酸厄洛替尼与相关的10种潜在杂质同时有效分离，该方法还可利用高效液相色谱法进行分离测定，不仅实现有效分离，还能够准确测定盐酸厄洛替尼与相关的潜在杂质的含量，专属性强，灵敏度高，对于实现对盐酸厄洛替尼的质量控制、安全性保证具有极其重要的意义。
Description
技术领域
本发明属于分析化学领域，具体涉及盐酸厄洛替尼与相关的潜在杂质的分离与测定方法。
背景技术
盐酸厄洛替尼是酪氨酸激酶抑制剂，适用于既往接受过至少一个化疗方案失败后的局部晚期或转移的非小细胞肺癌。盐酸厄洛替尼的中文名为：N-(3-乙炔苯基)-6,7-双(2-甲氧乙氧基)-4-喹啉胺盐酸盐，英文名为：Erlotinib hydrochloride，其结构式如式Ⅰ所示：
在盐酸厄洛替尼的合成过程中，其合成使用的原料K、J，以及合成过程产生副产物A、B、D、E、F、G、H、I，这些都使最终获得的盐酸厄洛替尼中含有的杂质，这些相关潜在杂质的结构式如下：
为了控制盐酸厄洛替尼的质量，需要对盐酸厄洛替尼及其相关潜在杂质进行分离测定。但是，目前还没有同时分离测定盐酸厄洛替尼及以上10个潜在杂质的HPLC方法。因此开发一种分离测定盐酸厄洛替尼及以上10个潜在杂质的方法对于实现对盐酸厄洛替尼的质量控制、安全性保证具有极其重要的意义。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种同时分离盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，该方法能够实现盐酸厄洛替尼及其潜在杂质的有效分离。本发明还提供了利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，该方法不仅实现有效分离，还能够准确测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的含量，专属性强，灵敏度高，对于实现对盐酸厄洛替尼的质量控制、安全性保证具有极其重要的意义。
为实现上述目的，本发明的技术方案为：
分离盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以甲醇-乙腈混合液和磷酸缓冲盐为流动相进行洗脱，所述盐酸厄洛替尼的结构式如式Ⅰ所示；
进一步，所述的方法，所述潜在杂质为A、B、D、E、F、G、H、I、J、K所示化合物中的一种或多种；
优选的，本发明分离盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，对盐酸厄洛替尼与以上10种潜在杂质同时进行分离。
进一步，所述的方法，所述磷酸缓冲盐为磷酸二氢钾水溶液与二乙胺的混合液，所述磷酸二氢钾水溶液与二乙胺的体积比为1000：1-3，所述磷酸二氢 钾水溶液浓度为1-1.5g/1000ml。
优选的，所述磷酸二氢钾水溶液与二乙胺的体积比为1000：2，所述磷酸二氢钾水溶液浓度为1.36g/1000ml。
进一步，所述的方法，所述磷酸缓冲盐的pH值为3.0-3.2。
优选的，所述磷酸缓冲盐的pH值为3.1。
本发明中，所述磷酸缓冲盐可采用以下方法进行制备：
取磷酸二氢钾1g-1.5g，加水溶解并稀释至1000ml，再加入二乙胺溶液1.0ml-3.0ml，混匀，用磷酸溶液调节pH值至3.0-3.2。
进一步，所述的方法，所述甲醇与乙腈的体积比为0.8-1.2：1。
优选的，所述甲醇与乙腈的体积比为1：1。
进一步，所述的方法，所述甲醇-乙腈混合液与磷酸缓冲盐的体积比为30-70：30-70。
优选的，所述流动相采用线性梯度洗脱分离，线性梯度洗脱条件为：
0min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为65-75：25-35；
20min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为55-65：35-45；
30min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为60-70：30-40；
50min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为55-65：35-45；
60min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为25-35：65-75；
62min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为65-75：25-35；
70min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为65-75：25-35。
更优选的，线性梯度洗脱条件为：
0min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为70：30；
20min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为60：40；
30min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为65：35；
50min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为60：40；
60min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为30：70；
62min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为70：30；
70min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为70：30。
本发明还提供了利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，该方法不仅实现有效分离，还能够准确测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的含量，专属性强，灵敏度高。
利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，所述高效液相色谱法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以甲醇-乙腈混合液和磷酸缓冲盐为流动相进行洗脱分离，分离后采用紫外检测器对盐酸厄洛替尼与潜在杂质进行检测；所述磷酸缓冲盐为磷酸二氢钾水溶液与二乙胺的混合液，所述磷酸二氢钾水溶液与二乙胺的体积比为1000：1-3，所述磷酸二氢钾水溶液浓度为1-1.5g/1000ml；所述甲醇与乙腈的体积比为0.8-1.2：1。
进一步，所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，所述潜在杂质为A、B、D、E、F、G、H、I、J、K所示化合物中的一种或多种。
进一步，所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，所述流动相采用线性梯度洗脱分离，线性梯度洗脱条件为：
0min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为65-75：25-35；
20min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为55-65：35-45；
30min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为60-70：30-40；
50min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为55-65：35-45；
60min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为25-35：65-75；
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70min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为65-75：25-35。
更优选的，线性梯度洗脱条件为：
0min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为70：30；
20min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为60：40；
30min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为65：35；
50min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为60：40；
60min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为30：70；
62min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为70：30；
70min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为70：30。
进一步，所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，所述色谱柱的规格为4.6×250mm，5μm。
进一步，所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，所述流动相的流速为0.5-1.5ml/min。
优选的，所述流动相的流速为1.0ml/min。
进一步，所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，所述色谱柱柱温为30℃±5℃。
优选的，所述色谱柱柱温为30℃。
进一步，所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，紫外检测波长为247nm±5nm。
进一步，所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，所述的方法具体为：
取潜在杂质对照品加稀释剂溶解制备成已知浓度的对照品溶液，取供试品加稀释剂溶解制备成供试品溶液，分别取对照品溶液及供试品溶液进样，进行高效液相色谱分析，记录色谱图，比较供试品溶液与对照品溶液中对应出峰时间的杂质的峰面积，计算供试品中所含厄洛替尼及潜在杂质的含量；所述稀释剂为乙腈水溶液，其中乙腈与水的体积比为0.8-1.2：1。
进一步，所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，所述进样量为20μl。
进一步，所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，所述方法还包括如下步骤：分别取盐酸厄洛替尼及潜在杂质对照品，分别用稀释剂溶解制成厄洛替尼定位溶液及各潜在杂质的定位溶液，进行高效液相色谱分析，确定厄洛替尼及各潜在杂质的保留时间。
在本发明的一个具体实施例中，利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替 尼与潜在杂质的方法具体步骤为：
(1)杂质对照品溶液：精密称取各杂质对照品适量，加稀释剂溶解并定量稀释制成每1ml中约各含杂质对照品0.3μg的混合溶液。
(2)供试品溶液：取供试品约50mg，精密称定，置50ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀，即得；
(3)测定方法：设置流动相流速为1.0ml/min，分别取上述溶液20μl进样，记录色谱图，比较供试品溶液与对照品溶液中杂质的峰面积；所述稀释剂采用乙腈水溶液，乙腈与水的体积比为1：1。
本发明的有益效果在于：
(1)本发明的分离盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以甲醇-乙腈混合液和磷酸缓冲盐为流动相进行洗脱，实现了盐酸厄洛替尼与相关潜在杂质的有效分离。
(2)本发明利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，检测过程中，溶剂峰不干扰盐酸厄洛替尼与潜在杂质的测定，该方法不仅实现盐酸厄洛替尼与10个潜在杂质的有效分离，还能够准确测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的含量，专属性强，灵敏度高，成功解决了盐酸厄洛替尼及其10个潜在杂质的有效分离问题，进而实现了杂质有效控制，从根本上保证了产品质量，对于实现对盐酸厄洛替尼的质量控制、安全性保证具有极其重要的意义。
附图说明
图1为实施例1稀释剂HPLC图。
图2为实施例1杂质I对照品HPLC图，图2中的色谱峰为杂质I对照品的色谱峰，保留时间在5.2min左右。
图3为实施例1杂质K对照品HPLC图，图3中的色谱峰为杂质K对照品的色谱峰，保留时间在7.1min左右。
图4为实施例1杂质J对照品HPLC图，图4中的色谱峰为杂质J对照品的色谱峰，保留时间在11.3min左右。
图5为实施例1杂质E对照品HPLC图，图5中的色谱峰为杂质E对照品的色谱峰，保留时间在17.8min左右。
图6为实施例1供试品HPLC图，图6中的色谱峰为供试品的色谱峰，保留时间在27.9min左右。
图7为实施例1杂质A对照品HPLC图，图7中的色谱峰为杂质A对照品的色谱峰，保留时间在44.0min左右。
图8为实施例1杂质B对照品HPLC图，图8中的色谱峰为杂质B对照品的色谱峰，保留时间在47.6min左右。
图9为实施例1杂质G对照品HPLC图，图9中的色谱峰为杂质G对照品的色谱峰，保留时间在54.0min左右。
图10为实施例1杂质H对照品HPLC图，图10中的色谱峰为杂质H对照品的色谱峰，保留时间在56.5min左右。
图11为实施例1杂质D对照品HPLC图，图11中的色谱峰为杂质D对照品的色谱峰，保留时间在60.8min左右。
图12为实施例1杂质F对照品HPLC图，图12中的色谱峰为杂质F对照品的色谱峰，保留时间在64.4min左右。
图13为实施例1混合溶液HPLC图，图13中的色谱峰为I、K、J、E、厄洛替尼、A、B、G、H、D、F的色谱峰，保留时间依次为：5.2min、7.1min、11.4min、17.8min、27.9min、44.3min、47.7min、54.3min、56.7min、60.8min、64.4min。
图14为实施例1杂质对照品溶液HPLC图(该图为杂质对照品溶液中添加了盐酸厄洛替尼，检样时可以不加)。
图15为采用方法1分析检测的HPLC图。
图16为采用方法2分析检测的HPLC图。
图17为采用方法3分析检测的HPLC图。
图18为采用方法4分析检测的HPLC图。
图19为采用方法5分析检测的HPLC图。
具体实施方式
所举实施例是为了更好地对本发明的内容进行说明，但并不是本发明的内容仅限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述发明内容对实施方案进行非本质的改进和调整，还包括各具体实施方式间的任意组合，仍属于本发明的保护范围。
实施例中所涉及的样品、对照品来源如下表所示：
实施例1
1、仪器与条件
仪器：高效液相色谱仪；
色谱柱：Agilent Eclipse XDB C18(4.6×250mm，5μm)；
流动相：按表1所示进行线性梯度洗脱；
A：磷酸缓冲盐(取磷酸二氢钾1.36g，加水溶解并稀释至1000ml，加二乙胺溶液2.0ml，混匀，用磷酸溶液调节pH值至3.1±0.1)；
B：甲醇-乙腈(体积比1：1)；
表1梯度洗脱表
紫外检测器检测波长：247nm；
流 速：1.0ml/min；
柱 温：30℃；
进样量：20μl；
稀释剂：乙腈水溶液(体积比1：1)。
2、实验步骤
(1)各杂质定位溶液：精密称取各杂质对照品适量，置不同的量瓶中，分别加稀释剂溶解并定量稀释制成每1ml中约各含杂质对照品100μg的溶液。
(2)杂质对照品溶液：精密移取各杂质定位溶液适量，置同一量瓶中，加稀释剂溶解并定量稀释制成每1ml中约各含杂质对照品0.3μg的混合溶液。
(3)供试品溶液：取供试品约50mg，精密称定，置50ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀，即得；
(4)混合溶液：称取供试品约50mg，分别移取各杂质定位溶液适量，置同一50ml量瓶中，加稀释剂稀释至刻度，摇匀，即得。
(5)测定方法：分别取稀释剂、各杂质定位溶液，供试品溶液、杂质对照品溶液和混合溶液各20μl进样，按上述色谱条件进行高效液相色谱分析，记录色谱图，比较供试品溶液与对照品溶液中各杂质的峰面积。
3、检测结果
色谱图见图1-14，由图1-14可以看出，空白稀释剂不干扰样品测定；主峰与邻近杂质峰间分离度符合要求；各已知杂质峰间的分离度符合要求，供试 品中检出杂质均小于杂质对照品中相应杂质的峰面积。
实施例2本发明的方法与现有分析方法的比较
酸厄洛替尼在Ch.P、USP和EP中均未收载，故参考盐酸厄洛替尼片国家进口药品注册标准JX20080202中有关物质分析方法(参见表2方法1-3)，但此方法未对已知杂质进行控制。
表2方法4是参考文献《盐酸厄洛替尼及其片剂中5种有关物质的定性及定量分析》[出自于《药物分析杂志》2015年第5期]中记载的方法。
表2方法5为本发明的方法。
表2有关物质分析方法
分别采用上述5种方法对盐酸厄洛替尼与潜在杂质进行分离检测，方法1的色谱图如图15所示，方法2的色谱图如图16所示，方法3的色谱图如图17所示，方法4的色谱图如图18所示，方法5的色谱图如图19所示，各方法的分析结果如表3所示。
表3有关物质分析方法的分析结果表
结果表明：采用进口相关制剂的方法，杂质D和杂质G完全重叠，杂质H和杂质D/G的分离度为0.98，杂质A和杂质B之间的分离度为0.66。将进口相关制剂的方法做调整，杂质D和杂质G仍完全重叠，且杂质F 50min内未出峰。采用文献方法(方法4)，杂质H和杂质G的分离度为0.9，杂质D和杂质F完全重叠。采用本发明的HPLC法(方法5)，所有杂质之间及杂质与主峰间分离度均大于1.5，各色谱峰峰型均较好，故采用本发明的HPLC法对有关物质进行测定，本发明的方法能够控制合成工艺中(原料、副产物等)或贮藏过程中(降解产物)可能引入成品中的杂质，对于实现对盐酸厄洛替尼的质量控制、安全性保证具有极其重要的意义。
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (10)
1.分离盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，其特征在于，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以甲醇-乙腈混合液和磷酸缓冲盐为流动相进行洗脱，所述盐酸厄洛替尼的结构式如式Ⅰ所示；
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述潜在杂质为A、B、D、E、F、G、H、I、J、K所示化合物中的一种或多种；
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述磷酸缓冲盐为磷酸二氢钾水溶液与二乙胺的混合液，所述磷酸二氢钾水溶液与二乙胺的体积比为1000：1-3，所述磷酸二氢钾水溶液浓度为1-1.5g/1000ml。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述甲醇与乙腈的体积比为0.8-1.2：1。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述甲醇-乙腈混合液与磷酸缓冲盐的体积比为30-70：30-70。
6.利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以以甲醇-乙腈混合液和磷酸缓冲盐为流动相进行洗脱分离，分离后采用紫外检测器对盐酸厄洛替尼与潜在杂质进行检测；所述磷酸缓冲盐为磷酸二氢钾水溶液与二乙胺的混合液，所述磷酸二氢钾水溶液与二乙胺的体积比为1000：1-3，所述磷酸二氢钾水溶液浓度为1-1.5g/1000ml；所述甲醇与乙腈的体积比为0.8-1.2：1。
7.根据权利要求6所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，其特征在于，所述潜在杂质为A、B、D、E、F、G、H、I、J、K所示化合物中的一种或多种。
8.根据权利要求6所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，其特征在于，所述流动相采用线性梯度洗脱分离，线性梯度洗脱条件为：
0min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为65-75：25-35；
20min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为55-65：35-45；
30min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为60-70：30-40；
50min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为55-65：35-45；
60min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为25-35：65-75；
62min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为65-75：25-35；
70min：磷酸缓冲盐与甲醇-乙腈混合液的体积比为65-75：25-35。
9.根据权利要求6所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，其特征在于，紫外检测波长为247nm±5nm。
10.根据权利要求6所述的利用高效液相色谱法分离测定盐酸厄洛替尼与潜在杂质的方法，其特征在于，所述的方法具体为：
取潜在杂质对照品加稀释剂溶解制备成已知浓度的对照品溶液，取供试品加稀释剂溶解制备成供试品溶液，分别取对照品溶液及供试品溶液进样，进行高效液相色谱分析，记录色谱图，比较供试品溶液与对照品溶液中对应出峰时间的杂质的峰面积，计算供试品中所含厄洛替尼及潜在杂质的含量；所述稀释剂为乙腈水溶液，其中乙腈与水的体积比为0.8-1.2：1。
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|---|---|
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Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109574940A (zh) * | 2018-11-20 | 2019-04-05 | 成都新恒创药业有限公司 | 一种盐酸厄洛替尼的降解杂质及其制备、检测方法和应用 |
| CN117486741A (zh) * | 2023-10-31 | 2024-02-02 | 江苏豪森药业集团有限公司 | 一种盐酸厄洛替尼有关物质的制备方法 |
| CN117929550A (zh) * | 2022-10-24 | 2024-04-26 | 北京海美源医药科技有限公司 | 一种检测厄洛替尼有关杂质的方法和其应用 |
| CN117929550B (zh) * | 2022-10-24 | 2025-12-30 | 北京海美源医药科技有限公司 | 一种检测厄洛替尼有关杂质的方法和其应用 |
Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009007984A2 (en) * | 2007-07-11 | 2009-01-15 | Hetero Drugs Limited | An improved process for erlotinib hydrochloride |
| EP2258865A1 (en) * | 2009-06-05 | 2010-12-08 | Universitätsklinikum Freiburg | Lysine-specific demethylase 1 (LSD1) is a biomarker for breast cancer |
| CN103319468A (zh) * | 2012-03-21 | 2013-09-25 | 广东东阳光药业有限公司 | 取代的螺双环化合物及其使用方法和用途 |
| CN103360369A (zh) * | 2012-03-27 | 2013-10-23 | 上海铂力生物科技有限公司 | 一种厄洛替尼及其新的中间体的制备方法 |
| CN103784411A (zh) * | 2012-11-01 | 2014-05-14 | 齐鲁制药(海南)有限公司 | 一种盐酸厄洛替尼药用组合物及其制备方法 |
| CN104447579A (zh) * | 2014-10-27 | 2015-03-25 | 成都新恒创药业有限公司 | 一种盐酸厄洛替尼杂质及其制备检测方法 |
| CN104910080A (zh) * | 2015-05-26 | 2015-09-16 | 大连理工大学 | 一种新的厄洛替尼相关物质及其制备方法 |
| CN105001166A (zh) * | 2014-04-17 | 2015-10-28 | 南京优科生物医药研究有限公司 | 一种厄洛替尼的新杂质及其制备方法 |
| CN105030705A (zh) * | 2015-06-29 | 2015-11-11 | 孙丽华 | 一种抗癌药物盐酸厄洛替尼片剂及其制备方法 |
| CN105130912A (zh) * | 2015-08-24 | 2015-12-09 | 海南中化联合制药工业股份有限公司 | 一种适合于工业化生产的厄洛替尼制备方法 |
-
2016
- 2016-07-25 CN CN201610590055.1A patent/CN107656005B/zh active Active
Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2009007984A2 (en) * | 2007-07-11 | 2009-01-15 | Hetero Drugs Limited | An improved process for erlotinib hydrochloride |
| EP2258865A1 (en) * | 2009-06-05 | 2010-12-08 | Universitätsklinikum Freiburg | Lysine-specific demethylase 1 (LSD1) is a biomarker for breast cancer |
| CN103319468A (zh) * | 2012-03-21 | 2013-09-25 | 广东东阳光药业有限公司 | 取代的螺双环化合物及其使用方法和用途 |
| CN103360369A (zh) * | 2012-03-27 | 2013-10-23 | 上海铂力生物科技有限公司 | 一种厄洛替尼及其新的中间体的制备方法 |
| CN103784411A (zh) * | 2012-11-01 | 2014-05-14 | 齐鲁制药(海南)有限公司 | 一种盐酸厄洛替尼药用组合物及其制备方法 |
| CN105001166A (zh) * | 2014-04-17 | 2015-10-28 | 南京优科生物医药研究有限公司 | 一种厄洛替尼的新杂质及其制备方法 |
| CN104447579A (zh) * | 2014-10-27 | 2015-03-25 | 成都新恒创药业有限公司 | 一种盐酸厄洛替尼杂质及其制备检测方法 |
| CN104910080A (zh) * | 2015-05-26 | 2015-09-16 | 大连理工大学 | 一种新的厄洛替尼相关物质及其制备方法 |
| CN105030705A (zh) * | 2015-06-29 | 2015-11-11 | 孙丽华 | 一种抗癌药物盐酸厄洛替尼片剂及其制备方法 |
| CN105130912A (zh) * | 2015-08-24 | 2015-12-09 | 海南中化联合制药工业股份有限公司 | 一种适合于工业化生产的厄洛替尼制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| CHANDRASHEKARA KARUNAKARA 等: "Separation and Determination of Process-Related Impurities of Erlotinib Using Reverse-Phase HPLC with a Photo-Diode Array Detector", 《ANALYTICAL SCIENCES》 * |
| P. A. KUMAR 等: "DEVELOPMENT AND VALIDATION OF A STABILITYINDICATING RP-HPLC METHOD FOR THE ESTIMATION OF ERLOTINIB IMPURITIES BY QbD APPROACH", 《RASAYAN J.CHEM.》 * |
| 李昌亮 等: "高效液相色谱法检测盐酸厄洛替尼片中有关物质", 《中南药学》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109574940A (zh) * | 2018-11-20 | 2019-04-05 | 成都新恒创药业有限公司 | 一种盐酸厄洛替尼的降解杂质及其制备、检测方法和应用 |
| CN117929550A (zh) * | 2022-10-24 | 2024-04-26 | 北京海美源医药科技有限公司 | 一种检测厄洛替尼有关杂质的方法和其应用 |
| CN117929550B (zh) * | 2022-10-24 | 2025-12-30 | 北京海美源医药科技有限公司 | 一种检测厄洛替尼有关杂质的方法和其应用 |
| CN117486741A (zh) * | 2023-10-31 | 2024-02-02 | 江苏豪森药业集团有限公司 | 一种盐酸厄洛替尼有关物质的制备方法 |
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