CN106562947A - 亮蓝g在制备人类免疫缺陷病毒糖蛋白120诱导神经病理痛药物中的应用 - Google Patents
亮蓝g在制备人类免疫缺陷病毒糖蛋白120诱导神经病理痛药物中的应用 Download PDFInfo
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Abstract
亮蓝G在制备人类免疫缺陷病毒糖蛋白120诱导神经病理痛药物中的应用，实验证实亮蓝G可降低背根神经节神经元P2X7受体的表达，降低人类免疫缺陷病毒糖蛋白120大鼠背根神经节细胞炎性因子—TNF‑α受体、IL‑1β的含量以及ERK1/2的磷酸化水平，增加人类免疫缺陷病毒糖蛋白120大鼠背根神经节IL‑10的含量，抑制背根神经节的伤害性信息传递，减轻神经损伤及炎性物质的伤害剌激，减轻人类免疫缺陷病毒糖蛋白120神经病理痛大鼠的痛行为，可应用于制备人类免疫缺陷病毒糖蛋白1200诱导神经病理痛、人类免疫缺陷病毒糖蛋白120诱导神经损伤相关疾病的药物。
Description
技术领域
本发明涉及人类免疫缺陷病毒糖蛋白120gp120诱导神经病理痛药物用途发明领域，尤其是涉及亮蓝G可用于在制备降低人类免疫缺陷病毒糖蛋白120gp120诱导的神经病理痛的药物中的应用，其作用机理涉及抑制背根神经节嘌呤2X(P2X)7受体介导的痛觉信息传递。
背景技术
人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染常可导致神经系统认知、感觉和行动功能障碍，引发各种神经系统疾病，严重时可危及生命。HIV感染并发周围神经病变的病人肢体远端出现感觉功能障碍，呈袜套式分布，足部最先疼痛，伴随着病情的进一步发展，患者肢体将会出现极度疼痛和功能障碍，导致行走功能丧失。HIV感染神经导致周围神经发生病理改变，而原发病变部位可能在背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)。已证实在HIV病毒的表面，多种蛋白具有神经毒性，包括穗花状的结构外膜糖蛋白(glucoprotein120,gp120)。gp120暴露在HIV病毒表面，因其相对分子质量为120KD而得名，在病毒浸染宿主细胞的过程中发挥重要作用。体外实验模型和体内实验模型研究都证实它与HIV感染相关性末梢感觉多发性神经病的病理相关，gp120还能介导培养的Schwann细胞和DRG神经细胞凋亡。病毒通过包膜糖蛋白gp120识别并浸染宿主细胞，通过巨噬细胞和小胶质细胞产生炎性细胞因子和神经毒素，导致神经元受损，并阻碍神经递质的释放和运输。HIV包膜糖蛋白gp120可以直接兴奋初级感觉传入神经元，导致痛觉过敏。重组gp120鞘内注射或短暂置于坐骨神经膜上可增强动物的热痛敏和机械痛敏。
大多数疾病都伴随有疼痛，给人们造成极大痛苦，其治疗是世界难题之一。按疼痛时程不同，可将疼痛分为急性痛(生理性痛)和慢性痛(病理性痛)。神经病理性疼痛就属于慢性痛。神经病理性疼痛(neuropathic pain,NPP)，简称神经痛，是由躯体感觉系统的损伤或疾病引起的疼痛，令人感觉不愉快。NPP常伴随感觉功能障碍，对非伤害性刺激产生痛觉过敏，这种痛觉有的为连续性的，有的是阵发性的。阵发性的疼痛感像被电击或刀割一样。周围神经损伤后，可能发生异常再生，神经元变得异常敏感，并自发地进行病理活动，对化学、冷、热和机械刺激高度敏感。NPP发病率较高，患者常感到疼痛难忍，常伴有睡眠障碍、精神萎靡、注意力分散、焦虑、抑郁、食欲减退，严重影响病人的生活质量。NPP发病的分子机理仍不清楚，治疗受限，诱发因素多种多样。HIV感染的神经病理痛并发症有自发痛和诱发痛。感觉神经病理改变是HIV并发外周神经病理性损伤的最常见形式，可影响30％的艾滋病感染的成人和儿童患者。HIV感染并发神经病理痛的发病率较高、发病机理尚不清楚、治疗极为困难，亟待解决。
Burnstock在1972年首次提出了“嘌呤能神经学说”，认为ATP可作为第一信使参与信息传递，调节组织细胞的生物生化代谢与生理活动。嘌呤信号转导(purinergicsignalling)受体分为P1和P2受体。腺苷及其类似物作用于P1受体；三磷酸腺苷(ATP)及其类似物作用于P2受体。根据受体的状态和功能的不同可将P2受体分为配体门控性离子通道型受体(P2X受体，包括P2X1-7)和G蛋白偶联型受体(P2Y受体，包括P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6、P2Y11、P2Y12、P2Y13、P2Y14、P2Y15)。P2X属于配体门控非选择性阳离子通道受体，ATP与其结合后，Na+、K+等阳离子可以通过。目前，随着基因敲除技术和P2X7受体选择性拮抗剂的问世,P2X7受体在一些神经病理性痛的作用越来越明确。
当受到外界损伤及伤害性剌激时，受损细胞、应激细胞以及感觉神经末梢释放的ATP大量增加，ATP在痛觉及相关伤害性信息传递中具有重要作用。研究显示P2X7受体参与炎症痛、NPP的发生。由ATP激活的P2X7受体在病毒急性感染的炎症反应调节过程中承担着重要角色。文献显示HIV包膜糖蛋白gp120损伤坐骨神经诱发NPP，上调背根神经节的炎性因子表达。因此，ATP、炎性因子等信号分子可能激活表达于DRG的P2X7受体，参与HIV感染并发NPP的痛觉形成和维持。HIV感染并发NPP的防治是个十分棘手的问题。目前尚不清楚DRG中P2X7受体在HIV感染并发的NPP中的作用。
本实验通过人类免疫缺陷病毒糖蛋白120诱导神经病理痛大鼠模型，观察P2X7受体特异性拮抗剂亮蓝G(brilliant blue G，BBG)处理后人类免疫缺陷病毒糖蛋白120诱导神经病理痛大鼠痛行为的变化，以及与介导神经病理痛的P2X7受体表达变化的关系，为亮蓝G用于人类免疫缺陷病毒糖蛋白120诱导神经病理痛的预防和治疗提供帮助。应用
发明内容
本发明的第一个目的在于提供亮蓝G的第一个新用途，即亮蓝G在制备防治人类免疫缺陷病毒糖蛋白120诱导神经病理痛疾病药物中的应用。
本发明的第二个目的在于提供亮蓝G的第二个新用途，即亮蓝G在制备人类免疫缺陷病毒糖蛋白120并发神经损伤疾病的药物中的应用。
本发明实验证实，亮蓝G可降低背根神经节神经元P2X7受体的表达，降低人类免疫缺陷病毒糖蛋白120大鼠背根神经节细胞炎性因子—TNF-α受体、IL-1β的含量以及ERK1/2的磷酸化水平，增加人类免疫缺陷病毒糖蛋白120大鼠背根神经节IL-10的含量，抑制背根神经节的伤害性信息传递，减轻神经损伤及炎性物质的伤害剌激，减轻人类免疫缺陷病毒糖蛋白120神经病理痛大鼠的痛行为，可应用于制备人类免疫缺陷病毒糖蛋白1200诱导神经病理痛、人类免疫缺陷病毒糖蛋白120诱导神经损伤相关疾病的药物。
附图说明
图1为HIV gp120诱导神经病理痛大鼠制模过程中的机械缩足反射阈值变化图。亮蓝G处理后对HIV gp120诱导神经病理痛大鼠的机械痛行为具有抑制作用。实验分组：对照组；HIV gp120大鼠模型组；HIV gp120大鼠模型+亮蓝G处理组。其中**p<0.01表示和对照组比较，##p<0.01表示与HIV gp120大鼠模型组比较。
图2为HIV gp120诱导神经病理痛大鼠DRG的P2X7受体real-time PCR检测结果图。亮蓝G处理后可降低HIV gp120诱导神经病理痛大鼠DRG上调的P2X7受体水平。实验分组：对照组；HIV gp120大鼠模型组；HIV gp120大鼠模型+亮蓝G处理组。其中**p<0.01表示和对照组比较，##p<0.01表示与HIV gp120大鼠模型组比较。
图3为HIV gp120诱导神经病理痛大鼠DRG的P2X7受体蛋白印迹检测结果图。亮蓝G处理后可降低HIV gp120诱导神经病理痛大鼠DRG上调的P2X7受体水平。实验分组：对照组；HIV gp120大鼠模型组；HIV gp120大鼠模型+亮蓝G处理组。图3(a)为蛋白印迹实验结果图，图3(b)为实验数据分析比较柱状图，其中**p<0.01表示和对照组比较，##p<0.01表示与HIVgp120大鼠模型组比较。
图4为HIV gp120诱导神经病理痛大鼠DRG的TNF-α受体蛋白印迹检测结果图。亮蓝G处理后可降低HIV gp120诱导神经病理痛大鼠DRG上调的TNF-α受体水平。实验分组：对照组；HIV gp120大鼠模型组；HIV gp120大鼠模型+亮蓝G处理组。图4(a)为蛋白印迹实验结果图，图4(b)为实验数据分析比较柱状图，其中**p<0.01表示和对照组比较，##p<0.01表示与HIV gp120大鼠模型组比较。
图5为HIV gp120诱导神经病理痛大鼠DRG的IL-1β蛋白印迹检测结果图。亮蓝G处理后可降低HIV gp120诱导神经病理痛大鼠DRG上调的IL-1β受体水平。实验分组：对照组；HIV gp120大鼠模型组；HIV gp120大鼠模型+亮蓝G处理组。图5(a)为蛋白印迹实验结果图，图5(b)为实验数据分析比较柱状图，其中**p<0.01表示和对照组比较，##p<0.01表示与HIVgp120大鼠模型组比较。
图6为HIV gp120诱导神经病理痛大鼠DRG的IL-10蛋白印迹检测结果图。亮蓝G处理后可升高HIV gp120诱导神经病理痛大鼠DRG下调的IL-10受体水平。实验分组：对照组；HIV gp120大鼠模型组；HIV gp120大鼠模型+亮蓝G处理组。图6(a)为蛋白印迹实验结果图，图6(b)为实验数据分析比较柱状图，其中**p<0.01表示和对照组比较，##p<0.01表示与HIVgp120大鼠模型组比较。
图7为HIV gp120诱导神经病理痛大鼠DRG的ERK1/2蛋白印迹检测结果图。亮蓝G处理后可降低HIV gp120诱导神经病理痛大鼠DRG上调的ERK1/2磷酸化水平。实验分组：对照组；HIV gp120大鼠模型组；HIV gp120大鼠模型+亮蓝G处理组。图7(a)为蛋白印迹实验结果图，图7(b)(c)为实验数据分析比较柱状图，其中**p<0.01表示和对照组比较，##p<0.01表示与HIV gp120大鼠模型组比较。
图8为HIV gp120诱导新生大鼠DRG神经元的BzATP激活电流结果图。HIV gp120模型组神经元的BzATP激活电流较对照组大，且亮蓝G抑制HIV gp120模型组神经元的BzATP激活电流较对照组更明显。实验分组：对照组；HIV gp120模型组。图8(a)为膜片钳激活电流实验结果图，图8(b)为实验数据分析比较柱状图，其中**p<0.01表示和单独用BzATP比较，##p<0.01表示与对照组比较。
具体实施方式
下面结合实施例并对照附图对本发明作进一步详细说明。
实施例1。
用本技术领域公知的方法，制成适用于HIV gp120诱导神经病理痛治疗的口服或注射的亮蓝G制剂。
实施例2。
用本技术领域公知的方法，制成适用于涉及HIV gp120并发神经损伤相关疾病治疗的口服或注射的亮蓝G制剂。
实施例3。
用本技术领域公知的方法，制成适用于涉及HIV gp120并发感觉神经炎性相关疾病治疗的口服或注射的亮蓝G制剂。
总之，亮蓝G以口服、注射、含片或其它局部或全身用药剂型药物进行上述疾病防治。
为了更好地理解本发明的实质，下面以亮蓝G对P2X7受体介导的相关疾病治疗作用研究的实验和结果来证明亮蓝G的用途。
一、材料和方法。
1.动物和分组。
健康Sprague-Dawley(SD)大鼠，南昌大学医学院实验动物科学部提供。健康SD雄性大鼠30只，体重200g左右，适应性饲养1周后，随机分成3组，每组10只，假手术对照组；HIVgp120模型组；HIV gp120模型+亮蓝G处理组，分别标记，以常规饲料喂养。(1)腹腔注射10％水合氯醛麻醉雄性SD大鼠(0.35ml/100g)。(2)采用俯卧位固定，常规左侧腘窝周围备皮，先用碘伏消毒2～3次，再酒精脱碘2～3次。切开左侧腿弯凹陷皮肤，暴露股二头肌，止血钳钝性分离肌肉，暴露坐骨神经，用玻璃分针游离出坐骨神经，注意不要损伤到神经。(3)将2×10mm的氧化纤维素膜在250μl浓度为0.1％的大鼠血清白蛋白(rat serum albumin,RSA)生理盐水溶液中浸泡，其中含有200ng gp120，对于假手术对照组，则浸泡于浓度为0.1％的RSA生理盐水溶液中。(4)将浸泡过的纤维素膜宽松的缠绕坐骨神经三根分叉部，约有2-3mm的神经被缠绕，注意不要压迫神经,然后将神经放回原处。(5)用4/0号缝线逐层缝合肌肉和皮肤切口，伤口用碘伏消毒，每只大鼠分开饲养。
从手术后第1天开始到手术后14天结束，HIV gp120+亮蓝G处理组腹腔注射亮蓝G30mg/kg(生理盐水配制)，同时，对照组和HIV gp120模型组腹腔注射等量生理盐水溶液，每天注射一次，连续注射两周，并于第14天取标本(L4-L6段背根神经节)。保持每次给药时间一致。
2.药物与试剂。
亮蓝G(Sigma公司)，兔源性嘌呤2X7(P2X7)抗体(Abcam公司)。
3.主要仪器。
消毒纱布、手巾、棉签等，碘酒及75％酒精，手术器械包：剪刀、眼科小弯镊、血管钳、丝线、有齿镊等。
4.大鼠行为学测定。
分别于第0，1，4，7，10，12，14天测量各组大鼠机械缩足反射阈值(MWT)，每次测量的时间及其他条件保持一致。
机械痛敏阈值变化的检测方法：
机械缩足反射阈值的检测：采用的装置为BME-404电子机械刺激器(中国医学科学院生物医学工程研究所,天津,中国)。该设备的主要参数如下：尖端直径测试针0.6mm，压力测量范围0.1-50g和压力测量分辨率0.05g。大鼠放入规格为25cm×15cm×25cm以小孔铁丝网为底的无色透明亚克力盒中，静置30分钟以上使之达到稳定的静息状态，此装置稍高于操作平台，以便看清大鼠足底，方便操作。手术侧(左侧)后肢足底表面垂直接触测试针，直到大鼠抬起左下肢，压力值被电脑软件自动记录。每只大鼠测量5次(间隔时间≥5分钟)，所测的平均值即为机械痛敏阈值。
5、实时定量-聚合酶链式反应(Real-time PCR)。
(1)提取总RNA并逆转录成cDNA：所有器械均经DEPC处理。在第14天取材，分别取各组大鼠背根神经节，用DEPC处理过的PBS冲洗，置于RNA Store液中﹣20℃保存，提取RNA时将神经节取出移至加有1ml Trizol匀浆器中，研磨后转移到1.5ml的无核酶离心管中，加入0.2ml氯仿，剧烈震荡15s，静置3min,，低温离心12000g×15min,收集上层无色液相，加入与液相等体积的异丙醇，混匀，常温静置25min，沉淀RNA，之后4℃离心12000g×10min，弃上清，在管底可见少许白色沉淀为RNA，加入1ml无核酶水配置的75％乙醇，充分洗涤RNA。4℃离心5000g×3min后，吸弃上清液，倒置2分钟，略干燥(切勿过分干燥，否则RNA不溶于水)，加20μl无RNase水溶解沉淀。采用50μl逆转录反应体系：无核酶水11.75μl，5×buffer 10μl，dNTP 3μl，Olig DT 2μl，MMLV 2μl，Rnasin 1.25μl，RNA样本20μl，共50μl，离心，恒温37℃水浴1小时。
(2)设计引物：参考文献设计P2X7受体引物序列。本发明选用β-actin作为标准内参，引物序列分别为：
(3)实时定量-聚合酶链式反应反应体系(共20μl)：
(4)聚合酶链式反应反应条件：
(5)分析数据。用β-actin作为内参对P2X7受体表达进行标化。
6、蛋白印迹。
(1)蛋白提取：将DRG置于加有200μl组织裂解液(含PMSF)的1ml匀浆器中，于冰上研磨充分。反复裂解后，将匀浆样品转移到1.5ml EP管中，4℃，12000g离心10min，取上清，按比例加入5×loading buffer和DTT，混匀后煮沸5min，使蛋白变性，-20℃保存，备用。
(2)十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳。
制备SDS-PAGE凝胶，所用试剂如下表：
十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳构成(ml)
(3)上样及电泳：每孔上样量为25μl(蛋白含量约为20μg)，样本两边加2μl蛋白Marker。浓缩胶恒压90V(约45min)，分离胶120V，待溴酚蓝迁移至胶的下缘时(约90min)停止电泳。
(4)转膜：根据蛋白Marker的指示和目的蛋白的分子量准备合适大小的PVDF膜和2张4层的滤纸，PVDF膜浸入甲醇作用5min后，放入转膜缓冲液中(滤纸置于转膜缓冲液中)浸泡以备用。电泳完毕后转膜，300mA转膜2个小时。
(5)免疫反应。
A)封闭：将膜置于含5％BSA的TBST封闭液中，水平摇床室温作用2h。
B)一抗结合：将膜放入用5％BSA配制的一抗(兔来源的P2X7、TNF-α、IL-1β、IL-10稀释比例1:1000，小鼠抗β-actin单抗稀释比例1:800)中，4℃过夜，或室温平摇3h，TBST洗膜3次。
C)二抗结合：将膜用IgG-HRP二抗反应液(P2X7、TNF-α、IL-1β、IL-10二抗为山羊抗兔，按1:2000溶于封闭液，β-actin为山羊抗小鼠，按1：5000溶于封闭液)孵育，室温平摇1.5h后，TBST洗膜10min×4次。
D)、免疫复合物的检测：膜加ECL发光剂反应3min后，用保鲜膜包裹，置于X线暗盒，暗室中剪大小合适X线胶片，曝光10s～10min，显影、定影，
(6)半定量分析：胶片扫描后，通过Image图像分析软件分析目的条带在的光密度值，以各组β-actin条带的光密度值标化其相应组P2X7、TNF-α、IL-1β、IL-10的蛋白表达量。
7、新生大鼠原代培养。
3-5天内的新生SD大鼠苯巴比妥(50mg/kg)腹腔注射麻醉后，用大头针将四肢固定俯卧于泡沫手术台上，用75％酒精消毒皮肤，铺无菌手术巾。经背部正中切开皮肤，钝性分离脊柱两旁肌肉，充分暴露棘突和横突，从颈部椎管开口插入显微剪，交替在中线两侧将椎管平行剪开，用显微镊去除椎板暴露脊髓，解剖显微镜下可见两侧椎间孔内圆形透亮的脊神经节，显微镊轻轻推脊髓两侧以松动神经节，然后慢慢将脊髓从椎管中提出(神经节成串挂于脊髓两侧)转入装有5mL DMEM：F/12培养基的100mm培养皿中。在解剖显微镜下用镊子逐个分离摘取神经节。转移入加有0.25％胰蛋白酶和I型胶原酶的离心管中,37℃培养箱中消化20min。加入含有10％FBS的培养基终止胰蛋白酶的消化，离心，重悬，用吸管小心吹打，将其制成单细胞悬液，接种于用多聚氨酸包被处理的细胞培养皿中于37℃、5％CO2培养箱中进行培养。培养基成分为Neurobasal培养基、2％B27、50ng/ml神经生长因子、2mmol/L L-谷氨酰胺以及双抗。培养48h后大部分DRG已经贴壁，全量换液并加入5μmol/L阿糖胞苷以抑制非神经元细胞的增殖，96h后全量换液，此后每48h半量换液。做膜片钳实验前，神经元分别用含有或者不含200pmol/L HIV gp120处理24h。
8、电生理电流记录。
应用全细胞膜片钮技术记录全细胞电流。所用微电极用两步拉制法制成,微电极充灌电极液后电阻在2-10MΩ之间。电流信号经Axopatch 200B膜片甜放大器、Digidata1440A及Clampex10.3采集和分析。调节微操纵器使微电极尖端接近细胞表面，并对微电极内施加一负压，形成高阻封接(1-10GΩ)，置钳制电压于-60mV，吸破细胞膜。移动微操纵器上的加药装置排管，不同药物的传送依赖于重力流的作用，每管直径(I.D)为0.2mm，管口距记录细胞100μm左右，然后分别加入需要的药物。电极内液成分为(mM)：140KCl,2MgCl2,10HEPES,11EGTA,and 5ATP。用KOH调节pH到7.2。细胞外液成分为(mM)：150NaCl,5KCl,2.5CaCl2,1MgCl2,10HEPES,10D-glucose。用NaOH调节pH到7.4。
9、统计学方法。
应用SPSS统计软件对实验数据进行分析,结果以均数±标准差表示，各组之间差异性采用方差分析，组间比较采用LSD法，p<0.05表示有显著性差异，p<0.01为极显著差异。
二、结果。
(一)行为学结果。
各组大鼠造模中均未见肢体运动障碍和自残现象。造模前测定各组间机械缩足反射阈值的基础值差异无显著性(p>0.05)。
机械痛敏(MWT)测定结果。
Gp120大鼠神经病理痛模型的机械缩足反射潜伏期测定结果显示，在术后7天到14天，模型组与对照组相比，手术侧机械痛反应阈值明显降低(p<0.01)。模型+亮蓝G处理组与模型组相比，手术侧机械痛反应阈值明显升高(p<0.01)。(见图1)。
(二)实时定量-聚合酶链式反应(Real-time PCR)。
P2X7受体表达。
P2X7的Real-time PCR结果表明：gp120模型组DRG中P2X7受体mRNA表达水平较对照组明显增加(p<0.01)，gp120模型+亮蓝G处理组较模型组明显降低(p<0.01)。(见图2)。
(三)蛋白印迹。
1、P2X7蛋白印迹结果。
P2X7蛋白印迹结果表明：gp120模型组DRG中P2X7受体表达水平较对照组明显增加(p<0.01)；gp120模型组+亮蓝G处理组P2X7受体蛋白的表达低于模型组(p<0.01)(见图3)。
2、TNF-α蛋白印迹结果。
TNF-α蛋白印迹结果表明：gp120模型组DRG中TNF-α受体表达水平较对照组明显增加(p<0.01)；gp120模型组+亮蓝G处理组P2X7受体蛋白的表达低于模型组(p<0.01)(见图4)。
3、IL-1β蛋白印迹结果。
IL-1β蛋白印迹结果表明：gp120模型组DRG中IL-1β受体表达水平较对照组明显增加(p<0.01)；gp120模型组+亮蓝G处理组P2X7受体蛋白的表达低于模型组(p<0.01)(见图5)。
4、IL-10蛋白印迹结果。
IL-10蛋白印迹结果表明：gp120模型组DRG中IL-1β受体表达水平较对照组明显降低(p<0.01)；gp120模型组+亮蓝G处理组P2X7受体蛋白的表达高于模型组(p<0.01)(见图6)。
5、ERK1/2蛋白印迹结果。
ERK1/2蛋白印迹结果表明：gp120模型组DRG中ERK1/2磷酸化水平较对照组明显增加(p<0.01)；gp120模型组+亮蓝G处理组ERK1/2磷酸化水平低于模型组(p<0.01)(见图7)。
(四)全细胞膜片钳记录结果。
在培养的新生大鼠DRG神经元细胞上进行实验，神经元细胞呈圆形或椭圆形，选用轮廓和形态清晰的中小细胞进行实验。Gp120模型组的BzATP激活电流明显大于对照组(p<0.01)，亮蓝G对gp120模型组BzATP激活电流的抑制作用也较对照组明显(见图8)。
发明人研究发现注射亮蓝G后，HIV gp120模型组DRG中P2X7的表达降低，同时观察到注射亮蓝G后HIV gp120模型组大鼠的机械痛升高，表明亮蓝G可降低HIVgp120模型组神经病理大鼠的痛行为。亮蓝G处理后同时可下调HIV gp120模型组大鼠背根神经节P2X7受体的表达，降低细胞炎性因子—肿瘤坏死因子(TNF-α)和白细胞介素(IL-1β)的含量，增加抗细胞炎性因子—白细胞介素(IL-10)的含量，降低ERK1/2磷酸化水平。因此，亮蓝G可能通过减少TNF-α、IL-1β的释放、增加IL-10的释放、减少ERK1/2磷酸化水平、降低HIV gp120神经病理大鼠背根神经节P2X7受体的表达、抑制背根神经节P2X7受体介导的伤害性信息传递，减轻HIV gp120神经病理痛大鼠的痛行为。
Claims (3)
1.亮蓝G在制备防治人类免疫缺陷病毒糖蛋白120诱导神经病理痛疾病药物中的应用。
2.亮蓝G在制备人类免疫缺陷病毒糖蛋白120并发神经损伤疾病的药物中的应用。
3.亮蓝G在制备用于上述疾病防治的口服、注射、含片或其它局部或全身用药剂型药物中的应用。
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