CN105636647A - 使用植物组合物和多西紫杉醇治疗前列腺癌的联合疗法 - Google Patents

Abstract

提供了给予包含灵芝(Ganoderma？lucidum)、丹参(Salvia？miltiorrhiza)和半枝莲(Scutellaria？barbata)的非醇有机提取物的植物组合物并联合多西紫杉醇用于癌症治疗的方法。提供了一种用于人的前列腺癌治疗或疗法的方法，该方法包括：在给予有效剂量的多西紫杉醇的期间同时给予有效剂量的植物组合物，其中同时给予多西紫杉醇和植物组合物取得了比单独给予任一种药剂更有效的治疗效果。

Description

使用植物组合物和多西紫杉醇治疗前列腺癌的联合疗法

相关申请的交叉引用

本申请要求2013年6月3号提交以及名称为"使用植物组合物和多西紫杉醇治疗前列腺癌的联合疗法"的美国临时专利申请第61/830,626号的优先权，通过引用将其全部内容在此并入。

发明领域

本发明通常涉及用于治疗癌症的组合物领域。更具体地，本发明提供了多功能的，多靶点的植物提取物组合物与多西紫杉醇联用用于预防和治疗癌症，尤其是前列腺癌。

发明背景

前列腺癌是从前列腺组织开始的癌症。位于膀胱下方和直肠前方，前列腺是负责生产精液的男性的性腺体。除了皮肤癌，前列腺癌是美国男性最常见的癌症。美国癌症协会对2013年美国前列腺癌的评估：(a)约238,590例前列腺癌新发病例将被诊断出；(b)约29,720名男性将死于前列腺癌；(c)约1/6的男性在一生中将被诊断为前列腺癌。

前列腺癌主要发生在老年男性中。约三分之二在65岁及以上男性中诊断出，而在40岁以下男性中很少发生。诊断的平均年龄约为67岁。在美国男性中，前列腺癌是第二大致死癌症，仅次于肺癌。大约36名男性中就有1名会死于前列腺癌。前列腺癌是严重的疾病，但大多数被诊断为前列腺癌的男性却不是死于这种癌症。事实上，在美国有超过250万被诊断为不同程度的前列腺癌的男性目前仍活着。

幸运的是，如果被早发现，前列腺癌是最容易治疗的恶性肿瘤之一。近年来常规筛查已经提高了对前列腺癌的诊断。前列腺是一个围绕着尿道的核桃大小的器官；它产生液体，这种液体是精液的一部分。超过99％的前列腺癌发生在腺细胞。这种类型的前列腺癌被称为腺癌。更罕见地，前列腺癌产生在前列腺的其它组织，被称为肉瘤。

大多数前列腺癌生长缓慢；然而，存在侵袭性的前列腺癌病例。癌细胞可从前列腺转移(扩散)到身体的其它部位，尤其是骨骼和淋巴结。前列腺癌可引起疼痛，排尿困难，性交过程中的问题，或勃起功能障碍。其它的症状可能在疾病的后期阶段发展。

用于治愈前列腺癌的治疗方案主要是手术，放疗，和质子治疗。其它的疗法，如激素治疗，化疗，冷冻治疗，和高强度聚焦超声治疗(HIFU)也是存在的，取决于临床方案和预期结果。

男性的年龄和基础的健康状况，转移的程度，显微镜下的外观，和癌症对于初级治疗的响应对于确定疾病的结果很重要。是否决定对局限性前列腺癌(前列腺中存在肿瘤)进行根治性的治疗是对于患者的生存和生活质量而言，在预期的有益和有害效果之间的患者权衡。

化疗(化疗)是使用能破坏癌细胞和肿瘤的药物进行癌症治疗。前列腺癌的化疗通常用于癌症已经转移到骨骼和身体其它部位的患者。在一些情况下，化疗可能与其它疗法联用，如放疗，用于治疗局限性前列腺癌。在这些情况下，低剂量的化疗被用于使癌细胞对放疗敏感。全身性的化疗可以通过嘴进行或者注射到静脉或者肌肉进行，并且被设计成通过身体到达癌细胞。局部化疗是直接递送到前列腺或者身体的其它部位来靶向特定区域的癌细胞。

前列腺癌的化疗治疗是对每个患者的个体化治疗。通过检查血液计数和其它健康指标来选择正确的化疗药物组合，以及其它的前列腺癌疗法，如果存在。直到最近，化疗使用的药物被局限在环磷酰胺，蒽环类药物(阿霉素或米托蒽醌)和雌氮芥，并且这些治疗的效果比较一般。在患者被单独给予肾上腺皮质激素或者给予米托蒽醌和强的松或者氢化可的松后观察到姑息性效果。Ⅱ期临床试验后，联合使用米托蒽醌和肾上腺皮质激素被公认为激素抵抗型前列腺癌的标准疗法。

紫杉烷类化合物(如紫杉醇和多西紫杉醇)已被证明对多种癌症具有显著的抗肿瘤和抗癌作用。例如，紫杉醇通过干扰微管破坏的正常功能来起作用。紫杉醇结合到微管蛋白的β亚基，它是微管的构建块，导致微管结构的超稳定。形成的紫杉醇/微管结构不能分解，从而阻止有丝分裂和抑制血管生成。然而，紫杉烷类化合物水溶性差是开发有效的以紫杉烷类化合物为基础的癌症疗法的重大挑战。此外，在联合治疗中不同紫杉烷类化合物制剂与其它治疗试剂的相互作用尚需要研究。

多西紫杉醇是化疗药物中的一类；紫杉烷，是一种半合成的紫杉醇(Taxol)类似物，紫杉醇是一种珍稀的太平洋紫杉树短叶红豆杉树皮中的提取物。由于紫杉醇的稀缺，广泛研究的开展促使多西紫杉醇的出现-一种10-脱乙酰基巴卡丁III的酯类产物，10-脱乙酰基巴卡丁III是从可再生及容易获得欧洲紫杉树中提取的。多西紫杉醇在化学结构中的两个位置与紫杉醇不同。它在碳10上具有羟基官能团，而紫杉醇具有乙酸酯，并且苯丙酸侧链上的叔丁基氨基甲酸酯代替了紫杉醇的苄基酰胺。碳10官能团的改变使得多西紫杉醇比紫杉醇更易溶于水。(ClarkeSJ,RivoryLP(February1999)."Clinicalpharmacokineticsofdocetaxel".("多西紫杉醇的临床药物动力学")。ClinPharmacokinet36(2):99-114.)

多西紫杉醇在全世界市售，其使用的名字是赛诺菲-安万特的泰索帝多西紫杉醇被用于治疗晚期的前列腺癌；尤其是男性中前列腺癌已经扩散到前列腺以外并且已经对激素治疗产生抗性。对于处于该阶段癌症的男性来说，没有更多的疗法选择，因为他们可能已经接受过放疗或者外科手术并且已经尝试过激素治疗而且产生了抗性。(MartelCL,GumerlockPH,MeyersFJ,etal.Currentstrategiesinthemanagementofhormonerefractoryprostatecancer(激素难治疗性前列腺癌的治疗现状).CancerTreatRev.2003；29:171-187.)每三周，通过一小时输液给药多西紫杉醇，需要10次或更多次这样的周期。

多西紫杉醇，无论是否与强的松一起使用，是优选的已经被证明能够帮助患有晚期前列腺癌的患者活得更久的化疗药物。(TannockIF,deWitR,BerryWR,etal.Docetaxelplusprednisoneormitoxantroneplusprednisoneforadvancedprostatecancer(多西紫杉醇联合强的松或者米托蒽醌联合强的松用于晚期前列腺癌).N.Engl.J.Med.351(15):1502-12(2004))。联合使用多西紫杉醇和雌氮芥或者强的松的疗法使治疗对激素去势耐受的癌症成为了可能。TAX327试验是III期研究，该研究在对雄性激素非依赖性转移性前列腺癌进行治疗时从多西紫杉醇中获得了显著的存活益处。相对于米托蒽醌的治疗，多西紫杉醇治疗的患者显示出12％的总反应率而米托蒽醌显示出7％的总反应率。多西紫杉醇的另一大优势是提高了生活质量。(BertholdDR,PondGR,SobanF,DeWitR,EisenbergerM,TannockIF.Docetaxelplusprednisoneormitoxantroneplusprednisoneforadvancedprostatecancer:UpdatedsurvivalintheTAX327study(多西紫杉醇联合强的松或者米托蒽醌联合强的松用于治疗晚期前列腺癌：TAX327研究的最新存活率).JClinOncol.2008；26(2):242-245.)

多西紫杉醇作为化学治疗试剂，是细胞毒性化合物，因此是有效地生物破坏性药物。就所有的化疗而言，不良反应是常见的，许多不同的副作用也已经被记录下来。需要增强的癌症治疗方案来增加治疗的有效性同时减少来自化疗治疗的副作用和毒性。

含有治疗上有效剂量的灵芝提取物、丹参提取物和半枝莲提取物中的两种或更多种的植物组合物用于癌症预防和治疗已经被Dao等报道。(USPat..No.8,173,177)。

发明概述

本发明涉及到联合使用多西紫杉醇和植物提取物组合物用于前列腺癌的治疗和疗法。

当与标准的非植物性化疗试剂一起使用时，植物提取物组合物可以被用来减少或缓解副作用。可以通过抑制炎症反应，调节免疫反应，减少氧化应激，调节免疫反应，抑制病毒和微生物感染，调节细胞增殖反应或者其它生物学反应来减少副作用。本发明的组合物也可以通过平衡常规的生物学反应对抗由于治疗试剂的治疗引起的特殊生物学通路的紊乱来缓解标准治疗试剂的副作用。

在一优选实施方案中，该组合物包括灵芝(Ganodermalucidum)、半枝莲(Scutellariabarbata)、黄芩(Scutellariabaicalensis)、丹参以及任选的沙棘(Hippophaerhamnoides)(沙棘(seabuckthorn))的提取物中的两种或更多种的组合。

在一实施方案中，提供了用于人的前列腺癌治疗或疗法的方法，该方法包括：给予有效剂量的植物组合物，该组合物能够有效地降低雄性激素受体蛋白的表达；同时给予有效剂量的具有抗雄性激素活性的化合物，其中同时给予化合物和植物组合物取得了比单独给予任一种药剂更有效的疗效。使用了含有灵芝、丹参和半枝莲的非醇有机提取物的植物组合物与多西紫杉醇联合使用的疗法。

公开了用于个体前列腺癌治疗或降低其严重性的方法，该方法包括：给予有效剂量的包含灵芝、丹参和半枝莲的有机介质中的两种或更多种提取物的植物组合物，其中每种提取物包含10％-50％w/w的灵芝和半枝莲以及1％-10％w/w的丹参，其中植物组合物能够有效地减少与前列腺癌相关的症状；以及联合给予有效剂量的多西紫杉醇，其中联合给予该化合物和植物组合物取得了比单独给予任一种药剂更有效的疗效。

在一些情况下，前列腺癌的症状是前列腺肿瘤的大小。在一些情况下，前列腺肿瘤是雄性激素依赖性的恶性腺癌。在一些情况下，前列腺癌的症状是前列腺癌组织的生长速度。在一些情况下，前列腺癌组织来源于雄性激素依赖性的恶性腺癌。在一些实施方案中，前列腺癌的症状是前列腺特异性抗原(PSA)的水平。

在一些实施方案中，联合给药包括每天给予所述植物组合物和隔一段时间周期性给予多西紫杉醇。在一些情况下，其中时间周期是3周。

在一些实施方案中，提取物是非醇的有机提取物。在一些实施方案中，提取物是用乙酸乙酯提取的。

在一些实施方案中，与单独给予相等剂量的多西紫杉醇相比，联合给予多西紫杉醇和植物组合物会降低毒性和副作用。

在一些实施方案中，植物组合物含有2％w/w的丹参提取物。

在一些实施方案中，植物组合物含有乳化剂，表面活性剂，抗氧化剂和稀释剂中的一种或多种。在一些实施方案中乳化剂是从脂肪酸，脂肪酸聚氧乙烯甘油酯，聚氧基化(polooxylated)蓖麻油，乙二醇酯，丙二醇酯、脂肪酸甘油酯，脱水山梨糖醇酯，聚甘油酯，脂肪醇乙氧基化物，乙氧基化丙氧基化嵌段共聚物，脂肪酸聚乙二醇酯，cremophores，甘油单辛酸/癸酸酯，CremophorEL，油酸，聚乙二醇甘油辛酸/癸酸酯(Labrasol)，Gelucire、Capryol、Captex、Acconon、Transcutol、和三乙酸甘油酯中的一种或多种中选择的。在一些实施方案中，抗氧化剂选自抗坏血酸和α-生育酚。在一些实施方案中，稀释剂是豆油。

在一些实施方案中，多西紫杉醇通过静脉给药。在一些实施方案中，植物组合物通过口服给药。在一些实施方案中，植物组合物采用适合口服给药的剂型。

在一些实施方案中，前列腺癌是去势抵抗性前列腺癌。在一些实施方案中，前列腺癌是雄性激素敏感性前列腺癌。

在一些实施方案中，多西紫杉醇以亚治疗剂量给药。

在一些实施方案中，植物组合物含有灵芝提取物的有效剂量选自10％、15％、20％、30％、33％、35％、40％、42％、44％、45％、46％、46.5％、47％、47.5％、48％、48.5％、49％、49.5％和50％。

在一些实施方案中，植物组合物含有半枝莲提取物的有效剂量选自10％、15％、20％、30％、33％、35％、40％、42％、44％、45％、46％、46.5％、47％、47.5％、48％、48.5％、49％、49.5％和50％。

在一些实施方案中，其中植物组合物含有丹参提取物的有效剂量选自1％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％、8.5％、9％、9.5％和10％。

本发明以及本发明的其它目的、特征和优点将在下述发明详述、附图和实施方案中进一步说明。

附图简述

图1提供了灵芝、半枝莲和丹参(Aneustat^TM,OMN54)以及多西紫杉醇联合治疗对(小鼠)体内LNCaP(雄性激素敏感性)人前列腺癌肿瘤SRCX生长的影响(P<0.01)。

图2提供了灵芝、半枝莲和丹参(Aneustat^TM,OMN54)以及多西紫杉醇+雌氮芥联合治疗对(小鼠)体内DU145(雄性激素非依赖性)人前列腺癌肿瘤SRCX生长的影响(P<0.01)。

图3提供了在对(小鼠)体内LTL-313(雄性激素依赖性)人前列腺癌肿瘤SRCX治疗时，联合使用OMN54和多西紫杉醇对肿瘤萎缩的协同疗效(p＝0)。

图4提供了在对LTL-313(雄性激素依赖性；腺癌)患者来源的人前列腺癌组织SRCX治疗时，联合使用OMN54和多西紫杉醇对生长抑制的协同疗效。TXT的剂量，联合-低和联合-中在实施例7中有描述。

图5提供了在对LTL-313(雄性激素依赖性；腺癌)患者来源的人前列腺癌组织SRCX治疗时，联合使用OMN54和多西紫杉醇对前列腺特异性抗原(PSA)水平的降低的以剂量敏感的方式的协同疗效。

发明详述

定义

本说明书中所使用的术语“植物”是指种子、叶、茎、花、根、果、树皮或者其它对描述目的有用的植物部分。在一些用途方面，优选使用植物的地下部分，如根和根状茎。叶、茎、种子、花、果、树皮或者植物的其它部分同样具有药用价值，可以被用来制茶和饮料、乳膏及用于食品制备。

为本说明书和权利要求书目的所使用的术语“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”或“治疗(therapy)”包括预防、抑制、治愈或缓解。

所用术语“给药”，是指组合物通过能够达到所需目的的方式被输送到受体。前述组合物能够通过有效的途径给予，如口服、外用、直肠给药等。

“协同效应”可以用联合指数法(CI)测定。联合指数法由Chou和Talalay描述。(Chou,T.-C.Themedian-effectprincipleandthecombinationindexforquantitationofsynergismandantagonism(协同和拮抗关系中的中效原理和联合指数),p.61-102.InT.-C.ChouandD.C.Rideout(ed.),Synergismandantagonisminchemotherapy(化疗中的协同和拮抗).AcademicPress,SanDiego,Calif.(1991)；Chou,T.-C,andP.Talalay.Quantitativeanalysisofdose-effectrelationships:thecombinedeffectsofmultipledrugsonenzymeinhibitors(剂量效应关系的定量分析：多种药物对酶抑制剂的联合作用).Adv.EnzymeRegul.22:27-55(1984))。CI值是0.90或稍低被认为是协同的，值是0.85是中等地协同，值低于0.75是显著地协同。CI值在0.90-1.10被认为仅是相加，而更高值则是拮抗的。

表1.协同/拮抗作用作为CI值的函数

联合指数(CI)值	解释
		>10	非常强的拮抗作用
3.3-10	强的拮抗作用
		1.45-3.3	拮抗作用
1.2-1.45	中等的拮抗作用
		1.1-1.2	轻微的拮抗作用
0.9-1.1	相加的
		0.85-0.9	轻微的协同作用
0.7-0.85	中等的协同作用
		0.3-0.7	协同作用
0.1-0.3	强的协同作用
		<0.1	非常强的协同作用

需要注意的是协同作用的确定会受到生物多样性、剂量、实验条件(温度、pH、氧张力等)、治疗方案和组合比例的影响。

植物组合药物包括：生物可利用度和最小的毒性。这种药物可以优选口服给药。植物组合物提供了多种治疗功能的联合来同时协同地作用于多个生物靶点。植物组合物包含低剂量的单独治疗成分来减少生理平衡的破坏及耐药性的发展。通常情况下，在选择来自天然的活性成分时需要考虑治疗效果和安全性的历史。

癌症：

癌症中涉及一些细胞通路。凋亡通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路、通过磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)的细胞信号转导的通路、信号转导器与转录激活因子(STAT)信号转导通路、p53信号转导通路、Wnt信号转导通路、环氧合酶(COX)都是已知的参与到肿瘤形成的几个步骤中，如致瘤性转化、转移和血管形成。同样，生长因子、致癌基因如Ras突变基因、肿瘤抑制子基因、雄性激素和雌性激素受体、共激活剂&抑制剂，以及许多其它的通路也已经被证明能够影响肿瘤的形成和癌变。

适合癌症的植物药物应该具有影响这些通路中的一种或多种的功能以及与缓解癌症状况相关的功能，如抗发炎、免疫系统调节、抗血管生成、抗转移等等。

适合于特定类型癌症的植物药应该具有也能够定向到这种癌症独有的通路的功能。例如，适合于前列腺癌治疗的植物药物应该包含与雄性激素受体相关的功能。优选的，植物药物通过与标准的化疗方案联合给予来实现目的。

前列腺癌是复杂的疾病。大量的生物通路牵连进前列腺癌的发展中：生长因子活性、细胞死亡(凋亡)、肿瘤发生、肿瘤抑制、细胞周期调节、细胞表面调节、雄性激素受体、共激活剂&抑制剂。一些情况与前列腺疾病相关：良性前列腺增生(BPH)、前列腺炎、前列腺上皮内瘤变(PIN)。

良性前列腺增生(BPH)指的是中老年男性的前列腺体积增大。BPH特征为前列腺间质和上皮细胞增生，导致了前列腺尿道周围区域大量的、相当离散的结节的形成。尽管前列腺特异性抗原水平在这些患者中可能升高，由于器官体积增大以及尿路感染引发的炎症，BPH并不被认为是一种癌前病变。

α阻断剂(α1-肾上腺素受体拮抗剂)使得BPH症状得到缓解。当5α-还原酶抑制剂和α阻断剂一起使用时，在前列腺肥大的患者中已经注意到BPH发展为为急性尿潴留和手术的进程减缓。(KaplanSA,McConnellJD,RoehrbornCG,etal(2006).Combinationtherapywithdoxazosinandfinasterideforbenignprostatichyperplasiainpatientswithlowerurinarytractsymptomsandabaselinetotalprostatevolumeof25mlorgreater(联合使用多沙唑嗪和非那雄胺用于具有下尿路症状以及基线总前列腺体积为25ml及以上的患者的良性前列腺增生治疗).JUrol175(1):217-20.)

一些植物成分对于治疗BPH很有效，可以被用来作为植物配方成分。锯叶棕榈(Serenoarepens)(锯棕榈)果提取物在缓解轻度至中度BPH症状中具有与非那雄胺的类似的疗效。(WiltTJ,IshaniA,MacDonaldR,(2002).Serenoarepensforbenignprostatichyperplasia(锯叶棕榈用于良性前列腺增生治疗).CochraneDatabaseSystRev2002(3),CD001423)。其它用于治疗BPH的植物有效成分包括来源于非洲马铃薯(Hypoxisrooperi)(非洲之星草)、臀果木(非洲臀果木(Prunusafricana)树皮的提取物)、西葫芦(Cucurbitapepo)(南瓜)的种子和大荨麻(Urticadioica)(刺荨麻)的根的β-谷甾醇。(WiltTJ,IshaniA,RutksI,MacDonaldR(2000)Phytotherapyforbenignprostatichyperplasia(用于良性前列腺增生的植物疗法)PublicHealthNutr3(4A):459-72)。一项双盲试验还支持了黑麦花粉的功效。(BuckAC,CoxR,ReesRWM,etal.(1990)Treatmentofoutflowtractobstructionduetobenignprostatichyperplasiawiththepollenextract,Cernilton.Adouble-blindplacebo-controlledstudy(使用花粉提取物-舍尼通治疗由前列腺增生引起的流出道梗。一项双盲安慰剂研究)Br.J.Urol.66:398-404)。

前列腺癌被归为恶性腺癌或者腺癌，当正常的分泌精液的前列腺细胞突变为癌细胞时癌症就开始了。最初，小的癌细胞团块被局限于其它正常的前列腺中，这种情况被称为原位癌或者是前列腺上皮内瘤(PIN)。虽然没有明确的证据证明PIN是癌症的前体，但是它与癌症密切相关。

前列腺特异性抗原(PSA)是34KD的糖蛋白，几乎全部由前列腺产生。又被称为激肽释放酶III，PSA是一种丝氨酸蛋白酶。(LiljaH.(Nov2003)."BiologyofProstate-SpecificAntigen"(前列腺特异性抗原的生物学特征).Urology62((5Suppl1)):27-33)。

在前列腺癌和其它非恶性前列腺疾病如BPH存在时，PSA经常升高。用于PSA检测的血液检查是目前最有效的用于早期前列腺癌检测的方法。高于正常水平的PSA被认为与局限性前列腺癌和转移性前列腺癌(CaP)相关。然而，除了癌症以外有许多原因可引起PSA水平的变化。在没有癌症的情况下，两种引起高PSA水平的常见原因是前列腺肿大(良性前列腺增生(BPH))和前列腺感染(前列腺炎)。

因此，PSA不是一个最好的检测。一些患有前列腺癌的男性不具有升高的PSA，而大多数PSA升高的男性并没有患前列腺癌。除了活检之外，没有无创性的检查可以提供明确的前列腺癌诊断。

用于前列腺癌治疗的植物组合物

当高PSA水平被检测出时，植物配方成为了最佳的一线疗法。植物组合物，如在本发明中披露的那些，都具有很低的毒性，而对前列腺癌很有效。

按照成分以及组合成分中许多需要的功能的证明来设计植物组合物。大量的具有治疗活性的化学物质存在于灵芝(#9)、半枝莲(#15)和丹参(#14)中：灵芝酸A、隐丹参酮、丹参酮IIA、黄芩素四甲基醚、黄芩素、芹菜素和汉黄芩素。

大量的化学物质存在于植物组合物中：腺苷、灵芝酸A、油酸、丹参酮IIA、黄芩素、芹菜素、木犀草素和汉黄芩素。任一种这些化学物质已知表现抗病毒、抗炎、免疫调节、抗血管生成及抗癌/抗肿瘤转移功能中的一种或多种。

灵芝(#9)、半枝莲(#15)和丹参(#14)的示例性组合被命名为OMN54，其基于由这三种植物的提取物的某种组合表现的协同作用，其中每种植物在组合成分中所占的比例在1％w/w-90％w/w之间。这些植物的提取物比较适宜在有机介质中进行制备，如乙醇以及包含酯类(如乙酸乙酯)、脂类等的非醇介质。在一个优选的实施方案中，提取物是在乙酸乙酯介质中进行制备的。

显著的协同作用由含有指定量的下述三种有机提取物组成的植物组合物表达出来：

(i)灵芝在33-50％w/w。更具体地灵芝提取物选自33％、35％、40％、42％、44％、45％、46％、46.5％、47％、47.5％、48％、48.5％、49％、49.5％和50％。

(ii)半枝莲在33-50％w/w。更具体地半枝莲提取物选自3％、35％、40％、42％、44％、45％、46％、46.5％、47％、47.5％、48％、48.5％、49％、49.5％和50％中。

(iii)丹参在1-10％w/w。更具体地丹参提取物选自1％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％、8.5％、9％、9.5％和10％。

体外研究表明OMN54不能调节未受刺激PBMC中的促炎症蛋白(表明长期使用安全)。在炎性刺激物(PHA有丝分裂原)存在时，OMN54抑制炎症信号转导(显著的抗炎活性)。观察到OMN54在受刺激和未受刺激细胞中对于包括细胞因子、趋化因子和生长因子在内的大量蛋白的作用。

人前列腺癌细胞系，LNCaP，是雄性激素敏感和PSA阳性的。在LNCaP细胞系上检测OMN54对与前列腺癌相关的特定基因的表达的活性。高水平的前列腺特异性抗原(PSA)是与前列腺癌相关的。OMN54对于PSA转录的显著抑制作用被认为对于前列腺癌的治疗是有益的。

OMN54对于前列腺癌细胞显示出明显的抗增殖作用，诱导了雄性激素受体(AR)阳性的(LNCaP)和雄性激素受体阴性的(DU-145)前列腺癌细胞系的凋亡。OMN54也显示出NF-κB抑制作用。植物组合物显示出的抗炎和抗增殖功能同样对BPH有效。因此，在对于高PSA水平的检测之后以及采用侵害性检查用于癌症的诊断之前，对于BPH和像前列腺癌及PIN这样的癌症状况均有效的低毒的植物配方，对于首次干预提供了有希望的方案。

其它对前列腺癌有效的植物成分包括辣椒素，发现于红辣椒中，其对培养的及小鼠异种移植中的人前列腺癌细胞具有显著地抗增殖作用。(MoriAetal.CancerRes.2006Mar15；66(6):3222-9)。辣椒素能够下调PSA的表达，这是通过阻止NF-κB的核迁移抑制其活性从而介导PSA转录的直接抑制来实现的。(Id.)

关于绿茶衍生物的2006年的研究表明其对于易患前列腺癌的高风险患者具有预防作用。(BettuzziS,BrausiM,RizziF,CastagnettiG,PeracchiaG,CortiA(2006)."Chemopreventionofhumanprostatecancerbyoraladministrationofgreenteacatechinsinvolunteerswithhigh-gradeprostateintraepithelialneoplasia:apreliminaryreportfromaone-yearproof-of-principlestudy"(患有高级别前列腺上皮内瘤的志愿者通过口服绿茶儿茶酚化学预防前列腺癌：一年原理证明研究的初步报告).CancerRes66(2):1234-40)。猜测发现于十字花科蔬菜的被称为二吲哚甲烷的植物化学成分具有抗雄性激素和免疫调节的性质。

植物是用于发现和发展用于治疗人类疾病的新的、天然衍生的试剂的宝贵资源。植物提取物通常含有多种分子并且拥有对于治疗和预防疾病是有用的多种功能。植物提取物还可以通过影响多种生物途径如炎症途径、免疫反应途径和氧化应激反应途径来维持正常组织的动态平衡。其结果是，植物提取物可以减轻用于治疗多种疾病靶点的许多治疗药物的有害副作用。

植物已经被证明是成功的抗癌成分的来源。例子包括绞股蓝(Gynostemmapentaphyllum)提取物、茶树(Camelliasinensis)(绿茶)和山楂(Crataeguspinnatifida)(山楂果)以及相同的制造方法是美国专利号为5,910,308和6,168,795的主题。一些药物，其从目前仍用于癌症治疗的植物中提取，被设计成了干扰微管变短(解聚作用)或者变长(聚合作用)的，如紫杉醇、多西紫杉醇、依托泊苷、长春新碱、长春花碱和长春瑞滨(Compton,D.A.,etal,(1999)Science286:913-914)。它们有一个共同的作用机制，就是结合于微管蛋白，组成微管的分子。(Compton,D.A.,etal,(1999)Science286:913-914)。至少六种植物衍生的抗癌药物已经获得FDA的批准(如，紫杉醇、长春碱、长春新碱、托泊替康、依托泊苷、替尼泊苷)。其它试剂正在进行临床试验评估(如，喜树碱、9AC和伊立替康)。植物提取物用于癌症治疗在美国专利申请公开20050214394Al、20050208070Al和20050196409Al中被描述。

本发明提供了新的组合物，该组合物包含植物提取物能够治疗与其病理学的多个生物途径相关的人类疾病。本发明的提取物包含两种或更多种的植物提取物，这些植物提取物能够协同地调节多种生物途径，这些生物途径包括但不限于炎症反应、免疫反应、氧化反应、病毒和微生物感染以及细胞增殖反应。

(i)灵芝(灵芝)：灵芝因为具有增强记忆和防止老年健忘的功效而出名，早在公元456-536就被记录在神农本草经第一卷中。采用口服或者局部给予灵芝的小鼠试验表明灵芝具有抗炎活性。(Stavinoha,W.,etal.,(1995).Studyoftheanti-inflammatoryefficacyofGanodermalucidum(灵芝的抗炎功效研究).InB.-K.Kim,&Y.S.Kim(Eds.),RecentAdvancesinGanodermalucidumresearch(灵芝研究的新进展)(pp.3-7).SeoulKorea:ThePharmaceuticalSocietyofKorea)。

提出灵芝属的应用(1)具有发展成癌症的高风险个体的癌症化学预防(2)在预防癌症转移或者复发中的辅助作用(3)减轻与癌症相关的恶病质和疼痛和(4)与化疗同时的辅助使用以减少副作用、保持白细胞数量以及允许更佳的化疗或者放疗剂量。(Chang,R.(1994)EffectiveDoseofGanodermainHumans(灵芝属用于人的有效剂量)；ProceedingsofContributedSymposium59A,B5thInternationalMycologicalCongress,Vancouver:pp.117-121)。由于人体剂量的研究是根据传统和经验的，通过使用这个数据和药代动力学原理计算出了用于治疗的灵芝属的适宜的剂量范围。计算结果表明(1)为了维持健康，灵芝属干子实体的剂量为每天0.5-1g(2)如果有慢性疲劳，压力，自身免疫，或其它慢性健康问题每天2-5g(3)有重大疾病每天5-10g。(Chang,R.(1993)LimitationsandPotentialapplicationsofGanodermaandrelatedfungalpolyglycansinclinicalontology(灵芝属及相关真菌蛋白多糖在临床本体中的局限性和潜在应用)；FirstInternationalConferenceonMushroomBiologyandMushroomproducts:96)。

虽然灵芝是优选，但是本领域技术人员能够确认灵芝属的其它种类也可以被用在本发明中。例如，松杉灵芝(G.tsugae)已经被证明在致敏性小鼠模型中能够调节Thl/Th2和巨噬细胞反应，同时由松杉灵芝重组表达的真菌免疫调节蛋白，FlP-gts能够抑制A549人肺腺癌细胞系中的端粒酶活性(Lin,J.Y.etal,(2006)FoodChem.Toxicol；Liao,C.H.etal,(2006)Mo.Carcinog.45(4):220-9)。其它灵芝属种类的例子包括但不限于，树舌灵芝(G.applanatum)、蒙古灵芝(G.mongolicum)、小孢子灵芝(G.microsporum)、G.subamboinense、弗氏灵芝(G.pfeifferi)、G.meredithae、G.oregonense(G.oregonse)、无柄灵芝(G.resinaceum)、G.oerstedii、马蹄状灵芝(G.ungulatum)、奇异灵芝(G.mirabile)、松杉灵芝(G.tsugae)、树灵芝(G.sessile)、紫光灵芝(G.valesiacum)、拱状灵芝(G.fornicatum)、G.carnosum、南方灵芝(G.australe)和狭长孢灵芝(G.boninense)。

半枝莲(黄芩)：半枝莲，用于肝、肺和直肠肿瘤的传统中药，已被证明能够抑制突变，黄曲霉毒素B1(AFB1)和细胞色素P450链接的氨基比林N-脱甲基酶的DNA结合以及代谢(WongB.Y.etal,(1993)Eur.J.CancerPrev.2(4):351-6；WongB.Y.etal,(1992)Mutat.Res.279(3):209-16)。半枝莲也能够体外增强巨噬细胞的功能以及体内抑制肿瘤的生长(WongB.Y.etal,(1996)CancerBiother.Radiopharm.ll(l):51-6)。

这种草本植物含有维生素C和维生素E以及钙、钾、镁、铁、黄芩苷锌、挥发油、单宁酸和苦味素。黄芩素作用于中枢神经系统。已经通过液相色谱纯化获得来源于半枝莲的活性成分黄芩素(WenzhuZhangetal,(2003)J.ofLiquidChromatography&RelatedTechnologies26(13):2133-40)。

(iii)黄芩(Scutellariabaicalensis)：黄芩已经被证明对于淋巴细胞性白血病、淋巴瘤和骨髓瘤细胞系具有抗增殖和细胞凋亡活性，拥有对人恶性脑肿瘤细胞具有抗癌活性(Kumagai,T.etal.(2006)Leuk.Res.；Scheck,A.C.etal,(2006)BMCComplementAltern.Med.6:27)。

半枝莲不应与黄芪黄芩混淆。半枝莲，半枝莲的整棵植株，不应该与“黄芩”混淆，“黄芩”是黄芩的常用名，是黄芩的根。尽管两者属于同一属，半枝莲用的是上半部分，在活性成分中含有精油，而黄芩主要依赖于类黄酮，尤其是黄芩苷和黄芩素。黄芩(Scutellariaradix)(黄芩的根)和半枝莲含有不同的类黄酮而且对于人白血病细胞系HL-60的增殖具有不同的效果。Sonodaetal.,J.Ethnopharm91:65-68(2004)

尽管半枝莲和黄芩是优选的，本领域的技术人员会认识到黄芩属的其它种类也可以用于本发明。例如，黄芩被证明能够抑制乙醇诱导的半胱天冬酶-11的表达以及N(2)a细胞中的细胞死亡，黄芩素，黄芩中的一种成分，造成人骨髓瘤细胞细胞增殖的抑制以及细胞凋亡的诱导(Kang,K.etal,(2005)BrainRes.Mol.BrainRes.142(2):139-45；Ma,Z.etal.(2005)Blood105(8):3312-8)。其它黄芩属的例子包括但不限于，Scutellariaamabilis、黄芩、甘肃黄芩(Scutellariarehderiana)和Scutellarialateriflora。优选的组合是从特殊种类提取的提取物与其它植物提取物以制剂的形式发挥协同作用或者与其它治疗药物以组合物的形式发挥协同作用。

(iv)丹参(丹参)：有超过900种丹参而且其中多数都有药用的历史。丹参在传统中药中被用来活血化瘀(BenskyD.,GambleAChineseherbalMedicineMateriaMedica1987EastlandPress:Seattle.384)。它增加了血小板的SOD的活性，从而提供免于肺栓塞的保护和抑制血小板聚集。(Wang,X.etal,(1996)ZhongguoZhongYaoZaZhi21:558-60)。丹参已经被证明能降低胆固醇，减少内皮细胞损伤以及抑制高脂血症动物的脂质过氧化作用。对LDL氧化的抑制可以降低动脉粥样硬化(WuY.J.etal,(1998)ArteriosclerosisThrombVaseBiol18:481-6)。一种丹参组分被发现能够通过减少Ca²⁺调动来抑制去甲肾上腺素诱导的主动脉条收缩。这一血管舒张活性可以解释丹参在高血压中的传统应用(NagaiM.etal,BiolPharmBull(1996)19:228-32)。丹参已经被证明具有比硝酸甘油更明显的优势，具有更持久的作用和更好的改善心脏功能(Bai,Y.R.andWang,S.Z.,(1994)ZhongguoZhongXiYiJieHeZaZhi14:24-5,4)。

丹参同样也是丹参化合物中的上等原料。丹参化合物含有四中重要的草药用于改善外周循环和整体健康。Crataeguslevigata的作用被中草药丹参(丹参)，印度草药毛喉鞘蕊花和缬草增强。中草药利用丹参治疗妇女的月经不调、腹痛、失眠、荨麻疹、肝炎和乳腺炎。

沙棘(Hippophaerhamnoides)(沙棘)：沙棘籽油中含有高量的两种必需脂肪酸，亚油酸和α-亚麻酸，它们是其它多不饱和脂肪酸如花生四烯酸和二十碳五烯酸的前体。从沙棘果/皮中提取的油富含棕榈油酸和油酸(Chenetal,"Chemicalcompositionandcharacteristicsofseabuckthornfruitanditsoil.(沙棘果及其油的化学成分和特征)"Chem.Ind.ForestProd.(Chinese)10(3),163-175)。血脂中α-亚麻酸水平的升高能够明显改善阿尔茨海默病的症状(Yangetal.,(2000)J.NutrBiochem.11(6):338-340)。α-亚麻酸的这些作用可能是由于类花生酸的组成以及不依赖类花生酸合成的其它机制的改变造成的(Kelley(1992)Nutrition,8(3),215-2)。

沙棘(沙棘)的抗氧化和免疫调节特性已经通过采用淋巴细胞作为模型系统被证实了。(Geethaetal.JEthnopharmacol2002Mar；79(3):373-8)。也已经证实从沙棘中提取的己烷提取物的抗溃疡特性。(SuleymanH.etal,(2001)PhytotherRes15(7):625-7)。采用沙棘草本制剂对小鼠全身致死剂量辐射进行的辐射防护显示出自由基清除、干细胞增殖加速和免疫刺激特性。(GoelH.C.etal.,(2002)Phytomedicine9(1):15-25)

(vi)茶树(Camelliasinensis)(绿茶)：茶树植株的干叶可以被制成三种茶：乌龙茶、红茶和绿茶。绿茶提取物是富含生物黄酮的有效提取物，主要被用来抵御自由基。它含有大量的多酚类物质，是生物类黄酮的一种。在绿茶制作时，茶叶通过湿热或者干热破坏多酚氧化酶从而防止多酚类物质氧化而保持稳定。这些多酚类物质是绿茶中主要的生物活性成分。在优选的实施方案中，绿茶是龙井茶或者龙井茶。

绿茶中的多酚类物质是儿茶酚，其具有多个链接的环状结构。多酚类物质是具有多个苯酚基团的生物类黄酮形式。它们控制味道和生物作用。儿茶酚，具有抗氧化特性的多酚类物质中的一类化学成分(保护细胞免受自由基介导的破坏)，包括表没食子儿茶素-3没食子酸酯(EGCG)、表没食子儿茶素和表儿茶素-3-没食子酸酯。最近，ECGC被证明是尿激酶(Jankunetal.,(1997)Nature387:561)和对苯二酚氧化酶的抑制剂；这些酶可能对肿瘤细胞的生长很关键。表没食子儿茶素-3没食子酸酯(EGCG)也能够保护免受消化道和呼吸道的感染。

含有灵芝、半枝莲、黄芩和丹参，以及选择性添加沙棘(沙棘)和茶树(绿茶)中的两种或更多种提取物组合的组合物具有新的肿瘤抑制、提高免疫力、减少炎症和抗氧化的特性，基于本发明的方法中使用的两种或更多种这些提取物的新组合的协同效应，均有可能是这些提取物中的皂苷、类黄酮和多酚类物质中的一种或多种联合的结果。

植物组合物配方

本发明的组合物可以是任何一种有效形式，包括但不限于干粉、沉淀物、乳液、萃取物以及其它常规的组成。为了萃取或者富集组合物中的有效成分，通常植物部分需要与适合的溶剂接触，如水、乙醇、甲醇、混合溶剂或其它任何溶剂。可以常规进行溶剂的选择，例如，基于溶剂萃取或者浓缩的活性成分的性质。景天组合物的优选活性成分包括但不限于：红景天苷、酪醇、β-谷甾醇、没食子酸、焦性没食子酸、大花红天素、草质素苷和/或红景天素。这些成分可以在同一步骤中被萃取，例如，采用乙醇溶剂，或者它们可以被单独萃取，每次使用对从植物中提取特殊目标成分非常有效的溶剂。在一些实施方案中，萃取可通过如下步骤完成：研磨所选部分，优选根部，成粉末。将粉末浸泡在所需溶剂中一段时间，以有效地从组合物中萃取活性制剂。可以通过过滤溶液并浓缩来产生糊状物，其中含有高浓度的溶剂萃取的成分。有时候，这些糊状物可以被干燥制成景天组合物的粉末提取物。可以采用HPLC、UV和其它的光谱方法测定提取物中的活性成分的含量。

本发明的组合物可以通过任何途径制备的任何形式给予，包括，如，口服给药、肠胃外给药、肠内给药、腹腔内给药、局部给药、皮肤给药(如，使用任一种标准贴剂)、眼部给药、鼻部给药、局部给药、非口服给药，如气溶胶、吸入剂、皮下给药、肌肉给药、含服、舌下含服、直肠给药、阴道给药、动脉给药和鞘内给药等。可以单独给药，或者与其它任一种有活性的或无活性的成分联合给药，包括医药用的形式或者作为食物或者饮品添加。

在本发明优选的实施方案中，组合物以任一种适宜的形式通过口服给药，包括，如，整株植物、粉末或者细粉状的植物材料、提取物、药片、胶囊、颗粒、片剂或者悬浮液。

该组合物可以与任一种药学上可接受的载体联合。短语“药学上可接受的载体”，是指任一种药学载体，像所描述的标准载体，如雷明顿的医药科学，第18版，麦克出版公司，1990。适合的载体的例子是本领域技术人员熟知的，可以包括但不限于，任一种标准的药学载体如磷酸盐缓冲生理盐水、含聚山梨醇酯80的磷酸盐缓冲生理盐水、水，乳化剂如油/水乳化剂以及各种类型的润湿剂。其它载体也可以包括无菌溶液、片剂、药物包衣片和胶囊。通常这类载体含有辅料如淀粉、牛奶、糖、一些类型的粘土、明胶、硬脂酸或其盐、硬脂酸镁或钙、滑石粉、植物脂肪或油、树胶、二醇类。这类载体也可以包括调味剂和颜色添加剂或其它的成分。含有这类载体的组合物是采用众所周知的常规方法制备的。与组合物一起配制的一般辅料都适于口服给药而且不会与组合物或其它活性成分发生有害反应。

适宜的药学上可接受的载体包括但不限于水、盐溶液、醇类、阿拉伯胶、植物油类、苄醇类、明胶、碳水化合物如乳糖、直链淀粉或淀粉、硬脂酸镁、滑石粉、硅酸、粘性石蜡、香精油、脂肪酸单甘油酯和二甘油酯、季戊四醇脂肪酸酯、羟甲基纤维素等。其它添加剂包括，如，抗氧化剂和防腐剂、着色剂、调味剂和稀释剂、乳化和悬浮剂，如阿拉伯树胶、琼脂、海藻酸、海藻酸钠、膨润土、卡波姆、卡拉胶、羰甲基纤维素、纤维素、胆固醇、明胶、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、辛苯聚醇-9、油醇、聚乙烯吡咯烷酮、丙二醇单硬脂酸酯、十二烷基磺酸钠、脱水山梨糖醇酯、十八烷醇、黄芪胶、黄原胶，以及它们的衍生物、溶剂，以及杂类成分如微晶纤维素、柠檬酸、糊精、葡萄糖、液状葡萄糖、乳酸、乳糖、氯化镁、聚偏磷酸钾、淀粉等。

植物组合物也可以与其它活性成分一起配制，如抗氧化剂、维生素(A、C、抗坏血酸，B族，如B1、硫胺素，B6、吡哆醇，B化合物、生物素、胆碱、烟酸、泛酸、B12、氰钴维生素、和/或B2，D、D2、D3、钙化醇、E、如生育酚、核黄素、K、K1、K2)。优选的化合物包括，如一水肌酸、丙酮酸酯、L-肉毒碱、α-硫辛酸、菲丁或菲丁酸、辅酶Q10、NADH、NAD、D-核糖，氨基酸如L-谷氨酰胺、赖氨酸，白杨黄素；前激素如4-雄烯二酮、5-雄烯二酮、4(或5-)-雄烯二醇、19-非-4(或5-)-雄烯二酮、19-非-4(或5-)-雄烯二醇、β-蜕皮甾酮和5-甲基-7-甲氧基异黄酮。优选的活性原料包括，如松花粉、枸杞子、沙棘、当归、五加皮、黄芪、麻黄、党参、细叶远志、百合、黑三棱、人参、三七、藤黄、Guggle、葡萄籽提取物或粉末、和/或银杏。

本发明中可以和上述组合物一起配制的其它植物或者草药包括那些在多种文本和出版物中提及的，如，E.S.Ayensu，西非的药用植物，参考出版物，阿尔戈纳克，密歇根州.(1978)；L.Boulos，北非的药用植物，参考出版物公司，阿尔戈纳克，密歇根州.(1983)；和N.C.Shah,(1982)J.Ethnopharm,6:294-5。

除了或替代植物提取物，植物配方可以包含生物和化学实体。可以构成植物成分的生物例子包括但不限于血液和血液制品、细胞、组织和器官、基因治疗载体、病毒和细菌疫苗、采用生物技术生产的治疗产品如抗体、单克隆抗体等。

含有植物成分的药学活性制剂包括但不限于抗氧化剂、抗癌剂、抗炎症试剂、荷尔蒙和荷尔蒙拮抗剂、抗高血压制剂、抗炎症试剂、镇定剂、强心剂、抗抑郁剂、皮质类固醇、抗溃疡制剂、抗过敏制剂和抗肥胖制剂、抗生素、抗菌剂、细菌制剂，以及其它医学上有用的药物如像雷明顿的医药科学，第18版，麦克出版公司，1990中被定义的那些。本发明优选的一个组合物含有，约1％-100％，优选约20-70％的植物提取物以及可选择性地添加，一种药学上可接受的辅料。本发明另一个优选的组合物含有，约l％-99％，优选约20-70％)的植物提取物，0.1-99％，优选1-10％的一种或多种的药学活性制剂以及，可选择性地添加，一种药学上可接受的辅料。

在一些实施方案中，植物组合物含有一种化疗制剂，其在单一制剂中或者是作为治疗方案的一部分单独给予。

多西紫杉醇

多西紫杉醇的细胞毒活性通过促进和稳定微管的组装被展现，同时其能在GTP不存在时防止生理微管的解聚/解体。这导致了游离微管蛋白的显著降低，其是微管形成所必需的，而且抑制了处于中期和后期的有丝分裂细胞的分开，防止了癌症细胞下一代的产生。由于在多西紫杉醇存在时微管不会分解，它们积聚在细胞里面并且引发细胞凋亡的启动。细胞凋亡也会通过细胞凋亡阻断癌蛋白bal-2的阻断而被促进。(Lyseng-WilliamsonKA,FentonC(2005)."Docetaxel:areviewofitsuseinmetastaticbreastcancer"(多西紫杉醇：对转移性乳腺癌应用的概述).Drugs65(17):2513-31)。多西紫杉醇被应用于大量的癌症治疗方案中：

乳腺癌：在之前化疗中将与阿霉素和环磷酰胺联合用于患有可手术的结节阳性乳腺癌患者的辅助治疗失败后，被用于患有局部晚期或转移性乳腺癌的患者的治疗。

晚期非小细胞性肺癌：在之前以铂为基础的化疗中将与顺铂联合用于患有不可切除、局部晚期或者转移性非小细胞性肺癌并且之前没有针对这种病情接受过化疗的患者失败后，作为一种单药，被用于患有局部晚期或转移性非小细胞性肺癌(NSCLC)的患者的治疗。

晚期胃癌/胃食管癌：与顺铂和氟尿嘧啶联合用于患有晚期胃腺癌，包括胃食管连接处的腺癌，并且没有接受过晚期疾病的之前化疗的患者的治疗。

局部晚期头颈部癌：与顺铂和氟尿嘧啶联合用于患有局部晚期头颈部鳞状细胞癌(SCCHN)的诱导治疗。

转移性雄性激素非依赖性前列腺癌：与强的松联合用于患有雄性激素非依赖性(激素抵抗性)的转移性前列腺癌患者的治疗。75mg/m²的剂量IV输注超过1小时，每3周给药一次。强的松每天两次以5mg的剂量口服，连续给药。当嗜中性粒白细胞数>1500个/mm³时，应当将与强的松联合给药。

根据本发明，意外地发现同时使用多西紫杉醇和OMN54进行治疗使得前列腺癌症状得到有效的补救，同时有明显降低的副作用和协同的抗癌活性。

为了治疗转移性雄性激素非依赖性前列腺癌，以75mg/m²的剂量IV输注超过1小时的方式给予，每3周给药一次。强的松每天两次以5mg的剂量口服，连续给药。当嗜中性粒白细胞数>1500个/mm³时，应当将与强的松联合给药。

本发明涉及到同时给予多西紫杉醇和植物组合物(如OMN54)。同时，被认为是植物组合物在给予多西紫杉醇的相同时间，或者同一天，或者24小时之内给予。OMN54的典型浓度是25、50、100、200或500μg/ml，多西紫杉醇的浓度为1nM。

在一些实施方案中，植物组合物被配制成口服剂型，其中含有包括灵芝、半枝莲、黄芩、丹参提取物中的两种或更多种的组合物，以及任意可选地药学上可接受的辅料。在一些实施方案中，剂型包括双层剂型。在某些方面，片剂被包覆上一种或多种的肠溶性多聚物、药学上可接受的密封层聚合物或者速率控制聚合物。在某些方面，活性成分以分散体形式被提供，分散体是以胶囊、颗粒、迷你片剂或者片剂的形式被提供。

当多西紫杉醇作为使用时，是通过1小时静脉注射给予的。每一瓶注射浓缩液是无菌的，无热原的，淡黄色至棕黄色，浓度为20mg/mL的溶液。一瓶装的中每mL含有20mg多西紫杉醇(无水的)，其溶解于含有0.54克聚山梨醇酯80和0.395克无水乙醇的溶液中。(处方信息.Bridgewater,NJ:Sanofi-AventisU.S.LLC；2011年9月)。三周一次的给药计划通常被认为而且仍被认为是有效的，但是新的研究显示一周一次的计划可能会更好。

本发明涉及到的组合物给药的方法，如，为了提供抗炎效果，降低炎症，提供抗氧化效果，使免受氧化，提供抗增殖效果，提供抗癌效果，促进DNA修复，提供抗辐射效果，使免受辐射，以及本文提到的其它情况和疾病。

有效剂量的组合物被施用到这样的宿主。有效剂量是对于达到期望的效果有用的剂量，最好是如前所述有益的或者有治疗效果的剂量。这种剂量可以按照常规确定，如通过进行剂量反应试验确定，该试验是对细胞、组织、动物模型(如通过标准的心理测试等进行迷宫测试、游泳测试、毒性测试、记忆测试的大鼠或小鼠)给予不同的剂量以确定能够达到效果的一种有效剂量。总量的选择是基于多种因素的，包括组合物被给予的环境(如，患有癌症的患者、动物模型、组织培养细胞，等)，被处理的细胞的位点、年龄、健康、性别和被治疗的人或动物的重量等。有用的总量包括，10毫克-100克，优选地，如，100毫克-10克、250毫克-2.5克、1克、2克、3克、500毫克-1.25克等，组合物的不同剂型如植物粉末、植物提取糊状物或粉末、准备的含有组合物有效成分的茶或者饮品以及注射剂的每种剂量取决于受者的需要和准备的方法。

液体，药物活性制剂包括在液体稀释剂或载体中的药物活性植物成分。活性成分可以被溶解或被分散在液体稀释剂或载体中，液体稀释剂或载体可以是水溶性或非水溶性的介质。液体稀释剂或载体包含下述三种类型：(a)水溶性载体：丙二醇、聚乙二醇、水、丙酮缩甘油、四氢呋喃聚乙二醇醚、二甲基异山梨醇、非离子型表面活性剂；(b)油类和有机载体：分馏椰子油、芝麻油、大豆油、植物油、液体石蜡、肉豆蔻酸异丙酯、三乙酸甘油酯；和(c)半固态的载体：高分子量的聚乙二醇，和白凡士林。

在一些实施方案中，制剂中含有一种或多种的乳化剂或表面活性剂。可使用的适宜的乳化剂包括一种或多种脂肪酸如油酸、脂肪酸聚氧乙烯甘油酯，如Tagats；聚氧基化蓖麻油、乙二醇酯，如乙二醇硬脂酸酯和乙二醇二硬脂酸酯；丙二醇脂，如丙二醇肉豆蔻酸酯；脂肪酸甘油酯，如甘油硬脂酸酯类和甘油单硬脂酸酯类；脱水山梨糖醇酯，如司盘类和吐温类；聚甘油酯，如聚甘油4-油酸酯；脂肪醇乙氧基化物，如Brij型乳化剂；乙氧基化丙氧基化嵌段共聚物，如泊洛沙姆类；脂肪酸聚乙二醇酯，如Labrafils、Labrafacs和Labrasols；cremophores；甘油单辛酸/癸酸酯，如CampmulCM10；Gelucire、Capryol、Captex、Acconon、Transcutol、和三乙酸甘油酯等。在一些实施方案中，乳化试剂选自CremophorEL、油酸和聚乙二醇甘油辛酸/癸酸酯(labrasol)。在一些实施方案中，抗氧化剂和/或稀释剂选自抗坏血酸和α-生育酚。在一些实施方案中，稀释剂是大豆油。

本发明的组合物含有有效量的在抗增殖或抗炎症试验中具有协同作用的灵芝、半枝莲、黄芩、丹参及可选择地沙棘(沙棘)的提取物中的两种或更多种的组合。

在本发明的一个方面，植物组合物包含有效量的灵芝、半枝莲和丹参提取物。组合物的剂量可以由本领域的技术人员根据能展示出本发明描述的多种性质的组合物的有效浓度容易地确定。

含有不同比例的个别提取物的组合物也可以类似地确定。例如，一种组合物可能在提取物组合的一种浓度或者不同比例时显示出抗炎作用，而在提取物组合的其他浓度或比例显示出不同程度的细胞毒性作用。灵芝、半枝莲、黄芩和丹参提取物中的两种或更多种的任一种比例都可以被用在本发明的组合物中。优选的组合物中出现的每一种提取物是等量的或者占总成分的约1％-约90％。在本发明的一些实施方案中，一种特殊的提取物构成总组合物质量的至少1％、1.5％、2％、5％、10％、15％、25％、33％、40％、45％、47.5％、48.5％、49.5％、50％、60％、66％、75％、90％或98％。在一实施方案中，OMN54含有约1-3％的丹参，以及差不多等量的(45-50％)的半枝莲和灵芝。

在进一步的实施方案中，本发明的组合物包含的组合物中的有用的植物化合物将被与治疗试剂联合给药来用于疾病的治疗。基于它们的抗炎、抗氧化、免疫调节、抗病毒、抗菌、抗增殖活性或者它们活性的任意组合，这些组合物与治疗试剂展现出了协同作用。

这些组合物展示了抗氧化活性，这阻止了对染色体/基因的破坏，降低了诱变剂的影响，减轻了化疗试剂的副作用，减轻了激素治疗试剂的副作用，及增强了细胞修复机制。

组合物进一步展现了免疫系统增强活性，该活性使得易于清除(i)受损的细胞或(ii)含有受损基因的细胞。此外，组合物提供了改善免疫状况的广泛的好处(被动免疫疗法)。

提取物的植物来源是具有悠久的个别化合物/提取物使用的历史的无毒的植物。被艾姆斯氏试验结果证明的抗突变特性(和通过协同作用增强的敏感性一起)降低了治疗必需的化疗试剂的水平，降低了对患者的毒性。

植物组合物显示出增强细胞循环的能力，这一能力通过增加有效性和降低化疗试剂和激素治疗试剂的必要的剂量使得本发明的植物组合物成为了化疗(如，和多西紫杉醇)、激素疗法或辐射疗法的一个强有力的佐剂。

质控。基于组合物的IC₅₀值可以根据定义的属性的特殊活性来规范。

这些植物组合物也适用于常规(口服)药物递送。组合物是采用热水、醇溶剂(乙醇)和非醇有机溶剂(酯、脂质、乙酸乙酯等)制备的提取物。

总之，本发明的组合物中的植物组合物具有很强地抑制细胞生长的作用和很弱的细胞毒性作用。采用本发明的组合物处理的细胞的组织病理学结果显示死亡癌细胞的最低滞留，这增强了癌症治疗后的恢复。

实施例

即使没有进一步的说明，相信本领域的技术人员通过前面的描述也可以充分的利用本发明。下面的实例只是为了说明，并不以任何方式限制公开文本其余部分的内容。

以下提取物的组合被用于所有的实例中：当按照显示协同作用比例组合时，灵芝、半枝莲，可选择地黄芪和丹参的提取物在整个说明书中被称为不同的名称：OMN54或Aneustat。

另外，本发明的组合物可以可选择性地包含花旗参(西洋参)、茶树(绿茶)和沙棘(沙棘)。

本领域的技术人员会明白虽然下面的实施例是为验证本发明，可使用任一种细胞系。例如，尽管没有限制，细胞可以从ATCC，罗克维尔，马里兰州获得。

用于确定本文公开的新的组合物和制剂的有效性的实验在加拿大温哥华的不列颠哥伦比亚癌症研究中心进行。

本领域的技术人员也会明白虽然前述的实施例是为了验证本发明，多种体内模型的前列腺癌是可以被使用的。例如，小鼠的CaP异种移植瘤是可以被使用的。此外，Pten基因敲除小鼠系，其中的杂合小鼠开发了子宫瘤、前列腺瘤、甲状腺瘤、结肠瘤和肾上腺髓质瘤，可以从人类癌症协会的小鼠模型处获得(PodsypaninaK.etal,(1999)Proc.Nat'lAcad.Sci.USA96:1563-1568)。

实施例1：制备植物提取物的方法

本发明的组合物可以作为干的草药进行给予。植物制品含有植物化学物质，其中的一些在水相中可溶而其它的一些则在有机相(醇、酯、脂质)中相对好溶解。不同的萃取方法被使用和测试来比较从草药中萃取有效成分的能力。萃取方法包括：水(热水)萃取法；有机(脂质组分)萃取法；非醇有机(乙酸乙酯)萃取法；和醇类(乙醇)萃取法。

产品是从草药或草药混合物中制备得到，通过在回流情况下溶剂(热水、80％乙醇或乙酸乙酯)回流30-60分钟，采用过滤分离获得滤液，然后浓缩(如，通过蒸发)用于进一步的分析。在进行活性的鉴定之前，滤液被合并、稀释或浓缩。多种添加剂包括但不限于，洗涤剂、抗氧化剂和稀释剂被添加到提取物中。

实施例2：单独的Aneustat和单独的多西紫杉醇对LNCaP前列腺癌细胞生长的影响

植物组合物(Aneustat或OMN54)和(多西紫杉醇)都可以明显地抑制(小鼠)体内LNCaP(雄性激素敏感的)人前列腺癌肿瘤SRCX的生长(P<0.01)。Aneustat缩小肿瘤体积的效果与用(其具有明显的毒性)的标准化疗效果相当。

LNCaP前列腺癌按下述方案治疗3周

如图1所示，Aneustat和在肿瘤体积缩小上具有类似的效果，的效果稍好些。

实施例3：单独的Aneustat和单独的多西紫杉醇对DU145前列腺癌细胞生长的影响

植物组合物(Aneustat或OMN54)或((多西紫杉醇)+(辉瑞))都可以明显地抑制(小鼠)体内DU145(雄性激素非依赖的)人前列腺癌肿瘤SRCX的生长(P<0.01)。Aneustat缩小肿瘤体积的效果与用Emcyt(雌莫司汀磷酸钠)+(其具有明显的毒性)的标准化疗效果相当。

LNCaP前列腺癌按下述方案治疗3周

如图2所示，Aneustat和在肿瘤体积缩小上具有类似的效果，的效果稍好些。

实施例5：OMN54和多西紫杉醇联合治疗对体内前列腺癌肿瘤萎缩的影响

在对(小鼠)体内LTL-313(雄性激素依赖性)人前列腺癌肿瘤SRCX处理时，治疗3周后，植物组合物(Aneustat或OMN54)与(多西紫杉醇)的联合使用显示出了协同作用和肿瘤萎缩(p＝0)。

LTL-313前列腺癌按下述方案治疗3周

如图3所示，Aneustat和在肿瘤体积缩小上显示出协同疗效。

实施例6：OMN54和多西紫杉醇联合治疗对体内前列腺癌细胞生长抑制的影响

治疗3周后，植物组合物(Aneustat或OMN54)与(多西紫杉醇)的联合使用显示出了明显的生长抑制作用在对LTL-313(雄性激素依赖性；腺癌)患者来源的人前列腺癌组织SRCX处理时。

LTL-313H-13异种移植瘤按下述方案治疗3周

如图4所示，Aneustat和在对小鼠体内前列腺癌细胞异种移植瘤的生长抑制中显示了协同效应。此外，目前显示在对LTL-313(雄性激素依赖性；腺癌)患者来源的人前列腺癌组织SRCX治疗时，这两种试剂的联合相对于单独使用具有更大的治疗效果。

实施例7：OMN54和多西紫杉醇的联合治疗对PSA水平的影响

在对LTL-313(雄性激素依赖性；腺癌)患者来源的人前列腺癌组织SRCX处理时，治疗3周后，植物组合物(Aneustat或OMN54)与 (多西紫杉醇)的联合使用显示出了明显的以剂量敏感的方式的前列腺特异性抗原(PSA)水平的降低。

LTL-313H-13异种移植瘤按下述方案治疗3周

如图5所示，Aneustat和在对小鼠体内前列腺癌细胞异种移植瘤的生长抑制中显示了协同效应。此外，目前显示在对LTL-313(雄性激素依赖性；腺癌)患者来源的人前列腺癌组织SRCX治疗时，这两种试剂的联合相对于单独使用具有更大的治疗效果。

实施例8：人前列腺癌组织异种移植/小鼠模型的建立

一个更具预测性的人类肿瘤组织异种移植模型被用来评估植物组合物的疗效。(ClinCancerResearch2006:12(13)；4043-4054)人类肿瘤移植要比细胞注射更好而且在肾被膜处的人类肿瘤移植要比皮下移植有直接的血液供应，因此更多的生物多样性被保留下来。异种移植模型比传统的体内模型更加类似于临床癌症。

前列腺癌治疗药物的临床前试验通过使用异种移植模型被大量开展，在这些模型中人类前列腺癌细胞系被通过皮下注射到免疫缺陷小鼠中。然而，癌细胞异种移植瘤可能无法准确地模拟体内前列腺肿瘤的行为。事实上，癌细胞系异种移植瘤模型对于准确预测抗癌试剂的临床效果记录很差。新的异种移植瘤模型被建立用于多种人类癌前和癌组织，包括前列腺癌组织。最重要的是，模型中的异种移植瘤保持了亲本组织的组织学特征。对于所选择的癌症类型，其异种移植瘤对于治疗的反应方式与患者中观察到的相似。例如，SCID小鼠体内生长的前列腺癌组织对于雄性激素阻断治疗显示出极大的反应，正如临床中的常规发现的一样。

人前列腺癌细胞系LTL-313的异种移植瘤能够在体内生长。两个组织异种移植瘤中的一个长到了核桃那么大的体积。移植到肾脏位置的的肿瘤存活而且保留了它们原有的组织病理学特征和分化标志物，即使在连续传代之后。前列腺癌组织在SCID小鼠体内生长非常迅速，大约5天增长一倍。细胞遗传学分析显示出一些异常的染色体。不仅有易位，还存在染色体片段的缺失和重复(注意：由于每一条染色体都有自己的显示颜色，一条染色体长度内处在超过一种的颜色就表明是一种易位)。光谱核型(SKY)分析显示LTL-313癌症异种移植组织含有少量的核型变化，尽管这个癌症是高度晚期的。

实施例9：对前列腺癌细胞系(DU145)的疗效研究

来源于前列腺细胞系DU145的肿瘤异种移植瘤被切割成2mm³的块，然后移植到SCID/裸鼠中。治疗在第13天开始(平均体积＝15.6mm³)。这些小鼠被均分成3组进行如下治疗：生理盐水；3.3倍IC₅₀的灵芝、丹参、和半枝莲；以及雌莫司汀磷酸钠和多西紫杉醇(E+D)。灵芝、丹参和半枝莲的联合使用显示出了与E+D的方法类似的显著的抑制效果。OMN54显著地抑制了体内DU145(雄性激素非依赖性)人前列腺癌肿瘤的生长。重要地是，对于肿瘤体积的这种影响与对患者具有显著毒性的相关标准化疗的影响相当。

实施例10：降低前列腺肿瘤体积活性的体内分析

6周龄的雄性裸鼠(BALB/c-nu/nu)被作为实验动物模型。动物们被从腹部切开，然后使用30g的针头从前列腺的背侧被接种人前列腺癌细胞系-LTL-313细胞(2×10⁶个细胞/50μL/Hanks缓冲盐溶液/鼠)。切开的腹部采用5-0的线缝合。正常饲喂两周后，从每只动物体内抽血进行血清中去前列腺特异性抗原水平的测定。本发明的组合物按下述方式通过口服给于小鼠；3组6只老鼠接受43.65、14.4或4.3mg/动物/天的剂量持续21天。在相同周期内，年龄相匹配的对照组小鼠采用生理盐水治疗。

接着移植物被收获来确定对肿瘤体积、组织学、凋亡指数(TUNEL检测)以及增殖指数(增殖标记物Ki67染色)的影响。TUNEL检测是通过定量荧光分析来检测凋亡诱导的DNA片段化。末端脱氧核苷酸转移酶(TDT)催化溴脱氧尿苷(BrdU)在3’-羟基末端通过缺口末端标记掺入到片段化的核DNA中。随后TRITC标记的抗BrdU抗体能够标记3’-羟基末端进行检测。

本发明中引用的所有出版物和专利申请均通过引用并入，如每一个单独的出版物或者专利申请会被明确地、单独地标注是通过引用并入的。

虽然，上文中已经用说明及实例对本发明作了详尽的描述，已达到清楚理解的目的，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域普通技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的改变或修改，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (25)

1.用于个体前列腺癌治疗或减少前列腺癌严重程度的方法，所述方法包括：

给予有效剂量的包含在有机介质中的灵芝(Ganodermalucidum)、丹参(Salviamiltiorrhiza)和半枝莲(Scutellariabarbata)的两种或更多种提取物的植物组合物，其中每种提取物包含约10％至约50％w/w的灵芝和半枝莲，以及约1％至约10％w/w的丹参，其中所述植物组合物能够有效地减少与前列腺癌相关的症状；以及

联合给予有效剂量的多西紫杉醇，

其中联合给予化合物和植物组合物取得了比单独给予每种药剂更有效的疗效。

2.如权利要求1所述的方法，其中前列腺癌症状是前列腺肿瘤的大小。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述前列腺肿瘤是雄性激素依赖性腺癌。

4.如权利要求1所述的方法，其中前列腺癌症状是前列腺癌组织的生长速度。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述前列腺癌组织来源于雄性激素依赖性腺癌。

6.如权利要求1所述的方法，其中前列腺癌症状是前列腺特异性抗原(PSA)的水平。

7.如权利要求1所述的方法，其中联合给予包括在一段时间内每天给予所述植物组合物和周期性给予多西紫杉醇。

8.如权利要求6所述的方法，其中一段时间是3周。

9.如权利要求1所述的方法，其中所述提取物是非醇的有机提取物。

10.如权利要求8所述的方法，其中所述提取物是用乙酸乙酯制备的。

11.如权利要求1所述的方法，其中与单独给予相等剂量的多西紫杉醇相比，联合给予多西紫杉醇和植物组合物导致降低的毒性和副作用。

12.如权利要求1所述的方法，其中所述植物组合物包含2％w/w的丹参提取物。

13.如权利要求1所述的方法，其中所述植物组合物包含乳化剂、表面活性剂、抗氧化剂和稀释剂中的一种或多种。

14.如权利要求13所述的方法，其中所述乳化剂选自以下一种或多种：脂肪酸、脂肪酸聚氧乙烯甘油酯、聚氧基化蓖麻油、乙二醇酯、丙二醇酯、脂肪酸甘油酯、脱水山梨糖醇酯、聚甘油酯、脂肪醇乙氧基化物、乙氧基化丙氧基化嵌段共聚物、脂肪酸聚乙二醇酯、cremophores、甘油单辛酸/癸酸酯、CremophorEL、油酸、Gelucire、Capryol、Captex、Acconon、Transcutol、和三乙酸甘油酯。

15.如权利要求13所述的方法，其中所述抗氧化剂选自抗坏血酸和α-生育酚。

16.如权利要求13所述的方法，其中所述稀释剂是豆油。

17.如权利要求1所述的方法，其中多西紫杉醇通过静脉内给药。

18.如权利要求1所述的方法，其中所述植物组合物通过口服给药。

19.如权利要求1所述的方法，其中所述前列腺癌是去势抵抗性前列腺癌。

20.如权利要求1所述的方法，其中所述前列腺癌是雄性激素敏感性前列腺癌。

21.如权利要求1所述的方法，其中所述多西紫杉醇以亚治疗剂量给药。

22.如权利要求1所述的方法，其中植物组合物包含选自10％、15％、20％、30％、33％、35％、40％、42％、44％、45％、46％、46.5％、47％、47.5％、48％、48.5％、49％、49.5％和50％的有效剂量的灵芝提取物。

23.如权利要求1所述的方法，其中植物组合物包含选自10％、15％、20％、30％、33％、35％、40％、42％、44％、45％、46％、46.5％、47％、47.5％、48％、48.5％、49％、49.5％和50％的有效剂量的半枝莲提取物。

24.如权利要求1所述的方法，其中植物组合物包含选自1％、1.5％、2％、2.5％、3％、3.5％、4％、4.5％、5％、5.5％、6％、6.5％、7％、7.5％、8％、8.5％、9％、9.5％和10％的有效剂量的丹参提取物。

25.如权利要求1所述的方法，其中植物组合物为适合口服给药的剂型。