CN105132566A - 毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备方法及其系统 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备方法及其系统。本发明提供的制备方法包括四步步骤：联合基因型风险等级的建立；个体基因检测；根据检测结果所属的风险等级确定饮品配方；饮品的制作。本发明可根据肥胖个体的联合基因型制备针对性的减肥饮品，具有更好的减肥效果；采用联合检测技术通过一次检测程序获得个体的联合基因型；采用个体化干预饮品的制备系统，实现了从样品检测到饮品的制备的一体化过程；本发明制备的个体化干预饮品具有良好的口感，深受大众的欢迎。
Description
技术领域
本发明涉及一种肥胖基因个体化干预饮品，尤其涉及一种毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备方法及其系统。
背景技术
肥胖作为一种疾病，正严重威胁人类的健康。世界卫生组织专家委员会提出以体质指数（Body-MassIndex，BMI）作为身体超重或肥胖的标准，即BMI在25~28之间为超重，28~32为肥胖，高于32为非常肥胖。肥胖症是一种与遗传因素及生活方式密切相关的慢性疾病，它会引发血脂升高，容易造成脂肪肝、动脉血管病变、心脏病、糖尿病，肥胖的儿童还会引发性功能发育不良并导致成人期各种疾病发病率和死亡率上升。
目前肥胖症的临床治疗方法主要是饮食和运动疗法，但存在着碳水化合物、脂肪以及蛋白质摄入量控制“一刀切”和盲目采用减肥药物的非个体化治疗方式。由于至少有40%躯体脂肪量的差异是由遗传因素引起的，所以很容易明确遗传对肥胖有很大影响。遗传体质不同的人在患肥胖症时应采取不同的减肥策略，利用现代科学研究成果，开发一项基于分子遗传基础的体重管理分子检测产品并制备相应的减肥食品以提供个性化的体重管理建议，具有较强的社会意义和市场前景。
外源性有毒化学物质通过不同途径被吸收进入机体后，将发生一系列化学变化并形成一些分解产物或衍生物，即生物转化，形成致癌物质。人体内有一些酶可以通过一系列反应和这些物质或其代谢反应产物结合，降低这些物质的毒性，以一定的形式排泄出体外从而使细胞免受损害。由于遗传体质的不同，不同机体的解读排毒能力也有所差异，而这种差异会影响到机体对诸多疾病如肥胖、癌症等疾病的易感性。
体内废弃物的长久堆积无法排出，也是导致身材臃肿的罪魁祸首。毒素是所有对身体造成危害的物质，或是可以引起身体的排异性反应、过敏症状。如果毒素长期在体内堆积的话，会使细胞与组织受伤，引起身体新陈代谢系统的紊乱而使体内毒素堆积，导致人体脾胃的运化代谢机能下降、血液毒素多、粘稠度高，造成全身肥胖、记忆力减退、面色暗沉、便秘和痔疮等疾病。
谷胱甘肽硫转移酶（GlutathioneS-transferase，GSTs）属于II相代谢酶超级家族，是体内重要的解毒酶系。它可直接与亲电子化合物反应，增加其水溶性而有利于排除体外，从而达到解毒的目的。GSTM1、GSTT1、GSTP1是谷胱甘肽硫转移酶的三种重要亚型。已发现GSTM1、T1、P1具有人群多态性，并有种族差异。其中GSTM1和GSTT1基因多态性均为编码基因完全缺失，导致具有该基因型个体酶活性极低，GSTP1基因在5号外显子的遗传学多态表现为GSTP1Val105Ile，也导致GSTP1酶活性降低。GSTs基因突变对临床有非常重要的影响。通过谷胱甘肽和化学物质或其代谢反应产物结合，可以降低这些物质的毒性，从而使细胞免受损害。当谷胱甘肽与多种氧化链代谢产物反应后，产生的减毒结合物可使其易于进入下一步代谢，并最后以硫醇尿酸的形式排泄出体外。编码这一类酶的基因一旦产生影响其正常功能的变异，就会影响机体对有毒有害物质正常的解毒作用。
细胞色素P450酶（CYP1A1、CYP1B1等）是一组含亚铁血红素，结构和功能相关的超家族基因编码的同工酶，这类酶在外源性和内源性化合物代谢中起着非常重要的作用，CYP450广泛存在于机体内，但主要存在于肝细胞内质网上，参与内源性物质（包括胆固醇、脂肪酸等）的生物合成与降解和外源性物质（包括药物和环境污染物）的代谢，其中CYP1A1是CYP450酶系中的重要成员之一，不仅参与了药物的代谢，而且还能催化许多前致癌物和前毒物的活化过程，在肝脏可被高度诱导。已有实验证实，肝微粒体CYP1A1表达增强与羟自由基的生成增多及脂质过氧化有关。羟自由基是脂质过氧化反应的启动剂，高脂饮食可增加线粒体或微粒体对脂肪酸的氧化而导致氧化应激，故脂肪酸可诱导CYP1A1的产生。随着CYP1A1表达的上调，POS生成增加，脂质过氧化反应加剧，形成恶性循环。
发明内容
本发明的目的是提供一种毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备方法及其系统，针对个人不同的基因体质制作不同的干预饮品，从而达到更好的减肥效果。
为实现上述目的，本发明提供了一种毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备方法，所述方法是通过对个体与毒素堆积型肥胖相关的多个基因多态性进行联合检测，并根据检测结果确定其发生毒素堆积型肥胖的风险等级，然后针对个体联合基因型发生毒素堆积型肥胖的风险等级制备针对性的减肥饮品，所述方法包括以下步骤：
步骤一、联合基因型风险等级的建立
（1）选择与毒素堆积型肥胖相关的基因多态性位点，根据文献给出的数据或自行采样研究确定各遗传风险因素相关多态性位点的不同基因型的单基因风险度；
（2）将采用的所有多态性位点的各基因型排列组合，然后根据各单基因风险度乘积建立联合基因型风险等级。
其中，步骤（1）中自行采样研究确定各遗传风险因素相关多态性位点的不同基因型的单基因风险度的具体方法为：
A．利用病例-对照关联分析方法，采用卡方检验或Fisher精确概率法，可信区间CI取95%，显著性差异取p<0.05，对毒素堆积型肥胖在特定人群中的遗传风险因素的相关位点进行筛选；
B．利用网上SPSS统计学软件计算相对风险度OR，CI取95%，p<0.05，作为各相关多态性位点不同基因型的单基因风险度。
优选地，步骤（1）中选择与毒素堆积型肥胖相关的基因多态性位点可根据文献资料查找中国人群中毒素堆积型肥胖常见的遗传风险因素进行选择。
优选地，与毒素堆积型肥胖相关的基因多态位性点选自于下表1中的至少两个：
表1
| 基因名称 | 位点名称 | NCBI Ref ID |
| GSTP1(SEQ 1) | Val105Ile | rs1695 |
| CYP1A1(SEQ 2) | Val462Ile | rs1048943 |
| CYP1A1(SEQ 3) | MspI | rs4646903 |
在本发明的一种优选实施方式中，根据大规模中国人群中的分子流行病学相关研究成果查阅，采纳的上表中各相关多态性位点的风险度如下表2所示：
表2
| 基因多态性位点 | 基因型 | 风险度(OR) |
| GSTP1 Val105Ile | 亚型1(AA) | 1 |
| 亚型2(AG) | 1 | |
| 亚型3(GG) | 3.26 | |
| CYP1A1 Val462Ile | 亚型1(AA) | 1 |
| 亚型2(AG) | 1 | |
| 亚型3(GG) | 1.89 | |
| CYP1A1 MspI | 亚型1(CC) | 3.12 |
| 亚型2(CT) | 1 | |
| 亚型3(TT) | 1 |
进一步地，步骤（2）的具体方法为：
每个与毒素堆积型肥胖相关的基因多态性位点分别有三种亚型，将所选位点所有亚型出现的可能进行排列组合；然后将这些亚型的风险度相乘获得不同排列组合的风险度乘积；将获得的风险度乘积从小到大或从大到小排列，合并风险度乘积相等的组；最终按风险度乘积的大小确定各组风险度的高低。
上述方法是将各位点作为独立因素进行加权处理的，风险度乘积越大，评估风险越大；用上述方法计算得出的联合基因型遗传高风险个体可表述为其自身引发毒素堆积型肥胖的遗传风险因素较多或结果确定性较强。
进一步地，将不同的相关多态性位点标记为a、b、c……，将不同的亚型标记为1、2、3，即携带位点1亚型1+位点2亚型1+位点3亚型1的单倍型表示为a1b1c1；在本发明的一个优选实施例中，选取的相关多态性位点为rs1695(GSTP1)、rs1048943(CYP1A1)和rs4646903(CYP1A1)，将它们分别标记为a、b、c，根据上述表格中所列的单基因风险度计算风险度乘积结果如表3所示：
表3
| 单倍型 | 风险度乘积 | 单倍型 | 风险度乘积 | 单倍型 | 风险度乘积 |
| a1b1c1 | 3.12 | a2b1c1 | 3.12 | a3b1c1 | 10.171 |
| a1b1c2 | 1 | a2b1c2 | 1 | a3b1c2 | 3.26 |
| a1b1c3 | 1 | a2b1c3 | 1 | a3b1c3 | 3.26 |
| a1b2c1 | 3.12 | a2b2c1 | 3.12 | a3b2c1 | 10.171 |
| a1b2c2 | 1 | a2b2c2 | 1 | a3b2c2 | 3.26 |
| a1b2c3 | 1 | a2b2c3 | 1 | a3b2c3 | 3.26 |
| a1b3c1 | 5.897 | a2b3c1 | 5.897 | a3b3c1 | 19.224 |
| a1b3c2 | 1.89 | a2b3c2 | 1.89 | a3b3c2 | 6.161 |
| a1b3c3 | 1.89 | a2b3c3 | 1.89 | a3b3c3 | 6.161 |
优选地，风险度乘积采用PHP编制程序，然后在计算机中输入各单基因风险度值后进行计算。
然后将上表3中的单倍型按风险度乘积从低到高排列并分组，如表4所示；风险等级越高，风险度乘积越大，即个体自身引发毒素堆积型肥胖的遗传风险越高。
表4
步骤二、个体基因检测
对从个体中获得的DNA进行步骤一中所选的基因多态性位点的联合基因型检测。
优选地，所述联合基因型检测采用TaqMan?-MCB技术进行；进一步优选地，对不同的风险位点采用同样的扩增程序，在不同的反应孔中，同时进行联合检测。荧光定量PCR反应后，将每个反应孔中的样品在荧光定量PCR仪上读取荧光量数据，对于每个个体的样本可得到对应不同风险位点的图，将其组合获得该个体的联合基因型。
优选地，联合检测的风险位点为rs1695(GSTP1)、rs1048943(CYP1A1)和rs4646903(CYP1A1)。
优选地，上述基因多态性位点联合检测采用的引物和探针设计如下表5所示：
表5
优选地，荧光定量PCR反应的扩增条件为，先预热：50℃、2分钟，95℃、10分钟，然后进行60个循环的95℃、30秒，60℃、1分钟。
在本发明的另一较佳实施方式中，联合基因型检测的手段也可以采用基因芯片测序技术。
步骤三、根据检测结果所属的风险等级确定饮品配方
根据联合基因型检测的结果确定个体的风险等级，并按不同风险等级的营养素需求及干预方式，确定饮品中不同营养素的添加量。
优选地，本发明所述饮品用于毒素堆积型肥胖基因个体化干预过程中的饮用方法为：每周固定1-3天为节食日，每个节食日饮用本发明制备的饮品5-8杯，每6-8周为一个干预疗程。
优选地，对于高风险等级（如表4中的V-VIII级）的个体节食日各营养素的每日建议摄入量如下表6所示：
表6
| 热量 | 1364.94千卡 | 硫胺素 | 0.12毫克 | 钙 | 196.26毫克 |
| 蛋白质 | 8.88克 | 核黄素 | 0.06毫克 | 镁 | 112.14毫克 |
| 脂肪 | 1.74克 | 烟酸 | 2.7毫克 | 铁 | 5.88毫克 |
| 碳水化合物 | 78.84克 | 维生素C | 140.1毫克 | 锰 | 0.9毫克 |
| 膳食纤维 | 10.74克 | 维生素E | 10.02毫克 | 锌 | 2.4毫克 |
| 维生素A | 879.72微克 | 胆固醇 | 0毫克 | 铜 | 1.02毫克 |
| 胡罗卜素 | 5259.84微克 | 钾 | 1182.54毫克 | 磷 | 198.6毫克 |
| 视黄醇 | 0微克 | 钠 | 134.64毫克 | 硒 | 4.26微克 |
对于低风险等级（如表4中的I-IV级）的个体节食日各营养素的每日建议摄入量如下表7所示：
表7
| 热量 | 1206.66千卡 | 硫胺素 | 0.12毫克 | 钙 | 120.42毫克 |
| 蛋白质 | 5.82克 | 核黄素 | 0.01毫克 | 镁 | 77.22毫克 |
| 脂肪 | 1.26克 | 烟酸 | 1.80毫克 | 铁 | 4.14毫克 |
| 碳水化合物 | 71.58克 | 维生素C | 82.2毫克 | 锰 | 0.48毫克 |
| 膳食纤维 | 8.94克 | 维生素E | 8.7毫克 | 锌 | 1.74毫克 |
| 维生素A | 451.56微克 | 胆固醇 | 0毫克 | 铜 | 0.9毫克 |
| 胡罗卜素 | 2711.88微克 | 钾 | 921.6毫克 | 磷 | 141.36毫克 |
| 视黄醇 | 0微克 | 钠 | 80.1毫克 | 硒 | 3.06微克 |
在本发明的一个优选实施例中，将两位点联合基因型风险等级III和IV定义为毒素堆积型肥胖基因类型，风险等级I和II定义为非毒素堆积型肥胖基因类型；在本发明的另一优选实施例中，将三位点联合基因型风险等级V-VIII定义为毒素堆积型肥胖基因类型，风险等级I-IV定义为非毒素堆积型肥胖基因类型。
本发明的一种实施方式是根据上述节食日的营养素需求和节食日的饮食规则设计对应的饮品配方。
果蔬是最常见的富含维生素和各种营养素的食品，果蔬制成汁和泥后营养更易吸收，美味且容易制备，本发明的一种优选实施方式为：采用鲜榨果蔬的方式制备符合配方中营养素要求的饮品。
在本发明的一个优选实施例中，将个体分为毒素堆积型肥胖基因类型和非毒素堆积型肥胖基因类型，针对毒素堆积型肥胖基因类型的个体制作的饮品的配方如下：
每300mL饮品中含有苹果62.5g、梨20g、紫甘蓝30g、西兰花7.5g、菠菜12.5g、西红柿12.5g、山药20g、柠檬2g。
针对非毒素堆积型肥胖基因类型的个体制作的饮品的配方如下：
每300mL饮品中含有苹果62.5g、梨20g、紫甘蓝15g、西兰花3.8g、菠菜6.3g、西红柿6.3、山药20g、柠檬2g。
步骤四、根据步骤三中确定的配方制作饮品
采用上述果蔬配方制作饮品，可通过人工或自动化榨汁装置来完成。
优选地，本发明所述饮品用于毒素堆积型肥胖基因个体化干预过程中的饮用方法为：每周固定1-3天为节食日，每个节食日饮用本发明制备的饮品5-8杯，每6-8周为一个干预疗程。
本发明还提供了一种毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备系统，该系统包括控制单元、联合基因型检测单元和饮品制作单元，其中控制单元分别与联合基因型检测单元、饮品制作单元电连接；所述控制单元内预设有毒素堆积型肥胖基因风险因素中多个相关多态性位点的单基因风险度值，且可根据用户选择的多态性位点自动建立风险等级；所述联合基因型检测单元用于检测个体DNA样本的联合基因型，同时将检测结果输出至所述控制单元，所述控制单元可根据联合基因型检测单元的检测结果输出该样本的对应风险等级，然后根据风险等级或风险度乘积值确定饮品配方输出至饮品制作单元，最后饮品制作单元根据控制单元的指令制作个体化干预饮品。
优选地，所述饮品制作单元包括自动榨汁机，所述自动榨汁机具有多通道原料入口，所述通道中装有切成块状的果蔬原料，每个通道内都设置有阀门，所述自动榨汁机可根据控制单元给出的配方，通过不同通道阀门的开闭，向榨汁机内腔中投入一定体积配比的不同果蔬原料，所述果蔬原料在该榨汁机的内腔中被榨成果汁和果泥混合物后从出口流出，收集该混合物，掺入适量水，即为本发明所述毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品。其中，按体积配比投入的果蔬原料在±0.5g的范围内视为可接受的误差。
优选地，所述块状是指长、宽、高均不大于3cm的小块。
优选地，所述自动榨汁机还具有自清洁功能；一种优选方式是，在一路通道中注入水或清洗液，当榨汁机开始清洁时，该注水或清洗液通道的阀门打开，水或清洗液流入榨汁机内腔，启动榨汁功能清洗内腔，清洗完后水或清洗液从果汁出口流出，完成一次自清洗。
本发明具有以下技术效果：
1、本发明可根据肥胖个体的联合基因型制备针对性的减肥饮品，比现有的“一刀切”减肥产品具有更好的减肥效果；
2、本发明采用联合检测技术可通过一次荧光定量PCR程序获得联合基因型，可更全面、快速地确定个体的基因型；
3、本发明采用个体化干预饮品的制备系统，实现了从样品检测到饮品的制备的一体化过程；
4、本发明制备的饮品采用市售果蔬为原料，制备过程简单，果蔬饮品具有良好的口感和鲜明的色泽，是一种很受大众欢迎且具有良好减肥效果的饮品。
以下将结合附图对本发明的构思、具体结构及产生的技术效果作进一步说明，以充分地了解本发明的目的、特征和效果。
附图说明
图1是本发明毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备系统的工作流程图；
图2是本发明的一个优选实施例中自动榨汁机的结构示意图。
具体实施方式
实施例1联合基因型风险等级的建立
本实施例中检测的多态性位点为：rs1695(GSTP1)、rs1048943(CYP1A1)和rs4646903(CYP1A1)，将它们分别标记为a、b、c，它们的亚型风险度如下表8所示：
表8
| 基因多态性位点 | 基因型 | 风险度(OR) |
| a | 1(AA) | 1 |
| 2(AG) | 1 | |
| 3(GG) | 3.26 | |
| b | 1(AA) | 1 |
| 2(AG) | 1 | |
| 3(GG) | 1.89 | |
| c | 1(CC) | 3.12 |
| 2(CT) | 1 | |
| 3(TT) | 1 |
根据表8所列单基因风险度计算获得的风险度等级如上述的表4所示。
实施例2个体基因检测
采用实施例1中的3个多态位点进行个体基因检测。
采集个体口腔上皮细胞样本，用硅胶吸附法抽提基因组DNA，经电泳检测验证后进行荧光定量PCR反应。
将个体样本分别放入3个反应孔中，同时检测3个位点，即rs13306517(LEP)、rs1805094(LEPR)、rs1800795(IL-6)，另外根据实验需要增设不含DNA模板的NTC空白对照孔；
在每个反应孔中加入试剂为荧光定量PCR反应体系，总体积为10μL，即浓度为20ng/μL的DNA模板2μL、10×荧光定量PCR反应缓冲液ABITaqman?MGB1μL、25mMdNTP合成DNA的四种脱氧核苷酸底物0.1μL、25mMMgCl2溶液0.5μL、（5units/μL）TaqDNA聚合酶0.02μL、去离子水4.98μL、3个位点分别采用不同的正向引物（20μM，0.225μL）、反向引物（20μM，0.225μL）、VIC荧光探针（10μM，0.25μL）和FAM荧光探针（10μM，0.25μL）；3个位点使用引物和探针如上文表5所示。
将反应孔和空白对照在PCR扩增仪上进行反应，先预热：50℃、2分钟，95℃、10分钟，然后进行60个循环的95℃、30秒，60℃、1分钟，反应结束后取出反应体系再放入荧光定量PCR仪上读取样品荧光量，得到三个基因的三张图。
将荧光定量PCR仪上显示的最终样本荧光信号的图与NTC空白对照比较，每个位点可能出现三种不同的信号中的一种，即纯VIC荧光信号、VIC和FAM杂合荧光信号以及纯FAM荧光信号，分别代表该位点三种不同的基因型。
实施例3风险等级与饮品配方
采用实施例1中建立的风险等级，其中将风险等级V-VIII定义为毒素堆积型肥胖基因类型，风险等级I-IV定义为非毒素堆积型肥胖基因类型。
对于毒素堆积型肥胖基因类型个体的配方：
每300mL饮品中含有苹果62.5g、梨20g、紫甘蓝30g、西兰花7.5g、菠菜12.5g、西红柿12.5g、山药20g、柠檬2g。
对于非毒素堆积型肥胖基因类型个体的普通配方：
每300mL饮品中含有苹果62.5g、梨20g、紫甘蓝15g、西兰花3.8g、菠菜6.3g、西红柿20g、山药20g、柠檬2g。
实施例4个体化干预饮品制备系统
本实施例中的毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品制备系统的工作流程如图1所示，该系统包括控制单元、联合基因型检测单元和饮品制作单元，其中控制单元分别与联合基因型检测单元、饮品制作单元电连接；所述控制单元内预设有毒素堆积型肥胖基因风险因素中多个相关多态性位点的单基因风险度值，且可根据用户选择的多态性位点自动建立风险等级；所述联合基因型检测单元用于检测个体DNA样本的联合基因型，同时将检测结果输出至所述控制单元，所述控制单元可根据联合基因型检测单元的检测结果计算出该样本的对应风险等级，然后根据风险等级或风险度乘积值确定饮品配方输出至饮品制作单元，最后饮品制作单元根据控制单元的指令制作出个体化干预饮品。
所述联合基因型检测单元包括荧光定量PCR仪，采用TaqMan?-MCB技术对个体的DNA样本进行检测。
所述饮品制作单元包括如图2所示的自动榨汁机，所述自动榨汁机具有8通道原料入口（图中1-8），可用于存放8种不同的果蔬，每个通道内的果蔬均采用市售新鲜果蔬，切成长宽高均不大于3cm的小块；每个通道内都设置有阀门，所述阀门的开闭受控制系统控制，同时控制系统还可以控制阀门开启的时间长短，根据阀门开启的时间长短来控制进入榨汁机内腔中不同种果蔬的体积比例，所述自动榨汁机可根据控制单元给出的配方，通过不同通道阀门的开闭，向榨汁机内腔9中投入一定体积配比的不同果蔬原料，所述果蔬原料在该榨汁机的内腔9中被榨成果汁和果泥后从出口10流出，收集该果汁果泥混合物，再调配适量水后即为本发明所述毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品。
该自动榨汁机还具有自清洁功能，在8路通道中的一路中注入水，当榨汁机需要清洁时，该注水通道的阀门打开，水流入榨汁机内腔，启动榨汁功能清洗内腔，清洗完后水从果汁出口10流出，完成一次自清洗。
实施例7临床干预试验
根据实施例1中建立的风险等级，将风险等级V-VIII定义为毒素堆积型肥胖基因类型，风险等级I-IV定义为非毒素堆积型肥胖基因类型。选取40例BMI指数≥28，且风险等级被判定为毒素堆积型肥胖基因的个体进行肥胖干预试验，试验个体的年龄均在25~50岁之间。其中20例（10男，10女）为试验组，采用实施例5中的毒素堆积型肥胖基因类型个体的配方；另20例（10男，10女）为对照组，采用实施例5中的非毒素堆积型肥胖基因类型的普通配方。
试验中受试者每周2天为节食日（周一和周四），从8点至18点每隔2小时饮用一瓶个体化饮品300ml（共6瓶），并在当天不再摄取其它食物；非节食日正常饮食，且食物由试验组织者统一配给，分配量按个体差异稍有调整，以所有受试者均不产生异常饥饿感为准，试验周期共计八周。
干预前，试验组和对照组的BW（体重）和BMI（体重指数）、WC（腰围）、HC（臀围）、WHR（腰臀比）均没有显著差异（P值>0.1）；干预后，受试者的上述指标均得到明显改善，但是试验组的改善结果比对照组的更好，其体重指数和腰臀比的差异具有统计学意义（P值均﹤0.05），见表9和10。
表9干预前后体重等各项指标的变化与比较（男性组）
*表示P<0.05
表10干预前后体重等各项指标的变化与比较（女性组）
*表示P<0.05。
以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此，凡本技术领域中技术人员依本发明的构思在现有技术的基础上通过逻辑分析、推理或者有限的实验可以得到的技术方案，皆应在由权利要求书所确定的保护范围内。
序列表
<110>上海中优生物高科技有限责任公司
<120>毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备方法及其系统
<130>2015
<160>15
<170>PatentInversion3.3
<210>1
<211>643
<212>DNA
<213>人
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<221>mutation
<222>(369)
<223>n=a或g
<400>1
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<212>DNA
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<222>(301)
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<213>人
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<223>带VIC荧光A型探针，与GSTP1rs1695SNP位点结合
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<223>带FAM荧光G型探针，与GSTP1rs1695SNP位点结合
<400>5
tgcaaatacatctccc16
<210>6
<211>22
<212>DNA
<213>人工序列
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<223>用于GSTP1rs1695SNP序列扩增的正向引物
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<223>用于GSTP1rs1695SNP序列扩增的反向引物
<400>7
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<210>8
<211>12
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<223>带VIC荧光A型探针，与CYP1A1rs1048943SNP位点结合
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<223>带FAM荧光G型探针，与CYP1A1rs1048943SNP位点结合
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gaccgttgccc11
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<223>用于CYP1A1rs1048943SNP序列扩增的反向引物
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aggatagccaggaagagaaa20
<210>12
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<223>带VIC荧光C型探针，与CYP1A1rs4646903SNP位点结合
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<212>DNA
<213>人工序列
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<223>带FAM荧光T型探针，与CYP1A1rs4646903SNP位点结合
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cctcctgggctca13
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<212>DNA
<213>人工序列
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<223>用于CYP1A1rs4646903SNP序列扩增的正向引物
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aggctggagtgcactggta19
<210>15
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列
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<223>用于CYP1A1rs4646903SNP序列扩增的反向引物
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acatggtgaaaccccatctc20
Claims (10)
1.一种毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备方法，其特征在于所述制备方法包括：
步骤一联合基因型风险等级的建立：
（1）选择与毒素堆积型肥胖相关的基因多态性位点，根据文献给出的数据或自行采样研究确定各遗传风险因素相关多态性位点的不同基因型的单基因风险度；
（2）将采用的所有多态性位点的各基因型排列组合，然后根据各单基因风险度乘积建立联合基因型风险等级；
步骤二个体基因检测：
对从个体中获得的DNA进行步骤一中所选的基因多态性位点的联合基因型检测；
步骤三根据检测结果所属的风险等级确定饮品配方：
根据联合基因型检测的结果确定个体的风险等级，并按不同风险等级的营养素需求及干预方式，确定饮品中不同营养素的添加量；
步骤四根据步骤三中确定的配方制作饮品。
2.如权利要求1所述的毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备方法，其特征在于步骤（1）中所述自行采样研究确定各遗传风险因素相关多态性位点的不同基因型的单基因风险度的具体方法为：
A．利用病例-对照关联分析方法，采用卡方检验或Fisher精确概率法，可信区间CI取95%，显著性差异取p<0.05，对毒素堆积型肥胖在特定人群中的遗传风险因素的相关位点进行筛选；
B．利用网上SPSS统计学软件计算相对风险度OR，CI取95%，p<0.05，作为各相关多态性位点不同基因型的单基因风险度。
3.如权利要求1所述的毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备方法，其特征在于步骤（1）中所述选择与毒素堆积型肥胖相关的基因多态性位点的具体方法为：根据文献资料查找中国人群中毒素堆积型肥胖常见的遗传风险因素进行选择。
4.如权利要求1所述的毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备方法，其特征在于所述与毒素堆积型肥胖相关的基因多态位性点选自于下述三个位点中的至少两个：rs1695、rs1048943、rs4646903。
5.如权利要求1所述的毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备方法，其特征在于步骤（2）的具体方法为：每个与毒素堆积型肥胖相关的基因多态性位点分别有三种亚型，将所选位点所有亚型出现的可能进行排列组合；然后将这些亚型的风险度相乘获得不同排列组合的风险度乘积；将获得的风险度乘积从小到大或从大到小排列，合并风险度乘积相等的组；最终按风险度乘积的大小确定各组风险度的高低。
6.如权利要求1所述的毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备方法，其特征在于步骤二中的所述联合基因型检测采用TaqMan?-MCB技术进行同时检测。
7.如权利要求1所述的毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备方法，其特征在于步骤三中对于高风险等级的个体采用鲜榨果蔬的方式制作饮品，其配方如下：每300mL饮品中含有苹果62.5g、梨20g、紫甘蓝30g、西兰花7.5g、菠菜12.5g、西红柿12.5g、山药20g、柠檬2g。
8.一种毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备系统，其特征在于包括控制单元、联合基因型检测单元和饮品制作单元，其中控制单元分别与联合基因型检测单元、饮品制作单元电连接；所述控制单元内预设有毒素堆积型肥胖基因风险因素中多个相关多态性位点的单基因风险度值，且可根据用户选择的多态性位点自动建立风险等级；所述联合基因型检测单元用于检测个体DNA样本的联合基因型，同时将检测结果输出至所述控制单元，所述控制单元可根据联合基因型检测单元的检测结果输出该样本的对应风险等级，然后根据风险等级或风险度乘积值确定饮品配方输出至饮品制作单元，最后饮品制作单元根据控制单元的指令制作个体化干预饮品。
9.如权利要求8所述的毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备系统，其特征在于所述饮品制作单元包括自动榨汁机，所述自动榨汁机具有多通道原料入口，所述通道中装有切成块状的果蔬原料，每个通道内都设置有阀门，所述自动榨汁机可根据控制单元给出的配方，通过不同通道阀门的开闭，向榨汁机内腔中投入一定体积配比的不同果蔬原料，所述果蔬原料在该榨汁机的内腔中被榨成果汁和果泥混合物后从出口流出，收集所述混合物，掺入一定量水，即为本发明所述毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品。
10.如权利要求8所述的毒素堆积型肥胖基因个体化干预饮品的制备系统，其特征在于所述根据用户选择的多态性位点自动建立风险等级的具体方法为：将所选位点所有亚型出现的可能进行排列组合；然后将这些亚型的风险度相乘获得不同排列组合的风险度乘积；将获得的风险度乘积从大到小排列，合并风险度乘积相等的组；最终按风险度乘积的大小确定各组风险度的高低。
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