BRPI0911659B1

BRPI0911659B1 - composto 3-fenilpirazolo[5,1-b]tiazol e composição farmacêutica compreendendo o mesmo

Info

Publication number: BRPI0911659B1
Application number: BRPI0911659-1A
Authority: BR
Inventors: Hisashi Shibata; Kodo Shikata; Kogyoku Shin; Taro Terauchi; Minako Hashizume; Kunitoshi TAKEDA; Akira Inomata; Yoshinori Takahashi
Original assignee: Eisai R&D Management Co., Ltd
Priority date: 2008-04-15
Filing date: 2009-04-09
Publication date: 2020-08-25
Also published as: DK2266990T3; RS52561B; JPWO2009128383A1; AU2009237050B2; BRPI0911659A2; JP4654325B2; HRP20121021T1; PL2266990T3; CY1113484T1; HK1150310A1; ZA201006764B; RU2482120C2; PT2266990E; HK1151797A1; RU2010146240A; TW201004964A; EP2266990A4; WO2009128383A1; IL208393A0; CN102007133B

Abstract

composto 3-fenilpirazolo[5,1-b]tlazol. a presente invenção refere-se a um composto representado peia seguinte fórmula (i), ou um sal do mesmo exibe excelente antagonismo de receptor de crf, e atividade farmacológica suficiente, propriedades farmacocinéticas e de segurança como um fármaco. m que r1 representa a fórmula -a11 -a12; r2 representa tetra-hidrofurilmetila, tetra-hidropiranilmetila ou tetra-hidropiranila; a11 representa uma iigação simples, metileno ou 1,2-etileno; a12 representa c1-6 alquila, c3-6 cicloalqui- 'la ou c3-6 cicloalquila tendo metila; r3 representa metóxi, ciano, ciclobutilo- ximetila, metoximetila ou etoximetila; e r4 representa metóxi ou cloro.

Description

COMPOSTO 3-FENILPIRAZOLO[5,1-B]TIAZOL E COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA COMPREENDENDO O MESMO

Campo Técnico

[0001] A presente invenção refere-se a novos compostos tendo antagonismo contra o receptor do fator de liberação de corticotropina (imediatamente abaixo, "CRF"), sais dos mesmos e uso médico dos mesmos.

Técnica Antecedente

[0002] CRF é um neuropeptídeo consistindo em 41 aminoácidos que é produzido e secretado no hipotálamo e promove a liberação do hormônio adrenocorticotrópico (ACTH) sob estresse, e ele também funciona no cérebro como um neurotransmissor ou neuromodulador, integrando eletrofisiologia, nervos autonômicos e comportamento em resposta ao estresse.

[0003] Os receptores de CRF são de dois subtipos, receptores de CRF1 e receptores de CRF2, dos quais os receptores de CRF1 têm sido relatados serem amplamente distribuídos no córtex cerebral, cerebelo, bulbo olfativo, glândula pituitária, núcleo amidaloide e em outros lugares.

[0004] Numerosos compostos moleculares baixos tendo antagonismo de receptor de CRF têm sido notados como agentes terapêuticos potenciais para um número de doenças incluindo depressão, ansiedade e distúrbios relacionados ao estresse. (Ver Literatura de não-Patente 1)

[0005] Os compostos revelados tendo antagonismo de receptor de CRF incluem compostos contendo 2,6-dimetóxi-4-metoximetilfenila (Ver Literatura de Patente 1), porém os compostos tendo um esqueleto de pirazolo[5,1-ó]tiazol de acordo com a presente invenção não foram revelados nem sugeridos.

[0006] O composto mostrado abaixo tem sido descrito como um composto tendo um esqueleto de pirazolo[5,1-b]tiazol, mas seu uso é para colorimetria. (Ver Exemplo 16 da Literatura de Patente 2)

[0007] Fórmula Química 1

Lista de citação

[0008] Literatura de Patente

[0009] Literatura de Patente 1 Publicação de Pedido de Patente dos Estados Unidos n° 2004/0224974

[00010] Literatura de Patente 2 Patente dos Estados Unidos n° 5234818

[00011] Literatura de não-Patente

[00012] Literatura de não-Patente 1 Fármacos do Futuro, 24:1089-1098(1999)

Sumário da Invenção Problema Técnico

[00013] Absolutamente nenhum composto de 3-fenilpirazolo[5,1-b]tiazol tendo antagonismo de receptor de CRF superior é conhecido. Além disso, embora compostos tendo antagonismo de receptor de CRF terem sido relatados, eles não necessariamente foram adequados em termos de exibir antagonismo de receptor de CRF superior, e em termos de terem atividade farmacológica suficiente, segurança e propriedades farmacocinéticas como medicamentos.

Solução do Problema

[00014] Como um resultado da pesquisa diligente, na luz das circunstâncias atuais, os presentes inventores descobriram novos compostos que são excelentes antagonistas de receptor de CRF com atividade farmacológica suficiente, segurança e propriedades farmacocinéticas, os quais são, portanto, úteis como agentes profiláticos ou terapêuticos para depressão, ansiedade, síndrome do intestino irritável e similar(es).

[00015] Especificamente, a invenção refere-se ao seguinte.

[00016] <1>Um composto representado pela seguinte fórmula (I) ou sal do mesmo.

[00017] Fórmula Química 2

em que
R1 representa a fórmula -A11-A12;
R2 representa tetra-hidrofurilmetila, tetra-hidropiranilmetila or tetra-hidropiranila;
A11 representa uma ligação simples, grupo metileno ou 1,2-etileno;
A12 representa C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila, ou C3-6 cicloalquila tendo metila;
R3 representa metóxi, ciano, ciclobutiloximetila, metoximetila ou etoximetila; e
R4 representa grupo metóxi ou cloro.

[00018] <2> Um composto ou sal do mesmo de acordo com <1> acima, em que R2 é tetra-hidropirano-4-il, tetra-hidropirano-3-il, (tetra-hidropirano-4-il)metila ou (tetra-hidrofurano-3-il)metila.

[00019] <3> Um composto ou sal do mesmo de acordo com <1> ou <2> acima, em que R1 é n-propila, n-butila, n-pentila, ciclopropilmetila, ciclobutilmetila, 2-(ciclopropil)etila ou (2-metilciclopropil)metila.

[00020] <4> Uma composição farmacêutica compreendendo um composto ou sal do mesmo de acordo com qualquer um de <1> a <3> acima como um ingrediente ativo.

[00021] <5> Uma composição farmacêutica de acordo com <4> acima, o qual é um antagonista de receptor de CRF1.

[00022] <6> Um agente terapêutico ou profilático para uma doença para a qual o antagonista de receptor de CRF1 é efetivo, compreendendo um composto ou sal do mesmo de acordo com qualquer um de <1> a <3> acima.

[00023] <7> Um agente terapêutico ou profilático para depressão, sintomas depressivos, ansiedade, síndrome do intestino irritável, distúrbios do sono, insônia, dependência de álcool, sintomas de abstinência de álcool, dependência de droga, sintomas de abstinência de droga, disfunção gastrointestinal relacionada ao estresse, anorexia nervosa, distúrbios de alimentação, íleo pós-operatório, neuropatia isquêmica, apoplexia, neuropatia excitotóxica, convulsão, epilepsia, hipertensão, esquizofrenia, distúrbio bipolar ou demência, que compreende um composto ou sal do mesmo de acordo com qualquer um de <1> a <3> acima.

[00024] <8> Um agente terapêutico ou profilático para depressão, sintomas depressivos, ansiedade ou síndrome do intestino irritável, compreendendo um composto ou sal do mesmo de acordo com qualquer um de <1> a <3> acima.

[00025] <9> Um método para o tratamento ou prevenção de depressão, sintomas depressivos, ansiedade, síndrome do intestino irritável, distúrbios do sono, insônia, dependência de álcool, sintomas de abstinência de álcool, dependência de droga, sintomas de abstinência de droga, disfunção gastrointestinal relacionada ao estresse, anorexia nervosa, distúrbios de alimentação, íleo pós-operatório, neuropatia isquêmica, apoplexia, neuropatia excitotóxica, convulsão, epilepsia, hipertensão, esquizofrenia, distúrbio bipolar ou demência, compreendendo administrar a um paciente, um composto ou sal do mesmo de acordo com qualquer um de <1> a <3> acima.

[00026] <10> Um método para o tratamento ou prevenção de depressão, sintomas depressivos, ansiedade ou síndrome do intestino irritável, compreendendo administrar a um paciente, um composto ou sal do mesmo de acordo com qualquer um de <1> a <3> acima.

[00027] <11> Um composto ou sal do mesmo de acordo com qualquer um de <1> a <3> acima para o tratamento ou prevenção de depressão, sintomas depressivos, ansiedade, síndrome do intestino irritável, distúrbios do sono, insônia, dependência de álcool, sintomas de abstinência de álcool, dependência de droga, sintomas de abstinência de droga, disfunção gastrointestinal relacionada ao estresse, anorexia nervosa, distúrbios de alimentação, íleo pós-operatório, neuropatia isquêmica, apoplexia, neuropatia excitotóxica, convulsão, epilepsia, hipertensão, esquizofrenia, distúrbio bipolar ou demência.

[00028] <12> Um composto ou sal do mesmo de acordo com qualquer um de <1> a <3> acima para o tratamento ou prevenção de depressão, sintomas depressivos, ansiedade ou síndrome do intestino irritável.

[00029] <13> Aplicação de um composto ou sal do mesmo de acordo com qualquer um de <1> a <3> acima para a fabricação de um agente terapêutico ou profilático para depressão, sintomas depressivos, ansiedade, síndrome do intestino irritável, distúrbios do sono, insônia, dependência de álcool, sintomas de abstinência de álcool, dependência de droga, sintomas de abstinência de droga, disfunção gastrointestinal relacionada ao estresse, anorexia nervosa, distúrbios de alimentação, íleo pós-operatório, neuropatia isquêmica, apoplexia, neuropatia excitotóxica, convulsão, epilepsia, hipertensão, esquizofrenia, distúrbio bipolar ou demência.

[00030] <14> Aplicação de um composto ou sal do mesmo de acordo com qualquer um de <1> a <3> acima para a fabricação de um agente terapêutico ou profilático para depressão, sintomas depressivos, ansiedade ou síndrome do intestino irritável.

[00031] <15-1> N-Butil-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1 -b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

[00032] <15-2> N-Butil-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

[00033] <15-3> N-(2-Ciclopropiletil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

[00034] <15-4> N-(Ciclobutilmetil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

[00035] <15-5> N-(Ciclopropilmetil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

[00036] <15-6> 3-[4-(Etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)pirazolo[5,1 -b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

[00037] <15-7> N-(Ciclobutilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-ó][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

[00038] <15-8> 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-pentil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1 -b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

[00039] <15-9> N-(Ciclopropilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

[00040] <15-10> 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1 -b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

[00041] <15-11> N-(Ciclopropilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

[00042] <15-12> 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-[(2-metilciclopropil)metil]-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

[00043] <15-13> 3-[2-Cloro-6-metóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1 -b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

[00044] <15-14> 4-{7-[(Ciclopropilmetil)(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)amino]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-3-il}-3,5-dimetoxibenzonitrila ou sal do mesmo.

[00045] <15-15> 4-{7-[(Ciclopropilmetil)(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)amino]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-3-il}-3,5-dimetoxibenzonitrila ou sal do mesmo.

[00046] <15-16> N-(Ciclopropilmetil)-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-3-(2,4,6-trimetoxifenil)-pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

[00047] <15-17> 3-{4-[(Ciclobutilóxi)metil]-2,6-dimetoxifenil}-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.

Efeito Vantajoso da Invenção

[00048] Os antagonistas do receptor de CRF têm sido relatados comoefetivos para uma ampla variação de doenças, que são listadas abaixo.

(1) depressão, sintomas depressivos, ansiedade

[00049] O antagonista do receptor CRF1 R121919 é efetivo para melhorar depressão, sintomas depressivos, ansiedade e similar(es). (Journal of Psychiatric Research, 34:171-181(2000))

[00050] O antagonista do receptor CRF1 R121919 exibe uma ação anti-ansiedade em ratos. (European Journal of Neuroscience, 13:373-380(2001))

[00051] O antagonista do receptor CRF1 CP-154526 exibe ações antidepressivas e antiansiedade em ratos. (European Journal of Pharmacology, 492:195-201(2004))

(2) síndrome do intestino irritável (IBS)

[00052] O antagonista do receptor CRF1 α-helicoidal CRF(9-41) inibe hipercinese intestinal de cólon em pacientes IBS e reduz dor abdominal e ansiedade. (Gut 2004; 53:958-964)

(3) distúrbios do sono, insônia

[00053] O antagonista do receptor CRF1 R121919 inibe distúrbio do sono relacionado ao estresse particularmente em ratos de elevada ansiedade. (Journal of Psychiatric Research, 36:197-208(2002))

(4) Dependência de álcool, sintomas de abstinência de álcool, dependência de droga, sintomas de abstinência de droga

[00054] O antagonista do receptor CRF1 CP-154526 inibe a recorrência do comportamento de procura por álcool produzida por estresse em ratos. (Psychopharmacology, 150:317-324(2000))

[00055] O antagonista do receptor CRF1 α-helicoidal CRF(9-41) inibe o comportamento de ansiedade em ratos com abstinência de etanol. (Brain Research, 605:25-32(1993))

[00056] O antagonista do receptor CRF1 CP-154526 inibe a recorrência do comportamento de procura de droga (heroína, cocaína) produzida por estresse em ratos. (Psychopharmacology, 137:184-190(1998))

[00057] O pré-tratamento com o antagonista do receptor CRF1 CP-154526 inibe os sintomas da abstinência de morfina induzido por naltrexona. (Journal of Neurochemistry, 74:199-208(2000))

(5) Disfunção gastrointestinal relacionada com estresse

[00058] O antagonista do receptor CRF1 NBI-27914 inibe a catarse em rato relacionada com estresse pelo evitamento de água. (Brain Research, 893:29-35(2001))

(6) Anorexia nervosa, distúrbio de alimentação

[00059] Os antagonistas do receptor de CRF1 α-helicoidais CRF(9-41) e CRA1000 inibem a redução relacionada ao estresse na ingestão de alimento. (Brain Research, 823:221-225(1999))

(7) Íleo pós-operatório

[00060] O antagonista do receptor CRF1 CP-154526 melhora o retardo do esvaziamento gástrico após cirurgia. (Gastroenterology, 125:654-659(2003))

(8) demência, demência senil tipo Alzheimer, demência de multi-infarto, demência senil.

[00061] O antagonista do receptor CRF1 CP-154526 inibe o distúrbio de aprendizagem após estresse agudo. (Behavioural Brain Research, 138:207-213(2003))

[00062] O antagonista do receptor CRF1 α-helicoidal CRF(9-41) suprime o aumento relacionado ao estresse em β-amiloide intracerebral. (Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 104:10673-10678(2007))

[00063] O antagonista do receptor CRF1 NBI27914 inibe níveis aumentados de deposição de placa Αβ e Αβ induzida por estresse em camundongos Tg2576 (Journal of Neurochemistry, 108: 165-175 (2009)).

[00064] O antagonista do receptor CRF1 antalarmina inibe a fosforilação tau hipocampal induzida por estresse (Journal of Neuroscience, 27 (24): 6552-6562 (2007)).

(9) Neuropatia isquêmica, apoplexia

[00065] O antagonista do receptor CRF1 α-helicoidal CRF(9-41) inibe encefalopatia excitotóxica e isquêmica. (Brain Research, 656:405-408(1994)).

(10) Neuropatia excitotóxica

[00066] O antagonista do receptor CRF1 Asressina inibe a neuropatia excitotóxica induzida por ácido caínico. (Brain Research, 744:166-170(1997))

(11) Convulsão, epilepsia

[00067] O antagonista do receptor CRF1 NBI27914 inibe a crise do sistema límbico (convulsão e eplepsia induzida por administração de CRF). (Brain Research, 770:89-95(1997))

(12) Hipertensão

[00068] O antagonista do receptor CRF1 Antalarmina inibe a hipertensão induzida por administração intraventricular de CRF. (Brain Research, 881:204-207(2000)).

[00069] Os compostos e sais dos mesmos de acordo com a invenção possuem excelente antagonismo de receptor de CRF, como evidenciado pelos dados de atividade nos Exemplos de teste farmacológico descritos abaixo. Desse modo, com base nas publicações anteriormente mencionadas demonstrando uma correlação entre o antagonismo do receptor CRF e os efeitos de tratar ou prevenir doenças, os compostos ou sais dos mesmos de acordo com a invenção são úteis para o tratamento ou prevenção de doenças associadas com CRF e/ou receptores CRF, e são particularmente úteis como agentes terapêuticos ou profiláticos para depressão, sintomas depressivos, ansiedade, síndrome do intestino irritável, distúrbios do sono, insônia, dependência de álcool, sintomas de abstinência de álcool, dependência de droga, sintomas de abstinência de droga, disfunção gastrointestinal relacionada ao estresse, anorexia nervosa, distúrbios de alimentação, íleo pós-operatório, neuropatia isquêmica, apoplexia, neuropatia excitotóxica, convulsão, epilepsia, hipertensão, esquizofrenia, distúrbio bipolar ou demência.

Descrição das Modalidades

[00070] A presente invenção será agora explicada em detalhes.

[00071] Por todo o presente relatório, as fórmulas estruturais dos compostos mostrarão apenas um isômero específico por conveniência, porém a invenção inclui todos os isômeros tais como isômeros geométricos, isômeros ópticos, estereoisômeros e tautômeros indicados pelas estruturas de composto, bem como suas misturas de isômeros, e os compostos podem, portanto ser qualquer um dos isômeros ou misturas dos mesmos em qualquer proporção desejada, sem ser limitados às fórmulas que são mostradas por conveniência. Desse modo, por exemplo, os compostos da invenção podem existir como formas opticamente ativas ou misturas racêmicas, todos os quais são incluídos sem limitações de acordo com a invenção, e se misturas racêmicas ou formas opticamente ativas, elas podem ser empregadas como misturas com as formas opticamente ativas em qualquer proporção desejada.

[00072] Os cristais polimórficos podem também existir, e pode ser empregada qualquer forma de cristal ou uma mistura da mesma sem quaisquer restrições, bem como formas amórfas, e os compostos da invenção também incluem igualmente anidrato e solvato (especialmente hidrato). A invenção também abrange metabólitos do composto (I) de acordo com a invenção, que são produzidos por metabolismo (oxidação, redução, hidrólise, conjugação e similar(es)) no corpo. A invenção abrange ainda também os compostos que produzem o composto (I) de acordo com a invenção por metabolismo (oxidação, redução, hidrólise, conjugação e similar(es)) no corpo (assim chamados profármacos).

[00073] Os significados dos termos e símbolos usados por toda a presente relatório serão agora explicados, seguido por mais uma descrição detalhada da invenção.

[00074] O termo "C1-6 alquila" usado por todo o presente relatório refere-se a grupos alquila de cadeia linear ou ramificada C1-6, e como exemplos específicos podem ser mencionados metila, etila, 1 -propila (n-propila), 2-propila (i-propila), 2-metil-1-propila (i-butila), 2-metil-2-propila (terc-butila), 1-butila (n-butila), 2-butila (s-butila), 1 -pentila, 2-pentila, 3-pentila, 2-metil-1-butila, 3-metil-1-butila, 2-metil-2-butila, 3-metil-2-butila, 2,2-dimetil-1-propila, 1-hexila, 2-hexila, 3-hexila, 2-metil-1 -pentila, 3-metil-1-pentila, 4-metil-1-pentila, 2-metil-2-pentila, 3-metil-2-pentila, 4-metil-2-pentila, 2-metil-3-pentila, 3-metil-3-pentila, 2,3-dimetil-1-butila, 3,3-dimetil-1-butila, 2,2-dimetil-1-butila, 2-etil-1-butila, 3,3-dimetil-2-butila e 2,3-dimetil-2-butila.

[00075] O termo "C3-6 cicloalquila" usado por todo o presente relatório refere-se a grupos de hidrocarboneto alifáticos saturados monocíclicos C3-6, e como exemplos específicos podem ser mencionados ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila e ciclo-hexila.

[00076] Como exemplos específicos da "C3-6 cicloalquila tendo metila" referida por toda a presente relatório podem ser mencionados 2-metilciclobutila, 3-metilciclobutila e 2-metilciclopropila, dentre os quais 2-metilciclopropila é preferido.

[00077] Como exemplos específicos de "tetra-hidropiranila" referido por todo o presente relatório podem ser mencionadas tetra-hidropiran-4-ila e tetra-hidropiran-3-ila, com tetra-hidropiran-4-ila sendo preferida.

[00078] Como exemplos específicos de "tetra-hidropiranilmetila" referido por toda a presente relatório podem ser mencionados (tetra-hidropiran-4-il)metila, (tetra-hidropiran-3-il)metila e (tetra-hidropiran-2-il)metila, dentre os quais (tetra-hidropiran-4-il)metila é preferida.

[00079] Como exemplos específicos de "tetra-hidrofurilmetila" referida por todo o presente relatório podem ser mencionadas (tetra-hidrofuran-3-il)metila e (tetra-hidrofuran-2-il)metila, com (tetra-hidrofuran-3-il)metila sendo preferida.

[00080] O termo "ansiedade" usado na presente relatório refere-se não apenas à ansiedade no sentido exato, mas também às condições dentro do conceito geral de ansiedade, tais como distúrbio de ansiedade generalizado, distúrbios do pânico, fobia, distúrbio obsessivo compulsivo e distúrbio de estresse pós-traumático, bem como doenças estritamente relacionadas à ansiedade.

[00081] O termo "demência" usado no presente relatório refere-se não apenas à demência no sentido exato, mas também às condições dentro do conceito geral de demência, tais como demência senil do tipo Alzheimer, demência de multi-infarto e demência senil, bem como doenças estritamente relacionadas à demência.

[00082] Um "sal" usado no presente relatório não é particularmente restrito contanto que ele seja formado com o composto da invenção, embora ele seja preferivelmente um sal farmacologicamente aceitável, e como exemplos específicos podem ser mencionados sais de ácido inorgânico, sais de ácido orgânico e sais de aminoácido acídico.

[00083] Um "sal" usado na presente relatório, a menos que de outra forma especificado, pode formar um sal com uma relação apropriada, e o número da molécula de ácido contra uma molécula do composto não é particularmente restrito, porém preferivelmente aproximadamente de 0,1 a aproximadamente 5 moléculas do ácido existe contra uma molécula do composto, mais preferivelmente aproximadamente de 0,5 a aproximadamente 2 moléculas do ácido existem contra uma molécula do composto, e ainda mais preferivelmente aproximadamente de 0,5, aproximadamente 1 ou aproximadamente 2 moléculas do ácido existem contra uma molécula do composto.

[00084] Como exemplos preferidos de sais de ácido inorgânico podem ser mencionados cloridrato, bromidrato, sulfato, nitrato e fosfato, e como exemplos preferidos de sais de ácido orgânico podem ser mencionados acetato, sucinato, fumarato, malato, tartarato, citrato, lactato, estearato, benzoato, metanossulfonato e p-toluenossulfonato.

[00085] Como exemplos preferidos de sais de aminoácido acídico podem ser mencionados aspartato e glutamato.

(Esquemas de produção geral)

[00086] Os esquemas de produção geral para os compostos de acordo com a invenção serão delineados abaixo, embora eles não sejam pretendidos ser restritivos. Os compostos de partida e os reagentes usados nos esquemas de produção geral para os compostos da invenção podem também formar sais ou solvatos (especialmente hidratos).

[00087] Os compostos representados pela fórmula geral (I) da invenção podem ser produzidos pelos seguintes esquemas de produção.

Esquema de Produção 1

[00088] Fórmula Química 3

[00089] em que Ar corresponde ao grupo representado pela fórmula:

[00090] Fórmula Química 4

no composto (I) descrito acima;
Ra e o grupo representado pela fórmula:

[00091] Fórmula Química 5

cada qual independentemente corresponde a R1 ou R2 acima;
X1 representa B(OH)2 ou similar(es);
X2 representa um grupo de saída tal como iodo, bromo, cloro, metanossulfonilóxi ou p-toluenossulfonilóxi; e
Boc representa terc-butoxicarbonila.

Etapa 1A

[00092] Esta é uma etapa de reagir o composto (1A-1) e o composto (1A-2) em um solvente na presença de uma base e um catalisador de paládio para produzir o composto (1B-1).

[00093] A etapa pode ser realizada com referência às condições reacionais descritas no WO 04/037822 (etapa 5-E do Processo de Produção 5, Exemplo 47) e em (2f) do Exemplo 2 abaixo e similar(es).

[00094] Os compostos representados pela fórmula geral (1A-1) podem ser produzidos de acordo com (2e) do Exemplo 2 e similar(es).

[00095] Para um composto representado pela fórmula geral (1A-2) pode ser usado um composto que pode ser produzido sob as condições reacionais descritas no WO 04/037822 (Exemplos de Produção 29 e 33) e nos Exemplos de Produção 1C(3) e 2C(6) e Exemplos 16(b) e 17(d) abaixo e similar(es). Para um composto representado pela fórmula geral (1A-2) pode ser usado qualquer composto comercialmente disponível, ou um composto que pode ser facilmente produzido por uma pessoa versada na técnica a partir de um composto comercialmente disponível.

[00096] A reação pode ser realizada sob uma corrente ou em uma atmosfera de um gás inerte tal como nitrogênio ou argônio.

[00097] O solvente usado para a reação não é particularmente restringido contanto que ele dissolva os materiais de partida até certo ponto e não interfira com a reação, e os exemplos incluem solventes alcoólicos tais como metanol, etanol e n-butanol, solventes de éter tais como tetra-hidrofurano, 1,2-dimetoxietano, metil-terc-butil éter, ciclopentil metil éter, dietil éter, di-isopropil éter, dibutil éter, diciclopentil éter, 1,2-dimetoxietano e 1,4-dioxano, solventes de hidrocarboneto aromático tais como benzeno, tolueno, xileno e mesitileno, solventes de amida tal como N,N-dimetilformamida, solventes de hidrocarboneto alifático tais como heptano e hexano, ou 1-metil-2-pirrolidinona, água, e misturas dos mesmos, dentre os quais os solventes preferidos são água, solventes alcoólicos, solventes de hidrocarboneto aromático, solventes de éter e misturas dos mesmos, e solventes mais preferidos são um solvente misturado de etanol e tolueno, ou um solvente misturado de 1,2-dimetoximetano e água.

[00098] A base empregada nesta etapa não é particularmente restringida e será diferente dependendo do material de partida e do solvente usados, porém exemplos incluem bases inorgânicas tais como hidróxido de lítio, hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido de bário, carbonato de lítio, carbonato de sódio, carbonato de potássio, hidrogenocarbonato de sódio, hidrogenocarbonato de potássio, carbonato de césio, fluoreto de césio e fluoreto de potássio, bases cíclicas tais como imidazol e piridina e aminas orgânicas tais como trietilamina e N,N-di-isopropiletilamina, dentre as quais carbonato de sódio e carbonato de potássio são preferidas.

[00099] O catalisador de paládio não é particularmente restringido contanto que não interfira com a reação, e será diferente dependendo do material de partida e do solvente usado, porém como exemplos preferidos podem ser mencionados tetracis(trifenilfosfina)paládio(0), acetato de paládio(N)/trifenilfosfina, acetato de paládio(II) /2-diciclo-hexilfosfino-2',4',6'-triisopropilbifenila, cloreto de paládio(II), tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0)/tri-terc-butilfosfina e dicloro[1,1'-bis(difenilfosfina)-ferroceno]paládio(0).

[000100] A temperatura de reação geralmente será diferente dependendo dos materiais de partida, solvente e outros reagentes usados na reação, porém é preferivelmente entre 0°C e a temperatura de refluxo do solvente (como temperatura interna do reator), e mais preferivelmente 60°C-100°C.

[000101] O tempo de reação será também, em geral, diferente dependendo dos materiais de partida, solvente e outros reagentes usados na reação, e da temperatura de reação, porém é preferivelmente 1-48 horas e mais preferivelmente 1-6 horas na temperatura de reação anteriormente mencionada após a adição dos reagentes.

[000102] O composto (1A-2) pode ser usado em 1-5 equivalentes molares e preferivelmente 1-3 equivalentes molares com relação ao composto (1A-1).

[000103] A base anteriormente mencionada pode ser empregada em 1-10 equivalentes molares e preferivelmente 2-5 equivalentes molares com relação ao composto (1A-1).

[000104] O catalisador de paládio pode ser usado em 0,01-1 equivalente molares e preferivelmente 0,05-0,1 equivalentes molares com relação ao composto (1A-1).

Etapa 1B

[000105] Esta é uma etapa de reagir o composto (1B-1) e o composto (1B-2) em um solvente na presença de uma base para produzir o composto (1C-1).

[000106] A etapa pode ser realizada com referência às condições reacionais descritas no WO 04/037822 (etapa 5-A do Processo de Produção 5, e Exemplo de Produção 24) e em (2g) do Exemplo 2 abaixo e similar(es).

[000107] A reação pode ser realizada sob uma corrente ou em uma atmosfera de um gás inerte tal como nitrogênio ou argônio.

[000108] O composto (1B-2) pode ser um composto que pode ser produzido sob as condições reacionais descritas no Exemplo de Produção 1B abaixo e similar(es). O composto (1B-2) pode ser um composto comercialmente disponível, ou um composto que pode ser facilmente produzido por uma pessoa versada na técnica a partir de um composto comercialmente disponível.

[000109] O solvente usado para esta reação não é particularmente restringido contanto que ele dissolva os materiais de partida a alguns graus e não interfira com a reação, e por exemplo, pode ser usado solventes de nitrila tal como acetonitrila, solventes de éter tais como tetra-hidrofurano, 1,2-dimetoxietano, metil-terc-butil éter, ciclopentil metil éter, dietil éter, di-isopropil éter, dibutil éter e diciclopentil éter, solventes de hidrocarboneto aromático tais como benzeno e tolueno, solventes de amida tais como N,N-dimetilformamida, solventes de hidrocarboneto alifático tais como heptano e hexano, sulfóxido de dimetila, ou misturas dos mesmos, dentre os quais N,N-dimetilformamida e sulfóxido de dimetila são preferidos.

[000110] A base empregada para esta etapa não é particularmente restringida e será diferente dependendo do material de partida e do solvente usado, porém como exemplos podem ser mencionados bases inorgânicas tais como hidróxido de lítio, hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, carbonato de lítio, carbonato de sódio, carbonato de potássio, hidrogenocarbonato de sódio, hidrogenocarbonato de potássio e carbonato de césio, bases organometálicas tais como potássio-terc-butóxido, butil lítio, metil lítio, bis(trimetilsilil)amida de lítio, bis(trimetilsilil)amida de sódio e bis(trimetilsilil)amida de potássio, bases de hidreto tais como hidreto de lítio, hidreto de sódio e hidreto de potássio, bases cíclicas tais como imidazol, piridina e 4-dimetilaminopiridina, e aminas orgânicas tais como trietilamina e N,N-di-isopropiletilamina, dentre os quais hidreto de sódio e hidróxido de sódio são preferidos.

[000111] A temperatura de reação geralmente será diferente dependendo dos materiais de partida, solvente e outros reagentes usados na reação, porém ela é preferivelmente 0°C-80°C (como temperatura interna do reator).

[000112] O tempo de reação geralmente será diferente dependendo dos materiais de partida, do solvente e outros reagentes usados na reação, e da temperatura de reação, porém preferivelmente a agitação é realizada durante 1 a 8 horas na temperatura de reação anteriormente mencionada após a adição dos reagentes.

[000113] O composto (1B-2) pode ser usado em 1-5 moles com relação ao composto (1B-1).

[000114] A base pode ser empregada em 1-5 equivalentes molares e preferivelmente 1,5 equivalente molar com relação ao composto (1B-1).

Etapa 1C

[000115] Esta é uma etapa de tratamento ácido do composto (1C-1) para produzir o composto (1D-1).

[000116] A etapa pode ser realizada com referência às condições reacionais descritas no WO 04/037822 (etapa 5-B do Processo de Produção 5, e Exemplo de Produção 24) e em (2g) de Exemplo 2 abaixo e similar(es).

[000117] Esta etapa pode ser realizada na presença ou na ausência de um solvente, e quando um solvente for usado, o solvente usado para a reação não é particularmente restringido contanto que ele possa dissolver os materiais de partida até certo ponto e não interfira com a reação, e os exemplos incluem solventes de éter tais como tetra-hidrofurano, 1,2-dimetoxietano, metil-terc-butil éter, ciclopentil metil éter, dietil éter, di-isopropil éter, dibutil éter, diciclopentil éter e 1,4-dioxano, solventes de hidrocarboneto aromático tais como benzeno e tolueno, solventes de hidrocarboneto alifático tais como heptano e hexano, acetato de etila, solventes de halogênio tais como diclorometano, acetonitrila, e misturas dos mesmos, com diclorometano sendo preferido.

[000118] O ácido usado nesta etapa pode ser ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido trifluoroacético ou similar(es), com ácido trifluoroacético sendo preferido.

[000119] A temperatura de reação geralmente será diferente dependendo dos materiais de partida, solvente e outros reagentes usados na reação, porém ela é preferivelmente 0°C-40°C (como temperatura interna do reator).

[000120] O tempo de reação também será diferente na maioria dos casos dependendo dos materiais de partida, do solvente e outros reagentes usados na reação, e da temperatura de reação, porém preferivelmente a agitação é realizada durante 1-8 horas na temperatura de reação anteriormente mencionada após a adição dos reagentes.

[000121] O ácido pode ser usado em uma quantidade de 1 mol ou mais com relação ao composto (1C-1), e um grande excesso de ácido pode também ser usado como o solvente de reação.

[000122] O produto da etapa 1B e etapa 1C pode ser usado como o material de partida para a etapa subsequente sem qualquer purificação especial, com apenas um procedimento de tratamento simples da mistura reacional e destilação do solvente, similar a (2g) no Exemplo 2 descrito abaixo.

Etapa 1D

[000123] Esta é uma etapa de reagir o composto (1D-1) e o composto (1D-2) em um solvente, na presença de um agente de redução e na presença ou na ausência de um ácido, para produzir o composto (1E-1).

[000124] A etapa pode ser realizada com referência às condições reacionais descritas no WO 04/037822 (etapa 5-C do Processo de Produção 5, e Exemplo de Produção 24) e em (2g) do Exemplo 2 e similar(es).

[000125] A reação pode ser realizada sob uma corrente ou em uma atmosfera de um gás inerte tal como nitrogênio ou argônio.

[000126] O composto (1D-2) pode ser um composto de aldeído ou composto de cetona como definido acima, e pode ser usado um composto que pode ser produzido sob as condições reacionais descritas no Exemplo de Produção 1A abaixo e similar(es), um composto comercialmente disponível, ou um composto que pode ser facilmente produzido por uma pessoa versada na técnica a partir de um composto comercialmente disponível empregando-se métodos usuais.

[000127] O solvente usado para esta reação não é particularmente restringido contanto que ele dissolva os materiais de partida a alguns graus e não interfira com a reação, e como examplos podem ser mencionados solventes alcoólicos tais como metanol e etanol, solventes de éter tais como tetra-hidrofurano, 1,2-dimetoxietano, metil-terc-butil éter, ciclopentil metil éter, dietil éter, di-isopropil éter, dibutil éter e diciclopentil éter ou ácido acético e similar(es), qualquer um dos quais pode ser usado sozinho ou como solventes misturados.

[000128] O agente de redução pode ser um agente de redução que é comumente usado para aminação redutiva entre os compostos de carbonila e os compostos de amina e não é particularmente restringido para esta reação, e α-picolinaborano, triacetoxiboroidreto de sódio e boroidreto de sódio podem ser mencionados como exemplos.

[000129] O ácido usado para a reação pode ser ácido trifluoroacético, ácido acético e similar(es).

[000130] A temperatura de reação geralmente será diferente dependendo dos materiais de partida, solvente e outros reagentes usados na reação, porém é preferivelmente entre 0°C e a temperatura de refluxo do solvente (como temperatura interna do reator), e é mais preferivelmente temperatura ambiente.

[000131] O tempo de reação será também, em geral, diferente dependendo dos materiais de partida, solvente e outros reagentes usados na reação, e da temperatura de reação, porém é preferivelmente 1-48 horas e mais preferivelmente 1-6 horas na temperatura de reação anteriormente mencionada após a adição dos reagentes.

[000132] O agente de redução pode ser usado em 0,5-3 equivalentes molares e preferivelmente 1-2 equivalentes molares com relação ao composto (1D-1).

[000133] O composto (1D-2) pode ser usado em 1-5 equivalentes molares e preferivelmente 1-2 equivalentes molares com relação ao composto (1D-1).

Esquema de Produção 2

[000134] Fórmula Química 6

[000135] em que Ar é um grupo representado pela fórmula:

[000136] Fórmula Química 7

Boc possui a mesma definição como acima, e
o grupo representado por Rd-CH2- corresponde a R1 ou R2.

Etapa 2A

[000137] Esta é uma etapa de tratamento ácido do composto (1B-1) para produzir o composto (2B-1).

[000138] Esta etapa pode ser realizada sob as condições reacionais descritas para a etapa 1C do Esquema de Produção 1, ou com referência às condições reacionais descritas em (12a) do Exemplo 12 abaixo e similar(es).

[000139] O solvente usado para a reação não é particularmente restringido contanto que ele dissolva os materiais de partida até certo ponto e não interfira com a reação, e por exemplo, acetato de etila, água ou um solvente misturado dos mesmos pode ser usado.

[000140] O ácido usado nesta etapa pode ser ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido trifluoroacético e similar(es), porém é preferivelmente uma solução de ácido clorídrico em acetato de etila, ou ácido trifluoroacético.

[000141] A temperatura de reação geralmente será diferente dependendo dos materiais de partida, solvente e outros reagentes usados na reação, porém é preferivelmente 0°C-40°C.

[000142] O tempo de reação será também, em geral, diferente dependendo dos materiais de partida, solvente e outros reagentes usados na reação, e da temperatura de reação, porém é preferivelmente 1-48 horas e mais preferivelmente 1-6 horas na temperatura de reação anteriormente mencionada após a adição dos reagentes.

[000143] O ácido pode ser usado em uma quantidade de 1 mol ou mais com relação ao composto (1B-1), e um grande excesso de ácido pode também ser usado como o solvente reacional.

Etapa 2B

[000144] Esta é uma etapa de reagir o composto (2B-1) e o composto (2B-2) em um solvente na presença de um agente de condensação para produzir o composto (2C-1).

[000145] Esta etapa pode ser realizada com referência às condições reacionais descritas em (12b) do Exemplo 12 abaixo e similar(es).

[000146] Como compostos representados pela fórmula geral (2B-2), pode ser usado um composto comercialmente disponível, ou um composto que pode ser facilmente produzido por uma pessoa versada na técnica a partir de um composto comercialmente disponível.

[000147] A reação pode ser realizada sob uma corrente ou em uma atmosfera de um gás inerte tal como nitrogênio ou argônio.

[000148] O solvente usado para a reação não é particularmente restringido contanto que ele possa dissolver os materiais de partida até certo ponto e não interfira com a reação, e exemplos incluem solventes de éter tais como tetra-hidrofurano, 1,2-dimetoxietano, metil-terc-butil éter, ciclopentil metil éter, dietil éter, di-isopropil éter, dibutil éter, diciclopentil éter, 1,2-dimetoxietano e 1,4-dioxano, solventes de amida tal como N,N-dimetilformamida, e um solvente misturado dos mesmos.

[000149] O agente de condensação para esta etapa será diferente dependendo dos materiais de partida e do solvente usado e não é particularmente restringido, e exemplos incluem carbodiimida solúvel em água (cloridrato de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida), 1-hidroxibenzotriazol, e uma mistura dos mesmos.

[000150] A temperatura de reação geralmente será diferente dependendo dos materiais de partida, solvente e outros reagentes usados na reação, porém é preferivelmente 0°C-40°C.

[000151] O tempo de reação será também diferente na maioria dos casos dependendo dos materiais de partida, do solvente e outros reagentes usados na reação, e da temperatura de reação, porém é preferivelmente 1 a 48 horas na temperatura anteriormente mencionada após a adição dos reagentes.

[000152] O composto (2B-2) pode ser usado em 1-5 equivalentes molares e preferivelmente 1-1,5 equivalente molar com relação ao composto (2B-1).

[000153] O agente de condensação pode ser usado em 1-10 equivalentes molares com relação ao composto (2B-1).

Etapa 2C

[000154] Esta é uma etapa do composto de redução (2C-1) em um solvente na presença de um agente de redução para produzir o composto (2D-1).

[000155] A etapa pode ser realizada com referência às condições reacionais descritas em (12c) do Exemplo 12 abaixo e similar(es).

[000156] A reação pode ser realizada sob uma corrente ou em uma atmosfera de um gás inerte tal como nitrogênio ou argônio.

[000157] O solvente usado para a reação não é particularmente restringido contanto que ele possa dissolver os materiais de partida até certo ponto e não interfira com a reação, e exemplos incluem solventes de éter tais como tetra-hidrofurano, 1,2-dimetoxietano, metil-terc-butil éter, ciclopentil metil éter, dietil éter, di-isopropil éter, dibutil éter, diciclopentil éter, e 1,4-dioxano, dentre os quais tetra-hidrofurano é preferido.

[000158] O agente de redução para esta etapa será diferente dependendo dos materiais de partida e do solvente usado e não é particularmente restringido, e exemplos incluem borano e uma solução de borano em tetra-hidrofurano.

[000159] A temperatura de reação geralmente será diferente dependendo dos materiais de partida, solvente e outros reagentes usados na reação, porém é preferivelmente de 0°C à temperatura de refluxo do solvente (como temperatura interna do reator).

[000160] O tempo de reação será também diferente na maioria dos casos dependendo dos materiais de partida, do solvente e outros reagentes usados na reação, e da temperatura de reação, porém é preferivelmente 1 a 24 horas na temperatura anteriormente mencionada após a adição dos reagentes.

[000161] O agente de redução pode ser usado em 1-10 equivalentes molares e preferivelmente 2-5 equivalentes molares com relação ao composto (2C-1).

[000162] O produto da etapa 2C pode ser usado como material de partida para a etapa subsequente sem qualquer purificação especial, com apenas um procedimento de tratamento simples da solução de reação e destilação do solvente, similar a (12c) no Exemplo 12 descrito abaixo.

Etapa 2D

[000163] Esta é uma etapa na qual o composto (2D-1) e o composto (1D-2) são reagidos para obter o composto (2E-1).

[000164] As condições reacionais para esta etapa podem ser as mesmas condições pelo mesmo procedimento como na etapa 1D do Esquema de Produção 1.

[000165] Na conclusão da reação em cada etapa dos processos descritos acima, o composto-alvo de cada etapa pode ser recuperado da mistura reacional por um método usual.

Método de tratamento de reação

[000166] Quando a mistura reacional é um líquido, por exemplo, a mistura reacional é retornada à temperatura ambiente ou resfriada sobre gelo quando desejado, e neutralizada com um ácido apropriado, álcali, agente de oxidação ou agente de redução, seguido pela adição de água e um solvente orgânico que é imiscível com esta e não reage com o composto-alvo, tal como acetato de etila. Após completamente agitar a mistura, é deixado descansar para separação e a camada da bicamada resultante que contém o composto-alvo é separada. A seguir, um solvente que é imiscível com a camada obtida e não reage com o composto-alvo é adicionado, e em seguida a camada contendo o composto-alvo é lavada e separada. Quando a camada é uma camada orgânica, ela pode ser seca empregando-se um dessecante tal como sulfato de magnésio anidro ou sulfato de sódio anidro, e o solvente destilado para obter o composto-alvo. Quando a camada é uma camada aquosa, ela pode ser eletricamente dessalinizada e em seguida seca por congelamento para obter o composto-alvo.

[000167] Quando a mistura reacional inteira é um líquido, pode ser possível recuperar o composto-alvo simplesmente destilando-se os componentes diferentes do composto-alvo (por exemplo, solvente, reagentes, etc.) em pressão normal ou sob pressão reduzida.

[000168] Quando o composto-alvo precipita sozinho como um sólido, ou quando a mistura reacional inteira é um líquido e o composto-alvo precipita sozinho como um sólido durante o processo de coletagem, o composto-alvo pode ser primeiro coletado por um método de filtração, o composto-alvo coletado lavado com um solvente orgânico ou inorgânico adequado e a secagem realizada como adequado para obter o composto-alvo.

[000169] Por outro lado, quando os reagentes ou o catalisador são os únicos sólidos presentes, ou quando os reagentes ou catalisador sozinho precipita como sólido durante o tratamento da mistura reacional, com o composto-alvo remanescente dissolvido em solução, os reagentes ou catalisador podem ser removidos primeiramente por um método de filtração, o catalisador ou os reagentes removidos lavados com um solvente orgânico ou inorgânico adequado, e a lavagem obtida combinada com a solução mãe para obter uma mistura líquida, que pode em seguida ser tratada da mesma maneira como no caso em que a mistura reacional inteira é um líquido, a fim de obter o composto-alvo.

[000170] A mistura reacional pode ser empregada diretamente durante as etapas subsequentes sem o isolamento do composto-alvo nos casos onde os componentes diferentes do composto-alvo na mistura reacional não inibirem a reação nas etapas subsequentes.

Processo de Purificação

[000171] A pureza do composto-alvo coletado pelos métodos acima pode ser aumentada realizando-se apropriadamente recristalização, vários métodos de cromatografia, ou destilação.

[000172] Quando o composto-alvo coletado é um sólido, a pureza do composto-alvo pode normalmente ser melhorada por recristalização. Para a recristalização pode ser usado um solvente simples ou uma mistura de solvente múltipla que não reaja com o composto-alvo. Especificamente, o composto-alvo pode primeiro ser dissolvido em temperatura ambiente ou com aquecimento no solvente simples ou mistura de solvente que não reaja com o composto-alvo. A mistura obtida pode em seguida ser resfriada com água gelada ou similar(es) ou deixada descansar em temperatura ambiente para causar a precipitação do composto-alvo da mistura.

[000173] Quando o composto-alvo coletado é um sólido ou líquido, a pureza do composto-alvo pode ser melhorada por vários métodos de cromatografia. Na maioria dos casos sílica-gel fracamente acídica tal como sílica-gel 60 (70-230 mesh ou 340-400 mesh) por Merck, Ltd. ou BW-300 (300 mesh) por Fuji Silysia Chemical, Ltd. pode ser empregada. Se o composto-alvo é básico, pode ser usado sílica-gel revestida por propilamina (200-350 mesh) por Fuji Silysia Chemical, Ltd., ou similar(es). Se o composto-alvo é dipolar ou requer eluição com um solvente altamente polar tal como metanol, pode ser usado NAM-200H ou NAM-300H de Nagara Science Co., Ltd. Empregando-se estas sílica-géis, o composto-alvo pode ser eluído em um solvente simples ou mistura de solvente que não reaja com o composto-alvo e o solvente destilado para obter o composto-alvo com a pureza realçada.

[000174] Quando o composto-alvo coletado é um líquido, a pureza do composto-alvo pode também ser melhorada por destilação.

[000175] A temperatura e o grau de pressão reduzida podem ser ajustados quando apropriado dependendo do composto-alvo, para obter o composto-alvo por um método de destilação usual.

[000176] Quando um composto da invenção é obtido na forma livre, ele pode ser convertido em um sal aceitável do composto por um método usual.

[000177] Ao contrário, quando um composto da invenção é obtido como um sal, ele pode ser convertido à forma livre do composto por um método usual.

[000178] Vários isômeros (por exemplo, isômeros geométricos, isômeros ópticos, isômeros rotacionais, estereoisômeros, tautômeros e similar(es)) obtidos para os compostos da invenção podem ser purificados e isolados empregando-se meios de separação usuais tais como, por exemplo, recristalização, um método de sal de diastereômero, resolução enzimática ou vários métodos de cromatografia (por exemplo, cromatografia de camada fina, cromatografia de coluna, cromatografia gasosa, etc.).

Formulação

[000179] Quando um composto da invenção deve ser usado como um fármaco, o composto da invenção normalmente será usado após a mistura e formulação com os aditivos apropriados. Entretanto, isto não anula o uso dos compostos da invenção em formas de commodity como fármacos.

[000180] Como aditivos podem ser mencionados excipientes, aglutinantes, lubrificantes, desintegrantes, agentes de coloração, neutralizantes de sabor, emulsificantes, tensoativos, auxiliares de dissolução, agentes de suspensão, agentes de isotonização, agentes de tamponamento, agentes antissépticos, antioxidantes, estabilizantes, aceleradores de absorção e similar(es) os quais são comumente usados em fármacos, e estes podem também ser usados em combinações apropriadas se desejado.

[000181] Como exemplos de excipientes podem ser mencionados lactose, açúcar macio branco, glicose, amido de milho, manitol, sorbitol, amido, amido pré-gelatinizado, dextrina, celulose cristalina, anidrido silícico, silicato de alumínio, silicato de cálcio, aluminometasilicato de magnésio, hidrogenofosfato de cálcio e similar(es).

[000182] Como exemplos de aglutinantes podem ser mencionados álcool de polivinila, metilcelulose, etilcelulose, goma arábica, tragacanto, gelatina, goma-laca, hidroxipropilmetilcelulose, hidroxipropilcelulose, carboximetilcelulose sódica, polivinilpirrolidona, macrogol e similar(es).

[000183] Como exemplos de lubrificantes podem ser mencionados estearato de magnésio, estearato de cálcio, fumarato de estearila de sódio, talco, polietileno glicol, sílica coloidal e similar(es).

[000184] Como exemplos de desintegrantes podem ser mencionados celulose cristalina, ágar, gelatina, carbonato de cálcio, hidrogenocarbonato de sódio, citrato de cálcio, dextrina, pectina, hidroxipropilcelulose pouco substituída, carboximetilcelulose, carboximetilcelulose de cálcio, croscarmelose sódica, amido de carboximetila, amido de carboximetila de sódio e similar(es).

[000185] Como agentes de coloração podem ser mencionados aqueles aprovados para adição aos farmacêuticos, tais como sesquióxido de ferro, sesquióxido de ferro amarelo, calamina, caramelo, β-caroteno, óxido de titânio, talco, fosfato de sódio de riboflavina, corante amarelo de tartrazina e similar(es).

[000186] Como neutralizantes de sabor podem ser mencionados pó de cacau, mentol, pós aromáticos, óleo de hortelã-pimenta, cânfora, pó de canela e similar(es).

[000187] Como agentes de emulsificação ou tensoativos podem ser mencionados trietanolamina de estearila, sulfato de laurila de sódio, ácido lauril aminopropiônico, lecitina, monoestearato de glicerina, ésteres de ácido graxo de sacarose, ésteres de ácido graxo de glicerina e similar(es).

[000188] Como auxiliares de dissolução podem ser mencionados polietileno glicol, propileno glicol, benzoato de benzila, etanol, colesterol, trietanolamina, carbonato de sódio, citrato de sódio, polisorbato 80, nicotinamida e similar(es).

[000189] Como agentes de suspensão podem ser mencionados os tensoativos anteriormente mencionados, bem como polímeros hidrofílicos tais como álcool de polivinila, polivinilpirrolidona, metilcelulose, hidroximetilcelulose, hidroxietilcelulose e hidroxipropilcelulose.

[000190] Como agentes de isotonização podem ser mencionados glicose, cloreto de sódio, manitol, sorbitol e similar(es).

[000191] Como agentes de tamponamento podem ser mencionadas soluções de tamponamento de citrato, fosfato, acetato, e carbonato.

[000192] Como agentes antissépticos podem ser mencionados metilparabeno, propilparabeno, clorobutanol, álcool de benzila, álcool de fenetila, ácido dehidroacético, ácido sórbico e similar(es).

[000193] Como antioxidantes podem ser mencionados sulfito, ácido ascórbico, α-tocoferol e similar(es).

[000194] Como estabilizantes podem ser mencionados aqueles comumente usados em fármacos.

[000195] Como aceleradores de absorção podem também ser mencionados aqueles comumente usados em fármacos.

[000196] Como formulações podem ser mencionadas formas orais tais como comprimidos, pós, grânulos, cápsulas, xaropes, pastilhas expectorantes e inalantes; as preparaçõe externas tais como supositórios, pomadas, pomadas oftálmicas, fitas, colírios, gotas de nariz, gotas de ouvido, cataplasmas, loções, e similar(es); e injeções.

[000197] As formas orais anteriormente mencionadas podem ser formuladas com combinações apropriadas dos aditivos mencionados acima. Suas superfícies podem também ser revestidas se necessário.

[000198] As preparações externas anteriormente mencionadas podem ser formuladas com combinações apropriadas dos aditivos acima mencionados, e especialmente excipientes, aglutinantes, neutralizantes de sabor, emulsificantes, tensoativos, auxiliares de dissolução, agentes de suspensão, agentes de isotonização, agentes antissépticos, antioxidantes, estabilizantes e aceleradores de absorção.

[000199] As injeções podem também ser formuladas com combinações apropriadas dos aditivos acima mencionados, e especialmente emulsificantes, tensoativos, auxiliares de dissolução, agentes de suspensão, agentes de isotonização, agentes de tamponamento, agentes antissépticos, antioxidantes, estabilizantes e aceleradores de absorção.

[000200] A dosagem de um fármaco de acordo com a invenção será diferente dependendo da severidade dos sintomas, idade do paciente, sexo e peso corporal, tipo de dosagem forma/sal, sensibilidade ao fármaco do paciente e natureza específica da doença, porém a dosagem por dia para adultos geralmente será de 30 μg a 10 g (preferivelmente 0,1 mg a 1 g) para administração oral, de 30 μg a 20 g (preferivelmente de 100 μg a 10 g) para aplicação externa e de 30 μg a 1 g (preferivelmente de 100 μg a 1 g) para injeção, ou administrada de uma única vez ou em várias dosagens divididas.

[000201] Estes valores são as quantidades reais administradas no caso de formulações de administração oral e injeções, e são as quantidades realmente absorvidas pelo corpo no caso de formulações externas.

Exemplos

[000202] Os compostos da invenção podem ser produzidos pelos processos descritos nos seguintes exemplos, e os efeitos dos compostos podem ser confirmados pelos métodos descritos nos seguintes exemplos de teste. Entretanto, estes exemplos específicos são meramente ilustrativos e não destinados a restringir a invenção de forma alguma, enquanto que várias modificações podem ser implementadas tais como estão dentro do escopo da invenção.

[000203] Os compostos mencionados com referência aos documentos publicados foram produzidos da maneira descrita naqueles documentos.

[000204] Os símbolos usados por todo o presente relatório representam o que segue.
1H-RMN: Ressonância Magnética Nuclear de Próton
δ: Deslocamento Químico
s: singleto
d: dupleto
t: tripleto
q: quarteto
m: multipleto
dd: duplo dupleto
br.s: singleto amplo
sept: septeto
J: constante de acoplamento
Hz: Hertz
M: mol/L
n-: normal
s-: secundário
terc-: terciário (terciária)
N: Normalidade
CDCl3: deutério-clorofórmio
DMSO-de: deutério-dimetil sulfóxido
DMF: N,N-Dimetilformamida
DME: 1,2-Dimetoxietano
THF: Tetra-hidrofurano
DMSO: Sulfóxido de dimetila
NMP: N-Metilpirrolidinona
WSCD: carbodiimida solúvel em água, cloridrato de 1 -etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida [CAS No.25952-53-8]
4AMS: Peneiras moleculares 4A (tamanho de poro: 4 angstrom)
Me: Metila
EGTA: Ácido etilenoglicol tetra-acético (ácido O,O'-bis(2-aminoetil)etilenoglicol-N,N,N',N'-tetra-acético)
BSA: Albumina de soro bovino
"Sob pressão reduzida" significa condições com aproximadamente de 1 a 50 mmHg empregando-se uma bomba de vácuo, uma bomba de jato de água etc.

[000205] A não ser que de outra forma especificado, "sílica-gel" em "cromatografia em coluna de sílica-gel" mencionado por todos os exemplos é Sílica-gel 60 (70-230 mesh ou 340-400 mesh) por Merck, Ltd., FLASH+Cartridge (KP-SIL, tamanho de poro: 60 angstrom, tamanho de partícula: 32-63 μm) por Biotage, ou Cartridge (Hi-Flash, tamanho de poro: 60 angstrom, tamanho de partícula: 40 μm) por Yamazen.

[000206] Também a não ser que de outra forma especificado, "(NH)sílica-gel" em "cromatografia em coluna de (NH)sílica-gel" mencionado por todos os exemplos é sílica-gel revestida por propilamina (200-350 mesh) por Fuji Silysia Chemical, Ltd., ou Cartridge (Hi-Flash Amino, tamanho de poro: 60 angstrom, tamanho de partícula: 40 μm) por Yamazen.

[000207] O termo "temperatura ambiente" refere-se a uma faixa entre 10°C a 35°C. Os valores percentuais são porcentagens em peso, a não ser que de outra forma especificado.

Exemplo de Produção 1A - Di-hidro-2H-piran-3(4H)-ona

[000208] Fórmula Química 8

[000209] A uma mistura de cloreto de oxalila (2,28 mL, 26,6 mmols) e diclorometano (40 mL) foi adicionado uma mistura de DMSO (3,78 mL, 53,2 mmols) e diclorometano (20 mL) ao mesmo tempo com agitação a -78°C, e a mistura foi agitada a -78°C durante 30 minutos.
Após então adicionar a esta mistura uma mistura de tetra-hidropiran-3-ol (sintetizado de acordo com o método descrito em Tetrahedron, 60, 10411-10418, 2004) (1,36 g, 13,3 mmols) e diclorometano (20 mL) a -78°C, a mistura resultante foi agitada a -78°C durante 30 minutos, após a qual trietilamina (11,1 mL, 79,8 mmols) foi adicionada e a agitação foi mantida durante 2 horas ao mesmo tempo que vagarosamente eleva-se a temperatura a 0°C.

[000210] Salmoura e dietil éter foram adicionados à mistura, e após agitação suficiente, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi em seguida filtrada, e o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida para obter o composto do título (1,62 g, 16,2 mmol).

[000211] 1H-RMN (CDCl3) δ: 2,07-2,14 (m, 2H), 2,54 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,82-3,88 (m, 2H), 4,03 (s, 2H).

Exemplo de Produção 1B - Metanossulfonato de 2-Ciclopropiletila

[000212] Fórmula Química 9

[000213] A uma mistura de 2-ciclopropiletanol (5,35 g, 62,1 mmols) e diclorometano (107 mL) foram adicionados cloreto de metanossulfonila (5,29 mL, 68,3 mmols) e trietilamina (13,1 mL, 93,1 mmols) nesta ordem durante agitação sobre gelo, e a mistura resultante foi agitada durante 1 hora. Água e acetato de etila foram em seguida adicionados à mistura reacional. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi em seguida filtrada, e o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida para obter o composto do título (10,3 g, 62,7 mmols).

[000214] 1H-RMN (CDCI3) δ: 0,10-0,16 (m, 2H), 0,48-0,55 (m, 2H), 0,72-0,83 (m, 1H), 1,65 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 3,01 (s, 3H), 4,29 (t, J = 6,8 Hz, 2H).

Exemplo de Produção 1C (1) - 4-Bromo-3,5-dimetoxibenzamida

[000215] Fórmula Química 10

[000216] A uma mistura de ácido 4-bromo-3,5-dimetoxibenzóico (15 g, 57,6 mmols) e THF (200 mL) foram adicionados trietilamina (9,63 mL, 69,0 mmols) e cloroformiato de etila (5,79 mL, 60,6 mmols) durante agitação em gelo, e a mistura resultante foi agitada durante 20 minutos enquanto resfriando em gelo. Após adicionar 28% de amônia aquosa à mistura e agitar em temperatura ambiente durante 2 horas, acetato de etila foi também adicionado. Após então cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo obtido (sólido) foi lavado com dietil éter e coletado por filtração para obter o composto do título (11,8 g, 45,4 mmol).

[000217] 1H-RMN (CDCl3) δ: 3,95 (s, 6H), 7,00 (s, 2H).

Exemplo de Produção 1C (2) - 4-Bromo-3,5-dimetoxibenzonitrila

[000218] Fórmula Química 11

[000219] Após adicionar tolueno (20 mL), DMF (5 mL) e cloreto de tionila (3,36 mL, 46,1 mmols) a 4-bromo-3,5-dimetoxibenzamida (4 g, 15,4 mmols) nesta ordem, a mistura foi agitada a 50°C durante 1 hora. Água gelada foi adicionada à mistura em temperatura ambiente, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000220] O resíduo obtido (sólido) foi lavado com dietil éter/n-heptano (1/1) para obter o composto do título (2,08 g, 8,59 mmols).

[000221] 1H-RMN (CDCl3) δ: 3,93 (s, 6H), 6,82 (s, 2H).

Exemplo de Produção 1C (3) - Ácido (4-Ciano-2,6-dimetoxifenil)borônico

[000222] Fórmula Química 12

[000223] A uma mistura de 4-bromo-3,5-dimetoxibenzonitrila (2 g, 8,26 mmols) e THF (60 mL) foi adicionado n-butil lítio (1,58 M de solução em n-hexano: 5,48 mL, 8,68 mmols) ao mesmo tempo agitando-se a -100°C, e a agitação foi mantida a -100°C durante 30 minutos. Após então adicionar borato de trimetila (1,84 mL, 16,5 mmols), a agitação foi mantida durante 4 horas enquanto eleva-se a temperatura a -20°C. Uma solução aquosa saturada de cloreto de amônio e 1N de ácido clorídrico foi em seguida adicionada à mistura reacional, e acetato de etila foi adicionado.

[000224] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo obtido (sólido) foi lavado com n-heptano para obter o composto do título (1,43 g, 6,91 mmols).

[000225] 1H-RMN (CDCl3) δ: 3,96 (s, 6H), 6,89 (s, 2H), 7,01 (s, 2H).

Exemplo de Produção 2C (1) - 4-amino-3-metoxibenzoato de etila

[000226] Fórmula Química 13

[000227] A uma mistura de ácido 4-amino-3-metoxibenzóico (15 g, 89,7 mmols) e etanol (170 mL) foi adicionado ácido sulfúrico concentrado (5 mL), e a mistura foi aquecida ao refluxo durante 7 horas. A mistura reacional foi em seguida retornada à temperatura ambiente. O solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. Água, uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e acetato de etila foi adicionada ao resíduo.

[000228] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi em seguida filtrada, e o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida para obter o composto do título (17,8 g, 91,2 mmols).

[000229] 1H-RMN (CDCI3) δ: 1,37 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 3,90 (s, 3H), 4,32 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 6,66 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,54 (dd, J = 1,6, 8,0 Hz, 1H).

Exemplo de Produção 2C (2) - 4-amino-3-cloro-5-metoxibenzoato de etila

[000230] Fórmula Química 14

[000231] Após adicionar acetonitrila (170 mL) e N-clorosuccinimida (13,4 g, 100 mmols) a 4-amino-3-metoxibenzoato de etila (17,8 g, 91,2 mmols) nesta ordem, a mistura foi agitada a 60°C durante 2 horas. A mistura foi retornada à temperatura ambiente, e o solvente na mistura foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 8/1 em seguida 4/1) para obter o composto do título (15,8 g, 68,8 mmols).

[000232] 1H-RMN (CDCI3) δ: 1,37 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 3,91 (s, 3H), 4,32 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 4,58 (br,s, 2H), 7,36 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 1,8 Hz, 1H).

Exemplo de Produção 2C (3) - 3-cloro-4-iodo-5-metoxibenzoato de etila

[000233] Fórmula Química 15

[000234] A 4-amino-3-cloro-5-metoxibenzoato de etila (15,8 g, 68,8 mmols) foram adicionados acetonitrila (40 mL) e diiodometano (22,2 mL, 275 mmols) nesta ordem, e em seguida a mistura foi agitada a 70°C e nitrito de isoamila (13,9 mL, 103 mmols) foi adicionado gota a gota durante um período de 10 minutos. A mistura foi em seguida agitada a 70°C durante 40 minutos. Após retornar a mistura à temperatura ambiente, o solvente na mistura foi destilado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 8/1 em seguida 5/1) para obter o composto do título (15,6 g, 45,8 mmols).

[000235] 1H-RMN (CDCl3) δ: 1,40 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 3,95 (s, 3H), 4,38 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 7,30 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 1,6 Hz 1H).

Exemplo de Produção 2C (4) - (3-Cloro-4-iodo-5-metoxifenil)metanol

[000236] Fórmula Química 16

[000237] A uma mistura de 3-cloro-4-iodo-5-metoxibenzoato de etila (15,6 g, 45,8 mmols) e tolueno (150 mL) foi adicionado hidreto de di-isobutilalumínio (1,01 M de solução em tolueno: 95,2 mL, 96,2 mmols) ao mesmo tempo que agitando a -78°C, e a agitação foi mantida durante 3 horas ao mesmo tempo que elevando a temperatura a -30°C. Após então adicionar uma solução de sal de Rochelle (tetraidrato de (+)-tartarato de sódio e potássio) (77,6 g, 275 mmols) em água (400 mL) à mistura, a agitação foi mantida durante 5 horas em temperatura ambiente e acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e secada sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi em seguida filtrada, e o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida para obter o composto do título (13,7 g, 45,8 mmols).

[000238] 1H-RMN (CDCl3) δ: 3,90 (s, 3H), 4,66 (s, 2H), 6,72 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,09 (br., 1H).

Exemplo de Produção 2C (5) - 1-Cloro-2-iodo-3-metóxi-5-(metoximetil)benzeno

[000239] Fórmula Química 17

[000240] A uma mistura de (3-cloro-4-iodo-5-metoxifenil)metanol (13,7 g, 45,9 mmols) e NMP (90 mL) foram adicionados hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo: 2,02 g, 50,5 mmols) e iodometano (3,14 mL, 50,4 mmols), e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 4 horas. Água e dietil éter foram adicionados à mistura. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000241] O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 8/1 em seguida 4/1) para obter o composto do título (13,2 g, 42,2 mmols).

[000242] 1H-RMN (CDCl3) δ: 3,40 (s, 3H), 3,90 (s, 3H), 4,40 (s, 2H), 6,69 (s, 1H), 7,07 (s, 1H).

Exemplo de Produção 2C (6) - Ácido [2-Cloro-6-metóxi-4-(metoximetil)fenillborônico

[000243] Fórmula Química 18

[000244] A uma mistura de 1-cloro-2-iodo-3-metóxi-5-(metoximetil)benzeno (4,72 g, 15,1 mmols) e THF (150 mL) foi adicionado n-butil lítio (1,58 M de solução em n-hexano: 10,5 mL, 16,6 mmols) ao mesmo tempo que agitando a -100°C, e a agitação foi mantida durante 30 minutos de -100°C a -85°C. Após então adicionar borato de trimetila (4,21 mL, 37,8 mmols), a agitação foi mantida durante 4 horas ao mesmo tempo que vagarosamente elevando a temperatura a -20°C. A solução aquosa saturada de cloreto de amônio e ácido clorídrico 1N foram em seguida adicionados à mistura reacional, e acetato de etila foi também adicionado.

[000245] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo obtido (sólido) foi lavado com n-heptano para obter o composto do título (2,65 g, 11,5 mmols).

[000246] 1H-RMN (CDCI3) δ: 3,42 (s, 3H), 3,92 (s, 3H), 4,44 (s, 2H), 6,23 (s, 2H), 6,86 (s, 1H), 7,00 (br.s, 1H).

Exemplo 1 - N-Butil-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil1-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000247] Fórmula Química 19

(1a) 2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)benzaldeído

[000248] Fórmula Química 20

[000249] A uma mistura de 1,3-dimetóxi-5-metoximetil-2-bromobenzeno (Exemplo de Produção 8X do WO 04/037822) (33,8 g, 129 mmols) e tetra-hidrofurano (338 mL) foi adicionado n-butil lítio (2,77 M de solução em n-hexano: 55,9 mL, 155 mmols) a -78°C. Após agitar a mistura a -78°C durante 30 minutos, DMF (11 mL, 142 mmol) foi adicionado e a agitação foi mantida durante 2 horas ao mesmo tempo que aquecendo à temperatura ambiente. A solução aquosa saturada de cloreto de amônio e acetato de etila foi adicionada à mistura reacional.

[000250] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 2/1 em seguida 1/1) para obter o composto do título (16,3 g, 77,5 mmols).

[000251] 1H-RMN (CDCl3) δ: 3,45 (s, 3H), 3,91 (s, 6H), 4,46 (s, 2H), 6,56 (s, 2H), 10,48 (s, 1H).

(1b) 1 -[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]etanona

[000252] Fórmula Química 21

[000253] A uma mistura de 2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)benzaldeído (16,3 g, 77,5 mmols) e THF (200 mL) foi adicionado brometo de metilmagnésio (0,99 M solução em n-hexano: 95,9 mL, 93 mmols) a 0°C, e a mistura foi agitada durante 30 minutos. A solução aquosa saturada de cloreto de amônio e acetato de etila foi adicionada à mistura reacional a 0°C.

[000254] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. Diclorometano-acetonitrila (9:1, 160 mL), 4ÂMS (38 g), -4-óxido de 4-metilmorfolina (14,6 g, 121 mmols) e perrutenato de tetrapropilamônio (1,41 g, 4,02 mmols) foram adicionados ao resíduo obtido nesta ordem e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 13 horas. Acetato de etila foi adicionado à mistura, e cromatografia em coluna de sílica-gel foi realizada para filtração por sucção. O solvente no filtrado obtido foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 1/1 em seguida 1/2) para obter o composto do título (16,8 g, 75,1 mmols).

[000255] 1H-RMN (CDCl3) δ: 2,47 (s, 3H), 3,41 (s, 3H), 3,81 (s, 6H), 4,44 (s, 2H), 6,54 (s, 2H).

(1c) 3-{[4-(2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-2-tioxo-1,3-tiazol-3(2H)-il]-amino}-3-oxopropanoato de etila

[000256] Fórmula Química 22

[000257] Após adicionar tetra-hidrofurano (140 mL) e trietilamina (56,1 mL, 403 mmols) a 1-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]etanona (22,7 g, 102 mmols), ácido terc-butildimetilsilil trifluorometanossulfônico (33,1 mL, 145 mmols) foi vagarosamente adicionado gota a gota a 0°C e a mistura foi agitada durante 30 minutos. A esta mistura foi adicionado N-bromosuccinimida (18,8 g, 107 mmols) a 0°C, e a agitação foi mantida durante 1,5 hora. Uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio foi adicionada à mistura, e acetato de etila foi adicionado.

[000258] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000259] Fluoreto de tetrabutilamônio (1,0 M de solução em THF: 91,4 mL, 91,4 mmols) foi adicionado a uma mistura do resíduo obtido e tetra-hidrofurano (140 mL) a 0°C, e a mistura foi agitada durante 30 minutos. A solução aquosa saturada de cloreto de amônio e acetato de etila foi adicionada à mistura reacional a 0°C.

[000260] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 3/1 em seguida 2/1).

[000261] A uma mistura do resíduo obtido e água-etanol (2:1, 275 mL) foi adicionado hidrazinacarboditioato de potássio (Heterociclos, vol.23, No.12, 1985, 3099-3106) a 4°C, e a mistura foi agitada durante 20 horas. A mistura foi filtrada por sucção com um filtro de vidro, e o resíduo foi lavado com água e seca sob pressão reduzida. A uma mistura do resíduo obtido e diclorometano (400 mL) foi adicionado gota a gota cloreto de etilmalonila (8,86 mL, 66,6 mmol) a 0°C, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 30 minutos. O solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 1/1 em seguida 1/3) para obter o composto do título (11,7 g, 27,6 mmols).

[000262] 1H-RMN (CDCl3) δ: 1,24 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 3,33 (br.s, 2H), 3,44 (s, 3H), 3,82 (s, 6H), 4,14 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 4,45 (s, 2H), 4,49 (s, 1H), 6,57 (s, 2H), 9,67 (s, 1H).

(1d) 3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-hidroxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-carboxilato de etila

[000263] Fórmula Química 23

[000264] Acetona (235 mL) foi adicionado a 3-{[4-(2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-2-tioxo-1,3-tiazol-3(2H)-il]-amino}-3-oxopropanoato de etila (11,7 g, 27,6 mmols), e em seguida iodometano (17,1 mL, 276 mmols) foi adicionado gota a gota em temperatura ambiente e a mistura foi agitada durante 23 horas. O solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. Ao resíduo obtido foram adicionados terc-butanol (235 mL) e terc-butóxido de potássio nesta ordem, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 3,5 horas. Água foi adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida ácido clorídrico aquoso 2N foi adicionado até o pH da mistura alcançar aproximadamente 4. O sólido precipitado foi coletado por filtração, e o resíduo resultante foi lavado com água e seco sob pressão reduzida para obter o composto do título (6,3 g, 16 mmols).

[000265] 1H-RMN (CDCl3) δ: 1,41 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 3,44 (s, 3H), 3,75 (s, 6H), 4,39 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 4,49 (s, 2H), 6,62 (s, 2H), 6,72 (s, 1H).

(1e) 3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-carboxilato de etila

[000266] Fórmula Química 24

[000267] Após adicionar DMF (164 mL), carbonato de césio (26 g, 80,1 mmols) e iodometano (4,99 mL, 80,1 mmols) nesta ordem a 3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil1-6-hidroxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-carboxilato de etila (6,3 g, 16 mmols). a mistura foi agitada a 70°C durante 15 horas.

[000268] Água e acetato de etila foram em seguida adicionados à mistura reacional ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo. Após cuidadosamente agitar a mistura. a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada. e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 1/2) para obter o composto do título (2,8 g, 6,89 mmols).

[000269] 1H-RMN (CDCl3) δ: 1,38 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 3,47 (s, 3H), 3,77 (s, 6H), 3,96 (s, 3H), 4,33 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 4,51 (s, 2H), 6,65 (s, 2H), 6,71 (s, 1H).

(1f) Ácido 3-[2.6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-carboxílico

[000270] Fórmula Química 25

[000271] Após adicionar etanol (124 mL) e hidróxido de sódio aquoso 5N (11 mL, 55 mmols) nesta ordem a 3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-carboxilato de etila (2,8 g, 6,89 mmols), a mistura foi aquecida ao refluxo durante 2 horas. Ácido clorídrico aquoso 5N (11 mL) foi em seguida adicionado à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e o solvente na mistura foi destilado sob pressão reduzida. Água foi adicionada ao resíduo, e o sólido precipitado foi coletado por filtração, lavado com água e seco sob pressão reduzida para obter o composto do título (2,52 g, 6,66 mmols).

[000272] 1H-RMN (DMSO-d6) δ: 3,38 (s, 3H), 3,72 (s, 6H), 3,79 (s, 3H), 4,48 (s, 2H), 6,76 (s, 2H), 7,16 (s, 1H).

(1g) 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol

[000273] Fórmula Química 26

[000274] Após adicionar uma solução aquosa de ácido polifosfórico (2,6% em peso: 214 mL) ao ácido 3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-carboxílico (2,52 g, 6,66 mmols), a mistura foi aquecida a 120°C durante 3,5 horas. Água e acetato de etila foram em seguida adicionados à mistura reacional em temperatura ambiente.

[000275] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de (NH)sílica-gel (acetato de etila) para obter o composto do título (2,17 g, 6,47 mmols).

[000276] 1H-RMN (CDCI3) δ: 3,46 (s, 3H), 3,77 (s, 6H), 3,89 (s, 3H), 4,50 (s, 2H), 5,84 (s, 1H), 6,40 (s, 1H), 6,63 (s, 2H).

(1h) 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-7-nitrosopirazolo[5,1-b][1,3]tiazol

[000277] Fórmula Química 27

[000278] A mistura de água e ácido clorídrico 5N (1:4, 70 mL) foi adicionada a 3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol (2,17 g, 6,47 mmols), e em seguida nitrito de sódio (1,06 g, 15,3 mmols) foi adicionado a 0°C e a mistura foi agitada durante 1 hora. Hidróxido de sódio aquoso 5N e acetato de etila foram adicionados à mistura em temperatura ambiente. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi em seguida filtrada, e o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida para obter o composto do título (2,34 g, 6,44 mmols).

[000279] 1H-RMN (CDCl3) δ: 3,49 (s, 3H), 3,79 (s, 6H), 4,23 (s, 3H), 4,52 (s, 2H), 6,66 (s, 2H), 6,90 (s, 1H).

(1i) 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000280] Fórmula Química 28

[000281] Acetato de etila (109 mL) e 10% de pó de paládio-carbono (50% de umidade: 2,34 g, 2,2 mmols) foram adicionados nesta ordem a 3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-7-nitrosopirazolo[5,1 -b][1,3]tiazol (2,34 g, 6,44 mmols), e a mistura foi agitada durante 1 hora sob uma atmosfera de hidrogênio. . A mistura foi filtrada com Celita e o solvente no filtrado obtido foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de (NH)sílica-gel (acetato de etila) para obter o composto do título (1.43 g. 4.09 mmols).

[000282] 1H-RMN (CDCl3) δ: 2,60 (br,s, 2H), 3,46 (s, 3H), 3,77 (s, 6H), 3,89 (s, 3H), 4,50 (s, 2H), 6,40 (s, 1H), 6,64 (s, 2H).

(1j) {3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila

[000283] Fórmula Química 29

[000284] Diclorometano (50 mL), trietilamina (0,3 mL, 2,15 mmols) e dicarbonato de di-terc-butila (375 mg e 1,72 mmol) foram adicionados nesta ordem a 3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (500 mg, 1,43 mmol), e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 22 horas. O solvente na mistura foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 1/1 em seguida 1/2) para obter o composto do título (511 mg, 1,14 mmol).

[000285] 1H-RMN (CDCI3) δ: 1,52 (s, 9H), 3,46 (s, 3H), 3,75 (s, 6H), 3,88 (s, 3H), 4,49 (s, 2H), 6,08 (br.s, 1H), 6,43 (s, 1H), 6,63 (s, 2H).

(1k) N-Butil-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000286] Fórmula Química 30

[000287] Hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo: 8,1 mg, 0,203 mmol) foi adicionado a uma mistura de {3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1 -b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila (70 mg, 0,156 mmol) e DMF (6 mL) em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 30 minutos. A esta mistura foi adicionado gota a gota 1-iodobutano (0,024 mL, 0,203 mmol) em temperatura ambiente, e a agitação foi mantida durante 1 hora. Água e acetato de etila foram em seguida adicionados à mistura reacional ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo.

[000288] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000289] Diclorometano (5 mL) e ácido trifluoroacético (1 mL) foram adicionados nesta ordem ao resíduo, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. Após então adicionar metanol (6 mL), tetra-hidro-4H-piran-4-ona (0,03 mL, 0,312 mmol) e ácido acético (1 mL) nesta ordem ao resíduo em temperatura ambiente, α-picolinaborano (33,4 mg, 0,312 mmol) foi adicionado a 0°C e a mistura foi agitada durante 1 hora. A esta mistura foi adicionada uma solução aquosa de hidróxido de sódio 5N para aproximar o pH neutro da mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado.

[000290] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e seca sobre sulfato de magnésio anidro. . A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 2/3) para obter o composto do título (61 mg, 0,125 mmol).

[000291] 1H-RMN (CDCI3) δ: 0,86 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,22-1,42 (m, 4H), 1,56-1,68 (m, 2H), 1,77-1,88 (m, 2H), 2,97 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,00-3,11 (m, 1H), 3,33 (td, J = 1,6, 11,6 Hz, 2H), 3,47 (s, 3H), 3,79 (s, 6H), 3,86 (s, 3H), 3,92-4,03 (m, 2H), 4,50(s, 2H), 6,42 (s, 1H), 6,65(s, 2H).

Exemplo 2 - N-Butil-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil1-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000292] Fórmula Química 31

(2a) 6-oxo-5,6-Diidropirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-carboxilato de etila

[000293] Fórmula Química 32

[000294] A uma mistura de malonato de dietila (100 g. 624 mmols) e DMF (900 mL) foram adicionados carbonato de césio (488 g. 1.5 mol) e dissulfeto de carbono (45,3 mL, 749 mmols) ao mesmo tempo que agitando em temperatura ambiente, e em seguida a agitação foi mantida em temperatura ambiente durante 5 minutos. Após adicionar bromoacetaldeidodietilacetal (290 mL, 1,87 mol) gota a gota à mistura em temperatura ambiente. iodeto de sódio (9,34 g, 62,4 mmols) foi adicionado e a mistura foi agitada a 60°C durante 8 horas. Água e dietil éter foram adicionados à mistura em temperatura ambiente.

[000295] Após cuidadosamente agitar a mistura. a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada. e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000296] A uma mistura do resíduo obtido e etanol (900 mL) foi adicionado hidrato de hidrazina (60,7 mL, 1,25 mol) ao mesmo tempo que agitando no banho de água, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 13 horas. A mistura foi filtrada e o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000297] Ao resíduo obtido foram adicionados 1,4-dioxano (1L) e ácido clorídrico 5N (200 mL) nesta ordem, e a mistura foi agitada a 60°C durante 4 horas. A mistura foi retornada à temperatura ambiente. e o solvente na mistura foi destilado sob pressão reduzida. Água foi adicionada ao resíduo resultante. e a mistura foi filtrada para obter um resíduo filtrado e um filtrado. O resíduo foi lavado com água e em seguida seco sob pressão reduzida para obter o composto do título (42,5 g, 200 mmols).

[000298] Acetato de etila foi adicionado ao filtrado obtido. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. Dietil éter foi adicionado ao resíduo resultante, e o sólido precipitado foi filtrado e seco sob pressão reduzida para obter o composto do título (2,6 g, 12,3 mmols).

[000299] 1H-RMN (CDCl3) δ: 1,41 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 4,40 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 6,89 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 4,4 Hz, 1H).

(2b) 6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-carboxilato de etila

[000300] Fórmula Química 33

[000301] A uma mistura de 6-oxo-5,6-Diidropirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-carboxilato de etila (41,3 g, 195 mmols) e DMF (624 mL) foram adicionados carbonato de césio (127 g, 389 mmols) e iodometano (24,2 mL, 389 mmols) ao mesmo tempo que agitando em temperatura ambiente. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora, e em seguida água e o solvente misturado de acetato de etila/dietil éter (1/1) foram adicionados.

[000302] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 9/1 em seguida 1/2,3) para obter o composto do título (30,7 g, 136 mmol).

[000303] 1H-RMN (CDCl3) δ: 1,39 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 4,08 (s, 3H), 4,35 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 6,87 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 4,4 Hz, 1H).

(2c) 6-Metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol

[000304] Fórmula Química 34

[000305] A uma mistura de 6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-carboxilato de etila (30,7 g, 136 mmols) e etanol (407 mL) foi adicionado hidróxido de sódio aquoso 5N (136 mL) ao mesmo tempo que agitando a temperatura ambiente, e a mistura foi agitada a 80°C durante 2 horas. Uma quantidade adequada de ácido clorídrico 5N foi em seguida adicionada durante agitação em gelo para aproximar o pH neutro da mistura. Etanol na mistura foi destilado sob pressão reduzida. O sólido precipitado na mistura foi coletado por filtração e lavado com água.

[000306] Ao resíduo obtido foram adicionados 1,4-dioxano (400 mL) e ácido clorídrico concentrado (200 mL) nesta ordem, e a mistura foi agitada a 60°C durante 1,5 hora. 1,4-Dioxano na mistura foi destilado sob pressão reduzida. Uma quantidade adequada de hidróxido de sódio foi adicionada para um pH fracamente acídico da mistura durante agitação em gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado.

[000307] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 1/0 em seguida 2,3/1) para obter o composto do título (15,8 g, 103 mmols).

[000308] 1H-RMN (CDCl3) δ: 3,95 (s, 3H), 5,81 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 0,8, 4,4 Hz, 1H).

(2d) (6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)carbamato de terc-butila

[000309] Fórmula Química 35

[000310] A uma mistura de 6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol (15,8 g, 103 mmols) e ácido clorídrico 5N (350 mL) foi adicionada uma mistura de nitrito de sódio (10,6 g, 154 mmols) e água (115 mL) durante agitação em gelo. Após agitar a mistura em temperatura ambiente durante 0,5 hora, hidróxido de sódio aquoso 5N foi adicionado em uma quantidade apropriada para aproximar o pH neutro da mistura, durante agitação em gelo. O precipitado na mistura foi coletado por filtração e lavado com água.

[000311] Etanol (200 mL), THF (300 mL) e 10% de paládio-carbono (50% de umidade: 16 g) foram adicionados nesta ordem ao resíduo obtido, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 5 horas em uma pressão atmosférica sob uma atmosfera de hidrogênio. A mistura foi filtrada com Celita e o solvente no filtrado obtido foi destilado sob pressão reduzida.

[000312] A uma mistura do resíduo obtido e diclorometano (425 mL) foram adicionados dicarbonato de di-terc-butila (24,1 g, 111 mmols) e trietilamina (17,8 mL, 128 mmols) ao mesmo tempo que agitando em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 11 horas. O solvente na mistura foi destilado sob pressão reduzida, e em seguida o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 2/1) para obter o composto do título (16,5 g, 61,4 mmols).

[000313] 1H-RMN (CDCl3) δ: 1,51 (s, 9H), 3,98 (s, 3H), 6,12 (br.s, 1H), 6,54 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 4,4 Hz, 1H).

[000314] (2d-2) Método de síntese alternativa de (6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)carbamato de terc-butila

[000315] A uma mistura de ácido 6-metoxipirazolo[5,1-b]tiazol-7-carboxílico (300 mg, 1,51 mmol) e 1,4-dioxano (4 mL) foram adicionados trietilamina (0,215 mL, 1,54 mmol) e difenilfosforil azida (0,325 mL, 1,51 mmol) ao mesmo tempo que agitando em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada e aquecida ao refluxo durante 3 horas. Após retornar a mistura à temperatura ambiente, trietilamina (0,631 mL, 4,53 mmols) e terc-butanol (0,289 mL, 3,02 mmols) foram adicionados e a mistura foi agitada e aquecida ao refluxo durante 3 horas. Após retornar a mistura à temperatura ambiente, o solvente na mistura foi destilado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 1/4) para obter o composto do título (144 mg, 0,535 mmol).

[000316] 1H-RMN (CDCl3) δ: 1,51 (s, 9H), 3,98 (s, 3H), 6,12 (br.s, 1H), 6,54 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 4,4 Hz, 1H).

(2e) (3-bromo-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)carbamato de terc-butila

[000317] Fórmula Química 36

[000318] A uma mistura de (6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)carbamato de terc-butila (16,5 g, 61,4 mmols) e THF (410 mL) foi adicionado n-butil lítio (2,77 M de solução em n-hexano: 62,1 mL, 172 mmols) ao mesmo tempo que agitando a -78°C. Após também agitar a mistura a -78°C durante 40 minutos, 1,2-dibromotetrafluoroetano (10,2 mL, 86 mmols) foi adicionado e a agitação foi mantida durante 2 horas ao mesmo tempo que aquecendo à temperatura ambiente. A solução aquosa saturada de cloreto de amônio e acetato de etila foram adicionados à mistura, e em seguida ácido acético foi adicionado para um pH fracamente acídico da mistura. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. . A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 1/0 em seguida 4/1) para obter o composto do título (14,3 g, 41,1 mmols).

[000319] 1H-RMN (CDCI3) δ: 1,51 (s, 9H), 4,04 (s, 3H), 6,16 (br.s, 1H), 6,50 (s, 1H).

(2f) {3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila

[000320] Fórmula Química 37

[000321] A uma mistura de (3-bromo-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)carbamato de terc-butila (2,00 g, 5,74 mmols), DME (200 mL) e água (70 mL) foram adicionados ácido 2,6-dimetóxi-4-(etoximetil)fenilbórico (Exemplo de Produção 33 de WO 04/037822) (2,07 g, 8,64 mmols), carbonato de potássio (1,59 g, 11,5 mmols), trifenilfosfina (0,75 g, 2,87 mmols) e acetato de paládio (0,13 g, 0,57 mmol) nesta ordem, e a mistura foi agitada a 90°C (temperatura interna) durante 4 horas. Água foi adicionada à mistura reacional, e em seguida acetato de etila foi adicionado.

[000322] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 2/1 em seguida 1/1) para obter o composto do título (2,49 g, 5,37 mmol).

[000323] 1H-RMN (CDCl3) δ: 1,29 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,52 (s, 9H), 3,61 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,75 (s, 6H), 3,87 (s, 3H), 4,53 (s, 2H), 6,09 (br.s, 1H), 6,42 (s, 1H), 6,64 (s, 2H).

(2g) N-Butil-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000324] Fórmula Química 38

[000325] A uma mistura de {3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila (100 mg, 0,22 mmol) e DMF (5 mL) foi adicionado hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo: 11,2 mg, 0,28 mmol) em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 30 minutos. Após então adicionar 1-iodobutano (33,0 μL, 0,28 mmol) à mistura, a agitação foi mantida durante 30 minutos. Água foi adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado.

[000326] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000327] Diclorometano (5 mL) foi adicionado ao resíduo resultante, ácido trifluoroacético (1 mL) foi adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000328] THF (10 mL) foi em seguida adicionado ao resíduo resultante, tetra-hidro-4H-piran-4-ona (42,2 μL, 0,43 mmol), ácido acético (1 mL) e triacetoxiboroidreto de sódio (91,6 mg, 0,43 mmol) foram adicionados nesta ordem, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 14 horas.

[000329] A esta mistura foi adicionado hidróxido de sódio aquoso 5N para aproximar o pH neutro da mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado.

[000330] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 2/1 em seguida 1/1) para obter o composto do título (81,0 mg, 0,16 mmol).

[000331] 1H-RMN (CDCl3) δ: 0,87 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 1,30 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 1,24-1,40 (m, 4H), 1,52-1,67 (m, 2H), 1,78-1,87 (m, 2H), 2,97 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,99-3,11 (m, 1H), 3,38 (td, J = 1,6, 11,6 Hz, 2H), 3,63 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,79 (s, 6H), 3,86 (s, 3H), 3,94-4,03 (m, 2H), 4,55 (s, 2H), 6,41 (s, 1H), 6,66 (s, 2H).

Exemplo 3 - N-(2-Ciclopropiletil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000332] Fórmula Química 39

[000333] A uma mistura de {3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila (100 mg, 0,216 mmol) e DMSO (5 mL) foram adicionados hidróxido de sódio em pó (17,3 mg, 0,432 mmol) e metanossulfonato de 2-ciclopropiletila (70,9 mg, 0,432 mmol) nesta ordem em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 1 hora. Água foi adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. . A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000334] Diclorometano (5 mL) foi adicionado ao resíduo resultante, ácido trifluoroacético (1 mL) foi adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000335] THF (10 mL) foi em seguida adicionado ao resíduo resultante, tetra-hidro-4H-piran-4-ona (42,2 μL, 0,432 mmol), ácido acético (1 mL) e triacetoxiboroidreto de sódio (91,6 mg, 0,432 mmol) foram adicionados nesta ordem, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 4 horas.

[000336] A esta mistura foi adicionado hidróxido de sódio aquoso 5N para aproximar o pH neutro da mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado.

[000337] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000338] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 2/1 em seguida 1/1) para obter o composto do título (78,9 mg, 0,15 mmol).

[000339] 1H-RMN (CDCI3) δ: -0,02-0,06 (m, 2H), 0,34-0,44 (m, 2H), 0,62-0,76 (m, 1H), 1,32 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 1,24-1,37 (m, 2H), 1,541,70 (m, 2H), 1,80-1,90 (m, 2H), 3,10 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 3,02-3,16 (m, 1H), 3,40 (td, J = 1,6, 11,6 Hz, 2H), 3,64 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,81 (s, 6H), 3,87 (s, 3H), 3,96-4,06 (m, 2H), 4,57 (s, 2H), 6,43 (s, 1H), 6,68 (s, 2H).

Exemplo 4 - N-(Ciclobutilmetil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000340] Fórmula Química 40

[000341] A uma mistura de {3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila (100 mg, 0,216 mmol) e DMSO (0,5 mL) foram adicionados hidróxido de sódio em pó (17,3 mg, 0,43 mmol) e (bromometil)ciclobutano (36,4 μL, 0,324 mmol) nesta ordem em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 1 hora. A solução aquosa saturada de cloreto de amônio e acetato de etila foi adicionada à mistura reacional. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e o solvente foi destilado com fluxo de ar de nitrogênio.

[000342] Diclorometano (0,6 mL) foi adicionado ao resíduo resultante, ácido trifluoroacético (0,3 mL) foi adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente na mistura foi em seguida destilado com um fluxo de ar de nitrogênio. THF (1 mL) foi adicionado ao resíduo resultante, tetra-hidro-4H-piran-4-ona (29,8 μL, 0,324 mmol) e triacetoxiboroidreto de sódio (68,7 mg, 0,324 mmol) foram adicionados nesta ordem, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. Uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio foi adicionada à mistura, e acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e o solvente foi destilado com um fluxo de ar de nitrogênio. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 19/1 em seguida 2,3/1) para obter o composto do título (98,9 mg, 0,192 mmol).

[000343] 1H-RMN (CDCl3) δ: 1,30 (t, J = 4,0 Hz, 3H), 1,50-1,64 (m, 4H), 1,66-1,89 (m, 6H), 2,28 - 2,39 (m, 1H), 2,96-3,06 (m, 1H), 2,99 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 3,37 (dt, J = 2,0, 12,0 Hz, 2H), 3,62 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,77 (s, 6H), 3,85 (s, 3H), 3,93-4,00 (m, 2H), 4,54 (s, 2H), 6,40 (s, 1H), 6,65 (s, 2H).

Exemplo 5 - N-(Ciclopropilmetil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil1-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000344] Fórmula Química 41

[000345] A uma mistura de {3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila (120 mg. 0,259 mmol) e DMSO (0,8 mL) foram adicionados hidróxido de sódio em pó (20,8 mg, 0,516 mmol) e brometo de ciclopropilmetila (37,7 μL, 0,389 mmol) em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 1 hora. A solução aquosa saturada de cloreto de amônio e acetato de etila foi adicionada à mistura reacional. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e o solvente foi destilado com um fluxo de ar de nitrogênio.

[000346] Diclorometano (0,6 mL) foi adicionado ao resíduo resultante, ácido trifluoroacético (0,3 mL) foi também adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente na mistura foi em seguida destilado com um fluxo de ar de nitrogênio. THF (1 mL) foi em seguida adicionado ao resíduo resultante, Di-hidro-2H-piran-3(4H)-ona (38,9 mg, 0,389 mmol) e triacetoxiboroidreto de sódio (82,4 mg, 0,389 mmol) foram adicionados nesta ordem, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. Uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio foi adicionada à mistura, e acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e o solvente foi destilado com um fluxo de ar de nitrogênio. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 19/1 em seguida 2,3/1) para obter o composto do título (93,8 mg, 0,187 mmol).

[000347] 1H-RMN (CDCI3) δ: -0,02-0,05 (m, 2H), 0,28-0,37 (m, 2H), 0,77-0,91 (m, 1H), 1,23-1,33 (m, 1H), 1,30 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,331,46 (m, 1H), 1,58-1,72 (m, 1H), 2,06 (br.d, J = 12,0 Hz, 1H), 2,82-2,94 (m, 2H), 3,09-3,24 (m, 3H), 3,62 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,73-3,89 (m, 1H), 3,78 (s, 6H), 3,86 (s, 3H), 4,08 (br,d, J = 9,2 Hz, 1H), 4,54 (s, 2H), 6,42 (s, 1H), 6,66 (s, 2H).

Exemplo 6 - 3-[4-(Etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000348] Fórmula Química 42

[000349] A uma mistura de {3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila (120 mg, 0,259 mmol) e DMSO (0,8 mL) foram adicionados hidróxido de sódio em pó (20,8 mg, 0,516 mmol) e 1-iodopropano (37,9 μL, 0,389 mmol) nesta ordem em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 1 hora. A solução aquosa saturada de cloreto de amônio e acetato de etila foi adicionada à mistura reacional. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e o solvente foi destilado com um fluxo de ar de nitrogênio.

[000350] Diclorometano (0,6 mL) foi adicionado ao resíduo resultante, ácido trifluoroacético (0,3 mL) foi adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente na mistura foi em seguida destilado com um fluxo de ar de nitrogênio. THF (1 mL) foi em seguida adicionado ao resíduo resultante, Diidro-2H-piran-3(4H)-ona (38,9 mg, 0,389 mmol) e triacetoxiboroidreto de sódio (82,4 mg, 0,389 mmol) foram adicionados nesta ordem, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. Uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio foi adicionada à mistura, e acetato de etila foi também adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e o solvente foi destilado sob uma corrente de nitrogênio. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 19/1 em seguida 2,3/1) para obter o composto do título (83,6 mg, 0,171 mmol).

[000351] 1H-RMN (CDCl3) δ: 0,86 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,26-1,57 (m, 3H), 1,30 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,59-1,68 (m, 2H), 2,02-2,10 (m, 1H), 2,94 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 3,04 (tt, J = 4,0, 10,8 Hz, 1H), 3,14-3,24 (m, 2H), 3,62 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 3,72-3,88 (m, 1H), 3,79 (s, 6H), 3,85 (s, 3H), 4,04-4,11 (m, 1H), 4,54 (s, 2H), 6,42 (s, 1H), 6,66 (s, 2H).

Exemplo 7 - N-(Ciclobutilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil1-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000352] Fórmula Química 43

(7a) (3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila

[000353] Fórmula Química 44

[000354] A uma mistura de (3-bromo-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)carbamato de terc-butila (998 mg, 2,87 mmols). DME (107 mL) e água (36 mL) foram adicionados ácido 2.6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenilbórico (Exemplo de Produção 29 de WO 04/03782) (973 mg, 4,31 mmols). carbonato de potássio (791 mg, 5,74 mmols), trifenilfosfina (374 mg, 1,43 mmol) e acetato de paládio (64,5 mg, 0,285 mmol) nesta ordem, e a mistura foi agitada a 90°C (temperatura interna) durante 1,5 hora. Água foi adicionada à mistura. e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura. a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000355] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 2/1 em seguida 1/1) para obter o composto do título (1,22 g, 2,71 mmols).

[000356] 1H-RMN (CDCl3) δ: 1,52 (s, 9H), 3,46 (s, 3H), 3,75 (s, 6H), 3,87 (s, 3H), 4,49 (s, 2H), 6,09 (br.s, 1H), 6,43 (s, 1H), 6,63 (s, 2H).

(7b) N-(Ciclobutilmetil)-3-[2.6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000357] Fórmula Química 45

[000358] Hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo: 34.5 mg. 0.863 mmol) foi adicionado a uma mistura de {3-[2.6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila (300 mg, 0,664 mmol) e DMF (6 mL) em temperatura ambiente. e a mistura foi agitada durante 30 minutos. A esta mistura foi adicionado (bromometil)ciclobutano (97,0 μL, 0,863 mmol), e a agitação foi mantida durante 2 horas e 40 minutos. Água foi adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo. e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura. a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000359] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000360] Diclorometano (10 mL) foi em seguida adicionado ao resíduo resultante, ácido trifluoroacético (4 mL) foi adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora e 20 minutos. O solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000361] THF (30 mL) foi em seguida adicionado ao resíduo resultante, tetra-hidro-4H-piran-4-ona (123 μL, 1,33 mmol) e triacetoxiboroidreto de sódio (282 mg, 1,33 mmol) foram adicionados nesta ordem, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas e 50 minutos.

[000362] Uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio foi adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e acetato de etila foi adicionado.

[000363] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000364] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 9/1 em seguida 3/2) para obter o composto do título (237 mg, 0,472 mmol).

[000365] 1H-RMN (CDCI3) δ: 1,50-1,64 (m, 4H), 1,68-1,89 (m, 6H), 2,29-2,39 (m, 1H), 2,99 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 2,97-3,05 (m, 1H), 3,333,41 (m, 2H), 3,47 (s, 3H), 3,78 (s, 6H), 3,85 (s, 3H), 3,93-4,01 (m, 2H), 4,50 (s, 2H), 6,41 (s, 1H), 6,64 (s, 2H).

Exemplo 8 - 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-pentil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000366] Fórmula Química 46

[000367] Hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo: 11,6 mg, 0,289 mmol) foi adicionado a uma mistura de {3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila (100 mg, 0,222 mmol) e DMF (2 mL) em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 30 minutos. Após então adicionar 1-bromopentano (35,8 μL, 0,289 mmol) à mistura, a agitação foi mantida durante 30 minutos. Água foi adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000368] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000369] Diclorometano (5 mL) foi em seguida adicionado ao resíduo resultante, ácido trifluoroacético (2 mL) foi adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000370] THF (10 mL) foi em seguida adicionado ao resíduo resultante, tetra-hidro-4H-piran-4-ona (40,8 μL, 0,444 mmol) e triacetoxiboroidreto de sódio (94,1 mg, 0,444 mmol) foram adicionados nesta ordem, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. Uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio foi adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e acetato de etila foi adicionado.

[000371] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000372] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 9/1 em seguida 3/2) para obter o composto do título (83,3 mg, 0,17 mmol).

[000373] 1H-RMN (CDCl3) δ: 0,85 (t, J = 6,8 Hz, 3H), 1,22-1,32 (m, 4H), 1,32-1,41 (m, 2H), 1,53-1,65 (m, 2H), 1,78-1,86 (m, 2H), 2,97 (dd, J = 7,2, 7,6 Hz, 2H), 3,00-3,10 (m, 1H), 3,33-3,43 (m, 2H), 3,47 (s, 3H), 3,79 (s, 6H), 3,86 (s, 3H), 3,94-4,02 (m, 2H), 4,50 (s, 2H), 6,42 (s, 1H), 6,65 (s, 2H).

Exemplo 9 - N-(Ciclopropilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000374] Fórmula Química 47

[000375] Hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo: 9,28 mg, 0,232 mmol) foi adicionado a uma mistura de {3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila (80 mg, 0,178 mmol) e DMF (5 mL) em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 30 minutos. Após então adicionar bromometilciclopropano (22,6 μL, 0,232 mmol) à mistura, a agitação foi mantida durante 30 minutos. Água foi adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000376] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000377] Diclorometano (5 mL) foi adicionado ao resíduo resultante, ácido trifluoroacético (1 mL) foi adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000378] Após então adicionar metanol (6 mL), e em seguida tetra-hidro-4H-piran-4-ona (34,8 μL, 0,356 mmol), ácido acético (1 mL) e α-picolinaborano (38,1 mg, 0,356 mmol) nesta ordem ao resíduo obtido, a mistura foi agitada durante 1 hora em temperatura ambiente. A esta mistura foi adicionado hidróxido de sódio aquoso 5N para aproximar o pH neutro da mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 1/1) para obter o composto do título (62,4 mg, 0,128 mmol).

[000379] 1H-RMN (CDCI3) δ: -0,02-0,06 (m, 2H), 0,29-0,40 (m, 2H), 0,78-0,92 (m, 1H), 1,50-1,66 (m, 2H), 1,78-1,88 (m, 2H), 2,88 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 3,10-3,22 (m, 1H), 3,39 (td, J = 1,6, 11,6 Hz, 2H), 3,47 (s, 3H), 3,79 (s, 6H), 3,87 (s, 3H), 3,92-4,03 (m, 2H), 4,50 (s, 2H), 6,41 (s, 1H), 6,65 (s, 2H).

Exemplo 10 - 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000380] Fórmula Química 48

[000381] Hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo: 6,73 mg, 0,168 mmol) foi adicionado a uma mistura de {3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila (58 mg, 0,13 mmol) e DMF (4 mL) em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 30 minutos. Após então adicionar 1-iodopropano (16,4 μL, 0,168 mmol) à mistura, a agitação foi mantida durante 30 minutos. Água foi adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi também adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000382] Diclorometano (5 mL) foi adicionado ao resíduo resultante, ácido trifluoroacético (1 mL) foi também adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000383] Após então adicionar metanol (6 mL), e em seguida tetra-hidro-4H-piran-4-ona (25,4 μL, 0,26 mmol), ácido acético (1 mL) e α-picolinaborano (27,8 mg, 0,26 mmol) nesta ordem ao resíduo obtido, a mistura foi agitada durante 1 hora em temperatura ambiente. A esta mistura foi adicionado hidróxido de sódio aquoso 5N para aproximar o pH neutro da mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000384] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 1/1) para obter o composto do título (50,0 mg, 0,105 mmol).

[000385] 1H-RMN (CDCl3) δ: 0,87 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,32-1,45 (m, 2H), 1,53-1,66 (m, 2H), 1,78-1,88 (m, 2H), 2,90-2,99 (m, 2H), 3,00-3,12 (m, 1H), 3,38 (td, J = 2,0, 12,0 Hz, 2H), 3,47 (s, 3H), 3,79 (s, 6H), 3,86 (s, 3H), 3,94-4,03 (m, 2H), 4,50 (s, 2H), 6,42 (s, 1H), 6,65 (s, 2H).

Exemplo 11 - N-(Ciclopropilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000386] Fórmula Química 49

[000387] A uma mistura de {3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila (120 mg, 0,267 mmol) e DMSO (0,8 mL) foram adicionados hidróxido de sódio em pó (21,4 mg, 0,534 mmol) e brometo de ciclopropilmetila (38,8 μL, 0,401 mmol) em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 1 hora. A solução aquosa saturada de cloreto de amônio e acetato de etila foi adicionada à mistura reacional. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e o solvente foi destilado com um fluxo de ar de nitrogênio.

[000388] Diclorometano (0,6 mL) foi adicionado ao resíduo resultante, ácido trifluoroacético (0,3 mL) foi adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente na mistura foi em seguida destilado com um fluxo de ar de nitrogênio. THF (1 mL) foi adicionado ao resíduo resultante, diidro-2H-piran-3(4H)-ona (40,1 mg, 0,401 mmol) e sodium triacetoxiboroidreto (84,9 mg, 0,401 mmol) foram adicionados nesta ordem, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. Uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio foi adicionada à mistura, e acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e o solvente foi destilado sob uma corrente de nitrogênio. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 19/1 em seguida 2,3/1) para obter o composto do título (96,1 mg, 0,197 mmol).

[000389] 1H-RMN (CDCI3) δ: -0,02-0,05 (m, 2H), 0,30-0,37 (m, 2H), 0,77-0,88 (m, 1H), 1,34-1,46 (m, 1H), 1,60-1,69 (m, 2H), 2,02-2,10 (m, 1H), 2,86 (dd, J = 6,4, 12,8 Hz, 1H), 2,90 (dd, J = 6,4, 12,8 Hz, 1H), 3,08-3,24 (m, 3H), 3,47 (s, 3H), 3,75-3,88 (m, 1H), 3,78 (s, 6H), 3,86 (s, 3H), 4,05-4,11 (m, 1H), 4,50 (s, 2H), 6,43 (s, 1H), 6,65 (s, 2H).

Exemplo 12 - 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil1-6-metóxi-N-[(2-metilciclopropil)metil1-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000390] Fórmula Química 50

(12a) 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil1-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000391] Fórmula Química 51

[000392] A uma mistura de {3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil1-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila (1,37 g, 3,05 mmols) e acetato de etila (10 mL) foi adicionada uma solução de HCl 4M em acetato de etila (20 mL), e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 3 horas. O solvente na mistura foi destilado sob pressão reduzida, e em seguida acetato de etila foi adicionado ao resíduo obtido e a solução aquosa saturada de carbonato de sódio foi adicionada. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000393] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. Ao resíduo foi adicionado uma mistura de n-heptano e acetato de etila, e o sólido precipitado foi coletado por filtração e seco sob pressão reduzida para obter o composto do título (836,6 mg, 2,39 mmols).

[000394] 1H-RMN (CDCl3) δ: 2,60 (br.s, 2H), 3,46 (s, 3H), 3,77 (s, 6H), 3,89 (s, 3H), 4,50 (s, 2H), 6,40 (s, 1H), 6,64 (s, 2H).

(12b) N-{3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}-2-metilciclopropanocarboxamida

[000395] Fórmula Química 52

[000396] A uma mistura de WSCD (104 mg, 0,67 mmol) e DMF (5 mL) foi adicionado 1-hidroxibenzotriazol (90,4 mg, 0,67 mmol), e em seguida 3-(2,6-dimetóxi-4-metoximetilfenil)-6-metoxipirazolo[5,1 -b]tiazol-7-ilamina (200 mg, 0,57 mmol) e ácido 2-metilciclopropanocarboxílico (60,8 μL, 0,62 mmol) foram adicionados nesta ordem e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 14 horas. Água foi adicionada à mistura reacional, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000397] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em (NH)sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 1/1) para obter o composto do título (215,9 mg, 0,50 mmol).

[000398] 1H-RMN (CDCl3) δ: 0,65-0,68 (m, 1H), 1,14 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 1,21-1,31 (m, 2H), 1,46-1,52 (m, 1H), 3,46 (s, 3H), 3,75 (s, 6H), 3,90 (s, 3H), 4,49 (s, 2H), 6,43 (s, 1H), 6,62 (s, 2H), 7,14 (br.s, 1H).

(12c) 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-[(2-metilciclopropil)metil]-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000399] Fórmula Química 53

[000400] A uma mistura de N-{3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}-2-metilciclopropanocarboxamida (100 mg, 0,23 mmol) e THF (2 mL) foi adicionado uma solução de borano em tetra-hidrofurano (0,99 M, 609 μL, 0,60 mmol), e a mistura foi agitada a 55°C durante 2 horas. Água foi adicionada à mistura reacional, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000401] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. A uma mistura do resíduo obtido e THF (1,5 mL) foram adicionados ácido trifluoroacético (150 μL), e em seguida tetra-hidro-4H-piran-4-ona (32 μL, 0,35 mmol) e triacetoxiboroidreto de sódio (73,8 mg, 0,35 mmol) nesta ordem, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. Água foi adicionada à mistura reacional, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000402] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de (NH)sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 4/1). As frações contendo a substância alvo foram coletadas, o solvente foi destilado sob pressão reduzida, e em seguida uma mistura de n-heptano e di-isopropil éter foram adicionados ao resíduo resultante. O sólido precipitado foi coletado por filtração, e o resíduo obtido foi lavado com uma pequena quantidade de n-heptano e em seguida seco sob pressão reduzida para obter o composto do título (43,7 mg, 0,09 mmol).

[000403] 1H-RMN (CDCl3) δ: 0,06-0,10 (m, 1H), 0,15-0,19 (m, 1H), 0,26-0,36 (m, 1H), 0,47-0,58 (m, 1H), 0,79 (d, J = 5,6 Hz, 3H), 1,501,68 (m, 2H), 1,78-1,89 (m, 2H), 2,68 (dd, J = 8,0, 12,0 Hz, 1H), 3,043,18 (m, 2H), 3,33-3,46 (m, 2H), 3,48 (s, 3H), 3,79 (s, 6H), 3,87 (s, 3H), 3,94-4,03 (m, 2H), 4,52 (s, 2H), 6,41 (s, 1H), 6,66 (s, 2H).

Exemplo 13 - 3-[2-Cloro-6-metóxi-4-(metoximetil)fenil1-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000404] Fórmula Química 54

(13a) (3-[2-cloro-6-metóxi-4-(metoximetil)fenil1-6-metóxi-pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila

[000405] Fórmula Química 55

[000406] A uma mistura de (3-bromo-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)carbamato de terc-butila (500 mg, 1,44 mmol). tolueno (8 mL) e etanol (4 mL) foram adicionados ácido [2-cloro-6-metóxi-4-(metoximetil)fenil1borônico (498 mg, 2,16 mmols), uma solução aquosa de carbonato de sódio 1M (2,88 mL, 2,88 mmol) e tetracis(trifenilfosfina)paládio(0) (166 mg, 0,14 mmol) nesta ordem. e a mistura foi agitada a 110°C durante 6 horas. Água foi adicionada à mistura, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000407] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de (NH)sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 3/1 em seguida 2/1) para obter o composto do título (349 mg, 0,77 mmol).

[000408] 1H-RMN (CDCl3) δ: 1,52 (s, 9H), 3,46 (s, 3H), 3,76 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 4,48 (s, 2H), 6,13 (br.s, 1H), 6,48 (s, 1H), 6,91 (s, 1H), 7,08 (s, 1H).

(13b) 3-[2-Cloro-6-metóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000409] Fórmula Química 56

[000410] A uma mistura de {3-[2-cloro-6-metóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il}carbamato de terc-butila (148 mg, 0,33 mmol) e DMF (4 mL) foi adicionado hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo: 17 mg, 0,42 mmol) em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 10 minutos. Após então adicionar 1-iodobutano (41,3 μL, 0,42 mmol) à mistura, a agitação foi mantida durante 2 horas. Água foi adicionada à mistura reacional, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000411] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000412] Diclorometano (2 mL) foi adicionado ao resíduo resultante, ácido trifluoroacético (2 mL) foi adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000413] THF (4 mL) foi em seguida adicionado ao resíduo resultante, tetra-hidro-4H-piran-4-ona (59,9 μL, 0,65 mmol) e triacetoxiboroidreto de sódio (138 mg, 0,65 mmol) foram adicionados nesta ordem, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 14 horas. Uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio foi adicionada à mistura reacional, e acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em (NH)sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 4/1 em seguida 3/1) para obter o composto do título (94,8 mg, 0,20 mmol).

[000414] 1H-RMN (CDCl3) δ: 0,88 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,32-1,44 (m, 2H), 1,52-1,66 (m, 2H), 1,79-1,86 (m, 2H), 2,92-2,97 (m, 2H), 3,02-3,11 (m, 1H), 3,34-3,41 (m, 2H), 3,47 (s, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,85 (s, 3H), 3,96-4,02 (m, 2H), 4,49 (s, 2H), 6,46 (s, 1H), 6,93 (br.s, 1H), 7,09 (br.s, 1H).

Exemplo 14 - 4-{7-[(Ciclopropilmetil)(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)amino1-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-3-il}-3,5-dimetoxibenzonitrila

[000415] Fórmula Química 57

(14a) [3-(4-ciano-2,6-dimetoxifenil)-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il]carbamato de terc-butila

[000416] Fórmula Química 58

[000417] A uma mistura de (3-bromo-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)carbamato de terc-butila (461 mg, 1,33 mmol), DME (49 mL) e água (16 mL) foram adicionados ácido (4-ciano-2,6-dimetoxifenil)borônico (412 mg, 2,00 mmols), carbonato de potássio (366 mg, 2,66 mmols), trifenilfosfina (174 mg, 0,659 mmol) e acetato de paládio (29,8 mg, 0,132 mmol) nesta ordem, e a mistura foi agitada a 90°C (temperatura interna) durante 2 horas. Água foi adicionada à mistura, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 2/1 em seguida 1/1) para obter o composto do título (296 mg, 0,688 mmol).

[000418] 1H-RMN (CDCI3) δ: 1,52 (s, 9H), 3,78 (s, 6H), 3,87 (s, 3H), 6,11 (br.s, 1H), 6,50 (s, 1H), 6,91 (s, 2H).

(14b) 4-{7-[(Ciclopropilmetil)(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)amino1-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-3-il}-3,5-dimetoxibenzonitrila

[000419] Fórmula Química 59

[000420] A uma mistura de [3-(4-ciano-2,6-dimetoxifenil)-6-metoxipirazolo[5,1-6][1,3]tiazol-7-il]carbamato de terc-butila (66 mg, 0,153 mmol) e DMF (4 mL) foram adicionados hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo: 7,96 mg, 0,199 mmol) e brometo de ciclopropilmetila (19,3 μL, 0,199 mmol) nesta ordem em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 1 hora. Água foi adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000421] Diclorometano (6 mL) foi adicionado ao resíduo, ácido trifluoroacético (1 mL) foi adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000422] Após então adicionar metanol (6 mL), e em seguida tetra-hidrofuran-3-carboxaldeído (55,4 μL, 0,306 mmol), ácido acético (1 mL) e α-picolinaborano (32,7 mg, 0,306 mmol) nesta ordem ao resíduo obtido, a mistura foi agitada durante 1 hora em temperatura ambiente. A esta mistura foi adicionado hidróxido de sódio aquoso 5N para aproximar o pH neutro da mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 2/1 em seguida 1/1) para obter o composto do título (53,9 mg, 0,115 mmol).

[000423] 1H-RMN (CDCI3) δ: 0,01-0,10 (m, 2H), 0,36-0,46 (m, 2H), 0,83-0,96 (m, 1H), 1,58-1,71 (m, 1H), 1,90-2,03 (m, 1H), 2,26-2,40 (m, 1H), 2,81 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,95 (dd, J = 8,4, 12,0 Hz, 1H), 3,07 (dd, J = 6,8, 12,0 Hz, 1H), 3,56 (dd, J = 6,0, 8,4 Hz, 1H), 3,65-3,74 (m, 1H), 3,81 (s, 6H), 3,86 (s, 3H), 3,76-3,88 (m, 2H), 6,49 (s, 1H), 6,92 (s, 2H).

Exemplo 15 - 4-{7-[(Ciclopropilmetil)(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)amino1-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-3-il}-3,5-dimetoxibenzonitrila

[000424] Fórmula Química 60

[000425] A uma mistura de [3-(4-ciano-2,6-dimetoxifenil)-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il]carbamato de terc-butila (90 mg, 0,21 mmol) e DMSO (0,8 mL) foram adicionados hidróxido de sódio em pó (16,8 mg, 0,42 mmol) e brometo de ciclopropilmetila (30,7 μL, 0,317 mmol) em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 1 hora. Uma solução aquosa saturada de cloreto de amônio e acetato de etila foi em seguida adicionada à mistura reacional. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e o solvente foi destilado com um fluxo de ar de nitrogênio.

[000426] Diclorometano (0,6 mL) foi adicionado ao resíduo resultante, ácido trifluoroacético (0,2 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. O solvente na mistura foi em seguida destilado com um fluxo de ar de nitrogênio. THF (1 mL) foi em seguida adicionado ao resíduo resultante, tetra-hidro-2H-piran-4-carbaldeído (36 mg, 0,315 mmol) e triacetoxiboroidreto de sódio (66,8 mg, 0,315 mmol) foram adicionados nesta ordem, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. Uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio foi adicionada à mistura, e acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e o solvente foi destilado com um fluxo de ar de nitrogênio. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 1/0 em seguida 3/2) para obter o composto do título (71,3 mg, 0,148 mmol).

[000427] 1H-RMN (CDCl3) δ: 0,00-0,06 (m, 2H), 0,36-0,44 (m, 2H), 0,84-0,94 (m, 1H), 1,21-1,34 (m, 2H), 1,54-1,67 (m, 1H), 1,71-1,80 (m, 2H), 2,80 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 2,89 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 3,33 (dt, J = 1,6, 11,6 Hz, 2H), 3,82 (s, 6H), 3,86 (s, 3H), 3,90-3,97 (m, 2H), 6,49 (s, 1H), 6,93 (s, 2H).

Exemplo 16 - N-(Ciclopropilmetil)-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-3-(2,4,6-trimetoxifenil)-pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000428] Fórmula Química 61

(16a) terc-Butil(3.5-dimetoxifenóxi)dimetilsilano

[000429] Fórmula Química 62

[000430] A uma mistura de 3,5-dimetoxifenol (3,00 g, 19,5 mmols) e DMF (45 mL) foram adicionados imidazol (2,66 g, 39,0 mmols) e terc-butildimetilclorosilano (2,94 g, 19,5 mmols) nesta ordem. e a mistura foi agitada durante 19,5 horas em temperatura ambiente. Água foi adicionada à mistura reacional. e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura. a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada. e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 9/1) para obter o composto do título (4,98 g, 18,6 mmols).

[000431] 1H-RMN (CDCl3) δ: 0,21 (s, 6H), 0,98 (s, 9H), 3,75 (s, 6H), 6,02 (d, J = 2,4 Hz, 2H), 6,11 (t, J = 2,4 Hz, 1H).

(16b) Ácido (4-{[terc-Butil(dimetil)silinoxi)-2,6-dimetoxifenil)borônico

[000432] Fórmula Química 63

[000433] A uma mistura de terc-butil(3,5-dimetoxifenóxi)dimetilsilano (4,97 g, 18,5 mmols) e THF (50,0 mL) foram adicionados N,N,N',N'-tetrametiletilenodiamina (3,35 mL, 22,2 mmols) e n-butil lítio (2,77 M solução em n-hexano: 8,01 mL, 22,2 mmols) nesta ordem em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 1 hora em temperatura ambiente. A mistura foi em seguida resfriada a -78°C (temperatura interna), e em seguida borato de trimetila (2,48 mL, 22,2 mmols) foi adicionado e a temperatura foi elevada à temperatura ambiente durante agitação. Uma solução aquosa saturada de cloreto de amônio foi adicionado à mistura reacional e em seguida acetato de etila foi adicionado, ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 4/1) para obter o composto do título (3,50 g, 11,2 mmols).

[000434] 1H-RMN (CDCI3) δ: 0,25 (s, 6H), 1,00 (s, 9H), 3,86 (s, 6H), 6,11 (s, 2H), 7,04 (s, 2H).

(16c) [3-(4-hidróxi-2,6-dimetoxifenil)-6-metoxipirazolo[5,1 -b][1,3]tiazol-7-il)]carbamato de terc-butila

[000435] Fórmula Química 64

[000436] A uma mistura de (3-bromo-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)carbamato de terc-butila (400 mg, 1,15 mmol), 1,4-dioxano (26,7 mL) e água (13,3 mL) foram adicionados ácido (4-{[terc-butil(dimetil)silil]oxi}-2,6-dimetoxifenil)borônico (647 mg, 2,07 mmols), carbonato de potássio (318 mg, 2,29 mmols) e tetracis(trifenilfosfina)paládio(0) (133 mg, 0,115 mmol) nesta ordem, e a mistura foi agitada durante 1 hora a 110°C (temperatura interna). Água foi adicionada à mistura, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 1/1) para obter o composto do título (224 mg, 0,53 mmol).

[000437] 1H-RMN (CDCI3) δ: 1,54 (s, 9H), 3,61 (s, 6H), 3,99 (s, 3H), 5,93 (s, 2H), 6,10 (br.s, 1H), 6,38 (s, 1H).

(16d) [6-metóxi-3-(2,4,6-trimetoxifenil)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)]carbamato de terc-butila

[000438] Fórmula Química 65

[000439] A uma mistura de [3-(4-hidróxi-2,6-dimetoxifenil)-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)]carbamato de terc-butila (224 mg, 0,531 mmol) e DMF (5,00 mL) foram adicionados carbonato de potássio (117 mg, 0,85 mmol) e iodometano (52,9 μL, 0,85 mmol) nesta ordem em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 14,5 horas. Água foi adicionada à mistura reacional, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi em seguida filtrada, e o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida para obter o composto do título (231 mg, 0,53 mmol).

[000440] 1H-RMN (CDCI3) δ: 1,52 (s, 9H), 3,73 (s, 6H), 3,86 (s, 3H), 3,89 (s, 3H), 6,10 (br.s, 1H), 6,20 (s, 2H), 6,40 (s, 1H).

(16e) N-(Ciclopropilmetil)-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-3-(2,4,6-trimetoxifenil)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000441] Fórmula Química 66

[000442] A uma mistura de [6-metóxi-3-(2,4,6-trimetoxifenil)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)]carbamato de terc-butila (112 mg, 0,256 mmol) e DMF (2,5 mL) foi adicionado hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo: 16,0 mg, 0,333 mmol) em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 30 minutos. Após adicionar brometo de ciclopropilmetila (32,3 μL, 0,333 mmol) à mistura, a agitação foi mantida durante 40 minutos. Água foi adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000443] Diclorometano (2,5 mL) foi adicionado ao resíduo resultante, ácido trifluoroacético (1 mL) foi adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora e 20 minutos. O solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000444] THF (4 mL) foi em seguida adicionado ao resíduo resultante, tetra-hidro-2H-piran-4-carbaldeído (29,4 mg, 0,257 mmol) e triacetoxiboroidreto de sódio (54,5 mg, 0,257 mmol) foram adicionados nesta ordem, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. Uma solução aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio foi adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro.

[000445] A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 9/1 em seguida 3/2) para obter o composto do título (75,0 mg, 0,16 mmol).

[000446] 1H-RMN (CDCl3) δ: 0,00-0,06 (m, 2H), 0,35-0,43 (m, 2H), 0,87-0,97 (m, 1H), 1,20-1,36 (m, 2H), 1,55-1,69 (m, 1H), 1,71-1,81 (m, 2H), 2,80 (dd, J = 6,4 Hz, 2H), 2,89 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 3,27-3,39 (m, 2H), 3,76 (s, 6H), 3,87 (s, 3H), 3,88 (s, 3H), 3,88-3,98 (m, 2H), 6,23 (s, 2H), 6,37 (s, 1H).

Exemplo 17 - 3-{4-[(Ciclobutilóxi)metil]-2,6-dimetoxifenil}-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000447] Fórmula Química 67

(17a) (4-Bromo-3,5-dimetoxifenil)metanol

[000448] Fórmula Química 68

[000449] A uma mistura de ácido 4-bromo-3,5-dimetoxibenzóico (50,0 g, 192 mmols) e THF (1 L) foi adicionado sulfeto de borano-metila (27,1 mL, 286 mmol) ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e a mistura foi aquecida ao refluxo durante 1 hora. Água foi vagarosamente adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida o solvente na mistura foi destilado sob pressão reduzida. Água e acetato de etila foram adicionados ao resíduo. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi em seguida filtrada, e o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida para obter o composto do título (47,3 g, 191 mmols).

[000450] 1H-RMN (CDCl3) δ: 1,80 (s, 1H), 3,91 (s, 6H), 4,68 (s, 2H), 6,60 (s, 2H).

(17b) 2-Bromo-5-(clorometil)-1,3-dimetoxibenzeno

[000451] Fórmula Química 69

[000452] A uma mistura de (4-bromo-3,5-dimetoxifenil)metanol (10,0 g, 40,6 mmols) e diclorometano (100 mL) foram adicionados trietilamina (12,4 mL, 89,3 mmols) e cloreto de metanossulfonila (3,46 mL, 44,7 mmols) nesta ordem ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 14 horas. Água foi adicionada à mistura, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 4/1) para obter o composto do título (2,47 g, 9,30 mmol).

[000453] 1H-RMN (CDCI3) δ: 3,92 (s, 6H), 4,55 (s, 2H), 6,60 (s, 2H).

(17c) 2-Bromo-5-[(ciclobutilóxi)metil1-1,3-dimetoxibenzeno

[000454] Fórmula Química 70

[000455] A uma mistura de álcool de ciclobutila (4,16 g, 57,7 mmols) e DMF (30 mL) foi adicionado hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo: 2,31 g, 57,7 mmols) ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. A esta mistura foi vagarosamente adicionada gota a gota uma mistura de 2-bromo-5-(clorometil)-1,3-dimetoxibenzeno (2,47 g, 9,3 mmols) e DMF (30 mL), e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. Água foi adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 4/1) para obter o composto do título (2,39 g, 7,94 mmols).

[000456] 1H-RMN (CDCI3) δ: 1,43-1,60 (m, 1H), 1,65-1,80 (m, 1H), 1,92-2,08 (m, 2H), 2,15-2,28 (m, 2H), 3,90 (s, 6H), 3,96-4,07 (m, 1H), 4,38 (s, 2H), 6,56 (s, 2H).

(17d) Ácido {4-[(Ciclobutilóxi)metil]-2,6-dimetoxifenil}borônico

[000457] Fórmula Química 71

[000458] A uma mistura de 2-bromo-5-[(ciclobutilóxi)metil]-1,3-dimetoxibenzeno (2,39 g, 7,94 mmols) e THF (20 mL) foi adicionado n-butil lítio (2,73 M solução em n-hexano: 3,49 mL, 9,53 mmols) a -78°C (temperatura interna), e a mistura foi agitada durante 1 hora. Após então adicionar borato de trimetila (1,07 mL, 9,53 mmols) à mistura, a temperatura foi vagarosamente elevada à temperatura ambiente durante agitação. Uma solução aquosa saturada de cloreto de amônio foi adicionado à mistura reacional ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. Heptano (30 mL) foi adicionado ao resíduo, o sólido precipitado foi coletado por filtração e seco sob pressão reduzida para obter o composto do título (905 mg, 3,40 mmols).

[000459] 1H-RMN (CDCI3) δ: 1,45-1,60 (m, 1H), 1,67-1,80 (m, 1H), 1,94-2,08 (m, 2H), 2,18-2,30 (m, 2H), 3,92 (s, 6H), 3,96-4,07 (m, 1H), 4,41 (s, 2H), 6,61 (s, 2H), 7,18 (s, 2H).

(17e) (3-{4-[(ciclobutilóxi)metil]-2,6-dimetoxifenil}-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)carbamato de terc-butila

[000460] Fórmula Química 72

[000461] A uma mistura de (3-bromo-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)carbamato de terc-butila (987 mg, 2,83 mmols), DME (80 mL) e água (28 mL) foram adicionados ácido {4-[(ciclobutilóxi)metil]-2,6-dimetoxifenil}borônico (904 mg, 3,4 mmols), carbonato de potássio (785 mg, 5,68 mmols), trifenilfosfina (370 mg, 1,42 mmol) e acetato de paládio (63,7 mg, 0,282 mmol) nesta ordem, e a mistura foi agitada a 90°C (temperatura interna) durante 3 horas. Água foi adicionada à mistura reacional, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 2/1) para obter o composto do título (1,24 g, 2,53 mmol).

[000462] 1H-RMN (CDCI3) δ: 1,52 (s, 9H), 1,46-1,62 (m, 1H), 1,66-1,81 (m, 1H), 1,96-2,10 (m, 2H), 2,20-2,32 (m, 2H), 3,75 (s, 6H), 3,87 (s, 3H), 4,02-4,13 (m, 1H), 4,43 (s, 2H), 6,08 (br.s, 1H), 6,41 (s, 1H), 6,62 (s, 2H).

(17f) 3-(4-[(Ciclobutilóxi)metil1-2.6-dimetoxifenil)-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000463] Fórmula Química 73

[000464] A uma mistura de (3-{4-[(ciclobutilóxi)metil]-2,6-dimetoxifenil}-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-il)carbamato de terc-butila (123 mg, 0,251 mmol) e DMF (6 mL) foi adicionado hidreto de sódio (60% de dispersão em óleo: 13,0 mg, 0,326 mmol) em temperatura ambiente, e a mistura foi agitada durante 30 minutos. Após então adicionar 1-iodopropano (35,4 μL, 0,326 mmol) à mistura, a agitação foi mantida durante 30 minutos. Água foi adicionada à mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado. Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000465] Diclorometano (6 mL) foi adicionado ao resíduo resultante, ácido trifluoroacético (1 mL) foi adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. O solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida.

[000466] THF (10 mL) foi em seguida adicionado ao resíduo resultante, tetra-hidro-4H-piran-4-ona (49 μL, 0,501 mmol), ácido acético (1 mL) e triacetoxiboroidreto de sódio (106 mg, 0,501 mmol) foram adicionados nesta ordem, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 14 horas. A esta mistura foi adicionado hidróxido de sódio aquoso 5N para aproximar o pH neutro da mistura ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo, e em seguida acetato de etila foi adicionado.

[000467] Após cuidadosamente agitar a mistura, a camada orgânica foi separada e a camada orgânica foi lavada com salmoura e seca sobre sulfato de magnésio anidro. A mistura foi filtrada, e em seguida o solvente no filtrado foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel (mistura de n-heptano e acetato de etila: n-heptano/acetato de etila = 1/1) para obter o composto do título (98,0 mg, 0,19 mmol).

[000468] 1H-RMN (CDCI3) δ: 0,87 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,32-1,44 (m, 2H), 1,46-1,66 (m, 3H), 1,69-1,87 (m, 3H), 1,98-2,11 (m, 2H), 2,21-2,33 (m, 2H), 2,94 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,00-3,10 (m, 1H), 3,38 (td, J = 1,6, 11,6 Hz, 2H), 3,79 (s, 6H), 3,85 (s, 3H), 3,94-4,02 (m, 2H), 4,03-4,13 (m, 1H), 4,44 (s, 2H), 6,40 (s, 1H), 6,64 (s, 2H).

Exemplo 1x - bromidrato de N-Butil-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000469] A uma mistura de N-butil-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (6 mg) e metanol (1 mL) foi adicionado ácido bromídrico (8,84M, 2,0 μL), e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora e o solvente foi destilado sob pressão reduzida. Metanol (1 mL) foi adicionado ao resíduo e o solvente foi destilado sob pressão reduzida. Acetato de etila (1 mL) foi adicionado ao resíduo resultante e o solvente foi destilado sob pressão reduzida e seco para obter o composto do título (6,0 mg).

Exemplo 2x - bromidrato de N-Butil-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil1-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000470] A N-butil-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (1,02 g) foi adicionada acetona (2 mL) aquecida por água quente, em seguida ácido bromídrico (8,84M, 240 μL) foi adicionado, e a mistura foi agitada. O solvente na mistura foi parcialmente removido soprando-se corrente de nitrogênio, e a mistura foi também agitada.

[000471] A mistura foi deixada descansar em temperatura ambiente sob pressão reduzida durante 13 horas para remover o solvente no resíduo. O resíduo resultante foi finamente triturado, acetona (2 mL) e heptano (2 mL) foram adicionados, e a mistura foi agitada sob sonicação (um sonicador tipo banheira) durante 1 minuto. O vaso foi protegido da luz e firmemente selado, e a mistura foi agitada durante um dia.

[000472] O precipitado na mistura foi coletado por filtração por sucção, e deixado descansar em temperatura ambiente sob pressão reduzida para remover o solvente no resíduo. Ao resíduo foi adicionado acetona (20 mL), e heptano (3 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada durante vários minutos. Heptano (5 mL) foi adicionado, o vaso foi protegido da luz, e a mistura foi agitada durante um dia. O precipitado na mistura foi coletado por filtração por sucção, e deixado descansar em temperatura ambiente sob pressão reduzida para remover o solvente no resíduo e o composto do título (701,17 mg) foi obtido.

Exemplo 2y - Fosfato de N-Butil-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000473] A N-butil-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (2,99 g) foram adicionados etanol (7 mL) aquecido por água quente e ácido fosfórico (14,6M, 410 μL). Heptano foi adicionado por 1 mL e o volume totalizado de 30 mL. A mistura foi agitada durante 1 hora sob sombreado.

[000474] O precipitado na mistura foi coletado por filtração por sucção, deixado descansar em temperatura ambiente sob pressão reduzida durante 1 semana para remover o solvente no resíduo e seco aquecendo-se a 60°C durante 1,5 hora para obter o composto do título (4,10 g).

Exemplo 3x - Fosfato de N-(2-Ciclopropiletil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000475] A uma mistura de N-(2-ciclopropiletil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (757,0 mg), etanol (10 mL) e acetato de etila (5 mL) foi adicionado ácido fosfórico (14,6M, 101 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 5 minutos e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seca para obter o composto do título (856,0 mg).

Exemplo 3y - Metanossulfonato de N-(2-Ciclopropiletil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000476] A uma mistura de N-(2-ciclopropiletil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (16,2 mg) e acetato de etila (0,5 mL) foi adicionado ácido metanossulfônico (2,05 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (19,2 mg).

Exemplo 3z - Sulfato de N-(2-Ciclopropiletil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000477] A uma mistura de N-(2-ciclopropiletil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (59,6 mg), etanol (2 mL) e acetato de etila (1 mL) foi adicionado ácido sulfúrico concentrado (6,18 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (66,3 mg).

Exemplo 4x - Metanossulfonato de N-(Ciclobutilmetil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000478] A uma mistura de N-(ciclobutilmetil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (13,4 mg) e acetato de etila (0,5 mL) foi adicionado ácido metanossulfônico (1,69 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (15,9 mg).

Exemplo 5x - Sulfato de N-(Ciclopropilmetil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000479] A uma mistura de N-(ciclopropilmetil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (42.0 mg), etanol (2 mL) e acetato de etila (1 mL) foi adicionado ácido sulfúrico concentrado (4,46 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (45,7 mg).

Exemplo 6x - Sulfato de 3-[4-(Etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6- metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7- amina

[000480] A uma mistura de 3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)pirazolo[5,1-ib][1,3]tiazol-7-amina (8,1 mg) e etanol (2 mL) foi adicionado ácido sulfúrico concentrado (0,88 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (9,8 mg).

Exemplo 7x - Sulfato de N-(Ciclobutilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000481] A uma mistura de N-(ciclobutilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (99,0 mg), etanol (2 mL) e acetato de etila (1 mL) foi adicionado ácido sulfúrico concentrado (10,5 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas e o solvente foi destilado sob pressão reduzida e seco para obter o composto do título (120,4 mg).

Exemplo 7y - Metanossulfonato de N-(Ciclobutilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000482] A uma mistura de N-(ciclobutilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (26,2 mg) e acetato de etila (1,0 mL) foi adicionado ácido metanossulfônico (3,40 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (31,2 mg).

Exemplo 8x - Metanossulfonato de 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-pentil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000483] A uma mistura de 3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-pentil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (12,2 mg) e acetato de etila (0,5 mL) foi adicionado ácido metanossulfônico (1,58 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (14,5 mg).

Exemplo 9x - Cloridrato de N-(Ciclopropilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000484] A uma mistura de N-(ciclopropilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (8,38 mg) e acetato de etila (0,5 mL) foi adicionado ácido clorídrico em dietil éter (1M, 17,2 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1,5 hora e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (9,22 mg).

Exemplo 10x - Cloridrato de 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000485] A uma mistura de 3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (6,98 mg) e acetato de etila (0,5 mL) foi adicionado ácido clorídrico em dietil éter (1M, 14,7 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1,5 hora e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (7,84 mg).

Exemplo 11x - Fosfato de N-(Ciclopropilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil1-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000486] A uma mistura de N-(ciclopropilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil1-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (30,0 mg) e acetato de etila (0,6 mL) foi adicionado ácido fosfórico (14,6M, 4,00 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 5 minutos e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (35,8 mg).

Exemplo 12x - Metanossulfonato de 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil1-6-metóxi-N-[(2-metilciclopropil)metil1-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000487] A uma mistura de 3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil1-6-metóxi-N-[(2-metilciclopropil)metil1-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (14,6 mg) e acetato de etila (0,5 mL) foi adicionado ácido metanossulfônico (1,90 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (17,4 mg).

Exemplo 13x - Metanossulfonato de 3-[2-Cloro-6-metóxi-4-(metoximetil)fenil1-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000488] A uma mistura de 3-[2-cloro-6-metóxi-4-(metoximetil)fenil1-6- metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7- amina (10,7 mg) e acetato de etila (0,5 mL) foi adicionado ácido metanossulfônico (1,45 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (12,8 mg).

Example 14x - bromidrato de 4-{7-[(Ciclopropilmetil)(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)amino1-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-3-il}-3,5-dimetoxibenzonitrila

[000489] A uma mistura de 4-{7-[(ciclopropilmetil)(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)amino]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-3-il}-3,5-dimetoxibenzonitrila (8,0 mg) e metanol (1 mL) foi adicionado ácido bromídrico (8,84M, 2,4 μL), e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora e o solvente foi destilado sob pressão reduzida. Metanol (1 mL) foi adicionado ao resíduo e o solvente foi destilado sob pressão reduzida. Acetato de etila (1 mL) foi adicionado ao resíduo resultante e o solvente foi destilado sob pressão reduzida e seco para obter o composto do título (8.0 mg).

Exemplo 15x - Cloridrato de 4-{7-[(Ciclopropilmetil)(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)amino1-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-3-il}-3.5-dimetoxibenzonitrila

[000490] A uma mistura de 4-{7-[(ciclopropilmetil)(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)amino1-6-metoxipirazolo[5,1 ]-b][1,3]tiazol-3-il}-3,5-dimetoxibenzonitrila (26.4 mg) e acetato de etila (0,5 mL) foi adicionado ácido clorídrico em dietil éter (1M, 54,7 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (28.4 mg).

Exemplo 16x - Cloridrato de N-(Ciclopropilmetil)-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-3-(2,4,6-trimetoxifenil)-pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000491] A uma mistura de N-(Ciclopropilmetil)-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-3-(2.4.6-trimetoxifenil)-pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (6,51 mg) e acetato de etila (0,5 mL) foi adicionado ácido clorídrico em dietil éter (1M, 13,4 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1,5 hora e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (7,41 mg).

Exemplo 17x - Fosfato de 3-{4-[(Ciclobutilóxi)metil]-2,6-dimetoxifenil}-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina

[000492] A uma mistura de 3-{4-[(ciclobutilóxi)metil]-2,6-dimetoxifenil}-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina (30,0 mg) e acetato de etila (0,6 mL) foi adicionado ácido fosfórico (14,6M, 4,00 μL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 5 minutos e o solvente foi removido soprando-se corrente de nitrogênio e seco para obter o composto do título (36,1 mg).

Exemplo de Teste Farmacológico

[000493] As capacidades de ligação dos compostos da invenção para o receptor de CRF1 (CRFR1) foram avaliadas. Os métodos de teste e os resultados foram como descritos abaixo.

Exemplo de Teste 1 <Teste de ligação de CRFR1> (1) Preparação de células de expressão de CRFR1

[000494] A fração de membrana de células humanas de expressão elevada de CRFR1 foi empregada como o material para um experimento de ligação de CRFR1. As células de expressão de CRFR1 foram preparadas da seguinte maneira. O gene de CRFR1 de tamanho natural foi obtido por PCR empregando-se biblioteca de cDNA de cérebro humano (QuickClone® Clontech). O fragmento de DNA obtido foi inserido em um vetor de clonagem e a sequência de nucleotídeo foi confirmada. cDNA tendo a própria sequência de nucleotídeo foi ligado a um vetor de expressão (pcDNA3.1®, Invitrogen). O vetor de expressão de CRFR1 foi introduzido na célula HEK293, e as células resistentes que proliferaram no meio de cultura contendo G418 (1 mg/ml) foram clonadas pelo método de diluição limitante. Dentre as células clonadas, as células tendo elevada afinidade de ligação entre a fração de membrana por unidade de proteína e sauvagina foram selecionadas de acordo com o seguinte experimento de ligação. As células selecionadas foram empregadas para os experimentos.

(2) Preparação da fração de membrana

[000495] As células clonadas obtidas em (1) foram coletadas e suspensas em tampão de membrana resfriado com gelo (50 mM de Tris-HCl, 5 mM de MgCl2, 2 mM de EGTA, 1 mM de DTT, coquetel de inibidor de protease (COMPLETE®, Roche Diagnostics) pH 7,3), e em seguida as células foram rompidas com Polytron (KINEMATICA) ao mesmo tempo que resfriando sobre gelo (nível 5, 10 segundos, 2-5 vezes, resfriamento com gelo) e em seguida centrifugadas (2.000 rpm, 5 minutos, 4°C), após o qual o sobrenadante foi coletado. O tampão de membrana foi adicionado ao precipitado, e a mistura foi submetida a tratamento por Polytron (mesmas condições como acima) e centrifugada (mesmas condições como acima), e o sobrenadante obtido foi coletado e combinado com o sobrenadante anterior. Este foi centrifugado (13.000 rpm (18.000 X g), 30 minutos, 4°C) para preparar membranas celulares. As membranas celulares precipitadas foram suspensas no tampão de membrana e rompidas com um Polytron (nível 5, 10 segundos, 3-5 vezes, resfriamento com gelo) para preparar uma suspensão dispersa. O ensaio de proteína foi realizado.

[000496] O seguinte método (1) ou (2) foi realizado para o uso como a fração de membrana celular.

(1) A suspensão dispersa acima foi diluída com o tampão de membrana contendo 0,1% de BSA para uma concentração de proteína de 200 pg/ml, para o uso como a fração de membrana celular.
(2) A suspensão dispersa acima foi congelada para preservação, e se necessário, descongelada, redispersa e diluída para o uso como a fração de membrana celular.

(3) Experimento de Ligação:

[000497] Um experimento de competição de ligação com CRF foi conduzido por método de SPA (GE Healthcare) empregando-se um prato de 96 cavidades. Uma mistura de 5 μg da proteína de fração de membrana celular, 1 mg de contas de SPA e 100 pM de 125I-CRF (Perkin Elmer) foi deixada descansar em temperatura ambiente durante pelo menos 2 horas na presença de um composto teste, e a radioatividade de cada cavidade após a centrifugação (1.200 rpm (260 x g), 5 minutos, temperatura ambiente) foi avaliada com um TopCount (Marca registrada; Perkin Elmer).

(4) Cálculo da capacidade de ligação

[000498] A radioatividade com a adição de um excesso de 4.000 vezes de sauvagina não-radioativa como a ligação não-específica foi subtraída de cada valor, e o valor resultante foi expresso como uma porcentagem (% de controle), com 100% como a radioatividade sem a adição do composto teste (controle). O valor de IC50 foi calculado de uma curva de inibição de ligação representada com a concentração de composto teste no eixo horizontal e % (% de controle) no eixo vertical.

[000499] Como mostrado pela seguinte tabela, os compostos da invenção exibem excelente capacidade de ligação para CRFR1.

Exemplo Teste 2 Avaliação do efeito ansiolítico por camundongos em teste de caixa luz/escuro em camundongos (1) Procedimento do Teste:

[000500] O teste de caixa luz/escuro em camundongos foi realizado de acordo com um método modificado de Belzung C., Misslin R., Vogel E. entre outros (Referência; Efeitos comportamentais do agonista parcial receptor de benzodiazepina RO16-6028 em camundongos, Psychopharmacology, 97, 388-391, 1989). O instrumento de teste usado foi uma caixa luz/escuro compreendendo uma caixa acrílica preta tampada (caixa escura; 15 x 10 x 20 cm), uma caixa acrílica branca da mesmampada (caixa clara; 15 x 20 x 20 cm) e um túnel acrílico escuro (10 x 7 x 4,5 cm) o qual conecta a caixa preta e a caixa clara e permite um camundongo se mover livremente para frente e para trás entre a caixa escura e a caixa clara. Neste instrumento de teste, entretanto, um polímero acrílico transparente foi usado pelo lado frontal (20 x 20 cm) e lado traseiro (20 x 20 cm) da caixa clara para permitir a observação do comportamento. Após ajustar a iluminação para que a intensidade de luz do piso da caixa clara fosse 150 Lux, camundongos Balb/c machos de 5 semanas de idade (adquiridos de Nihon Charles River) foram introduzidos na caixa escura no início do teste. Para o teste, o composto testado foi suspenso em 5% de dimetilsulfóxido, 5% de Cremopor EL e 90% de salina fisiológica e administrado oralmente aos animais de teste uma hora antes do início do teste.

(2) Cálculo do efeito ansiolítico:

[000501] O comportamento dos camundongos foi observado durante 5 minutos após o início do teste. O tempo gasto na caixa clara foi avaliado como um índice do efeito ansiolítico, com "gasto na caixa clara" definido como o estado no qual todos os membros dos camundongos estavam sobre o piso da caixa clara. A dose mínima que significantemente prolongou o tempo gasto na caixa clara em comparação com aquele do grupo tratado com veículo foi determinada como a dose mínima eficaz (MED). A significância estatística entre o grupo tratado com veículo e os grupos tratados por composto teste foi analisada por análise unidirecional de variância seguido por comparação múltipla de Dunnett quando as doses múltiplas foram fixadas para o mesmo teste, e pelo teste U de Mann-Whitney apenas quando uma dose foi fixada.

[000502] Os compostos dos Exemplos 1, 2, 3, 4, 5, 9, 10, 13 e 14 exibiram excelentes efeitos ansiolíticos no teste de caixa clara/escura em camundongos, com os efeitos estatisticamente significantes sendo observados em 30 mg/kg (administração oral).

Aplicabilidade Industrial

[000503] De acordo com a invenção é possível fornecer composições farmacêuticas compreendendo compostos de 3-fenilpirazolo[5,1-õ]tiazol ou sais dos mesmos, os quais exibem antagonismo de receptor de CRF. Os compostos ou sais dos mesmos de acordo com a invenção possuem excelente antagonismo de receptor de CRF, e atividade farmacológica suficiente, segurança e propriedades farmacocinéticas como fármacos.

[000504] As composições farmacêuticas da invenção são úteis para o tratamento ou prevenção de doenças associadas com receptores de CRF e/ou CRF, e são particularmente úteis como agentes terapêuticos ou profiláticos para depressão, sintomas depressivos, ansiedade, síndrome do intestino irritável, distúrbios do sono, insônia, dependência de álcool, sintomas de abstinência de álcool, dependência de droga, sintomas de abstinência de droga, disfunção gastrointestinal relacionada ao estresse, anorexia nervosa, distúrbios de alimentação, íleo pós-operatório, neuropatia isquêmica, apoplexia, neuropatia excitotóxica, convulsão, epilepsia, hipertensão, esquizofrenia, distúrbio bipolar ou demência.

Claims

Composto, caracterizado por ser representado pela seguinte fórmula (I) ou um sal do mesmo
na qual:
R1 representa a fórmula -A11-A12;
R2 representa tetra-hidrofurilmetila, tetra-hidropiranilmetila ou tetra-hidropiranila;
A11 representa uma ligação única, metileno ou 1,2-etileno;
A12 representa C1-6 alquila ou C3-6 cicloalquila, ou C3-6 cicloalquila tendo metila;
R3 representa metóxi, ciano, ciclobutiloximetila, metoximetila ou etoximetila; e
R4 representa metóxi ou cloro.
Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R2 ser tetra-hidropiran-4-ila, tetra-hidropiran-3-ila, (tetra-hidropiran-4-il)metila ou (tetra-hidrofuran-3-il)metila.
Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por R1 ser n-propila, n-butila, n-pentila, ciclopropilmetila, ciclobutilmetila, 2-(ciclopropil)etila ou (2-metilciclopropil)metila.
Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser N-Butil-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.
Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser N-Butil-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.
Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser N-(2-Ciclopropiletil)-3-[4-(etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.
Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser 3-[4-(Etoximetil)-2,6-dimetoxifenil]-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-3-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.
Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser N-(Ciclobutilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.
Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser N-(Ciclopropilmetil)-3-[2,6-dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.
Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser 3-[2,6-Dimetóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.
Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser 3-[2-Cloro-6-metóxi-4-(metoximetil)fenil]-6-metóxi-N-propil-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.
Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser 4-{7-[(Ciclopropilmetil)(tetra-hidrofuran-3-ilmetil)amino]-6-metoxipirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-3-il}-3,5-dimetoxibenzonitrila ou sal do mesmo.
Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser N-(Ciclopropilmetil)-6-metóxi-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilmetil)-3-(2,4,6-trimetoxifenil)-pirazolo[5,1-b][1,3]tiazol-7-amina ou sal do mesmo.
Composição farmacêutica, caracterizada por compreender
um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 13, ou sal do mesmo como um ingrediente ativo, e
um ou mais aditivos.
Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 14, caracterizada por o um ou mais aditivos ser selecionado do grupo de excipientes, aglutinantes, lubrificantes, desintegrantes, agentes de coloração, neutralizantes de sabor, emulsificantes, tensoativos, auxiliares de dissolução, agentes de suspensão, agentes de isotonização, agentes de tamponamento, agentes antissépticos, antioxidantes, estabilizantes e aceleradores de absorção.
Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 14 ou 15, caracterizada por ser para uso no tratamento ou prevenção de depressão, sintomas depressivos, ansiedade, síndrome do intestino irritável, distúrbios do sono, insônia, dependência de álcool, sintomas de abstinência de álcool, dependência de droga, sintomas de abstinência de droga, disfunção gastrointestinal relacionada ao estresse, anorexia nervosa, distúrbios de alimentação, íleo pós-operatório, neuropatia isquêmica, apoplexia, neuropatia excitotóxica, convulsão, epilepsia, hipertensão, esquizofrenia, distúrbio bipolar ou demência.
Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 16, caracterizada por ser para uso no tratamento ou prevenção de depressão, sintomas depressivos, ansiedade ou síndrome do intestino irritável.
Composto ou sal do mesmo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizado por ser para uso no tratamento ou prevenção de depressão, sintomas depressivos, ansiedade, síndrome do intestino irritável, distúrbios do sono, insônia, dependência de álcool, sintomas de abstinência de álcool, dependência de droga, sintomas de abstinência de droga, disfunção gastrointestinal relacionada ao estresse, anorexia nervosa, distúrbios de alimentação, íleo pós-operatório, neuropatia isquêmica, apoplexia, neuropatia excitotóxica, convulsão, epilepsia, hipertensão, esquizofrenia, distúrbio bipolar ou demência.
Composto ou sal do mesmo de acordo com a reivindicação 18, caracterizado por ser para uso no tratamento ou prevenção de depressão, sintomas depressivos, ansiedade ou síndrome do intestino irritável.