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BRPI0818718B1 - processo de preparo de uma composição de vacina compreendendo antígeno e adjuvante na forma de látex inverso de homopolímero do ácido acrílico - Google Patents

processo de preparo de uma composição de vacina compreendendo antígeno e adjuvante na forma de látex inverso de homopolímero do ácido acrílico Download PDF

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BRPI0818718B1
BRPI0818718B1 BRPI0818718A BRPI0818718A BRPI0818718B1 BR PI0818718 B1 BRPI0818718 B1 BR PI0818718B1 BR PI0818718 A BRPI0818718 A BR PI0818718A BR PI0818718 A BRPI0818718 A BR PI0818718A BR PI0818718 B1 BRPI0818718 B1 BR PI0818718B1
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BR
Brazil
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preparing
antigen
vaccine
oil
adjuvant
Prior art date
Application number
BRPI0818718A
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Inventor
Gaucheron Jérôme
Dupuis Laurent
Braun Olivier
Original Assignee
Soc Dexploitation De Produits Pour Les Industries Chimiques Seppic
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Soc Dexploitation De Produits Pour Les Industries Chimiques Seppic filed Critical Soc Dexploitation De Produits Pour Les Industries Chimiques Seppic
Publication of BRPI0818718A2 publication Critical patent/BRPI0818718A2/pt
Publication of BRPI0818718B1 publication Critical patent/BRPI0818718B1/pt
Publication of BRPI0818718B8 publication Critical patent/BRPI0818718B8/pt

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Abstract

processo de preparo de uma composição de vacina compreendendo pelo menos um antígeno e pelo menos um adjuvante processo de preparo de uma vacina, compreendendo uma etapa a) de preparo de uma composição adjuvante por dispersão em uma solução aquosa fisiologicamente aceitável, de pelo menos um látex inverso ou de um pó de polímero resultante da atomização desse látex inverso; uma etapa b) de mistura da composição obtida na etapa a) em um meio antigênico, destinado a formar uma composição de vacina.

Description

1/27
PROCESSO DE PREPARO DE UMA COMPOSIÇÃO DE VACINA COMPREENDENDO ANTÍGENO E ADJUVANTE NA FORMA DE LÁTEX INVERSO DE HOMOPOLÍMERO DO ÁCIDO ACRÍLICO
CAMPO DE APLICAÇÃO
A presente invenção se refere a um processo de preparo de uma composição de vacina, compreendendo pelo menos um antígeno, notadamente um antígeno de origem viral, bacteriana ou parasitária e pelo menos um adjuvante.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
O desenvolvimento de vacinas inativadas ou contendo antígenos purificados é cada vez mais importante, pois permite evitar os efeitos secundários indesejáveis no indivíduo tratado. Todavia, a melhoria da qualidade dos antígenos é feita em detrimento de seu caráter imunógeno. É por essa razão que são associados a adjuvantes de imunidade.
Os adjuvantes de imunidade são produtos que aumentam as reações do sistema imunitário, quando são administrados em presença de antígenos de origem viral, bacteriana ou sintética.
Eles provocam o aparecimento maciço de macrófagos no local de injeção, depois nos nódulos linfáticos, aumentam a produção de imunoglobulinas específicas, os anticorpos, e estimulam numerosas células implicadas nos mecanismos da defesa imunitária.
Esses adjuvantes são de naturezas diversas.
Elas podem, por exemplo, consistir em emulsões que se apresentam sob a forma de emulsões água em óleo E/H, ou óleo em água H/E ou água em óleo em água E/H/E ou óleo em água em óleo H/E/H.
Os adjuvantes de Freund são muito eficazes; eles
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2/27 resultam da associação de um óleo mineral e de um éster de manitol contendo ou não uma micobactéria morta. As vacinas fabricadas por mistura em partes iguais de um adjuvante de Freund com um meio antigênico aquoso, permanecem ainda as 5 referências no mundo inteiro para os estudos em laboratório. Eles se apresentam sob a forma de emulsões água no óleo E/H, isto é, de emulsões para as quais a fase contínua é constituída por um óleo ou uma mistura de óleos, e a fase dispersada é uma fase aquosa que pode compreender 10 excipientes solubilizantes como, por exemplo, o glicerol ou o dimetil-sulfóxido. O princípio ativo fica geralmente localizado na fase aquosa que é freqüentemente uma solução salina tamponada. Essa fase está sob a forma de gotas separadas entre elas por uma película oleosa. Essa 15 formulação permite obter respostas biológicas amplificadas e prolongadas no tempo.
Todavia, essas emulsões desse tipo E/H são geralmente muito viscosas e, portanto, dificilmente são injetáveis. Elas necessitam freqüentemente da utilização de seringas 20 com diâmetro de agulha considerável e são a causa de dores, quando da injeção e de traumatismos no nível do local da injeção.
O teor mássico em fase aquosa das emulsões E/H injetáveis se situa em torno de 30 a 40 % para 100 % da 25 massa da emulsão. O teor mássico máximo encontrado é 50 % mássico. Ora, esse limite constitui uma trava notadamente ao desenvolvimento de vacinas polivalentes, aos quais são associados vários antígenos e para os quais seria preferível obter emulsões E/H tendo teores em fase aquosa 30 superiores a 50 % mássico.
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Ora, em uma emulsão E/H de baixo teor em fase aquosa, até aproximadamente 20 % mássico, a viscosidade da emulsão é muito próxima da viscosidade do óleo. O aumento da proporção mássica em fase aquosa aumenta sua viscosidade. É assim que uma emulsão a 20 % mássico de água tendo uma viscosidade de 100 mPa.s, medida com o auxílio de um viscosímetro BROOKFIELD LVT equipado com um móbile no 2 que gira a uma velocidade de 60 rpm, se transforma em um creme muito dificilmente injetável, quando se aumenta o teor em água até 50 % mássico.
Certos adjuvantes oleosos comerciais que se apresentam sob a forma de emulsões E/H, como o MONTANIDETM ISA 70 permitem obter emulsões injetáveis E/H, contendo aproximadamente 30 % em peso, de fase aquosa, 70 % em peso de fase oleosa e tendo viscosidades da ordem de 50 a 100 mPa.s, medida com o auxílio de um viscosímetro BROOKFIELD
LVT equipado com um móbile no 2, girando a uma velocidade de 60 rpm. Outros adjuvantes, como o MONTANIDETM USA 50V2, permitem obter emulsões injetáveis E/H, contendo aproximadamente 50 % em peso de fase aquosa, 50 % em peso de fase oleosa e tendo viscosidades inferiores a 250 mPa.s medida com o auxílio de um viscosímetro BROOKFIELD LVT equipado com um móbile no 2, rpm.
O pedido internacional número WO 99/20305 divulga sobre oleato de manitol com que gira a uma velocidade de de patente publicado sob o a utilização de tensoativos óleos minerais como o MARCOLTM para fazer emulsões, ditas fluidas, de viscosidades da ordem de 500 mPa.s medida com o auxílio de um viscosímetro
BROOKFIELD LVT equipado com um móbile no 2 girando a uma
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4/27 velocidade de 60 rpm.
A noção de emulsão fluida depende amplamente do domínio de aplicação. Para as emulsões injetáveis, o limite superior de viscosidade para uma emulsão fluida é definido 5 em relação à viscosidade de uma emulsão de tipo E/H de referência, que contém 50 % mássico de fase aquosa e 50 % mássico de adjuvante incompleto de Freund (IFA); essa viscosidade, medida com o auxílio de um viscosímetro BROOKFIELD LVT equipado com um móbile no 3 que gira a uma 10 velocidade de 30 rpm, é da ordem de aproximadamente 2000 mPa.s. Essa emulsão é considerada como muito viscosa.
Uma emulsão de tipo E/H será dita fluida, caso sua viscosidade seja inferior a 4 vezes aquela dessa emulsão de referência, isto é inferior a 500 mPa.s a 25 °C, medida com 15 o auxílio de um viscosímetro BROOKFIELD LVT equipado com um móbile no 2 e girando a uma velocidade de 30 rpm.
Todavia, as emulsões fluidas são, em geral, menos estáveis do que as emulsões mais viscosas, já que defasagens à temperatura ambiente são observadas alguns 20 dias somente, após seu preparo.
Existem polímeros espessantes de fases aquosas que se apresentam sob a forma de pós, tais como os homopolímeros do ácido acrílico sob suas formas sódicas ou os copolímeros à base de ácido acrílico e de seus ésteres. Citar-se-ão, 25 por exemplo, os polímeros comercializados pela sociedade Noveon com o nome de marca, CARBOPOL™ e PEMULEN™· Eles são descritos notadamente nas patentes americanas US 5.373.044, US 2.798.053 e na patente européia EP 0 301 532. Esses polímeros foram desenvolvidos na origem como espessantes 30 destinados a espessar formulações essencialmente destinadas
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5/27 a aplicações cosméticas, e que são descritos e utilizados, há muitos anos. Esses polímeros são obtidos a partir de um monômero, tal como, por exemplo, o ácido acrílico, o ácido metacrílico, os ésteres do ácido acrílico ou o ácido metacrílico em solução em uma fase solvente orgânica. No decorrer da reação de polimerização, obtida pelo acréscimo de diferentes catalisadores em condições de temperatura e de pressão específicas, o polímero se insolubiliza da fase solvente inicial para se precipitar no fundo do reator. Esse processo é denominado polimerização por precipitação.
Os polímeros assim obtidos, cujos graus os mais conhecidos são os CARBOPOL ®, são espessantes muito eficazes muito utilizados em cosmética. Esses polímeros são também utilizados para aplicações farmacêuticas variadas:
. preparo de matrizes de polímeros para efeito de liberação retardada;
. preparo de géis de polímeros e complexação desses polímeros com proteínas;
. preparo de películas de polímeros induzindo uma proteção, quando da colocação em contato com os fluidos biológicos;
. preparo de formulações bio-adesivas, assegurando maior remanência, quando da aplicação sobre as mucosas;
. preparo de adjuvantes de vacinas.
A utilização como adjuvante de vacina, com teores mássicos finais em polímero da ordem do por cento, se apresenta sob a forma de uma vacina fluida e translúcida facilmente injetável.
As propriedades adjuvantes das substâncias sintéticas
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6/27 estão muito ligadas às suas formas físicas, quando da administração. Assim, o tamanho das partículas utilizadas para acionar um efeito adjuvante importante é um parâmetro maior que vai controlar a possibilidade de encargo pelas 5 células imunocompetentes. Além disso, em função do tamanho das partículas, será também possível orientar a resposta para uma produção de anticorpos (resposta humoral) ou antes de tudo para estimular células específicas do sistema imunitário (resposta celular). A síntese de micro-esferas 10 de diferentes polímeros em fase solvente sob a forma de dispersões é amplamente descrita na literatura com possibilidade de encapsulamento de um agente biologicamente ativo (podendo ser um antígeno no caso das vacinas) ou utilizado como suporte de adsorção para veicular e 15 apresentar u agente ativo ligado à superfície externa das micro-esferas por interações mais ou menos fortes.
O controle do tamanho das partículas adjuvantes é um desafio permanente, pois deve ser acompanhado de uma estabilidade dessas partículas adjuvantes no decorrer do 20 tempo. É importante notadamente evitar as agregações no decorrer da estocagem ou as separações de fases. O controle do tamanho deve também ser acompanhada de um estabilidade da composição, após injeção no ser vivo, notadamente em razão de estresse ligado à variação de pH, à presença de 25 enzimas, às variações de temperatura.
DESCRIÇÃO DAS FIGURAS
A FIG. 1 ilustra os resultados comparação imunológica de microgel obtidos em emulsão com poliacrilato obtido em fase de solvente (Carbopol® 974).
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A FIG. 2 ilustra resultados/ comparação de inocuidade de microgel obtido em fase de solvente (Carbopol® 974) / controle positivo de reação local: emulsão A / O.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
É por tecnologia isso que a requerente buscou desenvolver uma original de síntese dos polímeros, permitindo controlar o tamanho dos aglomerados de polímeros (ou microgéis), assegurando assim muito bons desempenhos adjuvantes. Para isso, tecnologia da polimerização em emulsão água no óleo
E/H, ou em emulsão inversa, utilizada para preparar esses polímeros. Com efeito, tamanho das gotas de solução de monômero é controlado pela utilização de sistemas tensoativos emulsionantes de tipo água no óleo adaptados às tecnologias das emulsões
E/H.
Trata-se, em geral, do acoplamento de um tensoativo emulsionante lipófilo, tendo, por exemplo, um HLB compreendido entre 2 e 7, com um tensoativo emulsionante hidrófilo, tendo, por exemplo, um HLB compreendido entre 10 e 15, com um valor médio ponderado, assegurando uma emulsão E/H homogêneo. A polimerização dos monômeros é assegurada pelo acréscimo dos catalisadores e outros reticulantes às concentrações habituais em condições de pH e de temperatura adaptadas a uma reação completa do monômero para formar polímeros.
A dimensão das partículas adjuvantes tem um impacto direto sobre as propriedades imunológicas das formulações que os contêm. Além disso, em função das espécies que devem ser vacinadas e do tipo de vacina considerado, o tamanho ótimo das partículas pode diferir. Pelo savoir-faire de formulação das emulsões (otimização do HLB, natureza dos
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8/27 tensoativos, concentração, processo), é possível, quando do processo de síntese em emulsão inversa, controlar a repartição do tamanho das gotas da emulsão e assim o tamanho médio e a repartição granulométrica dos 5 aglomerados. Por dispersão, entendem-se, em função do teor em tenso-ativo e da energia de cisalhamento fornecido quando da etapa de emulsificação, sistemas heterogêneos que podem ser:
. suspensões . emulsões . microemulsões.
Essas diferentes formas dispersadas permitem controlar a dispersão de tamanho dos microgéis em domínios que vão de 50 nm a 100 pm.
As condições químicas de síntese do polímero (tipos de monômeros, catalisadores, iniciadores) permitem controlar as propriedades individuais do polímero obtido (massa molar média, reticulação, caráter aniônico).
O adjuvante assim sintetizado se apresenta sob a forma 20 de uma emulsão gotas de polímero no óleo” ou látex inverso”. Essa emulsão, quando é dispersada em uma solução aquosa de antígeno contendo um tampão fisiológico, se inverte e se dispersa para dar uma dispersão fluida e translúcida de microgéis de polímeros na água. Por exemplo, 25 gotas de microgéis de poliacrilato de sódio podem ter um tamanho médio compreendido entre 0,5 e 5 micrometros, por exemplo, aproximadamente 2 micrometros.
A invenção tem por objeto um processo de preparo de uma vacina que utiliza um látex inverso. Mais 30 particularmente, a invenção tem por objeto um processo de
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9/27 preparo de uma vacina, compreendendo:
- uma etapa a) de preparo de uma composição adjuvante por dispersão em uma solução aquosa fisiologicamente aceitável, de pelo menos um látex inverso ou de um pó de polímero resultante da atomização desse látex inverso;
- uma etapa b) de mistura da composição obtida na etapa a) em um meio antigênico, destinado a formar uma composição de vacina.
Por látex inverso, entende-se uma emulsão água no óleo 10 de polímero, na qual a fase aquosa, dispersada na fase oleosa contínua, contém esse polímero. O látex inverso, resultante da polimerização em emulsão inversa se apresenta, portanto, sob a forma de uma emulsão líquida. Uma atomização posterior desse látex inverso pode, se 15 necessário ou se desejado, ser efetuada para formar esse pó de polímero. A atomização é, por exemplo, descrita no pedido de patente européia EP 1 496 081 (parágrafo [0033] e parágrafos [0055] a [0072] dos exemplos A e B).
Na referida EP 1 496 081 o parágrafo [0033] menciona 20 sobre as principais etapas do processo para obtenção de um látex inverso, i.e., etapa a) e etapa b), seguido pela etapa de atomização (etapa c). Os exemplos A e B do pedido EP 1 496 081 descrevem a produção de dois látex inversos por meio de um processo de polimerização do radical em 25 emulsão inversa (parágrafos [0055] a [0072]).
Por solução aquosa fisiologicamente aceitável, designam-se no âmbito da presente invenção as soluções aquosas que estão aptas a serem utilizadas no preparo de vacinas, quer se trate, por exemplo, de água de qualidade 30 conforme as farmacopéias notadamente européia ou americana
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10/27 como, por exemplo, os soros fisiológicos, ou de soluções salinas e/ou, se for o caso, hidro-alcoólicos, de acordo com essas farmacopéias.
Por composição adjuvante, designa-se uma composição adjuvante de imunidade.
Pelo menos um tensoativo de caráter hidrófilo pode também ser acrescentado previamente a essa etapa a), de forma a melhorar a estabilidade dessa dispersão no tempo.
Por tensoativo de caráter hidrófilo, designam-se agentes tenso-ativos emulsionantes que possuem um valor de
HLB suficientemente elevado, compreendido entre 10 e 15, para fornecer emulsões óleo na água estáveis, tais como os ésteres de manitan etoxilados, os ésteres de sorbitan etoxilados como, por exemplo, o oleato de sorbitam etoxilado com 20 moles de óxido de etileno, comercializado pela sociedade SEPPIC sob o nome de MONTANOX™ 80.
pelo um
Por meio menos um composto aminados. Por um composto antigênico, antígeno ou designa-se um meio que compreende pelo menos um gerador in vivo de que compreende antígeno ou pelo que compreende uma menos uma seqüência um gerador seqüência de in de ácidos vivo de ácidos aminados, designam-se seja microorganismos mortos, tais como vírus, as bactérias ou os parasitas, seja frações purificadas desses microorganismos, seja microorganismos vivos cujo poder patógeno foi atenuado. A título de exemplos de vírus que podem constituir um antígeno segundo a presente invenção, há o vírus da raiva, o herpes virus, tais como vírus do Mal de Aujeszky, os ortomixovirus, tais como influenza, os picomavirus, tais como o vírus da febre aftosa ou os retrovírus, tais como VIH. A título de microPetição 870190045531, de 15/05/2019, pág. 17/38
11/27 organismo do tipo bacteriano que pode constituir um antígeno, segundo a presente invenção, podem-se citar E.Coli, e aqueles dos gêneros Pasteurella, Furonculosis, Vibriosis, Staphylococcus e Streptococcus. A título deexemplos de parasitas, há aqueles dos gêneros Trypanosoma, Plasmodium e Leishmania. Podem-se citar também os vírus recombinantes, notadamente os vírus não envolvidos, tais como os adenovírus, o vírus da vacina, o vírus Canarypox, o herpes virus ou os caculovirus. Designase também um vetor recombinante viral não envolvido vivo, cujo genoma contém, inserida, de preferência em uma parte não essencial para a réplica do vírus envolvido correspondente, uma seqüência codificando para uma subunidade antigênica, induzindo uma síntese de anticorpo e/ou um efeito protetor contra o mencionado vírus envolvido ou microorganismo patógeno; essas subunidades antigênicas podem ser, por exemplo, uma proteína, uma glicoproteína, um peptídeo ou uma fração peptídica e/ou protetora contra uma infecção por um micro-organismo vivo tal como um vírus envolvido, uma bactéria ou um parasita. O gene exógeno inserido no micro-organismo pode ser, por exemplo,, oriundo de um vírus Aujeszky ou HIV.
Pode-se citar notadamente um plasmídeo recombinante constituído de uma seqüência de nucleotídeos, na qual é inserida uma seqüência nucleotídica exógena, proveniente de um micro-organismo ou de um vírus patógeno. Esta última seqüência nucleotídica tem por finalidade permitir a expressão de um composto que compreende uma seqüência de ácidos aminados, esse composto tendo ele próprio por finalidade acionar uma reação imune em um organismo
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12/27 hospedeiro.
Por gerador in vivo” de um composto que compreende uma seqüência de ácidos aminados, designa-se qualquer produto biológico capaz de expressar esse composto no organismo hospedeiro, no qual se introduz esse gerador in vivo. O composto que compreende a seqüência de ácidos aminados pode ser uma proteína, um peptídeo ou uma glicoproteína. Esses geradores in vivo são geralmente obtidos por processos oriundos da engenharia genética. Mais particularmente, podem consistir em micro-organismos vivos, geralmente um vírus, que exerce o papel de vetor recombinante, no qual é inserida uma seqüência nucleotídica, notadamente um gene exógeno. Esses compostos são conhecidos como tais e utilizados notadamente como vacina subunitária recombinante. Em relação a isto, é possível se referir ao artigo de M.Eliot et al., Journal of virology (1990) 71, 292-2431 e aos pedidos internacionais de patente publicados sob os números WO-A-91/00107 e WO-A94/16681. Os geradores in vivo, de acordo com a invenção, podem também consistir em um plasmídeo recombinante, compreendendo uma seqüência nucleotídica exógena, capaz de expressar em um organismo hospedeiro um composto que compreende uma seqüência de ácidos aminados. Esses plasmídeos recombinantes e seu modo de administração em um organismo hospedeiro foram descritos em 1990, por LIN et al., Circulation 82: 2227, 2221; COX et al, J. of VIROL.
Sept. 1993, 67, 9, 5664-5667 e no pedido internacional publicado sob o número WO 95/25542. Segundo a natureza da seqüência nucleotídica compreendida no gerador in vivo, o composto que compreende a seqüência de ácidos aminados que
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13/27 é expressa no meio do organismo hospedeiro pode:
(I) ser um antígeno, e permitir o acionamento de uma
reação imune;
(II) ter uma ação curativa face uma doença,
essencialmente uma doença de ordem funcional, que se
desenvolveu no organismo hospedeiro. Nesse caso, o gerador in vivo permite um tratamento do hospedeiro, do tipo terapia gênica.
A título de exemplo, essa ação curativa pode consistir em uma síntese pelo gerador in vivo de citoquinas, como as interleuquinas, notadamente a interleuquina 2. Estas permitem o desencadear ou o reforço de uma reação imune visando à eliminação seletiva das células cancerígenas.
A composição de vacina tal como definida acima compreende uma concentração em antígeno que depende da natureza desse antígeno que depende da natureza desse antígeno e da natureza do indivíduo tratado. Todavia, é particularmente notável que um adjuvante, de acordo com a invenção, permita diminuir notavelmente a dose habitual de antígeno requerido. A concentração adequada de antígeno pode ser determinada de maneira clássica pelo técnico. Geralmente, essa dose é da ordem de 0,1 pg/cm3 a 1 g/cm3 mais geralmente compreendida entre 1 pg/cm3 e 100 mg/cm3. A concentração desse gerador in vivo na composição, de acordo com a invenção, depende, ainda, notadamente da natureza desse gerador e do hospedeiro no qual é administrado. Essa concentração pode ser facilmente determinada pelo técnico, com base de experiência de rotina. A título indicativo, quando o gerador in vivo é um micro-organismo recombinante, sua concentração na composição, de acordo com a invenção,
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14/27 em geral compreendida entre 102 e 1015 microorganismos/cm3 e, de preferência, entre 105 e 1012 microorganismos/cm3. Quando o gerador in vivo é um plasmídeo recombinante, sua concentração na composição obtida, segundo o processo objeto da invenção, pode estar compreendida entre 0,01 g/dm3 e 100 g/dm3. A vacina, tal como definido anteriormente, é preparado, misturando-se a fase adjuvante e a fase antigênica, acrescentando eventualmente água ou um meio diluente farmaceuticamente aceitável.
A fase contínua oleosa, utilizada para preparar o látex inverso utilizado no decorrer da etapa a) do processo objeto da presente invenção, compreende um ou vários compostos escolhidos dentre os óleos de origem mineral, vegetal ou animal, os ésteres alquílicos desses óleos, os ésteres alquílicos de ácidos graxos ou os éteres alquílicos de ácidos graxos, os ésteres de ácidos graxos e de polióis ou os éteres de álcoois graxos e de polióis, os óleos de síntese.
Um óleo mineral comercial pode também ser utilizado, isto é, um óleo mineral comercial, contendo hidrocarbonetos saturados como as parafinas, as isoparafinas, as cicloparafinas, apresentando à temperatura ambiente, uma densidade entre 0,7 e 0,9 e um ponto de ebulição superior a 180 °C, tais como, por exemplo, o EXXSOL TM D 100 S, ou o
MarcolTM52 comercializados pela sociedade EXXON CHEMICAL, o iso-hexadecano ou o isododecano, seja uma mistura de vários desses óleos.
Segundo um aspecto preferido da presente invenção, a fase óleo é constituída de MARCOLTM 52 ou de iso30 hexadecano; o iso-hexadecano, que é identificado em
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15/27
Chemical Abstracts pelo número RN = 93685-80-4, é uma mistura de isoparafinas em C12, C16 e C20, contendo pelo menos 97 % de isoparafinas em C16, dentre as quais o constituinte principal é o 2,2,4,4,6,8,8-heptameyil nonano (RN = 4390-04-9). Ele é comercializado na França pela sociedade BAYER. O MARCOL™ 52 é um óleo comercial respondendo à definição dos óleos de vaselina do Codex francês. É um óleo branco mineral conforme as regulamentações FDA 21 CFR 172.878 e CFR 178.3620 (a) e ela é inscrita na Farmacopéia dos USA, US XXIII (1995) e na Farmacopéia européia (1993).
Como exemplos de óleos de origem vegetal, há o óleo de amendoim, o óleo de oliva, o óleo de gergelim, o óleo de soja, o óleo de germes de trigo, o óleo de pevide de uva, o óleo de girassol, o óleo de rícino, o óleo de linho, o óleo de soja, o óleo de milho, o óleo de coprah, o óleo de palma, o óleo de noz, o óleo de amêndoa, o óleo de colza ou ainda o óleo de peixe cartilaginoso, ou o óleo de origem vegetal comercializado na França pela sociedade SOPHIM, sob o nome PHYTOSQUALANTM, identificado em Chemical Abstracts pelo número RN = 111-01-3, e que consiste em uma mistura de hidrocarbonetos contendo mais de 80 %, em peso de 2, 6, 10, 15, 19, 23 - hexametil tetracosano.
Como exemplos de óleos de origem animal, há o óleo de spermacetí, a gordura de porco, o óleo de peixe cartilaginoso ou o óleo extraído dos fígados de peixes.
Como exemplos de ésteres alquílicos de óleos, há os ésteres metílicos etílicos, propílicos lineares ou ramificados ou butílicos, lineares ou ramificados, esses óleos.
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16/27
Como ácidos graxos apropriados ao preparo dos ésteres citados acima, há mais particularmente, aqueles comportando de 12 a 22 átomos de carbono, tais como, por exemplo, o ácido mirístico, o ácido palmítico, o ácido oléico, o ácido ricinoleico ou o ácido isosteárico e vantajosamente um ácido graxo líquido a 20 °C.
Como exemplos de ésteres de ácidos graxos ou de éteres de ácidos graxos há os ésteres alquílicos de ácidos graxos, tais como o oleato de etila, o oleato de metila, o miristato de isopropila, ou o palmitato de octila, os ésteres de ácidos graxos e de polióis ou os éteres de álcoois graxos e de polióis, tais como os monoglicerídeos de ácidos graxos, os diglicerídeos de ácidos graxos, os triglicerídeos de ácidos graxos, os ésteres de ácidos graxos com um poliglicerol ou os ésteres de ácidos graxos e de propileno glicol, e, mais particularmente, os ésteres de ácidos graxos com um hexol, tal como, por exemplo o sorbitol ou o manitol, os ésteres de ácidos graxos com um anidrido de hexol, como o sorbitano ou o manitano.
Como exemplos de óleo de síntese, há o polideceno hidrogenado ou o poliisobuteno hidrogenado, comercializado na França pela sociedade ETs B. Rossow et Cie sob o nome PARLEAM - POLYSYNLANE™, que é citado por Micehl et Irene Ash, Thesaurus ofChemical Products”, Chemical Publishing Co, Inc. 1986 Volume I, página 211 (ISBN 0 7131 3603 0).
No âmbito da presente invenção, a fase contínua oleosa, utilizada para preparar o látex inverso utilizado no decorrer da etapa a) do processo objeto da presente invenção, pode compreender um único dos compostos citados acima ou uma mistura de vários dos compostos citados acima.
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17/27
A proporção da fase oleosa no látex inversa está compreendida entre 10 % e 50 % mássica, e, de preferência, entre 15 % e 25 % mássico, da massa total do látex inverso.
Pelo menos um polímero obtido por polimerização em emulsão inversa, levando ao látex inverso na base do preparo da composição adjuvante preparada, quando da etapa a) do processo objeto da invenção é escolhido dentre os polieletrólitos aniônicos, ramificados ou reticulados, escolhidos dentre os copolímeros do ácido acrílico e do ácido 2-metil -[(1-oxo-2-propenil) amino] 1-propano sulfônico (AMPS), os copolímeros de acrilamina e do ácido 2-metil-[(1-oxo-2-propenil)amino] 1-propano sulfônico, os copolímeros do ácido -2-metil-[1-oxo-2-propenil) amino] 1propano sulfônico e acrilato de (2-hidróxi etila), o homopolímero do ácido -2-metil-[(1-oxo-2- propenil)amino] 1-propano sulfônico parcial ou totalmente salificado, o homopolímero do ácido acrílico, parcial ou totalmente salificado, o homopolímero do ácido metacrílico parcial ou totalmente salificado, os copolímeros do cloreto de acriloil etil trimetil amônio e acrilamida, os copolímeros do AMPS e da vinil pirrolidona, os copolímeros do AMPS e da N-metil acrilamida, os copolímeros do AMPS e o N,N-dimetil acrilamida, os copolímeros do AMPS e do metacrilamida, os copolímeros do AMPS e o N-isopropilacrilamida, os copolímeros do AMPS e o N-[2-hidróxi -1,1- bis(hidróxi metil) etil] propenamida [ou tris(hidróxi metil) acrilamidometano ou N-tris(hidróxi metil) metil acrilamida denominado também THAM], os copolímeros do ácido acrílico e do acrilamida, os copolímeros do ácido acrílico e a Nmetil acrilamida, os copolímeros do ácido acrílico e N,N
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18/27 dimetil acrilamida, os copolímeros do ácido acrílico e metacrilamida, os copolímeros do ácido acrílico e o Nisopropilacrilamida, os copolímeros do ácido acrílico e o N-[2-hidróxi-1,1-bis (hidróxi metil) etil] propenamida [ou o tris(hidróxi metil) acrilamida metano ou N-tris(hidróxi metil) metil acrilamida denominado também THAM], os copolímeros do ácido acrílico e de acrilatos de alquila, cuja cadeia carbonada compreende entre dez e trinta átomos de carbono, os copolímeros do AMPS e de acrilatos de alquila, cuja cadeia carbonada compreende entre dez e trinta átomos de carbono.
Por polímero ramificado, designa-se um polímero não linear que possui cadeias pendentes, de maneira a se obter, quando esse polímero é colocado em solução na água, um forte estado de emaranhado, levando a viscosidades, de baixo gradiente de velocidade, muito importantes.
Por polímero reticulado, designa-se um polímero não linear que se apresenta no estado de rede tridimensional insolúvel na água, mas inflável na água e levando, portanto, à obtenção de um gel químico.
Quando esse polieletrólito é reticulado, é mais particularmente com um composto dietilênico ou polietilênico na proporção molar expressa em relação aos monômeros utilizados, de 0,005 a 1 % e, de preferência, de 0,01 % a 0,2 % e, mais particularmente, de 0,01 % a 0,1 %. De preferência, o agente de reticulação e/ou o agente de ramificação é escolhido dentre o dimetacrilato de etileno glicol, o diacrilato de dietileno glicol, o dialquilóxi acetato de sódio, o diacrilato de etileno glicol, a dialil uréia, a trietilalilamina, o trimetilol propano triacrilato
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19/27 ou o metileno-bis-(acrilamida), alil sacarose.
Quando o látex inverso é utilizado, quando da etapa de preparo da composição adjuvante preparada na etapa a) objeto do processo da invenção, ele compreende geralmente 5 de 1 a 5 % mássico de u sistema emulsionante de tipo água no óleo (E/H).
Por sistema emulsionante de tipo água no óleo (E/H), designa-se, na definição precedente, seja um único tensoativo, seja uma mistura de tensoativos à condição que 10 essa mistura tenha um valor de HLB suficientemente baixo para induzir emulsões água no óleo. Como agente emulsionante de tipo água - no óleo, há, por exemplo, os ésteres de sorbitan, como o oleato de sorbitan, como aquele comercializado pela sociedade SEPPIC sob o nome MONTANETM 15 70 ou o sesquiolato de sorbitan como aquele comercializado pela sociedade SEPPIC sob o nome MONATANE™ 83. Há também certos ésteres de sorbitan polietoxilados, por exemplo, o monooleato de sorbitan pentaetoxilado como aquele comercializado pela sociedade SEPPIC sob o nome MONTANOXTM 20 81 ou o isostearato de sorbitan pentaetoxilado como aquele comercializado sob o nome MONTANOXTM 71 pela sociedade SEPPIC. Há ainda o álcool oleocetílico dietoxilado como aquele comercializado sob o nome SIMULSOLTM OC 72 pela sociedade SEPPIC, os poliésteres de peso molecular 25 compreendido entre 1000 e 3000, produtos da condensação entre um ácido poli(isobutenil) succínico ou seu anidrido e a dietanol amina, tais como o HYPERMER™ 2296 comercializado pela sociedade UNIQEMA ou enfim os copolímeros com blocos de peso molecular compreendido entre 30 2500 e 3500, como o HYPERMERTM B26 comercializado pela
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20/27 sociedade UNIQEMA ou a SIMALINETM IR200 comercializado pela sociedade SEPPIC.
Quando o látex inverso é utilizado quando da etapa de preparo da composição adjuvante preparada na etapa a) objeto do processo da invenção, ele compreende geralmente de 2 a 8 % mássico de um sistema emulsionante de tipo óleo na água (H/E).
Por sistema emulsionante de tipo óleo na água (H/E), designa-se na definição precedente, seja um único tensoativos à condição que HLB suficientemente elevado na água. Como agente água, há, por exemplo, os como o oleato de sorbitan de óxido de etileno, SEPPIC sob o nome de itan polietoxilado com 20 tensoativo, seja uma mistura de essa mistura tenha um valor de para induzir emulsões óleo emulsionante de tipo óleo na ésteres de sorbitan etoxilados polietoxilado com 20 moles comercializado peal sociedade MONTANOX™ 80, o laurato de sor moles de óxido de poletoxilado comercializado
SEPPIC sob o etileno, comercializado pela sociedade
nome de MONTANOX™ 20, o óleo de rícino
com 40 moles de óxido de etileno
sob o nome SIMULSOLTM OL50, o álcool
sociedade oleodecílico decaetoxilado, comercializado pela
SEPPOC sob o nome SIMULSOLTM OC 710, o álcool áurico heptaetoxilado comercializado sob o nome SIMULSOLTM P7 ou o monoestearato de sorbitan polietoxilado com 20 moles de óxido de etileno comercializado pela sociedade SEPPIC sob o nome MONTANOX™ 60.
Um polímero obtido por polimerização em emulsão, levando ao látex inverso na base do preparado da composição adjuvante preparada quando da etapa a) do processo objeto
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21/27 da invenção, vantajosamente utilizado, é escolhido dentre o grupo constituído do homopolímero do ácido acrílico total ou parcialmente salificado, o homopolímero do ácido metacrilato parcial ou totalmente salificado, os copolímeros do ácido acrílico e do ácido-2-metil -[(1-oxo2-propenil) amino] 1-propano sulfônico, os copolímeros da acrilamida e o ácido -2-metil-[(1-oxo-2-propenil) amino] 1propano sulfônico, os copolímeros do ácido -2-metil-[(1oxo-2-propenil)amino] 1-propano sulfônico e o acrilato de (2-hidroxietila) e ainda mais vantajosamente o poliacrilato de sódio.
A proporção mássica de pelo menos um látex inverso na composição adjuvante preparada quando da etapa a) do processo objeto da invenção está compreendida entre 0,5 % e 30 % da massa total da composição adjuvante, e preferencialmente entre 5 e 15 % da massa total da composição adjuvante.
Quando da etapa a) do processo objeto da presente invenção, uma substância imunoestimulante pode ser acrescentada. A substância imunoestimulante é, por exemplo, escolhida dentre um ou vários agentes estimulantes imunitários convencionais, tal como AvridinaTM, a N,Ndioctadecil -N',N'-bis (2-hidróxi etil) propanodiamina, os derivados do MDP (muramil dipeptídeo), notadamente o treonil-MDP, os derivados do ácido micólico ou os derivados do Lipídeo A. Essa substância é mais particularmente uma substância ionizada. A substância ionizada é, por exemplo,, escolhida dentre um ou vários sais orgânicos de cátions metálicos hidro-solúveis, tal como, por exemplo, o gluconato de cálcio, o gluconato de manganês, o salicilato
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22/27 de alumínio ou o acetato de alumínio solúvel. Quando a composição adjuvante, de acordo com a invenção, compreende um sal farmaceuticamente aceitável, este está a uma concentração de 0,02 a 3000 mg/cm3, de preferência 0,1 a 1000 mg/cm3, mais preferencialmente de 0,1 a 150 mg/cm3. Sais insolúveis geralmente utilizados como adjuvantes de imunidade, tais como o hidróxido de alumínio ou o fosfato de cálcio podem também ser utilizados.
De acordo com um aspecto da invenção, quando da etapa a), pelo menos um tensoativo de caráter hidrófilo destinado a estabilizar a emulsão é acrescentado. O HLB de pelo menos um tensoativo de caráter hidrófilo está compreendido entre 10 e 15.
A composição preparada na etapa a) comporta entre 0,1 e 15 % de pelo menos um tensoativo e, de preferência, entre 0,1 e 5 % de pelo menos um tensoativo.
No sentido da presente invenção, o número HLB de um tensoativo é calculado pela fórmula HLB = 20 (1-Is/Ia), na qual Is representa o índice de saponificação e Ia o índice de ácido do ácido graxo utilizado para o preparo do tensoativo. No caso de uma mistura de tensoativos, o HLB da mistura é a soma ponderada de HLB de cada tensoativo. Esses dois índices de saponificação e de ácido são determinados por métodos descritos na Farmacopéia européia.
De acordo com um outro aspecto particular da invenção, a composição obtida quando da etapa a) do processo objeto da presente invenção apresenta um teor mássico em fase oleosa compreendida entre 0,1 e 5 % da massa total da composição obtida quando da etapa a) do processo objeto da presente invenção, e, de preferência, entre 0,2 e 1 %
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23/27 mássico.
Os agentes tensoativos de caráter hidrófilo utilizados são geralmente escolhidos dentre os corpos graxos modificados.
Os corpos graxos modificados utilizados no âmbito da presente invenção podem ser de origem mineral vegetal ou animal. Como corpos graxos modificados de origem mineral, há os óleos de origem petrolífera.
Como corpos graxos modificados de origem vegetal, há os óleos vegetais modificados, por exemplo, os óleos modificados de amendoim, de oliva, de gergelim, de soja, de germes de trigo, de pevides de uva, de girassol, de rícino, de linho, de soja, de milho, de coprah, de palma, de noz, de amêndoas ou de colza.
Como corpos graxos modificados, designam-se notadamente os derivados alcoxilados de corpos graxos mais particularmente os derivados alcoxilados de óleos ou os derivados alcoxilados de ésteres alquílicos de óleos e, mais particularmente, os derivados etoxilados e/ou propoxilados de óleos ou os derivados etoxilados e/ou propoxilados dos ésteres metílicos, etílicos, propílicos lineares ou ramificados ou butílicos, lineares ou ramificados, desses óleos.
invenção tem mais especificamente por objeto uma composição tal como definida anteriormente, na qual o corpo graxo modificado é escolhido dentre os derivados etoxilados de óleos que tem um número de moles de óxido de etileno compreendido entre 1 e 10.
Por corpos graxos modificados designam-se também os ésteres de ácidos graxos e de polióis ou os ésteres de álcoois graxos e de polióis, e mais particularmente os
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24/27 ésteres de ácidos graxos com um hexol, tal como, por exemplo, o sorbitol ou o manitol ou os ésteres de ácidos graxos com um anidrido de hexol, como o sorbitano ou o manitano, os derivados alcoxilados de ésteres de ácidos graxos e de polióis ou os derivados alcoxilados de éteres de álcoois graxos e de polióis, como os triglicerídeos de ácidos graxos alcoxilados, os ésteres alcoxilados de poliglicerol de ácidos graxos, e mais particularmente os ésteres alcoxilados de ácidos graxos com um hexol, tal como, por exemplo, o sorbitl ou o manitol ou os ésteres alcoxilados de ácidos graxos com um anidrido de hexol, como o sorbitano ou o manitano que tem um número de moles de óxidos de etileno compreendido entre 1 e 20.
Por ésteres de ácidos graxos e de polióis, designam-se no âmbito da presente invenção, os monoésteres de ácidos graxos e de polióis ou os poliésteres de ácidos graxos e de poliol, tais como, por exemplo, os diésteres de ácidos graxos e de polióis ou os triésteres de ácidos graxos e de polióis. O mesmo acontece com os derivados polialcoxilados desses ésteres
Por éteres de ácidos graxos e de polióis, designam-se no âmbito da presente invenção, os monoéteres de ácidos graxos e de polióis ou os poliéteres de ácidos graxos e de poliol, tal como, por exemplos os diéteres de ácidos graxos e de polióis ou os triéteres de ácidos graxos e de polióis. O mesmo acontece com os derivados polialcoxilados desses éteres.
Os corpos graxos modificados podem ser escolhidos dentre os derivados etoxilados de éteres de álcoois graxos e de polióis, e, mais particularmente, os ésteres
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25/27 etoxilados de ácidos graxos com um hexol, tal como, por exemplo, o sorbitol ou o manitol ou os ésteres etoxilados de ácidos graxos com um anidrido de hexol, como o sorbitano ou o manitano tendo um número de moles de óxido de etileno compreendido entre 5 e 10.
Como ácidos graxos apropriados ao preparo dos corpos graxos modificados descritos acima, há aqueles que comportam em média de 12 a 22 átomos de carbono, tais como, por exemplo, aqueles que comportam de 16 a 18 átomos de carbono, 10 como ácido oléico, o ácido ricinoléico ou o ácido isosteárico e vantajosamente os ácidos graxos líquidos a 20 °C.
De acordo comum aspecto da invenção, quando da etapa
b), pelo menos um imunoestimulante escolhido dentre as saponinas, os óleos animais e/ou vegetais e/ou minerais 15 e/ou de síntese, os tensoativos, o hidróxido de alumínio, as lecitinas e os derivados de lecitina são acrescentados.
De acordo com um aspecto particular da invenção, a vacina obtida quando da etapa b) compreende entre 10 % e 20 % do preparado obtido na etapa a) e entre 80 e 90 % de um 20 meio antigênico.
A invenção tem também por objeto uma composição de vacina, compreendendo entre 10 e 20 % de um preparado obtido segundo a etapa a) do processo, tal como descrito anteriormente, e entre 80 e 90 % de um meio antigênico.
A composição de vacina tal como descrita acima pode ser utilizada como medicamento preventivo ou curativo. Segundo a natureza do antígeno ou do gerador in vivo, uma composição, de acordo com a invenção, pode ser administrada em peixes, crustáceos, tais como camarões, aves, notadamente, gansos, peruas, pombas e frangos, nos
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26/27 canídeos, tais como o cão, nos felídeos, tais como o chato, os porcos, os primatas, os bovinos, os ovídeos, os cavalos, em roedores, tais como o rato, os lagomorfos, tais com o coelho, os caprinos, tais como cabras, grandes mamíferos, tais como os elefantes.
A composição, de acordo com a invenção, pode ser também administrada no homem.
maneira injeção administração da composição pode ser feita clássica por via parenteral, notadamente subcutânea, intramuscular ou intraperitoneal.
de por
Ela pode também ser feita por via oral, nasal, ocular, por imersão ou por balneação.
A invenção tem enfim por objeto a utilização de um composição adjuvante obtida segundo a etapa a) do processo, tal como descrito anteriormente para o preparo de uma composição de vacina.
As percentagens utilizadas ao longo do pedido representam proporções mássicas.
De maneira muito surpreendente, a comparação das propriedades adjuvantes de dispersões de látex inversas em relação a polímeros de mesma composição química, mas obtidas por síntese em fase solvente seguida de uma precipitação, demonstra efeitos adjuvantes tanto na resposta humoral (diagrama 1) muito superiores quanto celular acompanhada de uma grande inocuidade (diagrama 2).
Os exemplos seguintes ilustram a invenção, sem, todavia, limitá-la.
EXEMPLO 1: Composição adjuvante à base de poliacrilato de sódio obtido em emulsão água no óleo mineral
Utiliza-se um óleo mineral fluido Marcol t1 52, fornecida por EXXON. A emulsão de polímero obtido após
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27/27 polimerização se apresenta sob a forma de um gelo oleoso branco e viscoso. Sua composição é de 30 % de óleo mineral (a fase contínua), 5 % de tensoativo destinados a estabilizar a emulsão e 25 % de poliacrilato de sódio e 40 % de água. Ao contato com uma solução antigênica aquosa tamponada com pH 7, a 3 %, a emulsão polímero no óleo se inverte para dar uma dispersão fluida de polímero contendo traços de óleo.
EXEMPLO 2: adjuvante para vacina à base de poliacrilato de sódio obtido por polimerização em emulsão.
Uma dispersão na água contendo 10 % do polímero descrito no exemplo 1 é preparada com uma agitação mecânica suficiente. A regulagem da viscosidade pode ser realizada pelo acréscimo de substâncias ionizadas (sais) inertes (exemplo cloreto de sódio) ou imunoestimulante (exemplo gliconato de manganês). Esse gel, pronto para uso, pode ser redispersado à concentração necessária no meio antigênico considerado, O acréscimo, no gel, de tensoativos suplementares destinados a estabilizar a dispersão do óleo na água pode também ser feita.
EXEMPLO 3: vacina contendo poliacrilato de sódio obtido por polimerização em emulsão
Uma vacina é constituída de 85 % de meio antigênico, no qual são acrescentados 15 % do preparado descrito no exemplo 2, O acréscimo de outros imunoestimulantes como, por exemplo, as saponinas, os óleos animais e/ou vegetais e/ou minerais e/ou de síntese, tensoativos, hidróxido de alumínio, lecitinas e derivados de lecitina é possível.

Claims (3)

REIVINDICAÇÕES
1. Processo de preparo de uma vacina, caracterizado por compreender:
- uma etapa a) de preparo de uma composição adjuvante por dispersão em uma solução aquosa fisiologicamente aceitável, de pelo menos um látex inverso ou de um pó de polímero resultante da atomização desse látex inverso;
em que o látex inverso é uma emulsão de água no óleo de polímero, em que o polímero está presente na forma de gotas na fase interna da dita emulsão;
e em que o látex inverso compreende pelo menos um tensoativo de caráter hidrófilo com HLB entre 10 e 15 e pelo menos um polieletrólito aniônico, ramificado ou reticulado, compreendendo um homopolímero do ácido acrílico parcial ou totalmente salificado e compreendendo ainda uma etapa a) (i) de adicionar um ou mais sais orgânicos de cátions metálicos hidro-solúveis;
- uma etapa b), realizada sob agitação, de mistura da composição obtida na etapa a) em um meio antigênico compreendendo um antígeno, em que a etapa b) compreende uma mistura de 10 a 20% de um preparado obtido na etapa a) com 80 a 90 % de um meio antigênico, para formar uma composição de vacina capaz de desencadear uma resposta imune ao antígeno quando da administração à um sujeito;
em que o antígeno está presente na fase aquosa fisiologicamente aceitável;
em que o dito látex inverso é feito em solução tamponada de antígeno.
2/2 etapa a), pelo menos uma substância imunoestimulante é acrescentada.
2. Processo de preparo de uma vacina, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de, quando da
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3. Processo de preparo de uma vacina, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de 5 compreender, ainda, quando da etapa b)
- uma etapa de acréscimo de pelo menos um imunoestimulante escolhido dentre as saponinas, os óleos animais e/ou vegetais e/ou minerais e/ou de síntese, os tensoativos, o hidróxido de alumínio , as lecitinas e os derivados de lecitina. 4. Proce sso de preparo de uma vacina, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o um ou
mais sal(is) orgânico(s) de cátion metálico hidrossolúvel compreende(m) gluconato de manganês.
BRPI0818718A 2007-10-24 2008-10-06 processo de preparo de uma composição de vacina compreendendo antígeno e adjuvante na forma de látex inverso de homopolímero do ácido acrílico BRPI0818718B8 (pt)

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Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2726554B2 (ja) 1990-08-03 1998-03-11 首都高速道路公団 複合橋脚の施工方法および位置決め装置
FR2957933B1 (fr) * 2010-03-24 2012-04-27 Seppic Sa Vaccin vivant pour maladies aviaires
AU2010357208A1 (en) * 2010-07-08 2013-02-21 United Biomedical, Inc. Designer peptide-based PCV2 vaccine
FR3026012B1 (fr) * 2014-09-23 2017-12-01 Soc D'exploitation De Produits Pour Les Industries Chimiques Seppic Administration par voie orale d'au moins une substance active pharmaceutique et/ou antigenique
WO2017210364A1 (en) 2016-06-01 2017-12-07 Infectious Disease Research Institute Nanoalum particles containing a sizing agent
FR3092754B1 (fr) 2019-02-18 2022-06-03 Total Marketing Services Composition adjuvante pour vaccin
CN111658780B (zh) * 2019-10-14 2021-10-12 四川大学 一种基于阴离子聚合物及其衍生物制备的疫苗载体
FR3107454B1 (fr) 2020-02-20 2023-02-10 Soc Dexploitation De Produits Pour Les Industries Chimiques Seppic Adjuvant de vaccin comprenant un microlatex inverse
RU2741834C1 (ru) * 2020-07-17 2021-01-29 Муса Тажудинович Абидов Вакцина и способ повышения иммуногенности и специфической активности средств профилактики инфекций

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2798053A (en) 1952-09-03 1957-07-02 Goodrich Co B F Carboxylic polymers
EP0301532A3 (en) 1987-07-30 1989-10-18 The B.F. Goodrich Company Solvent free acrylic acid type thickening agents and a method of making same
MX18621A (es) * 1988-12-19 1993-11-01 American Cyanamid Co Polimero en microparticulas soluble en agua, proceso para la preparacion del polimero, metodo para concentrar dispersion de solidos suspendidos y papel con resistencia para aplicaciones en seco y/o humedo
FR2649013B1 (fr) 1989-07-03 1991-10-25 Seppic Sa Vaccins et vecteurs de principes actifs fluides contenant une huile metabolisable
US5288814A (en) 1992-08-26 1994-02-22 The B. F. Goodrich Company Easy to disperse polycarboxylic acid thickeners
FR2700957B1 (fr) 1993-01-29 1995-03-03 Seppic Sa Composition de vaccin sous-unitaire recombinant vivant et procédé de préparation.
FR2717694B1 (fr) 1994-03-22 1996-05-03 Seppic Sa Une composition comprenant un plasmide recombinant et ses utilisations comme vaccin et médicament.
JP4104186B2 (ja) * 1995-11-30 2008-06-18 財団法人化学及血清療法研究所 オイルアジュバントワクチンおよびその調製方法
GB9622159D0 (en) * 1996-10-24 1996-12-18 Solvay Sociutu Anonyme Polyanionic polymers as adjuvants for mucosal immunization
FR2767327B1 (fr) * 1997-08-14 1999-10-29 Atochem Elf Sa Nouveaux polymeres associatifs et leur procede de preparation par emulsion inverse
JPH11106351A (ja) * 1997-10-02 1999-04-20 Chemo Sero Therapeut Res Inst オイルアジュバントワクチンおよびその製造方法
WO1999020305A1 (en) 1997-10-17 1999-04-29 Fort Dodge Australia Pty. Limited Veterinary vaccines
JP2001151699A (ja) * 1999-11-29 2001-06-05 Nippon Surfactant Kogyo Kk 動物用ワクチンのオイルアジュバント
US6551598B2 (en) * 2000-01-21 2003-04-22 Merial Vaccination against canine herpesvirosis and vaccines therefor
US6605674B1 (en) * 2000-06-29 2003-08-12 Ondeo Nalco Company Structurally-modified polymer flocculants
US6676958B2 (en) * 2001-06-19 2004-01-13 Advanced Bioadjuvants, Llc Adjuvant composition for mucosal and injection delivered vaccines
US20030129161A1 (en) * 2001-09-17 2003-07-10 Hsien-Jue Chu Interleukin-12 as a veterinary vaccine adjuvant
FR2856691B1 (fr) 2003-06-26 2005-08-26 Seppic Sa Nouveau polymere en poudre, procede pour sa preparation et utilisation comme epaississant
US20050048016A1 (en) * 2003-07-02 2005-03-03 L'oreal Composition containing a silicone elastomer and a block silicone copolymer

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