BE1021451B1 - DEVICE FOR IN VITRO FERTILIZATION - Google Patents
DEVICE FOR IN VITRO FERTILIZATION Download PDFInfo
- Publication number
- BE1021451B1 BE1021451B1 BE2012/0772A BE201200772A BE1021451B1 BE 1021451 B1 BE1021451 B1 BE 1021451B1 BE 2012/0772 A BE2012/0772 A BE 2012/0772A BE 201200772 A BE201200772 A BE 201200772A BE 1021451 B1 BE1021451 B1 BE 1021451B1
- Authority
- BE
- Belgium
- Prior art keywords
- gas
- tight
- receptacles
- vitro fertilization
- hollow needle
- Prior art date
Links
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 title claims abstract description 39
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title claims abstract description 33
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 39
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 24
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 24
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 15
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 claims abstract description 12
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 36
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 claims description 20
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 7
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 6
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 6
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 4
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 claims description 3
- 239000012780 transparent material Substances 0.000 claims description 3
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 claims description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229920002457 flexible plastic Polymers 0.000 claims description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 claims description 2
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 12
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 12
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 11
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 description 5
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 description 5
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 5
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 5
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 description 5
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 5
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 5
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 5
- 230000009027 insemination Effects 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003570 air Substances 0.000 description 2
- 239000012080 ambient air Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 description 2
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010010144 Completed suicide Diseases 0.000 description 1
- 229920002274 Nalgene Polymers 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 210000001109 blastomere Anatomy 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002224 dissection Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229940075473 medical gases Drugs 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 210000004681 ovum Anatomy 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 210000004340 zona pellucida Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M21/00—Bioreactors or fermenters specially adapted for specific uses
- C12M21/06—Bioreactors or fermenters specially adapted for specific uses for in vitro fertilization
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
- C12M23/02—Form or structure of the vessel
- C12M23/08—Flask, bottle or test tube
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M41/00—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation
- C12M41/12—Means for regulation, monitoring, measurement or control, e.g. flow regulation of temperature
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Thermal Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Clinical Laboratory Science (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
Inrichting voor in vitro fertilisatie bestaande uit twee recipiënten voorzien van gasdichte rubberen stoppen in een thermostatische behuizing, daardoor gekenmerkt dat één recipiënt een mengsel bevat van natriumbicarbonaat en citroenzuur, en dat de andere recipiënt groeimedium voor embryo's bevat, en dat de gasfase van beide recipiënten met elkaar zijn verbonden door middel van een verbindingsbuis.In vitro fertilization device consisting of two receptacles provided with gas-tight rubber stoppers in a thermostatic housing, characterized in that one receptacle contains a mixture of sodium bicarbonate and citric acid, and that the other receptacle contains growth medium for embryos, and that the gas phase of both receptacles with are connected together by means of a connecting tube.
Description
Inrichting voor in vitro fertilisatie.Device for in vitro fertilization.
De huidige uitvinding heeft betrekking op een inrichting voor het uitvoeren van een in vitro fertilisatie.The present invention relates to a device for performing an in vitro fertilization.
Het gaat over een gesloten cultuursysteem waarbij zowel eicel als zaadcel onder optimale en stabiele atmosferische en pH voorwaarden aanleiding kunnen geven tot bevruchting in vitro en de ontwikkeling van een embryo voor terugplaatsing in de baarmoeder. Dit systeem vervangt de huidige dure en zeer complexe systemen om eenzelfde stabiele en optimale cultuuromgeving te creëren.It is about a closed culture system in which both egg cell and sperm can under optimal and stable atmospheric and pH conditions give rise to in vitro fertilization and the development of an embryo for placement in the uterus. This system replaces the current expensive and highly complex systems to create the same stable and optimal cultural environment.
Het is bekend dat 8 tot 12 % van de koppels wereldwijd infertiel zijn. Waar deze conditie in de ontwikkelde landen in vele gevallen verholpen kan worden door een behandeling met geassisteerde reproductieve technologie (ART), is dit in de minder ontwikkelde landen dikwijls niet het geval wegens de te hoge kostprijs van een dergelijke behandeling.It is known that 8 to 12% of couples worldwide are infertile. Whereas this condition can be remedied in many cases by assisted reproductive technology (ART) treatment in developed countries, this is often not the case in less developed countries due to the excessive cost of such treatment.
In vitro fertilisatie (IVF) wordt in de ontwikkelde landen al gebruikt sinds 1978 en heeft inmiddels al geleid tot de geboorte van 3,5 miljoen kinderen. Toch blijft het belangrijkste probleem voor in vitro fertilisatie de hoge kost, ten gevolge van de dure infrastructuur van een IVF-laboratorium (laminar flow werktafels, microscopen, luchtzuiveringsinstallaties, materialen voor invriezen en opslag van eicellen, enz.), en van de dure wegwerpmaterialen en groeimedia. Dit alles leidt tot een kost voor de patiënt van meer dan 1.400,- € per cyclus in een land zoals België bijvoorbeeld.In vitro fertilization (IVF) has been used in developed countries since 1978 and has already led to the birth of 3.5 million children. Nevertheless, the most important problem for in vitro fertilization remains the high cost, due to the expensive infrastructure of an IVF laboratory (laminar flow work tables, microscopes, air purifiers, freezing and egg cell materials, etc.), and the expensive disposable materials and growing media. All this leads to a cost for the patient of more than € 1,400 per cycle in a country such as Belgium for example.
De hoge kost is bijzonder spijtig voor de minder ontwikkelde landen omdat net in deze minder ontwikkelde landen de infertiliteit dikwijls het gevolg is van aandoeningen die maken dat alleen een behandeling met in vitro fertilisatie nog een uitweg kan bieden uit de infertiliteit.The high cost is particularly unfortunate for the less developed countries because it is precisely in these less developed countries that infertility is often the result of disorders that make that only treatment with in vitro fertilization can offer a way out of infertility.
Bovendien is ook net in de minder ontwikkelde landen het sociale stigma, verbonden aan infertiliteit, dikwijls zo groot dat het kan leiden tot isolatie, verlating door de omgeving of zelfs tot geweld zoals moord of zelfdoding bij de infertiele vrouw.Moreover, even in less developed countries, the social stigma associated with infertility is often so great that it can lead to isolation, abandonment of the environment or even violence such as murder or suicide of the infertile woman.
Om hieraan te verhelpen, werd het Arusha-projeet in het leven geroepen, dat zich onder andere toelegt op het verschaffen van een betaalbare infertiliteitsdiagnose en een toegankelijke infertiliteitsbehandeling, waarvan een vereenvoudigde in vitro fertilisatie de hoeksteen vormt (Ombelet et al. Facts, Views and Vision in Obgyn, 2010, 107-115) .To remedy this, the Arusha projeet was created, which focuses on providing affordable infertility diagnosis and accessible infertility treatment, of which simplified in vitro fertilization is the cornerstone (Ombelet et al. Facts, Views and Vision in Obgyn, 2010, 107-115).
Een organisatie zonder winstgevend doel, The Walking Egg v.z.w., werd in het leven geroepen om deze doelstellingen te realiseren (N. Dhont in Facts, Views and Vision in ObGyn, 2011, 3(4):253-255).A non-profit making organization, The Walking Egg, etc., was created to achieve these goals (N. Dhont in Facts, Views and Vision in ObGyn, 2011, 3 (4): 253-255).
De strategie van The Walking Egg werd toegelicht door W. Ombelet et al. in Facts, Views and Vision in ObGyn, 2012, 66-75, waarin methodes voor het organiseren van medische opleiding en training voor de ééndags-diagnostische fase worden beschreven voor het Walking Egg-proj eet.The strategy of The Walking Egg was explained by W. Ombelet et al. In Facts, Views and Vision in ObGyn, 2012, 66-75, which describes methods for organizing medical education and training for the one-day diagnostic phase for the Walking Egg proj eats.
Om de doelstellingen van het Arusha-projeet te halen, dient men onder meer te beschikken over een kostengunstige maar efficiënte laboratorium-omgeving.In order to achieve the objectives of the Arusha project, it is necessary, among other things, to have a cost-effective but efficient laboratory environment.
De huidige uitvinding heeft tot doel voor de voornoemde en andere eisen een oplossing te bieden, doordat zij voorziet in een inrichting voor in vitro fertilisatie die toelaat een in vitro fertilisatie uit te voeren aan een lage kostprij s.The present invention has for its object to provide a solution for the aforementioned and other requirements in that it provides an in vitro fertilization device that allows an in vitro fertilization to be carried out at a low cost.
Hiertoe betreft de uitvinding een inrichting voor in vitro fertilisatie bestaande uit twee recipiënten, voorzien van gasdichte rubberen stoppen, daardoor gekenmerkt dat één recipiënt een mengsel bevat van natriumbicarbonaat en citroenzuur, en dat de andere recipiënt groeimedium voor embryo's bevat, en dat de gasfase van beide recipiënten met elkaar zijn verbonden door middel van een verbindingsbuis.To this end the invention relates to a device for in vitro fertilization consisting of two containers, provided with gas-tight rubber plugs, characterized in that one container contains a mixture of sodium bicarbonate and citric acid, and that the other container contains growth medium for embryos, and that the gas phase of both containers are connected to each other by means of a connecting tube.
Het groeimedium voor embryo's bevat aminozuren, calciumcarbonaat, calciumchloride, magnesiumsulfaat, kaliumchloride en een variabele hoeveelheid koolzuur. Dergelijke groeimedia zijn commercieel verkrijgbaar.The growth medium for embryos contains amino acids, calcium carbonate, calcium chloride, magnesium sulfate, potassium chloride and a variable amount of carbonic acid. Such growing media are commercially available.
Een voordeel van deze inrichting is dat ze toelaat een in vitro fertilisatie van menselijke eicellen met menselijke zaadcellen uit te voeren in een groeimedium met een strict gecontroleerde pH tussen 7,25 en 7,35.An advantage of this device is that it allows for the in vitro fertilization of human ova with human sperm cells in a growth medium with a strictly controlled pH between 7.25 and 7.35.
Nog een voordeel van deze inrichting is dat ze zeer goedkoop is, gemakkelijk te verplaatsen is en onafhankelijk van de aanwezigheid van medische gassen kan worden aangewend,Another advantage of this device is that it is very cheap, easy to move and can be used independently of the presence of medical gases,
Nog een voordeel van deze inrichting is dat de recipiënt met de chemicaliën natriumbicarbonaat en citroenzuur in droge toestand op voorhand bereid kan worden en lang kan bewaard worden.Another advantage of this device is that the container with the chemicals sodium bicarbonate and citric acid in the dry state can be prepared in advance and can be stored for a long time.
Bij voorkeur bestaan de recipiënten uit twee proefbuizen uit een transparant materiaal zoals glas of een transparante kunststof.The containers preferably consist of two test tubes of a transparent material such as glass or a transparent plastic.
Een voordeel van een transparant materiaal voor de proefbuizen is dat de proefbuizen dan van buiten uit gecontroleerd kunnen worden, en dat de vorming van het embryo doorheen de transparante wand kan worden waargenomen en geëvalueerd, en dit zonder de proefbuis te openen.An advantage of a transparent material for the test tubes is that the test tubes can then be monitored from the outside, and that the formation of the embryo through the transparent wall can be observed and evaluated without opening the test tube.
Het volstaat de inhoud van de proefbuis via een optische vergroting door middel van een microscoop of lens van een vergrootglas of een beeldcamera te onderzoeken.It is sufficient to examine the contents of the test tube via an optical magnification by means of a microscope or lens of a magnifying glass or an image camera.
Bij voorkeur bestaat het mengsel van natriumbicarbonaat en citroenzuur uit een verhouding van 75 gewichts% natriumbicarbonaat tot 25 gewichts% citroenzuur, bijvoorbeeld uit 30 mg natriumbicarbonaat en 10 mg citroenzuur.The mixture of sodium bicarbonate and citric acid preferably consists of a ratio of 75% by weight of sodium bicarbonate to 25% by weight of citric acid, for example 30 mg of sodium bicarbonate and 10 mg of citric acid.
Een eerste voordeel van een dergelijk mengsel is dat het bestaat uit goedkope chemicaliën, en dat een proefbuis gevuld met het mengsel in droge toestand lange tijd kan worden opgeslagen zonder zijn eigenschappen te verliezen.A first advantage of such a mixture is that it consists of inexpensive chemicals, and that a test tube filled with the mixture can be stored in the dry state for a long time without losing its properties.
Nog een voordeel is dat het mengsel door het toedienen van een kleine hoeveelheid water, bijvoorbeeld 3 ml steriel water, reageert met vorming van koolzuurgas (C02), dat in contact met de gasfase van de tweede reageerbuis, ervoor zorgt dat de pH van het groeimedium voor embryo' s in de tweede reageerbuis binnen zeer enge grenzen (7,25-7,35) gehouden wordt.Another advantage is that by administering a small amount of water, for example 3 ml of sterile water, the mixture reacts with formation of carbon dioxide (CO2), which, in contact with the gas phase of the second test tube, ensures that the pH of the growth medium for embryos in the second test tube is kept within very narrow limits (7.25-7.35).
Een bijkomend voordeel van deze inrichting volgens de uitvinding is dat zij blootstelling aan de omgevingslucht minimaliseert, waar het bekend is dat de kwaliteit van de omgevingslucht de resultaten van een in vitro fertilisatie nadelig kan beïnvloeden.An additional advantage of this device according to the invention is that it minimizes exposure to ambient air, where it is known that the quality of the ambient air can adversely affect the results of an in vitro fertilization.
Bij voorkeur bestaat het groeimedium voor embryo's uit een eenvoudig commercieel groeimedium op basis van een gebalanceerde zoutoplossing aangevuld met 5% menselijk serum albumine (HSA).Preferably, the growth medium for embryos consists of a simple commercial growth medium based on a balanced saline solution supplemented with 5% human serum albumin (HSA).
Een voordeel van dit groeimedium is dat het goedkoop is en dat zijn samenstelling bewezen heeft geschikt te zijn voor het opgroeien van bevruchte eicellen.An advantage of this growth medium is that it is cheap and that its composition has proven to be suitable for growing fertilized eggs.
Bij voorkeur bestaat de thermostatische behuizing uit een doos met een houder voor de recipiënten, voorzien van een verwarmelement, dat op een temperatuur van 36,5 tot 37,5 °C wordt gehouden.The thermostatic housing preferably consists of a box with a holder for the receptacles, provided with a heating element, which is kept at a temperature of 36.5 to 37.5 ° C.
Een voordeel van een dergelijke behuizing met een verwarmelement, is dat de recipiënten bij de fertilisatie en het opgroeien van het embryo op een constante temperatuur tussen 36,5 en 37,5 °C worden gehouden, hetgeen de normale lichaamstemperatuur is van de baarmoeder.An advantage of such a housing with a heating element is that the fertilizers during fertilization and growing up of the embryo are kept at a constant temperature between 36.5 and 37.5 ° C, which is the normal body temperature of the uterus.
Bij voorkeur kunnen de gasdichte rubberstoppen geperforeerd worden met een holle naald zonder delen van de rubberstop los te maken.Preferably the gas-tight rubber plugs can be perforated with a hollow needle without loosening parts of the rubber plug.
Een voordeel van de perforatie van de rubberstoppen met een holle naald is dat een vloeistof kan worden toegevoegd aan de eerste proefbuis, zonder lucht of andere gassen aan de proefbuis toe te voegen.An advantage of the perforation of the rubber plugs with a hollow needle is that a liquid can be added to the first test tube without adding air or other gases to the test tube.
Nog een voordeel van de perforatie van de rubberstoppen is dat ze de rubberen stop van de proefbuis kan doorboren zonder hiervan delen los te maken, die de inhoud van de proefbuis zouden verontreinigen. Na injectie sluit de perforatie van de rubberen stop zich weer, zodat de gasfase in de proefbuis afgesloten blijft van de atmosfeer buiten de proefbuis.Another advantage of the perforation of the rubber plugs is that it can puncture the rubber stopper of the test tube without detaching parts from it that would contaminate the contents of the test tube. After injection, the perforation of the rubber stopper closes again, so that the gas phase in the test tube remains sealed off from the atmosphere outside the test tube.
Bij voorkeur kunnen de gasdichte rubberstoppen geperforeerd worden met een holle naald, waar doorheen één te fertiliseren menselijke eicel kan geïntroduceerd worden en waar doorheen ook menselijke zaadcellen kunnen geïntroduceerd worden. Na een gepaste incubatietijd kan het gevormde embryo opgezogen worden door een zelfde holle naald gekoppeld met een injectiespuit.The gas-tight rubber plugs can preferably be perforated with a hollow needle through which one human egg cell to be fertilized can be introduced and through which human sperm cells can also be introduced. After an appropriate incubation time, the embryo formed can be aspirated through the same hollow needle coupled with a syringe.
Een voordeel van een dergelijke holle naald doorheen de rubberen stop, is dat de naald in de proefbuis bewogen kan worden, zonder de gasfase in de proefbuis te verstoren.An advantage of such a hollow needle through the rubber stopper is that the needle can be moved into the test tube without disturbing the gas phase in the test tube.
Bij voorkeur bestaat de gasdichte verbindingsbuis uit een flexibele kunststofbuis die aan beide uiteinden door middel van een gasdichte schroefkoppeling verbonden is met een holle naald die doorheen de rubberen stoppen van beide recipiënten gestoken kan worden om de gasfase van beide proefbuizen met elkaar te verbinden.The gas-tight connecting tube preferably consists of a flexible plastic tube which is connected at both ends by means of a gas-tight screw coupling to a hollow needle which can be inserted through the rubber plugs of both receptacles to connect the gas phase of both test tubes to each other.
Een voordeel van een dergelijke verbindingsbuis is dat de koolzuurhoudende gasfase van de eerste proefbuis doordringt tot boven de inhoud van de tweede proefbuis, zodat de pH van het groeimedium voor embryo's in de tweede proefbuis binnen zeer enge grenzen op de juiste pH (7,25-7,35) gehouden worden ingevolge de uitwisseling van het koolzuurgas met de oplossing in de tweede proefbuis.An advantage of such a connecting tube is that the carbonated gas phase of the first test tube penetrates above the contents of the second test tube, so that the pH of the growth medium for embryos in the second test tube is within very narrow limits at the correct pH (7.25-) 7,35) due to the exchange of the carbon dioxide with the solution in the second test tube.
Bij voorkeur wordt de inrichting voor in vitro fertilisatie in een stabiele omgeving van 31° Celsius opgeborgen. Voor de manipulaties zoals eicel identificatie, inseminatie en embryo transfer bestaat er een specifieke broedinrichting waarin door middel van gasdichte handschoenen van buitenuit gewerkt kan worden in isotherme en steriele omstandigheden.The device for in vitro fertilization is preferably stored in a stable environment of 31 ° Celsius. For the manipulations such as egg identification, insemination and embryo transfer there is a specific incubator in which gas-tight gloves can be used to work from outside in isothermal and sterile conditions.
Een broedinrichting zoals deze die gebruikt wordt voor het behandelen van prematuren, biedt voldoende ruimte om de bewerkingen voor in vitro fertilisatie uit te voeren en is reeds voorzien van de nodige hulpmiddelen om in steriele voorwaarden te kunnen werken.An incubator such as this used for the treatment of prematures provides sufficient space for carrying out the operations for in vitro fertilization and is already provided with the necessary tools to be able to work in sterile conditions.
Een voordeel van een dergelijke broedinrichting is dat ze klein is en geen laboratorium vereist om gebruikt te kunnen worden, wat de kosten voor de in vitro fertilisatie beperkt.An advantage of such an incubator is that it is small and does not require a laboratory to be used, which limits the costs for in vitro fertilization.
Nog een voordeel van een dergelijke broedinrichting is dat ze door de kleine afmetingen mobiel is en gemakkelijk getransporteerd kan worden naar plaatsen die zich op afstand van het in-vitro fertilisatie laboratorium bevinden.Another advantage of such an incubator is that, due to its small dimensions, it is mobile and can easily be transported to places remote from the in-vitro fertilization laboratory.
Met het inzicht de kenmerken van de uitvinding beter aan te tonen, is hierna, als voorbeeld zonder enig beperkend karakter, een voorkeurdragende uitvoeringsvorm beschreven van een inrichting voor in vitro fertilisatie volgens de uitvinding, met verwijzing naar de bijgaande tekeningen, waarin :With the insight to better demonstrate the characteristics of the invention, a preferred embodiment of an in vitro fertilization device according to the invention is described below as an example without any limiting character, with reference to the accompanying drawings, in which:
Figuur 1 schematisch en in zijaanzicht een inrichting voor in vitro fertilisatie volgens de uitvinding weergeeft; figuur 2 schematisch en in perspectief de inrichting van figuur 1 weergeeft geplaatst in een ge-thermostatiseerde doos; figuur 3 schematisch en in perspectief figuur 2 weergeeft, geplaatst in een broedinrichting; figuren 4 tot 7 schematisch opeenvolgende stappen in de in vitro fertilisatie weergeeft; figuur 8 schematisch een embryo weergeeft verkregen door in vitro fertilisatie in de inrichting volgens de uitvinding en dit in het blastomeer stadium.Figure 1 shows a schematic and side view of an in vitro fertilization device according to the invention; figure 2 schematically and in perspective shows the device of figure 1 placed in a thermostated box; figure 3 schematically and in perspective shows figure 2, placed in an incubator; Figures 4 to 7 schematically represent successive steps in in vitro fertilization; Figure 8 schematically represents an embryo obtained by in vitro fertilization in the device according to the invention and this at the blastomer stage.
In figuur 1 is schematisch de inrichting voor in vitro fertilisatie 1 volgens de uitvinding weergegeven, bestaande uit twee recipiënten 2, 3 elk afgesloten met een gasdichte rubberen stop 4, 4', waarvan één recipiënt 2 een mengsel 5 bevat van natriumbicarbonaat en citroenzuur, en de andere recipiënt 3 groeimedium 6 voor embryo's bevat, en waarbij de gasfase 7, 7' van beide recipiënten met elkaar zijn verbonden door middel van een flexibele verbindingsbuis 8 die aan beide uiteinden door middel van een gasdichte schroefkoppeling 9, 9' verbonden is met een holle naald 10, 10' die doorheen de rubberen stoppen 4, 4' van beide recipiënten 2, 3 gestoken is.Figure 1 schematically shows the device for in vitro fertilization 1 according to the invention, consisting of two containers 2, 3 each sealed with a gas-tight rubber stopper 4, 4 ', one of which container 2 contains a mixture 5 of sodium bicarbonate and citric acid, and the other container 3 contains growth medium 6 for embryos, and wherein the gas phase 7, 7 'of both containers are connected to each other by means of a flexible connecting tube 8 which is connected at both ends by means of a gas-tight screw coupling 9, 9' hollow needle 10, 10 'inserted through the rubber plugs 4, 4' of both receptacles 2, 3.
Zoals in figuur 2 is weergegeven, wordt de inrichting voor in vitro fertilisatie 1 geplaatst in een houder 11 die op een constante temperatuur wordt gehouden door een voedingsbron 12, en die bovendien is geplaatst in een doos 13 die gethermostatiseerd blijft.As shown in Figure 2, the in vitro fertilization device 1 is placed in a container 11 which is kept at a constant temperature by a power supply 12, and which is furthermore placed in a box 13 which remains thermostatized.
Figuur 3 geeft weer hoe de inrichting 1 voor in vitro fertilisatie geplaatst is in een houder en in zijn gethermostatiseerde doos, die vervolgens geplaatst wordt in een broedinrichting 14, die uitgerust is met gasdichte handschoenen 15, voor het uitvoeren van bewerkingen in de broedinrichting 14 onder steriele en thermostatische condities.Figure 3 shows how the in vitro fertilization device 1 is placed in a container and in its thermostated box, which is then placed in an incubator 14, equipped with gas-tight gloves 15, for performing operations in the incubator 14 under sterile and thermostatic conditions.
De figuren 4 tot 7 geven opeenvolgende stappen weer in het gebruik van de inrichting 1 voor · in vitro fertilisatie volgens de uitvinding.Figures 4 to 7 show successive steps in the use of the device 1 for in vitro fertilization according to the invention.
In figuur 4 wordt de eerste stap weergegeven, bestaande uit het toevoeren van water aan het droge mengsel van natriumbicarbonaat/citroenzuur door middel van een injectiespuit 16, waarvan de holle naald 17 doorheen de rubberen stop 4 van de eerste recipiënt 2 wordt gestoken.Figure 4 shows the first step consisting of supplying water to the dry sodium bicarbonate / citric acid mixture by means of a syringe 16, the hollow needle 17 of which is inserted through the rubber stopper 4 of the first container 2.
In een volgende stap, voorgesteld in figuur 5, wordt de gasdichte rubberstop 4' van de tweede recipiënt 3 geperforeerd met een holle naald 18 van een injectiespuit 16, waar doorheen één te fertiliseren menselijke eicel 20 in het groeimedium 6 voor embryo's wordt geïnjecteerd.In a next step, shown in Figure 5, the gas-tight rubber stopper 4 'of the second container 3 is perforated with a hollow needle 18 of a syringe 16, through which one human egg cell 20 to be fertilized is injected into the growth medium 6 for embryos.
In een daaropvolgende stap, voorgesteld in figuur 6, wordt opnieuw een holle naald 18 van een injectiespuit, doorheen de gasdichte rubberstop 4' van de tweede recipiënt 3 gestoken, ditmaal voor het introduceren van zaadcellen 21, waarna de fertilisatie in vitro kan plaatsvinden.In a subsequent step, shown in Figure 6, again a hollow needle 18 of a syringe is inserted through the gas-tight rubber stopper 4 'of the second container 3, this time for introducing sperm cells 21, after which fertilization can take place in vitro.
Tenslotte worden in een verdere stap, voorgesteld in figuur 7, één embryo uit het groeimedium 6 opgezogen na de nodige incubatietijd door middel van een holle naald 18 van een injectiespuit die gestoken werd doorheen de gasdichte rubberstop 4' van de tweede recipiënt 3.Finally, in a further step, shown in Figure 7, one embryo is aspirated from the growth medium 6 after the necessary incubation time by means of a hollow needle 18 of a syringe inserted through the gas-tight rubber stopper 4 'of the second container 3.
De werking van de inrichting 1 voor in vitro fertilisatie kan als volgt worden toegelicht.The operation of the in vitro fertilization device 1 can be explained as follows.
De eerste recipiënt 2 wordt gevuld met 30 g natriumbicarbonaat en 10 mg citroenzuur in droge toestand. Aan dit mengsel wordt 3 ml steriel water toegevoegd door middel van een injectiespuit 16 waarvan de holle naald 17 doorheen de rubberen stop 4 van de eerste recipiënt 2 wordt gestoken waarna het water wordt ingespoten bij het mengsel dat vervolgens gedurende 5 tot 10 seconden krachtig geschud wordt, en waarna de eerste recipiënt 2 met de tweede recipiënt 3 wordt verbonden door middel van de flexibele verbindingsbuis 8.The first container 2 is filled with 30 g of sodium bicarbonate and 10 mg of citric acid in the dry state. To this mixture, 3 ml of sterile water is added by means of a syringe 16, the hollow needle 17 of which is inserted through the rubber stopper 4 of the first container 2, after which the water is injected into the mixture which is then shaken vigorously for 5 to 10 seconds. and after which the first container 2 is connected to the second container 3 by means of the flexible connecting tube 8.
De chemische reactie van het mengsel met water stelt koolzuurgas (C02) vrij in de gasfase van de eerste recipiënt 2, dat doorheen de verbindingsbuis 8 naar de gasfase van de tweede recipiënt wordt geleid en daardoor de pH in het groeimedium op de optimale waarde tussen 7,25 en 7,35 brengt bij de temperatuur van 36,5 tot 37,5 °C van de houder die op deze temperatuur wordt gehouden.The chemical reaction of the mixture with water releases carbon dioxide (CO2) into the gas phase of the first container 2, which is passed through the connecting tube 8 to the gas phase of the second container and thereby the pH in the growth medium to the optimum value between 7 , 25 and 7.35 at the temperature of 36.5 to 37.5 ° C of the container that is kept at this temperature.
De recipiënten bestaan in deze uitvoeringsvorm uit glazen of kunststof testbuizen met een diameter van 150 mm en een lengte van 980 mm.In this embodiment, the containers consist of glass or plastic test tubes with a diameter of 150 mm and a length of 980 mm.
De holle metalen naalden die op beide uiteinden van de verbindingsbuis 8 zijn geschroefd, hebben een diameter van 1,1 mm, zijn 360 mm lang en steken met een lengte van 260 mm doorheen de rubberen stoppen 4, 4'. De verbindingsbuis 8 uit Nalgene zelf heeft een totale lengte van 110 mm en een inwendige diameter van 50 mm.The hollow metal needles screwed on both ends of the connecting tube 8 have a diameter of 1.1 mm, are 360 mm long and protrude with a length of 260 mm through the rubber plugs 4, 4 '. The connecting tube 8 from Nalgene itself has a total length of 110 mm and an internal diameter of 50 mm.
Om de tijd die nodig is om de pH van het groeimedium op de optimale waarde van 7,25 tot 7,35 te kennen wordt de pH gemeten in functie van de tijd. Deze tijd voor een 30+10 mg bicarbonaat/citroenzuur mengsel bedraagt voor het gebruikte groeimedium ongeveer 17 uren en blijft stabiel tot minimum 22 uren reactietijd.In order to know the time required to adjust the pH of the growth medium to the optimum value of 7.25 to 7.35, the pH is measured as a function of time. This time for a 30 + 10 mg bicarbonate / citric acid mixture is about 17 hours for the growth medium used and remains stable for a minimum of 22 hours of reaction time.
Aangezien de recipiënt 3 na het verwijderen van de naald 10' en de verbindingsbuis 8 gesloten blijft, blijven de gasfase en de pH van het groeimedium voor langere tijd stabiel, hetgeen toelaat groeimedium voor in vitro fertilisaties op voorhand te bereiden en gekoeld op te slaan in de recipiënt 3 in de vorm van afgesloten proefbuizen tot een in vitro fertilisatie gestart wordt.Since the container 3 remains closed after the needle 10 'and the connecting tube 8 have been removed, the gas phase and the pH of the growth medium remain stable for a long time, which makes it possible to prepare growth medium for in vitro fertilization in advance and store it in a cool place. the container 3 in the form of sealed test tubes until an in vitro fertilization is started.
De eigenlijke fertilisatie wordt gestart door één eicel uit gepreleveerde oocyte-cumulus complexen van eicellen in een proefbuis met groeimedium te injecteren dat in evenwicht is, en dit door middel van een holle naald 18 van een injectiespuit die doorheen de rubberen stop 4' van de proefbuis met groeimedium wordt gestoken. De holle naald is dun genoeg om de gasfase boven het groeimedium niet te verstoren, en de rubberen stop sluit zich weer nadat de holle naald eruit is verwijderd.The actual fertilization is started by injecting one egg from pre-delivered oocyte-cumulus egg cell complexes into a balanced growth tube with a hollow needle 18 of a syringe passing through the rubber stopper 4 'of the test tube is stuck with growth medium. The hollow needle is thin enough not to disturb the gas phase above the growth medium, and the rubber stopper closes again after the hollow needle is removed.
Hierna volgt de inseminatie-stap waarbij sperma standaard bereid wordt door een gradiënt centrifugatie gevolgd door een was-stap. De typische concentratie voor normaal sperma is 1000 bewegende spermatozoïden in 10 tot 15 μΐ cultuurmedium.This is followed by the insemination step where sperm is prepared as standard by a gradient centrifugation followed by a washing step. The typical concentration for normal sperm is 1000 moving spermatozoa in 10 to 15 μΐ culture medium.
Ongeveer 5 tot 10 internationale eenheden (IU) hyaluronidase kunnen toegevoegd worden aan het sperma in de inseminatie-oplossing. Het hyaluronidase kan chromatografisch gezuiverd, gedialyseerd en gelyofiliseerd hyaluronidase zijn. De toevoeging van hyaluronidase kan de navolgende controle voor bevruchting vergemakkelijken door het bevorderen van de spontane dispersie van cellen in de cumulus oophorus en de verdringing van corona-cellen uit de zona pellucida.About 5 to 10 international units (IU) of hyaluronidase can be added to the sperm in the insemination solution. The hyaluronidase can be chromatographically purified, dialyzed and lyophilized hyaluronidase. The addition of hyaluronidase can facilitate the following control before fertilization by promoting the spontaneous dispersion of cells in the cumulus oophorus and the displacement of corona cells from the zona pellucida.
Daarna wordt door middel van een injectiespuit met holle naald een volume zaadcellen toegevoegd aan het groeimedium, equivalent met ten minste 1.000 goed bewegende zaadcellen van normale morfologie.A volume of sperm is then added to the growth medium by means of a hollow needle syringe equivalent to at least 1,000 well-moving sperm of normal morphology.
De geïnsemineerde proefbuis wordt geïncubeerd bij 37 °C in een bij voorkeur draagbare incubator.The inseminated test tube is incubated at 37 ° C in a preferably portable incubator.
De fertilisatie wordt gecontroleerd binnen 17 tot 20 uren na de inseminatie wanneer de pronucleï nog aanwezig zijn en dit door de proefbuis in een horizontale positie te houden en doorheen het glas de embryo's te bekijken met een vergrotende optiek.The fertilization is checked within 17 to 20 hours after insemination when the pronuclei are still present and this by holding the test tube in a horizontal position and viewing the embryos through the glass with an enlarging optic.
Het toevoegen van hyaluronidase bij de inseminatie bevordert de visualisering van het ooplasma om het optreden van een mono- of dispersmische penetratie op te sporen.The addition of hyaluronidase during insemination promotes visualization of the ooplasm to detect the occurrence of mono- or dispersmic penetration.
Een eerste inspectie na fertilisatie is de pronucleaire check, waarbij alleen een embryo dat twee pronucleï vertoont hetgeen op een normale fertilisatie wijst, wordt overgebracht naar een nieuwe proefbuis, ditmaal met een ander groeimedium zijnde Global 'let the embryo choose' medium, op basis van een gebalanceerde zoutoplossing aangevuld met 5 % menselijk serum albumine (HSA).A first inspection after fertilization is the pronuclear check, in which only an embryo that shows two pronuclei, which indicates normal fertilization, is transferred to a new test tube, this time with a different growth medium being Global 'let the embryo choose' medium, based on a balanced saline solution supplemented with 5% human serum albumin (HSA).
Het IVF systeem volgens de uitvinding is ontworpen om dezelfde proefbuis te gebruiken vanaf het inbrengen van de eicel tot de embryo overdracht, zonder het embryo intussen uit de proefbuis te moeten nemen.The IVF system according to the invention is designed to use the same test tube from the insertion of the egg to the embryo transfer, without having to take the embryo out of the test tube in the meantime.
Het embryo met twee pronucleï wordt individueel gegroeid tot de dag van overdracht. De kwaliteit van het embryo wordt op gestelde tijden gecontroleerd door inspectie doorheen de glazen testbuis waarbij de celdelingsstadia gevolgd worden door de horizontaal geplaatste proefbuis te onderzoeken met ofwel een dissectiemicroscoop of een geïnverteerde microscoop met objectieven met een lange werkingsafstand.The embryo with two pronuclei is grown individually until the day of transfer. The quality of the embryo is checked at specified times by inspection through the glass test tube, cell division stages being followed by examining the horizontally placed test tube with either a dissection microscope or an inverted microscope with long-range objectives.
De stadia en de morfologie van het embryo kunnen gedocumenteerd worden door een fotografische camera of video camera.The stages and morphology of the embryo can be documented by a photographic camera or video camera.
Een voorbeeld van een embryo 23 bestaande uit acht cellen, zoals gefotografeerd doorheen de glazen wand van de testbuis, is schematisch in figuur 8 voorgesteld.An example of an embryo 23 consisting of eight cells, as photographed through the glass wall of the test tube, is shown schematically in Figure 8.
Overblijvende embryo's kunnen worden ingevroren en desgevallend worden ontdooid voor een overdracht in een latere cyclus.Residual embryos can be frozen and, if necessary, thawed for transfer in a later cycle.
Voor de overdracht van het embryo naar de draagmoeder, wordt het embryo uit de proefbuis opgezogen door middel van een holle naald met een injectiespuit voor overdracht naar een katheter op de conventionele manier ofwel door het rechtstreeks opzuigen van het embryo uit de proefbuis in de katheter die door een afgeschuinde holle naald in de proefbuis wordt geschoven, waarbij 5 tot 10 μΐ medium opgezogen wordt voor de embryo overdracht naar de baarmoeder.For transfer of the embryo to the gestational mother, the embryo is aspirated from the test tube by means of a hollow needle with a syringe for transfer to a catheter in the conventional manner or by direct aspiration of the embryo from the test tube into the catheter which is pushed through a beveled hollow needle into the test tube, sucking 5 to 10 μΐ of medium for transfer of the embryo to the uterus.
De huidige uitvinding is geenszins beperkt tot de als voorbeeld beschreven en in de figuren weergegeven uitvoeringsvorm, doch een inrichting voor in vitro fertilisatie volgens de uitvinding kan in allerlei vormen en afmetingen worden verwezenlijkt zonder buiten het kader van de uitvinding te treden.The present invention is by no means limited to the exemplary embodiment described in the figures, but an in vitro fertilization device according to the invention can be realized in all shapes and sizes without departing from the scope of the invention.
Uit recente experimentele gegevens uit het laboratorium van de aanvrager blijkt dat deze vereenvoudigde inrichting voor in vitro fertilisatie volgens de uitvinding vergelijkbare slaagpercentages kent in vergelijking met het meer ingewikkelde reguliere cultuursysteem dat in de ontwikkelde landen toegepast wordt en dit voor een beduidend lagere kost.Recent experimental data from the applicant's laboratory shows that this simplified in vitro fertilization device according to the invention has comparable success rates compared to the more complicated regular culture system used in developed countries and this for a considerably lower cost.
Claims (10)
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| BE2012/0772A BE1021451B1 (en) | 2012-11-15 | 2012-11-15 | DEVICE FOR IN VITRO FERTILIZATION |
| PCT/BE2013/000050 WO2014075153A1 (en) | 2012-11-15 | 2013-09-27 | Device and method for in vitro fertilisation. |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| BE2012/0772A BE1021451B1 (en) | 2012-11-15 | 2012-11-15 | DEVICE FOR IN VITRO FERTILIZATION |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BE1021451B1 true BE1021451B1 (en) | 2015-11-25 |
Family
ID=47664026
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BE2012/0772A BE1021451B1 (en) | 2012-11-15 | 2012-11-15 | DEVICE FOR IN VITRO FERTILIZATION |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| BE (1) | BE1021451B1 (en) |
| WO (1) | WO2014075153A1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109349112A (en) * | 2018-11-29 | 2019-02-19 | 山东省果树研究所 | A kind of explant locellus disinfection lost circulation prevention device and digital display time control speed regulation cyclotron oscillation device and its application |
| CN111542592A (en) * | 2017-11-08 | 2020-08-14 | 株式会社Ihi | Connection unit for cell culture apparatus, incubator apparatus, and cell culture apparatus |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2809032A1 (en) * | 1977-03-02 | 1978-09-07 | Olympus Optical Co | DEVICE FOR SUPPLYING LIQUID FOR AN AUTOMATIC INCUBATOR |
| EP0285496A1 (en) * | 1987-03-23 | 1988-10-05 | Ire Medgenix S.A. | Assembling and closing device for immunological test tubes |
| US5681742A (en) * | 1995-09-26 | 1997-10-28 | Louisville Laboratories, Inc. | Biological specimen containment and incubation device |
| US6170719B1 (en) * | 1999-08-06 | 2001-01-09 | Becton Dickinson And Company | Medical safety closure |
| US20110189649A1 (en) * | 2008-07-08 | 2011-08-04 | Andrew Skinn | Laboratory Apparatus for a Controlled Environment |
| WO2012063687A1 (en) * | 2010-11-09 | 2012-05-18 | 国立大学法人広島大学 | Diluent for frozen human sperm, dilution method for frozen human sperm, and adjustment method for human semen for in vitro fertilization or semen for artificial insemination |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3005756A (en) * | 1958-11-14 | 1961-10-24 | Noland L Van Demark | Diluter containing carbon dioxide for preserving semen |
-
2012
- 2012-11-15 BE BE2012/0772A patent/BE1021451B1/en not_active IP Right Cessation
-
2013
- 2013-09-27 WO PCT/BE2013/000050 patent/WO2014075153A1/en not_active Ceased
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2809032A1 (en) * | 1977-03-02 | 1978-09-07 | Olympus Optical Co | DEVICE FOR SUPPLYING LIQUID FOR AN AUTOMATIC INCUBATOR |
| EP0285496A1 (en) * | 1987-03-23 | 1988-10-05 | Ire Medgenix S.A. | Assembling and closing device for immunological test tubes |
| US5681742A (en) * | 1995-09-26 | 1997-10-28 | Louisville Laboratories, Inc. | Biological specimen containment and incubation device |
| US6170719B1 (en) * | 1999-08-06 | 2001-01-09 | Becton Dickinson And Company | Medical safety closure |
| US20110189649A1 (en) * | 2008-07-08 | 2011-08-04 | Andrew Skinn | Laboratory Apparatus for a Controlled Environment |
| WO2012063687A1 (en) * | 2010-11-09 | 2012-05-18 | 国立大学法人広島大学 | Diluent for frozen human sperm, dilution method for frozen human sperm, and adjustment method for human semen for in vitro fertilization or semen for artificial insemination |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111542592A (en) * | 2017-11-08 | 2020-08-14 | 株式会社Ihi | Connection unit for cell culture apparatus, incubator apparatus, and cell culture apparatus |
| CN109349112A (en) * | 2018-11-29 | 2019-02-19 | 山东省果树研究所 | A kind of explant locellus disinfection lost circulation prevention device and digital display time control speed regulation cyclotron oscillation device and its application |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2014075153A1 (en) | 2014-05-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2907974T3 (en) | Apparatus, method and system for monitoring the development of cultured samples | |
| Gook et al. | Cryopreservation of mouse and human oocytes using 1, 2-propanediol and the configuration of the meiotic spindle | |
| ES2232624T3 (en) | MICROINJECTION OF CRIOPROTECTORS FOR THE CONSERVATION OF CELLS. | |
| JP2022188054A (en) | Method and apparatus for dynamically culturing biological sample | |
| Zhang et al. | Nanoliter droplet vitrification for oocyte cryopreservation | |
| Lee et al. | Ultra-rapid vitrification of mouse oocytes in low cryoprotectant concentrations | |
| Casillas et al. | Porcine embryo production following in vitro fertilization and intracytoplasmic sperm injection from vitrified immature oocytes matured with a granulosa cell co-culture system | |
| Moawad et al. | Production of good-quality blastocyst embryos following IVF of ovine oocytes vitrified at the germinal vesicle stage using a cryoloop | |
| WO2005066329A1 (en) | Microinjection of cryoprotectants for preservation of cells | |
| Smith et al. | Theoretical and experimental basis of oocyte vitrification | |
| Eum et al. | Long-term liquid nitrogen vapor storage of mouse embryos cryopreserved using vitrification or slow cooling | |
| Oehninger et al. | The hemizona assay for assessment of sperm function | |
| BE1021451B1 (en) | DEVICE FOR IN VITRO FERTILIZATION | |
| Guan et al. | Contemporary techniques for freezing mouse spermatozoa | |
| Chang et al. | Impact of phase transition on the mouse oocyte spindle during vitrification | |
| Lestari et al. | Sucrose ‘versus’ trehalose cryoprotectant modification in oocyte vitrification: a study of embryo development | |
| Paynter et al. | Cryopreservation of mammalian oocytes | |
| Longenecker et al. | Cryopreservation protocols for genetically engineered mice | |
| Fuller et al. | Cryopreservation of mammalian embryos | |
| Wang et al. | External bending of cryodevice during vitrification leads to cryoprotectant cracks and damage to embryo blastomeres | |
| Schlapp et al. | Spatula Montevideo Device for the Vitrification of Mammalian Embryos | |
| Curchoe et al. | The changing culture of embryo culture | |
| Fakhrildin et al. | Effect of two types and two concentrations of cryoprotectants on ovine oocytes morphology and viability post-vitrification | |
| Pollet-Villard et al. | In Vitro Maturation and Time-Lapse Imaging of Immature Human Oocytes: A Direction Toward Clinical Applications | |
| Schiewe | Quality Control Factors Influencing the Successful and Reliable Implementation of Oocyte and Embryo |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FG | Patent granted |
Effective date: 20151125 |
|
| MM | Lapsed because of non-payment of the annual fee |
Effective date: 20171130 |