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Composition pharmaceutique injectable à base d'amoxicilline.
La présente invention concerne une nouvelle préparation injectable à base d'amoxicilline.
L'amoxicilline est un antibiotique de la famille des bétalactamines, dont l'intérêt thérapeutique est connu depuis longtemps.
Des compositions pharmaceutiques ä base d'amoxicilline pour administration orale peuvent être préparées aisément sous toutes les formes habituelles telles que par exemple gelules, comprimés ou autres compositions destinées à l'absorption orale.
Contrairement ä celä, les préparations injectables de telles compositions nécessitent l'emploi de derives solubles d'amoxicilline et d'un solvant approprié, qui peut & tre l'eau. Aussi, les sels solubles d'amoxicll1ine. tels que notamment le sel sodique ont été utilises jusqu'à présent pour la réalisation des
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preparations injectables.
Cependant, de telles solutions présentent une stabilité limitée et sont donc difficiles ä préparer industriellement avec une pureté satlsfalsante car les sels sont dégradables.
De plus, l'injection par vole intramusculaire des préparations en solution aqueuse est douloureuse et irritante pour le tissu. Il s'est donc avéré nécessaire d'adjoindre à ces solutions un anesthésique. Cependant, le choix d'un anesthésique local ä utiliser pour rendre l'injection supportable est très limite, notamment en raison de l'incompatibilité des sels d'amoxicilline avec certains types d'anesthésiques.
C'est ainsi qu'on connalt une preparation injectable ä base d'amoxicilline contenant de l'alcool benzylique en tant qu'anesthésique local. Cette préparation doit etre injectée immédiatement après la reconstitution.
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Cependant, ce produit a un titre bas et la teneur globale en produits de decomposition et impuretés est élevée, et peut atteindre 10%. De plus, il faut pratiquer plusieurs injections d'antibiotique par jour pour maintenir les concentrations sériques nécessaires.
En outre, l'alcool benzylique bien que efficace contre la douleur, provoque néanmoins lors de l'injection intramusculaire des irritations locales.
Du fait des difficultés rencontrées avec les solutions injectables connues, notamment à base de sel sodique d'amoxicilline, il fallait donc envisager une formule alternative.
La présente invention a pour objet de résoudre les problemes précités en proposant une composition pharmaceutique qui soit facile à injecter, qui présente une bonne pureté et stabilité dans le temps et qui lutte efficacement contre la douleur locale lors de l'injection sans provoquer d'irritation.
La solution proposee par la présente invention, pour resoudre ce problème consiste en une composition pharmaceutique injectable ä base d'amoxicilline, caractérisée en ce qu'elle comprend du trihydrate d'amoxicilline en suspension dans un vehicule ou milieu liquide approprié.
On a en effet découvert d'une manière surprenante que la tolérance locale à l'injection d'une suspension de trihydrate d'amoxicilline était meilleure que celle d'une solution aqueuse de sel sodique d'amoxicilline.
L'administration parentérale des suspensions rencontre une opinion à priori défavorable et est généralement réservée aux produits ne pouvant être solubilisés dans des véhicules usuels, l'objection portant sur la mauvaise tolérance locale ä l'injection.
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C'est pourquoi jusqu'à present, on utilisait uniquement des derives solubles d'amoxicilline, et il n'y avait pas lieu pour l'homme du metier de s'orienter vers des derives d'amoxicilline, tels que le trihydrate, mis en suspension dans un milieu liquide.
Selon une caractéristique particuliere de l'invention, la taille des particules du trihydrate d'amoxicilline dans la suspension est choisie de façon à permettre l'injection de la composition. Avantageusement, cette taille est comprise entre environ 1 et 25 microns et est de préférence de l'ordre de 5 microns.
Selon une autre caractéristique particulière, la concentration du trihydrate d'amoxicilline dans la suspension est comprise entre environ 100mg activité/ml et 700 mg activité/ml et est de préférence comprise entre 200 et 500 mg activité/ml.
Selon encore une autre caractéristique. de l'invention, le trihydrate d'amoxicilline est sous forme micronisée dans le solvant. La micronisation est particulièrement avantageuse du fait que la conformation des particules obtenues est tout a fait compatible avec les contraintes de l'injection.
L'invention sera mieux illustrée à la lecture de la description explicative qui va suivre, faite en référence aux experiences et observations données ci-après
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uniquement à titre d'exemple.
L'algie locale après injection subplantaire chez le rat, la tolerance locale ä l'injection intramusculaire chez le lapin et la biodisponibilité chez le chien d'une suspension aqueuse de trihydrate d'amoxicilline micronisee, selon l'invention, ont eté étudiées en comparaison avec une solution aqueuse de sel sodique d'amoxicilline.
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Le véhicule choisi pour la comparaison est l'eau qui est le milieu liquide le plus simple, et également le moins coûteux. Cependant, tout autre milieu liquide usuel approprie peut être utilise sans sortir du cadre de l'invention,
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Le trihydrate d'amoxicilline a été tnicronisee par passage sur un appareil Christo Jet Mill dans des conditions strictement définies et reproductibles. Cette technique connue est décrite par exemple par G. BOULLAY (Colloque APGI Dec. 1984).
L'analyse granulométrique de la poudre obtenue révèle la répartition des tailles de particules suivante : environ 80% des particules ont une taille inférieure à 5 microns ; environ 10% des particules ont une taille comprise entre 5 et 10 microns ; environ 10% des particules ont une taille comprise entre 10 et 20 microns.
Commementionnéprécédemment, lamicronisation du trihydrate d'amoxicilline est avantageuse car elle permet de surmonter la plupart des contraintes de l'injection de la suspension selon l'invention. Il est cependant bien entendu que d'autres techniques peuvent être utilisées, comme par exemple le microbroyage ou
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broyage prolonge.
L'intégrité du principe actif. après ce traitement, a été vérifiée, de façon conventionnelle, par dosage et recherche des impuretés. La poudre obtenue a été mise en suspension dans de l'eau par simple agitation. La suspension obtenue est homogène et facilement administrée par une seringue.
Deux suspensions distinctes ont ete préparées, ä des concentrations respectives de 200 mg activite/ml et 500 mg activité/ml, exprimées en terme d'amoxicilline sous forme d'acide libre anhydre.
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Experience 1 : Algie à l'injection.
L'algie à l'injection a été étudiée chez le rat femelle de souche OFA selon la technique de E. CELOZZI, V. J. LOTTI, E. O. STAPLAY et A. K. MILLER decrite dans J. of Pharmaceutical Methods 1980, Volume 4, pages 285 ä 289.
Des lots de rats pesant de 60 à 80g ont reçu les quatre preparations suivantes : - amoxicilline trihydrate/eau pour préparation injectable (500 mg activité/ml) ; - amoxiciline trihydrate/eau pour preparation
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injectable (200 mg activite/ml) ; - sel sodique d'amoxicilline/eau pour préparation injectable (500 mg activité/ml) ; - sel sodique d'amoxicilline/alcool benzylique à
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3% (500 mg activite/ml).
L'alcool benzylique est ici utilise comme anesthésique local.
0, 1 ml de chacune des solutions et suspensions précitées est injecte dans le tissu subplantaire de la patte. La douleur causée par l'injection est évaluée par le test du réflexe de léchage de la patte du rat. On compte le nombre de léchages de la patte, consécutifs ä l'injection, par intervalle de 3 minutes sur une durée de 15 minutes. On definit le léchage de la patte comme suit : léchage suivi du détournement de la tete ou 5 secondes de léchage ininterrompu. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 1.
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Tebleeu 1.
Algie locale s g e oc p S p
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<tb>
<tb> aprNombre <SEP> moyen <SEP> de <SEP> lécheges <SEP> pendant <SEP> des
<tb> intervalles <SEP> de <SEP> 3 <SEP> minutes
<tb> N <SEP> 0-3 <SEP> 3-6 <SEP> 6-9 <SEP> 9-12 <SEP> 12-15 <SEP> 0-15
<tb> Amoxicilline <SEP> Na <SEP> 1 <SEP> g <SEP> 25 <SEP> 15,3 <SEP> 7,6 <SEP> 1,4 <SEP> 1,2 <SEP> 0,7 <SEP> 26.2
<tb> 2 <SEP> ml <SEP> eeu <SEP> distillée
<tb> Amoxicilline <SEP> Na <SEP> l <SEP> g <SEP> * <SEP>
<tb> 2ml <SEP> alcoolbenzylique <SEP> 9 <SEP> 0 <SEP> 0,1 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0.1
<tb> 3%
<tb> Amoxicilline <SEP> micronisée <SEP> 1
<tb> + <SEP> 2 <SEP> # <SEP> eau <SEP> distillée <SEP> 10 <SEP> 0.2 <SEP> 0,1 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0.3
<tb> Amoxycilline <SEP> micronisée <SEP> 1g <SEP> 5 <SEP> 0,2 <SEP> 0,2 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0,
4
<tb> + <SEP> 5 <SEP> ml <SEP> eau <SEP> distillée
<tb>
N z Nombre d'animaux
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Les résultats obtenus montrent que l'injection du sel sodique d'amoxicilline en solution aqueuse est douloureuse, en particulier lors des trois premières minutes. La douleur s'atténue ensuite. Au contraire, l'injection d'amoxicilline trihydrate en suspension dans l'eau est indolore quelle que soit sa concentration et le score obtenu est tout ä fait comparable ä celui obtenu avec un anesthésique local.
Expérience2. :Toléranceàl'injection intramusculaire
Ces expériences ont pour but d'étudier l'irritation musculaire provoquée au point d'injection et l'evolution dans le temps des lesions observées.
Le test est pratiqué chez 12 lapins Neo-zélandais adultes (élevage Froxfield Farms Hampshire).
Ces lapins sont repartis en 3 lots de 4 ; la region dorsolombaire est rasée, et ils subissent chacun 6 injections intramusculaires simultanées dans les muscles sacrospiraux d'un volume de 0, 5 ml, des compositions suivantes : - eau pour preparation injectable (E)
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- benzylique a 3% (B) alcool- amoxicilline sodique/alcool benzylique ä 3% (C + B) (concentration de 200mg activité/ml -amoxicillinetrihydrate/eau (200 mg activite/ml) (A + E)
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- 3% (A + B) (200 mg activité/ml).
Les trois groupes de lapins sont sacrifies respectivement 2, 5 et 14 jours après les injections.
On procède ensuite à l'examen macroscopique des sites d'injection. Les lesions sont mesurées et recoivent un score en fonction de leur intensité définie comme suit :
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0 : pas de modification 1 : atteinte tres légère
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2 : atteinte modérée
3 : atteinte marquee.
Les resultats individuels de cet examen macroscopique sont rapportés dans le tableau 2.
Les échantillons représentatifs de chaque site d'injection sont alors prélevés, inclus en paraffine, coupés ä 5 micromètres,colorés à l'hemalun-phloxine-safran et font l'objet d'un examen histologique habituel, dont les résultats sont donnés ci-après dans le tableau comparatif 3.
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Tableau 2.
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<tb>
<tb>
48 <SEP> heures <SEP> 5 <SEP> jours <SEP> 14 <SEP> jours
<tb> Taille <SEP> intensité <SEP> Taille <SEP> des <SEP> intensités <SEP> Taille <SEP> des <SEP> intensités
<tb> lésions <SEP> des <SEP> lésions <SEP> lésions <SEP> des <SEP> lésions <SEP> lésions <SEP> des <SEP> lésions
<tb> (mm) <SEP> (mm) <SEP> (mm)
<tb> Composition <SEP> lapin <SEP> 1 <SEP> lapin <SEP> 5 <SEP> lapin <SEP> 9
<tb> mort <SEP>
<tb> J+4A <SEP> + <SEP> E <SEP> 3 <SEP> # <SEP> 3 <SEP> 1 <SEP> 15 <SEP> # <SEP> 10 <SEP> 3 <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 1
<tb> A <SEP> + <SEP> B <SEP> 20 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 1 <SEP> 12 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 3 <SEP> 0 <SEP> 0
<tb> C <SEP> + <SEP> B <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 3 <SEP> 6 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 2
<tb> B <SEP> 20 <SEP> # <SEP> 10 <SEP> 3 <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 1 <SEP> 0 <SEP> 0
<tb> E <SEP> B <SEP> 3 <SEP> 4 <SEP> 1 <SEP> 15 <SEP> # <SEP> 8 <SEP> 2 <SEP> 15 <SEP> # <SEP> 10 <SEP> 1
<tb> lepin <SEP> 2 <SEP> lepin <SEP> 6 <SEP> lepin <SEP> 10
<tb> A <SEP> + <SEP> E <SEP> 8 <SEP> # <SEP> 8 <SEP> 1 <SEP> 3 <SEP> # <SEP> 2 <SEP> 1 <SEP> 17 <SEP> # <SEP> 8 <SEP> 2
<tb> A <SEP> + <SEP> B <SEP> 12 <SEP> # <SEP> 7 <SEP> 2 <SEP> non <SEP> mesurable <SEP> 1
<SEP> non <SEP> mesurable <SEP> 1
<tb> C <SEP> + <SEP> B <SEP> 20 <SEP> # <SEP> 15 <SEP> 2 <SEP> 18 <SEP> # <SEP> 15 <SEP> 2 <SEP> 6 <SEP> # <SEP> 3 <SEP> 1
<tb> B <SEP> 20 <SEP> # <SEP> 15 <SEP> 3 <SEP> 12 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 2 <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 2
<tb> E <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 8 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 2 <SEP> 10 <SEP> 3 <SEP> 5 <SEP> 1
<tb> lepin <SEP> 3 <SEP> lepin <SEP> 7 <SEP> lepin <SEP> 11
<tb> A <SEP> + <SEP> E <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 1 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0
<tb> A <SEP> + <SEP> B <SEP> 25 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 2 <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 4 <SEP> 1 <SEP> 0 <SEP> 0
<tb> C <SEP> + <SEP> B <SEP> 20 <SEP> # <SEP> 12 <SEP> 3 <SEP> 12 <SEP> # <SEP> 6 <SEP> 2 <SEP> 22 <SEP> # <SEP> 4 <SEP> 2
<tb> E <SEP> 1 <SEP> # <SEP> 1 <SEP> 1 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0
<tb> lapin <SEP> 4 <SEP> lapin <SEP> 8 <SEP> lapin12
<tb> mort <SEP>
<tb> A <SEP>
<tb> J+7A
<SEP> + <SEP> B <SEP> 20 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> # <SEP> 12 <SEP> # <SEP> 10 <SEP> 1 <SEP> 25 <SEP> # <SEP> 3 <SEP> 2
<tb> C <SEP> + <SEP> B <SEP> 15 <SEP> # <SEP> 9 <SEP> 3 <SEP> 8 <SEP> # <SEP> 2 <SEP> 2 <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 2
<tb> B <SEP> 13 <SEP> # <SEP> 4 <SEP> 2 <SEP> 15 <SEP> # <SEP> 13 <SEP> 2 <SEP> 15 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 2
<tb> E <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 1 <SEP> 1 <SEP> 3 <SEP> # <SEP> 2 <SEP> 1 <SEP> 5 <SEP> # <SEP> 4 <SEP> 1
<tb>
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Tableau 3.
EXAMENHISTOLOGIQUE-Résultatscomparés Dägdndrescence Régénération Infiltrat Fibrose hmorragie Total Fibres musc. Fibres musc. cellulaire
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<tb>
<tb> Amoxicilline <SEP> micronisée <SEP> + <SEP> eau <SEP> pp2 <SEP> (pour <SEP> préperation <SEP> injectable)
<tb> (i)(ii)(iii)
<tb> J <SEP> + <SEP> 2 <SEP> 4/4 <SEP> (2-3) <SEP> 0/4 <SEP> 4/4 <SEP> (1-2) <SEP> 0/4 <SEP> 0/4
<tb> J+5 <SEP> 3/5 <SEP> (2-4) <SEP> 2/5 <SEP> (1-2) <SEP> 3/5 <SEP> (2-3) <SEP> 0/5 <SEP> 1/5 <SEP> (1)
<tb> J+14 <SEP> 2/3 <SEP> (3) <SEP> 2/3 <SEP> (1-2) <SEP> 2/3 <SEP> (3) <SEP> 2/3 <SEP> (2-3) <SEP> 0/3
<tb> Total <SEP> 9/12 <SEP> 4/12 <SEP> 9/12 <SEP> 2/12 <SEP> 1/12 <SEP> 25
<tb> Amxicilline <SEP> micronisée <SEP> + <SEP> alcool <SEP> benzylique
<tb> J+2 <SEP> 3/4 <SEP> (3-4) <SEP> 0/4 <SEP> 3/4 <SEP> (2) <SEP> 0/4 <SEP> 3/4 <SEP> (1)
<tb> J5 <SEP> 4/5 <SEP> (3-4)
<SEP> 3/5 <SEP> (2) <SEP> 4/5 <SEP> (3) <SEP> 0/5 <SEP> 0/5
<tb> J <SEP> + <SEP> 14 <SEP> 1/3 <SEP> (3) <SEP> 1/3 <SEP> (2) <SEP> 1/3 <SEP> (3) <SEP> 1/3 <SEP> 0/3
<tb> Total <SEP> 8/12 <SEP> 4/12 <SEP> 8/12 <SEP> 1/12 <SEP> 3/12 <SEP> 24
<tb> Sel <SEP> sodique <SEP> + <SEP> alcool <SEP> benzylique
<tb> J <SEP> + <SEP> 2 <SEP> 3/4 <SEP> (3-4) <SEP> 0/4 <SEP> 3/4 <SEP> (1-2) <SEP> 0/4 <SEP> 2/4(2-3)
<tb> J <SEP> + <SEP> 5 <SEP> 5/5 <SEP> (3-4) <SEP> 5/5 <SEP> (1-3) <SEP> 5/5(2-3) <SEP> 0/5 <SEP> 2/5 <SEP> (1-2)
<tb> J <SEP> + <SEP> 14 <SEP> 3/3 <SEP> (2-4) <SEP> 3/3 <SEP> (2) <SEP> 3/3(3-4) <SEP> 1/3 <SEP> (3) <SEP> 0/3
<tb> Total <SEP> 11/12 <SEP> 8/12 <SEP> 11/12 <SEP> 1/12 <SEP> 4/12 <SEP> 35
<tb> Alcool <SEP> benzylique
<tb> J <SEP> + <SEP> 2 <SEP> 4/4 <SEP> (3-4) <SEP> 1/4 <SEP> (1) <SEP> 4/4 <SEP> (2) <SEP> 0/4 <SEP> 3/4 <SEP> (1-3)
<tb> J <SEP> + <SEP> 5 <SEP> 4/5 <SEP> (3-4)
<SEP> 3/5 <SEP> (1-3) <SEP> 4/5 <SEP> (2-3) <SEP> 0/5 <SEP> 1/5 <SEP> (2)
<tb> J+14 <SEP> 2/3 <SEP> (3) <SEP> 2/3 <SEP> (2) <SEP> 2/3 <SEP> (3) <SEP> 2/3 <SEP> (1-3) <SEP> 0/3
<tb> Total <SEP> 10/12 <SEP> 6/12 <SEP> 10/12 <SEP> 2/12 <SEP> 4/12 <SEP> 32
<tb> Eau <SEP> ppi
<tb> J <SEP> + <SEP> 2 <SEP> 2/4 <SEP> (1-2) <SEP> 0/4 <SEP> 2/4 <SEP> (1-3) <SEP> 0/4 <SEP> 1/4 <SEP> (3)
<tb> J <SEP> + <SEP> 5 <SEP> 1/5 <SEP> (30 <SEP> 1/5 <SEP> (3) <SEP> 1/5 <SEP> (3) <SEP> 0/5 <SEP> 1/5 <SEP> (2)
<tb> J <SEP> + <SEP> 14 <SEP> 1/3 <SEP> (1) <SEP> 1/3 <SEP> (1) <SEP> 0/3 <SEP> 0/3 <SEP> 0/3
<tb> Total <SEP> 4/12 <SEP> 2/12 <SEP> 3/12 <SEP> 0/12 <SEP> 2/12 <SEP> 11
<tb>
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(i) Nombre de lapins présentant la lésion (ii) Nombre de lapins examinEs (iii)
Intensité de la lésion
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Les tableaux 2 et 3 ont permis de classer les preparations de la plus irritante à la mieux tolérée. Ce classement est le suivant : - amoxicilline sodique/alcool benzylique à 3% - alcool benzylique à 3% - amoxicilline trihydrate micronisee/eau pour preparation injeetable et amoxicilline trihydrate micronisee/alcool benzylique - eau pour préparation injectable.
Le tableau 3 montre en partlculier les résultats médiocres de l'alcool benzylique utilisé seul, ou comme anesthesique local avec une solution d'amoxicilline sodique.
Experience 3 : Biodisponibilité
On a étudié t au moyen des tests usuels, la biodlsponibl1ité d'une suspension aqueuse de trihydrate d'amoxicilline micronisée en comparaison avec une solution aqueuse de sel sodique d'amoxicilline.
L'étude a été conduite chez le chien en utilisant d'une part de l'amoxicilline sodique reconstituée avec l'alcool benzylique à 3% comme solvant, et d'autre part la forme trihydrate en suspension dans l'eau pour préparation injectable.
6 chiens Beagle (3 mâles - 3 femelles) d'un poids compris entre 10, 8 kg et 14, 5 kg ont reçu par voie intramusculaire (à 1a dose de 50 mg ! kg) les deux préparations suivantes : - sel sodique d'amoxicilline/alcool benzylique ä
3% - trihydrate d'amoxicilline/eau pour préparation injectable.
Les taux sériques et les éliminations urinaires ont été déterminés par voie microbiologique par la méthode des disques (souche Sarcina Lutea ATCC 9341)
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Les prélèvements sanguins ont été effectues aux temps suivants : 30 min, lh, lh 30, 2h, 4h, 6h, 8h, 10h, 12h, 24h, 32h 48h après l'injection.
Les urines ont été recueillies de 0 à 6h, de 6 ä 12h, de 12 ä 24h.
Le tableau 4 donne pour chacune des composltlons étudiées, les valeurs des taux sériques dans le temps.
Le tableau 5 donne pour chaque composition étudiée les valeurs des excrétions urinaires dans le temps.
Le tableau 6 donne pour chaque composition étudiée les aires sous la courbe d'evolution des taux sériques dans le temps.
Ces résultats montrent que les pies sériques sont plus élevés et plus précoces pour la préparation d'amoxicilline sodique en solution, tandis qu'il y a persistance des taux sériques dans la composition
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micronisée. (voir tableau 4).
On a défini de façon arbitraire mais en fonction des concentrations inhibitrices habituelles de l'amoxicilline un seuil de concentration inhibitrice minimum ä 5 mcg/ml.
Le tableau 4 montre que la décroissance des taux sériques en dessous du seuil de 5 mcg/ml est atteinte en 5 heures pour le sel sodique d'amoxicilline, et en 10 heures après administration pour la préparation micronisée.
Les aires sous la courbe des concentrations sériques (tableau 5) ne sont pas statistiquement différenties pour les deux préparations.
L'élimination urinaire (tableau 6) en 24 heures n'est pas statistiquement différente pour les deux préparations ; pendant les six heures suivant l'administration d'antibiotique, elle est significativement plus élevée pour le sel sodique, par
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contre entre la sixième et la vingt-quatrIème heure elle est significativement plus élevée pour l'amoxicilline trihydrate.
Toutefois l'importante elimination de l'antibiotique dans l'intervalle 12-24 heures observée pour le trihydrate micronisé permet de prévoir la persistance des taux urinalres bien au-delà de vingt-quatre heures.
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Tableau 4.
Dose : 50 mg/kg
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<tb>
<tb> Animal <SEP> Taux <SEP> sériques <SEP> mcg/ml
<tb> Composition <SEP> No. <SEP> sexe <SEP> poids <SEP> 0,5 <SEP> 1 <SEP> 1,5 <SEP> 2 <SEP> 4 <SEP> 6 <SEP> 8 <SEP> 10 <SEP> 12 <SEP> 24 <SEP> 32 <SEP> 48 <SEP> (Temps <SEP> en
<tb> heures)
<tb> (kg) <SEP> heures) <SEP>
<tb> Sel <SEP> sodique <SEP> 1 <SEP> M <SEP> 14,5 <SEP> 88,0 <SEP> 70,0 <SEP> 50,0 <SEP> 36,4 <SEP> 7,0 <SEP> 2,3 <SEP> 0,7
<tb> d'amoxicil- <SEP> 2 <SEP> M <SEP> 13,1 <SEP> 102,0 <SEP> 78,0 <SEP> 50,0 <SEP> 33, <SEP> 3 <SEP> 7, <SEP> 0 <SEP> l, <SEP> B <SEP> 0, <SEP> 5 <SEP>
<tb> line <SEP> 3 <SEP> M <SEP> 14,5 <SEP> 83,0 <SEP> 88,0 <SEP> 53,0 <SEP> 34,6 <SEP> 6,0 <SEP> 1,8 <SEP> 0,6
<tb> 4 <SEP> F <SEP> 12, <SEP> 9 <SEP> 102, <SEP> 0 <SEP> 88, <SEP> 0 <SEP> 55, <SEP> 0 <SEP> 37, <SEP> 6 <SEP> 9,7 <SEP> 2,1 <SEP> 0,6
<tb> 5 <SEP> F <SEP> 12,7 <SEP> 83,0 <SEP> 65,0 <SEP> 46,
0 <SEP> 25,1 <SEP> 5,0 <SEP> 1,1 <SEP> 0,4
<tb> 6 <SEP> F <SEP> 10,8 <SEP> 92,0 <SEP> 57,0 <SEP> 31,0 <SEP> 17.9 <SEP> 2,2 <SEP> 0.5 <SEP> 0.2
<tb> Moyenne <SEP> 91,6 <SEP> 74,3 <SEP> 47,5 <SEP> 30,8 <SEP> 6,3 <SEP> 1,6 <SEP> 0,5
<tb> Trihydrate <SEP> 1 <SEP> M <SEP> 14,5 <SEP> 6,2 <SEP> 7,6 <SEP> 7,9 <SEP> 9,4 <SEP> 8,7 <SEP> 6,7 <SEP> 4,3 <SEP> 4,2 <SEP> 3. <SEP> 3 <SEP> 2.0 <SEP> 0.6 <SEP> 0.15
<tb> d'amoxicil- <SEP> 2 <SEP> M <SEP> 13,1 <SEP> 7,5 <SEP> 13. <SEP> 0 <SEP> 13,6 <SEP> 15,4 <SEP> 12,8 <SEP> 8,3 <SEP> 6,2 <SEP> 5,6 <SEP> 4,1 <SEP> 1,6 <SEP> 0,3 <SEP> 0.09
<tb> line
<tb> micronisé <SEP> 3 <SEP> M <SEP> 14.5 <SEP> 7.3 <SEP> 12.0 <SEP> 15,4 <SEP> 15,4 <SEP> 12,8 <SEP> 8,3 <SEP> 5,9 <SEP> 4,9 <SEP> 4,0 <SEP> 2,2 <SEP> 0.
<SEP> 4 <SEP> 0.12
<tb> 4 <SEP> F <SEP> 12,9 <SEP> 8,8 <SEP> 12,0 <SEP> 15.5 <SEP> 16.6 <SEP> 14.7 <SEP> 11,8 <SEP> 8,2 <SEP> 6,4 <SEP> 3,5 <SEP> 2,0 <SEP> 0,6 <SEP> < 0.10
<tb> 5 <SEP> F <SEP> 12, <SEP> 7 <SEP> 7, <SEP> 3 <SEP> 9,2 <SEP> 11,5 <SEP> 13,6 <SEP> 11,2 <SEP> 9,4 <SEP> 6,4 <SEP> 4,2 <SEP> 2,6 <SEP> 1,6 <SEP> 0,4 <SEP> < 0,10
<tb> 6 <SEP> F <SEP> 10.8 <SEP> 6,2 <SEP> 7,6 <SEP> 9,3 <SEP> 12, <SEP> 0 <SEP> 10, <SEP> 2 <SEP> 9, <SEP> 4 <SEP> 6. <SEP> 2 <SEP> 4. <SEP> 7 <SEP> 3. <SEP> 0 <SEP> 1, <SEP> 6 <SEP> 0, <SEP> 3 <SEP> (0, <SEP> 10 <SEP>
<tb> Moyenne <SEP> 7,21 <SEP> 10,23 <SEP> 12,20 <SEP> 13,7311.73 <SEP> 8.98 <SEP> 6,20 <SEP> 5,00 <SEP> 3,41 <SEP> 1,83 <SEP> 0,43 <SEP> 0,10
<tb>
<Desc/Clms Page number 15>
EMI15.1
Tableau 6.
Dose 50 mg/kg
EMI15.2
<tb>
<tb> :Composition <SEP> Chien <SEP> 0-6 <SEP> h <SEP> 6 <SEP> -12h <SEP> 12-24 <SEP> h <SEP> 0-24 <SEP> h
<tb> No. <SEP> mg/ <SEP> excrétions% <SEP> mg/ <SEP> excrétion% <SEP> mg/ <SEP> excrétion% <SEP> mg/excrétion%
<tb> Amoxicilline <SEP> 1 <SEP> 408, <SEP> 0 <SEP> 56, <SEP> 28 <SEP> 48. <SEP> 0 <SEP> 5, <SEP> 77 <SEP> 15. <SEP> 6 <SEP> 2, <SEP> 15 <SEP> 465. <SEP> 4 <SEP> 64. <SEP> 19 <SEP>
<tb> sodique <SEP> 2 <SEP> 394,0 <SEP> 60,15 <SEP> 23,0 <SEP> 3,51 <SEP> 1,2 <SEP> 0,18 <SEP> 418,2 <SEP> 63,81
<tb> 3 <SEP> 21. <SEP> 8 <SEP> 3, <SEP> 01 <SEP> 259, <SEP> 2 <SEP> 35, <SEP> 75 <SEP> 39. <SEP> 2 <SEP> 5, <SEP> 41 <SEP> 320, <SEP> 2 <SEP> 44, <SEP> 16 <SEP>
<tb> 4 <SEP> 355.
<SEP> 7 <SEP> 55,15 <SEP> 50,0 <SEP> 7,75 <SEP> 2,9 <SEP> 0,45 <SEP> 408,6 <SEP> 63,34
<tb> 5 <SEP> 317, <SEP> 4 <SEP> 49, <SEP> 98 <SEP> 41, <SEP> 9 <SEP> 6, <SEP> 60 <SEP> 4, <SEP> 1 <SEP> 0, <SEP> 65 <SEP> 363. <SEP> 4 <SEP> 57, <SEP> 23 <SEP>
<tb> 6 <SEP> 267. <SEP> 1 <SEP> 49, <SEP> 46 <SEP> 37. <SEP> 8 <SEP> 7. <SEP> 00 <SEP> 1, <SEP> 5 <SEP> 0, <SEP> 28 <SEP> 306, <SEP> 4 <SEP> 56. <SEP> 74 <SEP>
<tb> moyenne <SEP> 294,0 <SEP> 45,67 <SEP> 75,6 <SEP> 11,06 <SEP> 10. <SEP> 75 <SEP> 1,68 <SEP> 380,36 <SEP> 58,23
<tb> Trihydrate <SEP> 1 <SEP> 66,5 <SEP> 9,17 <SEP> 142. <SEP> 6 <SEP> 19,64 <SEP> 68,4 <SEP> 9,43 <SEP> 277,3 <SEP> 38,24
<tb> d'amoxicilline <SEP> 2 <SEP> 54.
<SEP> 9 <SEP> 8,38 <SEP> 174,7 <SEP> 26,67 <SEP> 81,8 <SEP> 12,49 <SEP> 311,4 <SEP> 47,54
<tb> micronisd <SEP> 3 <SEP> 53,9 <SEP> 6.62 <SEP> 105,6 <SEP> 16,90 <SEP> 183,6 <SEP> 29,36 <SEP> 343,1 <SEP> 54,89
<tb> 4 <SEP> 63,4 <SEP> 9,83 <SEP> 150,4 <SEP> 23,32 <SEP> 78,4 <SEP> 12,16 <SEP> 292,2 <SEP> 45,30
<tb> 5 <SEP> 71, <SEP> 4 <SEP> 11,24 <SEP> 166,5 <SEP> 26,22 <SEP> 83,1 <SEP> 13,09 <SEP> 321.0 <SEP> 50,55
<tb> 6 <SEP> 92, <SEP> 0 <SEP> 17,04 <SEP> 129,5 <SEP> 23,98 <SEP> 82,0 <SEP> 15,19 <SEP> 303,5 <SEP> 56,20
<tb> moyenne <SEP> 67, <SEP> 0 <SEP> 10,71 <SEP> 144,86 <SEP> 22,79 <SEP> 96,2 <SEP> 15,28 <SEP> 308.08 <SEP> 48.78
<tb>
<Desc/Clms Page number 16>
Tableau 5.
Aires sous les courbes mg/ml x h
EMI16.1
<tb>
<tb> No. <SEP> animal <SEP> Produits <SEP> administrés
<tb> sel <SEP> sodique <SEP> trihydrate
<tb> 1 <SEP> 168,80 <SEP> 120,89
<tb> 2 <SEP> 174, <SEP> 72 <SEP> 1S1, <SEP> l1 <SEP>
<tb> 3 <SEP> 173, <SEP> 45 <SEP> 156, <SEP> 15 <SEP>
<tb> 4 <SEP> 193, <SEP> 70 <SEP> 172, <SEP> 79 <SEP>
<tb> 5 <SEP> 140, <SEP> 97 <SEP> 129, <SEP> 19 <SEP>
<tb> 6 <SEP> 117,97 <SEP> 127,54
<tb> Moyenne <SEP> 161, <SEP> 60 <SEP> 194, <SEP> 94 <SEP>
<tb>
Les résultats ci-dessus permettent donc de penser que la composition pharmaceutique selon l'invention peut également etre administrée chez l'homme avec succès.
A cet egard les propriétés pharmacologiques d'une telle suspension n'ont pas besoin d'etre décrites ici, puisque ce sont celles du trihydrate d'amoxicilline qui est un compose dont les effets sont en soi connus depuis longtemps.
<Desc / Clms Page number 1>
Pharmaceutical composition for injection based on amoxicillin.
The present invention relates to a new injectable preparation based on amoxicillin.
Amoxicillin is an antibiotic from the betalactamine family, whose therapeutic value has been known for a long time.
Pharmaceutical compositions based on amoxicillin for oral administration can be easily prepared in all the usual forms such as, for example, capsules, tablets or other compositions intended for oral absorption.
Unlike this, the injectable preparations of such compositions require the use of soluble amoxicillin derivatives and an appropriate solvent, which may be water. Also, the soluble salts of amoxicll1ine. such as in particular sodium salt have been used until now for the realization of
EMI1.1
injections.
However, such solutions have limited stability and are therefore difficult to prepare industrially with satisfactory purity because the salts are degradable.
In addition, the intramuscular injection of preparations in aqueous solution is painful and irritating to the tissue. It therefore became necessary to add an anesthetic to these solutions. However, the choice of a local anesthetic to be used to make the injection tolerable is very limited, in particular due to the incompatibility of the amoxicillin salts with certain types of anesthetics.
Thus, an injectable preparation based on amoxicillin containing benzyl alcohol is known as a local anesthetic. This preparation should be injected immediately after reconstitution.
<Desc / Clms Page number 2>
However, this product has a low titer and the overall content of decomposition products and impurities is high, and can reach 10%. In addition, several injections of antibiotics must be administered per day to maintain the necessary serum concentrations.
In addition, benzyl alcohol, although effective against pain, nevertheless causes local irritation during intramuscular injection.
Due to the difficulties encountered with known injectable solutions, in particular based on sodium salt of amoxicillin, it was therefore necessary to consider an alternative formula.
The object of the present invention is to solve the aforementioned problems by proposing a pharmaceutical composition which is easy to inject, which has good purity and stability over time and which effectively combats local pain during injection without causing irritation. .
The solution proposed by the present invention, to solve this problem consists of an injectable pharmaceutical composition based on amoxicillin, characterized in that it comprises amoxicillin trihydrate in suspension in a suitable vehicle or liquid medium.
It has indeed been surprisingly discovered that the local tolerance to the injection of a suspension of amoxicillin trihydrate was better than that of an aqueous solution of sodium salt of amoxicillin.
The parenteral administration of suspensions meets a priori unfavorable opinion and is generally reserved for products which cannot be dissolved in conventional vehicles, the objection relating to poor local tolerance to injection.
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This is why until now, only soluble derivatives of amoxicillin have been used, and there was no reason for those skilled in the art to orient themselves towards amoxicillin derivatives, such as the trihydrate, suspended in a liquid medium.
According to a particular characteristic of the invention, the size of the particles of amoxicillin trihydrate in the suspension is chosen so as to allow the injection of the composition. Advantageously, this size is between approximately 1 and 25 microns and is preferably of the order of 5 microns.
According to another particular characteristic, the concentration of amoxicillin trihydrate in the suspension is between approximately 100 mg activity / ml and 700 mg activity / ml and is preferably between 200 and 500 mg activity / ml.
According to yet another characteristic. of the invention, the amoxicillin trihydrate is in micronized form in the solvent. Micronization is particularly advantageous because the conformation of the particles obtained is entirely compatible with the constraints of the injection.
The invention will be better illustrated on reading the explanatory description which follows, made with reference to the experiments and observations given below.
EMI3.1
only as an example.
Local pain after subplant injection in rats, local tolerance to intramuscular injection in rabbits and bioavailability in dogs of an aqueous suspension of micronized amoxicillin trihydrate, according to the invention, were studied in comparison with an aqueous solution of sodium salt of amoxicillin.
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The vehicle chosen for the comparison is water, which is the simplest liquid medium, and also the least expensive. However, any other suitable conventional liquid medium can be used without departing from the scope of the invention,
EMI4.1
Amoxicillin trihydrate was tnicronized by passage through a Christo Jet Mill device under strictly defined and reproducible conditions. This known technique is described for example by G. BOULLAY (Colloque APGI Dec. 1984).
The particle size analysis of the powder obtained reveals the following particle size distribution: approximately 80% of the particles have a size less than 5 microns; about 10% of the particles have a size of between 5 and 10 microns; about 10% of the particles have a size between 10 and 20 microns.
Previously mentioned, amicronisation of amoxicillin trihydrate is advantageous because it overcomes most of the constraints of injecting the suspension according to the invention. It is however understood that other techniques can be used, such as for example micro-grinding or
EMI4.2
prolonged grinding.
The integrity of the active ingredient. after this treatment, was verified, in a conventional manner, by assay and search for impurities. The powder obtained was suspended in water by simple stirring. The suspension obtained is homogeneous and easily administered by a syringe.
Two separate suspensions were prepared, at respective concentrations of 200 mg activity / ml and 500 mg activity / ml, expressed in terms of amoxicillin in the form of anhydrous free acid.
<Desc / Clms Page number 5>
Experience 1: Algie on injection.
The injection pain was studied in female OFA rats according to the technique of E. CELOZZI, V. J. LOTTI, E. O. STAPLAY and A. K. MILLER described in J. of Pharmaceutical Methods 1980, Volume 4, pages 285 to 289.
Lots of rats weighing 60 to 80 g received the following four preparations: - amoxicillin trihydrate / water for injection (500 mg activity / ml); - amoxicilin trihydrate / water for preparation
EMI5.1
injectable (200 mg activity / ml); - sodium salt of amoxicillin / water for injection (500 mg activity / ml); - sodium salt of amoxicillin / benzyl alcohol to
EMI5.2
3% (500 mg activity / ml).
Benzyl alcohol is used here as a local anesthetic.
0.1 ml of each of the above solutions and suspensions is injected into the subplantar tissue of the leg. The pain caused by the injection is evaluated by the rat paw licking reflex test. The number of lickings of the paw, consecutive to the injection, is counted in intervals of 3 minutes over a period of 15 minutes. We define the licking of the leg as follows: licking followed by the diversion of the head or 5 seconds of uninterrupted licking. The results obtained are presented in Table 1.
<Desc / Clms Page number 6>
EMI6.1
Tebleeu 1.
Algie locale s g e oc p S p
EMI6.2
<tb>
<tb> aprNumber <SEP> means <SEP> of <SEP> licks <SEP> during <SEP> of
<tb> <SEP> intervals of <SEP> 3 <SEP> minutes
<tb> N <SEP> 0-3 <SEP> 3-6 <SEP> 6-9 <SEP> 9-12 <SEP> 12-15 <SEP> 0-15
<tb> Amoxicillin <SEP> Na <SEP> 1 <SEP> g <SEP> 25 <SEP> 15.3 <SEP> 7.6 <SEP> 1.4 <SEP> 1.2 <SEP> 0.7 <SEP> 26.2
<tb> 2 <SEP> ml <SEP> eeu <SEP> distilled
<tb> Amoxicillin <SEP> Na <SEP> l <SEP> g <SEP> * <SEP>
<tb> 2ml <SEP> benzyl alcohol <SEP> 9 <SEP> 0 <SEP> 0.1 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0.1
<tb> 3%
<tb> Amoxicillin <SEP> micronized <SEP> 1
<tb> + <SEP> 2 <SEP> # <SEP> distilled water <SEP> <SEP> 10 <SEP> 0.2 <SEP> 0.1 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0.3
<tb> Amoxycillin <SEP> micronized <SEP> 1g <SEP> 5 <SEP> 0.2 <SEP> 0.2 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0,
4
<tb> + <SEP> 5 <SEP> ml <SEP> distilled water <SEP>
<tb>
N z Number of animals
<Desc / Clms Page number 7>
The results obtained show that the injection of the sodium salt of amoxicillin in aqueous solution is painful, in particular during the first three minutes. The pain then subsides. On the contrary, the injection of amoxicillin trihydrate suspended in water is painless whatever its concentration and the score obtained is quite comparable to that obtained with a local anesthetic.
Experience 2. : Tolerance to intramuscular injection
The purpose of these experiments is to study the muscle irritation caused at the injection site and the development over time of the lesions observed.
The test is carried out on 12 adult New Zealand rabbits (Froxfield Farms Hampshire).
These rabbits are divided into 3 lots of 4; the dorsolumbar region is shaved, and they each undergo 6 simultaneous intramuscular injections into the sacrospiral muscles with a volume of 0.5 ml, of the following compositions: - water for injectable preparation (E)
EMI7.1
- 3% benzyl (B) alcohol - sodium amoxicillin / 3% benzyl alcohol (C + B) (concentration of 200 mg activity / ml - amoxicillinetrihydrate / water (200 mg activity / ml) (A + E)
EMI7.2
- 3% (A + B) (200 mg activity / ml).
The three groups of rabbits are sacrificed respectively 2, 5 and 14 days after the injections.
A macroscopic examination of the injection sites is then carried out. Lesions are measured and scored according to their intensity defined as follows:
EMI7.3
0: no modification 1: very slight damage
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2: moderate impairment
3: marked impairment.
The individual results of this gross examination are reported in Table 2.
The representative samples of each injection site are then taken, included in paraffin, cut to 5 micrometers, stained with hemalun-phloxine-saffron and are the subject of a usual histological examination, the results of which are given below. after in comparison table 3.
<Desc / Clms Page number 9>
Table 2.
EMI9.1
<tb>
<tb>
48 <SEP> hours <SEP> 5 <SEP> days <SEP> 14 <SEP> days
<tb> Size <SEP> intensity <SEP> Size <SEP> of <SEP> intensities <SEP> Size <SEP> of <SEP> intensities
<tb> <SEP> lesions of <SEP> <SEP> lesions <SEP> lesions of <SEP> lesions <SEP> lesions <SEP> of <SEP> lesions
<tb> (mm) <SEP> (mm) <SEP> (mm)
<tb> Composition <SEP> rabbit <SEP> 1 <SEP> rabbit <SEP> 5 <SEP> rabbit <SEP> 9
<tb> dead <SEP>
<tb> D + 4Y <SEP> + <SEP> E <SEP> 3 <SEP> # <SEP> 3 <SEP> 1 <SEP> 15 <SEP> # <SEP> 10 <SEP> 3 <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 1
<tb> A <SEP> + <SEP> B <SEP> 20 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 1 <SEP> 12 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 3 <SEP> 0 <SEP > 0
<tb> C <SEP> + <SEP> B <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 3 <SEP> 6 <SEP> # <SEP> 5 <SEP > 2
<tb> B <SEP> 20 <SEP> # <SEP> 10 <SEP> 3 <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 1 <SEP> 0 <SEP> 0
<tb> E <SEP> B <SEP> 3 <SEP> 4 <SEP> 1 <SEP> 15 <SEP> # <SEP> 8 <SEP> 2 <SEP> 15 <SEP> # <SEP> 10 <SEP > 1
<tb> lepin <SEP> 2 <SEP> lepin <SEP> 6 <SEP> lepin <SEP> 10
<tb> A <SEP> + <SEP> E <SEP> 8 <SEP> # <SEP> 8 <SEP> 1 <SEP> 3 <SEP> # <SEP> 2 <SEP> 1 <SEP> 17 <SEP > # <SEP> 8 <SEP> 2
<tb> A <SEP> + <SEP> B <SEP> 12 <SEP> # <SEP> 7 <SEP> 2 <SEP> no <SEP> measurable <SEP> 1
<SEP> no <SEP> measurable <SEP> 1
<tb> C <SEP> + <SEP> B <SEP> 20 <SEP> # <SEP> 15 <SEP> 2 <SEP> 18 <SEP> # <SEP> 15 <SEP> 2 <SEP> 6 <SEP > # <SEP> 3 <SEP> 1
<tb> B <SEP> 20 <SEP> # <SEP> 15 <SEP> 3 <SEP> 12 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 2 <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 5 <SEP > 2
<tb> E <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 8 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 2 <SEP> 10 <SEP> 3 <SEP> 5 <SEP> 1
<tb> lepin <SEP> 3 <SEP> lepin <SEP> 7 <SEP> lepin <SEP> 11
<tb> A <SEP> + <SEP> E <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 1 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0
<tb> A <SEP> + <SEP> B <SEP> 25 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> 2 <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 4 <SEP> 1 <SEP> 0 <SEP > 0
<tb> C <SEP> + <SEP> B <SEP> 20 <SEP> # <SEP> 12 <SEP> 3 <SEP> 12 <SEP> # <SEP> 6 <SEP> 2 <SEP> 22 <SEP > # <SEP> 4 <SEP> 2
<tb> E <SEP> 1 <SEP> # <SEP> 1 <SEP> 1 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0 <SEP> 0
<tb> rabbit <SEP> 4 <SEP> rabbit <SEP> 8 <SEP> rabbit12
<tb> dead <SEP>
<tb> A <SEP>
<tb> D + 7Y
<SEP> + <SEP> B <SEP> 20 <SEP> # <SEP> 5 <SEP> # <SEP> 12 <SEP> # <SEP> 10 <SEP> 1 <SEP> 25 <SEP> # <SEP > 3 <SEP> 2
<tb> C <SEP> + <SEP> B <SEP> 15 <SEP> # <SEP> 9 <SEP> 3 <SEP> 8 <SEP> # <SEP> 2 <SEP> 2 <SEP> 10 <SEP > # <SEP> 5 <SEP> 2
<tb> B <SEP> 13 <SEP> # <SEP> 4 <SEP> 2 <SEP> 15 <SEP> # <SEP> 13 <SEP> 2 <SEP> 15 <SEP> # <SEP> 5 <SEP > 2
<tb> E <SEP> 10 <SEP> # <SEP> 1 <SEP> 1 <SEP> 3 <SEP> # <SEP> 2 <SEP> 1 <SEP> 5 <SEP> # <SEP> 4 <SEP > 1
<tb>
<Desc / Clms Page number 10>
Table 3.
HISTOLOGICAL EXAMINATION-Compared Results Dägdndrescence Regeneration Infiltrate Fibrosis hemorrhage Total Fibers musk. Musk fibers. cellular
EMI10.1
<tb>
<tb> Amoxicillin <SEP> micronized <SEP> + <SEP> water <SEP> pp2 <SEP> (for <SEP> preperation <SEP> injectable)
<tb> (i) (ii) (iii)
<tb> J <SEP> + <SEP> 2 <SEP> 4/4 <SEP> (2-3) <SEP> 0/4 <SEP> 4/4 <SEP> (1-2) <SEP> 0 / 4 <SEP> 0/4
<tb> D + 5 <SEP> 3/5 <SEP> (2-4) <SEP> 2/5 <SEP> (1-2) <SEP> 3/5 <SEP> (2-3) <SEP > 0/5 <SEP> 1/5 <SEP> (1)
<tb> D + 14 <SEP> 2/3 <SEP> (3) <SEP> 2/3 <SEP> (1-2) <SEP> 2/3 <SEP> (3) <SEP> 2/3 <SEP> (2-3) <SEP> 0/3
<tb> Total <SEP> 9/12 <SEP> 4/12 <SEP> 9/12 <SEP> 2/12 <SEP> 1/12 <SEP> 25
<tb> Amxicillin <SEP> micronized <SEP> + <SEP> alcohol <SEP> benzyl
<tb> D + 2 <SEP> 3/4 <SEP> (3-4) <SEP> 0/4 <SEP> 3/4 <SEP> (2) <SEP> 0/4 <SEP> 3/4 <SEP> (1)
<tb> D5 <SEP> 4/5 <SEP> (3-4)
<SEP> 3/5 <SEP> (2) <SEP> 4/5 <SEP> (3) <SEP> 0/5 <SEP> 0/5
<tb> J <SEP> + <SEP> 14 <SEP> 1/3 <SEP> (3) <SEP> 1/3 <SEP> (2) <SEP> 1/3 <SEP> (3) <SEP > 1/3 <SEP> 0/3
<tb> Total <SEP> 8/12 <SEP> 4/12 <SEP> 8/12 <SEP> 1/12 <SEP> 3/12 <SEP> 24
<tb> Salt <SEP> sodium <SEP> + <SEP> alcohol <SEP> benzyl
<tb> J <SEP> + <SEP> 2 <SEP> 3/4 <SEP> (3-4) <SEP> 0/4 <SEP> 3/4 <SEP> (1-2) <SEP> 0 / 4 <SEP> 2/4 (2-3)
<tb> J <SEP> + <SEP> 5 <SEP> 5/5 <SEP> (3-4) <SEP> 5/5 <SEP> (1-3) <SEP> 5/5 (2-3 ) <SEP> 0/5 <SEP> 2/5 <SEP> (1-2)
<tb> J <SEP> + <SEP> 14 <SEP> 3/3 <SEP> (2-4) <SEP> 3/3 <SEP> (2) <SEP> 3/3 (3-4) < SEP> 1/3 <SEP> (3) <SEP> 0/3
<tb> Total <SEP> 11/12 <SEP> 8/12 <SEP> 11/12 <SEP> 1/12 <SEP> 4/12 <SEP> 35
<tb> Benzyl alcohol <SEP>
<tb> J <SEP> + <SEP> 2 <SEP> 4/4 <SEP> (3-4) <SEP> 1/4 <SEP> (1) <SEP> 4/4 <SEP> (2) <SEP> 0/4 <SEP> 3/4 <SEP> (1-3)
<tb> J <SEP> + <SEP> 5 <SEP> 4/5 <SEP> (3-4)
<SEP> 3/5 <SEP> (1-3) <SEP> 4/5 <SEP> (2-3) <SEP> 0/5 <SEP> 1/5 <SEP> (2)
<tb> D + 14 <SEP> 2/3 <SEP> (3) <SEP> 2/3 <SEP> (2) <SEP> 2/3 <SEP> (3) <SEP> 2/3 <SEP > (1-3) <SEP> 0/3
<tb> Total <SEP> 10/12 <SEP> 6/12 <SEP> 10/12 <SEP> 2/12 <SEP> 4/12 <SEP> 32
<tb> Water <SEP> ppi
<tb> J <SEP> + <SEP> 2 <SEP> 2/4 <SEP> (1-2) <SEP> 0/4 <SEP> 2/4 <SEP> (1-3) <SEP> 0 / 4 <SEP> 1/4 <SEP> (3)
<tb> J <SEP> + <SEP> 5 <SEP> 1/5 <SEP> (30 <SEP> 1/5 <SEP> (3) <SEP> 1/5 <SEP> (3) <SEP> 0/5 <SEP> 1/5 <SEP> (2)
<tb> J <SEP> + <SEP> 14 <SEP> 1/3 <SEP> (1) <SEP> 1/3 <SEP> (1) <SEP> 0/3 <SEP> 0/3 <SEP > 0/3
<tb> Total <SEP> 4/12 <SEP> 2/12 <SEP> 3/12 <SEP> 0/12 <SEP> 2/12 <SEP> 11
<tb>
EMI10.2
(i) Number of rabbits presenting the lesion (ii) Number of rabbits examined (iii)
Intensity of the lesion
<Desc / Clms Page number 11>
Tables 2 and 3 were used to classify the preparations from the most irritant to the best tolerated. This classification is as follows: - sodium amoxicillin / 3% benzyl alcohol - 3% benzyl alcohol - amoxicillin micronized trihydrate / water for injectable preparation and amoxicillin micronized trihydrate / benzyl alcohol - water for injectable preparation.
Table 3 shows in particular the poor results of benzyl alcohol used alone, or as a local anesthetic with a solution of sodium amoxicillin.
Experience 3: Bioavailability
The bioavailability of an aqueous suspension of micronized amoxicillin trihydrate was studied by means of the usual tests in comparison with an aqueous solution of sodium salt of amoxicillin.
The study was conducted in dogs using on the one hand amoxicillin sodium reconstituted with benzyl alcohol at 3% as solvent, and on the other hand the trihydrate form in suspension in water for injection.
6 Beagle dogs (3 males - 3 females) weighing between 10.8 kg and 14.5 kg received intramuscularly (at a dose of 50 mg! Kg) the following two preparations: - sodium salt of amoxicillin / benzyl alcohol ä
3% - amoxicillin trihydrate / water for injection.
Serum levels and urinary excretion were determined microbiologically by the disc method (Sarcina Lutea ATCC 9341 strain)
<Desc / Clms Page number 12>
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The blood samples were taken at the following times: 30 min, 1h, 1h 30m, 2h, 4h, 6h, 8h, 10h, 12h, 24h, 32h 48h after the injection.
Urine was collected from 0 to 6h, from 6 to 12h, from 12 to 24.
Table 4 gives for each of the composltlons studied, the values of the serum levels over time.
Table 5 gives for each composition studied the values of urinary excretion over time.
Table 6 gives for each composition studied the areas under the curve of evolution of serum levels over time.
These results show that the serum magpies are higher and earlier for the preparation of amoxicillin sodium in solution, while there is persistence of serum levels in the composition.
EMI12.2
micronized. (see table 4).
A minimum inhibitory concentration threshold of 5 mcg / ml has been defined arbitrarily, but as a function of the usual inhibitory concentrations of amoxicillin.
Table 4 shows that the decrease in serum levels below the threshold of 5 mcg / ml is reached in 5 hours for the sodium salt of amoxicillin, and in 10 hours after administration for the micronized preparation.
The areas under the serum concentration curve (Table 5) are not statistically different for the two preparations.
Urinary elimination (Table 6) in 24 hours is not statistically different for the two preparations; during the six hours following antibiotic administration, it is significantly higher for sodium salt, for
<Desc / Clms Page number 13>
against between the sixth and the twenty-fourth hour it is significantly higher for the amoxicillin trihydrate.
However, the significant elimination of the antibiotic in the 12-24 hour interval observed for micronized trihydrate makes it possible to predict the persistence of urinal levels well beyond twenty-four hours.
<Desc / Clms Page number 14>
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Table 4.
Dose: 50 mg / kg
EMI14.2
<tb>
<tb> Animal <SEP> Serum <SEP> rate <SEP> mcg / ml
<tb> Composition <SEP> No. <SEP> gender <SEP> weight <SEP> 0.5 <SEP> 1 <SEP> 1.5 <SEP> 2 <SEP> 4 <SEP> 6 <SEP> 8 < SEP> 10 <SEP> 12 <SEP> 24 <SEP> 32 <SEP> 48 <SEP> (Time <SEP> in
<tb> hours)
<tb> (kg) <SEP> hours) <SEP>
<tb> Salt <SEP> sodium <SEP> 1 <SEP> M <SEP> 14.5 <SEP> 88.0 <SEP> 70.0 <SEP> 50.0 <SEP> 36.4 <SEP> 7 , 0 <SEP> 2.3 <SEP> 0.7
<tb> d'amoxicil- <SEP> 2 <SEP> M <SEP> 13.1 <SEP> 102.0 <SEP> 78.0 <SEP> 50.0 <SEP> 33, <SEP> 3 <SEP > 7, <SEP> 0 <SEP> l, <SEP> B <SEP> 0, <SEP> 5 <SEP>
<tb> line <SEP> 3 <SEP> M <SEP> 14.5 <SEP> 83.0 <SEP> 88.0 <SEP> 53.0 <SEP> 34.6 <SEP> 6.0 <SEP > 1.8 <SEP> 0.6
<tb> 4 <SEP> F <SEP> 12, <SEP> 9 <SEP> 102, <SEP> 0 <SEP> 88, <SEP> 0 <SEP> 55, <SEP> 0 <SEP> 37, < SEP> 6 <SEP> 9.7 <SEP> 2.1 <SEP> 0.6
<tb> 5 <SEP> F <SEP> 12.7 <SEP> 83.0 <SEP> 65.0 <SEP> 46,
0 <SEP> 25.1 <SEP> 5.0 <SEP> 1.1 <SEP> 0.4
<tb> 6 <SEP> F <SEP> 10.8 <SEP> 92.0 <SEP> 57.0 <SEP> 31.0 <SEP> 17.9 <SEP> 2.2 <SEP> 0.5 <SEP> 0.2
<tb> Average <SEP> 91.6 <SEP> 74.3 <SEP> 47.5 <SEP> 30.8 <SEP> 6.3 <SEP> 1.6 <SEP> 0.5
<tb> Trihydrate <SEP> 1 <SEP> M <SEP> 14.5 <SEP> 6.2 <SEP> 7.6 <SEP> 7.9 <SEP> 9.4 <SEP> 8.7 <SEP > 6.7 <SEP> 4.3 <SEP> 4.2 <SEP> 3. <SEP> 3 <SEP> 2.0 <SEP> 0.6 <SEP> 0.15
<tb> d'Amoxicil- <SEP> 2 <SEP> M <SEP> 13.1 <SEP> 7.5 <SEP> 13. <SEP> 0 <SEP> 13.6 <SEP> 15.4 <SEP > 12.8 <SEP> 8.3 <SEP> 6.2 <SEP> 5.6 <SEP> 4.1 <SEP> 1.6 <SEP> 0.3 <SEP> 0.09
<tb> line
<tb> micronized <SEP> 3 <SEP> M <SEP> 14.5 <SEP> 7.3 <SEP> 12.0 <SEP> 15.4 <SEP> 15.4 <SEP> 12.8 <SEP> 8.3 <SEP > 5.9 <SEP> 4.9 <SEP> 4.0 <SEP> 2.2 <SEP> 0.
<SEP> 4 <SEP> 0.12
<tb> 4 <SEP> F <SEP> 12.9 <SEP> 8.8 <SEP> 12.0 <SEP> 15.5 <SEP> 16.6 <SEP> 14.7 <SEP> 11.8 <SEP> 8.2 <SEP> 6.4 <SEP> 3.5 <SEP> 2.0 <SEP> 0.6 <SEP> <0.10
<tb> 5 <SEP> F <SEP> 12, <SEP> 7 <SEP> 7, <SEP> 3 <SEP> 9.2 <SEP> 11.5 <SEP> 13.6 <SEP> 11.2 <SEP> 9.4 <SEP> 6.4 <SEP> 4.2 <SEP> 2.6 <SEP> 1.6 <SEP> 0.4 <SEP> <0.10
<tb> 6 <SEP> F <SEP> 10.8 <SEP> 6.2 <SEP> 7.6 <SEP> 9.3 <SEP> 12, <SEP> 0 <SEP> 10, <SEP> 2 <SEP > 9, <SEP> 4 <SEP> 6. <SEP> 2 <SEP> 4. <SEP> 7 <SEP> 3. <SEP> 0 <SEP> 1, <SEP> 6 <SEP> 0, <SEP > 3 <SEP> (0, <SEP> 10 <SEP>
<tb> Average <SEP> 7.21 <SEP> 10.23 <SEP> 12.20 <SEP> 13.7311.73 <SEP> 8.98 <SEP> 6.20 <SEP> 5.00 <SEP> 3.41 <SEP> 1.83 <SEP> 0.43 <SEP> 0.10
<tb>
<Desc / Clms Page number 15>
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Table 6.
Dose 50 mg / kg
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<tb>
<tb>: Composition <SEP> Dog <SEP> 0-6 <SEP> h <SEP> 6 <SEP> -12h <SEP> 12-24 <SEP> h <SEP> 0-24 <SEP> h
<tb> No. <SEP> mg / <SEP> excretion% <SEP> mg / <SEP> excretion% <SEP> mg / <SEP> excretion% <SEP> mg / excretion%
<tb> Amoxicillin <SEP> 1 <SEP> 408, <SEP> 0 <SEP> 56, <SEP> 28 <SEP> 48. <SEP> 0 <SEP> 5, <SEP> 77 <SEP> 15. < SEP> 6 <SEP> 2, <SEP> 15 <SEP> 465. <SEP> 4 <SEP> 64. <SEP> 19 <SEP>
<tb> sodium <SEP> 2 <SEP> 394.0 <SEP> 60.15 <SEP> 23.0 <SEP> 3.51 <SEP> 1.2 <SEP> 0.18 <SEP> 418.2 <SEP> 63.81
<tb> 3 <SEP> 21. <SEP> 8 <SEP> 3, <SEP> 01 <SEP> 259, <SEP> 2 <SEP> 35, <SEP> 75 <SEP> 39. <SEP> 2 < SEP> 5, <SEP> 41 <SEP> 320, <SEP> 2 <SEP> 44, <SEP> 16 <SEP>
<tb> 4 <SEP> 355.
<SEP> 7 <SEP> 55.15 <SEP> 50.0 <SEP> 7.75 <SEP> 2.9 <SEP> 0.45 <SEP> 408.6 <SEP> 63.34
<tb> 5 <SEP> 317, <SEP> 4 <SEP> 49, <SEP> 98 <SEP> 41, <SEP> 9 <SEP> 6, <SEP> 60 <SEP> 4, <SEP> 1 < SEP> 0, <SEP> 65 <SEP> 363. <SEP> 4 <SEP> 57, <SEP> 23 <SEP>
<tb> 6 <SEP> 267. <SEP> 1 <SEP> 49, <SEP> 46 <SEP> 37. <SEP> 8 <SEP> 7. <SEP> 00 <SEP> 1, <SEP> 5 < SEP> 0, <SEP> 28 <SEP> 306, <SEP> 4 <SEP> 56. <SEP> 74 <SEP>
<tb> mean <SEP> 294.0 <SEP> 45.67 <SEP> 75.6 <SEP> 11.06 <SEP> 10. <SEP> 75 <SEP> 1.68 <SEP> 380.36 < SEP> 58.23
<tb> Trihydrate <SEP> 1 <SEP> 66.5 <SEP> 9.17 <SEP> 142. <SEP> 6 <SEP> 19.64 <SEP> 68.4 <SEP> 9.43 <SEP> 277.3 <SEP> 38.24
<tb> of amoxicillin <SEP> 2 <SEP> 54.
<SEP> 9 <SEP> 8.38 <SEP> 174.7 <SEP> 26.67 <SEP> 81.8 <SEP> 12.49 <SEP> 311.4 <SEP> 47.54
<tb> micronisd <SEP> 3 <SEP> 53.9 <SEP> 6.62 <SEP> 105.6 <SEP> 16.90 <SEP> 183.6 <SEP> 29.36 <SEP> 343.1 <SEP > 54.89
<tb> 4 <SEP> 63.4 <SEP> 9.83 <SEP> 150.4 <SEP> 23.32 <SEP> 78.4 <SEP> 12.16 <SEP> 292.2 <SEP> 45 ,30
<tb> 5 <SEP> 71, <SEP> 4 <SEP> 11.24 <SEP> 166.5 <SEP> 26.22 <SEP> 83.1 <SEP> 13.09 <SEP> 321.0 <SEP> 50.55
<tb> 6 <SEP> 92, <SEP> 0 <SEP> 17.04 <SEP> 129.5 <SEP> 23.98 <SEP> 82.0 <SEP> 15.19 <SEP> 303.5 < SEP> 56.20
<tb> mean <SEP> 67, <SEP> 0 <SEP> 10.71 <SEP> 144.86 <SEP> 22.79 <SEP> 96.2 <SEP> 15.28 <SEP> 308.08 <SEP> 48.78
<tb>
<Desc / Clms Page number 16>
Table 5.
Areas under the mg / ml x h curves
EMI16.1
<tb>
<tb> No. <SEP> animal <SEP> Products <SEP> administered
<tb> salt <SEP> sodium <SEP> trihydrate
<tb> 1 <SEP> 168.80 <SEP> 120.89
<tb> 2 <SEP> 174, <SEP> 72 <SEP> 1S1, <SEP> l1 <SEP>
<tb> 3 <SEP> 173, <SEP> 45 <SEP> 156, <SEP> 15 <SEP>
<tb> 4 <SEP> 193, <SEP> 70 <SEP> 172, <SEP> 79 <SEP>
<tb> 5 <SEP> 140, <SEP> 97 <SEP> 129, <SEP> 19 <SEP>
<tb> 6 <SEP> 117.97 <SEP> 127.54
<tb> Average <SEP> 161, <SEP> 60 <SEP> 194, <SEP> 94 <SEP>
<tb>
The above results therefore suggest that the pharmaceutical composition according to the invention can also be administered to humans successfully.
In this regard, the pharmacological properties of such a suspension need not be described here, since they are those of amoxicillin trihydrate which is a compound whose effects have been known per se for a long time.