MXPA06010922A - Composiciones hmb y usos de las mismas. - Google Patents

Abstract

La presente invencion se refiere a metodos para la prevencion y tratamiento de enfermedades inflamatorias cronicas, cancer y perdida de peso involuntaria. En la practica de la presente invencion a los pacientes se administra entericamente HMB solo o alternativamente en combinacion con eicosapentanoico (20:5 w-3), FOS, carnitina y mezclas de los mismos. HMB puede agregarse a productos alimenticios comprendiendo una fuente de amino-nitrogeno enriquecido con aminoacidos neutrales grandes tales como leucina, isoleucina, valina, tirosina, treonina y fenilalanina y carecen substancialmente en aminoacidos libres.

Description

pulmonar obstructiva crónica (COPD), falla cardiaca crónica (CH F), falla renal , SI DA, demencia , enfermedad crónica del h ígado y cáncer. Con frecuencia es independiente de otros indicadores de severidad de enfermedad. (Witte, K. K. and Clark, A. L. ; Nutritonal abnormalities contributing to cachexia in chorinic illness, International Journal of Cardiology 85:23-31 , 2002). Enfermedad pulmonar con frecuencia se asocia con caquexia, y números substanciales de pacientes padeciendo de COPD, particularmente efisema, demacrándose durante el curso de la enfermedad . La pérdida de peso es un factor de riesgo independiente para prognosis, y con frecuencia se asocia con consumo de oxígeno incrementada. Esto se ha enlazado con desarrollo de metabolismo de energía del músculo ineficiente (Kutsuzawa, T. et al., : M uscle energy metabolism and nutritional status in patients with ch ronic obstructive pulmonary disease. Am. J . Respir. Crit. Care Med . 152(2) :647-652, 1 995) . COPD también se asocia con una respuesta inflamatoria sistémica elevada general, reflejada por concentraciones elevadas de citoquinas pro-inflamatorias y proteínas de fase aguda en la sangre periférica (Schols, A. M . et al. : Evidence for a relation between metabolic derangements and increased levéis of inflammatory mediators a subgroup of patients with chronic obstructive pulmonary diseases. Thorax 51 :81 9-824, 1 996; Takabatake, N . , er al. : Circulating leptin in patients with chronic obstructive pulmonary desease. Am J Respir Crit Ca e Med 1 59: 121 5-121 9, 1 999; Dentener, M .A. ef al. : Systemic anti-inflammatory mediators in COPD: increase in soluble interleukin I receptor I I during treatment of exacerbations. Thorax 56:721 -726, 2001 ) . Tales cambios con frecuencia se asocian con síndromes de desperdicio muscular. Estudios con extractos musculares y músculos incubados sugieren que la trayectoria de proteosoma-ubiquitin dependiente de ATP es responsable de la mayoría de la proteolisis incrementada que resulta por último en desperdicio muscular. En particu lar, niveles incrementados de proteínas conjugadas con ubiq uitin , e incrementos en niveles de mARN para poliubiquitin, ciertas subunidades de proteosoma y la enzima conj ugando ubiquitin E214K son características encontradas en la mayoría de los músculos atrofiados (Schols, A. M . W. J . : Pulmonary cachexia. I ntl J Cardiology 85: 1 01 -1 10, 2002; Jagoe, R. T and Goldberg , A. L. : What do we really know about the ubiquitin-proteosome pathway in muscle atrophy? Curr Opin Clin Nutr Metab Care 4: 1 83-1 90, 2001 ) . La mayoría de los pacientes con cáncer cuya enfermedad progresa a enfermedad metastática desarrollan caquexia durante su programa de tratamiento y la caquexia contribuye a sus muertes. La frecuencia de pérdida de peso en pacientes con cáncer varía de 40% para pacientes con cáncer de mama, leucemia mielocítica aguda, y sarcoma a más del 80% en pacientes con carcinoma del páncreas y estómago. Aproximadamente 60% de pacientes con carcinomas del pulmón, colón y próstata han experimentado pérdida de peso antes de comenzar la quimioterapia. Aunque la relación entre malnutrición de pretratamiento (pérdida de peso) y resultado adverso se establece, ninguna relación consistente se ha demostrado entre el desarrollo de caquexia y tamaño de tumor, etapa de enfermedad , y tipo o duración de la enfermedad. Caquexia de cáncer no es simplemente un efecto local del tumor. Las alteraciones en proteína, g rasa y metabolismo de carbohidrato ocurren comúnmente. Por ejemplo, anormalidades en metabolismo de carbohidrato incluyen tasas incrementadas de cambio de glucosa total, gluconeogenesis hepática incrementada, intolerancia a glucosa y niveles de glucosa elevados. Lipólisis incrementada, ácido graso libre incrementado y cambio de glicerol, hiperlipidemia, y actividad de lipasa de lipoproteína reducida se observan frecuentemente. La pérdida de peso asociada con caquexia de cáncer se causa no solamente por una reducción en tiendas de grasa corporales sino que también por una reducción en masa de proteína corporal total, con desperdicio muscular esquelético extensivo. El cambio de proteína incrementado y oxidación de aminoácido deficientemente regulada también puede ser importante. La presencia de factores derivados de huésped producidos en respuesta al cáncer se ha implicado como agentes causantes de caq uexia, por ejemplo, factor de necrosis de tumor (TNF) o caquectin, interleukin-1 (I L-1 ) , I L-6 , gamma-interferón (I FN), y prostaglandinas (PGs) (por ejemplo, PG E2). La pérdida de peso es común en pacientes con carcinomas del pulmón y tracto gastrointestinal, resultando en una pérdida masiva de tanto grasa corporal como proteína muscular, aunque la proteína no muscular permanece sin afectar. Mientras la pérdida de grasa corporal es importante en términos de reservas de energ ía, es la pérdida de proteína muscular esquelética la que resulta en inmovilidad, y eventualmente deterioro de función muscular respiratoria, conduciendo a muerte de neumonía hipostática. Aunque caquexia se acompaña frecuentemente por anorexia, complementación nutricional sola es incapaz de mantener peso corporal estable y cualquier peso que se obtiene se debe a un incremento en tejido adioposo y agua en lugar de masa corporal magra. Lo mismo es verdadero para estimulantes de apetito, tales como acetato de megestrol y acetato de medroxiprogesterona, sugiriendo que la pérdida de masa corporal mag ra se debe a factores diferentes a insuficiencia de energ ía. La masa muscular esquelética es un equilibrio entre la tasa de síntesis de prote ína y la tasa de degradación . Los pacientes con caquexia de cáncer muestran una depresión de síntesis de proteína en músculo esquelético y u n incremento en degradación de proteína, que se refleja en una expresión incrementada de la trayectoria proteolítica de proteosoma-ubiquitin , el determinante principal de degradación de proteína. De esta manera, el músculo esquelético de pacientes de cáncer caquético muestra expresión incrementada de mARN tanto para subunidades de proteasoma como ubiquitin, mientras la actividad proteolítica de proteasoma incrementó en paralelo con expresión de ubiquitin . La inhabilidad de estímulos anabólicos para incrementar masa corporal magra en pacientes caquéticos sugiere que la degradación de proteína debe atenuarse antes de que la masa muscular pueda incrementar. Ácido eicosapentanóico (EPA), subregula la expresión incrementada de la trayectoria proteol ítica de ubiq uitin-proteasoma en el músculo esquelético de ratones caquéticos, y se ha mostrado que estabiliza el peso corporal en pacientes caquéticos con cáncer pancreático. Cuando los pacientes consumieron un complemento denso de energ ía conteniendo 32g proteína y 2 g peso corporal EPA aumentó y esto se atribuye solamente a un incremento en masa corporal magra (Barber, M . D. , Ross, J .A. , Voss. A.C. , Tisdale, M .J . , Fearon , K.C. H. El efecto de un complemento nutricional oral enriquecido con aceite de pescado en pérdida de peso en pacientes con cáncer pancreático. Br. J. Cáncer, 81 :80-86, 1999). Un estudio reciente por May et al., (May, P. E. , Barber, A. , D'Olimpo, J.T. , Hourihane, A. And Abumbrad, N . N. Reversal of cancer-related wasting using oral supplementation with a combination of p-hydroxy-p-methylbutyrate, arginine and glutamine. Am. J. Surg., 1 83:471 -479, 2002) mostró una mezcla de H M B, arginina y glutamina para ser efectiva en incrementar el peso corporal en pacientes perdiendo peso con cáncer avanzado (etapa IV) . Además, el incremento en peso corporal se atribuye a un incremento en masa libre de grasa, como se observa con EPA. El uso del ácido eicosapentanóico de ácido graso poliinsaturado se sugiere para el tratamiento de caquexia al inhibir actividad lipolítica de agentes lipolíticos en fluidos corporales y la actividad de la guanidino-benzoatasa de enzima. Ver Tisdale. , M .J. , and Beck, A. , Patente de EE. UU. No. 5,457, 130, emitida el 1 0 de Octubre de 1 995; y Tisdale, et al., Cáncer Research 50:5022-5026 (Agosto 1 990). Sin embargo, el prod ucto enseñado por Tisdale fue en una forma de dosificación sólida, requiriendo un paciente ya enfermo para tragar 1 2-1 6 cápsulas por día. Este método tuvo serias desventajas, incluyendo dificultad en tragar, eructar y mal olor. H M B se ha encontrado ser útil dentro del contexto de una variedad de aplicaciones. Específicamente, en la Pat. de EE. UU . No. 6,031 ,000 a Nissen et al., describe u na composición comprendiendo de aproximadamente 0.5 g a aproximadamente 30 g de HMB, en donde de aproximadamente 0.5 g a aproximadamente 30 g se basa en el peso de la sal de calcio de H M B y de aproximadamente 0.5 g a aproximadamente 50 g de L-arginina libre, y de aproximadamente 0.5 g a aproximadamente 50 g de L-glutamina libre. Esta patente también proporciona un método para el tratamiento de desperdicio asociado con la enfermedad de un animal, un método para reducir el nivel de suero de triglicéridos de un animal , un método para disminuir la carga viral de suero de un animal, y un método para redistribuir g rasa en un animal teniendo una región visceral y una región subcutánea . Todos los métodos comprenden administrar al animal una composición comprendiendo H M B y al menos un aminoácido libre. La Pat. de EE. UU. No. 5,348,979 para Nissen et al., describe el uso de HM B en la retención de nitrógeno en sujetos humanos. La cantidad de HM B administrada es efectiva para conservar proteína según se determina por reducción en nitrógeno urinario. El método puede utilizarse con pacientes teniendo un equilibrio de nitrógeno negativo debido a las condiciones de enfermedad , y también con personas normales de edad avanzada quienes se someten a pérdida de proteína. HMB puede administrarse oralmente o por infusión intravenosa. Una cantidad efectiva de HMB está dentro del rango de 0.01 a 0.20 gramos de H M B en base a su sal de calcio por peso corporal por kilogramo por 24 horas. La Pat. de EE. U U . No. 5,028 ,440 para Nissen describe un método para criar animales domésticos que producen carne para incrementar el desarrollo de tejido magro. H MB o una sal comestible del mismo se administra a los animales en una cantidad por una duración suficiente de tiempo para obtener u n incremento substancial en peso de tejido mag ro. El método se adapta particularmente para usarse con rumiantes, incluyendo ganado y coderos, ya que H MB no se somete a destrucción de rumen apreciable. El método también puede practicarse con otros animales domésticos, incluyendo pollos, y pavos. H M B se alimenta dentro del rango de desde 0.5 a 1 00 mg.

La Pat. de EE. UU. No. 4,992,470 para Nissen describe el uso de H M B para ser más marcadamente efectivo para activar la función inmune de linfocitos T de mam íferos q ue alfa-q uetoisocaprdato (KIC). Para activación de los linfocitos T. H M B o una sal soluble en agua comestible del mismo se administra al mamífero por una vía a través de la cual H M B entra en la sangre del mamífero. La cantidad administrada es suficiente para mejora efectiva de la blastogénesis de sus linfocitos T. El método se adapta para usarse con mamíferos domésticos, incluyendo particularmente ganado, ovejas y cerdos. H M B también puede utilizarse con humanos como un estimulante del sistema inmune. HMB (base Ca-hmb) se administra oral o parenteralmente en una cantidad de 500 a 2,500 miligramos (mg) por sujeto humano por 24 horas. La patente alemana DE 29707308 para Kunz describe el uso de aminoácidos de cadena ramificada en combinación con H M B para promover generación muscular en la población en entrenamiento de peso. Ku nz enseña que un complemento de 3gm tomado diario con un consumo de proteína de 200gm por d ía aumenta el valor de proteína nutricional e incrementa significativamente la eficiencia de la proteína. Kunz también enseña que mejores efectos pueden lograrse cuando H M B se combina con hidrolisatos de proteína y/o mezclas de aminoácido libres en lugar con proteínas intactas (puras). La patente de EE. U U . 5,976,50 para Engel et al., describe un complemento alimenticio dietético para red ucción en peso formada de una mezcla de una confitería a base de azúcar conteniendo cantidades terapéuticas de q uitosan , kava y un nutricéutico quemador de g rasa q ue puede incluir colina/inusital, picolinato de cromo, HMB, carnitina y piruvato. El ingrediente nutricéutico mezclado con el quitosan y kava funciona para quemado cada vez que la grasa del cuerpo se ha consumido, es decir, metabolizar mejor cualquier gasa que se ingiere y no atrae, al quitosan. Los productos comerciales diseñados para la población en aumento de peso q ue contienen HMB incluyen Lean DynamX por EAS Inc. , de Golden , Colorado. Lean DynamX proporciona una mezcla de ingredientes que soportan pérdida de grasa sin el uso de fuertes estimulantes. Los ingredientes incluyen HM B, picolinato de cromo, ácido linoléico conjugado, hojas mate y tallos y tartrato de carnitina. La composición de polvo se mezcla con agua y toma 2-3 dosis diarias, con una dosis tomada 30 minutos antes del trabajo. Productos comerciales adicionales incluyen Mega HM B Fuel® de Twinlab Corporation ¡n Hauppauge, NY. Mega H MB Fuel® contiene 750mg de H MB en una cápsula. La dosis diaria sugerida es 4 cápsulas para soportar el daño a células musculares que puede ocurrir subsiguiente a ejercicio de resistencia intensa. También de interés es la Patente de EE. U U . 5,444,054 para Garleb, et al., y una Patente de EE. UU. relacionada 5, 780,451 . Estos documentos describen composiciones y métodos útiles en el tratamiento de colitis ulcerativa. Tales composiciones incluyen una fuente de proteína que pueden ser proteína hidrolizadas o intactas de rico valor biológico (col. 21 ) ; un oligosacárido indigestible tal como fructooligosacárido; y una mezcla lípida conteniendo una proporción relativamente alta de ácido eicosapentanóico, que contribuye a una proporción de ácido graso relativamente alta ?-3 a ?-6.

Las bio-trayectoria de ácido graso de cadena larga y acciones fisiológicas se tratan en la Patente de EE. U U. 5,223,285 para DeMichele, et al., la totalidad de la cual se incorpora en la presente para referencia. La prevención y/o tratamiento de caquexia permanece como un problema frustrante. Tanto estudios animales como humanos sugieren que el soporte nutricional es grandemente inefectivo en el reliando de masa corporal grasa en el huésped que lleva cáncer. Las pruebas al azar explorando la utilidad del soporte de nutrición parenteral total (TPN) como un anexo a terapia antineoplástica citotóxica han demostrado poca mejora en resultados de tratamiento. Ver, por ejemplo, Brennan , M . F. , y Burt, M .E. , 1 981 , Cáncer Treatment Reports 65 (Compl. 5): 67-68. Esto, junto con una clara demostración de que TPN puede estimular el crecimiento de tumor en animales sugiere q ue el uso de rutina de TPN en tratamiento de cáncer no se justifica. Kisner, D. L. , 1 981 , Cáncer Treatment Reports 65 (Compl. 5): 1 -2.

Breve Descripción de la Invención La presente invención se refiere a métodos para la prevención y tratamiento de enfermedades inflamatorias crónicas, cáncer, e pérdida de peso involuntaria. En la práctica de la presente invención a los pacientes se administran entéricamente HM B solo o alternativamente en combinación con eicosapentanóico (20:5 ?-3), FOS, carnitina y mezclas de los mismos.

En otra modalidad , la presente invención proporciona un método para el tratamiento del desperdicio asociado con enfermedad de un paciente. El método comprende administrar al paciente la composición arriba descrita, que comprende H MB en cantidades suficientes para tratar el desperdicio asociado con enfermedad , en donde, en la administración de la composición al paciente, el desperdicio asociado con enfermedad se trata. En otra modalidad , la presente invención proporciona un método para reducir la tasa de crecimiento de tumor en u n paciente. El método comprende administrar al paciente la composición arriba descrita, que comprende HM B en cantidades suficientes para reducir la tasa de crecimiento de tumor, en donde, en la administración de la composición al paciente, la tasa de crecimiento de tumor se reduce.

En otra modalidad , la presente invención proporciona un método para la prevención o tratamiento de enfermedades en pacientes al subregular la expresión y/o actividad de quinasa de proteína C, factor nuclear kappa-B, enzimas conjugando ubiquitin, y componentes de proteasoma 26S. Estos métodos comprenden administrar al paciente HMB, sus sales, metabolitos o derivados de los mismos. En todavía otra modalidad, H M B puede agregarse a productos alimenticios comprendiendo una fuente de amino-nitrógeno enriquecido con aminoácidos neutrales grandes tales como leucina, isoleucina , valina, tirosina, treonina y fenilalanina y careciendo substancialmente de aminoácidos libres.

Breve Descri pción de los Dibujos FIG. 1 representa un esquema describiendo los eventos intracelulares potenciales en músculo esquelético incluido en activación de proteasoma inducida por PI F. FIG. 2 presenta curvas de respuesta a dosis para el efecto de HMB en peso corporal (A) y volumen de tumor (B) en ratones llevando tumor MAC16. H MB (en PBS) se administra oralmente por cebad ura en un régimen diario a una concentración de 0.05 (·), 0.125 (O) y 0.25g/kg (X). Los ratones de control recibieron PBS solo ( ? ). Los resultados mostrados son el promedio ± SEM , donde n=20.

FIG. 3 representa el efecto de H MB (0.25g/kg; (¦), EPA (0.6g/kg; X) y la combinación (O) junto con controles PBS (·) en peso corporal de ratones llevando el tumor MAC16. Los resultados mostrados son promedio ± SEM , en donde n=20. FIG. 4 presenta el peso de músculos soleos (A) y tasa de degradación de proteína en músculo soleo (B) de ratones llevando el tumor MAC 1 6 y tratados con ya sea EPA (0.6g/kg) , H MB (0.25g/kg) o la combinación por 3 días. Los valores mostrados son promedio ± SEM , en donde n=6. FIG . 5 presenta el efecto de H M B y EPA en actividad funcional de proteosoma , determinado como la actividad de enzima 'similar a quimotripsin' , músculo gastrocnemio de ratones llevando el tumor MAC1 6 y tratados por 3 días. Los resultados se muestran como promedio ± SEM , en donde n=6.

FIG.6 presenta la expresión de proteasoma 20S a-subunidades (A) y ß-subunidades (B), detectadas por Western blotting, en músculo gastrocnemio de ratones tratados por 3 días con PBS (Control), HMB (0.25g/kg), EPA (0.6g/kg) o la combinación. El análisis densitométrico de las manchas (n=6) se muestran. A. Control, (barras cerradas), HMB (barras abiertas), EPA (barras mezcladas) y combinación (barras punteadas). FIG. 7 presenta la expresión de subunidades 19S de proteasoma, MSS1 (A) y p42 (B), detectada por Western blotting, en músculo gastrocnemio de ratones tratados por 3 días con PBS (Control), HMB (0.25g/kg), EPA (0.6g/kg) o la combinación (HMB+EPA). Análisis densitométrico de las manchas (n=6) se muestran. FIG. 8 presenta la expresión de E214k, detectada por Western blotting, en músculo gastrocnemio de ratones tratados por 3 días con PBS (Control), HMB (0.25g/kg), EPA (0.6g/kg) o la combinación (HMB+EPA). Los análisis densitométricos de las manchas (n=6) se muestran. FIG.9 (A) presenta el efecto de PIF en degradación de proteína total en miotubos C2C12 en la ausencia (X) o presencia de ya sea 50 µ? EPA (?), o 25 µ? (O) o 50 µ? (·) HMB. Las mediciones se hacen 24h después de la adición de PIF y se muestran como promedio ± SEM, en donde n=19. 1(B) presenta la actividad quimiotríptica de extractos solubles de miotubos de murino tratados con PIF en la ausencia o presencia de EPA (50 µ?) o HMB (25 o 50 µ?). Los símbolos son los mismos como en (A). Los resultados se muestran como promedio ± SEM, en donde n=9. FIG. 10 presenta el efecto de EPA y HMB en inducción por PIF de 20S proteasoma a-subunidad (A), ß-subunidad (B) y p42 (C). El control de carga de actin se muestra en (D). Western blots de extractos solubles de miotubos C2C12 24h después de tratamiento con PIF solo (vías A-C) o con PIF en la presencia de 50 µ? EPA (vías D-F), 50 µ? HMB (vías G-l) o 25 µ? HMB (vías J-L) a una concentración de PÍF de 4.2nm (vías B, E, H, y K) o 10nm (vías C, F, I y L). Los cultivos de control recibieron PBS (vía A), 50 µ? EPA (vía D), 50 µ? HMB (vía G) o 25 µ? (vía J). Las manchas mostradas son representativas de tres experimentos separados. FIG. 11 presenta Western blot del efecto de PIF en PKCa citoplásmico (A) y unido a membrana (B) en miotubos de murino. Las células se tratan con PIF solo (vías A-C) o con PIF en la presencia de 50 µ? EPA (vías D-F), 50 µ? HMB (vías G-l) o 25 µ? HMB (vías J-L) a 4.2 nM (vías B, E, H y K) o 10nM PIF (vías C, F, I y L). Las células de control recibieron PBS (vía A), 50 µ? EPA (vía D), 50 µ? HMB (vía G) o 25 µ? HMB (vía J). Las manchas mostradas son representativas de tres experimentos separados. FIG. 12 presenta Western blots de ERK 1/2 total (p44 y p42) (A) y ERK 1/2 (B) activo (fosforilado) en extractos solubles de miotubos de murino tratados con PIF solo (vías A-C) o con PIF en la presencia de 50 µ? EPA (vías D-F), 50 µ? HMB (vías G-l) o 25 µ? HMB (vías J-L) a una concentración PIF de 4.2nM (vías B, E, H, y K) o 10 nM (vías C, F, I y L). Las células de control recibieron ya sea PBS (vía A), 50 µ? EPA (vía D), 50 µ? HMB (vía G) o 25 µ? HMB (vía J). Las manchas mostradas son representativas de tres experimentos separados. FIG. 13 presenta el efecto de exposición de miotubos C2C12 por 30min en niveles citosólicos de ??? (A), determinados por Western blotting, y activación de unión de NF-?? a ADN, según se determina por EMSA (B y C). El análisis densitométrico es un promedio de 3 manchas replicadas o EMSAs. (A) Miotubos se tratan con PIF solo (vías A-E) o con PIF en la presencia de 50 µ? HMB a una concentración de 0 (vías A y F), 2.1 (vías B y G), 4.2 (vías C y H), 10.5 (vías D e I) o 16.8 nM PIF (vías E y J). En miotubos (B) y (C) se trataron con 0, 2.1, 4.2, 10.5 o 16.8nM PIF, en la ausencia (barras obscuras) o presencia (barras abiertas) de 25 µ? HMB (B) o 50 µ? HMB (C).

Descripción Detallada de la Invención El término HMB, también se refiere como ácido beta-hidroxi-beta-metilbutírico o ácido beta-hidroxi-isovalérico, puede representarse en su forma de ácido libre como (CH3)2(OH)CCH2COOH. HMB es un metabolito de ieucina formada por transaminación a alfa-cetoisocaproato (KIC) en músculo seguido por oxidación en KIC en el citosol del hígado para dar HMB. El término "aminoácidos neutrales grandes" se refiere a Ieucina, isoleucina, valina, tirosina, treonina y fenilalanina. Los aminoácidos son los bloques de formación de proteínas. Se caracterizan por la presencia de un grupo carboxilo (COOH) y un grupo amino (N H2) unido al mismo carbono al final del compuesto. El término "substancialmente carente en aminoácidos libres" se refiere a composiciones que contienen menos de 0.4 gramos de contenido aminoácido libre total en una dosis diaria de la composición. Por ejemplo, si el producto se diseña para alimentarse a la tasa de 1 lata por día, entonces una lata de producto contiene menos de un total de 0.4 gramos de aminoácidos libres. Los aminoácidos en cuestión son aquellos que ocurren de manera natural L-isómeros, consistiendo de uno o más de los siguientes compuestos: L-alanina , L-arginina, L-asparagina, L-ácido aspártico, L-cisteína (o L-cistina) , L-ácido glutámico, L-glutamina, glicina, L-histidina, L-isoleucina, L-leucina, L-lisina, L-metionina, L-fenilalanina, L-prolina, L-serina, L-treonina , L-triptofan , L-tirosina y L-valina, o sus sales farmacéuticamente aceptables o alimentos, ésteres, sales o derivados (tales como ésteres de etilo o metilo). El término "caquexia" se refiere a un estado de salud de enfermedad general y mala n utrición . Con frecuencia se asocia con e induce por cáncer maligno, y se caracteriza por pérdida de apetito, pérdida de masa corporal, especialmente masa corporal magra y desperdicio muscular. El término "ácidos grasos" se refiere a una familia de ácidos carboxílicos teniendo una cadena de hidrocarburo, generalmente de aproximadamente 12 a 24 carbonos de largo. Cuando son insaturados (teniendo un enlace doble) al menos un punto en la cadena de hidrocarburo, tales ácidos g rasos se diseñan por la posición del primer enlace doble. Ácidos g rasos ?-3 tienen un primer enlace doble en el tercer cabono del extremo metil de la cadena; e incluyen , pero no se limitan a, ácido a-linoléico, ácido estearidónico, ácido eicosapentanóico ("EPA"), ácido docosapentanóico y ácido docosahexanóico ("DHA") y lo similar. Ácidos g rasos ?-6 tienen un primer enlace doble en el sexto carbono del extremo metil dé la cadena; e incluyen, pero no se limitan a, ácido linoléico, ácido ?-linoléico, ácido araquidónico ("AA") y lo similar. El término "productos alimenticios" como se utiliza en la presente se refiere a vehículos de suministro que contienen una o más grasas, amino nitrógeno y carbohidratos y proporciona alguno o todo el soporte nutricional para un paciente en las cantidades diarias recomendadas. Frecuentemente, u n producto alimenticio contendrá vitaminas, minerales, minerales indicadores y lo similar para proporcionar nutrición equilibrada para reemplazos de comida, alimentos médicos, complementos. Los productos alimenticios pueden ser en cualquier forma típica tales como bebidas, polvos, barras, jugos, bebidas carbonatadas, agua embotellada . El término "Tomas Diarias de Referencia o RDI" se refiere a un conjunto de referencias dietéticas en base a las Concesiones Dietéticas Recomendadas para minerales y vitaminas esenciales. Las Concesiones Dietéticas Recomendadas son un conjunto de concesiones nutrientes estimadas establecidas por la Academia Nacional de Ciencias, que se actualizan periódicamente para reflejar conocimiento científico actual. El término "paciente" se refiere a humanos, perros, gatos, y cualquier otro animal no rumiante. Cualquier referencia a un rango numérico en esta solicitud debe considerarse como modificándose por el adjetivo "aproximadamente". Además, cualquier rango numérico debe considerarse para proporcionar soporte para una reivindicación dirigida a un subconjunto de ese rango. Por ejemplo, una descripción de u n rango de desde 1 a 1 0 debe considerarse para proporcionar soporte en la especificación y reivindicaciones a cualquier subconjunto en ese rango (es decir, rangos de 2-9, 3-6, 4-5, 2.2-3.6, 2.1 -9.9, etc.). Aunque no se propone limitar la invención a cualq uier teoría particular de operación , los solicitantes describen abajo un mecanismo probable. En tiempos de extrema necesidad (por ejemplo, hambre y lo similar), músculo esquelético se utiliza con frecuencia por el cuerpo como un recipiente de aminoácidos y energ ía. Esto se media por supraregulación de la proteofisis y subregulación de síntesis de proteína en múscu lo. El resultado neto del cual es liberación de aminoácidos de músculo a la circulación general para usarse en mantenimiento de sistemas críticos. Cuando buena salud y adecuada dispon ibilidad de nutriente se restauran, se vuelve a formar el músculo. En el caso de caquexia, este sistema es inactiva de manera inapropiada, aún en el caso de adecuación nutricional, las proteínas de tejido muscular continúan rompiéndose. Uno de los sistemas proteolíticos clave que se activan de manera inapropiada es el sistema de proteosoma de ubiqutin. Cuando funciona normalmente, este sistema reconoce proteínas que ya sea envejecen o en alguna otra manera ya sea se dañan o no se necesitan más, y las marca para retiro a través de conjugación con ubiquitin . Tales proteínas ubiquitinalidas se reconocen por el proteosoma, y se degradan , liberando ubiquitin libre y péptidos y aminoácidos libres en un proceso que consume energ ía. Existe un número de molécu las de señalización que activan o supraregulan este sistema, incluyendo factor induciendo proteolisis (P I F) que es un factor de proteína producido por ciertos tumores induciendo caquexia. La unión de P I F a la célula muscular causa la supraregulación de fosfolipasa A ( P LA) . Esto a su vez produce factores de señalización que activan por último quinasa de proteína C, resultando en la activación de genes (a través del factor nuclear kappa B , N FKB) para conjugación de ubiquitin y para ciertas subunidades del proteosoma. El resultado neto de toda esta señalización es la supraregulación del sistema de proteosoma de ubiquitin , y degradación de proteína sostenida, inapropiada en el músculo. F I G . 1 muestra una trayectoria detallada de esta secuencia de activación . Quinasa de proteína C Quinasa de proteína C es una familia de quinasas de treonina de serina activadas por lípido y calcio que juegan un papel clave en numerosas cascadas de señalización intracelular. Existen al menos 12 isotipos PKC diferentes, que se agrupan en tres clases en base a su estructura primaria y propiedades bioquímicas (CA Cárter: "Protein kinase C as a drug target: Implications for drug or diet prvention and treatment of cáncer" Current Drug Targets 1:163-183 (2000). Estos son los convencionales, (cPKCa, ß?, ß?? y ?) que requieren diacilglicerol, fosfatidilserina y calcio para activación, nuevos (nPKC5, e, ?, T y µ) que requieren diacilglicerol y fosfatidilserina, pero son independientes de calcio, y los atípicos (aPKC , i y ?) que son independientes de diacilglicerol y calcio. PKC se sintetiza como una proenzima unida a membrana. El retiro de la pro-secuencia por separación proteolítica, y fosforilación subsiguiente libera una enzima competente de la membrana al citosol. La interacción subsiguiente con los conjuntos peculiares de activadores produce enzima activa. De esta manera, existen varios niveles de regulación posible, incluyendo control de expresión, control de procesamiento proteolítico, control de eventos de fosforilación iniciales y finalmente, regulación de los niveles citosólicos de los diversos activadores requeridos para actividad completa. Quinasa de proteína C se incluye en algunas de las trayectorias de señalización conduciendo a mitogénesis y proliferación de células, apoptosis, activación de plaqueta, remodelación del citoesqueleto de actin , modulación de canales de ión y secreción. Además, otra observación que PKC también es el receptor principal para ásteres de forboli promotor de tumor proporcionado por un reactivo clave para estudiar el mecanismo de acción de esta enzima. PKC regula las trayectorias relevantes a inflamación , cardiovascular, microvascular periférico, CNS, oncología, estados de enfermedad infeccioso e inmune, y se consideran como objetivos serios e importantes para desarrollo de fármaco (P. G. Goekjian and M .R. Jirousek: "Protein Kinace C in the Treatment of Disease: Signal Transduction Pathways, I nhibitors, and Agents in Development" Current Medicional Chemistry 6(9) :877-903 (1 999); CA O'Brian , N E Ward , KR G ravitt and KP Gupta : "The tumor promoter receptor protein kinase C: A novel target for chemoprevention and therapy of human colon cáncer." Growth Factors and Tumor Promotion : Implications for Risk Assesment, páginas 1 1 7-1 20© 1 995, Wiley-Liss, I nc. ; F Battaini: ; "Protein kinase C isoforms as therapeutics targets in nervous system disease states". Pharmacological Research 44(5) :353-361 , (2001 ) ; RN Frank: "Potential new medical therapies for diabetic retinopathy: protein kinase C inhibitors. Am J Ophthalmol 1 33:693-698 (2002); M Meier and GL King: "Protein kinase C activation and its pharmacological in híbition in vascular disease". Vascular Medicine 5: 1 73-1 85 (2000)). N FKB Factor nuclear ? B (N FKB) es una familia de factores de transcripción encontrados en una amplia variedad de células mamíferas. La molécula mad ura es un homo o heterod ímero, hecho de uno o dos de los siguientes 5 productos genéticos (RelA (p65), p50, Rel B, c-Rel y p52), el más común es un dímero de RelA y p50. Bajo condiciones no activadas, N FKB se localiza en el citosol por asociación con una proteína inhibidora ???a. La señalización corriente arriba incluye una quinasa ???, y fosforilación de ???a unido resulta en su liberación de N FKB, permitiendo al último transubicarse al núcleo, y transcripción genética específica activa. ??? fosforilado se degrada por la trayectoria de proteosoma-ubiquitina. N FKB se reconoce ampliamente como una molécula reguladora clave asociada con inflamación . De esta manera, juega un papel clave en enfermedades inflamatorias crónicas y ag udas (AB Lentsch and PA Ward: "Activation and regulation of N FKB during acute inflammation" . Clin Chem Lab Med 37(3):205-208 (1 999)). También jugea un papel en ciertos aspectos de otras enfermedades, tal como metástasis de cáncer (VB Andela, AH Gordon, G Zotalis, RN Rosier, JJ Goater, G D Lewis, EM Schwarz, J E Puzas y RJ O'Keefe: "N FKB: A pivotal transcription factor en prostate cáncer metástasis to bone" Clinical Orthopaedics and Related Research 41 5S:S75-S85 (2003)). Este factor de transcripción se incluye en el desarrollo del síndrome diabético (E. Ho and TM Bray: "Antioxidants, N FKB activation and diabetogenesis". Proceedings of the Society for Experimental biology and Medicine 222:205-21 3 (1 999)) y en desarrollo inmune y regulación (J Moscat, MT Diaz-Meco and P Rennert: "N FKB activation by proptein kinase C isoforms and B-cell function". EMBO Reports 4:31 -36 (2003)). Finalmente, N FKB se asocia con control de apoptosis y en desarrollo y diferenciación . Sin embargo, P I F (factor inductor de proteolisis, que se libera por tumores y se incluye en pérdidas de masa magra inducida por cáncer) se enseña que es un regulador de desarrollo embriónico, y acciona una cascada de señalización por último a través de N FKB ( F . Delfino and WH Walker: "Hormonal regulation of the N FKB signaling pathway". Molecular and Cellular Endocrinology 1 57: 1 -9 (1 999) : TM Watchorn, I Waddell, N Dowidar and JA Ross. "Proteolysis-inducing factor regulates hepatic gene expression vía the transcription factor N FKB and STST3", FASEB J 1 5:562-564 (2001 )) . También se conoce que EPA ejerce sus efectos benéficos en caquexia a través de inhibición de la señalización resultado de activación de PLA, en particular la liberación de ácido araquidónico (AA). Esto previene la suprareg ulación subsig uiente y activación de la trayectoria de proteosoma-ubiquitin al remover el evento de señalización inicial. H MB, au nque no previene la activación de PLA o la liberación de AA, previene la supraregulación de quinasa de proteína C, previniendo la activación subsiguiente en la trayectoria de señalización , también previniendo por último la activación del sistema de proteosoma-ubiquitin. Se ha descubierto ahora sorprendente e inesperadamente que HM B solo puede red ucir la tasa de crecimiento de tumor y en combinación con niveles de dosis sub-óptimos de EPA mejora el efecto anticaquético. La combinación de EPA y H MB conserva la masa muscular al atenuar la deg radación de proteína a través de la subregulación de la expresión incrementada de componentes reguladores clave de la trayectoria proteolítica ubiquitin-proteasoma. El término "HM B" se refiere al compuesto teniendo la fórmula química anterior, tanto en su forma de ácido libre como sal, metabolitos y derivados de los mismos. Aunque cualquier forma adecuada de HM B puede utilizarse dentro del contexto de la presente invención, preferentemente, H M B se selecciona del grupo consistiendo de u n ácido libre, una sal, un éster, y una lactona ; más preferentemente, H M B es una sal. Aunq ue cualquier sal farmacéuticamente adecuada de HMB puede utilizarse dentro del contexto de la presente invención, preferentemente, sal H M B es soluble en agua o se vuelve soluble en agua en el estómago o intestinos de un paciente. Más preferentemente, la sal H M B se selecciona del grupo consistiendo de una sal de sodio, una sal de potasio, una sal de magnesio, una sal de cromo y u na sal de calcio. Más preferentemente, la sal HMB es una sal de calcio. Sin embargo, otras sales no tóxicas, tales como otras sales de metal de tierra alcalina o metal álcali, pueden utilizarse. De manera similar, cualquier éster farmacéuticamente aceptable puede utilizarse en el contexto de la presente invención , deseablemente, el éster H M B se convierte rápidamente en H MB en su forma de ácido libre. Preferentemente, el éster HMB es un éster de metilo o éster de etilo. Ester de metil HMB y éster etil HMB se convierten rápidamente en la forma de ácido libre de HMB. Del mismo modo, cualquier lactona farmacéuticamente aceptable puede utilizarse en el contexto de la presente invención. Deseablemente, la lactona HMB se convierte rápidamente a HMB en su forma de ácido libre. Preferentemente, lactona HMB es una lactona isovalaril o una lactona similar. Tales lactonas se convierten rápidamente en la forma de ácido libre de HMB. Los métodos para producir HMB y sus derivados se conocen bien en la materia. Por ejemplo, HMB puede sintetizarse por oxidación de alcohol de diacetona. Un procedimiento adecuado se describe por Coffman et al., J. Am. Chem. Seo. 80:2882-2887 (1958). Como se describe en la presente, HMB se sintetiza por una oxidación de hipoclorito de sodio alcalino de alcohol de diacetona. El producto se recupera en forma de ácido libre, que puede convertirse a la sal deseada. Por ejemplo, ácido 3-hidroxi-3-metilbutírico (HMBA) puede sintetizarse de alcohol de diacetona (4-hidroxi-4-metilpentan-2-ona) a través de oxidación utilizando hipoclorito acuoso frío (blanqueador). Después de acidificar la mezcla de reacción utilizando HCI, el producto HMBA se recupera por extracción utilizando acetato de etilo, y separando y reteniendo la capa orgánica de la mezcla de extracción. El acetato de etilo se remueve por evaporación y el residuo se disuelve en etanol. Después de la adición de Ca(OH)2 y enfriamiento, CaHMB cristalino puede recuperarse por filtración, los cristales enjuagarse con etanol y después secarse. Alternativamente, la sal de calcio de H MB está comercialmente disponible de TSI en la Ciudad de Salt Lake, Utah . El soporte nutricional en el paciente con cáncer puede categorizarse como (i) soportante, en el cual el soporte de nutrición se instituye para prevenir el deterioro de n utrición en el paciente alimentado de manera adecuada o para rehabilitar al paciente evacuado antes de la terapia definitiva;(ii) adjunto, en el cual el soporte de nutrición juega un papel integral en el plan terapéutico; y (iü) definitivo, en el cual el soporte de nutrición agresivo se requiere para la existencia del paciente. Las vías para proporcionar soporte de n utrición incluyen una dieta oral, alimentación por tubo y nutrición parenteral total o periférica. La modalidad preferida para métodos nutricionales y composiciones de lá invención es por la vía oral. U na alternativa para alimentación oral es tubo de alimentación por medio de tubos nasogástricos, nasoduodenales, esofagostomía, gastrostomia, o yeyunostomia. Los efectos benéficos que HMB tiene en la masa corporal magra de un paciente pueden lograrse en un número de maneras. Si se desea, H M B puede administrarse solo, sin un vehículo. H M B puede disolverse simplemente en agua y consumirse por el paciente. Alternativamente, HMB puede ser rociado en comida, disuelto en café, etc. La dosis diaria total para el paciente variará ampliamente, pero típicamente u n paciente se beneficiará de consumir al menos 2gm/día de H M B. Alternativamente, de 20 a 40 mg/kg/d ía. En una modalidad adicional , H MB puede incorporarse en pildoras , cápsulas, tabletas de rápida disolución, grageas, etc. La dosis activa puede variar ampliamente, pero típicamente variará de 250 mg a 1 gm/dosis con el paciente consumiendo de 2 a 8 dosis/día para lograr el objetivo de 2 mg/día mínimo. Los métodos para preparar tales formas de dosificación se conocen bien en la materia. La atención del lector se dirige a la edición más reciente de Remingtons Pharmaceutical Sciences for guidance on how to prepare such dosage forms. Aunq ue H MB puede administrarse como una entidad única, típicamente se incorporará en productos alimenticios y se consumirá por el paciente durante sus comidas o aperitivos. Si se desea, el paciente puede modificar simplemente la receta de los alimentos q ue consumen normalmente al rociar en alimentos, disolviendo en café, etc. En una modalidad adicional, H M B se incorporará en bebidas, barras, galletas, etc, q ue se han diseñado específicamente para aumentar la aceptabilidad de H M B e incrementar la selección de formas alternativas, aumentando así la aceptación del paciente/consumidor. Típicamente, HM B se incorporará en bebidas que reemplazan comidas tales como Ensure®, Boost®, Glucerna®, Pediasure®, Ped ialyte®, etc. H M B también puede incorporarse en barras de reemplazo de comidas tales como PowerBars®, barras Glucerna®, barras ChoiceDM®, barras Ensure®, y barras Boost®, etc. Alternativamente, HMB puede incorporarse en jugos, bebidas carbonatadas, agua embotellada, etc. Adicionalmente, HM B puede incorporarse en nutritivos médicos tales como ProSure®, Promote®, Jevity® y Advera® diseñados para soportar estados de enfermedad específicos tales como cáncer, VI H/SI DA, artritis COPD, etc. Métodos para producir cualquiera de tales productos alimenticios se conocen bien para aquellos expertos en la materia. La siguiente discusión se propone ilustrar tales productos alimenticios y su preparación. La mayoría de los productos de reemplazo de comidas (es decir, barras o líquidos) proporciona calorías de grasa, carbohidratos y proteína . Estos productos también típicamente contienen vitaminas y minerales, debido a que se proponen para ser adecuados para usarse como la fuente única de nutrición. Aunque estos productos de reemplazo de comidas pueden servir como la fuente única de nutrición, típicamente no. Los individuos consumen estos productos para reemplazar una o dos comidas un día, o para proporcionar un aperitivo saludable. Los productos nutricionales de esta invención deben construirse para incluir cualquiera de estas modalidades. La cantidad de estos ingredientes n utricionales puede variar ampliamente dependiendo de la población de paciente objetivo (es decir. , cáncer, VI H/SI DA, artritis, consideración organolépticas, preferencias culturales, uso, etc.) . Como una guía no limitante general sin embargo, los productos de reemplazo de comidas de esta invención contendrán las siguientes cantidades relativas de proteína, grasa y carbohidrato (en base al porcentaje relativo de calorías totales): un componente de proteína, proporcionado de 5 a 80% del contenido calórico total, un componente de carbohidrato proporcionándose de 1 0 a 70% del contenido calórico total , y un componente de lípido proporcionándose de 5 a 50% del contenido calórico total. Los reemplazos de comidas contendrán carbohidratos adecuados, lípidos y proteínas como se conoce por aquellos expertos en la materia para hacer fórmulas nutricionales. Los carbohidratos adecuados incluyen , pero no se limitan a, almidones hidrolizados, intactos, natural y/o qu ímicamente modificados, de maíz, tapioca, arroz o papa en formas cerosas o no cerosas; y azúcares tales como glucosa, fructosa, lactosa, sucrosa, maltosa, jarabe de almidón de fructosa alta, sólidos de jarabe de maíz, fructooligosacáridos y mezclas de los mismos. Los lípidos adecuados incluyen , pero no se limitan a, aceite de coco, aceite de soya, aceite de maíz, aceite de olivo, aceite de cártamo, aceite de cártamo oleico rico, aceite MCT (triglicéridos de cadena media), aceite de girasol, aceite de girasol oleico rico, aceite de palma, oleína de palma, aceite de cañóla, aceite de semilla de algodón, aceite de pescado, aceite de grano de palma, aceite de sábalo, aceite de semilla de soya, lecitina, fuentes de lípido de ácido araquidónico y ácido docosahexanóico, y mezclas de los mismos. Las fuentes de lípido de ácido araq uidónico y ácido docosahexanóico incluyen , pero no se limitan a, aceite marino, aceite de yema de huevo, y aceite de alga y fúngico.

Las numerosas fuentes comerciales para estas grasas están fácilmente disponibles y se conocen por un practicante de la materia. Por ejemplo, aceites de cañóla y soya están disponibles de Archer Daniels Midland of Decatur, Illinois. Aceites de maíz, coco, palma y grano de palma están disponibles de Premier Edible Oliz Corporation of Pórtland , Organ . El aceite de coco fraccionado está dispon ible de Henkel Corporation of LaGrange, Illinois. Aceites de girasol oleico rico y cártamo oleico rico están disponibles de SVO Specialty Products of Eastlake, Ohio. Aceite marino está disponible de Mochida I nternational of Tokio, Japón. Aceite de olivo está disponible de Anglia Oliz of North H umberside, Reino Unido. Aceites de semilla de algodón y girasol están disponibles de Cargil of Minneapolis, Minnesota. Aceite de girasol está disponible de California Oliz Corporation of Richmond, California. Además de estos aceites de grado alimenticio, los lípidos estructurados pueden incorporarse en el producto alimenticio si se desea. Los lípidos estructurados se conocen en la materia. Una descripción concisa de lípidos estructurados puede encontrarse en INFORM . Vol, . 8. No. 1 0, página 1004; titulado Structured lipids allow fait tailoring (Octubre 1 997). También ver la Patente de Estados Unidos No. 4,871 ,768. Los lípidos estructurados son predominante mezclas conteniendo triacilgliceroles de medio y ácidos grasos de cadena larga en el mismo núcleo de glicerol. Los lípidos estructurados y su uso en fórmula entérica también se des en las Patentes de Estados Unidos Nos. 6, 1 94,379 y 6, 1 60,007.

Opcionalmente, los ácidos grasos ?-3 pueden comprender aproximadamente 30% de la mezcla de aceite, preferentemente los ácidos grasos ?-3 consisten grandemente de ácido eicosapentanóico y ácido docosahexanóico. Los aceites dietéticos utilizados en la preparación de la composición nutricional generalmente contienen ácidos grasos ?-3 en la forma de triglicérido e incluyen, pero no se limitan a cañóla, triglicéridos de cadena media, pescado, semilla de soya, lecitina de soya, maíz, girasol, cártamo, girasol oleico rico, cártamo oleico rico, olivo, borraja, hierba del asno y aceite de semilla de lino. Opcionalmente, la proporción en peso de ácidos grasos ?-6 a ácidos grasos ?-3 en la mezcla de lípido de acuerdo a la invención es aproximadamente 0.1 a 3.0. El suministro de diario de ácidos g rasos ?-3 debe ser al menos 450 mg y puede variar dependiendo del peso corporal , sexo, edad y condición médica del individuo. Como se menciona , los niveles más altos se desean para consumo humano adulto: por ejemplo, de aproximadamente 0.5 a 50gm diario, más preferentemente de aproximadamente 2.5 a 5gm diario. U na ventája inesperada para combinar ácidos grasos ?-3 y HMB es la mejora en sabor del reemplazo de comidas. Las fuentes típicas de ácidos grasos ?-3 son aceites de pescado y alga. Cada fuente trae sabores objetables al producto de reemplazo de comida. Los inventores han descubierto que al agregar HM B, los mismos o mejores resultados clínicos relacionados con la prevención de pérdida dé peso involuntaria pueden obtenerse aún cuando se utilizan niveles inferiores o sub-óptimos de ácidos grasos ?-3 en el producto. Consecuentemente, los inventores han descubierto que existe una relación inversa entre los niveles de ácidos grasos ?-3 y HMB. Por ejemplo , si u na dosis efectiva de ácidos grasos ?-3 es 3gm suministrada en 2 latas por un reemplazo de comida, los mismos resultados clínicos se observarán en el prod ucto formulado para contener 2gm de ácidos grasos ?-3 y 1 g , de H MB suministrado en 2 latas o en prod ucto formulado para contener 1 gm de ácidos grasos ?-3 y 2g , de HM B suministrado en 2 latas. El producto formulado para contener solamente 1 gm de ácidos g rasos ?-3 sabrá mucho mejor que el producto formulado con 2 o 3gm de ácidos grasos co-3 mientras se logra la misma efectividad clínica. Además, ya que los ácidos grasos ?-3 son inhibidores conocidos de AA, un mediador de inflamación, un producto conteniendo ácidos grasos co-3 y H MB podrían tener beneficios más amplios que aquellos conteniendo cualquiera de los ingredientes solos. Las fuentes de proteína adecuadas incluyen , pero no se limitan a, leche, suero y fracciones de suero, soya , arroz, carne (por ejemplo, res), animal y vegetal (por ejemplo , guisante, papa) , huevo (albúmina de huevo), gelatina y pescado. Las fuentes de proteína intacta adecuadas incluyen , pero no se limitan a, a base de soya, a base de leche, proteína de caseína , proteína de suero, proteína de arroz, colágeno de carne de res, proteína de guisante, proteína de papa y mezclas de los mismos. Opcionalmente la fuente de proteína intacta se enriquece en aminoácidos neutrales grandes (LNAA) comprendiendo valina, isoleucina, leucina, treonina, tirosina y fenilalanina. Típicamente, aproximadamente 40% de caseína, suero y fuentes de proteína de soya son aminoácidos neutrales grandes. Por ejemplo, caseinato contiene aproximadamente 38% p/p LNAA, concentrado de proteína de suero contiene aproximadamente 39% p/p LNAA y aislado de proteína de soya contiene aproximadamente 34% p/p LNAA. Típicamente, el reemplazo de comida se formula con una fuente de proteína que suministrará aproximadamente 1 a 25gm de LNAA por día, preferentemente de aproximadamente 1 a 20gm de LNAA por día, más preferentemente de aproximadamente 4 a 20gm de LNAA por d ía. Como un ejemplo, un reemplazo de comida se consumió 3 veces un día que contiene una proteína comprendiendo 4.8g , LNAA suministrará 14.4gm LNAA por d ía. Los reemplazos de comida preferentemente también contienen vitaminas y minerales en una cantidad diseñada para suministrar o complementar los requerimientos nutricionales diarios de la persona que recibe la fórmula. Aquellos expertos en la materia reconocen que las fórmulas nutricionales con frecuencia incluyen excedentes de ciertas vitaminas y minerales para aseg u rar que pueden satisfacer n ivel objetivo durante la vida en el estante del producto. Estos mismos individuos también reconocen que ciertos microingredientes pueden tener beneficios potenciales para personas dependiendo de cualquier enfermedad subyacente o dolencia que el paciente padece. Por ejemplo, los pacientes con cáncer se benefician de tales antioxidantes como beta-caroteno, vitamina E, vitamina C y selenio. Los productos alimenticios preferentemente incluyen , pero no se limitan a, las siguientes vitaminas y minerales: calcio, fósforo, sodio, cloruro, magnesio, manganeso, hierro, cobre, zinc, selenio, yodu ro, cromo, molibdeno, nutrientes acondicionadamente esenciales m-inositol, carnitina y taurina, y vitaminas de complejo A, C, D, E, K y B, y mezclas de los mismos. La carnitina nutriente acondicionadamente esencial es un aminoácido que ocurre de manera natural formado de metionina y lisina. Su papel metabólico principal se asocia con el transporte .de ácidos grasos de cadena larga a través de las membranas mitocondriales, estimulando así la oxidación de estas substancias de combustible para energía metabolica. Complementación de carnitina es una herramienta metabolica importante en condiciones tales como enfermedades del hígado y riñon , y enfermedades crónicas principales o lesiones extensivas complicadas por mala n utrición. Opcionalmente, los reemplazos de comida pueden complementarse con carnitina a niveles suficientes para suministrar hasta 4gm/d ía de carnitina. Los reemplazos de comida también pueden contener fibra y estabilizadores. Las fuentes adecuadas de fibra y/o estabilizadores incluyen, pero no se limitan a, goma xantan , goma guar, goma arábiga , goma gati, goma karaya, goma tragacanto, furceleran , goma gelan , goma de algarroba, pectin , pectin de metoxi rica y baja, glucanos de avena y cebada, carragahen , psilio, gelatina, celulosa microcristalina, CMC (carboximetilcelulosa de sodio), celulosa de hidroxipropilmetil de metilcelulosa , celulosa de hidroxipropil , DATEM (ásteres de ácido tartárico de diacetil de mono- y diglicéridos) , dextran , carragahen , FOS (fructooligosacáridos), y mezclas de los mismos. Numerosas fuentes comerciales de fibras dietéticas solubles están disponibles. Por ejemplo, goma arábiga, carboxilmetilcelulosa hidrolizada, goma guar, pectina y las pectinas de metoxi ricas y bajas están disponibles de TIC Gums, Inc. , de Belcamp, Maryland . Los glucanos de cebada y avena están disponibles de Mountain Lake Specialty I ngrediente, Inc. de Omaha, Nebraska. Psilio está dispon ible de Meer Corporation of North Bergen , New Jersey mientras que carragahen está disponible de FMC Corporation de Filadelfia, Pensilvania. La fibra incorporada también puede una fibra dietética insoluble, ejemplos representativos de la cual incluyen fibra de cáscara de avena, fibra de cáscara de guisante, fibra de cáscara de soya, fibra de cotiledónea de soya, fibra de caña de azúcar, celulosa y hojuela de maíz. Numerosas fuentes para las fibras dietéticas insolubles también están dispon ibles. Por ejemplo, la hojuela de maíz está disponible de Quaker Oats of Chicago, I llinois; fibra de cáscara de avena de Canadian Harvest of Cambridge, Minnesota; fibra de cáscara de guisante de Woodstone Foods of Winnipeg, Canadá, fibra de cáscara de soya y fibra de cáscara de avena de The Fibrad G roup of LaVale, Maryland; fibra de cotiledónea de soya de Protein Technologies I nternational of St. Louis, Missouri; fibra de caña de azúcar de Delta Fiber Foods of Minneapolis, M innesota y celulosa de James River Corp. de Saddle Brook, New Jersey. Una discusión más detallada de los ejemplos de fibras y su incorporación en productos alimenticios puede encontrarse en la Patente de Estados U nidos No. 5,085,883 emitida a Garleb et al. La cantidad de fibra utilizada en las fórmulas puede variar. El tipo particular de fibra que se utiliza no es crítico. Cualquier fibra adecuada para consumo humano y que es estable en la matriz de un producto alimenticio puede utilizarse. Además de fibra, los reemplazos de comida también pueden contener oligosacáridos tales como fructooligosacáridos (FOS) o glucooligosacáridos (GOS). Los oligosacáridos se fermentan rápida y extensivamente a ácidos grasos de cadena corta por microorganismos anaeróbicos que inhiben el intestino grueso. Estos oligosacáridos son fuentes de energía preferenciales para la mayoría de las especies Bifidobacterium, pero no se utilizan por organismos potencialmente patogénicos tales como perfígenos de Clostridio, C. difficile, o Escherichia coli. Típicamente, FOS comprende 0 a 5mg/porción de reemplazo de comida, preferentemente de 1 a 5gm/porción , más preferentemente de 2 a 4gm/porción del reemplazo de comida . Los reemplazos de comida también pueden contener un saborizante para aumentar su aceptabilidad . Los endulzantes ratifícales pueden agregarse para complementar el sabor y ocultar el sabor salado. Los endulzantes ratifícales útiles incluyen sacarina, nutrasweet, sucralosa, acesulfano-K (ace-K), etc. Los reemplazos de comida pueden fabricarse utilizando técnicas bien conocidas por aquellos expertos en la materia. Varias técnicas de procesamiento existen. Típicamente, estas técnicas incluyen formación de una pasta de una o más soluciones, que pueden contener agua y uno o más de los siguientes: carbohidratos, proteínas, lípidos, estabilizadores, vitaminas y minerales. HMB se agrega típicamente a la pasta de carbohidrato antes de otros minerales. La pasta se emulsiona, homogeneiza y enfría. Varias otras soluciones pueden agregarse a la pasta antes del procesamiento, después del procesamiento o en ambos tiempos. La fórmula procesada se esteriliza entonces y puede diluirse para secarse en un polvo, utilizarse en una base lista para alimentar o empacarse en una forma líquida concentrada. Cuando la fórmula resultante se entiende que es un líquido listo para alimentar o líquido concentrado, una cantidad apropiada de agua debería agregarse antes de esterilización. Las composiciones sólidas tales como barras, galletas, etc., también pueden fabricarse utilizando técnicas conocidas por aqueiios expertos en la materia. Por ejemplo, pueden fabricarse utilizando tecnología de extrusión fría como se sabe en la materia. Para preparar tales composiciones, típicamente todos los componentes en polvo se mezclarán en seco juntos. Tales constituyentes típicamente incluyen las proteínas, premezclas de proteína, ciertos carbohidratos, etc. Los componentes solubles en grasa se mezclan entonces juntos y mezclan con la premezcla en polvo anterior. Finalmente cualquier componente líquido se mezclan entonces en la composición , formando una composición similar al plástico o pasta. El proceso anterior se propone para dar una masa de plástico que puede entonces formarse, sin cambios qu ímicos o médicos adicionales q ue ocurren, por el procedimiento conocido como extrusión o formación fría. En este proceso, la masa de plástico se forza a presión relativamente baja a través de una boquilla, que confiere la forma deseada. El exudato resultante se corta entonces en una posición apropiada para dar productos del peso deseado. Si se desea, el producto sólido se reviste entonces, para aumentar la admisibilidad, y empacarse para distribución . Típicamente, el paquete proporcionará direcciones para usarse por el consumidor final (es decir, consumirse por un paciente con cáncer, para ayudar a prevenir la pérdida de músculo mag ro, etc.). Las composiciones sólidas de la presente invención también pueden fabricarse a través de una aplicación horneada o extrusión calentada para producir cereales, galletas y galletitas. Un experto en la materia sería capaz de seleccionar uno de los muchos procesos de fabricación disponibles para producir el producto final deseado. Como se observa arriba, H M B también puede incorporarse en jugos, bebidas no carbonatadas, bebidas carbonatadas , soluciones de electrolito, aguas con sabor (de aq uí en adelante colectivamente "bebidas"), etc. H M B típicamente comprenderá de 0.5 a 2gm/porción de las bebidas. Los métodos para producir tales bebidas se conocen bien en la materia. La atención del lector se dirige a las Patentes de Estados Unidos Nos. 6, 1 76,980 y 5, 792,502, los contenidos de las cuales se incorporan en la presente para referencia. Por ejemplo, todos los ingredientes, incluyendo H M B se disuelven en un volumen apropiado de agua. Sabores, colores, vitaminas, etc. se agregan entonces opcionalmente. La mezcla se presu riza entonces, empaca y almacena hasta su envío. Cualquier enfermedad con la cual el desperdicio o inflamación se asocia tal como cardiovascular, microvascular periférico, sistema nervioso central, oncología , estados de enfermedad inmune e infecciosa puede tratarse de acuerdo con los métodos presentes. Preferentemente, la enfermedad se selecciona del grupo consistiendo de cáncer, caquexia, desperdicio asociado con la edad, desperdicio asociado con permanencia en el hospital a largo plazo, VI H/S IDA, artritis, trauma, enfermedad del h ígado, enfermedad de Chron u otras enfermedades del intestino inflamatorio (I BD), insuficiencia renal y COPD (enfermedad pulmonar obstructiva crónica) . Más preferentemente, la enfermedad es caquexia. La presente invención proporciona, en otra modalidad , un método para el tratamiento del desperdicio asociado con enfermedad de un paciente, tal como un mamífero, preferentemente un humano. El método comprende administrar al paciente la composición arriba descrita, que comprende H M B en cantidades suficientes para tratar el desperdicio asociado con la enfermedad , en donde, en la administración de la composición al paciente, el desperdicio asociado con enfermedad se trata. La cantidad de H M B que es suficiente para tratar desperdicio asociado con enfermedad en un paciente dado puede determinare de acuerdo con métodos bien conocidos en la materia. Cando se trata el desperdicio asociado con la enfermedad de un paciente, deseablemente, la composición comprendiendo H MB se administra a un paciente que padece de desperdicio asociado con la enfermedad en tal cantidad , en tal manera, y durante tal periodo de tiempo que la masa de tejido magro del paciente aumentará si una disminución concomitante en la masa grasa del paciente. Un ejemplo, dentro del contexto para tratar desperdicio asociado con caquexia de cáncer de un humano , cuando la composición se administra oralmente aproximadamente dos veces un día para un mínimo de dos semanas; la dosis es suficiente para proporcionar al menos 2gm H M B/día. La presente invención proporciona, en otra modalidad, un método para reducir la tasa de crecimiento de tumor en un paciente, tal como un mamífero, preferentemente un h umano. El método comprende administrar al paciente la composición arriba descrita, que comprende HMB en cantidades suficientes para reducir la tasa de crecimiento de tumor, en donde, en la administración de la composición al paciente, la tasa de crecimiento de tumor se reduce. La cantidad de H M B que es suficiente para atenuar el crecimiento de tumor en un paciente dado puede determinarse de acuerdo con métodos bien conocidos en la materia . Cuando se trata el crecimiento de tumor en un paciente, deseablemente, la composición comprendiendo H M B se administra a un paciente que padece de crecimiento de tumor en tal cantidad , en tal manera, y durante tal periodo de tiempo que la tasa de crecimiento de tumor del paciente dismin uirá. Un ejemplo, dentro del contexto para tratar el crecimiento de tumor en un humano adulto, cuando la composición se administra oralmente aproximadamente dos veces al día por un mínimo de dos semanas; la dosis es suficiente para proporcionar al menos aproximadamente 2gm H M B/dia. La presente invención proporciona, en otra modalidad , un método para subreg ular la expresión y/o actividad de quinasa de proteína C. Ejemplos l-IV muestran que tanto EPA como H M B atenuaron la activación inducida por PI F de quinasa de proteína C (PKC) y la degradación subsiguiente de ???a y acumulación nuclear de factor nuclear-?? (N F-KB) . La presente invención proporciona , en otra modalidad , u n método para subregular la expresión y/o actividad de factor nuclear kappa B . Ejemplos l-IV muestran que tanto EPA como H M B aten uaron activación inducida por PI F de quinasa de proteína C (PKC) y la degradación subsiguiente de ???a y acumulación nuclear de factor nuclear-?? (N F-KB) . La presente invención proporciona, en otra modalidad , un método para subregular la expresión y/o actividad de enzimas de conjugación de ubiquitin. Ejemplos l-IV muestran que esto se acompaña por u na reducción en la expresión de enzima de conjugación de ubiquit¡n-E214k. La combinación de EPA y H M B fue al menos tan efectiva o más efectiva que cualquier tratamiento solo. Estos resultados muestran que tanto EPA como H MB conservan la masa muscular al aten uar la degradación de proteína a través de subregulación de la expresión incrementada de componentes reguladores clave de la trayectoria proteolítica de proteosoma-ubiquitin . La presente invención proporciona, en otra modalidad, un método para subregular la expresión y/o actividad de componentes de 26S proteasoma. Ejemplos l-IV muestran que la actividad de proteasoma, determinada por la actividad de enzima 'similar a químotripsin' , se aten úa por H M B. La expresión de proteína de las subunidades 20S a o ß se reduce por al menos 50%, como fue para las subunidades MSS 1 y p42 de la subunidad reguladora de proteasoma 19S.

Ejemplo I Prevención de pérdida de peso y aten uación de degradación de proteína en animales con caquexia de cáncer Este estudio evalúa el efecto de HM B, en comparación con EPA o combinación , en pérd ida de peso inducida por tumor MAC1 6 y el mecanismo incluido. La pérdida de peso inducida por tumor MAC 16 se induce principalmente por PI F. Los ratones N M RI macho de cepa pura (peso promedio 25g) se obtienen de nuestra propia colon ia de procreación y se transplantan con fragmentos del tumor MAC 16 s.c. en el flanco por medio de un trocador, seleccionándose de animales donadores con pérdida de peso establecida como se describe en Bibby, M.C. et al., Characterization of a transplantable adenocarcinoma of the mouse colon producing cachexia in recipient animáis. J . Nati. Cáncer Inst. , 78:539-546, 1 987) . Los animales transplantados se alimenta con una dieta de crianza de rata y ratón (Special Diet Services, Witham, Reino Unido) y ag ua ad libitum, y la pérdida de peso fue evidente 10-12 d ías después del implante del tumor. Los animales justo antes del desarrollo de pérdida de peso se aleatorizan para recibir diariamente ya sea EPA (en aceite de olivo) , HM B (en PBS) o la combinación como se describe en las leyendas de la figura administrada p.o. por cebadura, mientras que los animales de control recibieron ya sea aceite de olivo o PBS. EPA (98% como ácido libre) se compra de Biomol Research Laboratories, Inc. , PA, USA. HMB (como la sal de calcio) se obtiene de Abbott Laboratories, Columbus, Ohio, USA. Todos los grupos contuvieron u n mínimo de 8 ratones. El volumen de tumor, peso corporal y toma de agua y alimentos se monitorean diariamente. Los animales se terminan por dislocación cervical cuando la pérdida de peso corporal alcanzó 25% , y todos los estudios se condujeron de acuerdo con las Directrices UKCCR para el cuidado y uso de animales de laboratorio. Los músculos soleos se disecan rápidamente, junto con tendones intactos, y se mantienen en salina fría isotónica antes de la determinación de degradación de proteína.

Los músculos soleos recientemente disecados se fijan a través de los tendones a soportes de alambre de aluminio, bajo tensión , a longitud aproximadamente de reposo para preven ir el acortamiento del músculo y preincuban por 45 min en 3ml de regulador de bicarbonato Krebs-Henseleit oxigenado (95% oxígeno:5% dióxido de carbono) (pH 7.4) conteniendo 5mM glucosa y 0.5mM cicloheximida. La degradación de proteína se determina por la Ijberación de tirosina durante un periodo de 2h como se describe en Waalkes, T. P. et al., A fluorimetrci meted for the estimation of tyrosine in plasma and tissues. J . Lab. Clin . Med. , 50:733-736, 1 957. La actividad de proteasoma funcional se determina al medir la actividad de enzima 'similar a quimotripsin' , la actividad proteol ítica predominante de las ß-subunidades de la proteasoma de acuerdo al método de Orino, E. et al. ATP-dependent reversible association of proteasomes with múltiple protein components to form 26S complexes that degrade ubiquitinated proteins in human HL-60 cells. FEBS Lett. , 284:206-210, 1991 . Los músculos se enjuagan con PBS frío, adelgazan y sonican en 20mM Tris, HCI , pH 7.5, 2mM ATP, 5mM MgCI2 y 1 mM DTT. El sonicato se centrífuga entonces por 10 min a 18,000g a 4°C y el sobrenadante se utiliza para determinar la actividad de enzima 'similar a quimotripsin' por la liberación de cumarin de aminometil (AMC) de succinil de subtrato fluorogénico -LLVY-AM C. La actividad se mide en la ausencia y presencia de la lactacistina inhibidora de proteasoma específica (1 0 µ?). Solamente la actividad suprimible de lactacistina se considera que es específica de proteasoma. Para muestras Western blottinh de proteína sistólica de músculo soleo (2 a 5 µ9), obtenidas del ensayo anterior, se resuelven en 10% SDS-PAGE y se transfieren a 0.45 µ?? membrana de nitrocelulosa (Hybond™, Amersham Life Science Products, Bucks, Reino Unido), que se ha bloqueado con 5% Marvel en PBS. Los anticuerpos primarios para MSS1 y p42 se utilizan a una dilución de 1:5000, para a-subunidades de proteasoma 20S a 1:1500 y para ß-subunidades a 1:1000, mientras el anticuerpo para ?214? se utiliza a una dilución de 1:500. Los anticuerpos secundarios se utilizan a una dilución de 1:2000. Los anticuerpos monoclonales de ratón a subunidades a de proteasoma 20S 1, 2, 3, 5, 6 y 7 (clon MCP 231), subunidad ß3 de proteasoma 20S (HC10), subunidad Rpt1 ATPase reguladora 19S (S7, Mss1; clon MSS1-104) y subunidad Rpt4 ATPass.e reguladora 19S (S106, p42; clon p42-23) se compran de Affiniti Research Products, Exeter, Reino Unido. Antisueros policlonales de conejo para enzima E2 de conjugación de ubiquitin (anticuerpo anti-UBC2) fue un regalo de Dr. Simón Wing, Universidad McGill, Montreal, Québec, Canadá. Los anticuerpos secundarios de anti-ratón de conejo y anti-conejo de cabra conjugados con peroxidasa fueron de Dako Ltd., Cambridge, Reino Unido. La incubación se lleva a cabo por 2h a temperatura ambiente, y se desarrolla por quimiluminescencia (ECL; Amersham). Una relación de respuesta a dosis de HMB en pérdida de peso en ratones que llevan el tumor MAC16 se muestra en la FIG. 2. La dosis de H MB mayor a 0.125g/kg causó una reducción significativa en pérdida de peso (FIG. 2A). Las diferencias del grupo de control se indican como a, p<0.05; b, p<0.01 y c, p<0.005. La atenuación de pérdida de peso no se acompaña por una alteración en toma de agua y alimentos. Un nivel de dosis de 0.25g/kg se elige para todos los experimentos subsiguientes. El efecto de HM B, EPA y la combinación de H M B y EPA en pérdida de peso en ratones que llevan tumor caquético MAC 16 se muestra en la FI G. 3. Las diferencias del grupo de control se indican como a, p<0.05; b, p<0.01 o c, p<0.005. U na dosis subóptima de EPA se elige para investigar interacciones con H M B . Todos los tratamientos causaron un incremento significativo en peso del músculo soleo (FIG . 4A), y una reducción significativa en liberación de ti.rosina (FIG. 4B) , indicando una reducción en degradación de proteína total. Diferencias del grupo de control PBS se indican como a, p<0.05; b, p<0.01 o c, p<0.005. En las dosis elegidas, HM B fue tan efectivo como EPA. La expresión de proteasoma ha mostrado ser elevada en músculos gastrocnemios de ratones llevando el tumor MAC 16 y esta expresión genética incrementada ha mostrado atenuarse por EPA. Los resultados en la FI G. 5 muestran que la actividad de proteasoma funcional, según se determina por actividad de enzima 'similar a quimotripsin' , se atenúa por H M B al mismo grado que EPA en las dosis elegidas, y que la combinación de H M B y EPA no produjo una depresión adicional en actividad. Las diferencias de control se indican como c, p<0.005. La expresión de proteína de subunidades de proteasoma se analiza por Western blotting de sobrenadantes de tejidos de músculo sonicado. La expresión de -subunidades de proteasoma 20S, las unidades estructurales de la proteasoma se atenúa tanto por HMB como EPA, y hubo alguna indicación de una disminución adicional de la banda 2 para la combinación (FIG. 6A). Las diferencias de control se muestran como c, p<0.001 , mientras que las diferencias de H M B se muestran como e, p<0.01 . Expresión de las ß-subunidades de proteasoma 20S, las subunidades catalíticas de la proteasoma, también se atenúan por HMB y EPA, pero la combinación fue más efectiva que cualquier agente solo (FIG . 6B) . Las diferencias de control se muestran como c, p<0.001 . La expresión de MSS1 , una subunidad ATPase del complejo regulador de proteasoma 1 9S se muestra en la FIG. 7A. Tanto H M B como EPA aten uó la expresión de MSS1 , pero la combinación no parece producir una reducción adicional. Los resultados similares se obtienen con p42, otra subunidad ATPAse del regulador 1 9S, que promueve asociación dependiente de ATP de la proteasoma 20S con el regulador 1 9S para formar la proteasoma 26S (FIG. 7B). Las diferencias de control se muestran como c, p<0.001 . De nuevo tanto HM B como EPA parecieron ser ig ualmente efectivos, mientras que la combinación no pareció reducir expresión de p42 más. La expresión de la enzima de conjugación de ubiq uitin, E2 4K también se reduce tanto por H M B como EPA, mientras que la combinación causó una reducción adicional en la expresión (FIG. 8). Las diferencias de control se muestran como b, p<0.01 y c, p<0.001 , mientras que las diferencias de HM B solo se muestran como d, p<0.05 y f, p<0.001 . Estos resultados confirman que H MB es tan efectivo como EPA para atenuar pérdida de masa muscular, degradación de proteína y subregulación de la trayectoria proteolítica de ubiquitin-proteasoma, y este mecanismo parecer ser responsable de conservación de masa muscular en ratones caquéticos llevando el tumor MAC1 6. Este estudio ha mostrado que HMB es efectivo para atenuar el desarrollo de caquexia o perdida de peso involuntaria en ratones que llevan tumor MAC16 y produjo una reducción en degradación de proteína en músculo esquelético al subregular la expresión incrementada de la trayectoria de ubiq uitin-proteasoma . De esta manera H M B es tan efectivo como EPA para reducir expresión de proteína de las subunidades y ß de proteasoma 20S, así como también dos subu nidades de MSS1 y p42 de regulador 1 9S, expresión de E214k y actividad proteolítica de proteasoma.

Ejem plo II Atenuación de crecim iento de tumor en animales El estudio animal descrito en el Ejemplo I anterior también evalúa el efecto de H M B en tasa de crecimiento de tumor en ratones que llevan tumor caquético MAC 16. El experimento se conduce como se describe en el Ejemplo 1 . Una relación de respuesta de dosis de H M B solo en tasa de crecimiento de tumor en ratones llevando el tumor MAC1 6 se muestra en la FIG . 2B. Las diferencias del grupo de control se indican como a, p<0.05; b, p<0.01 y c, p<0.005. Las dosis de HMB mayores a 0.125g/kg casaron una reducción significativa en tasa de crecimiento de tumor. La atenuación del crecimiento de tumor no-se acompaña por una alteración en toma de alimentos y agua.

Ejemplo III Atenuación de degradación de proteína en miotubos de murino Este estudio examina el efecto de HMB en degradación de proteína inducida por PIF y trayectorias de señalización en miotubos de murino para determinar el mecanismo de la atenuación de la expresión incrementada de la trayectoria proteolítica de ubiquitin-proteasoma. Los miotubos C2Ci2 se pasan de manera rutinaria en DMEM complementado con 10% FCS, glutamina y 1% penicil-estreptomicin bajo una atmósfera de 10% C02 en aire a 37°C. Los miotubos se forman al permitir cultivos confluentes para diferenciar en DMEM conteniendo 2% HS, con cambios de medio cada 2 días. PIF se purifica de tumores MAC16 sólidos (Todorov, P. et al., Characterization of a cáncer cachetic factor. Nature, 379:739-742, 1996) cortados de ratones con una pérdida de peso de 20 a 25%. Los tumores se homogeneizan en 10mM Tris-HCI, pH 8.0, conteniendo 0.5mM fluoruro de fenilmetilsulfonil, 0.5mM EGTA y 1mM ditiotreitol a una concentración de 5ml/g tumor. El sulfato de amonio sólido se agrega a 40% p/v y el sobrenadante, después del retiro del sulfato de amonio, se somete a cromatografía de afinidad utilizando anticuerpo monoclonal anti-PI F acoplado a una matriz sólida como se describe en Todorov, P et al., Induction of muscle protein degradation and weight loss by a tumor product. Cáncer Res. , 56: 1256-1261 , 1 996. Las fracciones inmunogénicas se concentran y utilizan para estudios adicionales. Los miotubos en multiplatos de seis cavidades se marcan con L-[2,6"3H]fenilalanina (0.67mCi/mmole) por 24h en 2ml DMEM conteniendo 2% HS. Se enjuagan entonces tres veces en PBS seguido por una incubación de 2h a 37°C en DM EM sin renol rojo hasta que no más reactividad apareció en el sobrenadante. Estos miotubos se incuban además entonces por 24h en la presencia de PI F, con o sin EPA o H M B, en DM EM fresco sin fenol rojo, para prevenir el enfriamiento de conteos, y en la presencia de 2mM fenilalanina fría para prevenir la reincorporación de radioactividad. La cantidad de radioactividad liberada en el medio se expresa como un porcentaje de cultivos de control no expuestos a PI F para determinar degradación de proteína total. Para medición de liberación de ácido araquidónico, miotubos en multiplatos de seis cavidades conteniendo 2ml DMEM con 2% HS se marcan por 24h con 1 0µ? ácido araq uidónico (conteniendo 1 µ?? de [3H] araquidonato/ml) (Smith , H et al., Effect of a cáncer cachetic factor on protein synthesis/degradation in murine C2C12 myoblast: Modulation by eicosapentaenoic acid . Cáncer Res. , 59:5507-551 3, 1 999). Las células se enjuagan entonces de manera extensiva con PBS para remover indicios de [3H]araquidonato sin incorporar y ya sea EPA o H MB se agrega 2h antes a PI F. Después de 24h más 1 ml de medio se remueve para determinar la radioactividad liberada. La actividad funcional de las subu nidades ß de la proteasoma se determina como la actividad de enzima 'similar a quimotripsin' obtenida de manera fluorimétrica de acuerdo al método de Orino, E. et al., ATP-dependent reversible association of proteasomes with múltiple protein components to form 26S complexes that degrade ubiquitinated proteins in human HL-60 cells. FEBS Lett. , 284:206-21 0, 1 991 . Los miotubos se exponen a PI F por 24h con o son EPA o HM B agregados 2h antes a PI F y la actividad de enzima se determina en una fracción de sobrenadante (Whitehouse, A.S. et al., I ncreased expression of the ubiquitin-proteasome pathway ¡n murine myotubes by proteolysis-inducing factor (PI F) is associated with activaction on the transcription factor N F-??. Br. J . Cáncer, 89: 1 1 16-1 122, 2003) por la liberación de cumarin de aminometil (AM C) de succinil-LLVY-AMC (0.1 mM) en la presencia o ausencia de la lactacistin inhibidora de proteasoma específica (1 0 µ?) (Fenteany, G. et al., Lactacystin , proteasome function and cell fate. J . Biol. Chem . , 273:8545-8548, 1 988). Solamente la actividad suprimible de lactacistin se considera por ser específica de proteasoma. La actividad se ajusta para la concentración de proteína de la muestra, determinada utilizando el ensayo Bradford (Sigma Chemical Co. , Dorset, Reino Unido) utilizando albúmina de suero de bovino como estándar. Para análisis Western blot, proteína citosólica (2 a 5µg) obtenida para el ensayo anterior se disuelve en 1 0% SDS-PAGE y se transfiere a 0.45 µ?t? membrana de nitrocelulosa, que se ha bloqueado con 5% Marvel en PBS, a 4°C durante la noche. Los anticuerpos primarios se utilizan a u na dilución de 1 : 1 00 (anti-actin y PKCa); 1 :500 (anti-ERK1 y 2); 1 : 1000 (ß-subunidad de anti-proteasoma 20S e ??? ); 1 : 1 500 (a-subunidad de anti-proteasoma 20S) o 1 :5000 (anti-p42), mientras los anticuerpos secundarios se utilizan a una dilución de 1 :2000. La incubación se lleva a cabo por 2h a temperatura ambiente y el desarrollo fue por ECL. La carga se cuantifica por concentración de actin. Las proteínas de unión de ADN se extraen de miotubos por el método de Andrews, N .C. et al., . Una técnica de microprecipitación rápida para extracción de proteínas de unión a ADN de números limitantes de célu las mamíferas. N ucleic Acid Res. , 2499, 1 991 , que utiliza lisis hipotónica seguida por extracción rica en sal de núcleos. El ensayo de unión EMSA (ensayo de cambio de movibilidad electroforética) se lleva a cabo de acuerdo a las instrucciones del fabricante. Ya que la activación y deg radación de proteína de la trayectoria proteolítica de ubiq uitin-proteasoma en ratones que llevan el tumor MAC 1 6 se enseña que se media por PI F, estudios mecan ísticos en el efecto de H M B en degradación de proteína se llevan a cabo en miotubos de murino tratados con PIF. La interrupción de proteína total inducida por PI F con una curva de respuesta a dosis en forma de campana típica, como se reporta previamente por Gomes-Marcondes, et al., Development of an in-vitro model system to investígate the mechanism of muscle protein catabolism induced by proteolysis-inducing factor. Br. J. Cáncer, 86:1628-1633, 2002 con un efecto máximo a 4 nM. El efecto de EPA se ha mostrado previamente (Smith, H. J. et al., Effect of a cáncer cachetic factor on protein synthesis/degradation in murine C2C 2 myoblast: Modulation by eicosapentaenoic acid. Cáncer Res., 59:5507-5513, 1999; Whitehouse, A.S. et al., Induction of protein catabolism in myotubes by 15(S)-hydroxyeicosatetraenoic acid through mcreased expression of the ubiquitin-proteasome pathway. Br. J. Cáncer, 89:737-745, 2003; y Whitehouse, A.S., et al., Increased expression of the ubiquitin-proteasome pathway in murine myotubes by proteolysis-inducing factor (PIF) is associated with activaction on the transcription factor NF-??. Br. J. Cáncer. 89: 1116-1122, 2003) para ser efectivo a 50µ?, y los datos en la FIG. 9A muestran que en una concentración de 50µ?, tanto HMB como EPA son efectivos de igual manera para atenuar degradación de proteína inducida por PIF. También hubo algo de atenuación a 25µ? HMB a concentraciones bajas, pero no a altas de PIF. Las diferencias de control en la ausencia de PIF se indican como a, p<0.005, mientras las diferencias de control con PIF (para grupos con adiciones de MHV o EPA) se indican como b, p<0.01 y c, p<0.005. La degradación de proteína inducida por PIF se ha mostrado previamente que se debe a una expresión incrementada de los componentes reguladores de la trayectoria proteolítíca de ubiquitin-proteasoma por Lorite, M.J., Smith, H.J., Arnold, J.A., Morris, A., Thompson, M.G and Tisdale, M.J. Activation of ATP-ubiquitin-dependent proteolysis in skeletal muscle in vivo and murine myoblast in vitro by a proteolysis-inducing factor (PIF). Br. J. Cáncer, 85:297-302, 2001 and Gomes-Marcones, M.C.C., Smith, H.J., Cooper, J.C. and Tisdale, M.J. Development of an in vitro modelo system to investígate the mechanism of muscle protein catabolism induced by proteolysis-inducing factor. Br. J. Cáncer 86:1628-1633, 2002. La actividad funcional de esta trayectoria se mide por la actividad de la enzima 'similar a quimotripsin", la actividad proteolítica predominante de las subunidades ß de la proteasoma. PIF indujo un incremento en la actividad de la enzima 'similar a quimotripsin', que fue máxima a 4.2nM. El efecto de PIF se atenúa completamente por 50µ? EPA y tanto 25 como 50µ? HMB. (FIG.9B, diferencias de control se muestran como a, p<0.001, mientras las diferencias en la presencia de EPA o HMB se muestran como b, p<0.001). Un efecto similar se observa en expresión de subunidades a proteasoma 20S, subunidades ß y p42, y subunidad ATPase del regulador 19S que promueve asociación dependiente de ATP de la proteasoma 20S con el regulador 19S para formar la proteasoma 26S (FIG. 10). En todos los casos, la expresión se incrementa por PIF a 4.2 y 10nM y este se atenúa por EPA y HMB a 50µ?, pero no a 25µ?. Estos resultados confirman que HMB atenúa la degradación de proteína a través de un efecto en inducción de la trayectoria de ubiquitin-proteasoma.

Ejemplo IV Efecto en actividad de mediador de señalización en inflamación v proteolísis El estudio in vitro descrito en el Ejemplo III anterior también evalúa el efecto de HMB en moléculas que son mediadores clave en la trayectoria de inflamación. El experimento se conduce como se describe en el Ejemplo III. La activación de PKC se ha mostrado que activa la cascada de quinasa regulada por señal extracelular (ERK) de trayectorias de señalización MAPK (Toker, A. Signalling through protein kinase C. Front. Biosci., 3:1134-1147, 1998; Wolf, I and Seger, R. The mitogen-activated protein kinase signalling cascade: from bench to bedside, IMAJ., 4:641-647). ERKs activados, por ejemplo, ERK1 (o MAPK p44) y ERK2 (o MAPK p42) son capaces de fosforilarse y consecuentemente activar la fosfolipasa citosólica A2, la enzima limitante de tasa en las trayectorias incluyendo liberación de ácido araquidónico en inflamación. Además, PIF se ha mostrado inducir fosforilación de p42/44 MAPK, mientras el MAPK permaneció sin cambiar y se incluye en expresión de proteasoma inducida por PIF (Smith, H.J. et al., Signal tranduction pathways involved in proteolysis-inducing factor induced proteasome expression in murine myotubes, Br. J. Cáncer, 89:1783-1788; 2003). El efecto de EPA y HMB en este proceso se muestra en la FIG. 12. PIF indujo una fosforilación incrementada de p42/44 que fue máxima a 4.2nM y este efecto se atenúa completamente tanto por EPA como HMB a 50µ?, pero no HMB a 25µ?. La habilidad de HMB para atenuar ERK 1/2 fosforilación puede ser importante en inhibición de expresión de proteasoma inducida por PIF por HMB. Los experimentos utilizando mutantes de PKC así como también inhibidores de esta enzima muestran que esto forma un mediador central de señalización intracelular por PIF. PKC se incluye probablemente en fosforilación (y degradación) de ?-??a conduciendo a acumulación nuclear de NF-?? y aumentó la transcripción genética. PÍF estimula la transubicación de PKCa del citoplasma a la membrana de plasma (FIG. 11) resultando en activación con un efecto máximo a 4.2nM PIF como con degradación de proteína (FIG. 9). Este proceso se atenúa de manera efectiva tanto por EPA como HMB a 50µ?; mientras que HMB fue menos efectivo a 25µ? (FIG. 11). Esto sugiere que la estimulación inducida por PIF de PKC se atenúa por HMB a través de inhibición de PKC. Como se trata previamente, PIF induce la degradación de ?-??a y estimula la acumulación nuclear de NF-?? y este proceso se ha mostrado atenuarse por 50µ? EPA (Whitehouse, A.S. et al., Increased expression of the ubiquitin-proteasome pathway in murine myotubes by proteolysis-inducing factor (PIF) is associated with activaction on the transcription factor NF-??. Br. J. Cáncer, 89: 1116-1122, 2003). Los resultados en la FIG. 13A muestran HMB a 50µ? para atenuar de manera efectiva la degradación de ?-??a en la presencia de PIF en miotubos de murino, y previenen la acumulación nuclear de NF-?? (FIG. 13C). Las diferencias de OnM PIF se muestran como b, p<0.01 y c, p<0.001. Solamente inhibición parcial de unión de NF-?? a ADN se observa cuando HMB se utiliza a una concentración de 25µ? (FIG. 13B). Las diferencias de OnM PIF b = p<0.01 y c=p<0.001. Las diferencias entre 50uM HMB y PIF tratadas contra PIF solo en la misma concentración e=p<0.01 y f=p<0.001. Estos resultados sugieren que el efecto total de HMB es comparable con aquel de EPA para prevenir el movimiento de NF-?? en el núcleo con activación concomitante de expresión genética. De esta manera HMB parece ser un agente efectivo en el tratamiento de inflamación inducida por citoquina y desperdicio muscular en caquexia de cáncer. HMB parece ejercer su efecto por inhibición de actividad de PKC, y estabilización resultante del complejo ???/ NF-??. Ya que estas moléculas son mediadores clave en la trayectoria de inflamación, HMB parece ser un compuesto anti-inflamatorio.

Ejemplo V Composición de un producto nutricional para prevenir pérdida de peso involuntaria La lista específica de materiales para fabricar el producto nutricional de este Ejemplo está presente en la Tabla 1. Por supuesto, varios cambios en ingredientes específicos y cantidades pueden hacerse sin apartarse del alcance de la invención.

Tabla 1 Lista de Materiales INGREDIENTE CANTIDAD (KG) AGUA 316 PREMEZCLA DE MINERAL ULTRAPEDAZO/PEDAZO 0.06 SULFATO DE ZINC 0.033 SULFATO DE MANGANESO 0.0082 MOLI BDATO DE SODIO 0.00023 CLORURO DE CROMO 0.00029 SELENITA DE SODIO 0.000098 CLORURO DE POTASIO 0.0.72 CITRATO DE SODIO 2.89 YODURO DE POTASIO 0.00009 CITRATO DE POTASIO 1.5 JARABE DE MAÍZ 7.68 MALTODEXTRIN 53.6 FOSFATO DE MAGNESIO DIBÁSICO 0.26 FOSFATO DE CALCIO TRIBÁSICO 0.99 CLORURO DE MAGNESIO 1.2 SUCROSA 11.9 FRUCTOOLIGOSACÁRIDO 5.9 TRIGLICÉRIDO DE CADENA MEDIA 2.6 ACEITE DE CAÑOLA 1.5 ACEITE DE SOYA 0.87 57% PALM ITATO DE VITAMINA A 0.007 PREMEZCLA DE VITAMINA DEK 0.04 VITAMINA D 0.0000088 ACETATO DE D-ALFA-TOCOFEROL 0.036 FILOAQUINONA 0.0006 CARRAGEHAN 0.03 LECITINA DE SOYA . 0.6 CASEI NATO DE SODIO 15.5 CASEI NATO DE CALCIO 4.2 MONOHIDRATO HMB DE CALCIO 2.6 AISLADO DE PROTEÍNA LÁCTEA 14 ACEITE DE SARDI A DEODORIZADO REFINADO 6.9 ACIDO ASCÓRBICO . 0.12 45% HIDRÓXIDO DE POTASIO 0.13 TAURIN 0.12 PREMEZCLA DE VITAMINA SOLUBLE EN AGUA 0.11 NIACINAMIDA 0.017 PANTOTETANTO DE CALCIO 0.01 HIDROCLORURO DE CLORURO DE TI AM I NA 0.003 HIDROCLORURO DE PIRIDOXINA 0.003 RIBOFLAVIN 0.002 ÁCIDO FÓLICO 0.004 BIOTIN 0.0034 CIANOCOBALAMIN 0.000038 PALMITATO ASCORBIL 0.03 CLORURO DE COLINA 0.25 L-CARNITINA 0.0681 N&A VAINILLA DE MALVAVISCO 1.6 N%A DULCE DE LECHE 0.27 El producto nutricional líquido de la presente invención se fabrica al preparar tres pastas q ue se mezclan, combinadas con aceite de sardina deodorizado refinado, tratan con calor, estandarizan , empacan y esterilizan. El proceso para fabricar 454kg (1 , 000 libras) del prod ucto nutricional líquido, utilizando la Lista de Materiales de la Tabla 7, se describe en detalle abajo. Una pasta dé carbohidrato/mineral se prepara al calentar primero aproximadamente 62.6kg de agua a una temperatura en el rango de aproximadamente 71 °C a 77°C con agitación. HMB se agrega al agua y disuelve al agita r la solución resultante por al menos cinco minutos. La cantidad requerida de citrato de potasio y premezcla de minera ultrapedazo/pedazo se agrega al agua y disuelve al agitar la solución resultante por al menos 1 0 minutos. Los siguientes minerales se calientan entonces, en orden enlistado, con alta agitación ; cloruro de magnesio, cloruro de potasio, citrato de sodio, yoduro de potasio, fosfato de magnesio y fosfato de tricalcio. La pasta se deja mezclar bajo agitación moderada hasta que se disolvió completamente o d ispersó. El jarabe de maíz, sucrosa y maltodextrina se ag regan entonces a la pasta con agitación . Ag regar la cantidad req uerida de FOS y dejar mezclar. La pasta completada de carbohidrato/mineral se mantiene con alta agitación a una temperatura en el rango de aproximadamente 60-66°C por no más de 8 horas hasta que se mezcla con las otras pastas. Una pasta de aceite se prepara al combinar y calentar los triglicéridos de cadena media (aceite de coco fraccionado) , aceite de cañóla y aceite de soya a una temperatu ra en el rango de aproximadamente 32-43°C con agitación . La premisa DEK de vitamina se agrega y se deja mezclar hasta q ue se dispersa completamente. Las cantidades requeridas de los siguientes ingredientes se agregan: lecitina sly, vitamina A, plamitato de ascorbil, y vitamina E. El carragahen se agrega y se deja mezclar hasta que se dispersa completamente. La pasta de aceite completada se mantiene baja agitación moderada a una temperatura en el rango de aproximadamente 32-43°C por no más de 8 horas hasta que se mezcla con las otras pastas. U na pasta de proteína se prepara al calentar primero aproximadamente 1 96.78kg de agua a una temperatu ra en el rango de aproximadamente 60-63°C con agitación . Caseinato de calcio y caseinato de sodio y aislado de proteína de leche se mezclan en la pasta utilizando u n aparato de mezcla. La pasta de proteína completada se mantiene bajo agitación a una temperatura en el rango de aproximadamente 54-60°C por no más de 2 horas antes de mezclarse con las otras pastas. El aceite y la pasta de proteína se mezclan juntos con agitación y la pasta mezclada resultante se mantiene a una temperatura en el rango de aproximadamente 54-66°C. Después de esperar por al menos cinco minutos la pasta de carbohidrato/mineral se agrega a la pasta mezclada de la etapa precedente con agitación y la pasta mezclada resultante se mantiene a una temperatura en el rango de aproximadamente 54-66°C. El aceite de sardina deodorizado refinado se ag rega entonces a la pasta con agitación . (En un método más preferido de fabricación el aceite de sardina se medirá lentamente en el producto a medida que la mezcla pasa a través de un conducto a una velocidad constante). Preferentemente, después de al menos 5 minutos el pH de la pasta mezclada se determina. Si el pH de la pasta mezclada está por debajo de 6.55, se ajusta con hidróxido de potasio diluido a un pH de 6.5 a 6.8. Después de esperar un periodo de no menos de un minuto a no más de dos horas, la pasta mezclada se somete a deareación, tratamiento de U ltra-Alta-Temperatu ra (U H F) , y homogeneización, como se describe como sigue: utilizar una bomba positiva para suministrar la pasta mezclada para este procedimiento; calentar la pasta mezclada a una temperatura en el rango de aproximadamente 66-71 °C; dearear la pasta mezclada a 25.4-38.1 cm de Hg; emu lsionar la pasta mezclada a 61 -75 atmósferas; calentar la pasta mezclada a una temperatura en el rango de aproximadamente 120-122°C al pasar a través de u n intercambiador de calor de placa/bobina con un tiempo de conservación de aproximadamente 10 segundos; calentar U HT la pasta mezclada a una temperatura en el rango de aproximadamente 144-147°C con un tiempo de conservación de aproximadamente 5 segundos; reducir la temperatura de la pasta mezclada para que esté en el rango de aproximadamente 120-1 22°C al pasarla a través de un enfriador flash; reducir la temperatura de la pasta mezclada para estar en el rango de aproximadamente 71 -82°C al pasarla a través de un intercambidor de calor de placa/bobina; homogeneizar la pasta mezclada a aproximadamente 265 a 266 atmósferas; pasar la pasta mezclada a través de un tubo de conservación por al menos 1 6 segundos a una temperatura en el rango de aproximadamente 74-85°C; y enfriar la pasta mezclada a u na temperatura en el rango de aproximadamente 1 -70°C al pasarla a través de un intercambiador de calor grande. Almacenar la pasta mezclada a una temperatura en el rango de aproximadamente 1 -7°C, preferentemente con agitación . Preferentemente, en este tiempo prueba analítica apropiada para control de calidad se conduce. En base a los resultados de prueba una cantidad apropiada de agua de dilución (1 0-38°C) se agrega a la pasta mezclada con agitación . Una solución de vitamina y solución de sabor se preparan por separado y después se agregan a la pasta mezclada. La solución de vitamina se prepara al calentar aproximadamente 3.94kg de agua a una temperatura en el rango de aproximadamente 43-66°C con agitación, y después agregar los sigu ientes ingredientes, en el orden enlistado: ácido ascórbico, 45% hidróxido de potasio, taurin , premezcla de vitamina soluble en agua, cloruro de colin , y L-carnitina. La solución de vitamina se ag rega entonces en la pasta mezclada con agitación . La solución de sabor se prepara al ag regar sabor malvavisco y dulce de leche a aproximadamente 7.94 kg de agua con agitación.

Un producto nutricional de acuerdo a la presente invención se ha fabricado utilizando un sabor malvavisco artificial distribuido por Firmenich I nc. , Princeton, New Jersey, U .S. A. y un sabor dulce de leche natural & artificial distribuido por Firmenich Inc. La solución de sabor se agrega entonces a la pasta mezclada con agitación. Si es necesario, hidróxido de potasio diluido se agrega a la pasta mezclada de manera que el producto tendrá un pH en el rango de 6.4 a 7.0 después de esterilización . El producto completado se coloca entonces en contenedores adecuados y se somete a esterilización . Por supuesto, si procesamiento aséptico deseado podría emplearse.

Ejem plo VI Com posición de u n producto n utricional para controlar respuesta glicém ica La Tabla 2 presenta un grupo de materiales para fabricar 1 ,000 kg de u n prod ucto n utricional líquido, que proporciona n utrientes a una persona pero limita respuesta de insulina resultante. Una descripción detallada de su fabricación sigue.

Tabla 2 Grupo de materiales para un nutricional líquido Premezcla WSV (por g premezcla) : 375 mg/g niacinamida, 242 mg/g pantotenato de calcio, 8.4 gm/g ácido fólico, 62 mg/g hidrocloruro de cloruro tiamina, 48.4 gm/g riboflavin, 59.6 mg/g hidrocloruro de piridoxina, 1 65 mcg/g cianobalamin y 7305 mcg/g biotin Premezcla vitamina DEK (por g premezcla) : 81 30 I U/g vitamina D3 , 838 l U/g vitamina E, 1 .42 mg/g vitamina K1 premezcla UTM/TM (por g premezcla); 45.6 mg/g zinc, 54 mg/g hierro, 15.7 manganeso, 6.39 mg/g cobre, 222 mcg/g selenio, 301 mcg/g cromo y 480 mcg/g molibdeno Los productos nutricionales líquidos diabéticos de la presente invención se fabrican al preparar cuatro pastas que se mezclan juntas, tratan con calor, estandarizan , empaquetan y esterilizan. Una pasta de carbohid rato/mineral se prepara al calentar primero aproximadamente 82 kg de agua a una temperatura de desde aproximadamente 65°C a aproximadamente 71 °C con agitación. Con agitación, la cantidad requerida de H M B de calcio se agrega y agita por 5 minutos. La cantidad requerida de citrato de sodio y goma gele distribuido por Kelco, División of Merck and Company I ncorporated, San Diego, California, U .S. A. se agrega y agita por 5 minutos. La cantidad req uerida de la premezcla de mineral ultrapedazo/minerai pedazo (UTM/TM) (distribuida por Fortitech, Schnectady, New York) se ag rega. La pasta es amarilla verdosa en color. La agitación se mantiene hasta que los minerales se dispersan completamente. Con agitación , las cantidades requeridas de los siguientes minerales se agregan entonces: citrato de potasio, cloruro de potasio, cloruro de cromo, cloru ro de magnesio y yoduro de potasio. Después, la primer maltodextrina distribuida por Grain Processing Corporation, M uscataine, lowa, U .S. A y fructosa se agregan a la pasta bajo alta agitación , y se dejan disolver. con agitación , las cantidades requeridas de polvo de maltitol distribuidas por Roquette America, I nc. , Keokuk, lowa , jarabe de maltitol distribuido por Goleen Technologies Company, Goleen , Colorado, U .S. A. y una segunda maltodextrina distribuida por Matsutani Chemical Industry Co., Hyogo, Japón bajo el nombre de producto Fibersol® 2(E) se agregan y agitan bien hasta que se disuelve completamente. La cantidad requerida de fosfato de tricalcio y fosfato de magnesio se agrega a la pasta bajo agitación. La pasta de carbohidrato/mineral completada se mantiene bajo agitación a una temperatura de aproximadamente 65°C a aproximadamente 71 °C por no más de doce horas hasta que se mezcla con las otras pastas. Una fibra en pasta de aceite se prepara al combinar y calentar las cantidades requeridas de aceite de cártamo oleico rico y aceite de cañóla a una temperatura de aproximadamente 45°C a aproximadamente 49°C con agitación . Con agitación , las cantidades req ueridas de ésteres de luteína de Cognis of LeGrange, Illinois se agrega. Se agita por u n mínimo de 1 5 minutos. Con agitación , las cantidades requeridas de los siguientes ingredientes se ag regan al aceite caliente: lecitina (distribuida por Central Soya Company, Fort Wayne, Indiana), premezcla de Vitamina D , E, K (distribuida por Vitamins I nc. , Chicago, I llinois), vitamina a, vitamina E y beta-caroteno. Las cantidades requeridas de polisacárido de soya distribuido por Protein Technology I nternational, St. Louis, M issouri se dispersa lentamente en el aceite caliente. La pasta de aceite/fibra completada se mantiene bajo agitación moderada a una temperatura de aproximadamente 55°C a aproximadamente 65° por un periodo de no más de doce horas hasta que se mezcla con otras pastas. Una primer proteína en pasta de agua se prepara al calentar 293kg de agua a 60°C a 65°C. Con agitación , la cantidad requerida de 20% solución de citrato de potasio se agrega y mantiene por un minuto. La cantidad req uerida de caseína ácida se agrega bajo alta agitación seguida inmediatamente por la cantidad requerida de 20% hidróxido de sodio. La agitación se maquina a elevada hasta que la caseína se disuelve. La pasta se mantiene de aproximadamente 60°C a 65°C con agitación moderada. U na segunda proteína en pasta de agua se prepara al calentar primero aproximadamente 77kg de agua a una temperatura de aproximadamente 40°C con agitación. El caseinato se agrega y la pasta se agita bien hasta que el caseinato se dispersa completamente. Con agitación continúa, la pasta se calienta lentamente a 60°C a 65°C. La pasta se mantiene por no más de doce horas hasta que se mezcla con otras pastas. El grupo se ensambla al mezclar 344kg de pasta de proteína uno con 84kg de pasta de proteína dos. Con agitación, 37kg de la pasta de aceite/fibra se agrega. Después de esperar por al menos un minuto, 216kg de la pasta de carbohidrato/mineral se agrega a la pasta mezclada de la etapa precedente con agitación y la pasta mezclada resultante se mantiene a una temperatura de aproximadamente 55°C a aproximadamente 60°C. El pH del grupo mezclado se ajusta a un pH de 6.45 a 6.75 con 1 N hidróxido de potasio. Después de esperar por un periodo de no menos de un minuto no más de dos horas, la pasta de mezcla se somete a deaeración, tratamiento a ultra alta temperatura, y homogeneización . La pasta mezclada se calienta a una temperatura de aproximadamente 71 °C a aproximadamente 82°C y deaerea bajo vacío. La pasta calentada se emulsiona entonces a través de un homogeneizador de etapa única a 900 a 1 1 00 psig. Después de emulsión, la pasta se calienta de aproximadamente 99°C a aproximadamente 1 1 0°C y después se calienta a una temperatura de aproximadamente 146°C por aproximadamente 5 segundos. La pasta se pasa a través de un enfriador flash para reducir la temperatura a de aproximadamente 99°C a aproximadamente 1 1 0°C y después a través de un enfriador de placa para reducir la temperatura a de aproximadamente 71 °C a aproximadamente 76°C. La pasta se homogeneiza entonces a 3900 a 41 00/400 a 600 psig . La pasta se mantiene a aproximadamente 74°C a aproximadamente 80°C por 16 segundos y después se enfría a 1 °C a aproximadamente 7°C. En este pu nto, las muestras se toman para prueba analítica y microbiológica. La mezcla se mantiene bajo agitación . Una solución de vitamina soluble en agua (WSV) se prepara por separado y agrega a la pasta mezclada procesada. La solución de vitamina se prepara al ag regar los siguientes ing redientes a 9.4 kg de agua con agitación ; premezcla WSV (distribuida por J. B. Laboratorios, Holland, Michigan), vitamina C, cloruro de colina, L-carnitina, taurin , inositol, ácido fólico, h idrocloruro de piridoxina y cianocobalamin. La cantidad req uerida de 45% pasta de hidróxido de potasio se agrega para traer el pH a entre 7 y 1 0.

En base a los resultados analíticos de las pruebas de control de calidad , una cantidad apropiada de agua se agrega al g rupo con agitación para lograr los sólidos totales deseados. Adicionalmente, 8.8 kg de solución de vitamina se agrega al grupo diluido bajo agitación. El producto pH puede ajustarse para lograr estabilidad de producto óptima. El producto completo se coloca entonces en contenedores adecuados y se somete a esterilización terminal.

Ejemplo VII Composición de producto nutricional pediátrico La Tabla 3 presenta un grupo de materiales para fabricar 771 kg de un nutricional entérico pediátrico de la presente invención . Una descripción detallada de su fabricación sigue.

Tabla 3 Grupo de materiales para nutricional pediátrico de vainilla Premezcla UTM/TM : (por gm premezcla) 132 mg zinc, 147 mg hierro, 10.8 mg manganesi , 12.5 mg cobre, 0.328 mg selenio, 0.284 mg molíbdeno Premezcla WSV: (por gm premezcla) 375 mg niacinamida, 242 mg pantotenato de d- calcio, 8.4 mg ácido fólico, 62 mg hidrocloruro de cloruro de tiamina, 48.4 mg riboflavi n, 59.6 mg hidrocloruro de pirodixina, 165.5 mgcg cianocabalamin, 7305 mcg biotin La mezcla de vitamina soluble de aceite de reserva (mezcla OSV) se prepara al pesar la cantidad especificada de premezcla DEK en un contenedor protegido de la luz, de tapa atornillada lo suficientemente g rande para conservar 54g de vitaminas solubles en aceite. Utilizando una pipeta de plástico, la cantidad requerida de vitamina A se ag rega a la alícuota DEK. El contenedor se llena con nitrógeno antes de aplicar la tapa.

La proteína de reserva en pasta grasa (PI F) se prepara al agregar las cantidades requeridas de aceite de cártamo oleico rico, aceite de soya y aceite MCT al tanq ue de mezcla. La mezcla se calienta a 40.5°C a 49°C con agitación . Con agitación , las cantidades requeridas de ésteres de leutin de American River Nutrition of Hadley,, Massachussets se agrega. Agitar por un mínimo de 15 minutos. Los emulsionantes, lecitina (distribuida por Central Soya of Decatur, Indiana) y monoglicéridos (distribuidos por Quest of Owings Mills, Marylando) se agregan y mezclan bien para disolverse. Toda la mezcla OSV se agrega entonces. Los contenedores se enjuagan 4 a 5 veces con la mezcla de aceite para asegurar la transferencia completa de las vitaminas. Carragehan (distribuida por FMC of Rockland , Maine) y el caseinato se agregan. La pasta se mezcla bien para dispersar la proteína. La pasta PI F se mantiene hasta seis horas a 60-65°C bajo agitación moderada hasta utilizarse.

La proteína de reserva en pasta de agua (PIW) se prepara al agregar la cantidad requerida de agua a un tanque de mezcla. El agua se conserva bajo agitación moderada y trae a 76-82°C . La cantidad req uerida de caseinato se agrega al agua bajo alta agitación y mezcla en alto hasta que la proteína se dispersa completamente. La pasta de proteína se deja enfriar a 54-60°C antes de proceder. U na vez enfriada, la cantidad requerida de proteína de suero se ag rega y se mezcla bien hasta que se dispersa/disuelve completamente. La pasta PIW se mantiene por dos horas a 54-60°C hasta utilizarse.

La solución mineral de reserva (M I N) se prepara al agregar la cantidad requerida de agua a u n tanque de mezcla y se calienta a 60-68°C. La mezcla de goma de celulosa (distribuida por FMC de Newark, Delaware) se agrega al agua y mantiene bajo agitación moderada por un m ínimo de cinco minutos antes de proceder. H M B de calcio se agrega y agita por un mínimo de cinco minutos antes de proceder. Las sales minerales de cloru ro de magnesio, cloruro de potasio, citrato de potasio, yoduro de potasio y fosfato de dipotasio se agregan uno a la vez con mezclado entre cada adición para asegurar los minerales disueltos. Solución M I N completada se mantiene a 54-65°C bajo agitación baja a moderada hasta que utilizarse. La mezcla final se prepara al ag regar la cantidad especificada de pasta PIW a un tanque de mezcla y calienta bajo agitación a 54-60°C. La cantidad especificada de pasta PI F se agrega al tanque y se mezcla bien . La cantidad especificada de solución M I N se agrega a la mezcla y se mezcla bien . La cantidad especificada de cloruro de sodio se agrega a la mezcla y se mezcla bien. La cantidad especificada de sucrosa se agrega a la mezcla y se mezcla bien para disolverse. El fosfato de tricalcio se ag rega a la mezcla y se mezcla bien para dispersarse. La cantidad especificada de agua adicional se agrega a la mezcla y se mezcla bien . La mezcla final completa se mantiene bajo agitación continúa a 54-60°C . Si es necesario, el pH se ajusta a 6.45-6.8 con 1 N KOH . Después de esperar por un periodo de no menos de un minuto no más de dos horas, la pasta de mezcla se somete a deaeración , tratamiento a ultra alta temperatura, y homogeneización . La pasta mezclada se calienta a una temperatura de aproximadamente 68°C a aproximadamente 74°C y deaerea bajo vacío. La pasta calentada se emulsiona a 900 a 1 100 psig. Después de emulsión, la pasta se calienta de aproximadamente 120°C a aproximadamente 122°C y después se calienta a una temperatura de aproximadamente 149°C a aproximadamente 1 50°C. La pasta se pasa a través de un enfriador flash para reducir la temperatura a de aproximadamente 120°C a aproximadamente 1 22°C y después a través de un enfriador de placa para reducir la temperatura a de aproximadamente 74°C a aproximadamente 79°C. La pasta se homogeneiza entonces a 3900 a 41 00/400 a 600 psig. La pasta se mantiene a aproximadamente 74°C a aproximadamente 85°C por 16 segundos y después se enfría a 1 °C a aproximadamente 6°C. En este punto, las muestras se toman para prueba analítica y microbiológica. La mezcla se mantiene bajo agitación. Estandarización procede como sig ue: La solución de vitamina de reserva (WSV) se prepara al calentar la cantidad especificada de agua a 48-60°C en un tanq ue de mezcla. Citrato de potasio, premezcla UTM/TM (distribuida por Fortifech of Schenectady, New York), premezcla WSV, m-inositol, taurin , L-carnitina y cloruro de colina se agregan cada uno a la solución en orden enlistado y se dejan mezclar bien para disolver o dispersar cada ingrediente. 14.2kg de la solución de vitamina se agrega al tanque de mezcla procesaada. La solución de vainilla de reserva se prepara al agregar la cantidad especificada de agua a un tanque de mezcla. La cantidad especificada de vainilla (distribuida por Givaudan Roure of Cincinnati, Ohio) se agrega al agua y mezcla bien. 1 8.5 kg de solución de vainilla se agrega al tanque de mezcla procesada y se mezcla bien. La solución de ácido ascórbico de reserva se prepara al agregar la cantidad requerida de agua a un tanque de mezcla. La cantidad especificada de ácido ascórbico se agrega y mezcla bien para disolverse. La cantidad especificada de 45% KOH se agrega y mezcla bien. 8.4 kg de solución de ácido ascórbico se ag rega al tanque de mezcla y se mezcla bien . » La mezcla final se diluye con los sólidos totales finales al agregar 92.5 kg de agua y mezcla bien. El producto se llena en contenedores adecuados antes de esterilización terminal (retorta) .

Ejem plo VIII Com posición de un com plemento nutricional com pleto La Tabla 4 representa un grupo de materiales para fabricar 1 ,000 kg de un líquido de reemplazo de comida con sabor vainilla. Una descripción detallada de su fabricación sigue.

Tabla 4 Grupo de materiales para nutricional líquido de vainilla Premezcla WSV (por g premezcla) ; 375 mg/g niacinamida , 242 mg/g pantotenato de calcio, 8.4 gm/g ácido fólico, 62 mg/g hidrocloruro de cloruro de tiamina , 48.4 gm/g riboflavin , 59.6 mg/g hidrocloruro de piridoxina; 1 65 mcg/g cianocabalamin y 7305 mcg/g biotin Premezcla vitamina D E K (por g premezcla) . 81 30 I U/g vitamina D3 ; 838 l U/g vitamina E, 1 .42 mg/g vitamina Ki Premezcla UTM/TM (por g premezcla) : 45.6 mg/g zinc, 54 mg/h hierro, 15.7 manganeso, 6.39 mg/g cobre, 222 mcg/g selenio, 301 mcg/g cromo y 480 mcg/g molibdeno.

Los productos de reemplazo de comida líquidos de la presente invención se fabrican al preparar tres pastas que se mezclan juntas, tratan con calor, estandarizan , empaquetan y esterilizan . Una pasta de carbohidrato/mineral se prepara al calentar primero la cantidad requerida de agua a una temperatura de desde aproximadamente 65°C a aproximadamente 71 °C con ag itación. La cantidad requerida de HMB de calcio se agrega y ag ita por un mínimo de 5 minutos. Con agitación , la cantidad requerida de citrato de potasio y premezcla de mineral ultrapedazo/minerai pedazo (UTM/TM) (distribuida por Fortitech , Schnectady, New York) se agrega. La pasta es amarilla verdosa en color. La agitación se mantiene hasta que los minerales se dispersan completamente. Con agitación , las cantidades requeridas de los sig uientes minerales se agregan entonces: clor ro de magnesio, cloru ro de potasio, cloruro de sodio, citrato de sodio, yoduro de potasio, fosfato de magnesio y fosfato de tricalcio. Después, la maltodextrina distribuida por Grain Processing Corporation , Muscataine, lowa, U .S. A, sucrosa y jarabe de maíz se agregan a la pasta bajo alta agitación , y se dejan disolver. La pasta de carbohidrato/mineral completada se mantiene con agitación a una temperatura de aproximadamente 65°C a aproximadamente 71 °C por no más de ocho horas hasta que se mezcla con las otras pastas. Una proteína en pasta grasa (PI F) se prepara al combinar y calentar las cantidades requeridas de aceite de cártamo oleico rico y aceite de cañóla a una temperatu ra de aproximadamente 40.5°C a aproximadamente 49°C con agitación. Con agitación , las cantidades requeridas de lutein libre de Kemin Foods of Des Moines, lowa se agrega. Agitar por un mínimo de 1 5 minutos. Agregar los siguientes ingredientes al aceite calentado: lecitina (distribuida por Central Soya Company, Fort Wayne, I ndiana) , vitamina A, y premezcla vitamina D, E, K (distribuida por Vitamins Inc. , Chicago, Illinois). La cantidad requerida de carragehan se mezcla en seco con la cantidad requerida de proteína suero y agregar a la mezcla de lípido en agitación y se deja agitar por un mínimo de 1 0 minutos. La cantidad requerida de proteína de soya se agrega a la mezcla lentamente para asegurar mezclado apropiado. La pasta de aceite/proteina completada se mantiene bajo agitación moderada a una temperatura de aproximadamente 40°C a aproximadamente 43°C por un periodo de no más de dos horas hasta que se mezcla con las otras pastas. Una proteína en pasta de agua se prepara al calentar primero aproximadamente la cantidad req uerida de agua a una temperatura de aproximadamente 40°C con agitación. El caseinato se agrega y la pasta se agita bien hasta que el caseinato se dispersa completamente. Con agitación continúa, la pasta se calienta lentamente a 60° C a 65°C. La pasta se mantiene por no más . de doce horas hasta que se mezcla con las otras pastas. El grupo se ensambla al la cantidad requerida de pasta de proteína con cantidad requerida de la pasta de carbohidrato/mineral se agrega y se deja agitar por 1 0 minutos. Con agitación , la cantidad requerida de la pasta de aceite/proteína se agrega y agita por al menos 1 0 minutos. El pH del grupo mezclado se ajusta a un pH de 6.66 a 6.75 con 1 N hidróxido de potasio. Después de esperar por un periodo de no menos de un minuto no más de dos horas, la pasta de mezcla se somete a deaeración, tratamiento a ultra alta temperatu ra, y homogeneización . La pasta mezclada se calienta a una temperatura de aproximadamente 71 °C a aproximadamente 82°C y deaerea bajo vacío. La pasta calentada se emulsiona entonces a través de un homogeneizador de etapa única a 900 a 1 1 00 psig . Después de emulsión, la pasta se calienta de aproximadamente 99°C a aproximadamente 1 1 0°C y después se calienta a una temperatura de aproximadamente 146°C por aproximadamente 5 segundos. La pasta se pasa a través de un enfriador flash para reducir la temperatura a de aproximadamente 99°C a aproximadamente 1 1 0°C y después a través de un enfriador de placa para reducir la temperatura a de aproximadamente 71 °C a aproximadamente 76°C. La pasta se homogeneiza entonces a 3900 a 4100/400 a 600 psig. La pasta se mantiene a aproximadamente 74°C a aproximadamente 80°C por 1 6 segundos y después se enfría a 1 °C a aproximadamente 7°C. En este punto, las muestras se toman para prueba analítica y microbiológica. La mezcla se mantiene bajo agitación . Una solución de vitamina soluble en agua (WSV) se prepara por separado y agrega a la pasta mezclada procesada. La solución de vitamina se prepara al ag regar los siguientes ingredientes a 9.4 kg de agua con agitación ; premezcla WSV (distribuida por J . B. Laboratorios, Holland , M ichigan) , vitamina C, cloru ro de colina , L-carnitina, taurin , inosítol, ácido fólico, hidrocloruro de piridoxina y cianocobalamin. La cantidad requerida de 45% pasta de hidróxido de potasio se agrega para traer el pH a entre 7 y 1 0! En base a los resultados analíticos de las pruebas de control de calidad , una cantidad apropiada de agua se ag rega al g rupo con agitación para lograr los sólidos totales deseados. Adicionalmente, 8.8 kg de solución de vitamina se agrega al grupo diluido bajo agitación . El producto pH puede ajustarse para lograr estabilidad de producto óptima. El producto completo se coloca entonces en , contenedores adecuados y se somete a esterilización terminal.

Ejem plo IX Com posición de una bebida Para producir un g rupo de 1 000 kg de bebida lista para leer, 987.31 kg de agua se coloca en un envase ajustado con un agitador. A temperatura ambiente, la cantidad requerida de benzoato de potasio se agrega y se deja disolver completamente . La cantidad requerida de H M B de calcio se agrega y se deja disolver completamente. Los siguientes ingredientes se agregan entonces en el orden listado. Cada ing rediente se disuelve completamente antes de que el sig uiente ingrediente se agreg ue. Tabla 5 Bebida Lista para beber Benzaoto de potasio 0.30 kg Monohid rato H M B de calcio 5.7 kg Citrato de potasio 0.1 5 kg Ácido cítrico 2.89 kg Ácido láctico 1 .41 kg Aspartamo 0.55 kg G licerofosfato de calcio 6.06 kg Agentes colorantes 0.001 9 kg Sabores artificiales y naturales 1 .0 kg Ácido ascórbico 0.33 kg El ácido ascórbico se ag rega j usto antes de llenar en latas de aluminio de 1 2 oz. Las bebidas pueden carbonatarse antes de llenar en latas de aluminio. La solución se deaerea y después se transfiere a un "enfriador carbo" donde se enfría y carbona a aproximadamente 2.5 volúmenes de dióxido de carbono. Ejem plo X Composición de producto de reemplazo de electrolito El siguiente ejemplo explica como fabricar una solución de rehidratación lista para beber. O RS tuvo la composición señalada en la Tabla 6. Tabla 6 Solución de Rehidratación lista para beber Pesar la cantidad requerida de agua filtrada y se agrega al tanque de mezcla . Calentar el ag ua a 43-45°C con agitación moderada. Mientras se mantiene agitación moderada, H M B de calcio se agrega y se deja mezclar por un mínimo de 5 minutos. Con agitación moderada continúa agregar la cantidad requerida de dextrosa. Agitar hasta disolver. Agregar la cantidad requerida de fructosa. Agitar hasta disolver. Agregar la cantidad requerida de los siguientes ing redientes, en el orden listado: a la mezcla de dextrosa/fructosa y agitar hasta disolver; gluconato de zinc, citrato de sodio, cloruro de sodio, citrato de potasio, y ácido cítrico. Agregar la cantidad req uerida de sucralosa (distribuida por McNeil Specialty Products Company of New Brunswick, New Jersey) y potasio de acesulfamo (distribuido como Sunsett® por Hoechst Food Ingredients of Somerset, New Jersey) y agitar hasta disolverse. Agregar el amarillo #6 y el sabor de ponche de frutas al grupo hasta disolverse. Enfriar la mezcla a 1 .1 -7.2°C y mantener con agitación baja. Llenar el número req uerido de una botella de plástico de un litro, aplicar el sello de calor de lámina a la abertura de la botella, y volver a mezclar a estándares de esterilidad de grado alimenticios. Alternativamente, la mezcla enfriada se encapsula dentro de un material de empacado congelable sellable y se sella tal como por sellado por calor. U na dosis única de solución de rehidratación se empaca en una cavidad congelable herméticamente sellada. Varios tipos de materiales de empacado que pueden utilizarse para practicar la invención , tales como aquellos utilizados en sacos congelados tradicionales, serían fácilmente aparentes para el experto en la materia. El material de envoltu ra es preferentemente un tipo que permitirá marcas, tal como identificación del producto, ingredientes, etc. , a colocarse en la superficie exterior del mismo. La formulación de rehidratación se envía y almacena, preferentemente en unidades múltiples de la misma , en esta condición . Se contempla que múltiples unidades en sacos congelados se empacarán juntos para propósitos de comercialización . Antes de la administración , un paquete de solución de rehidratación de líq uido se congela. Después de congelamiento, el empacado se abre y los contenidos del mismo se comen . Ya que la formulación de rehid ratación normalmente se administrará a temperaturas ambientes, la cantidad líq uida de rehidratación en cada paquete es preferentemente una cantidad que puede consumirse en su totalidad mientras aún está en estado congelado. Preferentemente, 20-35 onzas, más preferentemente 2.0 a 2.5 onzas por paquete. En una modalidad particularmente preferida, 2.1 onazas de solución de rehid ratación estéril se encapsula dentro de un material envolvente congelable por ejemplo, 1 a 8 veces. Se prefiere el material envolvente de plástico transparente.

Claims (1)

1. REIVINDICACIONES 1 . U n método para la prevención o tratamiento de condiciones de enfermedad en paciente al subregular la expresión y/o actividad de componentes seleccionados del grupo consistiendo de quinasa de proteína C, factor nuclear kappa-B, enzimas de conjugación de ubiquitin y componentes de proteasoma 26S que comprende administrar H M B, sus sales, metabolitos o derivados de los mismos. 2. El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque la administración de H MB, sus sales, metabolitos o derivados de los mismos subregula la expresión y/o actividad de quinasa de proteína C. 3. El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque la administración de H M B, sus sales, metabolitos o derivados de los mismos subregula la expresión y/o actividad de factor nuclear kappa-B. 4. El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque la administración de H MB, sus sales, metabolitos o derivados de lo smismos subregula la expresión y/o actividad de enzimas de conjugación de ubiq uitin . 5. El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque la admin istración de H M B, sus sales, metabolitos o derivados de lo smismos subregula la expresión y/o actividad de componentes de proteasoma 26S. 6. El método según la reivindicación 1 , caracterizado porque al menos uno de los componentes seleccionados del grupo consistiendo de L-carnitina, fuente de nitrógeno amino enriquecido con aminoácidos neutrales grandes substancialmente carentes de aminoácidos libres, ácidos grasos omega-3 y oligosacárido indigerible se administra en combinación con HMB o sus sales. 7. El método según la reivindicación 1, caracterizado porque la condición de enfermedad se selecciona del grupo consistiendo de cáncer, caquexia, desperdicio asociado con la edad, desperdicio asociado con hospitalización a largo plazo, VIH/SIDA, artritis, trauma, enfermedad del hígado, enfermedad de Crohn, IBD, insuficiencia renal y COPD. 8. El método según la reivindicación 7, caracterizado porque la enfermedad es caquexia. 9. Una composición comprendiendo: a. HMB, sus sales, metabolitos o derivados de los mismos; b. carnitina; c. fuente de amino nitrógeno enriquecida con aminoácidos neutrales grandes; y en donde dicha composición carece substancialmente en aminoácidos libres. 10. La composición según la reivindicación 9, caracterizada porque dicho HMB se selecciona del grupo consistiendo de HMB de sodio, HMB de potasio, HMB de magnesio, HMB de cromo, HMB de calcio, HMB de metal álcali, HMB de metal de tierra alcalina y lactona de HMB. 11. La composición según la reivindicación 9, caracterizada porque comprende además ácidos grasos co-3. 12. La composición según la reivindicación 11, caracterizada porque dichos ácidos grasos ?-3 se seleccionan del grupo consistiendo de ácido eicosapentanóico y ácido docosahexanóico. 13. La composición según la reivindicación 9, caracterizada porque dichos aminoácidos neutrales grandes comprenden al menos 10% de la fuente de amino nitrógeno. 14. La composición según la reivindicación 9, caracterizada porque dichos aminoácidos libres comprenden menos de 0.4gm/porción de la composición. 15. La composición según la reivindicación 9, caracterizada porque comprende menos de 2 gramos por porción de carnitina. 16. La composición según la reivindicación 9, caracterizada porque comprende al menos 1 gramo por porción de FOS. 17. La composición según la reivindicación 9, caracterizada porque comprende además un nutriente seleccionado del grupo consistiendo de vitaminas, minerales y minerales en pedazo. 18. Una composición comprendiendo: a. de aproximadamente 2 a 10 gm/litro calcio HMB; b. al menos 1 gramo por litro de ácidos grasos ?-3; c. de aproximadamente 1 a aproximadamente 8 gm/litro carnitina; d. de aproximadamente 1 a aproximadamente 25 gm/litro FOS; fuente de amino nitrógeno enriquecida con aminoácido neutrales grandes, en donde dicha fuente de amino nitrógeno comprende de aproximadamente 1 0 a 60% p/p de aminoácidos neutrales grandes; y en donde dicha composición substancialmente carece en aminoácidos libres. 1 9. La composición según la reivindicación 9, caracterizada porque dicha composición se administra a un humano o un animal. 20. La composición según la reivindicación 9, caracterizada porque dicha composición se selecciona del grupo consistiendo de complemento dietético, reemplazo de comida, barras nutricionales, gomas o pedazos y bebidas. 21 . Un método para tratar desperdicio asociado con enfermedad de un paciente comprendiendo administrar la composición según la reivindicación 9 a dicho paciente.