MXPA06009898A

MXPA06009898A - Composiciones y metodos para la aplicacion topica y suministro transdermico de toxinas botulinicas.

Info

Publication number: MXPA06009898A
Application number: MXPA06009898A
Authority: MX
Inventors: Jacob M Waugh; Michael D Dake
Original assignee: Revance Therapeutics Inc
Priority date: 2004-03-03
Filing date: 2005-03-03
Publication date: 2008-02-07
Also published as: EP2985039B1; HUE025656T2; IL253007B; SI2656859T1; JP2007526340A; ES2691498T3; CR8602A; KR101343411B1; KR20130060360A; EP1729821A2; IL177816A0; TR201815364T4; PL2985039T3; WO2005084410A9; IL237388A0; NO20064490L; JP5095388B2; ES2431610T3; HK1221650A1; CN102357062A

Abstract

Una composicion para la aplicacion topica de toxina de botulina (incluyendo derivados de toxina de botulina) comprende una toxina de botulina y un vehiculo que comprende una estructura polimerica que comprende un polipeptido de cadena larga o un polimero no peptidilo que tiene adheridos grupos de "eficiencia" o grupos de ramificacion cargados positivamente. La presente invencion se refiere tambien a metodos para reducir la paralisis muscular y otros padecimientos que pueden ser tratados con toxinas de butolina, particularmente, la paralisis subcutanea y mas particularmente, la paralisis facial o muscular mediante la aplicacion topica de una cantidad efectiva de toxina de botulina y vehiculo, en conjunto, a la piel o epitelio del sujeto. Tambien se describen equipos para la administracion.

Description

COMPOSICIONES Y MÉTODOS PARA APLICACIÓN TÓPICA Y SUMINISTRO TRANSDÉRMICO DE TOXINAS BOTULÍNICAS La presente solicitud reclama el beneficio de prioridad de la Solicitud de Patente Provisional Norteamericana No. 60/550,015 presentada el 3 de marzo de 2004. La Solicitud de Patente Provisional Norteamericana No. 60/550,015 está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia. Antecedentes de la Invención La piel protege los órganos del cuerpo de daño ambiental externo y actúa como un termostato para mantener la temperatura corporal. Consiste de diversas capas, cada una con funciones especializadas. Las capas mayores incluyen la epidermis, la dermis y la hipodermis. La epidermis es una capa de estratificación de células epiteliales que subyace la dermis, que consiste de tejido conectivo. Tanto la dermis como la epidermis están soportadas en forma adicional por la hipodermis, y la capa interna de tejido adiposo. La epidermis, la capa más superior de la piel, tiene única de 0.1 a 1 .5 milímetros de espesor (Inlander, Skin, Nueva York, NY: People's Medical Society, 1 -7 (1998)). Consiste en queratinocitos y se divide en varias capas con base en su estado de diferenciación. La epidermis puede ser clasificada en forma adicional en el estrato córneo y la epidermis viable, que consiste en melfigian granular y células básales. El estrato córneo es higroscópico y requiere al menos el 10% de humedad en peso para mantener su flexibilidad y suavidad. La higroscopicidad se atribuye en parte a la capacidad de mantener agua de la queratina. Cuando la capa horny pierde su suavidad y flexibilidad, se vuelve áspera y tiesa, dando como resultado una piel seca. La dermis, la cual yace justo debajo de la epidermis, tiene de 1.5 a 4 milímetros de grosor. Es la más gruesa de las tres capas de la piel. Además, la dermis también es lugar para la mayoría de las estructuras de la piel, incluyendo glándulas dulces y aceitosas (las cuales segregan substancias a través de las aberturas en la piel y los denominados poros o comedones), folículos de cabellos, terminaciones nerviosas y vasos sanguíneos y linfáticos (Inlander, Skin, Nueva York, NY: People's Medical Society, 1 -7 (1998)). Sin embargo, los principales de la dermis son colágeno y elastina. La epidermis es la capa más profunda de la piel. Actúa tanto como un aislante para la conservación del calor corporal, como un absorsor de impacto para la protección de órganos (Inlander, Skin, Nueva York, NY: People's Medical Society, 1 -7 (1998)). Además, la hipodermis también almacena grasa para reservas de energía. El pH de la piel normalmente es de entre 5 y 6. Esta acidez se debe a la presencia de aminoácidos anfotéricos, ácido láctico y ácidos grasos procedentes de las secreciones de las glándulas sebáceas. El término "manto ácido" se refiere a la presencia de las substancias solubles en agua en la mayor parte de las regiones de la piel. La capacidad de regulación de la piel, se debe en parte a estas secreciones almacenadas en la capa cornea de la piel.

Las arrugas, uno de los signos que revelan la edad , pueden ser originadas por cambios bioquímicos, histológicos y fisiológicos que se acumulan del daño ambiental (Benedetto, I nternational Journal of Dermatology, 38:641 -655 (1 999)). Además, existen otros factores secundarios que pueden originar los pliegues, surcos, y crisis característicos de las arrugas faciales (Stegman y Asociados, The Skin of the Aging Face Cosmetic Dermatological Surgery, 2a Edición, St. Louis, MO: Mosby Year Book: 5-1 5 (1 990)). Estos factores secundarios incluyen la constante acción de la gravedad, Ipartido en dos de posición frecuente y constante sobre la piel (por ejemplo, durante el sueño) y movimientos faciales repetidos originados por la contracción de músculos faciales (Stegman y Asociados, The Skin of the Aging Face Cosmetic Dermatological Surgery, 2a Edición, St. Louis, MO: Mosby Year Book: 5-1 5 (1 990)). Se han utilizado diferentes técnicas con el objeto de modificar potencialmente algunos de los signos de envejecimiento. Estas técnicas fluctúan desde humectadores faciales que contienen ácidos hidroxi-alfa y retinol hasta procedimientos quirúrgicos e inyecciones de neurotoxinas. Una de las funciones principales de la piel, es proporcionar una barrera para el transporte de agua y substancias potencialmente dañinas para la homeostasis normal. El cuerpo podría deshidratarse rápidamente sin una piel resistente, semi-permeable. La piel ayuda a prevenir la entrada de substancias peligrosas para el cuerpo. Aunque la mayoría de las substancias no pueden penetrar la barrera, se ha desarrollado un número de estrategias para incrementar en forma selectiva la permeabilidad de la piel con un éxito variable. Las toxinas botulínicas (también conocidas como toxinas botulínica o neurotoxinas botulínicas), son neurotoxinas producidas mediante botulinum Clostridium de bacteria gram-positiva. Actúan para producir la parálisis de músculos evitando la transmisión sinóptica o liberación de acetilcolina a través de la unión neuromuscular, y se considera que actúan en otras formas también. Su acción bloquea esencialmente las señales que normalmente pueden originar espasmos o contracciones musculares, dando como resultado parálisis o podrían originar secreciones glandulares o una sobreexcreción tal como hiperhidrosis o acné. La toxina botulínica se clasifica en ocho neurotoxinas que están relacionadas serológicamente, aunque son distintas. De estas, siete pueden originar parálisis, a saber la neurotoxina botulínica de serotipos A, B, C, D, E, F, y G. Cada una de estas, se distingue mediante la neutralización con anticuerpos específicos del tipo. Sin embargo, el peso molecular de la molécula de proteína de toxina botulínica, para los siete de estos serotipos de toxina botulínica activos que ocurren naturalmente sus formas recombinantes, es de aproximadamente 150 kD. Tal como se libera a través de la bacteria, las toxinas botulínicas son complejos que comprenden la molécula de proteína de toxina botulínica 150 kD en cuestión, junto con proteínas sin toxina asociadas. El complejo de toxina botulínica tipo A puede ser producido mediante la Clostridia bacterium como formas de 900 kD, 500 kD, y 300 kD. La toxina botulínica tipos B y C, se producen aparentemente únicamente como un complejo de 700 kD ó 500 kD. La toxina botulínica tipo D, se produce como complejos tanto de 300 kD como 500 kD. La toxina botulínica tipo E y F se producen únicamente como complejos de aproximadamente 300 kD. Los complejos (es decir, peso molecular mayor a aproximadamente 150 kD) se considera que contienen una proteína de hemaglutinina sin toxina y una proteína sin hemaglutinina sin toxina y no tóxica. Estas dos proteínas sin toxina (las cuales junto con la molécula de toxina botulínica comprende el complejo de neurotoxina relevante) pueden actuar para proporcionar estabilidad contra la desnaturalización para la molécula de toxina botulínica y protección contra ácidos digestivos cuando se ingiere la toxina. Además, es posible que los complejos de toxina botulínica más grandes (mayores a un peso molecular de aproximadamente 150 kD), puedan dar como resultado un rango de difusión más lento de la toxina botulínica fuera del sitio de inyección intramuscular de un complejo de toxina botulínica. Los diferentes serotipos de toxina botulínica varían en las especies animales que afectan y en la severidad y duración de la parálisis que provocan. Por ejemplo, se ha determinado que la toxina botulínica tipo A es 500 veces más potente, tal como se mide a través del rango de parálisis producido en la rata, que la toxina botulínica tipo B. Además, la toxina botulínica tipo B ha sido determinada para no tóxica en primates en una dosis de 480 U/kg, aproximadamente 12 veces el LD50 del primate para el tipo A. Debido al tamaño de molécula y estructura molecular de la toxina botulínica, no puede atravesar el estrato córneo y las múltiples capas de la arquitectura de la piel subyacente. El botulismo, complejo de síntoma característico de la exposición a toxina botulínica sistémica, ha existido en Europa desde la antigüedad. En 1895, Emile P. van Ermengem aisló primero el bacilo que forma la espora anaeróbica de carne de cerdo salada sin procesar obtenida de tejido post-mortem de víctimas quienes fallecieron de botulismo en Bélgica. Van Ermengem descubrió que la enfermedad era originada por una toxina extracelular que fue producida por lo que él denominó "Bacillus botulinus (Van Ermengem, Z. Hyyg Infektionskr, 26: 1 -56, Rev. Infect. (1987)). El nombre se cambió en 1922 a Clostridium botulinum. El nombre de Clostridium se utilizó para la reflejar la naturaleza anaeróbica del microorganismo y también sus características morfológicas (Carruthers and Carruthers, Can J. Ophthalmol, 31 :389-400 (1996)). En los años 1920, se aisló una forma cruda de la toxina botulínica tipo A después de erupciones adicionales de envenenamiento de alimentos. El Dr. Hermán Sommer de la Universidad de California, San Francisco, hizo los primeros intentos de purificar la neurotoxina (Borodic y Asociados, Ophthalmic Plast Recostr. Surg., 7:54-60 (1991 )). En 1946, el Dr. Edward J. Schantz y sus colegas aislaron la neurotoxina en forma cristalina (Schantz y Asociados, En: Jankovi J., Hallet M. (Eds) Therapy with Botulinum Toxin, Nueva York, NY: Marcel Dekker, 41 -49 (1994)). En 1949, Burgen y sus asociados tuvieron la capacidad de mostrar que la toxina botulínica bloquea los impulsos a través de la unión neuromuscular (Burgen y Asociados, J. Physiol. , 109: 10-24 (1949)). Alian B. Scott utilizó primero la toxina botulínica A (BTX-A) en monos en 1973. Scott demostró la parálisis de músculo ocular reversible que dura tres meses (Lamanna, Science, 130:763-772 (1959)). Poco después, se reportó que BTX-A es un tratamiento exitoso en humanos para estrabismo, blefaroespasmo y tortícolis espasmódica (Barón y Asociados, En: Barón EJ, Peterson LR, Finegold SM (Eds), Bailey & Scotts Diagnostic Microbiology, St. Louis, MO: Mosby Year Book, 504-523 (1994); Carruthers and Carruthers, Adv. Dermatol., 12:325-348 (1997); Markowitz, En: Strickland GT (Eds). Hunters Tropical Medicine, 7a Edición, Filadelfia: W. B. Saunders, 441 -444 (1991 )). En 1986, Jean y Alastair Carruthers, una pareja de esposos, en donde dicho equipo consiste en un cirujano ocuplástico y un dermatólogo, comenzaron a involucrar el uso cosmético de la toxina-A botulínicas (BTX-A) para el tratamiento de arrugas asociadas con movimiento en el área de la glabela (Schantz and Scott, In Lewis GE (Ed) Biomedical Aspects of Botulinum, Nueva York: Academic Press, 143-150 (1981 )). El uso de Carruthers de BTX-A para el tratamiento de arrugas, condujo a su publicación seminal de este método en 1992 (Schantz and Scott, In Lewis GE (Ed) Biomedical Aspects of Botulinum, Nueva York: Academic Press, 143-150 (1981 )). En 1994, el mismo tipo reportó experiencias con otras arrugas asociadas con movimiento en la cara (Scott, Ophthalmol, 87: 1044-1049 (1990)).

Esto a su vez, condujo al nacimiento de la era del tratamiento BTX-A cosmético. La toxina botulínica tipo A, se dice que es el agente biológico natural más letal conocido para el hombre. Las esporas de C. botulinum, se encuentran en la tierra y pueden crecer en contenedores de alimentos esterilizados y sellados en forma no adecuada. La ingestión de la bacteria puede originar botulismo, lo cual puede ser fatal. AI mismo tiempo, los efectos de paralización de músculo de la toxina botulínica, han sido utilizados para efectos terapéuticos. La administración controlada de la toxina botulínica se ha utilizado para proporcionar parálisis muscular para tratar condiciones, por ejemplo, padecimientos neuromusculares caracterizados por músculos esqueléticos hiperactivos. Las condiciones que han sido tratadas con toxina botulínica incluyen espasmo hemifacial, tortícolis espasmódica de generación en adultos, fisura anal, blefaroespasmo, parálisis cerebral, distonia cervical, dolores de cabeza por migrañas, estrabismos, padecimiento de unión temperomandibular y varios tipos de constricciones y espasmos musculares. Más recientemente, los efectos de paralización muscular de la toxina botulínica, han sido convenientes en aplicaciones faciales terapéuticas y cosméticas, tales como tratamiento de arrugas, líneas de expresión y otros resultados de espasmos o contracciones de músculos faciales. La aplicación tópica de la toxina botulínica puede proporcionar un tratamiento alternativo más seguro y más deseable debido a la naturaleza sin dolor de la aplicación, el área más grande de superficie de tratamiento que puede ser cubierta, la capacidad de formular una toxina pura con mayor actividad específica, la capacitación reducida que es necesaria para aplicar el terapéutico botulínico, las dosis menores que pueden ser necesarias para producir el efecto deseado y la eliminación de un requerimiento de paredes de toxina grandes para alcanzar un resultado químico terapéutico. Es altamente deseable un medio de suministro transdérmico efectivo de toxina botulínica, así como un medio efectivo para administrar toxina botulínica para tratar o prevenir un número de condiciones que no requieren inyección. Breve Descripción de los Dibujos La presente invención se refiere a composiciones nuevas que comprenden una toxina botulínica, más específicamente a composiciones que permiten el transporte o suministro de una toxina botulínica a través de la piel o epitelio (también referida como "suministro transdérmico"), < y la cual puede ser utiliza por consiguiente en aplicaciones tópicas para proporcionar toxina botulínica a un sujeto, para diversos propósitos terapéuticos, estéticos y/o cosméticos, tal como se describe en la presente invención. Un aspecto de la presente invención es proporcionar una composición que contiene una toxina botulínica y un vehículo. El vehículo tiene una estructura polimérica con grupos de ramificación adheridos cargados en forma positiva. La asociación entre el vehículo y la toxina botulínica es no covalente. Otro aspecto de la presente invención, es proporcionar un equipo para la administración a un sujeto de una toxina botulínica. Este equipo incluye una toxina botulínica que se encuentra en una cantidad efectiva para el suministro transdérmico de la misma, y un vehículo que tiene un esqueleto polimérico con grupos de ramificación cargados en forma positiva adheridos. La asociación entre el vehículo y la toxina botulínica es no covalente. Aún otro aspecto de la presente invención, es proporcionar un equipo para la administración a un sujeto de una toxina botulínica. El equipo incluye un aparato para suministrar la toxina botulínica a la piel y una composición que contiene un vehículo que tiene un esqueleto polimérico con grupos de ramificación adheridos cargados en forma positiva seleccionados de -(gly)n?-(arg)n2, HIV-TAT y fragmentos de los mismos, y PTD, Antennapedia, en la cual el subíndice n1 es un entero de desde 0 hasta aproximadamente 20, y el subíndice n2 es independientemente un entero non de desde 5 hasta aproximadamente 25. La presente invención también proporciona un método para administrar una toxina botulínica a un sujeto, en donde el método comprende la aplicación tópica a la piel o epitelio del sujeto de la toxina botulínica en conjunto con una cantidad efectiva de un vehículo. El vehículo tiene un esqueleto polimérico con grupos de ramificación cargados en forma positiva adheridos, y se asocia de manera no covalente con la toxina botulínica.

En un aspecto, la presente invención se refiere a una composición que comprende una toxina botulínica (tal como se define en la presente invención) y un vehículo que comprende un "esqueleto" cargado en forma positiva que tiene grupos de ramificación o "eficiencia" cargados en forma positiva, tal como se describe en la presente invención. Lo más preferentemente, el vehículo cargado en forma positiva es un polipéptido cargado en forma positiva de cadena larga o un polímero sin peptidilo cargado en forma positiva, por ejemplo, una polialquilenoimina. La presente invención se refiere además a un método para producir un efecto biológico tal como parálisis muscular, reducir la hipersecreción o sudoración, tratar dolor neurológico o dolor de cabeza por migraña, reducir espasmos musculares, prevenir o reducir acné, o reducir o aumentar una respuesta inmune, mediante la aplicación tópica de una cantidad efectiva de dicha composición, preferentemente a la piel, de un sujeto o paciente que necesita de dicho tratamiento. La presente invención también se refiere a un método para producir un efecto estético o cosmético, por ejemplo mediante aplicación tópica de toxina botulínica a la cara, en lugar de mediante inyección dentro de los músculos faciales. La presente invención también proporciona equipos para preparar o formular una composición que comprende el vehículo y la toxina botulínica, así como partidas adicionales que son necesarias para producir una formulación utilizable, o una premezcla que puede a su vez utilizarse para producir dicha formulación. Como alternativa, el equipo comprende medios para administrar por separado pero en conjunto la toxina botulínica y el vehículo a un sujeto. Breve Descripción de los Dibujos La figura 1 , representa los resultados de un experimento que demuestra la eficiencia del suministro transdérmico de la toxina botulínica utilizando una composición de la presente invención que comprende un esqueleto de péptido. La figura 2, es una fotografía que ilustra el estado de las extremidades traseras de un ratón, en donde se trató el área de una extremidad con una composición de la presente invención, y el área de la otra se trató con otra composición que contiene toxina botulínica, la cual no contiene un vehículo de acuerdo con la presente invención. La figura 3, es una fotografía que ilustra arrugas en la frente de un sujeto antes y después de tratamiento con "Essentia Botox Lotion" administrada en forma tópica. La figura 4, muestra una fundición de Mikrosil de la frente (A) después del tratamiento tópico de las arrugas con "Essentia Botox Lotion", y (b) antes del tratamiento. Estos moldes de Mikrosil las cuales son útiles debido a que minimizan los artefactos que pueden resultar de la fotografía del sujeto real, muestra claramente que el lado no tratado tiene arrugas más profundas. La figura 5, muestra fotografías que ilustran una prueba de almidón/yodo de Minor realizada en la frente de un sujeto 5, días después de la aplicación de "Essentia Botox Lotion" (A) y una loción de control (B). La loción de control contenía un esqueleto de polilisina cargado en forma positiva con un peso molecular desde aproximadamente 21 ,000 con grupos de ramificación TAT. Estas ilustraciones se tomaron dos minutos después de la aplicación. La figura 6, es la misma que ia figura 5, excepto que se tomaron después de que transcurrieron 5 minutos. La figura 7, muestra el área de dosis utilizada en estudios de hiperhidrosis axilar. Se debe observar que el área de dosis se extiende 1 centímetro más allá del área de la piel cubierta por cabello axilar. La figura 8a representa los resultados de un experimento que demuestra la eficiencia de la toxina botulínica suministrada en forma terapéutica a través de piel intacta como un agente tópico utilizando un vehículo de peptidilo corto para el tratamiento de hiperhidrosis axilar en sujetos humanos. La gráfica ilustra una reducción significativa en la cantidad de sudor (mg por 5 minutos) medido en forma gravimétrica cuatro semanas después del tratamiento con Botox además de un vehículo de peptidilo corto o un vehículo solo. Los resultados son valores de 4 semanas como proporción al valor de línea de base del mismo grupo, con importancia determinada mediante análisis Wilcoxon con pacientes P<0.05. N = 10. La figura 8b, representa los resultados de un experimento que demuestra la eficiencia de la toxina botulínica suministrada en forma terapéutica a través de piel intacta como un agente tópico utilizando un vehículo de peptidilo corto para el tratamiento de hiperhidrosis axilar en sujetos humanos. La gráfica ilustra una reducción significativa en la cantidad de sudor (mg por 5 minutos) medida en forma gravimétrica cuatro semanas después del tratamiento con Botox más un vehículo de peptidilo corto o un vehículo solo. Los resultados son valores de tratamiento como proporción al valor de control para ambos puntos de tiempo, con importancia determinada mediante análisis Wilcoxon con pacientes P<0.05. N = 10. La figura 9, muestra fotografías que ilustran una prueba de almidón/yodo de Minor antes y después del tratamiento con "Essentia Botox Lotion" en forma tópica para el tratamiento de hiperhidrosis axilar. La prueba de almidón/yodo en la línea de base versus semana 2, muestra cuándo se trató la axila derecha con "Essentia Botox Lotion" (a y c) y la axila izquierda se le aplicó el control (b y d) para el sujeto #12. Estas fotografías ilustran los beneficios típicos observados después del tratamiento con vehículo más Botox en yodo/almidón. Aunque se observa algún efecto cruzado en el lado de control (consistente con 25% de reducción en datos gravimétricos), se produjeron reducciones significativas con el tratamiento (consistente con 65% de reducción en datos gravimétricos en el lado tratado). Descripción Detallada de la Invención La presente invención proporciona composiciones y métodos para suministro, particularmente suministro transdérmico de una toxina botulínica mediante aplicación tópica de una formulación adecuada.

De acuerdo con la presente invención, se ha encontrado adecuada una molécula de vehículo cargada en forma positiva que tiene grupos de eficiencia, tal como se describe en la presente invención, como un sistema de transporte para una toxina botulínica, lo cual permite que la toxina sea administrada en forma transdérmica a músculos y/o otras estructuras asociadas con la piel. El transporte ocurre sin modificación covalente de la toxina botulínica. Por el término "cargado en forma positiva", se entiende que el vehículo tiene una carga positiva bajo al menos algunas condiciones de solución-fase, más preferentemente bajo al menos algunas condiciones fisiológicamente compatibles. Más específicamente, el término "cargado en forma positiva" tal como se utiliza en la presente invención, significa que el grupo en cuestión contiene funcionalidades que están cargadas bajo todas las condiciones de pH, por ejemplo, una amina cuaternaria o contiene una funcionalidad la cual puede adquirir carga positiva bajo ciertas condiciones de solución-fase, tal como cambios de pH en el caso de aminas primarias. Más preferentemente, el término "cargado en forma positiva" tal como se utiliza en la presente invención, se refiere a los grupos que tienen el comportamiento de asociarse con aniones a través de condiciones fisiológicamente compatibles. Los polímeros con una multiplicidad de porciones cargadas en forma positiva no necesitan ser homopolímeros, tal como lo podrá apreciar un experto en la técnica. Otros ejemplos de porciones cargadas en forma positiva son bien conocidos en la técnica y pueden emplearse fácilmente, tal como lo podrán apreciar los expertos en la técnica. Generalmente, el vehículo cargado en forma positiva (también referido como un "esqueleto cargado en forma positiva"), normalmente es una cadena de átomos lineales, ya sea con grupos en la cadena que llevan una carga positiva en un pH fisiológico, o con grupos que llevan una carga positiva adherida a las cadenas laterales que se extienden desde el esqueleto. Preferentemente, el esqueleto cargado en forma positiva por sí mismo no tendrá una actividad biológica enzimática o terapéutica definida. El esqueleto lineal es un esqueleto de hidrocarburo el cual, en algunas modalidades, es interrumpido por heteroátomos seleccionados de nitrógeno, oxígeno, azufre, silicón y fósforo. La mayoría de los átomos de la cadena de esqueleto normalmente son carbono. Además, el esqueleto con frecuencia será un polímero de unidades de repetición (por ejemplo, aminoácidos, poli(etileno-oxi), poli(propilenoamina), polialquilenoimina y similares) pero puede ser un heteropolímero. En un grupo de modalidades, el esqueleto cargado en forma positiva es una polipropilenoamina en donde un número de átomos de nitrógeno de amina se encuentran como grupos de amonio (substituidos-tetra) que llevan una carga positiva. En otra modalidad, el esqueleto cargado en forma positiva es un polímero sin peptidilo, el cual puede ser un hetero- u homo-polímero tal como polialquilenoimina, por ejemplo, una polietilenoimina o polipropilenoimina, que tiene un peso molecular desde aproximadamente 10,000 hasta aproximadamente 2,500,000, preferentemente desde aproximadamente 100,000 hasta aproximadamente 1 ,800,000, y lo más preferentemente desde aproximadamente 500,000 hasta aproximadamente 1 ,400,000. En otro grupo de modalidades, el esqueleto tiene adherida una pluralidad de porciones de cadena lateral que incluyen grupos cargados en forma positiva (por ejemplo, grupos amonio, grupos piridinio, grupos fosfonio, grupos sulfonio, grupos guanidinio, o grupos amidinio). Las porciones de cadena lateral en este grupo de modalidades, se pueden colocar en espaciamientos a lo largo del esqueleto que son consistentes en separaciones o son variables en separaciones. Además, la longitud de las cadenas laterales puede ser similar o disimilar. Por ejemplo, en un grupo de modalidades, las cadenas laterales pueden ser cadenas de hidrocarburo lineales o ramificadas que tienen desde 1 hasta 20 átomos de carbono y que terminan en el extremo distal (lejos del esqueleto) en uno de los grupos cargados en forma positiva descritos anteriormente. En todos los aspectos de la presente invención, la asociación entre el vehículo y el agente biológicamente activo es mediante interacción no covalente, cuyos ejemplos no limitantes incluyen interacciones iónicas, enlace de hidrógeno, fuerzas de van der Waals o combinaciones de los mismos. En un grupo de modalidades, el esqueleto cargado en forma positiva es un polipéptido que tiene múltiples grupos de cadena lateral cargados en forma positiva (por ejemplo, lisina, arginina, ornitina, homoarginina y similares). Preferentemente, el polipéptido tiene un peso molecular desde aproximadamente 10,000 hasta aproximadamente 1 ,500,000, más preferentemente desde aproximadamente 25,000 hasta aproximadamente 1 ,200,000, lo más preferentemente desde aproximadamente 100,000 hasta aproximadamente 1 ,000,000. Un experto en la técnica podrá apreciar que cuando se utilizan aminoácidos en esta parte de la invención, las cadenas laterales pueden tener ya sea la forma-D ó -L (configuración R ó S) en el centro de la adhesión. Como alternativa, el esqueleto puede ser un análogo de un polipéptido tal como un peptoide. Ver, por ejemplo, la publicación de Kessier, Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 32:543 (1993); Zuckermann y Asociados, Chemtracts-Macromol. Chem. 4:80 (1992); y Simón y Asociados, Proc. Nat'l. Acad. Sci. EUA 89:9367 (1992)). En síntesis, un peptoide es una poliglicina en la cual se adhiere la cadena lateral a los átomos de nitrógeno del esqueleto en lugar de los a-átomos de carbono. Tal como se indicó anteriormente, una parte de las cadenas laterales terminará normalmente en un grupo cargado en forma positiva para proporcionar un componente de esqueleto cargado en forma positiva. La síntesis de peptoide se describe, por ejemplo, en la Patente Norteamericana No. 5,877,278, la cual está incorporada en su totalidad a la presente invención como referencia. Como el término aquí utilizado, los esqueletos cargados en forma positiva que tienen una construcción de esqueleto de peptoide se consideran "sin péptido", ya que no están compuestos de aminoácidos que tienen cadenas laterales que ocurren naturalmente en las ubicaciones de a- carbono. Una variedad de otros esqueletos pueden ser utilizados empleando, por ejemplo, mimetizaciones estéricas o electrónicas de polipéptidos, en donde las ligaduras de amida del péptido se reemplazan con sustitutos tales como ligaduras de éster, tioamidas (-CSN H-), tioamida inversa (-N HCS-), aminometileno (-NHCH2-) o grupos de metilenoamino inversos (-CH2NH-), grupos ceto-metileno (-COCH2-), fosfinato (-PO2RCH2-), éster de fosfonoamidato y éster de fosfonamidato (-PO2RNH-), péptido inverso (-NHCO-), trans-alqueno (-CR=CH-), fluoroalqueno (-CF=CH-), dimetileno (-CH2CH2-), tioéter (-CH2S-), hidroxietileno (-CH(OH)CH2-), metilenoxi (-CH2O-), tetrazol (CN4), sulfonamido (-SO2NH-), metilenosulfonamido (-CHRSO2NH-), sulfonamida inversa (-NHSO2-), y esqueletos con malonato y/o subunidades de gem-diamino-alquilo, por ejemplo, tal como se publica en Fletcher y Asociados ((1 998) Chem. Rev. 98:763) y se detalla a través de las referencias aquí mencionadas. Muchas de las substituciones anteriores dan como resultado esqueletos de polímero aproximadamente isostéricos relativos a los esqueletos formados a partir de a-aminoácidos. En cada uno de los esqueletos aquí proporcionados, los grupos de cadena lateral pueden ser adheridos de modo que lleven un grupo cargado en forma positiva. Por ejemplo, los esqueletos enlazados por sulfonamida (-SO2NH- y -N HSO2-) pueden tener grupos de cadena lateral adheridos a los átomos de nitrógeno. En forma similar, la ligadura de hidroxietileno (-CH(OH)CH2-) puede contener un grupo de cadena lateral adherido al substituyente hidroxi. Un experto en la técnica puede adaptar fácilmente las otras químicas de ligadura para proporcionar grupos de cadena lateral cargados en forma positiva utilizando métodos sintéticos estándar. En una modalidad, el esqueleto cargado en forma positiva es un polipéptido que tiene grupos de ramificación (también referidos como grupos de eficiencia). Tal como se utiliza en la presente invención, un grupo de eficiencia o grupo de ramificación es cualquier agente que tenga el efecto de promover la translocación del esqueleto cargado en forma positiva a través de un tejido o membrana celular. Los ejemplos no limitantes de grupos de ramificación o eficiencia incluyen -(gly)n?-(arg)n2, HIV-TAT, o fragmentos de los mismos, o el dominio de transducción de proteína de Antennapedia, o un fragmento de los mismos, en donde el subíndice n1 es un entero de desde 0 hasta 20, más preferentemente de desde 0 hasta 8, o más preferentemente de desde 0 hasta 5, y el subíndice n2 es independientemente un entero non de desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 25, más preferentemente desde aproximadamente 7 hasta aproximadamente 17, lo más preferentemente desde aproximadamente 7 hasta aproximadamente 13. Preferidos en forma adicional son las modalidades en las cuales el fragmento HIV-TAT tiene la fórmula (gly)p-RGRDDRRQRRR-(gly)q, (gly)p-YGRKKRRQRRR-(gly)q, ó (gly)p-RKKRRQRRR-(gly)q, en donde los subíndices p y q son cada uno independientemente un entero de desde 0 hasta 20 y el fragmento se adhiere al esqueleto a través ya sea del término-C ó el término-N del fragmento. Los fragmentos HIV-TAT preferidos son aquéllos en los cuales los subíndices p y q son cada uno independientemente enteros de desde 0 hasta 8, más preferentemente desde 2 hasta 5. En otra modalidad, la cadena lateral o grupo de ramificación cargado en forma positiva es el dominio de transducción de la proteína (Antp) (PTD), o un fragmento de los mismos que retienen la actividad. Preferentemente el vehículo cargado en forma positiva incluye grupos de ramificación cargados en forma positiva de cadena lateral en una cantidad de al menos aproximadamente 0.05% como un porcentaje del peso total del vehículo, preferentemente desde aproximadamente 0.05 hasta aproximadamente 45% en peso, y lo más preferentemente desde aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 30% en peso. Para grupos de ramificación cargados en forma positiva que tienen la fórmula -(gly)n-?-(arg)n2l la cantidad más preferida es desde aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 25%. En otra modalidad, la parte del esqueleto es una polilisina y los grupos de ramificación cargados en forma positiva se adhieren a los grupos amino de cadena lateral de lisina. La polilisina puede tener un peso molecular desde aproximadamente 10,000 hasta aproximadamente 1 ,500,000, preferentemente desde aproximadamente 25,000 hasta aproximadamente 1 ,200,000, y lo más preferentemente desde aproximadamente 100,000 hasta 1 ,000,000. Pueden ser cualesquiera de las polilisinas comercialmente disponibles (Sigma Chemical Company, St. Louis, Missouri, EUA), tales como por ejemplo, polilisina que tiene MW >70,000, polilisina que tiene MW de 70,000 a 150,000, polilisina que tiene MW 150,000 a 300,000, y polilisina que tiene MW >300,000. La selección de una polilisina adecuada dependerá de los componentes restantes de la composición y será suficiente proporcionar una carga positiva neta general a la composición y proporciona una longitud que sea preferentemente desde 1 hasta 4 veces la longitud combinada de los componentes cargados en forma negativa. Los grupos de ramificación o grupos de eficiencia cargados en forma positiva preferidos incluyen, por ejemplo, -gly-gly-gly-arg-arg-arg-arg-arg-arg-arg (-Gly3Arg7) ó HIV-TAT. En otra modalidad preferida, el esqueleto cargado en forma positiva es una polialquilenoimina de cadena larga tal como polietilenoimina, por ejemplo, una que tenga un peso molecular de aproximadamente 1 ,000,000. Los esqueletos o moléculas transportadoras cargados en forma positiva que comprenden polipéptidos o polialquilenoiminas, que tienen grupos de ramificación descritos anteriormente, son compuestos novedosos y forman un aspecto de la presente invención. En una modalidad de la presente invención, únicamente un vehículo cargado en forma positiva que tiene grupos de ramificación cargados en forma positiva se necesita para el suministro transdérmico de la toxina botulínica. En ciertas modalidades, el vehículo cargado en forma positiva es un polipéptido (por ejemplo, lisina, arginina, ornitina, homoarginina y similares) que tiene múltiples grupos de cadena lateral cargados en forma positiva, tal como se describió anteriormente. Preferentemente el polipéptido tiene un peso molecular desde al menos aproximadamente 10,000. En otra modalidad, el vehículo cargado en forma positiva es un polímero sin peptidilo tal como polialquilenoimina que tiene múltiples grupos de cadena lateral cargados en forma positiva que tienen un peso molecular de al menos aproximadamente 100,000. Dichas polialquilenoiminas incluyen polietileno y polipropilenoiminas. En cualquier caso, para utilizarse como el único agente necesario para suministro transdérmico de la molécula transportadora cargada en forma positiva incluye grupos de ramificación o eficiencia cargados en forma positiva, que comprenden -(gly)n?-(arg)n2, en donde el subíndice n1 es un entero de desde 0 hasta 20, más preferentemente desde 0 hasta 8, aún más preferentemente de desde 2 hasta 5, y el subíndice n2 es independientemente un entero non de desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 25, más preferentemente desde aproximadamente 7 hasta aproximadamente 17, y lo más preferentemente desde aproximadamente 7 hasta aproximadamente 13, HIV-TAT, o fragmentos de los mismos, o Antennapedia PTD ó un fragmento de la misma. Preferentemente, los grupos de ramificación o de cadena lateral tienen la fórmula general -(gly)m-(arg)n2, tal como se describió anteriormente. Otras modalidades preferidas son aquéllas en donde los grupos de ramificación o eficiencia son fragmentos HIV-TAT que tienen la fórmula (gly)p-RGRDDRRQRRR-(gly)q, (gly)q-YGRKKRRQRRR-(gly)q, ó (gly)p-RKKRRQRRR-(gly)q, en donde los subíndices p y q son cada uno independientemente un entero de desde 0 hasta 20, y el fragmento se adhiere a la molécula transportadora a través ya sea del término-C ó el término-N del fragmento. Los grupos de ramificación laterales pueden tener la forma ya sea -D ó L-(configuración R ó S) en el centro de la adhesión. Los fragmentos H IV-TAT preferidos son aquéllos en donde los subíndices p y q son cada uno independientemente enteros de desde 0 hasta 8, más preferentemente de desde 2 hasta 5. Otras modalidades preferidas son aquéllas en donde los grupos de ramificación son grupos Antennapedia PTD ó fragmentos de los mismos que retienen la actividad del grupo. Estos son conocidos en la técnica, por ejemplo, en la publicación de Consolé y Asociados, J . Biol. Chem. 278:351 09 (2003). Preferentemente, el vehículo cargado en forma positiva incluye grupos de ramificación cargados en forma positiva de cadena lateral en una cantidad de al menos aproximadamente 0.05%, como un porcentaje del peso total del vehículo, preferentemente desde aproximadamente 0.05 hasta aproximadamente 45% en peso, y lo más preferentemente desde aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 30% en peso. Para grupos de ramificación cargados en forma positiva que tienen la fórmula -(gly)n?-(arg)n2, la cantidad más preferida es desde aproximadamente 0J hasta aproximadamente 25%. En otra modalidad, el vehículo es una polilisina con grupos de ramificación cargados en forma positiva adheridos a los grupos amino de cadena lateral de lisina. La polilisina utilizada en esta modalidad en particular puede ser cualquiera de las polilisinas disponibles comercialmente (Sigma Chemical Company, St. Louis, Missouri, EUA, por ejemplo), tales como, por ejemplo, polilisina que tenga MW >70,000, polilisina que tenga MW de 70,000 a 150,000, polilisina que tenga MW 150,000 a 300,000, y polilisina que tenga MW >300,000. Sin embargo, preferentemente la polilisina tiene MW de al menos aproximadamente 10,000. Los grupos de ramificación o grupos de eficiencia cargados en forma positiva preferidos incluyen, por ejemplo, -gly-gly-gly-arg-arg-arg-arg-arg-arg-arg -(Gly3Arg7), HIV-TAT, ó fragmentos de los mismos, y Antennapedia PTD ó fragmentos de la misma. En otras modalidades de la presente invención, el vehículo es un esqueleto de polilisina o polietilenoimina (PEÍ) relativamente corto (el cual puede ser lineal o ramificado) y que tiene grupos de ramificación cargados en forma positiva. Dichos vehículos son útiles para minimizar la agregación no controlada de los esqueletos y toxina botulínica en una composición terapéutica, que origina que se disminuya dramáticamente la eficiencia de transporte. Cuando el vehículo es un esqueleto de polilisina o PEÍ lineal relativamente corto, el esqueleto tendrá un peso molecular menor a 75,000, más preferentemente menor a 30,000, y lo más preferentemente menor a 25,000. Cuando el vehículo es un esqueleto de polilisina o PEÍ ramificado relativamente corto, sin embargo, el esqueleto tendrá un peso molecular menor a 60,000, más preferentemente menor a 55,000, y lo más preferentemente menor a 50,000. Sin embargo, si están incluidos en la composición los agentes de división aquí descritos, el peso molecular de los esqueletos de polilisina y PEÍ ramificados puede ser de hasta 75,000, en tanto que el peso molecular de los esqueletos de polilisina y PEÍ lineales puede ser de hasta 150,000. El término "toxina botulínica" como se utiliza en la presente invención, pretende referirse a cualesquiera de los tipos conocidos de toxina botuiínica, ya sea producidos mediante la bacteria o mediante técnicas recombinantes, así como tipos tales que puedan ser descubiertos subsecuentemente incluyendo variantes o proteínas de fusión construidas. Tal como se mencionó anteriormente, en este momento, se han caracterizado siete neurotoxinas botulínicas inmunológicamente distintas, es decir, los serotipos A, B, C, D, E, F, y G de neurotoxina botulínica, cada uno de los cuales se distingue por la neutralización con anticuerpos específicos del tipo. Los serotipos de toxina botulínica están disponibles en Sigma-Aldrich y en Metabiologics, Inc. (Madison, Wisconsin), así como en otras fuentes. Los diferentes serotipos de toxina botulínica varían en las especies animales que pueden afectar, y en la severidad y duración de la parálisis que provocan. Al menos dos tipos de toxina botulínica, tipos A y B, están comercialmente disponibles en formulaciones para el tratamiento de ciertas condiciones. Por ejemplo, el tipo A está contenido en preparaciones de Allergan que tienen la marca comercial BOTOX® y de Ipsen que tienen la marca comercial DYSPORT®, y el tipo B está contenido en preparaciones de Elan que tienen la marca MYOBLOC®. La toxina botulínica utilizada en las composiciones de la presente invención, puede ser alternativamente un derivado de toxina botulínica, esto es, un compuesto que tiene actividad de toxina botulínica pero que contiene una o más alteraciones químicas o funcionales en cualquier parte o en cualquier cadena con relación a las toxinas botulínicas nativas que ocurren naturalmente o recombinantes. Por ejemplo, la toxina botulínica puede ser una neurotoxina modificada (por ejemplo, una neurotoxina que tiene al menos uno de sus aminoácidos eliminado, modificado o reemplazado, tal como se compara con una neurotoxina producida en forma recombinante o nativa o un derivado o fragmento de la misma. Por ejemplo, la toxina botulínica puede ser una que ha sido modificada en cualquier forma, por ejemplo, para aumentar sus propiedades o disminuir efectos secundarios indeseables, pero que aún retiene la actividad de toxina botulínica deseada. La toxina botulínica puede ser cualquiera de los complejos de toxina botulínica producidos a través de la bacteria, tal como se describió anteriormente. Comb alternativa, la toxina botulínica puede ser una toxina preparada utilizando técnicas químicas recombinantes o sintéticas (por ejemplo, un péptido recombinante, una proteína de fusión o una neurotoxina híbrida, tal como se prepara a partir de subunidades o dominios de diferentes serotipos de toxina botulínica (ver la Patente Norteamericana No. 6,444,209, por ejemplo)). La toxina botulínica también puede ser una parte de la molécula en general que ha demostrado poseer la actividad necesaria de toxina botulínica, y en tal caso se puede utilizar como tal o como parte de una molécula de combinación o conjugada, por ejemplo una proteína de fusión. Además, la toxina botulínica puede estar en la forma de un precursor de toxina botulínica, el cual por sí mismo puede ser no tóxico, por ejemplo una proteasa de zinc no tóxica que se vuelve tóxica en la disociación proteolítica. La presente invención también contempla el uso general de combinaciones y mezclas de toxinas botulínicas, aunque debido a sus diferentes naturalezas y propiedades, las mezclas de serotipos de toxina botulínica no se administran generalmente en este momento en industrias cosmetológicas o para el cuidado de la salud. Las composiciones de la presente invención están preferentemente en la forma de productos que serán aplicados a la piel o epitelio de sujetos o pacientes, por ejemplo, humanos u otros mamíferos que necesitan del tratamiento en particular. El término "en necesidad" significa que incluyen necesidades tanto farmacéuticas como relacionadas con la salud, por ejemplo, condiciones de tratamiento que comprenden espasmos musculares parciales indeseables, así como necesidades cosmetológicas y subjetivas, por ejemplo, alteración o mejoría de apariencia del tejido facial. En general, las composiciones se preparan mezclando la toxina botulínica con el vehículo, y normalmente con uno o más vehículos o excipientes farmacéuticamente aceptables adicionales. En su forma más simple puede contener un simple vehículo o diluyente acuoso farmacéuticamente aceptable, tal como solución salina amortiguada. Sin embargo, las composiciones pueden contener otros ingredientes típicos en composiciones farmacéuticas o cosmetológicas tópicas, incluyendo un vehículo dermatológico o farmacéuticamente aceptable, transportador o medio (por ejemplo, vehículo, transportador o medio que sea compatible con los tejidos a los cuales se aplicará). El término "dermatológica o farmacéuticamente aceptable", tal como se utiliza en la presente invención, significa que las composiciones o componentes de los mismos se describen como adecuadas para utilizarse en contacto con estos tejidos o para utilizarse en pacientes en general sin una toxicidad, incompatibilidad, inestabilidad, respuesta alérgica y similares, indebida. Según sea lo adecuado, las composiciones de la presente invención pueden comprender cualquier ingrediente que se utilice convencionalmente en los campos bajo consideración, y particularmente en cosmetología y dermatología. Las composiciones también pueden incluir una cantidad de un anión pequeño, preferentemente un anión polivalente, por ejemplo, fosfato, aspartato o citrato. En términos de su forma, las composiciones de la presente invención pueden incluir soluciones, emulsiones (incluyendo microemulsiones), suspensiones, cremas, lociones, geles, polvos u otras composiciones sólidas o líquidas típicas utilizadas para aplicación a la piel y otros tejidos en donde se pueden utilizar las composiciones. Dichas composiciones pueden contener, además de la toxina botulínica y transportador, otros ingredientes normalmente utilizados en dichos productos, tales como agentes antimicrobianos, humectantes y de hidratación, agentes de penetración, conservadores, emulsificantes, aceites naturales o sintéticos, sorbentes, tensoactivos, detergentes, emolientes, antioxidantes, fragancias, rellenadores, engrosadores, ceras, absorsores de olor, productos de tinte, agentes de coloración, polvos, e incluyen opcionalmente anestésicos, aditivos anti-ardor, extractos botánicos, agentes de acondicionamiento, agentes de obscurecimiento o aclaramiento, abrillantadores, humectantes, mica, minerales, polifenoles, siliconas o derivados de los mismos, bloqueadores solares, vitaminas y fitomedicinales. En modalidades particularmente preferidas, las composiciones incluyen agentes de gelatinización y/o agentes de modificación de viscosidad. Estos agentes se agregan generalmente para incrementar la viscosidad de la composición, para hacer más fácil y precisa la aplicación de la composición. Además, estos agentes ayudan a prevenir que la solución de vehículo/toxina botulínica acuosa se seque, lo cual tiende a originar una disminución en la actividad de la toxina botulínica. Los agentes particularmente preferidos son los que están no cargados y no interfieren con la actividad de la toxina botulínica o la eficiencia de los complejos de toxina-vehículo en el cruce de la piel. Los agentes de gelatinización pueden ser ciertos agentes de gelatinización a base de celulosa, tales como hidroxipropilcelulosa (HPC), por ejemplo. En algunas modalidades, el complejo de toxina botulínica/vehículo se formula en una composición que tiene 2-4% HPC. Como alternativa, la viscosidad de una solución que contiene un complejo de toxina botulínica/vehículo puede alterarse agregando polietilenglicol (PEG). En otras modalidades, la solución de toxina botulínica/vehículo se combina con agentes viscosos mezclados previamente, tales como humectante Cetaphil®. Las composiciones de la presente invención pueden incluir opcionalmente agentes de división. Tal como se utiliza en la presente invención, un "agente de división" es cualquier substancia o aditivo que tenga la propiedad de prevenir o minimizar agregación no deseada o no controlada de la toxina botulínica con los vehículos de la presente invención. Los agentes de división pueden ser útiles, por ejemplo, cuando se debe emplear una solución de toxina botulínica concentrada debido a las restricciones de volumen. En estos casos, el agente de división mantiene la toxina botulínica dispersa, evitando de esta forma la agregación de la toxina, lo cual podría ocurrir de otra manera sin el agente de división. En general, un agente de división es (1 ) no irritante, (2) no destruye la toxina botulínica, (3) no confiere incremento alguno en permeabilidad, (4) produce tamaños de partícula confiables y estables, (5) está no cargada, y (6) no interfiere con complejos de la toxina y el vehículo transdérmico. Un ejemplo de un agente de división adecuado es etanol (EtOH). En modalidades preferidas, el EtOH es menor al 20% de la composición, y lo más preferentemente, menor al 5% de la composición. A manera de ejemplo, si las restricciones de volumen requieren reconstituir 100 U de toxina botulínica o 0.5 ml de solución, en lugar de 2.5 ml, normalmente se observa que la toxina botulínica exhibirá agregación no deseable, y por lo tanto actividad disminuida. Sin embargo, al agregar 1 % EtOH como un agente de dispersión, se mantiene la actividad total incluso 24 horas después a esta concentración. Como otro ejemplo, Botox® en 1.0 ml 0.9% NaCl de reconstitución tiene actividad completa, en tanto que la reconstitución en 0.5 ml en 1 % y 5% EtOH más 0.9% NaCI produce soluciones con actividad completa. En ciertas modalidades de la presente invención, se agregan puentes de olivo o polianión a las composiciones de toxina botulínica para mejorar la elaboración de complejos de la toxina con un vehículo de esqueleto cargado en forma positiva. Tal como es bien sabido en la técnica, la toxina botulínica es realmente un complejo de diferentes proteínas, algunas de las cuales se cargan en forma positiva, y algunas de las cuales se cargan en forma negativa. Debido a que la distribución exacta de los componentes de la toxina varía dependiendo de la fuente de la toxina, puede ser que la toxina botulínica procedente de ciertas fuentes tenga una menor propensión a elaboración de complejos con los esqueletos cargados en forma positiva aquí descritos. Sin embargo, un aspecto de la presente invención, es el descubrimiento de que agregando un puente de oligo o polianión a las toxinas botulínicas, se incrementa dramáticamente la eficiencia y eficacia de la administración tópica. Los ejemplos de dichos puentes oligo-/polianión incluyen fosfato de sodio (5%), PBS ó 5% poli-L-aspartato (por ejemplo, con un MW de 3,000). Las composiciones de acuerdo con la presente invención, pueden estar en la forma de composiciones de liberación controlada o liberación sostenida, en donde la toxina botulínica y el vehículo se encapsulan o se contienen de otra forma adentro de un material, de modo que se liberan en la piel en una forma controlada con el tiempo. La toxina botulínica y el vehículo pueden estar contenidos dentro de matrices, liposomas, vesículas, microcápsulas, microesferas y similares, o con un material de particulado sólido, los cuales todos son seleccionados y/o construidos para proporcionar liberación de la toxina botulínica con el tiempo. La toxina botulínica y el vehículo pueden estar encapsulados juntos (por ejemplo, en la misma cápsula) o por separado (en cápsulas separadas). Utilizando las composiciones aquí descritas, la toxina botulínica puede suministrarse a músculos que subyacen en la piel, o a estructuras granulares entre la piel, en una cantidad efectiva para producir parálisis, producir relajación, aliviar contracturas, prevenir o aliviar espasmos, reducir secreción glandular u otros efectos deseados. El suministro local de la toxina botulínica en esta forma puede producir reducciones de dosificación, reducir toxicidad y permitir una optimización de dosificación más precisa para los efectos deseados con relación a los materiales inyectables o implantables. Las composiciones de la presente invención aplican para administrar una cantidad efectiva de la toxina botulínica. El término "cantidad efectiva" tal como se utiliza en la presente invención, significa una cantidad de una toxina botulínica tal como se definió anteriormente, que es suficiente para producir la parálisis muscular u otro efecto biológico o estético deseado, aunque implícitamente es una cantidad segura, es decir, una que es lo suficientemente baja para evitar efectos secundarios severos. Los efectos deseados incluyen la relajación de ciertos músculos con la ayuda de, por ejemplo, la disminución de la aparición de líneas finas y/o arrugas, especialmente en el rostro, o ajuste de la apariencia facial en otras formas tales como ampliamiento de los ojos, elevación de las esquinas de la boca, o suavización de las líneas a los lados del labio superior, o la liberación general de tensión muscular. El efecto último mencionado, la liberación general de tensión muscular, puede llevarse a cabo en el rostro u otra parte. Las composiciones de la presente invención pueden contener una cantidad efectiva adecuada de la toxina botulínica para aplicación en la forma de un tratamiento de dosis simple, o pueden ser más concentradas, ya sea para dilución en lugar de administración o para uso en múltiples aplicaciones. A través del uso de los vehículos cargados en forma positiva de la presente invención, se puede administrar una toxina botulínica en forma transdérmica a un sujeto para tratar condiciones tales como espasmos musculares faciales indeseables u otros espasmos musculares, hiperhidrosis, acné, o condiciones en cualquier parte del cuerpo en donde se desea la liberación de dolor o espasmos musculares. La toxina botulínica se administra en forma tópica para la administración transdérmica a músculos u otras estructuras asociadas con la piel. La administración puede ser elaborada, por ejemplo para las piernas, hombros, espalda (incluyendo espalda baja), axilas, palmas, pies, cuello, ingle, dorsales de las manos o pies, codos, brazos superiores, rodillas, piernas superiores, glúteos, torso, pelvis o cualquier otra parte del cuerpo en donde se desee la administración de la toxina botulínica. La administración de la toxina botulínica también puede llevarse a cabo para tratar otras condiciones, incluyendo tratamiento de dolor neurológico, prevención o reducción de dolor de cabeza por migraña u otro dolor de cabeza, prevención o reducción de acné, prevención o reducción de distonia o contracciones distónicas (ya sea subjetiva o clínica), prevención o reducción de síntomas asociados con hiperhidrosis subjetiva o clínica, reducción de hipersecreción o sudoración, reducción o aumento de respuesta inmune o tratamiento de otras condiciones para las cuales se ha sugerido o se lleva a cabo la administración de toxina botulínica mediante inyección. La administración de toxina botulínica u otras proteínas terapéuticas así descritas, también se puede llevar a cabo para propósitos relacionados con la inmunización. En forma sorprendente, la administración de toxina botulínica aquí descrita puede llevarse a cabo para reducir respuestas inmunológicas. Más específicamente, la presente invención permite que una toxina botulínica sea suministrada mediante una ruta de administración alterada, cambiando de esta forma la presentación de antígeno de complejo del agente. En esta forma, la presente invención puede ser útil para reducir la respuesta inmune a antígenos para la toxina botulínica, y para facilitar la repetición de administración sin reducción relacionada con inmunología en la actividad. Como alternativa, el complejo puede ser preparado y aplicado en forma tópica para aumentar una respuesta inmune, por ejemplo, para proporcionar inmunizaciones con respecto a varias proteínas, por ejemplo, para inmunización de infantes sin inyecciones. Para utilizarse en relación con actividad relacionada con inmunología, una "cantidad efectiva" se refiere a una cantidad de la toxina botulínica suficiente para permitir a un sujeto montar una respuesta inmunológica para la toxina botulínica después de la aplicación o una serie de aplicaciones de la misma. Más preferentemente, las composiciones se administran mediante o bajo la dirección de un especialista u otro profesional del cuidado de la salud. Se pueden administrar en un solo tratamiento o en una serie de tratamientos periódicos con el tiempo. Para suministro transdérmico de toxina botulínica para los propósitos antes mencionados, se aplican en forma tópica una composición como la que se describió anteriormente a la piel en un lugar o lugares en donde se desee el efecto. En modalidades en donde se aplica directamente a la piel una solución acuosa de toxina botulínica/vehículo, se prefiere cubrir el área tratada (por ejemplo, con humectante Cetaphil®) u obstruir el área tratada con una barrera (por ejemplo, Telfa), con el objeto de evitar que la solución se seque, lo cual podría conducir a una disminución en la actividad de toxina. Debido a su naturaleza, lo más preferentemente la cantidad de toxina botulínica aplicada debe ser aplicada con cuidado, en un rango de aplicación y frecuencia de aplicación que producirá el resultado deseado sin producir resultados adversos o indeseados. Por consiguiente, las composiciones tópicas de la presente invención deben ser aplicadas, por ejemplo, en un rango desde aproximadamente 1 U hasta aproximadamente 20.000U, preferentemente desde aproximadamente 1 U hasta aproximadamente 10.000U de toxina botulínica por centímetro cuadrado de la superficie de la piel. Las dosis mayores a estos rangos pueden ser empleadas preferentemente junto con materiales de liberación controlada, por ejemplo, o dejarse un tiempo de permanencia más corto en la piel antes de la eliminación. La preparación adecuada de la superficie de la piel antes de ia aplicación de la composición de toxina botulínica/vehículo es importante para mantener la eficacia de la solución. Por ejemplo, la introducción de tensoactivos en la superficie de la piel para el propósito de limpiar los aceites de la superficie en la piel antes de la aplicación, es sorprendentemente contraproducente, debido a que los tensoactivos parecen destruir la actividad de la toxina botulínica.

Esto ocurre incluso si la piel se lava subsecuentemente con agua varias veces antes de la aplicación de la solución de toxina botulínica/vehículo. I ncluso tensoactivos extremadamente suaves, tales como los que se encuentran en toallitas para bebé, parecen causar este fenómeno. Por consiguiente, en métodos preferidos para administrar las composiciones de la presente invención, la piel se limpia previamente utilizando solamente agua. El lavado únicamente con agua también parece mejorar moderadamente el transporte transdérmico de la toxina botulínica. Además, la piel puede ser despojada para reducir la capa de estratum corneum antes de la aplicación del complejo de toxina botulínica/vehículo. En principio, el proceso de despojo de la piel debe conducir a una eficiencia mejorada del transporte transdérmico de la toxina botulínica. Sin embargo, el método utilizado para despojar la piel es importante. Por ejemplo, la reducción transmitida por acetona de la capa de estratum corneum en humanos o animales parece reducir la actividad de la toxina botulínica aplicada en forma subsecuente. En contraste, el despojo con cinta (por ejemplo, aplicando cinta en la superficie de la tela y posteriormente eliminando la cinta) parece permitir una penetración más profunda de la toxina botulínica y la reducción de dosis tanto en modelos de ratón como en humanos. Se presume que la abrasión de la superficie de la piel (por ejemplo, a través del uso de almohadillas abrasivas) puede originar un efecto similar como el del desprendimiento con cinta. La presente invención también comprende aparatos para transmisión transdérmica en una composición que contiene toxina botulínica y un vehículo que tiene un esqueleto cargado en forma positiva con grupos de ramificación adheridos, tal como se define en la presente invención. Dichos aparatos pueden ser tan simples en construcción como un parche cutáneo, o pueden ser dispositivos más complicados que incluyen medios para suministrar y monitorear el suministro de la composición, y opcionalmente medios para monitorear la condición del sujeto (por ejemplo, monitoreando la reacción del sujeto a las substancias que están siendo suministradas). Se debe observar que la elección de materiales para la construcción del dispositivo es importante. Los materiales preferidos para la construcción de dispositivos de suministro son aquéllos que no conducen a una pérdida de actividad de la solución de toxina botulínica/vehículo, ya sea a través de la degradación o absorción no deseada de la toxina botulínica en una superficie del dispositivo. Dicho comportamiento indeseado ha sido observado, por ejemplo, cuando la toxina botulínica/vehículo en una solución acuosa hace contacto con superficies de polipropileno, aunque no cuando la solución de toxina botulínica/vehículo contacta superficies de cloruro de polivinilo (PVC). Generalmente, las composiciones pueden ser formuladas previamente y/o instaladas previamente en un dispositivo o pueden ser preparadas posteriormente, por ejemplo, utilizando un equipo que aloja los dos ingredientes (toxina botulínica y vehículo) por separado, aunque proporciona medios para combinarlos en un momento previo o en el momento de la aplicación. La cantidad de molécula de vehículo o la proporción de la misma a la toxina botulínica, dependerá de qué vehículo se elija para utilizarse en la composición en cuestión. La cantidad adecuada o proporción de molécula transportadora en un caso determinado, puede determinarse fácilmente, por ejemplo, conduciendo uno o más experimentos, tales como los que se describen más adelante. En general, la presente invención también comprende un método para administrar una toxina botulínica a un sujeto o paciente que necesita de la misma. El método incluye la administración tópica de una cantidad efectiva de la toxina botulínica junto con un vehículo que tiene un esqueleto cargado en forma positiva con grupos de ramificación cargados en forma positiva adheridos, tal como se describe en la presente invención. Por el término "junto con" se entiende que los dos componentes (toxina botulínica y vehículo) se administran en un procedimiento de combinación, el cual puede comprender ya sea combinarlos en una composición, la cual se administra subsecuentemente al sujeto, o administrarlas por separado, aunque en una forma tal que actúen juntas para proporcionar el suministro de requisito de una cantidad efectiva de la proteína terapéutica. Por ejemplo, una composición que contiene el vehículo puede ser aplicada primero a la piel del sujeto, seguido de la aplicación de un parche cutáneo u otro dispositivo que contiene la toxina botulínica. La toxina botulínica puede incorporarse en forma seca en un parche cutáneo u otro dispositivo de suministro, aunque se puede aplicar el vehículo cargado en forma positiva a la superficie de la piel antes de la aplicación del parche, de modo que actúen juntos, dando como resultado el suministro transdérmico deseado. Por lo tanto, las dos substancias (vehículo y toxina botulínica) actúan en combinación o posiblemente ¡nteractúan para formar una composición o combinación in situ. Por consiguiente, la presente invención también comprende un equipo que incluye tanto un dispositivo para suministro de toxina botulínica a través de la piel y un líquido, gel, crema, o similar que contiene el vehículo o esqueleto, y que es adecuado para aplicar a la piel o epitelio de un sujeto. Los equipos para administrar las composiciones de la presente invención, ya sea bajo la dirección de un profesional del cuidado de la salud o a través del paciente o sujeto, también pueden incluir un aplicador acostumbrado adecuado para dicho propósito. Las composiciones, equipos y métodos de la presente invención permiten el suministro de una toxina botulínica más pura con actividad específica superior y farmacocinéticas potencialmente mejoradas. Además, el vehículo puede actuar como un estabilizador, reduciendo la necesidad de proteínas accesorias externas (por ejemplo, albúmina de suero humano que fluctúa de 400-600 mg ó albúmina de suero recombinante que fluctúa de 250-500 mg) y/o estabilizadores de polisacárido, y pueden producir reducciones benéficas en respuestas inmunes para la toxina botulínica. Además, las composiciones son adecuadas para utilizarse en ambientes fisiológicos con un pH que fluctúa de aproximadamente 4.5 hasta aproximadamente 6.3, y por lo tanto puede tener dicho pH. Las composiciones de acuerdo con la presente invención, pueden ser almacenadas ya sea a temperatura ambiente o bajo condiciones de refrigeración. Los siguientes son ejemplos representativos de la presente invención. Pueden demostrar el suministro de complejos de neurotoxina botulínica funcional a través de la piel sin requerir modificación covalente de la neurotoxina que será suministrada. EJEMPLOS EJEMPLO 1 Transporte de una toxina botulínica in vivo utilizando un vehículo de peptidilo Este experimento demuestra el uso del vehículo de peptidilo para transportar un complejo grande que contiene una toxina botulínica de proteína etiquetada intacta a través de piel intacta después de administración de una sola vez con relación a controles. Selección de esqueleto: Se ensambló el esqueleto cargado en forma positiva mediante conjugación de Gly3Arg7 a polilisina (MW 1 12,000) a través del carboxilo de la glicina terminal a aminas libres de las cadenas laterales de lisina en un grado de saturación de 18% (por ejemplo 18 de cada 100 residuos de lisina se conjugan a -Gly3Arg7). El esqueleto modificado fue designado "KNR". El policatión de control fue polilisina no modificada (designada "K", Sigma Chemical Co. , St.

Louis, MO) del mismo tamaño y del mismo lote. Agente terapéutico: La marca Botox® de la toxina botulínica A (Allergan) fue seleccionada para este experimento. Su peso molecular fue de aproximadamente 1 50,000. Preparación de muestras La toxina botulínica fue reconstituida de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Se biotiniló una alícuota de la proteína con un exceso molar calculado de 12-veces de biotina sulfo-NHS-LC (Pierce Chemical). El producto etiquetado se designó como "Btox-b'J En cada caso, se empleó un exceso de policatión para ensamblar un complejo final que tiene un exceso de carga positiva como en el suministro de complejos de nucleótido grandes altamente negativos. Una carga neutral o positiva neta previene la repulsión del complejo de proteína de los proteoglicanos de superficie celular altamente negativa y matriz extracelular. Se estandarizó la dosis de Btox-b en todos los grupos, como fue el volumen total y pH final de la composición que será aplicada en forma tópica. Las muestras se prepararon como se indica a continuación: Grupo marcado "JMW-7'J se mezclaron hasta lograr la homogeneidad 2.0 unidades de Btox-b por alícuota (por ejemplo, 20 U total) y vehículo de peptidilo KNR en una proporción MW calculada de 4: 1 y se diluyeron a 200 microiitros con solución salina amortiguada por fosfato. La composición resultante se mezcló hasta lograr la homogeneidad con 1 .8 ml de loción de Cetaphil® y se alicuotó en porciones de 200 microlitros. Grupo marcado "JMW-8J se mezclaron hasta lograr la homogeneidad 2.0 unidades de Btox-b por alícuota (por ejemplo, 20 U total) y K en una proporción MW de 4: 1 y se diluyeron a 200 microiitros con solución salina amortiguada por fosfato. La composición resultante se mezcló hasta lograr la homogeneidad con 1.8 ml de Cetaphil y se alicuotaron en porciones de 200 microlitros. Experimentos animales para determinar las eficiencias de suministro transdérmico después de un tratamiento de una sola vez con vehículos de peptidilo v Btox etiquetado: Los animales fueron anestesiados mediante inhalación de isofluorano durante la aplicación de los tratamientos. Después de ser anestesiados, 6 ratones negros C57 (n=4 por grupo) pasaron por aplicación tópica de una dosis medida de 200 microlitros del tratamiento apropiado aplicado a la parte craneal de la piel de la espalda dorsal (seleccionada debido a que el ratón no puede alcanzar esa región con su boca o patas). Los animales no pasaron por depilación. Después de 30 minutos del tratamiento inicial, los ratones fueron eutanizados mediante inhalación de CO2, y los segmentos de piel tratados fueron recolectados en el grosor total mediante observadores ciegos. Los segmentos tratados fueron divididos en tres partes iguales; la parte craneal se fijó en 10% de formalina amortiguada neutral durante 12 a 16 horas, posteriormente se almacenaron en etanol al 70% hasta la incrustación en parafina. La parte central fue congelada a presión y empleada directamente para visualización de biotina mediante observadores ciegos tal como se resume más adelante. El segmento caudal tratado fue congelado a presión para estudios de solubilización. Se llevó a cabo la visualización de biotina como se indica a continuación. En síntesis, cada sección se sumergió durante 1 hora en una solución amortiguadora de NeutrAvidin®. Para visualizar la actividad de fosfatasa alcalina, se lavaron secciones cruzadas en solución salina cuatro veces, posteriormente se sumergieron en NBT/BCIP (Pierce Scientific) durante 1 hora. Posteriormente se enjuagaron en solución salina y se fotografiaron en su totalidad en un microscopio Nikon E600 con lentes plan-apochromat. Manejo de datos de análisis estadístico: Se terminó la tinción positiva total mediante observador ciego a través de análisis de imagen por lotes utilizando el software Image Pro Plus (Media Cybernetics, Silver Spring, MD) y se normalizó a un área de sección transversal total para determinar el porcentaje de manchado positivo de cada uno. Posteriormente se determinó el error promedio y estándar de cada grupo con análisis con una seguridad del 95% en una forma de medidas repetidas ANOVA utilizando el software Statview (Abacus, Berkeley, CA). Resultados: El área de sección transversal promedio que fue positiva con respecto a toxina botulínica biotinilada, se reportó como porcentaje de área total después de administración tópica de una sola vez de Btox-b ya sea con KNR ("EB-Btox") ó K ("ni"). Los resultados se presentan en la siguiente tabla 1 y se ilustran en la figura 1. En la figura 1 , el área positiva para etiqueta se determinó como porcentaje de área total después de 3 días de un tratamiento diario con "EB-Btox" que contuvo Btox-b y el vehículo de peptidilo KNR y "ni", que contuvo Btox-b con policatión K, como un control. Se ilustraron los errores promedio y estándar de cada grupo. Tabla 1 . El error promedio y estándar fue para el área de toxina botulínica etiquetada como el porcentaje de sección transversal total después de administración tópica de una sola vez de Btox-b con KNR (JMW-7) ó K (JMW-8) durante 30 minutos.

P = 0.0001 (Crítico en el 99%) EJEMPLO 2 Eficacia terapéutica de una preparación de toxina botulínica tópica con un vehículo de peptidilo El ejemplo 1 demostró que el vehículo transdérmico de peptidilo permitió una transferencia eficiente de la toxina botulínica después de la administración tópica en un modelo de murido de piel intacta. Sin embargo, este experimento no indica si la toxina botulínica de proteína de complejo se liberó en una forma funcional después de la translocación a través de la piel. El siguiente experimento se construyó por lo tanto para evaluar si la toxina botulínica puede ser suministrada en forma terapéutica a través de piel intacta como un agente tópico utilizando este vehículo de peptidilo (nuevamente, sin modificación covalente de la proteína). El esqueleto cargado en forma positiva se ensambló nuevamente conjugando -Gly3Arg7 a polilisina (MW 1 12,000) a través del carboxilo de la lisina terminal a aminas libres de las cadenas laterales de lisina en un grado de saturación de 18% (por ejemplo 18 de cada residuos de lisina se conjuga a -Gly3Arg7). El esqueleto modificado se designó como "KNR'J El policatión de control fue polilisina no modificada (designada "K", Sigma Chemical Co. , St. Louis, MO) del mismo tamaño y del mismo lote. El mismo agente terapéutico de toxina botulínica se utilizó como en el ejemplo 1 , y se preparó en la misma forma. Las muestras se prepararon como se indica a continuación: Grupo etiquetado "JMW-9'J se mezclaron hasta lograr la homogeneidad 2.0 unidades de toxina botulínica por alícuota (es decir, 60 U total) y vehículo de peptidilo KNR en una proporción MW calculada de 4: 1 , y se diluyeron a 600 microlitros con solución salina amortiguada con fosfato. La composición resultante se mezcló hasta lograr la homogeneidad con 5.4 ml de Cetaphil y se alicuotó en porciones de 200 microlitros. Grupo etiquetado "JMW-10'J se mezclaron hasta lograr la homogeneidad 2.0 unidades de toxina botulínica por alícuota (por ejemplo 60 U total) y K en proporción MW de 4: 1 y se diluyeron a 600 microlitros con solución salina amortiguada con fosfato. La composición resultante se mezcló hasta lograr la homogeneidad con 5.4 ml de Cetaphil y se alicuotaron en porciones de 200 microlitros. Grupo etiquetado "JMW-1 1 ": se diluyeron 2.0 unidades de toxina botulínica por alícuota (por ejemplo, 60 U total) sin policatión a 600 microlitros con solución salina amortiguada por fosfato. La composición resultante se mezcló hasta lograr la homogeneidad con 5.4 ml de Cetaphil y se alicuotaron en porciones de 200 microlitros. Experimentos animales para determinar la eficacia terapéutica después de tratamiento de una sola vez con vehículo de peptidilo v toxina botulínica: Se anestesiaron animales mediante inhalación de isofluorano durante aplicación de tratamientos. Después de anestesiarse, seis ratones negros C57 (n=4 por grupo) pasaron por aplicación tópica de dosis medida de 400 microlitros del tratamiento adecuado aplicado de manera uniforme desde los dedos de las patas hasta la mitad de los muslos. Se trataron ambas extremidades, y los tratamientos fueron aleatorizados a cualquier lado. Los animales no pasaron por depilación. A los 30 minutos del tratamiento inicial, los ratones fueron evaluados con respecto a la capacidad de abducción digital de acuerdo con las calificaciones de abducción digital publicadas para movilidad de patas después de administración de toxina botulínica [Aoki, KR. A comparison of the safety margins of botulinum neorutoxin serotypes A, B, y F in mice. Toxicon. diciembre de 2001 ; 39(12): 1815-20]. La movilidad del ratón también se evalúa en forma subjetiva. Manejo de datos v análisis estadísticos: Se tabularon las calificaciones de abducción digital en forma independiente a través de dos observadores ciegos. Se determinó subsecuentemente el error promedio y estándar de cada grupo con análisis de importancia con una seguridad del 95% en una forma de medidas repetidas ANOVA utilizando el software Statview (Abacus, Berkeley, CA). Resultados: Las calificaciones de abducción digital promedio después de administración tópica de una sola vez de toxina botulínica con KNR ("JMW-9") o diluyente sin policatión ("JMW-10") se presentan en ia tabla 2 y se ilustran en la fotomicrográfica representativa de la figura 2 que se encuentra más adelante. El vehículo de peptidilo KNR produjo un suministro funcional estadísticamente importante de la toxina botulínica a través de la piel con relación a ambos controles, los cuales fueron comparables entre sí. Las repeticiones independientes adicionales (total de tres experimentos independientes, todos con conclusiones idénticas en parálisis estadísticamente significativa procedente de toxina botulínica tópica con KNR, pero no controles) del experimento confirmó estos descubrimientos y no reveló diferencias significativas entre la toxina botulínica tópica con o sin K (por ejemplo ambos controles). En forma interesante, los ratones ambularon en forma consistente hacia una extremidad paralizada (lo cual ocurrió en el 100% de los animales tratados y 0% de los controles de cualquier grupo de control). Tal como se muestra en la figura 2, una extremidad tratada con toxina botulínica más polilisina de policatión de control o con toxina botulínica sin policatión ("Botox solo") puede movilizar los dígitos (como un mecanismo de defensa cuando se levanta), aunque las extremidades tratadas con toxina botulínica más el vehículo de peptidilo KNR ("Essentia Botox Lotion") pueden no moverse. Tabla 2: Calificaciones de abducción digital 30 minutos después de la aplicación tópica de una sola vez de toxina botulínica con vehículo de peptidilo KN R ("JMW-9"), con un policatión de control ("JMW-1 0"), o soio ("J MW-1 1 ").

P = 0.0351 (crítico en el 95%). Conclusiones: Este experimento sirve para demostrar que el vehículo transdérmico de peptidilo puede transportar una cantidad terapéuticamente efectiva de terapéutico botulínico a través de la piel sin modificación covalente del terapéutico. El experimento también confirma que la toxina botulínica no funciona cuando se aplica en forma tópica en controles.

EJEMPLO 3 Eficacia terapéutica de una preparación de toxina botulínica tópica con un vehículo sin peptidilo Este experimento demuestra el desempeño de un vehículo sin peptidilo en la presente invención. Métodos: Selección de esqueleto: El esqueleto cargado en forma positiva fue ensamblado conjugando -Gly3Arg7 a polietilenoimina (PEÍ) MW 1 ,000,000 a través del carboxilo de la glicina terminal a aminas libres de cadenas laterales PEÍ en un grado de saturación de 30% (por ejemplo 30 de cada 100 residuos de lisina se conjugan a -Gly3Arg7. El esqueleto modificado fue designado "PEI R" para denotar el vehículo sin peptidilo grande. El policatión de control fue PEÍ modificado (designado "PEÍ", Sigma Chemical Co. , St. Louis, MO) del mismo tamaño y del mismo lote. Se utilizó el mismo agente terapéutico de toxina botulínica como en el ejemplo 1 . La toxina botulínica fue reconstituida a partir de producto Botox de acuerdo con las instrucciones del fabricante. En cada caso, se empleó un exceso de policatión para ensamblar un complejo final que tuvo un exceso de carga positiva como en el suministro de complejos de nucleótidos grandes altamente negativos. Una carga neutral o positiva neta evita la repulsión del complejo de proteína de los proteoglicanos de superficie celular altamente negativos y matriz extracelular. La dosis de toxina botulínica fue estandarizada a través de todos los grupos como fue el volumen total y pH final de la composición que será aplicada en forma tópica. Las muestras se prepararon como se indica a continuación: Grupo etiquetado "AZJ se mezclaron hasta lograr la homogeneidad 2.0 unidades de toxina botulínica por alícuota (es decir, 60 U total) y vehículo sin peptidilo PEI R en forma ultrapura en una proporción MW calculada de 5: 1 , y se diluyeron a 600 microlitros con solución salina amortiguada con fosfato. La composición resultante se mezcló hasta lograr la homogeneidad con 5.4 ml de Cetaphil y se alicuotaron en porciones de 200 microlitros. Grupo etiquetado "BAJ se mezclaron hasta lograr la homogeneidad 2.0 unidades de toxina botulínica por alícuota (por ejemplo, 60 U total) y PEÍ en proporción de carga de 5: 1 y se diluyeron a 600 microlitros con solución salina regulada con fosfato. La composición resultante se mezcló hasta lograr la homogeneidad con 5.4 ml de Cetaphil y se alicuotaron en porciones de 200 microlitros. Experimentos animales para determinar eficacia terapéutica después de tratamiento de una sola vez: Se anestesiaron animales median inhalación de isofluorano durante la aplicación de los tratamientos. Después de anestesiarse, seis ratones negros C57 (n=3 por grupo) pasaron por aplicación tópica de dosis medida de 400 microlitros del tratamiento adecuado aplicado de manera uniforme desde los dedos de las patas hasta la parte media del muslo. Ambos limbos fueron tratados, y los tratamientos se aleatorizaron a cualquier lado. Los animales no pasaron por depilación. Treinta minutos después del tratamiento inicial, los ratones fueron evaluados con respecto a capacidad de abducción digital de acuerdo con las calificaciones de abducción digital publicadas para movilidad de patas después de la administración de toxina botulínica [Aoki, KR. A comparison of the safety margins of botulinum neorutoxin serotypes A, B, y F in mice. Toxicon. Diciembre de 2001 ; 39(12): 1815-20]. La movilidad del ratón también se evalúa en forma subjetiva. Manejo de datos y análisis estadístico: Se tabularon las calificaciones de abducción digital en forma independiente a través de dos observadores ciegos. Se determinó subsecuentemente el error promedio y estándar de cada grupo con análisis de importancia con una seguridad del 95% en una forma de medidas repetidas ANOVA utilizando el software Statview (Abacus, Berkeley, CA). Resultados: Las calificaciones de abducción digital promedio después de la administración tópica de una sola vez de toxina botulínica con PEIR ("AZ"), o policatión de control ("BA"), se presentan en la tabla 3, y se presenta una repetición como la tabla 4 (repetición independiente simple de este experimento). El vehículo sin peptidilo PEIR produjo suministro funcional estadísticamente significativo de toxina botulínica a través de la piel con relación a los controles. Tal como se indicó anteriormente, se observó que los animales caminan en círculos hacia las extremidades paralizadas. Tabla 3. Calificaciones de abducción digital 30 minutos después de la administración tópica de una sola vez de Botox con PEI R ultrapuro ("AZ") o policatión de control PEÍ ("BA"). Se presenta el error promedio y estándar.

P = 0.0002 (crítico en el 99%). Tabla 4. Calificaciones de abducción digital 30 minutos después de la administración tópica de una sola vez de Botox con PEIR ultrapuro ("AZI") o policatión de control PEÍ ("BAI"). Se presenta el error promedio y estándar.

P = 0.0001 (crítico en el 99%). Conclusiones: Este experimento demostró que el vehículo transdérmico sin peptidilo puede transportar dosis terapéuticas de toxina botulínica a través de la piel sin modificación covalente previa de la toxina botulínica. Estos descubrimientos complementan los de los agentes de transferencia con peptidilo. La opción de utilizar vehículos sin peptidilo o con peptidilo para lograr el efecto terapéutico, será diseñado según las circunstancias, ambientes y métodos de aplicación específicos y se agregan al alcance de la plataforma de suministro transdérmico de la presente invención. EJEMPLO 4 Eficacia terapéutica de una preparación de toxina botulínica tópica con vehículo de peptidilo para hiperhidrosis de frente y arrugas Este experimento demuestra que la toxina botulínica puede ser suministrada en forma terapéutica a través de piel intacta como un agente tópico utilizando este vehículo de peptidilo para el tratamiento de hiperhidrosis de frente y arrugas en sujetos humanos. Procedimiento experimental para estudio de hiperhidrosis de frente v arrugas: Se tomaron fotografías de línea de base y posteriores al tratamiento de la frente del paciente con un fondo azul utilizando una cámara Nikon D70 con flash Nikon TTL Macro-speedlinght SB29s (Nikon, I nc. EUA). Los videos de la línea de base y post-tratamiento de la frente del paciente se tomaron con un fondo azul utilizando una cámara Sony Digital Handycam. Se llevó a cabo una prueba de almidón/yodo de Minor para visualizar la producción de sudor utilizando solución de yodo de povidona tópica al 1 0% (Walgreen Co. , Deerfield, I llinois) y almidón de maíz al 100% de Kingsford (ACH Food Companies, Inc., Memphis, Tennessee). La frente del paciente se pintó con una solución de yodo utilizando bolas de algodón estéril (Johnson & Johnson Consumer Product Company, Skillman, Nueva Jersey), y posteriormente se dejaron secar completamente. El área fue ligeramente espolvoreada con polvo de almidón utilizando bolas de algodón estéril. El sudor se indujo con actividad física a temperatura ambiente. Aparecieron manchas color azul-negro obscuras ya que el sudor disolvió el yodo y se hicieron reaccionar con polvo de almidón. Las fotografías de línea de base y post-tratamiento de la prueba de yodo-almidón se tomaron en un fondo azul utilizando una cámara Nikon D70 con flash Nikon TTL Macro-speedlinght SB9s. La frente del paciente se limpió con EtOH al 70% y posteriormente agua desionizada. El área de tratamiento definida previamente del sujeto en la frente se preparó mediante método de desprendimiento de cinta no invasivo del estratum corneum antes de la aplicación del tratamiento. Se aplicó cinta de corte previo al área de tratamiento con presión firme durante algunos segundos. Se eliminó rápidamente jalando una esquina de la cinta. La segunda cinta se aplicó con cuidado a la misma área inmediatamente después de que la cinta fue eliminada. Se repitió de 3 a 5 veces la separación de la cinta. Preparación de tratamiento: La solución de reconstitución de Botox de cloruro de sodio estéril al 0.9% (Abbott Laboratories, North Chicago, Illinois) más 5% EtOH más 5% de solución de poliaspartato de cadena corta etiquetada A-3C (Donlar BioPolymer, Inc. Bedford Park, Illinois) se preparó (por ejemplo para cada 1.0 mililitros de solución, 900 microlitros de cloruro de sodio estéril al 0.9% más 50 microlitros de 100% EtOH más 50 microlitros de solución de poliaspartato de cadena corta). Se preparó Kn21 T en una concentración de 1 miligramo/mililitro con cloruro de sodio 0.9% más 5% EtOH (por ejemplo 500 microlitros de KN21 T fueron alicuotados y 25 microlitros de 100% EtOH fueron agregados). Tal como se utiliza en la presente invención, Kn21 T se refiere a un esqueleto de polilisina cargado en forma positiva que tiene un peso molecular de 21 ,000 y grupos de ramificación TAT. Se reconstituyeron 100 unidades de Botox (Allergan, Irvine, CA) con 1 .0 mililitros de solución de reconstitución utilizando jeringa estéril libre de látex de 3 ml con 18G11 (Becton Dickinson & Co., Frankiin Lakes, Nueva Jersey). El Botox reconstituido se mezcló cuidadosamente mediante inversión 8 veces. Se utilizaron para cada sujeto 200 unidades de Botox. Se preparó la "Essentia Botox Solution" con 200 unidades de Botox y Kn21 T más 5% EtOH (por ejemplo, 2.0 mililitros de botox se agregaron a 500 microlitros de Kn21 T más 25 microlitros de 100% EtOH) y se saturaron a temperatura ambiente durante 5 minutos para que se formaran los complejos. La solución de control se preparó con solución de reconstitución y Kn21 T más 5% EtOH (por ejemplo, 2.0 ml de solución de reconstitución se agregó a 500 microlitros de Kn21 T más 25 microlitros de 100% EtOH) y se mantuvieron a temperatura ambiente. Aplicación de tratamiento: El sujeto se reclinó en una mesa con cubierta de protección alrededor de los ojos, rostro y cuerpo superior. El tratamiento se aplicó de manera uniforme a la frente del paciente utilizando una pipeta y se masajeó en la piel en un movimiento circular con los dedos, portando guantes de nitrilo libres de polvo. El área de tratamiento se cubrió con una capa delgada de crema humectante Cetaphil® (Galderma, Fort Worth, TX) y se incubó durante 60 minutos. Después de 60 minutos de incubación, el tratamiento fue eliminado con almohadillas de gasa estéril. Las almohadillas de gasa y los guantes fueron desechados en una bolsa de desechos biológicos. Resultados: La figura 3, ilustra la reducción significativa en profundidad, longitud y ancho de arrugas después del tratamiento tópico con combinación de vehículo de peptidilo y botulinum. Este experimento confirma que la toxina botulínica aplicada en forma tópica, cuando se combina con vehículo transdérmico, puede producir parálisis muscular significativa para producir un efecto cosmético. La figura 4 es un molde de Mikrosil de la piel tratada (A) versus piel no tratada (B). Las arrugas son visibles en el cast de la piel no tratada. Las figuras 5 y 6 muestran los resultados de la prueba de almidón/yodo de Minor. La figura 5 muestra fotos tomadas 2 minutos después de la aplicación, con el panel (A) que corresponde al lado tratado con Essentia Botox Lotion, y el panel (B) que corresponde al lado tratado con una loción de control que contiene el vehículo Kn21 T solo. La figura 6 es igual que la figura 5, excepto que fue tomada a los 4 minutos. Se debe observar que la coloración más pronunciada en el lado de la loción de control, indica que la piel en dicho lado está secretando más sudor. También se debe observar que la sudoración comienza antes en el lado no tratado. Conclusiones: Este ejemplo demuestra que los complejos aplicados en forma tópica de toxina botulínica pueden producir un beneficio estético significativo en la reducción de arrugas finas y gruesas. Este efecto transepitelial confirma además que la parálisis muscular puede lograrse con vehículos adecuados después de la aplicación tópica de complejos de toxina botulínica, tales como las que aquí se describen. Por lo tanto este ejemplo indica que la aplicación tópica de toxina botulínica puede conducir a liberación de espasmos musculares tales como blefaroespasmo o tortícolis, así como liberación de dolor relacionado con espasmos muscular tal como dolor de espalda baja. EJEMPLO 5 Eficacia terapéutica de una preparación de toxina botulínica tópica con vehículo de peptidilo para hiperhidrosis axilar Este experimento demuestra si la toxina botulínica puede ser suministrada en forma terapéutica a través de piel intacta como un agente tópico utilizando este vehículo de peptidilo para el tratamiento de hiperhidrosis axilar en sujetos humanos (n=10 axilas por grupo con una axila tratada y una de control por paciente en un modo de doble-ciego aleatorizado). Criterio de inclusión para estudio de hiperhidrosis axilar: • Edad: 18 años o más. Voluntarios sanos. Consentimiento informado proporcionado y firmado por el voluntario. Sujeto voluntario de acuerdo en seguir la instrucción y regresar a visitas de seguimiento. Sujeto que presenta hiperhidrosis subjetiva, preexistente. El sujeto no está en embarazo o planea estar en embarazo los siguientes tres meses. El sujeto vive y/o trabaja en San Francisco o área cercana ai estudio. El sujeto no tuvo tratamiento de sudoración bajo el brazo seis meses antes. El sujeto no planea tener tratamiento de sudoración bajo el brazo los siguientes tres meses. Procedimientos de medición qravimétrica: Como parte del procedimiento de medición gravimétrica, los sujetos se aclimataron primero en el área de pruebas.

Específicamente, cada sujeto se sentó durante 15 minutos a temperatura ambiente de 22.22-25°C (72-77°F) en posición de reposo.

Preparación de las axilas: (se portaron guantes de nitrilo libres de polvo para los siguientes procedimientos). El sujeto se cambió con una capa y sostén es una mujer) y se quitó toda las prendas de la parte superior del cuerpo (si es hombre), para exponer ambas de las axilas completamente. El área de dosis fue determinada previamente para ser el área cubierta por la piel que contiene vello, además de un área que se extiende 1 centímetro más allá de la piel que contiene vello en cada axila. El área de dosis se limpió con una almohadilla de gasa estéril humedecida previamente procedente de un tubo cónico de 50 ml mediante remojo con cinco golpes fuertes desde la parte superior hasta la parte ¡nferior en la misma dirección utilizando un lado de la gasa. Este paso se repitió tres veces más con una almohadilla de gasa humedecida previamente limpia cada vez teniendo cuidado de no irritar o corroer la piel. Las almohadillas de gasa se desecharon en el cesto de basura. Se repitió el mismo procedimiento de lavado para la otra axila. La axila se secó con gasa estéril seca utilizando movimiento de almohadilla firme desde la parte superior hasta la parte inferior de la axila, teniendo cuidado de no irritar o corroer la piel. Posteriormente, la axila se secó en forma adicional colocando un papel de filtro bajo el doblez de la axila y permitiendo que el filtro permaneciera en el filtro de prueba durante 5 minutos después del procedimiento para evaluación gravimétrica. El paciente se sentó con sus brazos contra su cuerpo en una posición de descanso. Se desecharon los papeles de filtro en el cesto de basura. El sujeto se dejó reposar durante 1 minuto sin manipulación de la axila antes de la primera evaluación gravimétrica. Medición de producción de sudor (medición gravimétrica): (Se utilizó un nuevo par de guantes de nitrilo libres de polvo antes de estas mediciones). El sujeto mantuvo sus manos juntas en la parte posterior de la cabeza para exponer completamente las axilas, en tanto que se refino parcialmente (aproximadamente 45 grados). Se eliminó el papel de filtro pesado previamente de un tubo de almacenamiento cónico y se colocó bajo la axila del sujeto con la punta del filtro alineándose con el centro de la línea del pliegue de la axila. El papel de filtro se mantuvo en su lugar utilizando los dedos en tanto que el sujeto relajó los brazos a los lados del cuerpo. El sujeto se sentó con ambos brazos mantenidos apretados contra su tronco durante 5 minutos. El conteo de tiempo comenzó cuando los papeles de filtro se aseguraron colocados bajo ambas de las axilas. Se midieron en forma simultánea ambas axilas. Después de 5 minutos, los papeles de filtro fueron eliminados de las axilas y se colocaron nuevamente en los mismos tubos cónicos respectivos. El papel de filtro colocado al principio fue eliminado primero. Las tapas de los tubos cónicos fueron roscadas fuertemente para evitar la evaporación del sudor dei tubo. La producción de sudor se repitió dos veces más en intervalos de 1 minuto. Prueba de almidón/vodo de Minor: El sujeto mantuvo sus manos juntas en la parte de atrás de la cabeza para exponer completamente las axilas. Se pintó solución de yodo sobre el área de la axila predeterminada como se hizo anteriormente con una almohadilla de gasa estéril y se dejó secar con aire. Cuando el yodo se secó completamente, se polveó una capa fina de almidón sobre el área cubierta por el yodo con bolas de algodón. El yodo se dejó secar con aire antes de la aplicación del almidón con el objeto de reducir un positivo y de fondo falso. Posteriormente el sujeto se sentó con ambos brazos mantenidos apretados contra su tronco. Después de 5 minutos, el sujeto levantó sus brazos y mantuvo sus manos juntas en la parte de atrás de la cabeza para exponer completamente las axilas. Se tomaron fotografías de cada axila con la axila izquierda y derecha y con las fechas marcadas claramente. Las axilas se limpiaron con EtOH al 70% y posteriormente con agua desionizada estéril. Preparación de tratamiento: Se preparó Kn21 pr en una concentración de 1 miligramo/mililitro con solución salina más 5% EtOH (es decir, 500 mililitros de Kn21 pr se alicuotaron en 25 microlitros de 100% EtOH se agregaron). Tal como se utiliza en la presente invención, Kn21 pr se refiere a un esqueleto de polilisina cargado en forma positiva con un peso molecular de 21 ,000 y grupos de ramificación que comprenden oligoarginina protegida. Se reconstituyeron 100 unidades de Botox® (Allergan, Irvine, CA) con 0.75 mililitros de cloruro de sodio al 0.9% (Abbott Laboratories, North Chicago, Illinois) utilizando jeringa estéril libre de látex de 3 ml con (Becton Dickinson and Company, Frankiin Lakes, Nueva Jersey). El Botox® reconstituido se mezcló con cuidado mediante inversión ocho veces. Se utilizaron 200 unidades de Botox® para cada sujeto. La solución de tratamiento se preparó con 200 unidades de Botox® y KN21 pr además de 5% EtOH (por ejemplo, 1 .5 mililitros de Botox® se agregaron a 500 mililitros de Kn21 pr más 25 microlitros de 100% EtOH) y se mantuvo a temperatura ambiente durante 5 minutos para permitir que se formaran los complejos. Después de un período de incubación de 5 minutos, se agregaron aproximadamente 1 .0 mililitros de 4% HPC (hidroxipropilcelulosa) (con 1 % EtOH) y se mezclaron suave y profundamente con una pequeña espátula de metal. Se transfirió la solución de tratamiento homogénea en una jeringa de 3 ml y tapa de la jeringa. (Becton Dickinson and Company, Frankiin Lakes, Nueva Jersey). Se preparó la solución de control con cloruro de sodio al 0.9% y Kn21 pr además de 5% EtOH (por ejemplo 1 .5 mililitros de cloruro de sodio al 0.9% y se agregaron a 500 mililitros de Kn21 pr más 25 microlitros de 100% EtOH) y se dejaron asentar a temperatura ambiente durante 5 minutos. Después de la incubación, se agregaron aproximadamente 1.0 mililitros de HPC al 4% (con 1 % EtOH) y se mezclaron suave y profundamente con una pequeña espátula de metal. Se transfirió la solución de control homogénea en una jeringa de 3 ml y se tapó la punta de la jeringa. Aplicación de tratamiento (se portaron guantes de nitrilo. libres de polvo): El sujeto mantuvo sus manos juntas con los dedos entrelazados y colocados en la parte trasera de la cabeza para exponer completamente sus axilas. Posteriormente, el sujeto se reclinó en una silla a un ángulo de aproximadamente 45 grados. Tal como se muestra en la figura 7, el área de dosis se mapeó de manera visual (por ejemplo, 1 centímetro más allá de la piel que contiene vello) para la aplicación. El área de dosis se revisó con respecto al secado. Se eliminó la tapa de la punta de la jeringa de la jeringa etiquetada marcada con "L" para izquierda y "R" para derecha, y se preparó para aplicación sobre la axila del sujeto. La solución de tratamiento se dispersó de manera uniforme alrededor del área de dosis con una jeringa y se masajeó en la piel con los dedos durante 1 minuto. Posteriormente el sujeto colocó sus brazos a lo largo de la parte lateral del cuerpo y se incubó durante 60 minutos. Después de la incubación a 60 minutos, el tratamiento se limpió con almohadillas de gasa estéril. Las almohadillas de gasa y los guantes se desecharon en una bolsa de residuos biológicos. Se dejo ir al sujeto. Resultados: BT tópico Essentia redujo la sudoración en un 65% y se ilustra en la figura 8A. Producción de sudor 4 semanas después del tratamiento (aleatorizado por lado) con esqueleto KN21 pr solo (control) o esqueleto kn21 pr más 200U Botox (proporción a línea de base). Los análisis estadísticos mediante clasificaciones firmadas por Wilcoxon utilizando N PSS con P tal como se observó y trascendencia en P<0.05. [n=1 0 sujetos]- Segunda comparación: línea de base versus 4 semanas (ver figura 8b). La producción de sudor (mg por 5 minutos) 4 semanas después del tratamiento axilar (aleatorizado por lado) con esqueleto kn21 pr solo (control) o esqueleto kn21 pr más 200U Botox (proporción de tratamiento de control) se presenta en la tabla 6. Los análisis estadísticos mediante clasificaciones firmadas por Wilcoxon utilizando NPSS con P, tal como se observaron y trascendencia P<0.05. (Pr T p=0.0217). [n=10]. La figura 9, muestra fotografías que ilustran la prueba de almidón/yodo de Minor antes y después del tratamiento con "Essentia Botox Lotion" en forma tópica para el tratamiento de hiperhidrosis axilar. La prueba de almidón/yodo en la línea de base versus semana 2, se muestra cuando la axila derecha fue tratada con "Essentia Botox Lotion" (a y c) y la axila izquierda se le aplicó el control (para el sujeto #12). Estas fotografías ilustran los beneficios típicos observados después del tratamiento con vehículo más Botox en yodo/almidón. Aunque se observa algún cruce en el lado de control (consistente con el 25% de reducción en datos gravimétricos), se produjeron reducciones significativas con el tratamiento (consistente con 65% de reducción en datos gravimétricos en el lado tratado). Conclusiones: Este ejemplo confirma que la aplicación tópica de complejos botulínicos formados de acuerdo con la presente invención, producen fácilmente el beneficio terapéutico en reducción de sudor en un cohorte de pacientes con hiperhidrosis-subjetivo o cuantitativo. Este efecto en reducción de sudoración, también ha sido producido en el caso de la frente presentado anteriormente en aplicación palma/plantas cuando se combina con un guante para limitar la dispersión de la formulación durante el tiempo de permanencia. Este suministro transepitelial de complejos de toxina botulínica para beneficio terapéutico, confirma además que el método puede ser extendido a otros casos en donde la función SNAP ó señales de acetilcolina son cruciales, tales como disfunción o espasmo de vejiga, aplicaciones gastrointestinales, o secreciones de glándula sebácea para reducir el mal olor o prevención/tratamiento de acné.

Claims

R E I V I N D I C A C I O N E S 1 . Una composición que comprende una toxina botulínica y un vehículo que comprende un esqueleto polimérico que tiene adheridos grupos de ramificación cargados en forma positiva, en donde la asociación entre el vehículo y la toxina botulínica es no covalente. 2. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque la toxina botulínica es un derivado de toxina botulínica. 3. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque la toxina botulínica comprende una toxina botulínica recombinante. 4. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque la toxina botulínica comprende una toxina botulínica modificada. 5. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque la toxina botulínica se selecciona de toxina botulínica serotipos A, B, C, D, E, F, y G. 6. Una composición tal como se describe en la reivindicación 5, caracterizada porque la toxina botulínica es toxina botulínica A. 7. Una composición tal como se describe en la reivindicación 5, caracterizada porque la toxina botulínica es toxina botulínica B. 8. Una composición tal como se describe en la reivindicación 5, caracterizada porque la toxina botulínica es toxina botulínica d . 9. Una composición tal como se describe en la reivindicación 5, caracterizada porque la toxina botulínica es toxina botulínica D. 10. Una composición tal como se describe en la reivindicación 5, caracterizada porque la toxina botulínica es toxina botulínica E. 1 1. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque el vehículo comprende un polipéptido que tiene adheridos grupos de ramificación cargados en forma positiva seleccionados de -(gly)n?-(arg)n2, HIV-TAT, Antennapedia PTD, y fragmentos de HIV-TAT o de Antennapedia PTD, en donde el subíndice n1 es un entero de desde 0 hasta aproximadamente 20, y el subíndice n2 es independientemente un entero non de desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 25. 12. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque el vehículo comprende un polipéptido que tiene grupos de ramificación cargados en forma positiva seleccionados de -(gly)ni-(arg)n2, en donde el subíndice n 1 es un entero de desde aproximadamente 0 hasta aproximadamente 20, y el subíndice n2 es independientemente un entero non de desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 25. 13. Una composición tal como se describe en la reivindicación 12, caracterizada porque, el subíndice n1 es un entero de desde 0 hasta aproximadamente 8. 14. Una composición tal como se describe en la reivindicación 12, caracterizada porque, el subíndice n1 es un entero de desde 2 hasta aproximadamente 5. 15. Una composición tal como se describe en la reivindicación 12, caracterizada porque, el subíndice n2 es un entero non de desde aproximadamente 7 hasta aproximadamente 17. 16. Una composición tal como se describe en la reivindicación 12, caracterizada porque, el subíndice n2 es un entero de desde aproximadamente 7 hasta aproximadamente 13. 17. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 1 , caracterizada porque el vehículo comprende un polipéptido que tiene adheridos grupos de ramificación cargados en forma positiva seleccionados de HIV-TAT y fragmentos de los mismos. 18. Una composición tal como se describe en la reivindicación 17, caracterizada porque los grupos de ramificación son fragmentos HIV-TAT cargados en forma positiva que tienen la fórmula (gly)p-RGRDDRRQRRR-(gly)q, (gly)p-YGRKKRRQRRR-(g!y)q, ó (gly)p-RKKRRQRRR-(gly)q, en donde los subíndices p y q son cada uno independientemente un entero de desde 0 hasta 20. 19. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque los grupos de ramificación cargados en forma positiva comprenden al menos aproximadamente 0.05% en peso del peso total del vehículo. 20. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque los grupos de ramificación cargados en forma positiva comprenden desde aproximadamente 0.5% hasta aproximadamente 45% en peso del peso total del vehículo. 21 . Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque los grupos de ramificación cargados en forma positiva comprenden desde aproximadamente 0.1 % hasta aproximadamente 30% en peso del peso total del vehículo. 22. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque el esqueleto comprende un polipéptido cargado en forma positiva. 23. Una composición tal como se describe en la reivindicación 22, caracterizada porque el esqueleto comprende una polilisina cargada en forma positiva. 24. Una composición tal como se describe en la reivindicación 23, caracterizada porque la polilisina tiene un peso molecular desde aproximadamente 10,000 hasta 1 ,500,000. 25. Una composición tal como se describe en la reivindicación 23, caracterizada porque la polilisina tiene un peso molecular desde aproximadamente 25 ,000 hasta aproximadamente 1 ,200, 000. 26. Una composición tal como se describe en la reivindicación 23, caracterizada porque la polilisina tiene un peso molecular desde aproximadamente 1 00, 000 hasta aproximadamente 1 ,000, 000. 27. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque el esqueleto comprende un vehículo sin peptidilo cargado en forma positiva. 28. Una composición tal como se describe en la reivindicación 27, caracterizada porque el esqueleto comprende una polialquilenoimina cargada en forma positiva. 29. Una composición tal como se describe en la reivindicación 28, caracterizada porque la polialquilenoimina es una polietilenoimina. 30. Una composición tal como se describe en la reivindicación 29, caracterizada porque la polietilenoimina tiene un peso molecular desde aproximadamente 1 0,000 hasta aproximadamente 2,500,000. 31 . Una composición tal como se describe en la reivindicación 29, caracterizada porque la polietilenoimina tiene un peso molecular desde aproximadamente 1 00,000 hasta aproximadamente 1 ,800,000. 32. Una composición tal como se describe en la reivindicación 29, caracterizada porque la polietilenoimina tiene un peso molecular desde aproximadamente 500,000 hasta aproximadamente 1 ,400,000. 33. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque tiene un pH desde aproximadamente 4.5 hasta aproximadamente 6.3. 34. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque es estable cuando se almacena a temperatura ambiente o bajo condiciones de refrigeración. 35. Una composición de liberación controlada tal como se describe en la reivindicación 1 . 36. Una composición líquida tal como se describe en la reivindicación 1 . 37. Una composición de gel tal como se describe en la reivindicación 1 . 38. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , la cual es una crema, loción o ungüento. 39. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque comprende además solución salina. 40. Una composición tal como se describe en la reivindicación 1 , caracterizada porque comprende además solución salina y un sistema amortiguador de pH . 41 . Un equipo para administrar una toxina botulínica a un sujeto que comprende una toxina botulínica y una cantidad efectiva para el suministro transdérmico de la misma, de un vehículo que comprende un esqueleto polimérico que tiene adheridos grupos de ramificación cargados en forma positiva, en donde la asociación entre el vehículo y la toxina botulínica es no covalente. 42. Un equipo tal como se describe en la reivindicación 41 , caracterizado porque comprende además un aplicador acostumbrado. 43. Un equipo tal como se describe en la reivindicación 42, caracterizado porque el aplicador acostumbrado está diseñado para ser utilizado por un profesional del cuidado de la salud. 44. Un equipo tal como se describe en la reivindicación 42, caracterizado porque el aplicador acostumbrado está diseñado para autoadministración por el sujeto. 45. Un equipo tal como se describe en ia reivindicación 41 , caracterizado porque la composición formulada previamente comprende la toxina botulínica y el vehículo. 46. Un equipo tal como se describe en la reivindicación 41 , caracterizado porque la toxina botulínica y el vehículo se formulan por separado para combinarse antes de la administración. 47. Un equipo tal como se describe en la reivindicación 41 , caracterizado porque la toxina botulínica está contenida en un dispositivo para administrar la toxina botulínica a un sujeto a través de la piel. 48. Un equipo tal como se describe en la reivindicación 47, caracterizado porque el dispositivo es un parche cutáneo. 49. Un equipo para administrar una toxina botulínica a un sujeto que comprende un dispositivo para administrar la toxina botulínica a la piel y una composición que comprende un vehículo que comprende un esqueleto polimérico que tiene adheridos grupos de ramificación cargados en forma positiva seleccionados de -(gly)n?- (arg)n2, HIV-TAT, y fragmentos de los mismos, y Antennapedia PTD, en donde el subíndice n 1 es un entero de desde 0 hasta aproximadamente 20, y el subíndice n2 es independientemente un entero non de desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 25. 50. Un equipo tal como se describe en la reivindicación 49, caracterizado porque el dispositivo es un parche cutáneo. 51 . Un método para administrar una toxina botulínica a un sujeto, caracterizado porque comprende aplicar en forma tópica a la piel o epitelio del sujeto la toxina botulínica junto con una cantidad efectiva de un vehículo que comprende un esqueleto polimérico que tiene adheridos grupos de ramificación cargados en forma positiva, en donde la asociación entre el vehículo y la toxina botulínica es no covalente. 52. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque comprende aplicar en forma tópica a la piel o epitelio del sujeto una cantidad efectiva de una composición de conformidad con la reivindicación 1. 53. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque comprende la aplicación por separado de la toxina botulínica y el vehículo a la piel o epitelio del sujeto. 54. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica se administra para logrear un efecto biológico deseado. 55. Un método tal y como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se administra para lograr un beneficio estético o cosmético. 56. Un método tal y como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica para reducir o prevenir una respuesta inmune. 57. Un método tal y como se describe en la reivindicación 56, caracterizado porque la respuesta inmune reducida o evitada mejora la respuesta terapéutica en administraciones repetidas posteriores de la composición. 58. Un método tal y como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se administra para prevenir o reducir síntomas asociados con hiperhidrosis subjetiva o clínica. 59. Un método tal y como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de contracciones distónica distonia subjetiva o clínica. 60. Un método tal y como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con espasmo muscular. 61 . Un método tal y como se describe en la reivindicación 60, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica a la espalda baja del sujeto. 62. Un método tal y como se describe en la reivindicación 60, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica al cuello del sujeto. 63. Un método tal y como se describe en la reivindicación 60, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica al menos a una pierna del sujeto. 64. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica al rostro del sujeto o a una parte el mismo. 65. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica a la axila del sujeto, o a una parte de la misma. 66. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica a las palmas de las manos o a los pies del sujeto o a una parte de los mismos. 67. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica a la espalda o cuello del sujeto, o a una parte de los mismos. 68. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica a la ingle del sujeto, o a una parte de la misma. 69. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la composición se aplica en forma tópica a las manos o pies del sujeto o a una parte de los mismos. 70. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica a los codos, brazos superiores, rodillas o piernas superiores del sujeto, o a una parte de los mismos. 71 . Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica a los glúteos del sujeto a una parte de los mismos. 72. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica al torso del sujeto o a una parte del mismo. 73. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica a la pelvis del sujeto o a una parte de la misma. 74. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica se aplica para generar o aumentar una respuesta inmune. 75. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con dolor de cabeza por migraña. 76. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de acné. 77. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica es un derivado de toxina botulínica. 78. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica comprende una toxina botulínica recombinante. 79. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica comprende una toxina botulínica modificada. 80. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica es seleccionada de toxina botulínica serotipos A, B, C, D, E, F, y G. 81 . Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracteri zado porque la toxina botulínica es toxina botulínica A. 82. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracteri zado porque la toxina botulínica es toxina botulínica B. 83. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracteri zado porque la toxina botulínica es toxina botulínica C. 84. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracteri zado porque la toxina botulínica es toxina botulínica D. 85. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracteri zado porque la toxina botulínica es toxina botulínica E. 86. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque el vehículo comprende un esqueleto polimérico que tiene adheridos grupos de ramificación cargados en forma positiva seleccionados de -(gly)n?-(arg)n2, HIV-TAT, Antennapedia PTD, y fragmentos de HIV-TAT ó de Antennapedia PTD, en donde el subíndice n 1 es un entero de desde 0 hasta aproximadamente 20, y el subíndice n2 es independientemente un entero non desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 25. 87. U n método tal y como se describe en la reivindicación 86, caracterizado porque el vehículo comprende un polipéptido que tiene grupos de ramificación cargados en forma positiva seleccionados de -(g'y)ni-(arg)n2, en donde el subíndice n 1 es un entero de desde aproximadamente 0 hasta aproximadamente 20, y el subíndice n2 es independientemente un entero non desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 25. 88. Un método tal y como se describe en la reivindicación 87, caracterizado porque el subíndice n 1 es un entero de desde 0 hasta aproximadamente 8. 89. Un método tal y como se describe en la reivindicación 87, caracterizado porque el subíndice n 1 es un entero desde aproximadamente 2 hasta aproximadamente 5. 90. Un método tal y como se describe en la reivindicación 87, caracterizado porque el subíndice n2 es un entero non de desde aproximadamente 7 hasta aproximadamente 17. 91 . Un método tal y como se describe en la reivindicación 87, caracterizado porque el subíndice n2 es un entero non de desde aproximadamente 7 hasta aproximadamente 1 3. 92. Un método tal y como se describe en la reivindicación 86, caracterizado porque el vehículo comprende un polipéptido que tiene adheridos grupos de ramificación cargados en forma positiva seleccionados de HIV-TAT y fragmentos de los mismos. 93. Un método tal y como se describe en la reivindicación 92, caracterizado porque los grupos de ramificación son fragmentos H IV- TAT cargados en forma positiva que tienen la fórmula (gly) -RG RDDRRQRRR-(gly)q, (gly)p-YGRKKRRQRRR-(gly)q, ó (gly)p-RKKRRQRRR-(gly)q, en donde los subíndices p y q son cada uno independientemente un entero de desde 0 hasta 20. 94. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque los grupos de ramificación cargados en forma positiva comprenden al menos aproximadamente 0.05% en peso del peso total del vehículo. 95. Un método tal como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque los grupos de ramificación cargados en forma positiva comprenden desde aproximadamente 0.5% hasta aproximadamente 45% en peso del peso total del vehículo. 96. Un método tal como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque los grupos de ramificación cargados en forma positiva comprenden desde aproximadamente 0.1 % hasta aproximadamente 30% en peso del peso total del vehículo. 97. Un método tal como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque el esqueleto comprende un polipéptido cargado en forma positiva. 98. Un método tal como se describe en la reivindicación 97, caracterizado porque el esqueleto comprende una polilisina cargada en forma positiva. 99. Una composición tal como se describe en la reivindicación 98, caracterizado porque la polilisina tiene un peso molecular desde aproximadamente 1 0,000 hasta 1 .5 millones. 100. Un método tal como se describe en la reivindicación 98, caracterizado porque la polilisina tiene un peso molecular desde aproximadamente 25,000 hasta aproximadamente 1 ,200,000. 101. Un método tal como se describe en la reivindicación 98, caracterizado porque la polilisina tiene un peso molecular desde aproximadamente 100,000 hasta aproximadamente 1 ,000,000. 102. Un método tal como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque el esqueleto comprende un vehículo sin peptidilo cargado en forma positiva. 103. Un método tal como se describe en la reivindicación 102, caracterizado porque el polímero sin peptidilo cargado en forma positiva es polialquilenoimina. 104. Un método tal como se describe en la reivindicación 102, caracterizado porque la polialquilenoimina es una polietilenoimina. 105. Un método tal como se describe en la reivindicación 104, caracterizado porque la polietilenoimina tiene un peso molecular desde aproximadamente 10,000 hasta aproximadamente 2,500,000. 106. Un método tal como se describe en la reivindicación 104, caracterizado porque la polietilenoimina tiene un peso molecular desde aproximadamente 100,000 hasta aproximadamente 1 ,800,000. 107. Un método tal y como se describe en la reivindicación 29, caracterizado porque la polietilenoimina tiene un peso molecular desde aproximadamente 500,000 hasta aproximadamente 1 ,400,000. 108. Un método tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica comprende una toxina botulínica recombinante. 1 09. Un método tal como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque tiene un pH desde aproximadamente 4.5 hasta aproximadamente 6.3. 1 1 0. Un método tal como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en una composición de liberación controlada. 1 1 1 . Un método tal como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica está contenida en una composición líquida. 1 12. Un método tal como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica está contenida en una composición de gel. 1 1 3. Un método tal como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica está contenida en una composición que es una crema, loción o ungüento. 1 14. Un método tal como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica está contenida en una composición que comprende además solución salina. 1 1 5. Un método tal como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica está contenida en una composición que comprende además solución salina y un sistema de amortiguación de pH. 1 16. Un método tal como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica está contenida en un aparato para suministrar la toxina botulínica, en donde el dispositivo se aplica en forma tópica a la piel o epitelio del sujeto. 1 1 7. Un método tal como se describe en la reivindicación 1 16, caracterizado porque el dispositivo es un parche cutáneo. 1 1 8. Un método tal como se describe en la reivindicación 1 17, caracterizado porque el dispositivo es un dispositivo de encapsulación de célula. 1 1 9. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con secreción de mucosa. 120. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de obesidad o síntomas de los mismos. 121 . Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en. forma tópica para prevención o reducción de inflamación o síntomas de los mismos. 122. Un método tal como se describe en la reivindicación 121 , caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con psoriasis. 123. Un método tal como se describe en la reivindicación 122, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica junto con otras modalidades de tratamiento. 124. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de ronquido. 125. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas cutáneos asociados con diabetes. 126. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para mejorar la curación de heridas. 127. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con disfunción nerviosa autónoma. 128. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con parálisis cerebral. 129. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con tiroiditis de Hashimoto. 130. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con padecimientos de glándula mamaria. 131 . Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para alteración de crecimiento de cabello. 132. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con padecimientos de paratiroides. 133. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con padecimientos de movimiento. 134. Un método tal como se describe en la reivindicación 133, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con enfermedad de Parkinson. 135. Un método tal como se describe en la reivindicación 133, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con temblores. 136. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con epilepsia. 137. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con padecimientos de oído interno. 138. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con padecimientos urológicos. 139. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de otras secreciones controladas en forma colinérgica. 140. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con padecimientos neurosiquiátricos. 141 . Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con músculos lesionados. 142. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con padecimientos del oído. 143. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con cáncer. 144. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con padecimientos de atrapamiento de nervios. 145. Un método tal como se describe en la reivindicación 54, caracterizado porque la toxina botulínica se aplica en forma tópica para prevención o reducción de síntomas asociados con hipercalcemia. 146. Un método tal como se describe en la reivindicación 51 , caracterizado porque la toxina botulínica comprende una proteína de fusión. 147. Una composición tal y como se describe en la reivindicación 5, caracterizada porque la toxina botulínica es toxina botulínica F. 148. Una composición tal y como se describe en la reivindicación 5, caracterizada porque la toxina botulínica es toxina botulínica G. 149. Una composición tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizada porque la toxina botulínica es toxina botulínica F. 150. Una composición tal y como se describe en la reivindicación 51 , caracterizada porque la toxina botulínica es toxina botulínica G. R E S U E N Una composición para aplicación tópica de una toxina botulínica (que incluye derivados de toxina botulínica) que comprende una toxina botulínica y un vehículo que comprende un esqueleto polimérico que comprende un polipéptido de cadena larga o un polímero sin peptidilo que tiene adheridos grupos de ramificación o de "eficiencia" cargados en forma positiva. La presente invención también se refiere a métodos para reducir parálisis muscular y otras condiciones que pueden ser tratadas con una toxina botulínica, particularmente parálisis de músculos subcutáneos, y más particularmente músculos faciales, aplicando en forma tópica una cantidad efectiva de la toxina botulínica y un vehículo, en conjunto, a la piel o epitelio del sujeto. También se describen equipos para la administración.