MXPA06009737A

MXPA06009737A - Metodo para evaluar el potencial terapeutico de una vacuna de administracion por la mucosa

Info

Publication number: MXPA06009737A
Application number: MXPA/A/2006/009737A
Authority: MX
Inventors: Ipsen Hanshenrik
Original assignee: Alkabello A/S; Ipsen Hanshenrik; Jacobi Henrik Hugo; Lund Maerkedahl Lise
Priority date: 2004-02-26
Filing date: 2006-08-25
Publication date: 2007-04-20

Abstract

La invención se relaciona a un método para evaluar el potencial terapéutico de un programa de vacunación que comprende una vacuna para administrarse por la mucosa que comprende uno o mas antígenos y un protocolo de vacunación, el método comprende a) someter a por lo menos un individuo de prueba al programa de vacunación, b) medir el nivel de un anticuerpo biomarcador seleccionado del grupo que consiste de IgA, IgG, IgE e IgX específico al antígeno en una muestra biológica del individuo de prueba, y c) usar las mediciones obtenidas para evaluar el potencial terapéutico del programa de vacunación.

Description

MÉTODO PARA EVALUAR EL POTENCIAL TERAPÉUTICO DE UNA VACUNA DE ADMINISTRACIÓN POR LA MUCOSA CAMPO TÉCNICO La presente invención se relaciona a un método para evaluar el potencial terapéutico de una vacuna para la administración por la mucosa que comprende uno o más antígenos . ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La alergia es un problema de salud mayor en países donde está adaptado el estilo de vida Occidental. Además, la prevalencia de enfermedad alérgica está incrementándose en estos países. Aunque la alergia en general no puede ser considerada una enfermedad amenazante de la vida, el asma anualmente causa un número significante de muertes. Una prevalencia excepcional de aproximadamente 30% en adolescentes conduce a una pérdida sustancial en la calidad de vida, días de trabajo y dinero, y garantiza una clasificación entre los problemas de salud mayor en el mundo Occidental . La alergia es una enfermedad compleja. Muchos factores contribuyen al evento de sensibilización. Entre estos está la susceptibilidad del individuo definido por una interacción aun todavía insuficientemente entendida entre varios genes. Otro factor importante es la exposición al alérgeno arriba de ciertos umbrales. Varios factores ambientales pueden ser importantes en el proceso de sensibilización incluyendo la contaminación, infecciones de la infancia, infecciones por parásitos, microorganismos intestinales, etc. Una vez que un individuo es sensibilizado y la respuesta inmune alérgica establecida, la presencia de solamente cantidades pequeñísimas de alérgenos eficientemente se traduce en síntomas. El curso natural de la enfermedad alérgica está usualmente acompañado por la agravación en dos niveles. En primer lugar, una progresión de síntomas y severidad de la enfermedad, así como progresión de la enfermedad, por ejemplo, la fiebre del heno al asma. En segundo lugar, más frecuentemente ocurre la diseminación en los alérgenos atacantes dando por resultado la multirreactividad alérgica. La inflamación crónica conduce a un debilitamiento general de los mecanismos de defensa de la mucosa dando por resultado una irritación no específica y eventualmente la destrucción del tejido de la mucosa. Los infantes pueden llegar a ser sensibilizados principalmente a los alimentos, es decir, leche, dando por resultado eczema o desórdenes gastrointestinales; sin embargo, más .frecuentemente ellos dejan estos síntomas espontáneamente. Estos infantes están en riesgo de desarrollar alergia de inhalación después en sus vidas . Las fuentes de alérgeno más importantes se encuentran entre las partículas más prevalecientes de un cierto tamaño en el aire que se respira. Estas fuentes son notablemente universales e incluyen pólenes de hierbas y partículas fecales de ácaros de polvo doméstico, que conjuntamente son responsables por aproximadamente 50% de todas las alergias. De importancia global también son la caspa del animal, es decir, caspa de gato y perro, otros pólenes, tal como los pólenes de artemisa, y micro hongos, tal como Alternaría. En una base regional todavía otros pólenes pueden dominar, tal como el polen de abedul en Europa del Norte y Central, ambrosia en los Estados Unidos del Este y Central, y el polen de cedro Japonés en el Japón. Los insectos, es decir, ponzoñas de abejas y de avispas, y alimentos, cada uno tiene en cuenta aproximadamente 2% de todas las alergias. La alergia, es decir, la hipersensibilidad de tipo I, es causada por una reacción inmunológica inapropiada a las sustancias no patogénicas foráneas. Las manifestaciones clínicas importantes de la alergia incluyen el asma, fiebre del heno, eczema y desórdenes gastrointestinales. La reacción alérgica es específica en el sentido de que un individuo particular es sensibilizado al (los) alérgeno (s) particulares) , mientras que el individuo no necesariamente muestra una reacción alérgica u otras sustancias conocidas que causan la enfermedad alérgica. El fenotipo alérgico se caracteriza por una inflamación pronunciada de la mucosa del órgano objetivo y por la presencia del anticuerpo específico de alérgeno de la clase IgE en la circulación y en la superficie de las células cebadas y basófilos. ' Un ataque alérgico es iniciado por la reacción del alérgeno foráneo con anticuerpos IgE específicos de alérgeno, cuando los anticuerpos se enlazan a receptores específicos de IgE de alta afinidad sobre la superficie de células cebadas y basófilos. Las células cebadas y basófilos contienen mediadores preformados, es decir, histamina, triptasa y otras sustancias, que son liberadas en la reticulación de dos o más anticuerpos IgE enlazados al receptor. Los anticuerpos IgE son reticulados por el enlace simultáneo de una molécula de alérgeno. La reticulación del IgE enlazado al receptor sobre la superficie de las células cebadas también conduce la liberación de moléculas de señalización responsables para la atracción de los eosinófilos, células T específicas de alérgeno, y otros tipos de células al sitio de la respuesta alérgica. Estas células en interacción con el alérgeno, IgE y células efectoras, conduce a una aparición renovada de los síntomas que ocurren 12-24 horas después de encontrar el alérgeno (reacción de fase tardía) . El manejo de la enfermedad de alergia comprende la diagnosis y el tratamiento incluyendo tratamientos profilácticos. La diagnosis de la alergia está relacionada con la demostración del IgE específico de alérgeno y la identificación de la fuente de alérgeno. En muchos casos una anamnesis cuidadosa puede ser suficiente para la diagnosis de alergia y para la identificación del material de fuente de alérgeno atacante. Más frecuentemente, sin embargo, la diagnosis es sustentada por mediciones objetivas, tal como la prueba de pinchamiento de la piel, prueba de sangre o prueba de provocación. Las opciones terapéuticas caen en tres categorías mayores. La primera oportunidad es la evitación o reducción de la exposición al alérgeno. Mientras que la evitación al alérgeno es obvia, por ejemplo, en el caso de alérgenos alimenticios, esta puede ser difícil o costosa, como para los alérgenos de acaro de polvo doméstico, o esta puede ser imposible, como para alérgenos de polen. La segunda opción terapéutica y más ampliamente utilizada es la prescripción de fármacos sintomáticos clásicos similares a antihistaminas y esteroides. Los fármacos sintomáticos son seguros y eficientes; sin embargo, ellos no alteran la causa natural de la enfermedad, ni controlan la diseminación de la enfermedad. La tercera alternativa terapéutica es la vacunación a la alergia específica que en la mayoría de los casos reduce o alivia los síntomas alérgicos causados por el alérgeno en cuestión. La vacunación para alergia específica convencional es un tratamiento causal para la enfermedad alérgica. Esta interfiere con mecanismos inmunológicos básicos que dan por resultado la mejora persistente del estado inmune del paciente. 'Así, el efecto protector de la vacunación para alergia específica se extiende más allá del período de tratamiento en contraste al tratamiento con fármaco sintomático. Algunos pacientes que reciben el tratamiento son curados, y además, la mayoría de los pacientes experimentan un alivio en la severidad de la enfermedad y los síntomas experimentados, o por lo menos una detención en la agravación de la enfermedad. Así, la vacunación para alergia específica tiene efectos preventivos que reducen el riesgo de la fiebre de heno que se desarrolla en asma, y reduce el riesgo de desarrollar nuevas sensibilidades. El mecanismo inmunológico que implica la vacunación para alergia exitosa no es conocido en detalle. Una respuesta inmune específica, tal como la producción de anticuerpos contra un patógeno particular, es conocida como una respuesta inmune adaptativa. Esta respuesta puede ser distinguida de la respuesta inmune innata, la cual es una reacción no específica hacia los patógenos. Una vacuna para alergia se enlaza para dirigirse a la respuesta inmune adaptativa, que incluye células y moléculas con especificidad de antígeno, tales como células T y las células B que producen anticuerpo. Las células B no pueden madurar en las células que producen anticuerpo sin la ayuda de las células T de la especificidad correspondiente. Las células T que participan en la estimulación de las respuestas inmunes alérgicas son principalmente del tipo Th2. El establecimiento de un nuevo balance entre las células Thl y Th2 se ha propuesto que es benéfico y central para el mecanismo inmunológico de la vacunación para alergia específica. Si esto es originado por una reducción en las células Th2, un desplazamiento de las células .Th2 a Thl, o una regulación hacia arriba de las células Thl es controversial . Recientemente, las células T regulatorias se han propuesto que son importantes para el mecanismo de la vacunación para alergia. De acuerdo con este modelo las células T regulatorias, es decir, células Th3 o Trl, regulan hacia abajo ambas de las células Thl y Th2 de la especificidad de antígeno correspondiente. A pesar de estas ambigüedades generalmente se cree que una vacuna activa debe tener la capacidad para estimular las células T específicas de alérgeno. La vacunación para alergia específica, no está, a pesar de sus virtudes, en uso difundido, principalmente por dos razones. Una razón es la inconveniencia asociada con el programa de vacunación tradicional que comprende vacunaciones repetidas, es decir, inyecciones durante varios meses. La otra razón es, más importantemente el riesgo de reacciones secundarias alérgicas. Las vacunaciones ordinarias contra agentes infecciosos suficientemente se realizan utilizando una sola o unas cuantas inmunizaciones de dosis alta. Esta estrategia, sin embargo, no puede ser utilizada para la vacunación para alergia puesto que está implícita una respuesta inmune patológica. La vacunación para alergia específica convencional por lo tanto se lleva a cabo utilizando múltiples inmunizaciones subcutáneas aplicadas sobre un período de tiempo prolongado. El curso es dividido en dos fases, la dosificación hacia arriba y la fase de mantenimiento. En la fase de dosificación hacia arriba dosis incrementadas son aplicadas, típicamente durante un período de 16 semanas, iniciando con dosis muy pequeñas. Cuando la dosis de mantenimiento recomendada es alcanzada como esta dosis aplicada para la fase de mantenimiento, típicamente con inyecciones cada seis semanas. Después de cada inyección el paciente debe permanecer bajo atención médica durante 30 minutos debido al riesgo de reacciones secundarias anafilácticas, que en principio aunque extremadamente raro podrían ser amenazantes de la vida. Además, la clínica debe ser equipada para soportar el tratamiento de emergencia. No hay duda de que una vacuna basada en una ruta diferente de administración eliminaría o reduciría el riesgo para reacciones secundarias alérgicas inherentes en la vacuna de base subcutánea actual así como facilitaría un uso más difundido, posiblemente aun habilitando la autovacunación en la casa. Los intentos para mejorar vacunas para la vacunación para alergia específicas se han realizado por arriba de 30 años e incluyen procedimientos diversos. Varios procedimientos se han dirigido al alérgeno mismo a través de la modificación de la reactividad de IgE. Otros procedimientos se han dirigido a la formulación y la ruta de administración para la vacuna. La prueba de nuevos alérgenos, formulaciones de alérgenos y protocolos de tratamiento es tanto laboriosa como consumidora de trabajo y tiempo, puesto que esta requiere la prueba in vivo en animales y/o humanos, incluyendo experimentos clínicos. En particular, los experimentos clínicos para probar la eficacia terapéutica de nuevas vacunas o protocolos de tratamiento son consumidores de trabajo y tiempo, puesto que ellos tradicionalmente involucran un alto número de pacientes, un período de tratamiento largo, que por ejemplo para la alergia de polen comprende la estación de polen y un período antes de la estación de polen, y una amplia gama de dosis. Además, los experimentos clínicos requieren la aprobación gubernamental del estudio clínico para ser llevado a cabo y el enrolamiento de personas de prueba adecuadas. También, los experimentos clínicos de vacunas, por ejemplo, vacunas para alergia, dependen del monitoreo y la evaluación de los síntomas clínicos, que son parámetros altamente subjetivos, y por consiguiente los resultados de tales experimentos involucran un cierto grado de incertidumbre. El objetivo de la presente invención es proporcionar un método mejorado para evaluar el potencial terapéutico de un protocolo de vacunación o una vacuna para la administración por la mucosa, por ejemplo, una vacuna para la administración para la oromucosa, es decir, sublingual. BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Este objetivo se logra por la presente invención, que comprende i. a. los siguientes aspectos: Un método para evaluar el potencial terapéutico de un programa de vacunación que comprende una vacuna para la administración por la mucosa que comprende uno o más antígenos y un protocolo de vacunación, el método que comprende a) someter por lo menos un individuo de prueba al programa de vacunación, b) medir el nivel de un anticuerpo biomarcador seleccionado del grupo que consiste de IgA, IgG, IgE e IgX específico al antígeno en una muestra biológica del individuo de prueba, y c) utilizar las mediciones obtenidas para evaluar el potencial terapéutico del programa de vacunación. Una vacuna obtenible por el método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-35. Un método para evaluar el efecto de la vacunación para alergia específica por la mucosa (SAV) de un individuo, el método que comprende a) someter al individuo a la SAV por la mucosa, b) medir el nivel de un anticuerpo biomarcador seleccionable del grupo que consiste de IgA, IgG, IgE e IgX específico al antígeno en una muestra biológica del individuo, y c) utilizar las mediciones obtenidas para evaluar el efecto de la SAV. La invención está basada en el descubrimiento experimental sorprendente de que la administración por la mucosa de una vacuna para alergia es seguida por un incremento distinto y confiable en la concentración del fluido sanguíneo de tanto IgE, IgG, IgA e IgX específico al alérgeno en cuestión, mientras que la administración por la mucosa de una vacuna no da origen a cualquiera de los cambios para un número de otros marcadores medibles de la respuesta del sistema inmune. Los resultados experimentales sugieren que las concentraciones del fluido corporal de IgE, IgG, IgA e IgX específicos de antígeno son fuertes y marcadores efectivos para el efecto terapéutico de una vacuna. Así, la presente invención proporciona una posibilidad de probar nuevos candidatos de alérgenos, nuevas formulaciones de vacunas y como nuevos protocolos de vacunación al analizar in vitro una muestra biológica de un animal o individuo de prueba. Al llevar a cabo, por ejemplo, tal análisis in vitro antes de los experimentos clínicos es posible excluir el protocolo de vacunación no efectivos, vacunas y dosis antes de realizar los experimentos clínicos y por consiguiente reducir el grado de los experimentos clínicos para de esta manera hacer el desarrollo de nuevas vacunas más factibles. También, la invención ha proporcionado un nuevo y adicional parámetro de evaluación del potencial terapéutico de una vacuna o protocolo de vacunación, un parámetro que es además fácilmente medible y cuantificable y por consiguiente muy confiable. En particular, el método puede ser utilizado en relación con experimentos clínicos para obtener información adicional o para obtener información alternativa a otros parámetros, tal como síntomas clínicos, y de esta manera hacer el experimento clínico más confiable. Como se presentará a partir de lo anterior, el método puede ser utilizado en cualquier etapa de desarrollo de vacuna a partir de la clasificación de nuevos candidatos de alérgenos, por ejemplo, alérgenos recombinantes y recombinantes modificados, a experimentos clínicos de vacunas para el propósito de obtener autorizaciones de vacunas en el mercado . BREVE DESCIPCION DE LAS FIGURAS La Fig. 1 muestra el nivel de IgE para un grupo de pacientes tratados con placebo para cuatro puntos en el tiempo del período de administración. La Fig. 2 muestra el nivel de IgE para un grupo de pacientes tratados con una dosis de 2500 SQ para cuatro puntos en el tiempo del período de administración. La Fig. 3 muestra el nivel de IgE para un grupo de pacientes tratados con una dosis de 25000 SQ para cuatro puntos en el tiempo del período de administración. La Fig. 4 muestra el nivel de IgE para un grupo de pacientes tratados con una dosis de 75000 SQ para cuatro puntos en el tiempo del período de administración. La Fig. 5 muestra el nivel de IgA para un grupo de pacientes tratados con placebo para cuatro puntos en el tiempo del período de administración. La Fig. 6 muestra el nivel de IgA para un grupo de pacientes tratados con una dosis de 2500 SQ para cuatro puntos en el tiempo del período de administración. La Fig. 7 muestra el nivel de IgA para un grupo de pacientes tratados con una dosis de 25000 SQ para cuatro puntos en el tiempo del período de administración. La Fig. 8 muestra el nivel de IgA para un grupo de pacientes tratados con una dosis de 75000 SQ para cuatro puntos en el tiempo del período de administración. La Fig. 9 muestra el nivel de IgG para un grupo de pacientes tratados con placebo para cuatro puntos en el tiempo del período de administración. La Fig. 10 muestra el nivel de IgG para un grupo de pacientes tratados con una dosis de 2500 SQ para cuatro puntos en el tiempo del período de administración. La Fig. 11 muestra el nivel de IgG para un grupo de pacientes tratados con una dosis de 25000 SQ para cuatro puntos en el tiempo del período de administración. La Fig. 12 muestra el nivel de IgG para un grupo de pacientes tratados con una dosis de 75000 SQ para cuatro puntos en el tiempo del período de administración. La Fig. 13 muestra el nivel de IgE para un grupo de pacientes tratados con placebo en el inicio de y en 1-2 semanas después de un período de tratamiento. La Fig. 14 muestra el nivel de IgE para un grupo de pacientes tratados con una dosis de 1000000 SQ en el inicio de y en 1-2 semanas después de un período de tratamiento. La Fig. 15 muestra el nivel de IgE para los Grupos de Tratamientos 1-4 de la población de Intención-Para-Tratar (ITT) en tres puntos del tiempo durante el período de tratamiento. La Fig. 16 muestra el nivel de IgE para los Grupos de Tratamiento 1 y 6 de la población de Intención-Para-Tratar (ITT) en tres puntos del tiempo durante el período de tratamiento. La Fig. 17 muestra el nivel de IgE para los Grupos de Tratamientos 1-4 de la población Por Protocolo (PP) en tres puntos del tiempo durante el período de tratamiento. La Fig. 18 muestra el nivel de IgE para los Grupos de Tratamientos 1, 5 y 6 de la población Por Protocolo (PP) en tres puntos del tiempo durante el período de tratamiento. La Fig. 19 muestra el nivel de IgX para los Grupos de Tratamiento 1-4 de la población de Intención-Para-Tratar (ITT) en tres puntos del tiempo durante el período de tratamiento. La Fig. 20 muestra el nivel de IgX para los Grupos de Tratamientos 1, 5 y 6 de la población de Intención-Para-Tratar (ITT) en tres puntos del tiempo durante el período de tratamiento. La Fig. 21 muestra el nivel de IgX para los Grupos de Tratamientos 1-4 de la población Por-Protocolo (PP) en tres puntos del tiempo durante el período de tratamiento. La Fig. 22 muestra el nivel de IgX para los Grupos de Tratamientos 1, 5 y 6 de la población Por-Protocolo (PP) en tres puntos del tiempo durante el período de tratamiento. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Evaluación del potencial terapéutico de un programa de vacuna La evaluación del potencial terapéutico de un programa de vacunación puede ser basado en 1) mediciones de IgE, IgA, IgG o IgX solas, 2) mediciones de dos de los cuatro anticuerpos biomarcadores, 3) mediciones de tres de los cuatro anticuerpos biomarcadores, o 4) mediciones de todos los cuatro anticuerpos biomarcadores. La evaluación de las mediciones obtenidas se puede llevar a cabo mediante la comparación con un perfil de nivel de anticuerpo biomarcador temporal de referencia, por ejemplo, al preparar una gráfica del nivel de anticuerpo biomarcador contra el tiempo para producir una curva temporal. Las mediciones obtenidas se utilizan para evaluar el potencial terapéutico de un programa de vacunación dado que es probado. El programa de vacunación tiene dos componentes principales, viz. el protocolo de vacunación y la vacuna, con cada uno que tiene un número de parámetros, que puede ser el sujeto de prueba en el método de la invención. El protocolo de vacunación involucra dos parámetros de por ejemplo la clasificación y selección de personas para el estudio, las circunstancias bajo las cuales la administración de la vacuna toma lugar, la ruta de administración, las dosis de antígeno utilizadas, la frecuencia y duración de la administración, etc. La vacuna involucra los parámetros de uno o más antígenos, el adyuvante, si está presente en la formulación de la vacuna, es decir, los excipientes de la formulación. El método de la invención se puede utilizar para evaluar el potencial terapéutico de 1) el protocolo de vacunación utilizando una vacuna convencional, 2) la vacuna utilizando un protocolo de vacunación convencional o 3) la combinación del protocolo de vacunación y la vacuna. En una modalidad del método de la invención, el anticuerpo biomarcador es IgE. Se prefiere que el nivel de IgE se incremente más de 50%, más de preferencia más de 100%, más de preferencia más de 200%, más de preferencia más de 300% y más de preferencia más de 400% comparado con el nivel en el inicio del programa de vacunación. Además se prefiere que el incremento de nivel de IgE ocurra dentro de doce semanas, de preferencia dentro de diez semanas, más de preferencia dentro de ocho semanas, más de preferencia dentro de seis semanas y mucho más de preferencia dentro de cuatro semanas desde el inicio del programa de vacunación. En una modalidad particular de la invención, el nivel de IgE tiene un valor máximo seguido por una disminución. Se prefiere que el valor máximo del nivel de IgE ocurra dentro de doce semanas, de preferencia dentro de diez semanas, más de preferencia dentro de ocho semanas, ' más de preferencia dentro de seis semanas, más de preferencia dentro de cuatro semanas desde el inicio del programa de vacunación. SE prefiere que el nivel de IgE disminuya a un nivel por debajo de 90%, de preferencia por debajo de 80%, más de preferencia por debajo de 70%, más de preferencia por debajo de 60% y mucho más de preferencia por debajo de 50% del valor máximo. Se prefiere que la disminución del nivel de IgE ocurra dentro de 26 semanas, de preferencia dentro 20 semanas, más de preferencia dentro de 16 semanas, más de preferencia dentro de 12 semanas, más de preferencia dentro de 8 semanas y mucho más de preferencia dentro de 4 semanas desde el tiempo de valor máximo. En otra modalidad de la invención, el nivel de IgE permanece en aproximadamente el valor óptimo una vez que se ha alcanzado. En una - modalidad preferida adicional de la invención, el anticuerpo biomarcador es IgA. Se prefiere que el nivel de IgA se incremente más de 50%, de preferencia más que 100%, más de preferencia más que 200%, más de preferencia más que 300% y mucho más de preferencia más que 400% comparado al nivel en el inicio del programa de vacunación. Se prefiere que el incremento del nivel de IgA ocurra dentro de 20 semanas, de preferencia dentro de 16 semanas, más de preferencia dentro de 12 semanas y mucho más de preferencia dentro de 8 semanas desde el inicio de la administración. En todavía una modalidad preferida de la invención, el anticuerpo biomarcador es IgG. Se prefiere que el nivel de IgG se incremente más de 50%, de preferencia más de 100%, más de preferencia más de 200%, más de preferencia más de 300% y mucho más de preferencia más de 400% comparado con el nivel en el inicio del programa de vacunación. Se prefiere que el incremento de nivel de IgG ocurre dentro de 20 semanas, de preferencia dentro de 16 semanas, más de preferencia dentro de 12 semanas y mucho más de preferencia dentro de 8 semanas desde el inicio de la administración. En una modalidad preferida adicional de la invención el anticuerpo biomarcador es IgX. En una modalidad preferida de la invención, el IgX se expresa como la relación del nivel IgE como es medido en un inmunoensayo con competición de otros componentes de la muestra biológica al nivel de IgE como es medido en un inmunoensayo sin competición. En está modalidad de la invención, se prefiere que el nivel de IgX disminuya más de 4%, de preferencia más de 6%, más de preferencia más de 8%, más 'de preferencia más de 10%, más de preferencia más de 12% y mucho más de preferencia más de 14% comparado con el nivel en el inicio de programa de vacunación. Además se prefiere que la disminución del nivel de IgX ocurre dentro de 24 semanas, de preferencia dentro de 16 semanas, más de preferencia dentro de 12 semanas y mucho más de preferencia dentro de 8 semanas desde el inicio de la administración. Las expresiones "nivel de IgE", "nivel de IgA", "nivel de IgG" y "nivel de IgX" utilizadas anteriormente puede referirse a los niveles de los individuos de prueba individuales, o, cuando un grupo de individuos se someten al programa de vacunación, los niveles ponderados del grupo o parte del grupo, tales como los niveles promedio de los mismos. Frecuentemente el nivel de IgA, IgE, IgG e IgX varía de un individuo a otro, y por lo tanto se prefiere utilizar un grupo de dos o más, de preferencia cinco o más, más de preferencia diez o más individuos para la prueba de un programa de vacunación. Protocolo de Vacunación En una modalidad de la invención, el protocolo de vacunación comprende la administración diaria de la vacuna al individuo de prueba. En otra modalidad de la invención el protocolo de vacunación comprende la administración de la vacuna cada segundo día, cada tercer día o cada cuarto día. Por ejemplo, el protocolo de vacunación comprende la administración de la vacuna durante un período de más de 4 semanas, de preferencia más de 8 semanas, más de preferencia más de 12 semanas, más de preferencia más de 16 semanas, más de preferencia más de 20 semanas, más de preferencia más de 24 semanas, más de preferencia más de 30 y mucho más de preferencia más de 36 semanas. El período de administración puede ser un período continuo. Alternativamente, el período de administración es un período discontinuo interrumpido por uno o más períodos de no administración. De preferencia, el período (total) de no administración es más corto que el período (total) de administración. En una modalidad adicional de la invención, la vacuna se administra al individuo de prueba una vez al día, alternativamente, la vacuna se administra al individuo de prueba dos veces al día. La vacuna puede ser una vacuna de unidósis . Medición de IgE, IgA, IgG e IgX En una modalidad de la invención, la medición del nivel de IgA, IgE y/o específico al antígeno en una muestra biológica se lleva a cabo mediante ELISA que comprende las etapas de 1) recubrir el alérgeno sobre una placa de ELISA y lavar, 2) adicionar la muestra biológica, incubar y lavar, 3) adicionar un conjugado de una enzima y anticuerpo anti-IgA/IgG/IgE, incubar y lavar, 4) adicionar un sustrato de enzima, incubar y detener la reacción, y 5) medir el nivel de sustrato reaccionado. En otra modalidad de la invención, la medición del nivel de IgA, IgE y/o IgG específico al antígeno es una muestra biológica se lleva a cabo mediante un inmunoensayo de dos sitios (inmunoensayo de competición) que comprende las etapas de (a) proporcionar una mezcla de una fase líquida y un complejo de fase sólida de cuatro componentes compuestos de (i) el anticuerpo de la muestra, (ii) un anticuerpo específico de clase dirigido contra el anticuerpo a ser detectado enlazado a una fase sólida, (iii) un ligando en la forma de un antígeno, un anticuerpo o un hapteno, y (iv) un compuesto de marca, para formar un complejo en fase sólida de cuatro componentes, (b) separar el complejo de fase sólida de cuatro componentes de la fase líquida, (c) lavar la fase sólida de cuatro componentes separada para remover los compuestos no enlazados al complejo, (d) realizar una detección/medición del complejo de cuatro componentes marcado, lavado. El inmunoensayo de dos sitios puede ser llevado a cabo en un número de procedimientos variantes. Opcionalmente, una etapa de lavado se puede llevar a cabo después del mercado de los reactivos (i) y (ii) antes de la adición de los reactivos (iii) y (iv) y/o después de los mezclados de los reactivos (i) , (ii) y (iii) . La fase sólida puede ser, por ejemplo un portador particulado, tales como partículas paramagnéticas . El compuesto de marca puede ser, por ejemplo, un compuesto quimioluminiscente, tal como un éster de acridinio. El ligando puede ser enlazado a biotin en o un derivado funcional del mismo, y el compuesto de marca puede ser un compuesto quimioluminiscente covalentemente enlazado a avidin, estreptavidin o un derivado funcional del mismo, caso en el cual la detección/medición del complejo de cuatro componentes marcado, lavado se lleva a cabo al iniciar una reacción quimioluminiscente en el complejo y al detectar/medir la quimioluminiscencia resultante, si la hay.

El inmunoensayo se puede llevar a cabo utilizando, por ejemplo un ADVIA Centaur (Bayer) . Una modalidad particular del inmunoensayo de dos sitios (inmunoensayo de no competición) comprende las etapas de (a) mezclar (i) la muestra biológica con (ii) un anticuerpo específico de clase dirigido contra el anticuerpo que es detectado enlazado a una fase sólida para formar una mezcla de una fase líquida y un complejo en fase sólida de dos componentes. (b) separar el complejo de fase sólida de dos componentes de la fase líquida y lavar el complejo de fase sólida de dos componentes separados para remover los compuestos no enlazados al complejo. (c) adicionar (iii) un ligando en la forma de un antígeno, un anticuerpo o un hapteno, y (iv) un compuesto de marca, para formar un complejo de fase sólida de cuatro componentes. (d) separa el complejo de fase sólida de cuatro componentes de la fase líquida, (e) lavar la fase sólida de cuatro componentes separada para remover los compuestos no enlazados al complejo. (f) realizar una detección/medición del complejo de cuatro componentes marcado, lavado. Otra modalidad particular del inmunoensayo de dos sitios (inmunoensayo de competición) comprende un inmunoensayo de dos sitios para un anticuerpo utilizando una marca quimioluminiscente y un ligando enlazado a biotin, el método que comprende las etapas de (a) mezclar la muestra biológica con un antígeno de ligando, anticuerpo o hapteno enlazado a biotin o un derivado funcional del mismo, un anticuerpo específico de clase dirigido contra el anticuerpo que es detectado enlazado a partículas paramagnéticas y un compuesto de acridinio quimioluminiscente enlazado a avidin, estreptavidin o un derivado funcional del mismo para formar un complejo de fase sólida de cuatro componentes, (b) separar magnéticamente la fase sólida de cuatro componentes de la fase líquida, (c) lavar la fase sólida de cuatro componentes para remover los compuestos no enlazados al complejo, (d) iniciar una reacción quimioluminiscente, si la hay, en la fase sólida separada y detectar/medir la quimioluminiscencia resultante, si la hay. Una modalidad particular adicional del inmunoensayo de dos sitios (inmunoensayo de no competición) comprende las etapas de (a) mezclar (i) la muestra biológica con (ii) un anticuerpo específico de clase dirigido contra el anticuerpo que es detectado enlazado a las partículas paramagnéticas para formar una mezcla de una fase líquida y un complejo de fase sólida de dos componentes. (b) magnéticamente separar el complejo de fase sólida de dos componentes de la fase líquida y lavar el complejo de fase sólida de dos componentes separados para remover los compuestos no enlazados al complejo. (c) adicionar (iii) un ligando en la forma de un antígeno, un anticuerpo o un hapteno enlazado a biotin o un derivado funcional del mismo, y (iv) un compuesto de acridinium quimioluminiscente enlazado a avidin, estreptavidin o un derivado o funcional del mismo marca, para formar un complejo de fase sólida de cuatro componentes. (d) separar magnéticamente el complejo de fase sólida de cuatro componentes de la fase líquida, (e) lavar la fase sólida de cuatro componentes separada para remover los compuestos no enlazados al complejo. • (f) iniciar una reacción quimioluminiscente, si la hay, en la fase sólida lavada, y detectar/medir la quimioluminiscencia resultante, si la hay. De preferencia IgX es expresado como la relación del nivel de IgE como es medido en un inmunoensayo con competición de otros componentes de la muestra biológica al nivel de IgE como es medido en un inmunoensayo sin competición. En este caso, el inmunoensayo sin competición puede ser uno de las modalidades de inmunoensayo de no competición de dos sitios como es descrito en lo anterior, en donde una etapa de lavado se lleva a cabo después del mezclado de la muestra biológica y el anticuerpo específico de clase es dirigido contra el anticuerpo que es detectado enlazado a una la fase sólida, es decir, el lavado se lleva a cabo antes de la adición del alérgeno con el fin de evitar la competición de los anticuerpos no de IgE de la muestra biológica en el enlace de anticuerpos IgE de la muestra al alérgeno. El inmunoensayo con competición puede ser uno de las modalidades de inmunoensayo de competición de dos sitios mencionados en lo anterior. De preferencia, la muestra biológica es seleccionada del grupo que consiste de sangre, plasma, suero, orina, saliva y secreción nasal. Formulaciones de vacuna y rutas de administración En una modalidad preferida de la invención, la vacuna es seleccionada del grupo que consiste de vacunas formuladas para ser adaptadas a la administración por la vía de la oromucosa, la mucosa del sistema respiratorio, la mucosa del sistema digestivo, la mucosa rectal y la mucosa genital. De preferencia, la vacuna es formulada para ser adaptada a la administración por la vía de la oromucosa. En una modalidad particular de la invención, la vacuna es seleccionada del grupo que consiste de vacunas formuladas con una solución, una suspensión, una dispersión, una emulsión, formas de dosificación de dispersión rápida, gotas, pastillas, un rocío, un aerosol, una tableta, una tableta masticable, granulos, un polvo, un gel, una pasta, un jarabe, una crema, un ungüento, una barra, implantes, vagitorios, supositorios o uteritorios . De preferencia, la vacuna es formulada como una forma de dosificación de dispersión rápida. La formulación puede ser cualquier formulación convencional adecuada para la administración por la mucosa, y en particular la formulación puede comprender excipientes y adyuvantes convencionales. Antígenos El antígeno de la vacuna evaluada de acuerdo con el método de la presente invención puede ser cualquier antígeno que induce una respuesta inmune en la exposición a un individuo. En una modalidad preferida de la invención, el antígeno es seleccionado del grupo que consiste de un antígeno respiratorio, un antígeno digestivo, un antígeno microbiano y un antígeno de insecto. En una modalidad particular de la invención, el antígeno es un antígeno respiratorio . En una modalidad particular, el antígeno es un alérgeno, por ejemplo, un alérgeno inhalante o un alérgeno de insecto. Otros ejemplos de antígenos son alergoides, péptidos, haptenos, carbohidratos, ácidos nucleicos de péptidos (PNAs, una clasificación de imitación genética sintética) y antígenos infecciosos, tal como material viral o bacteriano, así como análogos o derivados del mismo. Ejemplos de sustancias nutricionales están las vitaminas, enzimas, elementos menores y minerales menores así como análogos o derivados de los mismos. Ejemplos de medicamentos están los anticuerpos, antibióticos, péptidos, sales, hormonas, hemolíticos, hemostáticos, enzimas, inhibidores de enzima, psicofármica, opiatos y barbituratos, así como análogos o derivados de los mismos. Alérgenos En una modalidad preferida de la invención el alérgeno es cualquier proteína que ocurre naturalmente que se ha reportado que induce reacciones alérgicas, es decir, mediadas por IgE en su exposición repetida a un individuo. Ejemplos de alérgenos que ocurren naturalmente incluyen alérgenos de polen (alérgenos de polen de árbol, arbusto, mala hierba y hierba) , alérgenos de insecto (alérgenos inhalantes, de saliva y de ponzoña, por ejemplo alérgenos de ácaros, alérgenos de cucaracha y jejenes, alérgenos de ponzoña de himenópteros) , alérgenos de cabello y caspa de animales (de por ejemplo, perro, gato, caballo, rata, ratón, etc.) y alérgenos de alimentos. Los alérgenos de polen importantes de árboles, pastos y hierbas son tales que se originan de los órdenes taxonómicos de Fágales, Oléales, Piñales y platanaceae incluyendo i. a. abedul (Betula), aliso (Alnus) , avellano (Corylus) , carpe (Carpinus) y olivo (Olea) , cedro (Cryptomeria y Juniperus) , árbol Plano (Plátanos) , el orden de Poales incluyendo i. a. hierbas de los géneros Lolium, Phelum, Poa, Cynodon, Dactylis, Holcus, Phalaris, Sécale y Sorghum, los órdenes de Asterales y Urticales incluyendo i. a. hierbas de los géneros Ambrosia, Artemisia y Parietaria., Otros alérgenos de inhalación importantes son aquellos de acaro de polvo doméstico del género Dermatophagoides y Euroglyphus, ácaros de almacenamiento por ejemplo Lepidoglyphys, Glycyphagus y Tyrophagus, aquellos de cucarachas, jejenes y pulgas por ejemplo Blatella, Periplaneta, Chironomus y Ctenocephalides, y aquellos de mamíferos tales como gato, perro y caballo, alérgenos de ponzoña incluyendo tales que se originan de insectos urticantes o picantes tales como aquellos del orden taxonómico de Hymenoptera incluyendo abejas (superfamilia Apidae) , avispas (superfamilia Vespidae) y hormigas (superfamilia Formicoidae) . Los alérgenos de inhalación importantes de hongos son i. a. tales que se originan de los géneros Alternaría y Cladosporium. En una modalidad más preferida de la invención el alérgeno es Bet v 1, Aln g 1, Cor a 1 y Carb b 1, Que a 1, Cy j 1, Cry j 2, Cup a 1, Cup s 1, Jun a 1, Jun a 2, Jun a 3, Ole e 1, Lig v 1, Pía I 1, Pía a 2, Amb a 1, Amb a 2, Amp t 5, Art v 1, Art v2, Par j 1, Par j 2, Par j 3, Sal k 1, Ave e 1, Cyn d 1, Cyn d 7, Dac g 1, Fes p 1, Hol I 1, Lol p 1 y 5, Pha a 1, Pas n 1, Phl p 1, Phl p 5, Phl p 6, Poa p 1, Poa p 5, Sec c 1, Sec c 5, Sor h 1, Der f 1, Der f 2, Der p 1, Der p 2, Der p 7, Der m 1, Eur m 2, Gly d 1, Lep d 2, Bio t 1, Tyr p 2, Bla g 1, Bla g 2, Per a 1, Fed d 1, Can f 1, Can f 2, Bos d 2, Equ c 1, Equ c 2, Equ c 3, Mus m 1, Rat n 1, Apis m 1, Api m 2, Ves v 1, Ves v 2, Ves v 5, Dol m 1, Dil m 2, Dol m 5, Pol a 1, Pol a 2, Pol a 5, Sol i 1, Sol I 2, Sol I 3 Y Sol I 4, Alt a 1, Cía h 1, Asp f 1, Bos d 4, Mal d 1, Gly m 1, Gly m 2, Gly m 3, Ara h 1, Ara h 2, Ara h 3, Ara h 4, Ara h 5 o híbridos entremezclados de la reproducción molecular de cualquiera de éstos. En la modalidad más preferida de la invención el alérgeno es alérgeno de polen de hierba o un alérgeno de acaro de polvo o un alérgeno de ambrosia o un polen de cedro o un alérgeno de gato o alérgeno de abedul. En todavía otra modalidad de la invención, la forma de dosificación sólida de dispersión rápida comprende por lo menos dos tipos diferentes de alérgenos ya sea que se originan de la misma fuente alérgica o que se originan de diferentes fuentes alérgicas, por ejemplo, alérgenos del grupo 1 y grupo 5 de hierba o alérgenos del grupo 1 y grupo 2 de ácaros de diferentes especies de ácaros y hierbas repetidamente, antígenos de mala hierba similares alérgenos de ambrosía corta y gigante, diferentes alérgenos y hongos similares a alternaría y cladosporium, alérgenos de árbol similares a alérgenos de abedul, avellano, carpel, roble y aliso, alérgenos de alimentos similares a alérgenos de cacahuate, soya y leche. El alérgeno incorporado en la forma de dosificación sólida de dispersión rápida puede estar en la forma de un extracto, un alérgeno purificado, un alérgeno modificado, un alérgeno recombinante o un mutante de un alérgeno recombinante. Un extracto alergénico naturalmente puede contener una o más isoformas del mismo alérgeno, mientras que un alérgeno recombinante de manera típica solamente representa un isoforma de un alérgeno. Una modalidad preferida el alérgeno está en la forma de un extracto. En otra modalidad preferida el alérgeno es un alérgeno recombinante. En una modalidad preferida adicional el alérgeno' es un mutante que enlaza IgE bajo que ocurre naturalmente o un mutante que enlaza IgE bajo recombinante. Los alérgenos pueden estar presentes en cantidades equimolares o la relación de los alérgenos presentes puede variar de preferencia hasta 1:20. En una modalidad adicional de la invención el alérgeno que enlaza IgE bajo es un alérgeno de acuerdo con WO 99/47680, WO 02/40676 o WO 03/096869. Antígenos Infecciosos En una modalidad preferida de la invención, el agente microbiano es un virus, una bacteria, un hongo, un parásito o cualquier parte del mismo. Ejemplos de agentes microbianos son especie Vibrio, especie Salmonella, especie Bordetella, especie Haemophilus, Toxoplasmosis gondii, Cytomegalovirus, especie Chlamydia, especie Streptococcal, Norwaik Virus, Escherischia coli, Helicobacter pylori, Helicobacter felis, Rotavirus, Neisseria gonorrea, Neisseria meningiditis, Adenovirus, Virus Epstein Barr, Virus de Encefalitis Japonesa, Pneumocystis carini, Herpes simple, Especie de Clostridia, Virus Syncytial Respiratorio, especies de Campylobacter, especies Rickettsia, Varicella zoster, especies Yersinia, Virus Ross River, Virus J.C., Rhodococcus equi, Moraxella catarrhalis, Borrelia burgdorferi, Pasteurella haemolítica, poliovirus, virus de influenza, Vibrio cholerae y Salmonella entérica serovar Typhi . Ejemplos adicionales de agentes microbianos son aquellos, que previenen o reducen los síntomas de las siguientes enfermedades: Influenza, Tuberculosis, Meningitis, Hepatitis, Tos de Whooping, Polio, Tétano, Difteria, Malaria, Cólera, Herpes, Tifoide, HIV, SIDA, Measles, enfermedad de Lyme, Diarrea del Viajero, Hepatitis A, B y C, Otitis Media, Fiebre de Dengue, Rabia, Parainfluenza, Rubela, Fiebre Amarilla, Desinteria, Enfermedad Legionaria, Toxoplasmosis, Fiebre Q, Fiebre Hemorrágica, Fiebre Hemorrágica Argentina, Caries, Enfermedad de Chagas, Infección del Tracto Urinario causado por E. coli, Enfermedad Pneumocócica, Mumps y Chikungunya. Método para evaluar el efecto de SAV en un individuo La invención además se relaciona a un método para evaluar el efecto de la Vacunación para Alergia Específica (SAV) en un individuo, el método que comprende a) someter a un individuo a SAV, • b) medir el nivel de un anticuerpo biomarcador seleccionado del grupo que consiste de IgA, IgG, IgE e IgX específico del antígeno en una muestra biológica del individuo, y c) utilizar las mediciones obtenidas para evaluar el efecto de la SAV. La evaluación del efecto de SAV se lleva a cabo de - la misma manera como es descrito en relación con el método para evaluar el potencial terapéutico del programa de vacunación. DEFINICIONES En relación con la presente invención, se utilizan las siguientes expresiones: "Muestra biológica" significa cualquier fluido corporal, tal como sangre, plasma, suero, orina y saliva, que es excretado, secretado o transportado dentro de un organismo biológico. La expresión "alergia" significa cualquier alergia de hipersensibilidad de tipo 1, 2, 3 o 4 hacia un antígeno. La expresión "antígeno digestivo" significa cualquier agente antigénico que entra en contracto con la mucosa del sistema digestivo, en particular la mucosa de la cavidad oral, la faringe, la laringe, el estómago y el intestino . La expresión "antígeno respiratorio" significa cualquier agente antigénico que entra en contacto con la mucosa del sistema respiratorio, en particular la mucosa de la nariz, la cavidad oral, la faringe, la laringe, la tráquea y los pulmones. La expresión "antígeno" significa cualquier antígeno, al cual un individuo puede ser expuesto, y se refiere a cualquier compuesto o sustancia que ocurre naturalmente o sintético o parte o fracción del mismo que se ha reportado puede ser mostrado que induce una respuesta inmune en la expresión de un individuo. La expresión "alérgeno" significa cualquier alérgeno, al cual un individuo puede ser expresado, y se refiere a cualquier proteína que ocurre naturalmente o mezcla de proteína que se ha reportado que induce a reacciones alérgicas, es decir, mediadas por IgE, en la exposición repetida a un individuo. El alérgeno evaluado puede estar en la forma de un extracto de alérgeno, un alérgeno purificado, un alérgeno modificado, un alérgeno recombinante, un alérgeno mutante recombinante, cualquier fragmento de alérgeno arriba de 10 aminoácidos o cualquier combinación de los mismos. El término "forma de dosificación de dispersión rápida" se refiere a formas de dosificación que se desintegra en menos de aproximadamente 90 segundos, de preferencia en menos de 60 segundos, de preferencia menos de 30 segundos, más de preferencia en menos que 20, aun más de preferencia menos de 10 segundos en la cavidad oral, aun más preferido en menos de 5, mucho más de preferencia en menos de aproximadamente 2 segundos de ser colocada en la cavidad oral . El término "oromucosa" significa la mucosa de la cavidad oral y la faringe del paciente. La expresión "mucosa del sistema respiratorio" significa la mucosa de la nariz, la cavidad oral, la faringe, la laringe, la tráquea y los pulmones. La expresión "mucosa del sistema digestivo" significa la mucosa de la cavidad oral, la faringe, la laringe, el estómago y el intestino. La expresión "mucosa genital" significa la mucosa vaginal y urinal. El término "potencial terapéutico" significa capaz de prevenir o tratar parcial o completamente una enfermedad inmunológica mediada' por antígeno, o capaz de aliviar parcial o completamente síntomas o inhibir las causas de síntomas de una enfermedad inmunológica mediada por antígeno. El término "IgX" significa un parámetro que expresa directamente o indirectamente el nivel de anticuerpo no de IgE específico de alérgeno, tal como IgG4, presentes en la muestra biológica, que pueden competir con IgE en el enlace del alérgeno. IgX puede ser por ejemplo, el nivel de IgX absoluto o la relación de IgE como es medido en un inmunoensayo con competición (interferencia) de otros componentes de la muestra biológica al nivel de IgE como es medido en un inmunoensayo sin competición. EJEMPLOS EJEMPLO 1: TRATAMIENTO DE PACIENTES ALÉRGICOS AL POLEN DE HIERBA CON TABLETAS SUBLINGUALES NO COMPRIMIDAS DE DISPERSIÓN R PIDA Antecedentes Una vacuna contra la alergia de polen de hierba usando un extracto de Fleum pratense como sustancia alérgicamente activa se conoce que es efectiva en una formulación para la administración subcutánea, en donde el alérgeno es formulado junto con un gel de hidróxido de aluminio como adyuvante. Propósito Para probar el potencial terapéutico (eficacia) de una nueva formulación de extracto de Fleum pratense en la forma de una tableta deshidratada por congelación, no comprimida, de dispersión rápida para la administración sublingual, la tableta que no contiene adyuvante. La tableta contuvo gelatina de pescado como el agente de formación de matriz. El estudio de eficacia constituye una parte clínica de un estudio de fase I clínico, que también incluye un estudio de seguridad. Protocolo de Vacunación Personas de prueba 48 personas de prueba adulta entre 18 y 65 años que sufren de rinoconjuntivitis alérgica de moderada a severa en la estación del polen de hierba y que no tiene síntomas fuera de la estación. Los criterios de inclusión fueron 1) la historia clínica de la persona de prueba, 2) una prueba de pinchamiento de la piel positiva (>3mm en un Soluprick© SQ-U HEP Felum pratense) y 3) positivo específico de IgE contra Fleum pratense (CAP clase 2 o más alto) . Dosis y programa de administración Las 48 personas de prueba se dividieron en cuatro grupos A, B, C y D cada uno que comprende 12 personas. El Grupo A (2,500 SQ-U) se trata con una tableta que contiene 2,500 SQ-U y dos tabletas de placebo. El Grupo B (25,000 SQ-U) se trata con una tableta que contiene 25,000 SQ-U y dos tabletas de placebo. El Grupo C (75,000 SQ-U) se trata con tres tabletas que contienen 25,000 SQ-U. El Grupo D se trata con tres tabletas de placebo. Las tres tabletas se administraron una vez cada día durante 8 semanas. Las 8 semanas de tratamiento fueron seguidas por 10 semanas de no tratamiento y luego el mismo tratamiento, es llevado a cabo y las 8 semanas iniciales se continua en 15 semanas. Antes de la prueba de eficacia 45 de las personas han participado en un estudio de seguridad, en donde 30 personas se les han dado dosis incrementadas de 2500 a 1,125,000 SQ-U y 15 personas se les ha dado placebo. Mediciones Muestras de suero sanguíneo se obtuvieron después de 0, 3-5 y 7-8 semanas del período de tratamiento de 8 semanas así como en 2 semanas después del final del período de tratamiento de 15 semanas. El nivel de IgE, IgA e IgC se midieron utilizando los ensayos resumidos enseguida. Procedimiento de ensayo para medir IgE El IgE se midió en un ADVIA Centaur (Bayer) utilizando un inmunoensayo de dos sitios con el siguiente procedimiento : (a) mezclar la muestra líquida con un anticuerpo específico de clase dirigido contra el anticuerpo que es detectado enlazado a partículas paramagnéticas para formar un primer complejo de fase sólida, b) lavar, (c) adicionar el alérgeno Fleum pratense enlazado a biotin para formar un segundo complejo de fase sólida (d) adicionar un compuesto de acridinio quimioluminiscente enlazado a estreptavidin para formar un tercer complejo de fase . sólida, (e) separar magnéticamente la fase sólida de la fase líquida, (f) lavar, (g) iniciar una reacción quimioluminiscente, si la hay, en la fase sólida separada y (h) medir la quimioluminiscencia emitida, la cual es indicativa de la presencia del anticuerpo en la muestra. Procedimiento de ensayo para medir IgA e IgG 1.. Recubrimiento. 100 µl de extracto de Phl p (10 µg/ml) se adiciona a las cavidades de una placa de ELISA (NUNC Maxisorp 439454) . Las placas se dejan reposar hasta el siguiente día a 2-8°C. 2. Lavado. Las placas recubiertas se lavan con una solución reguladora. 3. Bloqueo. 200 µl de solución reguladora de Caseína al 2% se adiciona a cada cavidad y se incuba a temperatura ambiente durante una hora en una mesa de agitación. Después de la incubación se remueve la solución reguladora de Caseína. 4. Suero. La muestra de suero se diluye, y 100 µl de muestra diluida se adiciona a la cavidad de una placa y se incuba a temperatura ambiente durante dos horas en una mesa de agitación. 5. Lavado . 6. Conjugado. 100 µl de IgG/IgA antihumano de ratón HRP diluido 1:1000 en solución reguladora de Caseína al 0.5% se adiciona a cada cavidad y se deja reposar a temperatura ambiente durante una hora en una mesa de agitación. 7. Lavado 8. Sustrato: 100 µl de TMP (3, 3' , 5, 5' -Tetrametilbenzidina, Jem-En-Tec TMB ONE) se adiciona a cada cavidad y se incuba a 20 min. 9. Detención. 100 µl de H2S04 0.5 M se adiciona a cada cavidad para.detener la reacción. 10. Medición. La mezcla de reacción resultante se somete a una medición espectrofotométrica en un punto final de 450 nm (Bio Kinetics Reader EL-340) . Resultados Los resultados se muestran en las Figs. 1-12, en donde la Fig. 1-4 muestra los niveles de IgE para los grupos A, B, C y D, respectivamente, Las Figs. 5-8 muestran los niveles de IgA para los grupos A, B, C y D, respectivamente, y Is Figs. 9-12 muestra los niveles de IgG para los grupos A, B, C y D, respectivamente, y en donde cada figura indica el nivel de anticuerpo (kU/L para IgE y el título relativo como es comparado con un suero de referencia de un paciente alérgico para IgA e IgG) para los cuatro puntos del tiempo de la medición (semana 0, semana 4 (muestras obtenidas en 3-5 semanas) , semana 8 (muestras obtenidas en 7-8 semanas) y Final (dos semanas después del final del período de tratamiento de 15 semanas) . El nivel de anticuerpo es el valor medio para el grupo tratado. De la Fig. 1-4 lo siguiente aparece: En el Grupo A de tratamiento (Placebo) ningún incremento en el nivel de IgE se registra durante el periodo de administración. Para el Grupo B de tratamiento (2500 SQ) , un incremento continuo en el nivel de IgE de 29 a 58 se registra durante el período.

Para el Grupo C de tratamiento (25000 SQ) , se observa un incremento continuo de 31 a 94. Finalmente, para el Grupo D de tratamiento (75000SQ) , el nivel de IgE se eleva duramente de 34 a 0 semanas a un valor máximo de 168 en 4 semanas, y luego cae a 159 en 8 semanas y además a 86 al Final. El perfil temporal para el Grupo D se considera que representa un perfil deseado, lo cual significa una Vacunación para Alergia Específica efectiva. De las Figs. 5-8 se presenta que ningún incremento en el nivel de IgA se registra para los grupos A y B de tratamiento. Para los Grupos C y D de tratamiento el nivel de IgA se incrementa permanentemente durante el período de administración . De las Figs . 9-12 se presenta que ningún incremento en el nivel de IgG se registra para los grupos A y B de tratamiento. Para los grupos C y D de tratamiento el nivel de IgG se incrementa permanentemente durante el período de administración . Los resultados mostrados en la Fig. 1-12 además se listan en la Tabla 1. Tabla 1 EJEMPLO 2: TRATAMIENTO DE PACIENTES ALÉRGICOS A POLEN DE HIERBA CON TABLETAS SUBLINGUALES NO COMPRIMIDAS, DE DISPERSIÓN RÁPIDA Antecedentes Una vacuna contra la alergia de polen de hierba usando un extracto de Fleum pratense como sustancia activa alergénica se conoce que es efectiva en una formulación para la administración subcutánea, en donde el alérgeno se formula conjuntamente con un gen de peróxido de aluminio como adyuvante . Propósito Para probar el potencial terapéutico (eficacia) de una nueva formulación de extracto de Fleum pratense en la forma de tableta deshidratada por congelación, no comprimida, de dispersión rápida para la administración lingual, la tableta que no contiene adyuvante. La tableta contuvo gelatina de pescado como agente de formación de matriz. El estudio de eficacia constituye una parte de un estudio de fase I clínico, que también incluye un estudio de seguridad. Protocolo de Vacunación Personas de prueba 9 personas de prueba adulta entre 18 y 65 años que sufren de rinoconjuntivitis alérgica de moderada a severa en la estación del polen de hierba y que no tiene síntomas fuera de la estación. Los criterios de inclusión fueron 1) la historia clínica de la persona de prueba, 2) una Prueba de Pinchamiento de la Piel positiva (>3mm en un Soluprick© SQ-U HEP Felum pratense) y 3) positivo de IgE específico contra Fleum pratense (CAP clase 2 o más alto) . Dosis y programa de administración Las 6 personas de prueba se trataron con un número de tabletas correspondientes a una dosis diaria de 1.000.000 SQ-U durante un período de 28 días y 3 personas se trataron con placebo por el mismo período. Mediciones Muestras biológicas se obtuvieron al inicio de y en 1-2 semanas después del último día de tratamiento. El nivel de IgE se midió utilizando el ensayo descrito en el Ejemplo 1. Resultados Los resultados se muestran en las Figs. 13-14, en donde la Fig. 13 muestra el nivel de IgE para el grupo de pacientes tratados con placebo en el inicio de y en 1-2 semanas después de un período de tratamiento, y en donde la Fig. 14 muestra el nivel de IgE párale grupo de pacientes tratados con una dosis de 1000000 SQ en el inicio de y en 1-2 semanas después de un período de tratamiento. Como se presentará -de la Fig. 13, el nivel de IgE está sin cambio durante el período de tratamiento para el grupo de placebo, mientras que el nivel de IgE se incrementa de aproximadamente 0.31 a aproximadamente 1.79. EJEMPLO 3: TRATAMIENTO DE PACIENTES ALÉRGICOS A POLEN DE HIERBA CON TABLETAS SUBLINGUALES NO COMPRIMIDAS DE DISPERSIÓN RÁPIDA Antecedentes Una vacuna contra una alergia de polen de hierba usando un extracto de Fleum pratense como sustancia activa alergénica se conoce que es efectiva en una formulación para la administración subcutánea, en donde el alérgeno se formula junto con un gen de hidróxido de aluminio como adyuvante. Propósito Para probar el potencial terapéutico (eficacia) de una nueva formulación del extracto de Fleum pratense en la forma de una tableta deshidratada por congelación, no comprimida, de dispersión rápida para la administración sublingual, la tableta que no contiene adyuvante. La tableta contuvo gelatina de pescado como agente de formación de matriz. El estudio de eficacia constituye una parte de un estudio de fase Ilb-III clínico. Protocolo de Vacunación Personas de prueba 855 personas de prueba adulta entre 18 y 65 años que sufren de rinoconjuntivitis alérgica de moderada a severa en la estación del polen de hierba y que no tiene síntomas fuera de la estación. Los criterios de inclusión fueron 1) la historia clínica de la persona de prueba, 2) una Prueba de Pinchamiento de la Piel positiva (>3mm en un Soluprick© SQ-U HEP Felum pratense) y 3) positivo IgE específico contra Fleum pratense (CAP clase 2 o más alto) . Las personas de prueba vivieron en Dinamarca, Alemania, Suecia, Noruega, Bélgica, Austria, Inglaterra, Suiza y Canadá.

Dosis y programa de administración Las 855 personas de prueba se dividieron en seis grupos 1, 2, 3, 4, 5 y 6 que comprenden 136, 136, 139, 141, 1509 y 153 personas, respectivamente. El Grupo 1 se trató con placebo y antihistamina activa. El Grupo 2 se trató con una dosis de alérgeno de 2500 SQ y antihistamina activa. El Grupo 3 se trató con una dosis de alérgeno de 25000 SQ y antihistamina activa. El Grupo 4 se trató con una dosis de alérgeno de 75000 SQ y antihistamina activa. El Grupo 5 se trató con placebo y antihistamina de placebo.

El grupo 6 se trató con una dosis de alérgeno de 75000 SQ y antihistamina de placebo. El tratamiento se llevó a cabo diariamente por aproximadamente 8 semanas antes del inicio anticipado de la estación de polen de Fleum pratense (período de pretratamiento) , a través de la estación de polen y por una semana después de la estación de polen (período de Post-tratamiento) . La duración de la estación de polen varió de 12 días en Tronheim (Noruega) 86 días en Karisruhe, Alemania. Mediciones Muestras de sangre se retiraron en el inicio del período dé pretratamiento (Pretratamiento en la Fig. 15-22) , en el inicio de la estación de polen (Tratamiento en las Figs. 15-22) y al final del período de Post-Tratamiento (Post-tratamiento en las Figs. 15-22). El nivel de IgE se midió utilizando el ensayo descrito en el Ejemplo 1. El parámetro de IgX se determinó como Nivel de IgE (competición) /Nivel de IgE (sin competición). El nivel de IgE (sin competición) se midió utilizando el ensayo descrito en el Ejemplo 1. Nivel de IgE (competición) se midió utilizando el siguiente procedimiento de ensayo: (a) mezclar la muestra líquida con un anticuerpo específico de clase dirigido contra el anticuerpo que es detectado enlazado a partículas paramagnéticas para formar un primer complejo de la fase sólida. (b) adicionar el alérgeno de Fleum pratense enlazado a biotin para formar un segundo complejo de fase sólida. (c) adicionar un compuesto de acridinio quimioluminiscente enlazado a estreptavidin para formar un tercer complejo de fase sólida. (d) separar magnéticamente la fase sólida de la fase líquida. (e) lavar (f) iniciar una reacción quimioluminiscente, si la hay, en la fase sólida separada y (h) medir la quimioluminiscencia emitida, la cual es indicativa de la presencia del anticuerpo en la muestra. Resultados Los resultados de IgE se muestran en las en las Figs. 15-18 y la Tabla 2 y 3, en donde la Fig. 15 muestra el nivel de IgE para los Grupos 1-4 para la población ITT, la Fig. 16 muestra el nivel de IgE para los grupos 1, 5 y 6 para la población ITT, la Fig. 17 muestra el nivel de IgE para los Grupos 1-4 para la población PP y la Fig. 18 muestra el nivel IgE para los grupos 1, 5 y 6 para la población PP. ITT significa intención para tratar e incluye todas las personas -que inician en el estudio, y PP significa por Protocolo e incluye todas las personas tratadas de acuerdo con el protocolo planeado. La Tabla 2 contiene todos los valores de las Figs. 15 y 16 y la Tabla 3 contiene todos los valores de las Figs. 15, 17 y 18. Como se presentará de las Figs. 15-18 y las Tablas 2 y 3, para los Grupos 1 y 5 ningún incremento en el nivel de IgE del Pre-tratamiento al Tratamiento es registrado, y un incremento en pequeño eñ un nivel de IgE del Tratamiento al Post-tratamiento es registrado. Para el Grupo 2 un incremento permanente moderado en el nivel de IgE es registrado. Para los Grupos 3, 4 y 6 un incremento agudo en el nivel de IgA de Pre-tratamiento a Tratamiento es registrado seguido por una fase nivelada del Tratamiento al Post-tratamiento. Para el Grupo 4, el nivel de IgE disminuye ligeramente durante la fase nivelada. El perfil temporal del Grupo 3, 4 y 6, en particular el Grupo 4, se considera que representa un perfil deseado, que significa una Vacunación para Alergia Específica efectiva. Los resultados de IgX se muestran en las Figs. 19-22 y Tablas 4 y 5, en donde la Fig. 19 muestra el nivel de IgX para los Grupos 1-4 para la población ITT, la Fig. 20 muestra el nivel de IgX para los grupos 1, 5 y 6 para la población ITT, la Fig. 21 muestra el nivel de IgX para los Grupos 1-4 para la población PP y la Fig. 22 muestra el nivel de IgX para los grupos 1,' 5 y 6 para la población PP. ITT significa intención para tratar e incluye todas las personas que inician el estudio, y PP significa por Protocolo e incluye todas las personas , tratadas de acuerdo con el protocolo planeado. La Tabla 4 contiene todos los valores de las Figs. 19 y 20 y la Tabla 5 contiene todos los valores de las Figs. 21 y 22. Como se presentará de las Figs. 19-22 y las Tablas 4 y 5, para los Grupos 1 y 5 ninguna disminución en el nivel de IgX del Pre-tratamiento al Tratamiento es registrado, y una disminución pequeña en el nivel de IgX para el Tratamiento al Post-trátamiento es registrado. Para los Grupos 2 y 3 una disminución permanente moderada en el nivel de IgX es registrado. Para los Grupos 4 y 6 una fuerte disminución en el nivel de IgX del Pre-tratamiento a Tratamiento es registrado seguido por una disminución menos fuerte del Tratamiento al Post-tratamiento. Para el Grupo 4, la mayor parte de la disminución del nivel de IgX ocurre en el período de Pre-tratamiento a Tratamiento. El perfil temporal de los Grupos 4 y 6, en particular el Grupo 4, se considera que representa un perfil deseado, lo cual significa una Vacunación para Alergia Específica efectiva. o Tabla 2. gE específico de hierba (kU/L) para Población ITT Grupo -\ Grupo 2 Grupo 3 Grupo 4 Grupo , 5 Grupo Q Placebo 2500SQ 25000SQ 75000SQ Placebo 75000SQ +Astivo +Activo +Astivo +Activo +Placebo +Placebo Total Visita (N=136) (N=136) ,(N=139) (N=141) (N=150) (N=153) (N=855) Pretratamiento N 136 135 139 139 148 153 850 Medio (SD) 25.7(34.4) 3.8(47.2) 27.2(34.6) 27.1(45.8) 18.8(28.0) 29.1(44.4) 26.9(39.8) ^dio -] 2,4 14.0 12.7 12.4 10.1 10.6 12.0 P5%-P95% 1.3-109.0 1.6-120.9 0.8-115.4 1.1-97.2 0.5-71.4 0.7-133.8 0.8-107.4 Min-Max 0.3-201.5 0.2-271.8 0.4-207,1 0.4-360.6 0.1-185.6 0,2-229.6 0,1-360.6 Tratamiento N 130 131 130 131 142 145 809 Medio (SD) 22.7(29.5) 57.1(87.5) 88.3(104.6) 103.0(126.1 ) 17.5(28.3) 105.7(133.2) 65.8(101.4) Medio 11.2 24.9 46.4 63.4 9.3 57.0 26.6 P5%-P95% 0.9-92.8 1.6-173.1 1.9-326.8 3.0-355,5 0.4-63.5 2.7-340.2 1 ,2-258.8 Min-Max 0.2-148.8 0.2-702.1 0.5-563.3 1.1-705.6 0.0-233.4 0.5-901.7 0.0-901 J I > .o l Postratamiento N 130 131 130 133 142 146 812 Medio (SD) 40J(53.1) 74.8(96.1 ) 94.1(107.5) 99,5(129.4) 30.2(46.7) 111.1(136.7) 75.2(105.6) Medio 18.9 38.6 53.7 58.3 15.4 59.7 36.1 P5%-P95% 1.5-154.1 2.8-250.2 2.8-360.0 3.3-350.6 1.0-101.6 4.5-356:0 1.9-290.1 Min-Max- 0.3-286.8 0.3-675.5 1.6-554.9 1.5-7157 0.0-278.9 1.1-928.8 0.0-928.8 Tabla 3. IgE específico de hierba (kU/L) para población PP Grupo *( Grupo 2 Grupo 3 Grupo 4 Grupo 5 Grupo Q Placebo 2500SQ 25000SQ 75000SQ Placebo 75000SQ +Activo +Activo +Activo +Astivo +Piacebo +Placebo Total Visita (N=122) (N=122) (N=125) (N=124) (N=128) (N=127) (N=748) Pretratamiento N 122 121 125 122 127 127 744 Medio (SD) 25.3(35.0) 34.7(48.6) 25.7(34.5) 27.7(48.1) 19,4(287) 26.4(40.3) 26.5(39.9) Medio 12 1 14.1 11 ,0 11.9 11.1 10.5 11 ,6 t O P5%-P95% 1.3-109.0 1.6-120.9 0.8-103.1 1 ,5-97.2 0.4-71.4 0,6-107.1 0.8-109.0 Min-Max 0.3-201.5 0.2-271.8 0.4-207.1 0.4-360,6 0,1-185,6 0.2-219.0 0.1-360.6 Tratamiento N 122 121 123 123 127 127 743 Medio (SD) 22.3(29.2) 58.9(90.2) 857(102.5) 102.4(127.9) 17.6(28.9) 104.1(133.2) 65.2(101.4) Medio 11.2 25.0 44.9 63,3 9.3 57.0 267 P5%-P95% 0.9-92.8 17-173.1 1.9-280.4 3.4-355.5 0.4-63.5 27-327.4 1.3-251.3 Min-Max 0.2-148.8 0.2-702.1 0.5-563.3 1 ,1-705.6 0.0-233.4 0.5-9017 0.0-9017 Postratamiento N 122 121 121 123 127 126 740 Medio (SD) 40.9(54.3) 77.8(98.8) 92.2(1057) 98.4(131.2) 29.2(44.4) 1077(136.5) 74.3(105.3) Medio 18.5 38.6 53.2 57.8 15.7 53.2 34.9 P5%-P95% 1 ,5-154,1 3.2-250.2 2.8-3247 3.3-350.6 07-94.0 3.1-356.0 2.0-288.4 Min-Max 0.3-286.8 0.5-675.5 1.6-554.9 1 ,5-7157 0.0-278.9 1.1-928.8 0.0-928.8 t t Ul O Tabla . IgX específico de hierba para Población ITT Grupo 1 Grupo 2 Grupo 3 Grupo 4 Grupo 5 Grupo Q Placebo 2,500 SQ 25,000 SQ 75,000 SQ Placebo 75,000 SQ +Activo +Activo +Activo +Astivo + P|aCßb? + PlßCß O Total Visita (N=136) (N=136) . (N=139) (N=141 ) (N=150) (N=153) (N=855) Pretratamien- to N 136 135 139 139 148 153 850 .

Medio (SD) 1.097(0.15) 1.101(0.15) 1.111(0.16) 1 ,075(0.13) 1.101(0.21) 1.091(0.18) 1.096(0.16) Medio 1.08 1.08 1.09 1.07 1.07 1.08 1.08 P5%-P95% 0.88-1.37 0.90-1.37 0.90-1.42 0.87-1.30 0.87-1.44 0.85-1 ,39 0.88-1 ,38 Min-Max 0.80-175 0.81-1 ,64 0.66-178 079-1.44 0.67-2.68 0.57-1.69 0.57-2.68 Tratamiento N 130 131 130 131 142 145 809 Medio (SD) 1.107 1.082(0.14) 1.060(0.17) 0.988(0.13) 1.113(0.25) 0.990(0.16) 1.056(0.18) Medio 1.09 1.06 1.02 1.00 1.07 0.97 1.03 P5% - P95% 0.88-1.41 0.90-1.35 0.88-1.46 0.80-1.20 0.86-1.46 077-1.25 0.83-1.35 t Ul t Min-Max 077-176 0.83-1.53 0.64-176 0.55-1.39 079-3.19 0.47-1.48 0.47-3.19 Postratamiento N 130 131 130 133 142 146 812 Medio (SD) 1.087(0.16) 1 ,058(0,14) 1.015(0.16) 0.964(0.16) 1.110(0.27) 0.934(0.17) 1.027(0.19) Medio 1.07 1.03 ' 0.99 0.95 1.07 0.95 1.02 P5%-P95% 0.87-1.35 0.88-1.33 0.81-1.38 071-1.20 0.87-1.44 0.67-1.19 0.78-1.32 Min-Max 076-1.65 070-1.62 0.56-1.64 0.53-1.65 0.80-3.48 0.29-1.24 0.29-3.48 Ul Ul Tabla 5. IgX específico de hierba para Población PP Grupo 1 Grupo 2 Grupo i 3 Grupo 4 Grupo 5 Grupo Q Placebo 2,500 SQ 25,000 SQ 75,000 SQ Placebo 75,000 SQ +Astivo +Activo +Activo +Activo + Placebo + Placebo Total Visita (N=122) (N=122) - (N=125) (N=124) (N=128) (N=127) (N=748) Pretratamiento N 122 121 125 122 127 127 744 to t Ul Medio (SD) 1.103(0.15) 1.103(0.15) 1.114(0.17) 1.070(0.12) 1.103(0.22) 1.088(0.18) 1.097(0.17) Medio 1.08 1 ,10 1.09 1.07 1 ,07 1.07 1.08 P5% - P95% 0.89-1.37 0:90-1.37 0.91-1.42 0.88-1.29 0,87-1.44 0.84-1.40 0.88-1.39 Min-Max 0.80-175 0.81-1.64 ' 0.66-178 079-1.44 0,67-2.68 0.57-1.69 0.57-2.68 Tratamiento N 122 121 123 123 127 127 743 Medio (SD) 1.110(0.16) 1.086(0,13) 1.060(0.17) 0.985(0,13) 1.117(0.25) 0.989(0.16) 1.058(0.18) M^ÍO .09 1.06 1 ,02 1.00 1.07 0.97 1.04 P5%-P95% 0.88-1.41 0.90-1.35 0.88-1 ,46 0.80-1.20 0.86-1.40 077-1.25 0.83-1.35 Min-Max 077-176 0.83-1.53 0.64-176 0.55-1.39 0.81-3.19 0.47-1.48 0.47-3.19 Postratamiento N 122 121 121 123 127 126 740 Medio (SD) 1.090(0.16) 1,057(0.13) 1.014(0.17) 0.960(0.16) 1.113(0.28) 0.929(0.17) 1.027(0.20) Medio 1.07 1.04 0.99 0.94 1.07 0.95 1.02 P5%-P95% 0.88-1.35 0.88-1 ,32 0.81-1.38 071-1.20 0.87-1.44 0,65-1.19 079-1.32 Min-Max 076-1.65 070-1.62 0.56-1.64 0.53-1 ,65 0,80-3.48 0.29-1.24 0.29-3.48

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un método para evaluar el potencial terapéutico de un programa de vacunación que comprende una vacuna para la administración por la mucosa, que comprende uno o más antígenos y un protocolo de vacunación, el método caracterizado porque comprende a) someter por lo menos a un individuo de prueba al programa de vacunación, b) medir el nivel de un anticuerpo biomarcador seleccionado del grupo que consiste de IgA, IgG, IgE e IgX específico al antígeno en una muestra biológica del individuo de prueba, y c) utilizar las mediciones obtenidas para evaluar el potencial terapéutico del programa de vacunación.
2. Un método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la evaluación de las mediciones obtenidas es llevada a cabo mediante la comparación con un perfil de nivel de anticuerpo biomarcador temporal de referencia.
3. Un método de conformidad con la reivindicación 1 o 2, caracterizado porque el anticuerpo biomarcador es IgE.
4. Un método de conformidad con la reivindicación 2 o 3, caracterizado porque el nivel de IgE se incrementa más de 50%, de preferencia más de 100%, más de preferencia más de 200%, más de preferencia más de 300% y más de preferencia más de 400% comparado con el nivel al inicio del programa de vacunación.
5. Un método de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el incremento del nivel de IgE ocurre dentro de doce semanas, de preferencia dentro de diez semanas, más de preferencia dentro de ocho semanas, de preferencia dentro de cuatro semanas desde el inicio del programa de vacunación.
6. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 2-5, caracterizado porque el nivel de IgE tiene un valor máximo seguido por una disminución.
7. Un método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque el valor máximo del • nivel de IgE ocurre dentro de doce semanas, de preferencia dentro de diez semanas, más de preferencia dentro de ocho semanas, y más de preferencia dentro de cuatro semanas desde el inicio del programa de vacunación.
8. Un método de conformidad con la reivindicación 6 o 7, caracterizado porque el nivel de IgE disminuye a un nivel por debajo del 90%%, de preferencia por debajo de 80%, más de preferencia por debajo de 60%, más de preferencia por debajo de 50% y mucho más de preferencia por debajo del valor máximo .
9. Un método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque la disminución del nivel de IgE ocurre dentro de 26 semanas, de preferencia dentro de 20 semanas, más de preferencia dentro de 16 semanas, más de preferencia dentro de 12 semanas, y más de preferencia dentro de 8 semanas y mucho más de preferencia dentro de 4 semanas desde el tiempo del valor máximo.
10. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el anticuerpo biomarcador es IgA.
11. Un método de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque el nivel de IgA se incrementa más de 50%, de preferencia más de 100%, más de preferencia más de 200%, más de preferencia más de 300% y mucho más de preferencia más de 400% comparado con el nivel en el inicio del programa de vacunación.
12. Un método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el incremento del nivel de IgA ocurre dentro de 20 semanas, de preferencia dentro de 16 semanas, más de preferencia dentro de 12 semanas, y mucho más de preferencia dentro de 8 semanas desde el inicio de la administración .
13. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el anticuerpo biomarcador es IgG.
14. Un método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el nivel de IgG se incrementa más de 50%, de preferencia dentro de 100%, más de preferencia más de > 200%, más de preferencia más de 300% y mucho más de preferencia más de 400% comparado con el nivel en el inicio del programa de vacunación.
15. Un método de conformidad con la reivindicación 14, caracterizado porque el incremento del nivel de IgG ocurre dentro de 20 semanas, de preferencia dentro de 16 semanas, más de preferencia dentro de 12 semanas, y mucho más de preferencia dentro de 8 semanas desde el inicio de la administración .
16. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el anticuerpo biomarcador es IgX.
17. Un método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado por IgX se expresa como la relación del nivel de IgE como es medido en un inmunoensayo con competición de otros componentes de la muestra biológica al nivel de IgE como es medido en un inmunoensayo sin competición.
18. Un método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque el nivel de IgX disminuye más de 4%, de preferencia más de 6%, más de preferencia más de 8%, más de preferencia más de 10%, más de preferencia más de 12% y mucho más de preferencia más de 14% comparado con el nivel en el inicio del programa de vacunación.
19. Un método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque la disminución del nivel de IgX ocurre dentro de 24 semanas, de preferencia dentro de 16 semanas, más de preferencia dentro de 12 semanas, y mucho más de preferencia dentro de 8 semanas desde el inicio de la administración.
20. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el protocolo de vacunación comprende la administración de la vacuna al individuo de prueba cada día, cada segundo día, cada tercer día o cada cuarto día.
21. Un método de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado porque el protocolo de vacunación comprende la administración de la vacuna durante un período de más de 4 semanas, de preferencia más de 8 semanas, más de preferencia más de 12 semanas, más de preferencia más de 16 semanas, más de preferencia más de 20 semanas, más de preferencia más de 24 semanas, más de preferencia más de 30 semanas y mucho más de preferencia más de 36 semanas.
22. Un método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque el período de administración es un período continuo.
23. Un método de conformidad con la reivindicación 21, caracterizado porque el período de administración es un período discontinuo interrumpido por uno o más períodos de no administración.
24. Un método de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el período de no administración es más corto que el período de administración.
25. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 20-24, caracterizado porque la vacuna se administra al individuo de prueba una vez al día.
26. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 20-25, caracterizado porque la vacuna se administra al individuo de prueba dos veces al día.
27. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 20-26, caracterizado porque la vacuna es una vacuna unidosis.
28. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-27, caracterizado porque la vacuna se selecciona del grupo que consiste de vacunas formuladas para ser adaptadas para la administración por la vía de la oromucosa, la mucosa del sistema respiratorio, la mucosa del sistema digestivo, la mucosa rectal y la mucosa genital.
29. Un método de conformidad con la reivindicación 28, caracterizado porque la vacuna se formula para ser adaptada para la administración por la vía de la oromucosa.
30. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque la vacuna es seleccionada del grupo que consiste de vacunas formuladas como una solución, una suspensión, formas de dosificación de dispersión rápida, gotas y pastillas.
31. Un método de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque la vacuna es formulada como una forma de dosificación de dispersión rápida.
32. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque el antígeno es seleccionado del grupo que consiste de un antígeno respiratorio, un antígeno digestivo, un antígeno microbiano y un antígeno de insecto.
33. Un método de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado porque el antígeno es un antígeno respiratorio .
34. Un método de conformidad con la reivindicación 32 o 33, caracterizado porque el antígeno es un alérgeno.
35. Un método de conformidad con la reivindicación 34, caracterizado porque el alérgeno es un alérgeno inhalante .
36. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque la medición del nivel de anticuerpo biomarcador IgA, IgG y/o IgE específico para el antígeno en una muestra biológica se lleva a cabo mediante una ELISA que comprende las etapas de 1) recubrir el alérgeno sobre una placa de ELISA y lavar, 2) adicionar la muestra biológica, incubar y lavar, 3) adicionar un conjugado y una enzima y anticuerpo antibiomarcador, incubar y lavar, 4) adicionar un sustrato de enzima, incubar y detener la reacción, y 5) medir el nivel de sustrato reaccionado .
37. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-35, caracterizado porque la medición del nivel de IgA, IgE y/o IgG específico al antígeno en una muestra biológica se lleva a cabo mediante un inmunoensayo de dos sitios que comprende las etapas de (a) mezclar (i) la muestra biológica con (ii) un anticuerpo específico de clase dirigido con el anticuerpo que es detectado enlazado a una fase sólida para formar una mezcla de una fase líquida y un complejo de fase sólida de dos componentes, (b) separar el complejo de fase sólida de dos componentes de la fase líquida y lavar el complejo de fase sólida de dos componentes separados para remover los compuestos no enlazados al complejo, (c) adicionar (iii) un ligando en la forma de un antígeno, un anticuerpo o un hapteno, y (iv) un compuesto de marca, para formar un complejo de fase sólida de cuatro componentes. (d) separar el complejo de fase sólida de cuatro componentes de la fase líquida, (e) lavar en la fase sólida de cuatro componentes separada para remover los compuestos no enlazados al complejo, (f) realizar una detección/medición del complejo de cuatro componentes marcado, lavado.
38. Un método de conformidad con la reivindicación 37, caracterizado porque el inmunoensayo de dos sitios comprende un inmunoensayo de dos sitios para un anticuerpo utilizando una marca quimioluminiscente y un ligando enlazado a biotin, el método que comprende las etapas de (a) mezclar (i) la muestra biológica con (ii) un anticuerpo específico de clase dirigido contra el anticuerpo que es detectado enlazado a partículas paramagnéticas para formar una mezcla de una fase líquida y un complejo de fase sólida de dos componentes, (b) separar magnéticamente el complejo de fase sólida de dos componentes de la fase líquida y lavar el complejo de fase sólida de dos componentes separados para remover los compuestos no enlazados al complejo, (c) adicionar (iii) un ligando en la forma de un antígeno, un anticuerpo o un hapteno enlazado a biotin o un derivado funcional del mismo y (iv) un compuesto de acridinio quimioluminiscente enlazado a avidin, estreptavidin o un derivado funcional del mismo, para formar un complejo de fase sólida de cuatro componentes. (d) separar magnéticamente el complejo de fase sólida de cuatro componentes de la fase líquida, (e) lavar la fase sólida de cuatro componentes separada para remover los compuestos no enlazados al complejo, (f) iniciar una reacción quimioluminiscente, si la hay, en la fase sólida lavada, y detectar/medir la quimioluminiscencia resultante, si la hay.
39. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque IgX se determina como la relación del nivel de IgE como es medido en un inmunoensayo con competición de otros componentes de la muestra biológica al nivel de IgE como es medido en un inmunoensayo sin competición.
40. Un método de conformidad con la reivindicación 39, caracterizado porque IgE es medido en un inmunoensayo con competición se mide en un inmunoensayo que comprende las etapas de: (a) mezclar la muestra biológica con un antígeno de ligando, anticuerpo o hapteno enlazado a biotina o un derivado funcional del mismo, un anticuerpo específico de clase dirigido contra el anticuerpo que es detectado enlazado a partículas paramagnéticas y un compuesto de acridinio quimioluminiscente enlazado a avidin, estreptavidin o un derivado funcional del mismo para formar un complejo de fase sólida de cuatro componentes, (b) separar magnéticamente la fase sólida de cuatro componentes de la fase líquida, (c) lavar la fase sólida de cuatro componentes separadas para remover los compuestos no enlazados al complejo, (d) iniciar una reacción quimioluminiscente, si la hay, en la fase sólida separada y detectar/medir la quimioluminiscencia resultante, si la hay.
41. Un método de conformidad con la reivindicación 39 o 40, caracterizado porque IgE como es medido en un inmunoensayo sin competición se mide en un inmunoensayo que comprende las etapas de: (a) mezclar (i) la muestra biológica con (ii) un anticuerpo específico de clase dirigido contra el anticuerpo que es detectado enlazado a partículas paramagnéticas para formar una mezcla de una fase líquida y un complejo de fase sólida de dos componentes, (b) separar magnéticamente el complejo de fase sólida de dos componentes de la fase líquida y lavar el complejo de fase sólida de dos componentes para remover los compuestos no enlazados al complejo, (c) adicionar (iii) un ligando en la forma de un antígeno, un anticuerpo o un hapteno enlazado a biotin o un derivado funcional del mismo y (iv) un compuesto de acridinio quimioluminiscente enlazado a avidin, estreptavidin o un derivado funcional del mismo, para formar un complejo de fase sólida de cuatro componentes, (d) separar magnéticamente el complejo de fase sólida de cuatro componentes de la fase líquida, (e) lavar la fase sólida de cuatro componentes separada para remover los compuestos no enlazados al complejo, (f) iniciar una reacción quimioluminiscente, si la hay, en la fase sólida lavada, y detectar/medir la quimioluminiscencia resultante, si la hay.
42. Un método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque la muestra biológica se selecciona del grupo que consiste de sangre, plasma, suero, orina, saliva y secreción nasal.
43. Una vacuna, caracterizada porque se puede obtener mediante el método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1-42.
44. Un método para evaluar el efecto de la Vacunación para Alergia Específica (SAV) por la mucosa en un individuo, el método caracterizado porque comprende a) someter al individuo a la SAV por la mucosa, b) medir el nivel de un anticuerpo biomarcador seleccionado del grupo que consiste de IgA, IgG, IgE e IgX específico al antígeno en una muestra biológica del individuo, y c) utilizar las mediciones obtenidas para evaluar el efecto de la SAV.