MXPA04007005A - Metodo para tratamiento de enfermedad gastrointestinal y composicion polimera para su uso en este. - Google Patents

Abstract

La invencion se relaciona con un metodo para el tratamiento de enfermedades gastrointestinales mediante la administracion de un farmaco anti-microbiano polimero comprendiendo un derivado de poli (2-propenal, acido 2-propenoico) formado mediante reaccion entre un poli (2-propenal, acido 2-propenoico) y un alcohol o fenol para formar grupos carbonilos protegidos. La invencion se relaciona tambien con una composicion para el uso en el tratamiento de enfermedades gastrointestinales.

Description

METODO PARA TRATAMIENTO DE ENFERMEDAD GASTROINTESTINAL Y COMPOSICION POLÍMERA PARA SU USO EN ÉSTE.

CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se relaciona con el tratamiento o la prevención de enfermedades gastrointestinales y el fomento del crecimiento animal y a composiciones antimicrobianas para el uso en estos tratamientos .

Antecedentes de la invención Fármacos antimicrobianos son compuestos que matan a microorganismos como bacterias. Antibióticos son un subconjunto de fármacos antimicrobianos que se derivan (usualmente) de otros microorganismos y que operan al interferir con mecanismos específicos dentro del microorganismo meta. Antibióticos se usaron por primera vez en los años 1940 y 1950 y su uso ha ido en aumento desde entonces sin cesar. El desarrollo de la resistencia a los antibióticos se ha vuelto un evento serio y potencialmente amenazador para la vida en todo el mundo. Algunas cepas de estafilococo han mostrado resistencia a casi todos los antibióticos y habían sucedido infecciones fatales en hospitales. Otros organismos resistentes a fármacos comprenden neumococos que causan neumonía y cryptosporidium y E. coli que causan diarrea. El uso de antibióticos en alimento para animales se considera ampliamente como responsable del desarrollo acelerado de resistencia y como resultado, muchos países controlan su uso. Esto ha causado problemas en la ganadería produciendo dificultades para controlar enfermedades y para obtener tasas de crecimiento óptimas. Esto es un problema en particular en la cría de cerdos y aves. Por ejemplo, enfermedades gastrointestinales como colibacilosis en cerdos y coccidiosis en aves pueden tener efectos devastadoras . Melrose et al en (publicación de patente internacional No. 96/38186) eran los primeros para describir la preparación de polímeros de acroleína para uso en el tratamiento de enfermedades gastrointestinales. Estos polímeros tienen una unidad repetitiva de fórmula I o esta unidad en su fórmula hidratada, semi-acetal o acetal, representada por las fórmulas: CH, (0 CH2 CK donde R es hidrógeno y n un integro de uno o más, han sido manifestadas previamente. Previamente a esto, las propiedades biocidas de polímeros de acroleína en aplicaciones antisépticas fueron descritas por Melrose et al en la solicitud internacional No. O88/04671. La solicitud de patentes alemana P4404404 y equivalentes como EP667358 y AU 11686/95 (actualmente caducada) manifiestan un método donde la acroleína es polimerizada en un medio acuoso de hidróxido sódico. La publicación manifiesta que la poli-acroleína resultante es soluble en alcohol polihidrico a 40 a 50 °C para formar una solución de la poli-acroleína en un alcohol polihidrico. Como se explica más adelante, el asignatario de esta solicitud alemana encontró posteriormente que semejantes polímeros son problemáticos y que tienen una solubilidad baja en medio acuoso. La publicación europea No. 792895 erle et al (correspondiente a US 6060571) se relaciona con polímeros que liberan acroleína producidos mediante copolimerización de monómero de acroleína y un alcohol polihidrico. Werle et al observa que las poli-acroleínas descritas en la solicitud alemana No. P4404404 tienen problemas porque el rendimiento es menor del deseable y los polímeros son virtualmente insoluble en agua. La solicitud europea 792895 enseña que estos problemas pueden superarse formando un polímero que libera acroleína mediante copolimerización de un monómero de acroleína y un monómero de alcohol polihidrico. La estructura propuesta del copolímero es como sigue : Mientras acroleína libre tiene actividad antimicrobiana, también es irritante para ojos, pulmones, tejido y piel. Existe un requerimiento para una gama de aplicaciones, particularmente en tratamientos gastrointestinales de agentes antimicrobianos que so estables, altamente solubles en agua y seguros de usar. Existe además un requerimiento de un agente antimicrobiano efectivo para el tratamiento o la prevención de enfermedades gastrointestinales que puede reducir el impulso de desarrollar resistencia en el campo de los antibióticos . La descripción de los antecedentes de la invención se ha incluido en la presente con el fin de explicar el contexto de la invención. Esto no debe entenderse como admisión que el material referido se haya publicado, haya estado conocido o parte del conocimiento público general en la fecha de prioridad de alguna de las reivindicaciones . Sumario de la invención Hemos encontrado que la actividad y estabilidad de polímeros de poli (2-propenal , ácido 2-propenóico) en el tratamiento o la prevención de enfermedades gastrointestinales se mejora sustancialmente si se les somete a reacción con un alcohol o poliol para formar un grupo carbonilo protegido, tales como derivados de acetal y/o semi-acetal . Sorprendentemente hemos encontrado que la actividad del derivado en el tratamiento o la prevención de enfermedades gastrointestinales aumenta sustancialmente no obstante el contenido de acroleína fría puede estar extremadamente bajo o insignificante. La solubilidad del polímero en agua también es muy alta. La invención ofrece un método para el tratamiento o la prevención de enfermedades gastrointestinales en animales (incluyendo humanos) comprendiendo administrar al animal una cantidad efectiva de un derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) formado mediante reacción entre poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) y un compuesto orgánico conteniendo uno o varios grupos hidroxilo como alcohol, preferentemente seleccionados de alcanoles, fenoles, polioles y sus mezclas, para formar grupos carbonilo protegidos. En un aspecto adicional, la invención ofrece un fármaco antimicrobiano para el tratamiento de enfermedades gastrointestinales comprendiendo un derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) formado mediante reacción entre poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) y un compuesto orgánico conteniendo uno o varios grupos hidroxilo tales como un alcohol, preferentemente seleccionado de alcanoles, fenoles, polioles y sus mezclas, para formar grupos carbonilo protegidos. El término poliol, tal como se emplea en esta, significa una molécula conteniendo al menos dos grupos hidroxilo . Los derivados formados se seleccionan típicamente de derivados de hemiacetal y acetal. Sin querer restringirnos a una teoría, creemos que la reacción de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) con el alcohol forma grupos hemiacetal y/o acetal de al menos una parte de los grupos de aldehido pendientes, estabilizando de esta forma los grupos carbonilo de los polímeros contra degradación alcalina por la reacción de Cannizzaro. Se ha verificado que la formación de grupos acetal reduce de manera significativa o elimina la liberación de acroleína libre incrementando simultáneamente de forma sorpresiva la actividad del derivado resultante. En aún otra modalidad, la invención ofrece el uso del fármaco antimicrobiano precedentemente descrito para la preparación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de enfermedades gastrointestinales.

A lo largo de la presente descripción y las reivindicaciones de esta especificación, la palabra "comprenden" y las variaciones de la palabra como "comprendiendo" y "comprende" no se usan con la intención de excluir otros aditamentos, componentes o ingredientes. Descripción detallada de la invención El fármaco antimicrobiano inventivo puede prepararse calentando poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) en presencia de alcohol, preferentemente un poliol como polietilenglicol . Agua está presente invariablemente en los alcoholes y se entenderá que la presencia de al menos algo de agua ayuda en la reacción de sustitución nucleofilica que produce la formación hemxacetal o acetal» La solución es calienta generalmente a una temperatura en el intervalo de 40°C a 150°C, más preferiblemente 40 a 115 °C y más preferentemente 70 a 115°C. El fármaco antimicrobiano inventivo se prepara a partir de polímeros de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) . Semejantes polímeros y su preparación son descritos en la publicación internacional de patentes No. WO 96/38186 ( PCT/AU96/00328 ) cuyo contenido se incorpora en la presente mediante referencia. Los polímeros de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) se preparan preferentemente mediante polimerización de acroleína, preferentemente en solución acuosa mediante polimerización aniónica, seguida por autoxidación. Los polímeros contienen la unidad repetitiva de la fórmula I y al menos una (y típicamente una mezcla) de las formas hemiacetales y acétales hidratadas. Es de conocimiento público que las formas hemiacetales y acétales hidratadas, formadas mediante polimerización de acroleína, se producen mediante varios mecanismos de polimerización de acroleína de carbón-carbón y carbón-oxígeno. Por ejemplo, la forma hidratada es típicamente la forma hidratada de diol, la forma hemiacetal o acetal puede formarse mediante condensación de la forma de diol con la forma de aldehido o diol, la forma de tetrahidro pirano o tetrahidro pirano fusionada puede formarse mediante condensación de la forma de diol y la forma de autocondensacion aldólica de Michaelis-Menten . Ejemplos típicos de estas formas se muestran en las fórmulas (a) a (f) a continuación: \ (I) CH2 (a) RO RO RO o CH=CH2 t-H CH2 (f) CH2 CH^ donde R es hidrógeno y n es un integro de uno o más. La parte correspondiendo a la unidad repetitiva de la fórmula I es típicamente menos del 20% y frecuentemente entre 5 y 15%. No obstante la proporción relativamente baja de estas unidades, hemos encontrado que tienen un efecto significativo sobre la estabilidad del polímero. El poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) contiene generalmente no más que el 10% en base molar de unidades de monómeros de monómeros diferentes de acroleína y es, más preferentemente, un homopolímero de acroleína (antes de la autoxidación) . Donde se usan pueden seleccionarse otros monómeros del grupo consistiendo de ácido acrílico y vinil pirrolidona. Los grupos de ácido 2-propenóico están presentes esencialmente en una cantidad de 0.1 a 5 moles de grupos carboxílicos por kilogramo. Los polímeros de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) tienen típicamente un peso molecular promedio de número superior a 1000 y más preferentemente a 2000. Típicamente, es peso molecular es inferior a 10,000. El fármaco antimicrobiano inventivo es un derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) producido mediante reacción de un alcohol o fenol para formar grupos protegidos de carbonilo. Los grupos de carbonilo protegidos se forman con los grupos de 2-propenal, que reaccionan con el alcohol para formar grupos hemiacetal o acetal. El alcohol es preferentemente un poliol, lo que quiere decir que preferentemente contiene al menos dos grupos hidroxilo. Se pueden emplear alcandés como Ci a Cío ¦ Si el alcohol es un poliol, la reacción puede producir acétales o hemiacetales formados mediante reacción de uno o más de un grupo de alcohol. Adicionalmente, cuando dos grupos de alcohol reaccionan es posible que reaccionen con el mismo grupo de carbonilo o diferentes grupos de carbonilo dentro del polímero. Con referencia a la fórmula I precedente y formas hemiacetales y acétales, la invención produce derivados donde menos unidades de fórmula I están presentes y forma un grupo donde uno o más grupos son derivados de un alcohol, o, si el alcohol es un poliol, más de dos grupos R pueden formar junto un grupo de puente como, por ejemplo, un grupo acetal cíclico. La tendencia de los polioles de generar grupos cíclicos internos depende de la distribución y configuración del poliol. Los alcoholes preferidos son glicoles de polialquileno y alcoholes más preferidos son polietilenglicoles.

El peso molecular de los glicoles de polialquileno es preferentemente de 200 a 2000, y más preferentemente de 200 a 1000. Preferentemente, el alcohol como polietilenglicol está presente durante la preparación de polímeros antimicrobianos en una cantidad de 50 a 99% por peso. Composiciones relativamente diluidas del polímero de acroleína son particularmente preferidas, si el alcohol es un poliol, ya que la ocurrencia de reticulación intermolecular se reduce por la dilución. Más preferentemente, polietilenglicol está presente durante la preparación de los polímeros en una cantidad entre 64 y 95% por peso. Se adiciona preferentemente una base o álcali a los polímeros seguido de un desplazamiento hacia un pH ácido antes y/o durante el calentamiento, ya que se presenta una neutralización de los grupos ácidos del polímero, lo que mejora la actividad antimicrobiana de los polímeros. Preferentemente, la adición de la base o de álcali ajuste el pH de los polímeros de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) inicialmente a entre 7 y 9. Aún más preferentemente, el pH inicial al adicionar la base es aproximadamente de 8. La base es preferentemente un hidróxido de metal alcalino, carbonato, bicarbonato o una mezcla de estos.

En aún otra modalidad de la invención, se inhibe la liberación de monómeros de acroleina libres de liberación permanente, por lo que los polímeros tienen menos probabilidad de representar una fuente de irritación de tejido y piel. Hemos encontrado que el fármaco antimicrobiano inventivo tiene una actividad significativamente mejorada para controlar enfermedades gastrointestinales en comparación con el poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) con el cual se produce. El derivado superactivado de la presente invención puede usarse para tratar una gran gama de animales (incluyendo humanos) y una gama amplia de infecciones microbianas. El fármaco antimicrobiano inventivo puede usarse en el tratamiento de enfermedades gastrointestinales en humanos, sin embargo, es preferido particularmente que sea usado en el tratamiento de otros animales, en particular animales seleccionados del grupo consistiendo de perros, cerdos, ovejas, caballos, cabras, ganado, gatos, gallinas, patos, pavos y codornices. El fármaco antimicrobiano inventivo puede producirse en preparaciones para administración oral o rectal. Administración rectal puede ser particularmente conveniente en animales rumiantes. Se pueden producir también preparaciones orales para animales rumiantes usando recubrimientos entéricos para ofrecer una actividad óptima en las partes posteriores del tracto gastrointestinal. El fármaco antimicrobiano inventivo es particularmente conveniente para el tratamiento y la prevención de úlceras gastrointestinales, diarrea y cánceres gastrointestinales. El fármaco antimicrobiano inventivo puede usarse también para mejorar la tasa de aumento de peso en animales de granja al mejorar la conversión de alimento en peso en animales. Hemos encontrado que el fármaco antimicrob.iano inventivo puede usarse como promotor, de crecimiento y que el polímero puede usarse en lugar de antibióticos actualmente en uso. Resistencia a medicamentos es un problema de importancia clínica mayor en medicina humana. Este problema es agravado por el uso de antibióticos importantes en la alimentación de animales con la finalidad de ofrecer aumento de peso en animales de granja, particularmente en aves y cerdos. De hecho, en algunos países europeos se ha prohibido el uso de antibióticos convencionales en la alimentación de animales. El fármaco antimicrobiano inventivo puede usarse en el tratamiento de animales para prolongar significativamente la vida útil de antibióticos convencionales en el tratamiento humano. Hemos encontrado que el fármaco antimicrobiano inventivo es activo contra una gama amplia de microbios comprendiendo protozoarios , bacterias grampositivas y bacterias gramnegativas . Los polímeros inventivos contienen estructuras múltiples de diversas configuraciones y pueden ligarse a proteínas que se encuentran en las paredes celulares de organismos meta, lo que acelera la desactivación de la proteína y la destrucción de la célula. Entre las bacterias gramnegativas se ha verificado que el fármaco antimicrobiano inventivo es particularmente útil para ofrecer actividad contra un espectro amplio de microbios coliformes o enterobacterias . Es particularmente útil en el tratamiento de enfermedades gastrointestinales causadas por infección con E. coli como E. coli enterotoxigénica y E. coli ß-hemolítico . La colioacilosis es una enfermedad devastadora en la industria de cría de cerdo. La enfermedad se asocia generalmente con la proliferación E. coli ß-hemolítico en el intestino delgado después del destete y provoca tasas de mortandad altas y gran incidencia de enfermedad en jóvenes lechones de destete. Lechones de destete infectados no registran los aumentos de peso normales. Coccidiosis es una enfermedad animal protozoaria, en particular de aves de corral, y tiene un efecto devastador si se deja sin control. Hemos encontrado que el fármaco antimicrobiano inventivo puede usarse en el tratamiento y la prevención de coccidiosis en aves, particularmente en aves de corral. En pollos los síntomas clínicos típicos comprenden falta de desarrollo, rápida pérdida de peso, diarrea y disentería. Los efectos más serios se presentan en el intestino donde los protozoarios tienden a invadir las mucosas y causan daño epitelial, lesiones y sangrado. Se han usado vacunas intentando prevenir la coccidiosis, pero tienen efectos segundarios incluyendo la tendencia de perder peso y eficiencia alimenticia . El fármaco antimicrobiano inventivo puede usarse en combinación con otros fármacos con actividad conocida contra la coccidiosis. Estos fármacos incluyen nitro-carbanilida, quinolina, piridona, guanidina, quinoxalina, toltrazural, toluamida, sulfamida potenciada y ionóforo con carbanilida . Las clostridias son bacterias grampositivas responsables de enfermedades serias en una variedad de animales. Por ejemplo, enteritis necrótica se conoce como enfermedad que afecta a las aves de corral comerciales. Las bacterias de clostridia producen exotoxinas que son de las más tóxicas de todas las toxinas conocidas. Enteritis necrótica afecta en particular pollos en la edad de 14 a 42 días. La condición causa un apatía pronunciada, diarrea y puede causar la muerte en cuestión de horas. Enfermedades gastrointestinales superiores incluyendo gastritis crónica, úlcera gástrica y úlcera duodenal, son problemas de salud humana importantes. Se supone que Helicobacter es responsable del desarrollo de úlceras y del desarrollo de cánceres gastrointestinales, en particular de adenocarcinomas del estómago. Hemos encontrado que el fármaco antimicrobiano inventivo es particularmente activo contra Helicobacter, incluyendo fí. pylori, en enfermedades gastrointestinales en animales, particularmente humanos. La infección estomacal con Helicobacter pylori es una de las enfermedades infecciosas más frecuente en el mundo. Aproximadamente el 50% de la población están infectados con H. pylori. Se ha estimado que en países en vías de desarrollo más del 80% de la población ya es infectada con H. pylori durante la infancia. Helicobacter pylori es un bacilo gramnegativo, microaerofilico con forma de espiral que es móvil mediante flagelos en un extremo de la célula. Los tratamientos estándar de infecciones con fí. pylori son las así llamadas terapias antibióticas triples que comprenden o bien metronidazol o claritromicina . Desafortunadamente han surgido cepas de H. pylori que son resistentes a los dos antibióticos . H. pylori viven en el estómago en la interfase entre la superficie de células epiteliales gástricas y la capa de gel mucosa encima. H. Pylori puede encontrarse además encima del epitelio gástrico en el duodeno y esófago. Otras especies animales tienen presencia de sus propias especies de Helicobacter en sus tractos gastrointestinales, que tienen propiedades parecidas a H. pylori. En adición a su asociación con cánceres gastrointestinales, H. pylori se ha relacionado directamente con gastritis y formación de úlcera péptica en humanos . Las especies de Helicobacter en general, y fí. pylori en particular sobreviven las condiciones extremas en el estómago secretando ureasa que hidroliza urea para producir amoniaco y iones de bicarbonato, aumentando de esta forma el pH del ambiente inmediato del bacilo. La modificación local de las condiciones protege la bacteria de los efectos bactericidas del ácido gástrico. La posición preferida por debajo de la capa protectora mucosa del estómago es también una ventaja de supervivencia y su movilidad le permite penetrar la capa para obtener esta posición. Las células epiteliales cubriendo el estómago son naturalmente difíciles de penetrar; esto es parte de su función para proteger el resto del cuerpo del ácido gástrico y de los jugos digestivos. Esta dificultad de penetración lo vuelve también difícil para las defensas naturales del cuerpo pasar por las paredes del estómago y llegar al sitio de la infección con H. pylori. Esto tiene dos consecuencias; el cuerpo envía más nutrientes al sitio para ayudar a las células blancas, células T, y otros mecanismos de defensa, alimentando simultáneamente a los bacilos; y las células defensivas eventualmente mueren, liberando su carga de iones de superóxido y otras sustancias químicas letales, causando daño a las células epiteliales próximas. Es obvio que esta actividad produce gastritis que puede progresar fácilmente a úlceras pépticas. Si el ataque continúa, la posibilidad de la apariencia de adenocarcinomas gástricas y linfoma de tejido linfoide asociado con mucosa (MALT, por sus siglas en inglés) se aumenta de manera importante. El adenocarcinoma gástrico empieza en la mucosa y la primera etapa de su desarrollo, metaplasia intestinal, es una respuesta del estómago para deshacerse de la infección de H. pylori. Estudios realizados en UCL Medical School han mostrado que el linfoma MALT requiere de ayuda de células T específicos de H. pylori para su crecimiento. Tratamiento de la infección con H. pylori resultó ser extremadamente eficiente para curar el linfoma MALT. La Organización Mundial de Salud ha catalogado el patógeno un carcinógeno de grupo I. Consecuentemente, la presente invención ofrece también un método para el tratamiento o la prevención de enfermedades del tracto gastrointestinal causadas por infecciones con Helicobacter comprendiendo la administración gastrointestinal de una cantidad terapéutica de un agente donde el agente comprende un derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) formado mediante reacción entre un poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) y un compuesto orgánico conteniendo grupos hidroxilos seleccionados de alcanoles, fenoles, polioles y mezclas de estos, para formar grupos carbonilos protegidos. El término poliolo, donde se usa en la presente, significa un compuesto conteniendo al menos dos grupos hidroxilos. Los derivados formados son seleccionados típicamente de derivados hemiacetales y acétales . Por lo tanto, el uso del método de la presente invención ofrece una alternativa al uso de cirugía, terapia de radiación o quimioterapia tradicional en el tratamiento de cánceres gastrointestinales. La invención ofrece además un método para el tratamiento de infecciones gastrointestinales por una especie de bacterias Helicobacter como gastritis, úlcera gástrica, úlcera duodenal, linfoma gástrico maligno o cáncer gástrico, comprendiendo la administración gastrointestinal de una cantidad terapéutica de un agente donde el agente comprende un derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) formado mediante reacción entre un poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) y un compuesto orgánico conteniendo uno o más grupos hidroxilos para formar grupos carbonilos protegidos. La presente invención ofrece una alternativa a tratamientos estándar de infecciones con Helicobacter que, en general, comprenden las asi llamadas terapias antibióticas triples, donde todas ellas incluyen o bien metronidazol o claritromicina . Cepas de H. pylori han aparecido que son resistentes a estos dos antibióticos y nosotros hemos demostrado que el método de la presente invención puede tratar con efectividad estas bacterias resistentes a antibióticos. El agente que es un producto de la reacción entre poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) y un compuesto orgánico conteniendo uno o más grupos hidroxilos ha demostrado ser más efectivo en el tratamiento de infecciones con Helicobacter que les correspondientes grupos de poli ( 2-propenal , ácido 2-propenóico) no superactivados . La invención ofrece además el uso de un derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) en la producción de un medicamento para el tratamiento o la prevención de una enfermedad causada por infección con Helicobacter. El método de la presente invención puede usarse en el tratamiento o la prevención de cánceres gastrointestinales. Estos pueden comprender, por ejemplo, cánceres del esófago, estómago, intestino y colon. Un ejemplo de este tipo de cáncer el la linea de célula HT-29 de cáncer de colon humano. Cuando el fármaco antimicrobiano inventivo se integra en alimentos para animales o agua, esto puede hacerse de la manera usual. En una modalidad preferida, el fármaco antimicrobiano inventivo se integra en una mezcla previa. La mezcla previa preferentemente incluirá el fármaco antimicrobiano, un vehículo fisiológicamente compatible y opcionalmente algún alimento. La mezcla previa se encuentra generalmente en una forma relativamente concentrada y está preparada para diluirse con otro material como uno o varios de otros vehículos, vitaminas, suplementos minerales y alimento para formar el alimento animal terminado. La mezcla previa comprende preferentemente el fármaco antimicrobiano en una concentración en el intervalo de 0.1 a 70% de peso, preferentemente 0.5 a 50% por peso. La concentración óptima depende de si el tratamiento es preventivo, para control o remedio y si el fármaco antimicrobiano inventivo es la única sustancia activa o si se usa en terapia concomitante con otros materiales o fármacos antimicrobianos. En una modalidad preferida, la composición concentrada del fármaco antimicrobiano está presente en una forma de liberación controlada. La forma de liberación controlada comprende el fármaco antimicrobiano y material polímero para ofrecer la liberación controlada del fármaco antimicrobiano del sistema de liberación controlada, y es particularmente conveniente en composiciones de aditamento a material de alimento sólido. Como resultado de la formulación de liberación controlada, la liberación del fármaco antimicrobiano puede retardarse de manera que se presente principalmente en el duodeno. Un polímero de liberación controlada puede minimizar también el rechazo de la composición debido a sabor, o se puede usar para supositorios rectales. Una composición antimicrobiana inventiva puede estar presente en forma de bolitas, pastillas o composiciones sólidas parecidas. Las bolitas conteniendo el fármaco antimicrobiano inventivo puede prepararse mediante las etapas de: (i) disolver el fármaco antimicrobiano mencionado en una solución acuosa alcalina o básica; (ii) neutralizar la solución mencionada con ácido; (iii) adicionar a la solución neutralizada mencionada polímeros insolubles, reticulados, absorbentes de ácido acrílico y/o copolímeros de acrilamida y ácido acrilico, para formar bolitas hinchados húmedos; y (iv) opcionalmente, secar completa o parcialmente las bolitas húmedas hinchadas. Las bolitas húmedas, hinchadas asi formadas pueden usarse húmedas, parcialmente secas o completamente secas, como suplemento a, por ejemplo, alimento para animales. El sistema está diseñado además de manera que los grupos conteniendo carboxilo en la matriz polímera exterior hacen que los polímeros referidos permanecen esencialmente contenidos en la matriz en el ambiente ácido del estómago. Sin embargo, en al ambiente alcalino del duodeno, los grupos carboxílicos de la matriz se vuelven ionizados y mutuamente repelentes, y la bolita se hincha rápidamente para permitir que los polímeros de referencia, apoyados polla repulsión entre sus propios grupos iónicos, sean expulsados en un proceso de difusión aproximadamente sincronizado con la velocidad de paso del alimento por el duodeno . En la presente invención, el término "sistema de liberación controlada" se usa en el mismo contexto como en, y comprende la misma gama de ejemplos como citado en "Controlled Drug Delivery" (Robinson & Lee, 1987) . Muchos otros sistemas de liberación controlada sensibles al pH conocidos en el estado de la técnica (Robinson and Lee, 1987) pueden usarse en lugar del polímero de ácido acrilico o copolímero de acrilamida y ácido acrilico. Por ejemplo, sistemas de celulosa soluble y aniónica, o insoluble, reticulada y aniónica; o polímeros solubles y aniónicos, o insolubles, reticulados y aniónicos derivados de cualquier polímero de ácido acrilico genérico y/o sus derivados. Semejantes polímeros reticulados e insolubles se prefieren, ya que se hinchan y también tienen menor probabilidad de ser sometidos al metabolismo. Se prefiere que el sistema de liberación controlada comprenda una bolita sensible al pH, reticulada, absorbente de agua, que es un gel al estar húmedo. La invención ofrece también una composición alimenticia para animales comprendiendo el fármaco antimicrobiano inventivo y alimento. El fármaco antimicrobiano preferentemente está presente en una cantidad de 0.0001 a 25% de la composición alimenticia total y preferentemente de 0.0001 a 5% de la composición alimenticia total. En otra modalidad preferida, el fármaco antimicrobiano inventivo puede estar preparado para adición al agua de beber de los animales. El fármaco antimicrobiano inventivo se administra preferentemente en cantidades de 0.05 a 5000 mg/kg de peso físico/día, más preferentemente de 0.05 a 50 mg/kg/día. Ejemplos de vehículos inertes convenientes para el uso en composiciones para administración del fármaco antimicrobiano inventivo comprenden agua, aceite de oliva, aceite de cacahuete, aceite de sésamo, aceite de girasol, aceite de cártamo, aceite de maní, aceite de coco, parafina liquida, etilenglicol, propilenglicol , polietilenglicol, etanol, propanol, isopropanol, glicerol, alcoholes grasos, triglicéridos, polivinil alcoholes, polivinil acetato parcialmente hidrolizado y mezclas de estos. Formas sólidas para administración oral o rectal puede contener aglutinantes, edulcorantes, agentes de desintegración, diluyentes, saborizantes , agentes de recubrimientos, conservadores, lubricantes y/o agentes de retardo. Aglutinantes convenientes incluyen goma de acacia, gelatina, almidón, goma tragacanto, alginato sódico, carboximetil celulosa o polietilenglicol. Edulcorantes convenientes incluyen sucrosa, lactosa, glucosa o glicosidos de sabor como neohesperidina dihidrocalcona . Agentes de desintegración convenientes incluyen almidón de maíz, metil celulosa, polivinilpirrolidona, goma de xantano, bentonita, ácido alginico o ágar. Diluyentes convenientes incluyen lactosa, sorbitol, manitol, dextrosa, caolín, celulosa, carbonato de calcio, silicato de calcio o dicalciofosfato . Agentes saborizantes convenientes comprenden aceite de hierbabuena, salicilato de metilo, sabores de cereza, naranja o frambuesa. Agentes de recubrimiento convenientes incluyen polímeros o copolímeros de ácido acrílico y/o ácido metacrílico y/o sus ésteres, y/o sus amidas, ceras, alcoholes grasos, gluten de maíz, goma laca o gluten. Conservadores convenientes incluyen benzoato de sodio, vitamina E, a-tocoferol, ácido ascórbico, parabenes metílicos, parabenes propílicos o bisulfito sódico. Lubricantes convenientes incluyen estearato de magnesio, ácido esteárico, oleato sódico, cloruro sódico o talco. Agentes de retardo convenientes incluyen monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo . Suspensiones para administración oral o rectal pueden comprender además agentes de dispersión y/o agentes de suspensión. Agentes de suspensión convenientes incluyen carboximetil celulosa sódica, metil celulosa, hidroxipropil metil celulosa, polivinilpirrolidona, alginato sódico o alcohol cetílico. Agentes de dispersión convenientes incluyen lecitina, ésteres de polioxietileno o ácidos grasos como ácido esteárico, polioxietileno sorbitol mono-o di-oleato, -estearato o -laureato, polioxietileno sorbitano mono- o di-oleato, -estearato o -laurato, y similares . La composición del fármaco antimicrobiano puede comprender además uno o varios agentes de emulsión. Agentes de emulsión convenientes incluyen agentes de dispersión como mencionados a guisa de ejemplo en lo precedente o gomas naturales o gomas como goma de acacia o goma de tragacanto . Composiciones para administración según el método inventivo pueden prepararse con medios conocidos en el estado de la técnica para la preparación de composiciones (cono en el estado de la técnica de composiciones veterinarias y farmacéuticas) incluyendo mezclar, moler, homogenizar, suspender, disolver, emulsionar, dispersar y, donde es aplicable, mezclar los polímeros en cuestión junto con excipientes, diluyentes, vehículos y sustancias auxiliares . Para administración oral, la composición farmacéutica o veterinaria puede estar presente en forma de tabletas, pastillas, pildoras, comprimidos, cápsulas, elixires, polvos, incluyendo polvos liofilizados, soluciones, granulados, suspensiones, emulsiones, jarabes y tinturas. Se pueden preparar también formas de liberación lenta o retardada, por ejemplo, en forma de partículas recubiertas, tabletas de varias capas o microgránulos . Se prefiere en general que poli ( 2-propenal , ácido 2-propenóico) se prepare de poli ( 2-propenal ) mediante oxidación del sólido al aire. El polímero de poli (2-propenal) puede calentarse inicialmente , en un estado predominantemente seco, a entre 80 y 110°C. Más preferentemente, el polímero se calienta inicialmente a aproximadamente 85°C. El poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) se calienta preferentemente en alcohol durante un lapso en el intervalo de 1 hora a 1400 horas y más preferentemente de 1 hora a 60 horas. Según la presente invención, se ofrece además un compuesto o una composición de conservación comprendiendo el fármaco antimicrobiano inventivo. Según la presente invención, se ofrece además un compuesto o una composición desinfectante o antiséptica comprendiendo el fármaco antimicrobiano inventivo. Según otro aspecto inventivo estamos ofreciendo una composición para el tratamiento de enfermedades gastrointestinales comprendiendo un polímero antimicrobiano tal como se describe en lo precedente y adicionalmente un agente de quimioterapia donde el agente de quimioterapia adicional es adsorbido en el fármaco antimicrobiano. La adsorción típicamente reduce la penetración de membrana del agente de quimioterapia adicional. Agentes de quimioterapia convenientes para el uso en esta modalidad son aquellos que muestran una reducción importante en penetración de membrana al añadirse por mezcla con el fármaco antimicrobiano polímero. Preferentemente, la penetración se inhibe por un factor de al menos 50%. Los agentes de quimioterapia convenientes para el uso en esta modalidad inventiva incluyen antibióticos para el tratamiento de enfermedades gastrointestinales y agentes anticáncer para el tratamiento de cánceres gastrointestinales . El uso de agentes de quimioterapia en combinación con el fármaco antimicrobiano polímero reduce la penetración de membrana del agente de quimioterapia, reduciendo de esta manera los efectos segundarios sistémicos y ofreciendo una terapia más dirigida. En muchos casos se reduce también el olor. Ejemplos de agentes de quimioterapia para el tratamiento de enfermedades gastrointestinales incluyen antibióticos y agentes anticáncer. Ejemplos de antibióticos que pueden usarse en combinación con el polímero antimicrobiano incluyen tetraciclinas, penicilinas, aminoglicosidas , sulfonamidas, cefalosporinas y nitrofuranos . Los antibióticos pueden ser antibióticos convencionales empleados para tratar infecciones para el tracto gastrointestinal. Ejemplos de agentes anticáncer que pueden usarse en combinación con el fármaco antimicrobiano polímero inventivo son agentes de alquilación, antimetabólicos, antibióticos anticáncer, alcaloides vegetales, hormonas y otros agentes anticáncer, en particular agentes anticáncer conteniendo solamente carbono, hidrógeno y oxigeno. Las composiciones inventivas pueden comprender uno o varios fármacos antimicrobianos adicionales seleccionados del grupo de fenol (preferentemente en una cantidad de 0.1 a 10% por peso), una isotiazolinona (preferentemente en una cantidad de 0.001 a 1% por peso), un parabeno alquilico (preferentemente en una cantidad de 0.02 a 2%) y un alcohol bajo (preferentemente en una cantidad de 20 a 99%) , donde las cantidades están basadas en peso sobre el peso de la composición. Se ha verificado que el derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) empleado en el método inventivo aumenta de forma importante la estabilidad en comparación con polímeros de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) . Como el estado de la técnica había registrado algo de inestabilidad de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) , como se mostró por la pérdida de actividad antimicrobiana de sus composiciones, hemos realizado "envejecimiento acelerado" a temperaturas elevadas, es decir, a 40°C. Sin embargo, como mayor sorpresa para nosotros, el "envejecimiento" a temperaturas elevadas de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) en soluciones acuosas o acuosa-polietileno no solamente retrasó la pérdida de actividad antimicrobiana, sino de hecho aumentó la actividad antimicrobiana del poli (2-propenal, ácido 2-propenóico), véase ejemplo 2(a) y (b) . Este resultado es totalmente contradictorio e inesperado en consideración del estado de la técnica que predice que un aumento de temperatura debería causar "envejecimiento acelerado", es decir, pérdida acelerada de actividad antimicrobiana. En el presente documento, el proceso de procurar una actividad antimicrobiana aumentada mediante la formación de una nueva configuración del polímero en cuestión incluyendo poli (2-propenal , ácido 2-propenóico ) , se denomina "súper-activación" y los polímeros se mencionan como "polímeros súper-activados" . Aún más sorprendente, en vista del estado de la técnica, los inventores han encontrado que la súper-activación en solución acuosa de polietilenglicol es fomentada por condiciones básicas, seguido por ácidas. También son favorables a la súper-activación el calor y la humedad. La súper-activación se facilita mediante la presencia de polietilenglicoles o grupos polioles o alcanoles protegidos y estabiliza los grupos carbonilos de los polímeros mediante formación de acétales, mediante degradación alcalina por la reacción de Cannizzaro. Una ventaja adicional de la súper-activación es que reduce o elimina acroleína contaminante como fuente de irritación de tejido y piel.

Se está enfatizando que súper-activación es completamente distinta y en adición a cualquier incremento de actividad antimicrobiana que puede resultar de meramente una mayor disponibilidad de polímero, en cualquier medio de ensayo acuoso, como resultado de hidrofilia aumentada, tal como se demostró en la solicitud de patente Australiana caducada AU-A-11686/95 (de aquí en adelante "11686/95") . Los inventores han repetido exactamente el método descrito en 11686/95 y después encontraron a continuación que súper-activación posterior del polímero parcialmente soluble demostrablemente generó otro incremento adicional, sustancial de actividad antimicrobiana. Se debe tomar nota que aún súper-act ación no volvió el polímero de 11686/95 completamente soluble, en contraste con súper-activación empezando con polímero primeramente calentado a entre 80-85°C. El tiempo óptimo para lograr súper-activación de soluciones de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) depende de la temperatura en proporción inversa. Será obvio que aún envejecimiento a temperatura ambiente puede usarse para súper-activación, particularmente cuando sea apoyada por la presencia de solvente hidroxilo y/o base seguida por acidez, pero obviamente, esto puede ser impráctico debido a los períodos de tiempo más largos que se requieren. Los inventores han encontrado polímeros súper-activados tal como se describen en esta, convenientes para terapia gastrointestinal, conservadores en productos o métodos basados en agua, e ingredientes activos en desinfectantes o antisépticos que tienen la ventaja de una actividad antimicrobiana mejorada. Además, los inventores encontraron que la actividad antimicrobiana de estos desinfectantes o antisépticos se incrementó al incrementar su pH, por ejemplo, por encima de pH 6. Una característica común de la invención es la adición de un grupo capaz de interacción hidrofóbica al fármaco antimicrobiano inventivo, mediante formación hemiacetal/acetal ,o mediante adsorción, con la finalidad de mejorar la actividad antimicrobiana. La invención se describirá ahora con referencia a varios ejemplos que no deberían entenderse como limitando el alcance de la misma. Ensayo biocida Disuelva muestra con 1% por peso bicarbonato sódico acuoso para obtener la concentración requerida (a menos que se especifique lo contrario, 0.125% por peso del polímero) . Pese 19.9 g de la muestra diluida en una jarra estéril e inocule con 0.1 mi de 107-108 cfu de Ps . aeruginosa y mezcle. Transfiera a intervalos de tiempo 1 mi de la muestra inoculada a 9 mi de caldo de Letheen y coloque en vórtice. Distribuya en placas en diluciones en serie de 1 a 10. Vierta en soya tripticasa con ágar. Incube durante 3 días a 37°C. Ejemplo 1 El ejemplo describe un método para preparar poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) mediante oxidación de un polímero de acroleína sólido al aire. Este poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) es el método preferido para preparar una materia prima para el uso en el método inventivo. Agua (720 mi a temperatura ambiente, aproximadamente 20 °C) y acroleína (60 g; recientemente destilado, más hidroquinona adicionado a 0.25% peso/peso) se colocaron en una copa de pico abierta dentro de un vitrina de gases y se agitaron mecánicamente muy vigorosamente. A continuación se adicionaron 0.2 M de hidróxido sódico acuoso (21.4 mi) para ajustar el pH a 10.5 - 11.0. La solución se volvió inmediatamente de un amarillo típico para el anión de hidroquinona y dentro de un minuto el color había desaparecido y la solución clara se volvió lechosa. Aproximadamente 1 minuto después inició precipitación de un polímero coposo blanco, y parecía completa dentro de 15 - 30 minutos. El precipitado se filtró y lagó con agua (250 mi) , se secó a temperatura ambiente en filtros de papel durante 2 días (rendimiento 25 g) , después se roció como capa delgada en cajas de cultivo de vidrio y se calentó a 40°C/8 horas. Este calentamiento se continuó según el siguiente esquema: 50°C/15 horas; 65°C/4 horas; 75°C/18 horas; 84°C/24 horas. Se está previendo que este método puede aumentar de escala para incluir, por ejemplo, la adición en etapas de acroleina en un recipiente cerrado y seguido por secado más rápido (compárese el ejemplo 10). Típicamente, una solución de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) obtenido se preparó adicionando 2 q del respectivo polímero agitando durante 15 a 30 minutos a una solución de 1% peso/peso de carbonato sódico (100 mi), y se diluyó a continuación según se requería. Estas soluciones estaban perfectamente claras, en contraste con las soluciones intentadas usando alternativamente polímero derivado del ejemplo 5 de 11686/95. Ejemplo 2 Este ejemplo describe la formación de acetal de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico). (a) 5g de poli (2-propenal , ácido 2-propenóico) se disolvieron en 64g de polietilenglicol ("PEG") 200 y se combinaron con 31 g de una solución de 0.71 % peso/peso de carbonato sódico. Una parte de la solución (pH aparente = 5.8) se mantuvo a temperatura ambiente mientras que (b) el resto de la muestra de la etapa (a) se calentó a 60°C por periodos de 12 a 25 días. Muestras de (a) y (b) se diluyeron con 1% peso/peso de bicarbonato sódico y se sometieron a ensayo biocida en concentraciones de polímero de 0.125% peso/peso. Sorprendentemente, las muestras que habían sido sometidas a "envejecimiento acelerado" mostraron actividad antimicrobiana mejorada, tal como puede desprenderse por referencia a la tabla 1: Tabla 1 idades formando colonias(cfu)/ml lg de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) se disolvió en 200 mi de 0.1% peso/peso Na2C03 y se dejó reposar durante la noche. Laurilsulfato sódico se adicionó a un nivel de 0.05% peso/peso y la solución se acidificó con HC1 a un pH de 5.9. Porciones se guardaron tanto temperatura ambiente como a 60 °C. Ensayos biocidas se realizaron con soluciones de 0.125% peso/peso de polímero, con 1% peso/peso de NaHCC>3 empleado como diluyente. La muestra "envejecida" mostró una mejora sorprendente de desempeño, como puede verse mediante referencia a la tabla 2: Tabla 2 * unidades formando colonias(cfu)/rnl (c) Una solución de 5 % peso/peso de polímero súper-activado se preparó según el ejemplo 2(a), pero sustituyendo PEG200 con PEG1000. Una parte de esta solución se trató con NaOH concentrada con pH 8.1. Muestras se calentaron a 60°C y se sometieron a ensayo biccida. La muestra expuesta a condiciones más básicas produjo inesperadamente una actividad biocida superior, como puede apreciarse mediante referencia a la tabla 3 : Tabla 3 * unidades formando colonias(cfu)/ml Ejemplo 3 Este ejemplo analiza el producto obtenido mediante reacción del poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) con polietilenglicol .

La presencia de acétales en los polímeros del ejemplo 2(b) puede determinarse mediante análisis del residuo sólido remanente después de diálisis y concentración de la solución polímera usando espectroscopia de resonancia magnética nuclear (NMR por sus siglas en inglés) de protón (lti) y carbono (13C) . Diálisis separa todo material con peso molecular inferior a 1000. La tabla 4 muestra datos NMR de protón (1H) y carbono (13H) . Como puede apreciarse de la tabla 4, espectroscopia de resonancia magnética nuclear del residuo mostró picos en d 3.58 y 3.56 en el espectro de resonancia magnética nuclear 1H y d 71.62, 69.48 y 60.25 en el espectro de resonancia magnética nuclear 13C. Estos picos son indicios de la adhesión de unidades de polietilenglicol como acétales. Tabla 4 Datos de los espectros de resonancia magnética nuclear de 600 MHz 1 ? y 125MHz 13C en D20 con 1% peso/peso de Na2C03 del residuo sólido de polímero súper-activado después de diálisis y concentración.

Ejemplo 4 (a) soluciones de 5% peso/peso de polímeros intervalo de grados de súper-activación, pH aparente de 5.7, se prepararon de forma similar al ejemplo 2(a), pero variando el porcentaje de PEG200. Muestras se calentaron a 60°C y se observaron las estabilidades sobre el tiempo. Se consideró que la estabilidad física falló con la ocurrencia de precipitación o gelificació . Mediciones UV se hicieron en una concentración de 0.01% peso/peso de polímero en una solución de 1% peso/peso de carbonato sódico. Se considera que una disminución en la tasa de absorción a 268 nm 230 nm significa una disminución de estabilidad química. Los resultados se muestran en la tabla 5: Tabla 5: composición A B C D PEG 200 (% por peso) 0 50 64 95 estabilidad física tiempo A B C D 4 días a 60°C falló pasó pasó pasó 1 1 días a 60X falló falló pasó pasó estabilidad química tasa = 260-170 absorbancia pico 228-238 absorbancia pico tiempo A B C D 0 días a 60°C 1 .38 1 .41 1.43 1.46 4 días a 60°C 0.98 1 .04 1.21 1.27 1 1 días a 60°C - 0.97 1.03 1.09 18 días a 60°C - 0.89 0.92 1.04 25 días a 60°C - 0.84 1.04 Tanto los resultados físicos como de espectro UV demuestran el efecto positivo de PEG sobre la estabilidad; mayor contenido de PEG da como resultado mayor estabilidad física y química. (b) Las siguientes soluciones A y B se prepararon disolviendo 4g de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) en 196 g de 1% peso/peso de bicarbonato sódico y ajustando el pH a 7 (A) y 5.5 (B) con HC1 diluido. La solución C se preparó disolviendo 50 g de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) en PEG 200 (640 g) a 65° a 70°C. Después se añadió una solución de 4 g de carbonato sódico en agua (306 g) , siendo el pH aparente 7, y después 5.5 al término del período de tratamiento de 31 días. Todas las muestras se almacenaron a 40 °C. A diferentes intervalos de tiempo se sometieron muestras conteniendo el equivalente de 0.125% peso/peso a ensayos biocidas. Los resultados se muestran en la tabla 6: Tabla 6 Ejemplo 5 1 g de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) calentó en una cámara cerrada seca o húmeda, en ambos casos a 60°C, durante 3 días. Soluciones de polímero seco y polímero húmedo, respectivamente, se prepararon a 0.125% peso/peso (con corrección por el contenido de humedad) y se someten para su evaluación por ensayo biocida: Tabla 7: * unidades formando colonias(cfu)/ml Los polímeros mostraron absorción de carbonilo y/o carboxilo bajo IR entre 1700 - 1730 cm"1 en los grupos carbonilos (por ejemplo, con reactivo de Schiff) y tienen Mw = aproximadamente 10000 y Mn = aproximadamente 5000; titulación muestra grupos carboxilos de aproximadamente 5 mol %. Estos parámetros son similares (pero no idénticos) a aquellos de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) . Ejemplo 6 En un ensayo duplicado, una muestra de polímero se preparó y se disolvió después en etano-diol, exactamente corno descrito en el ejemplo 5 de 11686/95. La mitad de este material se calentó posteriormente a 80°C durante 24 horas (siendo que después de esto su solubilidad en medio acuoso aún era incompleta) . Las muestras se compararon respecto a su actividad antimicrobiana empleando el ensayo biocida estándar. Ambas muestras tratadas mediante calentamiento, es decir, súper-activación, mostraron una mejora clara de la actividad antimicrobiana, tal como se muestra en la tabla 8: Tabla 8: * unidades formando colonias(cfu)/ml Ejemplo 7 50 g de poli ( 2-propenal , ácido 2-propenóico) se disolvieron en PEG200 (640 g) a entre 65 y 70°C. Después se adicionó una solución de carbonato sódico (4g) en agua (306g) . La muestra se separó y reposó a temperatura ambiente o se calentó a 80°C durante 24 horas. El contenido de acroleina de la solución se determinó por periodos mediante HPLC de fase inversa y los resultados se muestran en la tabla 9: Tabla 9 días almacenados a 20°C contenido de acroleina (pprn) súper-activado no súper-activado 0 274 144 7 - 126 16 34 103 30 13 80 Ejemplo 8 Soluciones de poli ( 2-propenal , ácido 2-propenóico) se prepararon igual como en el ejemplo 7 y se trataron a temperaturas de 40, 60, 80, 100 y 115°C por periodos de tiempo variables. Las muestras se sometieron a ensayo estándar biocida para confirmar la tasa de exterminación aumentada y los resultados se muestran en la tabla .10: Tabla 10 Se observa que el periodo de tiempo requerido para súper-activación es proporcional a la inversa a la temperatura. Todas las soluciones de polímeros derivados del proceso de súper-activación estaban completamente mezclables, en cualquier proporción, con solventes acuosos. Ejemplo 9 (a) 540 g de poli ( 2-propenal, ácido 2-propenóico) se disolvieron en 2304 g de PEG200 a 65°C antes de mezclarlos con 43.2 g de carbonato sódico en 712 g de agua. Después, la solución se calentó a 100°C durante 4 horas, y se adicionaron 36 g de laurilsulfato sódico, 7 g de ECOTERIC T20 (detergente no iónico) y 2 g de fragancia de limón. La formulación, pH6, se diluyó 1:30 en agua dura y se probó contra Staphylococcus aureus (una bacteria grampositiva, de importancia particular respecto a infecciones en hospitales) y Salmonella choleraesuis (una bacteria gramnegativa de importancia particular respecto a infecciones en áreas de preparación alimenticia) , respectivamente usando Association of Agricultural Chemists Official Methods of Analysis (1995) 991.47, 991.48, (Método de ensayo de vehículo con superficie dura) . Los resultados se muestran en la tabla 11: Tabla 11 Ajustes de esta preparación a números de pH más altos, aumentos de actividad antimicrobiana, tal como se observó en el ensayo biocida. Los resultados se muestran en las tablas 12(a) y 12 (b) : Tabla 12 (a) Actividad contra Staphylococcus aureus Conreo inicial, 3 x 106 cfu/ml; polímero 350 ppm. pH 10 20 30 45 60 minutos minutos minutos minutos minutos cfu/ml cfu/ml cfu/ml cfu/ml cfu/ml 5.6 2.8 x 105 4.4 x 104 2.3 x 103 20 <10 7.2 2.7 x 103 <10 <10 <10 <10 8.9 3.2 x 103 <10 <10 <10 <10 10.5 1 .1 x 102 <10 <10 <10 <10 Actividad contra Pseudomona aeruginosa Conteo inicial, 3.7 x 106 cfu/ml; polímero 350 ppm. (b) 1200 g de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) se disolvieron en 7680 g de PEG200 a 60°C y después se adicionaron 96g de Na2C03 en 3024 g de agua. La solución se calentó a 100°C durante 6 horas. La preparación se adicionó a la tina de una torre de enfriamiento de circulación inducida en una concentración de 300 ppm (30 ppm polímero) 3 veces/semana. La dosificación se realizó en la tarde para dejar períodos de contacto de 8-12 horas antes de iniciar la operación; se esperó que la concentración residual se redujera a la mitad cada 3 - 6 horas de operación. El agua de recirculación tenía en promedio una temperatura de 27°C, pH 8.5, conductividad de 3000 . El conteo microbiano se determinó y se comparó con la torre contigua, idéntica que se había dotado diariamente con un agente de biodispersión . Los resultados se muestran en la tabla 13: Tabla 13 * unidades formando colonia/mi Los datos indican el programa de tratamiento mantenía los conteos microbianos dentro de los lineamientos del estándar AS/NZ 3666.3 (Int) : 1998 y por debajo de aquellos de la torre adyacente conteniendo dispersante biológico (que resultó ser inusualmente inadecuado durante las condiciones exigentes del período veraniego muy caluroso del ensayo) . Ejemplo 10 10(a) Ejemplo comparativo Este ejemplo muestra un método para preparar un polímero de acroleína donde no se usa el método inventivo. 1.0 0.8 % peso/peso de hidróxido sódico Coloque 9.90 kg de agua desionizada en una tina de acero inoxidable de 10 1 y adicione 0.08 kg de hidróxido sódico al agua y agite hasta que se haya disuelto. 2.0 polimerización Coloque 100.1 kg de agua desionizada en una tina de acero inoxidable de 200 1 y adicione 4.99 kg de una solución de 0.8% peso/peso de hidróxido sódico a la tina de 200 1. Equilibre la solución a 15 - 20°C. Simultáneamente, adicione 20 kg de monómero de acroleina y el resto de la solución de 0.8% peso/peso de hidróxido sódico a la tina de 200 1 a en porciones durante 1 hora de manera que el pH permanece en 10.5 - 11.0, y la temperatura no suba por encima de 30°C. Continúe con la polimerización durante otros 90 minutos. 3.0 Lavado Filtre/centrifugue la mezcla de polimerización y lave el polímero con agua desionizada hasta que el pH del agua de lavado sea menor de 7.0. El rendimiento aproximado es de 8 kg. 4.0 Secado Seque el polímero al aire, después caliéntelo en una estufa siguiendo el siguiente esquema: etapa período temperatura 1 2 horas 25°C 2 1 hora 40°C 3 1 hora 70°C 4 1 hora 75°C 5 2 horas 85°C 5.0 disolución Coloque 400 1 de agua en una tina de 500 1 y adicione 4 kg de carbonato sódico y agite hasta que esté disuelto. Adicione lentamente 8 kg de polímero seco, calentado y agite durante 30 minutos. Se verificó que el polímero obtenido tiene una solubilidad aproximada de 90 - 95% peso/peso en 1% peso/peso de carbonato sódico. Ejemplo 10(b) Este ejemplo describe un método para preparar un polímero de acroleína donde el polímero del ejemplo comparativo es súper-activado según el método inventivo. 1.0 Producción de la base Disuelve 0.4 kg de carbonato sódico en 30.6 kg de agua en un contenedor conveniente y coloque 64 kg de polietilenglicol 200 en el recipiente para mezclar. Empieza a agitar con un agitador mecánico y caliente el PEG200 a 65 + 3°C. Adicione 5 kg del polímero de acroleína seco del ejemplo 10a al PEG200 y agite hasta obtener una mezcla uniforme . Nota : Es posible que el sólido no se disuelva completamente en esta etapa. Adicione lentamente la solución de carbonato sódico a la mezcla de glicol en porciones que aseguren que el pH de la solución permanezca en el intervalo de 3.5 - 9.0. Agite la solución durante 45 minutas a 65 ± 3°C. Nota : El pH debería estar en el intervalo de 7-9.

La temperatura debería estar en el intervalo de 65 ± 3°C. 2.0 Súper-activación Cubra el recipiente para mezclar y caliente a 100°C durante cuatro (4) horas. Se encontró que el polímero resultante tiene una solubilidad aproximada de 99.5-100% peso/peso en agua. Ejemplo 11 Este ejemplo analiza la actividad antimicrobiana del poli ( 2-propenal , ácido 2-propenóico ) seco, activado de forma normal, del ejemplo 10a y la actividad antimicrobiana del derivado acetal súper-activado descrito en el ejemplo 10b. Polluelos tratados con cada uno de los fármacos antimicrobianos se compararon con un grupo de control según el siguiente método: En cada ensayo 20 polluelos de cisne (línea 53) , de un día se adquirieron de un criadero comercial. Se pesaron, se determinó su sexo y se distribuyeron al azar en jaulas adyacentes en un cuarto de una casa de animales aislada. Había una distribución uniforme de polluelos machos y hembras. Agua y alimento estaban disponibles al gusto. La dieta era una mezcla comercial (Chick Starter, Milne Feeds: 18% proteína cruda) con presencia de un coccidiostato (125 ppm dinitolmida) . Diez polluelos recibieron la preparación de 0.1% peso/peso del fármaco antimicrobiano activado de manera normal del ejemplo 10a en agua durante 14 días a través de bebedores estáticos; la dosificación era de 30 mg/kg/dia. Los otros diez polluelos eran el grupo de control. Ambos grupos de polluelos se pesaron en los días 0, 4, 7, 11 y 14. Al completar el ensayo, a todos los polluelos se aplicó eutanasia, y los polluelos tratados se sometieron a autopsia post mortem. Se realizó un examen total detallado de las cavidades torácicas y abdominales. Resultados : Tabla 14a Aumento de peso durante el ensayo con fármaco antimicrobiano activado de manera normal del ejemplo 10a Al completar el ensayo, en el post-mortem, no había evidencia de signos patológicos de toxicidad en este examen total en el grupo de polluelos tratados. Tabla 14b Aumento de peso en el ensayo con acetal antimicrobiano súper-activado del ejemplo 10b día grupo de control grupo tratado diferencia entre (peso promedio en g) (peso promedio en g) gru os (%) 0 42.5 42.5 0 4 62.5 67.5 8 7 97.5 103 6 1 1 130 145 1 1 .5 14 1 8 219 23 En el post mortem al completar el ensayo no se evidenciaron en los polluelos restantes signos clínicos o patológicos durante el examen total en ambos grupos. Conclusión : Había una diferencia significativa en incrementos de peso en el grupo tratado en comparación con el grupo de control (?2; P<0.015). El grupo tratado estaba 23% más pesado que el grupo de control al completar el ensayo. El mejoramiento significativo en aumento de peso del derivado acetal súper-activado en comparación con el control, y en el ejemplo siguiente, cuando se compara con el poli (2-propenal, ácido 2-propenóico ) activado de forma normal, demuestra la mejoría significativa en actividad antimicrobiana entérica del derivado acetal. Ejemplo 12 Este ejemplo evalúa el fármaco antimicrobiano polimérico del ejemplo 10b en condiciones de aplicación para el control de la colibacilosis porcina después del destete (PWC, por sus siglas en inglés) .

Método : 146 cerdos jóvenes [de destete] , o bien recibiendo varias preparaciones de fármaco antimicrobiano súper-activado en su alimento o agua, APRALAN® (Elando) oralmente, vacuna autógena, o nada de esto, se expusieron al estrés relacionado con el destete en una cria de cerdo comercial grande que tenia antecedentes largas de problemas con PWC. Sus respuestas respecto al desarrollo de diarrea, aumento de peso y mortandad se evaluaron y están representadas en la tabla 15. Tabla 15 Notas : 1. Codificación de tratamientos: i. grupo 1 = 0.1% peso/peso de fármaco antimicrobiano polímero súper-activado en el alimento ii. grupo 2 = 0.02% peso/peso de fármaco antimicrobiano polímero en agua. 2. Porcentaje del grupo que murió de PWC durante el ensayo 3. Cantidad promedio de días de cada cerdo en el grupo donde se registró un puntaje fecal de 1 o 2; puntaje fecal es una medida de la intensidad de diarrea. 4 La suma de puntaje fecal dividido entre el número de muestras observadas por cerdo. 5 F = Prueba exacta de Fisher. Conclusión : El ensayo alimenticio subraya los siguientes puntos que demuestran positivamente la eficacia del derivado acetal de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) (fármaco antimicrobiano súper-activado) para el uso en lechones en la cría de cerdos comercial cuando se les expone a Escherichia coli ß-hemolítico después del destete: 1. Mortandad: Tasas de mortandad inferiores para cualquiera de los grupos tratados con fármaco antimicrobiano polímero súper-activado a cualquiera de los grupos sin tratar, vacunados o de Apralan®. 2. Días de diarrea: Significativamente menos días de diarreas en cualquiera de los grupos tratados con fármaco antimicrobiano súper-activado [F; P<0.0001] que en cualquiera de los grupos sin tratar, vacunados o de Apralan®. 3. Puntaje fecal: Puntaje fecal significativamente menor en cualquiera de los grupos tratados con fármaco antimicrobiano súper-acti ado [F; P<0.0001] que en cualquiera de los grupos sin tratar, vacunado o de Apralan®. Ejemplo 13 Este ejemplo analiza el efecto de usar determinados suplementos con el fármaco antimicrobiano inventivo . Método: Se prepararon durante la noche caldos de cultivo de verificación y es estimó el conteo viable total (TVC, por sus siglas en inglés) de las culturas de la noche. Las muestras se diluyeron en serie 1 a 1 usando solución salina estéril (5 mi) . Agua dura estéril (SWH, por sus siglas en inglés) se usó como diluyente al verificar muestras conteniendo EDTA. 1 parte de cada cultivo de noche se diluyó en 9 partes de diluyente. Las suspensiones diluidas asi obtenidas se usaron para inocular. Inocule cada muestra de dilución con 100 µ? de cultivo de noche diluida. (Un cultivo por probeta). Mezcle bien . Los tubos se incubaron durante = 24 horas a 37 °C (A. niger fue incubado a 28°C por = 24 horas) . De cada probeta se volvió a cultivar 1 mi en 9 mi de caldo de recuperación y se mezcló bien (caldo de recuperación: caldo de nutrientes + 3% Tween 80 (NBT) para fármaco antimicrobiano polímero y EDTA; caldo de nutrientes + 3% Tween 80 + 0.1% de amoníaco (NBTA) para glutaraldehído y, caldo de Letheen (LB) para metil parabenos) . Las muestras se incubaron a 37 °C por otras = 48 horas. (28°C = 5 días para A. niger). Cada probeta se examinó respecto a crecimiento. Todas las probetas se cultivaron a continuación en ágar selectivo y se incubaron durante = 24 horas a 37°C. (28 °C durante = 5 días para A. niger) . Se juzgó que crecimiento en ágar selectivo confirma el crecimiento del organismo de ensayo . Se realizaron pruebas positivas usando 5 mi de diluyente inoculado con cultivo y se sometieron a incubación, recuperación y confirmación. Se realizaron pruebas negativas usando 5 mi de diluyente sin inocular y se sometieron a incubación, recuperación y confirmación.

RESULTADOS: Los resultados se encuentran reflejados en la siguiente tabla: Tabla 16 MKC de conseivadores selectos e índice sinqerqético nota: todos los valores proporcionales se expresan como proporción de fármaco antimicrobiano polímero : conservador Leyenda : 1) Fármaco antimicrobiano polímero 0.025% peso/peso 2) Fármaco antimicrobiano polímero 0.2% peso/peso 3 ) Glutaraldehído 0.025% peso/peso 4) Fármaco antimicrobiano polímero 0.025% peso/peso + glutaraldehído 0.025% peso/peso 5) Fármaco antimicrobiano polímero 0.2% peso/peso + glutaraldehído 0.025% peso/peso 6) Fármaco antimicrobiano polímero 0.2% peso/peso 7) EDTA 0.1% peso/peso 8) Fármaco antimicrobiano polímero 0.2% peso/peso + EDTA 0.1 pese/peso 9) Fármaco antimicrobiano polímero 0.2% peso/peso (en 80% peso/peso glicerol) 10) Metil parabeno 1% peso/peso (en 80% peso/peso glicerol ) 11) Fármaco antimicrobiano polímero 0.2% peso/peso (en 80% peso/peso glicerol) + metil parabeno 1% peso/peso (en 80% peso/peso glicerol) . Tabla 17 índice sinergético con Fármaco antimicrobiano polímero Cultivo glutaraldehído EDTA metil parabeno A. niger <0.6 <0.5 0.2 C. albicans 0.3 0.1 0.5 E. coli 0.5 <0.3 0.3 P. aeruginosa 0.6 0.4 0.2 S. aureus 0.3 <0.7 0 2 Nota: sinergia <1.0, suplemento = 1.0, antagonista > 1.0 donde SI=CD/A + CE/B A = Fármaco antimicrobiano polímero MKC B = conservador MKC C = mezcla MKC D = Proporción de A con B E = Proporción de B con A Conclusión : Se mostró que el derivado acetal de poli (2-propenai, ácido 2-propenóico) era sinergético con glutaraldehído, EDTA, y metil parabeno, respectivamente contra A. niger, C. albicans , E. coli, P. aeruginosa , S. aureus. Ejemplo 14 Este ejemplo demuestra la actividad del fármaco antimicrobiano polímero inventivo en combinación con el fármaco antimicrobiano polímero marca "Dettol". La muestra se diluyó por series 1 a 1 en solución salina normal estéril (5 mi) . Cada dilución de muestra se inoculó con ???µ? de cultivo de noche diluido (un cultivo por probeta) . Las muestras se mezclaron bien. Se incubaron a 37 ± 2°C durante = 24 horas (probetas inoculadas con Aspergillus niger se incubaron a 28 ± 2°C durante < 24 horas) . De cada probeta se volvió e incubar 1 mi en 9 mi de caldo de recuperación y se procesó bien en vórtice (NBT, o Sabouraud + 3% Tween (SABT) para A. niger) . Se incubaron a 37 ± 2°C durante = 48 horas {A. niger se incubó a 28 ± 2°C durante otros 5 días) . Los caldos de recuperación se examinaron respecto a turbiedad (crecimiento) y se embarraron en ágar selectivo para comprobar el crecimiento. Tabla 18 Resultados MKC en ppm de fármaco antimicrobiano polímero súper-activado y/o "Dettol Leyenda 1) 0.1% peso/peso fármaco antimicrobiano polímero 2) 0.2% peso/peso fármaco antimicrobiano polímero 3) "Dettol" 4.8% peso/volumen (diluido 1:20) 4) 0.1% peso/peso fármaco antimicrobiano polímero + "Dettol" (diluido 1:20) 5) 0.2% peso/peso fármaco antimicrobiano polímero + "Dettol" (diluido 1:20) Tabla 19 índice sinergético de fármaco antimicrobiano polímero y Dettol Nota: Antagonista si SI > 1, suplemento si SI = 1, sinergético si SI < 1 SI = CD/A + CE/B A = MKC fármaco antimicrobiano polímero (ppm). B = MKC fármaco antimicrobiano polímero C = MKC de fármaco antimiciobiano polímero / mezcla de "Dettol" (ppm) D proporción de fármaco antimicrobiano polímero en relación con Dettol E = proporción de "Dettol" en relación con fármaco antimicrobiano polímero Nota: El fármaco antimicrobiano activo en "Dettol" es cloroxilenol Conclusión : Se mostró que el fármaco antimicrobiano polímero inventivo era sinergético con "Dettol" contra E. coli, S. aureus, P. aeruginosa , C. albicans y A. niger. Esto demuestra que "Dettol" y el fármaco antimicrobiano polímero, al usarse juntos como solución mezclada, serán más efectivos que al usarse cada uno por si solo. Ejemplo 15 Calidades antisépticas de poli ( 2-propenal , ácido 2-propenóico) [súper-activado] El poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) antimicrobiano [súper-activado] se investigó respecto a sus calidades antisépticas. La cantidad de bacterias presentes en las manos de personas se determinó antes y después de la aplicación de fármaco antimicrobiano seguido na puesta de guantes de cirujano. El efecto antiséptico de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) [ súper-activado] se comparó con el antiséptico quirúrgico usado comúnmente, 4% de jabón quirúrgico clorhexidina (producido por Orion Laboratories, en Perth, Western Australia) . * soluciones acuosas de 3% peso/peso de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) [súper-activado] redujeron los conteos base de poblaciones bacterianas en manos con guantes después de 3 horas. * Una solución de 2% peso/peso de poli ( 2-propenal , ácido 2-propenóico) con 70% de etanol mostró una reducción sostenida en conteo bacteriano base después de 3 horas en manos con guantes, al igual que 4% clorhexidina. * Una solución de 3.2% peso/peso de poli ( 2-propenal , ácido 2-propenóico) [ súper-activado] con 3-1% de laurilsulfato sódico, seguido por una solución de 4% peso/peso de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) [súper-activado] en 70% de etanol, aplicado a manos antes de meterlas en guantes de cirujano, produjeron una reducción significativa del conteo bacteriano base después de 3 horas. Los resultados indican que poli (2-propenal , ácido 2-propenóico) [súper-activado] tiene una buena actividad residual antibacteriana que se requiere para el control sostenido de cantidades de bacterias en asepsia quirúrgica. La inclusión de 70% de etanol a la preparación ayuda el decremento inicial rápido de las cantidades de bacterias. Ejemplo 16 La. actividad biocida de 0.125% peso/peso y 0.05% peso/peso de polímero súper-activado contra la cepa de referencia H. pylori NCTC 11673 con pH 7 y pH 4. La eficacia in Vitro del polímero súper-activado es estableció primeramente contra la cepa de referencia H. pylori, H. pylori NCTC11637. Como variables se seleccionaron dos concentraciones; una era una dilución 40 veces de la solución de 5% del polímero súper-activado preparado en el ejemplo 2, produciendo una concentración de 0.125% peso/peso del polímero súper-activado, imitando la dilución en el estómago; la otra era una dilución de 100 veces produciendo una concentración de 0.05% peso/peso del polímero súper-activado . Se seleccionaron dos pH, pH 7 como base y pH 4 para imitar las condiciones en el estómago. Cultivos de H. pylori NCTC11637 se cultivaron en condiciones microaerófilas en placas de ágar selectivo a 37 ± 2°C hasta que se observó un crecimiento suficiente. El crecimiento se separó asépticamente de las placas y preparó como suspensión turbia estandarizada de 10% T, según se muestra en el colorímetro de Vitek, realizando la dilución con solución salina ??pp;? estéril. 19.9 g de la muestra se pesaron y se inocularon con ???µ? de suspensión de cultivo. 1 mi de la muestra se transfirió inmediatamente al caldo de desactivación/recuperación (caldo de nutrientes más 3% Tween 80) y después se diluyó en series. Alícuotas de ???µ? fueron colocadas en placas de ágar selectivo y se extendieron usando un separador estéril desechable. Las etapas de transferencia se repitieron en intervalos de tiempo de 5, 10, 15 y 20 minutos. Todas las placas se incubaron en condiciones microaerófílicas a 37 ± 2°C hasta que se había logrado suficiente crecimiento (aproximadamente 5 a 7 días) . Se contaron todas las colonias y se determinó la declinación de población sobre el tiempo. Se repitió el ensayo usando solución salina estéril normal como muestra para determinar la tasa natural de extinción en condiciones atmosféricas. Leyenda : Cultivo 1. Polímero súper-activado, pH 7.0, 0.125% peso/peso Cultivo 2. Polímero súper-activado, pH 7.0, 0.05% peso/peso Cultivo 3. Polímero súper-activado, pH 4, 0.125% peso/peso Cultivo 4. Polímero súper-activado, pH 4, 0.05% peso/peso Cultivo 5. Solución salina estéril normal, pH 7. Cultivo 6. Solución salina estéril normal, pH 4. Tabla 20 Actividad biocida de CHEMEQR™ fármaco antimicrobiano sobre H. pylori (NCTC 11637) Nota : Conteo en unidades formadoras de colonia (cfu) por mi de caldo de desactivación. Los resultados contra la cepa de referencia (tabla 20) demuestran que el polímero súper-activado era activo a pH 7 tanto con 0.125% peso/peso como a 0.05% peso/peso, y era activo también con pH 4 y 0.125% peso/peso . Ejemplo 17 En adición al ejemplo 16, tres otras cepas de H. pylori se examinaron con pH 7 y pH 4 : H. pylori 01/303, que es resistente a claritromicina y metronidazol ; H. pylori SS1, una cepa clínica aislada en Sydney con una alta capacidad colonizadora de interés para posibles modelos de animales, y H. pylori ATCC 700392, una cepa cuyo genoma se ha secuenciado y que viene del Reino Unido. Tabla 21 Actividad biocida de polímero súper-activado, 0.125% pH 7 Al ser tratado con el polímero súper-activado con 0.125% peso/peso en pH 7, todas las cepas fueron exterminadas rápidamente, siendo la cepa resistente a antibióticos particularmente vulnerable, ya que su exterminio se dio en menos de 10 minutos (tabla 21) . La cepa de control no se trató. Ejemplo 18 El método del ejemplo 3 se repitió al verificar la actividad biocida de 0.125% peso/peso polímero súper-activado (pH 4) contra todas las cepas de H. pylpri . Tabla 22 Actividad biocida de CHEMEQR™ fármaco antimicrobiano polímero a 0.125% y pH 4.

Verificando el polímero súper-activado en el estómago imitando pH de 4 y a 0.125% peso/peso dio como resultado que todas las cepas se exterminaron dentro de 20 minutos (tabla 3) . Este resultado es significativo porque este período de tiempo para matar a H. pylori es menor que el período de pasaje por el estómago (40 min - 1 hora) . Esto demuestra la efectividad del polímero súper-activado a un pH, una concentración y en el período de tiempo consistente con el tratamiento de una infección con H. pylori en el estómago. La cepa de control estaba sin tratar . Ejemplo 19 Este ejemplo demuestra la actividad antimicrobiana entérica del derivado acetal de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) preparado según el método del ejemplo 10b. Material y métodos: Dieciséis cerdos de destete (edad: 18 dias ± 2 días y peso 5.5 kg ± 1.0 kg) se adquirieron en un criadero de cerdos comercial. Se asignaron al asar en 2 grupos de 8 cerdos (distribución uniforme de sexos) y se alojaron en una casa de aislamiento de animales con ambiente controlado . Agua y alimento estaban disponibles sin restricción al entrar en la casa de animales, y la dieta consistía de croquetas para cerdos de destete comerciales libres de fármacos antimicrobianos [19% de proteína cruda]. Todos los cerdos de destete se sometieron a eutanasia mediante inyección intravenosa de barbiturato sódico y después a autopsia. Se extrajo ADN de regiones gástricas y de esófago del estómago de veinticuatro cerdos de destete durante la autopsia usando un equipo para tejido Qiagen Dneasy según las instrucciones incluidas. 3µ1 del ADN extraído se usaron para verificar la presencia de especies de Helicobacter en las muestras de tejido de la biopsia. Se realizó dos veces reacción de cadena de polimerasa (PCR) en cada muestra con siete muestras de ADN de control incluidas en cada corrida de PCR. No se encontraron discrepancias entre los PCR realizados. Resultados : Codificación de los tratamientos: Grupo 1: Ningún tratamiento (control negativo) Grupo 2: 0.1% peso/volumen de fármaco antimicrobiano polímero súper-activado según el ejemplo 10b; 30 mg/kg/día. Tabla 23 resultados de PCR de especies Helicobacter usando cebador específico del género previamente optimizado, donde + representa una detección positiva de especies de Helicobacter y - representa ninguna detección.

En grupo 1 (sin tratamiento) se presentaron cinco resultados positivos respecto a especies de Helicobacter (1 - gástrico, 4 - en el esófago) , mientras que en grupo 2 (0.1% peso/volumen de fármaco antimicrobiano polímero) no se dieron resultados positivos para el PCR. Conclusión : El derivado acetal de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) a 0.1% peso/volumen reduce de manera significativa (? : P<0.025) la incidencia de especies de Helicobacter porcino en la mucosa gástrica y esofagal en cerdos de destete. Ejemplo 20 Ejemplo comparativo 20(a) Este ejemplo muestra un método para preparar poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) no súper-activado . 0.8% peso/peso de hidróxido sódico Coloque 9.90 kg de agua desionizada en una tina de acero inoxidable de 10 1 y adicione 0.08 kg de hidróxido sódico al agua y agite hasta que se haya disuelto. Polimerización Coloque 100.1 kg de agua desionizada en una tina de acero inoxidable de 200 1 y adicione 4.99 kg de la solución de 0.8% peso/peso de hidróxido sódico a la tina de 2001. Mantenga la solución a 15 20°C. Adicione simultáneamente 20 kg de monómero de acroleína y el resto de la solución de 0.8% peso/peso de hidróxido sódico a la tina de 200 1 en porciones durante más de 1 hora de manera que el pH permanezca en 10.5 - 11.0, y la temperatura no suba por encima de 30°C. Continúe la polimerización por otros 90 minutos. Lavado Filtre/centrifugue la mezcla de polimerización y lave el polímero con agua desionizada hasta que el pH del agua de lavado sea menor de 7.0. El rendimiento aproximado es de 8 kg. Secado Seque el polímero al aire, después caliéntelo en una estufa siguiendo el siguiente esquema: etapa período temperatura 1 2 horas 25°C 2 1 hora 40°C 3 1 hora 70°C 4 1 hora 75°C 5 2 horas 85°C disolución Coloque 400 1 de agua en una tina de 500 1 y adicione 4 kg de carbonato sódico y agite hasta que esté disuelto. Adicione lentamente 8 kg de polímero seco, calentado y agite durante treinta minutos. Se verificó que el polímero obtenido tiene una solubilidad aproximada de 90 a 95% peso/peso en 1% peso/peso de carbonato sódico. " Ejemplo 20 (b) Este ejemplo describe un método para preparar un polímero de acroleína donde el polímero del ejemplo comparativo 20(a) es súper-activado Producción de la base Disuelve 0.4 kg de carbonato sódico en 30.6 kg de 7 agua en un contenedor conveniente y coloque 64 kg de polietilenglicol 200 en el recipiente para mezclar. Empieza a agitar con un agitador mecánico y caliente el PEG200 a 65 ± 3°C. Adicione 5 kg del polímero de acroleína seco del ejemplo 10a al PEG200 y agite hasta obtener una mezcla uni forme , Nota : Es posible que el sólido no se disuelva completamente en esta etapa. Adicione lentamente la solución de carbonato sódico a la mezcla de glicol en porciones que aseguren que el pH de la solución permanezca en el intervalo de 3.5 - 9.0. Agite la solución durante 45 minutas a 65 ± 3°C. Nota : El pH debería estar en el intervalo de 7-9. La temperatura debería estar en el intervalo de 65 ± 3°C. Súper-activación Cubra el recipiente para mezclar y caliente a 100°C durante cuatro (4) horas. Se encontró que el polímero resultante es miscible con agua en cualquier proporción.

Ejemplo 21 En el ejemplo 14 de PCT/AU9600328 se demostró que polímero poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) en solución de 0.5% peso/peso de carbonato sódico posee actividad anticáncer contra la línea de células de ascites de Ehrlich en un modelo de ratón. La actividad anticáncer de polímero poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) [ejemplo 20(a)] en comparación con aquella del polímero súper-activado [ejemplo 20(b)]. Un modelo in Vitro de un cáncer gastrointestinal se realizó en la línea de células de cáncer de colon humano, HT-29. Poli í 2-propenal , ácido 2-propenóico) se usó en una concentración de 5% peso/peso. El ensayo usado incuba las células de cáncer con varias concentraciones de polímero para obtener una gráfica que permite establecer un IC50. Metodología Células HT-29 (células de cáncer de colon humano) se sembraron (en 100 µ?) en pocillas de placas de cultivo de 96 pocillas y se incubaron durante la noche a 37 °C en una atmósfera húmeda con 5% de C02, 95% de aire. El polímero [polímero poli ( 2-propenal , ácido 2-propenóico) del ejemplo comparativo 20(a) y el polímero súper-activado del ejemplo 20(b)] se disolvió en agua y después se diluyó en medio a 10 concentraciones cubriendo un intervalo de 4-log. 100 µ? de cada solución se adicionó después a cada una de b pocillas. Las placas se incubaron durante otras 72 horas después de los cual se midieron células viables usando el ensayo de sulforodamina B (Skehan et al., (1990) J. Nat . Cáncer Inst. 82: 1107-1112.; Monks et al., (1991) J. Nat. Cáncer Ins. 83: 757-766.). Las células se fijaron después con 10% de ácido tricloroacético frío durante 1 hora a 4°C y las placas se enjuagaron con agua destilada, se dejaron al aire para secarse y después se tiñeron con 0.4% sulforodamina B (Aldrich) en 1% de ácido acético (volumen/volumen) durante 30 minutos. Colorante no ligado se retira después lavando dos veces con agua destilada y finalmente con 1% de ácido acético. Colorante ligado a proteína se disuelve en 10 mM de base Tris sin tampón y se toma del absorbancia a 550 nm usando un lector automático de placa. La absorbancia promedio para cada dosis de sustancia activa se expresa como porcentaje de la absorbancia de la pocilla de control sin tratar. Los resultados se muestran en la tabla 24. El polímero poli ( 2-propenal , ácido 2-propenóico) del ejemplo comparativo 20(a) produjo un IC50 promedio durante dos ensayos de 0.030%; el polímero poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) se le asignó el valor de 100%. Esto se traduce a 0.0015% peso/peso de polímero activo. El polímero súper-activado del ejemplo 20(b) produjo un IC50 promedio en cuatro ensayos de 0.025%. Esto se traduce en 0.00125% peso/peso del polímero súper-activado e indica que el polímero súper-activado tiene una activad anticáncer potente. Tabla 24 IC50- de CHEMEQR™ polímero antimicrobiano contra HT-29 células de cáncer de colon humano.

IC50 es la concentración necesaria para inhibir crecimiento celular en 50%. Finalmente, se entiende que se pueden realizar otras modificaciones y/o cambios sin desviarse del espirito de la presente invención tal como se detalla en la presente .

Claims (32)

1. REIVINDICACIONES 1. Método para el tratamiento o la prevención de enfermedades gastrointestinales en un animal (incluyendo humano) comprendiendo la administración gastrointestinal al animal de una cantidad efectiva de un polímero comprendiendo un derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) formado mediante la reacción entre un poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) y un compuesto orgánico conteniendo uno o varios grupos hidroxilos para formar grupos carbonilos protegidos.
2. 2. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque el polímero se administra oralmente.
3. 3. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque el animal sufre de al menos una enfermedad gastrointestinal seleccionado del grupo consistiendo de gastroenteritis, úlcera, diarrea y cáncer gastrointestinal y aumento de peso insuficiente promovida por disentería.
4. 4. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque el animal sufre al menos de una entre diarrea, gastroenteritis y disentería.
5. 5. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque el animal es seleccionado del grupo consistiendo de perros, cerdos, ovejas, caballos, reses, gatos, pollos, patos, pavos y codorniz.
6. 6. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque el animal es seleccionado de animales rumiantes y el polímero se administra por la vía rectal.
7. 7. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque el animal es seleccionado de pollos y cerdos.
8. 8. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque el animal es un cerdo parcialmente crecido.
9. 9. Método para el tratamiento o la prevención de colibacilosis porcina posterior al destete comprendiendo la administración oral a cerdos jóvenes después del destete de una cantidad efectiva como antimicrobiano del polímero según reivindicación 1.
10. 10. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque el derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) mencionado se administra en una dosis de 0.05 a 5000 mg/kg/día.
11. 11. Método según la reivindicación 1, caracterizado el derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) mencionado se administra en una dosis en el intervalo de 0.5 a 500 mg/kg/día .
12. 12. Método según la reivindicación 9, caracterizado porque se les administra el derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) mencionado a los cerdos jóvenes en una dosis en el intervalo de 0.05 a 50 mg/kg/día.
13. 13. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque las enfermedades gastrointestinales son causadas por uno o varios microbios seleccionados del grupo consistiendo de Coliformes , Salmonella , P. aeruginosa , Helicobacter, Proteus, Enterobacteria , levaduras , protozoarios , clostridia , Shigella y Coccidia.
14. 14. Método para el tratamiento o la prevención de enfermedades del tracto gastrointestinal causadas por infección con Helicobacter comprendiendo la administración gastrointestinal de una cantidad terapéutica de un polímero comprendiendo un derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) formado mediante reacción entre un poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) y un compuesto orgánico conteniendo grupos hidroxilos seleccionados de alcanoles, fenoles, polioles y sus mezclas, para formar grupos carbonilos protegidos.
15. 15. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque la enfermedad gastrointestinal es causada al menos por uno de E. coli y E. coli ß-hemolítico enterotoxigénicos .
16. 16. Método según la reivindicación 1 caracterizado porque se usa en el tratamiento o la prevención de enteritis necrótica en pollos comprendiendo la administración a pollos de una cantidad efectiva de derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) mencionado.
17. 17. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque el derivado poli (2-propenal , ácido 2-propenóico) mencionado se administra en combinación con otro fármaco quimioterapéutico adsorbido en este para reducir de esta manera la penetración de membrana del fármaco quimioterapéutico adicional.
18. 18. Método para el tratamiento o la prevención de coccidiosis en pollos comprendiendo la administración a pollos de una cantidad efectiva como antimicrobiano de un derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico ) formado mediante la reacción entre un poli (2-propenal , ácido 2-propenóico) y un compuesto orgánico conteniendo uno o más grupos hidroxilos para formar grupos carbonilos protegidos.
19. 19. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque el derivado comprende una multiplicidad de grupos carbonilos protegidos seleccionados de al menos un de grupos hemiacetales y acétales.
20. 20. Método según la reivindicación 19, caracterizado porque los grupos carbonilos protegidos incluyen grupos acétales .
21. 21. Método según la reivindicación 1, caracterizado porque el alcohol es seleccionado de alcanoles, fenoles, polioles y sus mezclas.
22. 22. Método según la reivindicación 21, caracterizado porque el alcohol es seleccionado de al menos un poliol.
23. 23. Método según la reivindicación 22, caracterizado porque el polio comprende un polialquilen glicol.
24. 24. Método según la reivindicación 23, caracterizado porque el poliol comprende un polietilenglicol .
25. 25. Método según la reivindicación 23, caracterizado porque el poliol es un polietilenglicol con un peso molecular de entre 200 y 2000.
26. 26. Fármaco antimicrobiano para el tratamiento o la prevención de enfermedades gastrointestinales en animales mediante la administración gastrointestinal de la composición antimicrobiana mencionada comprendiendo un poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) y un compuesto orgánico conteniendo uno o varios grupos hidroxilos para formar grupos carbonilos protegidos y un vehículo inerte farmacéuticamente o veterinariamente compatible para administración gastrointestinal a animales.
27. 27. Fármaco antimicrobiano para el tratamiento o la prevención de enfermedades gastrointestinales según la reivindicación 26, caracterizado porque el vehículo para administración gastrointestinal es seleccionado del grupo consistiendo de agua, polímeros de liberación controlada, aceite de oliva, aceite de cacahuete, aceite de sésamo, aceite de girasol, aceite de cártamo, aceite de coco, parafina líquida, etilenglicol, propilenglicol, polietilenglicol, etanol, propanol, isopropanol, glicerol, alcoholes grasos, triglicéridos, polivinil alcohol, polivinil acetatos parcialmente hidrolizadas y sus mezclas.
28. 28. Composición antimicrobiana según la reivindicación 27 en forma de un suplemento alimenticio o agua potable, siendo que el suplemento comprende entre 0.1 y 70% por peso del derivado de poli (2-propenal, ácido 2-propenóico) mencionado .
29. 29. Alimento para animales (incluyendo humanos) o composición de agua potable comprendiendo material alimenticio o agua y una cantidad efectiva como antimicrobiano de un fármaco antimicrobiano según la reivindicación 1.
30. 30. AlimenLo para animales según la reivindicación 29, caracterizado porque el fármaco antimicrobiano está presente en una cantidad de entre 0.001 a 25% por peso de la composición alimenticia de agua completa.
31. 31. Composición antimicrobiana comprendiendo un fármaco antimicrobiano según la reivindicación 26 y otro agente activo seleccionado del grupo consistiendo de agentes antimicrobianos y quimioterapéuticos .
32. 32. Composición según la reivindicación 31 caracterizada porque el fármaco antimicrobiano adicional comprende (en base a peso de la composición) al menos uno de (a) un fenol en una cantidad de 0.1 a 10%; (b) una isotiazolinona en una cantidad de 0.001 a 1%; (c) alquil parabenos en una cantidad de 0.02 a 2% y (d) alcanol de peso molecular bajo en una cantidad de 20 a 99.9%.