MXPA03001694A - Metodo para toma de muestra transdermal de acido nucleico. - Google Patents

Abstract

Un metodo para toma de muestra transdermal de acido nucleico minimamente invasivo que comprende la perforacion a traves de la capa mas externa de la piel y dentro de la epidermis subyacente con una pluralidad de microproyecciones; las celulas vivas de la piel en la epidermis subyacente se rompen, ocasionando que liberen sus contenidos incluyendo sus acido nucleicos (por ejemplo, ADN, ARN, fragmentos de los mismos u otro material de acido polinucleico encontrado en el nucleo y/o mitocondrias de las celulas); el acido nucleico se recolecta en las superficies de las microproyecciones y/o en un recipiente separado para recoleccion de acido nucleico; el acido nucleico recolectado se analiza entonces utilizando tecnicas estandares de reaccion en cadena de la polimerasa (PCR); ocasionalmente se aplica un dispositivo de succion que aplica un vacio parcial a traves de las aberturas en el miembro de microproyeccion de los microcortes en la piel para mejorar el deflujo de los fluidos intracelulares y extracelulares (por ejemplo, del cuerpo) que contienen el acido nucleico.

Description

METODO PARA TOMA DE MUESTRA TRANSDERMAL DE ACIDO NUCLEICO CAMPO DE LA INVENCION La presente invención se refiere a la toma de muestras de ácidos nucleicos (por ejemplo, ADN o ARN). Más particularmente, esta invención se refiere a la toma de muestra transdermal de ácido nucleico. La presente invención utiliza microproyecciones que perforan la piel para perforar las células de la piel y producir la toma de muestra transdermal de ácido nucleico.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION La evaluación del ADN actualmente se lleva a cabo mediante toma de muestras sanguínea o raspado tisular seguido por amplificación del ADN utilizando la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) y luego analizando el ADN amplificado. La toma de muestra sanguínea utilizando una jeringa es invasiva y dolorosa. El raspado tisular es inconveniente y desagradable para muchos pacientes. Un procedimiento común para la toma de muestra del ADN utiliza muestras de tejido de mucosa bucal obtenidas mediante la rotación vigorosa de cepillos para obtención de células a lo largo de la parte interior de la mejilla por aproximadamente 30 segundos.

Se han hecho muchos intentos para mejorar el flujo transdermal mediante la punción mecánica de la piel antes de la administración del fármaco transdermal. Véase por ejemplo las Patentes de E.U.A. Nos. 5, 279, 544 expedida a Gross et al., 5, 250, 023 expedida a Lee et al., y 3, 964, 482 expedida a Gerstel et al. Estos dispositivos utilizan microproyecciones sólidas y huecas para perforar la capa externa de la piel. Han habido algunos intentos para tomar muestras de analitos del cuerpo (por ejemplo, glucosa) contenidos en el fluido intersticial utilizando dispositivos que tienen microproyecciones similares a perforadores de la piel. El contenido del analito en el fluido intestinal se correlaciona entonces con el de la sangre. Véase por ejemplo, Cormier et al., O 97/48441 ; Joseph, Patente de E.U.A. 5, 161 , 532; Erickson et al., Patente de E.U.A. 5, 582, 184; Brinda, Patente de E.U.A. 5, 682, 233; Erickson et al., Patente de E.U.A. 5, 746, 217 y Erickson et al., Patente de E.U.A. 5, 820, 570. Daddona et al., Patente de E.U.A. 6, 091 , 975 provee un dispositivo diagnóstico que tiene microproyecciones que perforan el estrato córneo. Los sensores electroquímicos se colocan directamente sobre las microproyecciones para evaluar/medir la concentración de analito en el cuerpo tal como la concentración de glucosa en la sangre. Una de las ventajas de la toma de muestra del fluido intersticial es que la herida creada en la piel no es tan profunda como la herida necesaria para la toma de muestra sanguínea. Por lo tanto, la toma de muestra del fluido intersticial utilizando dichas microproyecciones que perforan el estrato córneo, se considera generalmente menos invasiva que la toma de muestra sanguínea. Sin embargo, aún hay la necesidad para toma de muestra menos invasiva de ácidos nucleicos para los propósitos de la evaluación genética (por ejemplo, prueba de paternidad, coincidencia de muestras de sangre/semen con individuos en el trabajo detectivesco policíaco/criminal), diagnósticos médicos (por ejemplo, selección de pacientes para la presencia de una enfermedad y/o para predisposición hacia una enfermedad tal como enfermedad cardiaca), y las similares.

BREVE DESCRIPCION DE LA INVENCION La presente invención provee un método para toma de muestra transdermal de ADN utilizando un dispositivo de bajo costo, con un elevado volumen de producción, reproducible. La invención comprende perforar a través de la capa más externa (por ejemplo, la capa del estrato córneo) de la piel y dentro de la capa subyacente de epidermis, o dentro tanto de la epidermis como de las capas de dermis, con una pluralidad de microproyecciones. Las células individuales de la piel dentro de las capas de epidermis/dermis son perforadas, ocasionando que los contenidos celulares, incluyendo los núcleos de las células y sus ácidos nucleicos, sean liberados. Los ácidos nucleicos se revisten sobre la superficie de las microproyecciones y/o se absorben en un revestimiento absorbente sobre las microproyecciones.

Típicamente las microproyecciones tienen una longitud de menos de aproximadamente 0.4 mm y un grosor y anchura que incluso es más pequeño. El método de la presente invención también puede ser utilizado para extraer y tomar muestras de ácidos nucleicos liberados dentro del fluido intersticial de la piel. Como se mencionó anteriormente, la capa más externa del estrato córneo de la piel es perforada para formar rutas a través de las cuales el fluido intersticial, que contiene los ácidos nucleicos, es retirado (es decir, toma de muestra). Opcionalmente, el dispositivo de toma de muestra utilizado con esta modalidad de la presente invención puede aplicar un vacío parcial (también referido aquí como "presión negativa") a la piel microcortada. La presión negativa ocasiona que el fluido intersticial excluya a partir de los microcortes. El fluido intersticial se recolecta, los ácidos nucleicos contenidos en él se amplifican utilizando técnicas estándares de reacción en cadena de la polimerasa (PCR), y luego los ácidos nucleicos amplificados son analizados. En un aspecto de la invención, el dispositivo para perforar la piel comprende una lámina que tienen una pluralidad de aberturas a lo largo de ésta, y una pluralidad de microproyecciones integrales a ésta y que se extienden hacia atrás (por ejemplo, en una dirección hacia la piel) a partir de ésta. El dispositivo opcional impulsado por presión negativa aplica un vacío parcial (por ejemplo, succión) a los microcortes a través de las aberturas en la lámina. En otro aspecto de la invención, se provee el uso de un dispositivo para perforar la capa del estrato córneo de la piel para propósitos de análisis de ácidos nucleicos en un animal. El uso incluye perforar a través de la capa de la piel del estrato córneo dentro de al menos una capa subyacente de epidermis con una microproyecciones perforadoras de la piel y rompiendo o separando células de la piel que contienen ácidos nucleicos. El ácidos nucleicos a partir de las células de la piel rotas o separadas se recolecta y luego se analiza.

BREVE DESCRIPCION DE LOS DIBUJOS La figura 1 es una vista en perspectiva ampliada del lado proximal a la piel del dispositivo del arreglo de microproyección de conformidad con una modalidad de la presente invención; La figura 2 es una vista en plano superior parcial de un patrón de arreglo de microproyección de conformidad con una modalidad de la presente invención; La figura 3 es una vista en sección lateral de un arreglo de microproyección para toma de muestra de ADN mantenido en su lugar sobre la piel con una cubierta adhesiva; y La figura 4 es una vista lateral de un dispositivo opcional impulsado por presión negativa con un arreglo para toma de muestra de ADN en microproyección que se muestra en la sección.

MODALIDADES PREFERIDAS DE LA INVENCION La presente invención provee un método sin sangrado y sin dolor para obtener una muestra de ácido nucleico a partir de la piel. Como se utiliza aquí, el término "ácido(s) nucleico(s)" se utiliza ampliamente para incluir el ADN (por ejemplo, ácido desoxirribonucleico), fragmentos de ADN, ARN (ácido rribonucleico), fragmentos de ARN, cromosomas, genes, y cualquier otra secuencia de ácido polinucléico, o porciones de los mismos, encontrados en los núcleos y/o mitocondrias de las células. La piel es perforada con al menos una, preferiblemente una pluralidad y más preferiblemente una multiplicidad de, microproyecciones diminutas que perforan el estrato córneo. A pesar de que la presente Invención no se limita a las microproyecciones de ningún tamaño, forma o configuración, con el objeto de hacer la toma de muestra indolora y sin sangrado, las microproyecciones deben perforar la piel a una profundidad de aproximadamente 25 µp? a aproximadamente 400 µ?t?, y preferiblemente a una profundidad de aproximadamente 50 µ?? a aproximadamente 300 µ??. La perforación a esta profundidad con una pluralidad de microproyecciones asegura poco sangrado, si es que lo hay, sensación poco significativa (dolor) y además asegura que las navajas penetrarán a través de la capa de células muertas más externa del estrato córneo y dentro de la capa de epidermis, o dentro tanto de las capas de la epidermis como de la dermis, la cual contiene células vivas de la piel. La perforación se puede lograr mediante el impacto de las microproyecciones en contra de la superficie de la piel utilizando dispositivo del tipo descrito en las figuras 22 y 23 de Trautman et al., WO 01/41863 o utilizando un dispositivo convencional cargado con un resorte del tipo utilizado para impulsar una lanceta dentro de la piel para toma de muestra de gota de sangre. Después de perforar dentro de la capa epidémica, las microproyecciones, las cuales típicamente son largas en relación con el diámetro típico de 20 µ?? de las células vivas de la piel epidémica, perforará y/o separará varias células de la piel en la capa epidémica, o tanto en las capas epidémica como dérmica, ocasionando que aquellas células liberen sus contenidos. Esto ocasiona que los núcleos de las células de la piel, y/o los ácidos nucleicos originalmente contenidos en los núcleos de las células de la piel, sean liberados hacia el fluido extracelular de la piel (también denominado fluido intersticial). Este fluido corporal es revestido sobre la superficie de las microproyecciones perforadoras de la piel o absorbido en un revestimiento absorbente sobre las microproyecciones. Como un resultado, los ácidos nucleicos de las células se revisten o absorben sobre las microproyecciones perforadoras de la piel. Las microproyecciones perforadoras de la piel típicamente se elaboran a partir de ya sea metal, plástico o silicón, cualesquiera de dichos materiales pueden ser revestidos adecuadamente con fluidos corporales intracelulares (a partir de las células rotas de la piel) y extracelulares, incluyendo los ácidos nucleicos de las células rotas. Una vez que los fluidos que contienen el ácido nucleico son revestidos sobre la superficie de las microproyecciones, las microproyecciones son removidas a partir de la piel, y el ácido nucleico se recolecta para amplificación por PCR y análisis posterior. Con las microproyecciones típicas basadas en metal, plástico o silicón, la muestra de ácido nucleico puede simplemente ser recolectada mediante inmersión/incubación de la microproyecciones en agua estéril, opcionalmente con agentes tensioactivos, reguladores de pH y proteasas. El gen(es) blanco en la solución que contiene el ADN y/o ARN se amplifica utilizando técnicas conocidas de reacción en cadena de la polimerasa. Estas técnicas se describen por ejemplo en Saiki, et al., Primerdirected Enzymatic Amplif ¡catión of DNA with a Thermostable DNA Polymerase, Science, 239, 487, 1988. Después de la amplificación del gen(es) blanco, el análisis se lleva a cabo utilizando técnicas estándares de análisis del ADN, tales como aquellas descritas en Saiki, et al., Analysis of Enzymatically Amplified Beta-globin and HLA-DQA1 with Alíele Specific Oligonucleotide Probes, Nature, 324, 163, 1986. Regresando a los dibujos en detalle, un ejemplo de un dispositivo de arreglo de microproyección perforadora de la piel 2 para la toma de muestra de ácido nucleico de conformidad con la presente invención se muestra generalmente en la figura 1. El dispositivo 2 comprende una pluralidad de microproyecciones 4 (por ejemplo, un arreglo de microproyección) que se extiende hacia atrás a partir de una superficie de una lámina o placa 6 (véase figura 1 en la que el dispositivo 2 está en posición invertida para mostrar las microproyecciones). Las microproyecciones 4 penetrarán a través de la capa del estrato córneo y al menos dentro de la capa de la epidermis de la piel cuando el dispositivo se presiona en contra de la piel para tomar una muestra de ácido nucleico de la misma. El término "piel" como se utiliza aquí se refiere a la piel de un animal vivo o muerto, particularmente un humano, pero específicamente excluye las membranas mucosales (por ejemplo, la mucosa de la boca). El dispositivo 2 preferiblemente tiene una densidad de microproyección de al menos aproximadamente 10 microproyecciones/cm2 y más preferiblemente de al menos aproximadamente 50 microproyecciones/cm2. De manera similar, el número de aberturas por unidad de área de la placa típicamente es de al menos aproximadamente 10 aberturas/cm2 y más típicamente de al menos aproximadamente 100 aberturas/cm2. Las microproyecciones 4 pueden formarse utilizando un proceso de grabado por luz, el cual se describe en Cormier et al., WO 97/48440, las descripciones del cual se incorporan aquí como referencia. Este proceso permite que las microproyecciones 4 se formen de manera reproducible a una escala muy pequeña (por ejemplo, décimas de mieras). La pluralidad de microproyecciones 4 para perforar el estrato córneo están presentes en una cara superficial 48 del dispositivo 2 en cualquier arreglo predeterminado, por ejemplo, como una agrupación de microproyecciones espaciadas en hileras que tienen un número deseado, o en cualquier relación espaciada aparte de una microproyección con respecto a otra microproyección. El dispositivo 2 de la modalidad mostrada en la figura 1 se produce por el patrón mostrado en la figura 2. Cada microproyección tiene un grosor y anchura que facilita la penetración del estrato córneo sin sangrado. La longitud requerida de la microproyección se somete a la variación de la piel a ser penetrada y corresponde al grosor natural del estrato córneo, para una de las características principales de la invención es que las microproyecciones son para penetrar el estrato córneo hacia dentro de la epidermis. Otro factor que afecta a la longitud de la microproyección, es el método de aplicación de la microproyección, puesto que las microproyecciones frecuentemente no penetran la piel a una profundidad igual a la longitud de la microproyección debido a las propiedades elásticas de la piel del animal vivo. Usualmente, las microproyecciones serán de aproximadamente 25 µ?? a aproximadamente 500 µ?? en longitud, con la longitud más típicamente siendo entre aproximadamente 100 µ?t? a aproximadamente 450 µ?t?. El patrón para cualquiera de los dispositivos de arreglo de microproyecciones utilizados en la presente invención puede producirse con un proceso de grabado por luz. Una lámina delgada o placa 6 de metal tal como acero inoxidable o titanio es grabada de manera foto- litográficamente con patrones que contienen estructuras semejantes a micronavajas. En general, un laminado delgado resistente a la sequedad o resistente a la humedad se aplica sobre una lámina de aproximadamente 7 µp? a aproximadamente 100 µ?t? de grosor, preferiblemente de aproximadamente 25 µ?? a aproximadamente 50 µ?? de grosor. La resistencia se expone al contacto utilizando una máscara que tiene un patrón deseado y subsecuentemente se desarrolla. Estas operaciones se llevan a cabo en gran parte de la misma manera que se hace para la elaboración de un tablero de circuito impreso. La lámina se graba entonces utilizando soluciones ácidas. Después de que el patrón ha sido grabado a través de la lámina, la lámina se coloca sobre un dado que tiene una pluralidad de aberturas que corresponden a las aberturas 8 en la lámina. Un punzón que tiene una pluralidad de protrusiones que corresponden a las aberturas en la lámina y el dado se localiza inicialmente por arriba de la lámina y del dado. A la etapa inicial, las microprotrusiones 4 están en el mismo plano que el resto de la lámina 6. Las protrusiones sobre ei punzón se presionan entonces dentro de las aberturas, doblando las microproyecciones 4 hacia atrás para que estén en ángulo (por ejemplo, substancialmente perpendiculares) al plano de la lámina 6 como se muestra en la figura 1. Generalmente, las microproyecciones 4 están a un ángulo de aproximadamente 90° con respecto a la superficie 48 de la lámina 6 después de haber sido perforada, pero pueden disponerse en otros ángulos hacia adelante o hacia atrás de la posición perpendicular siempre y cuando se logre la penetración del estrato córneo. Otra modalidad de la presente invención extrae los fluidos ¡ntracelulares y extracelulares que contienen ADN a partir de los microcortes formados por las microproyecciones perforadoras de la piel, en donde el fluido se extrae con un dispositivo que aplica un vacío parcial a la superficie de la piel. Con referencia ahora a la figura 4, se muestra un dispositivo 10 que aplica presión negativa que tiene un dispositivo de arreglo de microproyección 2 en el lado proximal a la piel del dispositivo 10. El dispositivo 10 y el dispositivo 2, en combinación, se utilizan para la toma de muestra transdermal del fluido intersticial que contiene ácidos nucleicos liberados a partir de las células de la piel que son perforadas o separadas por las microproyecciones perforadoras de la piel. El dispositivo 10 es un dispositivo conocido que aplica presión negativa (por ejemplo, succión) tal como aquel descrito en Ishibashi, Patente de E.U.A. 5, 320, 607, las descripciones del cual se incorporan aquí como referencias. El dispositivo 10 se monta sobre la superficie del dispositivo distal a la piel 2. El lado del dispositivo proximal a la piel 2 se pone en contacto con la superficie de la piel 20, con las microproyecciones 4 que se extienden al menos a través de la capa del estrato córneo de la piel 20. Mediante un sellado apropiado del dispositivo 10 en contra del lado del dispositivo distal a la piel 2, la presión negativa que se aplica por el dispositivo 10 ocasiona succión que se aplica a través de las aberturas 8 en la lámina 6. De esta manera, el fluido intersticial que contiene ácido nucleico se extrae fuera de los microcortes cortados en la piel 20 y se acarrea hacia el dispositivo 10. Aunque se prefiere utilizar un arreglo de microproyección no revestido hecho de un metal estéril tal como acero inoxidable o titanio, es posible revestir las microproyecciones 4 y/o el lado de la placa proximal a la piel 6 con un revestimiento delgado de un material absorbente del fluido, el cual puede absorber y mantener los fluidos que contienen ácido nucleico después de perforar el estrato córneo. También es posible utilizar una capa de transferencia/recepción del ácido nucleico que reviste el lado de la placa proximal a la piel 6. Dichas capas de transferencia/recepción se describen en Theeuwes, et al., WO 98/28037, las descripciones de la cual se incorporan aquí como referencias. La propiedad principal de barrera de la piel, tal como la resistencia al eflujo del ácido nucleico, reside primero en las paredes de las células individuales de la piel. Por lo tanto, las microproyecciones en el dispositivo 2 deben ser calibradas, conformadas y configuradas para perforar a través de la capa del estrato córneo y romper las paredes celulares de las células vivas de la piel en la capa de la piel justo por debajo de la capa del estrato córneo, sin perforar los lechos de capilares dentro de la piel para evitar un sangrado significativo. Segundo, las microproyecciones deben crear aberturas (por ejemplo, microcortes) en el estrato córneo particularmente para aquellas modalidades que recaen en la recolección del ácido nucleico liberado de las células de la piel hacia el fluido intersticial. Debido a que los fluidos intracelulares y extracelulares que contienen ácido nucleico revisten las proyecciones perforadoras de la piel substancialmente de manera instantánea conforme las microproyecciones perforan la piel, no hay necesidad de mantener al arreglo de microproyección anclado o unido de alguna otra manera a la piel por ningún lapso de tiempo apreciable. Por lo tanto, es posible, aunque no es necesario, proveer una cubierta adhesiva convencional para mantener el arreglo de microproyección unido a la piel por un corto periodo de tiempo. Un ejemplo de dicho sistema se describe en la figura 3 con una cubierta adhesiva periférica 3 que mantiene el dispositivo 2 en relación de perforación con la piel 20. En cualquier evento, el arreglo de microproyección debe preferiblemente ser esterilizado previamente para evitar cualquier contaminación cruzada posible, por ejemplo, mediante la toma de tejido o de otro material que contiene ácido nucleico a partir de una fuente diferente a la del sujeto evaluado. Más preferiblemente, el arreglo de microproyección y cualquier dispositivo utilizado para aplicar el arreglo de microproyección a la piel se elabora como un dispositivo desechable de un solo uso el cual se esteriliza y se coloca en un empaque sellado antes de su uso. La lámina y las microproyecciones se pueden elaborar a partir de materiales que tienen suficiente firmeza y capacidad de manufactura para producir microproyecciones, tales como, vidrios, cerámicas, polímeros rígidos, metales y aleaciones de metal. Los ejemplos de metales y de aleaciones de metal incluyen pero no se limitan a titanio, acero inoxidable, hierro, acero, estaño, zinc, cobre, platino, aluminio, germanio, níquel, circonio, y aleaciones de titanio que consisten de níquel, molibdeno y cromo, metales enchapados con níquel, oro, radio, iridio, titanio, platino, y los similares. Los ejemplos de vidrios incluyen silicón y vidrio devitrificado tal como "Photoceram" disponible a partir de Corning in Corning, NY. Los ejemplos de polímeros rígidos incluyen pero no se limitan a poliestireno, polimetilmetacrilato, polipropileno, polietileno, "Bakelite", acetato de celulosa, etilcelulosa, copolímeros de estireno/acrilonitrilo, copolímeros de estirenbutadieno, copolímeros de acrilonitrilo/butadieno/estireno (ABS), cloruro de polivinilo y polímeros de ácido acrílico incluyendo poliacrilatos y polimetacrilatos. Más preferiblemente, la lámina y las proyecciones se elaboran de titanio o de acero inoxidable. El número de micronavajas y de aberturas de cualesquiera de las modalidades del dispositivo 2 es variable con respecto al tamaño de muestra de ADN deseado y si se utiliza o no un dispositivo para muestra que se impulsa por presión negativa, y otros factores que serán evidentes a un experto en la técnica. Los siguientes ejemplos ilustran los usos y ventajas de la presente invención.

EJEMPLO 1 Se llevaron a cabo estudios en dos hermanos y en cuatro individuos no relacionados. En cada sujeto, el sitio para tratamiento (antebrazo ventral) se limpió con una almohadilla con alcohol ¡sopropílico estéril al 70%. El sitio de la piel se secó entonces con una almohadilla de gasa estéril. La piel se perforó al ¡mpactar un dispositivo de microproyección en contra de la superficie de la piel utilizando un aplicador cargado con un resorte. El dispositivo de microproyección incluye un arreglo de microproyección con forma de disco de 1 cm2 que tiene microproyecciones con una longitud de 200 µ?? y a una densidad de 320 microproyecciones/cm2, adheridas a un refuerzo de polietileno de baja densidad con adhesivo de poliisobutileno. Después de la aplicación, el sistema se removió inmediatamente con fórceps estériles y se transfirió dentro de un vial estéril y se almacenó en congelación (-20°C) hasta su análisis. En los mismos sujetos, se obtuvieron muestras adicionales de ADN mediante raspado del interior de la mejilla por 30 segundos con un cepillo para células el cual se transfirió inmediatamente dentro de un vial estéril y se almacenó por congelación (-20°C) hasta su análisis. Para los análisis, los viales se enviaron a un laboratorio contratado especializado en perfilamiento del ADN. El ADN se extrajo utilizando procedimientos estándares. Los polimorfismos del gen DQA1 se evaluaron mediante PCR y con el procedimiento de hibridación reversa en dot blot. Los resultados demuestran que los dos hermanos están de hecho relacionados mientras que los individuos remanentes no están relacionados. Resultados idénticos se obtuvieron con los cepillos para células. Esto resultados demuestran la validez del nuevo método para muestreado de ácido nucleico. Las aplicaciones incluyen análisis forenses, análisis de paternidad, pruebas genéticas para predisposición de enfermedades genéticas y detección de enfermedades infecciosas. A pesar de que invención ha sido descrita en conjunción con las modalidades específicas preferidas de la misma, se debe entender que la descripción precedente así como el ejemplo se pretenden para ilustrar y no limitan el alcance de la invención. Otros aspectos, ventajas y modificaciones dentro del alcance de la invención serán evidentes a aquellos expertos en la técnica a los cuales pertenece la invención.

Claims (1)

1. NOVEDAD DE LA INVENCION REIVINDICACIONES 1.- Un método para toma de muestra transdermal de ácido nucleico que comprende: perforar a través de la capa de la piel del estrato córneo (20) dentro de al menos una capa subyacente de epidermis con una microproyección perforadora de la piel (4) y rompiendo o separando las células de la piel que contienen ácido nucleico; recolectar el ácido nucleico a partir de las células de la piel rotas o separadas; y analizar el ácido nucleico. 2.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el paso de recolección comprende revestir la microproyección (4) con fluido corporal que contiene ácido nucleico y retirar la microproyección (4) a partir de la piel (20). 3.- El método de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado además porque incluye la absorción del fluido corporal en un material absorbente que reviste la microproyección (4). 4.- El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el paso de recolección comprende recolectar el ácido nucleico liberado a partir de las células de la piel rotas o separadas dentro del fluido corporal mediante la aplicación de presión negativa a la piel perforada (20). 5. - El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque la microproyección (4) perfora la piel (20) a una profundidad en menos de aproximadamente 500 µ??. 6. - El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado además porque incluye la perforación de la piel (20) con una pluralidad de microproyecciones (4). 7. - El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado además porque incluye la perforación de la piel (20) con una multiplicidad de microproyecciones (4). 8.- El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado además porque las microproyecciones (4) perforan la piel (20) a una profundidad de al menos aproximadamente 25 µ??. 9. - El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado además porque las microproyecciones (4) perforan la piel (20) a una densidad de al menos aproximadamente 10 microproyecciones/cm2. 10. - El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado además porque el ácido nucleico se recolecta en las superficies de las microproyecciones (4). 11. - El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el ácido nucleico se recolecta en una matriz absorbente. 12. - El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el ácido nucleico se analiza mediante ensayo de reacción en cadena de la polimerasa. 13. - El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque la piel (20) es la piel de un humano. 14. - El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque el ácido nucleico se selecciona a partir del grupo que consiste de ADN, fragmentos de ADN, ARN, fragmentos de ARN, genes, cromosomas, y secuencia de ácido polinucleico. 5.- El uso de un dispositivo (6) para perforar la capa del estrato córneo de la piel (20) para analizar ácido nucleico de un animal mediante perforación a través de la capa del estrato córneo de la piel (20) dentro de al menos una capa epidérmica subyacente con una microproyección para perforación de la piel (4) y rompiendo o separando las células de la piel que contienen ácido nucleico; recolectar el ácido nucleico a partir de las células de la piel rotas o separadas; y analizar el ácido nucleico. 16. - El uso como se reclama en la reivindicación 5, en donde la recolección del ácido nucleico comprende el revestimiento de la microproyección (4) con fluido corporal que contiene ácido nucleico y retiro de la microproyección (4) a partir de la piel (20). 17. - El uso como se reclama en la reivindicación 16, que incluye la absorción del fluido corporal en un material absorbente que reviste la microproyección (4). 18. - El uso como se reclama en la reivindicación 15, en donde la recolección del ácido nucleico comprende la recolección de un fluido corporal que contiene el ácido nucleico liberado a partir de las células rotas o separadas mediante la aplicación de presión negativa a la piel perforada (20). 19. - El uso como se reclama en la reivindicación 15, en donde la microproyección (4) perfora la piel (20) a una profundidad de menos de aproximadamente 500 µp?. 20. - El uso como se reclama en la reivindicación 15, que incluye la perforación de la piel (20) con una pluralidad de microproyecciones (4). 21. - El uso como se reclama en la reivindicación 20, que incluye perforación de la piel (20) con una multiplicidad de microproyecciones (4). 22. - El uso como se reclama en la reivindicación 20, en donde las microproyecciones (4) perforan la piel (20) a una profundidad de al menos aproximadamente 25 µ??. 23. - El uso como se reclama la reivindicación 20, en donde las microproyecciones (4) perforan la piel (20) a una densidad de al menos aproximadamente 10 microproyecciones/cm2. 24. - El uso como se reclama en la reivindicación 20, en donde el ácido nucleico se recolecta en las superficies de las microproyecciones (4). 25. - El uso como se reclama en la reivindicación 15, en donde el ácido nucleico se recolecta en una matriz absorbente. 26. - El uso como se reclama la reivindicación 15, en donde el ácido nucleico se selecciona a partir del grupo que consiste de ADN, fragmentos de ADN, ARN, fragmentos de ARN, genes, cromosomas, y secuencia de ácido polinucléico.