MX2013002005A

MX2013002005A - Dispositivo de fosfolipidos.

Info

Publication number: MX2013002005A
Application number: MX2013002005A
Authority: MX
Inventors: Chen Hailiang; Xian Chen Andrew; Surakanti Dushyanth; Okumu Franklin
Original assignee: Reddys Lab Ltd Dr
Priority date: 2010-08-20
Filing date: 2010-12-17
Publication date: 2013-06-24
Also published as: CA2809022A1; RU2013112353A; US20150306173A1; US9522169B2; US20170056326A1; AU2010359346B2; AU2010359346A1; US9132144B2; CN103179951A; KR101793101B1; JP2013534244A; ZA201301833B; RU2595865C2; KR20130112870A; US20170246109A1; JP5752248B2; MX366099B; EP2605751A1; CA2809022C; NZ608210A

Abstract

La presente invención proporciona un depósito transparente que comprende al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofílico seleccionado del grupo que consiste de varicomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y una mezcla del mismo, agua, un fosfolípido, un aceite, opcionalmente un agente que ajusta el pH, y un agente que modifica la viscosidad seleccionado del grupo que consiste de etanol, isopropanol, y una mezcla de los mismos, en donde el agua presente en el depósito no es más de alrededor de 4% en peso con relación al peso total del depósito y el depósito tiene un pH de entre alrededor de 3 y alrededor de 6, método para hacer y administrar el mismo.

Description

DEPÓSITO DE FOSFOLÍPIDOS CAMPO DE LA INVENCIÓN La invención se refiere a un depósito transparente que comprende al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofilico, y un método para hacer y administrar el mismo.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Un depósito es una manera de administrar un ingrediente activo en el cuerpo de un paciente para acción sistémica o local. Generalmente se administra por inyección subcutánea o intramuscular o instilación en otros tejidos, vasos o cavidades del cuerpo- un depósito también puede aplicarse a una herida antes de que se contenga, sea cosida, vendada o cerrada de otra manera. Al contrario de los depósitos removibles, los depósitos biodegradables se desintegran o degradan dentro de un tiempo pre-definido, típicamente después de que se ha suministrado el ingrediente farmacéutico activo atrapado. En otros constructos, el depósito inyectable biodegradable libera su ingrediente farmacéutico activo más a menos al mismo tiempo con, o como una función de, su degradación gradual. Una ventaja clave de ciertos depósitos de suministro biodegradables es su capacidad para suministrar medicamento directamente al sitio de acción pretendido proporcionando concentraciones. locales elevadas de medicamento cuando se compara con niveles sistémicos.

Los depósitos también pueden modular el suministro de medicamento para permitir varios perfiles de liberación. El perfil de liberación pudiera ser liberación inmediata (explosión) seguido por un estado estable, puede ser, entre otros, de "orden cero" o relación constante de suministro, puede proporcionar un aumento lento hasta estado estable, o puede aún proporcionarse para una liberación prolongada. Además, los depósitos tienen la. ventaja de permitir la liberación durante ün periodo de tiempo extendido, con una administración sencilla. Los niveles sanguíneos no se comprometen, por ejemplo, por asuntos de cumplimiento del paciente.

Los depósitos pueden comprender sistemas en partículas tales como depósitos basados en microesferas y depósitos basados en nanoesferas, o pueden también comprender un gel biodegradable, hecho típicamente de formadores de matriz soluble (polímeros, lípidos, carbohidratos) y ya sea un solvente orgánico o una mezcla de. solventes miscibles y no miscibles en agua.

Los fosfolípidos se han usado para preparar depósitos que comprenden un agente farmacológico activo lipofílico. Los fosfolípidos son solubles en aceites o solventes orgánicos pero insolubles en agua. Para formar un depósito, se requiere a menudo una alta concentración de fosfolípidos formadores de depósito. Esto puede impactar el volumen y viscosidad del depósito resultante y, en consecuencia, los depósitos actualmente disponibles pueden ser muy difíciles de inyectarse a través de una ajuga o jeringa convencionales. Las referencias que describen formulaciones basadas en fosfolípidos incluyen WO -89/00077, WO 02/32395,' EP 0282405 y Patentes de E.U.A. Nos. 5,863,549, 4,252,793, 5,660,854, 5,693,337, y ang et ' al., Lyophilization Of Water-In-Oil Emulsions To Prepare Phospholipid-Based Anhydrous Reverse Micelles For Oral Peptide Delivery, 39 European Journal of Pharmaceutical Sciences, en 373-79 (2010) .

La vancomicina es un antibiótico glicopéptido usado en la profilaxis y tratamiento de infecciones causadas por la bacteria Gram positiva. Generalmente es · el fármaco de elección para infecciones serias y endocarditis causada por S. aureus, estafilococos negativos en coagulasa, neumonía por estreptococos, estreptococos ß-hemolíticos, grupo JK de corinebacterias , estreptococos viridans, o enterococos cuando los ß-lactamos no se usan debido a la alergia o resistencia al fármaco. La vancomicina puede combinarse con otros antimicrobianos cuándo se trata, ínter alia, endocarditis de válvula de prótesis por estafilococos negativa en coagulasa con resistencia a meticilina, y endocarditis por enterococos . También se ha usado como un agente alternativo para meningitis por neumococo causada por cepas con sensibilidad a penicilina reducida. La vancomicina se ha usado en cirugía cardiaca y vascular para prevenir la infección post-quirúrgica. ver Rybak et al., Vancomicina Therapeutic Guidelines : A Summary of Consensúe Recommendations From The Infectíous Diseases Society of America, The American Society Of Health-System Pharmacists, y The Society Of Infectious Disease Pharmacists, CID 2009:49 (1 agosto), pg. 325.

La gentamicina es un antibiótico de aminoglicósido usado para tratar muchos tipos de infecciones bacterianas particularmente aquellas causadas por bacterias Gram negativas susceptibles. Se ha usado en un escenario quirúrgico debido a que actúa contra patógenos tales como pseudomonas aeroginosa y escherichía coli. La gentamicina se ha usado en otras aplicaciones quirúrgicas (por ejemplo, en compuesto con cemento óseo en escenarios ortopédicos). La gentamicina impregnada con implante de colágeno biodegradable (esponja) se está usando actualmente en varios mercados fuera de los E.U.A. para la prevención de infección al sitio quirúrgico (SSI, por sus siglas en inglés) . Sin embargo, dos estudios de fase III centrales grandes muestran una incidencia más alta de SSI en. pacientes que reciben la esponja de gentamicina ¦ (cirugía colorrectal) y no hay diferencia en la incidencia de SSI vs . Estándar de cuidado (cirugías cardiotoráxi'cas) . Ver generalmente, E. Bennett-Guerrero, NEJM, 2010, 1-10; y E. Bennett-Guerrero, JAMA, 18 agosto, 2010, 755- 762.

Tanto la vancomicina como la gentamicina son antibióticos muy hidrofílieos . También ambos son difíciles de formular en depósitos inyectables con base en fosfolípidos u otras formulaciones con alto contenido de fase aceitosa, ya que no están libremente solubles en fosfolipido o aceite.

Además, al conducir una serie de pruebas de estabilidad, se ha encontrado ahora que la vancomicina pierde su estabilidad a través de la hidrólisis mientras que la gentamicina se degrada debido a la oxidación o formación de aducto. De esta manera, las formulaciones que contienen ya sea uno de los activos son generalmente sensibles a estas condiciones. Por otro lado, tanto la vancomicina como la gentamicina son sensibles al calor y no se esterilizan usando calor, tal como por autoclave o radiación gamma.

En consecuencia, intentar formular un depósito que comprenda vancomicina, gentamicina o ambos junto con un fosfolipido y aceite proporciona muchos desafíos prácticos. Uno de tales atributos incluye que la formulación no debe presentar alta viscosidad ya que la formulación tiene que esterilizarse por filtrado a través de una membrana de esterilización, tal como una que tiene poros de alrededor de 0.2 mieras o menos. También se mantienen ciertos problemas dicotómicos. Por ejemplos, estos dos activos-, particulares tienen problemas de compatibilidad con los fosfolipidos que, igual que la viscosidad, sugiere una necesidad para mantener bajo el contenido de fosfolipido. Sin embargo, la necesidad de una formación de gel coherente y cohesiva y características de liberación apropiadas sugiere justo lo contrario .

En consecuencia, queda una necesidad largamente sentida por depósitos de fosfolipidos estables al almacenamiento que contengan vancomicina, gentamicina, una sal farmacéutica de la misma o una mezcla de la misma que pueda administrarse por inyección subcutánea o intramuscular, por inyección! intrainsicional o colocada en herida quirúrgica u otros' tejidos, vasos o cavidades corporales.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN Un aspecto de la presente invención proporciona un proceso para hacer un. depósito que comprende al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofílico que comprende: (1) mezclar al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua- hidrofilico seleccionado del grupo que . consiste de vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma y una mezcla de la misma, agua, un fosfolipido, y un aceite para formar una "emulsión" aceite en agua; (2) homogenizar la emulsión para obtener una "emulsión primaria"; (3) microfl-uidizar . la emulsión primaria para obtener una "solución monofásica", (4) asegurar que el pH de la emulsión primaria y/o la solución monofásica esté entre alrededor de 3 hasta alrededor de 6, y en una modalidad, desde alrededor de 3 hasta alrededor de 5, y en otra modalidad, desde alrededor de 3 hasta alrededor de 4 al ajustar el pH como sea necesario, (5) liofilizar la solución monofásica del pH deseado para obtener una pasta seca, (6) agregar un agente que modifica la viscosidad a la pasta seca en una cantidad suficiente para obtener una solución transparente, (7)' remover al menos algo del agente que modifica la viscosidad de la solución transparente para obtener un depósito que tiene desde alrededor de 5.5% en peso hasta alrededor de 7.5% en peso del agente que modifica la viscosidad con relación al peso total del depósito, y (8) esterilizar el depósito por filtración.

En una modalidad, las etapas de formar la emulsión y la emulsión primaria pueden combinarse como una etapa en la medida en que el producto resultante sea la emulsión primaria. En otra modalidad, las etapas de formar una emulsión primaria y la solución monofásica pueden combinarse como una etapa, en la medida en que el producto resultante sea la solución monofásica. Aún en otra modalidad, las etapas de formar la emulsión, la emulsión primaria, y la solución monofásica pueden combinarse como · una etapa por ello van directamente a la solución monofásica.

En una modalidad, el agua presente en el depósito no es más de alrededor de 4 % en peso con relación al peso total del depósito. En¦ otra modalidad, el contenido de agua del depósito no es más de alrededor de 2 % en peso, y todavía en otra modalidad, no más de alrededor de 1 % en peso. Todavía en una modalidad adicional, no hay más de alrededor de 0.5% en peso de agua con relación al peso total del depósito. En otras modalidades, los agentes farmacéuticamente activos son clorhidrato de vancomicina y sulfato de gentamicina. En otras modalidades, el depósito es transparente, y aún en otras modalidades, el depósito es ultra transparente..

Otro aspecto de la. presente invención proporciona un proceso para hacer un depósito transparente que comprende al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofílico que comprende: (1) disolver al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en ' agua- hidrofílico seleccionado del grupo que consiste de vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma y una mezcla de la misma en agua para formar una solución acuosa; (2) formar una emulsión aceite en agua que comprende un fosfolipido, un aceite, y la solución acuosa que comprende; (3) homogenizar la emulsión para obtener una emulsión primaria; (4) microfluidizar la emulsión primaria para obtener una solución monofásica, (5) ajustar el pH de la emulsión, emulsión primaria y/o la solución monofásica hasta entre alrededor de 3 hasta alrededor de 6, en otra modalidad, desde alrededor de 3 hasta alrededor de 5, y aún en otra modalidad, desde alrededor de 3 hasta alrededor de 4 como sea necesario, (6) liofilizar la solución monofásica del pH deseado para obtener una pasta seca, (7) agregar un agente que modifica la viscosidad a la pasta seca en una cantidad suficiente para obtener una viscosidad deseada y/o una claridad deseada, (8) filtración previa de la solución que modifica la viscosidad para . obtener una solución transparente, (9) remover al menos algo del agente que modifica la viscosidad de la solución transparente para obtener un depósito que tiene desde alrededor de 5.5% en peso hasta alrededor de 7.5% en peso del agente que modifica la viscosidad con relación al peso total del depósito, y (10) esterilizar el depósito sin calentamiento sustancial. Tales procedimientos de esterilización pueden darse por filtración entre otros métodos. En otra modalidad, filtración previa y remover el agente que modifica la viscosidad son etapas opcionales. En una modalidad, al menos un agente farmacéuticamente activo . soluble en agua hidrofilico es vancomicina, gentamiciria, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma y una mezcla de la misma.

Aún otro aspecto de la presente invención proporciona un método para hacer . un depósito que comprende: (1) formar una emulsión aceite en agua que incluye un fosfolipido, un aceite, al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofilico seleccionado del grupo que consiste de vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma o una mezcla de las mismas y agua; (2) convertir la emulsión a una solución monofásica que tiene un pH de entre alrededor de 3 hasta alrededor de 6; (3) liofilizar la solución monofásica para obtener una pasta seca, (4) agregar un agente que modifica la viscosidad a la pasta seca en una cantidad suficiente para obtener una solución que modifica la viscosidad, (5) remover al menos algo del agente que modifica la viscosidad para obtener un depósito, y (6) esterilizar el depósito, en donde el depósito es transparente.

En una modalidad,, el método comprende además la etapa de rellenar asépticamente el depósito, en una jeringa, un vial o cualquier otro dispositivo apropiado capaz de almacenar y/o suministrar el depósito al sitio de tratamiento o herida.

De acuerdo con otro aspecto de la invención, el agente estabilizante se disuelve opcionalmente en agua junto con los ingredientes farmacéuticamente aceptables. Aún en' otro aspecto de la invención, el agente estabilizante .se mezcla opcionalmente junto con los ingredientes farmacéuticamente aceptables, agua, un fosfolipido, y un aceite. Los ejemplos del agente estabilizante incluyen, pero no se limitan . a disodio EDTA, glicina, L-histidina, ácido cítrico, metionina, ácido ascórbico, L-cisteína, alfa-tocoferol, y mezclas de los mismos. Aún en otro aspecto de la invención, el depósito no incluye el agente estabilizante.

En una modalidad, en la etapa de formar la emulsión aceite en agua, la cantidad de agua agregada es alrededor de 60 % en peso hasta alrededor de 80 % en peso con relación al peso total de la emulsión resultante. En otra modalidad, la cantidad de agua en la emulsión en la etapa de formar la emulsión aceite en agua es alrededor de dos veces el peso de la emulsión.

Aún en otra modalidad, después de la etapa de microfluidizar la emulsión primaria, que resulta en una solución monofásica, también referida en la presente como "nanoemulsión", el tamaño de gota de nanoemulsión tiene un diámetro promedio de menos de alrededor de 120 nm, menos de alrededor de 100 nm, o menos de alrededor de 80 nm.

La reducción del diámetro promedio del tamaño de gota de la nanoemulsión/solución monofásica se considera, sin limitación, que reduce la viscosidad de la solución monofásica resultante, lo que permite la esterilización a través de un filtro, en vez de por el uso de un sistema de esterilización basado en. calor, tal como por autoclave o esterilización por radiación gamma, que pueden afectar la estabilidad de vancomicina y/o gentamicina.

Antes de la etapa de microfluidización, la emulsión primaria es generalmente una masa blanca, opaca que se parece a un yogur espeso. Después de la microfluidización, la solución monofásica resultante generalmente es transparente, translúcida, y tipo agua en viscosidad y propiedades de flujo.

Aunque la presente invención no se limita por ninguna teoría particular de operación, se considera que vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma o una mezcla de las mismas, muy hidrofílica, puede formularse con fosfolípidos para formar una solución monofásica como se define en la presente lo que resulta en depósitos estables al almacenamiento con propiedades deseables. Se considera que las gotas de nanoemulsión extremadamente pequeñas !3 proporcionadas durante la microfluidización pueden ser instrumentales en las propiedades eventuales de los depósitos producidos, entre otros factores que pueden involucrarse.

De acuerdo con otra modalidad de la presente invención, el pH de la emulsión, emulsión primaria y/o la solución monofásica es desde alrededor de 3 hasta alrededor de 6, desde alrededor de 3 hasta alrededor de 5, o desde alrededor de 3 hasta alrededor de 4. y si no, el pH puede ajustarse para que caiga en el intervalo deseado..

De acuerdo con aún otra modalidad de la presente invención, el pH del depósito, el producto final, es desde alrededor de 3 hasta alrededor de 6, desde alrededor de 3 hasta alrededor de 5, y en otra modalidad, desde alrededor de 3 hasta alrededor de 4.

Otro aspecto de. la presente invención es un depósito que comprende al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofilíco seleccionado del grupo que consiste de vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma y una mezcla de la misma, agua, un fosfolipido, y uno o más de un aceite, opcionalmente un agente que ajusta el pH, y un agente que modifica la viscosidad, en donde el agua presente en el depósito no es más de alrededor de 4 % en peso, no más de alrededor de 2 % en. peso, no más de alrededor de 1 % en peso, o no más de alrededor de 0.5% en peso de agua con relación al peso total del depósito. En otra modalidad, el depósito se puede, hacer en forma de jeringa.

En una modalidad de la presente invención, el depósito comprende tanto vancomicina como gentamicina. En otra modalidad, el depósito comprende sales farmacéuticas de una o ambas vancomicina y gentamicina. En otra modalidad, el depósito comprende ya sea vancomicina o gentamicina. Aún en otra modalidad, el depósito comprende una sal farmacéutica de ya sea vancomicina o gentamicina.

Los depósitos de acuerdo con la presente invención son, en una modalidad, "transparentes." Esto ofrece ventajas en que se puede mirar, el aire atrapado, cuerpos externos, y similares para prevenir la introducción accidental del mismo en el cuerpo. De forma interesante, también se ha descubierto que cuando tanto la vancomicina como la gentamicina están presentes en el depósito, el depósito de la invención es más transparente que , cuando el depósito contiene ya sea vancomicina o gentamicina sola. En tal modalidad donde tanto vancomicina como gentamicina están presentes en el depósito, la transparencia de tal depósito es "ultra transparente" como se define en la presente. En. una modalidad donde el depósito comprende ya sea vancomicina o gentamicina, la; transparencia de tal depósito es "translúcida" o "transparente" como se define en la presente.

En una modalidad, el agente que modifica la viscosidad es etanol, en donde la cantidad de etanol presente en el depósito es desde alrededor de 3 % en peso hasta alrededor de 25.0 % en peso, alrededor de 4 % en peso hasta alrededor de 10 % en peso. Todavía en otra modalidad, la cantidad de etanol presente está en el intervalo desde entre alrededor de 5% en peso hasta alrededor de 6.5% en peso con relación al peso total del depósito. Aún en otra modalidad, el agente que modifica la viscosidad es etanol absoluto.

En una modalidad, el agente que modifica la viscosidad puede agregarse a la pasta seca hasta que la cantidad de agente que modifica la viscosidad es alrededor de 75% en peso o más de la solución que modifica la viscosidad. En otras modalidades, la cantidad de agente que modifica la viscosidad es alrededor de 50 % en peso o más, y todavía en otra modalidad, alrededor de 30 % en peso o más. Finalmente, la cantidad de agente que modifica la viscosidad es alrededor de 25% en peso o más con relación al peso total de la solución que modifica la viscosidad.

Aún en otra modalidad, la cantidad de fosfolípido presente en el depósito es desde alrededor de 5% en peso hasta alrededor de 95% en peso, y en otra modalidad, desde alrededor de 25%. en peso hasta alrededor de 75%. en peso con relación al peso total del depósito. Én . otra modalidad, la cantidad de fosfolipidos está en el intervalo desde alrededor de 35% en peso hasta alrededor de 60 % en peso con relación al peso total del depósito.

De acuerdo con otra modalidad de la presente invención, la cantidad de aceite presente en el depósito es desde alrededor de 5% en peso hasta alrededor de 95%. en peso, y en otra modalidad, desde alrededor de 25% en peso hasta alrededor de 75% en peso con relación al peso total del depósito. Aún en otra modalidad, la cantidad de aceite está en el intervalo desde alrededor de 35% en peso hasta alrededor de 60 % en peso con relación al peso total del depósito.

De acuerdo con una modalidad de la presente invención, no más de alrededor de 80% de vancomicina y/o gentamicina se liberan en dos horas cuando se mide de acuerdo con un método I USP usando 500 mi de agua desionizada como, un medio. En otra modalidad, no más de alrededor de 50%, y aún en otra modalidad, no más de alrededor de 20% de vancomicina y/o gentamicina se liberan en dos horas · cuando se mide de acuerdo con un método I USP usando 500 mi de agua desionizada como un medio.

De acuerdo con otro aspecto de la invención, el depósito opcionalmente comprende el agente estabilizante para mejorar la estabilidad de vancomicina, gentamicina o ambos. Los ejemplos del agente estabilizante incluyen, pero no se limitan a EDTA (edetato de disodio) , glicina, L-histidina, ácido cítrico, metionina, ácido ascórbico, L-cisteína, alfa-tocoferol, y mezclas de los mismos. De acuerdo con aún otro aspecto de la invención, el depósito no contiene el agente estabilizante. Todavía en otra modalidad, la cantidad de agente estabilizante usada, si la hay, no impactará negativamente la estabilidad de cada, vancomicina o gentamicina activa, en el depósito.

En otro aspecto de . la invención, se proporciona un depósito como sé describe en la presente en un aplicador, jeringa, vial o cualquier otro dispositivo capaz de almacenar y/o suministrar el depósito al sitio de tratamiento, sitio del depósito o herida.

Otro aspecto de la presente invención es un método para administrar, por vía intradérmica, intramuscular, intraincisional, subcutánea, instilación o tópicamente, el depósito de la invención que comprende un agente farmacéuticamente . activo soluble en agua hidrofílico seleccionado del grupo · que consiste de vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma o una mezcla de las mismas, agua, fosfolípido, un aceite, opcionalmente un agente que ajusta el! pH y un agente que modifica la viscosidad a un paciente que necesite del mismo.

Aún otro aspecto de la .presente invención es un método para prevenir y/o. tratar infección post-quirúrgica al introducir un depósito de la presente invención.

Otro aspecto de la presente invención es un método para prevenir y/o tratar infección que comprende administrar un depósito de la presente invención que alcanza concentraciones en tejido local suficientemente altas suficientes para tratar y/o prevenir infecciones en el sitio local, sin toxicidad al riñon y/u otros órganos, y sin contribuir a la emergencia de cepas de bacterias resistentes al fármaco.

En otro aspecto, hay un método para volver al tejido localizado incapaz de sostener microorganismos patogénicos al administrar un depósito de la presente invención a la herida.

Aún otro aspecto de la presente invención es un método para volver al tejido localizado incapaz de sostener microorganismos patogénicos al administrar un depósito de la presente invención sin causar toxicidad al riñon y otros órganos, y sin causar emergencia de cepas de bacterias resistentes al fármaco.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 es un diagrama de flujo del proceso de una modalidad del método para hacer una composición inventiva de acuerdo con un aspecto de la invención.

La Figura 2 muestra el ensayo de recuperación de vancomicina y gentamicina de la formulación del EJEMPLO 1 después del tratamiento en autoclave.

La Figura 3 es un perfil de liberación in vitro de gentamicina y vancomicina de la formulación del EJEMPLO 6 usando el método I USP.

La Figura 4 ilustra concentraciones en plasma de vancomicina de la formulación del EJEMPLO 1 en conej os .

La Figura 5 ilustra concentraciones en tejido de vancomicina de la formulación del EJEMPLO 1 en conejos .

La Figura 6 ilustra concentraciones en plasma de gentamicina de la formulación del EJEMPLO 1 en conej os .

La Figura 7 ilustra concentraciones en tejido de gentamicina de la formulación del' EJEMPLO 1 en conej os .

La. Figura, 8 ilustra concentraciones medias en plasma de vancomicina en conejos después de instilación de herida SC sencilla de la formulación del EJEMPLO 6.

La Figura 9 ilustra concentración en plasma total media de gentamicina de la formulación del EJEMPLO 6 en conejos.

La Figura 10 ilustra concentración en tejido en un cerdo cuando se administra intraincisionalmente con un depósito de la presente invención vs . MIC 90 para patógenos superiores de infección al sitio quirúrgico (SSP) .

La Figura 11 ilustra comparación de concentración en plasma de vancomicina después de dosis terapéutica IV en humanos vs . administración intraincisional de la formulación de acuerdo con la presente invención en el cerdo.

La Figura 12 ilustra los patrones de difracción de rayos X de ángulo pequeño (SAXS) de los Ejemplos 10A hasta 10F.

La Figura 13 ilustra el análisis gravimétrico térmico de los Ejemplos 10A y 10D.

La Figura 14 ilustra el análisis de calorimetría de barrido diferencial (DSC) de los Ejemplos 10A y 10D.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención se describirá en más detalle a continuación.

Aunque la especificación concluye con las reivindicaciones que apuntan particularmente y reclaman de forma distintiva la invención, se considera que la presente invención se entenderá mejor a partir de la siguiente descripción. Todos los porcentajes y relaciones usadas en la presente están en peso de la composición total y todas las mediciones se hacen a 25°C y presión normal a menos que se designe de otra manera. Todas las temperaturas están en grados centígrados a menos que se especifique de otra manera. La presente invención puede comprender (extremo abierto) o consistir esencialmente de los componentes de la presente invención asi como otros ingredientes o elementos descritos en la presente. Como, se usa en la presente, "comprende" significa los elementos recitados, o su equivalente en estructura o función, más cualquier otro elemento o elementos que no se recitan. Los términos "que tiene", "que incluye" y "comprendido de" también se construyen como de extremo abierto a menos que el contexto' lo sugiera de otra manera. Como se usa en la presente, "que consiste esencialmente de" significa que la invención puede incluir ingredientes además de aquellos recitados en la reivindicación, pero sólo si los ingredientes adicionales no alteran materialmente las características básicas y novedosas de la invención reivindicada. Generalmente, tales aditivos pueden no presentarse en todo o sólo en cantidades residuales. Sin embargo, puede ser posible incluir hasta alrededor de 10% en peso de materiales que pueden alterar materialmente las características básicas y novedosas de la invención en la medida en que se mantenga la utilidad de los compuestos (contrario al grado de utilidad) . Todos los intervalos recitados en la presente incluyen los puntos finales, incluyendo aquellos que recitan un intervalo "entre" dos valores. Los términos tales como "alrededor de", "generalmente", "sustancialmente", y similares se construyen como para modificar un término o valor de tal manera que no es un absoluto. Tales términos se definirán por las circunstancias y los términos que se modifican por aquellos términos se entienden por. aquellos expertos en el campo. Esto incluye, al menos, el grado de error experimental esperado, error técnico y error de instrumento para una técnica dada usada para medir un valor.

Notar que aunque la especificación y las reivindicaciones pueden referirse a un producto final tal como, por ejemplo, un depósito u otra forma de dosificación de la invención, por ejemplo, como que contiene un pH en un estado intermedio, puede ser difícil distinguir de la forma de dosificación final que la recitación satisfaga. Sin embargo, tal recitación puede satisfacerse si los materiales usados antes de la producción final cubre tal recitación. Similarmente, la. cantidad de ingredientes introducidos en, por ejemplo, la emulsión, si se describe como que es en peso puede cambiar con relación al peso del producto en alguna otra fase de producción, tal como en el depósito final, que puede pesar más o menos. Es suficiente que aquellos porcentajes se corrijan en cualquiera de las etapas de producción y/o en cualquier intermediario. De hecho, ya que cualquier propiedad o característica de un producto final que no se está seguro de la forma de dosificación directamente, es suficiente si tal propiedad reside en los componentes mencionados justo antes de las etapas de producción final.

El término "emulsión" usado en la presente es un sistema de dos fases liquidas no miscibles. Una de las dos fases (la fase interna, fase discontinua o fase discreta) se distribuye como gotas/glóbulos a través de la segunda fase (la fase externa o continua) . Como se usa en la presente, las emulsiones incluyen emulsiones aceite en agua (0/W, por sus siglas en inglés) , en las cuales un liquido menos polar comúnmente referido como un aceite está en la fase interna; y emulsiones agua en aceite (W/O, por sus siglas en inglés) en las cuales un liquido . acuoso u otro relativamente polar está en la fase interna.

El término "emulsión · primaria" usado en la presente se refiere a un producto resultante de la etapa de homogenización, que puede emplear, por ejemplo, un mezclador de alto corte.

El término "solución monofásica" y "nartoemulsión" se usan intercambiablemente en la presente. Se nota que el término "solución" en "solución monofásica" no' significa que sea una mezcla homogénea de dos o más sustancias, pero que es un producto resultante de la etapa de microfluidización, que puede emplear, por ejemplo, un microfluidizador de alta presión.

El término "monofásico", "una fase" y "tipo una fase" se usan para significar que el producto resultante se mantendrá como una fase sin separación de fases o precipitación aún después de 6000 g de centrifugación por 10 minutos a 25 °C en 1 g de cantidad muestra, usando un centrifugo hecho por Heraeus, Modelo Biofuge Fresco o cualquier equivalente.

El término "viscoso" como se usa aquí significa que la viscosidad de la composición es desde alrededor de 1 centipoise hasta alrededor de 5000 centipoises, desde alrededor de 200 centipoises hasta alrededor de 2000 centipoises, o desde alrededor de 300 centipoises hasta alrededor de 1500 centipoises.

El término "aplicable por jeringa" como se usa en la presente significa que la composición puede administrarse con una jeringa o catéter o retirarse de un vial en una jeringa. No significa, sin embargo, that la composición de la invención deba estar' actualmente en una jeringa o se' administre usando una jeringa a menos que la recitación especifica o el contexto sugieran tal significado.

El término .'"translúcida" y "transparente" se usan intercambiablemente en la presente para significar que el depósito final ? cualquiera de la composición de etapa intermedia, tal como a solución, emulsión, emulsión primaria, nanoemulsión, y/o un gel, no es borroso u opaco, y que está libre de partículas visualmente suspendidas. También debe estar libre de burbujas. Más aún, por translúcida, significa que el depósito y/o cualquiera de la composición intermedia, tal como una solución, emulsión, emulsión . primaria, nanoemulsión, y/o un gel, está libre de partículas visualmente suspendidas y también debe estar libre de burbujas. Más aún, por "translúcida" o "transparente," también significa que el depósito y/o cualquiera de la composición intermedia, tal como una solución, emulsión, emulsión primaria, nanoemulsión, y/o un gel, de la presente invención tiene una transmisión de luz de más de alrededor de 90% medido a 800 nm (T800) en un cuveta de cuarzo de trayectoria de 1 cm usando alcohol como blanco cuando se mide por un espectrofotómetro UV visible, tal como uno hecho por Pharmacia, Modelo Ultrospec III.

Por "borroso" u "opaco,"' significa que un valor T800 del depósito es menos de alrededor de. 90%.

Por "ultra transparente," significa que un valor T800 del depósito es mayor que alrededor de 92%, o 95%.

El término "estable" como se usa en la presente significa que (1) la formulación se mantiene transparente a 25 °C por al menos un año, o (2) la formulación se mantiene transparente y no se separa o precipita después de centrifugación cuando la formulación se expone a 40 °C por una semana.

El término "gel" y "depósito" se usan intercambiablemente en . la presente.

Descripción del Proceso Como se muestra 'en la Figura 1, un aspecto de la presente invención proporciona un proceso para hacer un depósito que comprende un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofílico seleccionado del grupo que consiste de vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, y una mezcla de la misma, que comprende: (1) mezclar al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofilico seleccionado del grupo que consiste de vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma y una mezcla de la misma, agua, un fosfolipido, y un aceite para formar emulsión aceite en agua (ver Figura 1, Etapa 1 ) (3) homogenizar la emulsión para obtener una emulsión primaria (ver Figura 1, Etapa 2); (4) microfluidizar la emulsión primaria para obtener una solución monofásica, también referida en la presente y' en la Figura 1 como una nanoemulsión (ver. Figura 1, Etapa 3), (4). asegurar que el pH de la emulsión primaria y/o la solución monofásica está entre alrededor de 3 hasta alrededor de 6, un intervalo desde alrededor de 3 hasta alrededor de 5, o un intervalo desde alrededor de 3 hasta alrededor de 4 al ajustar el pH como sea necesario (ver Figura 1, Etapa 4), (5) liofilizar la solución monofásica del pH deseado para formar una pasta seca (ver Figura 1, Etapa 5), (6) agregar un agente que modifica la viscosidad a la pasta . seca en una cantidad suficiente para obtener una solución transparente, (ver Figura 1, Etapa 6) (7) remover al menos algo del agente que modifica la viscosidad de la solución transparente para obtener un depósito que tiene desde alrededor de 5.5% en peso hasta alrededor de 7.5% en peso del agente que modifica la viscosidad con relación al peso total del depósito (ver Figura 1, Etapa 7), y (8) esterilizar el depósito sin calentar el depósito' (ver Figura .1, Etapa 8).

En una modalidad de la presente invención, la etapa de mezclar al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofilico seleccionado del grupo que consiste de vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma y una mezcla de la misma, agua, un fosfolipido, y un . aceite para formar una emulsión aceite en agua comprende (1) disolver vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma y una mezcla de la misma en agua para formar urta solución acuosa; y (2) formar una emulsión que comprende un fosfolipido, un aceite,, y una solución acuosa que comprende los ingredientes farmacéuticamente aceptables solubles en agua hidrofilicos seleccionados del grupo que consiste de vancomicina, gentamicina, una sal' farmacéuticamente aceptable de la misma o una mezcla de las mismas.

En una modalidad alternativa, un agente que modifica la viscosidad se agrega a la pasta seca en una cantidad suficiente para obtener una viscosidad deseada, y luego la solución que modifica la viscosidad es pre-filtrada para obtener una solución transparente.

En una modalidad, el agua presente en el depósito no es más de alrededor de 4 % en peso, no más de alrededor de' 2 % en peso, no más de alrededor de 1 % en peso, o no más de alrededor de 0.5% en peso del agua con relación al peso total del depósito. En otras modalidades, los agentes farmacéuticamente activos son clorhidrato de vancomicina y sulfato de gentamicina. En otra modalidad, el depósito es transparente, y aún en otra modalidad, el depósito es ' ultra transparente.

Formación de Emulsión Aceite en Agua Al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofilico seleccionado del grupo que consiste de vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma y una mezcla de la misma, agua, un fosfolipido, y-un aceite se mezclan para formar una emulsión aceite en agua.

En otra modalidad, primero, el clorhidrato de vancomicina, sulfato de gentamicina o ambos se disuelven en agua para formar una solución acuosa.

La concentración inicial de fármaco de clorhidrato de vancomicina en agua es desde alrededor de 1 mg/ml hasta alrededor de 50 mg/ml o desde alrededor de 20 mg/ml hasta alrededor de 30 mg/ml, y la concentración fármaco inicial de sulfato de gentamicina en agua es desde alrededor de 1 mg/ml hasta alrededor de 75 mg/ml, o desde alrededor de 10 mg/ml hasta alrededor de 30 mg/ml.

Entonces la solución acuosa de vancomicina y/o gentamicina, fosfolipido, ' aceite, opcionalmente un agente que ajusta el pH y opcionalmente el agente estabilizante se mezcla para formar una emulsión aceite en agua.

Homogenizar Para obtener una Emulsión Pr maria Posteriormente, la emulsión puede homogenizarse usando un mezclador de alto corte (tal como por ejemplo mezclador Silverson Modelo L5M) para formar una emulsión primaria.

Microfluidizar Para obtener una Solución Monofásica La emulsión primaria se microfluidiza entonces por el uso der por ejemplo, un microfluidizador de alta presión, para obtener una nanoemulsión/solución monofásica. La nanoemulsión/solución monofásica resultante tiene un diámetro promedio de menos de 120 nm, menos de 100 nm, y/o menos de 80 nm para formar una solución monofásica/nanoemulsión . Se encuentra que el tamaño de gota mayor que 180 nm puede resultar en una solución turbia.

La reducción del diámetro promedio de las gotas de nanoemulsión se considera, sin limitación, que reduce la viscosidad de la solución monofásica resultante, lo que permite la esterilización a través de un filtro, en vez de por el uso de un sistema de esterilización basado en calor, tal como por autoclave o esterilización por radiación gamma, que pueden afectar la estabilidad de vancomicina y/o gentamicina.

Antes de la' etapa de microfluidización, la emulsión primaria generalmente es una masa blanca, opaca, tipo yogurt espeso. Después de la microfluidización, la solución monofásica resultante generalmente es transparente, translúcida, y tipo agua en viscosidad y propiedades de fluj o .

Con objeto de producir una solución monofásica transparente, la emulsión aceite en agua contiene venta osamente alrededor de 10% hasta alrededor de 80% de agua, desde alrededor de 30% hasta alrededor de 80% de agua, o desde alrededor de 60% hasta 80% de agua con relación al peso total de la emulsión aceite en agua con objeto de tener la propiedad de ' flujo deseada a procesarse en el homogenizador de alta presión, tal como un MICROFLUIDIZADOR .

Ajuste del pH El pH de la emulsión, emulsión primaria o. solución monofásica puede ajustarse al agregar un agente que' ajusta el pH de manera que el pH de la emulsión, emulsión primaria o solución monofásica es desde alrededor de 3 hasta alrededor de 6, un intervalo de alrededor de 3 hasta alrededor de 5, o un intervalo desde alrededor de 3 hasta alrededor de 4.

En otra modalidad, esta etapa se realiza al agregar una cantidad apropiada de un agente que ajusta el pH a la emulsión, seguido por etapa de homogenización de mezclado de alto corte por alrededor de 1 minuto. Luego, después de la etapa de homogenización, el pH de la composición se revisa y puede ajustarse de nuevo si es necesario.

Liofilización, Sublimación o Evaporación Al remover el agua, gentamicina y/o vancomicina se vuelve uniformemente dispersada en el vehículo fosfolipido/aceite . El agua se. remueve entonces de la solución monofásica por liofilización, sublimación y/o evaporación de manera que la cantidad de residual agua en la pasta seca resultante o el depósito transparente aplicable por jeringa final es menor que alrededor de 4 % en peso, menor que alrededor de 2 % en peso, o menor que alrededor de 0.5% en peso de agua con relación al peso total de la pasta seca o depósito transparente viscoso.

En otra modalidad, la solución monofásica se seca por congelado usando un liofilizador de charola. Aún en otra modalidad, la charola del liofilizador es de acero inoxidable.

Aún en otra modalidad, la altura de llenado de liquido en la charola de liofilización de acero inoxidable no es más de alrededor de 3 cm. En una modalidad, después de la etapa de liofilización, el producto resultante, que es la pasta seca, tiene no más del 1 % en peso de agua con. relación al peso total de la pasta seca.

Adición de Agente que Modifica la Viscosidad El agente que modifica la viscosidad se agrega a la pasta seca hasta . que la pasta seca está completamente disuelta. El agente que modifica la viscosidad puede agregarse a la pasta seca hasta que la cantidad de agente que modifica la viscosidad es alrededor de 75% en peso o más, alrededor de 50% en peso o más, alrededor de 30% en peso o más o alrededor de.25% en peso o más con relación al peso total de la solución que modifica la viscosidad. En una modalidad, el agente que' modifica la viscosidad y la pasta seca puede mezclarse a una temperatura de alrededor de 10 °C hasta alrededor de 80 °C, o alrededor de 25 °C hasta alrededor de 60 °C.

Pre-filtración Esta es. una etapa opcional y no se requiere para ciertas modalidades de la invención. Si la solución que modifica la viscosidad obtenida después de agregar el agente que modifica la viscosidad es borrosa, la solución que modifica la viscosidad puede filtrarse usando por ejemplo filtro de 0.65 mieras para formar una solución transparente. El componente borroso removido por las etapas de pre-filtración consiste de una fracción pequeña de vancomicina (alrededor de 2% ensayo objetivo) y gentamicina (3-4% ensayo objetivo) . Esta pérdida puede compensarse al ajustar.la carga inicial o calda de los objetivos de ensayo. Esta es una etapa opcional y no se requiere para ciertas modalidades de la invención.

Remoción del Agente que Modifica la Viscosidad Posteriormente, el agente que modifica la viscosidad que se agregó para disolver la pasta seca se remueve. La remoción del agente que modifica la viscosidad puede darse hasta que la cantidad de agente residual que modifica la viscosidad que puede estar presente en el depósito es desde alrededor de 1% hasta alrededor de 50%, desde alrededor de 2% hasta alrededor de 18%, . o desde alrededor de 5% hasta alrededor de 6.5% con relación al peso. total del depósito.

Si se sobre-seca, el agente que modifica la viscosidad puede agregarse de nuevo como sea necesario. La remoción del agente que modifica la viscosidad puede darse usando un evaporador rotatorio o al soplar con gas de nitrógeno o aire. El análisis gravimétrico térmico . (TGA, por sus siglas en inglés) puede usarse para medir la cantidad de agente que modifica la viscosidad que se remueve de la solución transparente para formar un depósito.

La viscosidad del depósito resultante de acuerdo con la presente invención es desde alrededor de 100 centipoise hasta; alrededor de 5000 centipoise, desde alrededor de 200 centipoise hasta alrededor de 2000 centipoise, o desde alrededor de 300 . centipoise hasta alrededor de 1500 centipoise. La medición de viscosidad puede realizarse usando cualquier método convencional, que incluye el uso de un Reómetro Programable Digital Brookfield con Modelo No. DV-III con Perno No. SP-40. Esta es una etapa opcional y no se requiere para ciertas modalidades de la invención.

Filtración Estéril El depósito se esteriliza entonces al filtrar a través de una membrana de esterilización, tal como una que tiene poros de alrededor de 0.2 mieras o menos.

Depósito Otro aspecto de la presente invención proporciona un depósito que comprende al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofilico seleccionado del grupo que consiste de vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma y una mezcla de la misma, agua, un fosfolipido, un aceite, un agente que ajusta el pH, y un agente que modifica la viscosidad, en donde el agua presente en el depósito no es más de alrededor de 4 % en peso, no más de alrededor de 2 % en peso, o no más de alrededor de 0.5% en peso de agua con relación al peso total del depósito.

De acuerdo con otro aspecto de la invención, el depósito opcionalmente comprende el agente estabilizante para mejorar la estabilidad de vancomicina, gentamicina o ambos. En otro aspecto de la invención, este depósito se proporciona en una jeringa, vial o cualquier otro dispositivo capaz de suministrar el depósito al sitio de tratamiento, sitio del depósito o herida.

Ingrediente Farmacéutico Activo ~ El ingrediente farmacéutico activo de acuerdo con la presente invención es vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma o una mezcla de las mismas. En una modalidad, ¦ el ingrediente farmacéutico activo de acuerdo con la presente invención es clorhidrato de vancomicina, sulfato de gentamicina o una mezcla de las mismas. En otra modalidad, los ingredientes farmacéuticos activos de acuerdo con. la presente invención son clorhidrato de vancomicina y sulfato de gentamicina. Aún en otra modalidad, el ingrediente farmacéutico activo de acuerdo con la presente invención es ya sea clorhidrato de vancomicina o sulfato de gentamicina.

Los ejemplos de la sal farmacéuticamente aceptable incluyen, pero no se limitan a, cualquiera de los ácidos que pueden formar sales con ya sea vancomicina o gentamicina tal como ácido acético, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido cítrico, ácido fórmico, ácido láctico, ácido succínico, ácido sulfúrico, y similares.

La cantidad de, los ingredientes farmacéuticos activos que puede estar presente en el depósito puede variar con un número de parámetros que incluyen el tamaño de la dosis pretendida total, la duración de administración, el tamaño del depósito y dónde y cómo se administrará, el tipo de activo a administrarse, el patrón de administración (por ejemplo, continuo, retardado, etc.) y similares. Sin embargo, generalmente, la cantidad total del ' ingrediente farmacéuticamente aceptable puede ser desde ¦ alrededor de 0.001 % en peso hasta alrededor de 20% en peso, desde alrededor de 0.01 % en peso hasta alrededor de 10% en peso, o desde alrededor de 0.1 % en peso hasta alrededor de 5% en peso con relación al peso total del depósito.

Aceite Un aceite de acuerdo con la presente invención puede ser, por ejemplo, aceites naturales . tales como aceites vegetales, aceite animal, vitamina E, éster de vitamina E, y similares y/o aceites sintéticos o semisintéticos , o mezclas de los mismos.

Un aceite vegetal se refiere a aceite derivado de planta semillas o nueces. Los ejemplos de aceites vegetales incluyen, pero no se limitan a, aceite de almendras, aceite de borraja, aceite de semilla de grosella negra, aceite de ricino, aceite de cártamo, aceite de frijol de soya, aceite de ajonjolí, aceite de semilla de algodón, aceite de semilla de uva, aceite de girasol, aceite de cañóla, aceite de coco, aceite de palma, aceite de naranja, aceite de maíz, aceite de olivo y similares.

Un aceite animal se refiere a aceite de triglicérido derivado de una fuente animal. Los ejemplos de aceite animal puede ser aceite de pescado, o de otras fuentes tales como cebo, manteca y similares.

Los ejemplos de aceites sintéticos o semisintéticos son mono-, di- o triglicéridos, cuyos componentes ácidos son ácidos grasos C6 hasta C20 saturados y/o insaturado, CAPTEX® (varios grados de ésteres de propilenglicol tal como propilenglicol didecanoato, y ésteres de glicerol tal como gliceril tricaprilato/caprato) ; MIGLYOL® (triglicéridos de ácido caprílico/cáprico; o triglicéridos de ácido caprilico/cáprico/linoleico; o triglicéridos de ácido caprílico/cáprico/succínico; o diéster de propilenglicol de ácido caprílico/cáprico y mezclas con otros agentes; CAPMUL® (disponible en diferentes grados, por ejemplo Capmul MCM. Este es principalmente mono- y di-ésteres de glicerol y de propilenglicol, tal como gliceril. mono-oleato y monocaprilato de propilenglicol. Otro grado consiste de polietilen glicol gliceril monoestearato .¦ En una modalidad, . el aceite usado de acuerdo con la presente invención es aceite de ajonjolí.

La cantidad del aceite que puede estar presente en el depósito puede, ser desde alrededor de 5% en peso hasta alrededor de 95% en peso, desde alrededor de 25% en peso hasta alrededor de 75% en peso, o desde alrededor de 35% hasta alrededor de 60% con relación al peso total del depósito.

En ciertas modalidades, el aceite para relación de fosfolipido en el depósito puede estar dentro de un intervalo desde alrededor de 20:1 hasta alrededor de 1:20, desde alrededor de 3:1 hasta alrededor de 1:3, o desde alrededor de 1:2 hasta alrededor de 1:1, en peso.

Fosfolipido . El fosfolipido de acuerdo con la presente invención se refiere a una molécula de lipido que contiene uno o más grupos fosfato, que incluye aquellos derivados de ya sea glicerol (fosfoglicéridos, glicerofosfolipidos) o espingosina (esfingolípidos ) . .

En algunas modalidades, los fosfolipidos son derivados de triglicérido en los cuales un ácido graso se ha remplazado' por un grupo fosfato y una de varias moléculas que contienen nitrógeno. Las cadenas de ácido graso son hidrofóbicas y las cargas en el fosfato y grupos amino hace tal porción de la molécula hidrofilica. El resultado es una molécula anfifilica.

De acuerdo con la Farmacopea de los Estados Unidos de América (USP) , la lecitina es un nombre sin propietario que describe una mezcla en .completo de fosfolipidos' insolubles en acetona, que comprende principalmente de fosfotidilcolina, fosfotidiletanólamina, fosfotidilserina y fosfotidilinositol , combinadas con varias cantidades de otras sustancias tales como triglicéridos , ácidos grasos y carbohidratos. La composición de lecitina y por lo tanto sus propiedades físicas varían dependiende de la fuente de la lecitina y composición de fosfolípido, por ejemplo, contenido de fosfotidilcolina, etc.

De acuerdo con una modalidad de la presente invención, la lecitina usada en la presente son lecitinas de grado farmacéutico derivadas de huevo o fríjol de soya, que se han usado en productos parenterales y . están sustancialmente libres de agentes de irritación, alérgicos, inflamatorios o agentes que causan otras reacciones biológicas adversas.

De acuerdo con la práctica de la presente invención, la selección de fosfolípido para preparar el depósito se' determina con base en la capacidad del fosfolípido para (1) ser químicamente compatible con al menos ¦ un agente farmacéuticamente activo soluble en agua. hidrofílico seleccionado del grupo que consiste de vancomicina, gentamicina y una mezcla de la misma, (2) formar una solución monofásica y mantener el tamaño de gota pequeño a través del proceso de fabricación y durante el almacenado, . y (3) proporcionar el depósito deseado y proporcionar la liberación deseada del agente farmacéuticamente activo.

Los ejemplos del fosfolípido incluyen, pero no se limitan a, esfingolipidos en la forma de esfingosina y derivados (obtenidos de frijol de soya, huevo, neuronas y leche), gangliosidos, y fitoesfingosina y derivados (obtenidos de levadura) .

Los fosfolipidos también pueden sintetizarse y los ejemplos de fosfolipidos sintéticos comunes incluyen, pero no se limitan a, digliceroles, tales como 1 , 2-diauroil-sn-glicerol (DLG) , 1 , 2-dimiristoil-sn-glicerol (DMG) , 1,2-dipalmitoil-sn-glicerol (DPG) , 1 , 2-distearoil-sn-glicerol (DSG); ácidos fosfatidicos, tal como ácido 1 , 2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfatidico, sal de sodio (DMPA, Na), ácido 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfatidico, sal de sodio (DPPA, Na), ácido 1 , 2-diestearoil-sn-glicero-3-fosfatidico, sal de sodio (DSPA, Na); fosfocolinas , tal como 1 , 2-didecanoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DDPC)-, 1 , 2-dilauroil-sn-glicero-3-fosfocolina (DLPC)., 1 , 2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DMPC), 1, 2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DPPC) , 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DSPC) , 1 , 2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DOPC)> 1 , 2-dilinoleoil--sn-glicero-3-fosfocolina (DLOPC), 1, 2-dierucoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DEPC) , 1, 2-dieicosapentaenoil-sn-glicero-3-fosfocolina (EPA-PC) 1, 2-didocosahexaenil-sn-glicero-3-fosfocolina (DHA-PC) , l-miristoil-2-palmitoil-sn-glicero-3-fosfocolina ( PPC) 1-miristoil-2-estearoil-sn-glicero-3-fosfocolina (MSPC) , 1-palmitoil-2-miristoil-sn-glicero-3-fosfocolina (PMPC) 1-palmitoil-2-estearoil-sn-glicero-.3-fosfocolina (PSPC) 1-estearoil-2-miristoil-sn-glicero-3-fosfocolina (SMPC) , 1-estearoil-2-palmitoi-sn-glicero-3-fosfocolina (SPPC) , 1-miristoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfocolina (MOPC) , 1-palmitoil-2-oleoi-sn-glicero-3-fosfocolina (POPC), 1-estearoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfocolina (POPC) ; fosfoetanolaminas, tal como fosfoetanolamina de frijol de soya hidrogenada (HSPE) , fosfoetanolamina de huevo no hidrogenada (EPE) , 1 , 2-dilauroil-sn-glicero-3-fosfoetanolamin (DLPE); 1, 2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamin (DMPE) ; 1, 2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosf.oetanolamin (DPPE) ; 1,2-distearoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamin (DSPE) ; 1, 2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamin (DOPE) ; 1 , 2-dilinoleoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamin (DLoPE) 1 , 2-dierucil-sn-glicero-3-fosfoetanolamin (DEPE) , 1 , 2-palmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamin (POPE); fosfogliceroles tales como fosfatidilglicerol de frijol de soya hidrogenado, sal de sodio (HSPG, Na) , fosfatidilglicerol' de huevo no hidrogenado, sal de sodio (EPG, Na), 1 , 2-dilauroil-sn-glicero-3-fosfoglicerol, sal de sodio ' (DLPG, Na), 1, 2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfoglicerol , sal de sodio (DMPG, Na), 1,2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfo-sn-l-glicerol, sal de amonio (DMP-sn-l-G, NH ) , 1 , 2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoglicerol, sal de sodio (DPPG, Na), 1 , 2-distearoil-sn-glicero-3-fosfoglicerol, sal de sodio (DSPG, Na), 1,2-diestearoil-sn-glicero-3-fosfo-sn-l-glicerol, sal de sodio (DSP-sn-lG, Na), 1 , 2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfoglicerol , sal de sodio (DOPG, Na), 1, 2-dierucil-sn-glicero-3-fosfoglicerol, sal de sodio (DEPG, Na), 1 , 2-palmitoil-sn-glicero-3-fosfoglicerol, sal de' sodio (POPG, Na) ; fosfotidilserinas tales como 1 , 2-dimiristoil-sn-glicero-3-fosfo-l-sina, sal de sodio (DMPS, Na), 1, 2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfo-l-sina , sal de sodio (DPPS, Na), 1, 2-diestearil-sn-glicero-3-fosfo-1-sina, sal de sodio (DSPS, Na), 1 , 2-dioleoil-sn-glicero-3-fosfo-l-sina, sal de sodio (DOPS, Na) , l-palmitoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfo-l-sina, sal de . sodio (POPS, Na) ; fosfolipidos en cadena mezclados, tal como l-palmitoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfocolina (POPC), l-palmitoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfoglicerol, sal de sodio (POPG, Na), 1-palmitoil-2-oleoil-sn-glicero-3-fosfoglicerol, sal de amonio (POPG, NH4 ) ; lisofosfolipidos , tal como l-miristoil-2-liso-sn-glicero-3-fosfocolina . (S-liso-PC) , l-palmitoil-2-liso-sn-glicero-3-fosfocolina (P-liso-PC) , l-estearoil-2-liso-sn-glicero-3-fosfocolina (S-liso-PC); y fosfolipidos pegilados, tales como N- ( carbonil-metoxipolietilenglicol 2000) -MPEG- 2000-DPPE, 1, 2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, sal de sodio, N- (carbonil-metoxipolietilenglicol 5000 ) -MPEG-5000-DSPE, l-2-distearoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, sal de sodio, N- (Carbonil-metoxipolietilenglicol 5000) -MPEG-5000-DPPE, 1, 2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, sal de sodio, N- (carbonil-metoxipolietilenglicol 750 ) -MPEG-750-DSPE, 1 , 2-distearoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, sal de sodio, N- (carbonil-metoxipolietilenglicol 2000) -MPEG-2000-DSPE, 1 , 2-distearoil-sn-glicero-3-fosfoetanolamina, sal de sodio.

La cantidad de los fosfolipidos que puede estar presente en el depósito puede variar con un número de parámetros que incluyen la viscosidad de la formulación final, la duración de administración, el tamaño del depósito y donde y cómo se administrará, el tipo de activo a administrarse, el patrón de administración (por ejemplo, continuo, retardado, etc.) y similares. Sin embargo,. generalmente, la cantidad del fosfolipido que puede estar presente en el depósito puede ser desde alrededor de 5% hasta alrededor de 95% con relación al peso total de la composición, ' o. alrededor de¦ 35% hasta alrededor de 60% con relación al peso total de la composición.

Agua El agua que puede usarse de acuerdo con la presente invención incluye, pero no se limita a agua destilada y desionízada, o cualquier otro liquido que es capaz de disolver la vancomicina y/o gentamicina soluble en agua hidrofilica y capaz de sublimarse/evaporarse durante la etapa de liofilización .

Con objeto de obtener una solución monofásica, por ejemplo, usando un microfluidizador de alta presión, la emulsión aceite en agua puede contener desde alrededor de 50% hasta alrededor de 90% de agua, desde alrededor de 60% hasta alrededor de 80% de agua, o desde, alrededor de 70% hasta 80% de agua con relación al peso total de la emulsión aceite en agua con objeto de tener la propiedad de flujo deseada a procesarse en el homogenizador, tal como un MICROFLUIDIZADOR.

Sin embargo, una vez que la solución monofásica se obtiene, la mayoría del agua puede ser removida por ejemplo, por liofilización, sublimación y/o evaporación.

La vancomicina se degrada debido a la hidrólisis, y la cantidad de residual agua en el depósito final afecta la estabilidad a largo plazo de vancomicina. Cuando la vancomicina se precipita, . el depósito se vuelve de translúcido a borroso o se separa en dos fases como se muestra en el EJEMPLO 2 en la presente.

En consecuencia, de acuerdo con la presente invención, la cantidad de residual agua deberá mantenerse menor que alrededor de 4% en peso, menor que alrededor de 2% en peso o menor que alrededor de 0.5% en peso de agua con relación al peso total del depósito transparente viscoso con objeto de mantener la vancomicina estable durante el almacenamiento.

Agente que Ajusta el pH El agente que ajusta el pH de acuerdo con la presente invención es cualquier ácido, base o sal no tóxico.- Los ejemplos de agentes que ajustan el pH incluyen, pero no se limitan a, ácido clorhídrico, ácido acético, ácido sulfúrico, hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, hidróxido de amonio, lisina, arginina, y similares.

Como se menciona anteriormente, la gentamicina se degrada debido a oxidación o formación de aducto. Como se muestra en el EJEMPLO 4 en la- presente enseguida, el pH afecta la estabilidad a .largo plazo de la gentamicina, y cuando la gentamicina se precipita, el depósito se vuelve de translúcido a borroso.

En consecuencia, el pH del depósito puede ser desde alrededor de 3 hasta alrededor de 6, un intervalo de alrededor de 3 hasta alrededor de 5, o un intervalo desde alrededor de 3 hasta alrededor de 4.

Agente Estabilizante El agente estabilizante de acuerdo con la presente invención es un material que reduce el efecto catalítico del ión de metal en la oxidación, hidrólisis u otras reacciones de degradación y/o incrementa la estabilidad del agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofílico. Los ejemplos de tal agente estabilizante incluyen, pero no se limitan a, EDTA (edetato de disodio) , glicina, L-histidina, ácido cítrico, metionina, ácido ascórbico, L-cisteína, alfa-tocoferol, y mezclas de los mismos. En ciertas modalidades, la cantidad del agente estabilizante presente en el depósito es desde alrededor de 0.001% hasta alrededor de 5.0% con relación al peso total de la composición, o alrededor de 0.01% hasta alrededor de 1.0% con relación al peso total de la composición. En otra modalidad, el depósito no contiene el agente estabilizante.

Agente que Modifica la Viscosidad Un agente que modifica la viscosidad de acuerdo con la presente invención es un líquido acuoso . o no acuoso (diferente al que tiene un nivel contaminante de agua) que es capaz de disolver la pasta seca formada después de la liofilización, sublimación y/o evaporación.

Los ejemplos de un · agente que modifica la viscosidad incluyen, sin limitación, etanol, isopropanol, y una mezcla de los mismos. En una modalidad, el agente que modifica la viscosidad es sustancialmente no acuoso. En otra modalidad, el agente que modifica la viscosidad es etanol.

El agente que modifica la viscosidad se agrega a la pasta seca hasta que la pasta seca está completamente disuelta en el agente. La solución resultante que modifica la viscosidad también puede volverse "borrosa." En una modalidad, el agente que modifica la viscosidad y la pasta seca se mezclan a una temperatura de alrededor de 10 °C hasta alrededor de 80 °C, o en un intervalo de alrededor de 50 °C hasta alrededor de 70 °C, o en un intervalo de alrededor de 25 °C hasta alrededor de 60 °C.

El agente que modifica la¦ viscosidad se agrega a la pasta seca hasta que la cantidad de agente que modifica la viscosidad es alrededor de 10% en peso, 20% en peso, 25% en peso o 30% en peso con relación al peso total de la solución resultante. La viscosidad resultante de la solución puede ser; desde alrededor de 10 hasta alrededor de 200 centipoise, desde alrededor de 15 hasta alrededor de 100 centipoise, o alrededor de 20 centipoise hasta alrededor de 50 centipoise.

La viscosidad puede determinarse usando un reómetro programable digital Brookfield con el perno SP-40 o cualquier otro reómetro equivalente. Más específicamente, el RPM de partida del reómetro puede ser desde 0.1 hasta 1.0, luego reduciendo el RPM hasta 0.1 en 0.1 RMP incrementado cada 30 segundos. La medición de viscosidad puede registrarse a 0.8 RMP a una temperatura ambiente de alrededor de 30 °C.

Posteriormente, alguna cantidad del agente que modifica la viscosidad usada para disolver la pasta seca puede removerse. La remoción del agente que modifica la viscosidad puede darse hasta que la cantidad residual de agente que modifica la viscosidad que puede estar presente en el depósito sea desde alrededor de 1% en peso hasta alrededor de 20% en peso, desde alrededor de 2% en peso hasta alrededor de 18 % en peso, o desdé alrededor de 5% en peso hasta alrededor de 6.5% en peso con relación al peso total del depósito. Si se sobre-seca, el agente que modifica . la viscosidad puede agregarse de nuevo como sea necesario.

La viscosidad del depósito resultante de acuerdo con la presente invención es desde alrededor de 100 centipoise hasta alrededor de 5000 centipoise, desde alrededor de 200 centipoise hasta alrededor de 2000 centipoise, o desde alrededor de 300 centipoise hasta alrededor de 1500 centipoise.

Método de Tratamiento Otro aspecto de la presente invención es un método para administrar via intradérmica, intramuscular, intraincisional, subcutánea, instilación o tópicamente un depósito de la presente invención que comprende vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma o una mezcla de las mismas, agua, fosfolipido, un aceite,, opcionalmente un agente que ajusta el pH y un agente que modifica la viscosidad. El depósito puede dosificarse en el sitio deseable usando varias dosificaciones y en varios intervalos de dosificación dependiendo de la necesidad. Esto es, el depósito debe ser suficiente para . liberar el agente farmacéuticamente activo por un periodo de alrededor de al menos un día con un volumen de dosificación desde alrededor de 0.1 mL hasta alrededor de 100 mL. Por ejemplo, intervalos de dosificación de una vez al día, una vez cada otro día, una vez cada 3 días, una vez a la semana o una vez al mes con un volumen de dosificación desde alrededor de 0.1 mL hasta alrededor de 100 mL puede usarse.. Típicamente, el depósito puede usarse en una aplicación sencilla y generalmente se infunde en el sitio de la herida antes de suturar el sitio de la herida.

Otro aspecto de la presente invención es un método para prevenir y/o tratar una infección que incluye, sin limitación, infección en sitio quirúrgico, que comprende administrar un depósito de la presente invención que alcanza una concentración suficientemente alta en tejido para tratar y/o prevenir infecciones en el sitio local, aún no causa toxicidad al riñon y/u otros órganos, y tampoco causa y/o contribuye a la emergencia de cepas de bacterias resistentes al fármaco.

En otro aspecto, se proporciona aquí un método para volver al tejido localizado incapaz de sostener microorganismos patogénicos al administrar un depósito de la presente invención a la herida.

En otra modalidad, esta se realiza sin causar toxicidad al riñon y/u otros órganos, y sin. causar y/o contribuir a la emergencia de cepas de bacterias resistentes al. fármaco.

En cada uno de los métodos anteriores, la dosis de vancomicina, gentamicina o ambos debe ser tal que, cuando se libera desde el depósito, el tejido localizado es incapaz de sostener bacterias patogénicas por al menos 24 horas y, en otra modalidad, al menos 48 horas. Todavía en otra modalidad, el tejido localizado es incapaz de sostener bacterias patogénicas por al menos 3 días, por al menos una semana o por un periodo de un mes.

Como se muestra en la Figura 10, y de acuerdo con los datos publicados, la concentración inhibidora mínima requerida para inhibir el crecimiento del 90% de los organismos (MIC90 (mcg/mi) ) para patógenos de infección en sitio quirúrgico (SSI) bien conocidos, . tal como staphylococcus aureus., estafilococos negativos en coagulasa, enterococos, pseudomonas aeruginosa , y Escherichia coli, están en el intervalo de 1-4 mcg/ml. Ver generalmente, M. J. . Rybak, et al., Vancomycin Therapeutic Guidelines, CID 2009:49 (1 Agosto), 325-327; y A. I. ¦ Hidron, et al., Infección and Hospital Epidemiology, Noviembre .2008 , vol . 29, No. 11, 996-1011. Estos se basan en el uso de vancomicina y gentamicina individualmente como se ilustra. Cuando el depósito de la presente invención que comprende vancomicina (4.37 mg/kg) y gentamicina (3.89 mg/kg) se administró a un cerdo, la concentración en tejido de cerdo localizada de vancomicina alcanzada por el depósito de la presente invención fue arriba de 19 mcg/ml en 48 hrs, que es científicamente más alta que el MIC 90 para los patógenos SSI identificados arriba. Similarmente, la concentración en tejido del cerdo de gentamicina alcanzada al administrar ' el depósito de la presente invención fue alrededor de 12 mcg/ml en 48 hrs.

Para este fin, se nota que los inventores no inoculan cerdos con los patógenos SSI arriba identificados y luego administran el depósito al sitio local para determinar la eficacia de la presente invención. Sin embargo, los datos MIC 90 publicados para los patógenos SSI arriba identificados, y la concentración alcanzable en el tejido de la formulación de la presente invención que comprende vancomicina y gentamicina demuestran que el uso del depósito de la presente invención seria altamente efectivo proporcionando los niveles de fármaco localizados efectivos para tratar y/o prevenir la infección haciendo que el tejido localizado sea incapaz de sostener microorganismos patogénicos.

La Figura 11 ilustra que los depósitos de. la presente invención cuando se administran intraincisional a cerdos proporcionan concentraciones locales altas en tejido de ambos activos, vancomicina y gentamicina, y concentraciones sistemáticas bajas (plasma). Las concentraciones sistemáticas bajas de gentamicina observadas usando el depósito de la presente invención proporcionan un margen de seguridad importante ya que la toxicidad de la gentamicina (renal y ototoxicidad) se . sabe se relacionan a concentraciones en plasma mayores que 10 mg/L. ver generalmente, D. S. Reeves, Infección 8 (1980) Suppl . 3, S 313-S320.

La toxicidad renal de vancomicina también se relaciona a exposición excesiva de fármaco pero no puede correlacionarse fácilmente a una concentración pico excesiva. Sin embargo, las concentraciones sistemáticas bajas observada usando la administración de depósito de la presente invención han mostrado toxicidad no sistemática en el modelo de cerdo para cualquier fármaco y transparentemente y están muy por debajo de los valores publicados para gentamicina.

Una segunda preocupación con la vancomicina es el desarrollo de resistencia bacteriana. La resistencia de vancomicina puede desarrollarse cuando los tejidos objetivo o tejidos auxiliares qué colonizan, las bacterias bacteria se exponen a concentraciones sub-efectivas de vancomicina por periodos importantes de tiempo. Después de la administración sistemática de vancomicina sola, las concentraciones mínimas deseadas en plasma en estado sólido son al menos 10 mg/L o quizás en el intervalo de alrededor de 10-20 mg/L. Dado a la ingesta baja de vancomicina por tejidos de la sangre, estas concentraciones son suficientes para empujar concentraciones terapéuticamente efectivas en los tejidos y lograr un efecto terapéutico. Las concentraciones de sangre sirven como un marcador sustituto para los tejidos objetivo en donde la meta es lograr una relación AUCo-t/MIC90 plasma de desde alrededor de 400 hasta alrededor de 300,000 o relación AUC0-t/MIC9o de >400 o relación, de AUC0-t/MIC9o de >1600. Esta relación se logra cuando los niveles bajos se mantienen en los niveles anteriormente observados.

Con el depósito de la presente invención, se observan muy bajas concentraciones de vancomicina en el plasma circulante mientras. que las . concentraciones supra-terapéuticas están presentes en el sitio, de incisión donde el gel se administró como se muestra en la Figura 10. Dado al bajo nivel de ingesta de vancomicina. de plasma al tejido, las concentraciones sistemáticas bajas de vancomicina llevan a niveles despreciables de vancomicina en tejidos distales del sitio de incisión. El único mecanismo para transporte es por medio del plasma y la cantidad de ingesta de plasma por los es baja. Por lo tanto, la probabilidad de desarrollar resistencia de vancomicina en los sitios distales de la incisión debe de ser muy baja.

De este modo en otro aspecto de esta invención se proporciona un método para tratar un paciente que comprende administrar a dicho paciente una dosis terapéuticamente efectiva de vancomicina sola o en combinación con gentamicina o sales farmacéuticamente aceptables de la misma de manera que una relación de AUCo-t/MlCgo plasma > 400 se logra para vancomicina para prevenir la emergencia de resistencia en s. aureus. Aún en otro aspecto de esta invención un paciente que recibe la administración observada anteriormente exhibe l/10th la concent ación de suero bajo en estado sólido para evitar que se . exhiba cualquier ñeprotoxicidad por administración de dosis alta de vancomicina por medio de métodos convencionales. Ver generalmente, M. J.. Rybak, Vancomycin Therapeutic Guidelines, CID 2009:49 (1 Agosto), 325-327.

EJEMPLOS EJEMPLO 1: Depósito de acuerdo con la presente invención Tabla 1: Lista de ingredientes del depósito De acuerdo con la presente invención Primero, un vaso de precipitados de 500 mL se cargó con 0.36 g de sulfato de gentamicina, 0.24 g de clorhidrato de vancomicina, 53.3 g de PL90G, 40 g de aceite de ajonjolí y 0.1 g de L-histidina. A esto se le agregó agua para inyección ( FI) y la mezcla se homogeneizó por medio de un mezclador de alto corte a 5000 RPM por 15 min. La' solución monofásica resultante se liofilizó para remover el agua para obtener una pasta seca con menos de 0.2% humedad residual.

EJEMPLO 2: Efecto del contenido del agua en la apariencia del EJEMPLO 1 .

Esta pasta seca se mezcló con agua y/o etanol, para formar una solución que modifica la viscosidad y se usa en muchos de los estudios, que incluye el EJEMPLO 2 al EJEMPLO 5 como se establece en la presente enseguida.

Varias cantidades de agua (desde 1.1% en peso a 4.1 % en peso) y etanol (a 6 % en peso) se agregaron en la pasta seca del EJEMPLO 1 para producir muchas muestras. Las muestras se mezclaron bien por medio de un mezclador BeadBeater, se centrifugaron para remover las burbujas de aire, y entonces se observaron para su apariencia inicial ("muestra inicial"). También, las muestran se pasaron a través de un filtro de 0.45 µ? y los filtrados se almacenaron a 2-8 °C para observación de apariencia adicional ("muestra filtrada"). La tabla 2 muestra el efecto del contenido de agua en la apariencia de las formulaciones. Se encontró que el contenido de agua afecta significativamente la apariencia de las formulaciones: Tabla 2 : .

Efecto del contenido del agua en la apariencia del EJEMPLO 1 Formulaciones EJEMPLO 3: Efecto . del contenido de agua en la estabilidad de la gentamicina y vancomiciná El efecto del contenido de agua residual en la estabilidad de la gentamicina y vancomiciná de las formulaciones, del. EJEMPLO 1 se evaluó por medio de un tratamiento autoclave de 60 min. Como se resume en la Tabla 3 a continuación, se encontró que la vancomiciná había reducido la estabilidad en términos de recuperación o pureza en el nivel más alto de agua residual. No se observó un efecto importante de agua en la estabilidad de gentamicina en el mismo intervalo.

Tabla 3: Efecto del contenido de agua en la estabilidad gentamicina y vancomicina EJEMPLO 4: Perfiles de estabilidad de pH . y solubilidad de pH de Gentamicina y Vancomicina en la formulación del EJEMPLO 1 Las formulaciones ajustadas del . pH del EJEMPLO 1 se colocaron a 2-8. °C para examinación de apariencia. (Ver la tabla 4 a continuación) .

Tabla : Efecto del pH en la apariencia de las formulaciones del EJEMPLO 1 Se generó un perfil de estabilidad de pH calentando las muestras del EJEMPLO 1 con un tratamiento autoclave de 60 minutos. (Ver la Tabla 5 a continuación).

Tabla 5: Efecto del pH en la estabilidad de las formulaciones del ¦ EJEMPLO 1 Los resultados indicaron, que: (1) el pH afectó la apariencia de las formulaciones del EJEMPLO 1. La formulación fue transparente a un pH de 3.2; (2) el pH afectó la estabilidad de la gentamicina en la formulación. Un pH bajo (por ejemplo, desde pH de 3 a 4 ) se prefiere para la estabilidad de gentamicina; y (3) el pH no afectó la estabilidad de la vancomicina de manera importante.

EJEMPLO 5: El perfil de estabilidad del pH de Gentamicina en la formulación del EJEMPLO 1 entre pH de 3.0 a 5.5 Las muestras de la formulación del EJEMPLO 1 en tres niveles diferentes de pH entre 3.0 a 5.5 se prepararon. Además, el efecto de L-histidina en la estabilidad de la formulación del EJEMPLO 1 también se probó comparando la formulación que contiene L-histidina con aquella que no contiene L-histidina. La estabilidad de gentamicina y vancomicina se evaluó del mismo modo como se establece en el EJEMPLO 3. Se encontró que (1) La estabilidad .de gentamicina en la formulación depende del pH (la gentamicina prefiere un pH bajo (por ejemplo, desde pH de 3 a 4); (2) La estabilidad de la vancomicina en la formulación es menos sensitiva, de pH en el intervalo de pH estudiado; (3) L-histidina incrementó la estabilidad de gentamicina en el intervalo de pH estudiado; y (4) L-histidina disminuyó la estabilidad de vancomicina en el intervalo de. pH estudiado.

La Figura 2 muestra la recuperación del ensayo después del tratamiento en autoclave.

EJEMPLO 6: Otro depósito de acuerdo con la presente invención y el proceso de fabricación de la formulación Tabla 6: Lista de ingredientes de otro depósito de acuerdo con la presente invención Un depósito claro estéril amarillo (tamaño de lote: 1500 g) , que contuvo menos de 0.5% en. peso de agua residual que tiene un pH de 3.3 se preparó por medio de un proceso de etapas múltiples seguido de las etapas de:. (1) emulsificación, (2) homogenización/microfluidización, (3) liofilización, (4) dilución de etanol, (5) pre-filtración, (6) remoción de etanol y (7) filtración. La mezcla simple de todos los ingredientes enlistados anteriormente no forma un depósito transparente.

Los procedimientos detallados para cada una de las etapas anteriormente observadas son como siguen: Primero, se agregó agua a sulfato de gentamicina, clorhidrato de vancomicina, para permitir la disolución completa de sulfato de gentamicina y clorhidrato de vancomicina. Luego, FOSFOLIPO (R) 90G (de Fosfolipido GmbH) y aceite de ajonjolí se agregaron, seguido por la mezcla de cizallamiento alto a 5000 rpm por 60 minutos para obtener una emulsión primaria uniforme. Entonces, el pH de la emulsión primaria se ajustó a 3.3 + 0.2 al agregar IN de HC1. Esto se hizo al agregar una cantidad apropiada de IN HC1 a la emulsión, seguido por la mezcla de cizallamiento alto por 1 minuto. Luego, la medición de pH se tomó para asegurarse que la emulsión primaria tuvo un pH ce 3.3 + 0.2. ¦ Posteriormente, la emulsión primaria se colocó en un microfluidizador para producir una solución monofásica. El diámetro promedio de las gotitas de la solución monofásica se midió usando un dispositivo de dispersión de rayo láser.

Luego, la solución monofásica se liofilizó para remover agua para obtener una pasta seca con menos de 0.5% de agua residual. Luego la pasta seca se mezcló con alcohol deshidratado. La mezcla entonces se sónico en un baño de agua a 60- 70 °C hasta que una solución transparente (viscosidad modificada) se obtuvo. Luego la solución se enfrió a temperatura ambiente, y se pre-filtró a través de un filtro estéril de micrón 0.65.

Luego el alcohol de la solución fue removido soplando gas de nitrógeno hasta que la cantidad residual de alcohol deshidratado fue 6.5%. en peso - 7 % en peso para obtener un gel viscoso y transparente. El alcohol deshidratado se agregó de vuelta según fue necesario, si se secó en exceso.

En capucha de bioseguridad, el gas argón a 40 psi (2.81 kg/cm2) se aplicó para filtrar el depósito a través de un filtro de 0.2 mieras para esterilizar la formulación. Luego, en una. capucha de seguridad, el depósito filtrado se llenó en un vial de vidrio.

EJEMPLO 7: Perfil de liberación in vitro . El perfil de liberación in vitro de la formulación del EJEMPLO 6 que contiene gentamicina y vancomicina se midió usando el método I USP usando aparato de vaso (100 rpm a 37 °C) . 1.36 g de la formulación del EJEMPLO 6 se llenó en una cápsula de tamaño 000. y la cápsula llena se colocó en una canastilla con malla 40 con deflectores. La Figura 3 muestra un perfil de liberación in vitro de gentamicina y vancomicina de la formulación del EJEMPLO 6 usando el método I USP. ' EJEMPLO 8: Estudios farmacocinéticos en conejos Se usaron conejos blancos de Nueva Zelanda para conducir estudios farmacocinéticos1 ("PK") para evaluar .'la entrega de las formulaciones hechas, de acuerdo con esta, invención. Se hicieron dos formulaciones de acuerdo con los procedimientos como se establece en el EJEMPLO 1 y EJEMPLO 6, respectivamente, y se administraron en una herida quirúrgica o bolsa subcutánea. La tabla 7 a continuación muestra el estudio PK de conejo diseñado a mayor detalle: Tabla .7 En un primer experimento, . se probaron dos conejos blancos de Nueva Zelanda. Después de la instilación en la herida de la formulación del EJEMPLO 1, la vancomicina y gentamicina se absorbieron rápidamente, con un Tmax de plasma de 1-2 horas. Las concentraciones Cmax de plasma fueron similares a aquellas observadas en el ratón. Las concentraciones en plasma disminuyeron a cerca del límite para cuantificación por 36 horas. Las concentraciones en tejido de vancomicina tuvieron un pico en 72 horas y estuvieron arriba de la concentración inhibidora mínima (MIC) mediante 168 horas, como se muestra en las Figuras 4 y 5.

Las concentraciones en el tejido de gentamicina tuvieron un pico a 72 horas y estuvieron en o debajo de MIC mediante 168 horas, como se muestra en las Figuras 6 y 7.

Los análisis de plasma y tejido se realizaron por análisis de Cromatografía líquida/Espectrometría de masas (LC- S/MS) y los resultados farmacocinéticos- (PK) de la formulación del EJEMPLO 1 se resumen en las Tablas 8 y 9, respectivamente a continuación: Tabla 8: Parámetros PK del plasma del conejo de la formulación del EJEMPLO 1 Tabla 9: Parámetros PK del tejido del conejo de la formulación del EJEMPLO 1 En un segundo experimento, seis conejos de Nueva Zelanda (Grupo I) se probaron por instalación de la herida de la formulación del EJEMPLO 6 que contiene la dosis de 12.6 mg/kg de vancomicina y 11.46 mg/kg de gentamicina ; y seis conejos adicionales de Nueva Zelanda (Grupo II) se probaron por instalación de la herida de la formulación del EJEMPLO 6 que contiene la dosis de 25.2 mg/kg de vancomicina y 22.9 mg/kg de gentamicina.

El gel de concentración más baja (Grupo I) promedió 4 pg/g tanto para vancomicina como para gentamicina total en el sitio de la herida, mientras que el gel de concentración más alta (Grupo II) promedió 26 y 19 4 pg/g para vancomicina y gentamicina, respectivamente, los cuales son más grandes que cuatro veces los valores MIC (concentración inhibidora mínima). Las concentraciones en plasma de vancomicina y gentamicina del estúdio MPI de la formulación del EJEMPLO 6 exhibieron relaciones AUC/MIC (área bajo la curva de concentración/concentración inhibidora mínima) de vancomicina mayores que 400 en ambas dosis y relaciones Cmax/MIC (concentración máxima/concentración inhibidora mínima) de gentamicina mayores que 800 en ambas dosis.

La Fig. 8 ilustra concentraciones medias en plasma de vancomicina en conejos después de instalación de herida sencilla subcutánea (SC) y la Fig. 9 ilustra la concentración media de plasma de gentamicina total en conejos.

El análisis de plasma y tejidos fue realizado por análisis LC-MS/MS, y los resultados PK de la formulación del EJEMPLO 6 se resumen en la Tabla 10 a continuación: Tabla 10 La diferencia clave entre la formulación del EJEMPLO 6 (fuerza alta) y la formulación del EJEMPLO 1 (fuerza baja) es que aunque los perfiles PK de estas dos formulaciones en animales pequeños, tal como ratones, fueron similares, hay una diferencia mayor en la realización cuando se prueban en animales más grandes, tal como conejos, ya que las concentraciones en. tejido para la formulación del EJEMPLO 1 cayeron debajo de 4 veces el valor MIC más pronto, por lo tanto describiendo un área inferior bajo la curva de concentración (AUC) con respecto al tiempo/área gastado 4 veces sobre MIC.

Ejemplo 1 Comparativo El Ejemplo 1 comparativo se produjo usando los mismos métodos como en los Ejemplos 1 o 6, excepto que las etapas de homogenización, la remoción de etanol y/o pre-filtración no se desarrollaron.

El Ejemplo .1 comparativo formó una pasta dura opaca después de la liofilización y no fue transparente y filtrable después de agregar el agente que modifica la viscosidad (etanol) .

EJEMPLO 9: Este ejemplo además ilustra un proceso para hacer una formulación de depósito de esta invención.

Tabla 11: Lista de ingredientes de una formulación de acuerdo con la presente invención ^Equivalente a 16.75 mg/g de gentamicina ** Equivalente a 18.76 mg/g de vancomicina Se agregó sulfato de gentamicina, clorhidrato de vancomicina, PL90G y aceite de ajonjolí y agua a un vaso de precipitados, mezcló y homogenizó por un mezclador de alto corte a 500 RPM durante 30 minutos para obtener una emulsión primaria. El pH de la emulsión primaria luego se ajustó hasta 3.3 por HC1 1N.

Se aplicó un microfluidizador ( -110EH, Microfluidics Corp) que reduce el tamaño de gota de la emulsión, primaria. La presión de operación se ajustó a 1757.3 kg/cm2 (25000 psi) . Después de 6 pasadas, el tamaño de gota (Z-Ave) de la solución monofásica fue menos de 80 nm por . dispersor de dispersión de luz láser (Nano-ZS, Malvern) . El pH de la solución monofásica se- verificó y ajustó hasta 3.3 como sea necesario.

La solución monofásica se transfirió en un recipiente de acero inoxidable con una altura de llenado menor que 3 cm y luego liofilizó para remover agua hasta menos de agua residual al 1% (por titulación Karl Fisher) para obtener una pasta seca. Después de la liofilización, la pasta seca se recolectó en un vaso de precipitados de 2L. Se agregó alcohol deshidratado en la pasta hasta 25% final (p/p) . La mezcla se disolvió al agitar . a temperatura ambiente para formar una solución amarilla transparente.

La solución transparente se evaporó para reducir el contenido de alcohol al · soplar el gas de nitrógeno para obtener un depósito viscoso y transparente con alcohol al 6% (p/p) . Luego el depósito se esterilizó al pasar a través de dos filtros de 0.2 um SARTOPORE (R) 2 .

Ejemplo Comparativo 2: Formulación hecha sin la etapa de microfluidización .

Se preparó una emulsión primaria de la misma forma como se describe en el Ejemplo 9. Esta emulsión primaria se agitó además durante la noche y se homogénizo con mezclado de corte alto adicional a- 5000 RPM durante .2 horas, y luego liofilizó de la misma manera como se describe en el Ejemplo 9. Para este ejemplo, la etapa de microfluidización no se empleó. Después de la liofilización, se agregó alcohol deshidratado en la pasta de manera que la cantidad del alcohol deshidratado fue¦ alrededor de 25% (p/p). La mezcla resultante no fue transparente aún después de agitar o calentar durante un periodo de tiempo extendido. El proceso no puede continuarse debido, a que no se obtuvo una solución transparente o filtrable.

Ejemplo Comparativo ' 3: Formulación hecha usando un recipiente de acero no inoxidable para la liofilización .

Se prepararon una emulsión primaria y solución monofásica de la misma manera como se describe en el Ejemplo 9. La nanoemulsión se 'liofilizó de la misma manera como se describe en el Ejemplo 9 excepto que se usó un recipiente dé vidrio en lugar de un recipiente de acero inoxidable. Después de la . liofilización, se agregó alcohol deshidratado en la pasta seca de manera que la cantidad del alcohol deshidratado es alrededor de 25% (p/p) con relación al peso total de la solución resultante que modifica la viscosidad. La mezcla resultante no fue transparente aún después de agitar o calentar durante un periodo de tiempo extendido. El proceso no puede continuarse debido a que no se obtuvo una solución transparente o filtrable.

Ejemplo Comparativo 4: Formulación hecha sin agregar alcohol deshidratado hasta alrededor de 25% (p/p) .

Se prepararon una emulsión primaria, solución monofásica y pasta seca de la misma manera como se describe en el Ejemplo 9. Después de la liofilización, se agregó alcohol deshidratado en la pasta de manera que la cantidad del alcohol deshidratado es alrededor de 6% (p/p) con relación al peso total de la solución resultante que modifica la viscosidad, y no 25% p/p. La mezcla resultante fue borroso y no transparente aún ' después de agitarse o calentarse durante un periodo prolongado de tiempo.

Como se menciona anteriormente, la transparencia de la solución se mide por apariencia, por ejemplo, que está libre de partícula visualmente suspendida, y la solución intermediaria tiene una transmisión de luz de más de alrededor de 90% medido a 800 nm (T800) en un cuveta de cuarzo de charola de 1 cm y alcohol como blanco cuando se mide por un espectrofotómetro UV visible, tal como uno hecho por Pharmacia, Model Ultrospec III EJEMPLOS 10A - 10F Componentes Ejemplo 10A Ejemplo 10B Ejemplo 10F Sulfato de . En una cantidad En una cantidad 0 gentamicina equivalente a equivalente a gentamicina al gentamicina al 1.68% (p/p) en 1.68% (p/p) en ensayo USP ensayo USP Clorhidrato de En una cantidad 0 0 vancomicina equivalente a gentamicina al 1.88% (p/p) en ensayo USP Lecitina de 50.00 51.00 50.00 soya El Ejemplo 10A identificado arriba se preparó de acuerdo al método de la presente invención.

El Ejemplo 10B identificado arriba también se preparó de acuerdo al método de la presente invención,.

El Ejemplo 10C identificado arriba se preparó de acuerdo al método de presente invención sin contener ningún agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofílico.

El Ejemplo 10D se preparó al mezclar la formulación del Ejemplo 10C con sulfato de gentamicina y clorhidrato de vancomicina. El Ejemplo 10D por lo tanto no se preparó de acuerdo al método de la presente invención.

El Ejemplo 10E se preparó al mezclar la formulación del Ejemplo 10C con sulfato de gentamicina únicamente. El Ejemplo 10E por lo tanto no se preparó de acuerdo con la presente invención.

El Ejemplo 10F se preparó sin la etapa de etapa de microfluidizació . En consecuencia, el Ejemplo 10F tampoco se preparó de acuerdo con la presente invención. La omisión de la etapa de fluidización resulta en precipitación en el depósito. El depósito resultante, por lo tanto, no fue transparente.

EJEMPLO 11: Caracterización Estructural por Difracción de Rayos X de Ángulo Pequeño (SAXS) de los Ejemplos 10A-10F Procedimiento: Se recolectaron datos de dispersión por rayos X de ángulo pequeño (SAXS) en una cámara de helio usando un generador de ánodo giratorio Bruker 18XHF22 que ¦ opera a 50kV y 50 mA suministrando un haz de radiación Cu (? = 1.541838 Á) que se colimó usando un colimador de perforación. Se filtró la radiación ?ß con un filtro de Ni. Un detector multihilos Highstar . se usó para recolectar los datos. Las muestras se cargaron sin modificación en capilares de vidrio de borosilicato de 0.9 mm y sellaron con epoxi. Las muestras se montaron en la cámara He en un goniómetro automatizado en la muestra para detectar la distancia de 64.55 om. Para prevenir al dispersión del aire se purgó gas He en la cámara durante 1 hora y luego cada muestra se recolectó durante 7200 segundos. Los datos se suavizaron e integraron sobre el circulo a 360°X desde 0.8 hasta 4.7 ° 2T en 0.1 y 0.02 anchos de grado. Los patrones se compararon, y las integraciones del ancho de 0.1 grados, se usaron para los refinamientos de las posiciones pico.

Resultados: La Figura 12 ilustra los patrones de difracción de rayos X del ángulo pequeño (SAXS.) de los Ejemplos 10A-10F.. Se observaron picos de difracción distintos. Los Ejemplos 10A, 10B y 10F exhiben un pico de difracción de ángulos bajos en alrededor de 2 Theta (grado) y las dos mezclas físicas (Ejemplos 10D y IGE) y el vehículo de depósito sin ningún agente activo (Ejemplo 10C) muestran un pico de difracción mucho más amplio en alrededor de 2.5 Theta (grado) .

Las formulaciones producidas usando el método de la presente invención (Ejemplos 10A y 10B) tienen un pico de difracción SAXS único formado en alrededor de 2 Theta (grado) , que no se encontró en el Ejemplo 10C o mezclas físicas del vehículo de depósito con los mismos fármacos (Ejemplos 10D y 10E) . El Ejemplo 10C tiene espaciado de cuadrícula más pequeño que los Ejemplos 10A, 10B y 10F.

Existe incremento de aproximadamente 8-9 Á calculado en el espaciado de cuadrícula cuando la gentamicina y vancomicina se incorporan en el depósito de acuerdo con la presente invención, formando tal estructura única (en la presente referido como la "Estructura 2-Theta") .

Las dos mezclas físicas (Ejemplos 10D y 10E) muestran espaciado de cuadrícula del pico de difracción primario que fue consistente con el vehículo de depósito (Ejemplo 10C) , indicando la mezcla física del vehículo de depósito con gentamicina y vancomicina que no cambian la estructura del vehículo.

Es sólo después dé que la vancomicina y/o gentamicina se incorporan en el vehículo, de depósito usando el proceso de la presente invención que se forma la estructura 2-Theta.

Esto indica claramente que las composiciones de la presente invención tienen una estructura 2-Theta única y tal estructura sólo puede obtenerse al usar el método de preparación de la presente invención.

La intensidad de difracción reducida en 2 Theta (grado) observada por el Ejemplo 10F sugiere que existe parcialmente la "Estructura 2-Theta" en la composición preparada sin la etapa de microfluidización .

Conclusión: Las composiciones de la presente invención, los Ejemplos 10A y 10B contienen la Estructura 2-Theta diferente .

EJEMPLO 12: ' Caracterización Estructural por Análisis Gavimétrico Térmico (TGA) de los Ejemplos 10A y 10D Procedimiento: Se llevaron a cabo experimentos TGA en un Instrumento Seiko TG/DTA 220 nit. La temperatura y entalpia se calibraron usando estándares de Indio y Estaño. Los barridos se completaron usando una rata de 10°C/min desde 25-300 °C con una tasa de purga de nitrógeno de. 80 ml/min en bandejas abiertas y un tamaño de muestra entre 5 y 10 mg.

Resultados: Como se muestra en la Figura 13, los resultados de TGA muestran diferencia pequeña en el perfil de pérdida de peso entre el Ejemplo 10A que se preparó de acuerdo al método de la presente invención y Ejemplo 10D, que no se preparó de acuerdo al método de la presente invención.

Ejemplo 13: Caracterización Estructural por Calorimetría de Barrido Diferenciada (DSC) de los Ejemplos 10A y 10D Procedimiento: Se llevaron a cabo experimentos DSC usando un Instrumento Seiko DSC 120 de DSC Modulado con célula sencilla con unidad RSC (enfriamiento refrigerado) . El DSC se calibró para temperatura y constante celular al usar un estándar de indio. Los barridos se corrieron en modo DSC normal en una tasa de 10°C/min en bandejas selladas con una tasa de purga de Nitrógeno de 40 ml/min con pesos entre 5 y 10 mg usados para cada .muestra. Los barridos' se. corrieron desde 25-300°C.

Resultados: Como ' se muestra en la Figura 14, los perfiles DSC para ambas muestras (Ejemplo 10A y 10D) se caracterizan por un evento endotérmico principal hasta alrededor de 100°C, que se relaciona probablemente para de desolvatación de las muestras. El Ejemplo 10D, sin embargo, muestra un pico endotérmico adicional en alrededor de 80 °C, posiblemente debido a la fusión de un fármaco sólido, esto es, sulfato de gentamicina y/o clorhidrato de vancomicina.

Aunque la invención . en la presente se ha descrito con referencia a modalidades particulares, es para entenderse que estas modalidades son meramente ilustrativas de los principios y aplicaciones de la presente invención. Por lo tanto es para entenderse que numerosas modificaciones pueden hacerse para las modalidades ilustrativas y que otras configuraciones pueden idearse sin alejarse del espíritu y alcance de la presente invención como se define por las reivindicaciones anexas.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCION Habiendo descrito la presente invención, se considera como novedad, y por lo tanto se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes: REIVINDICACIONES

1. Un método para hacer un depósito caracterizado porque comprende: (1) formar una emulsión de aceite en agua que incluye un fosfolipido, un aceite, al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofilico seleccionado del grupo que consiste de vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma o una mezcla de las mismas y agua; (2) homogeneizar la emulsión para obtener una emulsión primaria; (3) microfluidizar la. emulsión primaria para obtener una solución monofásica; (4) asegurar el pH de la emulsión primaria y/o la solución monofásica está entre alrededor de 3 hasta alrededor de 6 al ajusfar el. pH como sea necesario, (5) liofilizar la solución monofásica del pH deseado para obtener una pasta seca, (6) agregar un agente que modifica la viscosidad a la pasta seca en una cantidad de alrededor de 25% en peso o más del peso total de una solución que modifica la viscosidad resultante, (7) remover al menos algo del agente que modifica la viscosidad para obtener un depósito que tiene desde alrededor de 1% en peso hasta alrededor de 20% en peso del agente que modifica la viscosidad con relación al peso total del depósito, y (8) esterilizar el depósito.

2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el depósito es transparente.

3. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el depósito es ultra transparente.

4. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la etapa de formar la emulsión de aceite en agua comprende: disolver al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofilico seleccionado del grupo que consiste de vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma y una mezcla de la misma en el agua para obtener una solución acuosa; y mezclar la solución acuosa con el fosfolipido y el aceite.

5. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la cantidad del agente que modifica la viscosidad en el depósito es desde alrededor de 2% en peso hasta alrededor de 18 % en peso con relación al peso total del depósito.

6. El método de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la cantidad del agente que modifica la viscosidad es desde alrededor de 5% en peso hasta alrededor de 6.5% con relación al peso total del depósito.

7. El método de conformidad con. la reivindicación .1, caracterizado porque la sal farmacéuticamente aceptable de vancomicina y/o gentamicina es seleccionada del grupo que consiste de acetato, clorhidrato, bromhidrato, citrato, formiato, lactato, succinato, y sulfato.

8. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofilico es clorhidrato de vancomicina y sulfato de gentamicina.

9. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque la concentración de fármaco inicial del clorhidrato de vancomicina en agua es desde alrededor de 1 mg/ml hasta alrededor de 50 mg/ml.

10. El método de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la concentración de fármaco inicial de clorhidrato de vancomicina en agua es desde alrededor de 5 mg/ml hasta alrededor de 20 mg/ml.

11. El método de conformidad con la reivindicación 8, caracterizado porque la concentración de fármaco inicial del sulfato de gentamicina en agua es desde alrededor de 1 mg/ml hasta alrededor de 75 mg/ml.

12. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque la concentración de fármaco inicial del sulfato de gentamicina en agua es desdé, alrededor de 5 mg/ml hasta alrededor de..20 mg/ml.

13. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque además comprende la etapa de opcionalmente agregar el agente estabilizante y/o un agente que ajusta el pH a la emulsión, la emulsión primaria y/o a solución monofásica.

14. El método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizado porque el agente estabilizante es seleccionado del grupo que consiste de EDTA disodio, glicina, L-histidina, ácido cítrico, metionina, ácido ascórbico, L-cisteína, alfa-tocoferol, y mezclas de los mismos.

15. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la cantidad del agua en la emulsión antes de crear la emulsión primaria es desde alrededor de 60% en peso hasta alrededor de 80% en peso con relación al peso total de la emulsión.

16. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque las gotitas de la solución monofásica tienen un diámetro promedio de menos de alrededor de 120 nm.

17. El método de- conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el pH de la solución monofásica se ajusta hasta desde alrededor de 3 hasta alrededor de 5.

18. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el agente que modifica la viscosidad es seleccionado del grupo que consiste de etanol, isopropanol, y una mezcla de la misma.

19. El método de conformidad con la reivindicación 18, caracterizado porque el agente que modifica la viscosidad es etanol.

20. El método de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado porque el etanol es etanol absoluto.

21. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la cantidad del agente que modifica la viscosidad agregada es alrededor de 25% en peso o más con relación al peso total de la solución que modifica la viscosidad .

22. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la viscosidad de. la solución que modifica la viscosidad es desde alrededor de 10 hasta alrededor de 200 centipoise.

23. El método de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado porque la viscosidad de la solución que modifica la viscosidad es alrededor de 20 hasta alrededor de 50 centipoise.

24. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la viscosidad del , depósito . es desde alrededor de 100 centipoise hasta alrededor de 5000 centipoise.

25. El método de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado porque la viscosidad del depósito es desde alrededor de 20.0 centipoise hasta alrededor de 2000 centipoise.

26. El método de conformidad con la reivindicación 25, caracterizado porque la viscosidad del depósito es desde alrededor de 30.0 centipoise hasta alrededor de 1500 centipoise.

27. El método., de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el pH del depósito es desde alrededor de 3 hasta alrededor de 6.

28. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la cantidad del agua presente en el depósito no es más de alrededor de 4% en peso con relación al peso total del depósito.

29. El método de conformidad con . la reivindicación 28, caracterizado porque la cantidad no es más de alrededor de 2% en peso con relación al peso total del depósito.

30. El método de conformidad con la reivindicación 29, caracterizado porque la cantidad no es más de alrededor de 1% en peso con relación al peso total del depósito.

31. El método de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado porque la cantidad no es más de alrededor de 0.5% en peso con relación al peso total del depósito.

32. El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado porque además comprende la etapa de filtración previa de la solución que modifica la viscosidad para obtener una solución filtrada antes de la etapa de remover al menos algo del agente que modifica la viscosidad.

33. El método de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado porque además comprende, la etapa- de presentar asépticamente el depósito en una jeringa, un vial, cualquier otro dispositivo apropiado de almacenamiento y/o suministrar el depósito al sitio de tratamiento o herida.

34. Un método para hacer un depósito caracterizado porque comprende: (1) formar una emulsión de aceite en agua que incluye un fosfolipido, un aceite, al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofilico seleccionado del grupo que consiste de vancomicina, gentamicina, una . sal farmacéuticamente aceptable de la misma y una mezcla de la misma y agua; (2) convertir la emulsión a - una solución monofásica que tiene un pH de entre alrededor de 3 hasta alrededor de 6; (3) liofilizar la- solución monofásica para obtener una pasta seca, (4) agregar un agente que modifica la viscosidad a la pasta seca en una cantidad suficiente para obtener una solución que modifica la viscosidad, (5) remover al menos algo del agente que modifica la viscosidad para obtener un depósito, y (6) esterilizar el depósito, en donde el depósito es transparente.

35. El método de conformidad con la reivindicación 34, caracterizado porque el agente que modifica la viscosidad es etanol.

36. El método de conformidad con la reivindicación 34, caracterizado porque la cantidad del agua presente en el depósito no es más de alrededor de 4% en peso con relación al peso total del depósito.

37. El método de conformidad con la reivindicación 34, caracterizado porque la cantidad del agente que. modifica la viscosidad agregada para obtener una solución que modifica la viscosidad es alrededor de 25% en peso o más con relación al peso total de la solución que modifica la viscosidad.

38. El método de 'conformidad con la reivindicación 34, caracterizado porque la cantidad del agente que modifica la viscosidad presente en el depósito es desde alrededor de 1% en peso hasta alrededor de 20% en peso con relación al peso total del depósito.

39. El depósito producido de acuerdo con el método de conformidad con la reivindicación 1.

40. Un depósito que comprende al menos un agente farmacéuticamente activo soluble en agua hidrofilico seleccionado del grupo que consiste de vancomicina, gentamicina, una sal farmacéuticamente aceptable de la misma y una mezcla de la misma, agua, un fosfolipido, un aceite, opcionalmente un agente que ajusta el pH, y un agente que modifica la viscosidad, en donde el agua presente en el depósito no es más de alrededor de 4% en peso con relación al peso total del depósito y el depósito tiene un pH de entre alrededor de 3 ' y alrededor de 6.

41. El depósito de conformidad con la reivindicación 39, caracterizado porque la cantidad del agente que modifica la viscosidad presente en el depósito es desde alrededor de 1% en peso hasta alrededor de 20% en peso con relación al peso total del depósito.

42. El depósito de conformidad con la reivindicación 39, caracterizado porque la viscosidad del depósito es desde alrededor de 100 centipoises ' hasta alrededor de 5000 centipoises .

43. Un depósito transparente caracterizado porque comprende clorhidrato de . vancomicina y sulfato de gentamicina, agua,, un fosfolipido, un aceite, opcionalmente un agente que ajusta el pH, y agente que modifica la viscosidad, en donde el agua presente en el depósito no es más de alrededor de 4% en peso con relación al peso total del depósito y el depósito tiene un pH de entre alrededor de 3 y alrededor de 6.

44. El depósito de conformidad con la reivindicación 43, caracterizado porque la cantidad del agente que modifica la viscosidad presente en el depósito es desde alrededor de 1% en peso hasta alrededor de 20% en peso con relación al peso total del depósito.

45. El depósito de conformidad con la reivindicación 43, caracterizado porque la viscosidad del depósito es desde alrededor de 100 centipoise hasta alrededor de 5000 centipoise.

46. El método para administrar el depósito de conformidad con . la reivindicación 39, reivindicación 40 o reivindicación 43 a un paciente que necesite del mismo por medio intradérmico, intraincisional, intramuscular, subcutánea, instilación o tópicamente caracterizado porque el depósito es suficiente para liberar el agente farmacéuticamente activo por un periodo de alrededor de al menos un día con un volumen de dosificación desde alrededor de 0.1 mL hasta alrededor de 100 mL.

47. El método para tratar .la infección en el sitio quirúrgico al introducir el depósito de conformidad con la reivindicación 39, reivindicación 40 o reivindicación 43 caracterizado porque el depósito es suficiente para liberar el agente farmacéuticamente activo por un periodo de alrededor de al menos un día con un volumen de dosificación desde alrededor de 0.1 mL hasta alrededor de 100 mL.