MX2012006032A

MX2012006032A - Calconas como potenciadores de agentes antimicrobianos.

Info

Publication number: MX2012006032A
Application number: MX2012006032A
Authority: MX
Inventors: Ravi Subramanyam; Laurence Du-Thumm; Ghulam Nabi Qazi; Inshad Ali Khan; Krisham Avtar Suri; Naresh Kumar Satti; Furqan Ali; Nitin Pal Kalia
Original assignee: Indian Inst Of Integrative Medicine
Priority date: 2009-12-18
Filing date: 2009-12-18
Publication date: 2012-09-07
Also published as: CA2780876C; PL2512461T3; RU2012130405A; HK1176012A1; WO2011075136A1; EP2512461B1; CA2780876A1; TWI421097B; PH12012501199A1; EP2512461A1; CN102762200B; DK2512461T3; RU2521252C2; US20120251464A1; MY160565A; BR112012014737A2; TW201138847A; US9192589B2; JP2013514351A; AU2009356692A1

Abstract

Se describen compuestos que son efectivos para potenciar la eficacia de los agentes antimicrobianos. También, se describen métodos para la utilización de tales compuestos así como las composiciones que incluyen tales compuestos. La composición incluye un compuesto de calcona y, opcionalmente, un agente antimicrobiano.

Description

CALCONAS COMO POTENCIADORES DE AGENTES ANTIMICROBIANOS Campo de la Invención La invención se relaciona con el campo de los agentes antimicrobianos y con los compuestos capaces de potenciar la eficacia de los agentes antimicrobianos. Tales potenciadores se pueden utilizar para aumentar la eficacia de los agentes antimicrobianos en una variedad de campos, incluyendo por ejemplo, aumentar la eficacia de los agentes antimicrobianos para tratar las afecciones orales provocadas por la presencia de los microorganismos patógenos (por ejemplo, gingivitis, placa, etc.). La presente invención también provee procesos para la preparación de tales compuestos, las composiciones que incluyen tales compuestos, así como con el uso de los compuestos y composiciones en métodos para el tratamiento de las infecciones microbianas y otros trastornos producidos por los microorganismos patógenos .

Antecedentes de la Invención Una variedad de afecciones humanas deben su origen a los microorganismos patógenos, que incluyen bacterias, virus y hongos. La presencia de tales microorganismos patógenos conduce a septicemia, infecciones serias del tracto respiratorio superior e inferior, SNC, meningitis, tejido intra-abdominal incluyendo peritoneo, tracto genitourinario, Ref. 230701 piel y tejido blando, asi como una variedad de otras infecciones, tal como micosis sistémica, candidiasis incluyendo infecciones producidas por dermatofitos . Durante los últimos 100 años, se ha hecho progresos significativos para combatir las enfermedades producidas por tal gran familia de microbios con innumerables agentes terapéuticos de diversas naturalezas química y biológica que se han puesto a la disposición como cura a corto y largo plazo. Tales agentes antimicrobianos incluyendo aminoglicosidos , penicilinas, cefalosporinas , macrólidos, glicopéptidos , fluoroquinolonas , tetraciclinas , fármacos antiTB de primera y segunda línea, contra la lepra, antivirales, antifúngicos de polieno, triazol e imidazol, combinaciones, tales como los derivados de pirimidina y trxmetoprima y sulfametoxizol .

El constante uso de los antibióticos en el medio ambiente hospitalario ha dejado poblaciones bacterianas que son resistentes a muchos de los antibióticos. Estas poblaciones incluyen patógenos oportunistas que pueden no ser muy virulentos pero que son intrínsecamente resistentes a una cantidad de antibióticos. Tales bacterias a menudo infectan a pacientes debilitados o inmunocomprometidos . Las emergentes poblaciones resistentes también incluyen cepas de especies bacterianas que son agentes patógenos muy conocidos, los que anteriormente fueron susceptibles a los antibióticos. La reciente resistencia adquirida se debe en general a las mutaciones en el ADN, o a los plásmidos de resistencia (plásmidos R) o a los transposones que confieren resistencia transferidos desde otro organismo. Las infecciones por cualquier tipo de población bacteriana, patógenos oportunistas naturalmente resistentes o bacterias patógenas resistentes a los antibióticos, son difíciles de tratar con los antibióticos actuales. Se necesitan nuevas moléculas de antibióticos que puedan anular los mecanismos de resistencia.

A través de los años, las bacterias han desarrollado varios mecanismos diferentes para superar la acción de los antibióticos. Estos mecanismos de resistencia pueden ser específicos para una molécula o una familia de antibióticos, o pueden ser no específicos y estar involucrados en la resistencia a antibióticos no relacionados. Los mecanismos específicos incluyen la degradación del fármaco, la inactivación del fármaco por medio de la modificación enzimática, y la alteración del objetivo del fármaco (B. G. Spratt, Science 264:388 (1994)). No obstante, existen mecanismos más generales de resistencia a los fármacos, en los cuales se evita o reduce el acceso del antibiótico al objetivo mediante la disminución del transporte del antibiótico en la célula o mediante el aumento de la salida del fármaco desde la célula hacia el medio externo. Ambos mecanismos pueden reducir la concentración del fármaco en el lugar objetivo y permitir la supervivencia bacteriana en presencia de uno o más antibióticos que pudieran de otra forma inhibir o matar las células bacterianas. Algunas de las bacterias utilizan ambos mecanismos, combinando una baja permeabilidad de la pared celular (incluyendo las membranas) con una salida activa de los antibióticos. (H. Nikaido, Science 264:382-388 (1994)).

Al disminuir la permeabilidad de la membrana externa, ya sea mediante la reducción de la cantidad de porinas o mediante la reducción de la cantidad de una cierta especie de porinas, se puede disminuir la susceptibilidad de una cepa a un amplio intervalo de antibióticos debido a la reducida tasa de entrada de los antibióticos dentro de las células. Sin embargo, para la mayor parte de los antibióticos, los tiempos medios de equilibrado son suficientemente cortos de manera que el antibiótico pudiera ejercer su efecto a menos que esté presente otro mecanismo. Las bombas de salida .son ejemplos de tales otros mecanismos. Una vez en el citoplasma o el periplasma, un fármaco puede ser transportado de regreso al medio externo. Este trasporte es provocado por las bombas de salida, que están constituidas de proteínas. Diferentes bombas pueden excretar de manera específica un fármaco o un grupo de fármacos, tal como el sistema NorA que transporta quinolonas, o TeTA que transporta tetraciclinas , o ellas pueden excretar una gran variedad de moléculas, tales como ciertas bombas de salida de la Pseudomonas aeruginosa. En general, las bombas de salida tienen un componente citoplasmático y se requiere energía para transportar las moléculas fuera de la célula. Algunas bombas de salida tienen una segunda proteína en la membrana citoplasmática que se extiende hacia el periplasma.

Las bombas de salida de múltiples componentes, que pertenecen principalmente a los elementos de la familia de resistencia-modulación-división (R D) , que se encuentran mayormente en las bacterias Gram negativas, incluyen las bombas MDR AcrAB-TolC y MexAB-OprM de E. coli y Pseudomonas aeruginosa . La interacción entre las bombas de salida puede proveer efectos ya sea aditivos o multiplicativos sobre la resistencia al fármaco (A. Lee et al., J. of Bacteriology, 2000, 182: 3142). Las bombas MexAB-OprM, MexCD-OprJ, MexEF-OprN, MexXY-OprM, AcrAB-TolC, AcrEF, MarA, SoxS, y/o Tet son conocidas por estar presentes en los organismos Gram negativos, tal como P. aeruginosa y E. coli y se reportan en documentos y publicaciones recientes, tal como en Webber y Piddock, J. of Antimicrobial Chemother, 2003, 51: 39-11; Bambeke y otros J. of Antimicrobial Chemother, 2003, 51: 1055-1056, 74; Xian Zhi Li y otros, Journal of Antimicrob. Chemother., 2000, 45: 433 436; O Lomovskaya, y otros., Antimicrob. Agents and Chemother., 1999, 43: 1340 1346.

Una biopelícula es un grupo estructurado de microorganismos encapsulados dentro de una matriz extracelular polimérica autodesarrollada . Típicamente, las biopelículas se adhieren a una superficie viviente o inerte. En el organismo humano o animal las biopelículas se pueden formar sobre cualquier superficie interna o externa. Se ha encontrado que las biopelículas están involucradas en una amplia variedad de infecciones microbianas en el organismo y, por lo tanto, producen una cantidad de estados de salud incluyendo infecciones del tracto urinario, infecciones del oído medio, la formación de la placa dental y la gingivitis.

Los microorganismos presentes en una biopelícula tienen propiedades significativamente diferentes de los microorganismos flotantes de la misma especie. Esto es debido a que la matriz polimérica extracelular actúa para proteger los microorganismos del medio ambiente circundante permitiendo que los microorganismos cooperen e interactúen en varias formas que no exhiben los microorganismos flotantes. Estas complejas comunidades de microorganismos presentan un desafío único ya que ellas son a menudo resistentes a los medios clásicos de control antibacteriano. Las bacterias que viven en una biopelícula exhiben resistencia aumentada a los antibióticos debido a la densa matriz extracelular y la capa externa de células protege el interior de la biopelícula de los efectos de los antibióticos. Por consiguiente, los agentes antimicrobianos conocidos no tendrán el mismo efecto sobre las bacterias presentes en una biopelícula.

Por lo tanto, los factores celulares que afectan el transporte (transporte tanto activo como pasivo) de los antibióticos (así como de los agentes antibacterianos) hacia las células bacterianas son componentes importantes de la resistencia a los antibióticos para muchas especies bacterianas. Existe una necesidad de proveer compuestos y composiciones que aumenten la eficacia de los agentes antimicrobianos, incluso cuando la eficacia del agente antimicrobiano pueda estar afectada en forma adversa por la resistencia a los antibióticos.

Breve Descripción de la Invención La presente invención está dirigida a evadir tales problemas y la utilización de los productos de la presente invención ofrece un régimen de baja dosis que produce una acción terapéutica mejorada comparable con aquélla de la dosis estándar de un fármaco solo.

Una característica de la presente invención es proveer composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos de la presente invención. Una de las modalidades incluye una composición que comprende por lo menos uno de los compuestos de las fórmulas 1 a 4 y además, también puede incluir un antibiótico o compuesto antimicrobiano. Incluso otra característica de la presente invención se relaciona con un método para el tratamiento de las infecciones utilizando los compuestos de la presente invención o las composiciones que los comprendan. El tratamiento comprende la administración oral, parenteral y/o la aplicación tópica de una cantidad efectiva del compuesto de la presente invención o sus composiciones, ya sea solo o en combinación con un antibiótico o agente antimicrobiano o dos o más compuestos de esta invención.

Esta invención se relaciona con el uso de las calconas sintéticas para agentes antimicrobianos (y antibacterianos) . La presente invención se relaciona más específicamente con calconas y las composiciones que contienen las calconas seleccionadas del grupo que consiste de 3 - (4" -hidroxi - 3" -metoxi- fenil )- 1 -( 2 ' -hidroxi -5 ' -metoxi - fenil ) -prop-2 -en- 1 -ona (CK-1 - fórmula 2), 3- ( 4 ' -hidroxi - 3 ' -metoxi -fenil) -1-fenil -prop-2 - en- 1 -ona (CK-4 - fórmula 1), 3 - ( 2 " , 3 " -dimetoxi - fenil ) - 1 - furan- 2 - il -prop-2-en-l-ona (CK-14 - fórmula 3), 3 - ( 2 " , 5 " -dimetoxi -fenil) -1- (lH-pirrol-2-il) -prop - 2 -en- 1 -ona (CK-16 fórmula 4) , así como mezclas de las mismas.

Descripción Detallada de la Invención Se debe entender que la descripción detallada así como los ejemplos específicos, a la vez que indican modalidades de la presente invención, están proyectados para propósitos de ilustración solamente y no están dirigidos a limitar el alcance de la presente invención.

Las siguientes definiciones y guías no limitantes se deben considerar en la revisión de la descripción de esta invención enunciada en la presente. Los encabezados (tales como "Campo de la invención", "Antecedentes de la invención" y "Breve Descripción de la invención") que se utilizan en la presente están proyectados sólo para la organización general de los tópicos dentro de la descripción de la presente invención, y no están proyectados para limitar la descripción de la presente invención ni aspecto alguno de la misma. En particular, el tema que se describe en "Antecedentes de la invención" puede incluir aspectos de tecnología dentro del alcance de la presente invención, y puede no constituir una exposición de la técnica anterior. El tema que se describe en "Breve Descripción de la invención" no es una descripción exhaustiva ni completa de todo el alcance de la presente invención ni de ninguna de las modalidades de la misma. La clasificación o explicación de un material dentro de una sección de esta especificación como teniendo una utilidad particular (por ejemplo, que es un ingrediente "activo" o un "portador") se hace por conveniencia, y no se debe extraer ninguna inferencia de que el material necesaria o únicamente debe funcionar de acuerdo con su clasificación en la misma cuando se utiliza en cualquiera de las composiciones dadas.

La cita de las referencias en la presente no constituye una admisión de que esas referencias son la técnica anterior o que tienen alguna relevancia para la patentabilidad de la presente invención que se describe en la presente. Cualquier explicación acerca del contenido de las referencias citadas en los Antecedentes de la invención está proyectada simplemente para proveer un resumen general de las afirmaciones realizadas por los autores de las referencias, y no constituye una admisión de la precisión del contenido de tales referencias .

La descripción y ejemplos específicos, a la vez que indican modalidades de la presente invención, están proyectados para propósitos de ilustración solamente y no están dirigidos a limitar el alcance de la presente invención. Además, la exposición de las múltiples modalidades que tienen las características establecidas no está proyectada a excluir otras modalidades que tengan características adicionales, u otras modalidades que incorporen diferentes combinaciones de las características expuestas. Los Ejemplos específicos se proveen para propósitos ilustrativos de cómo elaborar y utilizar las composiciones y métodos de esta invención, y a menos que se indique explícitamente lo contrario, no se proyecta que sean una representación de las modalidades dadas de esta invención hayan, o no, sido preparadas o probadas.

Conforme se utiliza en la presente, las palabras "preferido" y "preferiblemente" se refieren a las modalidades de la presente invención que producen ciertos beneficios, bajo ciertas circunstancias. No obstante, otras modalidades también pueden ser preferidas, bajo las mismas u otras circunstancias. Asimismo, la exposición de una o más modalidades preferidas no implica que otras modalidades no sean útiles, y no se proyecta excluir las otras modalidades del alcance de la presente invención. En adición, las composiciones y los métodos pueden comprender, consistir esencialmente de, o consistir de los elementos que se describen en la presente.

Conforme se utiliza en la presente, la palabra "incluir", y sus variantes, está proyectada para ser no limitante, de manera que la exposición de los elementos en una lista no es la exclusión de otros elementos similares que también puedan ser útiles en los materiales, composiciones, dispositivos y métodos de esta invención.

Conforme se utiliza en la presente, el término "aproximadamente" , cuando se aplica al valor de un parámetro de una composición o método de esta invención, indica que el cálculo o la medición del valor permiten alguna ligera imprecisión sin que tenga un efecto substancial sobre los atributos químicos o físicos de la composición o método. Si, por alguna razón, la imprecisión provista por "aproximadamente" no es por lo demás entendida en la técnica con este significado usual, entonces "aproximadamente" conforme se utiliza en la presente, indica una posible variación de hasta 5% en el valor.

Conforme se hace referencia en la presente, todos los porcentajes de las composiciones son en peso de la composición total, a menos que se especifique lo contrario .

Las presentes modalidades incluyen composiciones que comprenden las calconas, 3-(4"-hidroxi-3" -metoxi - fenil ) -1- (2 ' -hidroxi-5 ' -metoxi - feni 1 ) -prop-2-en-l-ona (CK-1 - fórmula 2), 3 - ( 4 ' - hidroxi - 3 ' -metoxi-fenil) -1-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4 - fórmula 1), 3-(2",3"-dimetoxi-fenil) - 1 - furan- 2 - il -prop- 2 - en- 1 -ona (CK-14 - fórmula 3), 3 - ( 2 " , 5" - dimetoxi - feni 1 ) - 1 - ( 1H-pirrol - 2 - i 1 ) -prop- 2 - en- 1 -ona (CK-16 - fórmula 4), así como mezclas de las mismas. Se cree que estos compuestos y composiciones tienen las propiedades de potenciar la eficacia de la selección in vitro, cuando se combinan con varios agentes ant infecciosos utilizando bacterias, virus y levaduras. Estas composiciones y compuestos también fueron eficaces cuando se probaron in vivo utilizando modelos de ratones y conejillos de India infectados con microorganismos. Las estructuras de las calconas de las modalidades preferidas se proveen en la tabla siguiente, la que ilustra las síntesis de los compuestos .

Los compuestos de la presente invención no han sido reportados por ser útiles para potenciar la bioeficacia de los fármacos, en particular los fármacos antinfecciosas , tal como se describe en la presente invención. La síntesis de los compuestos se ha llevado a cabo a través de la combinación de varias etapas químicas conocidas en la técnica de la síntesis. Un experto en la técnica será capaz de sintetizar los compuestos que se describen en las modalidades, utilizando las guías que se proveen en la presente.

Los derivados de la calcona de la fórmula 2, es decir , 3 - ( 4 " -hidroxi - 3 " -meto i -fenil) -1- ( 2 ' -hidroxi - 5 ' -metoxi - fenil ) -prop- 2 -en- 1 -ona , y de la fórmula 1, es dec ir , 3 - ( 4 ' -hidroxi - 3 ' -metoxi -fenil) -1-fenil -prop- 2 -en-1-ona, fueron sintetizados mediante la condensación de los derivados de acetofenona con aldehidos aromáticos substituidos en condiciones alcalinas o ácidas, mientras que en el caso de los compuestos 3 y 4, la condensación fue entre aldehido aromático substituido y 2- acetilfurano y aldehidos aromáticos substituidos y 2- acetilpirrol , respectivamente. La síntesis y estructura de las fórmulas 1 a 4 se muestran en la forma esquemática a continuación.

Síntesis de la Calcona Como ejemplo ilustrativo, la estructura química del compuesto 1, 3- (4 ' -hidroxi-3' -metoxi-fenil) -1-fenil-prop-2- en-l-ona, que también se denomina fenil-3-metoxi-4- hidroxiestitiril cetona, es como sigue: Mientras que no se proyecta estar limitados por alguna de las teorías o modos de operación, se cree que estos compuestos inhiben las bombas de salida celular de las bacterias u otros microbios. Tales bombas de salida celular exportan moléculas de substrato desde el citoplasma en una forma dependiente de la energía, y las moléculas de substrato exportadas pueden incluir agentes antibacterianos u otros agentes antimicrobianos y desinfectantes. Tales inhibidores de las bombas de salida son útiles, por ejemplo, para el tratamiento de las infecciones microbianas mediante la reducción de la exportación de un agente antimicrobiano coadministrado o para evitar la exportación de un compuesto sintetizado por los microbios (por ejemplo, bacterias) que permite o mejora su desarrollo. Un ejemplo de reducción de la exportación de tal compuesto es la inhibición de la disponibilidad del hierro para el microbio al reducir la exportación de los sideróforos. Mientras que no se proyecta estar ligado a teoría de operación alguna, los compuestos también pueden potenciar la eficacia de ciertos agentes antibacterianos mediante la inhibición de la formación de la biopelícula y/o la degradación de una biopelícula. Por lo tanto, se cree que los compuestos y composiciones son útiles para prevenir las afecciones causadas por la formación de la biopelícula. De esta manera, esta invención también provee composiciones que incluyen tales compuestos y métodos para el tratamiento de las infecciones microbianas, las condiciones causadas por la presencia de microorganismos patógenos, así como las afecciones causadas por la formación de las biopelículas .

Por lo tanto, es una característica de la presente invención proveer un método para suprimir el crecimiento de una bacteria o un hongo, que comprende poner en contacto tal bacteria u hongo con un compuesto de calcona de la presente invención en presencia de una concentración de agente antibacteriano o antifúngico por debajo de la concentración inhibitoria mínima (MIC, por sus siglas en inglés) de tal bacteria u hongo.

Es una caracterís ica adicional de la presente invención, proveer métodos para el tratamiento de las infecciones en humanos y animales, causadas por cepas microbianas sensibles y resistentes utilizando un agente antimicrobiano y un compuesto de calcona de la presente invención en una cantidad suficiente para reducir la resistencia a los antibióticos, o una cantidad suficiente para inhibir la formación de la biopelícula y/o degradar una biopelícula, en donde el compuesto de calcona aumenta la susceptibilidad del microbio al agente antimicrobiano.

Otra característica de la presente invención provee un método para el tratamiento profiláctico de un humano o animal, que comprende la administración a tal humano o animal en riesgo de una infección microbiana de un compuesto de calcona de la presente invención, en donde el compuesto reduce la patogenicidad de un microbio en el humano o animal .

Otra característica de la presente invención provee un método para el tratamiento profiláctico de un humano o animal, que comprende la administración a tal humano o animal en riesgo de una infección microbiana de un agente antimicrobiano y un compuesto de calcona de la presente invención, en donde el compuesto aumenta la susceptibilidad de un microbio al agente antimicrobiano.

Otra característica de la presente invención provee un método de tratamiento que utiliza un compuesto de calcona de la presente invención mediante la administración, en forma sistemática o tópica, del compuesto al humano o animal afectado, evitando de esta manera los efectos tóxicos asociados con las mezclas de los compuestos de la presente invención.

Otra característica de la presente invención es potenciar la actividad antimicrobiana de un agente antimicrobiano contra un microbio al poner en contacto el microbio con un agente antimicrobiano y un compuesto de calcona de la presente invención.

El término "fármaco" que se utiliza en esta descripción se refiere a una entidad química capaz de afectar la pato-fisiología del organismo, y se puede utilizar para el tratamiento o prevención de las enfermedades. Los fármacos incluyen una cantidad de clases de compuestos, que incluyen, pero no están limitados a, aminoglicósido, penicilinas, cefalosporinas y otros agentes de ß-lactama, macrólidos, glicopéptidos , fluoroquinolonas , tetraciclinas , fármacos antiTB de primera y segunda línea, contra la lepra, antivirales, polienos, triazoles e imidazoles así como combinaciones, tales como pirimidinas, sulfametoxazol , compuestos fenólicos, tal como triclosán, magnolol y sus derivados, honokiol y sus derivados, compuestos de amonio cuaternario, tal como cloruro de cetilpiridinio . Los fármacos pueden ser un calconafármaco, activado o metabolizado, consistente de especies cargadas, descargadas, hidrófilas, hidrófobas o zwiteriónicas que hacen su entrada mediante simple difusión, transporte mediado por portador dependiente y no dependiente de los requerimientos de energía, a través de canales dependientes de voltaje y/o de iones.

Los derivados de calcona particularmente preferidos de las fórmulas 1 a 4 se seleccionaron del siguiente conjunto de compuestos preparados mediante los métodos que se describen en los ejemplos. Se puede utilizar uno o más de los derivados de calcona en las modalidades que se describen en la presente. 1. 3- (4 ' -hidroxi-3 ' -metoxi-fenil) -l-fenil-prop-2-en-l-ona, 2. 3- (4" -hidroxi-3" -metoxi-fenil) -1- (2 ' -hidroxi-5' -metoxi-fenil) -prop-2-en-l-ona, 3. 3- (2" , 3" -dimetoxi-fenil) -l-furan-2-il-prop-2-en-l-ona 4. 3- (2" , 5" -dimetoxi-fenil) -1- (lH-pirrol-2-il) -prop-2 -en-1-ona, 5. 1- (2-furil) -3- (3 , 4-dimetoxifenil) -prop-2 -en-l-ona, 6. 1- (2-furil) -3-fenilprop-2-en-l-ona, 7. 1- (2-furil) -3- (3,4, 5-metilendioxifenil ) -prop-2-en-l-ona, 8. 1- (2-furil) -3- (3 -hidroxi-metoxifenil) -prop-2-en-l-ona, 9. 1- (2-furil) -3- (3-nitrofenil) -prop-2-en-l-ona, 10. 1- (2-furil) -3- (3-hidroxifenil) -prop-2 -en- 1-ona, 11. 1- (2-furil) -3- (4 , 5-nitrofenil) -prop-2 -en-l-ona, 12. 1- (2-furil) -3- (3, 6-diclorofenil) -prop-2-en-l-ona, 13. 1- (2-furil) -3- (2 , 3 -dimetioxifenil ) -prop-2-en- 1-ona, 14. 1- (2-furil) -3- (2, 5-dimetoxifenil) -prop-2-en-l-ona, 15. 3- (4-nitrofenil) -1- (lH-pirrol-2-il) -propenona, 16. 3- (3-nitrofenil) -1- (lH-pirrol-2-il) -propenona, 17. 3- (2, 5-diclorofenil) -1- ( lH-pirrol-2 -il) -propenona, 18. 3- (2 , 3 -dimetioxifenil) -1- (lH-pirrol-2-il) -propenona, 19. 3- (2, 3 -dicloro-fenil) -1- (lH-pirrol-2-il) -propenona, 20. 3- (2, 6-diclorofenil) -1- (lH-pirrol-2-il) -propenona .

Los ejemplos particularmente adecuados de un microbio apropiado para el uso con un compuesto de calcona de las modalidades preferidas son especies bacterianas patógenas, tal como Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa, Escherischia coli, Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans, Actinomycetes viscosus, Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis que pueden intrínsecamente ser resistentes a los agentes antibacterianos comúnmente utilizados. Se cree que al exponer estas bacterias a un compuesto de calcona de la presente invención se puede desacelerar significativamente la exportación de un agente antibacteriano desde el interior de la célula o la exportación de los sideróforos. Por ejemplo, se ha reportado la sobreexpresión de un transportador de múltiples fármacos norA para las cepas de S. aureus para la resistencia a la fluoroquinolona ambas in-vitro (Kaatz y Seo, Antimicrobial agents and Chemother., 1997, 41: 2733-2737). Por lo tanto, si se administra otro agente antibacteriano en conjunto con el compuesto de calcona de la presente invención, el agente antibacteriano, que podría de otra manera ser mantenido a una concentración intracelular muy baja por el proceso de exportación, puede acumularse hasta una concentración que inhibirá el desarrollo de las células bacterianas. Esta inhibición del desarrollo se puede deber ya sea a la actividad bacteriostática o bactericida, dependiendo del agente antibacteriano específico utilizado. Mientras que la P. aeruginosa es un ejemplo de una bacteria apropiada, otras especies de bacterias y microbios incluyendo aquéllas que se describen líneas arriba pueden contener amplias bombas de substrato similares, que exportan en forma activa una variedad de agentes antimicrobianos, y de esta manera también pueden ser objetivos apropiados.

Por consiguiente, ilustrando la utilidad de los compuestos de calcona de la presente invención, que inhiben la bomba de salida de las cepas Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa, Escherischia coli, Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans, Actinomycetes viscosus, Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis se cree que se puede obtener uno o más de los siguientes efectos biológicos: 1) Las cepas de Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa, Escherischia coli, Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans, Actinomycetes viscosus, Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis se harán susceptibles a los antibióticos que pudieran no ser utilizados para el tratamiento de las respectivas infecciones bacterianas, o se harían más susceptibles a los antibióticos que inhiben el respectivo desarrollo bacteriano; 2) las cepas de Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa, Escherischia coli, Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans, Actinomycetes viscosus, Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis se harán más susceptibles a los antibióticos actualmente utilizados para el tratamiento de las respectivas infecciones bacterianas; 3) la virulencia de Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Pseudomonas aeruginosa, Escherischia coli, Staphylococcus aureus, Streptococcus mutans, Actinomycetes viscosus, Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis será atenuada debido a que se impide la disponibilidad de un elemento portador de sideróforo esencial; y 4) la inhibición de las bombas o de uno de los componentes de las bombas puede ser letal o prevenir su desarrollo.

Al obtener inclusive uno de estos efectos se provee un potencial tratamiento terapéutico para las infecciones por estas bacterias. Algunos o todos de los efectos mencionados líneas arriba también se pueden obtener con esos microbios, y por lo tanto los mismos también son objetivos apropiados para la detección y uso de los inhibidores de las bombas de salida. De esta manera, el término "microbios" incluye, por ejemplo, bacterias, hongos, levaduras y protozoarios .

Conforme se indica, la bacteria a ser inhibida a través del uso de un compuesto de calcona de la presente invención puede ser de otros grupos o especies bacterianas, tales grupos o especies bacterianas incluyen pero no están limitados a los siguientes: Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas acidovorans, Pseudomonas alcaligenes, Pseudomonas putida, Stenotrophomonas maltophilia, Burkholderia capada, Aeromonas hydrophilia, Escherichia coli, Citrobacter freundil , Salmonella tryphim rium, Salmonella typhi , Salmonella paratyphi , Salmonella enteritidis, Shigella dysenteriae, Shigella flexneri , Shigella sonnet, Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Serratia, marcescens, Francisella tularensis, Morganella morganii , Proteus mirabilis, Proteus vulgaris, Providencia álcalifaciens, Providencia rettgeri , Providencia stuartii, Porphyro pnas gingivalis, Prevotella intermedia, Acinetobacter calcoaceticus, Acinetobacter haemolyticus, Actinomycetes viscosus, Yersinia enterocolitica, Yersinia pestis, Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia intermedia, Bordetella pertussis, Bordetella parapertussis, Bordetella bronchiseptica, Haemophilus influenzae, Haemophilus parainfluenzae, Haemophilus duicreyi , Haemopuilus actinomycetemcomitans, Pasteurella multocida, Pasteurella hae olytica, Branhamella catarrhalis, Helicobacter pylori, Campylobacter fetus, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli, Borrelia burgdorferi , Vibrio cholerae, Vibrio parahaemolyticus, Legionella pneu ophila, Listeria monocytogenes, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Kingella, Morazella, Gardenerella vaginalis, Bacteroides fragilis, Bacteroides distasonis, grupo de homología de Bacteroides 3452A, Bacteroides distasonis, Bacteroides ovalus, Bacteroides thetaiotaomicron, Bacteroides uniformis, Bacteroides eggerthii , Bacteroides splanchnicus, Clostridium diffile, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium aviu , Mycobacterium intracellulare, Mycobacterium leprae, Corynebacterium diphtheriae, Corynebacterium ulcerans, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus agalactiae, Streptococcus mutans, Streptococcus sanguis, Streptococcus salivarius, Streptococcus pyogenes, Enterococcus f ecalis, Enterococcus faecium, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus intermedius, Staphylococcus hyicus subsp. hyicus, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus hominis y Staphylococcus saccharolyticus .

El término "bomba de salida" se refiere a un ensamble de proteínas transmembrana que exportan moléculas de substrato desde el citoplasma o el periplasma de una célula, en una forma dependiente de la energía. De esta manera, una bomba de salida típicamente estará localizada en la membrana citoplasmática de la célula (abarcando la membrana citoplasmática) . En la bacterias Gram negativas la bomba puede abarcar el espacio periplasmático y también puede haber una porción de la bomba de salida que abarque la membrana externa .

Un "inhibidor de la bomba de salida" es un compuesto que específicamente interfiere con la habilidad de una bomba de salida de exportar su substrato normal, u otros compuestos, tal como un antibiótico. El inhibidor puede tener actividad antimicrobiana intrínseca (por ejemplo, antibacteriana) por sí mismo, pero por lo menos una porción significativa de la actividad relevante se debe a la actividad inhibitoria de la bomba de salida. De particular interés en las modalidades, son los compuestos que inhiben la exportación o actividad de la bomba de salida, que tienen un amplio intervalo de substratos que incluye los agentes antibacterianos .

En otro aspecto, esta invención provee un método para el tratamiento de una infección microbiana, por ejemplo, una infección bacteriana, en un animal por medio de la administración a un animal que sufre de tal infección de uno o más compuestos de calcona conforme se- describe líneas arriba en una cantidad suficiente para reducir la actividad de la bomba de salida, o en una cantidad suficiente para inhibir la formación de la biopelícula y/o degradar la biopelícula.

En una modalidad preferida, el compuesto de calcona es uno que disminuye la patogenicidad del microbio. Tal disminución en la patogenicidad se puede obtener, por ejemplo, al interferir con la adquisición del elemento bacteriano esencial mediante la inhibición del transporte de los sideróforos, o mediante la inhibición o degradación de la formación de la biopelícula. La patogenicidad también puede ser reducida mediante la disminución o eliminación de los productos microbianos que causan los efectos de daños a los tejidos del huésped. Otros métodos para reducir la patogenicidad están, no obstante, también dentro de este aspecto .

En ciertas modalidades preferidas, la infección microbiana o trastorno puede ser debido a las bacterias, que pueden, por ejemplo, ser de cualquier especie bacteriana indicada líneas arriba, pero incluyendo de manera específica Streptococcus pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Escherischia coli, Staphylococcus aureus . Tales trastornos, cuando están presentes en la cavidad oral incluyen, por ejemplo, gingivitis, caries dental, formación de la placa y similares .

En un aspecto relacionado, esta invención provee un método para el tratamiento de un animal que sufre de una infección microbiana mediante la administración al animal de un compuesto de calcona de la presente invención en una cantidad suficiente para potenciar la actividad del agente antimicrobiano administrado junto con el compuesto de calcona. En este aspecto, el compuesto de calcona puede ser uno que reduce la viabilidad en vivo de un microbio involucrado en la infección. Mediante la reducción de la viabilidad in vivo, el animal infectado puede más rápidamente limpiar su organismo de la infección, o los microbios pueden incluso ser eliminados. En modalidades particulares, el animal es un mamífero. También, en modalidades particulares, el microbio puede ser de una variedad de especies bacterianas patógenas, incluyendo de manera específica aquéllos listados líneas arriba.

En un aspecto relacionado, la invención provee un método para el tratamiento de una infección microbiana en un animal, específicamente incluyendo en un mamífero, mediante el tratamiento de un animal que sufre de tal infección con un agente antimicrobiano y un compuesto de calcona de la presente invención que aumenta la susceptibilidad del microbio a ese agente antimicrobiano. En este sentido, un microbio involucrado en la infección puede ser tratado utilizando el agente antimicrobiano en cantidades menores, o puede ser tratado con un agente antimicrobiano que no es efectivo desde el punto de vista terapéutico cuando se utiliza en ausencia del compuesto de calcona. De esta manera, este método de tratamiento es especialmente apropiado para el tratamiento de las infecciones que utilizan un agente antimicrobiano solo debido a una necesidad de elevados niveles de dosis (los que pueden causar efectos secundarios indeseables) , o debido a la falta de algún agente antimicrobiano efectivo desde el punto de vista clínico. Sin embargo, también es apropiado para el tratamiento de las infecciones que involucran microbios que son susceptibles a agentes antimicrobianos particulares como forma de reducir la dosis de esos agentes particulares. Esto puede reducir el riesgo de efectos secundarios, pero también puede reducir el efecto de selección para microbios altamente resistentes que resultan del consistente uso de niveles elevados de un agente antimicrobiano particular. En modalidades particulares, el microbio es una bacteria, que puede, por ejemplo, ser de cualquiera de los grupos o especies que se indica líneas arriba. También, en modalidades particulares se pueden utilizar varios agentes antibacterianos. Éstos incluyen quinolonas, tetraciclinas , glicopéptidos , aminoglicósidos , beta-lactamas, rifamicinas, cumermicinas , macrólidos y cloranfenicol .

En modalidades particulares, un antibiótico de las clases mencionadas líneas arriba puede ser, por ejemplo, uno de los siguientes: Antibióticos de Beta-Lactama Imipenem, meropenem, saneftrinem, biapenem, cefaclor, cefadroxil, cefamandol, cefatrizina, cefazedona, cefazolin, cefixima, cefmenoxima, cefodizima, cefonicid, cefoperazona, ceforanida, cefotaxima, cefotiam, cefpimizol, cefpiramida, cef odoxima, cefsulodina, ceftazidima, cefteram, ceftezol, ceftibuteno, ceftizoxima, ceftriazona, cefurozima, cefuzonam, cefaceteril, cefalexina, cefaloglicina, cefaloridina, cefalotina, cefapirina, cefradina, cefmetazol, cefoxitina, cefotetan, aztreonam, carumonam, flomoxef, moxalactam, amidinocilina, amoxicilina, amicilina, azlocilina, carbenicilina, bencilpenicilina, carfecilina, cloxacilina, dicloxacilina, meticilina, mezlocilina, nafcilina, oxacilina, penicilina G, piperacilina, sulbenicilina, temocilina, ticarcilina, cefditoren, SC004, KY-020, cefdinir, ceftibuteno, FK-312, S-1090, CP-0467, BK-218, FK-037, DQ-2556, FK-518, cefozopran, ME1228, KP-736, CP-6232, Ro 09-1227, OPC-20000, LY206763, macrólidos, azitromicina, claritromicina, eritromicina, oleandomicina, rokitamicina, rosaramicina, roxitromicina, troleandomicina, telitromicina y otros quetólidos. Las quinolonas amifloxacina, cinoxacina, ciprofloxacina, enoxacina, fleroxacina, flumequina, 1ornefloxacina, ácido nalidíxico, norfloxacina, ofloxacina, levofloxacina, ácido oxolínico, pefloxacina, difloxacina, marbofloxacina, rosoxacina, temafloxacina, tosufloxacina, esparfloxacina, elinafloxacina, trovafloxacina, alatrofloxacina, grepafloxacina, moxifloxacina, gatifloxacina, gemifloxacina, nadifloxacina, PD131628, PD140248, Q-35, AM-1155, NM394, T-3761, rufloxacina, OPC-17116, DU-6859a (identificado en Sato, K. y otros, 1992, Antimicrob Agents Chemnother. 37:1491 98), DV-7751a (identificado en Tanaka, M. y otros, 1992 Antimicrob Agents Chemother 37:2212 18).

Tetraciclinas Clortetraciclina, demeclociclina, doxiciclina, limeciclina, metaciclina, minociclina, oxitetraciclina, tetraciclina, aminoglicósidos , amikacina, arbekacina, butirosina, dibekacina, fortimicinas, gentamicina, kanamicina, netilmicina, ribostanicina, sisomicina, espectinomicina, estreptomicina, tobramicina, clindamicina, lincomicina.

Oxazolidinonas Linezolida, eperezolida.

Cada uno de los compuestos ha sido reportado en la literatura. También se pueden utilizar otros compuestos de antibióticos que puedan ser identificados con los compuestos de calcona de esta invención.

En el contexto de la respuesta de un microbio, tal como una bacteria, a un agente antimicrobiano, el término "susceptibilidad" se refiere a la sensibilidad del microbio a la presencia del agente antimicrobiano. Así, potenciar la susceptibilidad quiere decir que el microbio será inhibido por una concentración más baja del agente antimicrobiano en el medio que circunda las células microbianas. Esto es equivalente a decir que el microbio es más sensible al agente antimicrobiano. En la mayor parte de los casos, la concentración inhibidora mínima (MIC) de ese agente antimicrobiano se habrá reducido.

La presente invención también caracteriza un método para potenciar la actividad antimicrobiana de un agente antimicrobiano contra un microbio, en el cual tal microbio es contactado con un compuesto de calcona de la presente invención, por ejemplo, un compuesto de calcona no específico para la tetraciclina, y un agente antibacteriano. De esta manera, este método hace más efectivo un agente antimicrobiano contra una célula que expresa una bomba de salida, o contra una célula involucrada en la formación de una biopelícula, cuando la célula se trata con la combinación de un agente antimicrobiano y el compuesto de calcona. En modalidades particulares, el microbio es una bacteria o un hongo, tal como cualquiera de aquéllos que se describen líneas arriba; el agente antibacteriano puede ser seleccionado de una cantidad de clases estructurales de antibióticos incluyendo, por ejemplo, beta-lactama, glicopéptidos , aminoglicósidos , quinolonas, tetraciclinas , rifamicinas, cumermicinas , macrólidos y cloranfenicol . En modalidades particulares, un antibiótico de las clases mencionadas anteriormente puede ser conforme se establece líneas arriba.

En un aspecto adicional, la presente invención provee composiciones farmacéuticas efectivas para el tratamiento de una infección de un animal, por ejemplo, un mamífero, por un microbio, tal como una bacteria o un hongo. La composición incluye un portador aceptable desde el punto de vista farmacéutico y un compuesto de calcona conforme se describe líneas arriba. En las modalidades preferidas, tales composiciones contienen compuestos de calcona que son en sí mismos agentes antimicrobianos efectivos, incluso en presencia de otro agente antimicrobiano (es decir, tienen actividad antimicrobiana intrínseca) . De esta manera, la composición farmacéutica que incluye tales compuestos de calcona se puede utilizar sola o en conjunto con otro agente antimicrobiano .

También en las modalidades preferidas, los compuestos de calcona en las composiciones farmacéuticas de este aspecto intensifican la efectividad de un agente antimicrobiano, de manera que tales composiciones se podrían utilizar en general con tal otro agente antimicrobiano. La presente invención también provee composiciones farmacéuticas similarmente efectivas para el tratamiento de una infección de un mamífero, en las cuales las composiciones incluyen un compuesto de calcona y un agente antimicrobiano. De manera similar, la presente invención provee formulaciones antimicrobianas que incluyen un agente antimicrobiano, un compuesto de calcona de la presente invención, y un portador. En las modalidades preferidas, el agente antimicrobiano es un agente antibacteriano.

Un "portador" o "excipiente" es un compuesto o material que se utiliza para facilitar la administración del compuesto, por ejemplo, para aumentar la solubilidad del compuesto. Los portadores sólidos incluyen, por ejemplo, almidón, lactosa, fosfato dicálcico, sacarosa y caolín. Los portadores líquidos incluyen, por ejemplo, agua estéril, solución salina, soluciones amortiguadoras, agentes tensioactivos no iónicos y aceites comestibles, tales como los aceites de maní y ajonjolí. En adición, se pueden incluir varios adyuvantes tales como los que se utilizan comúnmente en la técnica. Éstos y otros compuestos se describen en la literatura, por ejemplo, en el índice Merck, Merck & Company, Rahway, N.J. Las consideraciones para la inclusión de los diversos componentes en las composiciones farmacéuticas se describen, por ejemplo, en Gilman y otros (Eds.) (1990); Goodman and Gilman' s: The Pharmacological Basis of Therapeutics , S.sup.th Ed. , Pergamon Press.

En un aspecto adicional, la presente invención provee un método para elaborar una composición farmacéutica que comprende la identificación de un compuesto de calcona del tipo que se describe en la tabla anterior de las fórmulas 1 a 4; la síntesis del compuesto, y la preparación de una composición farmacéutica que contiene el compuesto. El compuesto de calcona puede tener la estructura química conforme se describe líneas arriba. La composición farmacéutica también puede contener uno o más agentes antimicrobianos, por ejemplo, conforme se identifica líneas arriba, y uno o más portadores, diluyentes y excipientes. Asimismo, en las modalidades preferidas, el compuesto de calcona es activo contra un microbio, por ejemplo, una bacteria, como se identifica líneas arriba.

Identificación de los Compuestos de Calcona La identificación de los compuestos de calcona que tienen las estructuras conforme se describe para la presente invención se llevó a cabo utilizando los métodos de selección conocidos por los expertos en la técnica de las técnicas biológicas y se describen en detalle a continuación. No obstante, también se pueden utilizar otros métodos de selección para detectar los inhibidores de la bomba de salida. Los inventores han seleccionado una librería de químicos sintéticos e identificado varios compuestos que inhiben en forma efectiva las respectivas bombas de salida del Staphylococcus aureus 1199B (que sobreexpresa NorA) , Staphylococcus aureus SA-K2192 (que sobreexpresa TetK) y Staphylococcus aureus SA-K2191 (que sobreexpresa MsrA) .

El método del damero: El método del damero es el método que más f ecuentemente se utiliza para tener acceso a las combinaciones antimicrobianas in vitro. El término "damero" se refiere al patrón (de tubos o cavidades de la placa de microtitulación) formado por múltiples diluciones de dos fármacos que están siendo probados (Eliopoulos GM, Moellering RC. Antimicrobial Combinations , en: Antibiotics in Laboratory Medicine: USA: Williams & Wilkins) . En el presente estudio el damero consistió de columnas en la cuales cada tubo (o cavidad) contiene la misma cantidad del fármaco estándar (antibacteriano/antifúngico/antiTB/antiviral) que se está diluyendo a lo largo del eje x, y las filas en las cuales cada tubo (o cavidad) contiene la misma cantidad del potenciador a ser diluido en el eje y. Como resultado cada cuadrado en el damero (que representa un tubo/cavidad o placa) contiene una única combinación del fármaco estándar y el potenciador. El intervalo de concentraciones del fármaco estándar en el presente estudio fue de 64 µ9/??1 hasta 0.03 yg/ml, mientras que el potenciador se probó en el intervalo de 500 ug/ml hasta 0.2 ug/ml . Esta técnica del damero se puede llevar a cabo con medios líquidos o semisólidos (agar) .

Método Agar : En el método agar, el agar (agar Mueller Hinton, agar Middlebrook 7H10) se esterilizó en autoclave y se dejó que se enfriara hasta una temperatura de 55°C a 50°C. La combinación del fármaco estándar y el potenciador se añadió al agar. Se prepararon diluciones dobles seriadas de cada una del fármaco estándar y el potenciador en solventes apropiados . Con la finalidad de mantener las concentraciones deseadas tanto del agar como de los fármacos, y para descartar el efecto del solvente, el volumen de solvente (conteniendo el fármaco estándar o el potenciador) añadido al agar se mantuvo bajo (es decir, = 5% del volumen total) . Después de que las placas de agar se han vertido y dejado secar, se aplicaron las bacterias a ser probadas a la superficie del agar con un dispositivo de replicación diseñado para administrar un inoculo estándar (aproximadamente 104 ufe/punto) . Las placas se incubaron a 37 °C por 24 hrs (3 semanas en el caso de ycojbacterium tuberculosis) .

Método de Caldo: El damero mencionado líneas arriba también se llevó a cabo con medios líquidos en un formato de placas de microtitulación. Este método se utilizó con la finalidad de estudiar la combinación de los fármacos antibacterianos/antifúngicos/antivirales con el potenciador.

Selección de los Compuestos de Calcona In Vivo Los inhibidores de las bombas de salida bacterianas se caracterizan en general inicialmente in vitro. Aquéllos que muestran una efectiva inhibición de la(s) bomba (s) y que muestran actividad sinérgica con antibióticos, se seleccionan para su evaluación in vivo. Las pruebas de eficacia se realizarán utilizando los procedimientos estándares. La evaluación de la eficacia primaria se puede llevar a cabo utilizando el modelo de septicemia de murino (Yun y otros Journal of Antimicrob. Chemother., 2002, 46: 3071-3074). En este modelo se utiliza una dosis supra-letal de las bacterias para estimular a los roedores. El tratamiento se inicia, haciendo variar cualquiera o ambos del (de los) tiempo (s) de tratamiento como la dosis del antibiótico. En estos experimentos se hacen variar tanto el antibiótico como el inhibidor de la bomba de salida. Un resultado positivo se indica por medio del aumento significativo en la protección de la infección letal mediante la combinación del potenciador (el inhibidor de la bomba de salida) y el antibiótico versus el antibiótico solo.

Composiciones Farmacéuticas y Modos de Administración El compuesto particular identificado líneas arriba puede ser administrado a un paciente ya sea en sí mismo, o en combinación con un agente antimicrobiano, por ejemplo, antibacteriano, o en composiciones farmacéuticas en donde se mezcla con un (os) portador (es) o excipiente (s) o diluyente(s) adecuado (s) . Una combinación de un compuesto de calcona con un agente antimicrobiano puede ser de por lo menos dos tipos diferentes. En uno, una cantidad de un compuesto de calcona se combina con una cantidad de un agente antimicrobiano en una mezcla, por ejemplo, en una mezcla en solución o en polvo. En tales mezclas, las cantidades relativas del compuesto de calcona y el agente antimicrobiano se pueden hacer variar conforme sea apropiado para la combinación específica y el tratamiento esperado. En un segundo tipo de combinación, un compuesto de calcona y un agente antimicrobiano pueden ser enlazados de manera covalente en tal forma que las moléculas enlazadas puedan ser escindidas dentro de la célula. Sin embargo, el término "en combinación" también puede hacer referencia a otras posibilidades, incluyendo la administración en serie de un compuesto de calcona y otro agente antimicrobiano. En adición, un compuesto de calcona y/u otro agente antimicrobiano pueden ser administrados en forma de calconafármacos , es decir, el compuesto se administra en una forma que se modifica dentro de la célula para producir la forma funcional. En el tratamiento de un paciente que exhibe un trastorno de interés, se administra una cantidad efectiva desde el punto de vista terapéutico de un agente o agentes, tales como éstos. Una dosis efectiva desde el punto de vista terapéutico se refiere a aquella cantidad del (de los) compuesto (s) que resulta en el alivio de los síntomas o en una prolongación de la supervivencia de un paciente, y puede incluir la eliminación de una infección microbiana.

La toxicidad y la eficacia terapéutica de tales compuestos se pueden determinar por medio de los procedimientos farmacéuticos estándares en cultivos de células o en animales experimentales, por ejemplo, para la determinación de la LD50 (la dosis letal para el 50% de la población) y la ED50 (la dosis efectiva desde el punto de vista terapéutico en el 50% de la población) . La relación de la dosis entre los efectos tóxico y terapéutico es el índice terapéutico y éste puede ser expresado como la relación LD50/ED50. Se prefieren los compuestos que exhiben grandes índices terapéuticos. Los datos obtenidos a partir de estos ensayos de cultivos celulares y estudios en animales se pueden utilizar para la formulación de un intervalo de dosificación para uso en humanos. La dosificación de tales compuestos yace de manera preferible dentro de un intervalo de concentraciones en la circulación que incluyen el ED50 con poca o ninguna toxicidad. La dosificación pude variar dentro de este intervalo dependiendo del régimen de dosificación y la forma de dosificación que se emplea así como de la ruta de administración utilizada. Es preferible que la concentración terapéutica en el suero de un compuesto de calcona esté en el intervalo desde 0.1 hasta 100 mcg/ml.

En el caso de las composiciones para el cuidado oral o dentífricos, los compuestos descritos en la presente se pueden administrar con un agente antibacteriano, agente antiplaca, agente anticálculo, agente antisarro, y otros agentes activos apropiados para el cuidado oral, así como también las combinaciones de estos agentes activos. Las composiciones pueden estar en la forma de una pasta dental, polvo dental, gel, enjuague, pastilla, goma de mascar, película, y similar. Se puede utilizar cualquier agente antibacteriano, incluyendo agentes antibacterianos naturales, agentes antibacterianos sintéticos, y similares. Las composiciones dentífricas usualmente contienen un agente antibacteriano, un compuesto de calcona, un abrasivo, un humectante, y un portador oralmente aceptable. Las respectivas cantidades de los componentes pueden variar, y las personas que tienen los conocimientos habituales en la técnica son capaces de formular composiciones dentífricas adecuadas utilizando las guías provistas en la presente.

El agente antimicrobiano en la composición de acuerdo con la presente invención no está particularmente limitado, y se puede seleccionar de éter difenílico halogenado (triclosán) , extractos de hierbas o aceites esenciales (por ejemplo, extracto de romero, timol, metol, eucaliptol, salicilato de metilo) , antisépticos de bisguanida (por ejemplo, clorhexidina, alexidina u octenidina) , antisépticos fenólicos, hexetidina, povidona yodada, delmopinol, salifluor, iones metálicos y sus sales (por ejemplo, cloruro de zinc, lactato de zinc, citrato de zinc, óxido de zinc, fluoruro estañoso y cloruro estañoso) , sanguinarina , propóleo, agentes de oxigenación (por ejemplo, peróxido de hidrógeno, peroxicarbonato o peroxiborato de sodio regulado) , cloruro de cetil piridinio, extracto de magnolia, magnolol, honokiol, 5 , 5 ' -dibutil-2 , 2 ' -diol , propil honokiol, ésteres de ácido borínico, así como mezclas de los mismos. También se pueden incluir agentes antiacoplamiento, tal como Solrol, así como también agentes que dispersan la placa, tales como enzimas (papaína, glucoamilasa, etc.).

Los presentes inventores han descubierto que el uso de los compuestos de calcona de la presente invención, en combinación con agentes antimicrobianos, puede potenciar significativamente la eficacia del agente antimicrobiano. La intensificación de . la eficacia puede resultar en el uso de concentraciones más bajas de los agentes antimicrobianos para lograr el mismo o similar efecto que se alcanza cuando los agentes antimicrobianos se utilizan solos. La cantidad de agente antimicrobiano se puede reducir en cualquier punto desde 10% hasta más de 50% de su concentración cuando se utiliza solo, sin el compuesto de calcona de la presente invención, de manera preferible desde 10% hasta 75%, más preferiblemente desde aproximadamente 10% hasta aproximadamente 50%.

En una* de las modalidades, conforme se enuncia en detalle en cualquier punto de la presente, la combinación tanto de un compuesto de calcona, de manera preferible 3-(4'-hidroxi-3 ' -metoxi-fenil) -1-fenil-prop-2-en-l-ona, como de un agente antimicrobiano provee un efecto sinérgico sobre la inhibición de la formación de la biopelícula y/o la degradación de la biopelícula. Los presentes inventores han encontrado una sorprendente reducción en la Concentración de Erradicación de las Biopeliculas (BEC50) que es la concentración más baja a la cual se observa más del 50% de reducción en la biomasa con relación al control. La BEC50 del compuesto de calcona y los agentes antimicrobianos es menor cuando ellos se prueban juntos para la inhibición de la biopelícula en comparación cuando ellos se prueban de manera separada.

Por consiguiente, en una de las modalidades preferidas, el compuesto de calcona tiene una BEC50 en presencia del agente antimicrobiano de 50% o menos, más preferiblemente de 30% o menos, de manera mucho más preferible de 25% o menos, en comparación con la BEC50 del compuesto de calcona cuando no está en presencia del agente antimicrobiano. El compuesto de calcona tiene de manera preferible una BEC50 en presencia del agente antimicrobiano de 0.1 ppm hasta 40 ppm, más preferiblemente de 0.2 ppm hasta 30 ppm, de manera más preferible de 0.2 ppm hasta 30 ppm.

En una de las modalidades preferidas, el agente antimicrobiano tiene una BEC50 en presencia del compuesto de calcona de 75% o menos, más preferiblemente de 50% o menos, en comparación con la BEC50 del agente antimicrobiano solo (cuando no está en presencia del compuesto de calcona) . La BEC50 del agente antimicrobiano en presencia del compuesto de calcona depende del agente antimicrobiano específico utilizado en la composición. El agente antimicrobiano típicamente puede tener una BEC50 de 30 ppm o menos en presencia del compuesto de calcona. El agente antimicrobiano tiene de manera preferible una BEC50 de 20 ppm o menos, más preferiblemente de 6 ppm o menos, de manera mucho más preferible de 2 ppm o menos en presencia del compuesto de calcona. En una de las modalidades, en donde el agente antimicrobiano es Triclosán, el Triclosán tiene una BEC50 desde 0.5 ppm hasta 3 ppm en presencia del compuesto de calcona, más preferiblemente una BEC50 desde 0.75 ppm hasta 1.5 ppm, mientras que la BEC50 del Triclosán solo está en el intervalo desde 1.5 ppm hasta 2.5 ppm.

En varias de las modalidades de la presente invención, cuando el portador de la composición para el cuidado oral es un sólido o una pasta, la composición oral comprende de manera preferible un material abrasivo dentalmente aceptable, que sirva ya sea para pulir el esmalte de los dientes o para proveer un efecto de blanqueamiento. Los ejemplos no limitantes incluyen abrasivos de sílice, tales como los geles de sílice y sílices precipitadas. Las modalidades comerciales incluyen ZEODENT® 115, comercializada por J. M. Huber, Edison, Nueva Jersey, Estados Unidos de América, y SYLODENT® XWA, SYLODENT® 783 O SYLODENT® 650 XWA de la Davison Chemical División de W. R. Grace & Co., Nueva York, Nueva York, Estados Unidos de América, y las sílices abrasivas SORBOSIL®, comercializadas por PQ Corporation, Malvern, PA, Estados Unidos de América. Otros abrasivos dentífricos útiles incluyen, sin limitación, metafosfato de sodio, metafosfato de potasio, fosfato tricálcico, fosfato dicálcico dihidratado, silicato de aluminio, alúmina calcinada, bentonita u otros materiales silíceos, o combinaciones de los mismos.

El abrasivo está presente en una cantidad efectiva.

En las modalidades en donde la composición oral está en una forma sólida o de pasta, el material abrasivo está en general presente en una cantidad de aproximadamente 10% hasta aproximadamente 99% de la composición oral. En ciertas modalidades, el material de pulido está presente en cantidades en el intervalo desde aproximadamente 10% hasta aproximadamente 75% (por ejemplo, de aproximadamente 10% hasta aproximadamente 40% o de aproximadamente 15% hasta aproximadamente 30%) en la pasta de dientes, y desde aproximadamente 70% hasta aproximadamente 99% en el polvo dental .

Incluso en una modalidad adicional, una composición de la invención comprende por lo menos un humectante, útil por ejemplo para prevenir el endurecimiento de una pasta dental luego de la exposición al aire. Se puede utilizar cualquier humectante aceptable oralmente, incluyendo sin limitación, alcoholes polihídricos , tal como glicerina, sorbitol, xilitol y PEG de bajo peso molecular. La mayor parte de los humectantes también funciona como endulzante. Uno o más endulzantes están opcionalmente presentes en una cantidad total de aproximadamente 1% hasta aproximadamente 70%, por ejemplo de aproximadamente 1% hasta aproximadamente 50%, de aproximadamente 2% hasta aproximadamente 25%, o de aproximadamente 5% hasta aproximadamente 15% en peso de la composición.

Inclusive en una modalidad adicional, una composición de la presente invención comprende por lo menos un agente tensioactivo, útil por ejemplo para compatibilizar otros componentes de la composición y proveer de esta manera estabilidad mejorada, para ayudar en la limpieza de la superficie dental a través de la detergencia, y proveer espuma luego de la agitación, por ejemplo durante el cepillado con una composición dentífrica de la invención. Se puede utilizar cualquier agente tensioactivo oralmente aceptable, la mayor parte de los cuales son aniónicos, no iónicos o anfotéricos. Los agentes tensioactivos aniónicos apropiados incluyen sin limitación sales solubles en agua de sulfatos de alquilo C8-2o monoglicéridos sulfonados de ácidos grasos C8-20; sarcosinatos , tauratos, y similares. Los ejemplos ilustrativos de éstas y otras clases incluyen lauril sulfato de sodio, sulfonato monoglicérido de coco sódico, lauril sarcosinato de sodio, lauril isetionato de sodio, lauret carboxilato de sodio y dodecil bencensulfonato de sodio. Los agentes tensioac ivos no iónicos adecuados incluyen sin limitación poloxámeros, ésteres de sorbitán polioxietilenados , etoxilatos de alcohol graso, etoxilatos de alquilfenol, óxidos de amina terciaria, óxidos de fosfina terciaria, sulfóxidos de dialquilo, y similares. Los agentes tensioactivos anfotéricos adecuados incluyen sin limitación derivados de aminas secundarias y terciarias C8-2o que tienen un grupo aniónico, tal como carboxilato, sulfato, sulfonato, fosfato o fosfonato. Un ejemplo apropiado es cocoamidopropil betaína. Uno o más agentes tensioactivos están opcionalmente presentes en una cantidad total de aproximadamente 0.01% hasta aproximadamente 10%, por ejemplo, de aproximadamente 0.05% hasta aproximadamente 5% o de aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 2% en peso de la composición.

En otra de las modalidades, la composición comprende un agente anticálculo aceptable oralmente. Uno o más de tales agentes pueden estar presentes. Los agentes anticálculo apropiados incluyen sin limitación fosfatos y polifosfatos (por ejemplo, pirofosfatos) , ácido poliaminopropansulfónico (AMPS) , citrato de zinc trihidratado, polipéptidos , tales como los ácidos poliaspártico y poliglutámico, sulfonatos de poliolefina, fosfato de poliolefina, difosfonatos , tales como azacicloalcano-2 , 2 -difosfonatos (por ejemplo, ácido azacicloheptano-2 , 2 -disfosfónico) , ácido etano-l-hidroxi-1, 1-difsfónico (EHDP) y etano- 1-amino-1 , 1-difosfonato, ácido fosfonoalcano carboxílico, así como las sales de cualquiera de estos agentes, por ejemplo, las sales de metal álcali y de amonio. Las sales de fosfato y polifosfato inorgánicas útiles ilustrativamente incluyen fosfatos de sodio monobásico, dibásico y tribásico, tetrapolifosfato, tripolifosfato de sodio (STPP) , pirofosfatos mono, di, tri y tetrasódicos , pirofosfato disódico de dihidrógeno, trimetafosfato de sodio, hexametafosfato de sodio y similares, en donde el sodio puede ser opcionalmente reemplazado por potasio o amonio. Otros agentes anticálculo útiles incluyen polímeros de policarboxilato . Éstos incluyen polímeros o copolímeros de monómeros que contienen grupos ácido carboxílico, tal como, ácido acrílico, ácido metacrílico y anhídrido o ácido maleico. Los ejemplos no limitantes incluyen copolímeros de éter polivinil metílico/anhídrido maleico (PVME/MA) , tales como aquéllos disponibles bajo la marca GANTREZ® de ISP, ayne, Nueva Jersey, Estados Unidos de América. Incluso otros agentes anticálculo útiles incluyen agentes secuestrantes incluyendo ácidos hidroxicarboxílieos , tales como los ácidos cítrico, fumárico, málico, glutárico y oxálico, así como las sales de los mismos, y ácidos aminopolicarboxílieos, tal como el ácido etilenodiaminatetraacético (EDTA) . Uno o más agentes anticálculo están opcionalmente presentes en la composición en una cantidad efectiva total anticálculo, típicamente de aproximadamente 0.01% hasta aproximadamente 50%, por ejemplo de aproximadamente 0.05% hasta aproximadamente 25% o de aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 15% en peso.

En varias de las modalidades, el sistema anticálculo comprende una mezcla de tripolifosfato de sodio (STPP) y pirofosfato tetrasódico (TSPP) . En varias de las modalidades, la relación de TSPP a STPP está en el intervalo desde aproximadamente 1:2 hasta aproximadamente 1:4. En una configuración preferida, el primer ingrediente activo anticálculo, TSPP está presente de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 2.5% y el segundo ingrediente activo anticálculo, STPP está presente de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10%.

En varias de las modalidades, el sistema anticálculo comprende además un polímero de policarboxilato aniónico sintético. En una de las modalidades, el policarboxilato aniónico sintético está presente desde aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 5%. En otra de las modalidades, el policarboxilato aniónico sintético está presente desde aproximadamente 0.5% hasta aproximadamente 1.5%, de manera mucho más preferible a aproximadamente 1% de la composición para el cuidado oral. En una de las modalidades de acuerdo con la presente invención, el sistema anticálculo comprende un copolímero de anhídrido maleico y éter metil vinílico, tal como por ejemplo, el producto GANTREZ® S-97 que se discute líneas arriba.

En varias de las modalidades, la proporción de TSPP a STPP a policarboxilato aniónico sintético está en el intervalo de aproximadamente 5:10:1 hasta aproximadamente 5:20:10 (ó 1:4:2) . En una de las modalidades, el sistema anticálculo de la composición para el cuidado oral comprende TSPP, STPP, y un policarboxilato, tal como un copolímero de anhídrido maleico y éter metil vinílico a una proporción de aproximadamente 1:7:1. En una configuración no limitante, el sistema anticálculo consiste esencialmente de TSPP presente de aproximadamente 0.5% hasta aproximadamente 2.5%, STPP presente de aproximadamente 1% hasta aproximadamente 10%, y un polímero de anhídrido maleico y éter metil vinílico presente de aproximadamente 0.5% hasta aproximadamente 1.5%.

Inclusive en una modalidad adicional, una composición de la invención comprende por lo menos un agente de espesamiento, útil por ejemplo, para impartir una consistencia deseada y/o sensación a la boca a la composición. Se puede utilizar cualquier agente espesante aceptable oralmente, incluyendo sin limitación carbómeros, también conocidos como polímeros de carboxivinilo, carragenanos , también conocidas como musgo irlandés, y más particularmente l-carragenano (iota-carragenano) , polímeros celulósicos, tal como hidroxietilcelulosa , carboximetilcelulosa (CMC), así como las sales de los mismos, por ejemplo, CMC sódica, gomas naturales, tal como karaya, xantana, goma arábiga y tragacanto, silicato de aluminio y magnesio coloidal, sílice coloidal y similares. Uno o más agentes de espesamiento están opcionalmente presentes en una cantidad total de aproximadamente 0.01% hasta aproximadamente 15%, por ejemplo de aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 10% o de aproximadamente 0.2% hasta aproximadamente 5% en peso de la composición.

Inclusive en una configuración adicional, una composición de la invención comprende por lo menos un modificador de la viscosidad, útil por ejemplo, para inhibir la sedimentación o separación de ingredientes o para promover la redispersibilidad luego de la agitación de una composición líquida. Se puede utilizar cualquier modificador de la viscosidad oralmente aceptable, incluyendo sin limitación aceite mineral, petrolato, arcillas y arcillas órgano-modificadas, sílice, y similares. Uno o más modificadores de la viscosidad están opcionalmente presentes en una cantidad total de aproximadamente 0.01% hasta aproximadamente 10%, por ejemplo de aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 5% en peso de la composición.

En otra de las modalidades, la composición comprende una fuente oralmente aceptable de iones fluoruro. Una o más de tales fuentes pueden estar presentes. Las fuentes adecuadas de iones fluoruro incluyen sales de fluoruro, fluorosilicato y monofluorofosfato, así como también fluoruros de amina, incluyendo olaflur (N1-octadeciltrimetilendiamina-N, , ' -tris (2-etanol) -difluorhidrato) . Se puede utilizar cualquiera de tales sales que sea oralmente aceptable, incluyendo, sin limitación, sales de metal álcali (por ejemplo, potasio, sodio), amonio, estaño e indio, y similares. Típicamente se utilizan sales solubles en agua que liberen fluoruro. Una o más sales de liberación de fluoruro están opcionalmente presentes en una cantidad que provea un total de aproximadamente 100 hasta aproximadamente 20,000 ppm, de aproximadamente 200 hasta aproximadamente 5,000 ppm, ó de aproximadamente 500 hasta aproximadamente 2,500 ppm, de iones fluoruro. Cuando el fluoruro de sodio es la única sal de liberación de fluoruro presente, una cantidad de aproximadamente 0.01% hasta aproximadamente 5%; de aproximadamente 0.05% hasta aproximadamente 1% ó de aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 0.5%; de fluoruro de sodio en peso puede estar presente de forma ilustrativa en la composición.

Otros componentes incluyen, sin limitación, saborizantes , colorantes así como otros ingredientes activos, tales como antioxidantes y agentes contra la inflamación. Los componentes se formulan en composiciones orales de acuerdo con los procedimientos conocidos.

Las pastas y los geles dentales contienen las mayores cantidades de humectantes y usualmente un compuesto o compuestos abrasivos para la limpieza de los dientes. Ellos se formulan con varios ingredientes activos, tales como agentes anticaries, compuestos antiplaca, agentes antinflamatorios , y similares, en adición a un compuesto antibacteriano y un inhibidor de la bomba de salida.

Los enjuagues bucales y lavados bucales contienen los inhibidores de la bomba de salida y los agentes antibacterianos en un portador líquido, tal como agua o agua/etanol. De manera general, las composiciones contienen una cantidad importante, hasta 98 ó 99% en peso. El compuesto activo (I) se formula opcionalmente junto con agentes tensioactivos , colorantes, saborizantes, y otros ingredientes activos .

El vehículo o portador aceptable oralmente en una pastilla, cuenta o tableta es un alcohol polihídrico (poliol) no cariogénico, sólido, soluble en agua, tal como manitol, xilitol, sorbitol, maltitol, hidrolisato de almidón hidrogenado, glucosa hidrogenada, disacáridos hidrogenados, polisacáridos hidrogenados, y similares, en una cantidad de aproximadamente 85% hasta aproximadamente 95% de la composición total. Se pueden incorporar emulsionantes, tal como glicerina, y lubricantes para la formación de tabletas, en cantidades menores aproximadamente de 0.1% hasta 5%, en la formulación para tableta, cuenta o pastilla con el fin de facilitar la preparación de las tabletas, cuentas o pastillas para chupar. Los lubricantes adecuados incluyen aceites vegetales, tal como, aceite de coco, estearato de magnesio, estearato de aluminio, talco, almidón y Carbowax. Las gomas no cariogénicas apropiadas incluyen kappa-carragenano, carboximetil celulosa, hidroxietil celulosa, y similares.

La pastilla, cuenta o tableta puede ser opcionalmente recubierta con un material de recubrimiento, tal como ceras, laca, carboximetil celulosa, copolímero de polietileno/anhídrido maleico o kappa-carragenano para aumentar más el tiempo que toma a la tableta o pastilla para que se disuelva en la boca. La tableta o pastilla no recubierta se disuelve lentamente, proporcionando una tasa de liberación sostenida de los ingredientes activos aproximadamente de 3 a 5 minutos. Por consiguiente, las composiciones para tableta, cuenta o pastilla de dosificación sólida de esta configuración brindan un periodo de tiempo relativamente largo de contacto con los dientes en la cavidad oral con el agente antibacteriano y el inhibidor de la bomba de salida de la presente invención.

Las formulaciones para goma de mascar típicamente contienen una base de goma de mascar, uno o más agentes plastificantes , por lo menos un agente endulzante y por lo menos un agente saborizante, en adición al compuesto antibacteriano y el compuesto inhibidor de la bomba de salida. Es preferible una goma sin azúcar.

Los materiales para base de goma son muy conocidos en la técnica e incluyen bases para goma, naturales o sintéticas de las mismas. Los elastómeros o gomas naturales representativas incluyen, chicle, goma natural, jelutong, balata, gutapercha, lechi caspi, sorva, gutakay, goma corona y perillo, o mezclas de los mismos. Los elastómeros o gomas sintéticas representativas incluyen copolímeros de butadieno-estireno, copolímeros de poliisobutileno e isobutileno-estireno. La base de goma se incorpora en el producto de goma de mascar a una concentración de aproximadamente 10% hasta aproximadamente 40% y de manera preferible de aproximadamente 20% hasta aproximadamente 35%.

Los agentes plastificantes/suavizantes incluyen, sin limitación, ceras así como mezclas de los mismos en cantidades de aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 5%. El ingrediente de agente endulzante que se utiliza en la práctica de esta invención se puede seleccionar de un amplio intervalo de materiales, e incluye los mismos endulzantes artificiales y polioles que se utilizan para la preparación de las tabletas, cuentas y pastillas para chupar. Los endulzantes de polioles, tal como sorbitol y maltitol, están presentes en la composición de goma de mascar de la presente invención en cantidades de aproximadamente 40% hasta aproximadamente 80% y de manera preferible desde aproximadamente 50% hasta aproximadamente 75%. En una configuración no limitante, un endulzante artificial está presente en la composición de goma de mascar de la presente invención en cantidades de aproximadamente 0.1% hasta aproximadamente 2%, y de manera preferible de aproximadamente 0,3% hasta aproximadamente 1%.

Las modalidades preferidas serán ahora explicadas con referencia a los siguientes ejemplos no limitantes.

Ejemplo 1 Preparación de 3- (4" -hidroxi-3" -metoxi-fenil) -1- (2' -hidroxi-5' -metoxi-fenil) -prop-2-en-l-ona (CK-1) Se añadió 2-hidroxi-5-metoxi acetofenona (10 gm, 0.06 mol) y 3-metoxi-4-hidroxi benzaldehído (10 gm, 0.06 moles) a la solución de 6 gm de hidróxido de sodio en 30 mi de agua destilada en un matraz de fondo redondo de 250 mi a 0°C. La temperatura de la reacción se mantuvo por debajo de 15 °C con agitación ocasional por 200 hr. La mezcla de reacción se neutralizó con 5% de HCl acuoso en condiciones de enfriamiento con hielo. La mezcla neutralizada se extrajo con cloroformo y se purificó mediante cromatografía de columna utilizando gel de sílice para obtener 2, p.f. 121, 5°C. 1H MR: d 3.84 (s, 3H) , d 3.97 (s, 3H) , d 6.96 (m, 2H) , d 7.14 (m, 2H) , d 7.24 (d, 1H) , d 7.39 (bs, 1H) , d 7.44 (d, 1H, J= 15.31 Hz) , d 7.86 (d, 1H, J= 15.31 Hz) .

Ejemplo 2 Preparación de 3- (4 ' -hidroxi-3 ' -metoxi-fenil) -1-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4) Se añadió 3-metoxi-4-hidroxibenzaldehído (20 gm, 0.132 mol) a la solución de acetofenona (20 gm, 0.125 mol) disuelta en ácido acético (20 mi) en un matraz de fondo redondo con agitación constante. La temperatura de reacción se mantuvo por debajo de 15 °C con agitación ocasional por 200 hrs . La mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo y el producto se extrajo con cloroformo. El extracto de cloroformo se destiló bajo presión reducida y el residuo se sometió a cromatografía en gel de Si02 para obtenerse 1, p.f. 91°C 1H MR: d 3.94 (s, 3H) , d 6.96 (d, 1H, J= 8.11 Hz) , d 7.13 (d, 1H, J= 1.78 Hz) , d 7.22 (dd, 1H, J= 8.11 Hz y 1.78 Hz) , d 7.37 (d, 1H, J= 15.30 Hz) , d 7.50 (m, 2H) , d 7.57 (m, 1H) , d 7.75 (d, 1H, J= 15.30 Hz) , d 8.01 (m, 2H) .

Ejemplo 3 Preparación de 3- (2" , 3" -dimetoxi-fenil) -l-furan-2-il-prop-2-en-l-ona (CK-14) Se añadió 2 , 3 -dimetoxibenzaldehído (4.69 gm, 0.018 mol) a la solución de 2-acetilfurano (2 gm, 0.018 mol) en metanol (10 mi) en un matraz de fondo redondo. A esta solución se añadió 10% solución acuosa de NaOH (4 mi) con agitación. La temperatura de reacción se mantuvo por debajo de 15°C y se continuó la agitación por 24 hrs. La mezcla de reacción fue luego vertida en agua enfriada con hielo con agitación vigorosa y se filtró el producto. La recristalización del producto se llevó a cabo con etanol, p.f. 109, 8°C 1HNMR: d 3.80 (s, 3H) , d 3.88 (s, 3H, ) , d 6.69 (dd, 1H, J= 3.56 y 1.99 Hz) , d 7.00 (bs, 3H) , d 7.54 (bs, 1H) , d 7.60 (d, 1H, J= 15.80 Hz) , d 7.84 (bs, 1H) , 8.14 (d, 1H, J= 15.80 Hz) .

Ejemplo 4 Preparación de 3- (2" , 5" -dimetoxi-fenil) -1- (1H-pirrol-2-il) -prop-2-en-l-ona (CK-16) .

Se añadió 2 , 5-dimetoxibenzaldehído (0.76 gm, 0.004 mol) a la solución de 2-acetilpirrol (0.5 gm, 0.004 mol) en metanol (10 mi) en un matraz de fondo redondo de 100 mi. A esta solución se añadió 10% de solución acuosa de NaOH (2 mi) con agitación. La temperatura de reacción se mantuvo por debajo de 15 °C y se continuó la agitación por 15 hrs . La mezcla de reacción fue luego vertida en agua enfriada con hielo con agitación vigorosa y se filtró el producto. La recristalización del producto se llevó a cabo con acetato de etilo, p.f. 122, 6°C 1HNMR: d 3.86 (s, 6H) , d 6.35 (bs, 1H) , d 6.96 (d, 1H, J= 6.35 Hz) , d 7.17 (m, 3H) , d 7.28 (bs, 1H) , d 7.42 (d, 1H, J= 15.90 Hz) , d 8.11 (d, 1H, J= 15.90 Hz) .

Ejemplo 5 Disminución en la MIC de la ciprofloxacina contra Staphylococcus aureus 1199B (que sobreexpresa NorA) cuando se utiliza en combinación con 3- (4 ' -hidroxi-3 ' -metoxi-fenil) -1-fenilprop-2 -en-l-ona (CK-4) La concentración inhibidora mínima (MIC) de la ciprofloxacina sola y en combinación con el compuesto de calcona mencionado líneas arriba se llevó a cabo contra el Staphylococcus aureus 1199B, utilizando el método que se describe en el diseño del estudio. Se observó hasta dieciséis veces de reducción en la MIC de la ciprof loxacina en combinación con el compuesto de calcona a 50 pg/ml (Tabla 1) .

Tabla 1 MIC de la ciprofloxacina sola y en combinación con 3- (4' -hidroxi-3' -metoxifenil) -1-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4) contra Staphylococcus aureus 1199B (que sobreexpresa NorA) Ejemplo 6 Disminución en la MIC de la tetraciclina contra el Staphylococcus aureus SA-K2192 (que sobreexpresa TetK) cuando se utiliza en combinación con la 3- (4 ' -hidroxi-3 ' -metoxi-fenil) -1-fenilprop-2-en-l-ona (CK-4) La concentración inhibidora mínima (MIC) de la tetraciclina sola y en combinación con el compuesto de calcona mencionado líneas arriba se llevó a cabo contra el Staphylococcus aureus SA-K2192, utilizando el método que se describe en el diseño del estudio. Se observó hasta ocho veces de reducción en la MIC de la tetraciclina en combinación con el compuesto de calcona a 50 g/ml (Tabla 2) .

Tabla 2 MIC de la tetraciclina sola y en combinación con la 3- (4' -hidroxi-3' -metoxi-fenil) -1-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4) contra el Staphylococcus aureus SA-K2192 (que sobreexpresa TetK) Ejemplo 7 Disminución en la MIC de la tetraciclina contra el Staphylococcus aureus SA-K2191 (que sobreexpresa MsrA) cuando se utiliza en combinación con la 3- (4 ' -hidroxi-3 ' -metoxi-fenil) -1-fenilprop-2-en-l-ona (CK-4) La concentración inhibidora mínima (MIC) de la eritromicina sola y en combinación con el compuesto de calcona mencionado líneas arriba se llevó a cabo contra el Staphylococcus aureus SA-K2191, utilizando el método que se describe en el diseño del estudio. Se observó hasta ocho veces de reducción en la MIC de la eritromicina en combinación con el compuesto de calcona a 50 pg/ml (Tabla 3) .

Tabla 3 MIC de la eritromicina sola y en combinación con la 3- (4' -hidroxi-3' -metoxifenil) -l-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4) contra el Staphylococcus aureus SA-K2191 (que sobreexpresa MsrA) Ejemplo 8 Disminución en la MIC de la ciprofloxacina contra el Staphylococcus aureus 1199B (que sobreexpresa NorA) cuando se utiliza en combinación con la 3- (2" , 3" -dimetoxi-fenil) -1-furan-2-il-prop-2-en-l-ona (CK-14) La concentración inhibidora mínima (MIC) de la ciprofloxacina sola y en combinación con el compuesto de calcona mencionado líneas arriba se llevó a cabo contra el Staphylococcus aureus 1199B, utilizando el método que se describe en el diseño del estudio. Se observó hasta ocho veces de reducción en la MIC de la ciprofloxacina en combinación con el compuesto de calcona a 50 pg/ml (Tabla 4) .

Tabla 4 MIC de la ciprofloxacina sola y en combinación con la 3- (2" , 3" -dimetoxi-fenil) -l-furan-2-il-prop-2-en-l-ona (CK-14) contra Staphylococcus aureus 1199B (que sobreexpresa orA) Ejemplo 9 Disminución en la MIC de la tetraciclina contra el Staphylococcus aureus SA-K2192 (que sobreexpresa TetK) cuando se utiliza en combinación con la 3- (2" , 3" -dimetoxi-fenil) -1-furan-2-il-prop-2-en-l-ona (CK-14) La concentración inhibidora mínima (MIC) de la tetraciclina sola y en combinación con el compuesto de calcona mencionado líneas arriba se llevó a cabo contra el Staphylococcus aureus SA-K2192, utilizando el método que se describe en el diseño del estudio. Se observó hasta cuatro veces de reducción en la MIC de la tetraciclina en combinación con el compuesto de calcona a 50 pg/ml (Tabla 5) .

Tabla 5 MIC de tetraciclina sola y en combinación con la 3-(2" , 3" -dimetoxi-fenil) -l-furan-2-il-prop-2-en-l-ona (CK-14) contra el Staphylococcus aureus SA-K2192 (que sobreexpresa TetK) Ejemplo 10 Disminución en la MIC de la tetraciclina contra el Staphylococcus aureus SA- 2191 (que sobreexpresa MsrA) cuando se utiliza en combinación con la 3- (2" , 3" -dimetoxi-fenil) -1-furan- 2 - i1 -prop-2 -en- 1-ona (CK- 14 ) La concentración inhibidora mínima (MIC) de la eritromicina sola y en combinación con el compuesto de calcona mencionado líneas arriba se llevó a cabo contra el Staphylococcus aureus SA-K2191, utilizando el método que se describe en el diseño del estudio. Se observó hasta cuatro veces de reducción en la MIC de la eritromicina en combinación con el compuesto de calcona a 50 g/ml (Tabla 6) .

Tabla 6 MIC de la eritromicina sola y en combinación con la 3- (2" , 3" -dimetoxi-fenil) -l-furan-2-il-prop-2-en-l-ona (CK-14) contra el Staphylococcus aureus SA-K2191 (que sobreexpresa MsrA) Ejemplo 11 Potenciación de la actividad del Triclosán contra el Streptococcus mutans, Actinomyces viscosus y Fusobacterium nucleatum cuando se utiliza en combinación con la 3-(4'-hidroxi-3 ' -metoxifenil ) -1-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4) La concentración inhibidora mínima (MIC) del triclosán solo y en combinación con el compuesto de calcona mencionado líneas arriba se llevó a cabo contra el Streptococcus mutans, Actinomyces viscosus y Fusobacterium nucleatum, utilizando el método que se describe en el diseño del estudio. Se observó de cuatro hasta ocho veces de reducción en la MIC del triclosán en combinación con el compuesto de calcona (Tabla 7) .

Tabla 7 MIC del triclosán solo y en combinación con la 3- (4 ' -hidroxi-3 ' -metoxi-fenil) -1-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4) contra el Streptococcus mutans, Actinomyces viscosus y Fusobacterium nucleatum.

Ejemplo 12 Potenciación de la actividad del magnolol contra el Streptococcus mutans, Actinomyces viscosus y Fusojacterium nucleatum cuando se utiliza en combinación con la 3-(4'-hidroxi-3 ' -metoxifenil ) -1-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4) La concentración inhibidora mínima (MIC) del magnolol solo y en combinación con el compuesto de calcona mencionado líneas arriba se llevó a cabo contra el Streptococcus mutans, Actinomyces viscosus y Fusoiacterium nucleatum, utilizando el método que se describe en el diseño del estudio. Se observó hasta dieciséis veces de reducción en la MIC de la magnolol en combinación con el compuesto de calcona (Tabla 8) .

Tabla 8 MIC del magnolol solo y en combinación con la 3- ( ' -hidroxi-3 ' -metoxi-fenil) -1-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4) contra el Streptococcus mutans, Actinomyces viscosus y Fusobacterium nucleatum.

Ejemplo 13 Potenciación de la actividad del 5,5' dibutilbifenil-2 , 2 ' -diol contra el Streptococcus mutans Actinomyces viscosus y " Fusobacterium nucleatum cuando se utiliza en combinación con la 3- (4 ' -hidroxi-3 ' -metoxi-fenil) -1-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4) La concentración inhibidora mínima (MIC) del 5,5'-dibutilbifenil-2 , 2 ' -diol solo y en combinación con el compuesto de calcona mencionado líneas arriba se llevó a cabo contra el Streptococcus mutans, Actinomyces viscosus y Fusobacterium nucleatum, utilizando el método que se describe en el diseño del estudio. Se observó de dos hasta cuatro veces de reducción en la MIC del 5 , 5 ' -dibutilbifenil-2 , 2 ' -diol en combinación con el compuesto de calcona (Tabla 9) .

Tabla 9 MIC del 5 , 5 ' -dibutilbifenil-2 , 2 ' -diol solo y en combinación con la 3- (4 ' -hidroxi-3 ' -metoxi-fenil) -1-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4) contra el Streptococcus mutans, Actinomyces viscosus y Fusobacterium nucleatum.

Ejemplo 14 Potenciación de la actividad del Honokiol contra el Streptococcus mutans, Actinomyces viscosus y Fusobacterium nucleatum cuando se utiliza en combinación con la 3- (4 ' -hidroxi-3 ' -metoxifenil) -l-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4) La concentración inhibidora mínima (MIC) del honokiol solo y en combinación con el compuesto de calcona mencionado líneas arriba se llevó a cabo contra el Streptococcus mutans, Actinomyces viscosus y Fusobacterium nucleatum, utilizando el método que se describe en el diseño del estudio. Se observó de cuatro hasta ocho veces de reducción en la MIC de la honokiol en combinación con el compuesto de calcona (Tabla 10) .

Tabla 10 MIC del honokiol solo y en combinación con la 3-(4'-hidroxi-3' -metoxi-fenil) -l-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4) contra el Streptococcus mutans, Actinomyces viscosus y Fusobacterium nucleatum.

Ejemplo 15 Reducción en el requerimiento de la dosis de la Ciprofloxacina cuando se utiliza en combinación con la 3-(4'-hidroxi-3 ' -metoxi-fenil) -1-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4) en el modelo de infección sistémica en ratones.

El estudio se llevó a cabo para apreciar in vivo la respuesta de la ciprofloxacina en combinación con el inhibidor de la bomba de salida mencionada líneas arriba. Los ratones albinos suizos fueron infectados por vía intravenosa con Staphylococcus aureus ATCC 29213 (107 CFU/ratón) . Los ratones infectados fueron divididos en grupos y cada grupo consistió de 6 ratones. El tratamiento consistió de una dosis inmediatamente después de la infección seguida por la siguiente dosis después de un espacio de 6 hrs . El resultado se registró como la cantidad de supervivientes cada día. Se observó los ratones por siete días y se determinó el ED50 después de siete días de observación. El ED50 para la ciprofloxacina fue de 9.2 mg/kg y en combinación con la CK-4 el ED5o para la ciprofloxacina se redujo a 5.86 mg/kg.

Ejemplo 16 Reducción en la Concentración de Erradicación de las Biopelículas (BEC50) para los agentes antibacterianos cuando se utiliza en combinación con la 3- (4 ' -hidroxi-3 ' -metoxi-fenil) -1-fenil-prop-2-en-l-ona (CK-4) El compuesto CK-4 se probó primero para evaluar si tuvo eficacia antimicrobiana por sí mismo. Se llevó a cabo un ensayo de MIC en dos agentes antibacterianos conocidos, así como también en CK-4, utilizando A. viscosus como el organismo de referencia. Los resultados se muestran en la Tabla 11 a continuación: Tabla 11 A partir de la tabla anterior, es evidente que se aprecia que la CK-4 tiene una MIC considerablemente más elevada que los dos agentes antibacterianos comúnmente utilizados (triclosán y cloruro de cetil piridinio (CPC) ) . Esto indica que la CK-4 sola no es un agente antibacteriano fuerte y, en los niveles utilizados en las formulaciones, contribuirá muy poco con la eficacia antibacteriana total.

El Actinomyces viscosus rATCC#43146 ) se desarrolló en caldo de tripticasa-soya complementado con 0,6% extracto de levadura (TSB-YE) a 37 °C, cultivo estático. Para los ensayos con especies mixtas, la fuente de las bacterias fue un quimiostato de cultivo continuo inoculado con A. viscosus, Lactobacillus casei (ATCC#334) , Streptococcus oralis ÍATCC #35037) , Fusobacterium nucleatum (ATCC#10953) , y Veilonella párvula (??(0#17745 ) . Este cultivo mixto se mantuvo en un medio complejo especializado en un quimiostato de cultivo continuo a 37°C.

Los ensayos de MIC se llevaron a cabo utilizando A. viscosus como organismo de referencia. Los compuestos a ser probados se colocaron en placas en las filas duplicadas de la primera columna de una placa de cultivo con 96 cavidades. Se llevaron a cabo diluciones dobles en serie en 0.5x TSB a través de la placa. Se cultivó la bacteria A. viscosus durante la noche en TSB-YE a 37°C, cultivo estático. Los cultivos durante la noche de las bacterias se diluyeron hasta un OD6io -0.4 en 0.5x TSB. Se añadió un volumen equivalente de las bacterias a la solución de prueba a cada uno de las cavidades de la placa de 96 cavidades. Las placas se incubaron durante la noche a 37 °C para permitir que se produzca el desarrollo bacteriano. Se leyó el OD6i0 de todo la placa en un lector de placas EnVision de Perkin Elmer. Los valores de la absorbancia se promediaron para las cavidades duplicados y se compararon con los valores para las cavidades que contienen las bacterias en medio solo. Los valores de la MIC se determinaron como la concentración del componente activo en la último cavidad para el cual se inhibió el desarrollo de las bacterias con relación a los controles del medio. Todas las placas contuvieron dos filas de Triclosán como control positivo.

Para evaluar la habilidad para biopotenciar de la CK-4, se llevaron a cabo pruebas de inhibición de la formación de biopelículas de una sola especie. Los agentes activos de interés se colocaron en placas en la primera columna de una placa de cultivo de 384 cavidades y se realizaron diluciones dobles en serie a través de la placa en 0.5x TSB. Los cultivos de primera generación de la bacteria A. Viscosus se desarrollaron durante la noche en TSB-YE. Los cultivos se diluyeron hasta un OD6i0 -0.2 en 0.5x TSB y se colocaron en placas en las cavidades conteniendo diluciones seriadas de los componentes activos. Las placas se incubaron por 24 horas a 37°C para permitir que se produzca el desarrollo y formación de la biopelícula.

A continuación de la incubación, se removieron los sobrenadantes de la placa y las biopelículas remanentes se tiñeron con 0.03% de violeta de cristal Grain. Las placas teñidas se leyeron en un lector de microplacas EnVision de Perkin Elmer por la absorbancia a 590 nm. Se compararon las absorbancias con la absorbancia de las cavidades tratados con medio solo y los resultados se reportaron como una reducción porcentual en la formación de la biopelícula con relación al control del medio. La BEC50 se define como la concentración más baja a la cual se observa más del 50% de reducción en la densidad de la biopelícula (conforme se lee por la absorbancia del tinte utilizado para teñir la biopelícula) con relación a un control de. medio solo. Se considera que un compuesto con una baja BEC50 es más eficaz que uno con un nivel más alto. Los resultados se muestran en Tabla 12 a continuación para una variedad de agentes antibacterianos conocidos .

Tabla 12 BEC50 de agentes antibacterianos solos, y con CK-4 Los resultados de este experimento revelan que la adición de la CK-4 tiene el potencial de aumentar dramática e inesperadamente la eficacia de varios de los compuestos antimicrobianos, a pesar de no tener una actividad antibacteriana fuerte por sí misma. El efecto fue particularmente fuerte para el cloruro de cetil piridinio (CPC) , que resultó en casi una disminución de 4 veces en la BEC50< cuando se compara con el CPC solo, permitiendo de esta manera el uso de concentraciones mucho menores del compuesto antimicrobiano para lograr la misma eficacia antibacteriana (hasta 75% menos CPC, cuando se utiliza junto con CK-4) .

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones:

1. Una composición, caracterizada porque comprende un portador, un agente antimicrobiano y un compuesto seleccionado del grupo que consiste de 3-(4'-Hidroxi - 3 ' -metoxi-fenil ) -1- ( 2 ' -hidroxi -5 ' metoxi - fenil ) -prop-2 -en- 1-ona , 3 - (4 ' -Hidroxi - 3 ' -metoxi -fenil )- 1- fenil -prop-2-en-l-ona, 3- (2" , 3" -Dimetoxi-fenil) - 1 - furan- 2 - il -prop-2 -en- 1-ona , 3- (2" , 5" -dimetoxi- fenil ) -1- ( lH-pirrol - 2 -il ) -prop-2 -en- 1-ona , y mezclas de las mismas.

2. La composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque es una composición para el cuidado oral .

3. La composición de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque el agente antimicrobiano comprende un agente antibacteriano.

4. La composición de conformidad con la reivindicación 3, caracterizada porque el agente antibacteriano se selecciona del grupo que consiste de una quinolona, una beta lactama, un cloranfenicol , un glicopéptido, un aminoglicósido, un macrólido, una rifamicina, una oxazolidonona, una cumermicina, un agente polifenólico, triclosán, un compuesto de amonio cuaternario, un compuesto de zinc, un éster de ácido borínico, y mezclas de los mismos.

5. La composición de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque el agente polifenólico es triclosán.

6. La composición de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque el agente polifenólico comprende magnolol o sus derivados.

7. La composición de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque el agente polifenólico comprende honokiol o sus derivados.

8. La composición de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque el compuesto de amonio cuaternario es cloruro de cetilpiridinio .

9. La composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el compuesto es 3- (4 ' -Hidroxi-3 ' -metoxi-fenil) -1-fenil-prop-2-en-l-ona .

10. La composición de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque la composición está en la forma de un dentífrico seleccionado del grupo que consiste de pasta dental, polvo dental, gel, enjuague, pastilla, goma de mascar, película, y mezclas de los mismos .

11. Un método para tratar una infección microbiana, caracterizado porque comprende administrar tópicamente a un mamífero en necesidad del mismo una composición de conformidad con la reivindicación 1.

12. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque la infección microbiana es causada por una bacteria.

13. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque la composición se administra a la cavidad oral .

14. El método de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque la composición está en la forma de un dentífrico seleccionado del grupo que consiste de pasta dental, polvo dental, gel, enjuague, pastilla, goma de mascar, película, y mezclas de los mismos.

15. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el antimicrobiano comprende un agente antibacteriano.

16. El método de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque el agente antibacteriano se selecciona del grupo que consiste de una quinolona, una beta lactama, un cloranfenicol , un glicopéptido, un aminoglicósido , un macrólido, una rifamicina, una oxazolidonona , una cumermicina, un agente polifenólico, triclosán, un compuesto de amonio cuaternario, un compuesto de zinc, un éster de ácido borínico, y mezclas de los mismos.

17. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el agente polifenólico es triclosán.

18. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el agente polifenólico comprende magnolol o sus derivados.

19. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el agente polifenólico comprende honokiol o sus derivados.

20. El método de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado porque el compuesto es 3- ( 4 ' -Hidroxi -3 ' -metoxifenil ) - 1- fenil -prop- 2 -en- 1 -ona .

21. El método de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque se reduce el conteo microbiano.

22. Una composición de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque es para el uso en el tratamiento de una infección microbiana que comprende la administración tópica a un mamífero en necesidad del mismo .

23. Una composición de conformidad con la reivindicación 22, caracterizada porque la infección microbiana es causada por una bacteria.

24. Una composición de conformidad con la reivindicación 22, caracterizada porque la composición se administra a la cavidad oral.

25. Una composición de conformidad con la reivindicación 23, caracterizada porque la composición está en la forma de un dentífrico seleccionado del grupo que consiste de pasta dental, polvo dental, gel, enjuague, pastilla, goma de mascar, película, y mezclas de los mismos .

26. Una composición de conformidad con la reivindicación 22, caracterizada porque el antimicrobiano comprende un agente antibacteriano.

27. Una composición de conformidad con la reivindicación 26, caracterizada porque el agente antibacteriano se selecciona del grupo que consiste de una quinolona, una beta lactama, un cloranfenicol , un glicopéptido, un aminoglicósido , un macrólido, una rifamicina, una oxazolidonona , una cumermicina, un agente polifenólico, triclosán, un compuesto de amonio cuaternario, un compuesto de zinc, un éster de ácido borínico, y mezclas de los mismos.

28. Una composición de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada porque el agente polifenólico es triclosán.

29. Una composición de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada porque el agente polifenólico comprende magnolol o sus derivados.

30. Una composición de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada porque el agente polifenólico comprende honokiol o sus derivados.

31. Una composición de conformidad con la reivindicación 27, caracterizada porque el compuesto es 3- (4 ' -hidroxi-3 ' -metoxifenil ) - 1- fenil -prop- 2 -en- 1 -ona .

32. Una composición de conformidad con la reivindicación 22, caracterizada porque el conteo microbiano se reduce.