MX2011013367A - Preparacion de material vegetal y productos alimenticios. - Google Patents
Preparacion de material vegetal y productos alimenticios.Info
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Abstract
La presente invención se refiere a un método para la preparación de un material vegetal, en donde una planta viva es tratada con una citocinina antes de la cosecha. La invención también se refiere a un método para la preparación de productos alimenticios, así como productos alimenticios que comprenden el material vegetal. La ventaja del método es que el material vegetal permanece verde por más tiempo durante el almacenamiento del producto alimenticio.
Description
PREPARACION DE MATERIAL VEGETAL Y PRODUCTOS ALIMENTICIOS
Campo de la Invención
La presente invención se refiere a un método para la preparación de material vegetal, y a un método para la preparación de composiciones alimenticias. La presente invención también se refiere a los productos alimenticios que contienen el material vegetal .
Antecedentes de la Invención
El color de los productos alimenticios es un atributo importante de su apreciabilidad por el consumidor. Los pasos de procesamiento en la preparación industrial del producto alimenticio, por ejemplo un paso de calentamiento como un auxiliar de preservación, así como el almacenamiento del producto alimenticio durante su vida de anaquel puede conducir a pérdida del color del producto. Por ejemplo, el color verde de los vegetales de hojas que son ingredientes en muchos productos alimenticios pueden volverse caféá durante el almacenamiento. El mecanismo responsable de este cambio de color es en general la inestabilidad de la clorofila, disparada por eventos durante el procesamiento, que subsecuentemente conduce a la degradación de la clorofila durante el almacenamiento del producto alimenticio. Las pérdidas mayores de la clorofila ocurren durante el almacenamiento en vez de durante el procesamiento.
REF.226117 Con el fin de prevenir la degradación de la clorofila, y con esto el cambio de color de los vegetales de hojas de verde a café, han sido propuestos diversos métodos, los cuales están enfocados a la estabilización de la clorofila en los materiales vegetales. El mayor foco ha sido sobre el tratamiento de las plantas o los órganos de las plantas después de la cosecha. Los ejemplos de éstos son las variaciones en la temperatura de calentamiento y el tiempo durante un proceso de preservación o cocción de la planta, el órgano de la planta, y/o el producto alimenticio, y la adición de ingredientes durante los pasos de procesamiento, por ejemplo, para cambiar el pH del paso de procesamiento. Tratamiento después de la cosecha
El procesamiento convencional como por ejemplo el que es utilizado en el enlatado o en la mayoría de los procesos de deshidratación, es dañino para la clorofila durante la fase térmica del proceso. Schwartz y Lorenzo (Food Sci. Nutr. 29, 1990, p. 1-17) describen que una exposición corta a más altas temperaturas es mejor para la retención de la clorofila que la exposición prolongada a temperaturas más bajas.
La Patente de los Estados Unidos US 4,701 ,330 describe un método para preservar el color verde de los vegetales almacenados a temperaturas de refrigeración, en donde los vegetales son blanqueados con agua o vapor, seguido por un tratamiento de vacío por 30 minutos, y un tratamiento de inmersión mientras está a vacío en una solución alcalina que tiene un pH de aproximadamente 8.7. Subsecuentemente, esto es seguido por la liberación del vacío, el empaquetamiento y almacenamiento de los vegetales en una atmósfera modificada de dióxido de carbono y nitrógeno bajo condiciones refrigeradas.
La Patente Japonesa JP 2008-81511 A describe una composición acuosa que contiene uno o más derivados de fitohormonas seleccionados de las citocininas y uno o más sacáridos seleccionados del grupo de los monosacáridos , oligosacáridos y polisacáridos . Esta composición puede ser utilizada para conservar la frescura de las flores cortadas y las partes de plantas cortadas.
Tratamiento previo a la cosecha
Además del tratamiento de los órganos de las plantas o partes de las plantas después de la cosecha, han sido también descritos los métodos para tratar las plantas previo a la cosecha para mejorar la retención del color verde de los órganos de las plantas .
La Patente de los Estados Unidos US 2004/0082478 Al describe el tratamiento de las plantas con una composición que comprende N-aciletanolamina, para lograr un efecto similar a la citocinina, tal como la retención de la clorofila.
Similarmente , Zaicovski et al. (Postcosecha Biol . Technol . , 49, 2008, p. 436-439) enseñan que la biosíntesis de la citocinina en la brócoli puede ser incrementada por estrés de agua antes de la cosecha, lo cual conduce a retraso del amarillamiento post-cosecha .
La Patente Británica GB 1,122,662 describe los métodos para mejorar la apariencia y/o la comestibilidad de los materiales vegetales durante el almacenamiento, mediante el tratamiento del material vegetal preferentemente inmediatamente antes del corte o la cosecha, con un derivado de urea como la 3 , -diclorofenil -urea mediante aspersión o inmersión en soluciones acuosas. Los materiales vegetales mencionados son espinaca, chícharos, fríjoles y otros diversos tales como las flores. Otros pasos de tratamiento después de la cosecha del material vegetal no han sido descritos .
La Patente Europea EP 113 070 Al describe el uso de nitro- y cianoguanidinas sustituidas para proteger las frutas o los vegetales contra el deterioro. Estas frutas o vegetales pueden ser rociados con una solución acuosa que contiene una guanidina sustituida, uno a dos días antes de la cosecha, y luego son ya sea rociadas o sumergidas en una solución acuosa que contiene la guanidina dentro de aproximadamente 24 horas después de la cosecha. Las nitro- y cianoguanidinas sustituyen una citocinina, la N6-benciladenina , y promueven el crecimiento y mejoran la velocidad de la biosíntesis de la clorofila. La velocidad de senectud es disminuida, lo que conduce a una retención más prolongada del color verde de los vegetales. Otros pasos de tratamiento después de la cosecha de las frutas o los vegetales no han sido descritos.
Similarmente, la Patente de los Estados Unidos US 4,677,226 A describe las alquil-, alquénil- y alquinilnitroguanidinas como reguladores del crecimiento vegetal de citocinina, lo que conduce al mejoramiento de la biosíntesis de la clorofila en algunos tejidos, o a degradación disminuida de la clorofila (senectud) en otros. Las plantas son tratadas con estos compuestos antes de la cosecha .
La Patente Japonesa JP 6-169642 A describe un método para mejorar el sabor de las partes de las plantas y para promover el crecimiento de las plantas (especialmente los vegetales de hojas y el té verde) durante el cultivo, mediante irrigación dentro de la raíz de la planta, o mediante pulverización sobre las plantas, de una composición acuosa que contiene L-teanina, alanina, glicina, aminoácidos, vitaminas, ácidos nucleicos, oligosacáridos , auxina y citocinina (cinetina) . No han sido descritos pasos de tratamiento subsecuentementes post-cosecha.
El documento WO 00/24249 describe las composiciones tales como los medios de cultivo para regular el crecimiento de las plantas, que comprenden uno o más compuestos similares a la auxina, y posiblemente también las citocininas tales como la zeatina, cinetina, y 6 -bencilaminopurina . No han sido descritos pasos de tratamiento subsecuentes después de la cosecha.
Breve Descripción de la Invención
A pesar de todas las tecnologías desarrolladas, existe todavía una necesidad para mejorar la protección de la clorofila del deterioro durante el procesamiento térmico de los alimentos, y el almacenamiento subsecuente del producto alimenticio. Mediante esta protección, la cantidad de clorofila que pudiera ser retenida en la planta cosechada o en el órgano de la planta es más alta, y en consecuencia el color verde cosechada, o el órgano vegetal es conservado por más tiempo. Cuando (una parte de) la planta cosechada o el órgano de la planta es aplicado como un ingrediente de un producto alimenticio ensamblado, el producto alimenticio o el ingrediente de los productos alimenticios en consecuencia podría permanecer verde por un periodo de tiempo más prolongado. Esto sería favorable para el consumidor.
Por lo tanto, un objetivo de la presente invención es proporcionar un método para la preparación de material vegetal que puede ser utilizado en productos alimenticios con el fin de darle al producto alimenticio un color verde fresco por un periodo prolongado de tiempo, o conservar el color verde del material vegetal cuando se utiliza como un ingrediente en el producto alimenticio. Es también un objetivo de la presente invención proporcionar un método con el cual las plantas pueden ser tratadas durante el cultivo, con el fin de prevenir la decoloración durante el tratamiento subsecuente después de la cosecha. Es también un objetivo de la presente invención proporcionar productos alimenticios que mantengan un color verde fresco o de los cuales los ingredientes mantengan un color verde fresco por más tiempo durante el almacenamiento del producto alimenticio.
Se ha encontrado ahora que las plantas verdes o los órganos vegetales (por ejemplo, hojas, tallos, frutos) que pueden ser utilizados como ingredientes en los productos alimenticios permanecerán verdes por más tiempo durante el almacenamiento de tal producto alimenticio, que comprenden tales órganos de plantas verdes o partes de las plantas u órganos de las plantas, mediante el tratamiento de la planta que contiene ese órgano, con la hormona del crecimiento citocinina antes de la cosecha. Subsecuentemente déspués de la cosecha de la planta o el órgano de la planta, la planta cosechada o el órgano de la planta será sometida a un paso de calentamiento, preferentemente en una solución acuosa, con el fin de terminar los procesos bioquímicos que tienen lugar en el órgano. Este paso de calentamiento puede ser realizado sobre la planta o parte cosechada de las plantas u órganos de las plantas tales como, o pueden ser realizados como un paso de pasteurización o esterilización durante el proceso de preparación de un producto alimenticio, después de que la planta cosechada o el órgano de la planta ha sido mezclado con otros ingredientes alimenticios. Este paso de calentamiento mejora la retención del color verde del material vegetal, por tanto tiempo como sea posible.
El efecto del tratamiento de la planta viva con una citocinina y el paso de calentamiento subsecuente no es solamente que el nivel de clorofila en la planta o el órgano de la planta se incremente, en comparación a una situación donde no se realiza ningún tratamiento con la citocinina antes de la cosecha. Además, la velocidad de pérdida de la clorofila durante el almacenamiento subsiguiente de la planta cosechada o del órgano de la planta, es también más baja que sin el tratamiento de la planta con citocinina.
En consecuencia, en un primer aspecto la presente invención proporciona un método para la preparación de un material vegetal, que comprende los pasos:
a) el tratamiento de una planta viva con una citocinina;
b) la cosecha de la planta o una parte de la planta o un órgano de la planta al menos 12 horas después del paso a) ;
c) el calentamiento de la planta, o la parte de la planta o el órgano de la planta a una temperatura entre 55 y 200°C.
El primer aspecto de la invención también proporciona un método para la preparación de una composición alimenticia, que comprende los pasos:
a) el tratamiento de una planta viva antes de la cosecha con una citocinina;
b) la cosecha de la planta o una parte de la planta o un órgano de la planta al menos 12 horas después del paso a) ;
c) el calentamiento de la planta, o la parte de la planta o el órgano de la planta a una temperatura entre 55 y 200°C;
y en donde además el producto del paso b) es mezclado con al menos un ingrediente alimenticio antes del paso c) ,
y/o en donde el producto del paso c) es mezclado con al menos un ingrediente alimenticio.
En un segundo aspecto, la presente invención proporciona un material vegetal obtenible mediante el método de acuerdo al primer aspecto de la invención.
El segundo aspecto de la invención también proporciona un producto alimenticio que comprende el material vegetal obtenible mediante el método de acuerdo al primer aspecto de la invención.
Descripción Detallada de la Invención
A no ser que se definan de otro modo, todos los términos técnicos y científicos utilizados en la presente tienen el mismo significado que el que es comúnmente entendido por una persona de experiencia ordinaria en la técnica. Todos los porcentajes, a no ser que se indique de otro modo, se refiere al porcentaje en peso.
Los aspectos preferidos descritos en conexión con el primero o el segundo aspecto de la presente invención, pueden ser también aplicables a los otros aspectos de la invención, cambiando lo que haya que cambiar .
- Las diversas características y modalidades de la presente invención, referidas en las secciones individuales más adelante aplican, como sea apropiado, a otras secciones, cambiando lo que haya que cambiar. En consecuencia, las características especificadas en una sección pueden ser combinadas con las características especificadas en otras secciones, como sea apropiado. Todas las publicaciones mencionadas en la especificación anterior son incorporadas por referencia en la presente. Diversas modificaciones y variaciones de los métodos descritos y los productos de la invención serán aparentes para aquellos expertos en la técnica sin apartarse del alcance de la invención. Aunque la invención ha sido descrita en conexión con las modalidades preferidas específicas, se debe entender que la invención como se reclama no debe ser indebidamente limitada a tales modalidades específicas. Más bien, diversas modificaciones de las modalidades descritas para llevar a cabo la invención que son aparentes para aquellos expertos en los campos relevantes, se pretenden que estén dentro del alcance de las reivindicaciones.
Clorofila
La clorofila es un pigmento verde encontrado en la mayoría de las plantas. La clorofila absorbe la luz más fuertemente en el azul y el rojo pero pobremente en las porciones verdes del espectro electromagnético, por lo tanto, los tejidos que contienen clorofila como las hojas de las plantas son verdes. La clorofila es vital para la fotosíntesis, lo cual permite que las plantas obtengan energía de la luz. Las moléculas de clorofila están específicamente acomodadas en y alrededor de los complejos proteicos de los pigmentos enlazados a la membrana, llamados fotosistemas que están incrustados en los cloroplastos . Las clorofilas a y b son los tipos de clorofila que son los más abundantemente presentes en la naturaleza. También la clorofila el, c2, y d son conocidas. La estructura de la clorofila a y la clorofila b se muestra en seguida
Clorofila a: R = CH3 (metilo)
Clorofila b: R = CHO (carbonilo)
En el contexto de la presente invención, el término "clorofila" se refiere a la clorofila a, b, el, c2, y d.
Cuando la clorofila se degrada, el color verde desaparece. La degradación de la clorofila en las plantas ocurre por medio de una cascada de intermediarios coloreados que al final son convertidos en compuestos incoloros. Los intermediarios coloreados (como la feofitina, féofórbido) están en el intervalo de color verde oliva a café, y en consecuencia la planta pierde su color verde fresco y puede adoptar un color verde oliva y también colores cafés. Las causas de la degradación de la clorofila son por ejemplo el calor, así como la senectud de la plantas.
Citocininas
Las citocininas son hormonas de crecimiento vegetal que son derivadas de la purina adenina. Existen dos tipos de citocininas: las citocininas tipos adenina representadas por cinetina, zeatina y 6-bencilaminopurina, así como las citocinas del tipo fenilurea como la difenilurea o el tidiazuron. No existe evidencia de que las citocininas de fenilurea aparezcan de manera natural en los tejidos vegetales y se consideran que son citocininas sintéticas.
Las citocininas son las hormonas más importantes que retrasan la senectud y promueven la síntesis de la clorofila y la biogénesis de cloroplastos en las plantas superiores. Se describen que éstas poseen un impacto directo sobre la estabilidad de la clorofila a (S. Hortensteiner, Cellular and Mol. Life Sci . , 56, 1999, p. 330-347), retrasando la senectud y por lo tanto previniendo que la clorofila se desintegre. La senectud es el término general que describe los procesos que tienen lugar durante el envejecimiento de un organismo. La aplicación exógéna de citocininas a los tejidos vegetales da una variedad de respuestas que incluyen el retraso en la senectud, el mantenimiento de la actividad de los cloroplastos, la declinación de la degradación a la clorofila, la producción de proteína y síntesis de ácidos nucleicos y la movilización de los nutrientes (J. S. An et al., J. Food Engin. 2006, p. 951-957) . Los estudios sobre la degradación de la clorofila durante la fase post-cosecha en la brócoli, mostraron que el uso de las 6-bencilaminopurina retardó la velocidad de degradación de la clorofila y tuvo una correlación a la velocidad de degradación del color verde, sugiriendo que esta hormona podría ser un agente bioquímico adecuado para prevenir la pérdida del color en vegetales (M. L. Costa et al.. Postcosecha Biol . TechnoL, 35, 2005, p. 191-199).
Son conocidas más de 200 citocininas naturales y sintéticas. Las citocininas activas de origen natural tienden a ser derivadas de la adenina y tiene ya sea una cadena lateral derivada de isopreno o aromática, sobre el extremo N6. Esto hace posible la división de las citocininas en dos clases principales, específicamente las citocininas aromáticas y las citocininas isoprenoides.
Ejemplos de citocininas aromáticas :
a. orto-topolina (oT)
b. meta-topolina (mT)
c. orto-metoxitopolina (MeoT)
d. meta-metoxitopolina (MemT)
e. 6-bencil-amino-purina (BAP) , ver figura siguiente:
Ejemplos de citocininas isoprenoides:
a. cis-zeatina (cZ) y trans- zeatina (tZ) , ver estructuras siguientes
HCX
i J
NHCH2CH =CCH2OH
NH
H
N
"
H
b. N6- (D2-isopentenil) adenina (iP)
c. dihidrozeatina (DZ) , en cuyo caso el doble enlace en el grupo lateral de la zeatin ha sido hidrogenado
d. cinetina (6-furfurilaminopurina) :
(C10H9N5O; PM 215.21; sinónimos: 6 -furfurilaminopurina y N6-furfuriladenina)
La cinetina fue la primera citocinina descubierta y nombrada así debido a la habilidad de los compuestos para promover la citocinesis (división celular) . Aunque éste es un compuesto natural, éste no es elaborado en las plantas si no que es un compuesto proveniente del esperma de arenque calentado en autoclave, y es por lo tanto usualmente considerada una citocinina "sintética" (lo que significa que la hormona es sintetizada en algún sitio diferente de una planta) .
Las funciones fisiológicas de la citocinina son:
¦ estimula la división celular;
¦ estimula la morfogénesis (inicio de los brotes/formación de botones) en el cultivo de tejidos;
¦ estimula el crecimiento de la liberación de botones laterales de dominancia apical;
¦ estimula la expansión de las hojas que resulta del agrandamiento de las células;
¦ puede mejorar la apertura estomacal en algunas especies;
¦ promueve la conversión de los etioplastos en cloroplastos vía la estimulación de la síntesis de clorofila ;
¦ y retrasa la senectud de las hojas.
Los pasos en la señalización de la citocinina son los siguientes:
¦ una citocinina, como la zeatina, se enlaza a una proteína receptora incrustada en la membrana plasmática de la célula;
¦ la porción interna del receptor enlaza luego un grupo fosfato a una proteína en el citosol;
¦ esta proteína se mueve hacia el núcleo donde ésta activa uno o más factores de la transcripción nuclear;
¦ éstos enlazan a los promotores de los genes;
¦ la transcripción de estos genes produce mARNs que se mueven hacia el citosol;
¦ la traducción de estos mARNs produce las proteínas que hacen posible que la célula lleve a cabo su función inducida por citocina.
Método para el tratamiento de la plantas
En un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un método para la preparación de un material vegetal, que comprende los pasos de:
a) el tratamiento de una planta viva antes de la cosecha, con una citocinina;
b) la cosecha de la planta o una parte de la planta o un órgano de la planta, al menos 12 horas después del paso a) ;
c) el calentamiento de la planta, o la parte de la planta o el órgano de la planta a una temperatura entre 55°C y 200°C.
Un material vegetal en el contexto de la presente invención es definido como un material de origen vegetal. El material vegetal puede ser una planta completa, o una parte de una parte de una planta, por ejemplo los tallos y las hojas, o un órgano de la planta como una hoja o el fruto de una planta.
En el paso a) , una planta viva es tratada, lo cual se entiende que significa que la planta u órgano de la planta está todavía desarrollándose no ha sido todavía cosechada. La planta puede ser cultivada mediante cualquier método que sea común en agricultura, como en un campo o en un invernadero, o mediante cualquier otro método adecuado conocido en la técnica. La planta puede también estar cultivada sobre sustratos hidropónicos , en donde las plantas son desarrolladas utilizando soluciones de nutrientes minerales, sin suelo. Las plantas pueden ser cultivadas con sus raíces en las soluciones de nutrientes minerales, o en un medio inerte como lana mineral .
El tratamiento de la planta con una citocinina en el paso a) puede ocurrir más de una vez, por ejemplo la planta puede ser tratada dos veces en dos días, en donde los días pueden ser días consecutivos o no días consecutivos. El tratamiento podría ocurrir adecuadamente tres, cuatro, cinco o más veces .
Preferentemente en este método, la citocinina comprende cinetina. La citocinina puede ser combinada con las otras clases de hormonas del crecimiento, tales como el ácido abscísico, auxinas, etileno y giberelinas. Preferentemente, una combinación de cinetina con cualquiera de las otras hormonas del crecimiento, tales como ácido abscísico, auxinas, etileno y giberelinas podrían ser utilizadas. También, una combinación de cualquiera de las citocininas mencionadas anteriormente, podría ser utilizada en el paso a de la presente invención.
Preferentemente, en el paso a) una citocinina en la solución acuosa es rociada sobre la planta viva. La aspersión puede sr realizada mediante cualquier método de aspersión que sea adecuado o comúnmente utilizado en el cultivo de plantas. Preferentemente la concentración de la citocinina en la solución acuosa está entre 0.01 a 10 milimoles por litro, más preferentemente de 0.1 a 5 milimoles por litro, más preferentemente de 0.5 a 2 milimoles por litro. Cuando la citocinina es rociada sobre la planta, la citocinina es absorbida por la planta desde su superficie.
Alternativamente, otro método preferido para el tratamiento de la planta viva con una citocinina en el paso a) , es que cuando la planta se desarrolle sobre sustratos hidropónicos , la citocinina esté comprendida en las soluciones nutritivas minerales con las cuales son alimentadas las plantas. Subsecuentemente, la citocinina puede ser absorbida por la planta desde el medio.
Otro método preferido para el tratamiento de la planta viva con una citocinina en el paso a) , es la inyección de un medio que comprende la citocinina dentro de las venas de las hojas u otras partes de la planta. Preferentemente, la concentración de la citocinina en el medio está entre 0.01 a 10 milimoles por litro, más preferentemente de 0.1 a 5 milimoles por litro, más preferentemente de 0.5 a 2 milimoles por litro.
La cosecha de la planta o el órgano de la planta en el paso b) tiene lugar al menos 12 horas después del paso de tratamiento a) . Este tiempo es requerido con el fin de darle a la planta el tiempo para absorber la citocinina y asimilar la hormona del crecimiento. La cosecha puede también por ejemplo, tener lugar 24 horas después del tratamiento en el paso b) , o 2 días después del tratamiento, o 3 días. Preferentemente, la planta es cosechada máximamente ,4 ó 5 días después del tratamiento.
El periodo de tiempo máximo entre los pasos b) y e) depende del tipo de planta, y puede estar preferentemente en el intervalo de un día entre cosecha en el paso b) y el calentamiento en el paso c) para ciertas plantas, preferentemente hasta unas pocas semanas para otras plantas. Esto no solamente depende del tipo y de la especie de la planta o del órgano de la planta, sino también de las condiciones de almacenamiento del material cosechado antes del paso c) , como la temperatura, la humedad, la composición de la atmósfera de gases (aire, nitrógeno) .
La planta o la parte de la planta o el órgano de la planta que se cosecha puede ser calentada en el paso c) tal cual se cosechó o alternativamente puede ser tratada después de la cosecha y antes del paso c) , por ejemplo mediante lavado, enfriamiento, congelamiento, recorte en piezas, molienda, trituración, deshidratación o cualquier otro tratamiento, o una combinación de cualquiera de estos tratamientos, que es común en la técnica.
Preferentemente en el paso c) , el calentamiento es realizado mediante el freído a una temperatura entre 110°C y 200°C. Freído significa que el calentamiento es realizado en aceite, en donde el aceite preferentemente es un aceite o grasa comestible. En el contexto de la presente invención, el término aceite o grasa comestible se refiere en general a los triglicéridos provenientes de origen vegetal o animal, por ejemplo, pero no limitados a, aceite de girasol, aceite de palma o cebo. Además, el aceite puede también contener trazas de triglicéridos, monoglicéridos o ácidos grasos libres. Los términos aceite o grasa comestible, y los triglicéridos son conocidos por aquellos expertos en la técnica. Más preferentemente el paso de calentamiento en tal paso de freído es realizado a una temperatura del aceite entre 120°C y 190°C, más preferentemente entre 140 y 180°C. El freído puede ser realizado como un freído poco profundo o un método de freído profundo. El freído poco profundo involucra el calentamiento del material vegetal en una capa delgada del aceite en un sartén o recipiente similar, mientras que el freído profundo involucra la inmersión del material vegetal en el aceite.
En un método preferido alternativo, en el paso c) el calentamiento es realizado en una solución acuosa a una temperatura entre 55°C y 150°C. En ese caso, en el paso c) la temperatura preferentemente está preferentemente entre 60°C y 150°C, más preferentemente entre 55°C y 140°C, más preferentemente entre 60°C y 140°C, aún más preferentemente entre 60°C y 120°C, y lo más preferentemente entre 70°C y 95°C.
Durante el paso de calentamiento, los procesos bioquímicos en la planta cosechada o en el órgano de la planta, que usualmente, (parcialmente) continúan después de la cosecha, son terminados. Si el paso de calentamiento es llevado a cabo como una operación unitaria, la duración del paso de calentamiento c) podría estar en el intervalo de unos pocos segundos (por ejemplo, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 segundos) a 30 minutos, más preferentemente de 5 segundos a 20 minutos, más preferentemente de 8 segundos a 10 minutos, más preferentemente de 20 segundos a 10 minutos, más preferentemente de 30 segundos a 10 minutos, lo más preferentemente de 1 minuto a 10 minutos. Típicamente, cuando la temperatura es relativamente alta, el tiempo de calentamiento será corto y viceversa. En el proceso completo, la exposición al calor del material vegetal puede ser mucho más prologada que únicamente en el paso de operación unitaria c) (si el paso c) es llevado a cabo como una operación unitaria) , tal como, pero no limitado á, 10 a 200 minutos.
La temperatura de inactivación efectivamente requerida y el tiempo son dependientes de la planta o del órgano que es utilizado en la presente invención. Algunas enzimas sensibles en las plantas están siendo inactivadas a temperaturas por debajo de 40°C, mientras que otras necesitan temperaturas de 50, 60, ó 70, o incluso 100°C o superiores. La mayoría de las enzimas son inactivadas a 100°C, pero algunas necesitan temperaturas más altas para la inactivación completa. Los procesos bioquímicos son usualmente terminados debido a la pérdida de la integridad de la membrana celular (alrededor de 50°C) y debido a la inactivación de la enzima. El tratamiento térmico es también relevante para la seguridad microbiana, ya que necesitan ser eliminados los patógenos potenciales: las temperaturas de pasteurización están en el intervalo de 70 a 95°C, mientras que la esterilización ocurre a temperaturas más altas, típicamente pero no limitadas a 120 a 150°C.
Si de acuerdo a un método preferido, el calentamiento en el paso c) es realizado en solución acuosa, entonces preferentemente el pH en el paso c) tiene un valor entre 3 y 11. Más preferentemente, la solución acuosa en el paso c) tiene un pH de 6.5 a 11, más preferentemente de 7 a 11, aún más preferentemente de 7.2 a 10, y lo más preferentemente de 8 a 10. Preferentemente a estos intervalos de pH, el pH es mantenido constante por una solución amortiguada. Mediante este amortiguamiento a valores de pH relativamente altos, la retención de la clorofila puede ser incrementada en comparación a un paso de calentamiento no amortiguado. Este efecto es especialmente pronunciado a temperaturas de remojo altas del paso c) . Alternativamente, el pH en el paso c) es preferentemente de 3 a 6.5, más preferentemente de 3.5 a 6 , lo más preferentemente de 4 a 5.5 , más preferentemente de 4.5 a 5. Este pH en el paso c) puede ser obtenido mediante el calentamiento del material vegetal, que puede dar como resultado un pH dentro del intervalo ácido como se indica aquí.
Después del paso c) , el material vegetal puede ser enfriado, por ejemplo mediante inmersión del material vegetal en un baño de agua, a una temperatura entre por ejemplo 2 y 10°C, o por ejemplo mediante enfriamiento en aire, con o sin circulación de aire forzado. Alternativamente después del paso c) , el material vegetal puede ser tratado mediante lavado, congelamiento, recorte en piezas, molienda, trituración, secado o cualquier otro tratamiento, o una combinación de cualquiera de estos tratamientos, que es común en la técnica.
Plantas y órganos de la plantas
Las plantas que son adecuadas para el uso en la presente invención incluyen cualquier planta, pero especialmente preferidas son las plantas verdes y comestibles o los órganos de las plantas, como se describen por el término general "frutas y vegetales" .
Un vegetal es una planta que es cultivada para una parte comestible, tal como la raíz de un betabel, la hoja de una espinaca, o los botones de flores de la brócoli o la coliflor. Una vegetal es en general considerado como cualquier producto vegetal sabroso o menos dulce. Usualmente en el contexto culinario el término vegetal excluye a las frutas dulces, las semillas, las nueces, los granos y las hierbas y especies.
La definición de fruto o fruta depende de si el término es utilizado en el contexto culinario o biológico (o botánico) . En términos culinarios, la fruta es usualmente un órgano de reproducción de la planta, de sabor dulce, como una manzana o fresa. Algunas frutas en el sentido botánico son en el contexto culinario considerados como vegetales, debido a que éstos no son (o menos) dulces, por ejemplo el pepino y el tomate.
En el contexto biológico una semilla es una planta embriónica pequeña, encerrada en una cobertura llamada el recubrimiento de la semilla, para reproducción de la planta. En el sentido culinario, las semillas comestibles incluyen las semillas que son directamente productos alimenticios, así como las semillas que son utilizadas para elaborar productos derivados. Algunos ejemplos de semillas son los fríjoles (o leguminosas) , que son semillas blandas ricas en proteína. Cereales (o granos) son cosechas similares a pasto que son cosechadas por sus semillas secas. Estas semillas son a menudo trituradas para elaborar harina. Los cereales proporcionan casi la mitad de todas las calorías consumidas en el mundo. Los ejemplos son el arroz y el trigo. Las nueces son botánicamente un tipo específico de fruta, pero el término es también aplicado a muchas semillas comestibles que no son botánicamente nueces. En el contexto culinario, una nuez es cualquier producto vegetal, duro, aceitoso y con cáscara dura.
Una hierba es una planta que usualmente es valorada por su sabor, esencia u otras cualidades. En el contexto culinario, las hierbas se originan de las partes verdes de las hojas de una planta, mientras que las especies en general se originan de otras partes de las plantas, incluyendo las semillas, las moras, la corteza, la raíz, los frutos, las hojas secas y las raíces. Las hierbas culinarias son distinguidas de los vegetales ya que, como las especies, éstas son utilizadas en pequeñas cantidades y proporcionan sabor en vez de sustancia al alimento. Las hierbas culinarias, pueden originarse de las plantas herbáceas (como los cebollinos) , arbustos (tal como romero y tomillo (que es un arbusto pequeño) ) o árboles (tal como el laurel) .
Otra propiedad de las plantas es que éstas deben pertenecer al grupo de las plantas de fotosíntesis (o que contienen clorofila) . Las siguientes plantas comestibles y plantas de órganos son adecuadas para el uso dentro del alcance de la presente invención, no obstante, la invención no está limitada a las plantas y órganos de la plantas mencionados como ejemplos aquí.
Plantas
Las plantas indicadas aquí como ejemplos que van a ser adecuados en la presente invención son mencionadas en su contexto culinario, y no ordenadas de una manera botánica
¦ brócoli (Brassica olerácea, grupo de cultivo itálica) ;
¦ otras especies del género Brassica, por ejemplo, la col; ¦ espinaca;
¦ hierbas tales como, pero no limitadas a perejil, artemisa, romero, tomillo, orégano, albaca y cebollines;
¦ puerro y otras plantas de la familia botánica alliaceae;
¦ pimiento verde (también conocido como páprika) ;
¦ y leguminosas como frijoles Francés, chícharos y ejotes.
Además de estas plantas ejemplificadas, que son cultivadas en tierra, las siguientes plantas acuáticas són también consideradas dentro del alcance de la presente invención:
¦ algas verdes ( c 2orop ytae) , las cuales son fotosintéticas ;
¦ y algas marinas, las cuales pertenecen a las algas verdes .
Cuando se cultivan algas verdes y/o algas marinas, por ejemplo, en un estanque, la citocinina puede ser aplicada a las algas verdes y/o a las algas marinas como parte de un medio nutritivo con el cual las algas verdes y/o las algas marinas son alimentadas.
Órganos de la plantas
Las seis partes de las plantas principales (en el contexto botánico) son las raíces, los tallos, las hojas, las flores, los frutos, y las semillas. Los siguientes órganos de las plantas son ejemplos de órganos que son adecuados en el contexto de la presente invención:
¦ hojas (definidas como el órgano de la planta especializado para la fotosíntesis) , incluyendo agujas;
¦ flores y cabezas de flores;
¦ botones;
¦ semillas ;
¦ vainas ;
¦ frutos;
¦ tubérculos y raíces;
¦ y tallo.
Preferentemente, el órgano en el paso c) es un órgano verde. Preferentemente la planta es una planta comestible, más preferentemente seleccionada del grupo que consiste de hierbas, brócoli, espinaca, chícharos, y pimiento verde, y combinaciones de los mismos.
Preparación del producto alimenticio
El primer aspecto de la invención también proporciona un método para la preparación de una composición alimenticia, en donde el material vegetal de acuerdo a la invención es preparado o utilizado. Por lo tanto, el primer aspecto de la invención también proporciona un método para la preparación de una composición alimenticia, que comprende los pasos de :
a) el tratamiento de una planta viva antes de la cosecha, con una citocinina;
b) la cosecha de la planta o una parte de la planta o un órgano de la planta al menos 12 horas después del paso a) ;
c) el calentamiento de la planta, o la parte de la planta o el órgano de la planta a una temperatura entre 55 °C y 200°C;
y en donde adicionalmente el producto del paso b) es puesto en contacto con al menos un ingrediente alimenticio antes del paso c) ,
y/o en donde el producto del paso c) es puesto en contacto con al menos un ingrediente alimenticio.
Los aspectos preferidos de la invención para la preparación de un material vegetal, pueden ser aplicados, cambiando lo que haya que cambiar, al método para la preparación de una composición alimenticia.
Preferentemente en el paso c) , el calentamiento es realizado mediante el freído a una temperatura entre 110°C y 200°C. Freído significa que el calentamiento es realizado en aceite, en donde el aceite preferentemente es un aceite o grasa comestible. Más preferentemente, el paso de calentamiento en tal paso de freído es realizado a una temperatura del aceite entre 120°C y 190°C, más preferentemente entre 140 y 180°C. El freído puede ser realizado como un freído poco profundo o un método de freído profundo. El freído poco profundo involucra el calentamiento del material vegetal en una capa delgada de aceite en un sartén similar, mientras que el freído profundo involucra la inmersión del material vegetal en el aceite.
En un método preferido alternativo, en el paso c) el calentamiento es realizado en una solución acuosa a una temperatura entre 55°C y 150°C. En este caso, en el paso c) la temperatura preferentemente está preferentemente entre 60°C y 150°C, más preferentemente entre 55°C y 140°C, más preferentemente entre 60°C y 140°C, aún más preferentemente entre 60°C y 120°C, y lo más preferentemente entre 70°C y 95°C.
En este método de acuerdo al primer aspecto de la invención, la planta cosechada o la parte de la planta o el órgano de la planta del paso b) es ya sea puesto en contacto con al menos un ingrediente alimenticio, y preferentemente mezclado con el ingrediente alimenticio, y esta composición es subsecuentemente calentada a una temperatura entre 55 y 200°C. O alternativamente, la puesta en contacto, el mezclado opcional, y el calentamiento subsecuente con un ingrediente alimenticio, se lleva a cabo de otra manera: primeramente calentando la planta cosechada o la parte de la planta o el órgano de la planta a una temperatura entre 55 y 200°C, seguido por la puesta de esta planta caliente u órgano de la planta caliente en contacto con al menos un ingrediente alimenticio .
Un ingrediente alimenticio es un ingrediente de un producto alimenticio o una composición alimenticia, y estos ingredientes incorporan todos los ingredientes que son comúnmente conocidos por la persona experta en la técnica. La puesta en contacto debe ser entendida en su sentido más amplio. Por ejemplo, si el material vegetal es la brócoli, entonces la puesta en contacto puede entenderse que es que la brócoli sea empacada con otros elementos de una comida. lista, o puede ser mezclado con otros vegetales en un plato de vegetales. Por otra parte, si el material vegetal por ejemplo es una hierba como la albaca, entonces la hierba puede ser mezclada con otros ingredientes alimenticios, o ser rociada sobre un producto alimenticio.
Antes de poner la planta cosechada o la parte de la planta o el órgano de la planta en contacto con un ingrediente alimenticio, éste puede necesitar ser cortado en pequeñas piezas, o puede sufrir un tratamiento común en la técnica, tal como, pero no limitado a un paso de lavado, un paso de enfriamiento o deshidratación. Estos pasos adicionales opcionales pueden ser llevados a cabo antes o después del calentamiento del paso c) .
Al menos un ingrediente alimenticio con el cual la planta cosechada o la parte de la planta o el órgano de la planta del paso b) es puesto en contacto, puede ser en una forma "cruda" , de este modo no todavía formulado como un producto alimenticio listo. En este caso, el tratamiento térmico de la planta cosechada o el órgano de la planta se puede realizar por ejemplo como un paso de pasteurización que es requerido para mantener el producto alimenticio microbiológicamente seguro y estable. De esta manera, el material vegetal de acuerdo a la invención es preparado mediante tal pasteurización del producto ' alimenticio completo. El producto alimenticio comprende entonces el material vegetal de acuerdo a la invención.
El material vegetal obtenido después del paso c) del método de acuerdo a la invención podría ser también puesto en contacto con uno o más ingredientes alimenticios en forma lista. Esto significa que la composición alimenticia dentro de la cual se mezcla la planta o el órgano de la planta, es ya un producto alimenticio listo para el consumo, y al cual son agregadas por ejemplo hierbas que son obtenidas de acuerdo al presente método de la invención. Esto conduce entonces a retención más prolongada del color verde de las hierbas durante la vida de anaquel del producto alimenticio.
El método para la preparación de una composición alimenticia de acuerdo al primer aspecto de la invención, puede ser considerado como una modalidad preferida del método para la preparación de un material vegetal de atíuerdo al primer aspecto de la invención. El método para la preparación de un producto alimenticio comprende el método para la preparación de un material vegetal de acuerdo al primer aspecto de la invención, y en donde además el producto del paso b) es puesto en contacto con al menos un ingrediente alimenticio antes del paso c) , y/o en donde el producto del paso c) es puesto en contacto con al menos un ingrediente alimenticio.
Productos alimenticios
En un segundo aspecto, la presente invención proporciona un material vegetal obtenible mediante el método de acuerdo al primer aspecto de la invención. Este material vegetal preferentemente es utilizado como un producto alimenticio o como un ingrediente de un producto alimenticio.
Por lo tanto, el segundo aspecto de la invención proporciona preferentemente un producto alimenticio que comprende el material vegetal de acuerdo a la invención. Con referencia nuevamente a los ejemplos anteriores, si el material vegetal es por ejemplo brócoli, entonces el producto alimenticio puede ser las cabezas de la flor de brócoli como tales. Si el material vegetal es por ejemplo una hierba como la albaca, entonces el producto alimenticio puede ser un producto que contiene piezas de albaca rociadas sobre la superficie del producto .
Tal producto alimenticio podría ser producido al mezclar la (parte de) planta, y/o (parte de) un órgano de la planta con otros ingredientes alimenticios.
Alternativamente, el producto alimenticio puede ser producido mediante el método preferido de acuerdo al primer aspecto de la invención.
Una amplia gama de productos alimenticios es adecuada como un portador para la planta cosechada o los órganos de la plantas del método de la presente invención. Los ejemplos preferidos de éstos son sopas, aderezos, bebidas, alimentos para untar o composiciones de hierbas.
Los ejemplos preferidos de tales productos alimenticios son barras de cereal, galletas, y biscochos, productos de confitería, condimentos, confiterías, bebidas, postres, bocadillos, aderezos, mayonesa, salsas, alimentos para untar y quesos con hierbas (queso suave, queso duro), bebidas lácteas, bebidas o jugos de frutas, bebidas o jugos de vegetales, combinaciones de bebidas lácteas y/o de frutas y/o de vegetales .
Los productos alimenticios especialmente preferidos de acuerdo a la presente invención son sopas, por ejemplo, sopa de chícharo, o cualquier sopa que comprenda hierbas que han sido obtenidas de acuerdo al método de la invención.
Otros productos alimenticios ensamblados que están dentro del alcance de la presente invención son comidas ya listas, así como productos alimenticios congelados.
En el caso de que el producto alimenticio sea una bebida, más específicamente una bebida de frutas, o combinación de bebida de frutas y bebida láctea, ésta comprende preferentemente al menos 10% en peso de la composición de un componente de fruta, en donde el componente de fruta es seleccionado de jugo de fruta, concentrado de fruta, concentración de jugo de fruta, puré de fruta, pulpa de fruta, fruta triturada, concentrado de puré de fruta y combinaciones de los mismos. Los ejemplos de tales componentes de fruta son jugo de naranja, jugo de manzana, jugo de uva, jugo de durazno, pulpa de plátano, pulpa de chabacano, jugo de naranja concentrado, pulpa de mango, jugo de durazno concentrado, puré de frambuesa, puré de fresa, pulpa de manzana, pulpa de frambuesa, jugo concentrado de uva, jugo concentrado de aronia, jugo concentrado de saúco. Preferentemente, tal bebida comprende al menos 30% en peso de la bebida del componente de fruta, más preferentemente al menos 40% en peso de la bebida del componente de fruta. Estas cantidades son calculadas como si se utilizaran jugos o purés de frutas no diluidos, no concentrados, y similares. De este modo, si 0.5% en peso de un concentrado de fruta sextuplicado es utilizado, la cantidad efectiva del componente de fruta incorporado es 3% en peso de la bebida. Cualquier componente de fruta comúnmente disponible puede ser utilizado en las bebidas de acuerdo a la invención, y puede ser seleccionado de una o más de las siguientes fuentes de frutas: frutas cítricas (por ejemplo, naranja, mandarina, limón o toronja); frutas tropicales (por ejemplo, plátano, durazno, mango, chabacano o fruta de la pasión) ; frutas rojas (por ejemplo, fresas, cerezas, frambuesas o zarzamoras), o cualquier combinación de las mismas.
Preferentemente, la bebida es una bebida elaborada de jugo de vegetales, en donde uno o más de tales egetales pueden ser tratados de acuerdo al primer aspecto de la invención. Los ejemplos de tales bebidas de vegetales son mini bebidas que contiene jugo de zanahoria, combinado con el jugo de vegetales verdes.
Otros productos alimenticios preferidos dé acuerdo a la invención son composiciones herbales como las pastas de hierbas. Tales composiciones pueden comprender una o más hierbas hechas purés, trituradas o molidas, opcionalmente combinadas con aceite y/o sal y/u otros ingredientes como queso, semillas, y vinagre. Los ejemplos de hierbas, adecuadas para tales tipos de composiciones han sido dados anteriormente en la presente. Un ejemplo de tal pasta de hierba sea el pesto, el cual tradicionalmente contiene albaca triturada y piñones, ajo, aceite de oliva extra virgen y queso duro rallado.
Alternativamente, el producto alimenticio preferentemente es un producto para untar tal como una emulsión agua en aceite (una emulsión continua aceitosa) , por ejemplo una margarina o un producto alimenticio tipo margarina con bajo contenido de grasa. Un producto para untar puede ser también una emulsión aceite en agua (continua en agua) como los productos para untar lácteos o productos para untar de queso suave. De manera adecuada, el nivel total de triglicéridos para tal producto para untar puede estar en el intervalo de aproximadamente 10% en peso a 85% en peso de la composición, más preferentemente de 20% a 70% en peso, lo más preferentemente de 30% a 60% en peso de la composición. Tales productos para untar pueden contener hierbas y especies, en donde las hierbas han sido obtenidas de acuerdo al primer aspecto de la presente invención.;
El producto alimenticio puede ser secado y contener menos de 40% en peso de agua de la composición, preferentemente menos de 25%, más preferentemente de 1 a 15%. Alternativamente, el alimento puede ser sustancialmente acuoso y contener al menos 40% en peso de agua de la composición, preferentemente al menos 50%, más preferentemente de 65 a 99.9%.
Además, el alimento comprende preferentemente nutrientes que incluyen carbohidratos (incluyendo azúcares y/o almidones), proteínas, grasas, vitaminas, minerales, fitonutrientes (incluyendo terpenos, compuestos fenólicos, organosulfuros o una mezcla de los mismos) o mezclas de los mismos. El alimento puede ser bajo en calorías (por ejemplo, puede tener un contenido energético menor de 100 kCal por 100 g de la composición) o puede tener un alto contenido calórico (por ejemplo, puede tener un contenido energético de más de 100 kCal por 100 g de la composición, preferentemente entre 150 y 1000 kCal) . El alimento puede también contener sal, saborizantes , colores, conservantes, antioxidantes, endulzantes no nutritivos o una mezcla de los mismos.
EJEMPLOS
Los siguientes ejemplos no limitantes ilustran la presente invención.
Métodos
La determinación de los contenidos de clorofila de hojas frescas utilizando espectrofotómetro .
Procedimiento :
1. Homogenización del tejido vegetal (100 mg) en nitrógeno líquido. Para cada punto de datos al menos tres muestras biológicas fueron cosechadas.
2. Adición de 400 microlitros de acetona en KOH 10 micromolar y la agitación en torbellino subsecuente
3. Centrifugación del homogeneizado a 13,000 rpm por 10 minutos para eliminar los desechos celulares y las proteínas
4. Transferencia de sobrenadante a nuevos tubos de ensayo
5. La adición de 200 microlitros de la mezcla de extracción al concentrado como se mencionó anteriormente, y la agitación en torbellino
6. Centrif gación del homogeneizado a 13,000 rpm por 10 minutos
7. El mezclado del sobrenadante con el sobrenadante del paso 4
8. La repetición de los pasos 5-7 tres veces hasta que el botón concentrado esté completamente blanco
9. Dilución de la muestra 1:10 en acetona y medición de la absorción a 664, 646/7 y 750 nm en un espectrofotómetro . Todas las mediciones de absorbancia a la longitud de onda indicada necesitan sustracción de la absorbancia a 750 nm. El cálculo de los contenidos de clorofila por comparación con las curvas de calibración.
Determinación de los contenidos de clorofila de las hojas mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC, por sus siglas en inglés) . Procedimiento:
1. Homogenización de 100 mg del material vegetal en nitrógeno líquido en un tubo de ensayo
2. Adición de 500 microlitros de acetona con KOH 10 micromolar y agitación en torbellino.
3. Centrifugación de la suspensión por 10 minutos a 4°C a 13.000 rpm.
4. El sobrenadante es transferido a un nuevo tubo de ensayo
5. Adición de 500 microlitros de acetona al botón y resuspensión del botón
6. Centrifugación por 10 minutos a 4°C a 13.000 rpm.
7. El sobrenadante es combinado con el sobrenadante del paso 4
8. Las muestras son agitadas en torbellino y centrifugadas por 10 minutos a 4°C a 13,000 rpm.
9. Una alícuota de 40 microlitros del extracto es mezclada con 160 microlitros de agua
10. La muestra es transferida a un vial de HPLC
11. Una alícuota de 10-100 microlitros es inyectada dentro de la columna de HPLC (columna RP C18)
12. Amortiguadores de corrida:
Acetonitrilo/agua/trietilamina (1798:200:2) y acetato de El objetivo de los experimentos: combinar los efectos del tratamiento pre-cosecha de las plantas de tabaco con la hormona del crecimiento cinetina y subsecuentemente el remojo con una solución amortiguadora sobre la estabilidad de la clorofila después del tratamiento térmico, seguido por diferentes periodos de almacenamiento.
Una solución de cinetina 1 mM en agua fue realizada mediante la disolución de la cinetina gota a gota con 10 microlitros de NaOH 1 M, luego la solución fue neutralizada a pH 7.0 con HCl . Esta solución acuosa de cinetina 1 mM fue inyectada dentro de las hojas de las plantas de tabaco en crecimiento {Nicotiana tabacum) . La aplicación de citocinina fue repetida una vez al día por cinco días consecutivos. En el día 7, las hojas de tabaco fueron cosechadas y almacenadas en papel aluminio. Las plantas control fueron tratadas con la misma solución a pH 7.0 (en agua), pero sin la cinetina.
Después de la cosecha, las hojas de las plantas cosechadas (tratadas con citocinina, así como las plantas control) fueron separadas en lotes, que fueron subsecuentemente tratados en diferentes temperaturas en uno de los siguientes días:
1. Las hojas fueron remojadas en agua de la llave durante 1 minuto a temperatura ambiente,- 2. Las hojas fueron remojadas en una solución amortiguadora de pH 7.2 durante 1 minuto a temperatura ambiente;
3. Las hojas fueron remojadas en agua de la llave durante 1 minuto a 70 °C;
4. las hojas fueron remojadas en una solución amortiguadora de pH 7.2 durante 1 minuto a 70°C;
5. Las hojas fueron remojadas en agua de la llave durante 1 minuto a 90 °C;
6. Las hojas fueron remojadas en una solución amortiguadora de pH 7.2 durante 1 minuto a 90 °C;
Inmediatamente después de cada uno de estos pasos, las hojas remojadas fueron enfriadas brevemente en un baño de la llave fría a 3°C.
La solución amortiguadora acuosa contenía NaCl 137 mM, KC1 2.7 mM, Na2HP04 10 mM y KH2P04 2 mM, y fue ajustada a pH 7.2 con más fosfato ácido o fosfato diácido, si se requería.
Finalmente, el contenido de clorofila de las hojas fue cuantificado después del almacenamiento en papeles secantes a 4°C en la oscuridad a diversos momentos en el tiempo. Las muestras de hojas fueron tomadas inmediatamente después de los pasos de calentamiento y enfriamiento descritos anteriormente, y después de 0 , 3, 7, 10, 14, 20 y 27 días de almacenamiento (ver Tabla 1) .
Resultados del remojo a temperatura ambiente
Tabla 1 Preparación experimental y resultados a la temperatura de remojo a temperatura ambiente - Contenido de clorofila a y b en hojas de tabaco (en micromol de clorofila por gramo de hojas en peso fresco)
Código TrataSolución Nivel de clorofila después de xx de Rede la miento de remojo almacenamiento ducción muestra pre- después
[micromol por gramo de queso fresco]
coeecha de 27 días
0 d 3 d 7 d 10 d 14 d 20 d 27 d
C RT Agua Agua 14.5 14 12.3 10 9 8 7.2 50%
B RT Agua Amorti - 13.5 14 12.5 12.5 11.5 10.2 8 38% guador pH
7.2
K RT Citoci- Agua 18 17.8 17.2 16.5 16.2 16 16 9% nina 5
días
B K RT Citoci- Amorti18.5 17.5 16.5 15.5 16 15.5 15 17% nina 5 guador pH
días 7.2
El contenido de clorofila en las hojas control tratadas a temperatura ambiente (no pre- tratadas con citocinina y remojadas en agua a temperatura ambiente) fue reducido por aproximadamente 50% después de 27 días, mientras que la reducción de la clorofila de las hojas tratadas en calor en presencia del amortiguador fue únicamente de aproximadamente 40%.
El efecto del pre - t ratami ento con citocinina fue mucho más fuerte: menos del 10% del contenido de clorofila se perdió después de 27 días.
Además, los niveles iniciales inmediatamente después del remojo fueron significativamente más altos .
La combinación del pre - tratamiento con citocinina y el tratamiento con amortiguador no aumentó el efecto de la citocinina únicamente (ver Tabla 1) .
A partir de este experimento, pueden ser extraídas las siguientes conclusiones:
¦ el tratamiento con citocinina conduce a un contenido más alto de clorofila por peso fresco, inmediatamente después del remojo de las hojas;
¦ sin el tratamiento con citocinina, el remojo en una solución amortiguada a temperatura ambiente en comparación a un paso de remojo no amortiguado, conduce a menor pérdida de clorofila ;
¦ el tratamiento con citocinina conduce a la reducción de velocidad de degradación de la clorofila, cuando se remoja en soluciones amortiguadas o no amortiguadas.
Resultados a una temperatura de remojo de 70 °C
Tabla 2 Preparación experimental y resultados del paso de calentamiento a una temperatura de remojo de 70°C - Contenido de clorofila a y b en hojas de tabaco (en micromol de clorofila por gramo de hojas en peso fresco)
Código Tratamiento Solución de Nivel de clorofila después de xx días de almacenamiento Reducción de la pre-cosecha remojo fadcronol por gramo de queso fresco] después nuestra de 27 días
0 d 3 d 7 d 10 d 14 d 20 d 27 d
C 70 Agua Agua 12.5 10.5 8.8 7 6 5 2.5 79%
B 70 Agua Amortiguador 14.5 14.5 14 14 13 12 11 24% pH 7.2
K 70 Citccinina 5 Agua 17.5 17 16.5 16.5 16 16 15.5 11% días
B K 70 Citocinina 5 Amortiguador 17 17.5 17.2 17 17 16.8 16 11% días pH 7.2
Las hojas control (C 70) han perdido aproximadamente 80% de su contenido de clorofila después de 27 días de almacenamiento, mientras que las pérdidas para las hojas pre-tratadas con citocinina fueron menores del 15% sobre el mismo periodo de almacenamiento (Tabla 2) . La combinación con el amortiguador únicamente tuvo un efecto despreciable sobre la retención de la clorofila.
A partir de este experimento a una temperatura de remojo de 70°C las conclusiones son similares que a un paso de remojo a temperatura ambiente, y los efectos son más pronunciados:
¦ El tratamiento con citocinina conduce a un contenido más alto de clorofila inmediatamente después del remojo de las hojas;
¦ Sin el tratamiento con citocinina, el remojo a una solución amortiguada a temperatura ambiente en
comparación a un paso de remojo no amortiguado, conduce a una menor pérdida de clorofila;
¦ El tratamiento de citocinina conduce a la reducción de la , velocidad de degradación de la clorofila en comparación al control, donde las plantas no son tratadas con citocinina; cuando son remojadas en soluciones amortiguadas o no amortiguadas.
Resultados a una temperatura de remojo de 90 °C
Tabla 3 Preparación experimental y resultados del paso de calentamiento a una temperatura de remojo de 90°C - Contenido de clorofila a y b en hojas de tabaco (en micromol de clorofila por gramo de hojas en peso fresco)
Código Tratamiento Solución Nivel de clorofila después de xx días dé Rede la pre-cosecha de almacenamiento ducción muestra remojo después
[micromol por gramo de queso fresco]
de 27
0 d 3 d 7 d 10 d 14 d 20 d 27 d días
C 90 Agua Agua 9.5 8 6.5 6 5 3 2 79%
B 90 Agua Amortigu 13 12 11 9.8 9 9.5 8 38% ador pH
7.2
K 90 Citocinina Agua 15 13.5 12.5 11 9.8 8.8 7.5 50%
5 días
B K 90 Citocinina Amortigu 18 17.5 17 16.5. 16 15.5 15 20%;
5 días ador pH
7.2
A 90°C las pérdidas del control son comparables a aquellas del tratamiento a 70°C, pero los valores iniciales
en el día O son algo más bajos. El efecto del amortiguador es comparable a aquel del remojo a 70°C, pero el efecto de la citocinina es menos pronunciado. En combinación con el amortiguador, las pérdidas de clorofila son menores de 20% (Tabla 3) .
A partir de este experimento a una temperatura de remojo de 90°C las conclusiones son similares que a un paso de remojo a 70°C, y los efectos son más pronunciados:
¦ El tratamiento con citocinina conduce a un contenido más alto de clorofila inmediatamente después del remojo de las hojas;
¦ Sin el tratamiento con citocinina, el remojo en una solución amortiguada a temperatura ambiente en comparación a un paso de remojo no amortiguador conduce a una pérdida de clorofila mucho más baja;
¦ El tratamiento con citocinina conduce a la reducción de la velocidad de degradación de la clorofila, en comparación al control en donde las plantas no son tratadas con citocinina; especialmente un efecto pronunciado es observado en la solución amortiguada.
Se hace constar que con relación a esta fecha el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.
Claims (15)
1. Un método para la preparación de un material vegetal, caracterizado porque comprende los pasos: a) el tratamiento de una planta viva con una citocinina; b) la cosecha de la planta o una parte de la planta o un órgano de la planta al menos 12 horas después del paso a) ; c) el calentamiento de la planta o la parte de la planta o el órgano de la planta a una temperatura entre 55°C y 200°C.
2. El método de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la citocinina comprende cinetiha.
3. El método de conformidad con la reivindicación 1 ó 2, caracterizado porque en el paso a) una citocinina en solución acuosa es rociada sobre la planta viva.
4. El método de conformidad con cualquier de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque la concentración de citocinina en la solución acuosa es de 0.01 a 10 milimoles por litro.
5. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque en el paso c) el calentamiento es realizado mediante el freído a una temperatura entre 110°C y 200°C.
6. El método de c conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque en el paso c) el calentamiento es realizado mediante solución acuosa a una temperatura entre 60°C y 150°C.
7. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la solución acuosa en el paso c) tiene un pH de 6.5 a 11.
8. El método de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado porque la solución acuosa en el paso c) tiene un pH de 3 a 6.5.
9. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque la duración del paso c) es de 1 a 10 minutos.
10. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizado porque el órgano es un órgano verde .
11. El método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, caracterizado porque la planta es una planta comestible, preferentemente seleccionada del grupo que consiste de hierbas, brócoli, espinaca, chícharos y pimiento verde, y combinaciones de los mismos.
12. El método para la preparación de una composición alimenticia, caracterizado porque comprende preparar un material vegetal de acuerdo con el método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 en donde adicionalmente el producto del paso b) es puesto en contacto con al menos un ingrediente alimenticio antes del paso c) , y/o en donde el producto del paso c) es puesto en contacto con al menos un ingrediente alimenticio.
13. El método de conformidad con la reivindicación 12, caracterizado porque en el paso c) el calentamiento es realizado en solución acuosa a una temperatura entre 60 °C y 150°C.
14. Un material vegetal, caracterizado porque es obtenible mediante el método de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11.
15. Una sopa, un aderezo, una bebida, un producto para untar o una composición herbal, caracterizada porque comprende el material vegetal de conformidad con la reivindicación 14.
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