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MX2011009490A - Compuestos para el tratamiento de trastornos metabolicos. - Google Patents

Compuestos para el tratamiento de trastornos metabolicos.

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Publication number
MX2011009490A
MX2011009490A MX2011009490A MX2011009490A MX2011009490A MX 2011009490 A MX2011009490 A MX 2011009490A MX 2011009490 A MX2011009490 A MX 2011009490A MX 2011009490 A MX2011009490 A MX 2011009490A MX 2011009490 A MX2011009490 A MX 2011009490A
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MX
Mexico
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preparation
mmol
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
formula
Prior art date
Application number
MX2011009490A
Other languages
English (en)
Inventor
Matthew Colin Thor Fyfe
Martin James Procter
Karen Lesley Schofield
Oscar Barba
Thomas Martin Krulle
Donald Smyth
William Gattrell
Simon Andrew Swain
Revathy Perpetua Jeevaratnam
Colin Peter Sambrook-Smith
David French Stonehouse
Peter Timothy Fry
Alan John William Stewart
Original Assignee
Prosidion Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Prosidion Ltd filed Critical Prosidion Ltd
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Abstract

La presente invención se dirige a compuestos terapéuticos los cuales tienen actividad como agonistas de GPR119 y son útiles para el tratamiento de trastornos metabólicos que incluyen la diabetes tipo II (I) (ver fórmula (I)).

Description

COMPUESTOS PARA EL TRATAMIENTO DE TRASTORNOS METABOLICOS Antecedentes de la Invención La presente invención se dirige a compuestos terapéuticos que son útiles para el tratamiento de trastornos metabólicos que incluyen la diabetes tipo II. En particular, la presente invención se dirige a compuestos los cuales tienen actividad como agonistas del GPR119.
Los fármacos dirigidos a la patofisiología asociada con la diabetes tipo II no dependiente de insulina tienen muchos efectos colaterales potenciales y no atienden adecuadamente la dislipidemia e hiperglicemia en una alta proporción de pacientes. El tratamiento se enfoca frecuentemente en las necesidades individuales del paciente utilizando una dieta, ejercicio, agentes hipoglicémicos e insulina, pero existe una necesidad continua de nuevos agentes antidiabéticos, particularmente aquellos que puedan ser mejor tolerados con menos efectos adversos.
Similarmente , el síndrome metabólico (síndrome X) pone a las personas en un alto riesgo de una enfermedad de las arterias coronarias y se caracteriza por una agrupación de factores de riesgo que incluyen la obesidad central (tejido adiposo excesivo en la región abdominal), intolerancia a la glucosa, alta cantidad de triglicéridos y baja cantidad de colesterol HDL y presión sanguínea alta. La REF: 223323 isquemia de miocardio y la enfermedad microvascular son una morbosidad establecida que está asociada con el síndrome metabólico no tratado o controlado deficientemente.
La obesidad se caracteriza por una masa excesiva de tejido adiposo en relación con el tamaño del cuerpo. Clínicamente, la masa de la grasa del cuerpo se calcula por medio del índice de masa corporal (BMI, por sus siglas en inglés; peso (kg) /altura (m) 2) o la circunferencia de la cintura. Los individuos se consideran obesos cuando el BMI es mayor que 30 y existen consecuencias médicas establecidas por tener sobrepeso. Ha habido una perspectiva médica aceptada durante algún tiempo de que un peso corporal incrementado, especialmente como resultado de grasa abdominal del cuerpo, está asociado con un riesgo incrementado de diabetes, hipertensión, enfermedad cardíaca y otras numerosas complicaciones de la salud, tales como artritis, apoplejía, enfermedad de la vesícula biliar, problemas musculares y respiratorios, dolor de espalda e incluso ciertos cánceres.
Existe una necesidad continua de agentes antidiabéticos novedosos, particularmente aquellos que sean bien tolerados con menos efectos adversos y en particular de agentes que sean imparciales respecto al peso o preferiblemente que causen una pérdida de peso.
El GPR119 (referido previamente como GPR116) es un GPCR identificado como SNORF25 en el documento O00/50562 el cual da a conocer los receptores tanto de humano como de rata, el documento US 6,468,756 también da a conocer el receptor de ratón (números de acceso: AAN95194 (humano), AAN95195 (rata) y A N95196 (ratón)).
En los humanos, el GPR119 es expresado en el páncreas, intestino delgado, colon y tejido adiposo. El perfil de expresión del receptor GPR119 humano indica su utilidad potencial como un objetivo para el tratamiento de la diabetes.
Se ha mostrado que los agonistas del GPR119 estimulan la liberación del GLP-1 del tracto GI . Como consecuencia, los agonistas del GPR119 (1) aumentan la liberación de insulina dependiente de glucosa del páncreas conduciendo a mejoramientos en la tolerancia a la glucosa oral; (2) atenúan el progreso de la enfermedad al incrementar las concentraciones de cAMP en células ß; y (3) inducen la pérdida de peso posiblemente a través de la capacidad del GLP-1 para reducir la captación de alimento.
Las Solicitudes de Patente Internacional WO2005/061489, WO2006/070208 , WO2006/067532 , WO2006/067531, O2007/003960, WO2007/003961, WO2007/003962 , WO2007/003964 , WO2007/116229, O2007/116230 , O2007/138362 , O2008/081204 , O2008/081205, WO2008/081206 , WO2008/081207 , O2008/081208 , O2009/050522 , W02009/050971 , W02010/004343 , WO2010/004344 , O2010/004345 , WO2010/004347 y WO2010/00166 dan a conocer agonistas del receptor GPR119.
La dipeptidil peptidasa IV (DPP-IV) es una serina proteasa omnipresente, no obstante sumamente específica, que escinde los dipéptidos N-terminales de los polipéptidos con L-prolina o L-alanina en la penúltima posición. Los estudios con inhibidores de la DPP-IV muestran que el papel principal de la DPP-IV está en la inactivación del GLP-1. Al extender la duración de acción del GLP-1, la secreción de insulina es estimulada, la liberación de glucagón es inhibida y el vaciado gástrico es desacelerado. Los inhibidores de la DPP-IV se utilizan para el tratamiento de la diabetes tipo II, los ejemplos de inhibidores de la DPP-IV incluyen vildagliptina , sitagliptina, alogliptina y saxagliptina .
La posibilidad de utilizar una combinación de un agonista del GPR119 y un inhibidor de la DPP-IV ha sido sugerida, sin embargo esto requiere la administración de dos productos formulados por separado al paciente o la co-formulación de dos ingredientes activos con los problemas inherentes de conseguir la compatibilidad en las propiedades fisicoquímicas, farmacocinéticas y farmacodinámicas de los dos ingredientes activos. La Solicitud de Patente Internacional WO2009/034388 , publicada después de la fecha de prioridad de la presente solicitud, da a conocer compuestos que tienen una actividad doble como agonistas del GPR119 e inhibidores de la DPP-IV.
Los compuestos de la invención también pueden tener una actividad doble como agonistas del GPR119 e inhibidores de la DPP-IV.
Breve Descripción de la Invención La presente invención se dirige a compuestos los cuales tienen actividad como agonistas del GPR119 y también pueden ser inhibidores de la DPP-IV y son útiles para el tratamiento de trastornos metabólicos que incluyen la diabetes tipo II.
Descripción Detallada de la Invención La presente invención proporciona compuestos de la fórmula (I) y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos : (I) en donde p es 1 o 2 ; cuando p es 2, Z es CHR1 o NR2 ; y cuando p es 1, Z es -N-CH2-Ph en donde el Ph es sustituido opcionalmente por 1 . o 2 grupos seleccionados independientemente de alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, haloalquilo de 1 a 4 átomos de carbono y halo; R1 es -N (CH3) -C (O) -O-alquilo C2-C4 o -N (CH3) -C (O) -0-cicloalquilo C3-C6 en donde el cicloalquilo es sustituido opcionalmente por alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; R2 es -C(0) -O-alquilo C2-C4, -C (O) -O-cicloalquilo C3-C6 en donde el cicloalquilo es sustituido opcionalmente por alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, -C (0) -alquilo C2-C4, C (0) -cicloalquilo C3-C6 en donde el cicloalquilo es sustituido opcionalmente por alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, o R2 donde T junto con -N=C- al cual está unido forma un anillo de heteroarilo de 5 o 6 miembros que contiene opcionalmente hasta 2 heteroátomos adicionales seleccionados de N, 0 y S; cuando T junto con -N=C- al cual está unido forma un anillo de heteroarilo de 5 miembros, R6 es alquilo de 2 a 4 átomos de carbono o cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono sustituido opcionalmente por alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, y cuando T junto con -N=C- al cual está unido forma un anillo de heteroarilo de 6 miembros, R6 es alquilo de 2 a 4 átomos de carbono, fluoro o cloro; Q es -O-, -0-CR8H- o -CR8H-0- ;.
X es fenilo o un grupo heteroarilo de 5 o 6 miembros que contiene uno o más heteroátomos seleccionados de N, O y S; con la condición de que cuando Q sea -0-CR8H-entonces X no es un grupo heteroarilo de 6 miembros; Y es un enlace, -CH2- o -CHMe- ; R3 y R3a se seleccionan independientemente de hidrógeno, fluoro o cloro, o cuando R7 es ciano, R3 puede ser metilo; con la condición de que cuando Y sea un enlace y R3 y R3a se encuentren en la posición orto con respecto al grupo Y, ambos son hidrógeno; R4 es hidrógeno o, cuando Y es -CH2- o -CHMe-, R4 puede ser -CH2- unido a la posición * en el anillo de fenilo para formar un heterociclo que contiene N de 6 miembros fusionado ; R5 es bencilo sustituido opcionalmente por uno o más grupos fluoro, cloro, ciano o metilo, o R5 es: donde r es l o 2 y m es 0, 1 o 2 ; W es CH2 o, cuando r es 2, W puede ser S; cuando W es CH2, R7 es fluoro o ciano, y cuando W es S, R7 es ciano; y R8 es hidrógeno o metilo.
En una modalidad preferida, los compuestos de la invención tienen la estereoquímica definida en la fórmula (la) , estos compuestos demuestran actividad inhibitoria de la (la) En una modalidad de la invención, cada p es independientemente 1 o 2, es decir que forma un anillo de 4, 5 o 6 miembros. En otra modalidad de la invención, cada p es el mismo, es decir que forma un anillo de 4 o 6 miembros. En los compuestos de la invención, p es preferiblemente 2.
Z es preferiblemente NR2.
En una modalidad de la invención, R2 es -C(0)OR4. En una modalidad adicional de la invención, R2 es: Cuando R2 es: los anillos particulares de heteroarilo de 5 o 6 miembros formados por T junto con -N=C- al cual está unido, los cuales se pueden mencionar son oxadiazol y pirimidina.
Q es preferiblemente -0- o -CR8H-0-, más preferiblemente -CR8H-0- .
X es preferiblemente un grupo fenilo unido en la posición meta o para o un anillo heteroaromático de 6 miembros en la posición meta o para que contiene uno o dos átomos de nitrógeno, más preferiblemente un grupo fenilo para-unido o un anillo heteroaromático de 6 miembros para-unido que contiene uno o dos átomos de nitrógeno.
X es preferiblemente fenilo o piridilo.
R3 es preferiblemente fluoro.
R4 es preferiblemente hidrógeno.
R5 es preferiblemente: W es preferiblemente CH2. r es preferiblemente 2.
Mientras que los grupos preferidos para cada variable han sido listados en general anteriormente por separado para cada variable, los compuestos preferidos de esta invención incluyen aquellos en los cuales múltiples o cada variable en la fórmula (I) se seleccionan de los grupos preferidos para cada variable. Por lo tanto, esta invención tiene por objeto incluir todas las combinaciones de los grupos listados preferidos.
Los compuestos representativos de la invención los cuales se pueden mencionar son aquellos proporcionados en los Ejemplos como la base libre o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
El peso molecular de los compuestos de la invención es preferiblemente menor que 800, más preferiblemente menor que 600.
Como se utiliza en este documento, a menos que se establezca de otra manera, "alquilo" significa cadenas de carbono las cuales pueden ser lineales o ramificadas. Los ejemplos de grupos alquilo incluyen etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec- y tere-butilo.
El término anillos de "heteroarilo" significa anillos de heteroarilo que contienen N de 5 o 6 miembros que contienen hasta 2 heteroátomos adicionales seleccionados de N, O y S. Los ejemplos de estos anillos de heteroarilo son pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, triazolilo, oxadiazolilo, tiadiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo y triazinilo.
Los compuestos descritos en este documento pueden contener uno o más centros asimétricos y de esta manera pueden dar origen a diastereómeros e isómeros ópticos. La presente invención incluye todos estos diastereómeros posibles así como también sus mezclas racémicas, sus enantiómeros resueltos sustancialmente puros, todos los posibles isómeros geométricos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. La presente invención incluye todos los estereoisómeros de los compuestos de la invención y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Además, las mezclas de estereoisómeros así como también los estereoisómeros específicos, aislados también están incluidos. Durante el curso de los procedimientos sintéticos que se utilizan para preparar estos compuestos, o en el uso de procedimientos de racemización o epimerización conocidos para aquellas personas expertas en el campo, los productos de estos procedimientos pueden ser una mezcla de estereoisómeros .
Cuando existe un tautómerq del compuesto de la invención, la presente invención incluye cualquier tautómero posible y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos y mezclas de los mismos, excepto donde se defina o establezca específicamente de otra manera.
Cuando el compuesto de la invención y las sales farmacéuticamente aceptables del mismo existen en la forma de solvatos o formas polimórficas , la presente invención incluye cualquier solvato y forma polimórfica posible. Un tipo de solvente que forma el solvato no está limitado particularmente siempre y cuando el solvente sea farmacológicamente aceptable. Por ejemplo, se puede utilizar agua, etanol, propanol, acetona o similares.
El término "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a sales preparadas a partir de bases o ácidos no tóxicos, farmacéuticamente aceptables. Cuando el compuesto de la presente invención es ácido, su sal correspondiente se puede preparar convenientemente a partir de bases no tóxicas, farmacéuticamente aceptables, que incluyen bases inorgánicas y bases orgánicas. Las sales derivadas de estas bases inorgánicas incluyen sales de aluminio, amonio, calcio, cobre (cúpricas y cuprosas) , férricas, ferrosas, de litio, magnesio, potasio, sodio, zinc y similares. Se prefiere particularmente las sales de amonio, calcio, magnesio, potasio y sodio. Las sales derivadas de bases no tóxicas, orgánicas, farmacéuticamente aceptables incluyen sales de aminas primarias, secundarias y terciarias, así como también aminas cíclicas y aminas sustituidas tales como aminas sustituidas de origen natural y sintetizadas. Otras bases no tóxicas, orgánicas, farmacéuticamente aceptables a partir de las cuales se pueden formar las sales incluyen arginina, betaína, cafeína, colina, N' , N' -dibenciletilendiamina, dietilamina, 2 -dietilaminoetanol , 2 -dimetilaminoetanol , etanolamina, etilendiamina , N-etilmorfolina, N-etilpiperidina , glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, resinas de poliamina, procaína, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina , trometamina y similares.
Cuando el compuesto de la invención es básico, su sal correspondiente se puede preparar convenientemente a partir de ácidos no tóxicos farmacéuticamente aceptables, que incluyen ácidos inorgánicos y orgánicos. Estos ácidos incluyen, por ejemplo, ácido acético, bencensulfónico, benzoico, canforsulfónico, cítrico, etanosulfónico , fumárico, glucónico, glutámico, bromhídrico, clorhídrico, isetiónico, láctico, maleico, málico, mandélico, metanosulfónico, múcico, nítrico, pamoico, pantoténico, fosfórico, succínico, sulfúrico, tartárico, p-toluensulfónico y similares.
Puesto que los compuestos de la invención están proyectados para el uso farmacéutico, se . proporcionan preferiblemente en una forma sustancialmente pura, por ejemplo por lo menos 60% puros, más adecuadamente por lo menos 75% puros, especialmente por lo menos 98% puros (los % están en una base en peso por peso) .
Los compuestos de la fórmula (I) se pueden preparar como se describe posteriormente, en donde R1, R2, R3, R3a, R5, R6, R7, Ra, X, Y, W, Q, Z, m, p y r son como se definiera para la fórmula (I) . PG es un grupo protector, Hal es halógeno y Tf es triflato.
Los compuestos de la fórmula (I) donde p es 2, Q es -0- o -CR8H-0-, X es 2-piridilo o 2-pirimidilo y R2 no es -C (O) -0-alquilo C2-C4 pueden ser sintetizados como se resume en el Esquema de Reacción 1. Los compuestos de la fórmula (IV) pueden ser sintetizados por medio de la reacción del triflato de la fórmula (II) con un boronato de la fórmula (III) bajo, por ejemplo, condiciones de Suzuki utilizando [1,1-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio en un solvente adecuado tal como DMF/agua a 80°C. Los compuestos de la fórmula (VI) se pueden preparar por medio de la reacción del haluro de arilo de la fórmula (IV) con alcoholes de la fórmula (V) bajo condiciones estándar, tal como KOfcBu en un solvente adecuado tal como THF a 150°C en un reactor de microondas. La desprotección de la funcionalidad de amina, utilizando condiciones estándar bien conocidas para aquellas personas de experiencia en el campo, proporciona los compuestqs de la fórmula (I) como se describieran anteriormente.
Esquema de Reacción 1 ? III IV I VI Los compuestos de la fórmula (I) donde p es 2, Q es -0- o -CR8H-0-, X es 2-piridilo o 2-pirimidilo y R2 es -C(0)-0-alquilo C2-C4 pueden ser sintetizados como se resume en el Esquema de Reacción 2. El bromuro de arilo de la fórmula (VIII) se puede preparar por medio de la reacción del alcohol de la fórmula (V) con cloruro de arilo de la fórmula (VII) en presencia de una base adecuada, tal como NaH en un solvente adecuado tal como THF a 60°C. Los boronatos de arilo de la fórmula (IX) se pueden preparar por medio de la reacción del bromuro de arilo de la fórmula (VIII) y bis (pinacolato) diboro en presencia de un catalizador adecuado, tal como [1,1-bis (difenilfosfino) ferrocen] dicloropaladio en un solvente adecuado tal como 1,4-dioxano a 110°C. Los compuestos de la fórmula (VI) se pueden preparar por medio de la reacción del triflato de la fórmula (II) con un boronato de la fórmula (IX) bajo, por ejemplo, condiciones de Suzuki utilizando [1,1-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio en un solvente adecuado tal como DMF/agua a 80°C. La desprotección de la funcionalidad de amina, utilizando condiciones estándar bien conocidas para aquellas personas de experiencia en el campo, proporciona los compuestos de la fórmula (I) como se describieran anteriormente.
Esquema de Reacción 2 V VII VIH VI IX II I Los compuestos de la fórmula (I) donde p es 2, Q es -0- o -CR8H-0- y X es fenilo pueden ser sintetizados como se resume en el Esquema de Reacción 3. El haluro de arilo de la fórmula (XI) se puede preparar por medio de la reacción del alcohol de la fórmula (V) y fenol (X) bajo, por ejemplo, condiciones de Mitsunobu utilizando dipiperidido azodicarboxí 1 ico y tribut i 1 fos f ina . Los boronatos de arilo de la fórmula (XII) se pueden preparar por medio de la reacción del haluro de arilo de la fórmula (XI) y bis (pinacolato) diboro en presencia de un catalizador adecuado, tal como [1,1-bi s ( di f eni 1 fos f ino ) ferroceno ] - di c loropaladio en un solvente adecuado tal como 1 , 4-dioxano a 110°C. Los compuestos de la fórmula (VI) se pueden preparar por medio de la reacción de triflato de la fórmula (II) con un boronato de la fórmula (XII) bajo, por ejemplo, condiciones de Suzuki utilizando [1,1-bi s ( di f eni 1 fos f ino ) ferroceno ] di c loropal adió en un solvente adecuado tal como DMF/acjua a 80 ° C en un reactor de microondas. La desprotección de la funcionalidad de amina, utilizando condiciones estándar bien conocidas para aquellas personas de experiencia en el campo, proporciona los compuestos de la fórmula (I) como se describieran anteriormente.
Esquema de Reacción 3 I Los compuestos de la fórmula (I) donde p es 2, Q es -O- o -C 8H-0- y X es 5-piridilo o 5- pirimidilo y pueden ser sintetizados como se resume en el Esquema de Reacción 4. El bromuro de arilo de la fórmula (VIII) se puede preparar por medio de la reacción del alcohol de la fórmula (V) con bromuro de arilo de la fórmula (XIII) bajo, por ejemplo, condiciones de Mitsunobu utilizando dipiperidido azodicarboxí lico y tributilf osf ina . Los compuestos de la fórmula (VI) se pueden preparar por medio de la reacción del bromuro de arilo de la fórmula (VIII) con un boronato de la fórmula (XIV) bajo, por ejemplo, condiciones de Suzuki utilizando [1,1-b i s ( di f eni 1 f os f ino ) f e rroceno ] di c loropa 1 adi o en un solvente adecuado tal como DMF/agua a 80°C en un reactor de microondas. La desprotección de la funcionalidad de amina, utilizando condiciones estándar bien conocidas para aquellas personas de experiencia en el campo, proporciona los compuestos de la fórmula (I) como se describieran anteriormente.
Esquema de Reacción 4 I VI Los compuestos de la fórmula (I) donde p es 2, Q es -0-CR8H- y X es fenilo pueden ser sintetizados como se resume en el Esquema de Reacción 5. Los mesilatos de la fórmula (XVI) se pueden preparar por medio de la reacción del alcohol de la fórmula (XV) con cloruro de metanosul foni lo en presencia de una base adecuada, tal como t riet i lamina , en un solvente adecuado, tal como DCM. Los bromuros de arilo de la fórmula (XI) se pueden preparar por medio de la reacción de los mesilatos de la fórmula (XVI) con alcoholes de la fórmula (XVII) en presencia de una base adecuada, tal como NaH, en un solvente adecuado, tal como THF . Los boronatos de arilo de la fórmula (XII) se pueden preparar por medio de la reacción del haluro de arilo de la fórmula (XI) y bis (pinacolato) diboro en presencia de un catalizador adecuado, tal como [1,1-bis (difenilfosf ino) ferroceno] dicloropaladio en un solvente adecuado tal como 1,4-dioxano a 110°C. Los compuestos de la fórmula (VI) se pueden preparar por medio de la reacción del triflato de la fórmula (II) con un boronato de la fórmula (XII) bajo, por ejemplo, condiciones de Suzuki utilizando [1,1-bi s ( di f eni 1 fos f ino ) fe r oceno ] di c 1oropa1adio en un solvente adecuado tal como DMF/agua a 80°C en un reactor de microondas. La desprotección de la funcionalidad de amina, utilizando condiciones estándar bien conocidas para aquellas personas de experiencia en el campo, proporciona los compuestos de la fórmula (I) como se describieran anteriormente.
Esquema de Reacción 5 i Los compuestos de la fórmula (I) donde p es 1 y X es 2-piridilo o 2-pirimidilo pueden ser sintetizados como se resume en el Esquema de Reacción 6. El bromuro de arilo de la fórmula (VIII) se puede preparar por medio de la reacción del alcohol de la fórmula (V) con bromuro de arilo de la fórmula (VII) en presencia de una base adecuada, tal como NaH, en un solvente adecuado, tal como DMF a 60°C. Los compuestos de la fórmula (VI) se pueden preparar por medio de la reacción del bromuro de arilo de la fórmula (VIII) con un boronato de la fórmula (XIV) bajo, por ejemplo, condiciones de Suzuki utilizando [1 , 1 -bis (difenilfosfino) ferroceno] -dicloropaladio en un solvente adecuado tal como DMF/agua a 80 °C en un reactor de microondas . La desprotección de la funcionalidad de amina, utilizando condiciones estándar bien conocidas para aquellas personas de experiencia en el campo, proporciona los compuestos de la fórmula (I) como se describieran anteriormente .
Esquema de Reacción 6 VII VIII XIV I VI Los compuestos de la fórmula (I) donde p es 1 y X es fenilo, 5-piridilo o 5-pirimidilo pueden ser sintetizados como se resume en el Esquema de Reacción 7. El bromuro de arilo de la fórmula (VIII) se puede preparar por medio de la reacción del alcohol de la fórmula (V) con bromuro de arilo de la fórmula (XIII) bajo, por ejemplo, condiciones de Mitsunobu utilizando dipiperidido azodicarboxílico y tributilfosfina . Los compuestos de la fórmula (VI) se pueden preparar por medio de la reacción del bromuro de arilo de la fórmula (VIII) con un boronato de la fórmula (XIV) bajo, por ejemplo, condiciones de Suzuki utilizando [1,1-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio en un solvente adecuado tal como DMF/agua a 80 °C en un reactor de microondas. La desprotección de la funcionalidad de amina, utilizando condiciones estándar bien conocidas para aquellas personas de experiencia en el campo, proporciona los compuestos de la fórmula (I) como se describieran anteriormente .
Esquema de Reacción 7 XIII VIH XIV I VI Los compuestos de la fórmula (I) donde p es 2, Q es -0-CR8H- y X es oxadiazol-3-ilo pueden ser sintetizados como se resume en el Esquema de Reacción 8. El nitrilo de la fórmula (XVIII) se puede preparar por medio de la reacción del triflato de la fórmula (II) con ZnCN en presencia de un catalizador adecuado, tal como [1,1-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio en un solvente adecuado tal como DMF a 70°C. La amidoxima de la fórmula (XIX) se puede preparar por medio de la reacción del nitrilo de la fórmula (XVIII) y clorhidrato de hidroxilamina en presencia de una base adecuada tal como K2C03 en un solvente adecuado tal como etanol/agua a 78°C. Los compuestos de la fórmula (VI) se pueden preparar por medio de la reacción de amidoxima de la fórmula (XIX) con el ácido de la fórmula (XX) bajo condiciones estándar, tal como cloroformiato de isobutilo y trietilamina, en un solvente adecuado tal como D F. La desprotección de la funcionalidad de amina, utilizando condiciones estándar bien conocidas para aquellas personas de experiencia en el campo, proporciona los compuestos de la fórmula (I) como se describiera anteriormente .
Esquema de Reacción 8 II XVIII XIX XX Los compuestos de la fórmula (I) donde p es 2, Q es -0-CR8H- y X es oxadiazol -5 - ilo se pueden preparar como se resume en el Esquema de Reacción 9. El ácido de la fórmula (XXI) se puede preparar por medio de la reacción del triflato de la fórmula (II) con monóxido de carbono en presencia de un catalizador adecuado, tal como acetato de paladio en un solvente adecuado, tal como DMF a 80 °C. Los compuestos de la fórmula (VI) se pueden preparar por medio de la reacción del ácido de la fórmula (XXI) con amidoxima de la fórmula (XXII) bajo condiciones estándar, tal como cloroformiato de isobutilo y trietilamina , en un solvente adecuado tal como DMF. La desprotección de la funcionalidad de amina, utilizando condiciones estándar bien conocidas para aquellas personas de experiencia en el campo, proporciona los compuestos de la fórmula (I) como se describiera anteriormente .
Esquema de Reacción 9 Los compuestos de la fórmula (I) donde p es 2, Q es -O-CR H- y X es tiazol-2-ilo se pueden preparar como se resume en el Esquema de Reacción 10. La amida de la fórmula (XXIII) se puede preparar por medio de la reacción del nitrilo de la fórmula (XVIII) con peróxido de hidrógeno en un solvente adecuado tal como agua/DMSO. La tioamida de la fórmula (XXIV) se puede preparar por medio de la reacción de la amida de la fórmula (XXIII) bajo condiciones estándar, por ejemplo utilizando un reactivo de Lawesson en un solvente adecuado tal como tolueno a reflujo. Los compuestos de la fórmula (VI) se pueden preparar por medio de la reacción de la tioamida de la fórmula (XXIV) con el cloruro de la fórmula (XXV) en presencia de una base adecuada, tal como K2C03 en un solvente adecuado tal como acetona. La desprotección de la funcionalidad de amina, utilizando condiciones estándar bien conocidas para aquellas personas de experiencia en el campo, proporciona los compuestos de la fórmula (I) como se describiera anteriormente.
Esquema de Reacción 10 XVIII XXIII XXIV XXV VI Los compuestos de la fórmula (I) donde p es 2, Q es -0-CR8H- y X es tiazol-4-ilo se pueden preparar como se resume en el Esquema de Reacción 11. Las cetonas de la fórmula (XXVI) se pueden preparar por medio de la reacción del triflato de la fórmula (II) con éter vini lbut í 1 i co en presencia de un catalizador adecuado, tal como acetato de paladio, en un solvente adecuado, tal como DMF a 80°C. Seguido por el tratamiento final con una solución acuosa de HCl a temperatura ambiente. Las bromocetonas de la fórmula (XXVII) se pueden preparar por medio de la reacción de las cetonas de la fórmula (XXVI) con tribromuro de t r ime t i 1 f eni lamonio en un solvente adecuado, tal como THF . Los compuestos de la fórmula (VI) se pueden preparar por medio de la reacción de las bromocetonas de la fórmula (XXVII) con tioamida de la fórmula (XXVIII) bajo condiciones de Hantzsch estándar, por ejemplo etanol a temperatura ambiente. La desprotección de la funcionalidad de amina, utilizando condiciones estándar bien conocidas para aquellas personas de experiencia en el campo, proporciona los compuestos de la fórmula (I) como se describiera anteriormente. quema de Reacción ? XXVI XXVII XXVIII Los compuestos de la fórmula (XIV) se pueden preparar como se resume en el Esquema de Reacción 12. Los compuestos de la fórmula (XIV) se pueden preparar por medio de la reacción del triflato de la fórmula (II) con bis (pinacolato) diboro en presencia de un catalizador adecuado, tal como [1,1-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio en un solvente adecuado tal como 1,4-dioxano a 110°C.
Esquema de Reacción 12 II XIV Los compuestos de la fórmula (II) donde R5 es bencilo se pueden preparar como se resume en el Esquema de Reacción 13. Los aldehidos de la fórmula (XXX) se pueden preparar por medio de la conversión de los fenoles de la fórmula (XXIX) bajo condiciones estándar, por ejemplo, sulfonimida de N-feniltrifluorometano en un solvente adecuado, tal como acetonitrilo a temperatura ambiente. La amina de la fórmula (XXXI) se puede preparar por medio de la reacción del aldehido de la fórmula (XXX) con LiHMDS, seguido por la reacción de la imina resultante con un reactivo de Grignard adecuado. La protección del grupo amina resultante con, por ejemplo, di - terc-butildicarbonato , proporciona los compuestos de la fórmula (II) .
Esquema de Reacción 13 II Los compuestos de la fórmula (II) donde R5 es amida, W es CH2 o S, m es 1 y R7 es ciano se pueden preparar como se resume en el Esquema de Reacción 14. Las amidas de la fórmula (XXXIII) se pueden preparar por medio de la reacción de los ácidos de la fórmula (XXXII) con una amina apropiada bajo condiciones de acoplamiento de amida estándar, por ejemplo, HOBT y EDCI, en un solvente adecuado, tal como DCM. Los triflatos de la fórmula (XXXIV) se pueden preparar por medio de la conversión de las amidas de la fórmula (XXXIII) bajo condiciones estándar, por ejemplo, sulfonimida de N-feniltrifluorometano en un solvente adecuado, tal como acetonitrilo a temperatura ambiente. Los compuestos de la fórmula (II) , como se .describiera anteriormente, se pueden preparar por medio de la reacción de los compuestos de la fórmula (XXXIV) bajo condiciones de deshidratación estándar, tal como anhídrido trifluoroacético y piridina en un solvente adecuado, tal como THF .
Esquema de Reacción 14 II Los compuestos de la fórmula (II) donde R5 es amida y R7 no es ciano se pueden preparar como se resume en el Esquema de Reacción 15. Las amidas de la fórmula (XXXV) se pueden preparar por medio de la reacción de los ácidos de la fórmula (XXXII) con una amina apropiada bajo condiciones de acoplamiento de amida estándar, por ejemplo, HOBT y EDCI en un solvente adecuado, tal como DCM. Los triflatos de la fórmula (II) se pueden preparar por medio de la conversión de las amidas de la fórmula (XXXIII) bajo condiciones estándar, por ejemplo, sulfonimida de N-feniltrifluorometano en un solvente adecuado, tal como acetonitrilo a temperatura ambiente.
Esquema de Reacción 15 XXXII XXXV ? Específicamente, los compuestos quirales de la fórmula (XXXII) donde R3 es flúor, R3a es hidrógeno, Y es CHMe y R4 es hidrógeno se pueden preparar como se resume en el Esquema de Reacción 16. El compuesto de la fórmula (XXXVII) se puede sintetizar por medio de la reacción del 4-benciloxi-2-fluorobenzaldehído (XXXVI) con (trifenilfosforaniliden) -acetato de metilo en un solvente adecuado, tal como THF, bajo condiciones de reflujo. La saponificación, seguida por la activación del ácido carboxílico resultante con, por ejemplo, cloruro de pivaloilo, seguida por la reacción con (£)-(-) -4-fenil-2-oxazolidinona la cual ha sido desprotonada con una base adecuada, tal como n-butil-litio, proporciona el compuesto de la fórmula (XXXIX) . La reacción con sulfuro de dimetilo, bromuro de meti1-magnesio y bromuro de cobre (I) -sulfuro de dimetilo en un solvente adecuado, tal como THF, produce el compuesto de la fórmula (XL) . La reacción subsecuente con dibutilborotriflato y N-bromosuccinimida, seguida por la reacción con azida de N, N, N' , N' -tetrametilguanidinio, proporciona el compuesto de la fórmula (XLII) . La remoción del grupo feniloxazolidin-2-ona, con peróxido de hidrógeno e hidróxido de sodio, proporciona el compuesto de la fórmula (XLIII) . La reducción, bajo condiciones estándar, seguida por la protección del grupo amina resultante con, por ejemplo, di- terc-butildicarbonato, proporciona los compuestos de la fórmula (XXXII) como se describiera anteriormente .
Esquema de Reacción 16 XXXII Específicamente, los compuestos de la fórmula (XXXII) donde R3 es flúor, R3a es hidrógeno, Y es CH2 y R4 es hidrógeno se pueden preparar como se resume en el Esquema de Reacción 17. Los compuestos de la fórmula (XLVI) se pueden preparar por medio de la reacción de 2-fluoro-4-metoxibenzaldehído (XLV) con acetato de sodio y ácido acetilaminoacético a 120°C en anhídrido acético. La reducción del ácido alquenoico resultante (XLVI), bajo condiciones estándar, proporciona un compuesto racémico de la fórmula (XLVII) . La reducción del ácido alquenoico (XLVI) con un catalizador quiral, tal como [Rh (cod) (PP) ] OTf y (S,S)-Et-Duphos, proporciona un compuesto de la fórmula (XLVII) en un exceso enantiomérico alto. La remoción del grupo acetilo, bajo condiciones ácidas estándar, seguido por la protección del grupo amina con, por ejemplo, di- erc-butildicarbonato proporciona los compuestos de la fórmula (XXXII) como se describiera anteriormente .
Esquema de Reacción 17 Los compuestos de la fórmula (XXV) donde p es 2 y Q es -0-CR8H- se pueden preparar como se resume en el Esquema de Reacción 18. Los alcoholes de la fórmula (XVII) se pueden tratar con 1 , 3 - di c loroacetona en presencia de una base adecuada, tal como 2C03, en un solvente adecuado tal como DMF para proporcionar los compuestos de la fórmula (XXV) como se describiera anteriormente .
Esquema de Reacción 18 „<CH2) -i -<C XVII xxv Los compuestos de la fórmula (XXVIII) donde p es 2 y Q es -0-CR8H- se pueden preparar como se resume en el Esquema de Reacción 19. Las amidas de la fórmula (XLIX) se pueden preparar por medio de la reacción de los ácidos de la fórmula (XX) con una amina apropiada bajo condiciones de acoplamiento de amida estándar, por ejemplo, HOBT y EDCI , en un solvente adecuado, tal como DCM. La tioamida de la fórmula (XXVIII) se puede preparar por medio de la reacción de la amida de la fórmula (XLIX) bajo condiciones estándar, por ejemplo utilizando un reactivo de Lawesson en un solvente adecuado tal como tolueno a reflujo.
Esquema de Reacción 19 XX XLIX XXVIII Otros compuestos de la fórmula (I) se pueden preparar por medio de métodos análogos a aquellos descritos anteriormente o por medio de métodos conocidos per se. Los detalles adicionales para la preparación de los compuestos de la fórmula (I) se encuentran en los ejemplos.
Los compuestos de la fórmula (I) se puede preparar individualmente o como colecciones de compuestos que comprenden por lo menos 2, por ejemplo de 5 a 1,000 compuestos y más preferiblemente de 10 a 100 compuestos de la fórmula (I) . Las colecciones de compuestos se pueden preparar por medio de un planteamiento combinatorio de "división y mezclado" o por medio de múltiples síntesis paralelas utilizando una química en fase ya sea de solución o sólida, utilizando procedimientos conocidos para aquellas personas expertas en el campo.
Durante la síntesis de los compuestos de la fórmula (I), los grupos funcionales lábiles en los compuestos intermedios, por ejemplo grupos hidroxi, carboxi y amino, se pueden proteger. Los grupos protectores se pueden retirar en cualquier etapa en la síntesis de los compuestos de la fórmula (I) o pueden estar presentes en el compuesto final de la fórmula (I) . Un planteamiento comprensivo de las maneras en las cuales se puede proteger varios grupos funcionales lábiles y los métodos para escindir los derivados protegidos, resultantes se proporciona en, por ejemplo, Protective Groups in Organic Chemistry, T. . Greene and P.G.M. uts,. (1991) iley-Interscience, Nueva York, 2a edición.
Los procesos para la producción de los compuestos de la fórmula (I) y compuestos intermedios para los mismos como se describen anteriormente también están incluidos como aspectos adicionales de la presente invención.
Cualquier compuesto intermedio novedoso como se define en los Esquemas de Reacción anteriores o en los Ejemplos, también está incluido dentro del alcance de la invención. Por lo tanto, de acuerdo con un aspecto adicional de la invención, se proporciona un compuesto de cualquiera de las fórmulas II, IV, VI, XIV, XVIII, XIX, XXI, XXIII, XXIV, XXIV, XXVI, XXVII, XXXI, XXXIV como se definiera anteriormente. Los grupos preferidos para las variables citadas anteriormente en relación con los compuestos de la fórmula (I) también tienen aplicación para los compuestos intermedios .
Como se indicara anteriormente, los compuestos de la invención son útiles como agonistas del GPR119, por ejemplo para el tratamiento y/o profilaxis de la diabetes. Para este uso, los compuestos de la invención se administrarán generalmente en la forma de una composición farmacéutica .
Los compuestos de la invención también pueden ser útiles como agonistas del GPR119/inhibidores de la DPP-IV dobles, por ejemplo para el tratamiento y/o profilaxis de . la diabetes. Para este uso, los compuestos de la invención se administrarán generalmente en la forma de una composición farmacéutica.
La invención también proporciona un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para el uso como una composición farmacéutica.
La invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención, en combinación con un portador farmacéuticamente aceptable.
Preferiblemente, la composición está comprendida de un portador farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente efectiva, no tóxica de un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
Por otra parte, la invención también proporciona una composición farmacéutica para el tratamiento de una enfermedad al modular el GPR119 y opcionalmente la DPP-IV, dando por resultado el tratamiento profiláctico o terapéutico de la diabetes, que comprende un portador farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente efectiva, no tóxica de un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
Las composiciones farmacéuticas pueden comprender opcionalmente otros ingredientes terapéuticos o adyuvantes. Las composiciones incluyen composiciones adecuadas para la administración oral, rectal, tópica y parenteral (inclusive subcutánea, intramuscular e intravenosa) , aunque la vía más adecuada en cualquier caso determinado dependerá del hospedante particular y el carácter y gravedad de las condiciones para las cuales se está administrando el ingrediente activo. Las composiciones farmacéuticas se pueden presentar convenientemente en una forma de dosificación unitaria y se pueden preparar por medio de cualquiera de los métodos bien conocidos en el campo de la farmacia.
En la práctica, los compuestos de la invención, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se pueden combinar como el ingrediente activo en una mezcla íntima con un portador farmacéutico de acuerdo con las técnicas de combinación farmacéuticas, convencionales. El portador puede tomar una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración, por ejemplo oral o parenteral (inclusive intravenosa) .
De esta manera, las composiciones farmacéuticas se pueden presentar como unidades discretas que son adecuadas para la administración oral tales como cápsulas, sellos o tabletas cada uno que contiene una cantidad predeterminada del ingrediente activo. Además, las composiciones se pueden presentar como un polvo, como gránulos, como una solución, como una suspensión en un líquido acuoso, como un líquido no acuoso, como una emulsión de aceite en agua o como una emulsión líquida de agua en aceite. Además de las formas de dosificación comunes expuestas anteriormente, el compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, también se puede administrar por medios de liberación contralada y/o dispositivos de suministro. Las composiciones se pueden preparar por medio de cualquiera de los métodos de farmacia. En general, estos métodos incluyen un paso que consiste en poner en asociación el ingrediente activo con el portador que constituye uno o más ingredientes necesarios. En general, las composiciones se preparan al mezclar de manera uniforme e íntima el ingrediente activo con portadores líquidos o portadores sólidos finamente divididos o ambos. Luego, al producto se le puede dar una forma conveniente en la presentación deseada.
Los compuestos de la invención, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, también se pueden incluir en composiciones farmacéuticas en combinación con uno o más de otros compuestos terapéuticamente activos.
El portador farmacéutico empleado puede ser, por ejemplo, un sólido, un líquido o un gas. Los ejemplos de portadores sólidos incluyen lactosa, alabastro, sacarosa, talco, gelatina, agar, pectina, goma arábiga, estearato de magnesio y ácido esteárico. Los ejemplos de portadores líquidos son jarabe de azúcar, aceite de cacahuate, aceite de olivo y agua. Los ejemplos de portadores gaseosos incluyen dióxido de carbono y nitrógeno.
En la preparación de las composiciones para la forma de dosificación oral, se puede emplear cualquier medio farmacéutico, conveniente. Por ejemplo, el agua, glicoles, aceites, alcoholes, agentes saborizantes , conservadores, agentes colorantes y similares se pueden utilizar para formar preparaciones líquidas, orales tales como suspensiones, elixires y soluciones; mientras que los portadores tales como almidones, azúcares, celulosa microcristalina, diluyentes, agentes de granulación, lubricantes, sustancias aglutinantes, agentes de desintegración y similares se pueden utilizar para formar preparaciones sólidas, orales tales como polvos, cápsulas y tabletas. Debido a su facilidad de administración, las tabletas y las cápsulas son las unidades de dosificación oral preferidas por lo cual se emplean portadores farmacéuticos, sólidos. Opcionalmente , las tabletas pueden ser revestidas por medio de técnicas estándar acuosas o no acuosas .
Una tableta que contiene la composición de esta invención se puede preparar por medio de la compresión o el moldeo, opcionalmente con uno o más ingredientes o adyuvantes secundarios . Las tabletas comprimidas se pueden preparar al comprimir, en una máquina adecuada, el ingrediente activo en una forma de flujo libre tal como polvo o gránulos, mezclado opcionalmente con una sustancia aglutinante, lubricante, diluyente inerte, agente tensioactivo o agente de dispersión. Las tabletas moldeadas se pueden hacer al moldear en una máquina adecuada una mezcla del compuesto en polvo humedecido con un diluyente líquido, inerte. Cada tableta contiene preferiblemente de aproximadamente 0.05 mg a aproximadamente 5 g del ingrediente activo y cada sello o cápsula contiene preferiblemente de aproximadamente 0.05 mg a aproximadamente 5 g del ingrediente activo.
Por ejemplo, una formulación proyectada para la administración oral a humanos puede contener de aproximadamente 0.5 mg a aproximadamente 5 g de agente activo, combinado con una cantidad apropiada y conveniente de un material portador la cual puede variar de aproximadamente 5 a aproximadamente 95 por ciento de la composición total. Las formas de dosificación unitarias contendrán generalmente entre aproximadamente 1 mg y aproximadamente 2 g del ingrediente activo, típicamente 25 mg, 50 mg, 100 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 800 mg o 1000 mg.
Las composiciones farmacéuticas de la presente invención que son adecuadas para la administración parenteral se pueden preparar como soluciones o suspensiones de los compuestos activos en agua. Se puede incluir un tensioactivo adecuado tal como, por ejemplo, hidroxipropilcelulosa . Las dispersiones también se pueden preparar en glicerol, polietilenglicoles líquidos y mezclas de los mismos en aceites. Además, se puede incluir un conservador para impedir el crecimiento perjudicial de microorganismos.
Las composiciones farmacéuticas de la presente invención que son adecuadas para el uso inyectable incluyen soluciones o dispersiones acuosas, estériles. Adicionalmente, las composiciones pueden estar en la forma de polvos estériles para la preparación extemporánea de estas soluciones o dispersiones inyectables, estériles. En todos los casos, la forma inyectable, final debe ser estéril y debe ser fluida realmente para una fácil aplicación con jeringa. Las composiciones farmacéuticas deben ser estables bajo las condiciones de manufactura y almacenamiento; de esta manera, deben conservarse preferiblemente contra la acción contaminante de microorganismos tales como bacterias y hongos.. El portador puede ser un solvente o medio de dispersión que contiene, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo glicerol, propilenglicol y polielilenglicol líquido) , aceites vegetales y mezclas adecuadas de los mismos .
Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden estar en una forma que es adecuada para el uso tópico tal como, por ejemplo, un aerosol, crema, ungüento, loción, polvo muy fino o similares. Además, las composiciones pueden estar en una forma adecuada para el uso en dispositivos transdérmicos . Estas formulaciones se pueden preparar, utilizando un compuesto de la invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, por vía de métodos de procesamiento convencionales. Como un ejemplo, una crema o ungüento se prepara al mezclar un material hidrófilo y agua, junto con de aproximadamente 5% en peso a aproximadamente 10% en peso del compuesto, para producir una crema o ungüento que tiene una consistencia deseada.
Las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden estar en una forma que es adecuada para la administración rectal en donde el portador es un sólido. Es preferible que la mezcla forme supositorios de dosis unitaria. Los portadores adecuados incluyen manteca de cacao y otros materiales utilizados comúnmente en el campo. Los supositorios se pueden formar convenientemente al mezclar primero la . composición con el(los) portador(es) ablandado(s) o fundido (s) seguido por el enfriamiento y la conformación en moldes .
Además de los ingredientes portadores mencionados anteriormente, las formulaciones farmacéuticas descritas anteriormente pueden incluir, como sea apropiado, uno o más ingredientes portadores, adicionales tales como diluyentes, amortiguadores, agentes saborizantes , sustancias aglutinantes, agentes tensioactivos , espesadores, lubricantes, conservadores (inclusive anti -oxidantes) y similares. Adicionalmente , se pueden incluir otros adyuvantes para que la formulación se vuelva isotónica con la sangre del receptor proyectado. Las composiciones que contienen un compuesto de la invención, o sales farmacéuticamente aceptables del mismo, también se pueden preparar en una forma concentrada en polvo o líquida.
Generalmente, los niveles de dosificación en el orden de 0.01 mg/kg a aproximadamente 150 mg/kg de peso corporal al día son útiles en el tratamiento de las condiciones indicadas anteriormente, o alternativamente de aproximadamente 0.5 mg a aproximadamente 7 g por paciente al día. Por ejemplo, la obesidad puede ser tratada de manera efectiva por medio de la administración de aproximadamente 0.01 a 50 mg del compuesto por kilogramo de peso corporal al día, o alternativamente de aproximadamente 0.5 mg a aproximadamente 3.5 g por paciente al día.
Se entiende, sin embargo, que el nivel de dosis específico para cualquier paciente particular dependerá de una variedad de factores que incluyen la edad, peso corporal, salud general, sexo, dieta, tiempo de administración, vía de administración, velocidad de excreción, combinación de fármacos y la gravedad de la enfermedad particular que se somete a terapia.
Los compuestos de la invención se pueden utilizar en el tratamiento de enfermedades o condiciones en las cuales el GPR119 y opcionalmente la DPP-IV desempeñan un papel principal .
De esta manera, la invención también proporciona un método para el tratamiento de una enfermedad o condición en la cual el GPR119 y opcionalmente la DPP-IV desempeñan un papel principal que comprende un paso que consiste en administrar a un sujeto necesitado del mismo una cantidad efectiva de un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Estas enfermedades o condiciones son diabetes, obesidad, tolerancia deteriorada a la glucosa, resistencia a la insulina y complicaciones diabéticas tales como neuropatía, nefropatía, retinopatía, cataratas, complicaciones cardiovasculares y dislipidemia) . Y el tratamiento de pacientes quienes tienen una sensibilidad anormal a grasas ingeridas que conduce a una dispepsia funcional . Los compuestos de la invención también se pueden utilizar para tratar enfermedades metabólicas tales como el síndrome metabólico (síndrome X) , tolerancia deteriorada a la glucosa, hiperlipidemia , hipertrigliceridemia , hipercolesterolemia , bajos niveles de HDL e hipertensión.
La invención también proporciona un método para el tratamiento de la diabetes tipo II, que comprende un paso que consiste en administrar a un paciente necesitado del mismo una cantidad efectiva de un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
La invención también proporciona un método para el tratamiento de la obesidad, síndrome metabólico (síndrome X) , tolerancia deteriorada a la glucosa, hiperlipidemia , hipertrigliceridemia , hipercolesterolemia, bajos niveles de HDL o hipertensión que comprende un paso que consiste en administrar a un paciente necesitado del mismo una cantidad efectiva de un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
La invención también proporciona un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para el uso en el tratamiento de una condición como se definiera anteriormente.
La invención también proporciona el uso de un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la manufactura de un medicamento para el tratamiento de una condición como se definiera anteriormente.
En los métodos de la invención, el término "tratamiento" incluye un tratamiento tanto terapéutico como profiláctico .
Los compuestos de la invención pueden exhibir propiedades ventajosas en comparación con compuestos o terapias de combinación conocidos para el tratamiento de la diabetes .
Los compuestos de la invención, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se pueden administrar solos o en combinación con uno o más de otros compuestos terapéuticamente activos. Los otros compuestos terapéuticamente activos pueden ser para el tratamiento de la misma enfermedad o condición que los compuestos de la invención o una enfermedad o condición diferente. Los compuestos terapéuticamente activos se pueden administrar de manera simultánea, de manera secuencial o por separado.
Los compuestos de la invención se pueden administrar con otros compuestos activos para el tratamiento de la obesidad y/o diabetes, por ejemplo insulina y análogos de insulina, inhibidores de lipasa gástrica, inhibidores de lipasa pancreática, sulfonil ureas y análogos, biguanidas por ejemplo metformina, agonistas de a2 , glitazonas, agonistas de PPAR-?, agonistas mezclados de PPAR-a/?, agonistas de RXR, inhibidores de la oxidación de ácidos grasos, inhibidores de oc-glucosidasa, ß-agonistas, inhibidores de fosfodiesterasa, agentes para disminuir los lípidos, inhibidores de glicógeno fosforilasa, agentes antiobesidad por ejemplo inhibidores de lipasa pancreática, antagonistas de MCH-1 y antagonistas de CB-1 (o agonistas inversos) , antagonistas de amilina, inhibidores de lipoxigenasa, análogos de somostatina, activadores de glucocinasa, antagonistas de glucagón, agonistas de señalización de insulina, inhibidores de PTP1B, inhibidores de gluconeogénesis , agentes antilipolíticos , inhibidores de GSK, agonistas de receptores de galanina, agentes anorexigenos , agonistas de receptores de CCK, leptina, fármacos antiobesidad serotonérgicos/dopaminérgicos , inhibidores de la reabsorción por ejemplo sibutramina, antagonistas de CRF, proteínas de unión de CRF, compuestos tiromiméticos , inhibidores de aldosa reductasa, antagonistas de receptores de glucocorticoides , inhibidores de NHE-1 o inhibidores de sorbitol deshidrogenasa .
La terapia de combinación que comprende la administración de un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y por lo menos otro agente, por ejemplo otro agente para el tratamiento de diabetes u obesidad, representa un aspecto adicional de la invención .
La presente invención también proporciona un método para el tratamiento de la diabetes .en un mamífero, tal como un humano, método el cual comprende administrar una cantidad efectiva de un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y otro agente, por ejemplo otro agente para el tratamiento de la diabetes u obesidad, a un mamífero necesitado del mismo.
La invención también proporciona el uso de un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y otro agente para el tratamiento de la diabetes .
La invención también proporciona el uso de un compuesto de ,1a invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la manufactura de un medicamento para el uso en combinación con otro agente, para el tratamiento de la diabetes .
El compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y el (los) otro(s) agente (s) se pueden co-administrar o administrar secuencialmente o por separado.
La co-administración incluye la administración de una formulación la cual incluye tanto el compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como el (los) otro(s) agente(s), o la administración simultánea o separada de diferentes formulaciones de cada agente. Donde los perfiles farmacológicos del compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y el (los) otro(s) agente (s) lo permiten, se puede preferir la coadministración de los dos agentes.
La invención también proporciona el uso de un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y otro agente en la manufactura de un medicamento para el tratamiento de la diabetes.
La invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y otro agente antidiabético y un portador farmacéuticamente aceptable. La invención también comprende el uso de estas composiciones en los métodos descritos anteriormente.
Todas las publicaciones, incluyendo, pero no limitadas a, las patentes y solicitudes de patente citadas en esta especificación, se incorporan en este documento a manera de referencia como si cada publicación individual fuera indicada específica e individualmente para ser incorporada a manera de referencia en este documento como se expone completamente.
La invención ahora será descrita por referencia a los siguientes ejemplos los cuales son para propósitos ilustrativos y no se deben interpretar como una limitación del alcance de la presente invención.
EJEMPLOS Materiales y métodos La cromatografía en columna se llevó a cabo sobre Si02 (malla 40-63) a menos que se especifique de otra manera. Los datos de LCMS se obtuvieron de la siguiente manera: Columna C18 3 µ AtlantisMR (3.0 X 20.0 mm, caudal de salida = 0.85 mL/minuto) eluyendo con una solución de H20-CH3CN que contenía 0.1% de HC02H durante 6 minutos con detección UV a 220 nm. Información del gradiente: 0.0-0.3 minutos 100% de H20; 0.3-4.25 minutos: Aumentar a 10% de H2O-90% de CH3CN; 4.25-4.4 minutos: Aumentar a 100% de CH3CN; 4.4-4.9 minutos: Mantener a 100% de CH3CN; 4.9-6.0 minutos: Regresar a 100% de H20. Los espectros de masas se obtuvieron utilizando una fuente de ionización por electropulverización en cualquiera de los modos de iones positivo (ES+) o negativo (ES") .
Los datos de LCMS (método 2) se obtuvieron de la siguiente manera: Columna Chromolith SpeedRODMR (4.6 X 50.0 monolito, caudal de salida = 3.0 mL/minuto) eluyendo con una solución de H20-CH3CN que contenía 0.1% de TFA durante 3 minutos con detección UV a 220 nm. Información del gradiente: 0-2 minutos: 99% de H20 1% de MeCN a 100% de MeCN; 2-3 minutos: Mantener a 100% de CH3CN. Los espectros de masas se obtuvieron utilizando una fuente de ionización por electropulverización en el modo positivo (ES+) .
La HPLC quiral se realizó en una columna Daicel chiralpak IAMR de 250 x 20 ram, 5 µ?.
Abreviaciones y siglas: Ac : Acetilo; AcOH: Acido acético; ADDP : Dipiperidido azodicarboxílico ; Boc : terc-butiloxicarbonilo; fc-Bu: tere-Butilo; DBU: 1,8- Diazabiciclo [5. .0] undec-7-eno; DCE : . 1, 2-Dicloroetano; DCM: Diclorómetaño; DIPEA : N, 2V-Diisopropiletilamina ; DMF: Dimetilformamida; EDCI : Clorhidrato de 1- (3-dimetilaminopropil) -3-etilcarbodiimida; EtOH: Etanol ; Et : Etilo; EtOAc : Acetato de etilo; eq.: Equivalentes; h: hora(s); min: minuto/s; HATU: Hexafluorofosfato de O- (7-azabenzotriazol-l-il) -?,?,?' ,?' -tetraraetiluronio; HCl : Acido clorhídrico; HPLC: Cromatografía líquida de alto desempeño; H20: Agua; HOBt : 1-Hidroxibenzotriazol ; IH: Isohexano; LiHMDS: Bis (trimetilsilil ) amida de litio; MeOH : Metanol; Me: Metilo; MeCN: Acetonitrilo; MP : Poliestireno Macroporoso; MgS04 : Sulfato de magnesio; MTBE : Eter metil - terc-butílico ; Na2C03 : Carbonato de sodio; Na2S03 : Sulfito de sodio; Na2S04 : Sulfato de sodio; NaHC03 : Carbonato ácido de sodio; NaOH : Hidróxido de sodio; NH4C1 : Cloruro de amonio; PBu3 : tri -terc-butil-fosfina; columna PE-AX: columna de amina cuaternaria basada en sílice; RP: Fase Inversa; RT : Tiempo de retención; r.t.: Temperatura ambiente; sat : Saturado; Si02: Sílice; TBAF: Fluoruro de tetra-butil -amonio ; THF: Tetrahidrofurano ; TFA: Acido trifluoroacético; TFAA: Anhídrido trifluoroacético; TMS : Trimetilsililo .
La síntesis de los siguientes compuestos ha sido descrita en alguna otra parte: [1- ( 3 - isopropil - [1 , 2 , 4 ] oxadiazol -5 - il ) piperidin-4- il] metanol : Jing y colaboradores, documento O2008/070692 ; éster isopropílico del ácido (4 -hidroxiciclohexil ) metilcarbámico : Ackermann y colaboradores, documento WO02/014267; éster isopropílico del ácido 4-carboximetoxipiperidin-l-carboxílico : Fyfe y colaboradores, documento WO2007/116229. Todos los otros compuestos estuvieron disponibles de fuentes comerciales.
Preparación 1: Ester isopropílico del ácido 4-hidroximetil-piperidin-l-carboxílico A una solución del 4 -piperidin-metanol (12 g, 104.12 mmol) en DCM (200 mL) se agregó DIPEA (23.6 mL, 135.42 mmol) y la reacción se enfrió a 0°C. Una solución de isopropilcloroformiato (120 mL, 119.79 mmol) en tolueno (120 mL) se agregó gota a gota, durante 1.5 horas, luego la reacción se llevó a la temperatura ambiente y se agitó durante 2.5 horas adicionales. La mezcla de reacción se dividió con solución de HCl 1M (200 mL) luego la capa orgánica se retiró y se lavó con solución de HCl 1M (200 mL) , salmuera (200 mL) y se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo proporcionó el compuesto del título: RMN XH d? (400MHz, CDCl3) : 4.96 - 4.86 (m, 1H) , 4.09 -4.25 (m, 2H) , 3.51 (d, J = 6.2 Hz, 2H) , 2.80 - 2.68 (m, 2H) , 1.78 - 1.62 (m, 3H) , 1.49 - 1.41 (m, 1H), 1.29 -1.09 (m, 8H) .
Preparación 2: Ester isopropílico del ácido 4-hidroxipiperidin- 1-carboxílico El compuesto del título se preparó a partir de la 4 -hidroxipiperidina empleando un procedimiento similar a aquel resumido en la Preparación 1: R N 1K d? (400MHz, CDC13 ) : 4.96 - 4.87 (m, 1H) , 3.94 - 3.82 (m, 3H) , 3.13 - 3.04 (m, 2H) , 1.92 - 1.82 (m, 2H) , 1.57 - 1.54 (m, 1H) , 1.54 - 1.42 (m, 2H) , 1.26 - 1..22 (m, 6H) .
Preparación 3: Ester isopropílico del ácido 4- (4-bromo feno i ) piperidin-1- carboxí 1 ico El éster isopropílico de ácido 4-hidroxip iper i din- 1 - carboxí 1 i co (Preparación 2, 4.68 g, 25 mmol) , 4-bromofenol (5.19 g, 30 mmol) y trif enilfosf ina (7.87 g, 25 mmol) se disolvieron en DCM (125 mL) y se agregó di-terc-but i lazodicarboxi lato (6.90 g, 30 mmol) , en porciones, durante 20 minutos. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 72 horas y luego se diluyó con DCM (150 mL) . La solución orgánica se lavó con. una solución de NaOH 2M (2 x 200 mL) , salmuera (200 mL) luego se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 90:10, 80:20, 70:30) proporcionaron el compuesto del título: RT = 4.09 min; m/z (ES+) = 342.1, 344.0 [M + H]+.
Preparación 4: Ester isopropílico del ácido 4- (5-bromopiridin-2 -iloxi) iperidin-l-carboxílico Una solución seca del éster isopropílico del ácido 4-hidroxipiperidin-l-carboxílico (Preparación 2, 10 g, 53 mmol) en DMF , bajo argón, se enfrió a 0°C. El hidruro de sodio (60% en aceite mineral, 2.54 g, 64 mmol) se agregó en una porción. Se permitió que la reacción alcanzara la temperatura ambiente antes de la agitación durante 45 minutos adicionales. Se agregó 5-bromo-2-cloropiridina (12.32 g, 64 mmol) y la reacción se calentó a 60°C durante 40 horas. Se permitió que la mezcla de reacción se enfriara a temperatura ambiente luego se agregó EtOAc . La solución orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgS04) y el solvente se retiró in vacuo. El material crudo se trituró a partir de iso-hexano (2 x 6 mL) luego éter dietílico para proporcionar el compuesto del título: RT = 3.98 min; m/z (ES+) = 343.0, 345.0 [M + H] + . Preparación 5: Ester isopropílico del cido 4-(5-bromopiridin-2 -iloximetil) iperidin-l-carboxílico El compuesto del título se preparó a partir del éster isopropílico del ácido 4-hidroximetil-piperidin-l-carboxílico (Preparación 1, 2.5 g, 12.42 mmol) y 5-bromo-2-cloropiridina (2.8 g, 14.4 mmol) empleando un procedimiento similar a aquel resumido en la Preparación 4: RT = 4.20 min; m/z (ES+) = 357.1, 359.1 [M + H] + .
Preparación 6: Ester isopropílico del ácido 4-metanosulfoniloximetilpiperidin- 1-carboxílico A una solución seca del éster isopropílico del ácido 4 -hidroximetilpiperidin- 1-carboxílico (Preparación 1, 2.5 g, 12.42 mmol) en DCM (30 mL) bajo argón se agregó trietilamina (2.08 mL, 14.9 mmol) y la mezcla se enfrió a 0°C. Se agregó cloruro de metanosulfonilo (1.06 mL, 13.66 mmol), gota a gota, durante 4 minutos luego la reacción se agitó a 0°C durante 30 minutos. La mezcla se diluyó con DCM (50 mL) y la capa orgánica se lavó con agua (2 x 50 mL) , solución de HC1 0.5M (2 x 50 mL) , salmuera (50 mL) luego se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo proporcionó el compuesto del título: RMN 1H ¾ (400MHz, DMS0-d6) : 4.95 - 4.85 (m, 1H) , 4.25-4.18 (m, 2H) , 4.17 - 4.07 (m, 2H) , 3.31 (s, 3H) , 2.98 - 2.79 (m, 2H) , 2.08 - 1.96 (m, 1H) , 1.85 - 1.75 (m, 2H) , 1.35 - 1.17 (m, 8H) .
Preparación 7: Ester isopropílico del ácido 4- (4-bromofenoximetil) iperidin- 1-carboxílico una solución del éster isopropílico del ácido metanosulfoniloxiraetilpiperidin- 1-carboxílico (Preparación 6, 3.4 g, 12.17 mmol) y 4-bromofenol (2.32 g, 13.39 mmol) en DMF (70 mL) bajo argón se agregó carbonato de potasio (3.36 g, 24.34 mmol) y la reacción se calentó a 90°C durante 16. horas . El solvente de reacción se retiró in vacuo y el residuo crudo se disolvió en EtOAc (200 mL) antes de ser lavado con agua (3 x 100 mL) . Las capas acuosas se combinaron y se extrajeron con EtOAc (50 mL) . Las fracciones orgánicas se combinaron y se lavaron con una solución saturada de NaHC03 (2 x 150 mL) , salmuera (150 mL) , luego se secaron ( gS04) . La remoción del solvente in vacuo proporcionó el compuesto del título: RT = 4.36 min; m/z (ES+) = 356.2, 358.2 [M + H] + .
Preparación 8: l-Piperidin-4-il-etanol A una solución del OC-metil-4 -piridin-metanol (3.7 g, 30 mmol) en EtOH (100 mL) se agregó AcOH (1.9 mL, 33 mmol) y óxido de platino (0.5 g, 2.2 mmol) y se permitió que la mezcla resultante se agitara bajo una atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla se filtró y el producto filtrado se concentró in vacuo. El residuo se disolvió en MeOH, al cual se agregó una solución de NaOH (1.6 g, 40 mmol) y agua (1.6 mL) en MeOH. La reacción se agitó durante 30 minutos antes de la remoción del solvente in vacuo y el residuo resultante se suspendió en éter dietílico durante 30 minutos. La mezcla se filtró y el producto filtrado se concentró in vacuo para proporcionar el compuesto del título: RMN XH d? (400MHz, CDC13) : 3.63 - 3.55 (m, 1H) , 3.39 - 3.31 (m, 2H) , 2.7 - 2.6 (m, 2H) , 2.01 - 1.92 (m, 2H) , 1.76 - 1.69 (m, 1H) , 1.67 - 1.54 (m, 2H) , 1.51 - 1.42 (m, 1H) , 1.1 - 1.14 (m, 3H) .
Preparación 9: Ester isopropílico del ácido 4-(l-hidroxietil) piperidin- 1-carboxílico El compuesto del título se preparó a partir del 1-piperidin-4-il-etanol (Preparación 8, 2.7 g, 20.93 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 1: RMN K 6H (400MHz, CDC13) : 4.97 - 4.87 (m, 1H) , 4.28 - 4.14 (m, 2H) , 3.66 - 3.55 (m, 1H) , 2.77 - 2.63 (m, 2H) , 1.88 - 1.81 (m, 1H) , 1.67 - 1.59 (m, 1H) , 1.48 - 1.38 (m, 1H) , 1.26 -1.16 (m, 11H) .
Preparación 10: Ester isopropílico del ácido 4- [1- (5-bromopiridin-2-iloxi) etil] iperidin-l-carboxílico compuesto del título se preparó al hac reaccionar el éster isopropílico del ácido 4-(l- hidroxietil) iperidin- 1-carboxílico (Preparación 9, 7.4 g, 57.36 mmol) con 2-cloro-5-bromopiridina (13.2 g, 68.8 mmol) empleando un procedimiento similar a aquel resumido en la Preparación 4: RT = 4.34 min; m/z (ES+) = 371.2, 373.2 [M + H]+.
Preparación 11: Ester isopropílico del ácido 4-(l-metanosulfoniloxietil) piperidin- 1-carboxílico compuesto del título se preparó a partir del éster isopropílico del ácido 4- (1-hidroxietil) piperidin-1-carboxílico (Preparación 9, 4.3 g, 20 mmol) empleando un procedimiento similar a aquel resumido en la Preparación 6 : RMN XK d? (400MHz, CDCl3) : 4.98 - 4.86 (m, 1H) , 4.69 - 4.61 (m, 1H) , 4.31 - 4.17 (m, 2H) , 3.01 (s, 3H) , 2.76 - 2.66 (m, 2H) , 1.84 - 1.63 (m, 3H) , 1.44 - 1.38 (m, 3H) , 1.35 - 1.22 (m, 8H) .
Preparación 12: Ester isopropílico del ácido 4-[l-(4-brornofenoxi) etil] piperidin-l-carboxílico El éster isopropílico del ácido 4- (1-metanosulfoniloxietil ) piperidin-l-carboxílico (Preparación 11, 100 mg, 0.36 mmol) se hizo reaccionar con 4-bromofenol (69 mg, 0.40 mmol) empleando las condiciones resumidas en la Preparación . El tratamiento final involucró la división de la mezcla de reacción entre EtOAc y agua. La fase orgánica se separó y se lavó con una solución de NaOH 1M, agua, salmuera y secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 4:1) proporcionaron el compuesto del título: RT = 4.5 min; m/z (ES+) = 370.2, 372.1 [M + H]+.
Preparación 13: Ester isopropílico del ácido 4- (4-bromopiridin-2 -iloximetil) iperidin- 1-carboxílico A una solución del éster isopropílico del ácido 4-hidroximetil-piperidin-l-carboxílico (Preparación 1, 1.1 g, 5.47 mmol) en THF (15 mL) se agregó hidruro de sodio (60% en aceite mineral, 218 mg, 5.47 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Se agregó 4 -bromo- 2-cloropiridina (0.62 mL, 5.47 mmol) y la reacción se calentó a 90 °C durante 4 horas antes de ser enfriada rápidamente con agua (10 mL) . Los productos orgánicos se extrajeron con EtOAc (3 x 15 mL) , se secaron (MgS04) y el solvente se retiró in vacuo. La purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH: EtOAc, 9:1) proporcionó el compuesto del título: RT = 4.16 min; m/z (ES+) = 357.1, 359.1 [M + H] + .
Preparación 14: Azetidin-3 -ol A una solución del l-benzhidrilazetidin-3 -ol (30.5 g, 130 mmol) en EtOH (500 mL) se agregó una solución pre-mezclada de trietilamina (55 mL, 390 mmol) y ácido fórmico (15 mL, 390 mol) en etanol (100 mL) . Se agregó paladio sobre carbón (2.40 g) y la mezcla se calentó a reflujo durante 3 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de celite para proporcionar el compuesto del título como una solución en etanol.
Preparación 15: 1- (4 - Isopropilbencil) azetidin-3 -ol una solución de azetidin-3 -ol (Preparación 6.84 mmol) y 4 - isopropilbenzaldehído (8.21 mmol) en etanol (45 mL) se agregó ácido acético (0.5 mL) . Después de la agitación durante 1 hora, se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (8.21 mmol) y la agitación continuó durante 72 horas. Se agregó ácido clorhídrico acuoso (ÍM, 30 mL) y la mezcla se concentró para retirar el etanol. La mezcla se extrajo con éter dietílico (x 2) y la mezcla acuosa, restante se basificó por medio de la adición de una solución de NaOH 2M. La solución luego se extrajo con DCM (x 3) . Los extractos de DCM combinados se secaron (MgS04) y se concentraron para proporcionar el compuesto del título; RT = 2.00 min; m/ z (ES+) = 206.1 [M + H] + .
Preparación 16: 5-Bromo-2- [1- (4-isopropilbencil) azetidin-3-iloxi] piridina Una solución del 1- (4-isopropilbencil) azetidin-3-ol (Preparación 15, 500 mg, 2.44 mmol) en DMF (10 mL) bajo argón se enfrió a 0°C. Se agregó hidruro de sodio (60% en aceite mineral 120 mg, 2.92 mmol) y se permitió que la reacción alcanzara la temperatura ambiente. Se agregó 5 -bromo- 2-cloropiridina (562.4 mg, 2.92 mmol) y la reacción se calentó a 60 °C durante 16 horas. El solvente se retiró in vacuo y la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, DCM : MeOH , 100:0, 90:10) proporcionó el compuesto del título: RT = 2.98 min; m/z (ES+) = 361.2, 363.2 [M + H] + .
Preparación 17: Ester isopropílico del ácido 4- [5- (4, 4, 5, 5-tetrametil- [1, 3 , 2] dioxaborolan-2 -il) piridin-2 -iloxi] -piperidin-l-carboxílico A una solución del éster isopropílico del ácido 4- (5-bromopiridin-2-iloxi) piperidin-l-carboxílico (Preparación 4, 5.0 g, 14.6 mmol) en dioxano (100 mL) se agregó acetato de potasio (4.3 g, 43.7 mmol), [1 , 1-bis (difenilfosf ino) - ferroceno] dicloropaladio (1.2 g, 1.5 tnmol) y bis (pinacolato) diboro (4.42 g, 17.4 mmol) . Se burbujeó argón a través de la mezcla de reacción durante 15 minutos. La mezcla de reacción se calentó a 110°C durante 16 horas y luego se permitió que fuera agitada durante 72 horas adicionales a temperatura ambiente. La remoción del solvente in vacuo seguida por la cromatografía en columna (Si02, DCM) proporcionaron el compuesto del título: RT = 4.00 min; m/z (ES+) = 391.2 [M + H] + .
Los siguientes compuestos se prepararon al hacer reaccionar el bromuro de arilo o heteroarilo apropiado con bis (pinacolato) diboro empleando un procedimiento similar a aquel resumido en la Preparación No. de Estructura Nombre Espectros Prep.
RMN ¾ ¾, (400MHz, CDCI3) : 8.55-8.48 (m, Ester isopropílico del 1H) , 7.96 - 7.89 (m, ácido 4- [5- (4,4,5,5- 1H) , 6.73 - 6.66 (ra, tetrametil- 1H) , 5.00 - 4.86 (m, 13 [1, 3 , 2] dioxaborolan-2- 1H) , 4.24 - 4.14 (m, il)piridin-2- 4H) , 2.83 - 2.71 (m, iloximetil] -piperidin- 2H) , 2.03 - 1.92 (m, 1-carboxílico 1H), 1.86 - 1.75 (m, 2H) , 1.30 - 1.19 (m, 20H) Ester isopropílico del ácido 4- [4- (4,4,5,5- RT = 4.24 min; m/z (ES*) 19 tetrametil- [1,3,2] - = 390.4 [ + H]* dioxaborolan-2- A il) fenoxi] piperidin-1- Preparación 24: Ester terc-butílico del ácido 4- (3-bromofenoximetil) piperidin- 1-carboxílico El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar el éster terc-butílico del ácido 4- hidroximetilpiperidin- 1-carboxílico (1.075 g, 5 mmol) con 3-bromofenol (1.026 g, 6 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 3: RT = 4.50 min; m/z (ES+) = 370.2, 372.2 [M + H]+.
Preparación 25: Ester isopropílico del ácido 4- (3-bromofenoximetil) iperidin- 1-carboxílico A una solución del éster terc-butílico del ácido 4- ( 3 -bromofenoximetil ) piperidin-l-carboxílico (Preparación 24, 1.5 g, 4.05 mmol) .en DCM (8 mL) se agregó TFA (2 mL) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. La mezcla se diluyó con DCM (150 mL) y se enfrió rápidamente con una solución saturada de NaHC03 (150 mL) . Los productos orgánicos se separaron y se lavaron con salmuera luego se secaron (MgS04) y el solvente se retiró in vacuo. El residuo se disolvió de nuevo en DCM (20 mL) y se agregó DIPEA (0.8 mL) antes de enfriar la reacción a 0°C. El cloroformiato de isopropilo (1M en tolueno, 4.86 mL, 4.86 mmol) se agregó por vía de una jeringa y se permitió que la reacción se calentara a temperatura ambiente antes de la agitación durante 16 horas adicionales. La mezcla se diluyó con EtOAc (150 mL) y la solución resultante se lavó con una solución de ácido cítrico 1M luego salmuera y se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo proporcionó el compuesto del título: RT = 4.34 min; m/z (ES+) = 355.2, 357.2 [M + H] + .
Preparación 26: Ester isopropílico del ácido 4- [3- (4,4, 5,5-tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2 -il) fenoximeti1] piperidin-1-carboxílico A una solución del éster isopropílico del ácido 4 -( 3 -bromof enoximet i 1 ) pipe idin- 1 - carboxí 1 ico en dioxano (Preparación 25, 430 mg, 1.21 mmol) se agregó acetato de . potasio (355 mg, 3.62 mmol) y bis (pinacolato) diboro (369 mg, 1.45 mmol) y la mezcla se purgó con argón. El [1,1-bis (difenilfosf ino) ferroceno] dicloropaladio (98 mg, 0.12 mmol) se agregó y la reacción se purgó durante 5 minutos adicionales antes del calentamiento a 100°C durante 20 horas. Después de este tiempo, se agregó celite y la mezcla- se filtró, lavando con EtOAc . El producto filtrado orgánico, resultante se lavó con una solución saturada de NaHC03 (150 mL) luego salmuera (150 mL) y se secó (MgS0 ) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 7:3) proporcionaron el compuesto del título: RT = 4.44 min; m/z (ES+) = 404.3 [M + H] + .
Preparación 27: Bromhidrato del ácido (S) -2-amino-3- (2-fluoro-4 -hidroxifenil) propiónico El anhídrido acético (540 g, 5.30 mol) se agregó bajo agitación a una mezcla de 2-fluoro-4 -metoxibenzaldehído (240 g, 1.56 mol) , iV-acetilglicina (219 g, 1.87 mol) y acetato de sodio (128 g, 1.56 mol) a temperatura ambiente. La suspensión se calentó a 100 °C durante 18 horas. La solución se enfrió a temperatura ambiente y el residuo se extrajo alternativamente con DCM (5 X 500 mL) y agua (5 X 200 mL) . El sólido cristalino, restante se secó para producir la 4-[l-(2-fluoro-4 -metoxifenil ) met- (E) - iliden] -2 -metil-4H-oxazol -5-ona . Los extractos de DCM se combinaron, se secaron (Na2S04) , se filtraron y se concertaron in vacuo. El residuo se recristalizó dos veces a partir de EtOH para proporcionar la 4- [1- (2-fluoro-4-metoxifenil)met- (E) -iliden] -2-metil-4H-oxazol-5-ona adicional: RT = 3.00 min (método 2 de LCMS) .
A la 4- [1- (2-fluoro-4 -metoxifenil ) met- (E) -iliden] - 2-metil-4H-oxazol-5-ona (150.9 g, 0.642 mol) en dioxano (700 mL) se agregó una solución de HC1 1M (1000 mL) y la mezcla se calentó bajo condiciones de reflujo durante 90 minutos. El dioxano se retiró extensamente por medio de la evaporación y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (x 2) y DCM (x 2) . Las capas orgánicas, combinadas se evaporaron y el residuo se recristalizó a partir de EtOAc/heptano para proporcionar el ácido ( Z) - 2 -acetilamino- 3 - ( 2 - fluoro-4 -metoxifenil) acrílico : RT = 1.73 min (método 2 de LCMS) . El ácido (Z) - 2 -acet ilamino-3 - ( 2 - f luoro- 4 -metoxifenil) acrílico (35.0 g, 138 mmol) se disolvió en MeOH (670 mL) y se hidrogenó en una autoclave durante 96 horas con una presión de 8 bares a 50°C utilizando [Rh(cod) (PP)]0Tf (277 µ???) como catalizador y (S, S) -Et-Duphos como ligando (277 µt???) . La solución se enfrió y se evaporó y el producto crudo se disolvió en EtOAc (550 mL) . La mezcla se calentó a 60°C seguido por la adición lenta de heptano (200 mL) antes del enfriamiento lentamente a temperatura ambiente. Los sólidos se aislaron para proporcionar el ácido (Z) -2-acetilamino-3 - ( 2 - fluoro- 4 -metoxi fenil ) acrílico. RT = 1.21 min (método 2 de LCMS) . Una autoclave de tantalio se cargó con el ácido ( Z) - 2 -acetilamino- 3 - ( 2 - fluoro-4 -metoxifenil ) crílico (71.0 g, 278 mmol), ácido bromhídrico acuoso (48%, 420 mL) y ácido acético (320 mL) y se calentó a 105 °C durante 16 horas. El solvente se evaporó y el residuo se trituró subsecuentemente con éter dietílico y éter terc-but ilmetí lico antes de ser secado a 30°C in vacuo durante 3 horas para proporcionar el compuesto del título: RT = 0.815 min; m/z (ES+) = 200.0 [M + H] + (método 2 de LCMS) .
Preparación 28: Acido (S) -2 - tere-butoxicarbonilamino-3 - (2 -fluoro-4 -hidroxifenil) ropiónico A una suspensión del bromhidrato del ácido (S)-2-amino-3- (2-fluoro-4-hidroxifenil) propiónico (Preparación 27, 15 g, 53.5 mmol) y trietilamina (15.64 mL, 112.25 mmol) en una mezcla de dioxano (150 mL) y agua (150 mL) a 0°C se agregó dicarbonato de di- fcerc-butilo (12.84 g, 58.85 mmol) . Se permitió que la suspensión resultante se calentara a la temperatura, ambiente y se agitó durante 48 horas antes de la remoción del dioxano in vacuo. El residuo resultante se dividió entre EtOAc y agua luego la fase acuosa se separó y se acidificó a pH 3 con una solución de ácido cítrico 1M. El producto se extrajo con EtOAc, se secó (MgS04) y el solvente se retiró in vacuo para proporcionar el compuesto del título: RT = 2.82 min, m/z (ES+) = 300.1 [M + H] + .
Preparación 29: Ester terc-butílico del ácido (S) - [2 - ( (S) -2 -carbamoilpirrolidin-l-il) -1- (2 - fluoro-4 -hidroxibencil) -2-oxoetil] carbámico A una solución del ácido (S) -2- tere- butoxicarbonilamino-3- (2-fluoro-4 -hidroxifenil) propiónico (Preparación 28, 15.3 g, 51 mmol) en THF (200 mL) se agregó EDCI (12.21 g, 63.75 mmol), HOBt (6.94 g, 51 mmol) y DIPEA (17.73 mL, 102 mmol) y la reacción se agitó durante 20 minutos. La mezcla se trató con L- ( - ) -prolinamida (6.51 g, 56.1 mmol) y la agitación continuó a temperatura ambiente durante 18 horas. El solvente se retiró in vacuo y el residuo resultante se diluyó con DCM. La solución orgánica se lavó con una solución de Na2C03 2M, seguida por una solución de ácido cítrico 0.1M antes de ser secada (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo proporcionó el compuesto del título: RT = 2.67 min, m/z (ES+) = 396.3 [M + H] + .
Preparación 30: Ester 4- [2- erc-butoxicarbonilamino-3 ( (S) -2-carbamoilpirrolidin-l-il) -oxopropil] -3-flurofenílico del ácido (S) - trifluorometanosulfónico A una solución del éster fce_rc-butílico del ácido (S) - [2- ( (S) -2-carbamoilpirrolidin-l-il) -1- (2-fluoro-4-hidroxibencil) -2-oxoetil] carbámico (Preparación 29, 17.65 g, 44.46 mmol) y DIPEA (8.5 mL, 48.91 mmol) en MeCN a 0"C se agregó sulfonimida de N-feniltrifluorometano (15.94 g, 44.46 mmol) . La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas antes de la remoción del solvente in vacuo. La purificación del residuo por medio de la cromatografía en columna (Si02, EtOAc) proporcionó el compuesto del título: RT = 3.42 min, m/z (ES+) = 528.3 [M + H] + .
Preparación 31: Ester 4- [2- fcerc-butoxicarbonilamino-3- ( (S) -2-cianopirrolidin-l-il) -3 -oxopropil] -3-fluorofenílico del ácido (S) - trifluorometanosulfónico A una solución del éster 4-[2-terc-butoxicarbonilamino-3 - ( (S) -2-carbamoilpirrolidin-l-il) -3-oxopropil] -3 -f luorofenílico del ácido (S) -trifluorometanosulfónico (Preparación 30, 7.42 g, 14.08 mmol) en THF (150 mL) se agregó piridina (2.26 mL, 28.16 mmol) y la mezcla se enfrió a 0°C. La reacción se trató con TFAA (9.78 mL, 70.4 mmol) y se agitó durante 5 minutos antes de ser diluida con DCM (100 mL) , se lavó con una solución saturada de Na2C03 y se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 4:1) proporcionaron el compuesto del título: RMN 1H d? (400MHz, DM.SO-d6) : 7.59 - 7.48 (m, 2H) , 7.35 - 7.22 (m, 2H) , 4.76 -4.70 (m, 1H) , 4.52 - 4.42 (m, 1H) , 3.56 - 3.34 (m, 2H) , 3.11 - 2.99 (m, 1H) , 2.91 - 2.81 (m, 1H) , 2.23 - 1.84 (m, 4H) , 1.24 (s, 9H) .
Preparación 32: Ester terc-butílico del ácido (S)-[l-(2-fluoro-4 -hidroxibencil) -2-oxo-2-pirrolidin-l-iletil] -carbámico El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar el ácido (S) -2 - terc-butoxicarbonilamino-3 - (2 -f luoro-4 -hidroxifenil ) propiónico (Preparación 28, 4.2 g, 14 mmol) con pirrolidina (1.27 raL, 15.4 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 29: RT = 2.97 min, m/z (ES+) = 353.3 [M + H] + .
Preparación 33: Ester 4- (2- erc-butoxicarbonilamino-3 -oxo- 3-pirrolidin-l-ilpropil) -3-fluorofenílico del ácido (S) -trifluorometanosul fónico El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar el éster terc-butílico del ácido (S) - [1- (2-fluoro-4 -hidroxibencil) -2-oxo-2-pirrolidin-l-iletil] carbámico (Preparación 32, 5 g, 14.0 mmol) con sulfonimida de N-feniltrifluorometano (5.5 g, 15.4 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 30: RT = 3.92 min, m/z (ES+) = 485.3 [M + H] + .
Preparación 34: Ester terc-butílico del ácido (S)-[l-(2-fluoro-4-hidroxibencil) -2- ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -2-oxoetil] carbámico El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar el ácido ( S) - 2 - terc-butoxicarbonilamino- 3 - ( 2 -fluoro-4 -hidroxifenil ) propiónico (Preparación 28) con clorhidrato de (S) -3-fluoropirrolidina empleando el procedimiento resumido en la Preparación 29 : RT = 2.96 min, m/z (ES+) = 371.2 [M + H]+.
Preparación 35: Ester 4- [2 - erc-butoxicarbonilamino-3 - ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) - 3 -oxopropil] -3-fluorofenílico del ácido (S) - trifluorometanosulfónico El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar el éster terc-butílico del ácido (S) - [1- (2-fluoro-4 -hidroxibencil) -2- ( (S) -3-f luoropirrolidin-l-il) -2-oxoetil] -carbámico (Preparación 34, 4.42 g, 11.94 mmol) con sulfonimida de N-feniltrif luorometano (4.6 g, 12.87 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 30: RT = 3.77 min, m/z (ES+) = 503.1 [M + H] + .
Preparación 36: Ester terc-butílico del ácido (S) - [2 - (3 , 3¦ difluoropirrolidin- 1- il) -1- (2-fluoro-4-hidroxibencil) -2-oxoetil] carbámico El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar el ácido (S) -2- erc-butoxicarbonilamino- 3 - (2-fluoro-4 -hidroxifenil ) propiónico (Preparación 28) con clorhidrato de 3 , 3 -difluoropirrolidina empleando un procedimiento similar a aquel resumido en la Preparación 29 pero utilizando trietilamina como la base: RT = 3.13 min, m/z (ES+) = 389.2 [M + H] + .
Preparación 37: Ester 4- [2- terc-butoxicarbonilamino- 3 - (3, 3-difluoropirrolidin-l-il) -3 -oxopropil] -3 - fluorofení lico del ácido (S) - trifluorometanosulfónico El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar el éster terc-butílico del ácido (S)-[2-(3,3-difluoropirrolidin-l-il) -1- (2-fluoro-4 -hidroxibencil ) -2-oxoetil] carbámico (Preparación 36, 4.42 g, 11.94 mmol) con sulfonimida de N- feniltrifluorometano (4.6 g, 12.87 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 30: RT = 3.93 min, m/z (ES+) = 521.1 [M + H] + .
Preparación 38: Ester isopropílico del ácido (S) -4- (5-{4- [2- fcerc-butoxicarbonilamino-3- (3 , 3 -difluoropirrolidin-l-il) -3- oxopropil] -3-fluorofenil}piridin-2-iloxi)piperidin-l- carboxílico [5- (4,4,5, 5 - tetrametil - [1,3,2] dioxaborolan-2 - il) piridin-2 - iloxi] piperidin-l-carboxílico (Preparación 17, 250 mg, 0.64 mmol) en una mezcla de DMF (4.0 mL) y agua (1.3 mL) se agregó el éster 4 - [2 - erc-butoxicarbonilamino- 3 - ( 3 , 3 - difluoropirrolidin-l-il) -3 -oxopropil] 3-fluorofenílico del ácido (S) -trifluorometanosulfónico (Preparación 37, 278 mg, 0.53 mmol), [1 , 1-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (44 mg, 0.05 mmol) y trietilamina (223 µ???, 1.6 mmol) y la reacción se calentó en un reactor de microondas a 80 °C durante 20 minutos. La mezcla se tomó en EtOAc, se lavó con salmuera y se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo y la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 100:0, 90:10, 80:20, 70:30, 50:50, 0:100) proporcionaron el compuesto del título: RT = 4.23 min; m/z (ES+) = 635.3 [M + H] + .
Preparación 39: Ester isopropílico del ácido (S) -4- (5-{4- [2-terc-butoxicarbonilamino-3 - ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -3-oxopropil] -3 -fluorofenil}piridin-2-iloxi) piperidin- 1-carboxílico El compuesto del título se preparó a partir del éster isopropílico del ácido 4 - [5 - (4 , 4 , 5 , 5 - tetrametil - [1,3,2] dioxaborolan-2 - il ) piridin-2 - iloxi] piperidin- 1-carboxílico (Preparación 17, 200 mg, 0.51 mmol) y éster 4- [2-terc-butoxicarbonilamino-3 - ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -3-oxopropil] -3 -fluorofenílico del ácido (S) -trifluorometanosulfónico (Preparación 35, 214 mg, 0.43 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 38: RT = 4.10 min; m/z (ES+) = 617.4 [M + H] + .
Preparación 40: Ester isopropílico del ácido (S) -4- (5- {4 - [2-te-rc-butoxicarbonilamino-3 - ( (S) -2-cianopirrolidin-l-il) -3-oxopropil] -3 - fluorofenil}piridin-2 - iloximetil) iperidin- 1-carboxílico compuesto del título se preparó a partir del éster isopropílico del ácido 4- [5- (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil-[1,3,2] dioxaborolan-2 - il ) iridin-2 - iloximetil] piperidin-1-carboxílico (Preparación 18, 240 mg, 0.59 mmol) y éster 4- [2-terc-butoxicarbonilamino-3- ( (S) -2-cianopirrolidin-l-il) -3-oxopropil] 3 - fluorofenílico . del ácido {S) -trifluorometanosulfónico (Preparación 31, 250 mg, 0.49 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 38: RT = 4.32 min; m/z (ES+) = 638.5 [M + H] + .
Preparación 41: Ester isopropílico del ácido (S) -4- (5-{4- [2-terc-butoxicarbonilaitiino-3- ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -3-oxopropil] -3 - fluorofenil}piridin-2 -iloximetil) piperidin-1-carboxílico El compuesto del título se preparó a partir del éster isopropílico del ácido 4 - [5 - (4 , 4 , 5 , 5 - tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2 - il ) iridin-2 - iloximetil] piperidin- 1-carboxílico (Preparación 18, 242 mg, 0.60 mmol) y éster 4-[2-terc-butoxicarbonilamino-3- ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -3-oxopropil] 3-fluorofenílico del ácido (S) -trifluorometanosulfónico (Preparación 35, 250 mg, 0.50 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 38: RT = 4.25 min; m/z (ES+) = 631.5 [M + H] + .
Preparación 42: Ester fcerc-butílico del ácido [2-((S)-3-fluoropirrolidin-l-il) -1- (4 -hidroxifenil) -2-oxoetil] carbámico A una solución del ácido terc-butoxicarbonilamino (4 -hidroxifenil ) acético (3.0 g, 11.22 mmol) en una mezcla de DCM (30 raL) y DMF (6 mL) bajo argón se agregó HOBt (2.06 g, 13.47 mmol) y EDCI (2.80 g, 14.59 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. A la reacción se agregó clorhidrato de ( S) - 3 - fluoropirrol idina (1.55 g, 12.35 mmol) y DIPEA (4.89 mL , 28.06 mmol) y la agitación continuó durante 16 horas adicionales. El solvente se retiró in vac o y el material crudo se dividió entre EtOAc (150 mL) y agua (100 mL) . La capa acuosa se retiró y la fase orgánica se lavó con agua (100 mL) , una solución de NaHC03 (100 mL) , una solución de HCl 1M (100 mL) luego salmuera (100 mL) antes de ser secada (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la cromatografía en columna (Si02, DCM : MeOH , 95:5) proporcionaron el compuesto del título: RT = 2.76 min; m/z (ES+) = 339.3 [M + H]+.
Preparación 43: Ester 4- [1- terc-butoxicarbonilamino-2- ( (S) -3 -fluoropirrolidin-l-il) -2 -oxoetil] fenílico del ácido trifluorometanosulfónico Una solución del éster t ere - but í 1 i co del ácido [2- ( (S) - 3-f luoropirrolidin-l-il) -1- (4-hidroxif enil ) -2-oxoetil] carbámico (Preparación 42, 2.28 g, 6.74 mmol) en Me CN (100 mL) bajo argón se enfrió a 0°C. Se agregó D I PEA (1.29 mL , 7.41 mmol). seguido por sulfonimida de N- f eni 1 t r i f luorome t ano (2.65 g, 7.41 mmol) y la reacción se agitó a 0°C durante 10 minutos antes de permitir que fuera agitada a temperatura ambiente durante 16 horas. El solvente de reacción se retiró in vacuo y el residuo crudo se disolvió de nuevo en EtOAc (150 mL) . La solución orgánica se lavó con una solución saturada de NaHC03 (60 mL) , luego salmuera (60 mL) y se secó (MgS04) y el solvente se retiró in vacuo. La purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 1:1) proporcionó el compuesto del título: RT = 3.74 min; m/z (ES+) 471.3 [M + H] + .
Preparación 44: Ester isopropílico del ácido (S) -4- {4 ' - [1-terc-butoxicarbonilamino-2 - ( (3) - 3 - fluoropirrolidin- 1- il) -2-oxoetil] bifenil-4 -iloxi}piperidin-l-carboxílico A una solución del éster 4- [1- terc-butoxicarbonilamino-2 - ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -2-oxoetil] fenílico del ácido trifluorometanosulfónico (Preparación 43, 544 mg, 1.16 mmol) y el éster isopropílico del ácido 4- [4- (4,4,5, 5-tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2-il) -fenoxi] piperidin-l-carboxílico (Preparación 19, 300 mg, 0.77 mmol) en una mezcla de tolueno (5 mL) y EtOH (5 mL) , bajo argón, se agregó una solución de Na2C03 (2M, 1.93 mL, 3.85 mmol) y la mezcla se agitó durante 5 minutos. El [1,1-Bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (126 mg, 0.15 mmol) se agregó y la reacción se burbujeó con argón durante 5 minutos antes del calentamiento a 80°C durante 16 horas. El solvente de reacción se concentró in vacuo y el residuo resultante se dividió entre EtOAc (100 mL) y agua (100 mL) . La capa orgánica se separó y se lavó con agua (50 mL) , una solución saturada de NaHC03 (100 mL) luego salmuera (100 mL) y se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 1:1) y la HPLC quiral proporcionaron el compuesto del título: RT = 4.06 min; m/z (ES+) = 584.6 [ + H] + .
Preparación 45: Ester terc-butílico del ácido [2-((S)-2-carbamoilpirrolidin-l-il) -1- (4-hidroxifenil) -2-oxoetil] -carbámico A una solución del ácido terc-butoxicarbonilamino (4 -hidroxifenil) acético 3.0 g, 11.2 mmol) en DCM (75 mL) se agregó (S) -prolinamida (1.54 g, 13.5 mmol), EDCI (2.15 g, 11.2 mmol), HOBt (2.06 g, 13.47 mmol) y DIPEA (4.69 mL, 26.9 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas . La mezcla de reacción se diluyó con DCM y se lavó con ácido cítrico 1M, una solución saturada de NaHC03, agua luego salmuera y se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo y la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, DCM:MeOH, 95:5, 90:10) proporcionaron el compuesto del título: RT = 2.50 min; m/z (ES+) = 364.3 [M + H] + .
Preparación 46: Ester 4- [1- terc-butoxicarbonilamino-2 - ( (S) -2-carbamoilpirrolidin-l-il) -2 -oxoetil] fenílico del ácido trifluorometanosulfónico El compuesto del título se preparó a partir del éster terc-butílico del ácido [2- ( (S) -2 -carbamoilpirrolidin-1-il) -1- (4 -hidroxifenil) -2-oxoetil] carbámico (Preparación 45, 1.93 g, 3.13 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 43: RT = 3.37 min; m/z (ES+) = 496.4 [M + H] + ..
Preparación 47: Ester 4- [1- erc-butoxicarbonilamino- 2- ( (S) -cianopirrolidin-l-il) -2-oxoetil] fenílico de ácido trifluorometanosulfónico A una solución del éster 4- [1- erc-butoxicarbonilamino- 2- ( (S) -2-carbamoilpirrolidin-l-il) -2-oxoetil] fenílico del ácido trifluorometanosulfónico (Preparación 46, 1.55 g, 3.13 mmol) en THF (60 mL) , enfriada a 0°C, se agregó piridina (0.53 mL, 6.57 mmol) seguido por TFAA (2.39 mL, 16.89 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 5 minutos y luego se enfrió rápidamente por medio de la adición de una solución saturada de NaHC03. Los productos orgánicos se extrajeron en EtOAc y se lavaron con ácido cítrico 1M, agua, luego salmuera y se secaron (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH: EtOAc, 1:1 seguido por una segunda columna utilizando DCM:EtOAc, 95:5) proporcionaron el compuesto del título: RT = 3.80 min; m/z (ES+) = 478.4 [M + H] + .
Preparación 48: Ester isopropílico del ácido (S) -4- {4 ' - [1-terc-butoxicarbonilamino-2 - ( (S) -2-cianopirrolidin-l-il) -2-oxoetil] bifenil-4 -iloxi}piperidin-l-carboxílico El éster isopropílico del ácido 4- [4- (4 , 4 , 5, 5-tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan- 2 - il ) -fenoxi] piperidin-1-carboxílico (Preparación 19, 234 mg, 0.5 mmol) se hizo reaccionar con el éster 4- [1- terc-butoxicarbonilamino- 2 - ( (S) -cianopirrolidin-l-il) -2-oxoetil] fenílico del ácido trifluorometanosulfónico (Preparación 47, 240 mg, 0.5 mmol) empleando un procedimiento similar a aquel resumido en la Preparación 38. La purificación mediante la HPLC quiral proporcionó el compuesto del título: RT = 4.17 min; m/z (ES+) = 591.3 [M + H]+.
Preparación 49: Ester isopropílico del ácido (S) -4 - [ ' - (2 -terc-butoxicarbonilamino-3 -oxo-3 -pirrolidin- 1- il -propil) -3' -fluorobifenil-4 -iloximetil] piperidin-1-carboxílico Una solución del éster isopropílico del ácido 4- [4- (4,4,5,5 - 1 et ramet il - [1,3,2] dioxaborolan- 2 -il) f enoximet i 1 ] -p ipe idin - 1 - carboxí 1 i co (Preparación 20, 200 mg, 0.50 mmol) en una mezcla de DMF (1.5 itiL) y agua (0.5 mL) se combinó con el éster 4 - (2-terc-but oxi carboni 1 amino - 3 - oxo - 3 - pi r rol i din- 1 - i lpropi 1 ) -3-f luorof ení lico del ácido ( S) - t r i f luorome tanosul fóni co (Preparación 33, 200 mg , 0.41 mmol) , [1,1-bis (dif enilf osf ino) ferroceno] dicloropaladio (34 mg , 0.04 mmol) y D I PEA (216 µ?^ , 1.24 mmol) . La reacción se calentó en un rector de microondas a 80°C durante 20 minutos. Se agregó EtOAc (100 mL) y la solución se lavó con agua (3 x 50 mL) , una solución saturada de NaHC03 (2 x 50 mL) luego salmuera (50 mL) y se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 1:1) proporcionaron el compuesto del título: RT = 4.53 min; m/z (ES+) = 612.5 [M + H] + .
Los siguientes compuestos se prepararon al hacer reaccionar el éster isopropílico del ácido 4- [4 - (4,4,5,5 - te t ramet i 1 - [1, 3, 2] dioxaborolan-2-il) f enoximet i 1 ] piper idin- 1 - carboxí 1 ico (Preparación 20) con el producto intermedio apropiado de éster de t r i f luorometanosulf onato empleando el procedimiento resumido en la Preparación 49: Preparación 52: Ester isopropílico del ácido 4- (6-bromopiridin-3 -iloximetil) piperidin-l-carboxílico A una solución seca del dipiperidido azodicarboxílico (5.01 g, 19.87 mmol) en tolueno (200 mL) se agregó tri-n-butilfosfina (4.95 mL, 19.87 mmol) seguido por 2-bromo-5-hidroxipiridina (1.73 g, 9.94 mmol) y la reacción se enfrió a 0°C durante 5 minutos. Una solución del éster isopropílico del ácido 4-hidroximetil-piperidin-l-carboxílico (Preparación 1, 2.0 g, 9.94 mmol) en tolueno (50 mL) se agregó a la solución, gota a gota durante 5 minutos, y se permitió que la reacción se agitara a 0°C durante 16 horas, se agregó iso-hexano (200 mL) y la reacción se agitó durante 10 minutos antes de filtrar la mezcla para retirar el producto precipitado. El producto filtrado se lavó con una solución de NaOH 2M (2 x 150 mL) , agua (150 mL) , una solución de HCl 1M (2 x 150 mL) , salmuera (150 mL) y se secó (MgS0 ) . La remoción del solvente in vacuo y la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 4:1, 3:1) proporcionaron el compuesto del título: RT = 3.87 min; m/z (ES+) = 357.2, 359.1 [M + H] + .
Preparación 53: Ester terc-butílico del ácido (S)-{l-[2-fluoro-4- (4,4,5, 5-tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2 -il) bencil] -2 -coco-2 -pirrolidin- l-iletil}carbámico A una solución del éster 4-(2-fcerc-butoxicarbonilamino-3-oxo-3-pirrolidin-l-ilpropil) -3-fluorofenílico del ácido (S) -trifluorometanosulfónico (Preparación 33, 320 mg, 0.66 mmol) en dioxano (12 mL) bajo argón se agregó bis (pinacolato) diboro (201 mg, 0.79 mmol), acetato de potasio (194 mg, 0.07 mmol) y 1,1-bis (difenilfosfino) ferroceno (37 mg, 0.07 mmol) y la mezcla se burbujeó con argón durante 5 minutos. El [1,1- bis (difenilfosfino) ferroceno] -dicloropaladio (54 mg, 0.07 mmol) se agregó y la reacción se burbujeó con argón durante 10 minutos adicionales antes de ser calentada a 90 °C durante 16 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de celite luego la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 6:4) proporcionaron el compuesto del título: RT = 4.07 min; m/z (ES+) = 463.4 [M + H] + .
Los siguientes compuestos se prepararon al hacer reaccionar bis (pinacolato) diboro con el producto intermedio apropiado de éster de triflluorometanosulfonato empleando el procedimiento resumido en la Preparación 53: Preparación 56: Ester isopropílico del ácido (S) -4-{6- [4-terc-butoxicarbonilamino-3 -oxo- 3 -p rrolidin- 1-ilpropil) -3 -fluorofenil] piridin-3 -iloximetil}piperidin-l-carboxílico El éster isopropílico del ácido 4 - ( 6 -bromopiridin-3 - iloximetil ) iperidin-l-carboxílico (Preparación 52, 133 mg, 0.37 mmol) , el éster terc-butílico del ácido (S)-{l-[2-fluoro-4 - (4,4,5, 5-tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2 -il.)bencil] -2-oxo-2-pirrolidin-l-iletil}carbámico (Preparación 53, 190 mg, 0.41 mmol), [1 , 1-bis (difenilfosfino) -ferroceno] dicloropaladio (31 mg, 0.04 mmol) y DIPEA (195 mg, 1.12 mmol) se combinaron en una mezcla de DMF (1.5 mL) y agua (0.5 mL) y la reacción se calentó a 80°C en un reactor de microondas durante 25 minutos. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (50 mL) luego se lavó con agua (3 x 30 mL) , una solución saturada de NaHC03 (2 x 30 mL) luego salmuera (30 mL) y se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, DCM : EtOAc , 7:3) proporcionaron el compuesto del título: RT = 4.10 min; m/z (ES+) = 613.5 [M + H] + .
Los siguientes compuestos se prepararon al hacer reaccionar el éster isopropílico del ácido 4 - ( 6 -bromopiridin- 3 - iloximetil ) -piperidin-l-carboxílico (Preparación 52) con el producto intermedio apropiado de éster de boronato empleando el procedimiento resumido en la Preparación 56: Preparación 59: Ester terc-butílico del ácido (S)-[l-(2-fluoro- - {6- [1- (4 -isopropilbencil) azetidin-3 -iloxi] piridin-3 -il}bencil) -2-oxo-2-pirrolidin-l-iletil] carbámico El compuesto del título se preparó a partir de la 5-bromo-2- [1- ( - isopropilbencil ) azetidin-3-iloxi] iridina (Preparación 16, 92 mg, 0.25 mmol) y éster terc-butílico del ácido (S) -{l- [2-fluoro-4- (4, 4,5, 5-tetrametil- [1,3,2] -dioxaborolan- 2 - il ) bencil] -2 -oxo- 2 -pirrolidin- 1 -iletil] carbámico (Preparación 53, 140 mg, 0.3 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 38: RT = 3.23 min; m/z (ES+) = 617.5 [M + H]+.
Preparación 60: Ester terc-butílico del ácido (S) - [2 - ( (S) -cianopirrolidin-l-il) -1- (2-fluoro-4-{6- [1- (4 -isopropilbencil) -azetidin-3-iloxi] iridin-3-il}bencil) -2-oxoetil] carbámico El compuesto del título se preparó a partir de la 5-bromo-2- [1- ( - isopropilbencil ) azetidin-3 -iloxi] iridina (Preparación 16, 111.1 mg, 0.31 mmol) y éster terc-butílico del ácido (S) -{ 2 -( (S) -2 -cianopirrolidin-l-il) -1- [2-fluoro-4- (4,4,5, 5-tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2-il) bencil] -2 -oxoetil }carbámico (Preparación 55, 180 mg, 0.37 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 38: RT = 3.22 min; m/z (ES+) = 642.5 [M + H] + .
Preparación 61: Ester isopropílico del ácido (S) -4- [1- (5-{4-[2- erc-butoxicarbonilamino-3- ( (S) -2-cianopirrolidin-l-il) -3-oxopropil] -3 -fluorofenil}piridin-2 -iloxi) etil] piperidin-1-carboxílico El éster isopropílico del ácido 4 - { 1- [5- (4 , 4 , 5 , 5 -tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2 -il ) iridin-2 - iloxi] etil } -piperidin-l-carboxílico (Preparación 21, 49 mg, 0.12 mmol) , el éster 4 - [2 - erc-butoxicarbonilamino-3 -( (S) -2 -cianopirrolidin- l-'il ) - 3 -oxopropil] -3-fluorofenílico del ácido (S) -trifluorometanosulfónico (Preparación 31, 50 mg, 0.1 mmol), [1 , 1-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (8 mg, 0.01 mmol) y trietilamina (41 µ?^, 0.29 mmol) se combinaron en una mezcla de DMF (0.75 mL) y agua (0.25 mL) y la reacción se calentó en un reactor de microondas a 80 °C durante 3 x 20 minutos. La mezcla luego se filtró a través de celite, lavando con EtOAc . El producto filtrado se lavó con agua (x 4) , ácido cítrico 1M, luego salmuera y se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 1:1) proporcionaron el compuesto del título: RT = 4.43 min; m/z (ES+) = 652.6 [M + H]+.
Los siguientes compuestos se prepararon al hacer reaccionar el éster de aril- o heteroaril -boronato apropiado con el producto intermedio apropiado de éster de trifluorometanosulfonato empleando un procedimiento similar a iloxi}piperidin-l- carboxilico Ester isopropílico del ácido (S) -4-{4' - [2-terc- RT = 4.32 butoxicarbonilami.no-3- (3,3- min ,¦ m/z 65 difluoropirrolidin-l-il) -3- (ES*) = oxopropil] -3' fluorobifenil- 634.3 [Ai 4-ilox }piperidin-l- + H] * carboxílico Ester isopropílico del ácido ? (S) -4-{4' - [2-terc-butoxi- RT = 4.33 carbonilamino-3- ( (S) -3- min m/z 66 fluoropirrolidin-l-il) -3- (ES*) = V oxopropil] -3' -fluorobifenil- 630.5 [ O ^ 3-iloximeti1 }piperidin-1- + ?G carboxílico Ester isopropílico del ácido (S) -4-{4' - [2-terc- RT = 4.43 butoxicarbonil-amino-3- ( (S) - min m/z 67 2-cianopirrolidin-l-il) -3- (ES*) = oxopropil] -3' -fluorobifenil- 637.5 [M 3 -iloximetil } -piperidin-1- + H]* carboxílico Preparación 68: Ester metílico del ácido (S) -2 - tere-butoxicarbonilamino- 3 - (4 - trifluorometanosulfoniloxi -fenil) ropiónico A una solución del éster metílico del ácido (S)-2-terc-butoxicarbonilamino-3 - (4 -hidroxifenil ) propiónico (2.90 g, 9.3 mmol) en MeCN (100 mL) se agregó N-feniltrif luorometano-sulfonamida (4.98 g, 13.9 mmol) y DIPEA (1.94 mL, 11.1 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas. Después de la concentración in vacuo, el residuo se disolvió de nuevo en EtOAc (400 mL) , el cual luego se lavó con una solución concentrada de NH4C1, agua y salmuera antes de ser secado (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la purificación por medio de la cromatografía en columna (S1O2, IH:EtOAc, 2:1) proporcionaron el compuesto del título: RT = 4.01 min; m/z (ES+) = 450.18 [M + Na]+.
Preparación 69: Ester isopropílico del ácido (S) -4- [4 ' - (2 -terc-butoxicarbonilamino-2 -metoxicarboniletil) bifenil -4 -iloximetil] piperidin- l-carbox£lico Una mezcla del éster metílico del ácido (S)-2- ere-butoxicarbonilamino-3 - (4 -trifluorometanosulfoniloxi -fenil) -propiónico (Preparación 68, 311 mg, 0.73 mmol) , el éster isopropílico del ácido 4- [4- (4 , 4, 5, 5-tetrametil [1,3,2] dioxaborolan-2 - il ) fenoximetil] piperidin- 1-carboxílico (Preparación 20, 352 mg, 0.87 mmol), trietilamina (0.3 mL, 2.15 mmol) y [1,1-bis (difenilfosfino) ferroceno] -dicloropaladio (78 mg, 0.10 mmol) en una solución de DMF (4 mL) y agua (1 mL) se calentó en un reactor de microondas a 80°C durante 20 minutos. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (200 mL) luego se lavó con una solución acuosa de HCl 1M, agua y salmuera antes de ser secada (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo y la purificación del residuo por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 2:1) proporcionaron el compuesto del título: RT = 4.64 min; m/z (ES+) = 572.46 [M + NH4] + .
Preparación 70: Ester isopropílico del ácido (S) -4- [4 ' - (2 -terc-butoxicarbonilamino-2 -carboxietil) bi fenil-4 - iloximetil] -piperidin-l-carboxílico A una solución del éster isopropílico del ácido (S) -4- [4 ' - (2- erc-butoxicarbonilamino-2 -metoxicarboniletil ) -bifenil-4-iloximetil] piperidin-l-carboxílico (Preparación 69, 202 mg, 0.36 mmol) en THF (15 mL) a 0°C se agregó agua (3 mL) e hidrato de hidróxido de litio (49 mg, 1.17 mmol) . El baño de hielo se retiró y la agitación continuó durante 18 horas a temperatura ambiente. Se agregó agua (50 mL) y el pH de la mezcla se ajustó a 2-3 con HCl acuoso, diluido. La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc y la fase orgánica se lavó con salmuera y se secó (MgS0 ) , luego la remoción del solvente in vacuo proporcionó el compuesto del título: RT = 4.15 min; m/z (ES+) = 558.5 [ + NH4] + .
Preparación 71: Ester isopropílico del ácido (S)-4-{4' terc-butoxicarbonilamino-3 - ( (S) -3 -fluoropirrolidin-l-il) -oxopropil] bifenil-4 -iloximetil}piperidin-l-carboxílico A una solución del éster isopropílico del ácido (S)-4-{4'-[2- terc-butoxicarboni lamino- 2 -carboxiet il ) bifenil-4 - iloximet il] piperidin- 1 -carboxí lico (Preparación 70, 88 mg, 0.16 mmol) y clorhidrato de (S) - ( + ) -3-f luoropirrol idina (42 mg, 0.33 mmol) en DMF (5 mL) se agregó HOBt (26 mg, 0.17 mmol) , EDCI (42 mg, 0.22 mmol) y DIPEA (0.12 mL, 0.69 mmol) . Después de la agitación a temperatura ambiente durante 12 horas, la mezcla de reacción se dividió entre EtOAc (100 mL) y agua/salmuera (1:1, 100 mL) . Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 50 mL) . Las capas orgánicas, combinadas se lavaron con una solución de HC1 1M (50 mL) , una solución de NaOH 1M (50 mL) y salmuera (50 mL) luego se secaron ( gS04) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH: EtOAc, 2:3) proporcionaron el compuesto del título: RT = 4.24 min; m/z (ES+) = 612.5 [M + H] + .
Preparación 72: Ester isopropílico del ácido (S) -4-{4' - [2- terc-butoxicarbonilamino-3 - ( (S) -2-carbamoilpirrolidin-l-il) - 3 -oxo-propil] bifenil-4-iloximetil}piperidin-l-carboxílico El compuesto del título se preparó a partir del éster isopropílico del ácido (S) -4- [4 ' - (2- terc- butoxicarboni lamino- 2 -carboxietil) bifenil -4 - iloximetil] - piperidin-l-carboxílico (Preparación 70, 88 mg, 0.35 mmol) y L- ( - ) -prolinamida (40 mg, 0.35 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 71: RT = 3.98 min; m/z (ES+) = 637.5 [M + H]+.
Preparación 73: Ester isopropílico del ácido (S) -4- {4 ' - [2 - terc-butoxicarbonilamino-3- ( (S) -2-cianopirrolidin-l-il) -3- oxopropil] bifenil-4-iloximetil}piperidin-l-carboxílico A una solución del éster isopropílico del ácido (S) - 4- {4 ' - [2- terc-butoxicarbonilamino-3- ( (S) -2-carbamoilpirrolidin- 1-il) -3-oxopropil] bifenil -4 -iloximetil }piperidin-l-carboxílico (Preparación 72, 71 mg, 0.11 mmol) en THF seco (5 mL) a 0°C se agregó piridina (20 µ?,, 0.25 mmol) y TFAA (80 mL, 0.58 mmol). La mezcla se agitó durante 10 minutos a 0°C antes de ser enfriada rápidamente por la adición de una solución saturada de NaHC03 (100 mL) . Los productos, orgánicos se extrajeron con EtOAc (3 x 50 mL) . Los extractos combinados se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron in vacuo, luego la purificación del residuo por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 1:2) proporcionó el compuesto del título: RT = 4.35 min; m/z (ES+) = 636.5 [M + NH4] + .
Preparación 74: Ester te.rc-bu.tilico del ácido (S)-{l-[2-fluoro-4- (6-fluoropiridin-3 -il) bencil] -2-oxo-2-pirrolidin-l-iletil}carbámico A una solución del éster 4-(2-terc-butoxicarbonilamino-3 -oxo-3 -pir olidin- 1- ilpropil ) -3 -fluorofenílico del ácido (S) -trifluorometanosulfónico (Preparación 33, 650 mg, 1.34 mmol) en una mezcla de THF y agua (5:1, 17 mL) se agregó ácido 2-fluoropiridil-5-borónico (246 mg, 1.75 mmol), fosfato de potasio (462 mg, 2.01 mmol) y [1 , 1-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (109 mg, 0.13 mmol) y la reacción se calentó en un reactor de microondas a 80°C durante 20 minutos. Se agregaron porciones adicionales del ácido 2-fluoropiridil-5-borónico (30 mg, 0.2 mmol) , fosfato de potasio (100 mg, 0.47 mmol) y [1,1-bis (difenilfosf ino) ferroceno] dicloropaladio (10 mg, 0.01 mmol) y la reacción se calentó a 80 "C durante 20 minutos adicionales. La mezcla se dividió ent.re DCM (150 mL) y agua (100 mL) y la fase orgánica se separó luego se lavó con una solución saturada de Na2C03 (100 mL) y se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la trituración del residuo con éter dietílico proporcionaron el compuesto del título: RT =N 3.67 min, m/z (ES+) = 432.3 [M + H] + .
Preparación 75: Ester isopropílico del ácido (S)-4-(5-{4- [terc-butoxicarbonilamino-3- ( (S) -2-cianopirrolidin-l-il) -3-oxopropil] -3-fluorofenil}piridin-2-iloxi) piperidin-l-carboxílico Una mezcla del éster isopropílico del ácido 4- [5- (4,4,5, 5 - tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan- 2 - il ) iridin-2 -iloxi] iperidin- 1 -carboxílico (Preparación 17, 239 mg, 0.61 mmol), éster 4 - [2 - terc-butoxicarbonilamino-3 - ( (S) - 2 -cianopirrolidin-l-il) -3-oxopropil] -3-fluorofenílico del ácido (S) -trifluorometanosulfónico (Preparación 31, 250 mg, 0.49 mmol), tetracis de paladio (113 mg, 0.1 mmol) y carbonato de potasio (169 mg, 1.23 mmol) en tolueno (5 mL) se burbujeó con argón durante 5 minutos y luego se calentó en un reactor de microondas a 75°C durante 30 minutos. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y los productos orgánicos se lavaron con agua luego salmuera y se secaron (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 75:25, 60:40) proporcionaron el compuesto del título: RT = 4.08 min; m/z (ES+) = 624.6 [M + H] " .
Preparación 76: Ester isopropílico del ácido ( S) - 4 - {4 ' - [2 -terc-butoxicarbonilamino-3- ( (S) - 2 -cianopirrol idin- 1 - il ) -3-oxopropil] -3' - f luorobifenil - 4 - iloxi }piperidin- 1-carboxí lico El compuesto del título se preparó a partir del éster isopropílico del ácido 4 - [4 - (4,4, 5, 5-tetrametil - [1, 3,2] dioxaborol an - 2 - i 1 ) f enoxi ] piperidin-1 - carboxí 1 ico (Preparación 19, 300 mg , 0.77 mmol) y éster 4 - [2 - t ere- but oxi carboni 1 amino - 3 - ( ( S) - 2 -c i anop i rrol idin- 1 - i 1 ) - 3 - oxopropi 1 ] - 3 - f luorof ení 1 ico del ácido ( S ) - t ri f 1 uorome t anosul f óni c o (Preparación 31, 314 mg , 0.62 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 38: RT = 4.25 min; m/z (ES+) = 623.6 [M + H] + .
Preparación 77: Ester isopropílico del ácido (S)-4-{5-[4 tere-butoxicarbonilamino- 3 -oxo-3 -pirrolidin- 1-ilpropil) -3 fluorofenil] piridin-2 -iloximetil }piperidin- 1-carboxílico El compuesto del título se preparó a partir del éster isopropílico del ácido - [5 - ( , , 5 , 5 - tetrametil - [1,3,2] dioxaborolan- 2 - il ) iridin-2 - iloximetil ] -piperidin- 1 -carboxílico (Preparación 18, 261 mg, 0.65 mmol) y éster 4- (2-tere-butoxicarbonilamino- 3 -oxo-3 -pirrolidin- 1-ilpropil ) -3 -fluorofenílico del ácido (S) - trifluorometanosulfónico (Preparación 33, 250 mg, 0.52 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 38: RT = 4.32 min; m/z (ES+) = 613.6 [M + H]+.
Preparación 78: Ester isopropílico del ácido (S) -4-{l- [4 ' - (2-fcere-butoxicarbonilamino-3-oxo-3-pirrolidin-l-ilpropil) -3' -fluorobifenil -4 -iloxi] etil}piperidin- 1-carboxílico El compuesto del título se preparó a partir del sopropílico del ácido 4 - { 1- [4 - ( , 4 , 5 , 5 - tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2 -il) fenoxi] etil }piperidin- 1-carboxílico (Preparación 22, 107.7 mg, 0.26 mmol) y éster 4-(2-terc-butoxicarbonilamino-3 -oxo-3 -pirrolidin- 1- ilpropil) -3 -fluorofenílico del ácido (S) - trifluorometanosulfónico (Preparación 33, 100 mg, 0.21 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 38: RT = 4.57 min; m/z (ES+) = 626.6 [M + H]+.
Preparación 79: Ester isopropílico del ácido (S) -4- (1-{4' - [2-terc-butoxicarbonilamino- 3- ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -3-oxopropil] -3 ' - fluorobifenil-4 - iloxi}etil ) iperidin- 1-carboxílico El compuesto del título se preparó a partir del éster isopropílico del ácido 4 - { 1- [4 - (4 , 4 , 5 , 5 - tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2-il) fenoxi] etil }piperidin- 1-carboxílico (Preparación 22, 260 mg, 0.63 mmol) y éster 4-[2-terc-butoxicarbonilamino-3 - ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -3-oxopropil] 3 - fluorofenílico del ácido (S) -trifluorometanosulfónico (Preparación 35, 252 mg, 0.5 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 38: RT: 4.42 min; m/z (ES+) = 644.6 [ + H]+.
Preparación 80: Ester 2 - terc-butílico del ácido (S)-7-hidroxi -3 , 4 -dihidro- 1H- isoquinolin-2 , 3 -dicarboxílico Una mezcla del ácido (S) -7 -hidroxi -1 , 2 , 3 , 4 -tetrahidroisoquinolin-3-carboxílico (5 g, 25.29 mmol) , dicarbonato de di- tere-butilo (6.6 g, 30.35 mmol) y trietilamina (3.42 mL, 25.29 mmol) en THF (40 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se dividió entre EtOAc (250 mL) y una solución de ácido cítrico 1M (500 mL) y la fase orgánica se separó antes de ser lavada con salmuera (500 mL) y secada (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la trituración con éter dietílico proporcionaron el compuesto del título: RT = 3.15 min, m/ z (ES+) = 294.1 [M + H] + .
Preparación 81: Ester terc-butílico del ácido (S) -3- ( (S) -2-carbamoilpirrolidin-l-carbonil) -7 -hidroxi -3 , 4 -dihidro-1H-isoquinolin-2 -carboxílico El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar el éster 2 - terc-butílico del ácido (SJ -7-hidroxi-3 , 4-dihidro-lH-isoquinolin-2 , 3 -dicarboxílico (Preparación 80, 2.05 g, 7.0 mmol) con L- ( - ) -prolinamida (1.6 g, 14.0 mmol) empleando un procedimiento similar a aquel resumido en la Preparación 29 pero utilizando trietilamina como la base: RT = 2.62 min, m/z (ES+) = 390.3 [M + H] + .
Preparación 82: Ester terc-butílico del ácido (S) -3- ( (S) -2-carbamoilpirrolidin- 1-carbonil) -7 - trifluorometanosulfoniloxi-3 , 4 -dihidro- 1H- isoquinolin-2 -carboxilico compuesto del título se preparó al hac reaccionar el éster terc-butílico del ácido (S) -3- ( (S) -2-carbamoilpirrolidin-l-carbonil) -7-hidroxi-3 , 4 -dihidro- 1H-isoquinolin-2 -carboxilico (Preparación 81, 900 mg, 2.31 mmol) con sulfonimida de N-feniltrifluorometano (909 mg, 2.54 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 30: RT = 3.41 min, m/z (ES+) = 522.3 [M + H] + .
Preparación 83: Ester terc-butílico del ácido (S) -3- ( (S) -2-cianopirrolidin- 1-carbonil) -7-trifluorometanosulfoniloxi- 3 , 4-dihidro-1H- isoquinolin-2 -carboxilico El compuesto del título se preparó al tratar el éster terc-butílico del ácido (S) -3- ( (S) -2-carbamoilpirrolidin-l carbonil) -7-trifluorometanosulfoniloxi-3 , 4 -dihidro-lH-isoquinolin-2-carboxílico (Preparación 82, 1.2 g, 2.3 mmol) con TFAA (1.62 mL, 11.52 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 47: RT = 3.93 min, m/z (ES+) = 504.3 [Ai + H] + . Preparación 84: Ester terc-butílico del ácido (S) -3- ( (S) -2-cianopirrolidin-1-carbonil) -7- [6- (1-isopropoxicarbonil-piperidin-4 -ilmetoxi)piridin-3-il] -3,4-dihidro-IH-isoquino1in-2 -carboxí1ico El preparó al hacer reaccionar eléster isopropílico del ácido 4- [5- (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2-il) piridin-2-iloximetil] -piperidin-l-carboxílico (Preparación 18, 145 mg, 0.36 mmol) con éster terc-butílico del ácido (S) -3- ( (S) - 2 -ciano irrolidin-l-carbonil ) -7 - trifluorometanosulfoniloxi -3 , 4 -dihidro- IH- isoquinolin-2 -carboxílico (Preparación 83, 151 mg, 0.3 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 38: RT : 4.32 min, m/z (ES+) = 632.6 [M + H]+.
Preparación 85: Ester isopropílico del ácido 4- (4-bromobenciloxi) piperidin-l-carboxílico El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar el éster isopropílico del ácido 4-hidroxipiperidin-1-carboxílico (Preparación 2, 2.05 g, 12 mmol) con bromuro de 4 -bromobencilo (3.0 g, 12 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 16 : RT = 4.20 min, m/z (ES+) = 356.1, 358.1 [M + H] + .
Preparación 86: Ester isopropílico del ácido 4- [4- (4, 4, 5, 5-tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2 -il) benciloxi] piperidin-1-carboxílico El a partir del éster isopropílico del ácido 4- (4-bromobenciloxi) iperidin-1-carboxílico (Preparación 85, 2.3 g, 6.46 mmol) empleando un procedimiento similar a aquel resumido en la Preparación 26: RT = 4.30 min, m/z (ES+) = 404.4 [M + H]+.
Preparación 87: Ester isopropílico del ácido (S) -4- [4' - (2-terc-butoxicarbonilamino-3-oxo-3-pirrolidin-l-ilpropil) -3' -fluorobifenil-4-ilmetoxi] piperidin-1-carboxílico El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar el éster isopropílico del ácido 4- [4- (4 , , 5 , 5- tet ratnet il - [1,3,2] dioxaborolan- 2 -il ) benciloxi] piperidin- 1-carboxílico (Preparación 86, 300 mg, 0.74 mmol) con éster 4 - (2-terc-butoxic arboni lamino- 3 - oxo -3-pirrolidin-l- ilpro i 1 ) - 3 -f luorof enílico del ácido (S) - trif luorometanosulfónico (Preparación 33, 240 mg , 0.5 mmol) empleando un procedimiento similar a aquel resumido en la Preparación 38: RT = 4.43 min, m/z (ES+) = 612.5 [M + H] +.
Preparación 88: Ester isopropílico del ácido (S)-4-{4'- [2 - erc- buto i carbóni lamino - 3 - ( (S) -3 - f luoropirrolidin-1 - i 1 ) - 3 - oxopropi 1] - 3 ' - f luorobi f eni 1 - 4 -ilmetoxi }piperidin- 1-carboxílico El compuesto del título se preparó · al hacer reaccionar el éster isopropílico del ácido 4- [4- (4,4,5,5 - tetramet i 1 - [1,3,2] dioxaborolan- 2 -i 1 ) benc i loxi ] iperidin- 1 - carboxíl ico (Preparación 86, 300 mg , 0.74 mmol) con éster 4- [2-terc-butoxicarbonilamino- 3 - ( (S) - 3 - f luoropirrol idin- 1 - i 1 ) -3-oxopropi 1 ] - 3 - f luorof ení 1 ico del ácido (S) -trif luorometanosulf ónico (Preparación 35, 249 mg , 0.5 mmol) empleando un procedimiento similar a aquel resumido en la Preparación 38: RT = 4.20 min, m/z (ES+) = 630.5 [M + H] + .
Preparación 89: Ester metílico del ácido (B) -3 - ( -benciloxi-2-fluorofenil) acrílico El (trifenilfosforaniliden) acetato de metilo (25.0 g, 74.8 mmol) se agregó a una solución de 4-benciloxi-2-fluorobenzaldehído (9.10 g, 39.5 mmol) en THF (400 mL) y la solución resultante se agitó bajo condiciones de reflujo durante 16 horas, antes de ser absorbida en sílice y purificada por medio de la cromatografía en columna (IH: EtOAc, 3:1) para proporcionar el compuesto del título: RT = 4.15 min; m/z (ES+) = 287,2 [ + H] + .
Preparación 90: Acido (E) -3- (4-benciloxi-2-fluorofenil) -acrílico Una solución de NaOH 1M (40 mL, 39.8 mmol) se agregó a una solución del éster metílico del ácido (E) -3- (4-benciloxi -2 - fluorofenil ) acrílico (Preparación 89, 9.50 g, 33.2 mmol) en MeOH (300 mL) y la suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente antes del calentamiento bajo condiciones de reflujo durante 1 hora para proporcionar una solución. El solvente se retiró in vacuo y el residuo se disolvió en EtOAc (300 mL) y agua (600 mL) antes de la adición de una solución de HC1 1M (50 mL) y la agitación a temperatura ambiente durante 30 minutos. La capa acuosa se separó y se extrajo adicionalmente con EtOAc (x 2) . Las capas orgánicas, combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron in vacuo para proporcionar el compuesto del título: RT = 3.72 min; m/z (ES+) = 562.3 [2 + NH4] +.
Preparación 91: (R) -3- [ (E) -3 - (4-Benciloxi-2-fluorofenil) -acriloil] -4- feniloxazolidin-2 -ona La trietilamina (4.60 mL, 33.0 mmol) y el cloruro de pivaloilo (3.60 mL, 28.2 mmol) se agregaron a una solución del ácido (E) -3- (4-benciloxi-2-fluorofenil) acrílico (Preparación 90, 6.20 g, 22.8 mmol) en THF (200 mL) a -78°C y se agitó a esta temperatura durante 15 minutos antes de la agitación a 0°C durante 1 hora. En un matraz de reacción separado, el n-butil-litio (1.6 M en hexano, 20 mL, 32.0 mmol) se agregó a una solución de R- (-) -4-fenil-2-oxazolidinona (5.00 g, 30.6 mmol) en THF (200 mL) a -78°C y se agitó a esta temperatura durante 20 minutos antes de la adición de la solución anterior, enfriada a -78°C, por vía de una cánula. La mezcla de reacción resultante se agitó a -78°C durante 1.5 horas y luego a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se agregó a una solución acuosa, concentrada de NH4C1 (300 mL) , luego la capa acuosa se separó y se extrajo adicionalmente con EtOAc (2 X 200 mL) . Las capas orgánicas, combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgS04) y se concentraron in vacuo. La recristalización (IH:EtOAc, 1:1, 250 mL) proporcionó el compuesto del título: RT = 4.08 min; m/z (ES+) = 418.2 [M + H] + .
Preparación 92: ( R) -3- [ ( R) -3- (4-Benciloxi-2-fluorofenil) -butiri] -4 - feniloxazolidin-2 -ona El sulfuro de dimetilo (30 mL) y el bromuro de metil-magnesio (solución 3.0M en Et20, 13.0 mL, 39.0 mmol) se agregaron a una suspensión de bromuro de cobre (I) -sulfuro de dimetilo (8.80 g, 42.9 mmol) en THF (60 mL) a -40°C y la mezcla de reacción resultante se agitó a esta temperatura durante 30 minutos antes del calentamiento de -20°C a -15°C. Una solución de la (R) -3- [ (E) -3- (4-benciloxi-2-fluorofenil) acriloil] -4-feniloxazolidin-2 -ona (Preparación 91, 40.0 g, 9.58 mmol) en THF (40 mL) se agregó gota a gota manteniendo la temperatura entre -25°C y -15°C y la solución se agitó a esta temperatura durante 2.5 horas, luego a temperatura ambiente durante 72 horas. La reacción se enfrió rápidamente con una solución acuosa, concentrada de HC1 (50 mL) y se filtró a través de celite. El producto filtrado se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y salmuera, se secó (MgS04) y se concentró in vacuo. La purificación por medio de la cromatografía en columna (IH:EtOAc, 3:1, 2:1) proporcionó el compuesto del título: RT = 4.35 min; m/z (ES+) = 434.3 [M + H] + .
Preparación 93: {R) -3- [ {2R, 3S) -3- (4-Benciloxi-5-bromo-2- fluorofenil) -2-bromobutiril] -4-feniloxazolidin-2-ona El dibutilborotriflato (10.0 mL, 10.0 mmol) y DIPEA (1.80 mL, 10.3 mmol) se agregaron a una solución de la (R) -3- [ (i?) -3- (4-benciloxi-2-fluorofenil) butiril] -4-feniloxazolidin-2- ona (Preparación 92, 3.00 g, 6.92 mmol) en DCM (50 mL) a -78 °C. La mezcla de reacción resultante se agitó a -78°C durante 10 minutos luego a 0°C durante 1 hora. La reacción se enfrió a - 78 °C y se transfirió, por vía de una cánula, a una solución de N-bromosuccinimida (3.71 g, 20.8 mmol) en DCM (50 mL) bajo argón, previamente enfriada a -78 °C. La reacción resultante se agitó a -78°C durante 2 horas y a 0°C durante 2 horas, antes de ser enfriada rápidamente con una solución acuosa de NaHC03 0.5 M. El DCM se retiró in vacuo, se agregó EtOAc y la capa orgánica se lavó con agua, salmuera, se secó (MgS04) y se concentró in vacuo.
La purificación por medio de la cromatografía en columna (IH:EtOAc, 3:1) proporcionó el compuesto del título: RMN ½ ¾ (400MHz, CDC13) 7.51 - 7.30 (m, 11H) , 6.68 (m, 1H) , 6.12 (m, 1H) , 5.26 (m, 1H) , 5.13 (s, 2H) , 4.59 (m, 1H) , 4.20 (m, 1H) , 3.63 (m, 1H) , 1.52 (m, 3H) .
Preparación 94: (R) -3- [(2S,3S) -2-Azido-3- (4-benciloxi-5-bromo-2-fluorofenil) butiril] -4-feniloxazolidin-2-ona La azida de ?,?,?' ,?' -tetrametilguanidinio (3.70 g, 23.4 mmol) se agregó a una solución de la (R) -3- [ [2R, 3S)-3-(4-benciloxi-5-bromo-2-fluorofenil) -2-bromobutiril] -4-feniloxazolidin-2-ona (Preparación 93, 3.40 g, 5.75 mmol) en MeCN (25 mL) y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y se lavó con agua y salmuera, se secó (MgS0 ) y se concentró in vacuo. La purificación por medio de la cromatografía en columna (IH:EtOAc, 2:1) proporcionó el compuesto del título: RT = 4.58 min; m/z (ES+) = 570.1, 572.1 [M + N¾]+.
Preparación 95: Acido (2S, 3S) -2-azido-3- (4-benciloxi-5-bromo-2-fluorofenil) butírico El peróxido de hidrógeno (solución acuosa al 35%, 5.00 mL) y monohidrato de hidróxido de litio (810 mg, 19.3 mmol) se agregaron a una solución de la (R) -3- [ (2S, 3S) -2-azido-3- (4-benciloxi-5-bromo-2-fluorofenil) butiril] -4 -feniloxazolidin-2 -ona (Preparación 94, 3.02 g, 5.46 mmol) en una mezcla de THF y agua (3:1, 100 mL) a 0°C y la solución resultante se agitó a esta temperatura durante 6 horas . La reacción se enfrió rápidamente con una solución acuosa de Na2S03 al 10% (p/v) y se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora antes del enfriamiento rápidamente con agua (250 mL) y la extracción con EtOAc (4 X 200 mL) . Los productos orgánicos, combinados se lavaron con una solución de HCl 0.5 M y salmuera, se secaron (MgS04) y se concentraron in vacuo para proporcionar el compuesto del título: RT = 4.03 min; m/z (ES+) = 425.0, 427.0 [M + H4] + .
Preparación 96: Clorhidrato del ácido (2S, 3S) -3- (2-fluoro-4-hidroxifenil) -2-metilbutirico El paladio al 10% sobre carbón (1.65 g) se agregó a una solución del ácido (2S, 3S) -2-azido-3- (4-benciloxi-5-bromo-2-fluorofenil) butírico (Preparación 95, 2.23 g, 5.46 mmol) en una mezcla de EtOH y agua (9:1, 200 mL) y la mezcla de reacción resultante se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno durante 72 horas, antes de la filtración a través de celite. El producto filtrado se concentró in vacuo y el resto se disolvió en agua y solución de HC1 1M, se lavó con EtOAc y se concentró in vacuo para proporcionar el compuesto del título: RT = 1.71 min; m/z (ES+) = 214.0 [M + H]+.
Preparación 97: Ester metílico del ácido {2S, 3S) -2 - terc-butoxicarbonilamino-3 - (4- terc-butoxicarboniloxi-2 - fluoro-fenil) butírico La trietilamina (700 µL, 5.00 mmol) y di -tere-but ildicarbonato (1.60 g, 7.33 mmol) se agregaron a una solución del clorhidrato del ácido (2S, 3S) - 3 - (2 - f luoro-4 -hidroxifenil) -2-metilbutírico (Preparación 96, 682 mg, 2.73 mmol) en una mezcla de dioxano y agua (19:1, 50 mL) y la solución resultante se agitó durante 72 horas. El solvente se retiró in vacuo y al residuo se agregó EtOAc (300 mL) y agua (100 mL) . La mezcla se hizo ácida con una solución de HCl 1M y se agitó vigorosamente. La capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc (2 X . 100 mL) y las capas orgánicas, combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron in vacuo. El resto se disolvió en una mezcla de tolueno y MeOH (4:1, 50 mL) y se enfrió a 0°C antes de la adición de trimetilsilildiazometano (2M en hexano, 2.5 mL, 5.0 mmol) . La mezcla de reacción resultante se agitó de 0°C a la temperatura ambiente durante 30 minutos, luego se enfrió rápidamente con AcOH (1 mL) y se concentró in vacuo. La purificación por medio de la cromatografía en columna (IH:EtOAc, 3:1) proporcionó el compuesto del título: RT = 4.10 min; m/z . (ES+) = 428.2 [M + H] + .
Preparación 98: Acido (2S, 3S) -2- fcerc-butoxicarbonilamino-3 -(4 - erc-butoxicarboniloxi-2 - fluorofenil) butírico compuesto del título se preparó a partir del éster metílico del ácido {2S, 3S) -2 - terc-butoxicarbonilamino-3 - (4 - terc-butoxicarboniloxi -2 -fluorofenil ) butírico (Preparación 97, 574 mg, 1.53 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 70: RMN K d? (400MHz, CD30D) : 7.35 (m, 1H) 6.95 (m, 2H) , 4.43 (m, 1H) , 3.49 (m, 1H) , 1.55 (s, 9H) , 1.36 (m, 12H) .
Preparación 99: Ester terc-butí lico del éster 4- [2-fc ere -buto i carbóni lamino -3- (3,3-difluoropirrolidin-l-i 1 ) - 1 -me ti 1 - 3 - oxopropi 1 ] - 3 - f luoro f ení li co del ácido (1S, 2S) -carbónico compuesto del título se preparó al hace reaccionar el ácido (2S, 3S) -2-terc-butoxicarboni lamino- 3 - ( 4 - tere- butoxicarboni loxi - 2 -fluorof enil ) butírico ( Preparación 98, 318 mg , 0.77 mmol) con clorhidrato de 3 , 3 - di f luoropirrol idina (226 mg , 1.57 . mmol) empleando un procedimiento similar a aquel resumido en la Preparación 71: RT = 4.05 rain, m/z (ES+) = 503.5 [M + H]+.
Preparación 100: Ester terc-butí lico del ácido (15, 2S) - [1- (3,3 -di f luoropirrol i din- 1 -carbóni 1 ) -2- ( 2 -fluoro-4-hidroxiEenil) ropil] carbámico A una solución del éster t erc-but i 1 i co del éster 4 - [ 2 - t ere - but oxi c arboni 1 ami no - 3 -( 3 , 3 -di f luoropi rrol idin - 1 - i 1 ) - 1 -met i 1 - 3 - oxoprop i 1 ] -3-f luorof ení 1 ico del ácido (1S, 2S) -carbónico (Preparación 99, 232 mg , 0.46 mmol) en DCM (8 mL) se agregó piperidina (2.0 mL , 20.2 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla resultante se dividió entre EtOAc (300 mL) y una solución de HC1 1M (100 mL) y la capa orgánica se separó, se lavó con agua luego con salmuera y se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo proporcionó el compuesto del título: R-T = 3.40 min, m/z (ES+) = 403.2 [M + H] + .
Preparación 101: Ester 4- [2- erc-butoxicarbonilamino-3 - (3, 3-difluoropirrolidin-l-il) -l-metil-3-oxopropil] -3-fluorofenílico del ácido (1S, 2S) - trifluorometanosulfónico El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar el éster terc-butílico del ácido ( 1S, 2S) - [1- ( 3 , 3 -difluoropirrolidin-l-carbonil) -2- (2-fluoro-4 -hidroxifenil ) -propil] carbámico (Preparación 100, 185 mg, 0.46 mmol) con sulfonimida de N- feniltrifluorometano (252 mg, 0.71 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 30: RT = 3.96 min, m/z (ES+) = 535.4 [M + H] + .
Preparación 102: Ester isopropílico del ácido 4-(5-{4- [ (1S, 2S) -2- erc-butoxicarbonilamino-3- (3, 3 -difluoropirrolidin-l-il) -l-metil-3-oxopropil] -3 -fluorofenil}piridin-2-iloximetil) -piperidin-l-carboxílico El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar el éster isopropílico del ácido 4 - [5 - (4 , 4 , 5 , 5-tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2 -il ) piridin-2-iloximetil] - piperidin- 1-carboxí lico (Preparación 18) con éster 4-[2- terc-butoxicarbonilamino-3- (3, 3 -di f luoropi rrol idin- 1 - i 1 ) - 1 -me t i 1 - 3 - oxoprop i 1 ] -3-f luorof enílico del ácido (1S, 2S) -trif luorometanosulf ónico .(Preparación 101) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 61: RT = 4.37 rain; m/z (ES+) = 663.5 [M + H]+.
Preparación 103: Ester terc-butí lico del ácido (S) -3-( (S) - 2- cianopirrolidin-l-carbonil) - 7 - { 6 - [1- ( 1 -isopropoxicarbonil-piperidin-4-il) etoxi] piridin-3-il}-3,4-dihidro-lH- i soquinol in - 2-carboxílico El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar el éster isopropílico del ácido 4-{l- [5- (4,4,5,5 - 1 et ramet i 1- [1, 3 , 2] dioxaborolan-2-il)piridin-2-iloxi] etil} -piperidin-1- carboxí 1 ico (Preparación 21, 150 mg, 0.36 mmol) con éster t erc-but í 1 i co del ácido (S) -3- ( (5) -2-cianopirrolidin-l-carbonil) -7-t r i f luorome ta o su 1 foniloxi-3 ,4-dihidro-lH-i soquinol in- 2 -carboxí lico (Preparación 83, 156 mg , 0.3 mmol) empleando el procedimiento resumido en la Preparación 38: RT : 4.39 min, m/z (ES+) = 646.6 [ M + H]+.
Preparación 104: Ester terc-butílico del ácido (S) -3- ( (S) -2-cianopirrolidin-l-carbonil) -7-{6- [ (S) -1- (1-isopropoxicarbonil-piperidin-4-il) etoxi] piridin-3-il} -3 , 4-dihidro-lH-isoquinolin-2-carboxílico El compuesto del título se proporcionó por vía de la separación mediante la HPLC quiral del éster terc-butílico del ácido (S) -3- ( (S) -2-cianopirrolidin-l-carbonil) -7- (6- [1- ( l-isopropoxicarbonilpiperidin- -il ) etoxi] piridin-3 - il } -3 , 4 -dihidro- 1H- isoquinolin-2 -carboxílico (Preparación 103): Daicel chiral pack IA 250 X 20 mm, MTBE : EtOH : DEA, 40:60:0.1, 10 mL/min, 285 nm.
Preparación 105: Ester terc-butílico del ácido (S) -3- ( (S) -2-cianopirrolidin-l-carbonil) -7-{6- [ (J?) -1- (1-isopropoxicarbonil-piperidin-4-il) etoxi] piridin-3 - il} -3 , 4-dihidro-lH-isoquinolin-2 -carboxílico El compuesto del título se proporcionó por vía de la separación mediante la HPLC quiral del áster terc-butílico del ácido (S) -3- ( (S) -2-cianopirrolidin-l-carbonil) -7- {6- [1-(l-isopropoxi-carbonilpiperidin-4-il) etoxi] piridin-3 - il } -3,4-dihidro-lH-isoquinolin-2-carboxílico (Preparación 103) : Daicel chiral pack IA 250 X 20 mm, MTBE : EtOH : DEA, 40:60:0.1, 10 mL/min, 285 nm.
Preparación 106: Ester isopropílico del ácido (S) -4- (4{4- [2-terc-butoxicarbonilamino-3 - ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -3-oxopropil] -3 - fluorofenil}piridin-2 - iloximetil) piperidin- 1-carboxílico Una solución del éster isopropílico del ácido 4- [4- (4,4,5, 5 - tetrametil - [1,3,2] dioxaborolan-2 - il ) piridin-2 -iloximetil] piperidin-l-carboxílico (Preparación 23, 910 mg, 2.25 mmol) y fluoruro ácido de potasio (878 mg, 11.24 mmol) en MeOH (9 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. El solvente se retiró in vacuo luego el residuo se lavó con éter dietílico y se recristalizó a partir de MeCN para proporcionar un sólido de color blanco. El material se combinó con el éster 4- [2- terc-butoxicarbonilamino-3- ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -3-oxopropil] 3-fluorofenílico del ácido (S) - trifluorometanosulfónico (Preparación 35, 588 mg, 1.17 mmol) , acetato de paladio (II) (26 mg, 1.17 mmol) y carbonato de potasio (462 mg, 3.35 mmol) en una mezcla de tolueno (5 mL) y agua (1 mL) y la reacción se calentó a 110°C durante 24 horas. Después del enfriamiento a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se extrajo con DCM (3 x 10 mL) y la fracciones orgánicas se combinaron, se secaron (MgS04) y el solvente se retiró in vacuo. La purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, IH:EtOAc, 7:3, 1:1) proporcionó el compuesto del título: RT = 4.20 min; m/z (ES+) = 631.4 [M + H]+.
Ejemplo 1: Ester isopropílico del ácido (S) -4 - (5- {4 - [2 -amino- 3 - (3 , 3 -di fluoropirrolidin-1 -il) -3-oxopropil] -3 -fluorofenil}piridin-2 -iloxi) piperidin- 1-carboxílico Una solución del éster isopropílico del ácido (S) -4- (5-{4- [2- terc-butoxicarbonilamino-3- (3, 3-difluoropirrolidin-1-il) -3-oxopropil] -3-fluorofenil}piridin-2-iloxi) piperidin-1-carboxílico (Preparación 38, 280 mg, 0.44 mmol) en DCM (5 mL) bajo argón se enfrió a 0°C. Se agregó TFA (1 mL) y la reacción se agitó a 0°C durante 2 horas. Una porción adicional de TFA (0.5 mL) se agregó y la agitación continuó durante 1 hora. La reacción se enfrió rápidamente con una solución saturada de NaHC03 y los productos orgánicos se extrajeron en DCM. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgS04) y el solvente se retiró in vacuo. La purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, DCM:MeOH, 98:2, 97:3, 95:5, 90:10, 80:20) proporcionó el compuesto del título: RT = 3.18 min; m/z (ES+) = 535.3 [M + H] + .
Los siguientes ejemplos se prepararon al tratar la amina protegida con carbamato de tere-butilo apropiada con TFA empleando un procedimiento similar a aquel resumido en el Ej em lo 1 : Ejemplo 17: Clorhidrato de éster isopropílico del 4- (5-{4- [2-amino-3- ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -3 oxopropil] -3 -fluorofenil}piridin-2 -iloxi) piperidin carboxílico Una solución del éster isopropílico del ácido (S) -4- (5- {4- [2 - terc-butoxicarbonilamino-3- ( (5) -3 -fluoropirrolidin-l-il) -3-oxopropil] -3-fluorofenil}piridin-2- iloxi) piperidin- 1-carboxílico (Preparación 39, 230 mg, 0.37 mmol) en DCM (4 mL) bajo argón se enfrió a 0°C. Se agregó TFA (1 mL) y la reacción se agitó durante 16 horas. La mezcla se diluyó con DCM y se agregó una solución saturada de Na2C03 para ajustar el pH. La fase orgánica se pasó a través de un separador de fases y el solvente se retiró in vacuo. La purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, DCM : eOH, 100:0, 95:5, 93:7) proporcionó el compuesto del título como su base libre. El producto se tomó en una solución de HCl 4M en dioxano y se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. La remoción del solvente in vacuo proporcionó el compuesto del título. RT = 2.81 min; m/z (ES+) = 517.4 [M + H] + .
Ejemplo 18: Sal de ácido p- toluensulfónico de la (S) -2-amino-3- (2-fluoro-4-{6- [1- (4 -isopropilbencil) azetidin-3-iloxi] -piridin-3 -il}fenil) -1-pirrolidin-l-il-propan-l-ona Una solución del éster terc-butílico del ácido (S) - [1- (2-fluoro-4- {6- [1- (4 - isopropilbencil ) azetidin-3-iloxi] -piridin-3 - il Jbencil ) -2-oxo-2-pirrolidin-l-il-etil] carbámico (Preparación 59, 75 mg, 0.12 mmol) en DCM (4 mL) bajo argón se enfrió a 0°C. Se agregó TFA (1 mL) y la reacción se agitó durante 3 horas. La mezcla se diluyó con DCM y una solución saturada de NaHC03 se agregó para ajustar el pH. La fase orgánica se separó, se secó (MgS04) y el solvente se retiró in vacuo. La purificación por medio de la cromatografía en columna (Si02, DCM :MeOH, 100:0, 98:2, 95:5, 90:10) proporcionó el compuesto del título como la amina libre. El producto se disolvió en DCM y monohidrato de ácido p-toluensulfónico (1 eq. , 15.2 mg, 0.08 mmol) se agregó como una solución en MeOH. La mezcla se agitó dúrate 15 minutos. La remoción del solvente in vacuo proporcionó el compuesto del título: RT = 2.57 min; m/z (ES+) = 517.5 [M + H] + .
Los siguientes ejemplos se prepararon al tratar la amina protegida con carbamato de tere-butilo apropiada con TFA empleando un procedimiento similar a aquel resumido en el Ejemplo 18.
Ejemplo 21: Ester isopropílico del ácido (S) -4-{4' - [1-amino- 2- ( (S) -3 - fluoropirrolidin-l-il) -2-oxoetil] bifenil- -iloxi} -piperidin-l-carboxílico Una solución del éster isopropílico del ácido 4-{4'- [1- terc-butoxicarbonilamino-2 - ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -2- oxoetil] bifenil-4 -iloxi }piperidin-l-carboxílico (Preparación 44, 106 mg, 0.18 ramol) en DCM (5 mL) bajo argón se enfrió a 0°C. Se agregó TFA (1 mL) y la reacción se agitó a 0°C durante 1.5 horas. La reacción se enfrió rápidamente por medio de la adición de una solución saturada de Na2C03 (30 mL) y los productos orgánicos se extrajeron en EtOAc (50 mL) . La capa orgánica se lavó con salmuera (50 mL) luego se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo proporcionó el compuesto del título: RT = 2.85 min; m/z (ES+) = 484.5 [ + H] + .
Ejemplo 22: Ester isopropílico del ácido 4- [ (J?) -1- (5-{4- [ (S) -2 -amino-3 - ( (S) -2 -cianopirrolidin-l-il) -3-oxopropil] -3-fluorofenil}piridin-2 -iloxi) etil] piperidin-l-carboxílico El compuesto del título se proporcionó por vía de la separación mediante la HPLC quiral del éster isopropílico del ácido (S) -4- [1- (5- (4- [2-amino-3- ( (S) -2-cianopirrolidin-l-il) -3-oxopropil] -3-fluorofenil}piridin-2-iloxi) etil] -piperidin-l-carboxílico (Ejemplo 10) : Daicel chiral pack IA 250 X 20 mm, eCN : MeOH :DEA, 25:75:0.1, 15 mL/min, 265 nm.
Los siguientes ejemplos se proporcionaron por vía de la purificación mediante la HPLC quiral de la mezcla relevante de diastereoisómeros , empleando procedimientos similares a aquel resumido en el Ejemplo 22.
Ejemplo 28: Clorhidrato de éster isopropílico del ácido 4 -{4' - [2-amino-3- ( (S) -2 -cianopirrolidin- 1- il) -3-oxopropil] bifenil -4 - iloximetil}piperidin-l-carboxílico A vina solución del éster isopropílico del ácido (S) -4- {4' - [2- fcerc-butoxicarbonilamino-3- ( (S) -2-cianopirrolidin-l-il) -3-oxopropil] bifenil-4-iloximetil}piperidin-l-carboxílico (Preparación 73, 56 rag, 0.09 mmol) en DCM se agregó TFA (2.5 mL) . Después de la agitación a temperatura ambiente durante 2.5 horas, la mezcla de reacción se concentró y el residuo se dividió entre EtOAc (100 mL) y una solución saturada de NaHC03 (100 mL) . Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 50 mL) . Las fracciones orgánicas, combinadas se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron in vacuo. La purificación del residuo por medio de la cromatografía en columna (Si02, DCM:MeOH, 100:7.5) proporcionó el compuesto del título como la amina libre. El producto de disolvió en MeOH (50 raL) y se trató con una solución de HCl 1M (1 mL) . La remoción del solvente in vacuo seguida por la co-destilación con MeOH (2 x 50 mL) proporcionaron el compuesto del título: RT = 2.97 min; m/z (ES+) = 519.5 [M + H] + . Ejemplo 29: Clorhidrato de áster isopropílico del ácido (S) -4-{4' - [2-amino-3- ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -3-oxopropil]bifenil-4-iloximetil}piperidin-1-carboxílico El compuesto del título se preparó a partir del éster isopropílico del ácido (S) -4- {4' - [2- erc-butoxicarbonilamino-3- ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -3-oxopropil]bifenil-4-iloximetil}piperidin-l-carboxílico (Preparación 71, 75 mg, 0.12 mmol) empleando el procedimiento resumido en el Ejemplo 28: RT = 3.03 min; m/z (ES+) = 512.4 [M + H]+.
Ejemplo 30: 2-Amino-3- (2-fluoro-4-{6- [1- (6-metilpirazin-2-il)piperidin-4-ilmetoxi] iridin-3-il}fenil) -1-pirrolidin-l-il-propan-l-ona Una solución del [ 1 - ( 6 -metilpirazin- 2 - il ) piperidin-4-il]metanol (144 mg, 0.7 mmol) y terc-butóxido de potasio (67 mg, 0.7 mmol) en THF (3 mL) se agitó durante 5 minutos antes de la adición del éster terc-butílico del ácido (S)-{l-[2-fluoro-4- (6 -fluoropiridin-3 - il) bencil] -2 -oxo-2 -pirrolidin-l-iletil}carbámico (Preparación 74, 75 mg, 0.17 mmol) y el calentamiento en un reactor de microondas a 150 °C durante 30 minutos. La mezcla de reacción se filtró a través de un tapón de MgS04 y el solvente se retiró in vacuo. La purificación del residuo por medio de la HPLC preparativa proporcionó el compuesto del título: RT = 2.82 min; m/z (ES+) = 519.5 [ + H]+.
Los siguiente ejemplos se prepararon al tratar el éster terc-butílico del ácido (S) - { 1- [2-fluoro-4- (6-fluoropiridin-3 - il) bencil] -2 -oxo-2 -pirrolidin-1- iletil } -carbámico (Preparación 74) con el alcohol apropiado empleando el procedimiento resumido en el Ejemplo 30.
Ej. Estructura Nombre LCMS 1- (4- {5- [4- (2-Amino- 3 -oxo-3 -pirrolidin- RT = 2.77 1-ilpropil) -3- min; m/z fluorofenil] piridin- 31 (ES+) = 2- 511.5 iloximetil Jpiperidin [Ai + H] * -1-il) -3 -met lbutan- 1-ona Ester isopropílico RT = 3.00 del ácido (4-{5- [4- min; m/z 32 (2-amino-3 -oxo-3 - (ES+) = pirrolidin-l- 527.5 ilpropil) -3- [M + H]* Ejemplo 34: (S) -2-Amino-3- (2-fluoro-4-{6- [1- (3-isoprop [1,2,4] oxadiazol-5-il) piperidin-4-ilmetoxi] piridin-3 - il} fenil) -1-pirrolidin-l- il-propan-l-ona El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar el [1- (3 - isopropil- [1 , 2 , ] oxadiazol- 5 - il)piperidin-4-il]metanol (157 rag, 0.7 mmol) con éster terc- butílico del ácido (S) - { 1- [2 - fluoro-4 - ( 6 - fluoropiridin-3 - il)bencil] -2-oxo-2-pirrolidin-l-iletil}carbámico (Preparación 74, 75 mg, 0.17 mmol) empleando el procedimiento resumido en el Ejemplo 30. La purificación adicional mediante la HPLC quiral proporcionó el compuesto del título: RT = 2.77 min; m/z (ES+) = 537.4 [M + H] + .
Ejemplo 35: (S) - 1- (4 - {5 - [4 - (2 -Amino- 3 -oxo- 3 -pirrolidin- 1-ilpropil) -3-fluorofenil]piridin-2-iloximetil}piperidin-l-il) -3 -metilbutan-l-ona El compuesto del título se preparó al hacer reaccionar la 1- (4 -hidroximetilpiperidin-l-il) -3 -metilbutan-l-ona (49 mg, 0.24 mmol) con éster terc-butílico del ácido (S)-{l- [2-fluoro-4- (6-fluoropiridin-3-il) bencil] - 2 -oxo- 2 -pirrolidin- 1-iletil }carbámico (Preparación 74, 70 mg, 0.16 mmol) empleando el procedimiento resumido en el Ejemplo 30. La purificación adicional mediante la HPLC quiral proporcionó el compuesto del título: RT = 2.77 min; m/z (ES+) = 511.5 [M + H] + .
Ejemplo 36: Ester isopropílico del ácido ( S) - 4 - {5 - [4 - (2 -amino- 3 -oxo-3 -pirrolidin- 1- ilpropil) -3- fluorofenil] piridin-2 -iloximetil}piperidin- 1-carboxílico El compuesto del título se preparó a partir del éster isopropílico del ácido (S) -4- { 5- [4- (2- tere- butoxicarbonilamino-3-oxo-3-pirrolidin-l-ilpropil) -3-fluorofenil] piridin-2 - iloximetil }piperidin-l-carboxilico (Preparación 77) empleando el procedimiento resumido en el Ejemplo 21: RT = 2.96 min; m/z (ES+) = 513.4 [M + H] + .
Ejemplo 37: Ester isopropílico del ácido 4 -{ (S) -1- [4 ' - ( (S) -2 -amino-3-oxo-3-pirrolidin-l-ilpropil) -3' - fluorobifenil-4 -iloxi] etil}piperidin-l-carboxílico El compuesto del título se proporcionó por vía de la separación mediante la HPLC quiral del éster isopropílico del ácido (S) -4- {l- [4 ' - (2-amino-3-oxo-3-pirrolidin-l-ilpropil ) -3 ' -fluorobifenil -4 -iloxi] etil }piperidin-l-carboxílico (Ejemplo 15) : Daicel chiral pack IA 250 X 20 mm, MeCN : eOH : THF : DEA, 50:50:2:0.1, 15 mL/min, 285 nm.
Ejemplo 38: Ester isopropílico del ácido 4 - { (R) -1- [4 ' - ( (£) -2 -amino-3 -oxo-3 -pirrolidin- 1- ilpropil) -3' - fluorobifenil-4 -iloxi] etil}piperidin-l-carboxílico compuesto del título se proporcionó por vía la separación mediante la HPLC quiral del éster isopropílico del ácido (£) -4- {l- [4 ' - (2-amino-3-oxo-3-pirrolidin-l- ilpropil) -3 ' -fluorobifeni 1-4- iloxi] et il }piperidin- 1- carboxílico (Ejemplo 15) : Daicel chiral pack IA 250 X 20 mm, MeCN : MeOH : THF : DEA, 5.0:50:2:0.1, 15 mL/min, 285 nm.
Ejemplo 39: Ester isopropílico del ácido 4 - ( (R) -1- {4 ' - [ (S) -2 - amino-3 - ( (S) -3 - fluoropirrolidin- 1-il) -3 -oxopropil] -3 ' - fluorobifenil-4 -iloxi}etil) piperidin-1 -carboxílico El compuesto del título se proporcionó por vía de la separación mediante la HPLC quiral del éster isopropílico del ácido ( S) -4 -( 1 -{ 4 '- [2 -amino- 3 -(( S) - 3 - fluoropirrolidin- 1 - il) -3-oxopropil] -3' -fluorobifenil-4-iloxi}etil) piperidin-1- carboxílico (Ejemplo 16) : Daicel chiral pack IA 250 X 20 mm, MeCN : MeOH : THF : DEA, 50:50:3:0.1, 15 mL/min, 285 nm.
Ejemplo 40: Ester isopropílico del ácido 4 - ( (S) -1- {4 ' - [ (S) -2 - amino-3- ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -3-oxopropil] -3' - fluorobifenil-4 - iloxi }etil) piperidin-1-carboxílico El compuesto del título se proporcionó por vía de la separación mediante la HPLC quiral del éster isopropílico del ácido (S) -4- (1- {4 ' - [2-amino-3- ( (S) -3-fluoropirrolidin-1-il) -3 -oxopropil] -3' - fluorobifenil-4 - iloxi } etil) piperidin- 1-carboxílico (Ejemplo 16) Daicel chiral pack IA 250 X 20 mm, MeCN : MeOH : THF : DEA, 50:50:3:0.1, 15 mL/min, 285 nm.
Ejemplo 41: Sal de ácido p- toluensulfónico de éster isopropílico del ácido (S) -4-{4' - [2-amino-3- ( (S) -3-fluoropirrolidin- 1-il) -3 -oxopropil] - 3 ' - fluorobifenil-4 -iloxi}piperidin-l-carboxílico A una solución del éster isopropílico del ácido (S) -4- {4' - [2- terc-butoxicarbonilamino-3- ( (S) -3-fluoropirrolidin-1-il) -3 -oxopropil] -3' -fluorobifenil-4-iloxi}piperidin-l-carboxílico (Preparación 64, 204 mg, 0.33 mmol) en DCM (5 mL) se agregó TFA (1 mL) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La reacción se enfrió rápidamente por medio de la adición de una solución saturada de NaHC03 (100 mL) luego la fase orgánica se separó y se lavó con salmuera (100 mL) , luego se secó (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo proporcionó el compuesto del título como la amina libre. El residuo se disolvió en DCM y se agregó una solución de monohidrato de ácido p-toluensulfónico (1 eq. , 52 mg, 0.27 mmol) en MeOH. La remoción del solvente in vacuo proporcionó el compuesto del título como su sal de ácido p-toluensulfónico: RT = 3.12 min; m/z (ES+) = 516.3 [M + H] + .
Los siguientes ejemplos se prepararon como sus sales de ácido p-toluensulfónico al tratar la amina protegida con carbamato de tere-butilo apropiada con TFA empleando el Ejemplo 45: Clorhidrato de éster isopropílico del ácido (S) -4-{4' - [2-amino-3- ( (S) -3- fluoropirrolidin-l-il) -3 -oxopropil] -3 ' -fluorobifenil-3-iloximetil}piperidin-l-carboxílico A una solución del éster isopropílico del ácido (S) - 4 - { ' - [2- t ere-butoxicarboni lamino- 3- ( (S) -3-fluoro-pirrol idin- 1 - i 1 ) - 3 -oxoprop 1 ] -3' - f luorobi feni 1 - 3 -i loximet i 1} -piperidin-1 - carboxí 1 ico (Preparación 66, 37 mg, 0.06 mmol) en DCM (5 mL) se agregó TFA (1 mL) . La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos luego se diluyó con DCM (150 mL) . Se agregó una solución saturada de NaHC03 (150 mL) y los productos orgánicos se separaron, se lavaron con salmuera y se secaron (MgS04) . La remoción del solvente in vacuo proporcionó el compuesto del título como la amina libre. El producto se disolvió en éter dietílico (10 mL) y se trató con algunas gotas de solución de HCl (4M en dioxano) . La decantación del solvente proporcionó el compuesto del título: RT = 2.95 min; m/z (ES+) = 530.4 [M + H] + .
Los siguientes ejemplos se prepararon al tratar la amina protegida con carbamato de tere-butilo apropiada con TFA empleando un procedimiento similar a aquel resumido en el Ejemplo 45.
Ejemplo 52: Clorhidrato de éster isopropílico del ácido 4- (4-{4- [2-amino-3- ( (S) -3 - fluoropirrolidin-l-il) -3- oxopropil] -3 - fluorofenil}piridin-2 -iloximetil) iperidin-1 carboxílico El compuesto del título se preparó a partir del éster isopropílico del ácido (S) -4 - (4 (4 - [2 - terc- butoxicarbonilamino-3- ( (S) -3-fluoropirrolidin-l-il) -3- oxopropil] -3 -fluorofenil }piridin- 2 -iloximetil) piperidin-1- carboxílico (Preparación 106, 150 mg, 0.24 mmol) empleando un procedimiento similar a aquel resumido en el Ejemplo 17: RT = 2.83 min; m/z (ES+) = 531.4 [M + H] + .
La actividad biológica de los compuestos de la invención se puede someter a prueba en los siguientes sistemas de ensayo: Ensayo Reportero de Levadura de GPR119 Ensayo Reportero de Levadura Los ensayos reporteros basados en células de levadura han sido descritos previamente en la bibliografía (véase por ejemplo Miret J. J. y colaboradores 2002, J. Biol . Chem. , 277:6881-6887; Campbell R.M. y colaboradores 1999, Bioorg. ed. Chem. Lett . , 9:2413-2418; King K. y colaboradores 1990, Science, 250:121-123) ; WO 99/14344; WO 00/12704; y US 6,100,042) . En resumen, las células de levadura han sido diseñadas de tal manera que la levadura endógena G-alfa (GPA1) ha sido suprimida y reemplazada por quimeras de proteína G construidas utilizando múltiples técnicas. Adicionalmente, la levadura endógena GPCR, Ste3 ha sido suprimida para permitir la expresión heteróloga de una GPCR de mamífero preferida. En la levadura, los elementos de la vía de transducción de señalización de feromonas, los cuales están conservados en las células eucarióticas (por ejemplo, la vía de proteína cinasa activada por mitógenos) , impulsan la expresión de Fusl. Al colocar la ß-galactosidasa (LacZ) bajo el control del promotor Fusl (Fuslp) , se ha desarrollado un sistema por medio del cual la activación de receptores conduce a una lectura enzimática.
Las células de levadura se transformaron por medio de una adaptación del método de acetato de litio descrito por Agatep y colaboradores (Agatep, R. y colaboradores. 1998, Transformation of Saccharomyces cerevisiae by the lithium acetate/single-stranded carrier DNA/polyethylene glycol (LiAc/ss-DNA/PEG) protocol . Technical Tips Online, Trends Journals, Elsevier) . En resumen, las células de levadura se desarrollaron durante toda la noche en placas de levadura/triptona (YT) . El ADN de cadena individual portador (10 µg) , 2 9 de cada uno de los dos plásmidos reporteros Fuslp-LacZ (uno con un marcador de selección de URA y uno con TRP) , 2 µg de GPR119 (receptor de humano o ratón) en un vector de expresión de levadura (2 µg de origen de replicación) y un amortiguador de acetato de litio/polietilenglicol/TE se pipetearon en un tubo Eppendorf . El plásmido de expresión de levadura que contiene el control de receptor/sin receptor tiene un marcador de LEU. Las células de levadura se inocularon en esta mezcla y la reacción procede a 30°C durante 60 minutos. Las células de levadura luego se impactaron con calor a 42 °C durante 15 minutos. Las células luego se lavaron y se esparcieron sobre placas de selección. Las placas de selección son medios de levadura definidos, sintéticos menos LEU, URA y TRP (SD-LUT) .
Después de la incubación a 30°C durante 2-3 días, las colonias que se desarrollaron sobre las placas de selección entonces se sometieron a prueba en el ensayo de LacZ.
Con el propósito de realizar ensayos fluorimétricos de enzimas para ß-galactosidasa , las células de levadura que llevaban el receptor GPR119 humano o de ratón se desarrollaron durante toda la noche en medio líquido de SD-LUT hasta una concentración insaturada (es decir, las células aún eran divisorias y no habían alcanzado todavía la fase estacionaria) . Se diluyeron en medio fresco hasta una concentración óptima del ensayo y 90 ?? de células de levadura se agregaron a placas de poliestireno negras de 96 pocilios (Costar) . Los compuestos, disueltos en DMSO y diluidos en una solución de DMSO al 10% hasta una concentración 10X, se agregaron a las placas y las placas se colocaron a 30 °C durante 4 horas. Después de 4 horas, el substrato para la ß-galactosidasa se agregó a cada pocilio. En estos experimentos, la di (ß-D-galactopiranosida) de Fluoresceína se utilizó (FDG) , un substrato para la enzima que libera fluoresceína, permitiendo una lectura fluorimétrica . 20 L por pocilio de FDG 500 µ?/Tritón X100 al 2.5% se agregaron (el detergente era necesario para volver permeables las células) . Después de la incubación de las células con el substrato durante 60 minutos, 20 µL por pocilio de carbonato de sodio 1M se agregaron para terminar la reacción y mejorar la señal fluorescente. Las placas luego se leyeron en un fluorímetro a 485/535 nm.
Todos los Ejemplos 1 a 52 mostraron actividad en este ensayo dando un incremento en la señal fluorescente de por lo menos ~ 1.5 veces aquel de la señal de fondo (es decir la señal obtenida en presencia de DIVISO al 1% sin compuesto) . Se pueden preferir los compuestos de la invención los cuales proporcionan un incremento de por lo menos 5 veces.
Ensayo de cA P Una línea de células estable que expresaba el GPR119 humano recombinante se estableció y esta línea de células se utilizó para investigar el efecto de los compuestos de la invención sobre los niveles intracelulares de AMP cíclico (cAMP) . Las monocapas de células se lavaron con una solución salina amortiguada con fosfato y se estimularon a 37 °C durante 30 minutos con varias concentraciones del compuesto en amortiguador de estimulación más DMSO al 1%. Las células luego se lisaron y el contenido de cAMP se determinó utilizando el kit de cAMP Perkin Elmer AlphaScreenMR (Ensayo Homogéneo de Proximidad Luminiscente Amplificado) . Los amortiguadores y las condiciones de ensayo fueron como se describe en el protocolo del fabricante.
Los compuestos de la invención produjeron un incremento dependiente de la concentración en el nivel intracelular de cAMP y tuvieron generalmente un valor EC50 de <10 µ?. Se pueden preferir los compuestos que muestran un valor EC50 menor que 1 µ? en el ensayo de cAMP.
Método de Ensayo de DPP-IV La actividad de DPP-IV se midió al supervisar la escisión del substrato peptídico fluorogénico, H-Gly-Pro-7-amino-4-metilcumarina (GP-AMC) por lo cual el producto 7-amino-4 -metilcumarina se cuantifica por medio de la fluorescencia en excitación 380 nm y emisión 460 nm. Los ensayos se llevaron a cabo en placas de 96 pocilios (Black OptiPlate- 96F) en un volumen total de 100 L por pocilio que consistía de Tris 50 mM pH 7.6, GP-AMC 100 µ?, DPP-IV humana recombinante 10-25 µ? y un intervalo de diluciones de inhibidor en una concentración final de 1% de DMSO. Las placas se leyeron en un fluorímetro después de 30 minutos de incubación a 37°C. Los residuos de DPP-IV humana recombinante Asn29-Pro766 se adquirieron de BioMol .
Todos los Ejemplos 1 a 52 mostraron actividad en este ensayo teniendo un valor IC50 de <20 µ?. Los compuestos de la invención de la fórmula (la) tienen generalmente un valor IC50 de <20 µ?.
Efectos anti-diabéticos de los compuestos de la invención en un modelo in vitro de células beta pancreáticas (HIT-T15) Cultivo de Células Las células HIT-T15 (pasada 60) se obtuvieron de ATCC y se cultivaron en medio RPMI1640 complementado con 10% de suero bovino fetal y selenito de sodio 30 nM. Todos los experimentos se realizaron con células en menos de la pasada 70, de acuerdo con la bibliografía, la cual describe propiedades alteradas de esta línea de células en los números de pasadas superiores a 81 (Zhang HJ, Walseth TF, Robertson RP. Insulin secretion and cAMP metabolism in HIT cells. Reciprocal and serial passage-dependent relationships . Diabetes. 1989 Jan; 38 ( 1) : 44 -8) .
Ensayo de cAMP Las células HIT-T15 se colocaron en medio de cultivo estándar en placas de 96 pocilios a 100,000 células/0.1 mL/pocillo y se cultivaron durante 24 horas y el medio luego se desechó. Las células se incubaron durante 15 minutos a temperatura ambiente con 100 µ? de amortiguador de estimulación (solución salina amortiguada de Hanks, HEPES 5 mM, IBMX 0.5 mM, BSA al 0.1%, pH 7.4). Este se desechó y se reemplazó por diluciones del compuesto superiores al intervalo de 0.001, 0.003, 0.01, 0.03, 0.1, 0.3, 1, 3, 10, 30 µ? en amortiguador de estimulación en presencia de DIVISO al 0.5%. Las células se incubaron a temperatura ambiente durante 30 minutos. Luego 75 uL de amortiguador de lisis (HEPES 5 mM, Tween-20 al 0.3%, BSA al 0.1%, pH 7.4) se agregaron por pocilio y la placa se agitó a 900 rpm durante 20 minutos. El material particulado se retiró por medio de la centrifugación a 3000 rpm durante 5 minutos, luego las muestras se transfirieron por duplicado a placas de 384 pocilios y se procesaron siguiendo las instrucciones del kit de ensayo de cAMP Perkin Elmer AlphaScreen1^. En resumen, se establecieron reacciones de 25 µ??? que contenían 8 µ??? de muestra, 5 µ1_> de mezcla de perlas aceptadoras y 12 ?? de mezcla de detección, de tal manera que la concentración de los componentes de reacción finales es la misma que aquella establecida en las instrucciones del kit . Las reacciones se incubaron a temperatura ambiente durante 150 minutos y la placa se leyó utilizando un instrumento Packard Fusión1"1. Las mediciones para el cAMP se compararon con una curva estándar de cantidades conocidas de cAMP (0.01, 0.03, 0.1, 0.3, 1, 3, 10, 30, 100, 300, 1000 nM) para convertir las lecturas a cantidades absolutas de cAMP. Los datos se analizaron utilizando el software XLfit 3.
Se descubrió que los compuestos representativos de la invención incrementan el cAMP en un valor EC50 menor que 10 µ? . Se pueden preferir los compuestos que muestran un valor EC50 menor que 1 µ? en el ensayo de cAMP.
Ensayo de secreción de insulina Las células HIT-T15 se colocan en un medio de cultivo estándar en placas de 12 pocilios a 106 células/l ml/pocillo y se cultivan durante 3 días y el medio luego se desecha. Las células se lavan x 2 con amortiguador Krebs-Ringer complementado (KRB) que contiene NaCl 119 mM, KCl 4.74 mM, CaCl22.54 mM, MgS04 1.19 mM, KH2P04 1.19 mM, NaHC03 25 mM, HEPES 10 mM a pH 7.4 y albúmina de suero bovino al 0.1%. Las células se incuban con 1 mi de KRB a 37 °C durante 30 minutos el cual luego se desecha. Esto es seguido por una segunda incubación con KRB durante 30 minutos, el cual se recolecta y se utiliza para medir los niveles básales de secreción de insulina para cada pocilio. Las diluciones de compuestos (0, 0.1, 0.3, 1, 3, 10 µ?) luego se agregan a los pocilios por duplicado en 1 mi de KRB, complementado con glucosa 5.6 mM. Después de la incubación durante 30 minutos a 37°C, las muestras se retiran para la determinación de los niveles de insulina. La medición de la insulina se realizó utilizando un kit de ELISA de insulina Mercodia Rat^, siguiendo las instrucciones del fabricante, con una curva estándar de concentraciones conocidas de insulina. Para cada pocilio, los niveles de insulina se corrigen por medio de la sustracción del nivel basal de secreción de la preincubación en ausencia de glucosa. Los datos se analizan utilizando el software XLfit 3.
Los compuestos de la invención incrementan preferiblemente la secreción de insulina en un valor EC50 menor que 10 (iM.
Pruebas de Tolerancia a la Glucosa Oral Los efectos de los compuestos de la invención sobre la tolerancia a la glucosa oral (Glc) se pueden evaluar en ratas macho Sprague-Dawley. El alimento se retira 16 horas antes de la administración de Glc y permanece retirado durante todo el estudio. Las ratas tienen acceso libre al agua durante el estudio. Se hace un corte a las colas de los animales, luego la sangre (1 gota) se retira para la medición de los niveles básales de Glc 60 minutos antes de la administración de la carga de. Glc. Luego, las ratas se pesan y se dosifican oralmente con el compuesto de prueba o vehículo (hidroxipropil-/?-ciclodextrina acuosa al 20%) 45 minutos antes de la remoción de una muestra de sangre adicional y el tratamiento con la carga de Glc (2 g kg"1 p.o.) . Las muestras de sangre se toman de la punta cortada de la cola 5, 15, 30, 60, 120 y 180 minutos después de la administración de Glc. Los niveles de glucosa en la sangre se miden justo después de la recolección utilizando un medidor de glucosa comercialmente disponible (OneTouch Ultra"1* de Lifescan) . Preferiblemente, los compuestos de la invención reducen estadísticamente la excursión de Glc en dosis de <100 mg kg1.
Los efectos de los compuestos de la invención sobre la tolerancia a la glucosa oral (Glc) también se pueden evaluar en ratones macho C57B1/6 o ratones macho ob/ob. El alimento se retira 5 horas antes de la administración de Glc y permanece retirado durante todo el estudio. Los ratones tienen acceso libre al agua durante el estudio. Se hizo un corte a las colas de los animales, luego la sangre (20 µL) se retira para la medición de los niveles básales de Glc 45 minutos antes de la administración de la carga de Glc. Luego, los ratones se pesan y se dosifican oralmente con el compuesto de prueba o vehículo (hidroxipropil-/?-ciclodextrina acuosa al 20% o Gelucire 44/14 acuoso al 25%) 30 minutos antes de la remoción de una muestra adicional de sangre (20 µ]1? ) y el tratamiento con la carga de Glc (2-5 g kg"1 p.o.) . Las muestras de sangre (20 µ?-? ) luego se toman 25, 50, 80, 120 y 180 minutos después de la administración de Glc. Las muestras de sangre de 20 µL para la medición de los niveles de Glc se toman de la punta cortada de la cola en micropipetas desechables (Dade Diagnostics Inc., Puerto Rico) y la muestra se agrega a 480 µL de reactivo de hemolisis. Las alícuotas de 20 µL por duplicado de la sangre hemolisada, diluida luego se agregan a 180 µL de reactivo de glucosa Trinders (método colorimétrico, enzimático (Trinder) de Sigma) en una placa de ensayo de 96 pocilios. Después del mezclado, las muestras se dejan a temperatura ambiente durante 30 minutos antes de ser leídas contra los estándares de Glc (conjunto estándar combinado de glucosa/nitrógeno úrico de Sigma) . Preferiblemente, los compuestos de la invención reducen estadísticamente la excursión de Glc en dosis <100 mg kg"1.
Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (20)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones:
1. Un compuesto de la fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo: caracterizado porque p es 1 o 2 ; cuando p es 2, Z es CHR1 o NR2; y cuando p es 1, Z es -N-CH2-Ph en donde el Ph es sustituido opcionalmente por 1 o 2 grupos seleccionados independientemente de alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, haloalquilo de 1 a 4 átomos de carbono y halo; R1 es -N(CH3) -C(0) -O-alquilo C2-C4 o - (CH3) -C (O) -0-cicloalquilo C3-C6 en donde el cicloalquilo es sustituido opcionalmente por alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; R2 es -C (O) -O-alquilo C2-C4, -C (O) -O-cicloalquilo C3-C6 en donde el cicloalquilo es sustituido opcionalmente por alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, -C (O) -alquilo C2-C , -C (O) -cicloalquilo C3-C6 en donde el cicloalquilo es sustituido opcionalmente por alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, o R2 es: donde T junto con -N=C- al cual está unido forma un anillo de heteroarilo de 5 o 6 miembros que contiene opcionalmente hasta 2 heteroátomos adicionales seleccionados de N, O y S; cuando T junto con -N=C- al cual está unido forma un anillo de heteroarilo de 5 miembros, R6 es alquilo de 2 a 4 átomos de carbono o cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono sustituido opcionalmente por alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, y cuando T junto con -N=C- al cual está unido forma un anillo de heteroarilo de 6 miembros, R6 es alquilo de 2 a 4 átomos de carbono, fluoro o cloro; Q es -O-, -0-CR8H- o -CR8H-0-; X es fenilo o un grupo heteroarilo de 5 o 6 miembros que contiene uno o más heteroátomos seleccionados de N, O y S; con la condición de que cuando Q sea -0-CR8H-entonces .X no es un grupo heteroarilo de 6 miembros; Y es un enlace, -CH2- o -CHMe- ; R3 y R3a se seleccionan independientemente de hidrógeno, fluoro o cloro, o cuando R7 es ciano, R3 puede ser metilo; con la condición de que cuando Y sea un enlace y R3 y R3a se encuentren en la posición orto con respecto al grupo Y, ambos son hidrógeno; R4 es hidrógeno o, cuando Y es -(¾- o -CHMe-, R4 puede ser -CH2- unido a la posición * en el anillo de fenilo para formar un heterociclo que contiene N de 6 miembros fusionado ; R5 es bencilo sustituido opcionalmente por uno o más grupos fluoro, cloro, ciano o metilo, o R5 es: donde r es l o 2 y m es 0, 1 o 2 ; W es CH2 o, cuando r es 2, puede ser S; cuando es CH2, R7 es fluoro o ciano, y cuando W es S, R7 es ciano; y R8 es hidrógeno o metilo.
2. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque tiene la estereoquímica definida en la fórmula (la) : (la)
3. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 o 2 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque p es 2.
4. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque Z es NR2.
5. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 4 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque R2 es -C(0)OR4.
6. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 4 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque R2 es: donde el anillo de heteroarilo de 5 o 6 miembros formado por T junto con el -N=C- al cual está unido se selecciona de oxadiazol y pirimidina.
7. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque X es fenilo en la posición meta o para o un anillo heteroaromático de 6 miembros en la posición meta o para que contiene uno o dos átomos de nitrógeno.
8. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 6 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque X es fenilo para-unido o un anillo heteroaromático de 6 miembros para-unido que contiene uno o dos átomos de nitrógeno.
9. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque X es fenilo o piridilo .
10. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque R3 es fluoro.
11. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque R4 es hidrógeno.
12. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones anteriores o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque R5 es:
13. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 12 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque r es 2.
14. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 12 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, caracterizado porque W es CH2.
15. Un compuesto, caracterizado porque es de conformidad con cualquiera de los ejemplos 1 a 52 como base libre o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
16. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un portador farmacéuticamente aceptable.
17. Uso de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o condición en la cual el GPR119 desempeña un papel principal, a un sujeto necesitado del mismo.
18. Uso de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad o condición en la cual el GPR119 y la DPP-IV desempeñan un papel principal, a un sujeto necesitado del mismo.
19. Uso de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de la diabetes tipo II, a un sujeto necesitado del mismo.
20. Uso de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la manufactura de un medicamento para el tratamiento de la obesidad, síndrome metabólico (síndrome X) , tolerancia deteriorada a la glucosa, hiperlipidemia, hipertrigliceridemia, hipercolesterolemia, bajos niveles de HDL o hipertensión, a un paciente necesitado del mismo .
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Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010149685A1 (en) 2009-06-24 2010-12-29 Boehringer Ingelheim International Gmbh New compounds, pharmaceutical composition and methods relating thereto
AU2010264720A1 (en) 2009-06-24 2011-12-08 Boehringer Ingelheim International Gmbh New compounds, pharmaceutical composition and methods relating thereto
US20130109703A1 (en) 2010-03-18 2013-05-02 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combination of a GPR119 Agonist and the DPP-IV Inhibitor Linagliptin for Use in the Treatment of Diabetes and Related Conditions
GB201114389D0 (en) 2011-08-22 2011-10-05 Prosidion Ltd Novel compounds
WO2012066077A1 (en) 2010-11-18 2012-05-24 Prosidion Limited 1,4 di substituted pyrrolidine - 3 - yl -amine derivatives and their use for the treatment of metabolic disorders
ES2602813T3 (es) 2011-06-09 2017-02-22 Rhizen Pharmaceuticals S.A. Nuevos compuestos como moduladores de GPR-119
US8853239B2 (en) * 2011-12-09 2014-10-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Compounds, pharmaceutical compositions and uses thereof
EP2872127A1 (en) 2012-07-11 2015-05-20 Elcelyx Therapeutics, Inc. Compositions comprising statins, biguanides and further agents for reducing cardiometabolic risk
KR101719321B1 (ko) * 2016-03-31 2017-03-23 충남대학교산학협력단 3-(4-클로로페닐)벤조[4, 5]이미다조[2, 1-b]싸이아졸-6-카복실산을 포함하는 항비만 또는 항우울증 치료용 조성물
CN109053524A (zh) * 2018-09-11 2018-12-21 山东谛爱生物技术有限公司 一种N-Boc-3-羟基氮杂环丁烷的制备方法
WO2023208081A1 (en) * 2022-04-28 2023-11-02 Shenzhen Bay Laboratory Substituted fluorosulfate and use thereof

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6100042A (en) 1993-03-31 2000-08-08 Cadus Pharmaceutical Corporation Yeast cells engineered to produce pheromone system protein surrogates, and uses therefor
GB9719496D0 (en) 1997-09-13 1997-11-19 Glaxo Group Ltd G protien chimeras
EP1123391A2 (en) 1998-09-01 2001-08-16 BASF Aktiengesellschaft Methods for improving the function of heterologous g protein-coupled receptors
US6221660B1 (en) 1999-02-22 2001-04-24 Synaptic Pharmaceutical Corporation DNA encoding SNORF25 receptor
RU2005117383A (ru) * 2002-11-07 2006-01-20 Мерк энд Ко., Инк. (US) Производные фенилаланина в качестве ингибиторов дипептидилпептидазы для лечения или профилактики диабета
KR101154830B1 (ko) 2003-12-24 2012-06-18 프로시디온 리미티드 Ｇｐｃｒ 수용체 효능제로서의 헤테로사이클릭 유도체
MX2007007553A (es) 2004-12-24 2007-08-15 Prosidion Ltd Agonistas del receptor acoplado a proteina g (gpr116) y uso de los mismos para tratar obesidad y diabetes.
JP5065908B2 (ja) 2004-12-24 2012-11-07 プロシディオン・リミテッド Ｇタンパク質結合受容体作動薬
GB0428514D0 (en) 2004-12-31 2005-02-09 Prosidion Ltd Compounds
WO2007003960A1 (en) 2005-06-30 2007-01-11 Prosidion Limited Gpcr agonists
JP2008545010A (ja) 2005-06-30 2008-12-11 プロシディオン・リミテッド Ｇタンパク質共役受容体アゴニスト
EP1910290A2 (en) 2005-06-30 2008-04-16 Prosidion Limited Gpcr agonists
US20090221644A1 (en) 2005-06-30 2009-09-03 Stuart Edward Bradley Gpcr Agonists
BRPI0710839A2 (pt) 2006-04-06 2011-08-23 Prosidion Ltd agonistas heterocìclicos de gpcr
GB0607196D0 (en) 2006-04-11 2006-05-17 Prosidion Ltd G-protein coupled receptor agonists
GB0610746D0 (en) 2006-06-01 2006-07-12 Prosidion Ltd Method of treatment
BRPI0719941A2 (pt) * 2006-12-06 2014-04-22 Smithkline Beecham Corp Composto, uso de um composto, método para o tratamento de distúrbios ou condições metabólicos, composição farmacêutica, e, processo para a preparação de uma composição farmacêutica
BRPI0806312A2 (pt) 2007-01-04 2011-09-06 Prosidion Ltd agonistas cgpr piperidina
EA015129B1 (ru) 2007-01-04 2011-06-30 Прозидион Лимитед Пиперидиновые агонисты gpcr
PE20081849A1 (es) 2007-01-04 2009-01-26 Prosidion Ltd Derivados de piperidin-4-il-propoxi-benzamida como agonistas de gpcr
GB0700122D0 (en) 2007-01-04 2007-02-14 Prosidion Ltd GPCR agonists
PE20081659A1 (es) 2007-01-04 2008-10-24 Prosidion Ltd Agonistas de gpcr
US20100286112A1 (en) 2007-09-10 2010-11-11 Oscar Barba Compounds for the treatment of metabolic disorders
GB0720389D0 (en) 2007-10-18 2008-11-12 Prosidion Ltd G-Protein Coupled Receptor Agonists
KR101136774B1 (ko) 2007-10-18 2012-04-19 제이엑스 닛코 닛세키 킨조쿠 가부시키가이샤 금속 피복 폴리이미드 복합체 및 그 복합체의 제조 방법 그리고 전자 회로 기판의 제조 방법
CN101621337B (zh) 2008-06-30 2013-08-07 华为技术有限公司 一种时延调节装置与方法
US20110269734A1 (en) 2008-07-10 2011-11-03 Prosidion Limited Piperidinyl gpcr agonists
GB0812641D0 (en) 2008-07-10 2008-08-20 Prosidion Ltd Compounds
JP2011527332A (ja) 2008-07-10 2011-10-27 プロシディオン・リミテッド ピペリジンｇｐｃｒ作動薬
GB0812648D0 (en) 2008-07-10 2008-08-20 Prosidion Ltd Compounds

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