MX2011008496A - Derivados de triazolopiridina como inhibidores de proteinas cinasas activadas por mitogeno p38 (map). - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) que son inhibidores de cinasa p38 MAP, útiles como agentes anti-inflamatorios en el tratamiento de, entre otros, enfermedades del tracto respiratorio en donde; R1 es alquilo C1-C4, cicloalquilo C3-C6, fenilo el cual es opcionalmente sustituido, heteroarilo monocíclico de 5 o 6 elementos el cual es opcionalmente sustituido, o un radical de fórmula (II) en donde n es 1 o 2, y R3 y R4 son independientemente H o alquilo C1-C4, o R3 y R4 tomados junto con el nitrógeno al cual están unidos forman un anillo heterociclico de 6 elementos opcionalmente que contiene un heteroátomo adicional seleccionado de N y O; Y es -O- o S(O)p- en donde p es 0, 1 o 2; A es un radical arileno divalente opcionalmente sustituido, o un radical heteroarileno mono- o bicíclico, o un radical cicloalquileno nt divalente C3-C6 que tiene 5 o 6 átomos de anillo, o un radical piperidinileno en donde el nitrógeno del anillo se enlaza a R2NHC(=O)W-; W es un enlace, -NH- o -C(RA) (RB), en donde RA y RB son independientemente H, metilo, etilo, amino, hidroxilo o halo; y R2 es un radical como se define en las reivindicaciones.

Description

DERIVADOS DE TRIAZOLOPIRIDINA COMO INHIBIDORES DE PROTEINAS CINASAS ACTIVADAS POR MITOGENO P38 (MAP) Campo de la Invención Esta invención se refiere a compuestos y composiciones que son inhibidores de p38 MAPK, útiles como agentes anti- inflamatorios en el tratamiento de, entre otros, enfermedades del tracto respiratorio.

Antecedentes de la Invención Las proteínas cinasas activadas por mitógeno (MAPK) constituyen una familia de serina/treonina cinasas dirigidas a prolina que activan sus sustratos por fosforilación dual. Existen cuatro isoformas humanas conocidas de cinasa p38 MAP, ?38a, ?38ß, ?38? y ?38d. Las cinasas p38, las cuales también son conocidas como proteínas anti - inflamatorias de enlace al fármaco supresoras de citocina (CSBP) , proteínas cinasas activadas por estrés (SAPK) y RK, son responsables de la fosforilación (Stein et al., Ann. Rep. Med Chem. , 1996, 31, 289-298) y activación de factores de transcripción (tales como ATF-2, MAX, CHOP y C/ERPb) así como también otras cinasas (tales como MAPKAP-K2/3 o MK2/3) , y son las mismas activadas por estrés físico y químico (por ejemplo, UV, estrés osmótico) , citocinas pro- inflamatorias y lipopolisacáridos bacterianos (LPS) (Herlaar E. & Brown Z., Molecular Medicine Today, 1999, 5, 439-447) . Los productos de Ref . : 222409 fosforilación de p38 han sido mostrados por mediar la producción de citocinas proinflamatorias , que incluyen factor alfa de necrosis del tumor (TNF a) e interleucina- ( IL- ) - 1 , y ciclooxigenasa-2 (COX-2). IL-1 y TNFa también son conocidos por estimular la producción de otras citocinas proinflamatorias tales como IL-6 e IL-8.

IL-1 y TNFa son sustancias biológicas producidas por una variedad de células, tales como monocitos o macrófagos . IL-1 ha sido demostrada por mediar una variedad de actividades biológicas mostradas por ser importantes en la inmunorregulación y otras condiciones fisiológicas tales como inflamación (por ejemplo, Dinarello et al, Rev. Infect . Disease, 1984, 6, 51). La producción excesiva o no regulada de TNF (particularmente TNFa) se ha implicado en la mediación o exacerbación de un número de enfermedades, y se cree que el TNF puede causar o contribuir a los efectos de inflamación en general. La IL-8 es un factor quimiotáctico producido por varios tipos de células que incluyen células mononucleares , fibroblastos, células endoteliales y queratinocitos . Su producción de células endoteliales es inducida por IL-1, TNF, o lipopolisacárido (LPS) . La IL-8 estimula un número de funciones in vitro. Se ha mostrado por tener propiedades quimioatacantes por neutrófilos, linfocitos-T y basófilos. El incremento en producción de IL-8 es también responsable de la quimiotaxis de neutrófilos en el sitio inflamatorio in vi o.

La inhibición de la transducción de señal vía p38, la cual además de IL-1, TNF e IL-8 descritos anteriormente también se requiere para la síntesis y/o acción de varias proteínas pro- inflamatorias adicionales (por ejemplo, IL-6, GM-CSF, COX-2, colagenasa y estromelisina) , se espera que sea un mecanismo altamente efectivo para regular la activación excesiva y destructiva del sistema inmune. Esta expectación es soportada por las actividades anti- inflamatorias potentes y diversas descritas por inhibidores de cinasa p38 (Badger et al., J. Pharm. Exp . Thera. , 1996, 279, 1453-1461; Griswold et al, Pharmacol. Comm. , 1996, 7, 323-229). En particular, los inhibidores de cinasa p38 han sido descritos como agentes potenciales para tratar artritis reumatoide . Además de enlaces entre la activación de p38 e inflamación crónica y artritis, existen también datos que implican un papel para p38 en la patogénesis de enfermedades de las vías respiratorias en particular COPD y asma. El estímulo de estrés (que incluye humo de tabaco, infecciones o productos oxidativos) puede causar inflamación dentro del ambiente pulmonar. Inhibidores de p38 se han mostrado por inhibir LPS y TNF-a IL-?ß, IL-6, IL-4, IL-5 y IL-13 de las vías respiratorias inducidos por ovalbúmina (Haddad et al, Br. J. Pharmacol., 2001, 132 (8), 1715-1724; Underwood et al, Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. 2000, 279, 895-902; Duan et al., 2005 Am. J. Respir. Crit. Care ed. , 171, 571-578; Escort et al Br. J. Pharmacol . , 2000, 131, 173-176; Underwood et al . , J. Pharmacol. Ex . Ther. 2000, 293, 281-288). Además, inhiben significantemente la neutrofilia y la liberación de MMP-9 en LPS, ozono o modelos animales de humo de cigarro. Existe también un cuerpo significante de datos preclínicos que resaltan los beneficios potenciales de la inhibición de la cinasa p38 que podría ser relevante en el pulmón (Lee et al., Immunopharmacology, 2000, 47, 185-200). De este modo, la inhibición terapéutica de activación de p38 puede ser importante en la regulación de inflamación de las vías respiratorias .

La implicación de la trayectoria de p38MAPK en varias enfermedades ha sido revisada por P. Chopra et al. (Expert Opinión on Investigational Drugs, 2008, 17(10), 1411-1425) . Se cree que los compuestos de la presente invención pueden ser usados para tratar enfermedades mediadas por p38 tales como: asma, broncoconstricción crónica o aguda, bronquitis, lesión pulmonar aguda y bronquiectasis , hipertensión arterial pulmonar, tuberculosis, cáncer pulmonar, inflamación en general (por ejemplo, enfermedad inflamatoria del intestino), artritis, neuroinflamación, dolor, fiebre, enfermedad fibrótica, trastornos y enfermedades pulmonares (por ejemplo, lesión alveolar hiperóxica) , enfermedades cardiovasculares, lesión de reperfusión post- isquémica e insuficiencia cardiaca congestiva, cardiomiopatía , apoplejía, isquemia, lesión de reperfusión, lesión por reperfusión renal, edema cerebral, neurotrauma y trauma cerebral, trastornos neurodegenerativos, trastornos del sistema nervioso central, enfermedades hepáticas y nefritis, condiciones gastrointestinales, enfermedades ulcerativas, enfermedad de Crohn, enfermedades oftálmicas, condiciones oftalmológicas, glaucoma, lesión aguda al tejido ocular y traumas oculares, diabetes, nefropatía diabética, condiciones relacionadas a la piel, mialgias debido a infección, influenza, choque endotóxico, síndrome de choque tóxico, enfermedad autoinmune, rechazo al injerto, enfermedad de resorpción ósea, esclerosis múltiple, psoriasis, eczema, trastornos del sistema reproductivo femenino, condiciones patológicas (pero no malignas) , tales como hemangiomas , angiofibroma de la nasofaringe, y necrosis avascular de hueso, tumores benignos y malignos/neoplasia que incluye cáncer, leucemia, linfoma, lupus ertrematoso sistémico (SLE) , angiogénesis que incluye neoplasia, hemorragia, coagulación, daño por radiación y/o metástasis. La liberación crónica del TNF activo puede causar caquexia y anorexia, y el TNF puede ser letal. El TNF también se ha implicado en enfermedades infecciosas. Estas incluyen, por ejemplo, malaria, infección micobacteriana y meningitis. Estas también incluyen infecciones virales, tales como VIH, virus de la influenza y virus del herpes, que incluyen virus del herpes simple tipo-1 (HSV-1) , virus del herpes simple tipo-2 (HSV-2) , citomegalovirus (CMV) , virus de varicela-zoster (VZV) , virus Epstein-Barr , virus del herpes-6 humano (HHV-6) , virus del herpes-7 humano (HHV7) , virus del herpes-8 (HHV-8) , pseudorabias y rinotraqueítis , entre otros.

Los inhibidores de cinasa P38 conocidos han sido revisados por G. J. Hanson (Expert Opinions on Therapeutic Patents, 1997, 7, 729-733) J Hynes et al. (Current Topics in Medicinal Chemistry, 2005, 5, 967-985), C. Domínguez et al (Expert Opinions on Therapeutics Patents, 2005, 15, 801-816) y L . H. Pettus & R. P. urtz (Current Topics in Medicinal Chemistry, 2008, 8, 1452-1467) . Los inhibidores de cinasa P38 que contienen una porción de triazolopiridina se conocen en la técnica, por ejemplo, de los documentos WO07/091152, WO04/072072, O06/018727.

Breve Descripción de la Invención Los compuestos de la presente invención son inhibidores de la próteína cinasa activada por mitógeno p38 ("p38 MAPK" , "cinasa p38" o "p38"), que incluyen cinasa p38a, y son inhibidores de la producción de citocina y quimiocina que incluyen producción de TNFa e IL-8. Tienen un—número de aplicaciones terapéuticas en el tratamiento de enfermedades inflamatorias, particularmente enfermedades de las vías respiratorias alérgicas y no alérgicas, más particularmente enfermedades de las vías respiratorias inflamatorias u obstructivas tales como enfermedad pulmonar obstructiva crónica ("COPD") y asma. Son por lo tanto particularmente adecuados para suministro pulmonar, por inhalación por la nariz o boca.

De conformidad con la invención se proporciona un compuesto de la fórmula (I) , o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable: en donde; R1 es alquilo Cx-C6, cicloalquilo C3-C6, fenilo el cual es heteroarilo monocíclico de 5 o 6 elementos opcionalmente sustituido, el cual es opcionalmente sustituido o un radical de la fórmula (II) en donde n es 1 o 2; y R3 y R4 son independientemente H o alquilo Ci-C3, o R3 y R4 tomados junto con el nitrógeno al cual están unidos forman un anillo heterocíclico de 6 elementos que opcionalmente contienen un heteroátomo adicional seleccionado de N y O; Y es -0- o -S(0)p- en donde p es 0 , 1 o 2 ; A es un radical arileno divalente opcionalmente sustituido, o un radical heteroarileno mono o bicíclico, o un radical cicloalquileno divalente C3-C6 que tiene 5 o 6 átomos en el anillo, o un radical piperidinileno en donde el nitrógeno del anillo está ligado a R2NHC (=0) - ; W es un enlace, -NH- o -C(RA) (RB)~, en donde RA y RB son independientemente H, metilo, etilo,- amino, hidroxilo o halo; y R2 es un radical de la fórmula (IIIA) , (IIIB) o (IIIC) : (IIIA) (IIIB) (IIIC) · en donde m es 0 o 1; q es 0 , 1 , 2 o 3 ; T es -N= o -CH=; R5 es H o F; R7 es -CH3, -C2H5, -CH20H, -CH2SCH3í -SCH3 o -SC2H5; R8 es -CH3 o -C2H5; y cada incidencia de R6 es independientemente H, alquilo Ci-C6, hidroxi o halo; o una incidencia única de R6 es un radical de la fórmula (IVA) , (IVB) o (IVC) NR61aR61b W"-r TNR61aR61b (IVA) (IVB) (IVC) mientras cualquier otra incidencia de R6 es independientemente H, alquilo Ci-C6, hidroxilo o halo; en donde n y p son como se definen anteriormente; y en donde en R6 R61a y R61 son H, alquilo, o R61a y R61b se pueden unir junto con el nitrógeno al cual están unidos para formar un anillo heterocíclico que opcionalmente contiene un heteroátomo adicional seleccionado de N y O.

En otro aspecto, la invención incluye composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de la invención, junto con uno o más portadores y/o excipientes farmacéuticamente aceptables. Particularmente preferidas son composiciones adaptadas para inhalación por administración pulmonar .

En otro aspecto, la invención incluye el uso de un compuesto de la invención para el tratamiento de enfermedades o condiciones las cuales se benefician de la inhibición de la actividad de cinasa p38 MAP. El tratamiento de enfermedades de las vías respiratorias inflamatorias u obstructivas es un uso preferido. Todas las formas de enfermedades de las vías respiratorias inflamatorias u obstructivas son potencialmente tratables con los compuestos de la presente invención, en particular una enfermedad de las vías respiratorias inflamatoria u obstructiva que es un miembro seleccionado del grupo que consiste de neumonía eosinofílica crónica, asma, COPD, COPD que incluye bronquitis crónica, enfisema pulmonar o disnea asociada o no asociada con COPD, COPD que se caracteriza por obstrucción de las vías respiratorias progresiva, irreversible, síndrome de angustia respiratoria en adultos (ARDS) , exacerbación de hiper-reactividad de las vías respiratorias consecuente a otra terapia de fármaco y enfermedad de las vías respiratorias que se asocia con hipertensión pulmonar, enfermedades inflamatorias crónicas que incluyen fibrosis quística, bronquiectasis y fibrosis pulmonar (Idiopática) . La eficacia se anticipa cuando inhibidores de cinasa p38 son administrados ya sea localmente al pulmón (por ejemplo, por inhalación o suministro nasal) o vía rutas sistémicas (por ejemplo, suministro oral, intravenoso y subcutáneo) .

Descripción Detallada de la Invención Terminología Como se usa en la presente, el término "alquilo (Ca-Cb) " en donde a y b son números enteros, se refiere a un radical alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene desde a hasta b átomos de carbono. De este modo, cuando a es 1 y b es 6, por ejemplo, el término incluye metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, t-butilo, n-pentilo y n-hexilo.

Como se usa en la presente, el término "carbocíclico" se refiere a un radical mono, bi o tricíclico que tiene hasta 16 átomos en el anillo, todos los cuales son carbono, e incluye arilo y cicloalquilo .

Como se usa en la presente, el término "cicloalquilo" se refiere a un radical carbocíclico saturado monocíclico que tiene de 3-8 átomos de carbono e incluye, por ejemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y ciclooctilo.

El término "radical cicloalquileno divalente" se refiere a un radical cicloalquilo que tiene dos valencias insatisfechas tales como 1 , 3 -ciclopentileno y 1,4-ciclohexileno, como sigue: Como se usa en la presente, el término no calificado "arilo" se refiere a un radical aromático carbocíclico mono o bicíclico, e incluye radicales que tienen dos anillos aromáticos carbocíclicos monocíclicos los cuales están directamente ligados por un enlace covalente. Ilustrativo de tales radicales son fenilo, bifenilo y naftilo.

El término "radical arileno divalente" se refiere a un radical arilo raonocíclico o bicíclico que tiene dos valencias insatisfechas tales como 1,3-fenileno o 1,4-fenileno como sigue: o 1 , 4 -naftalenilo como sigue: Como se usa en la presente, el término no calificado "heteroarilo" se refiere a un radical aromático mono o bicíclico que contiene uno o más heteroátomos seleccionados de S, N y 0, e incluye radicales que tienen dos de tales anillos monocíclicos , o uno de tal anillo monocíclico y un anillo arilo monocíclico, los cuales están directamente ligados por un enlace covalente. Ejemplos ilustrativos de tales radicales son tienilo, benzotienilo, furilo, benzofurilo, pirrolilo, imidazolilo, bencimidazolilo, tiazolilo, benzotiazolilo, isotiazolilo, bencisotiazolilo, pirazolilo, oxazolilo, benzoxazolilo, isoxazolilo, bencisoxazolilo, isotiazolilo, triazolilo, benzotriazolilo, tiadiazolilo, oxadiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, triazinilo, indolilo y indazolilo.

Como se usa en la presente, el término no calificado "heterociclilo" o "heterocíclico" incluye "heteroarilo" como se define anteriormente, y en su significado no aromático se refiere a un radical no aromático mono-, bi- o tri-cíclico que contiene uno o más heteroátomos seleccionados de S, N y O, y a grupos que consisten de un radical no aromático monocíclico que contiene uno o más de tales heteroátomos los cuales están ligados covalentemente a otro de tal radical o a un radical carbocíclico monocíclico. Ilustrativos de tales radicales son grupos pirrolilo, furanilo, tienilo, piperidinilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, pirazolilo, piridinilo, pirrolidinilo, pirimidinilo, morfolinilo, piperazinilo, indolilo, morfolinilo, benzofuranilo, piranilo, isoxazolilo, bencimidazolilo, metilendioxifenilo, etilendioxifenilo , maleimido y succinimido.

El término "radical heteroarileno divalente" se refiere a un radical heteroarilo monocíclico o bicíclico que tiene dos valencias insatisfechas tales como lo siguiente : con lo siguiente siendo actualmente preferido A menos que se especifique de otro modo en el contexto en el cual ocurre, el término "sustituido" como se aplica a cualquier porción arilo o heteroarilo aquí significa sustituida con al menos un sustituyente , por ejemplo seleccionado de alquilo (0?-06) , fluoroalquilo (Ci-C6) , alcoxi (C1-C6) (que incluye sustitución metilendioxi y etilendioxi en átomos de carbono adyacentes de un anillo aromático) , fluoroalcoxi (Ci-C6) , alcoxi (Ci-C6) -alquilo (Ci-C6) , benciloxi-alquilo (Cx-C6) , alcoxi (C1-C6) -alcoxi (Ci-Cg) , benciloxi-alcoxi (Ci-C6) , hidroxi, hidroxialquilo (Ci-C6) , hidroxialcoxi (Ci-C6) , mercapto, mercaptoalquilo (Cx-Cg) , alquiltio (C!-C6) , ciclopropilo , halo (que incluye fluoro y cloro) , 0-bencilo, nitro, nitrilo (ciano) , -C00H, tetrazolilo, -COORA, -CORA, -S02RA, -C0NH2, -S02NH2, -CONHRA, -S02NHRA, -CONRARB, -S02NRARB, -NH2, -NHRA, -NRARB, -OCONH2, -OC0NHRA, -OCONRARB, -NHC0RA, -NHCOORA, -NRBCOORA, -NHS02ORA, -NRBS02ORA, -NHC0NH2, -NRAC0NH2, -NHCONHR8 -NRACONHRB, -NHCONRARB O -NRAC0NRARB en donde RA y RB son independientemente un grupo alquilo (Ci-C4) , o RA y RB cuando se unen al mismo nitrógeno pueden formar, junto con tal nitrógeno, un grupo amino cíclico tal como un grupo morfolinilo, piperidinilo o piperazinilo . Un "sustituyente opcional" puede ser uno de los grupos sustituyentes abarcados en la descripción anterior.

Compuestos de la invención pueden existir en una o más formas geométricas ópticas, enantioméricas , diastereoméricas y tautoméricas , que incluyen pero no se limitan a formas cis y trans, formas E y Z, formas R, S y meso, formas ceto y enol . A menos que se declare de otro modo una referencia a un compuesto particular que incluye todas las formas isoméricas, incluye racémica y otras mezclas de los mismos. En donde sea apropiado tal isómero puede ser separado de sus mezclas por la aplicación o adaptación de métodos conocidos (por ejemplo, técnicas cromatográficas y técnicas de recristalización) . En donde sea apropiado tales isómeros pueden ser preparados por la aplicación de adaptación de métodos conocidos (por ejemplo, síntesis asimétrica) .

Como se usa en la presente el término "sal" incluye sales de adición de base, adición de ácido y amonio. Como se menciona brevemente anteriormente, compuestos de la invención los cuales son acídicos pueden formar sales, que incluyen sales farmacéuticamente aceptables, con bases tales como hidróxidos de metal álcali, por ejemplo, hidróxidos de sodio y potasio; hidróxidos de metal alcalinotérreos por ejemplo, 1 hidróxidos de calcio, bario y magnesio; con bases orgánicas por ejemplo, N-metil-D-glucamina, colina tris (hidroximetil) amino-metano, L-arginina, L-lisina, N-etil piperidina, dibencilamina y similares. Aquellos compuestos de la invención los cuales son básicos pueden formar sales, que incluyen sales farmacéuticamente aceptables con ácidos inorgánicos, por ejemplo, con ácidos hidrohálicos tales como ácidos clorhídricos o bromhídricos , ácido sulfúrico, ácido nítrico o ácido fosfórico y similares, y con ácidos orgánicos por ejemplo, con ácido acético, trifluoroacético, tartárico, succínico, fumárico, maleico, málico, salicílico, cítrico, metansulfónico, p-toluensulfónico, benzoico, bencensulfónico, glutámico, láctico y mandélico y similares. Aquellos compuestos (I) los cuales tienen un nitrógeno básico pueden también formar sales de amonio cuaternario con un contraión farmacéuticamente aceptable tal como amonio, cloruro, bromuro, acetato, formiato, p-toluensulfonato, succinato, hemi -succinato, naftaleno-bis sulfonato, metanosulfonato, trifluoroacetato, xinafoato, y similares. Para una revisión en sales, véase Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use por Stahl and ermuth ( iley-VCH, einheim, Germany, 2002) .

Se espera que compuestos de la invención puedan ser preparados en la forma de hidratos y solvatos . Cualquier referencia en la presente, que incluye las reivindicaciones aquí, a "compuestos con los cuales la invención está relacionada" o "compuestos de la invención" o "los presentes compuestos" y similares, incluye referencia a hidratos de sales, y solvatos de tales compuestos. El término 'solvato' se usa en la presente para describir un complejo molecular que comprende el compuesto de la invención y una cantidad estequiométrica de una o más moléculas solventes farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, etanol . El término "hidrato" es empleado en la presente cuando el solvente es agua.

Compuestos individuales de la invención pueden existir en varias formas polimórficas y se pueden obtener en diferentes hábitats cristalinos.

Los compuestos también pueden ser administrados en la forma de profármacos de los mismos. De este modo, ciertos derivados de los compuestos los cuales pueden ser activos en su propio derecho o pueden tener poca o ninguna actividad farmacológica los mismos pueden, cuando se administran dentro o sobre el cuerpo, ser convertidos en compuestos de la invención que tienen la actividad deseada, por ejemplo, por desdoblamiento hidrolítico. Tales derivados son referidos como "profármacos" . Información adicional en el uso de profármacos se puede encontrar en Pro-drugs as Novel Delivery Systems , Vol . 14, ACS Symposium Series (T. Higuchi and V.J. Stella) and Bioreversible Carriers in Drug Design, Pergamon Press, 1987 (ed. E. B. Roche, American Pharmaceutical Association; CS . Larsen y J. 0stergaard, Design and application of prodrugs . In Textbook of Drug Design and Discovery, 3rd Edition, 2002, Taylor and Francis) .

Los profármacos de conformidad con la invención pueden, por ejemplo, ser producidos reemplazando funcionalidades apropiadas presentes en los compuestos de la fórmula (I) con ciertas porciones conocidas por aquellos expertos en la técnica como "pro-porciones" como se describe, por ejemplo, en Design of Prodrugs por H. Bundgaard (Elsevier, 1985) . Tales ejemplos podrían ser un profármaco de un grupo carboxilo (tal como -CO-0-CH2-0- CO-tBu como se usa en el profármaco pivampicilina de ampicilina) , una amida (-CO-NH- CH2-NAk2) o una amidina ( -C (=N-0-CH3) -NH2) .

En los compuestos de la invención, el radical divalente -W- [A] -Y- puede ser, por ejemplo, cualquiera de los radicales correspondientes en los compuestos del Ejemplo específico siguiente. Por ejemplo, tal radical puede ser uno de las siguientes fórmulas (B) - (J) : (B) (C) (D) (E) <F) (G) (H) (I) (J) Una subclase de compuestos de la invención tiene la fórmula ( IA) : en donde V, V , X y X1 son independientemente -CH= o -N=; y R1, R2, Y y W son como se definen con relación a la fórmula (I) . Dentro de esta subclase, los compuestos pueden tener la fórmula (IA1) : en donde Y es 0 u S y R1 y R2 son como se definen con relación a la fórmula (I) . Otra subclase de compuestos de la invención tiene la fórmula (IB) : en donde U es CH o N, y R1 , R2 , Y y son como se definen con relación a la fórmula (I), con la condición de que cuando U es N entonces W no es NH . Dentro de esta subclase, los compuestos pueden tener la fórmula (IB1) : en donde Y es 0 u S y R1 y R2 son como se definen con relación a la fórmula (I) . Una subclase adicional de compuestos de la invención tiene la fórmula en donde Y es O u S, R2 es como se define en la reivindicación 1, y R1 es fenilo, heteroarilo monocíclico de 5 o 6 elementos o un radical de la fórmula (II) como se define con relación a la fórmula (I) anterior.

En los compuestos de la invención, que incluyen las subclases de las fórmulas (IA) , (IA1), (IB), (IB1), y (IC) anteriores, características estructurales específicas actualmente preferidas incluyen las siguientes: R1 puede ser un grupo de la fórmula (II) como se define con relación a la fórmula (I) anterior en donde el grupo -NR3R4 es morfolinilo.

R1 puede ser isopropilo o 2 , 6 -diclorofenilo .

R2 puede ser un radical de la fórmula (IIIC) como se define con relación a la fórmula (I) anterior, en donde R7 y R8 son cada uno metilo.

R2 puede tener la fórmula (IIID), (IIIE) , (IIIF) o (IIIG) : R2 puede ser un radical de la fórmula (IIIA) como se define con relación a la fórmula (I), en donde m es 0.

R2 puede ser un radical de la fórmula (IIIB) como se define con relación a la fórmula (I) anterior, en donde (a) T es -CH= y R5 = H; o (b) T es -N= y R5 = H; o (c) T - CH= y R5 = F.

Sustituyentes opcionales en el radical divalente A incluyen -CN, -F, -Cl, -Br, -N02, -OH, -S02alquilo Ci-C2, -S02alquiloCl-C2 completamente o parcialmente fluorado, alquilo Ci-C4, alquilo C1-C4 completamente o parcialmente fluorado, alcoxi Cx-C4, alcoxi C1-C4 completamente o parcialmente, y -SCF3.

El radical divalente A puede ser un anillo de seis elementos tal como fenileno o piridinileno, ligado a Y y W en una orientación 1,3 (meta) o l,4(para).

El radical divalente A puede ser un radical ciclohexileno ligado a W y Y en una orientación trans-1,4. W puede ser -CH2- .

Utilidad Como se menciona anteriormente los compuestos de la invención son inhibidores de p38MAPK, y de este modo pueden tener utilidad para el tratamiento de enfermedades o condiciones las cuales se benefician de la inhibición de la enzima p38. Tales enfermedades y condiciones se conocen de la literatura y varias se han mencionado anteriormente. Sin embargo, los compuestos son en general de uso como agentes anti-inflamatorios , particularmente para uso en el tratamiento de enfermedad respiratoria. En particular, los compuestos pueden ser usados en el tratamiento de enfermedad pulmonar obstructiva crónica (COPD) , bronquitis crónica, fibrosis pulmonar, neumonía, síndrome de angustia respiratoria aguda (ARDS) , enfisema pulmonar, o enfisema inducida por tabaquismo, asma intrínseca (asma no alérgica) e intrínseca (alérgica) , asma leve, asma moderada, asma severa, asma resistente a esteroides, asma neutrofílica, asma bronquítica, asma inducida por ejercicio, asma ocupacional y asma inducida después de la infección bacteriana, fibrosis quística, fibrosis pulmonar y bronquiectasis .

Composiciones Como se menciona anteriormente, los compuestos con los cuales la invención está relacionada son inhibidores de cinasa p38, y son útiles en el tratamiento de varias enfermedades por ejemplo, enfermedades inflamatorias del tracto respiratorio. Ejemplos de tales enfermedades son referidos anteriormente, e incluyen asma, rinitis, síndrome alérgico de las vías respiratorias, bronquitis y enfermedad pulmonar obstructiva crónica.

Se entenderá que el nivel de dosis específica para cualquier paciente particular dependerá de una variedad de factores que incluyen la actividad del compuesto específico empleado, la edad, peso corporal, salud general, sexo, dieta, tiempo de administración, ruta de administración, frecuencia de excreción, combinación de fármaco y la severidad de la enfermedad particular que se somete a tratamiento. Los niveles de dosis óptimos y frecuencia de dosificación serán determinados por ensayo clínico, como se requiere en la técnica farmacéutica. En general, el intervalo de dosis diaria para administración oral caerá dentro del intervalo desde aproximadamente 0.001 mg hasta aproximadamente 100 mg por kg de peso corporal de un humano, a menudo 0.01 mg hasta aproximadamente 50 mg por kg, por ejemplo 0.1 a 10 mg por kg, en dosis únicas o divididas. En general, el intervalo de dosis diaria para administración inhalada caerá dentro del intervalo desde aproximadamente 0.1 \ig hasta aproximadamente lmg por kg de peso corporal de un humano, preferiblemente 0.1 g hasta 50 g por kg, en dosis únicas o divididas. Por otro lado, puede ser necesario usar dosificaciones fuera de estos límites en algunos casos. Para el propósito de la invención, se prefiere la administración inhalada.

Los compuestos con los cuales la invención está relacionada pueden ser preparados para administración por cualquier ruta consistente con sus propiedades farmacocinéticas . Composiciones oralmente administrables pueden estar en la forma de tabletas, cápsulas, polvos, gránulos, grageas, preparaciones en gel o líquidas, tales como soluciones o suspensiones orales, tópicas o parenterales estériles. Las tabletas y cápsulas para administración oral pueden estar en forma de presentación de dosis unitaria, y pueden contener excipientes convencionales tales como agentes enlazantes, por ejemplo jarabe, acacia, gelatina, sorbitol, tragacanto, o polivinilpirrolidona ; rellenadores por ejemplo lactosa, azúcar, maíz-almidón, fosfato de calcio, sorbitol o glicina; lubricante de tableteado, por ejemplo estearato de magnesio, talco, polietilenglicol o sílice; desintegrantes por ejemplo almidón de papa o agentes humectantes adecuados tales como laurilsulfato de sodio. Las tabletas pueden ser recubiertas de conformidad con métodos bien conocidos en la práctica farmacéutica normal. Las preparaciones líquidas orales pueden estar en la forma de, por ejemplo, suspensiones acuosas o aceitosas, soluciones, emulsiones, jarabes o elíxires, o pueden ser presentadas como un producto seco para reconstitución con agua u otro vehículo adecuado antes del uso. Tales preparaciones líquidas pueden contener aditivos convencionales como agentes de suspensión, por ejemplo sorbitol, jarabe, metilcelulosa, jarabe de glucosa, grasas comestibles hidrogenadas de gelatina; agentes emulsificantes , por ejemplo lecitina, monooleato de sorbitán, o acacia; vehículos no acuosos (los cuales pueden incluir aceites comestibles) , por ejemplo aceite de almendra, aceite de coco fraccionado, ésteres aceitosos tales como glicerina, propilenglicol , o alcohol etílico; preservativos, por ejemplo p-hidroxibenzoato de metilo o propilo o ácido sórbico, y si se desea agentes colorantes o saborizantes convencionales.

Para aplicación tópica a la piel, el fármaco puede ser elaborado en una crema, loción o ungüento. Las formulaciones en crema o ungüento las cuales pueden ser usadas para el fármaco son formulaciones convencionales bien conocidas en la técnica, por ejemplo, como se describe en los libros de texto de farmacéutica estándares tales como la British Pharmacopoeia .

El ingrediente activo también puede ser administrado parenteralmente en un medio estéril. Dependiendo del vehículo y concentración usado, el fármaco puede ser ya sea suspendido o disuelto en el vehículo. Ventajosamente, adyuvantes tales como un anestésico local, preservativo y agentes amortiguadores pueden ser disueltos en el vehículo. 2 Sin embargo, para el tratamiento de una enfermedad inflamatoria del tracto respiratorio, compuestos de la invención también pueden ser formulados para inhalación, por ejemplo como un atomizador nasal, o inhaladores en aerosol o polvo seco. Para suministro por inhalación, el compuesto activo está preferiblemente en la forma de micropartículas . Puede ser preparado por una variedad de técnicas, que incluyen secado por atomización, secado por congelamiento y micronización . La generación de aerosol se puede llevar a cabo usando, por ejemplo, atomizadores de chorro accionados por presión, o atomizadores ultrasónicos, preferiblemente usando aerosoles medidos accionados por propulsor o administración libre de propulsor de compuestos activos micronizados de, por ejemplo, cápsulas de inhalación u otros sistemas de suministro de "polvo seco" .

Por medio del ejemplo, una composición de la invención puede ser preparada como una suspensión para suministro de un nebulizador o como un aerosol en un propulsor líquido, por ejemplo para uso en un inhalador de dosis medida presurizada (PMDI). Propulsores adecuados para uso en un PMDI se conocen por la persona experta e incluyen CFC-12, HFA-134a, HFA-227, HCFC-22 (CCl2F2) y HFA-152 (CH4F2 e isobutano) .

En una modalidad preferida de la invención, una composición de la invención está en forma de polvo seco, para suministro usando un inhalador de polvo seco (DPI) . Se conocen muchos tipos de DPI .

Las micropartículas para suministro por administración pueden ser formuladas con excipientes que ayudan al suministro y liberación. Por ejemplo, en una formulación de polvo seco, las micropartículas pueden ser formuladas con partículas portadoras grandes que ayudan al flujo del DPI en el pulmón. Se conocen partículas portadoras adecuadas, e incluyen partículas de lactosa; pueden tener un diámetro aerodinámico mediano de masa mayor de 90 µp?.

En el caso de una formulación a base de aerosol, un ejemplo es: Compuesto de la invención 24 mg/lata Lecitina, NF Liq. Conc . 1.2 mg/lata Triclorofluorometano, NF 4.025 g/lata Diclorodifluorometano, NF 12.15 g/lata.

Los compuestos activos pueden ser dosificados como se describe dependiendo del sistema inhalador usado. Además de los compuestos activos, las formas de administración pueden contener adicionalmente excipientes, tales como, por ejemplo, propulsores (por ejemplo, Frigen en el caso de aerosoles medidos), sustancias activas de la superficie, emulsificadores , estabilizadores, preservativos, saborizantes , rellenadores (por ejemplo, lactosa en el caso de inhaladores en polvo) o, si es apropiado, compuestos aditivos adicionales.

Para los propósitos de inhalación, un gran número de sistemas están disponibles con los cuales aerosoles de tamaño de partícula óptimo pueden ser generados y administrados, usando una técnica de inhalación la cual es apropiada para el paciente. Además del uso de adaptadores (espaciadores, expansores) y contenedores en forma de perlilla (por ejemplo Nebulator®, Volumatic®) , y dispositivos automáticos que emiten un atomizador de solución reguladora (Autohaler®) , para aerosoles medidos, en particular en el caso de inhaladores en polvo, un número de soluciones técnicas están disponibles (por ejemplo, Diskhaler®, Rotadisk®, Turbohaler® o los inhaladores por ejemplo como se describe en el documento EP-A- 0505321 ) . Adicionalmente , compuestos de la invención pueden ser suministrados en dispositivos de cámara múltiple de este modo permitiendo el suministro de agentes de combinación.

Combinaciones Otros compuestos pueden ser combinados con compuestos con los cuales la invención está relacionada para la prevención y tratamiento de enfermedades inflamatorias, en particular enfermedades respiratorias. De este modo, la presente invención también está relacionada con composiciones farmacéuticas que comprenden una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la invención y uno o más de otros agentes terapéuticos. Agentes terapéuticos adecuados para una terapia de combinación con compuestos de la invención incluyen, pero no se limitan a: (1) corticoesteroides , tales como propionato de fluticasona, fuorato de fluticasona, fuorato de mometasona, dipropionato de beclometasona, ciclesónido, budesónido, GSK 685698, GSK 870086, QAE 397, QMF 149, TPI-1020; (2) agonistas ß2 -adrenoreceptores tales como salbutamol, albuterol, terbutalina, fenoterol, y agonistas ß2 -adrenoreceptor de acción prolongada tales como salmeterol, indacaterol, formoterol (que incluye fumarato de formoterol), arformoterol, carmoterol, GSK 642444, GSK 159797, GSK 159802, GSK 597501, GSK 678007, AZD3199; (3) productos de combinación de agonista ß2 de acción prolongada/corticoesteroides tales como salmeterol/propionato de fluticasona (Advair/Seretide) , formoterol/budesónido (Symbicort) , formoterol/propionato de fluticasona (Flutiform) , formoterol/ciclesónido, formoterol/fuorato de mometasona, indacaterol/fuorato de mometasona, Indacaterol/QAE 397, GSK 159797/GSK 685698, GSK 159802/GSK 685698, GSK 642444/GSK 685698, GSK 159797/GSK 870086, GSK 159802/GSK 870086, GSK 642444/GSK 870086, arformoterol/ciclesónido; (4) agentes anticolinérgicos , por ejemplo agonistas del receptor muscarínico-3 (M3) tales como bromuro de ipratropio, bromuro de tiotropio, Aclidinio (LAS-34273), NVA-237, GSK 233705, Darotropio, GSK 573719, GSK 961081, QAT 370, QAX 028; (5) agonistas ß2- adrenoreceptores/M3 -anticolinérgicos de farmacología dual tales como GSK961081; (6) moduladores de leucotrieno, por ejemplo, antagonistas de leucotrieno tales como montelukast, zafirulast o pranlukast o inhibidores de la biosíntesis de leucotrieno tales como Zileuton o BAY-1005, o antagonistas de LTB4 tales como Amelubant, o inhibidores de FLAP tales como GSK 2190914, AM-103; (7) inhibidores de fosfodiesterasa-IV (PDE-IV) (oral o inhalado), tales como roflumilast, cilomilast, Oglemilast, ONO-6126, Tetomilast, Tofimilast, UK 500,001, GSK 256066; (8) antihistaminas , por ejemplo agonistas selectivos del receptor de histamina-1 (Hl) , tales como fexofenadina , citirizina, loratidina o astemizol o antagonistas del receptor dual H1/H3 tales como GSK 835726, GSK 1004723; (9) agentes antitusivos, tales como codeína o dextramorfano; (10) un mucolítico, por ejemplo N-acetil cisteína o fudosteína; (11) un modulador mucocinético/expectorante, por ejemplo ambroxol, soluciones hipertónicas (por ejemplo, salina o manitol) o tensoactivo; (12) un mucolítico péptido, por ejemplo desoxirribonucleasa I humana recombinante (dornase-alfa y rhDNase) o helicidina; (13) antibióticos, por ejemplo azitromicina , tobramicina y aztreonam; (14) inhibidores no selectivos COX-l-COX-2, tales como ibuprofeno o cetoprofeno; (15) inhibidores COX-2, tales como celecoxib y rofecoxib; (16) antagonistas de VLA-4, tales como aquellos descritos en los documentos WO97/03094 y WO97/02289; (17) inhibidores de TACE e inhibidores de TNF- , por ejemplo anticuerpos monoclonales anti-TNF, tales como Remicade y CDP-870 y moléculas de inmunoglobulina del receptor de TNF, tales como Enbrel; (18) inhibidores de metaloproteasa de matriz, por ejemplo MMP-12; (19) inhibidores de elastasa de neutrófilo humano, tal como 0N0-6818 o aquellos descritos en los documentos WO2005/026124 , WO2003/053930 y WO06/082412 ; (20) antagonistas A2b tales como aquellos descritos en el documento WO2002/42298 ; (21) moduladores de la función del receptor de quimiocina, por ejemplo antagonistas de CCR3 y CCR8 ; (22) compuestos los cuales modulan la acción de otros receptores prostanoides , por ejemplo antagonista de tromboxano A2; antagonistas de DPI tales como MK-0524, antagonistas de CRTH2 tales como ODC9101 y AZD1981 y antagonistas combinados de DP1/CRTH2 tales como AMG 009; (23) antagonistas PPAR que incluyen agonistas PPAR-alfa (tales como fenofibrato) , agonistas PPAR delta, agonistas PPAR gamma tales como Pioglitazona , Rosiglitazona y Balaglitazona ; (24) metilxantinas tales como teofilina o aminofilina y combinaciones de metilxantina/corticoesteroides tales como teofilina/budesónido, teofilina/propionato de fluticasona, teofilina/ciclesónido, teofilina/fuorato de mometasona y teofilina/dipropionato de beclometasona ; (25) agonistas A2a tales como aquellos descritos en los documentos EP1052264 y EP1241176; (26) antagonistas de CXCR2 o IL-8 tales como SCH 527123 o GSK 656933; (27) moduladores de la señalización de IL-R tales como cineret y ACZ 885; (28) agonistas de MCP-1 tales como ABN-912.

Métodos de Síntesis Los compuestos de la invención pueden ser preparados de conformidad con las rutas ilustradas en los Esquemas de reacción 1-6.

Esquema de reacción 1 Compuestos de la fórmula general (I-a) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (IX) : en donde r es 0 o 1, Y es S u 0, y Ra es como se define para R1 en la fórmula general (I) , por reacción con una amina de la fórmula general (X) : RbNH2 (X) , en donde Rb es como se define para R2 en la fórmula general (I) .

Usando un agente de acoplamiento adecuado tal como hexafluorofosfato de 2- (7-aza-lH-benzotriazol-l-il) -1, 1, 3, 3-tetrametiluronio, l-etil-3- (31 -dimetilaminopropil) carbodiimida o diciclohexilcarbodiimida en la presencia de una base tal como diisopropiletilamina o trietilamina . La reacción puede tomar lugar en un solvente adecuado tal como diclorometano, N, -dimetilformamida o tetrahidrofurano a un intervalo de temperaturas, preferiblemente a temperatura ambiente .

Alternativamente, compuestos de la fórmula (I-a) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (IX) por reacción con un agente halogenante adecuado el cual es cloruro de oxalilo o cloruro de tionilo en la ausencia o presencia de un solvente tal como diclorometano o N, -dimetilformamida a un intervalo de temperaturas, preferiblemente de temperatura ambiente a 100 °C, seguido por reacción con una amina de la fórmula general (X) , usando una base adecuada tal como diisopropiletilamina, en un solvente adecuado tal como tetrahidrofurano a un intervalo de temperaturas, preferiblemente de temperatura ambiente a 80 °C.

Compuestos de la fórmula general (IX) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (V) : donde X es un grupo saliente adecuado tal como fluoro, bromo o yodo, por reacción con un compuesto de la fórmula general (VIII) : en donde R es H o alquilo, usando un catalizador adecuado tal como yoduro de cobre (I), cloruro de cobre (I) , acetato de paladio, tetraquis (trifenilfosfina) aladio ( 0 ) o dicloro ( 1 , 11 -bis (difenilfosfino) ferroceno) aladio (II), en la ausencia o la presencia de un ligando adecuado tal como (2,9-dimetil) -1, 10-fenantrolina, prolina, 1 , 2 -ciclohexildiamina o una fosfina, usando una base tal como carbonato de potasio, hidróxido de potasio, carbonato de potasio o terc-butóxido de sodio. La reacción puede tomar lugar en un solvente adecuado tal como tolueno, N-metilpirrolidinona o N, N-dimetilformamida a un intervalo de temperaturas, preferiblemente entre 40 y 150°C; seguido, si R es alquilo, por hidrólisis de conformidad con métodos conocidos por aquellos expertos en la técnica .

Compuestos de la fórmula general (V) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (IV) : usando un oxidante adecuado tal como cloramina T, tetraacetato de plata o diacetato de fenilyodo ( III ) , en un solvente adecuado tal como diclorometano o etanol a un intervalo de temperaturas, preferiblemente entre temperatura ambiente y 100 °C.

Compuestos de la fórmula general (IV) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (II) : por reacción con un aldehido de la fórmula general (III) : RaCH0 (III), en un solvente adecuado tal como etanol o tetrahidrofurano a un intervalo de temperaturas, preferiblemente entre temperatura ambiente y 80 °C.

Alternativamente, compuestos de la fórmula (IV) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula (II) por reacción con un compuesto de la fórmula general (VI) : R3C02H (VI) , usando un agente deshidratante/acilante adecuado tal como trifenilfosfina/tricloroacetonitrilo en la presencia de una base tal como diisopropiletilamina, en un solvente adecuado tal como diclorometano o acetonitrilo, a un intervalo de temperaturas, preferiblemente entre temperatura ambiente y 150 °C.

Alternativamente, compuestos de la fórmula (IV) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula (VII) : usando un agente deshidratante adecuado tal como reactivo Burgess, trifenilfosfina y hexacloroetano, oxicloruro de fósforo, ácido acético o condiciones Mitsunobu (dietilazodicarboxilato/trifenilfosf ina/trimetilsililazida) , en la ausencia o presencia de un solvente adecuado tal como tetrahidrofurano, tolueno o NMP, a un intervalo de temperaturas, preferiblemente entre temperatura ambiente y 120°C.

Compuestos de la fórmula general (VII) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (II) por reacción con un ácido carboxílico de la fórmula general (VI) , como se describe para la preparación de compuestos de la fórmula (I-a) a partir de compuestos de la fórmula (IX) .

Esquema de reacción 2 Compuestos de la fórmula general (I-b) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (XII) : (XII) , en donde Ra es como se define para R1 en la fórmula general (I) , por reacción con un compuesto de la fórmula general (XIII) : en donde R es como se define para R2 en la fórmula general (I) , en un solvente adecuado tal como sulfóxido de dimetilo, 1,4-dioxano o acetonitrilo, en la presencia de una base tal como diisopropiletilamina a un intervalo de temperaturas, preferiblemente entre temperatura ambiente y 100°C.

Compuestos de la fórmula general (XIII) pueden ser preparados a partir de aminas de la fórmula general (X) de conformidad con procedimientos de literatura conocidos (por ejemplo, los documentos O2006/009741 , EP1609789) .

Alternativamente compuestos de la fórmula general (I-b) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (XII) por reacción con una amina de la fórmula general (X) , usando un agente de acoplamiento adecuado tal como fosfeno, difosfeno o trifosfeno, en un solvente adecuado tal como diclorometano, tolueno, tetrahidrofurano o acetonitrilo, usando una base adecuada tal como trietilamina, piridina o diisopropiletilamina, a un intervalo de temperaturas preferiblemente entre 0 y 100 °C.

Compuestos de la fórmula general (XII) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (V) : por reacción con un compuesto de la fórmula general (XI) H N SH (XI), usando una base adecuada tal como carbonato de cesio, idróxido de potasio, carbonato de potasio o terc-butóxido de sodio, en la ausencia o presencia de un catalizador adecuado tal como yoduro de cobre (I) o bromuro de cobre (I) y un ligando adecuado tal como (2 , 9-dimetil) -1 , 10 -fenantrolina , prolina o 1 , 2 -ciclohexildiamina . La reacción puede tomar lugar en un solvente adecuado tal como tolueno, N-metilpirrolidinona, metanol o N,N-dimetilformamida a un intervalo de temperaturas, preferiblemente entre 40 y 150°C.

Esquema de reacción 3 (l-c) Compuestos de la fórmula general (I-c) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (XVI) : por reacción con un compuesto de la fórmula general (XIII) o (X) , como se describe para la preparación de compuestos de la fórmula (I-b) a partir de compuestos de la fórmula (XII) .

Compuestos de la fórmula general (XVI) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (XV) : (XV) en donde Rc puede ser un grupo protector adecuado o H por desprotección de conformidad con métodos conocidos por aquellos expertos en la técnica.

Compuestos de la fórmula general (XV) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (V) : por reacción con un compuesto de la fórmula general (XIV) R HN OH (XIV), como se describe para la preparación de compuestos de la fórmula (XII) a partir de compuestos de la fórmula (XI) .

Esquema de reacción 4 (l-d) Compuestos de la fórmula general (I-d) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (XIX) : por reacción con un compuesto de la fórmula general (XIII) o (X) , como se describe para la preparación de compuestos de la fórmula (I-b) a partir de compuestos de la fórmula (XII) .

Compuestos de la fórmula general (XIX) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (XVIII) : por reacción con un agente reductor adecuado tal como cloruro de estaño (II) , hierro o gas de hidrógeno en la presencia de un catalizador tal como paladio en carbono, óxido de platino o Níquel Raney, en la presencia o ausencia de ácido tal como cloruro de hidrógeno o ácido acético, en un solvente adecuado tal como metanol, etanol o etilo acetato, a un intervalo de temperaturas, preferiblemente entre temperatura ambiente y 80 ° C .

Alternativamente compuestos de la fórmula general (XIX) pueden ser preparados a partir de compuestos fórmula general (V) : por reacción con un compuesto de la fórmula general (XVII) : en donde Rd es H, con especies metalizadas adecuadas tales como butil litio, magnesio o cloruro de i -propi lmagnes io , en un solvente adecuado tal como tet rahidrofurano o éter dietílico, a un intervalo de temperaturas, preferiblemente entre -780 °C y temperatura ambiente.

Compuestos de la fórmula general (XVIII) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (V) por reacción con un compuesto de la fórmula general (XVII) , en donde Rd es O, como se describe para la preparación de compuestos de la fórmula general (XIX) a partir de compuestos de la fórmula general (V) .

Esquema de reacción 5 (XXI) (XXII) (V) Compuestos de la fórmula general (I-e) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (XXII) : por reacción con un compuesto de la fórmula general (XXIII; (XXIII), usando una base adecuada tal como diisopropiletilamina, carbonato de potasio, carbonato de sodio o hidruro de sodio en la ausencia o presencia de un catalizador adecuado tal como yoduro de potasio o yoduro de sodio, en un solvente adecuado tal como diclorometano, tetrahidrofurano o acetonitrilo, a un intervalo de temperaturas, preferiblemente entre temperatura ambiente y 80°C.

Compuestos de la fórmula general (XXIII) pueden ser preparados a partir de aminas de la fórmula general (X) , de conformidad con procedimientos de literatura conocidos (por ejemplo, Migliara et al. Fármaco (1992), 47(1), 111-19).

Compuestos de la fórmula general (XXII) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (XXI) : en donde R° es un grupo protector adecuado, por desprotección de conformidad con métodos conocidos por aquellos expertos en la técnica.

Compuestos de la fórmula general (XXI) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (V) : por reacción con un compuesto de la fórmula general (XX) : como se describe para la preparación de compuestos de la fórmula (XII) a partir de compuestos de la fórmula (XI) · Esquema de reacción 6 Compuestos de la fórmula general (I-f) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (XXVI) : por reacción con aminas de la fórmula (X) como se describe para la preparación de compuestos de la fórmula general (I-a) a partir de compuestos de la fórmula general (IX) .

Compuestos de la fórmula general (XXVI) pueden "ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (XXV) : en donde R es alquilo, por desprotección de conformidad con métodos conocidos por aquellos expertos en la técnica .

Compuestos de la fórmula general (XXV) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (XXIV) : por reacción con un compuesto de la fórmula general (V) , como se describe para la preparación de compuestos de la fórmula general (XII) a partir de compuestos de la fórmula general (XI ) .

Compuestos de la fórmula general (V) pueden ser preparados como se describe en Chem. Soc . Jpn., 1980, 53, 2007-11.

Esquema de reacción 8 (i-g) < XIX) Compuestos de la fórmula general (I-g) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (XXIX) : (XXIX) por reacción con una amina de la fórmula general (X) : RbNH2 (X) , en donde Rb es como se define para R2 en la fórmula general (I) como se describe anteriormente.

Compuestos de la fórmula general (XXIX) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (XXVIII) : (XXVIII) en donde es alquilo por desprotección de conformidad con métodos conocidos por aquellos expertos en la técnica .

Compuestos de la fórmula general (XXVIII) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (XXVII) : (XXVII) por reacción con un compuesto adecuado RdX (XXXI) usando una base adecuada tal como hexametildisilazida de litio o hidruro de sodio en un solvente adecuado tal como tetrahidrofurano, DMF o éter dietílico, a un intervalo de temperaturas, preferiblemente entre temperatura ambiente y 80°C.

Compuestos de la fórmula general (XXVII) pueden ser preparados a partir de compuestos de la fórmula general (IX) : en donde r es 1, Y es S u O, y Ra es como se define para R1 en la fórmula general (I) por reacción con un alcohol de la fórmula general (XXX) de conformidad con métodos conocidos por aquellos expertos en la técnica.

Rc0H (XXX) 4 Detalles Experimentales Generales Abreviaturas usadas en la sección experimental: ac . = acuoso; DCM = diclorometano; DIPEA = diisopropiletilamina; DMF = N,N-dimetilformamida; DMSO = sulfóxido de dimetilo; EDCI HC1 = clorhidrato de l-etil-3 - (3 ' -dimetilaminopropil ) carbodiimida ; EtOAc = acetato de etilo; EtOH = etanol; FCC = cromatografía de columna instantánea; h = hora ; HATU = hexafluorofosfato de 2- (7-aza-lH-benzotriazol- 1- il ) -1,1,3, 3 -tetrametiluronio; HOBt = 1-hidroxi-benzotriazol ; HPLC = cromatografía líquida de alta resolución; LCMS = espectrometría de masas de cromatografía líquida ; MeCN = acetonitrilo; MeOH = metanol; min = minutos ; NMR = resonancia magnética nuclear; RT = temperatura ambiente; Rt = tiempo de retención; sat . = saturado; SCX-2 = cromatografía de intercambio catiónico fuerte ; TFA = ácido trifluoroacético ; THF = tetrahidrofurano.

La nomenclatura de las estructuras se asignó usando el software Autonom 2000 ame de MDL Inc.

Todas las reacciones se llevaron a cabo bajo una atmósfera de nitrógeno a menos que se especifique de otro modo .

Se obtuvieron espectros de NMR en un espectrómetro Varían Unity Inova 400 con una sonda de resonancia triple de detección inversa de 5 mm que opera a 400 MHz o en un espectrómetro Bruker Avance DRX 400 con una sonda de resonancia TXI triple de detección inversa de 5 mm que opera a 400 MHz o en un espectrómetro Bruker Avance DPX 300 con una sonda de frecuencia dual de 5 mm estándar que opera a 300 MHz. Los cambios se dan en ppm con relación a tetramet ilsilano . Se asignó el espectro de NMR usando Análisis de Espectro DataChord Versión 4.0.b21.

En donde los productos se purificaron por cromatografía de columna instantánea, 'sílice instantánea' se refiere a gel de sílice para cromatografía, 0.035 a 0.070 mm (220 a 440 malla) (por ejemplo, gel de sílice Fluka 60) , y una presión aplicada de nitrógeno a elución de columna acelerada de 10 p.s.i o uso del sistema de purificación CombiFlash® Companion o uso del sistema de purificación Biotage SP1. Todos los solventes y reactivos comerciales se usaron como se recibieron .

Los compuestos purificados por HPLC preparativa se purificaron usando una columna de fase inversa C18 (100 * 22.5 mm i.d columna Génesis con tamaño de partícula de 7 \im) , o una columna Fenil-Hexilo (250 x 21.2 mm i.d. columna Gemini con un tamaño de partícula de 5 pm) , detección UV a 230 o 254 nm, flujo 5-20 mL/min) , eluyendo con gradientes de 100-0 a 0-100% agua/acetonitrilo (que contiene 0.1% TFA o 0.1% de ácido fórmico) o agua/MeOH (que contiene 0.1% TFA o 0.1% de ácido fórmico) . Las fracciones que contienen el producto requerido (identificadas por análisis de LCMS) se combinaron, la fracción orgánica se removió por evaporación, y la fracción acuosa restante se liofilizó, para dar el producto final. Los productos purificados por HPLC preparativa se aislaron como sales de TFA o formiato, a menos que se declare de otro modo.

Los sistemas de Espectroscopia de Masas de Cromatografía Líquida (LCMS) y HPLC usados son: Método 1 Espectrómetro de masas cuadrupolo ZMD Waters con una columna de fase inversa C18 (30 * 4.6 mm Phenomenex Luna tamaño de partícula de 3 µt?) , elución con A: agua + 0.1 % de ácido fórmico; B: acetonitrilo + 0.1 % de ácido fórmico. Gradiente : Gradiente - Tiempo flujo mL/min %A %B 0.00 2.0 95 5 0.50 2.0 95 5 4.50 2.0 5 95 5.50 2.0 5 95 6.00 2.0 95 5 Detección - MS, ELS, UV (200 yL división a MS con detector UV en línea) . Método de ionización por MS - Electro rocío (ión positivo y negativo) .

Método 2 Espectrómetro de masas Quadrupole Platform LC Waters con una columna de fase inversa C18 (30 * 4.6 mm Phenomenex Luna tamaño de partícula de 3 ym) , elución con A: agua + 0.1 % de ácido fórmico; B: acetonitrilo + 0.1% de ácido fórmico. Gradiente: Gradiente - Tiempo flujo mL/min %A %B 0.00 2.0 95 5 0.50 2.0 95 5 4.50 2.0 5 95 5.50 2.0 5 95 6.00 2.0 95 5 Detección - MS, ELS, UV (200 ]ih división a S con detector UV en línea) . Método de ionización por MS - Electro rocío (ión positivo y negativo) .

Método 3 Columna de fase inversa C18 Phenomenex Gemini (250 * 21.20 mm tamaño de partícula de 5 µp?) , elución con A: agua + 0.1% de ácido fórmico; B: acetonitrilo + 0.1 % de ácido fórmico. Gradiente - 95% A/5% B a 5% A/95% B durante 15 min - velocidad de flujo 18 mL/min. Detección - Detector UV en línea ajustado a una longitud de onda de 220 nM .

Método 4 Micromass ZQ2000 aters con una columna de fase inversa C18 (100 * 3.0 mm Higgins Clipeus con tamaño de partícula de 5 µta) , elución con A: agua + 0.1% de ácido fórmico; B: acetonitrilo + 0.1% de ácido fórmico.

Gradiente : Gradiente - Tiempo flujo mL/min %A %B 0.00 1.0 95 5 1.00 1.0 95 5 15.00 1.0 5 95 20.00 1.0 5 95 22.00 1.0 95 5 25.00 1.0 95 5 Detección - MS, ELS , UV (100 pL división a MS con detector UV en línea) . Método de ionización por MS - Electro rocío (ión positivo) .

Método 5 Espectrómetro de masas Quadrupole Platform . LC Waters con una columna de fase inversa C18 (30 * 4.6 rara Phenomenex Luna tamaño de partícula de 3 pm) , elución con A: agua + 0.1 % de ácido fórmico; B: metanol + 0.1 % de ácido fórmico. Gradiente: Gradiente - Tiempo flujo mL/min %A %B 0.00 2.0 95 5 0.50 2.0 95 5 4.50 2.0 5 95 5.50 2.0 5 95 6.00 2.0 95 5 Detección - MS, ELS , UV (200 L división a MS con detector HP1100 DAD en línea) . Método de ionización por MS - Electro rocío (ión positivo y negativo) .

Método 6 Columna de fase inversa C18 Phenomenex Gemini (250 x 21.20 mm tamaño de partícula de 5 µ??) ., elución con A: agua + 0.1 % de ácido fórmico; B: metanol + 0.1% de ácido fórmico. Gradiente - 95% A/5% B a 5% A/95% B durante 15 min - velocidad de flujo 18 mL/min. Detección - Detector UV en línea ajustado a una longitud de onda de Método 7 Micromass ZQ2000 Waters con una columna de fase inversa C18 (100 * 3.0 mm Higgins Clipeus con tamaño de partícula de 5 µp?) , elución con A: agua + 0.1% de ácido fórmico; B: metanol + 0.1% de ácido fórmico. Gradiente : Gradiente - Tiempo flujo mL/min %A %B 0.00 1.0 85 15 1.00 1.0 85 15 13.00 1.0 5 95 20.00 1.0 5 95 22.00 1.0 85 15 25.00 1.0 85 15 Detección - MS, ELS , UV (100 yL división a MS con detector UV en línea) . Método de ionización por MS - Electro rocío (ion positivo) .

Método 8 Espectrómetro de masas cuadrupolo ZMD Waters con una columna de fase inversa C18 (30 x 4.6 mm Phenomenex Luna tamaño de partícula de 3 µp?) , elución con A: agua + 0.1 % de ácido fórmico; B: metanol + 0.1 % de ácido fórmico. Gradiente : Gradiente - Tiempo flujo mL/min %A %B 0.00 2.0 95 5 0.50 2.0 95 5 4.50 2.0 5 95 5.50 2.0 5 95 6.00 2.0 95 5 Detección - MS, ELS, UV (200 pL división a MS con detector aters 996 DAD en línea) . Método de ionización por MS - Electro rocío (ión positivo y negativo) .

Método 9 Micromass ZQ2000 Waters con una columna Acquity BEH C18 (50 x 2.1 mm con tamaño de partícula de 1.7 pm) , elución con A: agua + 0.1 % de ácido fórmico; B: metanol + 0.1 % de ácido fórmico. Gradiente: Gradiente - Tiempo flujo mL/min %A %B 0.00 0.4 85 15 0.40 0.4 85 15 6.00 0.4 5 95 8.00 0.4 5 95 8.80 0.4 85 15 10.00 0.4 85 15 Detección - MS, UV PDA. Método de ionización por MS - Electro rocío (ión positivo/negativo) .

Método 10 Cuadrupolo Quatro Microtriple Waters con una columna de fase inversa C18 (100 x 3.0 mm Higgins Clipeus con tamaño de partícula de 5 pm) , elución con A: agua + 0.1 % de ácido fórmico; B: metanol + 0.1 % de ácido fórmico. Gradiente : Gradiente - Tiempo flujo mL/min %A %B 0.00 1.0 85 15 1.00 1.0 85 15 13.00 1.0 5 95 20.00 1.0 5 95 22.00 1.0 85 15 25.00 1.0 85 15 Detección - MS, ELS , UV (100 µ?; división a MS con detector UV en línea) . Método de ionización por MS - Electro rocío (ion positivo/negativo) .

Método 11 Espectrómetro de masas cuadrupolo ZMD Waters con una columna de fase inversa C18 (columna inversa Acquity BEH C18, 1.7um, 100 x 2.1 mm) , elución con A: agua + 0.1 % de ácido fórmico; B: acetonitrilo + 0.1% de ácido fórmico. Gradiente : Gradiente - Tiempo flujo mL/min %A %B 0.00 0.4 95 5 0.40 0.4 95 5 6.00 0.4 5 95 6.80 0.4 5 95 7.00 0.4 95 5 8.00 0.4 95 5 Detección - MS, UV PDA. Método de ionización por MS - Electro rocío (ión positivo/negativo) .

Ejemplo 1 N-Ciclopropilmetil-3- {3- [3- (2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1,2,4] triazolo [4 , 3-a] piridin-6-ilsulfañil } -benzamida a. N- (5-yodo-piridin-2-il) -N' - [1- [3- (2 -morfolin-4 -il-etoxi) -fenil] -raet- (E) -iliden] -hidrazina A una suspensión de 5-yodo-2-hidrazinopiridina (6.62 g, 0.028 mmol) en EtOH (90 mL) se agregó 3- (2-morfolin-4-il-etoxi) -benzaldehído (6.63 g, 0.028 mmol) . La reacción se calentó a reflujo por 2 h bajo nitrógeno, luego se enfrió a TA. Lo precipitado resultante se recolectó por filtración y lavó con EtOH para proporcionar el compuesto del título (10.93 g, 86%) como un sólido blanco. LCMS (Método 1) : Rt 2.37 min, m/z 453 [MH+] . ¾ NMR (300 MHz, CD3OD) : d 8.24 (1 H, d, J 2.2), 7.90-7.84 (2 H, m) , 7.36-7.18 (3 H, m) , 7.12 (1 H, d, J 8.8), 6.94- 6.89 (1 H, m) , 4.19 (2 H, t, J 5.4), 3.72 (4 Hi 1, J 4.6), 2.83 (2 H, t, J 5.4), 2.62 (4 H, t, J 4.6). b. 6-yodo-3- [3- (2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1,2,4] triazolo [4 , 3-a] iridina A una solución del Ejemplo 1 etapa a (10.93 g, 24.16 mmol) en DCM (100 mL) /EtOH (15 mL) , se agregó Phl (OAc) 2 (10.74 g, 33.35 mmol). La reacción se agitó a TA por 72 h, diluyó con DCM (25 mL) después se lavó con hidróxido de sodio ac . (1 M, 25 mi.) y salmuera (25 mL) . La capa orgánica se secó (MgS04) , filtró, y lo filtrado se concentró in vacuo. El residuo se trituró con Et20 (10 mL) y el sólido resultante se recolectó por filtración para proporcionar el compuesto del título (9.98 g, 92%) como un sólido blancuzco. LCMS (Método 1): Rt 2.11 min, m/z 451 [MH+] . ?? NMR (400 MHz, DMSO-d6) : d 8.69 (1 H, s) , 7.71 (1 H, d, J 9.5), 7.60 (1 H, d, J 9.5), 7.53 (1 H, t, J 7.9), 7.47-7.41 (2 H, m) , 7.18 (1 H, d, J 8.1), 4.21 (2 H, t, J 5.7), 3.59 (4 H, t, J 4.5), 2.75 (2 H, t, J 5.7) , 2.45 (4 H, m) . c. ácido 3- {3- [3- (2-Morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1,2,4] triazolo [4 , 3 -a] piridin-6 -ilsulfanil] -benzoico cargó un recipiente de reacción con el Ejemplo etapa b (400 mg, 0.888 rtimol) , ácido 3-mercaptobenzoico (205 mg, 1.24 mmol) , complejo 1:1 de [1, 11 -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (11) con DCM (138 mg, 0.168 mmol), carbonato de cesio (578 mg, 1.777 mmol), y DMF (3 mL) . La reacción se desgasificó (x3) bajo argón. La reacción se calentó a 90°C por 24 h después se dejó enfriar a TA, filtró, y lo filtrado se concentró in vacuo para proporcionar el compuesto del título (422 mg, cuantitativo). LCMS (Método 2): Rt 2.20 min, m/z 477 [MH+] . d. N-Ciclopropilmetil-3- { 3- [3- (2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1,2,4] triazolo [4, 3-a] piridin-6-ilsulfañil} -benzamida Se cargó un recipiente de reacción con el Ejemplo 1 etapa c (213 mg, 0.447 mmol), ciclopropanemetilamina (32 mg, 0.447 mmol), HATU (212 mg, 0.558 mmol), y DMF (3 mL) . Se agregó DIPEA (225 µL, 1.34 mmol), la reacción se agitó a TA por 24 h después se concentró in vacuo y el residuo crudo se purificó directamente por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3) para proporcionar el compuesto del título (92 mg, 39%) como un sólido blancuzco. LCMS (Método 4): Rt 6.55 min, m/z 530 [MH+] . XH MR (400 MHz, CDCl3) : d 8.39 (1 H, s) , 7.89 (1 H, s) , 7.75- 7.65 (2 H, m) , 7.51-7.30 (5 H, m) , 7.17 (1 H, d, J 9.6), 7.08 (1 H, d, J 8.4), 6.85 (1 H, m) , 4.25 (2 H, t, J 5.2), 3.79 (4 H, t, J 4.4), 3.26 (2 H, t, J 6.2), 3.00 (2 H, t, J 5.2), 2.77 (4 H, m) , 1.07-0.95 (1 H, m) , 0.52-0.44 (2 H, m) , 0.24-0.18 (2 H, m) .

Se prepararon los siguientes Ejemplos usando métodos similares a aquellos usados en el Ejemplo 1.

NMR (400 MHz) d LC S (CDCI3): 8.63 (1 H. s), 8.35 (1 H, s), 8.00 (1 H, s), 7.82 (1 H, d, J 7.5), 7.54 (1 H, d, J 9.5), 7.50- 7.40 (4 H, m), 7.34-7.28 (2 H, (Método 3): Rt m), 7.18 (1 H, t, J 8.1), 7.14-7.03 (2 H, m), 6.99 (1 H, d, J 8), 6.66 7.15 min, m/z (1 H, dd, J 8.3, 2.4), 4.16 (2 H, t, 637 [ H+].

J 5.6), 3.79 (4 H, t, J 4.6), 3.73 (4 H, t, J 4.6), 3.11 (4 H, t, J 4.7), 2.85 (2 H, t, J 5.5), 2.60 (4 H, t, J 4.4).

(CDCI3): 8.80 (1 H, br s), 8.39 (1 H, t, J 1.2), 8.07 (1 H, d, J 5.7), 7.97 (1 H, t, J 1.7), 7.81 (1 H, dt, J 7.6, 1.5), 7.59 (1 H, dd, J 9.5, (Método 4): Rt 1), 7.55-7.44 (3 H, m), 7.40-7.32 (3 H, m), 7.16 (1 H, dd, J 1.6, 5.49 min, m/z 0.3), 7.10 (1 H, dd, J 2.6, 1 ), 6.75 638 [ H+]. (1 H, dd, J 5.7, 1.7), 4.24 (2 H, t, J 5.3), 3.78 (8 H, m), 3.49 (4 H, t, J 4.8), 2.97 (2 H, t, J 5.3), 2.75 (4 H, t, J 4.5) (CDCI3). 8.41 (1 H, S), 7.75 (1 H, d, J 9.6), 7.49 (1 H, t, J 8), 7.40 (1 H, s), 7.35 (1 H, d, J 7.7), 7.26 (Método 4): Rt (2 H, d, J 5.5), 7.19-7.10 (5 H, m), 7.13-7.05 (4 H, m), 6.59 (1 8.32 min, m/z H, s), 4.25 (2 H, t, J 5.5), 3.79 (4 702 [ H+].

H, t, J 4.5), 3.65 (2 H, s), 2.93 (2 H, t, J 5.5), 2.70 (4 H, t, J 4.3), 2.37 (3 H, s), 1.32 (9 H, s).

(CDCI3). 8.39 (1 H, s), 7.69 (1 H, d, J 9.5), 7.47 (1 H, t, J 8), 7.37- 7.25 (7 H, m), 7.17 (1 H, d, J (Método 3): Rt 9.7), 7.07 (2 H, m), 6.69 (1 H, d, 7.59 min, m/z J 10), 6.29 (1 H, d, 11.8), 4.18 (2 H, t, J 5.2), 3.79-3.71 (8 H, m), [MH+] 669. 3.69 (2 H, s), 3.08 (4 H, t, J 4.5), 2.85 (2 H, t, J 5.5), 2.61 (4 H, m).

(CD3OD): 8.50 (1 H, s), 7.64 (1 H, d, J 9.6), 7.32 (2 H, d, J 8.1), (Método 4): Rt 7.28 (1 H, dd, J 9.6, 1.6), 7.21- 7.15 (6 H, m), 6.30 (1 H, s), 3.57 11.35 min, m/z (2 H, s), 3.53 (1 H, m), 2.32 (3 H, 539 [MhT], s), 1.47 (3 H, s), 1.45 (3 H, s), I .30 (9 H, s).

(CD3OD): 7.89 (1 H, S), 7.84 (1 H, dd, J 9.6, 1.0), 7.64-7.53 (3 H, (Método 4): Rt m), 7.43 (1 H, dd, J 9.6, 1.6), 7.35-7.28 (2 H, m), 7.22-7.15 (2 12.70 min, m/z H, m), 7.15 (4 H, s), 6.32 (1 H, 641 [MH+]. s), 3.57 (2 H, s), 2.31 (3 H, s), I .31 (9 H, s).

(CD3OD): 8.26 (1 H, t, J 1.2), 7.75-7.68 (1 H, m), 7.48 (1 H, t, J (Método 7): Rt 8.0), 7.44 (2 H, d, J 7.5), 7.40 (1 H, t, J 2.0), 7.38-7.25 (7 H, m), 13.44 min, m/z 7.22-7.08 (7 H, m), 6.32 (1 H, s), 679 [MH*]. 5.13 (2 H, s), 3.53 (2 H, s), 2.29 (3 H, s), 1.38-1.20 (9 H, m).

(CDCI3): 8.07 (1 H, s), 7.68 (1 H, d, J 9.6), 7.33 (3 H, m), 7.29- 7.13 (5 H, m), 7.07 (2 H, dd, J (Método 9): Rt 9.5, 1.7), 6.59 (1 H, s), 3.80-3.59 4.11 min, m/z (6 H, m), 3.52 (2 H, m), 3.41- 3.30 (1 H, m), 2.47 (4 H, m), 624 [MH*].

I .55 (3 H, s), 1.53 (3 H, s), 1.32 (9 H, s).

Ejemplo 10 1- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -3- (4-{3 [3- (2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1,2,4] triazolo [4,3-a] piridin-6-ilsulfañil } -fenil) -urea (6 -Bromo- [1,2,4] triazolo [4 , 3-a] iridin-3 -fenol Tribromuro de boro (1 M en DCM, 13.1 mL, 13.1 mmol) se agregó lentamente a una solución agitada de 3- (3-benciloxi-fenil) -6-bromo- [1,2,4] triazolo [4 , 3 -a] piridina (1 g, 2.63 mmol) en DCM (5 mL) a -780°C. La reacción se dejó calentar hasta TA, se agitó por 24 h, y se trató con solución saturada de NaHC03 a pH > 7. El producto se extrajo con DCM:MeOH 9:1 (mL) , se secó (MgS0) , y se concentró in vacuo. La purificación del residuo crudo por FCC (DCM:MeOH, 1:0 a 9:1) proporcionó el compuesto del título (350 mg, 46%) como un sólido amarillo. LCMS (Método 2): Rt 2.65 min, m/z 290 y 292 [MH+] . b. 6-Bromo-3- [3- (2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1,2,4] triazolo [4 , 3-a] piridina Una mezcla del Ejemplo 10 etapa a (250 mg, 1.21 mmol), clorhidrato de N- ( 2 -bromoeti1 ) morfol ina (306 mg, 1.32 mmol) y K2C03 (500 mg, 3.62 mmol) en DMF (20 mL) se calentó a 50°C por 24 h. La reacción después se dejó enfriar a TA y se concentró in vacuo. El residuo se purificó por FCC (DCM : MeOH , 1:0 a 9:1) para proporcionar el compuesto del título (479 mg, 98%) como un aceite amarillo. XH NMR (300 MHz , CDC13): d 8.44 (1 H, dd, J 1.7, 1), 7.74-7.69 (1 H, m) , 7.50 (1 H, t, J 7.9), .7.39-7.35 (2 H, m) , 7.35-7.30 (1 H, m) , 7.14-7.08 (1 H, m) , 4.21 (2 H, t, J 5.6), 3.74 (4 H, t, J 4.6), 2.85 (2 H, t, J 5.6), 2.63-2.56 (4 H, m) . c. 4-{3- [3- (2-Morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1,2,4] triazolo [4 , 3-a] piridin-6-ilsulfañil] -feni lamina El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 1 etapa c usando el Ejemplo 10 etapa b y 4-amino-bencen-tiol . LCMS (Método 2) : Rt 2.14 min, m/z 448 [MH+] . d. 1- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -3- (4- {3- [3- (2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] -[1,2,4] triazolo [4,3-a] iridin-6-ilsulfanil} -fenil) -urea Una mezcla del Ejemplo 10 etapa c (315 mg, 0.703 mmol) , 5- (2,2,2- tricloroetoxicarbonil ) amino- 3 -tere -butil - 1 -p-tolil-lH-pirazol (299 mg, 0.703 mmol) y DIPEA (116 yL, 0.675 mmol) en DMSO (3 mL) se calentó a 55°C por 24 h. La reacción se concentró in vacuo y el residuo se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3) para proporcionar el compuesto del título (202 mg, 41%) como un sólido blancuzco. LCMS (Método 4) : Rt 8.46 min, m/z 703 [MH+] . XH NMR (400 MHZlCDCl3) : d 9.30 (1 H, br s) , 8.34 (1 H, br s) , 8.16 (1 H, s) , 7.49-7.41 (3 H, m) , 7.37 (1 H, d, J 9.6) , 7.29 (2 H, d, J 8.4) , 7.25-7.20 (2 H, m) , 7.18 (2 H, d, J 8) , 7.09-7.04 (2 H, m) , 6.90 (2 H, d, J 8), 6.44 (1 H, s) , 4.15 (2 H( t, J 5.4) , 3.72 (4 H, t, J 4.5) , 2.88 (2 H, t, J 5.4) , 2.64 (4 H, t, J 4.4) , 2.11 (3 H, s) , 1.30 (9 H, s) .

El siguiente Ejemplo se preparó usando métodos similares a aquellos usados en el Ejemplo 10 (etapas c-d) : Ejemplo Estructura N R (400 MHz) d LCMS No. 5 11 Ejemplo 12 1- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -3- (6-{3- [3- (2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1,2,4] triazolo [4,3-a] iridin-6 - ilsulfañil } -piridin-3 - il ) -urea a. 3- [3- (2- orfolin-4-il-etoxi) -fenil] -6- (5-nitro-piridin-2 -ilsulfañil) - [1,2,4] triazolo [4 , 3-a] piridina A una solución del Ejemplo 1 etapa b (300 mg, 0.67 mmol) en THF (5 mL) a 0°C se agregó por goteo 2 M de cloruro de isopropilmagnesio en Et20 (335 L, 0.67 mmol) . La reacción se agitó a 0°C por 1 h, después se agregó 2 , 21 -ditiobis ( 5 -nitro-piridina) (227 mg, 0.73 mmol). La reacción se dejó calentar a TA y se agitó por 1 h adicional después diluyó con EtOAc (10 mL) . La capa orgánica se lavó con 1 M NaOH (10 mL) , salmuera (10 mL) , se secó (MgS04) , y se concentró in vacuo. La purificación por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3) proporcionó el compuesto del título (50 mg, 16%) como un sólido amarillo. LCMS (Método 1): Rt 2.33 min, m/z 479 [MH+] . 1H NMR (400 MHz , CD3OD) : d 9.16 (1 H, d, J 2.6), 8.80 (1 H, t, J 1.2), 8.41 (1 H, dd, J 8.9, 2.7), 7.90 (1 H, dd, J 9.6, 1), 7.60-7.53 (2 H, m) , 7.50-7.45 (3 H, m) , 7.25-7.20 (1 H, m) , 4.27 (2 H, t, J 5.4), 3.73 (4 H, t, J 4.7), 2.94 (2 H, t, J 5.4) , 2.70 (4 H, t, J 4.5) . b. 6- {3- [3- (2-Morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1,2,4] triazolo [4 , 3 -a] piridin-6-ilsulfañil } -piridin-3 -ilamina El Ejemplo 12 etapa a (50 mg, 0.11 mmol) se disolvió en EtOH (10 mi.) y se trató con Pd/C (10%) (10 mg) . La reacción se agitó a TA bajo una atmósfera de hidrógeno durante 72 h. El catalizador se filtró bajo nitrógeno y lo filtrado se concentró in vacuo para dar el compuesto del título (31 mg, 66%). LCMS (Método 1): Rt 1.94 min, m/z 449 [MH+] . c. 1- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -3- (6-{3- [3-(2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] -[1,2,4] triazolo [4 , 3-a] piridin-6-ilsulfanil}-piridin-3-il) -urea El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 10 etapa d usando el Ejemplo 12 etapa b. LCMS (Método 4) : Rt 8.06 min, m/z 704 [Nttf] . ¾ NMR (400 MHZ1CDCI3) : d 8.70 (1 H, br s) , 8.57 (1 H, s), 8.25 (1 H, dd, J 8.7, 2.7), 7.99 (1 H, d, J 2.7), 7.73 (1 H, br s) , 7.63 (1 H, d, J 9.5), 7.47 (1 H, t, J 8) , 7.35-7.23 (6 H, m) , 7.09 (1 H, dd, J 8.4, 2.5), 7.04 (2 H, d, J 8) , 6.45 (1 H, s) , 4.20 (2 H, t, J 5.4), 3.73 (4 H, t, J 4.6), 2.91 (2 H, t, J 5.4), 2.67 (4 H, s) , 2.22 (3 H, s) , 1.34 (9 H, s) .

E emplo 13 1- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -3- (5- {3- [3- (2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1,2,4] triazolo [4 , 3-a] piridin-6-ilsulfanil}-piridin-2-il) -urea a. 5-{3- [3- (2-Morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1,2,4] triazolo [4 , 3 -a] piridin-6-ilsulfañil } -piridin-2-ilamina 8 El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 1 etapa c usando diclorhidrato de 2-amino-5-mercaptopiridina . LCMS (Método 1): Rt 1.77 min, m/z 449 [MH+] . b. 1- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -3- (5- {3- [3- (2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1,2,4] triazolo [4,3-a] piridin-6-ilsulfañil } -piridin-2-il) -urea El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 10 etapa d usando el Ejemplo 13 etapa a. LCMS (Método 4): Rt 8.25 min, m/z 704 [MH+] . ?? NMR (400 MHz, CD3OD) : d 8.31 (1 H, s) , 7.84 (1 H, dd, J 8.7, 2.4), 7.81-7.77 (1 H, m) , 7.74 (1 H, d, J 2.4), 7.55 (1 H, t, J 7.9), 7.41-7.33 (5 H, m) , 7.30 (2 H, d, J 8.1), 7.22 (1 H, dd, J 8.4, 2.4), 7.03 (1 H, d, J 8.6), 6.51 (1 H, s) , 4.26 (2 H, t, J 5.4), 3.75 (4 H, t, J 4.6), 2.97 (2 H, t, J 5.4), 2.74 (4 H, t, J 4.6), 2.26 (3 H, s) , 1.34 (9 H, s).

Ejemplo 14 1- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -3- (frans-4- {3- [3- ( 2 -morfolin-4 - il -etoxi ) -fenil] - [1,2,4] triazolo [4 , 3 -a] piridin-6-iloxi } -ciclohexil ) -urea a. éster tere -butíl ico del ácido (trans-4- {3-[3 - (2-Morfolin-4-il-etoxi) - fenil] - [1, 2, 4] triazolo [4,3-a]piridin-6-iloxi}-ciclohexil)-carbámico Una mezcla del Ejemplo 1 etapa b (234 mg , 0.52 mmol ) , yoduro de cobre (I) (9 mg , 0.052 mmol ) , 1,10- fenantrol ina (19 mg , 0.104 mmol ) , carbonato de cesio (335 mg , 1.04 mmol) y trans-4-boc-aminociclohexanol (560 mg , 2.6 mmol) en tolueno (3 mL) se calentó a 110°C por 72 h bajo una atmósfera de argón. La suspensión se enfrió a TA, diluyó con EtOAc (10 mi.) y filtró a través de HiFlo. Lo filtrado se concentró in vacuo y el residuo se purificó por HPLC preparativa de fase inversa (Método 3) para proporcionar el compuesto del título (205 mg, 39%) como un sólido blancuzco. LCMS (Método 2) : Rt 2.53 min, m/z 538 [MH+] . b. sal de ácido tri f luoroacé i co de trans-4- {3 - [3- (2-Morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1, 2 , 43triazolo [4 , 3-a] piridin-6-iloxi} - c ic lohexi 1 amina Una solución del Ejemplo 14 etapa a (196 mg , 0.178 mmol) en TFA (2 mL) y DCM (10 raL) se agitó a TA por 0.5 h, después se concentró in vacuo para dar el compuesto del título (rendimiento cuantitativo) . LCMS (Método 2) : Rt 0.38 rain, m/z 438 [M - CF3C02+] . c. 1- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il ) - 3 - ( f rans -4- {3 - [3- (2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1, 2 , 4] triazolo [4 , 3-a] piridin-6-iloxi} -ciclohexil) -urea El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 10 etapa d usando el Ejemplo 14 etapa b. LCMS (Método 4) : Rt 7.84 min, m/z 693 [MH+] . 1K NMR (400 MHz , CDCl3) : d 7.76 (1 H, d, J 2), 7.61 (1 H, d, J 9.9), 7.47 (1 H, t, J 8.1), 7.34-7.27 (4 H, m) , 7.13 (2 H, d, J 8.1), 7.10-7.03 (2 H, m) , 6.86 (1 H, s), 6.28 (1 H, s), 5.49 (1 H, d, J 7.6) , 4.19 (2 H, t, J 5.4), 4.06-3.97 (1 H, m), 3.76-3.67 (5 H, m) , 2.88 (2 H, t, J 5.4), 2.62 (4 H, t, J 4.4), 2.29 (3 H, s), 2.07 (4 H, d, J 11.4), 1.65-1.53 (2 H, m) , 1.33 (9 H, s), 1.29-1.16 (2 H, m) .

Se prepararon los siguientes Ejemplos usando métodos similares a aquellos usados en el Ejemplo 14: Ejemplo Estructura NMR (400 Hz) d LCMS No. 15 16 Ejemplo 17 N- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -2- (4-{3- [3- (2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1,2,4] triazolo [4,3-a] piridin-6-iloxi} -piperidin-i-il) -acetamida a. 3- [3- (2-Morfolin-4-il-etoxi) -fenil] -6- (piperidin-4 -iloxi) - [l,2,4]triazolo[4,3-a] piridina El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 14 etapas a-b, usando N-Boc-4-hidroxipiperidina, seguido por la purificación en cartucho SCX-2. LCMS (Método 5): Rt 0.38, 1.87 min, m/z 424 [MH+] . b. N- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -2-cloro-acetamida Una solución de 5-terc-butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-ilamina (886 mg, 3.86 mmol) , piridina (465 L, 5.80 mmol) y cloruro de cloroacetilo (462 µ??, 5.80 mmol) en DCM (5 mL) se agitó a TA por 2 h. La mezcla de reacción se diluyó con bicarbonato de sodio ac . sat . y DCM y la capa acuosa resultante se extrajo dos veces con DCM. Las capas orgánicas combinadas se secaron (MgS04) y se concentraron in vacuo para proporcionar el compuesto del título (1.17g, 100%) como un sólido amarillo. LCMS (Método 5) : Rt 4.41 min, m/z 306 [MH+] . c. W- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -2- (4- {3- [3-(2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] - [1, 2, 4] triazolo [4 , 3-a] piridin-6-iloxi}-piperidin-1-il) -acetamida Una solución del Ejemplo 17 etapa a (32 mg, 0.076 mmol) , Ejemplo 17 etapa b (23 mg, 0.076 mmol), yoduro de potasio (4 mg, 0.002 mmol) y carbonato de potasio (13 mg, 0.091 mmol) en acetonitrilo (5 mL) se calentó a reflujo por 2.5 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a TA, se concentró in vacuo y se purificó dos veces por HPLC preparativa de fase inversa (Método 6) para proporcionar el compuesto del título (5 mg, 9%) como un sólido blanco. LCMS (Método 4): d Rt 6.21 min, m/z 693 [MH4'] . ¾ MR (400 MHz, CD30D) : 7.92 (1 H, d, J 2.0), 7.76 (1 H, d, J 9.9), 7.58 (1 H, t, J 8.1) , 7.43-7.32 (7 H, m) , 7.22 (1 H, dd, J 8.4,.2.3) , 6.51 (1 H, s) , 4.36-4.29 (1 H, m) , 4.26 (2 ¾ 1, J 5.4), 3.72 (4 H, t, J 4.6), 3.10 (2 H, s) , 2.89 (2 H, t, J 5.4), 2.72-2.62 (6 H, m) , 2.44-2.32 (5 H, m) , 1.85 (2 H, m) , 1.61-1.53 (2 H, m) , 1.33 (9 H, s) .

Ejemplo 18 N- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -2- {4- [3- (3-hidroxi-fenil) - [1,2,4] triazolo [4, 3-a]piridin-6-ilsulfanil] -fenil} -acetamida El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 10 etapa a usando el Ejemplo 8. LCMS (Método 7): Rt 12.01 min, m/z 589 [MH+] . XH NMR (400 MHz , CD30D) : d 8.35 (1 H, t, J 1.2), 7.74 (1 H, dd, J 9.6, 1.0), 7.45-7.36 (1 H, m) , 7.37-7.32 (3 H, m) , 7.24-7.20 (4 H, m) , 7.25-7.07 (4 H, m) , 6.99 (1 H, ddd, J 8.2, 2.4, 1.1), 6.32 (1 H, s) , 3.58 (2 H, s) , 2.31 (3 H, s) , 1.31 (9 H, s) .

Ejemplo 19 N- {5-terc-Butil-2- [4- (2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] -2H-pirazol-3-il } -2- [4- (3-isopropil- [l,2,4]triazolo[4,3-a] piridin-6 - ilsulfañil ) -fenil] -acetamida a. 5-terc-Butil-2- [4- (2-morfolin-4-il-etoxi) -fenil] -2H-pirazol-3-ilamina Una solución de 4- (5-amino-3-terc-butil-pirazol-l-il) -fenol (documento WO2005/110994 , 0.462 g, 2 mmol) , 2- morfolin-4 - il-etanol (0.327 g, 2.5 mmol) y trifenilfosfina (1.05 g, 4 mmol) en THF (5 mL) bajo una atmósfera de nitrógeno se trató con azodicarboxilato de diisopropilo (0.808 mg, 4 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a TA por 16h, después diluyó con éter dietílico. La capa orgánica se lavó con agua. La capa acuosa resultante se basificó con carbonato de potasio y se extrajo con EtOAc . La capa orgánica resultante se lavó con solución ac . de ácido cítrico, y la capa acuosa resultante se basificó con carbonato de potasio, y se extrajo con EtOAc (tres veces) . La capa orgánica resultante se secó (Na2S0 ) , evaporó a sequedad después sónico con éter dietílico (10 mL) y filtró para dar el compuesto del título (0.297 g, 43%) como un sólido blanco. LC S (Método 5): Rt 0.41, 2.16 min, m/z 345 [MH+] . ¾ NMR (400 MHz, CDCl3) : d 7.46-7.39 (2 H, m) , 6.98-6.93 (2 H, m) , 5.50 (1 H, s) , 4.15- 4.08 (2 H, m) , 3.75 (4 H, t, J 4.5), 3.63 (2 H, bs) , 2.83-2.78 (2 H, m), 2.59 (4 H, t, J 4.3), 1.34-1.26 (9 H, m). b. N- { 5-terc-Butil-2- [4- (2 -morfolin-4-il-etoxi) -fenil] -2H-pirazol-3-il } -2- [4- (3-isopropil- [l,2,4]triazolo[4,3-a] piridin-6-ilsulfanil) -fenil] -acetamida El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 1 etapas c-d, usando ácido 3-mercaptoacético y Ejemplo 19 etapa a. LCMS (Método 7) : Rt 9.09 min, m/z 654 [MH+] . XH NMR (400 MHz, CDCl3) : 8.12 (1 H, s) , 7.70 (1 H, d, J 9.6), 7.22 (2 H, d, J 8.0), 7.20-7.09 (5 H, m) , 7.12-7.05 (1 H, m) , 6.93-6.86 (2 H, m) , 6.57 (1 H, s) , 4.17 (2 H, t, J 5.7), 3.73 (4 H, t, J 4.5), 3.64 (2 H, s) , 3.41- 3.32 (1 H, m) , 2.84 (2 H, t, J 5.7), 2.59 (4 H, t, J 4.4), 1.56 (3 H, s) , 1.54 (3 H, s) , 1.32 (9 H, s) .

Ejemplo 20 N- [5-terc-Butil-2- (4-hidroxi-fenil) -2H-pirazol-3-il] -2- [4- (3 -isopropil- [1,2,4] triazolo [4 , 3-a] piridin-6-ilsulfanil) -fenil] -acetamida a. N- { 5 -terc-Butil- 2 - [4- (terc-butil-dimetil silaniloxi) -fenil] -2H-pirazol-3-il}-2- [4- (3-isopropil- [1,2,4] triazolo [4 , 3 -a] piridin-6-ilsulfanil) -fenil] -acetamida El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 19 etapa b, usando 5-terc-butil-2- [4- ( tere -but i 1 - dime t i 1 - s i lani loxi ) - fenil] -2H-pirazol - 3 - ilamina ( US 2006 / 035922 ) . LCMS (Método 5) : Rt 4.96 min, m/z 655 [MH+] . XH NMR (300 MHz , CD3OD) : d 8.47 (1 H , s) , 7.65 (1 H, dd , J = 9.60, 1.01 Hz) , 7.35- 7.24 (3 H , m) , 7.22-7.17 (4 H , m) , 6.89-6.84 (2 H , m) , 6.30 (1 H, s), 3.59 (2 H , s) , 2.99 (1 H , m), 1.48 (3 H , S), 1.45 (3 H, s), 1.30 (9 H , s), 0.99 (9 H, s), 0.20 (6 H , s) . b . N- [5 - terc -But il - 2-(4-hidroxi-fenil) -2H-pirazol-3-il] -2 - [4 - (3-iso ro il - [1,2,4] triazolo [4,3-a ] pi r idin - 6 - i 1 sul f ani 1 ) -fenil] -acetamida Una solución del Ejemplo 20 etapa a (80 mg , 0.12 mmol) y trihidrofluoruro de trietilamina (40 mg, 0.24 mmol) en THF (2 mL) se agitó a TA por 24h, después diluyó con EtOAc, lavó con bicarbonato de sodio ac . sat . , se secó (Na2S04), y evaporó. El residuo se purificó por FCC (DC /MeOH 100/0 a 95/5) , se disolvió en EtOAc, lavó con ácido cítrico ac . y salmuera, se secó (Na2S04) , evaporó y se secó in vacuo a 40 °C para proporcionar el compuesto del título (45 mg , 68%) como un sólido rosa. LCMS (Método 7) : Rt 11.15 min, m/z 541 [ H+] . XH NMR (400 MHz, CDC13 ) : d 8.23 (1 H, s) , 7.91 (1 H, s), 7.74 (1 H, d, J 9.5), 7.25-7.14 (5 H, m) , 7.05 (2 H, d, J 8.4) , 6.85 (2 H, t, J 8.6), 6.51 (1 H, s), 3.64 (2 H, s) , 3.47-3.38 (1 H, m) , 1.55 (3 H, s), 1.53 (3 H, s) , 1.31 (9 H, s) .

Ejemplo 21 1- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -3- [4- (3-isopropil- [1,2,4] triazolo [4, 3-a] piridin-6-iloxi) -ciclohexil] -urea del ácido Una solución de 5-fluoro-2-hidrazinil-piridina (0.59 g, 4.65 mmol) , ácido isobutírico (528 mg, 6 mmol), e hidrato de HOBt (153 mg, 1 mmol) en DCM (10 mi.) se trató con EDCI HC1 (1.15 g, 6 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a TA por 40 min, se vertió en bicarbonato de sodio ac. sat. (40 mL) , se extrajo con cuatro porciones de DCM, se secó (Na2S04) , evaporó y se purificó por FCC (DCM/EtOAc 9/1 a 3/7) para dar el compuesto del título (0.42 g, 46%). LCMS (Método 8): Rt 2.46 min, m/z 198 [MH+] . b. 6-Fluoro-3-isopropil- [1,2,4] triazolo [4, 3-a] piridina Una solución del Ejemplo 21 etapa a (0.41g, 2.08 mmol) , trifenilfosfina (763 mg, 2.91 mmol) y trietilamina (0.87 mL, 6.24 mmol) en THF (5 mL) a 0°C se trató con 1,2-hexacloroetano (690 mg, 2.91 mmol) . La mezcla de reacción se agitó a 0°C por 40 min después a TA por 20 min, se apagó con agua, se extrajo dos veces con EtOAc, se secó (Na2S04) , evaporó y se purificó dos veces por FCC (ciclohexano/EtOAc 1/0 a 1/1) para proporcionar el compuesto del título (274 mg, contaminado con 20% PPh30, 58%) como un sólido blanco. LCMS (Método 5): Rt 2.58 min, m/z 180 [MH+] . c. 4- ( 3 - isopropil - [1, 2 , 4] triazolo [4 , 3-a] piridin-6-iloxi) -ciclohexilamina Una solución de trans- -amino-ciclohexanol (402 mg , 3.6 mmol) y tere -butóxido de potasio (395 mg , 3.6 mmol) en tolueno (1 mL) y 1 , 3 - dimet i 1 - 3 , 4 , 5 , 6 -tetrahidro- 2 ( 1H) -pi imidinona (0.5 mL) se calentó a 80°C bajo argón por 20 min, después se trató con el Ejemplo 21 etapa b (274 mg , contaminado con 20 % PPh30, 1.2 mmol) . La mezcla de reacción se agitó por 1 h, se apagó con agua y se extrajo con tres porciones de EtOAc . Lo acuoso y las capas orgánicas combinadas se purificaron en cartucho SCX (MeOH a 1 N NH3 en MeOH) , y el residuo resultante se purificó por FCC (DCM/MeOH con 0.1% NH3 100/0 a 85/15) para dar el compuesto del título (235 mg, 71%) . LCMS (Método 5) : Rt 1.86 min, m/z 275 [MH+] . d. 1 - ( 5 - terc-But il - 2 -p- tol il - 2H-pirazol - 3 -il) - 3- [4- (3- i sopro i 1 - [1,2,4] triazolo[4,3-a]piridin-6-iloxi ) -ciclohexil] -urea El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 10 etapa d partiendo del Ejemplo 21 etapa c y usando dioxano en lugar de DMSO. LCMS (Método 7) : Rt 11.66 min, m/z 530 [MH+] . 1H NMR (400 MHz, CDC13 ) : d 7.60 (1 H, d, J 9.9) , 7.37 (1 H, s) , 7.34 (2 H, d, J 8.2) , 7.19 (2 H, d, J 8.1) , 7.03 (1 H, dd, J 9.9, 2.0) , 6.37 (1 H, s) , 6.23 (1 H, s) , 5.12 (1 H, d, J 7.5) , 4.07 (1 H, m) , 3.73 (1 H, m) , 3.31-3.22 (1 H, m) , 2.34 (3 H, s) , 2.12-2.05 (4 H, m) , 1.68-1.56 (2 H, m) , 1.51 (3 H, s) , 1.49 (3 H, s) , 1.54-1.31 (2 H, m) , 1.34 (9 H, s) .

E emplo 22 N ' - (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -2- [4 - ( 3 - iso ropil - [1, 2 , 4] triazolo [4 , 3 -a] piridin-6- iloxi ) -ciclohexil] -acetamida a. Éster etílico del ácido [4- (3-isopropil-[1,2,4] triazolo[4,3-a] piridin- 6 - iloxi ) -ciclohexil ] -acético El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 21 etapa c partiendo de éster etílico del ácido trans- (4-hidroxi-ciclohexil) -acético (Krieg et al., Journal fuer Praktische Chemie 1987, 329 (6), 1123-30)). LCMS (Método 5): Rt 4.16-4.23 min, m/z 346 [MH+] . b. Ácido [4- (3-isopropil- [1, 2, 4] triazolo [4, 3-a] piridin-6 - iloxi ) -ciclohexil] -acético Una solución del Ejemplo 22 etapa a (50 mg, 0.145 mmol) e hidróxido de sodio 1N (0.5 mL, 0.5 mmol) en MeOH (2 ttiL) se agitó a TA por 16h. La mezcla de reacción se trató con bicarbonato de sodio ac . sat . , evaporó a sequedad, y se purificó en una FCC de fase inversa (agua/MeOH 100/.0 a 0/100) para dar dos fracciones. La primera fracción de elución se acidificó a pH 5 con solución 1 N HCl y se extrajo con EtOAc . La capa orgánica se secó (MgS04) , filtró, combinó con la segunda fracción de elución de la cromatografía y se concentró in vacuo. El residuo resultante se disolvió en MeOH/EtOAc (1:1, 10 mL) , filtró y evaporó a sequedad para dar el compuesto del título como un sólido marrón pálido (27 mg, 59%) . LCMS (Método 5) : Rt 3.58-3.65 min, m/z 318 [MH+] . c . N- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -2- [4-(3-isopropil- [1,2,4] triazolo [4, 3 -a] piridin-6 - iloxi ) -ciclohexil] -acetamida El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 1 etapa d partiendo del Ejemplo 22 etapa b. LCMS (Método 10) : Rt 11.59 min, m/z 529 [MH+] . XK NMR (400 MHz, CDC13) : d 7.67 (1 H, d, J 9.9), 7.38 (1 H, s), 7.36-7.25 (4 H, m) , 7.20 (1 H, m) , 7.04 (1 H, dd, J 9.8, 2.0), 6.60 (1 H, s) , 4.10-3.98 (1 H, m) , 3.3.28 (1 H, m) , 2.41 (3 H, s) , 2.21 (2 H, d, J 6.5), 2.16 (3 H, m) , 1.93 (4 H, m) , 1.52 (3 H, s) , 1.51 (3 H, s), 1.34 (9 H, s) , 1.23-1.07 (2 H, m) .

Ejemplo 23 N- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -2- [4- (3-isopropil- [1,2,4] triazolo [4 , 3-a] piridin-6-iloxi) -fenil] -acetamida a . 6-yodo-3-isopropil- [1,2,4] triazolo [4 , 3-a] piridina compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 1 etapas a-b usando 2-metil-propionaldehído. LCMS (Método 5): Rt 3.43 min, m/z 288 [MH+] . XH NMR (300 MHz, CD30D) : 8.75 (1 H, s), 7.58 (1 H, dd, J 9.6, 1.5), 7.52 (1 H, dd, J 9.6, 1.1), 3.68-3.49 (1 H, m) , 1.50 (3 H, s) , 1.47 (3 H, s) . b . 2- [4 - (3-isopropil- [1,2,4] triazolo [4 , 3 -a] piridin-6-iloxi) -fenil] -acetamida Una solución del Ejemplo 23 etapa a (430 mg, 1.5 mmol) , tere-butilo 2 - (4 -hidroxifenil ) acetato (WO2008/024746 , 621 mg, 3 mmol), carbonato de cesio (978 mg, 3 mmol), cloruro de cobre (I) (74 mg, 0.75 mmol) y 2,2,6,6-tetrametilheptandiona (28 mg, 0.15 mmol) en N-metilpirrolidinona (2 mL) se calentó a 115°C por 1 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a TA, diluyó con éter dietílico y lavó con agua. La capa acuosa se extrajo con EtOAc y DCM y las capas orgánicas combinadas se secaron (Na2S04) , filtraron y se concentraron in vacuo. El aceite resultante se purificó en un cartucho SCX-2 eluyendo con EtOAc, MeOH después 1 N amoníaco en MeOH. Las fracciones de amoníaco se concentraron in vacuo y se purificaron dos veces por FCC (DCM/MeOH que contiene NH3 10/0 a 9/1 después EtOAc) para proporcionar el compuesto del título como una goma anaranjada (44 mg, 8%). LCMS (Método 8): Rt 4.30 min, m/z 368 [MH+] . c. Ácido [4 - (3 -isopropil- [1, 2 , 4] triazolo [4 , 3-a] iridin-6-iloxi) -fenil] -acético Una solución del Ejemplo 23 etapa b (44 mg, 0.12 mmol) , TFA (1 raL) y anisol (1 mL) en DCM (1 mL) se agitó a TA por 1 h, después evaporó in vacuo. El residuo resultante se suspendió en éter dietílico (3 mL) , filtró y se secó in vacuo para dar el compuesto del título (38 mg, cuant . ) . LCMS (Método 5) : Rt 3.65 min, m/z 312 [MH+] . d. N' - (5- erc-Bu il -2 -p-tolil -2H-pirazol-3 - il ) -2- [4- (3- isopropil- [1,2,4] triazolo [4, 3 -a] piridin-6-iloxi) -fenil] -acetamida El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 1 etapa d partiendo del Ejemplo 23 etapa c. LCMS (Método 10): Rt 11.60 min, m/z 523 [MH+] . ? NMR (400 MHz, CDC13) : 7.77 (1 H, d, J 9.9), 7.66 (1 H, s) , 7.29 (1 H, s) , 7.26-7.15 (4 H, m) , 7.14 (2 H, d, J 8.1 ), 7.05 (1 H, dd, J 9.9, 2.0), 6.98 (2 H, d, J 8.1 ), 6.60 (1 H, s) , 3.67 (2 H, s), 3.27 (1 H, m) , 2.39 (3 H, s), 1.52 (3 H, s) , 1.50 (3 H, s) , 1.33 (9 H, s) .

Ejemplo 24 N- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) - 2-[4 - ( 3 - isopropil - [1, 2,4] triazolo [4, 3-a]piridin-6-ilsulfanil) -fenil] -propionamida a. Ester metílico del ácido [4 - ( 3 - I sopropi 1 [l,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-6-ilsulfanil) -fenil] -acético A una solución de ácido 4 - ( 3 - i sopropi 1 - [1,2,4] triazolo [4, 3-a]piridin-6-ilsulfanil) -fenil] -acético (preparada en una manera similar al Ejemplo 1 etapa c) (209 mg, 0.639 mmol) en MeOH (20 mL) se agregó HCl concentrado (25 µ]_?) y la reacción se agitó a reflujo por 5 h. La reacción se enfrió a TA, se concentró in vacuo, dividió entre DCM (5 mL) y NaHC03 sat . (5 mL) , la capa orgánica se separó, se secó (MgS04) , y se concentró in vacuo para proporcionar el compuesto del título (218 mg) . LCMS (Método 1) : Rt 3.04 min, m/z 342 [MH+] . b. Ester metílico del ácido 2- [4- (3-isopropil- [1,2,4] triazolo[4,3-a] piridin-6-ilsulfañil) -fenil] -propiónico Una solución del producto del Ejemplo 24 etapa b (218 mg, 0.637 mmol) en THF (5 mi.) se enfrió a 0°C y se agregó LiHMDS (1 en hexanos, 702 µ?, 0.702 mmol). Después de 10 min . se agregó yodometano (43 µ?,, 0.702 mmol) y se continuó agitando a 0°C por 0.5 h, después se dejó calentar lentamente a TA con agitación durante la noche. La reacción se apagó con solución saturada de NH4C1 (5 mL) , se extrajo con Et20 (2 x 10 mL) , se secó (MgS04) , y se concentró in vacuo. La purificación por cromatografía usando 0-10% de DCM/MeOH proporcionó el compuesto del título (69.2 mg, 30%). LCMS (Método 1) : Rt 3.25 min, m/z 356 [MH+] . c . Ácido - (3 - isopropil- [1,2,4] triazolo [4,3 ridin-6-ilsulfañil) -fenil] -propiónico Una solución del producto del Ejemplo 24 etapa c (69.2 mg, 0.194 mmol) en 1 M NaOH (1 mL) y MeOH (2 mL) se agitó a temperatura ambiente por 3.5 h. La reacción se apagó con ácido acético (1 mL) y se concentró in vacuo para proporcionar el compuesto del título. LCMS (Método 1) : Rt 3.11 min, m/z 342 [MH+] . d. N- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -2 - [4- (3-isopropil- [1,2, ] triazolo [4, 3-a]piridin-6-ilsulfanil) -fenil] -propionamida El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 1 etapa d partiendo del Ejemplo 24 etapa c. LCMS (Método 4) : Rt 5.25 min, m/z 553 [MH+] . ? NMR (400 MHz, MeOD) : d 8.53 (1 H, dd, J 1.6, 1.0Hz) , 7.66 (1 H, dd, J 9.5, 1.0Hz) , 7.34 (2 H, m) , 7.31 (1 H, dd, J 9.5, 1.6Hz) , 7.23 (2 H, m) , 7.09 (4 H, s) , 6.27 (1 H, s) , 3.72 (1 H, q, J 7.1 Hz) , 3.55 (1 H, m) , 2.31 (3 H, s) , 1.47 (6 H, 2 x d, J 6.9Hz) , 1.40 (3 H, d, J 7.1 Hz) , 1.30 (9 H, s) .

Ejemplo 25 1- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il] -3- [4- (3-ciclopentil- [1,2,4] triazolo [4 , 3 -a] piridin-6-iloxi) -ciclohexil] -urea compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 21. LCMS (Método 11) : Rt 4.59 min, m/z 555 [M+] . ?? NMR (400 MHz , MeOD) : d 7.88 (1 H, dd, J 2.1, 0.8) , 7.60 (1 H, dd, J 9.9, 0.8) , 7.30 (4 H, m) , 7.25 (1 H, dd, 9.9, 2.1) , 6.27 (1 H, s) , 4.32 (1 H, m) , 3.57 (2 H, m) , 2.38 (3 H, s) , 2.20 (2 H, m) , 2.10 (2 H, m) , 1.87 (9 H, m) , 1.56 (2 H, m) , 1.35 (1 H, m) , 1.28 (9 H, s) .

E emplo 26 1 -[4-(3-isopropil- [l,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-6-il oxi ) -ciclohexil] -3 - [5- (1-metil-l-me t i 1 sul fani 1 - et i 1 ) - 2 - - tol i 1 - 2H - i razol - 3 - i 1 ] -urea El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 1 etapa d partiendo del Ejemplo 21 etapa c. LCMS (Método 11) : Rt 4.59 min, m/z 561 [M+] . XK NMR (400 MHz, MeOD) : d 7.85 (1 H, dd, J 2.1, 0.8) , 7.57 (1 H, dd , J 9.9, 0.8) , 7.30 (4 H, m) , 7.21 (1 H, dd, 9.9, 2.1) , 6.41 (1 H, s) , 4.32 (1 H, m) , 3.56 (1 H, m) , (1 H, sept . , J 6.9) , 2.38 (3 H, s) , 2.11 (2 H, m) , 1.98 (2 H, m) , 1.91 (3 H, s) , 1.61 (6 H, s) , 1.56 (2 H, m) , 1 .42 (6 H, d, J 6.9) , 1.35 (3 H, m) .

Ejemplo 27 N- {5-terc-Butil-2- [3- (2-piridin-4-il-etoxi) -2H-pirazol-3-il} -2- [4- (3-isopropil- [1,2,4] triazolo [4 , 3 a] iridin-6-ilsulfanil) -fenil] -acetamida El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 1 etapa d. LCMS (Método 11) : Rt 3.81 min, m/z 646 [MH+] . XH NMR (400 MHz , CDCl3) : d 8.53-8.49 (2 Hx m) , 8.04 (1 H, s) , 7.64 (1 H, d, J 9.6), 7.26 (1 H, s NH) , 7.24-7.10 (7 Hi m) , 7.02 (1 H, dd, J 9.6, 1.6), 6.87 (1 H, t, J 2.4) , 6.82 (1 H, ddd, J 8.4, 2.4, 1.0), 6.63 (1 H, d, J 7.9), 6.57 (1 H, s) , 4.19 (2 H, t, J 6.4), 3.62 (2 H, s) , 2.36-3.28 (1 H, m) , 3.08 (2 H, t, J 6.4) , 1.51 (6 H, d, 6.9) , 1.29 (9 H, s) .

Ejemplo 28 El Ejemplo 28 se preparó usando un método similar a aquel usado en el Ejemplo 1. LCMS (Método 11) : Rt 5.12 min, m/z 525 [MH+] . XH NMR (400 MHz, CDCl3) : d 1.36 (9H, s) , 1.54 (6H, d, J 8Hz) , 2.41 (3H, s) , 3.37 (1 H, q, J 8Hz) , 6.71 (1 H, s) , 7.12-7.16 (1 H, m) , 7.28-7.33 (2H, m) , 7.35-7.46 (5H, m) , 6.68-7.73 (1 Hi m) , 7.78 (1 Hi S) , 7.91 (1 H, s) , 8.12 (1 H, s) .

Ejemplo 29 1- (5-terc-Butil-2-p-tolil-2H-pirazol-3-il) -3- [4- (3-piridin-2 -il - [l,2,4]triazolo[4,3-a] piridin-6 - iloxi ) -ciclohexil] -urea El compuesto del título se preparó en una manera similar al Ejemplo 10 etapa d usando dioxano en lugar de DMSO y calentando a 80°C. LCMS (Método 7) : Rt 4.95 min, m/z 565 [MH+ ] . 1K NMR (400 MHz, DMSO) : d. 9.36 (1 H, dd, J 2.3, 0.8) , 8.74 (1 H, ddd, J 4.9, 1.8, 1.1) , 8.34 (1 H, dt, J 8.1, 1.1, 1.1) , 8.03-7.97 (1 H, m) , 7.91 (1 H, s, NH) , 7.86 (1 H, dd, J 9.8, 0.8) , 7.48 (1 H, ddd, J 7.5, 4.9, 1.1) , 7.37 (1 H, dd, J 9.8, 2.3) , 7.31-7.24 (4 H, m) , 6.52 (1 H, d, J 7.4 NH) , 6.21 (1 H, s) , 4.34-4.24 (1 H, m) , 3.52-3.40 (1 H, m) , 2.32 (3 H, s) , 2.12-2.00 (2 H , m) , 1.92- 1.84 (2 H, m) , 1.56-1.44 (2 H, m) , 1.34-1.22 (2 H , m) , 1.20 (9 H , s) .

Ensayos Biológicos Ensayo de Ciñasa. p38 La enzima p38 recombinante humana expresada en E. coli y activada por incubación con la enzima MKK6 (Calbiochem #559324) se usó como fuente de actividad enzimática .

El ensayo se llevó a cabo en placas de ensayo de 96 cavidades de fondo plano, transparentes, de alto enlace, las cuales han sido recubiertas con ATF-2 recombinante (Biosource #PHF0043) . Los compuestos de prueba se incubaron con cinasa p38 por 2h previo al inicio del ensayo de cinasa por la adición de ATP para obtener una concentración de ensayo de 250µ?. La fosforilación de ATF-2 se detectó y cuantificó usando un ELISA. Este consiste de incubación secuencial en la presencia de ant i - fosfo-ATF2 , anti-IgG biotinilado y estreptavidina-HRP . La incubación con un sustrato cromogénico HRP (TMB) resulta en absorbancia que es proporcional a la cantidad de sustrato fosforilado producida. La absorbancia es detectada usando un lector de placa de cavidades múltiples.

Los compuestos se diluyen en DMSO previo a la adición al amortiguador de ensayo, la concentración final de DMSO en el ensayo es 1%.

El IC50 es definido como la concentración en cual un compuesto dado logra 50% de inhibición control .

Los resultados se muestran en la Tabla 1.

Tabla 1 En la Tabla 1 anterior, las potencias de enlace de p38a (valores IC50) se indican como sigue: <2000-500nM 1 + ' ,· <500-100nM '++'; 10 -<100nM '+++'; <10nM '++++'. Todos los compuestos probados exhiben valores IC50 <2000nM; NT no probado .

Ensayo funcional de p38 La inhibición de la p38 celular reduce la liberación de TNFa, una respuesta funcional la cual es cuantificada midiendo la cantidad de TNFa en los sobrendantes de células THP-1 activadas por LPS (una línea de células monocíticas inmortalizadas) o células mononucleares de sangre periférica (PBMCs) aisladas de sangre humana recientemente extraída .

Células sembradas en placas de 96 cavidades se pre-trataron por la adición de inhibidores de p38 por lh seguido por adición de lipopolisacárido (LPS) para activar la producción y liberación de citocina. La cantidad de TNFa liberado en los sobrenadantes celulares es cuantificada usando un kit de ensayo inmunosorbente ligado a la enzima Systems R&D (ELISA) (producto DY210) siguiendo las instrucciones de los fabricantes.

Los compuestos son diluidos en DIVISO previo a la adición, la concentración de DMSO final en el ensayo es 0.3%. El EC50 es definido como la concentración en la cual un compuesto dado alcanza 50% de inhibición del control .

Los resultados se muestran en la Tabla 2.

Tabla 2 En la Tabla 2 anterior, los valores EC50 son indicados como sigue: <7000-500nM ' + 1 ; <500- ????? ' ++ ' ; 10 -<100nM '+++'; <10nM '++++'. Todos los compuestos probados exhiben valores EC50 <2000nM; NT no probado.

Ensayos biológicos Modelo de ratón pre-clínico de inflamación COPD- inflamación pulmonar inducida por humo de tabaco Varios estudios han establecido que el número de células inflamatorias recuperadas en el lavado broncoalveolar (BAL) es signi icantemente elevado 24 h después de la exposición final al humo de tabaco (TS) de 4 u 11 días consecutivos de exposiciones a TS, este punto de tiempo se usó en los estudios reportados en la presente.

Los protocolos para la exposición de ratones a TS, obteniendo lavado broncoalveolar (BAL) , preparación de laminillas de citospin para conteos de células diferenciales, son como se resumen posteriormente.

Exposición de ratones a TS diariamente por 4 u 11 días consecutivos En este protocolo de exposición, los ratones se expusieron en grupos de 5 individuos en cámaras de policarbonato transparentes individuales (27 cm x 16 cm x 12 cm) . El TS de los cigarrillos se dejó entrar a las cámaras de exposición a una velocidad de flujo de 100 ml/min. Para minimizar algunos problemas potenciales causados por la exposición repetida a un nivel elevado de TS (6 cigarrillos) , la exposición de los ratones al TS se incrementó gradualmente durante el periodo ~de _ exposición a un máximo de 6 cigarrillos. El programa de exposición usado por 4 días fue como sigue: Día 1: 4 cigarrillos (aproximadamente 32 min de exposición) Día 2: 4 cigarrillos (aproximadamente 32 min de exposición) Día 3: 6 cigarrillos (aproximadamente 48 min de exposición) Día 4: 6 cigarrillos (aproximadamente 48 min de exposición) El programa de exposición usado por 11 días de exposición fue como sigue: Día 1: 2 cigarrillos (aproximadamente 16 min de exposición) Día 2: 3 cigarrillos (aproximadamente 24 min de exposición) Día 3 : 4 cigarrillos (aproximadamente 32 min de exposición) Día 4: 5 cigarrillos (aproximadamente 40 min de exposición) Día 5 a 11: 6 cigarrillos (aproximadamente 48 min de exposición) Un grupo adicional de ratones se expuso al aire en una base diaria por longitudes de tiempo equivalentes como controles (sin exposición a TS) .

Análisis de lavado broncoalveolar (BAL) Se realizó lavado broncoalveolar como sigue: la tráquea se canuló usando una cánula intravenosa de nylon Portex (ajuste luer rosa) acortada a aproximadamente 8 mm. Se usó salina amortiguada de fosfato (PBS) como el fluido de lavado. Un volumen de 0.4 mi se instiló suavemente y se retiró 3 veces usando una jeringa de 1 mi y después se colocó en un tubo Eppendorf y mantuvo en hielo previo a determinaciones subsecuentes .

Conteos Celulares : Se preparó fluido de lavado a partir de células por centrifugación y el sobrenadante se decantó y congeló para análisis subsecuente. La pelotilla celular se resuspendió en un volumen conocido de PBS y se calcularon los números de células totales contando una alícuota teñida (teñido Turks) bajo un microscopio usando un hemocitómetro . Se realizaron conteos celulares diferenciales como sigue: La pelotilla celular residual se diluyó a aproximadamente 105 células por mi. Se colocó un volumen de 500 µ? en el embudo de una laminilla de citospin y centrifugó por 8 min a 800 rpm . La laminilla se secó en aire y se tiñó usando soluciones ' Kwik-Diff' (Shandon) como por las instrucciones propietarias. Cuando se secó y cubrió la laminilla, las células diferenciales se contaron usando microscopio de luz. Hasta 400 células se contaron por operador unidesviado usando microscopio de luz . Las células se diferenciaron usando técnicas morfométricas estándares.

Tratamiento de Fármaco Roedores tales como ratones y ratas son respiradores nasales obligados de este modo el suministro oral de materiales de prueba (tales como agentes terapéuticos) por inhalación, no producirá buena exposición pulmonar. Como una consecuencia, el suministro de agentes terapéuticos a los pulmones en roedores en general se logra por inhalación intra-nasal, intra-tecal o por exposición de aerosol al cuerpo completo en una cámara.

El método de cámara utiliza grandes cantidades de material de prueba y es en general reservado por estudios de toxicología de inhalación en lugar de estudios de eficacia farmacológica. La administración intra-traqueal es un método de suministro muy eficiente ya que casi todo el material de prueba es suministrado a los pulmones, pero esto es casi una técnica invasiva. Para estudios en el ratón particularmente, es también casi técnicamente demandante ya que el diámetro de la tráquea es completamente pequeño. La ruta intranasal es menos invasiva que la ruta intra-traqueal y así es particularmente adecuado para estudios de dosificación repetida tal como el modelo de ratón de 4-11 días descrito anteriormente. Después de la administración intranasal -50% de la dosis administrada es suministrada a los pulmones (Eiles JE, Williamson ED and Alpar HO. 1999, lnt J Pharm, 189 (1) : 75-9) .

Como una ruta subrogada para inhalación oral, los ratones fueron dosificados intra-nasalmente con vehículo (0.2% tween 80 en salina), Ejemplo 10 ( 30 µ?/ kg ) , Ejemplo 10 ( 100 g/ kg ) o Ejemplo 10 ( 300 g/ kg ) . El grupo de control de ratones recibió el vehículo lhr previo a ser expuesto al aire diariamente por un máximo de 50 minutos por día. La exposición a TS se condujo por 4 días. El BAL se realizó 24 h después de la exposición final a TS.

Análisis estadístico y manejo de datos Todos los resultados son presentados como puntos de datos individuales para cada animal y el valor medio se calculó para cada grupo. Puesto que las pruebas para normalidad fueron positivas, los datos se sometieron a un análisis de una forma de prueba de varianza (ANOVA) , seguido por una corrección Bonferroni para comparaciones múltiples para probar la significancia entre los grupos de tratamiento.

Un valor "p" de < 0.05 se consideró por ser estadísticamente significante. Los porcentajes de inhibición fueron automáticamente calculados dentro de las hojas de cálculo Excel para los datos de células usando la fórmula siguiente: f r.esultado de grupo de tratamiento - resultado de grupo falso % de inhibición = 1 - resultado de grupo de vehículo de TS- resultado de grupo falso Los datos de inhibición para otros parámetros se calcularon normalmente usando la fórmula anterior.

Breve Descripción de las Figuras La Figura 1 es una gráfica de barras que ilustra el efecto de administración intranasal a ratones de laboratorio con vehículo (0.2% tween 80 en salina), Ejemplo 10 (30 µ?/kg) , Ejemplo 10 (100 yg/kg) o Ejemplo 10 (300 yg/kg) en el número de células BALL inducidas por humo de tabaco 24 horas posteriores a la exposición final.

La Figura 2 es una gráfica de barras que ilustra el efecto de administración intranasal a ratones de laboratorio con vehículo (0.2% tween 80 en salina), Ejemplo 10 (30 pg/kg) , Ejemplo 10 (100 yg/kg) o Ejemplo 10 (300 pg/kg) en el número de neutrófilos BAL inducidos por humo de tabaco 24 horas posteriores a la exposición final.

Como se ilustra en la Figura 1, el Ejemplo 10 inhibe significantemente el influjo de células BAL inducido por TS a 30, 100 o 300 µ?/kg cuando se administra por la ruta intranasal. Se observaron hallazgos similares con neutrófilos de BAL (Figura 2). Los resultados demuestran un claro efecto anti=inflamatorio en los pulmones de ratones expuestos a TS .

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (17)

REIVI DICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :

1. Un compuesto de la fórmula (I), o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable: caracterizados porque; R1 es alquilo Ci-C6, cicloalquilo C3-C6, fenilo el cual es heteroarilo monocíclico de 5 o 6 elementos opcionalmente sustituido, el cual es opcionalmente sustituido o un radical de la fórmula (II) en donde n es 1 o 2; y R3 y R4 son independientemente H o alquilo Ci-C6, o R3 y R4 tomados junto con el nitrógeno al cual están unidos forman un anillo heterocíclico de 6 elementos que opcionalmente contienen un heteroátomo adicional seleccionado de N y O; Y es -O- o -S(0)p- en donde p es 0, l o 2 ; A es un radical arileno divalente opcionalmente sustituido, o un radical heteroarileno mono o bicíclico, o un radical cicloalquileno divalente C3-C6 que tiene 5 o 6 átomos en el anillo, o un radical piperidini leño en donde el nitrógeno del anillo está ligado a R2NHC(=0)W-; W es un enlace, -NH- o -C(RA) (RB) -, en donde RA y RB son independientemente H, metilo, etilo., amino, hidroxilo o halo; y R2 es un radical de la fórmula (IIIA) , (IIIB) o (IIIC) : (IIIA) (IIIB) (IIIC) en donde m es 0 o 1; q es 0, 1, 2 o 3 ; T es -N= O -CH=; R5 es H O F; R7 es -CH3, -C2H5/ -CH2OH, -CH2SCH3, -SCH3 o -SC2HS; R8 es -CH3 o -C2H5; y cada incidencia de R6 es independientemente H, alquilo Ci-C6, hidroxi o halo; o una incidencia única de Rs es un radical de la fórmula (IVA) , (IVB) O ( I VC ) mientras cualquier otra incidencia de R6 es independientemente H, alquilo Ci - C6 , hidroxilo o halo; en donde n y p son como se definen anteriormente; y en donde en R6 Reia y Reib SQn Hi alqu i0/ 0 Rsia y Rsib se pueden unir junto con el nitrógeno al cual están unidos para formar un anillo heterocíclico que opcionalmente contiene un heteroátomo adicional seleccionado de N y 0.

2. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el radical divalente -W- [A] -Y- tiene una de las siguientes fórmulas (B) - (J) : (B) (C) (D) (E) (H (G) (H) (I) (J)

3. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque tiene la fórmula (IA) : en donde ; V, V, X y ?' son independientemente -CH= o -N=; y R1, R2, Y y W son de conformidad con la reivindicación 1.

4. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque tiene la fórmula (IA1) : en donde Y es O u S y R1 y R2 son de conformidad con la reivindicación 1.

5. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque tiene la fórmula (IB) : en donde ; U es CH o N, y; R1, R2, Y y son de conformidad con la reivindicación 1, con la condición de que cuando U es N entonces W no es NH.

6. Un compuesto de conformidad con 1 reivindicación 1, caracterizado porque tiene la fórmul (IB1) : en donde Y es O u S y R1 y R2 son de conformidad con la reivindicación 1.

7. Un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque tiene la fórmula (IC) : en donde Y es O u S, R2 es de conformidad con la reivindicación 1, y R1 es fenilo, heteroarilo monocíclico de 5 o 6 elementos o un radical de la fórmula (II) de conformidad con la reivindicación 1.

8. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque R1 es un grupo de la fórmula (II) de conformidad con la reivindicación 1 en donde el grupo -NR3R4 es morfolinilo.

9. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizado porque R1 es isopropilo o 2 , 6-diclorofenilo.

10. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, caracterizado porque. R2 es un radical de la fórmula (IIIC) de conformidad con la reivindicación 1, en donde R7 y R8 son cada uno metilo.

11. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizado porque R2 tiene la fórmula (IIID) , (IIIE) , (IIIF) o (IIIG) :

12. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizado porque R2 es un radical de la fórmula (IIIA) de conformidad con la reivindicación 1, en donde m es 0.

13. Un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, caracterizado porque R2 es un radical de la fórmula (IIIB) de conformidad con la reivindicación 1, en donde (a) T es -CH= y R5 = H; o (b) T es -N= y R5 = H; O (c) T -CH= y R5 = F.

14. Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, junto con uno o más portadores y/o excipientes farmacéuticamente aceptables.

15. Una composición de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada porque se adapta para inhalación por administración pulmonar.

16. Uso de un compuesto de conformidad con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 , para el tratamiento de enfermedades o condiciones las cuales se benefician de la inhibición de la actividad de cinasa p38 MAP.

17. Uso de conformidad con la reivindicación 16, en donde la enfermedad o condición es neumonía eosinofílica crónica, asma, COPD, síndrome de angustia respiratoria en adultos (ARDS) , exacerbación de hiper-reactividad de las vías respiratorias consecuente a otra terapia de fármaco o enfermedad de las vías respiratorias que se asocia con hipertensión pulmonar.