MX2011005304A - Administracion combinada de farmaco. - Google Patents

Abstract

La presente invención está dirigida a la administración en combinación. La invención proporciona una combinación que comprende (a) un tioéster o un profármaco de la forma activa del mismo, y (b) al menos un inhibidor de esterasa. También se proporcionan una composición farmacéutica, un envase, y un kit que comprende el ingrediente activo anteriormente mencionado, así como un método para el tratamiento y profilaxis de un trastorno cardiovascular que involucra el uso de los ingredientes activos anteriormente mencionados.

Description

ADMINISTRACION COMBINADA DE FARMACO Descripción de la Invención La presente invención está dirigida a la administración combinada de un inhibidor de esterasa y un tioéster .

En un primer aspecto, la presente invención proporciona un proceso para incrementar la biodisponibilidad de un tioéster, en donde es administrada una forma de dosis que contiene un inhibidor de esterasa en combinación con una forma de dosis que contiene el tioéster.

La forma de dosis que contiene el inhibidor de esterasa puede ser administrada al mismo tiempo que la forma de dosis que contiene el tioéster, o puede s^r administrada en una secuencia mediante la cual la administración . de la forma de dosis que contiene el inhibidor de esterasa es preferentemente antes a la administración de la forma de dosis que contiene el tioéster, por ejemplo, 1 a 60 minutos, por ejemplo, 1 a 40 minutos, por ejemplo, 1 a 20 minutos antes de la administración del tioéster.

El término "esterasa" denota un grupo de enzimas las cuales en una reacción química con el agua, dividen los ésteres en un ácido y un alcohol, por ejemplo, un tioéster en un ácido y un tioalcohol. Los ejemplos para un inhibidor de esterasa incluyen los inhibidores de las carboxilesterasas Ref.:219821 humanas (Satoh et al, Chemico-Biological Interactions 162:195-211 (2006) tal como los derivados bencílicos, por ejemplo, la 1- {4- [oxo (fenil) acetil] fenil} -2-feniletan-l, 2-diona (Wadkins et al., J. Med. Chem. 48:2906-2915 (2005), o las trifluorometil-cetonas , por ejemplo,.3- (dodecilsulfonil) -1 , 1 , 1-trifluoropropan-2 , 2-diol (Wadkins et al., Molecular Pharmacology 71 :713-723 (2007), o los derivados de nitrofeniléster, por ejemplo, el éster 4 -nitrofenílico del ácido 4-bencil-piperidin-l-carboxílico, o los derivados de sulfonamida, por ejemplo, la 4-cloro-N- (4- { [ (4-clorofenil) sulfonil] amino} fenil) bencensulfonamida (Wadkins et al. Molecular Pharmacology 65 (6) : 1336-1343 (2004). Otros ejemplos del inhibidor de esterasa incluyen los inhibidores de lipasa tales como orlistat y cetilistat (Birari y Bhutani, Drug Disc. Today 12:379-389 (2007)). El orlistat (tetrahidrolipstatina, 2-formil-amino-4-metil-pentanoato) de 1- (3-hexil-4-oxo-oxetan-2-il) tridecan-2 - ilo es comercialmente disponible en una forma de dosis de cápsula. Cada cápsula contiene el ingrediente activo, orlistat, y también contiene los ingredientes activos celulosa microcristalina, glicolato de almidón de sodio, lauril sulfato de sodio, povidona, y talco .

La invención también proporciona una combinación que comprende un tioéster, preferentemente de la fórmula I, o el profármaco que forma el S- [2- ( [ [1- (2- etilbutil) ciclohexil] carbonil] amino) fenil] tiol in vivo y al menos un inhibidor de esterasa.

En otra modalidad más, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende (a) un tioéster, preferentemente de la fórmula (I) o un profármaco que forma el S- [2- ( [ [1- (2-etilbutil) ciclohexil] carbonil] amino) fenil] tiol in vivo, (b) al menos un inhibidor de esterasa y (c) uno o más portadores farmacéuticamente aceptables. Los portadores o excipientes deben ser aceptables en el sentido de ser compatibles con los otros ingredientes y no dañinos para el recipiente de los mismos .

La invención proporciona además un envase que comprende unidades de dosis separadas, de las cuales (a) al menos una unidad de dosis comprende (a) un tioéster, preferentemente de la fórmula (I) , o un profármaco que forma el S- [2- ( [ [1- (2-etilbutil ) ciclohexil] carbonil] amino) fenil] tiol in vivo, y (b) al menos otra unidad de dosis que comprende un inhibidor de esterasa. Un "envase" se entiende que es cualquier envase útil para el almacenamiento estable de las unidades de dosis. El envase puede ser, por ejemplo, un recipiente de vidrio o de plástico (de polietileno de alta densidad) en general utilizado para envasar y almacenar tabletas. Otra forma de envasado es un paquete tipo blister. Los paquetes tipo blister son bien conocidos en la industria de los envases y son ampliamente utilizados para el envasado de formas de dosis unitaria farmacéutica (por ejemplo, tabletas, cápsulas, y similares) . Los paquetes tipo blister consisten en general de una lámina de material relativamente rígido cubierta con una hoja de un material plástico preferentemente transparente. Durante el proceso de envasado se forman huecos en la hoja de plástico. Los huecos tienen el tamaño y la forma de las tabletas o las cápsulas que van a ser envasadas. En seguida, las tabletas o las cápsulas son colocadas en los huecos, y la lámina de material relativamente rígido se sella contra la hoja de plástico en la cara de la hoja que está opuesta a la dirección en la cual se formaron los huecos. Como resultado, las tabletas o las cápsulas son selladas en los huecos entre la hoja de plástico y la lámina. Preferentemente, la resistencia de la lámina es tal que las tabletas o las cápsulas pueden ser retiradas del paquete tipo blister mediante aplicación manual de presión sobre los huecos, con lo cual se forma una abertura en la lámina en el sitio del hueco. La tableta o la cápsula puede ser luego retirada vía la abertura.

La invención proporciona además un kit que comprende (a) una primera composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de (i) un tioéster, preferentemente de la fórmula (I) , o un profármaco que forma el S- [2- ( [ [1- (2-etilbutil) ciclohexil] carbonil] amino) fenil] tiol in vivo, y (ii) un portador farmacéuticamente aceptable, (b) una segunda composición farmacéutica que comprende (i) al menos un inhibidor de esterasa, y (ii) un portador farmacéuticamente aceptable, (c) la información de prescripción, y (d) un recipiente, en donde la primera y la segunda composiciones f rmacéuticas pueden ser las mismas o diferentes, y en donde la información de prescripción incluye las instrucciones para un paciente respecto a la co-administración de un tioéster, preferentemente de la fórmula (I), o un profármaco que forma el S-[2-([[l- (2-etilbutil) ciclohexil] carbó i 1 ] amino )fenil]tiol in vivo, y el inhibidor de esterasa.

La invención proporciona además un método para el tratamiento o la profilaxis de un trastorno cardiovascular en un paciente, que comprende tratar al paciente con una cantidad terapéu icamente efectiva de una combinación de (a) un tioéster, preferentemente de la fórmula (I) , o un profármaco que forma el S- [2- ( [ [1- ( 2 -etilbutil ) ciclohexil] carbonil] amino) fenil] tiol in vivo, y (b) al menos un inhibidor de esterasa. Preferentemente el inhibidor de esterasa es administrado antes de la administración de la forma de dosis que contiene el tioéster.

Los trastornos cardiovasculares incluyen, pero no están limitados a, trastorno cardiovascular, trastorno cardiaco coronario, trastorno de las arterias coronarias, hipoalfalipoproteinemia (bajos niveles de colesterol HDL) , hiperbetal ipoprote inemia (altos niveles de colesterol LDL) , hipercolesterolemia , hiperl ipidemia , y ateroesclerosis . Los trastornos cardiovasculares adicionales que pueden ser tratados o prevenidos incluyen, pero no están limitados a, hipertensión, hipertrigl iceridemia , hiperl ipidoproteinemia , trastorno vascular periférico, angina, isquemia, hipercolesterolemia primaria (familiar homocigota y heteroc igota , y no familiar), dislipidemias mixtas (tipos lia y Ilb de Frederickson) , e infarto al miocardio. Después del tratamiento con la combinación anteriormente descrita, la progresión de las placas ateroesclerót icas es preferentemente retardada o detenida (por ejemplo, en las arterias coronarias, en las arterias carótidas, y/o en el sistema arterial periférico) en un paciente. Preferentemente, las placas ateroescleróticas sufren regresión después del tratamiento (por ejemplo, en las arterias coronarias, y/o en el sistema arterial periférico (en un paciente) .

Los ejemplos para un tioéster incluyen aquellos descritos por ejemplo en la patente Europea EP 1020439 Al, por ejemplo, en los compuestos de la fórmula I en donde R es alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 10 átomos de carbono, halo (alquilo de 1 a 4 átomos de carbono) , cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono, cicloalquenilo de 5 a 8 átomos de carbono, (cicloalquil de 3 a 10 átomos de carbono) (alquilo de 1 a 10 átomos de carbono) , arilo, aralquilo o un grupo heterocíclico de 5 ó 6 miembros que tiene 1 a 3 átomos de nitrógeno, oxígeno o azufre, X1, X2, X3 y X4 independientemente son hidrógeno, halógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, halo (alquilo de 1 a 4 átomos de carbono) , alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, ciano, nitro, acilo o arilo, Y es -C0- o -S02; y Z es alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono o (cicloalquil de 3 a 10 átomos de carbono) (alquilo de 1 a 10 átomos de carbono) .

En una modalidad preferida de la presente invención, el tioéster es el éster del S- (2- { [1- (2-etil- butil) -ciclohexancarbonil] -amino} -fenílico) del ácido tioisobutírico .

El tioéster puede ser formulado en cualquier formulación convencional incluyendo formulaciones en cápsula o formulaciones en tableta. Un ejemplo de una formulación en tableta del tioéster se describe el documento W02004/082593 y se da en la Tabla 1.

Tabla 1: Ejemplo de una formulación de tableta del COMPUESTO La administración oral combinada de un inhibidor de esterasa y un tioéster proporciona un incremento en la estabilidad y la biodisponibilidad del tioéster en el tracto gastrointestinal de pacientes, que es mostrado por los siguientes resultados de prueba: Ejemplo 1: Estabilidad del éster S- (2 - { [1- (2 -etil-butil) - ciclohexancarbonil] -amino} - fenílico) del ácido tioisobutírico Soluciones de reserva: (a) FeSSIF (Fluido Intestinal Simulado en Estado Alimentado) y solución salina amortiguada con fosfato: FeSSIF = 1 parte de concentrado + 9 partes de Pro-FeSSIF b) reserva A = solución de fármaco (0.5 mg/ml) : 5 mg del éster S- (2- { [1- (2-etil-butil) -ciclohexancarbonil] -amino} -fenílico) del ácido tioisobutírico (COMPUESTO A) se disolvieron en 50 ih etanol y se agregaron 950 µ?? de micelas mixtas de lecitina de soya/glicocolato de sodio (158/97 mg/ml) en agua. Una parte de la mezcla se diluyó con 9 partes de la solución salina amortiguada con fosfato a pH 6.5. (c) reserva B = solución inhibidora de esterasa (1.0 mg/ml) Se disolvieron 5 mg de 2 - formil - amino- 4 -meti 1 -pentanoato de 1 - ( 3 -hexi 1 - 4 -oxo-oxetan- 2 - i 1 ) tridecan- 2 - ilo (COMPUESTO B) se disolvieron en 250 de etanol. Se agregaron 4.75 mi de micelas mixtas de lecitina de soya/glicocolato de sodio (30/80.6 mg/ml) para dar una solución de 1 mg/ml del COMPUESTO B. (d) reserva C = lipasa en solución salina amortiguada con fosfato (PBS) pH 6.5 (ejemplo dado a 24 mg/ml, con una actividad final de enzima de aproximadamente 450 U/ml) .

Se pesaron 240 mg de lipasa (lipasa de páncreas de cerdo, 20.6 U/mg de lipasa, CASO No. 9001-62-1, Fluka, Art . No. 62300) dentro de un frasco, y se disolvieron al agitar 10 mi de una solución salina amortiguada con fosfato de pH 6.5. Cualquier material no disuelto fue eliminado mediante centrifugación durante 5 minutos a 5000 rpm. El sobrenadante fue utilizado para los experimentos y diluido con PBS para obtener la lipasa a la concentración final de 0.55 mg/ml.

Se inyectaron 200 µ?? de una solución de 2-formil -amino-4 -metil -pentanoato de 1 - ( 3 -hexil - 4 - oxo-oxetan- 2 - il ) tridecan- 2 - ilo (reserva B) en 1.6 mi de solución de lipasa (reserva C) (de la reserva C para obtener una concentración final de enzima de 0.55 mg/ml) . A ésta, se inyectaron 200 ih de la solución del fármaco (reserva A) al tiempo cero. La mezcla fue incubada a 37°C, mientras que se mezclaba suavemente con un agitador giratorio aproximadamente a 2 rpm. A intervalos regulares, se tomaron muestras de 200 pL y se diluyeron inmediatamente con 600 L de isopropanol . La solución/suspensión combinada fue centrifugada durante 5 minutos a 3000 rpm y se determinaron la concentración del COMPUESTO A así como sus productos de degradación potenciales en el sobrenadante mediante de análisis de HPLC.

Para obtener el valor al tiempo cero, se agregaron 600 yL de isopropanol a 180 de una lipasa a 0.55 mg/ml en solución salina amortiguada con fosfato, para inhibir las enzimas, seguido por la adición de 20 de la solución del fármaco (reserva A) .

Tiempo +100 pg/ml del con/sin del COMPUESTO B COMPUESTO B (minuto) COMPUESTO A Disulfuro COMPUESTO A Disulfuro 0 46.9 5 48.2 < 0.2 27.2 16.4 10 48.2 < 0.2 14.7 26.8 15 48.2 < 0.2 7.3 33.1 20 48.0 < 0.2 4.1 36.3 30 48.3 < 0.2 <0.1 38.0 60 40.1 < 0.2 <0.1 32.3 Concentración en g/ml del COMPUESTO A (la concentración teórica es 50 pg/ml) y disulfuro con 0.55 mg/ml (11 U/ml) de lipasa Ejemplo 2: Comparación de los diferentes procedimientos experimentales e influencia de la concentración del inhibidor de lipasa sobre la estabilidad del éster S-(2- { [1- (2 -etil-butil) -ciclohexancarbonil] -amino} - fenílico) del ácido tioisobutírico Procedimiento A (Premezcla de lipasa y COMPUESTO B, seguida por la adición del COMPUESTO A) : 1600 µ!> de lipasa en solución salina amortiguada con fosfato (de la reserva C) pará obtener una concentración final de enzima de 0.55 mg/ml) se mezclaron con 200 pL del COMPUESTO B (reserva B) y se pre-incubaron durante 5 minutos a 37 °C. Al tiempo cero, se agregaron 200 yL de la solución del fármaco (reserva A) . La mezcla fue incubada a 37 °C. Después de 10 minutos, la reacción fue detenida por la dilución de una parte de la mezcla con 3 partes de isopropanol .

Procedimiento B (Premezcla del COMPUESTO B y del COMPUESTO A, seguido por la adición de lipasa) : se mezclaron 100 yL de la solución del fármaco (reserva A) con 0, 12, 25 ó 50 yL de la solución inhibidora de esterasa (reserva B) y 100, 88, 75 ó 50 yL del concentrado FeSSIF (lecitina 37.5 mM y taurocolato de sodio 150 mM) se agregaron para constituir 200 yL de una solución con el COMPUESTO B a concentraciones de 0 , 12, 25 ó 50 yg/ml . Al tiempo cero, se agregaron 800 yL de lipasa en solución salina amortiguada con fosfato (de la reserva C para obtener concentraciones finales de enzima de 0.55 mg/ml) . La mezcla de reacción fue incubada a 37°C y se detuvo después de 10 minutos por dilución de una parte de la mezcla de reacción con 3 partes de isopropanol.

Procedimiento A (lipasa Procedimiento B + COMPUESTO B, luego (COMPUESTO B + COMPUESTO A) COMPUESTO A, luego lipasa) COMPUESTO COMPUESTO A SD (n = COMPUESTO A SD (n = B (yg/ml) (yg/ml) 3) (yg/ml) 3) 0 14.7 n.d. 23.0 1.0 12 n.d. n.d. 46.4 0.6 25 n.d. n.d. 46.5 1.0 50 46.4 0.7 46.1 1.1 100 48.2 0.8 n.d. n.d.

Concentración en yg/ml del COMPUESTO A (la concentración teórica 50 yg/ml) con 0.55 mg/ml (11 U/ml) de lipasa Procedimiento B 1 (Premezcla del COMPUESTO B y del COMPUESTO A, seguido por la adición de lipasa) : Las pruebas fueron repetidas como se describe bajo el procedimiento B pero con la concentración final del COMPUESTO B de 0, 3, 6, 12 yg/ml.

Concentración en yg/ml del COMPUESTO A (la concentración teórica es 50 yg/ml) después de 10 minutos de incubación con 0.55 mg/ml (11 U/ml) de lipasa.

Procedimiento C (Premezcla del COMPUESTO A y lipasa, seguido por la adición del COMPUESTO B) : Nota: concentración final del COMPUESTO B: 3 yg/ml. 1er experimento: Se mezclaron 220 µ ??? solución del fármaco (reserva A) y 220 µ ??? del concentrado FeSSIF (Lecitina 37.5 m y Taurocolato de sodio 150 mM) . Al tiempo cero, la reacción fue iniciada por la adición de 1700 µ ? de lipasa en solución salina amortiguada con fosfato (de la reserva C para obtener una concentración final de enzima de 0.55 mg/ml) . La mezcla fue incubada a 37°C y después de 5 minutos, se tomó una muestra de 200 pL para el análisis de HPLC . Luego, se agregaron 60 µL de la solución del COMPUESTO B (reserva B) previamente diluida 1:10 en solución salina amortiguada con fosfato (corresponde a 100 µg/ml del COMPUESTO B) y como una función del tiempo, fueron tomadas muestras de 200 L, diluidas inmediatamente con 600 µL de isopropanol y centrifugadas por 5 minutos a 3000 rpm . El sobrenadante fue analizado mediante HPLC. 2do experimento (idéntico al experimento 1 pero orden diferente de la adición del reactivo) : Se mezclaron 1700 µ? de la lipasa en solución salina amortiguada con fosfato (de la reserva C, para obtener una concentración final de enzima de 0.55 mg/ml) con 220 µL del concentrado FeSSIF y al tiempo cero se agregaron solución 220 µL de la solución del fármaco (reserva A) . Después de 7 minutos de incubación, se tomó una muestra de 200 \il> , y e agregaron 60 µ?? desde solución diluida del COMPUESTO (reserva B) y se continuó como se describe para el 1 expe imento .

La concentración en ug/ml del COMPUESTO A (la concentración teórica es de 50 ug/ml) y el disulfuro después de la incubación con 0.55 mg/ml (11 U/ml) de 1 ipasa .

Mediante esos expe imentos, se pudo demostrar que el COMPUESTO B inhibidor de lipasa previene eficientemente la degradación hidrolítica inducida por la lipasa, del COMPUESTO A. La presencia del inhibidor de esterasa mantuvo efectivamente la estabilidad del COMPUESTO A e inhibió la formación de disulfuro.

Ejemplo 3: Influencia de la concentración del inhibidor de lipasa sobre la estabilidad del éster S- (2-{ [1- (2-etil-butil) -ciclohexancarbonil] -amino} - fenílico) del ácido tioisobutírico en fluidos intestinales humanos Procedimiento D (COMPUESTO A y COMPUESTO B en solución) : Fluidos intestinales en ayunas: los fluidos provenientes de 4 diferentes sujetos fueron recolectados con un tubo nasoyeyunal después de un ayuno de toda la noche, y combinados .

Fluidos intestinales estimulados: los fluidos provenientes de 3 sujetos diferentes fueron recolectados después de un ayuno de toda la noche con un tubo nasoyeyunal, y combinados. Para la estimulación, veinte minutos antes del comienzo de la recolección, a los voluntarios se les proporcionaron gomas de mascar y se les pidió que mascaran en un periodo de 15 minutos, manteniendo el sabor por el reemplazo de las barras de goma aproximadamente cada 2 minutos .

Soluciones de reserva (a) reserva D = solución del fármaco (5 mg/ml) : 5 mg del éster S- (2- { [1- (2-etil-butil) -ciclohexancarbonil] -amino} -fenílico) del ácido tioisobutírico (COMPUESTO A) se disolvieron en 50 L de etanol y se agregaron 950 µ??. solución de micelas mixtas que contenían lecitina de soya/glicocolato de sodio (158/97 mg/ml) en agua. (b) reserva E = solución del inhibidor de esterasa (0.3 mg/ml ) 3 mg del 2-formil-amino-4-metil-pentanoato de l-(3-hexil-4-oxo-oxetan-2-il) tridecan-2-ilo (COMPUESTO B) se disolvieron en 1 mi de etanol. 100 yL de esta solución se diluyeron con 900 yL de concentrado FeSSIF (lOx) . (c) reserva F = la premezcla del COMPUESTO A y del COMPUESTO B (respectivamente 500 y 30 yg/ml) y 100 yL de la solución del fármaco (reserva D) se mezclaron con 100 yL de la solución inhibidora de esterasa (reserva E) y se agregaron 800 yL de pro-FaSSIF. (d) reserva G = la premezcla del COMPUESTO A y del COMPUESTO B (respectivamente 500 y 10 yg/ml) 100 yL de la premezcla (reserva F) se mezclaron con 200 yL de la solución del fármaco (reserva A) . (e) reserva H = la premezcla del COMPUESTO A y del COMPUESTO B (respectivamente 500 y 20 yg/ml) 200 yL de la premezcla (reserva F) se mezclaron con 100 yL de la solución del fármaco (reserva A) . 315 yL de fluidos intestinales (en ayunas y estimulados) fueron pre-calentados a 37°C por aproximadamente 5 minutos. Al tiempo cero, se agregaron 35 yL de las soluciones de la premezcla, por ejemplo, ya sea la reserva A, la reserva G, la reserva H o la reserva F, para obtener 50 yg/ml del COMPUESTO A y concentraciones finales del COMPUESTO B de 0, 1, 2 ó 3 yg/ml. Las muestras fueron incubadas a 37°C mientras que se agitaba suavemente. La reacción fue detenida después de 2 minutos o después de 10 minutos mediante dilución de 1 parte de la mezcla de reacción con 3 partes de isopropanol y la mezcla resultante fue centrifugada por 5 minutos a 5'00O rpm. El sobrenadante fue analizado mediante HPLC.

Concentración en µg/ml del COMPUESTO A (la concentración teórica es de 50 µg/ml) y el disulfuro en fluido intestinal obtenido de los sujetos en ayunas.

Concentración en ug/ml del COMPUESTO A (la concentración teórica es de 50 g/ml) y el disulfuro en fluido intestinal obtenido de los sujetos después de la estimulación .

Mediante los experimentos anteriores es evidente que la presencia del COMPUESTO B estabiliza el COMPUESTO A disuelto frente a la hidrólisis en los fluidos intestinales, y reduce la formación de disulfuro.

Ejemplo 4: Influencia de la concentración del inhibidor de lipasa sobre la estabilidad del éster S- (2-{ [1- (2-etil-butil) -ciclohexancarbonil] -amino}-fenílico) del ácido tioisobutírico en fluidos intestinales humanos Procedimiento E (COMPUESTO A y COMPUESTO B en suspensión, el compuesto en exceso separado mediante centrifugación) : Reserva J = suspensión del COMPUESTO B (2 mg/ml) Se agregaron 100 pL del concentrado FeSSIF y 900 iL de pro-FeSSIF pH 6.5 a 4 mg de la formulación de Orlistat ® comercialmente disponible (Xenical ) que contenía 2 mg del inhibidor de lipasa, 2-formil-amino-4-metil-pentanoato de 1- (3-hexil-4-oxo-oxetan-2-il) tridecan-2-ilo (COMPUESTO B) en un frasco y la formulación fue dispersada al agitar suavemente durante 15 minutos para obtener una suspensión homogénea fina .

Se agregaron 500 \ih de fluidos intestinales recién descongelados (en estado en ayunas y estimulado) a 1 mg del COMPUESTO A en un frasco de vidrio de 1 mi, inmediatamente seguido por la adición ya sea de 0 , 10 ó 20 L de la suspensión del COMPUESTO B (reserva J) correspondiente a 0, 40 +o 80 pg/ml del COMPUESTO B. La cantidad del COMPUESTO B fue de 0, 2% ó 4% del COMPUESTO B con relación al COMPUESTO A. La mezcla fue incubada a 37°C con agitación suave. Fueron retiradas muestras de 90 µL como función del tiempo y centrifugadas a 13O00 rpm (aproximadamente 12000 xg) por 5 minutos. Se diluyeron 50 pL del sobrenadante con 150 pL de isopropanol, se centrifugaron a 5'00O rpm por 5 minutos y el sobrenadante claro fue analizado mediante HPLC.

Concentración en g/mL del COMPUESTO A (Tioéster) , el tiofenol y disulfuro en ayunas y fluidos intestinales humanos estimulados (HIF) con 40 g/ml del COMPUESTO B.

HIF-en ayunas (ug/ml) HIF-estimulado (ug/ml) Tiempo COMPUESTO Tio- diCOMPUESTO Tio-fenol diA fenol sulfuro A sulfuro 15 min 1.12 0.16 110.57 0.74 0.16 40.71 30 min 11.75 3.85 363.56 0.55 0.89 102.65 1 hora 111.05 13.54 646.50 10.53 75.39 343.60 2 217.35 35.60 902.02 32.71 149.23 565.70 horas 4 281.66 64.21 1075.49 221.31 349.31 764.51 horas Concentración en µ9/??111 del COMPUESTO A (Tioéster) , el tiofenol y disulfuro en ayunas y fluidos intestinales humanos estimulados (HIF) con 80 pg/ml del COMPUESTO B.

Los experimentos anteriores muestran que la adición del COMPUESTO B en la forma de una suspensión estabiliza el tioéster que está presente en exceso en los fluidos intestinales, contra la hidrólisis y la oxidación subsiguiente del tiol formado.

Ejemplo 5: Influencia de la concentración del inhibidor de lipasa sobre la estabilidad del éster del S- (2 - { [1- (2 -etil-butil) -ciclohexancarbonil] -amino} - fenílico) del ácido tioisobutírico en los fluidos intestinales humanos Procedimiento F (COMPUESTO A y COMPUESTO B en suspensión, la degradación inmediatamente detenida sin la separación del compuesto en exceso) : Reserva K = suspensión del COMPUESTO B (0.5 mg/ml) Diluir una parte de la suspensión del COMPUESTO B (reserva J) con 3 partes de la solución de FeSSIF de pH 6.5. 500 pL de fluidos intestinales recién descongelados (en ayunas y en estado estimulado) fueron agregados a un 1.2 mg del COMPUESTO A en un frasco de vidrio de mi. El compuesto suspendido fue agitado por 15 minutos a 37°C para obtener la humectación y una suspensión homogénea. En paralelo, fueron preparados 4 frascos de vidrio con 20 µ?? de una suspensión del COMPUESTO B a diferentes concentraciones. Estas concentraciones fueron obtenidas al mezclar FeSSIF de pH 6.5 y la suspensión del COMPUESTO B (reserva K) en diferentes proporciones, respectivamente de 1:0, 1:3, 1:1, 0:1 para obtener 0, 1, 2 y 4% con relación al COMPUESTO A. Al tiempo cero, se agregaron 100 L de la suspensión del COMPUESTO A para incubar a 37° C a 20 pL de la suspensión del COMPUESTO B. La mezcla fue incubada a 37°C con agitación suave, después de 15 minutos y 60 minutos, la reacción fue detenida al mezclar una muestra de 50 pL con 150 pL de isopropanol y se centrifugó a 5'00O rpm durante 5 minutos. El sobrenadante claro fue analizado para el producto de hidrólisis y su forma oxidada mediante HPLC.

T = 15 minutos T = 60 minutos COMPUESTO COMPUESTO Tio- diCOMPUESTO Tio- di¬ B conc . A (pg/ml) fenol sulfuro A (pg/ml) fenol sulfuro (pg/ml) (pg/ml) (pg/ml) (pg/ml) (pg/ml) 0 1111.92 12.07 512.32 182.50 22.18 1004.67 20 1299.01 9.58 367.37 718.26 15.27 569.98 40 1381.23 5.42 290.53 598.81 8.36 331.72 80 1728.95 6.34 290.06 826.93 10.49 299.09 Concentración en pg/ml del COMPUESTO A (Tioéster) , el tiofenol y disulfuro en fluidos intestinales humanos en ayunas (HIF) con 0, 20, 40 y 80 pg/ml del COMPUESTO B, correspondientes a 0, 1, 2 y 4% con respecto a la concentración del tioéster.

Concentración en pg/ml del COMPUESTO A (Tioéster) , el tiofenol y disulfuro en fluidos intestinales humanos en ayunas (HIF) con 0, 20, 40 y 80 pg/ml del COMPUESTO B, correspondientes a 0, 1, 2 y 4% con respecto a la concentración del tioéster.

Mediante los experimentos, se pudo demostrar que el inhibidor de esterasa COMPUESTO B previene eficientemente la degradación hidrolítica del COMPUESTO A, inducida por la enzima gastrointestinal.

Se hace constar que con relación a esta fecha el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (14)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :

1. Un proceso para incrementar la biodisponibilidad de un tioéster, caracterizado porque es administrada una forma de dosis que contiene un inhibidor de esterasa, en combinación con una forma de dosis que contiene el tioéster.

2. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la forma de dosis que contiene el inhibidor de esterasa es administrada al mismo tiempo que la forma de dosis que contiene el tioéster.

3. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la forma de dosis que contiene el inhibidor de esterasa es administrada antes de la administración de la forma de dosis que contiene el tioéster.

4. El proceso de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado porque la forma de dosis que contiene el inhibidor de esterasa es administrada 1 a 60 minutos, por ejemplo, 1 a 40 minutos, por ejemplo, 1 a 20 minutos, antes de la administración de la forma de dosis que contiene el tioéster.

5. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el inhibidor de esterasa es el 2-formil-amino-4-metil-pentanoato de 1- (3-hexil -4 -oxo-oxetan-2 - il) tridecan-2 - ilo .

6. El proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el tioéster es el éster del S- (2- { [1- (2-etil-butil) -ciclohexancarbonil] -amino} -fenílico) del ácido tioisobutírico .

7. Un proceso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque la proporción de un inhibidor de esterasa al tioéster está entre 1:100 y 1:5.

8. Una combinación, caracterizada porque comprende un tioéster o profármaco que forma el S- [2- ( [ [1- (2-etilbutil) ciclohexil] carbonil] amino) fenil] tiol in vivo y al menos un inhibidor de esterasa.

9. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende (a) un tioéster o un profármaco que forma el S- [2- ( [ [1- ( 2 -etilbutil ) ciclohexil] carbonil] amino) fenil] tiol in vivo, (b) al menos un inhibidor de esterasa y (c) uno o más portadores farmacéuticamente aceptables.

10. Un envase, caracterizado porque comprende unidades de dosis separadas, de las cuales (a) al menos una unidad de dosis comprende (a) un tioéster o un profármaco que forma el S- [2- ( [ [1- (2-etilbutil) ciclohexil] carbonil] amino) fenil] tiol in vivo, y (b) al menos otra unidad de dosis que comprende un inhibidor de esterasa.

11. Un kit, caracterizado porque comprende (a) una primera composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de (i) un tioéster o un profármaco que forma el S- [2- ( [ [1- (2-etilbutil) ciclohexil] carbonil] amino) fenil] tiol in vivo, y (ii) un portador farmacéuticamente aceptable, (b) una segunda composición farmacéutica que comprende (i) al menos un inhibidor de esterasa, y (ii) un portador farmacéuticamente aceptable, (c) la información de prescripción, y (d) un recipiente, en donde la primera y la segunda composición farmacéuticas pueden ser la mismas o diferentes, y en donde la información de prescripción incluye un aviso para un paciente respecto a la co-administración de un tioéster, o un profármaco que forma el S- [2- ( [ [1- (2-etilbutil ) ciclohexil] carbonil] amino) fenil] tiol in vivo, y el inhibidor de esterasa.

12. Un método para el tratamiento o profilaxis de un trastorno cardiovascular en un paciente, caracterizado porque comprende tratar al paciente con una cantidad terapéuticamente efectiva de una combinación de (a) un tioéster, preferentemente de la fórmula (I), o un profármaco que forma el S- [2- ( [ [1- (2-etilbutil) ciclohexil] carbonil] amino) fenil] tiol in vivo, y (b) al menos un inhibidor de esterasa.

13. Una combinación, una composición farmacéutica, un envase, un kit, o un método de conformidad con las reivindicaciones 8, 9, 10, 11 ó 12 respectivamente, caracterizados porque el tioéster es de la fórmula (I) en donde R es alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, alquenilo de 2 a 10 átomos de carbono, halo (alquilo de 1 a 4 átomos de carbono) , cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono, cicloalquenilo de 5 a 8 átomos de carbono, (cicloalquil de 3 a 10 átomos de carbono) (alquilo de 1 a 10 átomos de carbono), arilo, aralquilo o un grupo heterocíclico de 5 ó 6 miembros que tiene 1 a 3 átomos de nitrógeno, oxígeno o azufre, X1, X2, X3 y X4 independientemente son hidrógeno, halógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, halo (alquilo de 1 a 4 átomos de carbono) , alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, ciano, nitro, acilo o arilo, Y es -CO- o -S02 y Z es alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono o (cicloalquil de 3 a 10 átomos de carbono) (alquilo de 1 a 10 átomos de carbono) .

14. Una combinación, una composición farmacéutica, un envase, un kit, o un método de conformidad con la reivindicación 13, caracterizados porque el inhibidor de esterasa es el 2 - formil -amino- 4 -metil-pentanoato del 1- (3-hexil-4-oxo-oxetan-2-il) tridecan-2-ilo.