MX2009000792A - Inhibidores de monoamina oxidasa utiles para tratar trastornos de la retina externa. - Google Patents

Abstract

Se describen composiciones y métodos para tratar trastornos de la retina externa con compuestos que inhiben monoamina oxidasa.

Description

INHIBIDORES DE MONOAMINA OXIDASA ÚTILES PARA TRATAR TRASTORNOS DE LA RETINA EXTERNA ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Esta solicitud reclama prioridad a la Solicitud Internacional de PCT No. US2007/07603 presentada el 27 de julio de 1007, que reclama prioridad a la Solicitud Provisional de E.U.A. Serie No. 60/820,735, presentada el 28 de julio de 2006.

CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se dirige a compuestos que son inhibidores de monoamina oxidasa y su uso para tratar trastornos de la retina externa que resulta de condiciones o enfermedades degenerativas agudas o crónicas del ojo.

DESCRIPCIÓN DE LA TÉCNICA RELACIONADA La degeneración macular relacionada con la edad (AMD) es la causa principal de ceguera a la edad mayor con una incidencia de aproximadamente el 20% en adultos de 65 años de edad incrementándose a 37% en individuos de 75 años o más. La AMD no exudativa se caracteriza por acumulación y atrofia de fotorreceptores de barra y cono en la retina externa, epitelio de pigmentación retinal (RPE) , membrana de Bruch y coriocapilaris; mientras que la AMD exudativa conduce a neovascularización coroidal (Green and Enger, Ophthalmol, 100/1519-35, 1993; Green y otros, Ophthalmol, 92:615-27, 1985; Green and Key, Trans Am Ophthalmol Soc, 75:180-254, 1977; Bressler y otros, Retina, 14:130-42, 1994; Schneider y otros, Retina, 18:242-50, 1998; Green and Kuchle (1997). En: Yannuzzi, L.A., Flower, R. ., Slakter, J.S. (Eds.) Indocyanine green angiography. St. Louis: Mosby, p. 151-6). La retinitis pigmentosa (RP) representa un grupo de distrofias hereditarias caracterizadas por degeneración de barras con atrofia secundaria de fotorreceptores de conos y epitelio de pigmentación subyacente. (Pruett, Trans Am Ophthalmol Soc, 81:693-735, 1983; heckenlively, Trans Am Ophthalmol Soc, 85:438-470, 1987; Pagon, Sur Ophthalmol, 33:137-177, 1988; Berson, Invest Ophthalmol Vis Sci, 34:1659-1676, 1993; Nickells y Zack, Ophthalmic Genet, 17:145-65, 1996) . La patogénesis de enfermedades degenerativas retínales, tal como AMD y RP, es multifacética y puede accionarse por factores ambientales en individuos normales o en aquellas que se predisponen genéticamente. Hasta la fecha, más de 100 genes se han mapeado o clonado que pueden asociarse con otras varias degeneraciones retínales externas. La exposición ligera es un factor ambiental que se ha identificado como un factor de contribución a la progresión de trastornos degenerativas retínales talles como AMD (Young, Sur Ophthal, 32:252-269, 1988; Taylor, y otros, Arch Ophthal, 110:99-104, 1992; Cruickshank, y otros, Arch Ophthal, 111:514-518, 1993). Se ha mostrado que la tensión foto-oxidativa que conduce al daño por la luz a las células retínales es un modelo útil para estudiar las enfermedades degenerativas retínales por las siguientes razones; el daño principalmente es para los fotorreceptores y epitelio de pigmentos retínales (RPE) de la retina externa, las mismas células que son afectadas en las enfermedades heredodegenerativas (Noell y otros, Invest Ophthal Vis Sci, 5, 450-472, 1966; Bressler y otros, Sur Ophthal, 32, 375-413, 1988; Curcio y otros, Invest Ophthal Vis Sci, 37, 1236-1249, 1996) ; la apoptosis es el mecanismo de muerte celular por el cual las células fotorreceptoras y RPE se pierden en AMD y RP, así como siguen un daño de células inducido foto oxidativo (Ge-Zhi y otros, Trans AM Ophthal Soc, 94, 411-430, 1996; Abler y otros, Res Commun Mol Pathol Pharmacol, 92, 177-189, 1996; Nickells y Zack, Ophthalmic Genet, 17:145-65, 1996) ; la luz se ha implicado como un factor de riesgo ambiental para la progresión de AMD y RP (Taylor y otros, Arch Ophthalmol, 110, 99-104, 1992; Naash y otros, Invest Ophthal Vis Sci, 37, 775-782, 1996); y las intervenciones terapéuticas que inhiben el daño foto-oxidativo también se ha mostrado que son efectivos en modelos animales de enfermedad retinal heredo-degenerativa (Labial y otros, Proc Nat Acad Sci, 89, 11249-11253, 1992; Fakforovich y otros, Nature, 347, 83-86; 1990; Frasson y otros, Nat. ed. 5, 1183-1187, 1990). Un número de diferentes clases de compuestos se ha identificado en varios modelos animales que reducen al mínimo el daño foto-oxidativo retinal. Incluyen, antioxidantes tales como ascorbato (Organisciak y otros, Invest Ophthal Vis Sci, 26:1589-1598, 1985), dimetilthiourea (Organisciak y otros, Invest Ophthal Vis Sci, 33:1599-1609, 1992; Lam y otros, Arch Ophthal, 108:1751-1752, 1990), a-tocoferol (Kozaki y otros, Nippon Ganka Gakkai Zasshi, 98:948-954, 1994) y ß-caroteno (Rapp y otros, Cur Eye Res, 15:219-232, 1995); antagonistas de calcio tales como flunarizina (Li y otros, Exp Eye Res, 56: 71-78, 1993; Edward y otros, Arch Ophthal, 109, 554-622, 1992; Collier y otros, Invest Ophthal Vis Sci, 36:S516); factores de crecimiento tales como factor de crecimiento básico de fibroblastos, factor nervioso derivado del cerebro, factor neurotrófico ciliar, e interleucina-1-ß (LaVail y otros, Proc Nat Acad Sci, 89, 11249-11253, 1992); glucocorticoides tales como metilprednisolona (Lam y otros, Graefes Arch Clin Exp Ophthal, 231, 729-736, 1993) y dexametasona (Fu y otros, Exp Eye Res, 54, 583-594, 1992); quelatadores de hierro tal como desferoxamina (Li y otros, Cur Eye Res, 2, 133- 144, 1991); NMDA-antagonistas tales como eliprodilo y MK-801 (Collier y otros, Invest Ophthal Vis Sci, 40:S159, 1999).

Se ha mostrado que los inhibidores de monoamina oxidasa ( AO) inhiben la inducción de apoptosis. Esta inhibición se piensa que resulta de la alteración de expresión de genes para las proteínas depuradoras de superoxido dismutasa de Cu/Zn (S0D1) y superóxido dismutasa N (S0D2) así como los oncogenes Bcl-2, Bcl-XL, Bax, oxido sintasa nítrico, c-JUN y deshidrogenasa de dinucleótido de nicotinamida adenina. Rasagilina (1 mg/kg) , un inhibidor de AO-B, se ha mostrado que acelera significativamente la recuperación de función de motor y memoria espacial en un modelo de daño de cabeza cerrada de ratón. Adicionalmente, el edema cerebral se redujo un 40-50%. Otros ciertos inhibidores de MAO se han descrito para otros trastornos. En la retina, se ha mostrado que los inhibidores de MAO selegilina y desmetilselegilina protegen las células de los ganglios de excitotoxicidad inducida por nMDA (Takahata y otros, Eur J Pharmacol, 458 (l-2):81-9, 2003). También se ha mostrado de deprenilo protege a las células del ganglio después del daño al nervio óptico (Buys y otros, Cur Eye Res, 14(2): 119-126, 1995) o falta de suero (Ragaiey y otros, J Ocul Pharmacol Ther, 13 (5) : 79-88, 1997). Se ha reportado el efecto de clorgilina, un inhibidor de MAO-A, en los ritmos del fotoreceptor de derrame de disco y degradación autofágica (Reme y otros, Trans Ophthalmol Soc UK, 103 ( Pt 4): 405-10, 1983).

La Patente de E.U.A. 5,263,957, describe derivados de carboxiamida de N-fenilalquilo a-amino sustituido. Los compuestos descritos son tales que son útiles como agentes antiepilépticos, anti-parquison, neuroprotectores, antidepresivos, antiespásticos y/o hipnóticos. La patente ' 957 no menciona el uso de dichos compuestos para tratar trastornos de la retina externa. De hecho, las indicaciones oftálmicas no se mencionan del todo. La Patente de E.U.A. No. 5,945,454, describe bencilamino-2-metil-propanamidas 2- ( 4-sustituidas ) y su uso como agentes terapéuticos. Los compuestos se describieron por ser activos en el sistema nervioso central y se sugiere para usarse en trastornos del sistema nervioso central, incluyendo daño ocular o retinopatia. Significativamente, los compuestos de esta invención no son abarcados dentro de los compuestos reclamados para usarse en los métodos descritos. La Patente de E.U.A. No. 5,242,950 describe un método para tratar degeneración macular administrando L-deprenilo o una sal del mismo. L-deprenilo es un inhibidor de MAO-B selectivo. L-deprenilo se deberá administrar oral o transdérimacmente . La patente '950 no sugiere el suo de otros tipos de inhibidores de MAO, ni sugiere suministrar métodos diferentes a los orales o transdérmicos . La Patente de E.U.A. No. 5,981,598, describe un método para tratar glaucoma administrando un compuesto de deprenilo. Los compuestos descritos para usarse en los métodos de la patente '598 o la patente ' 950 difiere significativamente de los comuestos de la invención. De hecho, el "compuesto de deprenilo" se define en la patente de '598 como "compuestos de deprenilo que son estructuralmente similares a deprenilo", por lo tanto excluye los compuestos preferidos de la invención. WO 2005/039591 describe derivados de benzazepina, que son inhibidores de MAO-B. Los compuestos descritos en la presente, de nuevo, difieren significativamente de los compuestos de esta invención. Ninguna de las publicaciones descritas antes mencionan el uso de los compuestos de esta invención para inhibir o evitar la degeneración retinal que resulta de la pérdida o daño a los fotorreceptores y/o células epiteliales de pigmento retinal. Lo que se requiere son compuestos más efectivos y métodos para el tratamiento de estos trastornos serios, que amenazan la vista.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN La presente invención se dirige a inhibidores de MAO-A/B y B que se ha descubierto que son útiles para tratar trastornos de la retina externa, particularmente: AMD; RP y otras formas de enfermedad retinal heredodegenerativa; separación de la retina y lagrimeo; membrana epiretinal; isquemia que afecta la retina externa, retinopatia diabética; daño asociado con terapia de láser (rejilla, focal y panretinal) incluyendo terapia fotodinámica (PDT) ; trauma; retinopatia iatrogénica incluida por cirugía (translocación retinal, cirugía subretinal o vitrectomía) o por luz; y conservación de transplantas de la retina. Como se usa en la presente, la retina externa icluyen RPE, fotorreceptores , células de Muller (al grado que sus procesos se extienden en la retina externa) , y la capa de plexiforma externa. Los compuestos se formulan para suministro ocular sistémico o local .

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS Los siguientes dibujos forman parte de la presente especificación y se incluyen para demostrar además ciertos aspectos de la presente invención. La invención además puede entenderse mejor por referencia a estos dibujos en combinación con la descripción detallada de las modalidades específicas presentes.

Las Fig. 1A y Fig. IB muestran la conservación de la función de ERG en 5 días (Fig. 1A) y 1 mes (Fig. IB) en ratas dosificadas sistemicamente con safinamina y expuestos a un insulto severo foto-oxidativo . Dosificar de 155-60 mg/kg safinamida provista la protección de función retinal significante y completa. La Fig. 2 muestra la prevención de lesiones retínales pro tratamiento con safinamida. Las ratas dosificadas con 60 mg/kg de safinamida carecieron de lesiones retínales significantes.

DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN Parte química El objetivo de la presente invención son los compuestos de la fórmula general I I en donde : R1 es cicloalquilo de C5-C7; fenilo (no sustituido) o fenilo sustituido independientemente con uno o más halógenos o CF3 R2 es H, alquilo de C1-C3 R3 es H, alquilo de C1-C3 (no sustituido) o alquilo de C1-C3 sustituido con OR6 R3 es H, alquilo de C1-C3 (no sustituido) o alquilo de C1-C3 sustituido con OR6 R4, R5 son independientemente H, alquilo de C1-C3 R6 es H, alquilo de C1-C2. Los compuestos preferidos de la fórmula I son compuestos en donde: R1 es cicloalquilo de C5-C7; fenilo (no sustituido) o fenilo sustituido independientemente con uno o más halógenos o CF3 R2 es H, alquilo de C1-C2 R3 es H, alquilo de C1-C2 (no sustituido) o alquilo de C1-C2 sustituido con OR6 R3 es H, alquilo de C1-C2 (no sustituido) o alquilo de C1-C2 sustituido con OR6 R4, R5 son independientemente H, alquilo de C1-C2 R6 es H, alquilo de C1-C2. Se prefieren más los compuestos de la fórmula I que son compuestos en donde: R1 es fenilo (no sustituido) o fenilo sustituido independientemente con uno o dos F, Cl, R2 es H, CH3 R3 es H, alquilo de C1-C2 (no sustituido) o alquilo de C1-C2 sustituido con OR6 R4, R5 son independientemente H, CH3 R6 es H, CH3 Se prefieren más los compuestos de la fórmula I que son compuestos (S) y (R) en donde: R1 es 3-fluorofenilo R2 es H R3 es CH3 R4, R5 son H y particularmente el isómero (S) ( safinamida ) . Los compuestos de la fórmula I son compuestos conocidos y se preparan de acuerdo con los métodos descritos en la Patente de E.U.A. No. 5,263,957. Parte Biológica Las enfermedades retínales con frecuencia alteran el tejido y pueden dar como resultado una pérdida de función visual para millones de pacientes. Por ejemplo, los tejidos retínales pueden dañarse por factores ambientales, tales como exposición ligera, que se conoce que contribuye a la progresión de trastornos degenerativos retínales tales como AMD (Young 1988; Taylor y otros 1992; Cruickshank y otros 1993) . A la fecha, no existe tratamiento efectivo para trastornos neurodegenerativos de la retina. Las etapas tempranas de degeneración macular normalmente se tratan por combinaciones de antioxidantes o agentes anti-inflamatorios cuya eficacia no se demuestra en la clínica. Las etapas avanzadas de degeneración macular que conducen a pérdida de visión severa se tratan ya sea por remoción quirúrgica de membranas de espacio subretinal, fotocoagulación de láser, terapia fotodinámica y más recientemente con bloqueadores de VEGF en pacientes como AMD exudativa. Los tratamientos no aprobados están disponibles para la forma avanzada de AMD conocida como Atrofia Geográfica. El tratamiento con láser también se usa en el tratamiento de retinopatia diabética. Es importante observar que tanto la fotocoagulación de láser de la retina como la escisión quirúrgica de membranas subretinales o membranas intra-vitrea da como resultado la destrucción de neuronas retínales viables. La prevención o reducción de daño de retina externa por inhibidores de MAO es un enfoque terapéutico único y novedoso al manejo de maculopatía relacionada con la edad y/o degeneración macular y otras retinopatías . En los paradigmas de daño por luz usados por los inventores de la presente, los antioxidantes fueron inefectivos ( -tocoferol ) o marginalmente efectivos en altas dosis (ascorbato, análogos de vitamina E) . Similarmente, algunos antagonistas de calcio ( flunarizina, nicardipina) fueron moderadamente efectivos mientras que otros (nifedipina, nimodipina, verapamilo) no tuvieron efecto para evitar cambios funcionales o morfológicos inducidos por luz. Inesperadamente, se ha descubierto que los compuestos de esta invención son de 50 a 100 veces más potentes que los antioxidantes en este paradigma de daño por la luz y por lo tanto son útiles para tratar trastornos de la retina externa. La monoamina oxidasa (MAO) es una proteina integral de la membrana mitocondrial externa y juega un papel principal en la inactivación de aminas en el sistema nervioso central (cNS) y el sistema nervioso periférico PNS) . En el CNS humano, la isoenzima de MAO-A es responsable de la desaminación de dopamina. Después del entusiasmo inicial, el uso de MAO-A e inhibidores de MAO no selectivos se ha limitado por el amplio rango de fármaco inducido por MAO e interacciones de alimentos inducidas por MAO que son posibles, particularmente con medicamentos simpatomiméticos o alimentos que contienen triamina, dando como resultado reacciones hipertensas. Los inhibidores de la isoenzima de MAO-B han demostrado propiedades neuroprotectoras y neuro-rescatadoras en cierto número de modelos, incluyendo: modelo de MPTP de monos y ratones, modelo de daño en la cabeza de ratones; axotomia nerviosa facial en ratas; y disfunción de otro dopaminérgico inducido por fármacos agudo en roedores. Los inhibidores de MAO-B de larga acción (deprenilo, selegilina) también se han asociado con insomnio, nausea, arritmias cardiacas benignas, mareo y dolor de cabeza. La invención contempla el uso del inhibidor de MAO de la fórmula general I o cualquier derivado farmacéuticamente aceptable, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables, para tratar trastornos de la retina externa. La frase "farmacéuticamente aceptable" significa los compuestos que pueden usarse con seguridad para el tratamiento de enfermedades de la retina externa. Como se usa en la presente, la retina externa incluye RPE, fotorreceptores, células de Muller (al grado que sus procesos se extienden en la retina externa) , y la capa plexiforma externa. Los compuestos se formulan para suministro ocular sistémico o local. Mientras que se contempla que cualquier inhibidor de acción corta de MAO A/B y B serán útiles en los métodos de la presente invención, los inhibidores de MAO preferidos son inhibidores de acción corta, potente del receptor de MAO-B, tal como los compuestos descritos específicamente en la presente. Los compuestos preferidos incluyen 2-{ [4- (3-cloro-benciloxi) -bencil] -metil-amino} -acetamida, (S) -2- [4- (2-fluoro-benciloxi) -bencilamino] -propionamida, (S) -2- [4- (3-fluoro-benciloxi) -bencilamino] -3-hidroxi-propionamida, (S) -2-{ [4- (3-cloro-benciloxi) -bencilamino] -propionamida, (R) -2- [4-( 3-cloro-benciloxi ) -bencilamino] -3-hidroxi-propionamida, (S) -2- (4-ciclohexilmetoxi-bencilamino) -propionamida, (S) -2- [4- (3-fluoro-benciloxi) -bencilamino] -3-hidroxi-propionamida, (S) -2-[4- (3-cloro-benciloxi) -bencilamino] -3-hidroxi-propionamida, (S) -2-{ [4- (3-cloro-benciloxi) -bencil] -metil-amino} -propionamida, (S) -2- [4- ( 3-fluoro-benciloxi ) -bencilamino] - propionamida (safinamida) , (S) -2- [4- (3-fluoro-benciloxi ) -bencilamino] -propionamida (safinamida) o cualquier derivado o análogo o sal farmacéuticamente aceptable de estos compuestos. El compuesto más preferido para usarse en los métodos descritos en la presente es safinamida o cualquier derivado, análogo o sal farmacéuticamente aceptable de los mismos . Los trastornos de la retina externa abarcan condiciones degenerativas inducidas ambientalmente, agudas y crónicas (trauma, isquemia, tensión foto-oxidativa) de los fotoreceptores y células de RPE en individuos normales o predispuestos genéticamente. Dichos trastornos incluyen, peor no se limitan a, degeneración macular relacionada con la edad (AMD) ; retinitis pigmentosa (RP) y otras formas de enfermedad retinal heredodegenerativa; desprendimiento de la retina; lágrimas; membrana epiretinal; isquemia que afecta la retina externa; retinopatia diabética; daño asociado con terapia de láser (rejilla, focal y panretinal) incluyendo terapia fotodinámica (PDT), terapia térmica o crioterapia; trauma; retinopatia iatrogénica inducida por cirugía ( traslocación retinal, cirugía subretinal o vitrectomía) o por luz; y conservación de transplantas retínales. Los compuestos de esa invención, que son inhibidores potentes y selectivos de MAO-B (IC50 en el rango nanomolar submicromolar) , in Vitro e in vivo, generalmente no tienen efecto relevante en MAO-A. Después de la administración oral en ratones, los compuestos se comportan como inhibidores de MAO-B de acción corta potentes con recuperación completa de actividad de 8 a 16 horas después de la administración de una sola dosis de sustancia. La actividad de inhibición de MAO de compuestos útiles para los métodos de la presente invención se pueden determinar usando una variedad de métodos conocidos para el experto. El Método 1 y Método 2, descritos más adelante, son ejemplos de análisis útiles para determinar actividad de inhibición de MAO B.

MÉTODO 1 Análisis de actividades de enzimas MAO-A y MAO-B in Vitro - Preparaciones de membrana (fracción mitocondrial cruda) Las ratas Wistar macho (Harían, Italia - 175-200 g) se sacrificaron bajo anestesia ligera y los cerebros se removieron rápidamente y se homogeneizaron en 8 volúmenes de hielo fría 0.32 M de solución reguladora de sacarosa conteniendo 0.1M EDTA, pH 7.4. El homogenado crudo se centrifugó a 2220 rpm durante 10 minutos a +4°C y el sobrenadante recuperado. La pella se homogeneizó y se centrifugó de nuevo. Los dos sobrenadantes se combinaron y centrifugaron a 9250 rpm durante 10 minutos. La pella se resuspendió en solución reguladora fresca y se centrifugó a 11250 rpm durante 10 minutos a +4°C. La pella resultante se almacenó a -80°C.

- Análisis de actividades de enzima in Vitro Las actividades de enzimas se evaluaron con un análisis radio-enzimático usando los sustratos 14C-serotonina (5-HT) y 1C-feniletilamina (PEA) para MAO-A y MAO-B, respectivamente . La pella mitocondrial (500 µg de proteina) se resuspendió en 0.1 M de solución reguladora de fosfato (pH 7.4). 500 µ? de la suspensión se agregaron a 50 µ? de solución del compuesto de prueba o solución reguladora, y se incubaron durante 30 minutos a 37 °C (preincubación) luego se agregó el sustrato (50 µ?) . La incubación se lleva a cabo durante 30 minutos a 37°C (14C-5-HT, 5 µ?) o durante 10 minutos a 37°C (14C-PEA, 0.5 µ?) . La reacción se detuvo agregando 0.2 mi de 37% HC1 o ácido perclórico. Después de la configuración, los metabolitos desaminados se extrajeron con 3 mi de éter dietilico (5-HT) o tolueno (PEA) y la fase orgánica radioactiva se midió por espectrometría de centelleo de líquidos y 90% eficiencia. La cantidad de los metabolitos neutros y/o ácidos formados como resultado de actividad de MAO se obtuvo midiendo la radioactividad del eluato. La actividad de MAO en la muestra, que corresponde a un porcentaje de radioactivita comparado con la actividad control en ausencia del inhibidor, se expresó como moles de sustrato transíormado/mg proteína/min. Las curvas de inhibición del fármaco se obtuvieron de por lo menos ocho diferentes puntos de concentración, cada uno por duplicado (10~10 a 10"5 M) . Los valores de IC50 (la concentración del fármaco que inhibe el 50% de la actividad enzimática) se calcularon con intervalos de confianza determinados usando análisis de regresión lineal (adaptando mejor el programa de computadora auxiliado) . El procedimiento descrito en el método 1 se utilizó para generar los datos mostrados en la Tabla 1.

MÉTODO 2 Inhibición de MAO-B ex vivo Los compuestos de prueba se administraron oralmente a ratones macho C57BL (Harían, Italia, 25-27 g) en la única dosis de 20 mg/kg. En varios intervalos de tiempo (1, 2, 4, 8 y 24 h) , los animales fueron sacrificados, los cerebros fueron removidos, los cortes se desecaron y almacenaron a -80 °C. Los homogenados crudos (0.5%) se prepararon en solución reguladora de fosfato 0.1 M (pH 7.4) y se usaron de manera fresca. Se evaluó la actividad de MAO-A y MAO B como describió antes.

Tabla 1. Inhibición MAO-A y MAO-B in Vitro de algunos compuestos de la invención en mitocondria de cerebro de ratas MÉTODO 3 Actividad Neuroprotectora de inhibidores de MAO en el modelo de retinopatia en ratas inducido foto-oxidativo Los resultados de retinopatia fóticos de la excitación excesiva de RPE y neuroretina por absorción de radiación ultravioleta visible o cercana. La severidad de lesiones depende de longitud de onda, irradiación, duración de exposición, especies, pigmentación ocular, y edad. El daño puede resultar de peroxidación de membranas celulares, inactivación de enzimas mitocondriales tales como citocromo oxidasa, y/o calcio intracelular incrementado. El daño celular que resulta de tensión foto-oxidativa conduce a muerte celular por apoptosis (Shahinfar, y otros, 1991, Current Eye Research, Vol. 10:47-59; Abler, y otros, 1994, Investigative Ophthalmology & Visual Science, Vol. 35 (Suppl) : 1517 ) . La apoptosis inducida por tensión oxidativa se ha implicado como una causa de muchas patologías oculares, incluyendo, retinopatia iatrogénica, degeneración macular, RP y otras formas de enfermedad heredodegenerativa, retinopatia isquémica, lágrimeo retinal, separación de la retina, glaucoma y neovascularización retinal (Chang, y otros, 1995, Archives of Ophthalmology, Vol. 113:880-886; Portera-Cailliau, y otros, 1994, Proceedings of National Academy of Science (U.S.A.), Vol. 91 :974-978; Buchi, E. R. , 1992, Experimental Eye Research, Vol. 55:605-613; Quigley, y otros, 1995, Investigative Ophthalmology & Visual Science, Vol. 36:774-786). Se ha observado daño retinal inducido por luz en ratones (Zigman, y otros, 1975, Investigative Ophthalmology & Visual Science, Vol. 14:710-713), ratas (Noell, y otros, 1966, Investigative Ophthalmology and Visual Science, Vol. 5:450-473; Kuwabara, y otros, 1968, Archives of Ophthalmology, Vol. 79:69-78; LaVail, M. M . , 1976, Investigative Ophthalmology & Visual Science, Vol. 15:64-70), conejos (Lawwill, T., 1973, Investigative Ophthalmology & Visual Science, Vol. 12:45-51), y ardillas (Collier, y otros, 1989; In LaVail y otros, Inherited and Environmentally Induced Retinal Degenerations . Alan R. Liss, Inc., New York; Collier, y otros, 1989, Investigative Ophthalmology & Visual Science, Vol. 30:631-637), non-human primates (Tso, M. O. M. , 1973, Investigative Ophthalmology & Visual Science, Vol. 12:17-34; Ham, y otros, 1980, Vision Research, Vol. 20:1105-1111; Sperling, y otros, 1980, Vision Research, Vol. 20:1117-1125; Sykes, y otros, 1981, Investigative Ophthalmology & Visual Science, Vol. 20:425-434; Lawwill, T., 1982, Transactions of the American Ophthalmology Society, Vol. 80:517-577), y el ser humano ( arshall, y otros, 1975, British Journal of Ophthalmology, Vol. 59:610-630; Green, y otros, 1991, American Journal of Ophthalmology, Vol. 112:520-27). En el hombre, la exposición crónica a radiación ambiental también se ha implicado como un factor de riesgo para ARMD (Young, R. W., 1988, Survey of Ophthalmology, Vol. 32:252-269; Taylor, y otros, 1992, Archives of Ophthalmology, Vol. 110:99-104; Cruickshank, y otros, 1993, Archives of Ophthalmology, Vol. 111 :514-518). Prevención de Daño Foto-Oxidativo con Safinamida: La eficacia de Safinamida, un inhibidor de AO-B de acción corta, para proteger células retínales contra la inducción de lesiones fotoquímicas por exposición a luz azul se evaluó midiendo cambios inducidos por luz en funcionamiento retinal (electroretinograma (ERG) ) y evaluar los cambios de morfología retinal. La protección dependiente de dosis significativa de función retinal se midió en ratas expuestas a la luz después de un período de recuperación en 5 días en ratas dosificadas con Safinamida (5-60 mg/kg) . ERG no fueron significativamente diferentes de lo normal después de un periodo de recuperación de 1 mes en ratas dosificadas con safinamida (15 a 16 mg/kg). Sujetos. Las ratas Sprague Dawley macho se asignaron aleatoriamente a grupos experimentales con fármacos o vehículos. Las ratas que reciben tratamiento con vehículo (N=15) o fármaco (Safinamida: 5 mg/kg, N=10; 15 mg/kg, N=10; 30 mg/kg, N=10; y 60 mg/kg, N=9) se dosificaron previamente (IP) a 48, 24 y 0 horas antes de una exposición a la luz de 6 horas (luz azul filtrada espectralmente (~220 fe) ) y 24 y 48 horas después de la exposición a la luz. Las ratas de control se alojaron en su jaula bajo exposición a la luz cíclica normal. Las ratas de control no se dosificaron con vehículo o fármaco . Evaluación de Función Retinal. ERG es una medición clínica no invasiva de la respuesta eléctrica del ojo a un destello de luz. La onda a y la onda b son dos componentes de ERG que son diagnóstico de función retinal. La onda a refleja la función de retina externa y se genera por interacciones entre el fotoreceptor y RPE mientras que la onda b refleja función de retina interna, particularmente en célula bipolares. Aunque la retina interna no se daña significativamente por esta exposición a la luz, la onda b se deprime debido a la falta de introducción de fotoreceptor. Los cambios en la amplitud de onda o latencia se diagnostican de la patología de retina externa. ERG se registró después de un periodo de recuperación de cinco días a partir de que las ratas anestesiadas se adaptaron a la oscuridad (cetamina-HCl, 75 mg/kg; xilazina, 6 mg/kg) . La respuesta eléctrica del ojo a un destello de luz se produjo observando un campo homogenizado . Los ERG a una serie de destellos luminosos incrementándose en intensidad se digitalizaron para analizar características temporales de la relación de intensidad de forma de onda y registro de voltaje de respuesta.

Evaluación Microscópica de Luz de Lesiones Retínales. Los tejidos oculares se fijaron en una mezcla de paraformaldehído y glutaraldehído, deshidratado en una serie de etanol ascendente, embebida en resina de plástico JB-4, y se analizaron secciones de 1 a 1.5 miera de grosor usando un sistema de análisis de imágenes en computadora cuantitativo conectado al microscopio. Los grosores de Epitelio de Pigmento Retinal (RPE) , Capa Nuclear Externa (ONL) y Capa Nuclear Interna (INL), así como la longitud de los segmentos internos (IS) , en donde se localiza la mitocondria, y segmentos externos (OS) , que contienen el fotopigmento sensible a la luz, se midieron para evaluar la protección de la retina externa. Dado que la INL no se afecta significativamente por la exposición a la luz, esta capa sirve como una emisión de Conil adicional. Resultados. La exposición a la luz azul a las ratas dosificadas con vehículo en una reducción importante en la función retinal (ANOVA, p<0.001), como se midió por ERG, cuando se midió 5 días después de la exposición a la luz (Figura 1A) . Después de la exposición a la luz azul, las amplitudes de respuesta de onda a máxima reducidas 69% y las amplitudes de respuesta de onda b máxima reducidas 71% de las ratas dosificadas con vehículo. La dosificación con Safinamida dio como resultado la protección dependiente de dosis de la función retinal (Fig. 1A) . A todas las dosis evaluadas (5-60 mg/kg) se midió protección de ERG significativa comparado con ratas dosificadas con vehículos. Las respuestas de onda de ERG máxima se midió comparado con ratas dosificadas con vehículos. Las respuestas de onda a de ERG máxima de ratas dosificadas con Safinamida (5 mg/kg) fueron 52% de lo normal y las respuestas registradas de ratas dosificadas con 15 ó 30 mg/kg fue del 70% de la normal. Las respuestas retínales de ratas dosificadas con Safinamida (60 mg/kg) no se disminuyó significativamente comparado con las ratas de control que se mantuvieron debajo de la luz normal, oscura, visible, cíclica. La Fig. 1A muestra amplitudes de respuesta de ERG medidas 5 días después de una exposición a la luz azul durante 6 horas. La dosificación con Safinamida (5-60 mg/kg) proporcionó protección de función retinal significante. Después de un período de recuperación de 3 semanas adicional, la evaluación de la respuesta retinal inducida por destellos (Fig. IB) no demostró recuperación significante de respuestas de ERG de ratas dosificadas con vehículo. La evaluación de la respuesta de ERG en ratas dosificadas con Safinamida (15 a 60 mg/kg) demostró función de onda a y b de ERG normal. La evaluación microscópica de luz de retinas de ratas dosificadas con vehículo demostró adelgazamiento significativo (A OVA, p <0.001) de RPE así como pérdida de células fotoreceptoras y acortamiento de su longitud de segmento interno + externo (Fig. 2). La reducción que depende de dosis en lesiones retínales se midieron en ratas dosificadas con Safinamida. Las retinas obtenidas de ratas dosificadas con Safinamida (15 y 60 mg/kg) demostró un RPE más grueso comparado con ratas dosificadas con vehículos. La ONL fue significativamente más gruesa en ratas dosificadas con Safinamida (15 y 60 mg/kg) y la longitud de segmento fotoreceptor fue significativamente más larga (60 mg/kg) comparado con ratas dosificadas con vehículo y no son significativamente diferentes de controles normales. Las retinas de ratas dosificadas con Safinamida (60 mg/kg) no tuvieron ninguna lesión retinal significativa. En general, para enfermedades degenerativas, los compuestos de esta invención se administran oralmente con dosis diarias de estos compuestos variado entre aproximadamente 0.001 y alrededor de 500 miligramos. La dosis diaria total preferida vacía entre aproximadamente 1 y alrededor de 100 miligramos. La administración no oral, tal como intravítrea, ocular tópica, de parche transdérmico, subdérmico, parenteral, intraocular, subconjuntival, o retrobulbar o por inyección subtenón (inyecciones utilizadas para el tratamiento de cáncer a través de la membrana que cubre los músculos y nervios del globo ocular) , trans-escleral (incluyendo iontoforesis) , administración yuxta-escleral posterior, o polímeros o liposomas biodegradables de liberación lenta pueden requerir un ajuste de la dosis diaria total necesaria para proveer una cantidad terapéuticamente efectiva del compuesto. Los compuestos también pueden suministrarse en soluciones de irrigación ocular. Las concentraciones deberán variar de aproximadamente 0.001 µ?, preferiblemente de aproximadamente 0.01 µ? a alrededor de 5 µ?. Los compuestos pueden incorporarse en varios tipos de formulaciones oftálmicas para suministrarse al ojo (v.gr., tópicamente, intracameralmente, yuxtaescleralmente o via un implante) . Pueden combinarse con conservadores, agentes tensioactivos, mejoradores de viscosidad, agentes gelificantes, incrementadotes de penetración, reguladores, oftalmológicamente aceptables, cloruro de sodio y agua para formar suspensiones o soluciones oftálmicas acuosas estériles o geles preformados o geles formados in situ. Las comulaciones de solución oftálmica pueden prepararse disolviendo el compuesto en una solución reguladora acuosa isotónica fisiológicamente aceptable. Además, 1 a solución oftálmica puede incluir un agente tensioactivo oftalmológicamente aceptable para ayudar a disolver el compuesto. Las soluciones oftálmicas pueden contener un incrementador de viscosidad, tal como, hidroximetilcelulosa, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, metilcelulosa, polivinil-pirrolidona, o similares, para mejorar la retención de la formulación en el saco de la conjuntiva. Con el fin de preparar las formulaciones de ungüentos oftálmicos estériles, el ingrediente activo se combina con un conservador en un vehículo apropiado, tal como, aceite mineral, lanolina líquida o petrolato blanco. Las formulaciones de gel oftálmico estéril pueden prepararse suspendiendo el ingrediente activo en una bases hidrofílica preparada de la ocmbinación de, por ejemplo, carbopol-940, o similares, de acuerdo con las formulaciones publicadas para preparaciones oftálmicas análogas; también se pueden incorporar conservadores y agentes de tonicidad. Si se dosifica tópicamente, los compuestos se formulan preferiblemente como suspensiones o soluciones oftálmicas tópicas, con un H de aproximadamente 4 a 8. Los compuestos normalmente estarán contenidos en estas formulaciones en una cantidad de 0.001% a 5% en peso, pero preferiblemente en una cantidad de 0.01% a 2% en peso. Por lo tanto, para la presentación tópica, de podrían suministrar de 1 a 2 gotas de estas formulaciones a la superficie del ojo de 1 a 4 veces por día de acuerdo con la discreción de un clínico experto. Los siguientes ejemplos se incluyeron para demostrar las modalidades preferidas de la invención. Deberá apreciarse por los expertos en la materia que las técnicas descritas en los siguientes ejemplos representan técnicas descubiertas por el inventor para funcionar bien en la práctica de la invención, y por lo tanto se puede considerar que constituye los modos preferidos para su práctica. Sin embargo, los expertos en la materia, en vista de la presente descripción, deberán apreciar que se pueden hacer muchos cambios en las modalidades especificas que se describen y aún obtienen un resultado similar sin alejarse del espíritu y alcance de la invención. Las siguientes formulaciones oftálmicas tópicas son útiles de acuerdo con la presente invención se administran de 1 a 4 veces al día de acuerdo con la discreción de un clínico experto.

EJEMPLO 1 Ingredientes Cantidad (% peso) Safinamida 0.01-2% Hidroxipropilmetilcelulosa 0.5% Fosfato de sodio dibásico 0.2% (anhídrido) Cloruro de sodio 0.5% EDTA de disodio (Edetato de 0.01% disodio) Polisorbato 80 0.05% Cloruro de Benzalconio 0.01% Hidróxido de sodio/ácido Para ajustar pH a 7.3-7.4 clorhídrico Agua purificada c.s. para 100% EJEMPLO 2 EJEMPLO 3 EJEMPLO 4 EJEMPLO 5 10 mM Solución IV p/v% Safinamida 0.384% Acido Tartárico L 2.31% Hidróxido de sodio pH 3.8 Acido clorhídrico pH 3.8 Agua purificada c.s. para 100% EJEMPLO 6 Cápsulas de 5mg Ingrediente Mg/cápsula (total Peso 22a mg) Safinamida 5 Lactosa anhídrida 55.7 Almidón, carboximetilo de 8 sodio Celulosa microcristalina 30 Dióxido de silicio coloidal 0.5 Esterage de magnesio 0.8 Todas las composiciones y/o métodos descritos y reclamados en la presente pueden crearse y ejecutarse sin experimentación indebida en vista de la presente descripción. Mientras que las composiciones y métodos de esta invención se han descrito en términos de modalidades preferidas, será evidente para los expertos en la materia que se pueden aplicar variaciones a las composiciones y/o métodos y en los pasos o en la secuencia de pasos del método descrito en la presente sin alejarse del concepto, espíritu y alcance de la invención. Más específicamente, será evidente que ciertos agentes que se refieren química y estructuralmente pueden sustituirse para los agentes descritos en la presente para lograr resultados similares. Todas las sustituciones y modificaciones aparentes para los expertos en la materia se consideran dentro del alcance y concepto de la invención como se definió por las reivindicaciones anexas. Las referencias citadas en la presente al grado que proveen detalles de procedimiento y otros ilustrativos suplementarios para los exhibidos en la presente, se incorporan específicamente en la presente por referencia.

Claims (19)

REIVINDICACIONES

1.- Un método para tratar trastornos de la retina externa que comprende administrar una composición que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un inhibidor de monoamina oxidasa, en donde el inhibidor de monoamina oxidasa es un compuesto de la fórmula I o un derivado farmacéuticamente aceptable o análogo del mismo en donde: R1 es cicloalquilo de C5-C7; fenilo (no sustituido) o fenilo sustituido independientemente con uno o más halógenos o CF3 R2 es H, alquilo de C1-C3 R3 es H, alquilo de C1-C3 (no sustituido) o alquilo de C1-C3 sustituido con OR6 R3 es H, alquilo de C1-C3 (no sustituido) o alquilo de C1-C3 sustituido con OR6

R4, R5 son independientemente H, alquilo de C1-C3 R6 es H, alquilo de C1-C2. 2. - El método de la reivindicación 1, en donde: R1 es cicloalquilo de C5-C7; fenilo (no sustituido) o fenilo sustituido independientemente con uno o más halógenos o CF3 R2 es H, alquilo de C1-C2 R3 es H, alquilo de C1-C2 (no sustituido) o alquilo de C1-C2 sustituido con OR6 R3 es H, alquilo de C1-C2 (no sustituido) o alquilo de C1-C2 sustituido con OR6 R4, R5 son independientemente H, alquilo de C1-C2 R6 es H, alquilo de C1-C2.

3. - El método de la reivindicación 1, en donde: R1 es fenilo (no sustituido) o fenilo sustituido independientemente con uno o dos F, Cl, R2 es H, CH3 R3 es H, alquilo de C1-C2 (no sustituido) o alquilo de C1-C2 sustituido con OR6 R4, R5 son independientemente H, CH3 R6 es H, CH3.

4. - El método de la reivindicación 3, en donde: R1 es 3-fluorofenilo R2 es H R3 es CH3 R4, R5 son H .

5.- El método de la reivindicación 4, en donde el compuesto es safinamida.

6. - El método de la reivindicación 1, en donde el trastorno se selecciona del grupo que consiste de: AMD; RP y otras formas de enfermedad retinal heredodegenerativas; separación de la retina y lágrimas; membrana epiretinal; isquemia que afecta la retina externa; retinopatia diabética; daño asociado con terapia de láser (rejilla, focal y panretinal) incluyendo terapia fotodinámica (PDT) ; trauma; retinopatia iatrogénica inducida por cirugía ( traslocación retinal, cirugía subretinal, o vitrectomía) o inducida por luz; y conservación de transplantas retínales.

7. - El método de la reivindicación 6, en donde el trastorno se selecciona del grupo que consiste de AMD, RP, y retinopatia diabética.

8. - El método de la reivindicación 7, en donde el trastorno es AMD.

9. - El método de la reivindicación 1, en donde la cantidad de inhibidor de monoamina oxidasa en la composición es de aproximadamente 0.01 a alrededor de 2%.

10. - El método de la reivindicación 1, en donde 1 administración es vía un método seleccionado del grupo que consiste de administración ocular tópica, inyección intra-vítrea, administración oral, administración retrobulbar, administración subconjuntival, administración subtenón, administración transdérmica, administración intravenosa, administración intraperitoneal, administración subcutánea, administración vía polímeros biodegradables de liberación lenta, liposomas y vía minibombas.

11. - El método de la reivindicación 10, en donde la administración es vía suministro local.

12. - Un método para tratar o evitar la degeneración retinal, el método comprendiendo administrar aun paciente una composición que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un inhibidor de monoamina oxidasa, en donde el inhibidor de monoamina oxidasa es un compuesto de la fórmula I, o un derivado farmacéuticamente aceptable o análogo del mismo I en donde: R1 es cicloalquilo de C5-C7; fenilo (no sustituido) o fenilo sustituido independientemente con uno o más halógenos o CF3 R2 es H, alquilo de C1-C3 R3 es H, alquilo de C1-C3 (no sustituido) o alquilo de C1-C3 sustituido con OR6 R3 es H, alquilo de C1-C3 (no sustituido) o alquilo de C1-C3 sustituido con OR6 R4, R5 son independientemente H, alquilo de C1-C3 R6 es H, alquilo de C1-C2.

13. - El método de la reivindicación 12, en donde el inhibidor de monoamina oxidasa es sulfanamida.

14. - El método de la reivindicación 12, en donde el trastorno se selecciona del grupo que consiste de: AMD; RP y otras formas de enfermedad retinal heredo-degenerativa; separación de la retina y lagrimeo; membrana epiretinal; isquemia que afecta la retina externa; retinopatia diabética; daño asociado con terapia de láser (rejilla, focal y panretinal) incluyendo terapia fotodinámica (PDT); trauma; retinopatia iatrogénica inducida por cirugía ( traslocación retinal, cirugía subretinal o vitrectomía) o inducida por luz; y conservación de transplantas de la retina.

15. - El método de la reivindicación 14, en donde el trastorno se selecciona del grupo que consiste de AMD, RP, y retinopatia diabética.

16. - El método de la reivindicación 15, en donde el trastorno es AMD.

17. - El método de la reivindicación 12, en donde la cantidad del inhibidor de monoamina oxidasa en la composición es de aproximadamente 0.01% a alrededor de 2%.

18. - El método de la reivindicación 12, en donde la administración es vía un método seleccionado del grupo que consiste de administración ocular tópica, inyección intravitrea, administración oral, administración retrobulbar, administración de la subconj untival , administración de subtenón, administración subcutánea, administración via polímeros biodegradables de liberación lenta, liposomas, y vía mini-bombas.

19. - El método de la reivindicación 18, en donde la administración es vía suministro local.